СРЕДСТВО ДЛЯ НАРКОЗА НА ОСНОВЕ 3-АМИНОМЕТИЛЕНИНДОЛИНОНА-2 Российский патент 2008 года по МПК C07D209/34 A61K31/404 A61P23/00 

Изобретение относится к области медицины и химии, в частности к фармацевтическим лекарственным средствам, и касается нового средства для наркоза на основе 3-аминометилениндолинона-2 и способа получения 3-аминометилениндолинона-2.

Средства для наркоза (синоним: общие анестетики) представляют собой группу фармакологических средств, вызывающих состояние хирургического наркоза, т.е. состояния, которое должно быть достигнуто для безопасного выполнения хирургической операции.

Слово "наркоз" происходит от греческого narke, что значит оцепенение, онемение. Состояние наркоза характеризуется обратимым угнетением центральной нервной системы и проявляется выключением сознания, наступлением медикаментозного (гипнотического) сна, подавлением болевой чувствительности (анальгезией), понижением рефлекторных функций и реакций на внешние раздражители, в том числе потерей двигательной активности, снижением тонуса мышц (миорелаксацией).

Современная анестезиология располагает достаточно большим арсеналом препаратов для общей анестезии и дополнительных средств, обеспечивающих тот или иной из указанных выше компонентов наркоза. Однако ни один из известных препаратов не обладает требуемой эффективностью и безопасностью, т.к. они не способны вызывать все составные части наркоза или же не оказывать неблагоприятных побочных действий на сердечно-сосудистую или дыхательную системы.

В частности, известны анестезирующие средства - гексенал и тиопентал, являющиеся производными барбитуровой кислоты (Машковский М.Д. Лекарственные средства. Пособие для врачей. T.1. 14-е изд. М.: Новая волна. - 2000, с.22-24).

Препараты барбитурового ряда вызывают снотворный и наркотический эффекты, но не обеспечивают анальгетический компонент наркоза, т.к. не подавляют чувства боли при выполнении операции, не дают полного расслабления скелетной мускулатуры, рефлексы угнетают частично, вызывают возбуждение n.vagus. В связи с чем любая манипуляция в полости рта и глотки может сопровождаться кашлевой реакцией, икотой, глоточными и гортанными рефлексами и ларингоспазмом (что особенно характерно для тиопентала). Кроме того, барбитураты обладают высокой токсичностью и угнетают дыхательный и сосудодвигательный центры.

Известно анестезирующее средство Кетамин (синонимы: Кеталар, Калипсол, Кетанест, Кетмин), содержащее активное вещество - 2-(метиламино)-2-(2-хлорфенил)-циклогексана гидрохлорид в смеси с фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами (Машковский М.Д. Лекарственные средства. Пособие для врачей. T.1. 14-е изд. М.: Новая волна. - 2000. с.24-25; Справочник Видаль. Лекарственные препараты в России. АстраФармСервис. - 2004, с.471, 1294-1295).

Особенностью наркозного (общеанестезирующего) действия Кетамина является быстрый и непродолжительный эффект (8-15 минут) с сохранением при наркотических дозах самостоятельной вентиляции легких.

Кетамин вызывает выраженный анальгетический эффект (до 2 часов), но оказывает лишь легкое снотворное действие с частичной утратой сознания (состояние типа нейролептанальгезии).

Хирургический наркоз под влиянием кетамина не развивается и это действие препарата обозначается как "диссоциативная анестезия". Кетамин плохо расслабляет скелетную мускулатуру, в фазе наркоза могут наблюдаться непроизвольные движения конечностей; не снимает глоточные, гортанные и кашлевые рефлексы. Препарат применяют для мононаркоза и комбинированного наркоза, при проведении кратковременных операций, не требующих миорелаксации особенно у больных с низким АД или при сохранении самостоятельной вентиляции легких.

Недостатками Кетамина также являются широкий спектр побочных действий и противопоказаний к применению. В частности, Кетамин оказывает отрицательное влияние на сердечно-сосудистую систему, т.к. вызывает развитие гипертензии и тахикардии; вызывает повышенную секрецию слизистых оболочек и слюнных желез (гиперсаливацию), тошноту, одышку, угнетение дыхательного центра. Возможна обтурация верхних дыхательных путей из-за спазма жевательной мускулатуры и западения языка. В послеоперационном периоде нередки галлюцинации, психомоторное возбуждение и длительная дезориентация. Кроме того, Кетамин может оказывать неблагоприятное воздействие на печень, вызывая ее дегенерацию.

