Изобретение относится к использованию химических соединений в области медицины и может быть использовано как средство при изготовлении фармакологических препаратов для улучшения когнитивных функций и памяти, не связанных с разрушением нейронов.
Нарушение когнитивных функций и снижение памяти является следствием как естественных возрастных изменений (Levy R. Aging-associated cognitive decline. Int. Psychogeriatr. 1994. V.6. P.63-68), так возникает и в результате различных патологий центральной нервной системы, как острых (травмы - физические и психические, отравления, гипоксия, стрессы, и т.п.), так и хронических - нейродегенеративные заболевания, депрессия, алкоголизм, нейроинфекции. В последнее время выделяют также особый вид снижения когнитивных функций: так называемое мягкое когнитивное снижение, наблюдаемое в пожилом или старческом возрасте, которое характеризуется более выраженным ухудшением когнитивных функций, чем это характерно для просто возрастного снижения. Этиология этого заболевания неизвестна, и, по-видимому, не имеет прямого отношения к нейродегенеративным процессам в мозге (Гаврилова С.И. Концепция мягкого когнитивного снижения. В кн. Болезнь Альцгеймера и старение. Матер. III Рос. Конф. М., Пульс. С.9-20). Кроме того, в процессе жизнедеятельности человека часто возникают ситуации, которые требуют значительной активации его когнитивных функций, и необходимость запомнить большой объем материала.
Решением проблемы улучшения памяти и когнитивных функций человека в мире занимаются уже достаточное количество лет, однако механизм их в общем случае до сих пор установить не удалось. В медицинской практике имеется некоторое количество препаратов, которые способны как-то улучшать память. К ним в первую очередь относится сравнительно недавно открытый класс так называемых ноотропов-веществ, которые способны улучшать работу мозга, обладают антигипоксическими и в целом защитными свойствами, и в том числе способствуют восстановлению нарушенных мыслительных функций и памяти (М.Д.Машковский. Лекарственные средства, т.1. с.108-116, 1998. Харьков). Они широко используются при таких патологических состояниях как: травмы мозга, инсульты и хроническая цереброваскулярная недостаточность, постгипоксические энцефалопатии, нейроинфекции, поражения мозга нейродегенеративного характера, хронический алкоголизм, задержка развития у детей. Однако ноотропные препараты, применяемые в настоящее время, бывают недостаточно эффективны при некоторых видах патологий или обладают высокой токсичностью (Воронина Т.А.Эксперим. Клинич. Фармакол. 66(2), 10-14, 2003). Например, широко используемый в клинической практике препарат ноотропил (пирацетам) оказывал стимулирующее влияние на обучение и память в тестах условной реакции активного и пассивного избегания только в дозах 200-500 мг/кг (в зависимости от теста). (Островская Р.У., Гудашева Т.А., Воронина Т.А., Середенин С.Б. Эксперим. и клинич фармакология, 65(5), 66-72, 2002). Практически отсутствуют вещества, которые бы оказывали быстрое - в течение часа - специфическое активирующее воздействие на когнитивные функции и память. Для проявления стимулирующих свойств того же пирацетама требуется его применение в течение нескольких недель или применение огромных - сотни мг/кг - доз.
В последние годы в мире наблюдается значительный интерес к поиску новых препаратов и средств, направленных на решение этой проблемы.
Задачей, на решение которой направлено предлагаемое изобретение, является расширение арсенала средств, которые могут быть использованы в качестве новых эффективных стимуляторов когнитивных функций и памяти, не связанных с разрушением нейронов.
Поставленная задача решается применением гидрированных пиридо([4,3-b]) индолов формулы (1) или формулы (2) в качестве средства для улучшения когнитивных функций и памяти, не связанных с разрушением нейронов.
В случае применения соединений формулы (1) R1 выбирают из группы, содержащей СН3-, СН3СН2- или PhCH2;
R2 выбирают из группы, содержащей Н, PhCH2 или 6-СН3-3-Py-(СН2)2-;
R3 выбирают из группы, содержащей Н, СН3- или Br-;
Указанные соединения могут представлять собой соли с фармацевтически приемлемыми кислотами.
