Область техники
Изобретение относится к области медицины и биотехнологии, а именно к применению штаммов Enterococcus faecium М ВКПМ (В-3490) и Enterococcus faecium M-3185 (ВКПМ В-3491) и композиции на их основе для лечения печеночной недостаточности, проявляющейся гепатодепрессивным, цитолитическим и холестатическим синдромами, внутрипеченочной портальной гипертензией, развивающейся при заболеваниях и поражениях печени, имеющих в основе вирусные, токсические и другие механизмы развития, регенерации печени, а также профилактики синдрома перенапряжения в условиях действия экстремальных факторов внешней среды и интенсификации метаболических процессов в печени.
Предшествующий уровень техники
Известны способы лечения печеночной недостаточности, включающие применение гепатопротекторов, глюкокортикостероидных препаратов и/или иммуномодулирующих средств (Никитин И.Г., Сторожаков Г.И. // Клин. перспективы в гастроэнтерол., гепатол. - 2001. - №3. - с.7-11; Катикова О.Ю. и соавт. // Вопр. мед. химии. - 2001. - Т.47, вып.6; Robert P Perrillo et al. // Hepatology. - 1999. - Vol.30. - No4. - Pt 2: 301А (Abstract No. 561); Glue P. et al. // Clin. Pharmacol. Ther. - 2000. - Vol.68. - P.556-567). К недостаткам известных способов относится ограничение их применения в ряде случаев - наличием противопоказаний, особенно при длительном назначении, в ряде случаев - низкой эффективностью.
Известен также способ интенсификации метаболических процессов в печени и профилактики синдрома перенапряжения в условиях действия экстремальных факторов внешней среды анаболическими гормонами, антигипоксантами и/или актопротекторами (Буланов Ю.Б. Анаболические средства. М., 1993). К недостаткам известных способов относится существенное ограничение их применения при ряде заболеваний, в частности - печени, отнесением в группу допинговых препаратов, возникновением побочных эффектов при длительном назначении.
Известно применение штаммов Enterococcus faecium M ВКПМ (В-3490) и Enterococcus faecium M-3185 (ВКПМ В-3491) и композиции на их основе, содержащей указанные штаммы в соотношении 0,5-1,5 до 1,5-0,5, в качестве иммуностимулирующего средства, повышающего иммунный статус, резистентность к вирусным заболеваниям, устойчивость к стрессам (PCT/RU 96/00132).
Настоящее изобретение направлено на преодоление указанных недостатков известных способов лечения печеночной недостаточности, интенсификации метаболических процессов в печени и профилактики синдрома перенапряжения в условиях действия экстремальных факторов внешней среды путем применения в качестве лекарственных и профилактических средств при заболеваниях и поражениях печени, а также интенсификации метаболических процессов в печени и профилактики синдрома перенапряжения путем введения штаммов Enterococcus faecium M ВКПМ (В-3490) и Enterococcus faecium M-3185 (ВКПМ В-3491), композиции и препарата «Билактин» на их основе.
Сущность изобретения
Авторами неожиданно была обнаружена высокая терапевтическая эффективность известных ранее штаммов Enterococcus faecium M (ВКПМ В-3490) и Enterococcus faecium M-3185 (ВКПМ В-3491) и известной ранее композиции при лечении и профилактике заболеваний и поражений печени, профилактике перенапряжения и интенсификации метаболических процессов в печени.
Настоящее изобретение предусматривает применение штаммов Enterococcus faecium M (ВКПМ В-3490) и Enterococcus faecium M-3185 (ВКПМ В-3491), композиции и препарата «Билактин» на их основе для лечения печеночной недостаточности, проявляющейся гепатодепрессивным, цитолитическим и холестатическим синдромами и внутрипеченочной портальной гипертензией при заболеваниях и поражениях печени; для регенерации печени; для профилактики перенапряжения в условиях воздействия экстремальных факторов окружающей среды; для повышения аэробной производительности организма и для увеличения доли липидов в энергообеспечении и улучшения соотношения между мышечной массой тела и массой жира.
Изобретение также предусматривает способ лечения и профилактики печеночной недостаточности, проявляющейся гепатодепрессивным, цитолитическим и/или холестатическим синдромами и внутрипеченочной портальной гипертензией при заболеваниях и поражениях печени; способ повышения аэробной производительности организма и способ увеличения доли липидов в энергообеспечении и улучшения соотношения между мышечной массой тела и массой жира.
