Изобретение относится к экспериментальной медицине, а именно к нейрофизиологии и нейрохирургии, и может быть использовано для стимуляции роста нервной ткани.
Известен способ лечения повреждений периферического нерва, защищенный патентом РФ №2022558, кл. А 61 К 31/35, опубл. 15.11.1994.
Способ заключается в том, что после невролиза или шва нерва по общепринятому способу и введению лекарственных препаратов, стимулирующих регенерацию нервных волокон, препятствующих атрофии денервированных мышц и прогрессированию трофических расстройств, дополнительно осуществляют тубаж области операции гелем кверцетина и одновременно назначают пероральный прием гранул кверцетина.
Однако любой тубаж периферического нерва может привести к образованию пленки, механически препятствующей реваскуляризации как эпиневрия, так и самого ствола нерва.
Известен также способ стимуляции нервов с помощью субэпиневральной микроинъекции в периферический нерв токсина яда скорпиона, защищенный патентом РФ №2107507, кл. А 61 К 35/58, опубл. 27.03.1998.
Недостатком известного способа является то, что он может быть использован только местно, во время оперативного вмешательства и не пригоден для системного терапевтического лечения.
Наиболее близким к заявляемому техническому решению, выбранным в качестве прототипа, является способ регенерации аксонов раздробленного седалищного нерва крысы, которым вводили препарат V-10367, содержащий нейротрофическое количество соединения, которое связывается с FK-506 - связывающим белком (FKBR) и нейротрофический фактор, такой как фактор роста (ФРН) (патент РФ №2197240, кл. А 61 К 31/40, опубл. 27.01.2003).
Недостатком известного способа является то, что при использовании модели раздробленного седалищного нерва не достигается полная деиннервация конечности, а также сохраняется возможность спонтанной реиннервации.
Задача, решаемая предлагаемым изобретением, - создание высокоэффективного способа восстановления функций конечностей после повреждения нервных тканей.
Технический результат от использования изобретения заключается в ускорении процесса регенерации и увеличении объема регенерирующих нервных волокон в периферическом нерве.
Указанный результат достигается тем, что в способе стимуляции регенерации поврежденного периферического нерва у экспериментальных животных после операции его перерезки и сшивания, включающий введение лекарственных препаратов, в качестве лекарственных препаратов используют витамины группы В и антихолинэстеразные препараты, причем животным дополнительно в послеоперационном периоде вводят внутримышечно нейротоксин яда пестрого скорпиона в дозах 40-50 мкг/кг один раз в 2 дня в течение 30-40 дней, повторяя курс 2-3 раза с интервалом 20-30 дней.
Нейротоксин яда пестрого скорпиона ранее не применялся для стимуляции регенерации поврежденного периферического нерва. Известно его применение для изучения структурно-функциональной организации быстрых натриевых каналов мембран нервных волокон. По современным представлениям механизм действия нейротоксинов яда скорпиона заключается в нарушении процесса натриевой инактивации электровозбудимых мембран нервного волокна (Каменская М.А., Нейротоксины в физиологических исследованиях. Итоги науки и техники, сер. Физиология человека и животных, М., 1982, - Т.28. - 140 с.; Орлов Б.Н., Гелашвили Д.Б., Зоотоксинология (ядовитые животные и их яды), М.: Высшая школа,1985, 280 с.).
Для очистки яда пестрого скорпиона и выделения из него индивидуальных нейротоксинов применяются современные методы биоорганической химии.
Так, в Институте биоорганической химии РАН им. М.М.Шемякина и Ю.А.Овчинникова фракционированием яда пестрого скорпиона Buthus eupeus, обычного для Средней Азии и Закавказья, на биогеле Р-10, карбоксиметилцеллюлозе СМ-32 и ДЕАЕ-сефадексе А-50 было выделено в общей сложности 20 индивидуальных токсинов. Гомогенность всех полученных токсинов доказана диск-электрофорезом и анализом N-концевых аминокислотных остатков. (Ю.А.Овчинников, Биоорганическая химия полипептидных нейротоксинов. Химия жизни: Избранные труды / Ю.А.Овчинников, М.: Наука, 1990, с.206-293; Гришин Е.В., Солдатов Н.М., Выделение, свойства и аминокислотный состав токсинов яда среднеазиатского скорпиона Buthus eupeus, Биоорганическая химия, 1978, т.4, с.450-458).