Одним из соединений, которое можно применять в качестве средства для улучшения когнитивных функций и памяти, не связанных с разрушением нейронов, может быть соединение формулы (1), в котором R1 соответствует СН3-, R2 - Н-, a R3-СН3-.
В случае применения соединений формулы (2) R1 выбирают из группы, содержащей СН3-, СН3CH2- или PhCH2-.
R2 выбирают из группы, содержащей Н-, PhCH2- или 6-СН3-3-Py-(СН2)2-, а
R3 выбирают из группы, содержащей Н-, СН3- или Br-;
Указанные соединения могут представлять собой соли с фармацевтически приемлемыми кислотами.
Одним из соединений, которое можно применять в качестве средства для улучшения когнитивных функций и памяти, может быть соединение формулы (2), в котором R1 соответствует СН3СН2- или PhCH2-, R2 соответствует Н-, а R3- Н-.
Или соединение, где R1 соответствует СН3-, R2 соответствует PhCH2-, а R3- СН3-.
Или соединение, где R1 соответствует СН3-, R2 соответствует 6-СН3-3-Py-(СН2)2-, а R3-Н-.
Или соединение, где R1 соответствует СН3-, R2 соответствует 6-СН3-3-Py-(СН2)2-, а R3-СН3-.
Или соединение, где R1 соответствует СН3-, R2 соответствует Н-, а R3- Н- или СН3-.
Или соединение, где R1 соответствует СН3-, R2 соответствует Н-, а R3-Br-.
Любое из выше указанных соединений может применяться в качестве средства для улучшения когнитивных функций и памяти, не связанных с разрушением нейронов.
Соединения формулы (1) и (2) являются известными соединениями, широко применяемыми в фармакологической практике, и включают следующие конкретные соединения:
1) цис (±)2,8-диметил-2,3,4,4а,5,9b-гексагидро-1Н-пиридо/4,3-b/индол и его дигидрохлорид;
2) 2-этил-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-пиридо/4,3-b/индол;
3) 2-бензил-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-пиридо/4,3-b/индол;
4) 2,8-диметил-5-бензил-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-пиридо/4,3-b/индол и его гидрохлорид;
5) 2-метил-5-/2-(6-метил-3-пиридил)-этил/-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-пиридо/4,3-b/индол и его моногидрат сесквисульфата;
6) 2,8-диметил-5-/2-(6-метил-3-пиридил)-этил/-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-пиридо/4,3-b/индол и его дигидрохлорид (димебон).
7) 2-метил-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-пиридо/4,3-b/индол;
8) 2,8-диметил-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-пиридо/4,3-b/индол и его метилиодид;
9) 2-метил-8-бром-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-пиридо/4,3-b/индол и его гидрохлорид.
Были проведены обширные исследования ряда известных соединений, представляющих производные тетра- и гексагидро-1Н-пиридо([4,3-b] индола и проявляющих широкий спектр биологической активности. В ряду 2,3,4,5-тетрагидро-1H-пиридо[4,3-b]индолов были обнаружены следующие виды активности: антигистаминная (OS-DE N1813229 от 6 декабря 1968, N1952800 от 20 октября 1969), центрально-депрессантная, противовоспалительная (USP N3718657 от 13 декабря 1970), нейролептическая (Herbert C.A., Plattner S.S, Wehch W.N., Mol. Pharm., 1980, v.17, N1, p38-42) и другие. Производные 2,3,4,4а,5,9b-гексагидро-1Н-пиридо[4,3-b]индола проявляют психотропную (Welch W.H, Herbert С A., Weissman А, Кое КВ., J. Med. Chem, 1986, vol.29, N10, p.2093-2099), антиагрессивную, антиаритмическую и другие виды активности.
