СРЕДСТВО ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ САХАРНОГО ДИАБЕТА Российский патент 2008 года по МПК A61K33/00 A61P3/10 

Изобретение относится к области медицины.

Известны пероральные противодиабетические средства, являющиеся производными сульфонилмочевины. Действие препаратов сульфонилмочевины связано главным образом со стимуляцией ими β-клеток поджелудочной железы, сопровождающейся мобилизацией и усилением выброса эндогенного инсулина. К препаратам этой группы относятся: карбутамид, хлорпромамид, глибенкламид, глипизид и др.

Данные препараты противопоказаны при нарушении функции печени и почек, лейкопении, гранулоцитопении (Машковский М.Д. Лекарственные средства. М.: ООО «Новая волна. Издатель С.Б.Дивов. - 2002. - Т.1, 2).

Существует необходимость разработки противодиабетических средств, стимулирующих наработку инсулина, применение которых возможно и полезно при нарушении функции печени и почек и других нарушениях, имеющих место у больных диабетом.

Раскрытие изобретения

Сущность предлагаемого изобретения состоит в применении природного клиноптилолита для производства средства для лечения диабета.

Предлагаемое средство расширяет арсенал средств для лечения диабета. Кроме того, оно обладает рядом сопутствующих свойств, актуальных для больных диабетом. Оно усиливает регенераторные процессы в почках, печени, поджелудочной железе, кишечнике. У больных сахарным диабетом в поздних стадиях заболевания развивается почечная недостаточность. Предлагаемое средство за счет связывания и выведения низкомолекулярных токсических веществ, таких как мочевина, мочевая кислота, креатинин и др., уменьшает их токсическое действие на организм, частично компенсируя почечную недостаточность (RU 2097046 «Энтеросорбент для терапии почечной недостаточности»).

У диабетиков наблюдается гиперхолестериемия. Предлагаемое средство оказывает гипохолестеринемическое действие (RU 2144360 «Гипохолестеринемическое средство»). Кроме того, клиноптилолит стимулирует репаративную регенерацию в органах кроветворения (RU 2135188 «Средство с регенераторно-восстановительным действием»).

Осуществление изобретения

Исследования были проведены на взрослых самцах крыс линии Вистар - интактных животных и животных с экспериментальной моделью сахарного диабета. Кроме того, было проведено обследование больных с инсулинозависимым сахарным диабетом, получавших в качестве дополнительного терапевтического средства измельченный цеолит Шивыртуйского месторождения - шивыртуин, предназначенный для медицинских целей, на 95% состоящий из клиноптилолита и его геохимических разновидностей (фракция 0-1 мм) (препарат цеосорб). Препарат представляет собой серый порошок без вкуса и запаха и имеет следующий состав: SiO₂ (63,5%); TiO₂ (0,2%); Al₂О₃ (13,9%); Fe₂O₃ (1,8%); FeO (0,2%); СаО (3,3%); MgO (0,1%); Na₂O (1,3%); К₂О (2,7%); H₂O (13%) (Протокол экспертизы Российского государственного научного центра экспертизы лекарств от 21 января 1993 г №1/93).

Все животные (20 особей) были поделены на три группы. Первая группа была контрольной, ее составляли интактные животные. Для моделирования сахарного диабета животным 2-й и 3-й групп вводили 10%-ный раствор аллоксана подкожно из расчета 0,1 мл на 100 г массы тела. Животные первой и второй групп содержались на стандартном корме (ПК 12112 и ПК-121-2 для лабораторных крыс и мышей). В корм животных третьей группы был добавлен препарат клиноптилолита из расчета 5% от массы корма.

Животные трех групп, задействованные в эксперименте, содержались в стандартных условиях вивария и не имели ограничения в потреблении воды и пищи. В течение послеинъекционного периода у всех животных через каждые три дня путем надсечки хвоста брали пробы крови объемом 0,2 мл и пробы мочи для определения содержания сахара в крови.

