ПРОИЗВОДНЫЕ 4-ФЕНИЛ-5-ОКСО-1, 4, 5, 6, 7, 8-ГЕКСАГИДРОХИНОЛИНА В КАЧЕСТВЕ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ БЕСПЛОДИЯ Российский патент 2010 года по МПК C07D215/20 C07D401/12 C07D405/12 C07D417/12 A61K31/47 A61K31/4709 A61P5/24 

Настоящее изобретение относится к производным 4-фенил-5-оксо-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолина, фармацевтическим композициям, их содержащих, и применению указанных производных для получения лекарственных средств для лечения нарушений фертильности.

Гонадотропины выполняют важные функции в целом ряде процессов живого организма, включая метаболизм, терморегуляцию и репродуктивный цикл. Гонадотропины действуют на специфические типы клеток половых желез, стимулируя овариальную и тестикулярную дифференцировку и стероидогенез. Гипофизарный гонадотропный гормон FSH (фолликулостимулирующий гормон), например, играет ключевую роль в стимуляции развития и созревания фолликулов, тогда как LH (лютеинизирующий гормон) индуцирует овуляцию (Sharp, R.M. Clin Endocrinol. 33:787-807, 1990; Dorrington and Armstrong, Recent Prog. Horm. Res. 35:301-342, 1979). В настоящее время FSH применяют клинически, для стимуляции яичников, т.е. гиперстимуляции яичников для in vitro оплодотворения (яйцеклетки) (IVF) и индукции овуляции у бесплодных ановуляторных женщин (Insler, V., Int. J. Fertility 33:85-97, 1988, Navot and Rosenwaks, J. Vitro Fert. Embryo Transfer 5:3-13, 1988), а также в случае мужского гипогонадизма и мужского бесплодия.

Гонадотропный FSH высвобождается из передней доли гипофиза под влиянием гонадотропин-высвобождающего гормона и эстрогенов и из плаценты во время беременности. У женщин FSH действует на яичники, стимулируя развитие фолликулов, и является основным гормоном, регулирующим секрецию эстрогенов. У мужчин FSH отвечает за целостность семенных канальцев и действует на клетки Сертоли, поддерживая гаметогенез. Очищенный FSH применяют клинически для лечения бесплодия у женщин и для лечения некоторых типов нарушения сперматогенеза у мужчин. Гонадотропины, предназначенные для терапевтических целей, могут быть выделены из мочи человека и имеют низкую чистоту (Morse et al, Amer. J. Reproduct. Immunol, and Microbiology 17:143, 1988). Альтернативно, они могут быть получены в виде рекомбинантных гонадотропинов. Рекомбинантный человеческий FSH доступен коммерчески и его используют для вспомогательной репродукции (Olijve et al. Mol. Hum. Reprod. 2:371, 1996; Devroey et al. Lancet 339:1170, 1992).

Действия FSH гормона опосредованы специфическим рецептором плазматической мембраны, который является представителем большого семейства рецепторов, связанных с G-белком. Эти рецепторы состоят из единственного полипептида с семью трансмембранными доменами и способны взаимодействовать с Gs белком, что приводит к активации аденилатциклазы.

Рецептор FSH является высокоспецифической мишенью в процессе роста овариальных фолликулов и экспрессируется исключительно в яичнике. Блокирование рецептора или ингибирование передачи сигнала, который обычно индуцируется после FSH-опосредованной активации рецептора, может нарушить развитие фолликулов и, соответственно, нарушать овуляцию и фертильность. Низкомолекулярные антагонисты FSH могут составлять основу для новых противозачаточных средств, в то время как низкомолекулярные агонисты FSH могут быть использованы для тех же самых клинических целей, как и нативный FSH, т.е. для лечения бесплодия и для овариальной гиперстимуляции при in vitro оплодотворении (яйцеклетки).

Низкомолекулярные миметики FSH с агонистическими свойствами были раскрыты в международной заявке WO 2000/08015 (Applied Research Systems ARS Holding N.V.) и в WO 2002/09706 (Affymax Research Institute). Недавно в международной заявке WO 2003/004028 (AKZO NOBEL N.V.) были раскрыты некоторые производные тетрагидрохинолина в качестве модулирующих FSH веществ, имеющих либо агонистические свойства, либо антагонистические свойства. В настоящее время остается потребность в низкомолекулярных миметиках гормона, которые могли бы селективно активировать рецептор FSH.

Для этой цели настоящее изобретение предлагает производные 4-фенил-5-оксо-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолина общей формулы I

где

R¹ представляет собой (1-6C)алкил, (2-6C)алкенил или (2-6C)алкинил;

R² представляет собой галоген, (1-4C)алкокси, фторированный (1-4C)алкокси, (1-4C)алкил или фторированный (1-4C)алкил; или R² может быть H, когда R³ представляет собой R⁹,R¹⁰-аминосульфонил;

R³ представляет собой OH, NO₂, CN, фторированный (1-4C)алкокси, (1-4C)алкокси(2-4C)алкокси, гидрокси(2-4C)алкокси, (1-4C)алкоксикарбонил, (3-4C)алкенилоксикарбонил, (1-4C)алкоксикарбонилокси, (3-4C)алкенилоксикарбонилокси, R⁷,R⁸-амино, R⁹,R¹⁰-амино, R⁹,R¹⁰-аминокарбонил, R⁹,R¹⁰-аминосульфонил или фенил(1-4C)алкокси, где фенильное кольцо необязательно замещено одним или несколькими заместителями, выбранными из гидрокси, амино, галогена, нитро, трифторметила, циано, (1-4C)алкила, (2-4C)алкенила, (2-4C)алкинила, (1-4C)алкокси, (ди)(1-4C)алкиламино;

R⁴ представляет собой R¹¹-фенил или R¹¹-(2-5C)гетероарил, где фенильная или гетероарильная группа необязательно дополнительно замещена одним или несколькими заместителями, выбранными из гидрокси, амино, галогена, нитро, трифторметила, циано, (1-4C)алкила, (1-4C)алкилтио, (1-4C)алкокси, (2-4C)алкенила, (2-4C)алкинила;

R⁷ представляет собой H, (1-4C)алкил;

R⁸ представляет собой (1-4C)алкилсульфонил, (1-4C)алкилкарбонил, (2-4C)алкенилкарбонил, (3-6C)циклоалкилкарбонил, (1-4C)алкоксикарбонил, (3-4C)алкенилоксикарбонил, (1-4C)алкокси(1-4C)алкилкарбонил, (3-4C)алкенилокси(1-4C)алкилкарбонилфенилкарбонил, (2-5C)гетероарилкарбонил, фенил(1-4C)алкилкарбонил, (2-5C)гетероарил(1-4C)алкилкарбонил, где фенильное кольцо или гетероароматическое кольцо необязательно замещено одним или несколькими заместителями, выбранными из гидрокси, амино, галогена, нитро, трифторметила, циано, (1-4C)алкила, (2-4C)алкенила, (2-4C)алкинила, (1-4C)алкокси, (ди)(1-4C)алкиламино;

R⁹ и R¹⁰ независимо выбраны из Н, (1-6C)алкила (3-6C)циклоалкила, (3-6C)циклоалкил(1-4С)алкила и (1-4C)алкокси(2-4C)алкила;

или R⁹ и R¹⁰ могут быть соединены вместе с образованием (4-6C)гетероциклоалкенильного кольца или (2-6C)гетероциклоалкильного кольца, необязательно замещенного одним или несколькими (1-4C)алкильными заместителями;

R¹¹ представляет собой H, (1-6C)алкоксикарбонил, R¹²,R¹³-амино, (1-6C)алкилкарбонил, (1-6C)алкилсульфонил, R¹⁴-окси, R¹⁴,R¹⁵-амино, R¹⁴,R¹⁵-аминокарбонил, R¹⁴,R¹⁵-аминосульфонил;

R¹² представляет собой Н, (1-4C)алкил;

R¹³ представляет собой (1-4C)алкилсульфонил, (1-4C)алкилкарбонил, (3-6C)циклоалкилкарбонил, (1-4C)алкоксикарбонил, (3-4C)алкенилоксикарбонил, (ди)(1-4C)алкиламино(1-4C)алкилкарбонил, (2-6C)гетероциклоалкил(1-4C)алкилкарбонил, (4-6C)гетероциклоалкенил(1-4C)алкилкарбонил или (1-4C)алкокси(1-4C)алкилкарбонил;

R¹⁴ и R¹⁵ независимо выбраны из H, (1-6C)алкила, (3-4C)алкенила, (3-4C)алкинила, (3-6C)циклоалкила, (3-6C)циклоалкил(1-4C)алкила, гидрокси(2-4C)алкила, амино(2-4C)алкила, (1-4C)алкокси(2-4C)алкила, (ди)(1-4C)алкиламино(2-4C)алкила, (2-6C)гетероциклоалкил(2-4C)алкила, (4-6C)гетероциклоалкенил(2-4C)алкила, фенил(1-4C)алкила и (2-5C)гетероарил(1-4C)алкила;

X представляет собой O или R¹⁶-N;

Y представляет собой CH₂, C(O) или SO₂;

Z представляет собой CN или NO₂;

R¹⁶ представляет собой H, (1-4C)алкил, (1-4C)алкилкарбонил;

или их фармацевтически приемлемую соль.

Производные 4-фенил-5-оксо-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолина по данному изобретению являются сильнодействующими активаторами рецептора FSH и могут быть использованы для тех же самых клинических целей, что и природный FSH, поскольку они ведут себя как агонисты, с преимуществом, заключающимся в том, что они могут быть получены синтетическим путем, могут демонстрировать измененные свойства стабильности и могут вводиться по-разному.

Таким образом, агонисты рецептора FSH по данному изобретению могут быть использованы для лечения нарушений фертильности, например, в регулируемой гиперстимуляции яичников и методах IVF.

Термины (1-4C)алкил и (1-6C)алкил, используемые для определения, означают алкильные группы с линейной или разветвленной цепью, содержащие соответственно 1-4 и 1-6 углеродных атомов, и представляют собой метил, этил, пропил, изопропил, бутил, втор-бутил, изобутил и трет-бутил и т.д.

Термин (2-4С)алкокси(2-4С)алкил означает алкоксигруппу, алкильная группа которой содержит 2-4 углеродных атома, присоединенную к алкильной группе, содержащей 2-4 атома углерода.

Термины фторированный (1-4C)алкил и фторированный (1-4C)алкокси означают линейные или разветвленные алкильные и алкоксигруппы, содержащие соответственно 1-4 атома углерода, и которые являются замещенными, по меньшей мере, одним атомом фтора.

Термины (2-4C)алкенил, (3-4C)алкенил и (2-6C)алкенил означают линейные или разветвленные алкенильные группы, содержащие 2-4, 3-4 и 2-6 атомов углерода, соответственно, такие как этенил, 2-бутенил и н-пентенил.

Термин (2-4C)алкенил означает линейные или разветвленные алкинильные группы, содержащие 2-4 атома углерода, такие как этинил и пропинил.

Термин (3-6C)циклоалкил означает циклоалкильную группу, содержащую 3-6 атомов углерода, и представляет собой циклопропил, циклобутил, циклопентил и циклогексил.

Термин (3-6C)циклоалкил(1-4C)алкил означает (1-4C)алкильную группу, определенную выше, замещенную определенной ранее (3-6C)циклоалкилалкильной группой.