На основе производных тетра- и гексагидро-1Н-пиридо[4,3-b]индола выпускается несколько лекарственных препаратов: диазолин (mebhydroline), димебон, дорастин, карбидин (дикарбин), стобадин, гевотролин. Диазолин (2-метил-5-бензил-2,3,4,5-тетра-гидро-1Н-пиридо[4,3-b]индол)дигидрохлорид (Клюев М.А. Лекарственные средства, применяемые в медицинской практике СССР - М.: Медицина 1991, стр.512) и димебон(дигидрохлорид 2,8-диметил-5-(2-(6-метил-пиридил-3)этил)-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-пиридо[4,3-b]индола) (Машковский М.Д. Лекарственные средства В 2 ч., ч.1, 12-е изд. - М.: Медицина, 1993, с.383), а также его близкий аналог дорастин (2-метил-8-хлор-5-(2-(6-метил-3-пиридил)этил)-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-пиридо[4,3-]индол)дигидрохлорид (USAN and USP dictionary of drugs names (United States Adopted Names 1961-1988, current U.S. Pharmacopeia and National Formular for Drygs, and other nonproprietary drug names), 1989, 26th Edition, p.196) известны как антигистаминные препараты. Карбидин (дикарбин) (дигидрохлорид цис(±)-2,8-диметил-2,3,4,4а,5,9b-гексагидро-1Н-пиридо[4,3-b]индола) является отечественным нейролептиком с антидепрессантным эффектом (Яхонтов Л.Н., Глушков Р.Г. Синтетические лекарственные средства / Под ред. А.Г.Натрадзе - М: Медицина, 1983, с.234-237), а его (-)-изомер, стобадин известен как антиаритмическое средство (Kitlova М., Gibela P., Drimal J., Bratisi. Lek. Listy, 1985, V.84, N5, p.542-546); гевотролин (дигидрохлорид 8-фтор-2-(3-3-пиридил)пропил)-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-пиридо[4,3-b]индола) является антипсихотическим и анксиолитическим средством (Abou-Gharbi М., Patel U.R., Webb M.B., Moyer J.A., Ardnee T.H., J. Med. Chem., 1987, v.30, p.1818-1823).
Ранее также было показано, что димебон проявляет ярко выраженные свойства антагонистов NMDA-рецепторов, позволяющие восстанавливать когнитивные функции и память у животных с моделью болезни Альцгеймера, вызванной хроническим введением холинотоксина AF64A. Крысы с моделью БА, у которых предварительно были поражены холинергические нейроны, после приема димебона в эксперименте условного рефлекса активного избегания показывали значительно лучшие результаты, чем контрольные животные, которые димебон не получали (Bachurin, S., Bukatina, E., Lermontova, N., et al Ann. N. Y Acad Sci 2001, v.939, P.425-435). Кроме того, димебон оказывает положительное влияние на больных болезнью Альцгеймера. Современные представления о механизмах патогенеза болезни Альцгеймера (БА) говорят о существовании многочисленных нейротических бляшек на поверхности ряда областей мозга. Находящийся в них белок β-амилоид оказывает нейротоксическое действие и вызывает гибель в первую очередь холинергических нейронов. (Поэтому холинергические препараты ингибиторы холинестераз - арисепт, физостигмин и другие широко применяются для лечения БА). С гибелью нейронов связывают ухудшение памяти и когнитивных функций и при других нейродегенеративных заболеваниях (Alzheimer Disease and Related Disorders 1999 Willey. Eds. Iqbal et al., 1-819). В пилотных клинических исследованиях было показано, что применение димебона в дозе 20 мг три раза в день оказывает улучшение состояния больных БА, имеющих отчетливое нарушение памяти, т.е. восстановление памяти и когнитивных функций (патент РФ №2106864).
В наших исследованиях неожиданно было обнаружено, что применение гидрированных пиридо([4,3-b])индолов формулы (1) или формулы (2) вызывает значительное улучшение памяти и когнитивных функций не только при наличии нейродегенеративных заболеваний, но и у животных, у которых не производилось разрушение нейронов, то есть не связано с наличием у него известных ранее свойств антагонистов NMDA-рецепторов.
Ухудшение памяти и когнитивных функций, наблюдаемые в пожилом и старческом возрасте, при травмах мозга, депрессии, алкоголизме, нейроинфекциях, стрессах, переутомлении, мягком когнитивном снижении, и т.п. не связано с гибелью нейронов (и, в частности, холинергических нейронов), а предполагает другие механизмы. К ним относятся: ухудшение снабжения нейронов мозга кислородом и глюкозой, нарушение нейрональных связей, в том числе между корой и подкорковыми структурами, действие нейротоксинов, нарушение синтеза белков и нуклеиновых кислот, затруднение появления новых нейронов в мозге (Роуз С. Устройство памяти. М.: Мир, 1995., Schacter D.L. Searching for Memory: The Brain, the Mind and the Past. Basic Books, 1996., Edelman G. The Remembered Present: A Biological Theory of Consciousness. Basic Books, 1989).