В конце эксперимента под эфирным наркозом у животных забирали образцы почки и поджелудочной железы. Для изучения образцов тканей на электронном микроскопе их фиксировали в1% растворе OsO₄ на фосфатном буфере (рН 7,4), дегидратировали в этиловом спирте возрастающей концентрации и заключали в смолу (эпон). Из полученных блоков готовили полутонкие срезы толщиной 1 мкм, окрашивали метиленовым голубым, изучали под световым микроскопом и выбирали необходимые участки тканей для исследования в электронном микроскопе. Из отобранного материала получали ультратонкие срезы толщиной 35-40 нм на ультратоме LKB-8800, контрастировали насыщенным водным раствором уранилацетата, цитратом свинца и изучали в электронном микроскопе JEM 1010.

Для изучения эндокринных механизмов влияния клиноптилолита на функциональное состояние поджелудочной железы в собранных образцах плазмы крови определяли концентрацию инсулина и фрагмента проинсулина С-пептида.

Статистический анализ результатов исследований проводили на основе вычисления средних арифметических (М) и их ошибок (±m). Различия показателей животных экспериментальных групп по сравнению с таковыми контрольных животных оценивали методом вариационной статистики по t-критерию Стьюдента и считали достоверными при p≤0,05 (в отдельных сериях экспериментов использовали непараметрический критерий Вилкоксо-на-Манна-Уитни для малых независимых выборок (Pu≤0,05)). Все расчеты проводили по общепринятым формулам (Лакин Г.Ф., 1980) с использованием пакета программ Microsoft Exel 2000.

1. Протективный и терапевтический эффекты клиноптилолита в условиях аллоксанового диабета

1.1 Влияние природного клиноптилолита на концентрацию сахара в крови и моче крыс с аллоксановой моделью диабета

Определение концентрации глюкозы в крови и моче животных (а также в крови обследованных больных с инсулинозависимым сахарным диабетом) производилось пикриновым методом. К 0,1 мл плазмы крови добавляли 0,9 мл дистиллированной воды и 0,5 мл пикриновой кислоты (1,2% р-р), тщательно перемешивали и центрифугировали в течение 10 минут при скорости вращения 3000 об/мин. Затем к 1 мл центрифугата приливали 0,2 мл гидроксида натрия (20% р-р) и помещали его в кипящую водяную баню на 5 минут. После охлаждения раствор фотометрировали при длине волны 560 нм на спектрофотоколориметре «Specol». Концентрацию глюкозы определяли по калибровочной кривой.

Концентрацию глюкозы в моче определяли тем же способом. Мочу предварительно разводили от 10 до 50 раз в зависимости от концентрации в ней глюкозы.

По данным таблицы 1 можно проследить динамику развития сахарного диабета у крыс. Как видно, после инъекции аллоксана содержание сахара в крови животных 2-й и 3-й групп было достоверно выше, чем в контроле. При этом животные экспериментальных групп выглядели вялыми, потребляли большое количество воды.

На 5 сутки после приема клиноптилолита различий в содержании сахара в крови животных 2-й и 3-й групп не было обнаружено, на 8 сутки отмечена тенденция к понижению, а на 11 и 15 сутки клиноптилолитовой диеты уровень сахара в крови крыс 3-й группы был достоверно ниже по сравнению с аналогичными показателями 2-й группы. Следовательно, в условиях клиноптилолитовой диеты происходит более быстрая нормализация сахара в крови крыс.

Поскольку наряду с повышением содержания сахара в крови при сахарном диабете наблюдается повышение содержания сахара в моче, вторым этапом работы явилась оценка влияния клиноптилолита на содержание сахара в моче крыс с экспериментальной моделью сахарного диабета. По данным таблицы 2 можно оценить эффект клиноптилолита на глюкозурию у крыс.

Как видно из данных таблицы 2, содержание сахара в моче животных 2-й и 3-й экспериментальных групп на 5 сутки после инъекции аллоксана был достоверно выше контрольных показателей. На протяжении всего периода приема клиноптилолита наблюдалась четкая тенденция к снижению содержания сахара в моче крыс 3-й групп по сравнению со 2-й. Эти факты хорошо согласуются с показателями содержания сахара в крови и подтверждают мысль о позитивном влиянии природного клиноптилолита на течение сахарного диабета.