Термин (2-6C)гетероциклоалкил означает гетероциклоалкильную группу, содержащую 2-6 атомов углерода, предпочтительно 3-5 атомов углерода, и включающую, по меньшей мере, один гетероатом, выбранный из N, О и/или S, которая может быть присоединена через гетероатом, если это возможно, или атом углерода. Предпочтительными гетероатомами являются N или O. Наиболее предпочтительными группами являются пиперидин-1-ил, морфолин-4-ил, пирролидин-1-ил и пиперазин-1-ил.

Термин (4-6C)гетероциклоалкенил означает гетероциклоалкенильную группу, содержащую 4-6 атомов углерода, предпочтительно 5-6 атомов углерода, и включающую, по меньшей мере, один гетероатом, выбранный из N, О и/или S, которая может быть присоединена через гетероатом, если это возможно, или атом углерода. Предпочтительными гетероатомами являются N или O.

Термин (2-5C)гетероарил означает гетероароматическую группу, содержащую 2-5 атомов углерода и, по меньшей мере, один гетероатом, выбранный из N, О и S, такие как имидазолил, тиадиазолил, пиридинил, тиенил или фурил. Предпочтительными гетероарильными группами являются тиенил, фурил и пиридинил.

(2-5C)Гетероарильная группа может быть присоединена через атом углерода или гетероатом, если это возможно.

Используемый в описании термин (ди)(1-4C)алкиламино означает аминогруппу, монозамещенную или дизамещенную алкильными группами, каждая из которых содержит 1-4 атома углерода и имеет такое же значение, как определено ранее.

Термин галоген означает фтор, хлор, бром или иод, при этом предпочтительны хлор, бром или иод.

Термин “фармацевтически приемлемая соль” представляет собой соли, которые, с точки зрения специалиста-медика, пригодны для использования путем введения в контакт с тканями людей и низшими животными без проявления нежелательной токсичности, раздражения, аллергической реакции и т.п., и которые соответствуют разумному соотношению польза/риск. Фармацевтически приемлемые соли общеизвестны в данной области техники. Они могут быть получены в процессе окончательного выделения и очистки соединений по данному изобретению, или отдельно путем взаимодействия функциональной группы свободного основания с подходящей неорганической кислотой, такой как хлористоводородная кислота, фосфорная кислота или серная кислота, или с органической кислотой, такой как, например, аскорбиновая кислота, лимонная кислота, винная кислота, молочная кислота, малеиновая кислота, малоновая кислота, фумаровая кислота, гликолевая кислота, янтарная кислота, пропионовая кислота, уксусная кислота, метансульфокислота и т.п. Кислотная функциональная группа может быть подвергнута взаимодействию с органическим или неорганическим основанием, подобным гидроксиду натрия, гидроксиду калия или гидроксиду лития.

Один аспект данного изобретения относится к соединениям формулы I, где R¹ представляет собой (1-6C)алкил. В частности, данное изобретение относится к соединениям, где R¹ представляет собой (1-4C)алкил.

Другой аспект данного изобретения относится к соединениям, представленным формулой I, где R² представляет собой галоген. В частности, R² представляет собой Br.

В другом аспекте данного изобретения R³ в соединении формулы I представляет собой R⁹,R¹⁰-аминосульфонил. В частности, R⁹ и R¹⁰ представляют собой, независимо, (1-6C)алкил.

Другой аспект данного изобретения относится к соединениям формулы I, где R⁴ представляет собой R¹¹-фенил или R¹¹-(2-5C)гетероарил, при этом фенильная или гетероарильная группа необязательно, кроме того, замещена одним (1-4C)алкокси. В частности, данное изобретение относится к соединениям, где R¹¹ представляет собой H или R¹²,R¹³-амино.

Дополнительный аспект данного изобретения относится к соединениям формулы I, где X представляет собой O.

В другом аспекте данное изобретение касается соединений формулы I, где Y представляет собой CH₂.

Другой аспект данного изобретения относится к соединениям, где Z представляет собой CN.

Следующий аспект данного изобретения касается соединений, где одно или несколько из конкретных определений групп R¹ посредством R¹⁶ и X, Y и Z, определенных здесь выше, объединены в определении соединения 4-фенил-5-оксо-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолина формулы I.

Очередной аспект данного изобретения касается соединений, представленных формулой I, которые имеют EC₅₀ в анализе связывания меньше чем 10^-8M (как описано в примере 43).

Подходящие общие способы получения соединений описаны в общих чертах ниже.

В некоторых случаях R^x-группы, содержащие функциональные группы, могут нуждаться в дополнительной временной защите, в зависимости от типа реакции, подлежащей осуществлению, что должно быть очевидно специалисту в данной области (см. Protective groups in Organic Synthesis, T.W. Greene and P.G.M. Wuts, John Wiley & sons, Inc., New York, 1999).

Производные 4-фенил-5-оксо-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолина формулы I, где R¹, R², R³, R⁴, X, Y и Z такие, как определено выше, можно получить, следуя нижеследующим стратегиям. Способ А исходит из соответствующим образом функционализированных производных 4-фенил-5-оксо-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолина общей структуры II, где R¹, R², R⁴, X, Y и Z такие, как определены выше, и FG1 представляет собой функциональную группу, такую как нитро, азидо, (необязательно защищенную) амино, (необязательно защищенный) гидроксил, карбоновую кислоту, сульфонилхлорид и т.п., которая может быть превращена в группы, определенные для R³.

Например, N-ацилирование или N-сульфонилирование соединений формулы II-а дает соединения общей формулы I-a, где R¹, R², R⁴, X, Y и Z такие, как определены ранее, R⁷ представляет собой H и R⁸ представляет собой ацильную или сульфонильную группу.

В типичном эксперименте соединения II-а подвергают взаимодействию в растворителе, таком как дихлорметан, N,N-диметилформамид, диметилсульфоксид, этанол, тетрагидрофуран, 1,4-диоксан, толуол, 1-метилпирролидин-2-он или пиридин, с соответствующим образом замещенным ацилгалогенидом (галогенангидрид карбоновой кислоты), ангидридом кислоты или сульфонилгалогенидом в присутствии основания, такого как триэтиламин, N,N-диизопропилэтиламин (DiPEA) или пиридин, с получением N-ацилированных или N-сульфонилированных производных формулы I-a, соответственно. Альтернативно, N-ацилированные соединения общей формулы I-a можно получить взаимодействием производных II-а с соответствующим образом замещенными карбоновыми кислотами в присутствии конденсирующего реагента, такого как диизопропилкарбодиимид (DIC), (3-диметиламинопропил)этилкарбодиимид (EDCI), O-(бензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметилуроний тетрафторборат (TBTU) или O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметилуроний гексафторфосфат (HATU) и третичное аминное основание (например, DiPEA), в растворителе, таком как N,N-диметилформамид или дихлорметан, при температуре окружающей среды или повышенной температуре.

Соединения общей формулы I-b, где R¹, R², R⁴, R⁸, X, Y и Z такие, как определены выше, и R⁷ представляет собой (1-4C)алкильную группу, можно получить путем N-алкилирования производных I-a соответствующим образом замещенными алкилгалогенидами общей формулы R⁷-Гал. Эту реакцию обычно проводят в присутствии основания, такого как карбонат калия, карбонат цезия, гидроксид натрия или гидрид натрия, в подходящих растворителях, таких как дихлорметан, N,N-диметилформамид, этанол, диметилсульфоксид, тетрагидрофуран или 1,4-диоксан.

Альтернативно, соединения формулы I-b могут быть получены восстановительным алкилированием, известным в данной области, алкилальдегидами (например, ацетальдегид, (изо)бутиральдегид), ацетоном или бутаноном. Как правило, соединения общей формулы II-a обрабатывают соответствующим карбонильным соединением и восстановителем, таким как цианоборгидрид натрия или триацетоксиборгидрид натрия, в подходящем растворителе, таком как метанол, этанол, дихлорметан, N,N-диметилформамид или их смеси, необязательно в присутствии кислот, таких как уксусная кислота, с получением соединений общей формулы II-b. Соединения общей формулы II-b могут быть затем N-ацилированы или N-сульфонилированы, получая соединения общей формулы I-b такими же способами, как описано для получения соединений общей формулы I-a из II-a.

Соединения общей формулы II-b можно также получить посредством последовательности из 3 стадий. Сначала соединения формулы II-а могут быть превращены в производные 2,4-динитробензолсульфонамида II-с реакцией N-сульфонилирования 2,4-динитробензолсульфонилхлоридом (DNS-Cl).

Сульфонамид может быть алкилирован с получением соединений общей формулы II-b, используя известные в данной области реакции Мицунобу, соответствующим образом замещенными первичными или вторичными спиртами формулы R⁷-OH (R⁷=алкил), трифенилфосфином (необязательно связанным с полимером) и диалкилазодикарбоксилатом в подходящих растворителях, таких как 1,4-диоксан, тетрагидрофуран или дихлорметан, при повышенной температуре или температуре окружающей среды. Альтернативно, сульфонамид общей формулы II-с может быть алкилирован, используя алкилгалогениды формулы R⁷-Гал (Гал = Cl, Br, I) и подходящее основание, такое как K₂CO₃, в растворителе, таком как N,N-диметилформамид, тетрагидрофуран или 1,4-диоксан. Расщепление сульфонамидной связи N-S первичным амином, таким как пропиламин, в подходящем растворителе, таком как дихлорметан, дает затем соединения формулы II-b. Альтернативно, сульфонамидная связь N-S может быть расщеплена с использованием меркаптоуксусной кислоты и третичного аминного основания в растворителе, таком как дихлорметан. Примеры проведения этих реакций можно найти в литературе. Например, см.: Tetrahedron Lett. 38 (1997) 5831-5834, Bioorg. Med. Chem. Lett. 10 (2000) 835-838.

Используя такие же способы, как описаны для получения производных II-b, получают соединения общей формулы I-с, где R¹, R², R⁴, R⁹, X, Y и Z такие, как определены выше, путем взаимодействия соединений II-а с (замещенными) алкилальдегидами или (циклическими) кетонами (например, пропиональдегид, циклогексанон, ацетон или ацетальдегид) в условиях восстановления или путем алкилирования производных II-с посредством R⁹-OH или R⁹-Гал, с последующим удалением DNS-группы. Соединения I-с могут быть восстановлены алкилированием снова, используя соответствующим образом замещенные альдегиды или кетоны, чтобы ввести R¹⁰, получая соединения общей формулы I-d, где R¹, R², R⁴, R⁹, R¹⁰, X, Y и Z такие, как определены выше. В некоторых случаях восстановительное алкилирование II-а может быть проведено дважды с получением соединений общей формулы I-d, где R⁹ = R¹⁰ (например, когда используют формальдегид, R⁹ = R¹⁰ = метил).

Соединения общей формулы II-а можно получить восстановлением нитрогруппы в соединениях общей формулы II-е в соответствующую аминогруппу. Обычно соединения II-е обрабатывают цинковой пылью и уксусной кислотой в подходящем растворителе, таком как ТГФ или диоксан, при температурах в диапазоне от 0°C до температуры образования флегмы. Альтернативные способы включают обработку железом, SnCl₂ или водородом в присутствии катализатора на основе переходных металлов, такого как палладий или платина на угле, используя способы и реагенты, известные специалистам в данной области. Альтернативно, соединения общей формулы II-а могут быть получены отщеплением известных N-защитных групп (=PG в формуле II-f), таких как аллилоксикарбонильной (Alloc), флуорен-9-илметоксикарбонильной (Fmoc) или трет-бутоксикарбонильной (Boc) группы в соединениях общей формулы II-f, получая соответствующие производные II-а. Родственные манипуляции с защитными группами можно найти в Protective groups in Organic Synthesis, T.W. Greene and P.G.M. Wuts, John Wiley & sons, Inc., New York, 1999.

