ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ ЛЕКАРСТВЕННАЯ ФОРМА, УСТОЙЧИВАЯ К ДЕЙСТВИЮ ЖЕЛУДОЧНОГО СОКА, ВКЛЮЧАЮЩАЯ N-(2-(2-ФТАЛИМИДОЭТОКСИ)АЦЕТИЛ)-L-АЛАНИЛ-D-ГЛУТАМИНОВУЮ КИСЛОТУ (LK 423) Российский патент 2009 года по МПК A61K9/22 A61K9/26 A61K38/04 A61P29/00 

Область техники

Настоящее изобретение относится к фармацевтическим лекарственным формам, которые применяют для контролируемой и/или направленной доставки активного компонента в определенные отделы желудочно-кишечного тракта человека или животных. Фармацевтические лекарственные формы по настоящему изобретению в качестве активного вещества в основном включают N-(2-(2-фталимидоэтокси)ацетил)-L-аланил-D-глутаминовую кислоту (LK 423), однако указанные формы можно использовать для других активных агентов.

Другой объект настоящего изобретения относится к способам получения указанных фармацевтических лекарственных форм и способам лечения хронических воспалительных заболеваний человека и/или животных с использованием фармацевтических лекарственных форм по настоящему изобретению.

Предпосылки создания настоящего изобретения

N-(2-(2-фталимидоэтокси)ацетил)-L-аланил-D-глутаминовая кислота (LK 423) описана в Европейском патенте ЕР 477912 (патент США №5514654). Указанное соединение влияет на регуляцию продуцирования цитокинов, ингибирование противовоспалительного продуцирования цитокинов и стимуляцию продуцирования цитокинов, прежде всего интерлейкин IL-10 описан в заявке WO 0135982 и в статьях (Ochi С. и др., Arzneimittel-Forschung, т.49 (1), cc.72-79 (1999), Moriguchi M. и др., Arzneimittel-Forschung, т.49(2), cc.184-192 (1999)). Действие соединения LK 423 при лечении различных воспалительных заболеваний, прежде всего при лечении язвенного колита и/или болезни Крона, описано в заявке WO 0135982. Возможность получения фармацевтических композиций для перорального и неперорального введения активного вещества LK 423 упомянута в заявке WO 0135982. Однако подробное описание фармацевтических лекарственных форм, включающих LK 423, отсутствует как в патентной, так и в научной литературе.

Применение фармацевтических лекарственных форм, обеспечивающих эффективную доставку активного вещества в определенные отделы желудочно-кишечного тракта (например, в ободочную кишку), в которых происходит высвобождение активного вещества, является наиболее целесообразным способом лечения очаговых заболеваний (например, язвенного колита и болезни Крона) и системных заболеваний с использованием активных веществ, которые быстро разлагаются в верхних отделах желудочно-кишечного тракта (активные белки и пептиды). Поскольку доступ в отдаленные отделы желудочно-кишечного тракта является затрудненным, то лекарственные формы, предназначенные для доставки активных компонентов в указанные отделы, являются комплексными. Несмотря на затрудненный доступ в ободочную кишку, было разработано несколько способов доставки лекарственных средств, предназначенных для лечения ободочной кишки (Rubinstein A., Crit Rev Ther Drug Carrier Syst, т.12 (вып.2 и 3), cc.101-149 (1995)). В работе Friend D.R., Adv Drug Deliv Rev, т.7, cc.149-199 (1991) описаны два критерия, которые необходимо использовать при создании фармацевтических лекарственных форм для доставки в кишку:

- доставка неизмененного активного вещества через желудок и тонкую кишку в ободочную кишку,

- направленное высвобождение активного вещества в ободочной кишке с удовлетворительной предсказуемостью и воспроизводимостью.

Указанные критерии можно использовать для доставки лекарственного средства в другие удаленные отделы желудочно-кишечного тракта человека и животных.

Различные подходы к разработке контролируемой и/или избирательной и/или направленной доставке лекарственных средств в желудочно-кишечный тракт описаны в следующих документах: ЕР 527942 (WO 9116881, US 5525634 и US 586661), WO 9200732, ЕР 366621 (US 5171580 и WO 9004386), ЕР 553392, ЕР 636366 (US 5286493 и US 5580578), ЕР 463877, ЕР 453001, WO 9116042, US 5840332, GB 1219026, WO 8300435, ЕР 40590, ЕР 225189, US 2002/0051818 (US 2001/0005716, US 2001/0024660), ЕР 810857 (US 6228396, WO 9535100) и US 5350741 и в специальной литературе: Gruber Р и др., Ad Drug Del Rev, т.1, cc.1-18 (1987); Rao S и Ritschel WA, S.T.P. Pharma Sci, т.5, cc.19-29 (1995); Evans D.F. и др., Gut, т.29, cc.1035-1041 (1988); Lee V.H.L. и др., Peptide and protein drug delivery, под ред. Lee V.H.L., Marcel Dekker New York, cc. 712-720 (1990); Rubinstein A., Crit Rev Ther Drug Carrier Syst, т.12 (вып.2 и 3), cc.101-149 (1995); Wilding I.R. и др., Pharmac Ther, т.62, cc.97-124 (1994); Peeters R. и Kinget R., Int J Pharm, т.94, cc.125-134 (1993); Evans D.F. и др., Gut, т.29, cc.1035-1041 (1988); Ashford M. и др., Int J Pharm, т.91, cc.241-245 (1993); Ashford M и др., Int J Pharm, т.95, cc.193-199 (1993); Follonier N и Doelker E, S.T.P. Pharma Sci, т.2, cc.141-158 (1992); Hwang S.J. и др., Crit Rev Ther Drug Carrier Syst, т.15, cc.243-284 (1998); Coupe A.J. и др., Pharm Res, т.8, cc.360-364 (1991); Mooter van den G. и Kinget R., Drug Del, т.2, cc.81-93 (1995); Wilding I.R. и др., Pharmac Ther, т.62, cc.97-124 (1994); Wilding I.R. и др., Int J Pharm, т.111, cc.99-102 (1994); Fukui E и др., Int J Pharm, т.204, cc.7-15 (2000); Gazzaniga А. и др., Pharma Sci, т.5 (вып.1), cc.83-88 (1995); Ishibashi Т. и др., Int J Pharm, т.168, cc.31-40 (1998); Ishibashi Т. и др., J Control Release, т.57, cc.45-53 (1999); Kraeling M.E.K. и Ritschel W.A., Methods Find Exp Clin Pharmacol, т.14(3), cc.199-209 (1992); Ashford M. и др., J Controlled Release, т.26, cc.213-220 (1993); Ashford M. и др., J Controlled Release, т.30, cc.225-232 (1994); Rubinstein А. и др., Pharm Res, т.10, cc.258-263 (1993); Sriamornsak P., Int. J. Pharm., т.169, cc.213-220 (1998); Sriamornsak P. и Nunthanid, J. Int. J. Pharm., т.160, cc.207-212 (1998); Sriamornsak P., Puttipipatkhachorn S., Prakongpan S., Int. J. Pharm., т.156, cc.189-194 (1997); Sriamornsak P. и др., J. Controlled Release, т.47, cc.221-232 (1997); Sriamornsak P., Int. J. Pharm., т.169, cc.213-220 (1998); Wakerly Z. и др., Pharm. Res., т.13, cc.1210-1212 (1996); Macleod G.S. и др., J. Controlled Release, т.58, cc.303-310 (1999); Macleod G.S. и др., Int. J. Pharm., т.187, cc.251-257 (1999); Munjeri О. и др., J. Controlled Release, т.46, cc.273-278 (1997).

При разработке системы доставки лекарственных средств, предназначенной для доставки в удаленные отделы желудочно-кишечного тракта (например, ободочную кишку) следует учитывать следующие важные параметры, такие как величина рН (разработка рН-контролируемых систем), время прохождения через желудочно-кишечный тракт (разработка систем с контролируемым временем высвобождения) и деградируемые в ободочной кишке полимеры, например деградируемые полисахариды.

