СПОСОБ ПЕРИТОНЕАЛЬНОГО ДИАЛИЗА Российский патент 2009 года по МПК A61M1/28 A61K31/7076 A61P29/00 

Область техники

Настоящее изобретение относится к профилактическому или терапевтическому средству для лечения повреждений брюшины, которые могут возникнуть во время перитонеального диализа; к перитонеальному диализу, который является безопасным и вызывает меньше повреждений брюшины или других нарушений, и к способу перитонеального диализа с использованием перитонеального диализата.

Предшествующий уровень техники

На поздней стадии почечной недостаточности отходы организма не могут удаляться в достаточной степени и поэтому возрастает содержание в крови связанных с уремией веществ, таких как азот мочевины (BUN), креатинин (Cr), фосфор (Р) и калий (К), вызывая разнообразные симптомы. Симптомы включают повышенную усталость, одышку, сниженный объем мочи, отеки, потерю аппетита и, в дополнение к ним, гипертонию, гиперакалиемию и анемию. При отсутствии лечения больные в конечном счете умирают. Поэтому больные уремией должны подвергаться гемодиализу, перитонеальному диализу или трансплантации почки.

Из этих трех подходов к лечению по нескольким причинам в последнее время стали широко использовать перитонеальный диализ. Во-первых, по сравнению с гемодиализом перитонеальный диализ удобен тем, что его можно выполнять на дому, он не требует ни специального устройства, ни помощи человека; перитонеальный диализ представляет собой медленный процесс и, следовательно, может поддерживать стабильное физическое состояние пациента, не вызывая низкого артериального давления или дискомфорта, ощущения усталости, которые могут в противном случае вызываться после диализа; и при перитонеальном диализе пациент «не теряет время», что происходит в случае гемодиализа.

Однако когда пациентов лечат перитонеальным диализом в течение длительного периода времени, у них может быть проблема возможного функционального расстройства брюшины, включающая отвердение брюшины или перитонит. Это расстройство вызывается высокой дозой глюкозы, используемой при перитонеальном диализе, когда брюшина используется в качестве полупроницаемой мембраны, и диализат, содержащий глюкозу в высокой концентрации, вводится во внутрибрюшинную полость через введенный в нее катетер, и диализат с высоким уровнем глюкозы удерживается в полости в течение 5-6 ч перед выпусканием.

Описание изобретения

Для решения описанной выше проблемы настоящее изобретение относится к перитонеальному диализату, который вызывает меньше повреждений брюшины, и его можно использовать при перитонеальном диализе непрерывно в течение длительного периода времени, и способу перитонеального диализа с использованием этого диализата.

Авторы настоящего изобретения сосредоточились на мезотелиальных клетках брюшины, выстилающих брюшину, и вели поиск веществ, которые способны предотвратить повреждения мезотелиальных клеток брюшины, вызванные высоким уровнем сахара, и обнаружили, что аденозинтрифосфат (АТФ) или его соль оказывают эффект предотвращения повреждений мезотелиальных клеток брюшины; что АТФ или его соль, таким образом, можно использовать в качестве профилактического или терапевтического средства для лечения повреждений брюшины и что перитонеальный диализат, содержащий АТФ или его соль, можно использовать при перитонеальном диализе в течение длительного периода времени, что, таким образом, и составляет настоящее изобретение.

Соответственно, настоящее изобретение относится к перитонеальному диализату, содержащему АТФ или его соль.

Настоящее изобретение также относится к профилактическому или терапевтическому средству для лечения повреждений брюшины, причем средство содержит АТФ или его соль в качестве активного ингредиента.

Настоящее изобретение также относится к средству для лечения клеточных повреждений, вызванных сахаром, причем средство содержит АТФ или его соль в качестве активного ингредиента.

Настоящее изобретение также относится к применению АТФ или его соли при изготовлении перитонеального диализата.

Настоящее изобретение также относится к применению АТФ или его соли при изготовлении профилактического или терапевтического средства для лечения повреждения брюшины.

Настоящее изобретение также относится к применению АТФ или его соли при изготовлении средства для лечения клеточных повреждений, вызванных сахаром.