Техническим результатом, который может быть получен при осуществлении изобретения, является улучшение когнитивных функций и памяти в пожилом и старческом возрасте, мягком когнитивном снижении, при травмах мозга, депрессии, алкоголизме, нейроинфекциях, стрессах, переутомлении, задержке развития у детей, т.е. патологий, не связанных с гибелью нейронов (и, в частности, холинергических нейронов).
На фиг.1 в виде диаграммы представлено влияние различных доз димебона на продолжительность обследования объекта в известной и новой локализации.
На фиг.2 представлено влияние различных доз мемантина на продолжительность обследования объекта в известной и новой локализации.
Возможность осуществления изобретения с реализацией заявляемого назначения подтверждается, но не исчерпывается следующими сведениями.
Пример. 1. Поведенческий эксперимент с целью выявления действия представителя гидрированных пиридо([4,3-b]) индолов формулы (1) или формулы (2) - димебона - на когнитивные функции и память у экспериментальных животных.
Методика
Для исследования действия веществ на память животных, у которых предварительно не производилось разрушение нейронов, нами был использован тест узнавания новой локализации известного объекта ("Object location memory test" (В. Kolb, К.Buhrmann, R.McDonald and R.Sutherland, Cereb. Cortex 6 (1994), pp.664-680. D.Gaffan, Eur. J.Neurosci. 4 (1992), pp.381-388., Т.Steckler, W.H.I.M. Drinkenburgh, A.Sahgal and J.P.Aggleton, Prog. Neurobiol., 54 (1998), pp.289-311).
Эксперименты проводили на мышах-самцах 3 - 5-месячного возраста линии C57BL/6 массой 20-24 г. Животных содержали в виварии по 5 штук в клетке при световом режиме 12/12 ч со световой частью с 8-ми до 20-ти ч при свободном доступе к воде и пище. Камера наблюдения была изготовлена из непрозрачного органического стекла белого цвета размером 48×38×30 см. В качестве объектов обследования использовали стеклянные флаконы коричневого цвета диаметром 2,7 см и высотой 5,5 см. За 2-3 мин до помещения животного камеру и объекты обследования протирали 85%-ным спиртом. Животных всегда помещали в центр камеры.
Димебон растворяли в дистиллированной воде и вводили внутрижелудочно за 1 час до тренировки в объеме 0,05 мл на 10 г веса животного. Контрольным животным вводили соответствующий объем растворителя.
Порядок проведения поведенческого эксперимента.
В первый день мышей приносили в исследовательскую комнату и акклиматизировали в течение 20-30 мин. После этого каждое животное помещали на 10 мин в пустую, предварительно обработанную спиртом, поведенческую камеру для ознакомления. Затем животное убирали в клетку и уносили в виварий.
На следующий день этих же мышей приносили в исследовательскую комнату, 20-30 мин акклиматизировали и затем вводили внутрижелудочно раствор димебона. Через 1 ч после введения вещества животное помещали поведенческую камеру, на дно которой ставили по диагонали на расстоянии 14,5 см от углов два одинаковых объекта (стеклянные флаконы) для узнавания. Длительность тренировки каждого животного 20 мин. Через 20 мин его убирали в клетку и возвращали в виварий.
Тестирование проводили через 48 ч после тренировки. Для этого после акклиматизации животное помещали на 1 мин в камеру для повторного ознакомления. Через минуту его убирали и на дно камеры ставили один объект в известной для животного локализации, а другой - в новой. С помощью двух электронных секундомеров регистрировали с точностью до 0,1 с, время обследования отдельно каждого объекта в течение 10 мин. За поведением животных наблюдали через зеркало. В качестве положительной реакции обследования объекта считали целенаправленное приближение носа животного к объекту на расстояние 2 см или непосредственное касание объекта носом.
В связи с тем, что в данном тесте наблюдаются значительные колебания времени обследования объектов между животными, то мы вычисляли процент времени обследования для каждой мыши по формуле tНл/(tИл+tНл)×100. За 100% принимали общее время, затраченное на обследование двух объектов. Дальнейшую обработку результатов проводили по методу Стьюдента с использованием t-теста.
