СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ТУБЕРКУЛЕЗА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА Российский патент 2008 года по МПК A61K39/35 A61K39/04 

Изобретение относится к ветеринарии, в частности к способам диагностики туберкулеза с учетом дифференциации парааллергических и специфических туберкулиновых реакций.

Известен способ диагностики туберкулеза внутрикожной туберкулиновой пробой в дозе 10,0 тыс. МЕ, объеме 0,2 мл. Оценка результатов исследования осуществляется через 72 часа после инъекции. Животных, считающихся реагирующими на туберкулин (при наличии на месте инъекции воспалительной припухлости, увеличения кожной складки на 3 мм и более), признают больными и подвергают убою (см. Туберкулез крупного рогатого скота, верблюдов, яков, овец и пантовых оленей, А.С.Донченко, В.Н.Донченко, Новосибирск, 1994, С.46-63 - прототип).

Однако использование данного способа диагностики туберкулеза, а именно внутрикожной туберкулиновой пробы (ППД - туберкулина для млекопитающих), в связи с наличием проявления парааллергических реакций на туберкулин, предопределяет выранжировку здорового крупного рогатого скота, в то время как он сенсибилизирован атипичными микобактериями I, II, III, IV групп по Раньону или факторами немикобактериальной этиологии, например: абсцессы на серозных оболочках и в паренхиматозных органах, травматический ретикулоперикардит, эхинококкоз, финноз, фасциолез, дикроцелиоз и другие паразитарные заболевания. Поскольку парааллергические реакции имеют широкое распространение и отмечаются в 50-73% хозяйств, а при кратности диагностических исследований 2 раза в год выявляется от 2,1 до 18,6% реагирующих на туберкулин животных, у которых не подтверждается туберкулез, то необоснованному убою подвергается огромное количество здоровых животных, нанося тем самым значительный экономический ущерб.

Кроме необоснованного убоя, до определения официального статуса, в таких хозяйствах нарушается производственная деятельность (ограничиваются перегруппировки скота, прекращается племенная продажа, вводится пастеризация молока, вынужденная дезинфекция животноводческих помещений и т.д.).

В связи с изложенным необходима разработка способа диагностики туберкулеза крупного рогатого скота, характеризующегося наиболее значимо достоверными и практически объективно фиксируемыми показателями, позволяющими с большой точностью дифференцировать парааллергические и специфические туберкулиновые реакции, что позволит сократить до минимума необоснованный убой скота и упростить процесс диагностики.

Указанный технический результат достигается тем, что в способе диагностики туберкулеза крупного рогатого скота, включающем внутрикожную инъекцию 0,2 мл туберкулина, при наличии на месте инъекции воспалительной припухлости (увеличение) кожной складки на 3 мм и более с читкой реакции через 72 часа, больными признаются животные, реагирующие на дозу 0,6-0,8 тыс. ME.

Для опыта по выявлению возможности использования раститрованной (от 0,1 до 1,0 тыс. ME) дозы ППД туберкулина для млекопитающих при диагностике туберкулеза были отобраны 10 групп животных, сенсибилизированных факторами туберкулезной этиологии, а именно: атипичными микобактериями I, II, III, IV групп по Раньону, при этом в каждой группе присутствовали животные с факторами немикобактериальной этиологии (эхинококкоз, финноз, фасциолез, дикроцелиоз и т.д.) и 10 групп животных, больных туберкулезом. Результаты опыта отражены в таблице 1.

Таблица 1Реакция на раститрованный ППД туберкулинживотных, сенсибилизированных атипичными микобактериямиживотных, больных туберкулезом (заражение М.bovis)количество животных, голДоза туберкулина, тыс. МЕ/голВеличина утолщения кожной складки, ммколичество животных, голДоза туберкулина, тыс. МЕ/голВеличина утолщения кожной складки, мм100,1-80.1-90,2-60,2-80,3-80,3-110,4-70,42,870,5-100,52,8-3,0100,6-90,63 мм и более120,71,370,73 мм и более110,81,880,83 мм и более100,92,5-3,0100,93 мм и более81,02,8-3,2101,03 мм и более