Способ осуществляют следующим образом.
Под общим наркозом у крысы препарируют седалищный нерв или большеберцовый нерв и пересекают. Непосредственно после операции накладывают 3-4 микрохирургических шва, например, с помощью атравматической иглы фирмы «Коно» (Япония) под визуальным контролем с помощью бинокулярного микроскопа, добиваясь сопоставления друг с другом нервных пучков. Через 5-10 суток после операции животным вводят лекарственные препараты, стимулирующие регенерацию нервных волокон, препятствующие атрофии денервированных мышц и прогрессированию трофических расстройств: внутримышечно витамины B1, В12, антихолинэстеразные соединения: прозерин, дибазол в терапевтических дозах и дополнительно внутримышечно вводят нейротоксин яда пестрого скорпиона в дозах 40-50 мкг/кг 1 раз в 2 дня в течение 30 дней, повторяя курс 2-3 раза с интервалом 20-30 дней.
Пример 1.
Указанным способом у крысы перерезают и сшивают большеберцовый нерв, в результате чего наступает выпадение чувствительности на подошвенной стороне стопы - зоне локальной анестезии. У животного общепринятым способом измеряют порог болевой чувствительности (ПБЧ) к электрическому раздражителю на здоровой и оперированной конечностях. Изменения ПБЧ оперированной конечности выражают в процентах по отношению к здоровой. Сравнительные данные по значению ПБЧ под влиянием традиционной фармакотерапии, включающей внутримышечное введение витаминов B1, В12 и антихолинэстеразных соединений: прозерина, дибазола в терапевтических дозах и при дополнительном введении внутримышечно нейротоксина яда пестрого скорпиона приведены в таблице.
Поскольку критерий Левина свидетельствует о различии дисперсий распределений признаков в сравниваемых группах, был применен расчет t - критерия Стьюдента с учетом неравных дисперсий. Статистический анализ показал наличие существенных различий между сравниваемьми группами. Таким образом, можно заключить, что введение в комплексную терапию повреждений периферических нервов нейротоксина яда пестрого скорпиона статистически значимо снижает порог болевой чувствительности, что свидетельствует о большем объеме реиннервации травмированной конечности.
Пример 2.
Способ стимуляции регенерации поврежденного периферического нерва осуществляли, как описано в примере 1.
Анализ гистологических препаратов продольных срезов большеберцового нерва крыс с моделью первичной травмы (перерезка и наложение микрохирургического шва) с последующим проведением в качестве стимуляции регенерации традиционной фармакотерапии, включающей внутримышечное введение витаминов B1, В12 и антихолинэстеразных соединений: прозерина, дибазола в терапевтических дозах, а также с применением внутримышечных инъекций нейротоксина яда пестрого скорпиона показал, что в группе животных получивших традиционное лечение на фоне микрохирургического шва через 40 суток отмечен довольно компактный с отчетливыми проявлениями васкуляризации глиально-соединительнотканный рубец.
На фиг.1 (Серия традиционное лечение. Микрофото. Импрегнация серебром. Ув. 600) видны проросшие, растущие и вторично дегенерирующие нервные волокна в рубце, через 40 суток после операции. При импреганции серебром наблюдаются регенерирующие мякотные и безмякотные волокна, образующие в области рубца картину невромы. Неврома в области рубца содержит небольшое количество колб роста. Наряду с хаотичным расположением нервных волокон и невроме характерно наличие рядов аксонов, переходящих непосредственно из центрального в периферический отрезок нерва. В дистальной части периферического отрезка нерва отмечается почти полная невротизация, главным образом, тонкими и средними по диаметру аксонами.