Настоящее изобретение также относится к способу перитонеального диализа, отличающемуся тем, что он предусматривает применение диализата, содержащего АТФ или его соль в эффективном количестве.

Настоящее изобретение также относится к способу лечения повреждений брюшины, отличающемуся тем, что вводят АТФ или его соль в эффективном количестве.

Настоящее изобретение также относится к способу лечения клеточных повреждений, вызванных сахаром, отличающемуся тем, что вводят АТФ или его соль в эффективном количестве.

В соответствии с настоящим изобретением можно получить перитонеальный диализат, который является безопасным и который после применения при перитонеальном диализе в течение длительного периода времени вызывает меньше повреждений брюшины.

Краткое описание чертежей

На фиг.1 показан эффект АТФ на уменьшение жизнеспособности НРМС (мезотелиальных клеток брюшины человека), связанное с глюкозой (5,8, 75 и 140 мМ) (по данным измерения спектральной поглощательной способности).

На фиг.2 показан эффект аденозина на уменьшение жизнеспособности НРМС, связанное с глюкозой (5,8, 75 и 140 мМ) (по данным измерения спектральной поглощательной способности).

На фиг.3 показан эффект антагониста рецепторов АТФ (сурамина, 10 мкМ), оказываемый на эффект АТФ на уменьшение жизнеспособности, по данным измерения спектральной поглощательной способности, НРМС, связанное с глюкозой (5,8, 75 и 140 мМ).

На фиг.4 показан эффект антагониста рецепторов АТФ (реактивного синего 2, 30 мкМ), оказываемый на эффект АТФ на уменьшение жизнеспособности, по данным измерения спектральной поглощательной способности, НРМС, связанное с глюкозой (5,8, 75 и 140 мМ).

На фиг.5 показан эффект антагониста рецепторов АТФ (PPADS, 10 мкМ), оказываемый на эффект АТФ на уменьшение жизнеспособности, по данным измерения спектральной поглощательной способности, НРМС, связанное с глюкозой (5,8, 75 и 140 мМ).

Наилучший способ осуществления изобретения

Аденозинтрифосфат (АТФ), используемый в настоящем изобретении, был известен как источник энергии для клеток. Однако оставалось неизвестным, что АТФ может функционировать для предотвращения повреждения клеток, в частности, мезотелиальных клеток брюшины, вызванного высокими уровнями сахара, наряду с другими сахарами, глюкозой. Как показано в примере ниже, мезотелиальные клетки брюшины, которые были предварительно обработаны антагонистом рецепторов АТФ перед обработкой АТФ, не проявляли никакого профилактического эффекта по поводу повреждений мезотелиальных клеток. Результаты указывают на то, что терапевтический эффект АТФ на повреждения клеток не связан с действием АТФ, служащего в качестве источника энергии после захвата клетками, но скорее с действием АТФ, оказываемым опосредующим действием рецепторов АТФ.

Предпочтительные примеры соли АТФ включают соли щелочных металлов, такие как соли натрия, и соли щелочноземельных металлов, такие как соли магния и соли кальция.

Перитонеальный диализат настоящего изобретения содержит эффективное количество АТФ или его соли. Уровень АТФ или его соли в перитонеальном диализате составляет предпочтительно от 10 до 5000 мкМ, предпочтительнее от 50 до 3000 мкМ, еще предпочтительнее от 50 до 2000 мкМ.

Перитонеальный диализат настоящего изобретения, в дополнение к АТФ или его соли, предпочтительно содержит глюкозу и электролиты. Уровень глюкозы составляет предпочтительно от 1000 до 4000 мг/дкл, предпочтительнее от 1200 до 3600 мг/дкл. В качестве электролитов используются Na⁺, Ca²⁺, Mg²⁺ и Cl^-. Предпочтительно перитонеальный диализат настоящего изобретения содержит Na⁺ в количестве от 100 до 200 мЭкв/л, Ca²⁺ в количестве от 4 до 5 мЭкв/л, Mg²⁺ в количестве от 1 до 2 мЭкв/л и Cl^- количестве от 80 до 120 мЭкв/л. Предпочтительно перитонеальный диализат настоящего изобретения, кроме того, содержит органическую кислоту, такую как молочная кислота, в количестве от 30 до 50 мЭкв/л. Предпочтительно осмотическое давление перитонеального диализата доводят до уровня от 300 до 700 мОсм/л. Остальная часть представляет собой воду.