Производные карбоновой кислоты общей формулы II-h, доступные в результате омыления соответствующих алкиловых сложных эфиров II-g, могут быть конденсированы с аминами общей структуры R⁹R¹⁰NH, используя конденсирующий реагент, как описано ранее для получения производных I-a из II-а, с получением соединений формулы I-е, где R¹, R², R⁴, R⁹, R¹⁰, X, Y и Z такие, как определены выше. Альтернативно, соединения общей формулы II-h могут быть превращены в соответствующие хлорангидриды кислот общей формулы II-i способами, известными в данной области: обработка карбоновых кислот общей формулы II-h

тионилхлоридом или оксалилхлоридом и ДМФА в подходящем растворителе, таком как дихлорметан или толуол, дает соответствующие хлорангидриды кислот II-i. Последующая реакция с аминами общей структуры R⁹R¹⁰NH, необязательно в присутствии подходящего третичного аминного основания, дает соединения общей формулы I-е.

Соединения общей формулы I-f, где R¹, R², R⁴, X, Y и Z такие, как определены выше, и R представляет собой циано, можно получить дегидратацией амидов общей формулы I-g в присутствии ангидрида трифторуксусной кислоты и подходящего основания, такого как триэтиламин или пиридин, в подходящем растворителе, таком как дихлорметан, 1,4-диоксан или тетрагидрофуран, при 0°C или температуре окружающей среды. Родственные дегидратации амидов с получением арилнитрилов можно найти в литературе, например, см.: Org. Prep. Proced. Int. 26 (1994) 429-438, Acta Chem. Scand. 53 (1999) 714-720, J. Org. Chem. 57 (1992) 2700-2705. Соединения формулы I-g получают согласно синтезу, в общих чертах описанного для производных I-е.

Соединения общей формулы II-j, где R¹, R², R⁴, X, Y и Z такие, как определены выше, могут быть O-алкилированы (замещенными) алкилгалогенидами E-Гaл (E = алкил, фторированный алкил, алкоксиалкил, гидроксиалкил, (замещенный) фенилалкил или (замещенный) гетероарилалкил; Гaл =Cl, Br, I) путем обработки основанием, таким как карбонат калия или карбонат цезия, в подходящем растворителе, таком как N,N-диметилформамид, ацетон, тетрагидрофуран, 1,4-диоксан или 1-метилпирролидин-2-он, получая соединения общей формулы I-h, где R¹, R², R⁴, X, Y и Z такие, как определены выше, и E представляет собой алкил, фторированный алкил, алкоксиалкил, гидроксиалкил, (замещенный) фенилалкил или (замещенный) гетероарилалкил. Альтернативно, для осуществления этого превращения могут быть использованы условия реакции Мицунобу, описанные для превращения производных II-с в соединения II-d.

Соединения общей формулы I можно также получить манипуляцией функциональных групп FG2 в соединениях общей формулы III (способ B). Например, функционализирование аминогруппы соединений общей формулы III-а таким же способом, как описан для превращения производных II-а в I-a и I-b, дает соединения общей формулы I-k, где R¹, R², R³, R¹², R¹³, X, Y и Z такие, как определены выше, A представляет собой (замещенное) фенильное или (замещенное) гетероарильное кольцо.

Соединения общей формулы I-l, где R¹, R², R³, R¹⁴, X, Y и Z такие, как определены выше, R¹⁵ представляет собой H и A представляет собой (замещенное) фенильное или (замещенное) гетероарильное кольцо, можно получить восстановительным алкилированием соединений общей формулы III-а, используя такие же способы, как описаны для получения соединений формулы II-b из II-а или путем последовательности из 3 стадий, описанной для получения производных II-b из II-а через II-c и II-d. Восстановительное алкилирование соединений I-l альдегидами или кетонами в присутствии цианоборгидрида натрия или триацетоксиборгидрида натрия может привести к получению соединений общей формулы I-m, где R¹, R², R³, R¹⁴, R¹⁵, X, Y и Z такие, как определены выше, и A представляет собой (замещенное) фенильное или (замещенное) гетероарильное кольцо.

Соединения общей формулы III-a могут быть получены из соединений общей формулы III-b или III-c по аналогии с получением соединений II-а из II-е или II-f, соответственно.

Производные амида I-n, где R¹, R², R³, R¹⁴, R¹⁵, X, Y и Z такие, как определены выше, и A представляет собой (замещенное) фенильное или (замещенное) гетероарильное кольцо, можно получить из карбоновых кислот III-е такими же способами (с помощью хлорангидрида кислоты или путем использования конденсирующих реагентов), которые описаны для получения соединений I-е из II-h.

Аналогично, сложные эфиры общей формулы I-o, где R¹, R², R³, R¹⁴, X, Y и Z такие, как определены выше, и A представляет собой (замещенное) фенильное или (замещенное) гетероарильное кольцо, можно получить из производных III-e и спиртов общей формулы R¹⁴-OH, используя такие же способы, как описаны для превращения III-e в соответствующие амиды I-n.

Соединения общей формулы III-e могут быть получены из соответствующих алкиловых сложных эфиров III-d путем опосредованного основанием или кислотой расщепления сложного эфира, хорошо известного специалистам в данной области.

Производные общей формулы I-p, где R¹, R², R³, R¹⁴, X, Y и Z такие, как определены выше, и A представляет собой (замещенное) фенильное или (замещенное) гетероарильное кольцо, можно получить алкилированием гидроксильной группы в соединениях общей формулы III-g алкилгалогенидом общей формулы R¹⁴-Гал, в котором Гал может представлять собой Br, Cl или I. Как правило, такую реакцию осуществляют в апротонном растворителе, таком как N,N-диметилформамид, 1,4-диоксан или тетрагидрофуран, в присутствии основания, такого как гидрид натрия, карбонат калия, карбонат цезия или триэтиламин, при температуре окружающей среды или повышенной температуре. Альтернативно, превращение соединений общей формулы III-g в ариловые эфиры общей формулы I-p, может быть осуществлено в условиях алкилирования Мицунобу. В таком превращении алкилирование гидроксильной группы в соединениях формулы III-g осуществляют спиртами общей формулы R¹⁴-OH при воздействии (связанного с полимером) трифенилфосфина и диэтилазодикарбоксилата или его производных в подходящем апротонном растворителе, таком как тетрагидрофуран или дихлорметан.

Производные общей формулы III-g можно получить отщеплением гидроксил-защитной группы в соединениях общей формулы III-f. Подходящими защитными группами, общеизвестными специалистам в данной области, являются тетрагидропиранильные (THP) или трет-бутилдиметилсилильные (TBS) защитные группы. Отщепление THP и TBS групп обычно осуществляют обработкой кислотами, такими как хлористоводородная кислота, трифторметансульфокислота или трифторуксусная кислота, в подходящем растворителе, таком как тетрагидрофуран или метанол. Альтернативно, TBS группу можно удалить обработкой фторидом тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране. Родственные манипуляции с защитными группами можно найти в Protective groups in Organic Synthesis, T.W. Greene and P.G.M. Wuts, John Wiley & sons, Inc., New York, 1999.

Соединения общей формулы I могут быть также получены манипулированием обеих функциональных групп FG1 и FG2 в соединениях общей формулы IV (способ C), в направлении, описанном для превращений соединений общей формулы II и III. Две функциональные группы могут быть, но могут и не быть, идентичными. Специалистам в данной области очевидно, что порядок, в соответствии с которым модифицируют функциональные группы FG1 и FG2, может иметь решающее значение для успешного завершения синтеза. Очевидно, что в некоторых случаях использование (ортогональных) защитных групп может быть необходимо.

Например, динитросоединения общей формулы IV-a могут быть восстановлены в диаминосоединения IV-b, используя способы, описанные для получения производных II-а из II-е. Обычное N-ацилирование или N-сульфонилирование дает соединения общей формулы I-q, где R¹, R², R³, X, Y и Z такие, как определены выше, и A представляет собой (замещенное) фенильное или (замещенное) гетероарильное кольцо и R¹³ = R⁸.

Чтобы сделать возможным независимую вариацию заместителей (например, R⁸ и R¹³), функциональные группы в соединениях общей формулы IV должны подвергаться превращениям ортогональным способом. Например, соединения общей формулы IV-c могут быть функционализированы, используя такие же способы, как описаны для синтеза производных I-a, I-b, I-е и I-d из соединений II-а, с получением соединений общей формулы IV-d, где R¹, R², X, Y и Z такие, как определены выше, A представляет собой (замещенное) фенильное или (замещенное) гетероарильное кольцо и G представляет собой NR⁷R⁸ или NR⁹R¹⁰. Эти соединения могут быть превращены в производные I-r, где R¹, R², X, Y и Z такие, как определены выше, A представляет собой (замещенное) фенильное или (замещенное) гетероарильное кольцо и G представляет собой NR⁷R⁸ или NR⁹R¹⁰ и К представляет собой NR¹²R¹³ или NR¹⁴R¹⁵.

Очередной возможностью достигнуть желаемых соединений общей формулы I может быть функционализация соединений общей формулы V (способ D). Соединения общей формулы V-a, где X = О, могут быть использованы для получения соединений I-s, где R¹, R², R³, R⁴, Y и Z такие, как определены выше, и X = O, путем О-алкилирования, O-ацилирования или О-сульфонилирования, используя обычные условия, общеизвестные для специалистов в данной области. Картина замещения (гетеро)арильного кольца в R⁴ такая, как определена выше. В типичном эксперименте соединения V-a подвергают взаимодействию в растворителе, таком как дихлорметан, N,N-диметилформамид, диметилсульфоксид, этанол, тетрагидрофуран, 1,4-диоксан, толуол, 1-метилпирролидин-2-он или пиридин, с соответствующим образом замещенным (гетеро)ароматическим алкилгалогенидом формулы IX, ацилхлоридом формулы X или сульфонилхлоридом формулы XII в присутствии основания, такого как триэтиламин, N,N-диизопропилэтиламин (DiPEA), пиридин, карбонат калия, карбонат цезия или гидрид натрия, необязательно в присутствии каталитического количества иодида калия или иодида тетрабутиламмония, с получением O-алкилированных, О-ацилированных или O-сульфонилированных производных формулы I-s соответственно.

Альтернативно, О-алкилированные соединения общей формулы I-s, в которой Y = CH₂, можно получить, используя известные в данной области реакции Мицунобу со спиртами формулы XIII, трифенилфосфином (необязательно связанного с полимером) и диалкилазодикарбоксилатом (например, диэтилазодикарбоксилатом) в подходящих растворителях, таких как 1,4-диоксан, тетрагидрофуран или дихлорметан, при повышенной температуре или температуре окружающей среды.

Кроме того, О-ацилированные соединения общей формулы I-s, где Y = C(O), могут быть получены взаимодействием (гетеро)ароматической карбоновой кислоты формулы XI в присутствии конденсирующего реагента, такого как диизопропилкарбодиимид (DIC), (3-диметиламинопропил)этилкарбодиимид (EDCI), О-(бензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметилуроний тетрафторборат (TBTU) или O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N,N,N',N^'-тетраметилуроний гексафторфосфат (HATU), и третичного аминного основания (например, DiPEA) в растворителе, таком как N,N-диметилформамид или дихлорметан, при температуре окружающей среды или повышенной температуре.