Известен препарат для общей анестезии Пропофол (Диприван, Рекофол), содержащий активное вещество - 2,6-диизопропилфенол в смеси с фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами (Справочник Видаль. Лекарственные препараты в России АстраФармСервис. - 2004, с.398, 728, 742).

Пропофол вызывает быстрое наступление медикаментозного сна (в течение 30 с) и быстрое восстановление сознания после выхода из наркоза. Однако гипнотическое действие его очень непродолжительно. Кроме того, Протофол практически не оказывает анальгезирующего действия, что требует дополнительного назначения анальгетиков. К недостаткам препарата относится также то, что он существенно снижает артериальное давление, может вызвать судороги, бронхоспазм и отек легких.

Наиболее близким аналогом изобретения является фармацевтическая композиция для вводного наркоза и поддержания общей анестезии, содержащая в качестве активного соединения производные фенилового эфира α-аминокислот или фармацевтически приемлемую соль, в смеси с фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами. В качестве фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ известное средство для наркоза содержит любую фармацевтически приемлемую добавку, которая не влияет на функцию активного вещества. Известное средство для наркоза может быть использовано в любой форме для введения (Патент RU №2223947, С07С 229/38, А61К 31/235, опубл. 2004.02.20).

Известное средство проявляет гипнотическую и обезболивающую активность, но данных о наличии миорелаксантной активности нет.

Известен способ получения 3-аминометилениндолинона-2 (соединение 1), являющегося активным веществом предлагаемого средства для наркоза. Известный способ его получения основан на синтезе 3-хлорметилениндолинона-2 (соединение 2) из индолинона-2 (соединение 3) через гидроксиметилениндолинон-2 (соединение 4) с последующей заменой атома хлора на аминогруппу. Ключевым исходным соединением для получения соединения (1) известным способом является 3-хлорметиленоксиндол (соединение 2), который при взаимодействии с аммиаком дает целевое соединение (1). Общая схема указанных процессов представлена на рис.1 (H. Behringer, H. Weissauer, Chem. Ber., 1952, v.85, B.743).

Рис.1. Общая схема получения 3-аминометилениндолинона-2 согласно работе: H. Behringer, H. Weissauer, Chem. Ber., 1952, v.85, B.743.

Однако описанный способ характеризуется тем недостатком, что в нем требуется при получении хлорпроизводного 2 использование токсичного тионилхлорида, что усложняет масштабирование процесса и, являясь простым методом для лабораторных исследований, он усложнен для промышленного производства.

Наиболее близким аналогом способа получения 3-аминометилениндолинона-2 является получение целевого продукта (1) из соединения (4) через предварительное образование оксима (5), его О-ацетилирование и каталитическое гидрирование полученного производного (6) в присутствии катализатора - палладия на угле. Общая схема указанных процессов представлена на рис.2 (E. Winkert, J.H. Udelhofen, N.K. Bhattacharyya, J.Am.Chem.Soc., 1959, v.81, p.3763).

Рис.2. Общая схема получения 3-аминометилениндолинона-2 согласно работе: E. Winkert, J.H. Udelhofen, N.K. Bhattacharyya, J. Am. Chem. Soc., 1959, v.81, p.3763.

К недостаткам ближайшего аналога относится сложность проведения процесса синтеза, связанная с использованием уксусного ангидрида и палладиевого катализатора по схеме 4→5→1.

Таким образом, в настоящее время отсутствуют средства для наркоза, которые могут широко использоваться при различных хирургических вмешательствах и использование которых не связано с развитием отчетливых побочных неблагоприятных эффектов.

Отсутствуют также эффективные и безопасные методы синтеза 3-аминометилениндолинона - соединения, являющегося активным веществом средства для наркоза.

В связи с этим задачей изобретения является создание новых, активных и безопасных средств для наркоза (общих анестетиков), лишенных всех или части недостатков указанных выше аналогов.

Задачей изобретения является также разработка нового способа получения активного вещества средства для наркоза, пригодного для промышленного производства, который обеспечивает воспроизводимый высокий выход и безопасность синтеза целевого продукта.

Поисковые исследования, направленные на изыскание фармакологической активности в отношении центральной нервной системы в ряду производных оксиндола, позволили впервые обнаружить у соединения 3-аминометилениндолинона фармакологические свойства, характерные для общих анестетиков.

Средство для наркоза на основе соединения 3-аминометилениндолинона структурной формулы (1) является объектом настоящего изобретения.

