СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОСТАГЛАНДИНА Ф ИЗ ВОДОРОСЛИ Gracilaria verrucoza Российский патент 2010 года по МПК C12P31/00 

Изобретение относится к способам получения простагландинов из морских культивируемых агароносных красных водорослей, в частности простагландина Ф_2α (ПГФ_2α) из Gracilaria verrucoza, и может быть использовано для получения фармацевтических субстанций и лекарственных препаратов, предназначенных для применения в комплексной терапии социально-значимых заболеваний.

Известные способы получения ПГФ_2α, описанные в патентных документах России, позволяют получать рацемический ПГФ_2α и его аналоги (п. РФ №331439, C07C 405/00, опубл. 21.03.72; а.с. СССР №1291587, C07C 177/00, опубл. 23.02.87).

Однако указанные методы относятся к химическому синтезу и позволяют получать только синтетический ПГФ_2α, который по своим биологическим свойствам значительно уступает природному. Кроме того, в результате синтезов образуется не чистый ПГФ_2α, а смесь трудно разделяемых рацематов (изомеров).

Наиболее близким способом по количеству существенных признаков и достигаемому техническому результату является способ получения смеси простагландинов (ПГЕ₁, ПГЕ₂, ПГЕ₃ и ПГФ_2α) из водоросли Gracilaria verrucoza. В составе данной смеси получают, в том числе и ПГФ_2α. Из смеси простагландинов ПГФ_2α выделяется известным методом жидкостной хроматографии. Согласно данному способу водоросль измельчают на кусочки или клетки физическими или химическими методами, в частности с использованием лиофильной сушки и гомогенизации, вымораживания, разрезания на кусочки, разрушения клеток ультразвуком. Измельченную водоросль или ее порошок смешивают с дистиллированной водой или водоорганическим растворителем и выдерживают смесь при 5-40°С при pH 3-12 в течение ночи для превращения ненасыщенных жирных кислот под воздействием ферментов, присутствующих в водорослях, в простагландины и перехода их в дистиллированную воду или водоорганический растворитель. В случае использования для извлечения простагландинов воды их затем переводят в органическую фазу, используя в качестве органического растворителя, в частности тетрагидрофуран, этилацетат, этиловый эфир, петролейный эфир, н-гексан, хлороформ, четыреххлористый углерод, метиленхлорид или бензин. Полученный раствор пропускают через неполярную синтетическую пористую смолу, имеющую специфическую поверхность не менее 350 м²/г, с объемом пор не менее 0,8 мл/г, при этом простагландины сорбируются на этой смоле, с которой они элюируются органическим или водоорганическим растворителем. Полученная смесь простагландинов (ПГЕ₁, ПГЕ₂, ПГЕ₃ и ПГФ_2α) разделяется на индивидуальные простагландины известными методами жидкостной хроматографии (EP №0424915, C07C 405/00, C07C 67/00, C07C 401/00, 02.05.91 г.).

К недостаткам известного способа следует отнести следующее:

- невысокий выход ПГФ_2α, выход по данным, приведенным в патенте, составляет от 0 до 4,2 мкг/г сырой водоросли, что делает нецелесообразным применение данного способа для получения индивидуального ПГФ_2α;

- предварительная обработка сырья физическими или химическими методами приводит к частичному разрушению ферментных систем, присутствующих в водоросли, и, как следствие, снижению выхода простагландинов;

- необходимость измельчения исходного сырья приводит к усложнению самого способа;

- длительность процесса получения простагландинов. Так, процесс превращения ненасыщенных жирных кислот проходит в течение ночи, т.е. не менее 8-10 часов, при этом в течение этого периода необходимо постоянно поддерживать определенную температуру (5-40°С) и pH в интервале 3-12, что значительно усложняет технологический процесс;

- длительное выдерживание в воде приводит к повышенному выделению полисахаридов, которые за счет образования эмульсий затрудняют процесс последующей экстракции простагландинов органическими растворителями;

- необходимость экстракции простагландинов органическими растворителями. Эта стадия является трудоемкой и не обеспечивает достаточной степени перехода простагландинов из водной фазы в органическую фазу;

- недостаточная емкость неполярной синтетической пористой смолы, используемой для извлечения простагландинов из раствора, что требует использования значительного количества сорбента и соответственно больших количеств органических растворителей для элюирования.