Как видно из таблицы 1, животные, сенсибилизированные атипичными микобактериями, практически не реагировали на раститрованную дозу от 0,1 до 0,6 тыс. ME. При дозе от 0,7 до 0,8 тыс. ME реакция на туберкулин не достигала диагностической величины (утолщения кожной складки 3 мм). Однако часть животных, сенсибилизированных атипичными микобактериями, при дозе 0,9-1,0 тыс. ME реагировала на туберкулин утолщением кожной складки в пределах диагностической (от 3,0 до 3,2 мм). Так, у 10 животных при дозе 0,9 тыс. ME реакция на туберкулин выглядела следующим образом: 2,5; 2,5; 3,1; 3,0; 2,5; 2,8; 3,0; 3,0 мм, то есть у четырех животных (40%) величина реакции была на уровне диагностической. При использовании дозы 1,0 тыс. ME диагностический показатель отмечен уже у 50% животных.

Животные, больные туберкулезом, как видно из таблицы 1, начинают реагировать в пределах диагностического показателя уже при дозе туберкулина 0,5 тыс. ME (3,0; 2,8; 2,9; 3,0; 2,9; 2,8; 3,0; 2,8; 3,0; 2,9 мм), то есть у четырех животных из десяти (у 40%) этот показатель достигал диагностической величины. Однако в дальнейшем, при использовании доз туберкулина от 0,6 до 1,0, реакция больных животных выражалась в пределах 3 мм и выше. Таким образом, исходя из анализа опытов по использованию раститрованных (от 0,1 до 1,0 тыс. ME) доз туберкулина при диагностике туберкулеза крупного рогатого скота, следует отметить, что использование дозы туберкулина от 0,6 до 0,8 тыс. ME являются оптимальными при выявлении больных туберкулезом животных, так как при использовании доз 0,9 до 1,0 тыс ME часть животных, сенсибилизированных атипичными микобактериями, реагируют на туберкулин в пределах диагностического показателя (от 3 до 3,2 мм).

Таким образом, использование дозы ППД туберкулина от 0,6 до 0,8 тыс. ME при диагностике туберкулеза крупного рогатого скота исключает влияние факторов нетуберкулезной этиологии на результаты диагностики.

Производственные испытания были проведены в двух хозяйствах, а именно в хозяйстве, неблагополучном по туберкулезу, с поголовьем 586 голов крупного рогатого скота и в благополучном по туберкулезу хозяйстве с поголовьем 829 голов. Предварительно все поголовье обоих хозяйств подвергалось инъекциям внутрикожной туберкулиновой пробой в регламентированной дозе в 10 тыс. ME с целью выявления реагирующих на туберкулин животных с последующей разбивкой через 45 дней реагирующих животных на группы, подвергнутые внутрикожным инъекциям ППД туберкулина в дозах 8,0; 6,0; 4,0; 2,0; 1,0; 0,8; 0,6; 0,5 тыс.

Использование в опыте дозы 10 тыс. ME было предпринято с целью сокращения количества животных в опыте. Работа проводилась только на реагирующих животных, так как доза 10 тыс. ME выявляла и больных туберкулезом и животных, сенсибилизированных факторами нетуберкулезной этиологии. Результаты производственных испытаний отражены в таблице 2.

Таблица 2№ опытаКол-во животных в опыте, гол.Кол-во животных, прореагировавших на дозу 10 тыс. МЕ, гол.Кол-во животных в группе (из числа реагирующих), гол.Доза туберкулина, тыс. MEКол-во реагирующих животных, гол.Утолщение кожной складки,ммДиагнозХозяйство, неблагополучное по туберкулезу1586112148,01413,3туберкулез установлен   146,0149,8-"-"-"-"-   144,0148,1-"-"-"-"-   142,0146,3-"-"-"-"-   141,0145,3-"-"-"-"-   140,8143,6-"-"-"-"-   140,6143,4-"-"-"-"-   140,5142,6-3,2-"-"-"-"-Хозяйство, благополучное по туберкулезу28297598,073,8туберкулез не установлен   96,063,5-"-"-"-"-   94,043,3-"-"-"-"-   92,043,0-"-"-"-"-   91,013,0-"-"-"-"-   100,8---"-"-"-"-   100,6---"-"-"-"-   100,5---"-"-"-"-

Как видно из таблицы 2, в неблагополучном по туберкулезу хозяйстве при использовании дозы 0,5 тыс. ME у некоторых животных величина утолщения кожной складки не достигала диагностической величины (3 мм), однако у этих животных после патолого-анатомического вскрытия обнаружен туберкулез, что подтвердило вывод (отраженный в экспериментальных исследованиях) о недостаточности дозы 0,5 тыс. ME при диагностике туберкулеза внутрикожной туберкулиновой пробой.