Другим объектом изобретения является способ получения 3-аминоиндолинона-2 - соединения, являющегося активным веществом предлагаемого средства для наркоза.

Технический результат изобретения заключается в расширении арсенала средств, применяемых для общей анестезии.

Еще один технический результат изобретения заключается в упрощении и повышении безопасности способа получения 3-аминоиндолинона-2, что делает его пригодным для промышленного производства.

Сущность изобретения заключается в следующем.

Согласно изобретению средство для наркоза содержит активное вещество и фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества и отличается тем, что в качестве активного вещества содержит 3-аминометилениндолинон-2 структурной формулы (1),

взятое в эффективном количестве.

В качестве фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ в составе средства для наркоза согласно изобретению могут быть использованы любые фармацевтически приемлемые компоненты, которые не влияют на функцию активного вещества.

Термин «приемлемый» означает «совместимый с активным веществом - 3-аминометилениндолиноном-2 структурной формулы (1) и не наносящий вреда пациентам».

В частности, это может быть водный раствор, изотонические солевые растворы, эмульсионные растворы для инъекций и др. Подходящими фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами также являются такие наполнители, как, например, лактоза, сахароза, маннит, сорбит, производные целлюлозы и/или фосфаты кальция, или их смеси, а также связующие компоненты, такие как, например, крахмал, желатина, метилцеллюлоза, карбоксиметилцеллюлоза, поливинилпирролидон, полиэтиленгликоли и др.

Соединение 3-аминометилениндолинон-2 структурной формулы (1), являющееся активным веществом предлагаемого средства для наркоза, представляет собой порошок с желтоватым оттенком, плохо растворимый в воде. Т.пл. 220°С.

Соединение 3-аминометилениндолинон-2 ранее описано в литературе в ряде работ, но утилитарные свойства его ранее были не известны, и ни в одной из них нет сведений о биологической активности этого соединения (H. Behringer, H. Weissauer, Chem. Ber., 1952, v.85, B.743; E. Winkert, N.K. Bhattacharyya, T.L. Reid, T.E. Stevens, J. Am. Chem. Soc., 1956, v.78, p.797; E. Winkert, J.H. Udelhofen, N.K. Bhattacharyya, J. Am. Chem. Soc., 1959, v.81, p.3763).

Заявители неожиданно обнаружили, что 3-аминометилениндолинон-2 обладает фармакологическими свойствами, характерными для средств для наркоза (общих анестетиков).

Заявители также обнаружили, что анестезирующее средство, полученное на основе 3-аминометилениндолинона, вызывает все основные компоненты хирургического наркоза, а именно: полную анестезию, анальгезию, миорелаксацию без существенных побочных эффектов и этим превосходит все современные известные неингаляционные анестетики.

Использование средства для наркоза по изобретению делает излишним дополнительное включение других внутривенных седативных препаратов, анестетиков или болеутоляющих средств.

Средство для наркоза по изобретению может вводиться любым приемлемым энтеральным способом введения, например перорально или ректально, или любым приемлемым парентеральным способом введения, например внутривенно, внутримышечно или подкожно.

Продолжительность его общенаркотического действия составляет от 2,5 мин до 140 мин и более, в зависимости от применяемой дозы.

Диапазон использованных для экспериментальных исследований доз: 6,0-50 мг/кг (внутривенно), 12-100 мг/кг (внутрибрюшинно) и 25-200 мг/кг (per os).

Средство для наркоза по изобретению обладает при внутривенном введении низким уровнем токсичности и не имеет выраженного побочного действия. В отличие от тиопентала и гексенала оно не снижает, а несколько повышает артериальное давление у наркотизированных животных и инъекция в сосуд не сопровождается болевой реакцией, отсутствует период возбуждения, предшествующий наркозу; в отличие от кетамина средство для наркоза по изобретению не вызывает гипертонуса скелетной мускулатуры, угнетения дыхательного центра, гиперсаливации.

Острая токсичность (ЛД50) соединения 3-аминометилениндолинон при внутривенном введении мышам составляет 112 мг/кг.

3-Аминометилениндолинон существенно менее токсичен в сравнении с тиопенталом, острая токсичность которого (ЛД50) при внутривенном введении мышам составляет 78 мг/кг (The Merk Index, Thirteenth Esition, 2001).