При избирательной доставке активного вещества в определенные отделы желудочно-кишечного тракта обеспечивается высокая концентрация активного вещества в поврежденном отделе и низкая системная нагрузка, что позволяет снизить побочные эффекты. По сравнению с системной доставкой активного вещества использование избирательной доставки обеспечивает снижение степени разложения активного вещества, повышение степени абсорбции, более эффективный профиль абсорбции и снижение местных побочных эффектов.

В настоящее время для лечения воспалительных заболеваний кишечника существует острая необходимость в фармацевтических лекарственных формах, предназначенных для контролируемого, направленного и эффективного введения и/или доставки активного вещества в поврежденный отдел, причем способ введения таких лекарственных форм должен быть простым и не требующим помощи медицинского персонала, и в то же время такие формы должны быть экономичными, эффективными, безопасными с минимальным количеством побочных эффектов в отношении человека или животных.

Краткое описание настоящего изобретения

Объектом настоящего изобретения являются новые фармацевтические лекарственные формы, предназначенные для контролируемой и/или направленной доставки активного вещества в желудочно-кишечный тракт человека и животных, предпочтительно в определенные отделы желудочно-кишечного тракта. Фармацевтические лекарственные формы по настоящему изобретению обеспечивают контролируемое высвобождение активного вещества в предварительно определенных концентрациях в определенные отделы желудочно-кишечного тракта, прежде всего в удаленные отделы желудочно-кишечного тракта человека или животных. Несмотря на то что фармацевтические лекарственные формы по настоящему изобретению были разработаны для использования в качестве активного вещества N-(2-(2-фталимидоэтокси)ацетил)-L-аланил-D-глутаминовой кислоты (LK 423), концепцию изобретения и фармацевтические лекарственные формы по настоящему изобретению можно использовать для других активных веществ, для которых необходима контролируемая и/или направленная доставка в определенные отделы желудочно-кишечного тракта.

Фармацевтические лекарственные формы по настоящему изобретению можно использовать для лечения хронических воспалительных заболеваний, таких как воспалительные заболевания кишечника человека и животных.

В настоящем изобретении предлагается новая фармацевтическая лекарственная форма, включающая активное вещество. Предпочтительные варианты осуществления настоящего изобретения описаны в зависимых пунктах формулы изобретения. В настоящем изобретении предлагается также способ лечения.

Описание чертежей

На фиг.1 показано схематическое изображение фармацевтической лекарственной формы по настоящему изобретению.

На фиг.2 показан профиль высвобождения активного вещества из микрокапсул размером 1600-1200 мкм, покрытых смесью 10% Eudragit® RS/Eudragit® RL в соотношении 1:1 и 30% Eudragit® L-55, как описано в примере 1.

На фиг.3 показан профиль высвобождения активного вещества из микрокапсул размером 1250-2000 мкм, покрытых смесью 3% Eudragit® RS/Eudragit® RL в соотношении 1:1 и 30% Eudragit® L-55, как описано в примере 2.

На фиг.4 показан профиль высвобождения активного вещества из таблеток, включающих микрокапсулы с одним слоем покрытия и спрессованных в таблетки со смесью фталата гидроксипропилметилцеллюлозы (НРМСР) и Kollidon® SR, как описано в примере 3.

На фиг.5 показана слизистая оболочка кишечника с индуцированным декстрансульфатом натрия (DSS) коагуляционным некрозом, необработанная LK 423. В области некроза отсутствует поверхностный и гландулярный эпителий. Участки слизистой оболочки пронизаны воспалительными клетками. Значительный участок кровоизлияния окружен воспалительными клетками, расположенными в сильно отечной подслизистой оболочке.

Орган: ободочная кишка, контрастирование - ГЭ (гематоксилин - эозин), увеличение: 40х.

На фиг.6 показан некротический участок слизистой оболочки с индуцированным DSS коагуляционным некрозом, обработанный соединением LK 423. Участок слизистой оболочки пронизан воспалительными клетками (активный воспалительный процесс), включая значительное число фибробластов. Поверхность слизистой оболочки покрыта эпителием неравномерной толщины, который отслаивается от поверхности ткани. В слизистой отсутствует обновление гландулярного эпителия. Воспалительные клетки и фибробласты накапливаются в отечной подслизистой оболочке под тонкой мышечной пластиной.

Орган: ободочная кишка, контрастирование - ГЭ (гематоксилин - эозин), увеличение: 40х.

На фиг.7 показан некротический участок слизистой оболочки с индуцированным DSS коагуляционным некрозом, обработанный микрокапсулами, включающими LK 423 в составе фармацевтической лекарственной формы по настоящему изобретению. Грануляционная ткань расположена в участке некроза слизистой и подслизистой оболочек. Грануляционная ткань в слизистой оболочке покрыта поверхностным эпителием на границах повреждения. Наблюдается новообразование правильно структурированных желез и лимфатических фолликул. Отсутствуют острые кровоизлияния и острые воспаленные инфильтраты.

Орган: ободочная кишка, контрастирование - ГЭ (гематоксилин - эозин), увеличение: 40х.

Подробное описание вариантов осуществления настоящего изобретения

Установлено, что фармацевтические лекарственные формы по настоящему изобретению, включающие активное вещество, можно использовать для контролируемой и/или направленной доставки активного вещества в определенные отделы желудочно-кишечного тракта, прежде всего в удаленные отделы желудочно-кишечного тракта человека и животных, например в подвздошную кишку, слепую кишку и ободочную кишку.

Предпочтительно, фармацевтические лекарственные формы по настоящему изобретению включают активное вещество N-(2-(2-фталимидоэтокси)ацетил)-L-аланил-D-глутаминовую кислоту (LK 423).

Фармацевтические лекарственные формы по настоящему изобретению включают ядро, внутренний слой покрытия и необязательно внешний слой покрытия.

Тремин «ядро», использованный в данном контексте, означает центральную часть фармацевтической лекарственной формы, включающую активное вещество per se или включающую активное вещество, инкапсулированное в полисахаридную матрицу. Указанное ядро получают в виде сферической частицы, которую выбирают из группы, включающей микросферу, микрочастицу, пеллет, гранулу или другой аналог и/или аналогичную форму.

Термин «покрытие», использованный в данном контексте, означает слой, окружающий ядро.

Ядро находится во внутренней части фармацевтической лекарственной формы по настоящему изобретению. Фармацевтическая лекарственная форма включает несколько покрытий, и, таким образом, ядро содержится во внутренней части, окруженной одним слоем внутреннего покрытия и необязательно одним слоем внешнего покрытия.

Термин «внутреннее покрытие», использованный в данном контексте, означает покрытие, которое наносят непосредственно на ядро, и является взаимозаменяемым с терминами «замедляющее покрытие», «покрытие замедляющего типа», «покрытие из замедляющих полимеров» и «покрытие для замедленного высвобождения».

Термин «субпокрытие», использованный в данном контексте, означает слой, расположенный под внутренним или под внешним покрытием для изоляции ядра от внутреннего покрытия и/или внутреннего покрытия от внешнего покрытия. Указанное покрытие используют в случае несовместимости между компонентами ядра и компонентами внутреннего покрытия и/или между компонентами внутреннего и внешнего покрытий.

Термин «внешнее покрытие», использованный в данном контексте, означает покрытие, которое наносят на внутреннее покрытие, и является взаимозаменяемым с терминами «энтеросолюбильное покрытие», «покрытие, устойчивое к действию желудочного сока», «покрытие, устойчивое к действие кислоты», «покрытие из устойчивых к действию желудочного сока и/или кислоты полимеров».

