СПОСОБ КОРРЕКЦИИ ЭНДОТЕЛИАЛЬНОЙ ДИСФУНКЦИИ КОМБИНАЦИЕЙ ЛОЗАРТАНА И L-АРГИНИНА ПРИ L-NAME-ИНДУЦИРОВАННОМ ДЕФИЦИТЕ ОКСИДА АЗОТА Российский патент 2007 года по МПК A61K31/4178 A61K31/197 A61P9/08 A61P9/14 

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной кардиофармакологии.

Наиболее близким к заявленному решению является способ коррекции эндотелиальной дисфункции с помощью лозартана, относящегося к антагонистам рецепторов ангиотензина II (AT 1-подтип), описанный В.С.Зодионченко, Т.В.Адашевой, А.П.Сандомирской в статье «Дисфункция эндотелия и артериальная гипертензия: терапевтические возможности», Русский медицинский журнал, том 10, 2002, с.11-16, который заключается в пероральном приеме препаратов этой группы у больных для коррекции эндотелиальной дисфункции.

Основным недостатком способа является косвенный механизм действия лозартана при эндотелиальной дисфункции, связанный со стимуляцией AT 2 подтипа рецепторов ангиотензина II и реализующийся вследствие брадикининзависимого пути эндотелиопротекции, в то время как одним из главных факторов развития данного патофизиологического состояния, особенно при эссенциальной артериальной гипертензии, является повреждение в системе L-аргининNO, приводящее к нарушению продукции оксида азота (NO), активность которой при применении только лозартана остается недостаточно компенсированной. Поэтому результаты коррекции эндотелиальной дисфункции при повреждении в системе L-аргининNO, которое связано в основном с недостаточностью эндотелиальной NO-синтазы, с помощью лозартана неудовлетворительны.

Техническим результатом изобретения является способ коррекции эндотелиальной дисфункции, включающий использование лозартана, относящегося к антагонистам рецепторов ангиотензина II (AT 1-подтип) и донатора NO-L-аргинина.

Технический результат достигается тем, что на фоне моделирования эндотелиальной дисфункции в эксперименте внутрибрюшинным введением лабораторному животному в течение 7 суток блокатора синтеза NO L-нитро-аргинин-метилового эфира (L-NAME) в дозе 25 мг/кг, проводится ее коррекция внутрижелудочным введением лозартана в дозе 6 мг/кг однократно в сутки и внутрибрюшинным введением донатора NO L-аргинина в дозе 200 мг/кг также однократно в сутки, которая приводит к активизации коррекции эндотелиальной дисфункции, так как L-аргинин является основным субстратом для синтеза NO и, одновременно, активатором его ферментативного пути образования в сосудистом эндотелии.

СПОСОБ ОСУЩЕСТВЛЯЕТСЯ СЛЕДУЮЩИМ ОБРАЗОМ

Опыты проводят на белых крысах самцах линии Wistar массой 250-300 г. N-нитро-L-аргинин метиловый эфир (L-NAME) вводится внутрибрюшинно в дозе 25 мг/кг/сут. На 7 день от начала эксперимента под наркозом (этаминал-натрия 50 мг/кг) вводят катетер в левую сонную артерию для регистрации показателей артериального давления (АД), болюсное введение фармакологических агентов осуществляют в правую бедренную вену. Показатели гемодинамики: систолическое артериальное давление (САД), диастолическое артериальное давление (ДАД) и частоту сердечных сокращений (ЧСС) измеряют непрерывно посредством датчика и компьютерной программы "Bioshell". Функциональные пробы: эндотелий зависимая вазодилатация (ЭЗВ) - внутривенное введение ацетилхолина (АХ) в дозе 40 мкг/кг, эндотелий независимая вазодилатация (ЭНЗВ) - внутривенное введение нитропруссеида натрия (НП) в дозе 30 мкг/кг.

При статистической обработке данных рассчитывали среднее значение, величину стандартного отклонения. Различия считали достоверными при p<0,05.

ПРИМЕР КОНКРЕТНОГО ВЫПОЛНЕНИЯ.

Болюсное внутривенное введение АХ в течение 3-5 сек приводило к резкому падению артериального давления, достигающего пика у интактных животных для систолического давления (САД) 84,3±4,4, для диастолического давления (ДАД) - 38,7±2,8 и для среднего артериального давления (СрАД) 53,9±2,7 мм рт.ст., при этом в течение первых 2-3 сек развивалась резкая брадикардия до 130-150 ударов в минуту. Восстановление АД происходило в среднем за 42,2±0,8 сек после нормализации сердечного ритма. ЭНЗВ также характеризовалась снижением САД до 83,0±3,7, ДАД до 42,1±4,4 и СрАД до 55,7±3,5 мм рт.ст. с последующим полным восстановлением в среднем в течение 45,1±1,0 сек. Блокада NO-синтазы с помощью длительного, ежедневного, в течение 7-суток внутрибрюшинного введения L-NAME (N-нитро-L-аргинин метиловый эфир в дозе 25 мг/кг) вызывало артериальную гипертензию (САД - 190,3±6,7, ДАД - 145,0±3,9, СрАД - 160,1±4,6 мм рт.ст.) и приводила к меньшему снижению показателей АД после введения АХ (САД до 110,6±5,2, ДАД до 82,8±6,6, СрАД до 92,1±6,1 мм рт.ст.) и НП (САД до 88,7±4,7, ДАД до 50,8±4,2 и СрАД до 63,4±4,1 мм рт.ст.) по сравнению с интактными животными.