Механизм наркотического действия соединения (1) нами пока до конца не изучен. Однако из литературных источников известно, что, за исключением кетамина (антагонист NMDA рецепторов), все средства для наркоза оказывают свое депримирующее действие на ЦНС в результате активации ГАМК-ергической системы.

Так, уже хорошо известно, что многие вещества, вызывающие в эксперименте и клинике наркотическое действие, являются ГАМК-миметиками. Это оксибутират натрия, в настоящее время применяемый в качестве средства для наркоза при внеполостных операциях, и, мусцимол - прямой ГАМК-миметик, большие дозы которого вызывают у животных глубокое торможение и нарушение рефлекса переворачивания (E. Winkert, N.K. Bhattacharyya, T.L. Reid, T.E. Stevens, J. Am. Chem. Soc., 1956, v.78, p.797).

Среди структурных аналогов соединения (1) можно привести литературные данные о биологической активности нового класса ГАМК-ергических веществ, производных 1-арил-3-(аминоалкилиден) индолинон-2-ов (E. Winkert, J.H. Udelhofen, N.K. Bhattacharyya, J. Am. Chem. Soc., 1959, v.81, p.3763). Ряд соединений этого класса проявил активность на модели ГАМК-дефицитных судорог, вызываемых 3-меркаптопропионовой кислотой (3-МПК). Было показано, что хотя эти соединения не являются ГАМК-миметиками и не влияют на уровень ГАМК в мозге, однако, подобно другим ГАМК-ергическим веществам, способны повышать связывание с БД (бенздиазепиновые)-рецепторами меченного [³Н] флюнитразепама in vitro и в радиоиммунологических исследованиях противодействовать повышению цГМФ при введении изониазида (450 мг/кг). Полагают, что эти вещества могут рассматриваться как потенциальные антиконвульсанты и анксиолитики.

Таким образом, на основании современных представлений о механизме проявления выраженного наркотического эффекта, можно предположить наличие у соединения формулы (1) свойств антагониста NMDA-рецепторов или ГАМК-миметиков.

Новый способ получения соединения (1) согласно настоящему изобретению заключается в конденсации индолинона-2 с коммерчески доступными диалкилацеталями диметилформамида (соединение 7), преимущественно с диметил- (соединение 7а) и диэтил (соединение 7б)-ацеталями с образованием 3-диметиламинометилениндолинона-2 (соединение 8), который далее вводят в реакцию переаминирования с аммиаком, в результате которой гладко образуется целевой продукт (1).

Изобретение иллюстрируется, но не ограничивается, следующими примерами.

Пример 1. Получение 3-аминометилениндолинона.

А) Получение промежуточного продукта - 3-диметиламинометилениндолинона-2 (соединение 8)

Смесь 15 г (0,113 моля) индолинона-2 (соединение 3) и 17 г (0,115 моля) диэтилацеталя диметилформамида (соединение 7б) в 100 мл пропанола-2 перемешивают 1,5 часа при комнатной температуре, прибавляют еще 15 г (0,102 моля) соединения (7б) и перемешивают еще 2,5 часа.

Реакционную смесь охлаждают и отфильтровывают 17,09 г соединения 8 (выход - 80%). При охлаждении из маточного раствора выпадает еще 0,7 г соединения 8. Общий выход составляет 84%.

Т.пл. 198,5-200°С. ИК-спектр: v см^-1: 3120 (NH), 1680 (СО), УФ-спектр, нм (lgε): 210 (4,502), 275 (4,249), 347 (4,159), ¹Н ЯМР-спектр (d-ДМСО) δ м.д.: 3,36, 3,46 (β-NMe₂, транс- и цис-изомер), 7,30, 7,44 (4-СН, транс- и г/мс-изомер), 7,59, 7,46 (α-СН, транс- и цис-изомер), 10,02, 9,90 (NH, транс- и цис-изомер), 6,7-7,1 (аром. протоны).

Б) Получение целевого продукта - 3-аминометилениндолинона (соединение 1)

В суспензию 13,13 г соединения 8 в 200 мл метанола пропускают при комнатной температуре аммиак-газ до исчезновения исходного продукта (контроль - тонкослойная хроматография). Реакционную массу упаривают в вакууме. Полученный остаток растирают с пропанолом-2. Получают 10,46 г (94%) соединения формулы (1). После перекристаллизации из пропанола-2, т.пл. 218-219°С (лит.⁶ т.пл. 220°С). Спектр ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆, м.д., J/Гц): 6,78-6,89 (м, 3Н, Н(5), Н(6), Н(7)); 7,31 (д, 1Н, J=7,2 Гц, 4(Н)); 7,81, 8,23 (оба по 2Н и 1Н, Н, NH₂), 10,14 (уш.с., 1H, NH).