В составе фармацевтической лекарственной формы по настоящему изобретению ядро включает активное вещество и полисахарид (образующий полисахаридную матрицу), причем отношение содержания активного вещества к содержанию полисахарида составляет приблизительно от 4:1 до приблизительно 1:4 (мас./мас.). Предпочтительно активным веществом является LK 423, а отношение содержания LK 423 к полисахариду составляет приблизительно 1:1 (мас./мас.). Полисахарид выбирают из группы, включающей пектин или альгинат, в форме кислоты или в форме соли металла, галактоманнаны, ковалентно сшитый декстран, амилозу, ксантаны, каррагенан и крахмал или комбинации указанных полисахаридов или их солей с аналогичной избирательной способностью к деградации. Предпочтительно полисахаридом является пектин, более предпочтительно в форме соли кальция (пектинат кальция).

Предпочтительно ядро представляет собой твердую дисперсию активного вещества LK 423 в пектинате кальция, который образует матрицу пектината кальция. Матрица пектината кальция является избирательно деградируемой бактериальной флорой в удаленных отделах желудочно-кишечного тракта. При контактировании с водной фазой он набухает, образует гидрогель, через который высвобождается активное вещество. Активное вещество можно растворять, суспендировать или частично растворять или суспендировать в матрице. Твердая дисперсия представляет собой сферические шарики.

Кроме того, ядро предпочтительно включает глидант. Использование глидантов приводит к повышению гомогенности суспензий в процессе получения ядра. Содержание глиданта, если он присутствует, составляет от приблизительно 15 до приблизительно 60% (мас./мас.) в расчете на массу ядра. Глидант в составе ядра выбирают из группы, включающей стеарат магния, стеарат кальция или аэросил. Предпочтительным глидантом является стеарат магния или аэросил.

Диаметр ядер фармацевтических лекарственных форм по настоящему изобретению составляет от приблизительно 100 мкм до приблизительно 2800 мкм.

Ядро фармацевтической лекарственной формы по настоящему изобретению покрыто внутренним покрытием, которое обеспечивает замедленное высвобождение активного вещества из ядра. Внутреннее покрытие предотвращает высвобождение активного вещества в проксимальных отделах тонкой кишки и способствует его высвобождению в подвздошной кишке, слепой кишке и ободочной кишке.

Внутреннее покрытие включает полимер, нерастворимый в воде и частично проницаемый для воды и водных растворов. Полимер выбирают из группы, включающей сополимеры эфиров метакрилатов, смесь поливинилацетата (ПВА) и поливинилпирролидона (ПВП) и комбинации указанных соединений. Внутреннее покрытие включает комбинацию двух или более полимеров. Если внутреннее покрытие включает комбинацию двух полимеров, то они оба являются рН-независимыми и нерастворимыми в водной среде. Комбинацию двух полимеров выбирают из группы, включающей сополимеры эфиров метакрилатов (комбинация сополимеров эфиров акриловой и метакриловой кислот с низким содержанием четвертичных аммонийных групп), например продукты Eudragit RS, Eudragit RL. Предпочтительно внутреннее покрытие включает комбинацию производных эфиров метакриловой и акриловой кислот, которые являются сополимерами эфиров акриловой и метакриловой кислот с низким содержанием четвертичных аммонийных групп, при этом молярное соотношение аммонийных групп к остальным нейтральным эфирам составляет 1:20 в первом полимере и 1:40 во втором полимере. Более предпочтительно первый полимер является аммонийно-метакрилатным сополимером типа А по USP/NF (например, продукт Eudragit® RL), а второй полимер - аммонийно-метакрилатным сополимером типа В по инструкции USP/NF (например, продукт Eudragit® RS). Предпочтительно сополимеры наносят на ядро в виде дисперсии, более предпочтительно в виде 30% водной дисперсии.

Внутреннее покрытие предпочтительно включает другие фармацевтически приемлемые эксципиенты. Пригодные фармацевтически приемлемые эксципиенты выбирают из группы, включающей глидант, пластификатор, пеногаситель и пигмент.

Глидант для внутреннего покрытия выбирают из группы, включающей гидратированный силикат магния (тальк), каолин и моностеарат глицерина. Предпочтительным глидантом для внутреннего покрытия является тальк.

Предпочтительный пластификатор для внутреннего покрытия выбирают из группы, включающей триэтилцитрат, трибутилцитрат, ацетилтриэтилцитрат, ацетилтрибутилцитрат, диэтилфталат, дибутилфталат, дибутилсебакат, триацетат глицерина, триацетин, полиэтиленгликоль 6000 и моноолеат полиоксиэтилена(20)сорбитана. Предпочтительным пластификатором для внутреннего покрытия является триэтилцитрат.

В фармацевтической лекарственной форме по настоящему изобретению, включающей одно ядро и одно (внутреннее) покрытие, содержание ядра составляет от приблизительно 50% до приблизительно 98% (мас./мас.), а содержание покрытия составляет от приблизительно 2% до приблизительно 50% (мас./мас.) в расчете на общую массу фармацевтической лекарственной формы. Предпочтительно содержание ядра в указанной лекарственной форме составляет от приблизительно 70% до приблизительно 97% (мас./мас.), а содержание покрытия составляет от приблизительно 2% до приблизительно 30% (мас./мас.) в расчете на общую массу фармацевтической лекарственной формы.

В фармацевтической лекарственной форме по настоящему изобретению внешнее покрытие наносят на внутреннее покрытие. Внешнее покрытие является нерастворимым в кислотной среде при рН менее 5 и предотвращает высвобождение активного вещества в кислотной среде желудка. Внешнее покрытие предпочтительно включает полимер, растворимый при рН более 5,5 (то есть рН среды в тонкой кишке).

Внешнее покрытие включает любые полимеры, устойчивые к действию кислоты, которые выбирают из группы, включающей сополимеры производных метакриловой кислоты (например, продукты Eudragit® L, Eudragit® L-55, Eudragit® S, Eudragit® FS), HPMCP, фталат гидроксиэтилцеллюлозы (НЕСР), фталат-ацетат целлюлозы (CAP), поливинилацетилфталат (PAP), сукцинат-ацетат гидроксипропилметилцеллюлозы (НРМС AS) или комбинации указанных соединений. Предпочтительно внешнее покрытие включает анионный сополимер на основе метакриловой кислоты и этилакрилата. Согласно USP/NF пригодным полимером является сополимер метакриловой кислоты типа С (например, продукт Eudragit® L-55) в виде дисперсии, более предпочтительно в виде 30% водной дисперсии.

Внешнее покрытие по настоящему изобретению предпочтительно включает другие фармацевтически приемлемые эксципиенты, которые выбирают из группы, включающей глидант, пластификатор, пеногаситель и пигмент. Предпочтительно используют глидант и пластификатор.

Глидант для внешнего покрытия выбирают из группы, включающей тальк, каолин и моностеарат глицерина. Предпочтительным глидантом для внешнего покрытия является тальк.

Пластификатор для внешнего покрытия выбирают из группы, включающей триэтилцитрат, трибутилцитрат, ацетилтриэтилцитрат, ацетилтрибутилцитрат, диэтилфталат, дибутилфталат, дибутилсебакат, триацетат глицерина, триацетин, полиэтиленгликоль 6000 и моноолеат полиоксиэтилен(20)сорбитана. Предпочтительным пластификатором для внешнего покрытия является триэтилцитрат.

В фармацевтической лекарственной форме по настоящему изобретению, содержащей одно ядро, внутреннее и внешнее покрытие, содержание ядра составляет от приблизительно 30% до приблизительно 90% (мас./мас.), содержание внутреннего покрытия составляет от приблизительно 2% до приблизительно 50% (мас./мас.) и содержание внешнего покрытия составляет от приблизительно 6% до приблизительно 50% (мас./мас.) в расчете на общую массу фармацевтической лекарственной формы. Предпочтительно содержание ядра в указанной лекарственной форме составляет от приблизительно 55% до приблизительно 90% (мас./мас.), а содержание внутреннего покрытия составляет от приблизительно 2% до приблизительно 30% (мас./мас.), и содержание внешнего покрытия составляет от приблизительно 6 до приблизительно 32% (мас./мас.) в расчете на общую массу фармацевтической лекарственной формы.