Задача, поставленная перед изобретением, - повышение выхода и обеспечение возможности получения индивидуального простагландина Ф_2α и упрощение способа его получения.

Поставленная задача решается тем, что в известном способе получения простагландинов из водоросли Gracilaria verrucoza, включающем инкубацию водоросли в дистиллированной воде для превращения ненасыщенных жирных кислот под воздействием ферментов, присутствующих в этой водоросли, в простагландины, переход простагландинов в воду, извлечение простагландинов из водного раствора сорбцией на сорбенте с последующим элюированием водоорганическими растворителями, согласно изобретению в качестве исходного сырья используют свежесобранную водоросль, перед инкубацией в дистиллированную воду вводят 0,5-5 мМ адреналина, инкубацию ведут в течение 1-2 час при освещении и температуре не более 4°С. Перед извлечением простагландинов сорбцией на сорбенте полученный водный раствор подкисляют до pH 2,5-3,0.

Введение в инкубационную среду (дистиллированная вода) адреналина обеспечивает образование практически одного вида простагландина, а именно ПГФ_2α, и, в конечном результате, позволяет отказаться от сложных, затратных стадий очистки. При снижении концентрации адреналина менее 0,5 мМ снижается общий выход простагландинов и изменяется соотношение ПГА₂/ПГФ_2α в сторону ПГА₂. При увеличении концентрации адреналина выше 5 мМ происходит общее снижение синтеза простагландинов и выход целевого продукта снижается.

Использование в качестве сырья свежесобранной водоросли не только приводит к упрощению способа, поскольку отсутствует необходимость замораживания и измельчения сырья, но и способствует увеличению выхода простагландина Ф_2α.

Проведение инкубации свежесобранных морских водорослей при освещении также значительно повышает выход простагландинов, в том числе ПГФ_2α. При этом целесообразно освещать водоросли светом интенсивностью 100-300 мкЕ/м²с. При использовании света интенсивностью менее 100 мкЕ/м²с увеличение выхода простагландинов не наблюдается, а при использовании света интенсивностью более 300 мкЕ/м²с происходит подавление ферментативной активности, что отрицательно сказывается на выходе целевого продукта.

Установлено, что процесс превращения ненасыщенных жирных кислот, в частности арахидоновой кислоты, в простагландины под воздействием ферментов наилучшим образом проходит при температуре среды не более 4°С, обеспечивая, в конечном результате, повышение выхода простагландинов. Повышение температуры более 4°С приводит к снижению выхода простагландинов.

Инкубация морской водоросли в дистиллированной (пресной) воде менее 1 час не обеспечивает в полной мере переход ненасыщенных жирных кислот в простагландины. Увеличение времени инкубации более 2 час приводит к нежелательным последствиям. Так, при этом начинается интенсивный переход в раствор полисахаридов, присутствующих в водорослях. Полисахариды образуют эмульсию, что, в последующем, затрудняет выделение простагландинов на сорбенте, т.е. осложняется процесс очистки, и, как следствие, уменьшает выход простагландинов. Кроме того, при инкубации более 2 час существенно снижалась скорость фильтрации из-за образования на поверхности фильтра студенистого осадка полисахаридов. Осаждение на поверхности сорбента полисахаридов является также причиной того, что поверхностный слой сорбента быстро теряет свою фильтрационную способность.

Подкисление водного раствора, содержащего простагландины до pH среды 2,5-3,0, обеспечивает перевод простагландинов, находящихся в воде в виде солей, в форму свободных ионизированных кислот. Это способствует наилучшему удержанию простагландинов на силикагеле и, в конечном результате, повышает выход простагландинов. При повышении кислотности среды, pH ниже 2,5, наблюдается нежелательный переход биологически активной формы простагландина ПГЕ₂ в неактивную форму ПГА₂, и, как следствие, не только снижается выход ПГФ_2α, но и требуется дополнительная его очистка от неактивной формы ПГА₂.

В качестве сорбента целесообразно использовать полярный модифицированный силикагель с привитыми углеводородами с размером зерен до 100 мкм. В качестве привитых могут быть углеводороды с длиной цепи от С₈ до С₁₈. Эти сорбенты обладают по сравнению с ионообменными смолами, используемыми в прототипе, емкостью выше на 2-3 порядка, что позволяет перерабатывать значительные объемы раствора, обеспечивает быстрое и качественное извлечение простагландинов и позволяет отказаться от стадии предварительного концентрирования простагландинов в органических растворителях перед их разделением на сорбенте.