В группе животных дополнительно к традиционному лечению получавших нейротоксин яда пестрого скорпиона через 40 суток рубец содержит меньше соединительной ткани по сравнению с традиционным лечением. Между пучками нервных волокон часто встречаются развитые капилляры артериолы, венулы, что свидетельствует о хорошей васкуляризации регенерирующего нерва (фиг.2. Окраска гематоксилин-эозин. Ув. 600).
При импрегнации серебром наблюдается масса регенерирующих мякотных и безмякотных нервных волокон, образующих в области рубца характерную картину регенерационной невромы с хаотичным и направленным расположением нервных волокон. Наряду с основным направленным расположением нервных волокон, переходящих в дистальный отрезок, выделяется обильный, ненаправленный рост и прохождение через рубец тонких волокон. Рост волокон в этой серии более массовый.
Пример 3.
Способ стимуляции регенерации поврежденного периферического нерва осуществляли, как описано в примере 1.
Клиническое обследование восстановления нарушенных функций конечности оперированных крыс на 30 сутки показало, что:
- ноцицептивная чувствительность ступни оперированной конечности у крыс, получавших традиционную фармакотерапию, включающую внутримышечное введение витаминов B1, В12 и антихолинэстеразных соединений: прозерина, дибазола в терапевтических дозах, было ниже, чем у экспериментальных животных, которым дополнительно вводился нейротоксин яда пестрого скорпиона;
- у крыс, получавших традиционную фармакотерапию, включающую внутримышечное введение витаминов B1, B12 и антихолинэстеразных соединений: прозерина, дибазола в терапевтических дозах, практически отсутствовало разгибательное движение стопы оперированной конечности, тогда как дополнительное введение нейротоксина яда пестрого скорпиона приводило к появлению начальных признаков экстензии;
- у большей части животных, получавших традиционную фармакотерапию, включающую внутримышечное введение витаминов В1, B12 и антихолинэстеразных соединений: прозерина, дибазола в терапевтических дозах, наблюдалась выраженная контрактура мышц задней поверхности бедра, в то время как у крыс, которым дополнительно вводили нейротоксин яда пестрого скорпиона, мышцы были гораздо мягче и эластичнее;
- применение тепловизионного метода показало, что у крыс, получавших традиционную фармакотерапию, включающую внутримышечное введение витаминов В1, В12 и антихолинэстеразных соединений: прозерина, дибазола в терапевтических дозах, на теплограмме подошвенной поверхности задней конечности через 30 суток после перерезки и сшивания большеберцового нерва видно снижение свечения вплоть до симптома «тепловизионной ампутации».
Теплограмма подошвенной поверхности задней конечности крысы через 30 суток после перерезки и сшивания большеберцового нерва на фоне традиционной фармакотерапии приведена на фиг.3. Видно снижение свечения вплоть до симптома «тепловизионной ампутации» на оперированной конечности.
- Теплограмма подошвенной поверхности задней конечности крысы через 30 суток после перерезки и сшивания большеберцового нерва на фоне традиционной фармакотерапии и получавших дополнительно нейротоксин яда пестрого скорпиона приведена на фиг.4. Видно отсутствие симптома "тепловизионной ампутации" на оперированной конечности.
Введение нейротоксина яда пестрого скорпиона в дозе, меньшей чем 40 мкг/кг, и менее чем 30 дней неэффективно, а в большей чем 50 мкг/кг и более чем 40 дней повышает риск возникновения побочных эффектов.
Таким образом, предлагаемое изобретение по сравнению с прототипом ускоряет процесс регенерации и увеличивает объем регенерирующих нервных волокон в периферическом нерве.