Результаты
В результате проведенных экспериментов установлено, что при тестировании через 48 ч после тренировки в контрольной группе мыши обследуют объект в известной локализации 46,9±7,9% времени и в новой локализации 53,1±7,9% (Р=0,3), т.е. они воспринимают объекты в обоих местах как новые. Однако животные, которым вводили димебон в дозе 0,01 мг/кг, затрачивали на обследование объекта в новой локализации 57,5±4,8% времени, а в известной - 42,5±4,8% (Р=0,06). Максимально выраженный стимулирующий эффект наблюдали после введения димебона в дозе 0,1 мг/кг (фиг.1). В этой группе мыши обследовали объект в новой локализации 62,4±6,5% времени, а в известной -37,6% (Р=0,002). При увеличении дозы до 0,25 мг/кг активирующее влияние его на память исчезает.
В отличие от димебона препарат сравнения мемантин, который в настоящее время широко используется в клинической практике для лечения нарушений мнестических и когнитивных функций различного генеза, оказывал максимально выраженное активирующее действие на память в дозе 2,5 мг/кг. Показано, что в этой группе мыши затрачивали на обследование объекта в новой локализации 59,4±6,9% времени, а в известной - 40,6±6,9% (Р=0,003) (фиг.2).
На основании представленных результатов можно сделать вывод, что по стимулирующему действию на память животных димебон в 25-250 раз активнее мемантина и в 2000-5000 раз активнее ноотропила (пирацетама).
При исследовании острой токсичности димебона установлено, что ЛД50 для мышей при внутрижелудочном введении составляет более 1000 мг/кг. Исследованием острой токсичности мемантина установлено, что после внутрижелудочного введения его в дозе 300 мг/кг уже наблюдается гибель животных. ЛД50 для мышей при внутрижелудочном введении пирацетама составляет 8000 мг/кг.
Следующим аспектом изобретения является фармакологическое средство для улучшения когнитивных функций и памяти, не связанных с разрушением нейронов, содержащее активное начало и фармацевтически приемлемый носитель, в котором в качестве активного начала содержится эффективное количество гидрированного пиридо(4,3-b) индола формулы (1) или формулы (2).
Фармакологическое средство согласно изобретению приготавливается с помощью общепринятых в данной области техники приемов и включает фармакологически эффективное количество активного агента, представляющего соединения формулы (1) и (2) (называемый далее "активное начало"), составляющее обычно от 1 до 20 вес.%, или от 1 мг до 20 мг в дозируемой форме, которая представляет собой таблетку, гранулу, сфероид, шарик, пилюлю или капсулу, в сочетании с одной или более фармацевтически приемлемыми вспомогательными добавками, такими как разбавители, связующие, разрыхляющие агенты, адсорбенты, ароматизирующие вещества, вкусовые агенты. В соответствии с известными методами фармацевтические композиции могут быть представлены различными жидкими или твердыми формами.
Примеры твердых лекарственных форм включают, например, таблетки, пилюли, желатиновые капсулы и др.
Композиции, как правило, получают с помощью стандартных процедур, предусматривающих смешение активного начала с жидким или тонко измельченным твердым носителем.
Композиции согласно изобретению в форме таблеток содержат от 1 до 20% активного начала и наполнитель(и) или носитель(и). В качестве таковых для таблеток применяются: а) разбавители: свекловичный сахар, лактоза, глюкоза, натрия хлорид, сорбит, маннит, гликоль, фосфат кальция двузамещенный; б) связующие вещества: магниевый силикат алюминия, крахмальная паста, желатин, трагакант, метилцеллюлоза, карбоксиметилцеллюлоза и поливинилпирролидон; в) разрыхлители: декстроза, агар, альгиновая кислота или ее соли, крахмал, твин.
ПРИМЕР 1
100 мг таблетки, содержащие по 5 мг димебона
Таблетка может быть сформирована посредством прессовки или формовки активного ингредиента с одним или более дополнительными ингредиентами.