Способ осуществляется следующим образом.

Пример 1.

Свежесобранные водоросли Gracilaria verrucosa отжимают от морской воды, берут 1000 г водоросли и помещают в ванну с дистиллированной водой (5 л). Предварительно в воде растворяют 458 мг адреналина, при этом получается 0,5 мМ раствор адреналина. Ванну термостатируют при 4°С и освещают ксеноновой лампой с интенсивностью 100 мкЕ/м²с в течение 2 час. По окончании инкубации воду отделяют, подкисляют 2н. соляной кислотой до pH 3,0 и пропускают через колонку с октадецил силикагелем (С₁₈, содержащий 9-12% углерода) с размером зерен 100 мкм. Затем сорбент промывают сначала 500 мл воды для удаления примесей нелипидной природы, затем 500 мл этанола. В этанол элюируются простагландины и другие неполярные вещества. После чего из элюата этанол удаляют упариванием, остаток суспендируют в 50 мл насыщенного раствора диазаметана в диэтиловом эфире. Через 30 минут реакционную смесь упаривают и остаток разделяют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). ВЭЖХ выполняют на колонке Zorbax ODS (22 мм × 250 мм), мобильная фаза ацетонитрил-вода, 80:20 (по объему) со скоростью 20 мл/мин, детектирование с помощью УФ-детектора при 200 нм. Собирают пики, соответствующие по времени удерживания стандартам метиловых эфиров ПГФ_2α (4,75 мин) и ПГЕ₂ (5,28 мин). Получено ПГЕ₂ - 51 мкг/г сырой водоросли и ПГФ_2α - 538 мкг/г сырой водоросли. Структура полученных веществ подтверждалась методами газожидкостной хроматографии-масс-спектрометрии (ГЖХ-МС) и ядерного магнитного резонанса (ЯМР).

Пример 2.

Свежесобранные водоросли Gracilaria verrucosa отжимают от морской воды, берут 1000 г водоросли и помещают в ванну с дистиллированной водой (5 л). Предварительно в воде растворяют 4580 мг адреналина (5 мМ раствор адреналина). Ванну термостатируют при 4°С и освещают ксеноновой лампой с интенсивностью 175 мкЕ/м²с в течение 1,5 час. По окончании инкубации воду отделяют, подкисляют 2н. соляной кислотой до pH 2,5 и пропускают через колонку с октадецил силикагелем (С₁₈, содержащий 16-18% углерода) с размером зерен 100 мкм. Затем сорбент промывают сначала 500 мл воды для удаления примесей нелипидной природы, затем 500 мл этанола. В этанол элюируются простагландины и другие неполярные вещества. После чего из элюата этанол удаляют упариванием, остаток суспендируют в 50 мл насыщенного раствора диазаметана в диэтиловом эфире. Через 30 минут реакционную смесь упаривают и остаток разделяют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). ВЭЖХ выполняют на колонке Zorbax ODS (22 мм × 250 мм), мобильная фаза ацетонитрил-вода, 80:20 (по объему) со скоростью 20 мл/мин, детектирование с помощью УФ-детектора при 200 нм. Собирают пики, соответствующие по времени удерживания стандартам метиловых эфиров ПГФ_2α (4,75 мин) и ПГЕ₂ (5,28 мин). Получено ПГЕ₂ - 16 мкг/г сырой водоросли и ПГФ_2α - 265 мкг/г сырой водоросли.

Пример 3.

