ВАКЦИНА ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ ЦЕНУРОЗА И ТОНКОШЕЙНОГО ЦИСТИЦЕРКОЗА СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ Российский патент 2008 года по МПК A61K39/00 

Изобретение относится к области ветеринарной паразитологии.

Проблема ценуроза в животноводческих хозяйствах России и многих других стран не потеряла актуальность и до настоящего времени. Ценурозные инвазии - это заболевания овец, коз, крупного рогатого скота, реже - других копытных и грызунов. Почти все заболевшие ценурозом животные погибают, а вынужденно прирезанные дают недоброкачественное мясо. Поэтому основной задачей является резкое снижение этой инвазии, а затем - полная ее ликвидация-девастация путем создания в природе таких условий, при которых возбудители этой инвазии не могли бы существовать. Основным методом борьбы с ценурозами животных является их иммунизация. Результаты иммунизации доказывают, что уже в первый год ее применения количество заболевших животных уменьшается в 15-20 раз. На второй год ее применения количество заболевших животных уменьшается до 0,5-0,01% от общего поголовья молодняка, а в отдельных случаях и до полного отсутствия больных животных. Третий год применения иммунизации новорожденнных животных обычно характеризуется отсутствием инвазированных среди них. Инвазированные же мультицептозом собаки, являющиеся основным источником заражения, через 6-7 месяцев после заражения самоосвобождаются от возбудителя. Повторного же заражения собак мультицептозом не происходит в связи с отсутствием в хозяйствах ценурозных животных.

Таким образом, использование противоценурозной вакцины в животноводческих хозяйствах, расположенных в разных климатических зонах, с разными приемами ведения хозяйства и неодинаковой эпизоотической ситуацией по ценурозу, является мощным приемом борьбы и профилактики данной инвазии.

Известна вакцина для профилактики лярвальных тениидозов сельскохозяйственных животных, содержащая двухсуточную культуру лярвоцист Multiceps multiceps, питательную среду на основе среды 199 и сыворотки крови, бензилпенициллина калиевую соль, стрептомицина сульфат, мертиолят и гидроокись алюминия (см., например, SU 1237214 А1, 15.06.1986).

Известна вакцина для профилактики цистицеркоза тенуикольного у овец, содержащая двухсуточную культуру онкосфер Taenia hydatigena, питательную среду на основе среды 199 и сыворотки крови, бензилпенициллина калиевую соль, стрептомицина сульфат, мертиолят и гидроокись алюминия (см., например, RU 94028803 А, 20.10.1996).

Недостатком известных вакцин является их узкий спектр действия, невысокая иммуногенность и короткий срок хранения.

Известна вакцина для профилактики цистицеркоза сельскохозяйственных животных, полученная методом генной инженерии, основанная на двух видах белка, обнаруженных в онкосферах. Две вакцинации, проведенные с 30-дневным интервалом, дают иммунитет, длящийся несколько месяцев. Эффективность вакцины 99,5-100% (см., например, htt://elementy.ru/news/164614, 13.07.2005).

Однако способ получения данной вакцины сложен, а иммуногенность ее невысокая.

Вакцины, эффективные как против ценуроза, так и против тонкошейного цистицеркоза сельскохозяйственных животных, из уровня техники неизвестны.

Задачей настоящего изобретения является разработка вакцины, эффективной как против ценуроза, так и против тонкошейного цистицеркоза сельскохозяйственных животных, безвредной, обладающей высокой иммуногенностью и длительным сроком хранения.

Поставленная задача решается за счет того, что согласно изобретению вакцина для профилактики ценуроза и тонкошейного цистицеркоза сельскохозяйственных животных содержит двухсуточную культуру лярвоцист Multiceps multiceps и двухсуточную культуру лярвоцист Taenia hydatigena, среду 199, сыворотку крови крупного рогатого скота, бензилпенициллина калиевую соль, стрептомицина сульфат, формалин и гидроокись алюминия при следующем соотношении ингредиентов (в об.%):

двухсуточная культура лярвоцист

Multiceps multiceps1,1·10³-1,2·10³ экз./ мл

двухсуточная культура

лярвоцист Taenia hydatigena1,1·10³-1,2·10³ экз./млсыворотка крови крупного рогатого скота8,0-10,0бензилпенициллина калиевая соль0,018-0,02стрептомицина сульфат0,029-0,03формалин8,0-10,0гидроокись алюминия8,0-10,0среда 199остальное

Технический результат, достигаемый изобретением, заключается в том, что полученная вакцина безвредна, обладает длительным сроком хранения, высокой иммуногенностью и предохраняет сельскохозяйственных животных от заражения как ценурозом, так и тонкошейным цистицеркозом.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Получение вакцины

Собак инвазируют личинками цепней Multiceps multiceps и Taenia hydatigena (далее - соответственно М. multiceps и Т. hydatigena). Затем проводят дегельминтизацию экспериментально инвазированных собак. Отмывают М. multiceps и Т. hydatigena в водопроводной воде. Отделяют зрелые членики М. multiceps и Т. hydatigena. Разрушают зрелые членики с последующим отмыванием яиц в водопроводной воде. Яйца М. multiceps и Т. hydatigena раздельно последовательно выдерживают в желудочном соке в течение 1 часа, а затем в кишечном соке в течение 15 минут при температуре 37°С. Состав желудочного сока (рН 1,5-2,0): пепсин (медицинский) - 1,0 г, хлористоводородная кислота - 1,0 мл, вода дистиллированнная - до 100,0 мл. Состав кишечного сока (рН 7,1-7,3): панкреатин - 1,0 г, желчь крупного рогатого скота - 10,0 мл, вода дистиллированнная - до 100,0 мл.

