СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ГЕЛЬМИНТОЗОВ У СВИНЕЙ Российский патент 2010 года по МПК A61D99/00 

Данное изобретение относится к области ветеринарии и связано с разработкой копрологического метода диагностики кишечных гельминтозов свиней.

Кишечные гельминтозы свиней причиняют большой ущерб животноводству, который складывается из снижения продуктивности, ухудшения вкусовых качеств мяса из-за резкого снижения содержания аминокислот, витаминов, макро- и микроэлементов. Большинство половозрелых гельминтов, в том числе и желудочно-кишечного тракта, локализуются в просвете кишечника, а их личиночные стадии - в легких, в глубоких слоях кишечника и других органах. Животные, пораженные кишечными гельминтозами, выделяют во внешнюю среду огромное количество яиц и личинок с яйцами.

Основой специфической профилактики гельминтозов у животных являются профилактические и легочные дегельминтизации, целесообразность проведения которых определяется результатами гельминтокопроскопических исследований.

Для диагностики кишечных гельминтозов свиней применяются различные методы.

1. Метод Фюллеборна. При этом методе пробу фекалий весом 3-5 г помещают в стакан, заливают небольшим количеством флотационной жидкости, тщательно размешивают, затем добавляют 50-100 мл этого раствора и процеживают через металлическое сито или марлю в один слой в сухой чистый стакан. Взвесь отстаивают 40-60 мин, затем прикосновением петли снимают поверхностную пленку, переносят ее на предметное стекло для микроскопирования [1].

Недостатком метода является то, что флотация яиц происходит длительно (40-60 минут) и метод является недостаточно эффективным.

2. Метод Котельникова-Хренова. Техника проведения этого метода аналогична методу Фюллеборна, но в качестве флотационной жидкости применяется нитрат аммония (техническая гранулированная аммиачная селитра), используемый как удобрение [2].

Недостатком этого метода является то, что из-за сверхнасыщенности флотационного раствора из аммиачной селитры происходит быстрое высыхание и кристаллизация капель на предметном стекле, что затрудняет просмотр материала и в конечном итоге отрицательно влияет на эффективность исследований.

3. Метод Маллори [3] также по технике схож с методом Фюллеборна, но в качестве флотационного раствора используется насыщенный раствор сахара.

Недостатком этого метода является то, что раствор сахара является густым, при этом происходит неполное всплывание яиц гельминтов. Также следует отметить, что просмотр капли на предметном стекле при микроскопировании затруднен, что также связано с густотой флотационного раствора, состоящего из сахара.

Два этих недостатка значительно снижают ценность и эффективность данного метода.

4. Метод Котельникова-Вереничева с хлоридом цинка [4] заключается в следующем: пробу фекалий величиной с грецкий орех помещают в 40-60 мл воды и тщательно размешивают до появления равномерной взвеси. При постоянном помешивании взвесь процеживают через металлическое сито или марлю в чистый стакан. После 5 минут отстаивания надосадочную жидкость сливают. На дне оставляют такое количество взвеси, которое бы вместилось в центрифужную пробирку и центрифугируют 1-2 минуты при 3000 об/мин, после чего всю жидкость до осадка сливают, а к осадку добавляют насыщенный раствор хлорида цинка. Осадок взбалтывают до получения взвеси и снова центрифугируют 1-2 минуты при 1500 об/мин. После этого металлической петлей снимают поверхностную пленку, переносят на предметное стекло и исследуют под микроскопом.

Недостатком этого метода является то, что после центрифугирования из-за большого удельного веса флотационной жидкости (1,82) вместе с яйцами гельминтов поднимаются на поверхность и непереваренные частицы корма, что затрудняет просмотр материала и в конечном итоге снижает диагностическую эффективность.

Также следует особо подчеркнуть, что используемый в качестве флотационной жидкости насыщенный раствор хлорида цинка является токсичным химическим соединением.

Задача изобретения - разработка способа диагностики гельминтозов свиней в целях определения истинной гельминтологической ситуации для проведения соответствующих лечебно-профилактических мероприятий в исследуемых группах.

Способ диагностики гельминтозов свиней проводится по следующей схеме. Вначале готовят комбинированную флотационную смесь из двух ингредиентов 1. В 1 л кипящей воды растворяют 420 г натрия хлорида (ρ=1,19). 2. В 1 л кипящей воды растворяют 1670 г сахара. Плотность раствора - 1,28. Для получения комбинированной флотационной жидкости эти растворы смешивают в соотношении 6:1.