Пример 2. Получение средства для наркоза на основе 3-аминометилениндолинона.

А) Для приготовления испытуемого средства для наркоза в форме раствора берут полученное по примеру 1 соединение формулы (1) в количестве 30 мг и растворяют в 10 мл горячей воды до образования истинного раствора. Получают 0,3% водный раствор для внутривенных инъекций.

Б) Для получения испытуемого средства для наркоза в форме раствора берут полученное по примеру 1 соединение формулы (1) в количестве 30 мг и растворяют 10 мл воды. В качестве фармацевтически приемлемого вспомогательного вещества для приготовления раствора препарата для внутривенного введения используют 1% раствор соединения в полиэтиленгликоле с м.м. 500 (ПЭГ-500) с водой (1:1).

В) Для приготовления испытуемого средства для наркоза в форме суспензии берут полученное по примеру 1 соединение формулы (1) в количестве 30 мг и растирают в 10 мл водного 1%-го раствора карбоксиметилцеллюлозы (КМЦ) с добавлением в качестве эмульгатора Твин-80 (2-3 капли).

Пример 3. Выбор адекватных моделей для оценки гипнотического, анальгетического, миорелаксантного и гипометаболического действия у наркотизированных животных.

Общая анестезия или наркоз у животных характеризуется глубоким угнетением центральной нервной системы (ЦНС), что выражается в потере сознания, гипнотическом состоянии и нарушении рефлекторной деятельности.

Исследование поведенческих показателей является объективными критериями оценки адекватности гипнотического или общеанестезирющего действия исследуемых препаратов, поскольку сон определяется как состояние неподвижности, сопровождающееся характерной неподвижной позой и ослаблением сенсорных контактов с окружающей средой.

Поведенческие показатели животных определяют по стандартным тестам, описанным в «Методических указаниях по изучению снотворной активности фармакологических веществ» ("Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ" - Фармакологический государственный комитет, МЗ РФ, Москва, 2000, с.131-136).

В зависимости от применяемой дозы общего анестетика изменяется выраженность и продолжительность угнетения ЦНС, отмечаются поведенческие изменения, которые соответствуют стадиям хирургического наркоза у людей.

Небольшие дозы общего анестетика оказывают на организм животного гипноседативный эффект, при этом отмечается седация, дискоординация и атаксия.

Отмечаемые в малых дозах моторные расстройства или моторный дефицит выявляют у животных с помощью теста "вращающийся стержень" (rota-rod). Животных группой (если позволяет прибор) или по одиночке помещают на "вращающийся стержень" и в течение 2 минут регистрируют их количество, удерживающееся на стержне.

Состояние общей анестезии у животных поведенчески выражается в нарушении моторных функций, утрате рефлекса переворачивания (righting reflex) и принятии животным бокового положения. При введении препаратов, обладающих гипнотической (снотворной) активностью, животные через некоторое время после введения препарата засыпают и утрачивают рефлекс переворачивания (тест «бокового положения»). Они остаются в неудобной позе на спине или на боку. Такое гипнотическое состояние животных обозначается как наличие бокового положения. Гипнотическую активность оценивают по латентному времени возникновения бокового положения (времени засыпания). Продолжительность (в мин) вызванного общеанестезирующего эффекта оценивают по времени нахождения животного в боковом положении до возникновения рефлекса переворачивания или пробуждения животного.

У наркотизированных животных наряду с общей анестезией отмечается потеря рефлекторной активности (роговичного, ушного, болевого и плантарного рефлексов), миорелаксация, анальгезия и гипотермия.

Анальгезия отмечается у животного, которое полностью вошло в наркоз (миорелаксация, закрытие глазной щели, отсутствие роговичного рефлекса, урежение дыхания). Анальгетический эффект оценивают по реакции на болевой раздражитель - это либо сдавление корня хвоста зажимом (тест Гаффнера), либо укол этого места иглой. В ответ животное может вздрагивать, отдергивать хвост или реагировать вокализацией. Этот эффект оценивают как качественную реакцию.

Миорелаксирующий эффект у наркотизированного животного оценивают пальпаторно, при взятии его в руки отмечается отсутствие мышечного тонуса.