Аналогично, соединения общей формулы I-t можно получить из соединений V-b N-алкилированием, N-ацилированием или N-сульфонилированием, используя такие же способы, как описаны для синтеза соединений I-s, используя реагенты формулы IX-XIII. Кроме того, соединения общей формулы I-t, в которой Y = CH₂, могут быть получены восстановительным аминированием (гетеро)ароматических альдегидов формулы XIV с соединениями V-b и подходящим восстановителем, таким как цианоборгидрид натрия или триацетоксиборгидрид натрия. Альтернативно, соединения общей формулы V-b могут быть превращены в соответствующие бензимины по реакции с (гетеро)ароматическими альдегидами XIV способами, известными специалистам в данной области, с последующим восстановлением в присутствии восстановителя, такого как боргидрид натрия, с получением соединений I-t, в которых Y = CH₂.

Соединения общей формулы I-t, где R¹, R², R³, R⁴, Y и Z такие, как определены выше, и X представляет собой NH, могут быть N-алкилированы такими же способами, как описано для получения производных I-b из I-a (если Y = C(O) или SO₂), или такими же способами, как описано для получения соединений-производных II-b из II-а (если Y = CH₂), с получением соединений общей формулы I-u, где R¹⁶ представляет собой (1-4C)алкильную группу.

Соединения общей формулы I, где R¹, R², R³, R⁴, X, Y и Z такие, как определены выше, можно также получить в соответствии с основательно документально подтвержденной реакцией поликонденсации типа Ганча с участием трех компонентов (способ E), исходя из циклогексан-1,3-дионов общей формулы VI, енаминов общей формулы VII и бензальдегидов общей формулы VIII-a-b

Родственные реакции циклоконденденсации типа Ганча можно найти в: Bioorg. Med. Chem. Lett. 12 (2002) 1481-1484, J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1 (2002) 1141-1156, Synlett (2002) 89-92, Drug Dev. Res. 51 (2000) 225-232, Drug Dev. Res. 51 (2000) 233-243, J. Med. Chem. 42 (1999) 1422-1427, там же 5266-5271, там же 41 (1998) 2643-2650, WO 9408966, Arzneim.-Forsch./Drug Res. 45 (1995) 1054-1056, J. Med. Chem. 34 (1991) 2248-2260, там же 17 (1974) 956-65, Indian J. Chem., Sect В (1994) 526-531, Chem. Rev. 72 (1972), 1-42. Вышеупомянутую реакцию обычно проводят при повышенной температуре в подходящих растворителях, таких как уксусная кислота, (изо)пропанол, этанол, метанол или их смеси.

Соединения общей формулы I-w, где R² представляет собой H и R³ представляет собой R⁹,R¹⁰-аминосульфонил и R¹, R⁴, X, Y и Z такие, как определены выше, могут быть синтезированы каталитическим гидрированием соединений общей формулы I-v, используя водород и катализатор на основе переходных металлов, такой как палладий на угле, в подходящих растворителях, таких как этанол, метанол, этилацетат или их смеси.

Соединения общей формулы II достижимы исходя из производных общей формулы XV-a и XV-b, используя такие же способы, как описаны для получения соединений общей формулы I-s и I-t соответственно, используя реагенты формулы IX-XIV.

Подобно N-алкилированию соединений общей формулы I-t с получением I-u, соединения общей формулы II-k, где R¹, R², R⁴, Y, Z такие, как определены выше, и X = NH, могут быть N-алкилированы с получением соединений общей формулы II-l, где R¹⁶ представляет собой (1-4C)алкильную группу.

Соединения общей формулы II и III могут быть также синтезированы согласно реакциям циклоконденсации типа Ганча путем взаимодействия соединений VI и VII с альдегидами формулы XVI или XVII соответственно.

Соединения общей формулы III также достижимы исходя из производных общей формулы V-a и V-b, используя такие же способы, как описаны для получения соединений общей формулы I-s и I-t соответственно, используя реагенты формулы XVIII-XXIII.

Аналогично, соединения общей формулы IV можно получить из производных общей формулы XV-a и XV-b, используя такие же способы, как описаны для

получения соединений общей формулы I-s и I-t соответственно, используя реагенты формулы XVIII-XXIII.

Соединения общей формулы IV и V-a-b можно также получить согласно вышеупомянутой реакции циклоконденсации типа Ганча, используя замещенные бензальдегиды общей формулы XXIV или XXV соответственно.

Соединения общей формулы V-c-d, в которой R² представляет собой Br, могут быть также получены орто-бромированием фенолов или анилинов, которые общеизвестны специалистам в данной области. Так, соединения формулы V-e-f - синтезированные из соединений VI и VII и альдегидов XXVI реакцией циклоконденсации типа Ганча - дают соединения формулы V-c-d после обработки бромом в подходящем растворителе, таком как уксусная кислота, этанол или дихлорметан или их смеси, необязательно в присутствии ацетата натрия. Альтернативно, для достижения этого превращения можно использовать N-бромсукцинимид в N,N-диметилформамиде или ацетонитриле. Например, см.: J. Chem. Soc. Perkin Trans.2 6 (2000) 1113-1118, J. Org. Chem. 44 (1979), 4733-4735.

Кроме того, соединения общей формулы V-i, где R³ представляет собой сульфамоильную группу и X = O, можно получить взаимодействием аминов общей формулы R⁹R¹⁰NH с соединениями общей формулы V-h, необязательно в присутствии третичного аминного основания, такого как триэтиламин или DiPEA. Соединения V-h получают хлорсульфонилированием соединений общей формулы V-g. Для родственных примеров в литературе, касающихся хлорсульфонилирования фенолов, см.: Tetrahedron 53 (1997) 4145-4158, Bioorg. Med. Chem. Lett. 13 (2003) 379-382.

Соединения общей формулы V можно также получить из соединений общей формулы XV путем селективного модифицирования FG1. Например, соединения общей формулы XV-c-d, где R¹, R² и Z такие, как определены выше, и FG1 представляет собой NH₂, могут быть селективно N-ацилированы или N-сульфонилированы, используя такие же условия, как описаны для получения соединений I-a из II-а, с получением соединений общей формулы V-j-k, где R¹, R², R⁸ и Z такие, как определены выше. Примеры в литературе, сообщающие о подобной региоселективности при ацилировании или сульфонилировании производных 1,2-диаминобензола, см.: J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1 (1988) 1939-1943, J. Med. Chem. 33 (1990) 2101-2108, J. Med. Chem. 43 (2000) 4084-4097, Bioorg. Med. Chem. 10 (2002) 3997-4004. Для примеров, описывающих региоселективную функционализацию производных орто-гидроксианила, см.: J. Org. Chem. 53 (1988) 4762-4769, JP 2003026630, Pharm. Chem. J. 36 (2002), 410-412.

Соединения общей формулы XV можно также получить вышеупомянутой реакцией циклоконденсации типа Ганча, используя замещенные бензальдегиды общей формулы XXVII. Кроме того, соединения общей формулы XV, где R² = Br, можно получить реакцией Ганча с альдегидами общей формулы XXVIII, с последующим орто-бромированием образовавшихся фенолов и анилинов, по аналогии с получением соединений формулы V-c-d.

Замещенные циклогексан-1,3-дионы общей формулы VI являются коммерчески доступными или их можно получить описанными в литературе способами. Релевантные примеры имеются в: J. Med. Chem. 43 (2000) 4678-4693, Tetrahedron 56 (2000) 4753-4758, J. Med. Chem. 35 (1992) 3429-3447, там же 24 (1981) 1026-1034, Org. Synt. Coll. Vol. V (1973) 400, Chem. Ber. 88 (1955) 316-327, Justus Liebig Ann. Chem. 570 (1950) 15-31.

Соединение формулы VII-a является коммерчески доступным и соединение VII-b документально подтверждено в литературе, см., например: Drug Dev. Res. 51 (2000) 225-232.

Соединения общей формулы IX-XIV и XVIII-XXIII либо коммерчески доступны, документально подтверждены в литературе, либо могут быть легко синтезированы специалистами в данной области.

Бензальдегиды общей формулы VIII-a, где R², R³, R⁴ и Y такие, как определены выше, и X = O, легко получают из бензальдегидов общей формулы XXV-a, используя такие же способы, как описаны для превращения соединений формулы V-a в I-s. Аналогично, соединения общей формулы VIII-b, где R², R³, R⁴ и Y такие, как определены выше, и X = N-R¹⁶, получают из XXV-b, используя такие же способы, как описаны для превращения соединений V-b в I-t. Подобным образом, бензальдегиды общей формулы XVII-a-b получают из альдегидов XXV-a-b, по реакции с соединениями с XVIII по XXIII.

Следуя такой же стратегии, бензальдегиды общей формулы XVI-a-b и XXIV-a-b получают из соединений общей формулы XXVII-a-b.

Бензальдегиды общей формулы XXV, XXVI, XXVII и XXVIII коммерчески доступны, документально подтверждены в литературе или могут быть получены специалистами в данной области. Например, см.: J. Chem. Soc., Perkin Trans. 2 (2000) 1119-1124, J. Chem. Soc., Chem. Commun. 4 (1993) 419-420, Synth. Commun. 20 (1990) 2659-2666, Chem. Pharm. Bull. 34 (1986) 121-129, Indian J. Chem. Sect. В 20 (1981) 1010-1013, Monatsh. Chem. 106 (1975) 1191-1201, DE 1070162, J. Org. Chem. 23 (1958) 120, Tetrahedron Lett. 25 (1984), 2901-2904, J. Org. Chem. 25 (1960), 2053-2055, J. Chem. Soc., Perkin Trans. 2 (1992), 2235-2242.

Кроме того, бензальдегиды общей формулы XXV-c и XXVII-c, где R² представляет собой бромид и X представляет собой N-H, можно получить бромированием соединений общей формулы XXIX, используя такие же способы, как описаны для превращения соединений общей формулы V-f в V-d. Соединения общей формулы XXIX легко получают из соединений общей формулы XXX, используя те же способы восстановления, как описаны для получения соединений общей формулы II-а из II-e. Соединения общей формулы XXX являются коммерчески доступными, документированы в литературе, или они могут быть легко получены специалистами в данной области.

Кроме того, замещенные бензальдегиды общих формул VIII, XVI, XVII, XXIV, XXV, XXVI, XXVII, XXVIII, XXIX, XXX могут быть получены из соответствующих бензойных кислот XXXI или сложных эфиров бензойных кислот общей формулы XXXII способами восстановления, известными в данной области. Кроме того, окисление спиртов XXXIII способами, известными в данной области, также приводит к получению бензальдегидов. С таким же успехом бензилбромиды XXXIV, которые можно получить бензилбромированием соответствующих производных толуола XXXV, могут быть превращены в бензальдегиды способами, известными в данной области. Кроме того, альдегиды можно получить реакцией снятия защиты с соответствующих (циклических) ацеталей общей формулы XXXVI.

Соединения по данному изобретению имеют, по меньшей мере, два хиральных атома углерода и поэтому могут быть получены в виде чистых энантиомеров или в виде смеси энантиомеров, или в виде смеси диастереомеров. Способы получения чистых энантиомеров общеизвестны в данной области техники, например, кристаллизация солей, которые получают из оптически активных кислот и рацемической смеси, или хроматография с использованием хиральных колонок. Для разделения диастереомеров могут быть использованы колонки с прямой или обращенной фазой.