В благополучном по туберкулезу хозяйстве (табл.2) в данном опыте туберкулез не установлен, однако у 45 животных из 75 исследуемых величина кожной складки была на уровне диагностической (3 мм и более). При использовании способа по прототипу все 75 животных согласно "Наставлениям" подвергались бы убою, однако дальнейшие исследования подтвердили сенсибилизацию данных животных факторами нетуберкулезной этиологии (атипичные микобактерии I, II, III, IV групп по Раньону, факторы немикобактериальной этиологии - эхинококкоз, дикроцелиоз, абсцессы на серозных оболочках и в паренхиматозных органах). У групп животных, где использовалась доза туберкулина 0,5-0,8 тыс. ME, реакция на туберкулин не достигала диагностической величины (3 мм), хотя воздействие факторов нетуберкулезной этиологии было очевидным. Использование дозы туберкулина 0,6-0,8 тыс. ME исключило при диагностике туберкулеза влияние факторов нетуберкулезной этиологии.

Пример 1: В благополучном по туберкулезу хозяйстве при плановых диагностических исследованиях на туберкулез была проведена туберкулинизация 448 коров внутрикожной туберкулиновой пробой в дозе 0,8 тыс. ME в объеме 0,2 мл (разведение регламентированной дозы 10 тыс. ME 1:12,5), реагирующих на ППД туберкулин не выявлено.

Пример 2: В СПК "Страна Советов" при плановых аллергических исследованиях внутрикожной туберкулиновой пробой в дозе 0,8 тыс. ME выделено 45 реагирующих на туберкулин животных с диагностической величиной утолщения кожной складки (от 3,5 до 3,8 мм). После убоя у всех животных обнаружены характерные для туберкулеза изменения в заглоточных, бронхиальных и средостенных лимфоузлах. Исследованием биоматериала установлен туберкулез бычьего вида (M.bovis).

Экономическая эффективность от использования заявленного способа диагностики видна из следующего примера. В СПК им. Кирова в 2002-2003 гг. при аллергических исследованиях 525 коров и поступающих в стадо 385 нетелей при использовании дозы туберкулина по прототипу (10 тыс. ME) выделено 185 реагирующих на туберкулин животных, все эти животные были подвергнуты убою. Однако патологоанатомически и лабораторно туберкулез был подтвержден у 28 животных, остальные животные были сенсибилизированы факторами нетуберкулезной этиологии. Ущерб составил 4 миллиона 66 тысяч рублей. Таким образом, анализ научно-экспериментальных результатов и производственных испытаний заявленного способа диагностики туберкулеза крупного рогатого скота при использовании дозы туберкулина в пределах от 0,6 до 0,8 тыс. ME (исключающей влияние на конечный результат диагностики факторов нетуберкулезной этиологии) показал высокую эффективность заявленного способа в связи с ликвидацией необоснованного убоя скота.

Изобретение относится к области ветеринарной микробиологии. Способ включает внутрикожную инъекцию туберкулина в объеме 0,2 мл с последующей через 72 часа читкой реакции. Больными признаются животные при увеличении кожной складки на 3 мм и более. При этом туберкулин вводят в дозе 0,6-0,8 тыс. МЕ. Способ исключает влияние на конечный результат диагностики факторов нетуберкулезной этиологии и обеспечивает ликвидацию необоснованного убоя скота. 2 табл.

Способ диагностики туберкулеза крупного рогатого скота посредством внутрикожной инъекции туберкулина в объеме 0,2 мл с последующей через 72 ч читкой реакции, при которой больными признаются животные при увеличении кожной складки на 3 мм и более, отличающийся тем, что доза туберкулина при этом составляет 0,6-0,8 тыс. МЕ.