Плотность комбинированной флотационной жидкости должна составлять 1,23.

С каждой пробы пинцетом берут фекалии массой 1 г, кладут в цилиндрический стакан (объемом 50 мл), с помощью дозатора заливают 5 мл флотационной жидкости и тщательно размешивают палочкой до получения гомогенной взвеси. При постоянном помешивании добавляют остальную часть раствора, доводя объем до 13 мл. Полученную суспензию фильтруют через сито в другой стаканчик. Содержимое переливают в центрифужную пробирку и центрифугируют при 1500 об/мин в течение 2 мин. После прикосновения петли к поверхностной пленке взвеси снимают три капли на предметное стекло для микроскопирования.

Пример. Сравнительное изучение диагностической эффективности флотационного метода Фюллеборна и нового способа диагностики гельминтозов у свиней проводилось в 2006-2008 годах на 8 группах свиней разного возраста и пола в количестве 541 голов.

Полученные результаты приведены в таблице.

Как видно из таблицы, в КП «Тан» Черемшанского района РТ из исследованных 68 проб фекалий поросят 4-5-месячного возраста, которые не подвергались ранее дегельминтизации, по методу Фюллеборна удалось выявить в 16 пробах (23,5%) яйца аскарисов, в 28 пробах (41,2%) яйца эзофагостом и в 5 (7,9%) яйца трихоцефал.

Новым способом диагностики гельминтозов у этих же исследованных 68 животных выделены в 34 пробах (50,0%) яйца аскарисов, в 51 пробах (75%) яйца эзофагостом и в 13 пробах (19,1%) яйца трихоцефал. Следовательно, с помощью нового метода выявлено яйца аскарисов больше на 26,5%, эзофагостом на 33,8% и трихоцефал на 11,7%.

Кроме того, эти исследования также показали, что кишечные гельминтозы свиней в данном хозяйстве представлены 3 видами гельминтов: аскарисами, эзофагостомами и трихоцефалами.

В этом же районе в КП им. Тукая исследовали пробы фекалий от 110 свиней на откорме, которые ранее также не были обработаны против гельминтов. Исследования показали, что в кишечнике у животных данной группы паразитируют аскарисы и эзофагостомы, а диагностическая эффективность нового метода выше, чем известного. Например, методом Фюллеборна из 110 проб выявлено яиц аскарисов в 8 случаях (7,3%), эзофагостом в 25 случаях (22,7%). Новым методом выявлено зараженных аскарисами больше на 10,9%, а эзофагостомами на 28,2%.

В ООО «Агрофирма Заман» Нурлатского района исследовали животных

3-х возрастных групп (поросята отъемыши, свиноматки и свиньи на откорме), которые ранее не подвергались дегельминтизации. Путем гельминтоовоскопии 98 проб фекалий у свиней на откорме было установлено наличие в их кишечнике гельминтов 3-х видов (см. табл.). В этой группе новым способом диагностики гельминтозов выявлено больше, чем существующим методом, аскарисов на 26,2%, эзофагостом - 41,6% и трихоцефал - 17,8%.

В этом же хозяйстве брали пробы фекалий у 73 поросят отъемышей, которые 20 дней назад до нашего исследования были дегельминтизированы пиперазин адипинатом. Результаты копрологического исследования показали, что яйца аскарисов и эзофагостом в пробах фекалий отсутствуют, что, по-видимому, связано с эффективностью антигельминтика пиперазин адипината против аскарисов и эзофагостом. Однако было установлено, что животные в слабой степени заражены трихоцефалезом. Методом Фюллеборна выявлены яйца этих гельминтов у 4-х животных (5,5%), новым методом - у 9 (12,3%). Высокая эффективность нового способа диагностики гельминтозов установлена при исследовании свиноматок и хряков. Так, в этом же хозяйстве при исследовании 15 свиноматок методом Фюллеборна аскариоз был установлен у 4 (26,6%) животных, эзофагостомоз - у 8 (58,3%) животных, новым способом аскариоз выявлен у 53,3%, эзофагостомоз - у 80,0% животных. Кроме того, в последнем случае у 20,0% животных обнаружены и трихоцефалы. Аналогичные данные о более высокой эффективности нового способа диагностики гельминтозов у свиней получены в ООО «Борьба» Нурлатского района и Учхозе КГАВМ (см. таблицу).