Соединения по данному изобретению могут образовывать гидраты или сольваты. Специалистам в данной области известно, что заряженные соединения образуют различные гидраты при лиофилизации с водой, или образуют сольваты при концентрировании в растворе с соответствующим органическим растворителем. Соединения по данному изобретению включают гидраты или сольваты перечисленных соединений.

Производные 4-фенил-5-оксо-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолина по данному изобретению, как было установлено, являются агонистами рецептора FSH. Методы определения связывания с рецептором, а также анализы in vitro и in vivo определения биологической активности гонадотропинов общеизвестны. В общем, экспрессированный рецептор вводят в контакт с соединением, подлежащим испытанию, и измеряют связывание, или стимулирование, или ингибирование функционального ответа.

Для измерения функционального ответа выделенную ДНК, кодирующую ген рецептора FSH, предпочтительно человеческий рецептор, экспрессируют в подходящих клетках-хозяевах. Такой клеткой может быть клетка яичника китайского хомячка, но применимы также и другие клетки. Предпочтительными являются клетки, принадлежащие млекопитающим (Jia et al, Mol. Endocrin., 5:759-776, 1991).

Методы конструирования клеточных линий, экспрессирующих рекомбинантный FSH, общеизвестны в данной области техники (Sambrook et al., Molecular Cloning: a Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, latest edition). Экспрессия рецептора достигается экспрессией ДНК, кодирующей требуемый белок. К этому времени методы сайтнаправленного мутагенеза, лигирования дополнительных последовательностей, ПЦР и конструирования подходящих экспрессионных систем, все это хорошо известно в данной области. Участки ДНК, или всю молекулу ДНК, кодирующую требуемый белок, можно сконструировать синтетическим путем, используя обычные твердофазные методы, предпочтительно включая сайты рестрикции для облегчения лигирования. Подходящие контрольные элементы для транскрипции и трансляции включенной кодирующей последовательности могут быть предусмотрены в ДНК-кодирующих последовательностях. Как хорошо известно, в настоящее время в распоряжении имеются экспрессионные системы, которые совместимы с большим разнообразием хозяев, включая прокариотических хозяев, таких как бактерии, и эукариотических хозяев, таких как дрожжи, растительные клетки, клетки насекомых, клетки млекопитающих, клетки птиц и т.п.

Затем клетки, экспрессирующие рецептор, вводят в контакт с испытуемым соединением, для наблюдения связывания, или стимуляции, или ингибирования функционального ответа.

Альтернативно, для измерения связывания испытуемого соединения могут быть использованы выделенные клеточные мембраны, содержащие экспрессированный рецептор.

Для измерения связывания могут быть использованы радиоактивные или флуоресцирующие соединения. В качестве эталонного соединения может быть использован человеческий рекомбинантный FSH.

Как альтернатива, могут быть также осуществлены анализы конкурентного связывания (с рецептором).

Другой анализ включает скрининг соединений-агонистов рецептора FSH путем определения стимуляции рецептор-опосредованного накопления цАМФ. Так например, такой метод включает экспрессию рецептора на клеточной поверхности клетки-хозяина и воздействие на клетку испытуемого соединения. Затем измеряют количество цАМФ. Уровень цАМФ должен возрастать при стимулирующем действии испытуемого соединения после связывания с рецептором.

Помимо непосредственного измерения, например, уровней цАМФ в экспонированной клетке, могут быть использованы клеточные линии, которые помимо трансфекции с ДНК, кодирующей рецептор, также трансфицируют со второй ДНК, кодирующей репортерный ген, экспрессия которого реагирует на уровень цАМФ. Такие репортерные гены могут быть цАМФ индуцируемы или могут быть сконструированы таким образом, чтобы быть связанными с новыми чувствительными цАМФ элементами. В общем, экспрессия репортерного гена может регулироваться любым чувствительным элементом, реагирующим на изменяющиеся уровни цАМФ. Подходящие репортерные гены представляют собой, например, LacZ, щелочную фосфатазу, люцеферазу светлячков и зеленый флуоресцирующий белок. Принципы анализов такой трансактивации известны в данной области техники и изложены, например, в Stratowa, Ch., Himmler, A. and Czernilofsky, A.P., (1995) Curr. Opin. Biotechnol. 6:574.

Настоящее изобретение также относится к фармацевтической композиции, содержащей производное 4-фенил-5-оксо-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолина или его фармацевтически приемлемые соли, имеющее общую формулу I, в смеси с фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами и необязательно другими терапевтическими средствами. Вспомогательные вещества должны быть "приемлемыми" в том смысле, что они должны быть совместимыми с другими компонентами композиции и не быть вредными для реципиента.

Фармацевтические композиции включают, например, композиции, подходящие для перорального, сублингвального, подкожного, внутривенного, внутримышечного, назального, местного или ректального введения и т.п., все в виде стандартных лекарственных форм для введения.

В случае перорального введения активный компонент может быть представлен в виде дискретных единиц, таких как таблетки, капсулы, порошки, гранулы, растворы, суспензии и т.п.

Для парентерального введения фармацевтическая композиция по данному изобретению может быть представлена в упаковках, содержащих лекарственное средство в дозах на один прием или в упаковках лекарственного средства для многократного приема, например жидкости для инъекции в предопределенных количествах, например, в герметичных флаконах и ампулах, и, кроме того, они могут храниться в лиофилизованном (высушенном сублимацией) состоянии, требующем только добавления стерильного жидкого носителя, например воды, непосредственно перед применением.

Смешанное с такими фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами, например, как описанными в обычной ссылке, Gennaro, A.R. et al., Remington: The Science and Practice of Pharmacy (20th Edition., Lippincott Williams & Wilkins, 2000, see especially Part 5: Pharmaceutical Manufacturing), активное средство может быть спрессовано в твердые дозированные единицы, такие как пилюли, таблетки, или подвергнуто обработке с получением капсул или суппозиторий. С помощью фармацевтически приемлемых жидкостей активное средство может применено в виде жидкой композиции, например в виде препарата для инъекции, в форме раствора, суспензии, эмульсии или в виде аэрозоля, например назального аэрозоля.

Для приготовления твердых стандартных лекарственных форм предполагается использование обычных добавок, таких как наполнители, красители, полимерные связующие и т.п. В общем, может быть использовано любое фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество, которое не мешает функционированию активных соединений. Подходящие носители, с которыми активное средство по данному изобретению может вводиться в виде твердых композиций, включают лактозу, крахмал, производные целлюлозы и т.п., или их смеси, используемые в подходящих количествах. В случае парентерального введения могут быть использованы водные суспензии, изотонические физиологические растворы и стерильные растворы для инъекций, содержащие фармацевтически приемлемые диспергирующие и/или увлажняющие средства, такие как пропиленгликоль или бутиленгликоль.

Кроме того, данное изобретение включает вышеописанную фармацевтическую композицию в комбинации с упаковочным материалом, подходящим для указанной композиции, при этом указанный упаковочный материал включает инструкции для применения данной композиции для использования, изложенного выше.

Точная доза и режим введения активного компонента или фармацевтической композиции, содержащей его, могут варьироваться в зависимости от конкретно используемого соединения, пути введения и возраста и состояния индивидуального субъекта, которому должно вводиться лекарственное средство.

В общем, парентеральное введение требует более низких доз, чем другие способы введения, которые в большей степени зависят от абсорбции. Однако подходящая доза для людей может составлять 0,05-25 мг на кг массы тела. Желательная доза может быть представлена в виде одной дозы или многократных субдоз, вводимых в соответствующие интервалы времени на протяжении дня, или в случае реципиентов женского пола в виде доз, которые вводят в соответствующие суточные интервалы времени на протяжении менструального цикла. Дозы, так же как и режим введения, могут быть различными для реципиента женского и мужского пола.

Таким образом, соединения по данному изобретению могут применяться в терапии.

Другой аспект изобретения относится к применению производного 4-фенил-5-оксо-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолина, представленного общей формулой I, для получения лекарственного средства, подлежащего использованию для лечения нарушений, чувствительных к опосредованным рецептором FSH путям (развития), предпочтительно для лечения нарушений фертильности. Соответственно, пациентам, нуждающимся в этом лечении, могут вводиться подходящие количества соединений по данному изобретению.

В очередном аспекте данное изобретение относится к применению производного 4-фенил-5-оксо-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолина, имеющего общую формулу I, для получения лекарственного средства, которое используют для лечения нарушений фертильности.

Данное изобретение иллюстрируется нижеследующими примерами.

ПРИМЕРЫ

Общие комментарии:

В примерах используют нижеследующие аббревиатуры: DMA = N,N-диметиланилин, DIPEA = N,N-диизопропилэтиламин, TFA = трифторуксусная кислота, HATU = гексафторфосфат O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметилурония, Fmoc = 9-флуоренилметоксикарбонил, Fmoc-Cl = 9-флуоренилметоксикарбонилхлорид, DMF = N,N-диметилформамид (ДМФА), THF = тетрагидрофуран (ТГФ).

Если не оговорено особо, все конечные продукты нижеприведенных примеров подвергают лиофильной сушке из смесей вода/1,4-диоксан, смесей вода/трет-бутанол или вода/ацетонитрил. Если соединение получают в виде соли HCl или TFA, то перед лиофилизацией к смеси растворителей добавляют соответствующие кислоты в подходящих количествах.

Названия конечных продуктов, описанных в примерах, составлены с использованием программы Beilstein Autonom (версия: 2.02.304).

Для определения времен удерживания используют нижеследующие способы проведения аналитической ВЭЖХ:

Способ 1: колонка: 5 мкм Luna C-18(2) 150×4,6 мм; скорость потока: 1 мл/мин; детектирование: 210 нм; температура колонки: 40°C; растворитель A: смесь CH₃CN/H₂O = 1/9 (об./об.); растворитель B: CH₃CN; растворитель C: 0,1M водная трифторуксусная кислота; градиент: растворитель A/B/C = 65/30/5 до 10/85/5 (об./об./об.) за 30,00 мин, затем постоянный в течение еще 10,00 мин при A/B/C = 10/85/5 (об./об./об.).

Способ 2: идентичен способу 1, за исключением используемого градиента: Градиент: растворитель A/B/C = 75/20/5 до 15/80/5 (об./об./об.) за 30,00 мин, затем постоянный в течение еще 10,00 мин при A/B/C = 15/80/5 (об./об./об.).

Способ 3: Идентичен способу 1, за исключением используемого градиента: Градиент: растворитель A/B/C = 95/0/5 до 15/80/5 (об./об./об.) за 30,00 мин, затем постоянный в течение еще 10,00 мин при А/B/C = 15/80/5 (об./об./об.).

Способ 4: Идентичен способу 1, за исключением используемого градиента: Градиент: растворитель A/B/C = 60/40/0 до 0/100/0 (об./об./об.) за 20,00 мин, затем постоянный в течение еще 10,00 мин при A/B/C = 0/100/0 (об./об./об.).

Диастереомерное соотношение определяют, если наблюдают исходное разделение индивидуальных диастереомеров, используя соответствующий способ проведения аналитической ВЭЖХ. Альтернативно, диастереомерное соотношение определяют посредством анализа методом ¹H-ЯМР в том случае, когда идентифицируют различимые сигналы, соответствующие диастереомерам.

Для очистки веществ методом препаративной ВЭЖХ используют нижеследующие способы:

Способ A: Колонка = Luna C-18. Градиент: 0,1% трифторуксусной кислоты в смеси H₂O/CH₃CN (9/1, об./об.)/CH₃CN = 80/20 до 0/100 (об./об.) на протяжении 30-45 мин, в зависимости от легкости разделения. Детектирование: 210 нм.