Участок и кинетику высвобождения активного вещества из фармацевтической лекарственной формы по настоящему изобретению варьируют изменением размера ядра, содержания активного вещества, толщины и состава внутреннего покрытия, а также толщины и состава внешнего покрытия. Используют различные комбинации ядер различного диаметра, а также внутреннего и внешнего покрытия различной толщины и состава. Увеличение толщины внутреннего и/или внешнего покрытий приводит к замедлению высвобождения активного вещества.

В наиболее предпочтительном объекте осуществления настоящего изобретения фармацевтическая лекарственная форма, пригодная для контролируемой и/или направленной доставки активного вещества в удаленные отделы желудочно-кишечного тракта, включает следующие элементы:

- ядро-матрицу пектината кальция, в которой диспергирован продукт LK 423, включающую стеарат магния в качестве глиданта, и

- внутреннее покрытие, включающее полимеры Eudragit RS и Eudragit RL, тальк в качестве глиданта и триэтилцитрат в качестве пластификатора, и

- внешнее покрытие, включающее полимер Eudragit L-55, тальк в качестве глиданта и триэтилцитрат в качестве пластификатора.

Фармацевтическую лекарственную форму по настоящему изобретению получают в форме микрокапсулы, микрочастицы с покрытием, микросферы с покрытием, гранулы с покрытием, пеллета с покрытием, таблетки, капсулы и т.п. Предпочтительно фармацевтическую лекарственную форму по настоящему изобретению получают в форме микрокапсулы, инкапсулированной в инертную матрицу таблетки или в инертную капсулу, чтобы упростить способ введения и обеспечить более точную дозировку. Инертная матрица таблетки или капсулы не должна влиять на высвобождение лекарственного средства.

Термин «микрокапсула», использованный в данном контексте, означает сферическую частицу с размерами от 1 мкм до 3000 мкм, включающую ядро и по крайней мере одно покрытие. Микрокапсулы включены в различные лекарственные формы: суспензии, капсулы или таблетки, а также их используют в качестве порошков.

Термин «микросфера», использованный в данном контексте, означает сферическую частицу размером от 1 мкм до 3000 мкм, включающую активное вещество, полисахарид (образующий полисахаридную матрицу) и один или более эксципиентов.

Другой вариант осуществления настоящего изобретения относится к фармацевтической лекарственной форме, не содержащей внешнего покрытия. Предпочтительно фармацевтическую лекарственную форму получают в виде микрокапсул, включающих ядро и внутреннее покрытие. Вместо внешнего покрытия такие микрокапсулы инкапсулируют в следующие элементы:

- матрицу таблетки, устойчивую к действию желудочного сока, в форме таблетки, или

- инертную матрицу таблетки, на которую затем наносят покрытие из устойчивого к действию желудочного сока и/или кислоты полимера, в форме таблетки, или

- капсулу из устойчивого к действию желудочного сока и/или кислоты полимера, или

- инертную капсулу, на которую затем наносят покрытие из устойчивого к действию желудочного сока и/или кислоты полимера.

Устойчивые к действию желудочного сока и/или кислоты полимеры в составе указанной фармацевтической лекарственной формы растворимы в кислотной среде при рН более 5 (рН среды кишечника) и их выбирают из группы, включающей любые полимеры, устойчивые к действию кислоты, которые выбирают из группы, включающей сополимеры производных метакриловой кислоты (например, продукты Eudragit® L, Eudragit® L-55, Eudragit® S, Eudragit® FS), HPMCP, фталат гидроксиэтилцеллюлозы (НЕСР), фталат-ацетат целлюлозы (CAP), поливинилацетилфталат (PAP), HPMC AS или комбинации указанных соединений.

Для модулирования высвобождения лекарственного средства и/или упрощения способа получения таблеток или капсул можно использовать другие соединения. Например, при использовании в качестве устойчивого к действию желудочного сока полимера НРМСР для модуляции высвобождения лекарственного средства добавляют смесь ПВА и ПВП (например, продукт Kollidon® SR).

Более предпочтительно фармацевтическая лекарственная форма согласно данному варианту осуществления настоящего изобретения представляет собой таблетку, включающую микрокапсулы (включающую ядро и внутреннее покрытие), инкапсулированные в матрицу таблетки, предпочтительно представляющую собой комбинацию НРМСР со смесью ПВА и ПВП (например, продукт Kollidon® SR).

В фармацевтической лекарственной форме согласно данному варианту осуществления настоящего изобретения содержание ядра составляет от приблизительно 10% до приблизительно 90% (мас./мас.) в расчете на общую массу фармацевтической лекарственной формы. Содержание внутреннего покрытия составляет от приблизительно 2% до приблизительно 50% (мас./мас.), и содержание матрицы таблетки составляет от приблизительно 6% до приблизительно 90% (мас./мас.) в расчете на общую массу фармацевтической лекарственной формы. Предпочтительно содержание ядра в указанной лекарственной форме составляет от приблизительно 10% до приблизительно 80% (мас./мас.) в расчете на общую массу фармацевтической лекарственной формы. Содержание внутреннего покрытия составляет от приблизительно 2% до приблизительно 30% (мас./мас.), и содержание матрицы таблетки составляет от приблизительно 6 до приблизительно 90% (мас./мас.) в расчете на общую массу фармацевтической лекарственной формы.

Фармацевтические лекарственные формы по настоящему изобретению вводят человеку или животным в количестве от приблизительно 10 мг до приблизительно 1000 мг продукта LK 423 в виде одной дозы или нескольких разделенных доз.

Другой объект настоящего изобретения относится к способам получения фармацевтических лекарственных форм для контролируемой и/или направленной доставки активного вещества (например, LK 423).

Микрокапсулы по настоящему изобретению получают различными способами. Для получения ядер пригодным является любой способ, который позволяет получать твердые дисперсии активного вещества в полисахариде, образующем полисахаридную матрицу в форме шариков, прежде всего способ ионотропного гелеобразования, основанный на быстром отверждении полисахаридных капель в растворе ионов, с которыми полисахарид образует нерастворимые соли. Пригодные способы включают также распылительную сушку, экстракцию растворителем, упаривание и способ псевдоожиженного слоя.

Покрытия для ядер и микрокапсул получают способом псевдоожиженного слоя или любым другим способом, пригодным для получения пленочного покрытия. Другие способы включают экстракцию растворителем или упаривание.

Другой объект настоящего изобретения относится к способам контролируемой и/или направленной доставки активного вещества (например, LK 423) с одновременным применением или введением любой фармацевтической лекарственной формы по настоящему изобретению. В другом варианте объект настоящего изобретения относится к способам контролируемой и/или направленной доставки активного вещества во все удаленные отделы желудочно-кишечного тракта.

Объект настоящего изобретения относится также к способам лечения хронических воспалительных заболеваний человека или животных с использованием доставки любой фармацевтической лекарственной формы по настоящему изобретению. Хронические воспалительные заболевания выбирают из группы, включающей воспалительные заболевания кишечника человека или животных, в основном колит, неспецифический язвенный колит и/или болезнь Крона.

При использовании способа лечения хронических воспалительных заболеваний активное вещество вводят человеку или животным в количестве от приблизительно 10 мг до приблизительно 1000 мг в сут в виде одной дозы или в виде нескольких разделенных доз.

Кроме способов лечения объектом настоящего изобретения является также применение активного вещества для получения любой фармацевтической лекарственной формы по настоящему изобретению, предназначенной для лечения хронических воспалительных заболеваний человека или животных. Хронические воспалительные заболевания выбирают из группы, включающей воспалительные заболевания кишечника человека или животных, в основном колит, неспецифический язвенный колит и/или болезнь Крона.