Раскрытие сущности изобретения
Печень, являясь самой крупной железой животного организма, участвует в процессах пищеварения, обмена веществ, кровообращения, осуществляя специфические защитные, обезвреживающие, ферментативные и выделительные функции, направленные на поддержание постоянства среды организма. Инфекции различной этиологии, воздействия токсических веществ, механические повреждения, экстремальные факторы окружающей среды (в том числе большие физические нагрузки, повышенная температура) и другие являются причинами возникновения функциональных нарушений, заболеваний и поражений печени. Нарушения функции печени в значительной мере обусловлены изменением проницаемости клеточных мембран гепатоцитов, приводящим к нарушению метаболических процессов и повышению содержания в крови ряда веществ, контроль содержания которых используется при диагностике заболеваний и поражений печени. К таким веществам относятся:
- аланин-аминотрансфераза (АЛТ),
- аспартат-аминотрансфераза (ACT),
- гамма-глютамилтранспептидаза (ГГТП),
- щелочная фасфотаза (ЩФ),
- билирубин,
- холестерин.
Печень осуществляет ключевые моменты в углеводном, белковом и жировом обменах. При этом уровень аэробной производительности организма напрямую связан со скоростью восстановления лактата в гликоген, осуществляемого печенью в цикле Кори: известно, что в процессе интенсивной работы в мышцах из-за недостаточного поступления кислорода для обеспечения энергозатрат и восстановления АДФ в АТФ осуществляется процесс анаэробного (без участия O2) расщепления углеводов - гликолиза. Образовавшаяся при этом молочная кислота переходит в кровь и при поступлении с током крови в печень превращается (восстанавливается) в гликоген. При этом около 20% молочной кислоты в печени в присутствии кислорода окисляется до углекислого газа и воды, обеспечивая энергией процесс восстановления молочной кислоты в гликоген. При превышении уровня физической нагрузки, при котором функциональные возможности печени обеспечивают восстановление всего образующегося лактата в гликоген, именуемого аэробным порогом, начинается накопление лактата в организме, снижение рН крови, нарушение метаболических процессов, быстрое истощение энергетических запасов и, как следствие, мышечное утомление вплоть до полной потери способности выполнять физическую нагрузку.
Печень обеспечивает окисление не менее 60% от общего количества жирных кислот, используемых для обеспечения энергетических потребностей организма. При окислении жирных кислот в большом количестве образуются промежуточные продукты - ацетон и b-оксимасляная кислота, ацетоуксусная кислота, ацетооксимасляная кислота («кетоновые тела»), которые именуют «токсинами усталости». Дальнейшее расщепление кетоновых тел требует предварительно затрат значительного количества энергии. При интенсивной физической нагрузке в условиях дефицита глюкозы, которая хотя бы в небольшом количестве необходима для «сжигания» кетоновых тел, процесс окисления жирных кислот блокируется на стадии образования кетоновых тел, которые вместе с молочной кислотой сдвигают рН крови в кислую сторону и формируют синдром усталости. В условиях, когда углеводные и жировые источники энергии организма исчерпаны или не могут покрыть необходимых энегозатрат, организм начинает использовать для этих целей белковые вещества, что в итоге приводит к истощению мышечной системы.
Клетки печени (гепатоциты) в обычных условиях делятся достаточно редко (в норме среди гепатоцитов митозы встречаются в 0,0003%). Стимуляция здоровой митотической активности гепатоцитов, обеспечение законченности митотических процессов способствуют своевременному обновлению клеток печени, замене пораженных клеток, восстановлению долек и сегментов
Применение известных штаммов Enterococcus faecium М (ВКПМ В-3490) и Enterococcus faecium M-3185 (ВКПМ В-3491) и композиции на их основе при лечении и профилактике различных заболеваний и функциональных нарушений печени неожиданно позволило при высоком терапевтическом эффекте сократить сроки лечения печеночной недостаточности, повысить активность регенераторных процессов в печени, уменьшить степень прогрессирования нарушений функции печени; корригировать нарушения иммунной системы, а также повысить аэробную производительность организма, увеличить долю липидов в энергетическом обеспечении и улучшить соотношение между мышечной массой тела и массой жира.