Перитонеальный диализат настоящего изобретения, содержащий АТФ или его соль, может предотвратить повреждения брюшины и клеточные повреждения, в частности, повреждения мезотелиальных клеток брюшины, которые могут в противном случае быть вызваны высоким уровнем сахара. Примеры повреждений брюшины включают перитонит, склеротический инкапсулированный перитонит, не поддающийся лечению длительный перитонит и общий перитонит. Однако профилактическое или терапевтическое средство для лечения повреждения брюшины или терапевтическое средство для лечения клеточного повреждения в соответствии с настоящим изобретением можно использовать вместо типа перитонеального диализата в лекарственных формах, например, для перорального введения, внутривенного введения, внутримышечного введения и местного введения. Лекарственные композиции, подходящие для этих путей введения, можно изготовить добавлением одного или нескольких фармакологически приемлемых носителей к этому средству, а затем обработкой смеси посредством обычного способа, известного специалистам в данной области.

Когда приготавливают твердую лекарственную форму для перорального применения, АТФ или его соль смешивают с эксципиентом (и, при необходимости, одной или несколькими добавками, таким как связывающее вещество, разрыхлитель, смазывающее вещество, краситель, подслащивающее вещество и ароматизирующее вещество) и полученную смесь перерабатывают посредством обычного способа для изготовления твердого лекарственного продукта для перорального применения, такого как таблетки, покрытые таблетки, гранулы, порошок или капсулы. Добавки могут представлять собой те, которые в целом используются в данной области. Примеры эксципиента включают лактат, сахарозу, хлорид натрия, глюкозу, крахмал, карбонат кальция, каолин, микрокристаллическую целлюлозу и салициловую кислоту; примеры связывающего вещества включают воду, этанол, пропанол, простой сироп, раствор глюкозы, раствор крахмала, сжиженный желатин, карбоксиметилцеллюлозу, гидроксипропилцеллюлозу, гидроксипропиловый крахмал, метилцеллюлозу, этилцеллюлозу, шеллак, фосфат кальция и поливинилпирролидон; примеры разрыхлителя включают высушенный крахмал, аргинат натрия, порошкообразный агар, гидрокарбонат натрия, карбонат кальция, лаурилсульфат натрия, стеарат моноглицерила и лактозу; примеры смазывающего средства включают очищенный тальк, соли стеариновой кислоты, боракс и полиэтиленгликоль; и примеры подслащивающего вещества включают сахарозу, кожуру апельсинов, лимонную кислоту и винную кислоту.

Когда получают жидкий лекарственный продукт для перорального введения, АТФ или его соли смешивают с добавкой, такой как подслащивающее вещество, буфер, стабилизатор или ароматизирующее вещество, и полученную смесь перерабатывают посредством обычного способа для изготовления посредством этого перорально вводимого жидкого лекарственного продукта, такого как лекарственное средство в виде раствора, сиропа или эликсира для приема внутрь. Примеры подслащивающего вещества включают ванилин; примеры буфера включают цитрат натрия; и примеры стабилизатора включают трагакант, акацию и желатин.

Когда получают продукт для инъекций, АТФ или его соль смешивают с добавкой, такой как регулятор рН, буфер, стабилизатор, средство, придающее изотоничность, или местный анестетик, и полученную смесь перерабатывают посредством обычного способа с изготовлением посредством этого инъекционного раствора для подкожной инъекции, внутримышечной инъекции или внутривенной инъекции. Примеры регулятора рН или буфера включают цитрат натрия, ацетат натрия и фосфат натрия; примеры стабилизатора включают пиросульфит натрия, ЭДТА, тиогликолевой кислоты и тиомолочной кислоты; примеры местного анестетика включают гидрохлорид прокаина и гирохлорид лидокаина; и примеры средства, придающего изотоничность, включают хлорид натрия и глюкозу.