1.2. Влияние природного клиноптилолита на содержание инсулина в крови крыс с аллоксановой моделью сахарного диабета

Для изучения влияния природного клиноптилолита на гормональные механизмы регуляции в собранных образцах плазмы крови определяли концентрацию инсулина.

Определение гормонов в данных исследованиях на животных и при обследовании больных сахарным диабетом проводили радиоиммунологическим методом с применением наборов фирмы RIA «IMMUNOTECH» и «CIS bio international» на γ-счетчике «ГАММА-800» (Россия). Математическую обработку результатов определения проводили на ЭВМ «МОД-81м».

Поскольку аллоксановая модель сахарного диабета характеризуется нарушением функции β-клеток островков Лангерганса, отвечающих за выработку инсулина, было важно проследить изменение концентрации гормона у исследуемых животных.

Анализ результатов исследования влияния клиноптилолита на содержание гормона в крови крыс с аллоксановым диабетом показал, что концентрация инсулина у животных 3-й группы не отличалась от контрольных показателей, что указывает на терапевтический эффект клиноптилолита (таблица 3). Во 2-й группе животных концентрация инсулина была достоверно ниже по сравнению с показателями контрольной группы.

1.3. Структурная организация инсулоцитов поджелудочной железы крыс в условиях аллоксанового диабета и использования в рационе клиноптилолита

При исследовании структурной организации поджелудочной железы крыс с аллоксановым диабетом отмечали мозаичность в структуре островков Лангерганса. Наблюдали участки некроза инсулоцитов и замещение клеток коллагеновыми волокнами. Некоторые клетки были лишены гранул секрета, в них отмечали значительное расширение цистерн гранулярного ретикулума, отек митохондрий, небольшое число прикрепленных и свободных полисомальных рибосом. Встречались клетки, в которых отмечали зоны скопления огромного количества свободных полисомальных рибосом.

При исследовании ультраструктуры инсулоцитов поджелудочной железы крыс с аллоксановым диабетом отмечали снижение на 72% объемной плотности митохондрий. При этом данные органоиды уменьшались в размерах. Объемная плотность гранулярного ретикулума снижалась на 56%. В клетках отмечали уменьшение на 64% объемной плотности гранул инсулина. Численная плотность прикрепленных рибосом снижалась на 57%, свободных полисомальных рибосом - на 36%, а суммарная численная плотность рибосом в клетке - на 44% (табл.4).

Цистерны гранулярного эндоплазматического ретикулума были расширены. Комплекс Гольджи часто занимал значительный объем за счет расширения цистерн.

Следовательно, в условиях аллоксанового диабета происходила гибель части инсулоцитов, на месте некроза клеток образовывались скопления коллагеновых волокон. В оставшихся инсулоцитах отмечали мозаичность в структурной организации. В одних клетках отсутствовали гранулы секрета, была снижена белок-синтетическая и энергетическая функции клеток. В другой части клеток на фоне меньшего снижения белок-синтетической и энергетической функции отмечали небольшое количество секреторных гранул.

У животных, которым на фоне аллоксанового диабета давали с рационом клиноптилолит, также отмечали мозаичность в повреждении инсулоцитов. Отмечали небольшое число клеток без гранул секрета с расширенными цистернами гранулярного эндоплазматического ретикулума и небольшим числом рибосом. Имела место коллагенизация перикапиллярных пространств. Достоверно ниже значения в контроле (на 44%) была объемная плотность секреторных гранул. Остальные параметры соответствовали значениям в контроле (табл.4). Митохондрии отличались хорошо выраженными кристами.