При использовании активного вещества для получения любой фармацевтической лекарственной формы по настоящему изобретению для лечения хронических воспалительных заболеваний активное вещество вводят человеку или животным в количестве от приблизительно 10 мг до приблизительно 1000 мг в сут в виде одной дозы или в виде нескольких разделенных доз.

Пример 1

Получение микрокапсул для доставки LK 423 в ободочную кишку крысы

Получение ядер

Ядра получали способом ионотропного гелеобразования, который основан на быстром отверждении капель раствора полисахарида в растворе ионов, с которыми полисахариды образуют нерастворимые соли.

Для получения растворов пектина LMA (пектин Genu, тип LM-104 AS-Z, фирмы Hercules, Нидерланды) пектин растворяли в деминерализованной воде по крайней мере в течение 12 ч при комнатной температуре. LK 423 и стеарат магния суспендировали в растворе пектина и полученную дисперсию перемешивали в течение 3 ч на магнитной мешалке. Дисперсию по каплям вручную добавляли в 0,25 М раствор CaCl₂. Полученные ядра отверждали в растворе CaCl₂ в течение 30 мин, фильтровали, промывали деминерализованной водой и сушили в течение 24 ч при комнатной температуре и атмосферном давлении. Непосредственно перед нанесением покрытия ядра сушили в камере Вюрстера.

Состав дисперсии для получения ядер приведен в таблице 1.

Таблица 1 Состав дисперсии для получения ядер Ингредиент Количество Пектин 6,0 г Деминерализованная вода 100 г LK 423 6,0 г Стеарат магния 2,7 г

Высушенные ядра просеивали и для получения микрокапсул использовали только фракцию с размером частиц 1250-1600 мкм.

Способ нанесения покрытий

Нанесение покрытий проводили способом псевдоожиженного слоя в приборе Apparatus Niro-Aeromatic STREA-1.

Составы дисперсий для покрытия ядер приведены в таблице 2.

Таблица 2 Состав дисперсий для покрытия ядер Внутреннее покрытие Внешнее покрытие Eudragit® RS/RL 30 D
(1:1) (30% мас./мас. дисперсия) 48,33 г Eudragit L 30 D-55 (30% мас./мас. дисперсия) 53,0 г Триэтилцитрат 3,63 г Триэтилцитрат 1,6 г Тальк 7,26 г Тальк 8 г Деминерализованная вода 40,78 г Деминерализованная вода 37,4 г

В таблице указаны массы отдельных компонентов в расчете на 100 г дисперсии.

Внутреннее покрытие наносили в следующих условиях:

- Нагретый поток воздуха на входе: уровень 5,

- Температура воздуха на входе: 40°С,

- Давление при распылении: 2 бар,

- Скорость потока суспензии для покрытия: 1,3 г/мин.

Содержание полимеров в составе внутреннего покрытия составляет 10 мас.% в расчете на массу исходных непокрытых ядер. Ядра с внутренним покрытием отверждали в течение 24 ч при 40°С и затем наносили внешнее покрытие в следующих условиях:

- Нагретый поток воздуха на входе: уровень 5,

- Температура воздуха на входе: 40°С,

- Давление при распылении: 1,5 бар,

- Скорость потока суспензии для покрытия: 1,9 г/мин.

Содержание полимера в составе внешнего покрытия составляет 30 мас.% в расчете на массу непокрытых ядер.

Все испытания проводили по крайней мере через 24 ч после нанесения внешнего покрытия. При этом микрокапсулы хранили на поддонах при комнатной температуре.

Поскольку в испытаниях использовали малые количества образцов, то покрытия наносили на 1-2 г ядер или ядер с внутренним покрытием и добавляли соответствующее количество окрашенных пеллетов плацебо, которые значительно отличаются по цвету (до 40 г). Размер полученных микрокапсул составлял 1600-2000 мкм. Содержание LK 423 в микрокапсулах составляло 14, 5% (мас./мас.).

Оценка высвобождения активного вещества in vitro

Испытания по высвобождению LK 423 in vitro проводили с использованием описанных выше микрокапсул по методике USP XXVI в приборе 2 в течение 12 ч в различных средах в следующем порядке: в течение первых 3 ч в растворе HCl при рН 3,3, в течение следующих 3 ч в фосфатном буферном растворе при рН 7,1, в течение следующего 1 ч в фосфатном буферном растворе при рН 7,6 и и в течение 5 ч в фосфатном буферном растворе при рН 7,1. Указанные условия близки к условиям в желудочно-кишечном тракте крысы. Профиль высвобождения LK 423 показан на фиг.2. Полученные результаты свидетельствуют о том, что в течение первых 7 ч высвобождается 20% инкапсулированного лекарственного средства с последующим высвобождением еще по крайней мере 50% лекарственного средства в течение следующих 4 ч.

Пример 2

Получение микрокапсул для доставки LK 423 в ободочную кишку человека

Ядра получали согласно способу, описанному в примере 1, отбирали ядра размером 1000-1600 мкм и наносили покрытие. Полимеры в составе внутреннего покрытия (таблица 2) составляют 3 мас.% в расчете на массу непокрытых ядер. Содержание полимера в составе внешнего покрытия составляет 30 мас.% в расчете на массу непокрытых ядер. Условия нанесения покрытий описаны в примере 1.

Размер микрокапсул составлял 1250-2000 мкм. Содержание активного вещества составляло 10,8% (мас./мас.).

Оценка высвобождения активного вещества in vitro

Испытание по высвобождению LK 423 in vitro проводили с использованием описанных выше микрокапсул по методике USP XXVI в приборе 2 в течение 2 ч в растворе HCl при рН 1,2, в течение следующих 2 ч в фосфатном буферном растворе при рН 6,8, в течение следующего 1 ч в фосфатном буферном растворе при рН 7,5 и, наконец, в течение 4 ч в фосфатном буферном растворе при рН 6,0. Указанные условия близки к условиям в желудочно-кишечном тракте человека. Профиль высвобождения LK 423 показан на фиг.3. Полученные результаты свидетельствуют о том, что в течение первых 3 ч высвобождается менее 15% лекарственного средства с последующим высвобождением еще по крайней мере 60% лекарственного средства в течение следующих 4 ч.

Пример 3

Получение микрокапсул для доставки LK 423

Ядра получали согласно способу, описанному в примере 1. Для получения растворов пектина LMA (пектин Genu, тип LM-104 AS-Z, фирмы Hercules, Нидерланды) пектин растворяли в деминерализованной воде по крайней мере в течение 12 ч при комнатной температуре. LK 423 и аэросил 200 (фирмы Degussa) суспендировали в растворе пектина и полученную дисперсию перемешивали в течение 1-2 ч на магнитной мешалке. Дисперсию по каплям с помощью инфузионного насоса добавляли в ледяной 0,272 М раствор CaCl₂. На 100 мл раствора CaCl₂ использовали 2,4 г дисперсии. Полученные ядра отверждали в растворе CaCl₂ в течение 5 мин, фильтровали, промывали деминерализованной водой и сушили в течение 24 ч при комнатной температуре и атмосферном давлении. Непосредственно перед нанесением покрытия ядра сушили в камере Вюрстера. Количества использованных веществ приведены в таблице 3.

Таблица 3 Состав дисперсии для получения ядер. Ингредиент Количество Пектин 3,5 г Деминерализованная вода 100 г LK 423 3,5 г Аэросил 200 5,512 г

Высушенные ядра просеивали и для получения микрокапсул использовали только фракцию с размером частиц 1600-2000 мкм.

Условия нанесения покрытий описаны в примере 1, за исключением того, что соотношение полимеров в составе внутреннего покрытия Eudragit RS/Eudragit RL составляло 7:3. Содержание полимеров в составе внутреннего покрытия составляет 15 мас.% в расчете на массу непокрытых ядер. Содержание полимера в составе внешнего покрытия составляет 30 мас.% в расчете на массу непокрытых ядер.