Таким образом, исследования, проведенные с пробами фекалий, взятыми от 541 свиней 8 половозрастных групп из 5 хозяйств различных районов РТ, показали, что методом Фюллеборна яиц аскарисов выявлено у 13,9%, эзофагостом у 34,0%, трихоцефал у 5,7% животных. Новым способом диагностики гельминтозов дополнительно установлено наличие аскарисов у 17%, эзофагостом у 29% и трихоцефал у 10,8% животных. Эти данные говорят о более высокой диагностической эффективности нового метода.

В литературе данный способ не описан, поэтому он является новым, соответствует критерию изобретательского уровня и промышленной применимости.

Источники информации

1. Лутфуллин М.Х., Латыпов Д.Г., Корнишина М.Д. Ветеринарная гельминтология. Казань, «Идель-Пресс», 2007, 232 с.

2. Лутфуллин М.Х., Латыпов Д.Г., Корнишина М.Д. Гельминто-копроскопические исследования животных. Казань, 2002, 24 с.

3. Акбаев М.Ш. и др. Паразитология и инвазионные болезни животных. Москва, «Колос», 1998, 744 с.

4. Акбаев М.Ш. и др. Паразитология и инвазионные болезни животных. Москва, «Колос С», 2002, 743 с.

Диагностическая эффективность флотационного метода Фюллеборна и нового способа диагностики гельминтозов у свиней № п/п Наименование хозяйства, р-на Половозрастная группа Исследовано проб фекалий Выявлено яиц в 1 г фекалий Методом Фюллеборна Новым способом диагностики гельминтозов аскарисов эзофагостом трихоцефал аскарисов эзофагостом трихоцефал проб % проб % проб % проб % проб % проб % 1 КП «Тан» Черемшанского р-на Поросята 4-5 мес 68 16,0 23,5 28,0 41,2 5,0 7,4 34,0 50,0 51 75,0 13,0 19,1 2 КП им. Тукая Черемшанского р-на Свиньи на откорме 110 8,0 7,3 25,0 22,7 - - 20,0 18,2 56 50,9 - - 3 ООО «Агрофирма Заман» Нурлатского р-на Свиньи на откорме 84 17,0 20,2 - 51,2 13,0 15,5 39,0 46,4 78 92,8 28,0 33,3 Поросята отъемыши 73 - - - - 4,0 5,5 - - - - 9,0 12,3 Свиноматки 15 4,0 26,6 8,0 58,3 - - 8,0 53,3 12 80,0 3,0 20,0 4 ООО «Борьба» Нурлатского р-на Свиньи на откорме 84 св. №1 13,0 15,5 27,0 32,1 - - 30,0 35,7 53,0 63,1 11,0 13,1 92 св. №2 16,0 17,4 45,0 48,9 9,0 9,7 28,0 30,4 78,0 84,8 22,0 23,9 5 Учхоз КГАВМ (Высокогорский р-н) Свиноматки 10 1,0 10,0 6,0 60,0 - - 3,0 30,0 8 80,0 - - Хряки 5 - - 2,0 40,0 - - 5,0 100, 0 5 100, 0 3,0 30,0 6 ИТОГО   541 75 13,9 184 34,0 31,0 5,7 167 30,9 341 63,0 89,0 16,5

Изобретение относится к области ветеринарии. Для исследования берут 1 г фекалий свиней и размешивают в 13 мл комбинированной флотационной жидкости. Флотационная жидкость состоит из насыщенного раствора NaCl (420 г на 1 л) и сахара (1670 г на 1 л), взятых в соотношении 6:1. Затем взвесь фильтруют и центрифугируют в течение 2 минут при 1500 об/мин, после чего микроскопируют поверхностную пленку. Способ позволяет быстро поставить диагноз, одновременно выявить яйца гельминтов при ассоциативных инвазиях, обладает высокой диагностической эффективностью, дает возможность экономить компоненты флотационной жидкости. 1 табл.

Способ диагностики гельминтозов свиней, заключающийся в том, что берут 1 г фекалий, размешивают в 13 мл комбинированной флотационной жидкости, состоящей из насыщенного раствора NaCl (420 г на 1 л) и сахара (1670 г на 1 л), взятых в соотношении 6:1 соответственно, фильтруют, отфильтрованную взвесь центрифугируют в течение 2 мин при 1500 об/мин, после чего микроскопируют поверхностную пленку.