Следовательно, использование на фоне аллоксанового диабета клиноптилолита, по-видимому, оказывало стимулирующий эффект на процессы внутриклеточной регенерации эндокринной части поджелудочной железы. При этом происходило восстановление клеточного состава островков и внутриклеточная репарация инсулоцитов, так как не отмечали участков коллагенизации интерстиция на месте некротизированных инсулоцитов, как в группе крыс с аллоксановым диабетом. Кроме того, концентрация цитоплазматических органоидов не отличалась от значений в контроле.

1.4. Структурная организация нефрона при использовании клиноптилолита в условиях аллоксанового диабета

Структура почечного фильтра клубочкового аппарата

В структуре почечного фильтра в условиях аллоксанового диабета отмечали стаз эритроцитов в кровеносных капиллярах сосудистых клубочков. Наблюдали отек подоцитов, слияние цитоподий, набухание органоидов подоцитов, снижение количества прикрепленных и свободных полисомальных рибосом, количества митохондрий и крист митохондрий, наличие вздутий на цитоподиях. Уменьшалось количество цитоподий на 40% за счет их слияния. Возрастала на 83% толщина базальной мембраны за счет ее набухания, при этом снижалась ее электронная плотность (табл.5).

При добавлении клиноптилолита в меньшей степени была выражена отечность подоцитов и базальной мембраны. В подоцитах в большем количестве, чем при аллоксановом диабете без лечения, отмечали все цитоплазматические органоиды.

Количество цитоподий уменьшалось за счет их слияния, но этот процесс был менее выражен и количество цитоподий было меньшим на 24% по сравнению с соответствующим показателем у нелеченых животных. Базальная мембрана была отечной, ее толщина недостоверно возрастала по сравнению со значением в контроле (табл.5).

Структура проксимального отдела нефрона

В условиях аллоксанового диабета отмечали отек эпителиоцитов проксимального отдела нефрона. Клетки отличались гетерогенностью по ультраструктурной организации. В базальной части клеток наблюдали набухшие митохондрий, на 30% снижалась объемная плотность митохондрий. Имела место тенденция к снижению концентрации крист митохондрий и численной плотности данных органоидов (табл.6).

В апикальной части клеток органоиды часто отсутствовали. Наблюдали клетки с опустошенной цитоплазмой. В таких клетках практически отсутствовали органоиды. Цистерны гранулярного, гладкого эндоплазматического ретикулума и комплекса Гольджи были расширены. Объемная плотность гранулярного эндоплазматического ретикулума снижалась на 43% по сравнению с соответствующими показателями в контрольной группе. Снижено было количество свободных и, особенно, прикрепленных рибосом, численная плотность которых была уменьшена на 45%.

Возрастала электронная плотность вторичных лизосом, объемные и численные плотности данных органоидов достоверно не изменялись (табл.6).

При добавлении в рацион животных клиноптилолита в условиях аллоксанового диабета также отмечали отек эпителиоцитов проксимального отдела нефрона. Клетки различались по ультраструктурной организации. Отмечали различия в структуре базальной и апикальной частей клеток. В базальной части клеток наблюдали набухшие митохондрии увеличенного размера и удлиненной формы. Имела место тенденция к снижению концентрации крист митохондрии. Объемная плотность гранулярного эндоплазматического ретикулума снижалась на 37% по сравнению с соответствующим показателем в контрольной группе.

Цистерны гранулярного, гладкого эндоплазматического ретикулума и комплекса Гольджи были расширены. Снижена была численная плотность прикрепленных рибосом на 31%. Объемные и численные плотности вторичных лизосом достоверно не изменялись (табл.6).

В апикальной части клеток органоиды часто отсутствовали. Наблюдали клетки с отсутствием органоидов в центральной части цитоплазмы. Добавление в рацион животных с аллоксановым диабетом клиноптилолита способствовало большей сохранности митохондрии в эпителиоцитах проксимального отдела нефрона. В меньшей степени снижались объемная плотность мембран гранулярного эндоплазматического ретикулума и численная плотность прикрепленных рибосом. Известно, что состояние белоксинтетического аппарата и митохондрии определяют эффективность резорбтивной функции клеток проксимального отдела нефрона.