токсин яда скорпиона
название | год | авторы | номер документа |
---|---|---|---|
Способ применения ресвератрола для ускорения регенерации поврежденных нервов | 2021 |
|
RU2778199C1 |
СПОСОБ СТИМУЛЯЦИИ РЕГЕНЕРАЦИИ НЕРВНЫХ ТКАНЕЙ НА ОСНОВЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ БИОСОВМЕСТИМЫХ СУСПЕНЗИЙ ИЛИ ВЗВЕСЕЙ КРЕМНИЕВЫХ НАНОКЛАСТЕРОВ | 2007 |
|
RU2375080C2 |
СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ПОВРЕЖДЕНИЙ ПЕРИФЕРИЧЕСКИХ НЕРВОВ | 2008 |
|
RU2360688C1 |
СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ПОВРЕЖДЕНИЙ ПЕРИФЕРИЧЕСКОГО НЕРВА | 1991 |
|
RU2022558C1 |
СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ПОВРЕЖДЕНИЯ ПЕРИФЕРИЧЕСКОГО НЕРВА | 2006 |
|
RU2337725C2 |
СРЕДСТВО ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ НЕВРАЛГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ | 2004 |
|
RU2266746C2 |
СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ТРАВМАТИЧЕСКИХ НЕВРОПАТИЙ | 2010 |
|
RU2459642C2 |
СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ОПТИЧЕСКОГО НЕВРИТА ПРИ ОПТИКОХИАЗМАЛЬНОМ АРАХНОИДИТЕ В СТАДИИ РЕМИССИИ | 2005 |
|
RU2284814C1 |
СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ НЕВРОЛОГИЧЕСКИХ ОСЛОЖНЕНИЙ ПРИ ОРТОПЕДИЧЕСКИХ ОНКОЗАБОЛЕВАНИЯХ | 2002 |
|
RU2223762C2 |
Способ лечения повреждений периферических нервов | 1986 |
|
SU1771757A1 |
Изобретение относится к экспериментальной медицине, а именно к нейрофизиологии и нейрохирургии, и может быть использовано для стимуляции роста нервной ткани. Способ стимуляции регенерации поврежденного периферического нерва у экспериментальных животных после операции его перерезки и сшивания включает введение лекарственных препаратов, в качестве которых используют витамины группы В и антихолинэстеразные препараты. Дополнительно в послеоперационном периоде животным вводят внутримышечно нейротоксин яда пестрого скорпиона в дозах 40-50 мкг/кг один раз в 2 дня в течение 30-40 дней, повторяя курс 2-3 раза с интервалом 20-30 дней. Способ обеспечивает ускорение процесса регенерации и увеличение объема регенерирующих нервных волокон в периферическом нерве. 1 табл., 4 ил.
Способ стимуляции регенерации поврежденного периферического нерва у экспериментальных животных после операции его перерезки и сшивания, включающий введение лекарственных препаратов, отличающийся тем, что в качестве лекарственных препаратов используют витамины группы В и антихолинэстеразные препараты, причем животным дополнительно в послеоперационном периоде вводят внутримышечно нейротоксин яда пестрого скорпиона в дозах 40-50 мкг/кг один раз в 2 дня в течение 30-40 дней, повторяя курс 2-3 раза с интервалом 20-30 дней.
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАРАТА ОНКООВАРИАЛЬНОГО АЛЬФА-1-ГЛОБУЛИНА | 1990 |
|
RU2022559C1 |
СРЕДСТВО ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ НЕВРАЛГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ | 2004 |
|
RU2266746C2 |
СПОСОБ СТИМУЛЯЦИИ НЕРВОВ | 1994 |
|
RU2107507C1 |
Орлов Б.Н., Гелашвили Д.Б | |||
Зоотоксинология | |||
Ядовитые животные и их яды | |||
- М.: Высшая школа, 1985, 81-88 с | |||
CN 1098293, 08.02.1995, реферат | |||
Sandoval MR et al | |||
TsTx toxin isolated from Tityus serrulatus scorpion venom induces spontaneous recurrent seizures and |
Авторы
Даты
2006-12-27—Публикация
2005-07-25—Подача