Свежесобранные водоросли Gracilaria verrucosa отжимают от морской воды, берут 1000 г водоросли и помещают в ванну с дистиллированной водой (5 л). Предварительно в воде растворяют 916 мг адреналина (1 мМ раствор адреналина). Ванну термостатируют при 4°С и освещают ксеноновой лампой с интенсивностью 175 мкЕ/м²с в течение 1 час. По окончании инкубации воду отделяют, подкисляют 2н. соляной кислотой до pH 3,0 и пропускают через колонку с октадецил силикагелем (С₁₈, содержащий 22-24% углерода) с размером зерен 50 мкм. Затем сорбент промывают сначала 500 мл воды для удаления примесей нелипидной природы, затем 500 мл этанола. В этанол элюируются простагландины и другие неполярные вещества. После чего из элюата этанол удаляют упариванием, остаток суспендируют в 50 мл насыщенного раствора диазаметана в диэтиловом эфире. Через 30 минут реакционную смесь упаривают и остаток разделяют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). ВЭЖХ выполняют на колонке Zorbax ODS (22 мм × 250 мм), мобильная фаза ацетонитрил-вода, 80:20 (по объему) со скоростью 20 мл/мин, детектирование с помощью УФ-детектора при 200 нм. Собирают пики, соответствующие по времени удерживания стандартам метиловых эфиров ПГФ_2α (4,75 мин) и ПГЕ₂ (5,28 мин). Получено ПГЕ₂ - 67 мкг/г сырой водоросли и ПГФ_2α - 545 мкг/г сырой водоросли.

Пример 4.

Свежесобранные водоросли Gracilaria verrucosa отжимают от морской воды, берут 1000 г водоросли и помещают в ванну с дистиллированной водой (5 л). Предварительно в воде растворяют 916 мг адреналина (1 мМ раствор адреналина). Ванну термостатируют при 4°С и освещают ксеноновой лампой с интенсивностью 175 мкЕ/м²с в течение 1 часа. По окончании инкубации воду отделяют, подкисляют 2н. соляной кислотой до pH 3,0 и пропускают через колонку с октадецил силикагелем (С₁₈, содержащий 22-24% углерода) с размером зерен 100 мкм. Затем сорбент промывают сначала 500 мл воды для удаления примесей нелипидной природы, затем 500 мл этанола. В этанол элюируются простагландины и другие неполярные вещества. После чего из элюата этанол удаляют упариванием, остаток суспендируют в 50 мл насыщенного раствора диазаметана в диэтиловом эфире. Через 30 минут реакционную смесь упаривают и остаток разделяют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). ВЭЖХ выполняют на колонке Zorbax ODS (22 мм × 250 мм), мобильная фаза ацетонитрил-вода, 80:20 (по объему) со скоростью 20 мл/мин, детектирование с помощью УФ-детектора при 200 нм. Собирают пики, соответствующие по времени удерживания стандартам метиловых эфиров ПГФ_2α (4,75 мин) и ПГЕ₂ (5,28 мин). Получено ПГЕ₂ - 71 мкг/г сырой водоросли и ПГФ_2α - 557 мкг/г сырой водоросли.

Пример 5.

Свежесобранные водоросли Gracilaria verrucosa отжимают от морской воды, берут 1000 г водоросли и помещают в ванну с дистиллированной водой (5 л). Предварительно в воде растворяют 916 мг адреналина (1 мМ раствор адреналина). Ванну термостатируют при 4°С и освещают ксеноновой лампой с интенсивностью 175 мкЕ/м²с в течение 1 час. По окончании инкубации воду отделяют, подкисляют 2н. соляной кислотой до pH 3,0 и пропускают через колонку с окта силикагелем (С₈, 9 содержащий 15-18% углерода) с размером зерен 100 мкм. Затем сорбент промывают сначала 500 мл воды для удаления примесей нелипидной природы, затем 500 мл этанола. В этанол элюируются простагландины и другие неполярные вещества. После чего из элюата этанол удаляют упариванием, остаток суспендируют в 50 мл насыщенного раствора диазаметана в диэтиловом эфире. Через 30 минут реакционную смесь упаривают и остаток разделяют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). ВЭЖХ выполняют на колонке Zorbax ODS (22 мм × 250 мм), мобильная фаза ацетонитрил-вода, 80:20 (по объему) со скоростью 20 мл/мин, детектирование с помощью УФ-детектора при 200 нм. Собирают пики, соответствующие по времени удерживания стандартам метиловых эфиров ПГФ_2α (4,75 мин) и ПГЕ₂ (5,28 мин). Получено ПГЕ₂ - 15 мкг/г сырой водоросли и ПГФ_2α - 187 мкг/г сырой водоросли.

Пример 6.