Доза препарата (следует отметить, неприменимая к случаю перитонеального диализата) настоящего изобретения отличается в зависимости от возраста, массы тела и состояний пациента, а также пути и частоты введения и т.д. Суточная доза АТФ для взрослого составляет обычно от 1 до 1000 мг, и препарат предпочтительно вводится перорально или внутривенно 1 раз в сутки или несколько раз в сутки дробным образом.

Перитонеальный диализат можно использовать в соответствии с обычным способом перитонеального диализа. В частности, катетер вводится в брюшную полость пациента, страдающего почечным заболеванием, и диализат (обычно от 1,5 до 2,0 л), содержащий АТФ, вводят внутрибрюшинно пациенту через катетер. Альтернативно, вводится содержащий АТФ раствор глюкозы, имеющий физиологический уровень глюкозы, а после этого вводят обычный диализат (такой как раствор, содержащий высокий уровень глюкозы). Влитый таким образом диализат или раствор удерживают в течение примерно 5-6 ч, а затем выпускают. Обычно процедуру повторяют 3-5 раз/д. Физиологический уровень глюкозы составляет от 0,08 до 0,16% (мас./об.).

Примеры

Настоящее изобретение далее будет подробно описано путем приведения примеров, которые не должны рассматриваться как ограничивающие собой изобретение.

Пример 1

Мезотелиальные клетки брюшины человека (НРМС) предварительно инкубировали в течение 3 ч в культуральной среде (М199), содержащей АТФ (0, 10, 100 и 1000 мкМ). Клетки промывали культуральной средой НРМС (буфером в виде солевого раствора), а затем инкубировали в течение 8 ч в культуральной среде (М199), содержащей глюкозу на трех различных уровнях (5,8, 75 и 140 мМ). Жизнеспособность НРМС определяли посредством подсчета клеток (WST-1).

Результаты показаны на фиг.1. Когда НРМС предварительно инкубировали в культуральной среде, не содержащей АТФ, жизнеспособность НРМС уменьшалась по мере увеличения уровня глюкозы, в то время как когда НРМС предварительно инкубировали в культуральной среде, содержащей АТФ, снижение жизнеспособности, вызванное высоким уровнем глюкозы, значительно уменьшалось.

Пример 2

Вместо АТФ использовали аденозин, который представляет собой метаболит АТФ, для изучения эффекта аденозина на уменьшение жизнеспособности НРМС, вызванное высоким уровнем глюкозы.

Результаты показаны на фиг.2. Аденозин не проявлял эффекта уменьшения снижения жизнеспособности НРМС, как показано в случае АТФ.

Пример 3

Перед этапом предварительной инкубации в культуральной среде, содержащей АТФ, как в процедуре примера 1, НРМС предварительно инкубировали в течение 30 мин каждым из следующих селективных антагонистов рецепторов АТФ: (1) Сурамин (антагонист рецепторов Р2Х, P2Y; 10 мкМ), (2) Реактивный синий 2 (антагонист рецепторов P2Y; 30 мкМ) и (3) PPADS (антагонист рецепторов Р2Х; 10 мкМ). Затем выполняли тест, как описано в примере 1.

Результаты показаны на фиг.3, 4 и 5. Когда НРМС обрабатывали антагонистом рецепторов АТФ, АТФ не проявлял эффекта уменьшения снижения жизнеспособности НРМС.

Результаты, полученные в примере 1, указывают на то, что АТФ оказывает эффект значительного предотвращения повреждений мезотелиальных клеток брюшины, вызванных высоким уровнем глюкозы. Результаты, полученные в примерах 2 и 3, выявляют, что этот эффект АТФ не связан с действием АТФ, служащим в качестве источника энергии после захвата клетками, а скорее связан с прямым действием АТФ, проявляемым опосредующим действием рецепторов Р2.