Следовательно, при использовании клиноптилолита, по-видимому, можно ожидать большую функциональную активность эпителиоцитов, чем в условиях аллоксанового диабета без лечения.

Структура дистального отдела нефрона

Эпителиоциты дистального отдела нефрона животных, страдающих аллоксановым диабетом, также отличались структурной гетерогенностью. Часто наблюдали клетки, в которых ядра были расположены близко к апикальной поверхности и выбухали в просвет канальца. В цитоплазме клеток выделяли участки, в которых отсутствовали органоиды, и участки с большой концентрацией цитоплазматических органоидов. Эпителиоциты имели отечный вид. Отмечали нерегулярность базальной исчерченности. Расширенными были цистерны гранулярного эндоплазматического ретикулума. Объемная плотность мембран гранулярного эндоплазматического ретикулума была снижена на 60%. Численная плотность прикрепленных рибосом уменьшалась на 51%. Отмечали тенденцию к снижению объемной плотности митохондрий (табл.7).

Эпителиоциты дистального отдела нефрона животных с аллоксановым диабетом, которым в рацион добавляли клиноптилолит, различались по ультраструктурной организации. Отмечали клетки с небольшим количеством органоидов, расположенных вдоль цитоплазматической мембраны, при этом центральная часть цитоплазмы оставалась без органоидов. Отмечали нерегулярность базальной исчерченности. Расширенными были цистерны гранулярного эндоплазматического ретикулума. В то же время объемные плотности мембран митохондрий, гранулярного эндоплазматического ретикулума, численная плотность прикрепленных рибосом достоверно не изменялись. Происходило достоверное снижение поверхностной плотности мембран гранулярного эндоплазматического ретикулума, численной плотности прикрепленных рибосом, и менее значительным был отек эпителиоцитов.

При использовании клиноптилолита в условиях аллоксанового диабета отмечали менее выраженные структурные изменения в эпителиоцитах дистального отдела по сравнению с нелечеными животными.

Собирательные трубки

У животных с аллоксановым диабетом отмечали отек эпителиоцитов собирательных трубок, снижение электронной плотности цитоплазмы. Отмечали расширение цистерн гранулярного эндоплазматического ретикулума. На 43% уменьшалась объемная плотность митохондрий и на 45% численная плотность прикрепленных рибосом. Остальные параметры достоверно не отличались от соответствующих показателей в контроле (табл.8).

Меньшие изменения в условиях аллоксанового диабета отмечали в структуре эпителиоцитов собирательных трубок при добавлении в рацион животным клиноптилолита. Происходило снижение количества прикрепленных рибосом, остальные внутриклеточные параметры достоверно не отличались от соответствующих значений в контроле и в группе с аллоксановым диабетом.

Таким образом, при использовании клиноптилолита в составе рациона животных с аллоксановым диабетом в структуре нефрона происходили изменения, свидетельствующие о протективном действии клиноптилолита на структурно-функциональное состояние органа.

2. Влияние клиноптилолита на некоторые показатели крови и уровень протеинурии больных инсулинозависимым сахарным диабетом

Работа была выполнена на добровольцах в возрасте от 18 до 25 лет (сахарный диабет 1 типа) и больных сахарным диабетом 2 типа в возрасте 18-35 лет. Обследуемые больные в течение двух недель получали препарат клиноптилолита в качестве дополнительного терапевтического средства на фоне стандартного лечения. До начала применения препарата бралась контрольная порция крови, в которой определялось содержание глюкозы, инсулина, С-пептида, тироксина, трийодтиронина, альдостерона и кортизола. Полученные результаты сравнивали с клиническими показателями больных, находящихся на стандартном лечении.