Способ B: Колонка = Luna C-18. Градиент: смесь H₂O/CH₃CN (9/1, об./об.)/CH₃CN = 80/20 до 0/100 (об./об.) на протяжении 30-45 мин, в зависимости от легкости разделения. Детектирование: 210 нм.

Пример 1

4-[3-Бром-4,5-бис-(3-метоксибензилокси)фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-3-карбонитрил

(a). 3-Бром-4,5-бис-(3-метоксибензилокси)бензальдегид

Смесь 5-бром-3,4-дигидроксибензальдегида (100 мг), 3-метоксибензилбромида (71 мкл), карбоната калия (140 мг) и иодида тетрабутиламмония (10 мг) в 5 мл ДМФА перемешивают при 60°C в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляют водой и экстрагируют этилацетатом. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме.

Выход: 143 мг.

(b). 4-[3-Бром-4,5-бис-(3-метоксибензилокси)фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-3-карбонитрил

Смесь 3-бром-4,5-бис-(3-метоксибензилокси)бензальдегида (143 мг), 3-аминокротонитрила (28 мг), 5-пропилциклогексан-1,3-диона (52 мг) в этаноле (10 мл) перемешивают при 80°C в течение 17 ч. Смесь концентрируют в вакууме. Остаток очищают хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюента смесь гептан/этилацетат 1/1→2/8 (об./об.).

Выход: 122 мг. МС-ЭРИ (Масс-спектрометрия с электрораспылительной ионизацией): [M+H]⁺=657,4/659,4; анал. ВЭЖХ R_t=17,18 мин (диастереомер 1), R_t=17,3 мин (диастереомер 2) (способ 4). Диастереомерное соотношение: 4:1.

Пример 2

4-[3-Бром-4-(3-метоксибензилокси)-5-нитрофенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-3-карбонитрил

(a). 3-Бром-4-гидрокси-5-нитробензальдегид

3-Бром-4-гидроксибензальдегид (250 мг) растворяют в 5 мл уксусной кислоты. Добавляют азотную кислоту (52 мкл) и смесь перемешивают в течение 3 ч, на протяжении которых образуется твердое вещество. Твердое вещество отфильтровывают, промывают водой и сушат в вакууме.

Выход: 249 мг. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=245,8/247,8

(b). 3-Бром-4-(3-метоксибензилокси)-5-нитробензальдегид

К раствору 3-бром-4-гидрокси-5-нитробензальдегида (87,4 мг) в сухом дихлорметане (7,5 мл) добавляют 3-метоксибензиловый спирт (35 мкл), трифенилфосфин (103 мг) и диэтилазодикарбоксилат (45 мкл). Смесь перемешивают в атмосфере азота в течение 17 ч и затем концентрируют в вакууме. Остаток очищают хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюента смесь гептан/этилацетат 9/1→1/1 (об./об.).

Выход: 50 мг.

(c). 4-[3-Бром-4-(3-метоксибензилокси)-5-нитрофенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-3-карбонитрил

Смесь 3-бром-4-(3-метоксибензилокси)-5-нитробензальдегида (50 мг), 3-аминокротонитрила (13 мг) и 5-пропилциклогексан-1,3-диона (25 мг) в 10 мл этанола перемешивают при 80°C в течение 17 ч. Смесь концентрируют в вакууме. Остаток очищают хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюента смесь гептан/этилацетат 8/2→1/1 (об./об.).

Выход: 50 мг. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=566,2/568,2; анал. ВЭЖХ R_t=22,66 мин (способ 1). Диастереомерное соотношение: 4:1.

Пример 3

4-[3-Амино-5-бром-4-(3-метоксибензилокси)фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-3-карбонитрил

Соединение, описанное в примере 2c, (81 мг), растворяют в ТГФ (10 мл) и охлаждают до 0°C. Добавляют уксусную кислоту (123 мкл), с последующим добавлением цинковой пыли (187 мг). После перемешивания при комнатной температуре в течение 1 ч смесь разбавляют дихлорметаном и промывают насыщенным водным NaHCO₃ и насыщенным раствором соли. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают препаративной ВЭЖХ (способ A).

Выход: 15,3 мг (в виде соли TFA). МС-ЭРИ: [M+H]⁺=536,4/538,4; анал. ВЭЖХ: R_t=18,77 мин (способ 1). Диастереомерное соотношение: 5:1.

Пример 4

4-[3-Этокси-4-(3-метоксибензилокси)-5-нитрофенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-3-карбонитрил

(a). 3-Этокси-4-(3-метоксибензилокси)-5-нитробензальдегид

Смесь 5-нитро-3-этокси-4-гидроксибензальдегида (100 мг), 3-метоксибензилбромида (73 мкл), карбоната калия (144 мг) и иодида тетрабутиламмония (10 мг) в ДМФА (5 мл) перемешивают при 60°C в течение 90 мин. Смесь выливают в воду и экстрагируют этилацетатом. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюента смесь гептан/этилацетат 2/1 (об./об.).

Выход: 43 мг.

(b). 4-[3-Этокси-4-(3-метоксибензилокси)-5-нитрофенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-3-карбонитрил

Смесь 3-этокси-4-(3-метоксибензилокси)-5-нитробензальдегида (40 мг), 3-аминокротонитрила (10 мг) и 5-пропилциклогексан-1,3-диона (19 мг) в этаноле (2 мл) перемешивают при 80°C в течение 17 ч. Смесь концентрируют в вакууме. Остаток очищают хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюента смесь гептан/этилацетат 1/1 (об./об.).

Выход: 50 мг. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=532,4; анал. ВЭЖХ: R_t=21,17 мин (диастереомер 1) Rt=21,55 мин (диастереомер 2.) (гетеро 1)

Диастереомерное соотношение: 4,5:1.

Пример 5

4-[3-Амино-5-этокси-4-(3-метоксибензилокси)фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-3-карбонитрил

К раствору соединения, описанного в примере 4b, (100 мг) и уксусной кислоты (162 мкл) в ТГФ (5 мл), охлажденному до 0°C, при интенсивном перемешивании добавляют цинковую пыль (246 мг).

После перемешивания в течение 30 мин смесь фильтруют, разбавляют дихлорметаном и промывают водой. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме.

Выход: 85 мг (в виде соли TFA). МС-ЭРИ: [M+H]⁺=502,4; анал. ВЭЖХ: R_t=15,28 мин (диастереомер 1) R_t=16,38 мин (диастереомер 2) (способ 2). Диастереомерное соотношение 4:1.

Пример 6

N-[3-Бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-2-(3-метоксибензилокси)фенил]бутирамид

Смесь соединения, описанного в примере 3, (100 мг), бутирилхлорида (21 мкл) и N,N-диизопропилэтиламина (162 мкл) в дихлорметане (5 мл) перемешивают в течение 17 ч. Смесь разбавляют дихлорметаном и промывают насыщенным водным NaHCO₃. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают препаративной ВЭЖХ (способ B).

Выход: 52 мг. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=606,2/608,2; анал. ВЭЖХ: R_t=21,60 мин (диастереомер 1) R_t=21,99 мин (диастереомер 2) (способ 1). Диастереомерное соотношение: 4:1.

Пример 7

Метиловый эфир [3-бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-2-(3-метоксибензилокси)фенил]карбаминовой кислоты

Смесь соединения, описанного в примере 3, (100 мг), метилхлорформиата (17 мкл) и N,N-диизопропилэтиламина (162 мкл) в сухом дихлорметане (5 мл) перемешивают в течение 17 ч. Смесь разбавляют дихлорметаном и промывают насыщенным водным NaHCO₃. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают препаративной ВЭЖХ (способ B).

Выход: 35 мг. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=594,2/596,2; анал. ВЭЖХ: R_t=20,33 мин (диастереомер 1) R_t=20,73 мин (диастереомер 1) (способ 1). Диастереомерное соотношение: 5:1.

Пример 8

N-[3-Бром-5-(3-циано-2-метил-5-oxo-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-2-(3-метоксибензилокси)фенил]-2-метоксиацетамид

Смесь соединения, описанного в примере 3, (100 мг), метоксиацетилхлорида (24,3 мг) и N,N-диизопропилэтиламина (162 мкл) в дихлорметане (5 мл) перемешивают в течение 17 ч. Смесь разбавляют дихлорметаном и промывают насыщенным водным NaHCO₃. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают препаративной ВЭЖХ (способ B).

Выход: 37 мг. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=608,2/610,2; анал. ВЭЖХ: R_t=19,99 мин (диастереомер 1) R_t=20,44 мин (диастереомер 2) (способ 1). Диастереомерное соотношение: 5:1.

Пример 9

[3-Бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-2-(3-метоксибензилокси)фенил]амид фуран-2-карбоновой кислоты

Смесь соединения, описанного в примере 3, (100 мг), 2-фуроилхлорида (28,9 мг) и N,N-диизопропилэтиламина (162 мкл) в дихлорметане (5 мл) перемешивают в течение 17 ч. Смесь разбавляют дихлорметаном и промывают насыщенным водным NaHCO₃. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают препаративной ВЭЖХ (способ B).

Выход: 92 мг. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=630,2/632,2; анал. ВЭЖХ: R_t=21,27 мин (диастереомер 1) R_t=21,75 мин (диастереомер 2) (способ 1). Диастереомерное соотношение: 5:1.

Пример 10

N-[3-Бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-2-(3-метоксибензилокси)фенил]метансульфонамид

Смесь соединения, описанного в примере 3, (100 мг), метансульфонилхлорида (22 мкл) и пиридина (46 мкл) в дихлорметане (5 мл) перемешивают в течение 17 ч. Смесь разбавляют дихлорметаном и промывают насыщенным водным NaHCO₃. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают препаративной ВЭЖХ (способ B).

Выход: 55 мг. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=614,2/616,2; анал. ВЭЖХ: R_t=18,24 мин (способ 1). Диастереомерное соотношение: 6:1.

Пример 11

2-Бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-6-нитрофениловый эфир 2-метоксибензойной кислоты

(a). 3-Бром-4-гидрокси-5-нитробензальдегид

К охлаждаемому раствору 3-бром-4-гидроксибензальдегида (5 г) в уксусной кислоте (50 мл) добавляют азотную кислоту (1,17 мл). Смеси дают возможность достичь комнатной температуры. После перемешивания в течение 17 ч полученный осадок отфильтровывают. Твердое вещество промывают водой и сушат в вакууме.

Выход: 3,7 г.

(b). 4-(3-Бром-4-гидрокси-5-нитрофенил)-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-3-карбонитрил

Смесь 3-бром-4-гидрокси-5-нитробензальдегида (2 г), 3-аминокротонитрила (667 мг) и 5-пропилциклогексан-1,3-диона (1,25 г) в этаноле (75 мл) нагревают до кипения в течение 17 ч. Смесь концентрируют в вакууме. Остаток очищают хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюента смесь гептан/этилацетат 1/0→0/1 (об./об.).

Выход: 1,8 г. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=446,2/448,2

(c). 2-Бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-6-нитрофениловый эфир 2-метоксибензойной кислоты

Смесь 4-(3-бром-4-гидрокси-5-нитрофенил)-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-3-карбонитрила (200 мг), N,N-диизопропилэтиламина (390 мкл) и 2-метоксибензоилхлорида (53 мкл) в дихлорметане (4 мл) перемешивают в течение 4 ч. Смесь разбавляют дихлорметаном и промывают водой. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме.

Остаток очищают хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюента смесь гептан/этилацетат 1/0→0/1 (об./об.).