Свежесобранные водоросли Gracilaria verrucosa отжимают от морской воды, берут 1000 г водоросли и помещают в ванну с дистиллированной водой (5 л). Предварительно в воде растворяют 1 мМ 916 мг адреналина (1 мМ раствор адреналина). Ванну термостатируют при 4°С и освещают ксеноновой лампой с интенсивностью 175 мкЕ/м²с в течение 1 час. По окончании инкубации воду отделяют, подкисляют 2н. соляной кислотой до pH 3,0 и пропускают через колонку с силикагелем (С₁₂, содержащий 22-24% углерода) с размером зерен 50 мкм. Затем сорбент промывают сначала 500 мл воды для удаления примесей нелипидной природы, затем 500 мл изопропилового спирта. В изопропиловый спирт элюируются простагландины и другие неполярные вещества. После чего из элюата изопропиловый спирт удаляют упариванием, остаток суспендируют в 50 мл насыщенного раствора диазаметана в диэтиловом эфире. Через 30 минут реакционную смесь упаривают и остаток разделяют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). ВЭЖХ выполняют на колонке Zorbax ODS (22 мм × 250 мм), мобильная фаза ацетонитрил-вода, 80:20 (по объему) со скоростью 20 мл/мин, детектирование с помощью УФ-детектора при 200 нм. Собирают пики, соответствующие по времени удерживания стандартам метиловых эфиров ПГФ_2α (4,75 мин) и ПГЕ₂ (5,28 мин). Получено ПГЕ₂ - 55 мкг/г сырой водоросли и ПГФ_2α - 512 мкг/г сырой водоросли.

Пример 7.

Свежесобранные водоросли Gracilaria verrucosa отжимают от морской воды, берут 1000 г водоросли и помещают в ванну с дистиллированной водой (5 л). Предварительно в воде растворяют 1 мМ (183,2 мг) адреналина. Ванну термостатируют при 4°С и освещают ксеноновой лампой с интенсивностью 175 мкЕ/м²с в течение 1 час. По окончании инкубации воду отделяют, подкисляют 2н. соляной кислотой до pH 3,0 и пропускают через колонку с силикагелем (C₁₂, содержащий 22-24% углерода) с размером зерен 50 мкм. Затем сорбент промывают сначала 500 мл воды для удаления примесей нелипидной природы, затем 500 мл метилового спирта. В метиловый спирт элюируются простагландины и другие неполярные вещества. После чего из элюата метиловый спирт удаляют упариванием, остаток суспендируют в 50 мл насыщенного раствора диазаметана в диэтиловом эфире. Через 30 минут реакционную смесь упаривают и остаток разделяют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). ВЭЖХ выполняют на колонке Zorbax ODS (22 мм × 250 мм), мобильная фаза ацетонитрил-вода, 80:20 (по объему) со скоростью 20 мл/мин, детектирование с помощью УФ-детектора при 200 нм. Собирают пики, соответствующие по времени удерживания стандартам метиловых эфиров ПГФ_2α (4,75 мин) и ПГЕ₂ (5,28 мин). Получено ПГЕ₂ - 60 мкг/г сырой водоросли и ПГФ_2α - 511 мкг/г сырой водоросли.

Пример 8.

Свежесобранные водоросли Gracilaria verrucosa отжимают от морской воды, берут 1000 г водоросли и помещают в ванну с дистиллированной водой (5 л). Предварительно в воде растворяют 916 мг адреналина (1 мМ раствор адреналина). Ванну термостатируют при 4°С и освещают ксеноновой лампой с интенсивностью 300 мкЕ/м²с в течение 1 час. По окончании инкубации воду отделяют, подкисляют 2н. соляной кислотой до pH 3,0 и пропускают через колонку с октадецил силикагелем (С₁₈, содержащий 22-24% углерода) с размером зерен 50 мкм. Затем сорбент промывают сначала 500 мл воды для удаления примесей нелипидной природы, затем 500 мл этанола. В этанол элюируются простагландины и другие неполярные вещества. После чего из элюата этанол удаляют упариванием, остаток суспендируют в 50 мл насыщенного раствора диазаметана в диэтиловом эфире. Через 30 минут реакционную смесь упаривают и остаток разделяют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). ВЭЖХ выполняют на колонке Zorbax ODS (22 мм × 250 мм), мобильная фаза ацетонитрил-вода, 80:20 (по объему) со скоростью 20 мл/мин, детектирование с помощью УФ-детектора при 200 нм. Собирают пики, соответствующие по времени удерживания стандартам метиловых эфиров ПГФ_2α (4,75 мин) и ПГЕ₂ (5,28 мин). Получено ПГЕ₂ - 49 мкг/г сырой водоросли и ПГФ_2α - 485 мкг/г сырой водоросли.