Положительное влияние клиноптилолита на морфологическое и функциональное состояние поджелудочной железы крыс в условиях аллоксанового диабета позволяло предполагать возможность благоприятного клинического эффекта при использовании клиноптилолитсодержащих препаратов в лечении больных инсулинзависимым сахарным диабетом. Результаты обследования группы пациентов-добровольцев представлены в таблице 9. Как видно, двухнедельный прием препарата цеосорб (в качестве дополнительного терапевтического средства) не привел к заметным изменениям содержания сахара, инсулина и С-пептида в крови, однако при этом зафиксировано снижение содержания кортизола с 762,2±90,1 до 437,1±62,7 ммоль/л.

Поскольку у больных сахарным диабетом 1 типа активизируется липолиз, что приводит к повышению содержания свободных жирных кислот в крови, то мы проанализировали содержание СТГ и некоторых липопротеидов в крови. При этом мы не обнаружили изменения содержания альфа-холестерина, бета-липопротеидов и триглицеридов, в то время как содержание СТГ и общего холестерина было снижено.

Анализ суточной протеинурии показал заметное ее снижение, причем данный показатель оставался сниженным и через 1,5 недели после отмены препарата клиноптилолита.

Таким образом, 2-недельный прием больными препарата клиноптилолита в качестве дополнительного терапевтического средства вызывал уменьшение активности контринсулярных гормонов, улучшение липидного метаболизма и выраженное снижение протеинурии, что может свидетельствовать об улучшении функций гломерулярного фильтра.

Отсутствие заметного влияния препарата на содержание сахара в крови больных инсулинозависимым сахарным диабетом объясняется, по-видимому, тем, что по сравнению с экспериментальными животными, которые имели, главным образом, функциональное повреждение инсулоцитов (аллоксановая модель сахарного диабета), островковый аппарат поджелудочной железы больных уже находился в стадии необратимых изменений. Кроме этого, больные в течение всего периода обследования получали экзогенный инсулин. Вместе с тем, более глубокое изучение показателей крови больных инсулинзависимым сахарным диабетом показало, что при использовании препарата цеосорб происходит уменьшение активности контринсулярных гормонов и улучшение липидного метаболизма. Особого внимания заслуживает значительное (более чем в 2 раза) снижение протеинурии. Этот факт хорошо согласуется с данными об увеличении количества цитоподий на базальной мембране почечного фильтра (табл. 5).

Таким образом, у человека с сахарным диабетом 1-го типа клиноптилолит снижает содержание в крови контринсулярного гормона (кортизола), триглицеридов, соматотропного гормона, значительно и стабильно снижает протеинурию. Повышение содержания С-пептида в крови указывает на увеличение продукции инсулина. Отсутствие стабильного его повышения в крови говорит о быстром разрушении его в печени. Применение клиноптилолита чрезвычайно важно с точки зрения профилактики почечных осложнений, которые всегда выявляются при тяжелых формах диабета и требуют специальной терапии. Как энтеросорбент клиноптилолит снижает нагрузку на почки, связанную с выведением минеральных веществ. Кроме того, клиноптилолит действует как средство с регенераторным эффектом, восстанавливая функцию почек. Именно поэтому в проведенных исследованиях было обнаружено стойкое снижение протеинурии. Таким образом, клиноптилолит оказывает лечебное действие не только по отношению к островковому аппарату поджелудочной железы, но и по отношению к другим органам, которые страдают при диабете.

Таблица 1.
Влияние клиноптилолита на содержание сахара в крови крыс с аллоксановым диабетом (М±m)Группы
ЖИВОТНЫХДо приема клиноптилолитаПосле приема клиноптилолитаЧ/з 3 суток после инъекции аллоксанаЧ/з 5 суток после инъекц5 сут.8 сут.11 сут.15 сут.1-я группа (контроль)75,0±18,860±0,0290,0± 25,087,5±2190,0± 37,595,0±12,52-я группа (аллоксан + ст. корм)334,4±59,0^*220,0± 34,3^*152,0± 29,4266,4±38^*154,3±16,9^*339,2±33,1^*3-я группа (аллоксан
+ клинопт.)319,4±48,4^*221,9± 37,3^*173,8± 36,6195,0±22^*106,9±4^A223,8±20,5^*AПримечание: ^* - достоверные отличия от контроля;
А - достоверные отличия между 2 и 3 экспериментальными группами.