Гипометаболическое действие. Глубокое угнетение ЦНС как правило сопровождается метаболическими сдвигами в организме вследствие снижения основного обмена. Оценку этого показателя проводят на основании снижения ректальной температуры у животных при условии нормальной температуры в экспериментальной комнате (+27°С). Температуру в прямой кишке измеряют с помощью ректального датчика электротермометра на протяжении всего периода наркоза.

Пример 4. Изучение продолжительности действия средства для наркоза на основе 3-аминометилениндолинона.

Гипнотическая активность анестезирующих средств, полученных по примеру 2, исследовалась в поведенческих экспериментах и оценивалась по способности препаратов угнетать центральную нервную систему и вызывать медикаментозный сон.

Средство для наркоза на основе 3-аминометилениндолинона вводят мышам опытных групп: в диапазоне доз от 15 мг/кг до 120 мг/кг - внутрибрюшинно; в дозах 50 мг/кг и 60 мг/кг - внутривенно (в боковую вену хвоста) и перорально. Животным контрольных групп вводят препараты сравнения - гексенал, тиопентал, кетамин в дозах 50 мг/кг и 60 мг/кг при тех же способах введения.

Вхождение животных в наркоз и продолжительность наркотического состояния определяют в тесте «боковое положение», по примеру 3. Регистрируют следующие поведенческие показатели: проявление двигательного возбуждения, снижение общей поведенческой активности (гиподинамия), угнетение исследовательского поведения и двигательных реакций (седация), утрата рефлекса переворачивания, продолжительность бокового положения, нарушение координации, состояние глазной щели, наличие роговичного и ушного рефлексов.

Из данных табл.1 и табл.2 следует, что исследуемое средство для наркоза вызывает дозозависимое увеличение продолжительности бокового положения у мышей. По выраженности общеанестезирующего эффекта (продолжительность бокового положения) средство для наркоза на основе 3-аминометилениндолинона значительно превосходит препараты сравнения гексенал и калипсол (кетамин) (см. табл.1). Так, средство для наркоза на основе 3-аминометилениндолинона проявляет свое действие, начиная с дозы 15 мг/кг, в то время как препараты сравнения гексенал и кетамин только начиная с доз 60 мг/кг и 90 мг/кг. При этом по продолжительности эффекта предлагаемого средства для наркоза в 20-30 раз превосходит препараты сравнения.

Табл.1
Продолжительность бокового положения у мышей под влиянием средства для наркоза на основе 3-аминометилениндолинона, гексенала и калипсола.Дозы, мг/кг, в.бПродолжительность бокового положения (мин), n =Средство на основе 3-аминометилениндолинонаГексеналКалипсол (кетамин)152,5±0,05Отсут.Отсут.3022,3±3,5Отсут.Отсут.60140,0±20,05,8±1,2Отсут.90≥5 ч114,0±27,04,5±1,4120--8,5±2,55Примечание: - не изучали; n=10-14 животных в группе на дозу

Из табл.2 следует, что заявляемое средство для наркоза значительно активнее препаратов сравнения при использовании в одинаковых дозах по влиянию на нарушение рефлекса переворачивания, характеризующего общеанестезирующее действие.

Табл.2
Сравнительное действие средства для наркоза на основе 3-аминометилениндолинона, гексенала, тиопентала и кетамина у мышей.Исследуемые препаратыДозы, мг/кгНарушение рефлекса переворачивания (мин), n =Ведение в венуВведение в. брюшинноВведение внутрьСредство на основе 3-50
6068,0±6,2
--
140,0±2,042,0±3,5
-аминомети-    лениндоли-    нона    Гексенал605,4±0,67,1±0,96нТиопентал5028,0±3,0-- 60-32,0±4,8нКетамин60н0,7±0,02нПримечание: н - нет эффекта; - не изучали; n=10-14 животных в группе

Пример 5. Оценка общеанестезирующего действия средства для наркоза на основе 3-аминометилениндолинона при различных способах введения.

Испытуемое средство для наркоза, полученное по примеру 2 (вариант А), вводят мышам внутривенно в диапазоне доз от 12 мг/кг до 72 мг/кг.

Испытуемое средство для наркоза, полученное по примеру 2 (вариант Б), вводят мышам внутрибрюшинно в диапазоне доз от 15 мг/кг до 90 мг/кг.

Испытуемое средство для наркоза, полученное по примеру 2 (вариант В), вводят мышам перорально в диапазоне доз от 25 мг/кг до 200 мг/кг.