Пример 9.

Свежесобранные водоросли Gracilaria verrucosa отжимают от морской воды, берут 500 г водоросли и помещают в ванну с дистиллированной водой (2,5 л). Предварительно в воде растворяют 2290 мг адреналина (5 мМ раствор адреналина). Ванну термостатируют при 4°С и освещают ксеноновой лампой с интенсивностью 175 мкЕ/м²с в течение 1,5 час. По окончании инкубации воду отделяют, подкисляют 2н. соляной кислотой до pH 2,5 и пропускают через колонку с октадецил силикагелем (С₁₈, содержащий 16-18% углерода) с размером зерен 100 мкм. Затем сорбент промывают сначала 500 мл воды для удаления примесей нелипидной природы, затем 500 мл этанола. В этанол элюируются простагландины и другие неполярные вещества. После чего из элюата этанол удаляют упариванием, остаток суспендируют в 50 мл насыщенного раствора диазаметана в диэтиловом эфире. Через 30 минут реакционную смесь упаривают и остаток разделяют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). ВЭЖХ выполняют на колонке Zorbax ODS (22 мм × 250 мм), мобильная фаза ацетонитрил-вода, 80:20 (по объему) со скоростью 20 мл/мин, детектирование с помощью УФ-детектора при 200 нм. Собирают пики, соответствующие по времени удерживания стандартам метиловых эфиров ПГФ_2α (4,75 мин) и ПГЕ₂ (5,28 мин).

Как видно из представленных примеров, заявляемый способ позволяет повысить выход ПГФ_2α по сравнению с прототипом более чем на два порядка, получить практически чистый ПГФ_2α и не требует дополнительно длительной и затратной процедуры очистки ПГФ_2α от других видов простагландинов, поскольку доля ПГЕ₂ после инкубации в растворе незначительна.

Кроме того, предложенный метод позволяет существенно упростить процедуру выделения простагландинов из инкубационной среды (разделения на индивидуальные простагландины) и отказаться от использования значительного количества органических растворителей.

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано при получении биологически активного простагландина Ф_2α из природного сырья. Способ предусматривает введение в дистиллированную воду 0,5-5,0 мМ адреналина с получением раствора адреналина. В полученный раствор адреналина вносят свежесобранные водоросли Gracilaria verrucosa и инкубируют их в течение 1-2 час при освещении светом интенсивностью 100-300 мкЕ/м²с и температуре не более 4°С. По окончании инкубирования полученный раствор отделяют от водоросли. Затем подкисляют до pH 2,5-3,0 и пропускают через колонку с неполярным модифицированным силикагелем с привитыми углеводородами. После чего элюируют водоорганическими растворителями и разделяют на индивидуальные простагландиды методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Способ позволяет увеличить выход простагландина Ф_2α. 1 з.п. ф-лы.

1. Способ получения простагландинов из водоросли Gracilaria verrucoza, включающий инкубацию водоросли в дистиллированной воде для превращения ненасыщенных жирных кислот под воздействием ферментов, присутствующих в этой водоросли, в простагландины, переход простагландинов в дистиллированную воду, извлечение простагландинов из водного раствора сорбцией на сорбенте с последующим элюированием водоорганическими растворителями и разделением на индивидуальные простагландины, отличающийся тем, что используют свежесобранную водоросль, перед инкубацией в дистиллированную воду вводят 0,5-5,0 мМ адреналина, инкубацию ведут в течение 1-2 ч при освещении светом интенсивностью 100-300 мкЕ/м²с и температуре не более 4°С, перед извлечением простагландинов сорбцией на сорбенте полученный водный раствор подкисляют до pH 2,5-3,0 при этом в качестве сорбента используют неполярный модифицированный силикагель с привитыми углеводородами.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве сорбента используют неполярный модифицированный силикагель с привитым октадецил углеводородом с размером зерен до 100 мкм.