Настоящее изобретение предусматровает, что в схему лечения печеночной недостаточности и для регенерации печени по прототипу дополнительно или в виде монотерапии больным, а также с целью повышения аэробной производительности организма, увеличения доли липидов в энергетическом обеспечении, улучшения соотношения между мышечной массой тела и массой жира и профилактики синдрома перенапряжения пациентам назначают внутрь препарат, содержащий концентраты монокультур жизнеспособных штаммов Enterococcus faecium М (ВКПМ В-3490) и Enterococcus faecium M-3185 (ВКПМ В-3491) в дозе не менее 1011 КОЕ один-три раза в сутки на протяжении 10-90 дней или на период воздействия экстремальных факторов и последующей реабилитации.
Использование штаммов и композиции на их основе в лечении печеночной недостаточности позволяет значительно сократить продолжительность гепатодепрессивного, цитолитического и холестатического синдромов, улучшить синтетическую функцию печени, корригировать нарушения иммунитета, стимулировать энергетические процессы, что способствует значительному улучшению результатов лечения и повышению качества жизни пациентов.
Использование штаммов и композиции на их основе для регенерации печени позволяет стимулировать митотическую активность гепатоцитов, обеспечить завершенность митозов и повысить скорость регенерации печени.
Использование штаммов и композиции на их основе в целях профилактики синдрома перенапряжения, повышения аэробной производительности организма, увеличения доли липидов в энергетическом обеспечении и улучшения соотношения между мышечной массой тела и массой жира позволяет увеличить скорость восстановления в печени лактата в глюкозу в цикле Кори, интенсифицировать клеточный метаболизм гепатоцитов с увеличением доли липидов в энергообеспечении.
Учитывая высокую эффективность штаммов Enterococcus faecium М (ВКПМ В-3490) и Enterococcus faecium M-3185 (ВКПМ В-3491) при лечении печеночной недостаточности и ускорении регенерации печени, повышении аэробной производительности организма, увеличении доли липидов в энергетическом обеспечении, улучшении соотношения между мышечной массой тела и массой жира и профилактике синдрома перенапряжения на основе указанных штаммов был разработан препарат «Билактин» (регистрационное удостоверение №004339.Р.643.07.2002).
Препарат «Билактин» выпускается в виде капсул и/или таблеток, содержащих:
лиофильно высушенную микробную массу Enterococcus faecium M (ВКПМ В-3490) - 40-60%
лиофильно высушенную микробную массу Enterococcus faecium M-3185 (ВКПМ В-3491) - 40-60%
остаточное количество растворимых сухих веществ среды выращивания - до 20%.
Изобретение далее иллюстрируется примерами, которые являются предпочтительными, предназначены лишь для подтверждения возможности осуществления изобретения и не должны стать основанием для ограничения объема притязаний Заявителя. Специалист в данной области техники без труда найдет возможности иных воплощений изобретения, безусловно, подпадающих под притязания Заявителя, отраженные в формуле изобретения, приводимой ниже.
Пример 1
Больная Г., 42 г. Находилась на стационарном лечении в гастроэнтерологическом отделении с 11.12.2002 по 27.12.2002.
Диагноз: Первичный билиарный цирроз, класс А-В, умеренная активность. Гепатолиенальный синдром. Печеночная недостаточность 1-2 ст. Печеночная энцефалопатия 0.
Жалобы: На чувство слабости в вечернее время, выраженный кожный зуд, диспептические расстройства, пожелтение кожных покровов.
Из анамнеза: Считает себя больной в течение 4-5 лет. За последние несколько лет пациентка неоднократно госпитализировалась с диагнозом «Цирроз печени, криптогенный, умеренная активность». Проводимое лечение (эссенциале, карсил, легален курсами) без положительной динамики проявлений цитолитического и холестатического синдромов.
В клинике проводилось лечение: инфузионная терапия, ферментная терапия, витамины. С момента поступления пациентки в клинику был назначен препарат "Билактин" содержащий концентраты монокультур Enterococcus faecium M (ВКПМ В-3490) и Enterococcus faecium М-3185 (ВКПМ В-3491) по 2 капсулы 3 раза в день. Прием препарата "Билактин" был продолжен амбулаторно по 2 капсулы 3 раза в день до месяца.