Размер микрокапсул составлял 1600-2000 мкм. Содержание активного вещества составляет 14, 11%.

Оценка высвобождения активного вещества in vitro

Испытания по высвобождению LK 423 in vitro проводили с использованием описанных выше микрокапсул по методике USP XXVI в приборе 2 в различных средах в следующем порядке: в течение первых 2 ч в растворе HCl, содержащем 2 г/л NaCl, при рН 1,2, и, наконец, в фосфатном буферном растворе при рН 6,8. Полученные результаты свидетельствуют о том, что в течение первых 4 ч высвобождается менее 25% инкапсулированного лекарственного средства с последующим высвобождением еще по крайней мере 55% лекарственного средства в течение следующих 5 ч.

Пример 4

Получение таблеток для доставки LK 423 в ободочную кишку человека

Ядра, содержащие твердую дисперсию LK 423 в пектинате кальция (образующего матрицу пектината кальция) покрывали полимером Eudragit® RS. Полученные микрокапсулы инкапсулировали в матрицу таблетки, представляющую собой комбинацию НРМСР и продукта Kollidon® SR. На микрокапсулы наносили комбинацию указанных двух полимеров.

Получение ядер

Ядра получали способом ионотропного гелеобразования. Процесс проводили, как описано в примере 1, за исключением того, что стеарат магния не использовали. Отношение содержания пектина LMA (пектин GENU LMA, фирмы Hercules) к содержанию LK 423 в исходной дисперсии составляло 1:3 (мас./мас.). Количество воды в 1 г пектина в исходной дисперсии составляло от 25 до 30 г.

Нанесение покрытий

Внутреннее покрытие наносили способом упаривания растворителя в системе ацетон/вазелиновое масло при соответствующем соотношении 6 мл/8 мл. 0,5 г Ядер суспендировали в ацетоне, в котором был растворен полимер Eudragit® RS (3,0 г) и суспендирован стеарат магния (0,2 г). Ацетон упаривали при перемешивании при 40°С и полученные микрокапсулы сушили при комнатной температуре и пониженном давлении в течение ночи. Внешнее покрытие не наносили. Для получения таблеток использовали фракцию размером 1250-1600 мкм. Содержание LK 423 в микрокапсулах составляло 62% (мас./мас.).

Получение таблеток

Таблетки получали на таблетировочной машине. Микрокапсулы наносили на слой физической смеси НРМСР (HP-55, фирмы Shin-Etsu) и продукта Kollidon® SR (фирмы BASF), а на них наносили еще один слой смеси НРМСР и продукта Kollidon® SR. Смесь полимеров наносили также на обе боковые поверхности таблеток с целью предотвращения прямого контактирования микрокапсул с окружающей средой. Для получения 1 таблетки использовали 150 мг (2×75 мг) НРМСР, 20 мг (2×10 мг) продукта Kollidon® SR и 32 мг микрокапсул. Содержание LK 423 составляло 20 мг на 1 таблетку, т.е. 9,9% (мас./мас.).

Оценка высвобождения активного вещества in vitro

Испытания по высвобождению LK 423 in vitro проводили с использованием описанных выше таблеток по методике USP XXVI в приборе 2 в различных средах в следующем порядке: в течение первых 2 ч в растворе HCl, содержащем 2 г/л NaCl, при рН 1,2, в течение 3 ч в фосфатном буферном растворе при рН 6,8 и, наконец, в фосфатном буферном растворе Соренсена с добавлением пектиназы (продукт Pectinec Ultra SP-L, фирмы Novo Nordisk) при рН 6,0. Указанные условия близки к условиям в желудочно-кишечном тракте человека. Профиль высвобождения LK 423 показан на фиг.4. Полученные результаты свидетельствуют о том, что в течение первых 3 ч высвобождается менее 15% инкапсулированного лекарственного средства с последующим высвобождением еще по крайней мере 60% лекарственного средства в течение следующих 4 ч.

Пример 5

Оценка противоязвенного действия in vivo микрокапсул, содержащих LK 423

Язвенные изменения в подвздошной, слепой и ободочной кишках индуцировали у крыс, получавших питьевую воду, содержащую 2% декстринсульфата натрия (DSS) в течение 5 сут.

DSS является соединением, после перорального введения которого в виде водного раствора в слизистых оболочках подвздошной, слепой и ободочной кишки развиваются воспалительные и язвенные изменения.

В испытаниях использовали 2 контрольные группы и 2 экспериментальные группы (А и В) крыс, при этом каждая группа включала одинаковое число самцов и самок крыс. Животных рандомизировали в различные группы. До 7 ч вечера в день 5-ти животным обеспечивали свободный доступ к корму, затем животных кормили только между 12 ч дня и 6 ч вечера, в остальное время животных не кормили.

В день 6 животных поили водой, содержащей 1% DSS. Животные группы А получали чистое соединение LK 423 в дозе 75 мг/кг. Чистое соединение LK 423 получали в виде суспензии в 1% желатине (продукт Gelatin GE0020, фирмы Scharlau) и вводили животным перорально через трубку в объеме 1 мл.

Животные группы В получали микрокапсулы, содержащие LK 423 в дозе 75 мг/кг (полученные, как описано в примере 1). Микрокапсулы, диспергированные в 1,5-2 мл 1% желатина и содержащие LK 423, вводили животным перорально через трубку.

В начале эксперимента масса тела крыс составляла от 220 до 250 г. В ходе эксперимента масса тела выживших животных изменялась незначительно во всех группах. Массу тела регистрировали в исходный день и в дни 6 и 12. Для определения гематологических параметров у животных отбирали по 1,5 мл крови из периорбитального синуса в исходный день и в день 5 эксперимента, а также из брюшной аорты в день 12 эксперимента. Количество эритроцитов и гемаглобина, а также показатель гематокрита определяли в клинической лаборатории ветеринарного факультета Института защиты жвачных животных. В день 1 эксперимента количество эритроцитов составляло от 6,93 до 7,87×10¹²/л, гемоглобина - от 139 до 149,7 г/л и гематокрита от 41,81 до 42,5% в отдельной группе. В ходе эксперимента регистрировали выживших животных, наличие диареи и крови в фекалиях или интенсивность кровотечения. В день 12 животных забивали при глубокой анестезии эфиром и проводили вскрытие. Наблюдали макроскопические изменения в подвздошной, слепой и ободочной кишке, а также интенсивность кровотечения.

При вскрытии у животных отбирали образцы кишечника и консервировали в 10% формальдегиде, получали парафиновые срезы тканей, которые проявляли гематоксилином и эозином, затем проводили патогистологический анализ.