Освободившиеся от яйцевых оболочек онкосферы отмывают от остатков кишечного сока средой культивирования, после чего онкосферы переносят в свежую порцию среды культивирования и помещают в термостат на 48 часов при температуре 37°С. В процессе 48-часового культивирования онкосферы развиваются в лярвоцисты. Среду культивирования готовят из (об.%): сыворотки крови крупного рогатого скота - 8,0, бензилпенициллина калиевой соли - 0,018, стрептомицина сульфата - 0,029, среды 199 - остальное.

Количество лярвоцист подсчитывают для каждого вида возбудителей раздельно. Доводят количество лярвоцист М. Multiceps до 1,1·10³ экз./мл и Т. hydatigena до 1,1·10³ экз./мл с учетом последующего добавления формалина (8,0 об.%) и гидроокиси алюминия (8,0 об.%).

Подготовленные по описанной методике культуры с лярвоцистами смешивают в равных объемах. Готовую вакцину при постоянном перемешивании разливают во флаконы емкостью 200 мл, контролируют на стерильность и безвредность.

Пример 2

Вакцину готовят согласно примеру 1, но отмытые яйца М. multiceps и Т. hydatigena после разрушения зрелых члеников раздельно последовательно выдерживают в желудочном соке в течение 1,5 часов, а в кишечном соке - в течение 20 минут при температуре 38°С. Отмытые от остатков кишечного сока онкосферы помещают в термостат на 48 часов при температуре 38°С. Среда культивирования содержит (об.%): сыворотка крови крупного рогатого скота - 10,0, бензилпенициллина калиевая соль - 0,02, стрептомицина сульфат - 0,03, среда 199 - остальное. Доводят количество лярвоцист М. Multiceps до 1,2·10³ экз./мл и Т. hydatigena до 1,2·10³ экз./мл с учетом последующего добавления формалина (10,0 об.%) и гидроокиси алюминия (10,0 об.%).

Подготовленные по описанной методике культуры с лярвоцистами смешивают в равных объемах. Готовую вакцину при постоянном перемешивании разливают во флаконы емкостью 250 мл, контролируют на стерильность и безвредность.

Пример 3

Иммунизации вакциной были подвергнуты ягнята (10 гол.) и телята (10 гол.). Молодняк сельскохозяйственных животных иммунизируют не ранее 1,5-месячного возраста, дважды с интервалом 10-12 суток. Вакцину вводят внутримышечно с внутренней стороны бедра в дозе 1 мл на голову.

Напряженность иммунитета проверяют экспериментальным заражением иммунизированных животных.

Иммуногенность вакцины контролируют реакцией латекс-агглютинации (РЛА) по титру антител в сыворотке крови экспериментальных животных. Титр антител считают удовлетворительным при положительных результатах РЛА при разведении сыворотки 1:32; 1:64.

Результаты исследования показали, что вакцина сохраняет иммуногенность не менее 1,5 лет при температуре хранения 6-10°С.

Продолжительность иммунитета у иммунизированных животных составляет 1 год и более.

Таким образом, полученная вакцина эффективна как против ценуроза, так и против тонкошейного цистицеркоза сельскохозяйственных животных, безвредна, обладает высокой иммуногенностью и длительным сроком хранения.

Изобретение относится к области ветеринарной паразитологии. Вакцина содержит двухсуточную культуру лярвоцист Multiceps multiceps, двухсуточную культуру лярвоцист Taenia hydatigena, среду 199, сыворотку крови крупного рогатого скота, бензилпенициллина калиевую соль, стрептомицина сульфат, формалин и гидроокись алюминия при следующем соотношении ингредиентов (в об.%): двухсуточная культура лярвоцист Multiceps multiceps - 1,1·10³-1,2·10³ экз./мл, двухсуточная культура лярвоцист Taenia hydatigena - 1,1·10³-1,2·10³ экз./мл, сыворотка крови крупного рогатого скота 8,0-10,0, бензилпенициллина калиевая соль 0,018-0,02, стрептомицина сульфат - 0,029-0,03, формалин - 8,0-10,0, гидроокись алюминия - 8,0-10,0, среда 199 остальное. Вакцина эффективна против ценуроза и тонкошейного цистицеркоза сельскохозяйственных животных, безвредна, обладает высокой иммуногенностью и длительным сроком хранения.

Вакцина для профилактики ценуроза и тонкошейного цистицеркоза сельскохозяйственных животных, содержащая двухсуточную культуру лярвоцист Multiceps multiceps, двухсуточную культуру лярвоцист Taenia hydatigena, среду 199, сыворотку крови крупного рогатого скота, бензилпенициллина калиевую соль, стрептомицина сульфат, формалин и гидроокись алюминия при следующем соотношении ингредиентов, в об.%:

двухсуточная культура лярвоцист Multiceps multiceps1,1·10³-1,2·10³ экз./млдвухсуточная культура лярвоцист Taenia hydatigena1,1·10³-1,2·10³ экз./млсыворотка крови крупного рогатого скота8,0-10,0бензилпенициллина калиевая соль0,018-0,02стрептомицина сульфат0,029-0,03формалин8,0-10,0гидроокись алюминия8,0-10,0среда 199остальное.