На фоне проводимого лечения через 1 неделю исчез кожный зуд, улучшилось самочувствие (улучшился сон, увеличилась работоспособность), уменьшились выраженность диспептических расстройств. Через 1 месяц приема препарата улучшились показатели АЛТ и ACT, все показатели САН. При УЗИ-исследовании констатировано уменьшение размеров печени.
Биопсия печени: первичный билиарный цирроз, 8 баллов по Knodell.
Данные лабораторного исследования:
Больная выписана со значительным улучшением.
Пример 2
Больная М., 38 л. Находилась на лечении в гастроэнтерологическом отделении с 17.10.2002 по 14.11.2002
Диагноз: Цирроз печени, экзотоксической этиологии, класс В-С, выраженной активности.
Жалобы: На чувство слабости вечернее время, кожный зуд, диспептические расстройства, увеличение размеров живота.
Из анамнеза: Считает себя больной в течение 2-3 лет. Госпитализирована с диагнозом - субкомпенсированный цирроз печени.
Пациентке назначен курс гептрал, дюфалак, инфузионная терапия. На фоне проводимого лечения через неделю отмечено ухудшение лабораторных показателей, в связи с чем больной назначен "Билактин" по 2 капсулы 3 раза в день до окончания лечения в стационаре, отменены гептрал и дюфалак.
Через 7 дней приема препарата "Билактин" в виде монотерапии исчез кожный зуд, улучшилось самочувствие (улучшился сон, увеличились физический тонус и работоспособность), уменьшились проявления диспептических расстройств.
Через 1 мес лабораторные показатели, характеризующие цитолитический и холестатический синдромы в пределах нормы, улучшились все показатели по шкале САН.
Данные лабораторного исследования:
Больная выписана из стационара в хорошем состоянии с рекомендацией приема препарата "Билактин" по 1 капсуле в день в течение месяца.
Пример 3
Больной М., 27 лет
Диагноз: Неалкогольный стеатогепатит, умеренная активность.
Жалобы: На немотивированное чувство слабости в дневное и вечернее время.
Из анамнеза: В 2001 при биохимическом обследовании у больного обнаружено ab-HBs при отрицательном HBV-ДНК крови. В биоптате печеночной ткани HBV-ДНК (+). Получал курс противовирусного лечения - ламивудин 100 мг/сут + реоферон по 6 млн. ЕД×3 раза в неделю (в течение 6 месяцев). HBV-ДНК через 6 месяцев в биоптате печени не обнаружен. Несмотря на проводимое лечение, у больного сохранялся цитолитический синдром: - АЛТ-140; АСТ-80; билирубин-25; что явилось причиной для амбулаторного назначения препарата "Билактин" (по 2 капсулы 3 раза в день на протяжении месяца с последующим переходом на прием препарата "Билактин" по 1 капсуле 1 раз в день в течение месяца.
На фоне лечения препаратом "Билактин" через 1 нед улучшилось самочувствие (улучшился сон, увеличилась работоспособность, повысилось внимание), через 1 мес сохранялась хорошая работоспособность.
Биопсия печени: картина хронического гепатита, жировая дистрофия до 5%, 9 баллов по Knodell.
Данные лабораторного исследования:
Пример 4
Белым беспородным крысам-самцам и белым беспородным мышам-самцам в течение 7 дней внутрижелудочно вводился препарат "Билактин" в дозах Д1=10 г/кг, Д2=30 г/кг, Д3=70 г/кг. После забоя животных методом декапитации, проводились морфологические исследования. При осмотре макропрепаратов изменений органа не обнаружено. При микроскопическом исследовании выявлены печеночные клетки, находящиеся в стадии многочисленных митозов в различных стадиях от профазы и метафазы до телофазы, что не характерно для клеток печени, обычно амитотичных (в норме среди гепатоцитов митозы встречаются в 0,0003%). В том числе выявлены многочисленные двуядерные гепатоциты, что говорит о выраженной стимуляции митотической активности гепатоцитов, завершенности митоза и регенерации печени.