Получение прессованных таблеток осуществляется на специальной установке. Активный ингредиент в свободной форме, такой как порошок или гранулы, в количестве 50 г (количество вещества, необходимое для получения 10000 таблеток) перемешивается со связующим веществом - трагакантом (200 г), смешивается с разбавителем - лактозой (550 г), в смесь добавляется разрыхляющее вещество - альгиновая кислота (200 г) и отдушка - лимонная кислота (50 г).
Для желатиновых капсул используются дополнительно красители и стабилизаторы. В качестве красителей используются: тетразин, индиго; в качестве стабилизаторов могут быть представлены: натрия метабисульфит, натрия бензоат. Предлагаемые желатиновые капсулы содержат от 1 до 20% активного ингредиента.
ПРИМЕР 2
500 мг капсулы, содержащие по 20 мг димебона
200 г Активного вещества (димебона) (количество, необходимое для приготовления 10000 капсул), тонко измельчают и смешивают в смесителе с глицерином (1000 г) и сахарным сиропом (3190 г). После перемешивания в смесь добавляют мятное масло (400 г), бензоат натрия (100 г), аскорбиновую кислоту (50 г) и тетразин (50 г). Желатиновые капсулы приготовляют капельным методом. Этот метод позволяет осуществлять одновременное капельное дозирование раствора лекарственного вещества и нагретой желатиновой массы (900 г желатина) в охлажденное вазелиновое масло. В результате образуются бесшовные шарообразные желатиновые капсулы, заполненные лекарственной смесью, полностью готовые к употреблению, содержащие 20 мг активного начала.
Согласно изобретению способ улучшения когнитивных функций и памяти, не связанных с разрушением нейронов, заключается во введении пациенту фармакологического средства, содержащего эффективное количество гидрированных пиридо(4,3-b) индолов формулы (1) или формулы (2), в дозе 1-150 мг по крайней мере один раз в день в течение периода, необходимого для достижения терапевтического эффекта.
Назначаемая для приема доза активного компонента - соединения формулы (1) или (2) - варьирует в зависимости от многих факторов, таких как возраст, пол, вес человека, конкретно назначаемое соединение, способ приема, форма препарата, в виде которой назначается активное соединение.
Настоящее изобретение относится к области лекарственных средств, в частности к средству для улучшения когнитивных функций и памяти, не связанных с разрушением нейронов, на основе гидрированных пиридо (4,3-b) индолов (соединений формулы (1) и (2)), способу улучшения когнитивных функций и памяти, не связанных с разрушением нейронов, а также к применению указанных соединений. Техническим результатом, который может быть получен при осуществлении изобретения, является улучшение когнитивных функций и памяти в пожилом и старческом возрасте, мягком когнитивном снижении, при травмах мозга, депрессии, алкоголизме, нейроинфекциях, стрессах, переутомлении, задержке развития у детей, т.е. патологий, не связанных с гибелью нейронов (и, в частности, холинергических нейронов). 4 н. и 11 з.п. ф-лы, 2 ил.
в которой R1 выбран из группы, содержащей СН3-, СН3СН2- или PhCH2;
R2 выбран из группы, содержащей Н-, PBCH2- или 6-СН3-3-Ру-(СН2)2-;
R3 выбран из группы, содержащей Н-, СН3- или Br-.
в которой R1 выбран из группы, содержащей СН3-, СН3СН2- или PhCH2-;
R2 выбран из группы, содержащей Н-, PhCH2- или 6-СН3-3-Ру-(СН2)2-, а
R3 выбран из группы, содержащей Н-, СН3- или Br-.
| СРЕДСТВО ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ БОЛЕЗНИ АЛЬЦГЕЙМЕРА | 1995 |
|
RU2106864C1 |
| ГЕРОПРОТЕКТОР НА ОСНОВЕ ГИДРИРОВАННЫХ ПИРИДО(4,3-b) ИНДОЛОВ (ВАРИАНТЫ), ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОЕ СРЕДСТВО НА ЕГО ОСНОВЕ И СПОСОБ ЕГО ПРИМЕНЕНИЯ | 2003 |
|
RU2283108C2 |
| ПРОИЗВОДНЫЕ ГИДРИРОВАННЫХ ПИРИДО(4,3-B)ИНДОЛОВ, СПОСОБЫ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ, ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ И СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ | 1995 |
|
RU2140417C1 |