Индуцированные DSS изменения включали коагуляционный некроз слизистой оболочки кишечника. Во всех группах (обе контрольные группы, группа А и группа В, таблица 3) оценивали повреждение ткани и реакцию окружающей ткани на повреждение (уровень регенерации), а также сопутствующие параменты: степень кровотечения в слизистой оболочке, гипертрофию слизистой оболочки с гландулярной гиперплазией и степень эпителизации поврежденной поверхности. Использовали следующие критерии:

Степень острого кровотечения в ткани и диаметр поля зрения в микроскопе при 40-кратном увеличении (4 мм):

- Отсутствие кровотечения - 0

- Небольшое кровотечение в слизистой и подслизистой оболочке диаметром менее половины поля зрения - 1

- Умеренное кровотечение в слизистой и подслизистой оболочке диаметром в половину поля зрения - 2

- Обширное кровотечение в слизистой и подслизистой оболочке диаметром более половины поля зрения - 3

- Чрезвычайно обширное кровотечение в слизистой, подслизистой оболочке, вокруг сосудов в мышечной оболочке, в серозной оболочке и в окружающих тканях - 4

Процесс регрессии - повреждение с защитной реакцией ткани:

- Отсутствие клеточного ответа (отсутствие реакции) или процесс регрессии не активирован - 0

- Умеренная клеточная инфильтрация (моноциты, гранулоциты, макрофаги, гистоциты) с фрагментацией ядер и пикнозом слизистой оболочки и подслизистой оболочки - 1

- Обширная диффузная клеточная инфильтрация (моноциты, гранулоциты, макрофаги, гистоциты) с фрагментацией ядер и пикнозом слизистой оболочки и подслизистой оболочки - 2

- Клеточная инфильтрация (моноциты, гранулоциты, макрофаги, гистоциты) в граничных участках повреждения - 3

Процесс регенерации/организация ткани:

- Отсутствие клеточной реакции - 0

- Исходная фаза (инфильтрация ткани фибрином, фагоциты, моноциты, ретикулярные мезенхимальные клетки, эндотелиальные клетки) - 1

- Грануляционная ткань (фибробласты, гистоциты, лимфоциты, моноциты) - 2

- Зрелая грануляционная ткань с новообразованными базальными клетками гландулярного эпителия, лимфоциты, волокна коллагена - 3

- Регрессия повреждения - 4

Гипертрофия слизистой оболочки и гиперплазия железистых и бокаловидных клеток:

- Отсутствие - 0

- Умеренная гиперплазия вокруг повреждения - 1

- Регенеративная гиперплазия - 2

- Избыточная гиперплазия - 3

Эпителизация повреждений:

- Отсутствие - 0

- Исходная эпителизация - 1

- Регенеративная эпителизация - 2

- Избыточная эпителизация - 3

Результаты оценки уровня повреждения, регенерации и интенсивности кровотечения в слизистой оболочке в контрольных группах представлены в таблице 4. В обеих контрольных группах индуцированный некроз ткани сопровождался инфильтрацией воспалительных клеток. В свежих повреждениях наблюдается диффузная инфильтрация клеток. В самих клетках происходит фрагментация ядер. В более старых повреждениях инфильтрация клеток сформирована в пограничную линию, которая отделяет поврежденную часть ткани от новообразованной грануляционной ткани. Гипертрофия слизистой оболочки наблюдается на границе повреждения, при этом эпителизация поверхности повреждения еще не активирована (фиг.5). В контрольных группах в основном наблюдается некроз ткани и изоляция повреждения. Процессы регенерации не наблюдаются.

В группе А индуцированный DSS некроз тканей сопровождался клеточной инфильтрацией, ростом грануляционной соединительной ткани и одновременно значительными процессами регенерации. Процессы изоляции повреждений все еще активированы. Процессы функциональной регенерации слизистой оболочки проявлялись в избыточном росте гландулярного и поверхностного эпителия. Несмотря на значительную гиперплазию окружающей ткани наблюдаются участки, обновленные только зрелой соединительной тканью (таблица 4, фиг.6). В данной группе соотношение уровней регенерации/повреждения составляет 1,35:1.

В группе В индуцированный DDS некроз тканей сопровождался умеренной клеточной инфильтрацией. После лечения поврежденная ткань заменялась новообразованной зрелой соединительной тканью, содержащей все компоненты ткани слизистой оболочки кишечника (поверхностный и гландулярный эпителий, лимфатические фолликулы и сосуды). Процессы регенерации проявлялись на уровне ткани (таблица 4, фиг.7). Соотношение уровней регенерации/повреждения составляет 3,22:1.

В таблице 4 указаны также наличие крови в фекалиях, процент животных, у которых наблюдается кровотечение в отдельных сегментах кишечника, и уровень кровотечения в слизистой и подслизистой оболочках. Указаны также снижение гематологических показателей в период от исходного дня до завершения эксперимента и смертность в отдельных группах.

Таблица 4 Действие чистого соединения LK 423 (группа А) и микрокапсул, включающих LK 423 (группа В), на язвенные изменения в подвздошной, слепой и ободочной кишке Группа Контроль Группа А (Чистое соединение) Контроль Группа В (Микрокапсулы) Доза активного вещества 0 75 мг/кг 0 75 мг/кг Число животных 6 6 10 10          

продолжение таблицы 4

Группа Контроль Группа А (Чистое соединение) Контроль Группа В (Микрокапсулы) Наличие крови в фекалиях * от ++ до +++ + от ++ до +++ +           Уровень кровотечения в слизистой оболочке # 2,0 0,6 2,0 0,2   Процент животных, у которых наблюдается кровотечение Подвздошная кишка 10 17 30 0 Слепая кишка 50 17 40 0 Ободочная кишка 50 17 70 0   Различие в гематологических показателях в день 1 и в день 12 Эритроциты ×10¹²/л (×10¹²/л) 2,20 1,25 1,78 1,02 Гемоглобин, г/л 41,6 17,2 23,7 2,3 Гематокрит, % 12,9 6,74 7,6 4,0   Смертность Смертность в % 33 33 50 0   Клеточные процессы в забитых животных# Уровень повреждения 2,5 1,75 2,2 0,9 Уровень регенерации 0 2,37 0 2,90 Гипертрофия слизистой оболочки 0,87 2,75 1,87 1,80 Эпителизация 0 2,37 0,37 1,20 * + следовые количества крови, ++ умеренное кровотечение, +++ обширное кровотечение # описано для 0-3; величины индивидуальных уровней см. в примерах

Полученные данные, указанные в таблице 4 и на фиг.5-7, свидетельствуют о том, что включение LK 423 в микрокапсулы значительно повышает пероральное терапевтическое действие LK 423. Улучшения проявляются в снижении кровотечений в различных отделах кишечника, в повышенной выживаемости животных и в ускоренном и более физиологическом обновлении слизистой оболочки кишечника. При ускоренном обновлении тканей в группе В (микрокапсулы, содержащие LK 423) наблюдаются лишь незначительные изменения показателей крови по сравнению с контрольными группами или группой А (чистое соединение А).

У животных, получавших чистое соединение LK 423 или микрокапсулы, содержащие LK 423, наблюдается ускоренная регенерация повреждений слизистой оболочки кишечника по сравнению с животными обеих контрольных групп. У животных, получавших чистое соединение LK 423, наблюдается неравномерная регенерация в отношении всех участков ткани. Эпителиальный слой кишечника, выстилающий слизистую, в которой все еще активированы воспалительные процессы, быстро регенерировался. Гландулярный эпителий, окружающий поврежденные ткани и независящий от повреждения, характеризуется признаками гиперплазии, которая превышает уровень, наблюдаемый в группе, получавшей микрокапсулы, содержащие LK 423 (группа В) по настоящему изобретению. В группе, получавшей чистое соединение LK 423 (группа А), наблюдается заметная реакция лимфатических фолликул (гиперплазия) в слизистой оболочке и более глубоком слое подслизистой оболочки. У животных, получавших микрокапсулы, содержавшие LK 423, по настоящему изобретению наблюдается более равномерная и однородная регенерация повреждений тканей слизистой оболочки, что приводит к физиологической регенерации слизистой оболочки кишечника, изоляции и подавлению воспалительных процессов в слизистой оболочке. Образование эпителиального слоя, который выстилает участки грануляционной ткани, инициируется на границах повреждения. Гиперплазия эпителия вдоль границы повреждения находилась в пределах физиологической нормы. Регенерация индуцированных повреждений слизистой оболочки кишечника у животных, получавших микрокапсулы по настоящему изобретению, является более физиологичной по сравнению с регенерацией у животных, получавших чистое соединение LK 423, и включала все компоненты ткани слизистой оболочки, равномерно распределенные в ткани без избыточного роста.