Таблица 2.
Влияние клиноптилолита на содержание сахара в моче крыс с аллоксановым диабетом (М±m)Группы
ЖИВОТНЫХДо приема клиноптилПосле приема клиноптилолитаЧ/з 5 суток после инъекции аллоксана5 сут.8 сут.11 сут.15 сут.1-я группа (Контроль)595,0±206,3650±0,01800,0
±375,0491,0± 61,31400±125,02-я группа (Аллоксан + ст. корм)11610,0
±2538,5^*3100
±566,4^*6850,0±1370,^*3330,0
±783,2^*9083,3±1693,5^*3-я группа (Аллоксан + клиноптил.)9531,4
±1857,3^*4706,3
±888,2^*4587,5±869,6^*1828,6
±150,3^*6385,7±1062,9^*

Таблица 3
Влияние клиноптилолита на содержание гормонов в крови крыс с аллоксановым диабетом (M±m)Группы животныхИнсулин, мЕ/млКонтроль2,9±0,4Аллоксан + ст. корм1,8±0,2^*Аллоксан + клиноптил.3,6±1,0

Таблица 4
Структурная организация инсулоцитов поджелудочной железы крыс (М±m)Исследованные параметрыКонтрольАллоксановый диабетАллоксановый диабет + клинопт.Митохондрии (Vv)8,3±2,182,3±0,58^*6,5±2,62ГЭР (Vv)5,9±0,622,6±0,68^*6,7±3,31Лизосомы (Vv)0,80±0,210,85±0,230,96±0,21Рибосомы прикрепленные (Nv)27,7±3,1312,0±1,92^*27,1±6,96Рибосомы свободные
полисомальные (Nv)42,8±4,3427,8±7,30^*37,5±14,47Суммарные рибосомы (Nv)70,5±5,2439,8±7,16^*64,6±13,81Комплекс Гольджи (Vv)6,7±1,956,4±3,307,1±2,13Гранулы инсулина (Vv)12,2±1,264,4±2,38^*6,9±2,30^*Примечание: Vv - объемная плотность структур (% от объема цитоплазмы); Nv - численная плотность структур (число в 1 мкм³ объема цитоплазмы). ^* - величины, достоверно отличающиеся от соответствующих показателей у крыс контрольной группы.

Таблица 5
Структура почечного фильтра нефрона (M±m)Исследованные параметрыКонтрольАллоксановый диабетАллоксан + клиноптил.Количество цитоподий на 10 мкм23,85±1,9514,38±2,78^*18,15±2,47Толщина базальной мембраны (мкм)0,30±0,070,55±0,13^*0,45±0,19Примечание: ^* - обозначены величины, достоверно отличающиеся от соответствующих показателей у крыс контрольной группы.

Таблица 6
Ультраструктура эпителиоцитов проксимального отдела нефрона (М±m)Исследованные параметрыКонтрольАллоксанов. диабетАллоксан + клиноптил.Митохондрии (Vv)54,4±7,5138,8±2,69^*58,3±4,32Митохондрии Sv
внутренняя мембрана Sv
наружная мембрана4,28±1,163,0±0,742,74±0,73Митохондрии (NA)34,1±3,8127,0±3,5420,5±4,19ГЭР (Vv)23,7±2,5913,7±1,61^*15,0±2,22^*A3P(Vv)3,б3±1,198,97±2,622,74±1,02Рибосомы прикрепленные (NA)28,5±5,1615,7±4,37^*19,6±3,32^*Рибосомы свободные полисомальные (NA)22,5±3,1415,8±3,1820,4±3,39Комплекс Гольджи (Vv)1,87±1,542,50±0,270,94±1,04Лизосомы (Vv)3,10±2,803,0±2,315,80±0,46Лизосомы (NA)1,31±0,992,47±1,232,73±1,36Примечание: Vv - объемная плотность структур (% от объема цитоплазмы); NA - численная плотность структур (число в тестовой площади). ^* - величины, достоверно отличающиеся от соответствующих показателей у крыс контрольной группы.