Пример 5
В рамках учебно-тренировочного сбора на фоне высоких стандартных нагрузок в течение трех недель пяти высококвалифицированным спортсменам назначали препарат "Билактин" (основная группа) и пяти высококвалифицированным спортсменам назначали плацебо (контрольная группа). Проводилось клинико-лабораторное и физическое обследование, калиперометрия во время выполнения 6-минутного бега на тредбане с определением числа сердечных сокращений, АД, общей работоспособности, содержания молочной кислоты, глюкозы, ряда биохимических показателей, характеризующих функцию печени, показатели мышечной и жировой массы тела в условиях воздействия высокой температуры и низкой влажности воздуха в начале и в конце трехнедельного тренировочного цикла.
По результатам заключительного тестирования в основной группе обнаружены более высокий уровень работоспособности по тесту Купера, отсутствие повышения лактата при увеличении объема выполняемой нагрузки, стабилизация мышечной массы с сокращением массы жира.
Уровень биохимических показателей, в том числе характеризующих функцию печени (AST, ALT, мочевина) изменялся лишь в пределах нормы, тогда как у спортсменов контрольной группы в 2-х случаях зарегистрировано увеличение уровня ALT выше нормы и в 3-х случаях превышение нормы AST. Уровень холестерина у спортсменов опытной группы после трехнедельного сбора остался в пределах нормы, тогда как у 2-х спортсменов контрольной группы данный показатель превысил нормальное значение по окончании сбора.
Пример 6
На основе композиции штаммов Enterococcus faecium М (ВКПМ В-3490) и Enterococcus faecium М-3185 (ВКПМ В-3491) создан препарат «Билактин». Препарат «Билактин» применяется для лечения печеночной недостаточности и регенерации печени, повышения аэробной производительности организма, увеличения доли липидов в энергетическом обеспечении, улучшения соотношения между мышечной массой тела и массой жира и профилактики синдрома перенапряжения. Отличительной особенность препарата является высокая концентрация жизнеспособных клеток (колониеобразующих единиц - КОЕ/г), которая достигается применением специальных сред и режимов культивирования, а также способов концентрирования и сушки, позволяющих сохранять высокую жизнеспособность клеток бактерий без применения специальных защитных сред. Препарат прошел полный комплекс исследований на безвредность и отнесен к 4 классу токсичности (нетоксичные вещества) и 3 классу алергенности (слабые алергены). Препарат зарегистрирован Министерством здравоохранения РФ в качестве биологически активной добавки к пище (БАД) - регистрационное удостоверение №004339.Р.643.07.2002.
Препарат выпускается в виде капсул, содержащих сухую порошкообразную массу жизнеспособных клеток бактерий штаммов Enterococcus faecium М (ВКПМ В-3490) и Enterococcus faecium M-3185 (ВКПМ В-3491), упакованных во флаконы, или в виде таблеток, полученных высушиванием замороженной отформованной пасты монокультур штаммов Enterococcus faecium. M-3185 ВКПМ В-3491, Enterococcus faecium M ВКПМ В-3490. Препарат принимают внутрь перорально.
Промышленная применимость
Штаммы Enterococcus faecium М (ВКПМ В-3490) и Enterococcus faecium M-3185 (ВКПМ В-3491), композиция шаммов Enterococcus faecium М (ВКПМ В-3490) и Enterococcus faecium M-3185 (ВКПМ В-3491), препарат «Билактин» и разработанные способы лечения и профилактики заболеваний и поражений могут быть применены для лечения печеночной недостаточности (гепатодепрессивного, цитолитического и холестатического синдромов) при заболеваниях и поражениях печени, для регенерации печени, профилактики перенапряжения в условиях воздействия экстремальных факторов окружающей среды, повышения аэробной производительности организма, увеличения доли липидов в энергетическом обеспечении организма и улучшения соотношения между мышечной массой тела и массой жира.
Литература
1. Буланов Ю.Б. Анаболические средства. М., 1993.
2. Ивашкин В.Т. // Рос. журн. гастроэнтерол., гепатол., колопроктол. - 1998. - N 5.
3. Катикова О.Ю. и соавт. // Вопр. мед. химии. - 2001. - Т.47, вып.6.
4. Никитин И.Г., Сторожаков Г.И. // Клин. перспективы в гастроэнтерол., гепатол. - 2001. - №3. - с.7-11.
