СПОСОБ КОРРЕКЦИИ ЭНДОТЕЛИАЛЬНОЙ ДИСФУНКЦИИ ПРЕПАРАТОМ ФОСФОГЛИВ ПРИ L-NAME ИНДУЦИРОВАННОМ ДЕФИЦИТЕ ОКСИДА АЗОТА Российский патент 2009 года по МПК A61K31/198 A61K31/683 A61P9/10 

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной кардиофармакологии.

Наиболее близким к заявленному решению является способ восстановления эндотелиальной функции, поврежденной в результате G-радиации, с помощью раствора, содержащего фосфатидилхолиновые липосомы, описанный A.I.Soloviev, A.V.Stefanov, S.M.Tishkin, A.S.Khromov, A.V.Parshikov, I.V.Ivanova, A.M.Gurney в статье «Saline containing phosphatidylcholine liposomes possess the ability to restore endothelial function damaged resulting from G-irradiation» в Journal of physiology and pharmacology, 2002, 53, 4, 701-712, который заключается в перитонеальном введении кроликам раствора, содержащего фосфатидилхолиновые липосомы, в дозе 30 мг/кг для восстановления поврежденной эндотелиальной функции.

Основным недостатком способа является ограниченная направленность фармакологического эффекта раствора, содержащего фосфатидилхолиновые липосомы, при эндотелиальной дисфункции, связанная в основном со структурообразующими и биоэффекторными свойствами фосфолипидов, способствующих репарации и восстановлению нарушенных функций поврежденных клеточных мембран на фоне оксидативного стресса. Поэтому с целью оптимизации коррекции эндотелиальной дисфункции целесообразно применение лекарственной композиции на основе фосфатидилхолина и глицирризиновой кислоты, которая является основным активным компонентом корня солодки и обладает противовоспалительным, антиоксидантным, противовирусным действием, а также оказывает позитивное влияние на систему синтеза оксида азота.

Техническим результатом изобретения является способ коррекции эндотелиальной дисфункции, включающий использование препарата фосфоглив, в состав которого входит липоид С 80 в количестве 0,065 г (содержание фосфатидилхолина 73-79%) и глицират в количестве 0,035 г.

Технический результат достигается тем, что на фоне моделирования эндотелиальной дисфункции в эксперименте путем внутрибрюшинного введения лабораторным крысам самцам линии Wistar в течение 7 суток блокатора синтеза NO N-нитро-L-аргинин-метилового эфира (L-NAME) в дозе 25 мг/кг проводится ее коррекция внутрижелудочным введением препарата фосфоглив в дозе 2,2 г/кг однократно в сутки, которая приводит к активизации коррекции эндотелиальной дисфункции, за счет суммирования эффектов фосфатидилхолина как универсального мембранорепарирующего, структурообразующего агента, способного восстанавливать поврежденные клеточные мембраны, и глицирризиновой кислоты, индуцирующей продукцию интерликина-12, γ-интерферона, ингибирующей протеинкиназу С, стимулирующей экспрессию iNOS, оказывая иммуномодулирующий, антиоксидантный, стимулирующий генерацию NO и повышающий его биодоступность эффекты.

СПОСОБ ОСУЩЕСТВЛЯЕТСЯ СЛЕДУЮЩИМ ОБРАЗОМ

Опыты проводят на белых крысах самцах линии Wistar массой 200-250 г. N-нитро-L-аргинин метиловый эфир (L-NAME) вводится внутрибрюшинно в дозе 25 мг/кг/сут. На 7 день от начала эксперимента под наркозом (этаминал-натрия 50 мг/кг) вводят катетер в левую сонную артерию для регистрации показателей артериального давления (АД), болюсное введение фармакологических агентов осуществляют в правую бедренную вену. Показатели гемодинамики: систолическое артериальное давление (САД), диастолическое артериальное давление (ДАД) и частоту сердечных сокращений (ЧСС) измеряют непрерывно посредством датчика и компьютерной программы "Bioshell". Функциональные пробы: эндотелийзависимая вазодилатация (ЭЗВ) - внутривенное введение ацетилхолина (АХ) в дозе 40 мкг/кг, эндотелий независимая вазодилатация (ЭНЗВ) - внутривенное введение нитропруссида натрия (НП) в дозе 30 мкг/кг.

При статистической обработке данных рассчитывали среднее значение, величину стандартного отклонения. Различия считали достоверными при p<0,05.

ПРИМЕР КОНКРЕТНОГО ВЫПОЛНЕНИЯ.

Болюсное внутривенное введение АХ в течение 3-5 с приводило к резкому падению артериального давления, достигающего пика у интактных животных для систолического давления (САД) 84,3±4,4, для диастолического давления (ДАД) - 38,7±2,8 и для среднего артериального давления (СрАД) 53,9±2,7 мм рт.ст., при этом в течение первых 2-3 с развивалась резкая брадикардия до 130-150 ударов в минуту. Восстановление АД происходило в среднем за 42,2±0,8 с после нормализации сердечного ритма. ЭНЗВ также характеризовалась снижением САД до 83,0±3,7, ДАД до 42,1±4,4 и СрАД до 55,7±3,5 мм рт.ст. с последующим полным восстановлением в среднем в течение 45,1±1,0 с. Блокада NO-синтазы с помощью длительного, ежедневного, в течение 7 суток внутрибрюшинного введения L-NAME (N-нитро-L-аргинин метиловый эфир в дозе 25 мг/кг) вызывало артериальную гипертензию (САД - 190,3±6,7, ДАД - 145,0±3,9, СрАД - 160,1±4,6 мм рт.ст.) и приводила к меньшему снижению показателей АД после введения АХ (САД до 110,6±5,2, ДАД до 82,8±6,6, СрАД до 92,1±6,1 мм рт.ст.) и НП (САД до 88,7±4,7, ДАД до 50,8±4,2 и СрАД до 63,4±4,1 мм рт.ст.) по сравнению с интактными животными.