Таблица 7
Ультраструктура эпителиоцитов дистального отдела нефрона (M±m)Исследованные параметрыКонтрольАллоксановый диабетАллоксан + клиноптил.Митохондрии (Vv)39,5±4,4024,6±5,1030,1±2,96Митохондрии Sv
внутренняя мембрана Sv
наружная мембрана2,32±0,342,32±0,442,26±0,17Митохондрии (NA)23,9±2,3919,4±4,1422,4±2,12ГЭР (Vv)18,2±2,517,5±1,53^*16,9±2,41A3P(Vv)4,81±1,712,0±1,031,96±1,09Рибосомы прикрепленные (NA)28,9±4,4314,1±3,30^*23,1±2,37Рибосомы свободные полисомальные (NA)25,5±5,3321,5±4,4427,7±3,68Комплекс Гольджи (Vv)2,58±1,972,55±0,232,04±0,99Лизосомы (Vv)1,94±1,641,23±0,962,08±0,87Лизосомы (NA)1,38±0,8б1,31±0,822,55±1,09Примечание: обозначения аналогичные табл.6.

Таблица 8
Ультраструктура эпителиоцитов собирательных трубок нефрона
(М±m)Исследованные параметрыКонтрольАллоксановый диабетАллоксан + клиноптил.Митохондрии (Vv)35,0±4,9120,0±2,32^*45,0±5,20Митохондрии Sv
внутренняя мембрана Sv
наружная мембрана2,12±0,242,16±0,452,44±0,53Митохондрии (NA)4,84±1,953,85±0,986,05±1,17ГЭР (Vv)12,6±2,7011,0±4,109,30±2,61Рибосомы прикрепленные (NA)21,7±3,5212,0±2,17^*15,7±2,46^*Рибосомы свободные полисомальные (NA)18,9±2,7921,2±3,6216,9±2,58Лизосомы (Vv)2,50±0,222,10±1,381,53±0,29Лизосомы (NA)1,05±0,120,63±0,491,35±0,49Примечание: обозначения аналогичны приведенным в табл.6

Таблица 9
Влияние природных клиноптилолита на показатели крови и уровень протеинурии больных сахарным диабетом I типаПоказательВремя исследования До назначения клиноптилолитаЧерез 2 недели (на фоне приема)Через 1,5 недели после отменыОбщий холестерин
(ммоль/л)6,1±0,44,6±0,2^*5,8±0,6Альфа-холестерин (ммоль/л)1,4±0,21,6±0,11,6±0,1Триглицериды (ммоль/л)1,2±0,10,8±0,2^*0,9±0,2Бета-липопротеиды (ед.)34,7±1,936,8±2,735,3±1,9Сахар крови (ммоль/л)7,1±0,87,5±0,88,1±0,9Инсулин (мкг/мл)15,6±2,018,3±2,218,1±2,5С-пептид (пмоль/л)102,1±42,5161,9±40,074,8±39,7Кортизол (ммоль/л)762,2±90,1437,1±62,7^*579,5±83,1СТГ (Е/мл)13,4±0,910,1±0,8^*12,9±1,1Суточная протеинурия
(мг/л)37,0±9,016,0±3,8^*14,6±6,2^*

Предложено применение клиноптилолита цеолита Шивыртуйского месторождения в качестве средства для лечения сахарного диабета. Средство оказывает гипохолестеринемическое действие, а также стимулирует регенерацию эндокринной части поджелудочной железы. Дополнительно средство усиливает регенераторные процессы в почках, печени, кишечнике; за счет связывания и выведения низкомолекулярных токсических веществ, таких как мочевина, мочевая кислота, креатинин и др., уменьшает их токсическое действие на организм, частично компенсируя почечную недостаточность; стимулирует репаративную регенерацию в органах кроветворении. 9 табл.

Применение клиноптилолита цеолита Шивыртуйского месторождения в качестве средства для лечения сахарного диабета.