Пример 4

Составление композиции перитонеальных диализатов

(1) Диализат, содержащий АТФ

К каждому из трех диализатов, содержащих глюкозу (1,36, 2,27 и 3,86%), добавляют хлорид натрия, лактат натрия, хлорид кальция, хлорид магния и т.д. с тем, чтобы придать обычные композиционные пропорции, и добавляют АТФ так, что полученная смесь приобретает уровень АТФ от 50 до 2000 мкМ.

(2) Раствор с физиологическим уровнем глюкозы, содержащий АТФ

К раствору глюкозы, имеющему физиологический уровень глюкозы (0,1%), добавляют хлорид натрия, лактат натрия, хлорид кальция, хлорид магния и т.д. с тем, чтобы придать обычные композиционные пропорции, и добавляют АТФ так, что полученная смесь приобретает уровень АТФ от 50 до 2000 мкМ.

Изобретение относится к области медицины. Предложен перитонеальный диализат, содержащий аденозинтрифосфат или его соль, и способ перитонеального диализа с использованием диализата. Перитонеальный диализат является безопасным и вызывает меньше повреждений брюшины в сравнении с диализатами предшествующего уровня техники. Перитонеальный диализат можно более безопасно использовать при перитонеальном диализе непрерывно в течение длительного периода времени. 9 н. и 7 з.п. ф-лы, 5 ил.

1. Перитонеальный диализат, содержащий аденозинтрифосфат или его соль, глюкозу и электролит, где содержание аденозинтрифосфата или его соли в диализате составляет от 50 до 3000 мкМ.

2. Профилактическое или терапевтическое средство для лечения повреждений брюшины, включающее аденозинтрифосфат или его соль в качестве активного ингредиента.

3. Средство для лечения клеточных повреждений, вызванных сахаром, включающее аденозинтрифосфат или его соль в качестве активного ингредиента.

4. Средство по п.3, где клеточное повреждение, вызванное сахаром, представляет собой повреждение мезотелиальных клеток брюшины, вызванное глюкозой.

5. Применение аденозинтрифосфата или его соли, глюкозы и электролита для изготовления перитонеального диализата, где содержание аденозинтрифосфата или его соли в диализате составляет от 50 до 3000 мкМ.

6. Применение аденозинтрифосфата или его соли для изготовления профилактического или терапевтического средства для лечения повреждения брюшины.

7. Применение аденозинтрифосфата или его соли для изготовления средства для лечения клеточных повреждений, вызванных сахаром.

8. Применение по п.7, где клеточное повреждение, вызванное сахаром, представляет собой повреждение мезотелиальных клеток брюшины, вызванное глюкозой.

9. Способ перитонеального диализа, отличающийся тем, что предусматривает применение диализата, содержащего аденозинтрифосфат или его соль, глюкозу и электролит, где содержание аденозинтрифосфата или его соли в диализате составляет от 50 до 3000 мкМ.

10. Способ перитонеального диализа по п.9, содержащий внутрибрюшинное введение диализата, содержащего эффективное количество аденозинтрифосфата или его соли, через катетер, имплантированный в брюшную полость пациента, страдающего почечным заболеванием.

11. Способ перитонеального диализа по п.9, где содержание глюкозы составляет от 1000 до 4000 мг/дкл.

12. Способ перитонеального диализа по п.9, содержащий внутрибрюшинное введение через катетер, имплантированный в брюшную полость пациенту, страдающему почечным заболеванием, диализата, содержащего эффективное количество аденозинтрифосфата или его соли и физиологический уровень глюкозы перед введением диализата, содержащего глюкозу в высокой концентрации.

13. Способ перитонеального диализа по п.12, где физиологическое содержание глюкозы составляет от 0,08 до 0,16% (мас./об.), а высокое содержание глюкозы составляет от 1000 до 4000 мг/дкл.

14. Способ лечения повреждения брюшины, отличающийся тем, что вводят аденозинтрифосфат или его соль в эффективном количестве.

15. Способ лечения клеточного повреждения, вызванного сахаром, отличающийся тем, что вводят аденозинтрифосфат или его соль в эффективном количестве.

16. Способ по п.15, где клеточное повреждение, вызванное сахаром, представляет собой повреждение мезотелиальных клеток брюшины, вызванное глюкозой.