Выход: 90 мг. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=580,2/582,2; анал. ВЭЖХ: R_t=24,32 мин (способ 2).

Пример 12

4-[3-Бром-5-изопропиламино-4-(3-метоксибензилокси)фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-3-карбонитрил

К смеси соединения, описанного в примере 3, (100 мг), уксусной кислоты (114 мкл) и ацетона (20 мкл) в 2 мл дихлорметана и 2 мл метанола добавляют цианоборгидрид натрия (25 мг) в 1 мл метанола. После перемешивания в течение 17 ч смесь разбавляют дихлорметаном и промывают водой. Остаток очищают хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюента смесь гептан/этилацетат 9/1→0/1 (об./об.).

Выход: 94 мг. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=578,4/580,4; анал. ВЭЖХ: R_t=23,34 мин (диастереомер 1) R_t=23,73 мин (диастереомер 2) (способ 1). Диастереомерное соотношение: 5:1.

Пример 13

4-[3-Бром-5-диметиламино-4-(3-метоксибензилокси)фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-3-карбонитрил

К смеси соединения, описанного в примере 3 (100 мг), и уксусной кислоты (114 мкл) в 2 мл дихлорметана и 2 мл метанола добавляют раствор 37% формальдегида в метаноле (64 мкл) и цианоборгидрид натрия (16 мг).

После перемешивания в течение 17 ч дихлорметан удаляют в вакууме. Оставшийся раствор охлаждают до 0°C, и в это время образуется осадок. Твердое вещество собирают фильтрацией, промывают холодным метанолом и затем очищают препаративной ВЭЖХ (способ B).

Выход: 90 мг. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=564,4/566,4; анал. ВЭЖХ: R_t=16,18 мин (диастереомер 1) R_t=16,71 мин (диастереомер 2) (способ 1). Диастереомерное соотношение: 10:1.

Пример 14

[5-(3-Циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-3-этокси-2-(3-метоксибензилокси)фенил]амид пропан-1-сульфоновой кислоты

(а). 3-Этокси-4-гидрокси-5-нитробензальдегид

К раствору 3-этокси-4-гидроксибензальдегида (5 г) в уксусной кислоте (50 мл) добавляют 2-мя порциями азотную кислоту (1,4 мл). Полученную суспензию перемешивают в течение 17 ч. Твердое вещество собирают фильтрацией, промывают водой и сушат в вакууме.

Выход: 5,07 г.

(b). 4-(3-Этокси-4-гидрокси-5-нитрофенил)-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-3-карбонитрил

Смесь 3-этокси-4-гидрокси-5-нитробензальдегида (1,5 г), 3-аминокротонитрила (584 мг) и 5-пропилциклогексан-1,3-диона (1,09 г) в этаноле (60 мл) нагревают при температуре кипении в течение 17 ч. Смесь концентрируют в вакууме. Остаток очищают хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюента смесь гептан/этилацетат 1/0→0/1 (об./об.).

Выход: 1,3 г. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=412,3.

(c). 4-[3-Этокси-4-(3-метоксибензилокси)-5-нитрофенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-3-карбонитрил

Смесь 4-(3-этокси-4-гидрокси-5-нитрофенил)-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-3-карбонитрила (1,5 г), 3-метоксибензилбромида (2,56 мл), гидроксида калия (450 мг) и хлорида бензилтриэтиламмония (415 мг) в 60 мл дихлорметана и 60 мл воды перемешивают в течение 48 ч. Органический слой отделяют, сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюента смесь гептан/этилацетат 7/3→4/6 (об./об.).

Выход: 1,2 г. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=532,3.

(d). 4-[3-Амино-5-этокси-4-(3-метоксибензилокси)фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-3-карбонитрил

Раствор 4-[3-этокси-4-(3-метоксибензилокси)-5-нитрофенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-3-карбонитрила и уксусной кислоты (1,3 мл) в ТГФ (33 мл) охлаждают до 0°C. Порциями при энергичном перемешивании добавляют цинковую пыль (3,02 г). Смеси предоставляют возможность достичь комнатной температуры и перемешивают в течение 1 ч. Затем смесь фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток растворяют в дихлорметане и промывают насыщенным водным NaHCO₃. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме.

Выход: 1,1 г. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=502,3.

(e). [5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил]-3-этокси-2-(3-метоксибензилокси)фенил]амид пропан-1-сульфоновой кислоты

К раствору 4-[3-амино-5-этокси-4-(3-метоксибензилокси)фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-3-карбонитрила (220 мг) и пиридина (106 мкл) в дихлорметане (5 мл) добавляют пропан-1-сульфонилхлорид (94 мг). После перемешивания в течение 17 ч смесь разбавляют дихлорметаном и экстрагируют водой и насыщенным водным NaHCO₃. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают препаративной ВЭЖХ (способ B).

Выход: 41 мг. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=608,4; анал. ВЭЖХ: R_t=20,50 мин (способ 1). Диастереомерное соотношение: 5:1.

Пример 15

N-[3-Бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-2-(3-метоксибензиламино)фенил]метансульфонамид

(a). 4-Амино-3-нитробензальдегид

4-Фтор-3-нитробензальдегид (3 г) медленно добавляют к 50 мл концентрированного водного NH₄OH. После перемешивания в течение 3 ч смесь разбавляют водой и экстрагируют дихлорметаном. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюента смесь гептан/этилацетат 1/0→0/1 (об./об.).

Выход: 2,1 г. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=167,2.

(b). 4-Амино-3-бром-5-нитробензальдегид

4-Амино-3-нитробензальдегид (2,1 г) растворяют в 25 мл дихлорметана. Добавляют бром (2 мл) и уксусную кислоту (1 мл) и смесь перемешивают в течение 2 ч при комнатной температуре. Смесь разбавляют этилацетатом и промывают насыщенным водным NaHSO₃. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюента смесь гептан/этилацетат 1/0→0/1 (об./об.).

Выход: 2,5 г. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=245,0/247,0.

(c). 4-(4-Амино-3-бром-5-нитрофенил)-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-3-карбонитрил

Смесь 4-амино-3-бром-5-нитробензальдегида (665 мг), 3-аминокротонитрила (223 мг), 5-пропилциклогексан-1,3-диона (418 мг) в 50 мл этанола перемешивают при 80°C в течение 4 ч, затем при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь концентрируют в вакууме. Остаток очищают хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюента смесь гептан/этилацетат 1/0→0/1 (об./об.).

Выход: 680 мг. МС-ЭРИ: [М+Н]⁺=445,2/447,2.

(d). 4-(3,4-Диамино-5-бромфенил)-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-3-карбонитрил

4-(4-Амино-3-бром-5-нитрофенил)-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-3-карбонитрил (600 мг) растворяют в ТГФ (150 мл) и охлаждают до 0°C. Добавляют уксусную кислоту (1,3 мл), с последующим добавлением цинковой пыли (2 г). Полученную суспензию перемешивают при 0°C в течение 2 ч и затем еще 4 ч при комнатной температуре. Смесь фильтруют и разбавляют насыщенным водным NaHCO₃, с последующей экстракцией этилацетатом. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюента смесь гептан/этилацетат 3/1→0/1 (об./об.).

Выход: 316 мг. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=415,2/417,2.

(e). 9Н-Флуорен-9-илметиловый эфир [2-амино-3-бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)фенил]карбаминовой кислоты

4-(3,4-Диамино-5-бромфенил)-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-3-карбонитрил (316 мг) и N,N-диметиланилин (195 мкл) растворяют в дихлорметане (40 мл) и охлаждают до 0°C. Добавляют по каплям раствор 9-флуоренилметилхлорформиата (187 мг) в дихлорметане (3 мл). После перемешивания в течение 2 ч реакционную смесь разбавляют водой и экстрагируют этилацетатом. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюента смесь гептан/этилацетат 1/0→0/1 (об./об.).

Выход: 381 мг.

(f). 9Н-Флуорен-9-илметиловый эфир [3-бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-2-(3-метоксибензиламино]фенил]карбаминовой кислоты

К раствору 9Н-флуорен-9-илметилового эфира [2-амино-3-бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)фенил]карбаминовой кислоты в метаноле (5 мл) добавляют уксусную кислоту (143 мкл) и м-анизальдегид (304 мкл). После перемешивания в течение 2 ч добавляют цианоборгидрид натрия (158 мг). Полученную смесь перемешивают в течение 3 ч и затем гасят водой, с последующей экстракцией этилацетатом. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюента смесь гептан/этилацетат 1/0→0/1 (об./об.).

Выход: 145 мг. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=757,6/759,6.

(g). 4-[3-Амино-5-бром-4-(3-метоксибензиламино)фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-3-карбонитрил

9Н-Флуорен-9-илметиловый эфир [3-бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-2-(3-метоксибензиламино)фенил]карбаминовой кислоты (145 мг) растворяют в 20% пиперидине в ДМФА (5 мл) и перемешивают в течение 1 часа. Реакционную смесь разбавляют водой и экстрагируют этилацетатом. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают препаративной ВЭЖХ (способ B).

Выход: 70 мг. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=535,4/537,4.

(h). N-(3-Бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-2-(3-метоксибензиламино)фенил]метансульфонамид

К раствору 4-[3-амино-5-бром-4-(3-метоксибензиламино)фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-3-карбонитрила (70 мг) и пиридина (40 мкл) в 1 мл дихлорметана добавляют метансульфонилхлорид (50 мкл) порциями до тех пор, пока не наблюдают полного превращения, подтверждаемого данными ТСХ (элюент: смесь гептан/этилацетат 1/1, об./об.). Реакционную смесь разбавляют водой и экстрагируют этилацетатом. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают препаративной ВЭЖХ (способ A).

Выход: 18 мг (в виде соли TFA). МС-ЭРИ: [M+H]⁺=613,4/615,4; анал. ВЭЖХ: R_t=21,27 мин (способ 2).

Пример 16

Метиловый эфир 3-бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-2-(3-нитробензилокси)бензойной кислоты

(a). Метиловый эфир 5-формил-2-гидроксибензойной кислоты

5-Формил-2-гидроксибензойную кислоту (11,3 г) растворяют в метаноле (35 мл) и концентрированной серной кислоте (3 мл). Смесь нагревают при кипячении с обратным холодильником в течение 40 ч. Добавляют диэтиловый эфир и смесь выливают в воду. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток растворяют в смеси диоксана (80 мл) и воды (50 мл) и обрабатывают 6н. хлористоводородной кислотой (2,5 мл). Через 15 мин диоксан удаляют в вакууме. Смесь экстрагируют этилацетатом. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме.

Выход: 8,23 г. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=181,2.

(b). Метиловый эфир 3-бром-5-формил-2-гидроксибензойной кислоты

К раствору метилового эфира 5-формил-2-гидроксибензойной кислоты (7,93 г) в уксусной кислоте (50 мл) и дихлорметане (40 мл), охлажденному до 0°C, добавляют бром (2,49 мл). После перемешивания в течение 17 ч смеси предоставляют возможность достичь комнатной температуры. Добавляют ацетат натрия (3,61 г) и продолжают перемешивание в течение 1 ч. Смесь разбавляют водой и экстрагируют этилацетатом. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме.

Выход: 11,88 г. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=259,0/261,0.