Одновременное введение L-NAME и препарата фосфоглив в дозе 2,2 г/кг внутрижелудочно не приводило к снижению показателей исходных значений АД (САД - 197,8±6,8, ДАД - 142,7±4,0 мм рт.ст.) по сравнению с группой нелеченных животных (таблица 1).

Таблица 1. Динамика показателей АД и ЧСС при моделировании дефицита оксида азота и коррекции эндотелиальной дисфункции препаратом фосфоглив. Группы животных Функциональные пробы САД, мм рт.ст. ДАД, мм рт.ст. ЧСС, уд. в мин. Интактные Исходные 137,7±3,7^у 101,9±4,3^у 420,0±9,0 ЭЗВ с АХ 84,3±4,5^у 38,7±2,8^у 416,0±14,0 ЭНЗВ с НП 83,0±3,7 42,1±4,4 415,0±10,0 Получавшие L-NAME (25 мг/кг) Исходные 190,3±6,7^* 145,0±3,9^* 428,0±11,0 ЭЗВ с АХ 110,6±5,2^* 82,8±6,6^* 426,0±14,0 ЭНЗВ с НП 88,7±4,7 50,8±4,2 426,0±13,0 L-NAME (25 мг/кг) + фосфоглив (2,2 г/кг) Исходные 197,8±6,8 142,7±4,0 364,1±14,4^*у ЭЗВ с АХ 91,6±3,4 50,4±3,0 347,8±14,3^*у ЭНЗВ с НП 104,3±4,5 55,5±5,1 376,7±17,1^{у *} - р<0,05 в сравнении с группой интактных ^у - р<0,05 в сравнении с группой L-NAME

Принципиальная разница в ЭЗВ и ЭНЗВ у интактных животных и животных, получавших внутрибрюшинно ингибитор NO-синтазы L-NAME, закономерно привела к необходимости введения специального показателя, характеризующего степень эндотелиальной дисфункции, являющегося отношением площади треугольника над трендом реакции восстановления АД в ответ на введение НП (эндотелийнезависимая вазодилятация) к площади треугольника над трендом реакции восстановления АД в ответ на введение АХ (эндотелийзависимая вазодилятация).

Рассчитывали это отношение у каждого животного интактной группы и животных после моделирования блокады NO-синтазы и получили разницу данного показателя в 5 раз - соответственно 1,1 у интактных и 5,4 у животных, получавших L-NAME.

Таким образом, для дальнейшей оценки влияния АХ и НП при ЭЗВ и ЭНЗВ использовано отношение показателей эндотелийнезависимой и эндотелийзависимой вазодилятации как показатель коррекции эндотелиальной дисфункции. Так, в группе, которая на фоне введения ингибитора NO-синтазы L-NAME получала препарат фосфоглив, это отношение соответствовало значению 2,2±0,3 (таблица 2).

Таблица 2. Показатели, отражающие коррекцию эндотелиальной дисфункции на фоне введения L-NAME препаратом фосфоглив. Группы животных Функциональные пробы Прирост падения сосудистой реакции по СрАД (мм рт.ст.) Время сосудистой реакции (с) Площадь сосудистой реакции (усл. ед.) Отношение площадей сосудистой реакции НП кАХ Интактные АХ 59,9±2,9 42,2±0,8 1268,0±74,8 1,1±0,1 НП 61,0±3,0 45,1±1,0 1375,3±93,7   L-NAME АХ 68,0±4,1 20,0±1,4^* 695,3±87,6^* 5,4±0,6^* НП 98,0±2,0^* 67,4±1,4^* 3322,7±116,7^* L-NAME + фосфоглив АХ 96,9±4,3^*у 52,4±2,4^*у 2554,2±177,6^*у 2,2±0,3^у НП 92,0±4,0^* 108,5±11,0^*y 4954,9±497,3^{*у *} - р<0,05 в сравнении с группой интактных; ^у - р<0,05 в сравнении с группой L-NAME

Таким образом, препарат фосфоглив в дозе 2,2 г/кг предотвращает развитие эндотелиальной дисфункции при L-NAME-индуцированном дефиците оксида азота в эксперименте.

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной кардиологии и фармакологии, и касается коррекции эндотелиальной дисфункции. Для этого в эксперименте лабораторным крысам самцам линии Wistar моделируют эндотелиальную дисфункцию внутрибрюшинным ежедневным введением N-нитро-L-аргинин метилового эфира в дозе 25 мг/кг, в течение 7 суток. Одновременно ежедневно внутрижелудочно вводят препарат фосфоглив в дозе 2,2 г/кг. Способ обеспечивает эффективную коррекцию эндотелиальной дисфункции за счет способности фосфоглива повышать продукцию и биодоступность оксида азота. 2 табл.

Способ коррекции эндотелиальной дисфункции, отличающийся тем, что в эксперименте лабораторным крысам самцам линии Wistar с эндотелиальной дисфункцией, на фоне ее моделирования внутрибрюшинным введением N-нитро-L-аргинин метилового эфира в дозе 25 мг/кг ежедневно, в течение 7 сут, оценивая степень развития дисфункции по отношению показателей эндотелийнезависимой и эндотелийзависимой вазодилятации, внутрижелудочно ежедневно вводят препарат фосфоглив в дозе 2,2 г/кг.