В зависимости от дозы средство для наркоза на основе 3-аминометилениндолинона оказывает отчетливое влияние на поведенческие реакции испытуемых животных (уровень бодрствования, координация движения и защита от судорожного действия максимального электрошока (МЭШ)) (см. табл.3).

Табл.3
Влияние средства для наркоза на основе 3-аминометилениндолинона на поведение мышей при различных способах введения.Дозы, мг/кг, внутрьНарушение рефлекса переворачивания (в мин) n =Нарушение координации движений (удержание на вращающемся стержне)Защита от МЭШ-судорог25010/120/125042,0±3,52/122/1210086,1±11,32/124/12200>3 ч0/1212/12 Дозы, мг/кг, в венуНарушение рефлекса переворачивания (мин) n =Нарушение координации движений (удержание на вращающемся стержне)Защита от МЭШ-судорог1211,2±2,49/120/122426,1±5,312/120/123653,0±8,712/129/1272>2 ч12/1212/12 Дозы, мг/кг, в. брюш.Нарушение рефлекса переворачивания (мин) n =Нарушение координации движений (удержание на вращающемся стержне)Защита от МЭШ-судорог150--3022,3±3,58/124/1260140,0±20,010/128/1290>5 ч12/1212/12Примечание: n=12-14 животных в группе; - не изучали; 0 - нет эффекта

Пример 6. Оценка общеанестезирующего действия средства для наркоза на основе 3-аминометилениндолинона на крысах.

Испытуемое средство для наркоза вводят крысам внутривенно (в боковую вену хвоста) в трех дозах 15 мг/кг, 40 мг/кг до 60 мг/кг. Животным контрольных групп вводят препарат сравнения - кетамин в тех же дозах.

Общеанестезирующий эффект оценивают в тесте «боковое положение», так как это описано в примере 3.

Результаты испытаний представлены в табл.4, из которых видно, что средство для наркоза на основе 3-аминометилениндолинона значительно превосходит по общеанестезирующей активности препарат кетамин.

Табл.4
Сравнительная оценка средства для наркоза на основе 3-аминометилениндолинона и кетамина на крысахИсследуемые препаратыДозы, мг/кг, в/вПродолжительность бокового положения (мин), n =Средство на основе1565,0±10,03-аминометилен-  индолинона   40110±13,2 60>180Калипсол (кетамин)15Отсут. 3015,5±2,0 6027,4±5,2Примечание: n=6-8 животных в группе

Пример 7. Оценка общеанестезирующего действия средства для наркоза на основе 3-аминометилениндолинона на кроликах и кошках.

Средство для наркоза по изобретению исследуют также в опытах на крупных животных - кроликах и кошках при внутривенном введении. Для оценки общеанестезирующего действия используют методики, описанные в примере 3.

Наркотический эффект при внутривенном введении средства для наркоза на основе 3-аминометилениндолинона также выражается в угнетении общего состояния, рефлекторной деятельности, гипнотическом действии, мышечной релаксации, гипотермии.

У кошек с эфирным рауш-наркозом внутривенное введение испытуемого средства для наркоза (после окончания эфирной анестезии) приводит к подавлению реакции пробуждения, успокоению и повторному входу в наркоз, отмечается кратковременное угнетение дыхания, незначительное снижение артериального давления, потеря рефлекторной и болевой чувствительности.

В опытах на кроликах с хронически вживленными электродами при введении средства для наркоза на основе 3-аминометилениндолинона (5-15-30-45 мг/кг, в/в) отмечалось угнетение корковой активности, указывающей на отчетливое торможение в центральной нервной системе, что является необходимым условием для проявления общего анестезирующего действия.

Пример 8. Оценка анальгетической активности средства для наркоза на основе 3-аминометилениндолинона на мышах и крысах.

Установлено, что анальгезия отмечается у животного, которое полностью вошло в наркоз. Это состояние констатируют на основании следующих показателей: миорелаксация, закрытие глазной щели, отсутствие роговичного рефлекса, урежение дыхания.

Животным опытных груп (мыши, крысы) вводят средство для наркоза на основе 3-аминометилениндолинона. Анальгетический эффект оценивают по двигательной реакции на болевой раздражитель при дозированном сдавливании основания хвоста мышей с помощью зажима (метод Гафнера). Этот эффект оценивают как качественную реакцию.

Данные, подтверждающие проявление выраженного анальгезирующего действия у животных, наркотизированных заявленным средством для наркоза на основе 3-аминометилениндолинона, представлены в табл.5 (правый столбец).

Пример 9. Оценка миорелаксантной активности средства для наркоза на основе 3-аминометилениндолинона.