5. Хазанов А.И. Болезни печени, желчного пузыря и желчных путей / Диагн. и леч. внутр. болезней. - Рук. для врачей в 3-х томах. Под ред. акад. Ф.И.Комарова, Медицина. - 1996. - Т.3. - С.195-300.
6. Glue P. et al. // Clin. Pharmacol. Ther. - 2000. - Vol.68. - P.556-567.
7. Robert P Perrillo et al. // Hepatology. - 1999. - Vol.30. - No4. - Pt 2: 301A (Abstract No. 561).
8. PCT/RU 96/00132 от 27 мая 1996 года «Применение штаммов Streptococcus faecium и композиция на их основе».
название | год | авторы | номер документа |
---|---|---|---|
СПОСОБ И СРЕДСТВО ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ВИРУСНЫХ ГЕПАТИТОВ НА ОСНОВЕ ШТАММОВ Enterococcus faecium M (ВКПМ В-3490) И Enterococcus faecium М-3185 (ВКПМ В-3491) | 2007 |
|
RU2445107C2 |
ПРИМЕНЕНИЕ ШТАММОВ Enterococcus faecium M И Enterococcus faecium M-3185 ДЛЯ ПОВЫШЕНИЯ СКОРОСТИ ГЛИКОЛИЗА И СПОСОБ ПОВЫШЕНИЯ СКОРОСТИ ГЛИКОЛИЗА | 2007 |
|
RU2426782C2 |
ПРЕПАРАТ, ОБЛАДАЮЩИЙ ИММУНОСТИМУЛИРУЮЩИМ ДЕЙСТВИЕМ | 1994 |
|
RU2101020C1 |
СРЕДСТВО, ОБЛАДАЮЩЕЕ АНТИАРИТМИЧЕСКИМИ И ГЕПАТОПРОТЕКТОРНЫМИ СВОЙСТВАМИ | 2011 |
|
RU2469720C1 |
СПОСОБ КОРРЕКЦИИ ИШЕМИЧЕСКОГО ПОРАЖЕНИЯ ПЕЧЕНИ | 2009 |
|
RU2394574C1 |
СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ИШЕМИЧЕСКИХ НАРУШЕНИЙ ПЕЧЕНИ | 2014 |
|
RU2563796C1 |
СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ОСТРЫХ ОТРАВЛЕНИЙ | 1996 |
|
RU2144817C1 |
СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ПОСЛЕДСТВИЙ ИШЕМИЧЕСКОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ НА ПЕЧЕНЬ | 2011 |
|
RU2456678C1 |
ШТАММ БАКТЕРИЙ STREPTOCOCCUS FAECIUM, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ БОРЬБЫ С ДИСБАКТЕРИОЗАМИ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ | 1993 |
|
RU2152433C1 |
Средство для стимуляции регенерации ткани печени при парентеральном введении и способ стимуляции регенерации ткани печени на его основе | 2017 |
|
RU2643591C1 |
Изобретение относится к области биотехнологии и медицины и касается способа интенсификации метаболических процессов в печени, заключающегося в пероральном приеме композиции или препарата на основе штаммов Enterococcus faecium М (ВКПМ В-3490) и Enterococcus faecium M-3185 (ВКПМ В-3491), в частности, для лечения печеночной недостаточности, проявляющейся гепатодепрессивным, цитолитическим и холестатическим синдромами и внутрипеченочной портальной гипертензией при заболеваниях и поражениях печени; для регенерации печени; для профилактики перенапряжения в условиях воздействия экстремальных факторов окружающей среды; для повышения аэробной производительности организма и для увеличения доли липидов в энергообеспечении и улучшения соотношения между мышечной массой тела и массой жира. 4 з.п. ф-лы, 4 табл.
Бесколесный шариковый ход для железнодорожных вагонов | 1917 |
|
SU97A1 |
КОМПЛЕКСНЫЙ БАКТЕРИАЛЬНЫЙ ПРЕПАРАТ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ И ПРОФИЛАКТИКИ ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ЖИВОТНЫХ | 1995 |
|
RU2091075C1 |
WO 9728812, 14.08.1997. |
Авторы
Даты
2008-12-27—Публикация
2003-08-26—Подача