Полученные результаты свидетельствуют о том, что микрокапсулы по настоящему изобретению, в которых активное вещество LK 423 инкапсулировано в ядро пектината кальция, покрытого двумя слоями покрытий, предотвращают высвобождение LK 423 в желудке за счет внешнего покрытия. Однако наличие внутреннего покрытия обеспечивает замедленное и контролируемое высвобождение LK 423 вдоль тонкой кишки и инициирует высвобождение LK 423 в удаленных отделах тонкой кишки и предпочтительно в толстой кишке. При попадании в толстую кишку, в которой бактерии кишечника деградируют полисахаридное ядро и в результате происходит ускоренное высвобождение LK 423.

Структура фармацевтической лекарственной формы с контролируемым высвобождением по настоящему изобретению обеспечивает доставку пригодных концентраций активного вещества LK 423 в поврежденные участки с требуемой кинетикой. Указанные признаки обеспечивают оптимальное действие фармацевтической лекарственной формы по настоящему изобретению.

Настоящее изобретение относится к фармацевтическим лекарственным формам, которые применяют для контролируемой и/или направленной доставки активного вещества в определенные отделы желудочно-кишечного тракта человека или животных. Фармацевтические лекарственные формы предпочтительно включают активное вещество N-(2-(2-фталимидоэтокси)ацетил)-L-аланил-D-глутаминовую кислоту (LK 423). Описаны также способы лечения хронических воспалительных заболеваний желудочно-кишечного тракта у человека и/или животных с использованием фармацевтических лекарственных форм по настоящему изобретению. 3 н. и 18 з.п. ф-лы, 4 табл., 7 ил.

1. Фармацевтическая лекарственная форма с покрытием, включающая ядро, содержащее активное вещество N-(2-(2-фталимидоэтокси)ацетил)-L-аланил-D-глутаминовую кислоту и полисахарид, внутреннее покрытие, которое включает полимер, выбранный из группы, включающей сополимеры эфиров метакрилатов, смесь поливинилацетата и поливинилпирролидона и/или комбинации указанных соединений, внешнее покрытие, которое включает полимер, устойчивый к действию кислоты, который выбирают из группы, включающей сополимер производных метакриловой кислоты, фталат гидроксипропилметилцеллюлозы, фталат гидроксиэтилцеллюлозы, фталат-ацетат целлюлозы, поливинилацетилфталат, сукцинат-ацетат гидроксипропилметилцеллюлозы или комбинации указанных соединений.

2. Фармацевтическая лекарственная форма с покрытием по п.1, в которой полисахарид ядра выбирают из группы, включающей пектин или альгинат в форме кислоты или в форме соли металла, галактоманнаны, ковалентно сшитый декстран, амилозу, ксантаны, каррагенан и крахмал или комбинации указанных полисахаридов.

3. Фармацевтическая лекарственная форма по п.2, в которой полисахарид выбирают из группы, включающей пектин или пектинат кальция.

4. Фармацевтическая лекарственная форма с покрытием по п.1, в которой ядро представляет собой твердую дисперсию N-(2-(2-фталимидоэтокси)ацетил)-L-аланил-D-глутаминовой кислоты в пектинате кальция, который образует матрицу пектината кальция.

5. Фармацевтическая лекарственная форма с покрытием по п.1, в которой ядро дополнительно включает глидант, который выбирают из группы, включающей стеарат магния, стеарат кальция и аэросил.

6. Фармацевтическая лекарственная форма с покрытием по п.1, в которой комбинация полимеров внутреннего покрытия включает комбинацию сополимеров эфиров акриловой и метакриловой кислот с низким содержанием четвертичных аммонийных групп.

7. Фармацевтическая лекарственная форма с покрытием по п.1, в которой устойчивым к действию кислоты полимером внешнего покрытия является анионный сополимер на основе метакриловой кислоты и этилакрилата.

8. Фармацевтическая лекарственная форма с покрытием по п.1, в которой внутреннее покрытие и внешнее покрытие дополнительно включают глидант, выбранный из группы, включающей тальк, каолин и моностеарат глицерина.

9. Фармацевтическая лекарственная форма с покрытием по п.8, в которой глидантом является тальк.

10. Фармацевтическая лекарственная форма с покрытием по п.1, в которой внутреннее покрытие и внешнее покрытие дополнительно включают пластификатор, выбранный из группы, включающей триэтилцитрат, трибутилцитрат, ацетилтриэтилцитрат, ацетилтрибутилцитрат, диэтилфталат, дибутилфталат, дибутилсебакат, глицерилтриацетат, триацетин, полиэтиленгликоль 6000 и моноолеат полиоксиэтилен(20)сорбитана.

11. Фармацевтическая лекарственная форма с покрытием по п.10, в которой пластификатором является триэтилцитрат.

12. Фармацевтическая лекарственная форма с покрытием по п.1, включающая
ядро-матрицу пектината кальция, в которой диспергирована N-(2-(2-фталимидоэтокси)ацетил)-L-аланил-D-глутаминовая кислота, включающее стеарат магния, и
внутреннее покрытие, включающее комбинацию сополимеров эфиров акриловой и метакриловой кислот с низким содержанием четвертичных аммонийных групп (Eudragit RS и Eudragit RL), тальк и триэтилцитрат, и
внешнее покрытие, включающее анионный сополимер на основе метакриловой кислоты и этилакрилата (Eudragit L-55), тальк и триэтилцитрат.

13. Фармацевтическая лекарственная форма с покрытием по п.1, которую получают в форме микрокапсулы, микрочастицы с покрытием, микросферы с покрытием, гранулы с покрытием, пеллета с покрытием, таблетки или капсулы.

14. Фармацевтическая лекарственная форма с покрытием по п.12, которую получают в форме микрокапсулы.

15. Фармацевтическая лекарственная форма с покрытием по п.13, причем микрокапсулы дополнительно инкапсулируют в инертную матрицу таблетки или в инертную капсулу.

16. Фармацевтическая лекарственная форма с покрытием, включающая ядро, содержащее N-(2-(2-фталимидоэтокси)ацетил)-L-аланил-D-глутаминовую кислоту и покрытие, где лекарственную форму получают в форме микрокапсулы, которая инкапсулирована
в матрицу таблетки, устойчивую к действию желудочного сока, в форме таблетки, или
инертную матрицу таблетки, на которую затем наносят покрытие из устойчивого к действию желудочного сока и/или кислоты полимера, в форме таблетки, или
в капсулу из устойчивого к действию желудочного сока и/или кислоты полимера, или
в инертную капсулу, на которую затем наносят покрытие из устойчивого к действию желудочного сока и/или кислоты полимера.

17. Фармацевтическая лекарственная форма с покрытием по п.16, которую получают в форме таблетки, включающей микрокапсулы, которые инкапсулированы в матрицу таблетки, устойчивую к действию желудочного сока.

18. Фармацевтическая лекарственная форма с покрытием по п.17, в которой матрицей таблетки является комбинация фталата гидроксипротилметилцеллюлозы и смеси поливинилацетата и поливинилпирролидона.

19. Фармацевтическая лекарственная форма с покрытием по п.16, в которой полимеры, устойчивые к действию желудочного сока и/или кислоты, выбирают из группы, включающей сополимеры производных метакриловой кислоты, фталат гидроксипропилметилцеллюлозы, фталат гидроксиэтилцеллюлозы, фталат-ацетат целлюлозы, поливинилацетилфталат, сукцинат-ацетат гидроксипропилметилцеллюлозы или комбинации указанных соединений.

20. Способ лечения хронических воспалительных заболеваний у человека или животных, нуждающихся в таком лечении, причем указанный способ заключается в том, что фармацевтическую лекарственную форму с покрытием по любому из пп.1-19 вводят человеку или животным перорально в количестве от приблизительно 10 до приблизительно 1000 мг активного вещества один раз в сутки в виде однократной дозы или нескольких разделенных доз.

21. Способ по п.20, в котором хроническое воспалительное заболевание выбирают из группы, включающей колит, неспецифический язвенный колит и болезнь Крона.