Одновременное введение L-NAME и лозартана (6 мг/кг внутрижелудочно) не приводило к снижению показателей исходных значений АД (САД - 192,2±10,5, ДАД - 138,2±2,4 мм рт. ст.), а в экспериментах, где еще дополнительно вводился L-аргинин (200 мг/кг внутрибрюшинно) отмечалось потенциирование гипотензивного действия, так как исходные цифры АД были существенно ниже: САД - 165,0±6,2, ДАД - 131,1±4,3 мм рт.ст. (табл.1).

Таблица 1
Динамика показателей АД и ЧСС при моделировании дефицита оксида азота и коррекции эндотелиальной дисфункции лозартаном с использованием L-аргининаГруппы животныхФункциональные пробыСАД, мм рт.ст.ДАД, мм рт.ст.ЧСС, уд. в минИнтактныеИсходные137,7±3,7101,9±4,3420,0±9,0ЭЗВ с АХ84,3±4,538,7±2,8416,0±14,0ЭНЗВ с НП83,0±3,742,1±4,4415,0±10,0Получавшие L-NAME (25 мг/кг)Исходные190,3±6,7*145,0±3,9*428,0±11ЭЗВ с АХ110,6±5,2*82,8±6,6*426,0±14,0ЭНЗВ с НП88,7±4,750,8±4,2426,0±13,0L-NAME(25 мг/кг) + Лозартан (6 мг/кг)Исходные192,2±10,5*138,2±2,4*415,0±9,0ЭЗВ с АХ90,0±7,8*51,7±5,0*425,0±11,0ЭНЗВ с НП95,5±8,955,5±5,5430,0±11,0L-NAME(25 мг/кг) + Лозартан (6 мг/кг) + L-аргинин (200 мг/кг)Исходные165,0±6,2**131,1±4,3**372,0±17,0ЭЗВ с АХ94,0±5,5**87,0±2,8**357,0±16,0ЭНЗВ с НП105,1±5,385,1±5,9376,0±14,0* - p<0,05 в сравнении с группой интактных
** - p<0,05 в сравнении с группой L-NAME + лозартан

Принципиальная разница в ЭЗВ и ЭНЗВ у интактных животных и животных с введением ингибитора NO-синтазы L-NAME закономерно привело нас к необходимости выведения специального показателя, характеризующего степень эндотелиальной дисфункции, являющегося отношением площади треугольника над трендом реакции восстановления АД в ответ на введение НП к площади треугольника над трендом реакции восстановления АД в ответ на введение АХ.

Мы рассчитывали это отношение у каждого животного интактной группы и крыс после моделирования блокады NO-синтазы и получили разницу данного показателя в 5 раз - соответственно 1,1 у интактных и 5,4 у животных, получавших L-NAME.

Таким образом, для дальнейшей оценки влияния АХ и НП при ЭЗВ и ЭНЗВ нами использовано это отношение как показатель коррекции эндотелиальной дисфункции. Так, в группе, где на фоне введения ингибитора NO-синтазы L-NAME вводился только лозартан, это отношение соответствовало значению 2,3±0,3, а в группе с дополнительным введением к лозартану донотора NO L-аргинина - 1,7±0,1 (табл.2).

Таблица 2
Показатели, отражающие коррекцию эндотелиальной дисфункции на фоне введения L-NAME лозартаном и лозартаном в сочетании с L-аргинином.Группы животныхФункциональные пробыПрирост падения сосудистой реакции по СрАД (мм рт.ст.)Время сосудистой реакции (сек)Площадь сосудистой реакции (усл. ед.)Отношение площадей сосудистой реакции АХ к НПL-NAME + лозартанАХ91,7±4,729,7±1,91048,9±79,82,3±0,3НП93,0±7,074,8±8,63523,4±535,9L-NAME + лозартан L-аргининАХ89.3±3,337,8±4,31653,7±143,21,7±0,1*НП92,0±5,075,5±6,23458,3±347,8* - p<0,05 в сравнении с группой L-NAME+лозартан

Таким образом, полученные результаты позволяют констатировать активизацию коррекции эндотелиальной дисфункции лозартана при сочетанием его применении с L-аргинином.

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной кардиофармакологии, и касается коррекции эндотелиальной дисфункции. Для этого крысам линии Wistar моделируют эндотелиальную дисфункцию путем ежедневного внутрибрюшинного введения L-нитро-аргинин-метилового эфира в дозе 25 мг/кг в течение 7 суток. На этом фоне вводят лозартан внутрижелудочно в дозе 6 мг/кг и L-аргинин внутрибрюшинно в дозе 200 мг/кг однократно в сутки. Способ позволяет оценить на данной модели динамику коррекции эндолиальной дисфункции под влиянием синергетического воздействия лозартана и L-аргинина. 2 табл.

Способ коррекции эндотелиальной дисфункции, включающий введение лозартана, отличающийся тем, что крысам линии Wistar в эксперименте моделируют дисфункцию ежедневным в течение 7 суток внутрибрюшинным введением L-нитро-аргинин-метилового эфира крысам в дозе 25 мг/кг и на фоне этого вводят лозартан внутрижелудочно в дозе 6 мг/кг и L-аргинин внутрибрюшинно в дозе 200 мг/кг однократно в сутки.