Миорелаксирующий эффект у животного (мыши, крысы), наркотизированного средством для наркоза на основе 3-аминометилениндолинона, оценивают пальпаторно. Так, при взятии животного в руки отмечается отсутствие мышечного тонуса, т.е. релаксация скелетной мускулатуры.

Таким образом, в результате исследований показано, что средство для наркоза на основе 3-аминометилениндолинона в виде 0.3% раствора (10-12 мг/кг, внутривенно или 20-30 мг/кг, внутрибрюшинно) вызывает у мышей и крыс зависимый от дозы гипнотический эффект, превосходящий соответствующие эффекты других средств для наркоза (Табл.1-4).

Угнетение ЦНС, выражается в нарушении моторных функций (седация, дискоординация, нарушение рефлекса переворачивания), частичной или полной утрате рефлекторной деятельности (роговичного, ушного, болевого и плантарного рефлексов), потенцировании действия наркотических средств и антагонизму к действию возбуждающих средств (фенамину). Аналогичное действие наблюдается также при введении средства для наркоза на основе 3-аминометилениндолинона внутрь, начиная с 40-50 мг/кг.

Характерно, что периоду угнетения при введении средства для наркоза на основе 3-аминометилениндолинона (в отличие от гексенала, тиопентала и калипсола) не предшествует период возбуждающего действия, как и при введении кетамина, у животных, находящихся в боковом положении, первые 30-40 мин глазная щель открыта, отмечается мышечная ригидность, но без судорожного компонента (Табл.5).

В отличие от тиопентала натрия и гексенала, гипнотический эффект средства для наркоза на основе 3-аминометилениндолинона сопровождается вначале мышечным гипертонусом, который в течение периода наблюдения сменяется на миорелаксацию. Гипнотическое состояние, вызываемое средством для наркоза на основе 3-аминометилениндолинона, напоминает действие кетамина, но без негативных периферических эффектов (пилоэрекция, гиперсаливация) и гипертонуса в виде судорожных подергиваний конечностей, а после выхода из наркоза у животных отмечается выраженная каталепсия.

Средство для наркоза на основе 3-аминометилениндолинона проявляет такое же аналогичное действие у животных при введении внутрь (50-200 мг/кг), при этом латентный период наступления гипнотического эффекта увеличивается, последовательно развиваются гиподинамия, атаксия, нарушение рефлекса переворачивания, снижение рефлекторной деятельности (табл.3). Анализ угнетающего действия предлагаемого средства для наркоза на ЦНС показал, что соединение потенцирует действие наркотических средств (гексенала и тиопентала) и проявляет частичный антагонизм к возбуждающему эффекту фенамина.

Средство для наркоза на основе 3-аминометилениндолинона предупреждает судорожное действие МЭШ, увеличивает латентный период судорог и гибели, вызванных коразолом, вызывает гипотермию и увеличивает продолжительность жизни в условиях гипоксии. Все это указывает на высокую активность предлагаемого средства в отношении центральной нервной системы, что является неотъемлемым и необходимым свойством средств для наркоза.

Табл.5
Влияние средства для наркоза на основе 3-аминометилениндолинона на поведение и общее состояние мышей при внутрибрюшинном введении.Дозы, мг/кг, в/бКол-во животных n =Расстройство моторной деятельностиБоковое положение (мин)Состояние глазной щелиРоговичный рефлексБолевая чувствит-ть (тест Гафнера)Двигательное возбуждениеГиподинамияНарушение координации (%)1571-2 минВыраж.162,0±0,02Откр.Присут.Присут.20204-9 минВыраж.1003,2±0,05Откр.Присут.Присут.30303-10 минВыраж.10020±2,4Откр.Присут.Отсут.45183-10 минВыраж.10072,0±4,9Откр.Присут.Отсут.60190 минВыраж.100140,0±20Закр.Отсут.Отсут.90140 минВыраж.100>6Закр.Отсут.Отсут.

Изобретение относится к средству для наркоза на основе 3-аминометилениндолинона-2, взятого в эффективном количестве, которое не имеет существенных побочных эффектов и этим превосходит современные неингаляционные анестетики. Описан способ получения 3-аминометилениндолинона-2. 5 табл., 2 ил.

Средство для наркоза, содержащее активное вещество в смеси с фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами, отличающееся тем, что в качестве активного вещества содержит 3-аминометилениндолинон-2 структурной формулы (1)

взятый в эффективном количестве.