(c). Метиловый эфир 3-бром-5-формил-2-(3-нитробензилокси)бензойной кислоты

Смесь метилового эфира 3-бром-5-формил-2-гидроксибензойной кислоты (518 мг), карбоната калия (613 мг), иодида тетрабутиламмония (68 мг) и 3-нитробензилбромида (525 мг) в ДМФА (10 мл) нагревают при 60°C в течение 5 ч. Смесь разбавляют водой и экстрагируют этилацетатом. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме.

Выход: 851 мг. МС-ЭРИ: [М+Н]⁺=394,0/396,0.

(d). Метиловый эфир 3-бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-2-(3-нитробензилокси)бензойной кислоты

Смесь метилового эфира 3-бром-5-формил-2-(3-нитробензилокси)бензойной кислоты (788 мг), 3-аминокротонитрила (165 мг) и 5-пропилциклогексан-1,3-диона (308 мг) в этаноле (5 мл) нагревают при 80°C в течение 17 ч. Смесь концентрируют в вакууме. Остаток очищают препаративной ВЭЖХ (способ B).

Выход: 1,37 г. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=594,4/596,4; анал. ВЭЖХ: R_t=24,59 мин (диастереомер 1) R_t=24,89 мин (диастереомер 2) (способ 2).

Пример 17

{3-Бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-2-[(пиридин-3-илметил)амино]фенил}амид пропан-1-сульфоновой кислоты

(a). [2-Амино-3-бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)фенил]амид пропан-1-сульфоновой кислоты

Соединение, описанное в примере 15d, (4 г) растворяют в 250 мл дихлорметана. Добавляют пиридин (1,5 мл), с последующим добавлением по каплям раствора пропансульфонилхлорида (1,03 мл) в 50 мл дихлорметана. Смесь перемешивают в течение 17 ч и затем промывают водой. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме.

Выход: 5,44 г. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=521,4/523,4.

(b). {3-Бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-2-[(пиридин-3-илметил)амино]фенил}амид пропан-1-сульфоновой кислоты

[2-Амино-3-бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)фенил]амид пропан-1-сульфоновой кислоты (842 мг) и уксусную кислоту (950 мкл) растворяют в метаноле (25 мл). Добавляют 3-пиридинкарбоксальдегид (1,52 мл) и полученную смесь перемешивают в течение 17 ч. Добавляют цианоборгидрид натрия (1,02 г) и продолжают перемешивание в течение 17 ч. Смесь разбавляют этилацетатом и промывают водной лимонной кислотой и водным NaHCO₃. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают препаративной ВЭЖХ (способ A).

Выход: 237 мг (в виде соли TFA). МС-ЭРИ: [M+H]⁺=612,4/614,4; анал. ВЭЖХ: R_t=8,79 мин (способ 2).

Пример 18

3-Бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-2-(3-метоксибензилокси)-N-пропилбензамид

Смесь соединения, описанного в примере 22c, (100 мг), н-пропиламина (145 мкл), TBTU (75 мг) и N,N-диизопропилэтиламина (31 мкл) в дихлорметане (10 мл) перемешивают в течение 65 ч. Смесь разбавляют дихлорметаном и экстрагируют насыщенным водным NaHCO₃. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают препаративной ВЭЖХ (способ B).

Выход: 41 мг. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=605,4/607,4; анал. ВЭЖХ: R_t=26,72 мин (диастереомер 1) R_t=27,01 мин (диастереомер 2) (способ 2).

Пример 19

4-{[2-Бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-6-(пропан-1-сульфониламино)фениламино]метил}-N-(2-метоксиэтил)бензамид

(a). 4-{[2-Бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-6-(пропан-1-сульфониламино)фениламино]метил}бензойная кислота

Смесь соединения, описанного в примере 17a, (600 мг), 4-карбоксальдегид бензойной кислоты (863 мг) и уксусной кислоты (657 мкл) в метаноле (5 мл) перемешивают в течение 1 часа. Добавляют цианоборгидрид натрия (361 мг) и смесь перемешивают в течение 17 ч. Реакционную смесь разбавляют этилацетатом и промывают водой. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме.

Выход: 605 мг. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=655,4/657,4.

(b). 4-{[2-Бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-6-(пропан-1-сульфониламино)фениламино]метил}-N-(2-метоксиэтил)бензамид

Смесь 4-{[2-бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-6-(пропан-1-сульфониламино)фениламино]метил}бензойной кислоты (200 мг), TBTU (300 мг), N,N-диизопропилэтиламина (536 мкл) и 2-метоксиэтиламина (134 мкл) в ДМФА (2 мл) перемешивают в течение 2 ч при комнатной температуре. Смесь разбавляют этилацетатом и промывают водным NaHCO₃. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают препаративной ВЭЖХ (способ B).

Выход: 115 мг. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=712,4/714,4; анал. ВЭЖХ: R_t=17,99 мин (способ 2).

Пример 20

4-{[2-Бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-6-(пропан-1-сульфониламино)фениламино]метил}-N-[2-(1Н-имидазол-4-ил)этил]бензамид

Конденсацию гистамина (283 мг) и соединения, описанного в примере 19a, (200 мг), в присутствии TBTU (300 мг) и N,N-диизопропилэтиламина (536 мкл) осуществляют в соответствии со способом, описанным в примере 19b.

Выход: 123 мг (в виде соли TFA). МС-ЭРИ: [M+H]⁺=748,4/750,4; анал. ВЭЖХ: R_t=10,38 мин (способ 2).

Пример 21

4-[3-Бром-4-(3-метоксибензилокси)-5-(морфолин-4-карбонил)фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-3-карбонитрил

Смесь соединения, описанного в примере 22c, (100 мг), морфолина (50 мкл), HATU (100 мг) и N,N-диизопропилэтиламина (92 мкл) в дихлорметане (5 мл) перемешивают в течение 17 ч. Смесь разбавляют дихлорметаном и экстрагируют насыщенным водным NaHCO₃. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают препаративной ВЭЖХ (способ B).

Выход: 54 мг. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=634,4/636,4; анал. ВЭЖХ: R_t=21,32 мин (способ 2).

Пример 22

3-Бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-2-(3-метоксибензилокси)бензамид

(a). Метиловый эфир 3-бром-5-формил-2-(3-метоксибензилокси)бензойной кислоты

Смесь соединения, описанного в примере 16b, (4,62 г), 3-метоксибензилбромида (3,03 мл), карбоната калия (5,47 г) и иодида тетрабутиламмония (606 мг) в ДМФА (90 мл) перемешивают при 60°C в течение 5 ч. Смесь выливают в воду и экстрагируют этилацетатом. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток перекристаллизовывают из смеси этанола и диэтилового эфира (1/1, об./об.).

Выход: 5,65 г.

(b). Метиловый эфир 3-бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-2-(3-метоксибензилокси)бензойной кислоты

Смесь метилового эфира 3-бром-5-формил-2-(3-метоксибензилокси)бензойной кислоты (3,78 г), 3-аминокротонитрила (822 мг) и 5-пропилциклогексан-1,3-диона (1535 мг) в этаноле (25 мл) перемешивают при 80°C в течение 17 ч. Смесь концентрируют в вакууме.

Выход: 5,9 г.

(c). 3-Бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-2-(3-метоксибензилокси)бензойная кислота

Раствор метилового эфира 3-бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-2-(3-метоксибензилокси)бензойной кислоты (5,7 г) в диоксане (135 мл) и 1н NaOH (15 мл) перемешивают в течение 17 ч. Смесь подкисляют концентрированной уксусной кислотой и экстрагируют этилацетатом. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток растворяют в этаноле и затем концентрируют до тех пор, пока не произойдет осаждение твердого вещества. Твердое вещество собирают фильтрацией и промывают петролейным эфиром.

Выход: 4,2 г. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=563,6/565,2.

(d). 3-Бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-2-(3-метоксибензилокси)бензамид

Смесь 3-бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-2-(3-метоксибензилокси)бензойной кислоты (57 мг), хлорида аммония (18 мг), HATU (57 мг) и N,N-диизопропилэтиламина (34 мкл) в ДМФА (0,8 мл) перемешивают в течение 17 ч. Смесь разбавляют водой и экстрагируют этилацетатом. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают препаративной ВЭЖХ (способ B).

Выход: 29 мг. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=564,4/566,4; анал. ВЭЖХ: R_t: 19,64 мин (способ 2).

Пример 23

N-[2-Бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-6-(пропан-1-сульфониламино)фенил]-3-метоксибензамид

Раствор соединения, описанного в примере 17a, (229 мг) и N,N-диметиланилина (480 мг) в ТГФ (4 мл) обрабатывают 75 мкл 3-метоксибензоилхлорида. После перемешивания в течение 17 ч смесь разбавляют этилацетатом и промывают водой. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают препаративной ВЭЖХ (способ B).

Выход: 151 мг. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=655,4/657,4; анал. ВЭЖХ: R_t=20,82 мин (способ 2).

Пример 24

N-[3-Бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-2-(3-метансульфониламинобензилокси)фенил]метансульфонамид

(a). 3-Бром-4-гидрокси-5-нитробензальдегид

К раствору 3-бром-4-гидроксибензальдегида (20 г) в уксусной кислоте (200 мл) добавляют дымящую азотную кислоту (4,18 мл). Полученную суспензию перемешивают в течение 3 ч. Твердое вещество собирают фильтрацией. К фильтрату добавляют еще 420 мкл дымящей азотной кислоты. Через 45 мин добавляют воду и полученный осадок собирают фильтрацией. Объединенное твердое вещество промывают водой и сушат в вакууме.

Выход: 18,26 г. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=245,8/247,8.

(b). 4-(3-Бром-4-гидрокси-5-нитрофенил)-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-3-карбонитрил

Смесь 3-бром-4-гидрокси-5-нитробензальдегида (18,26 г), 3-аминокротонитрила (6,09 г) и 5-пропилциклогексан-1,3-диона (11,45 г) в этаноле (250 мл) перемешивают при 80°C в течение 17 ч. Смесь концентрируют в вакууме. Остаток очищают хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюента дихлорметан.

Выход: 16,49 г. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=446,2/448,2.

(c). 4-(3-Амино-5-бром-4-гидроксифенил)-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-3-карбонитрил

К раствору 4-(3-бром-4-гидрокси-5-нитрофенил)-2-метил-5-оксо-7-пропил-l,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-3-карбонитрила (15,8 г) и уксусной кислоты (30 мл) в ТГФ (300 мл) при энергичном перемешивании добавляют порциями цинковую пыль (46 г). Через 2 ч смесь фильтруют и концентрируют до тех пор, пока не образуется осадок. Этот осадок собирают фильтрацией и промывают этанолом.

Выход: 9,27 г. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=416,2/418,2.

(d). 4-[3-Амино-5-бром-4-(3-нитробензилокси)фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-3-карбонитрил

Смесь 4-(3-амино-5-бром-4-гидроксифенил)-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-3-карбонитрила (5 г), 3-нитробензилбромида (2,72 г), карбоната калия (3,65 г) и иодида калия (400 мг) в ДМФА (100 мл) перемешивают в течение 65 ч при комнатной температуре. Смесь разбавляют этилацетатом и промывают водой. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюента смесь гептан/этилацетат 1/0→0/1 (об./об.).

Выход: 1,45 г. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=551,4/553,4.

(e). N-[3-Бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-2-(3-нитробензилокси)фенил]метансульфонамид

Раствор 4-[3-амино-5-бром-4-(3-нитробензилокси)фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-3-карбонитрила (1,15 г) и триэтиламина (740 мкл) в дихлорметане (20 мл) обрабатывают метансульфонилхлоридом (203 мкл). После перемешивания в течение 18 ч смесь разбавляют этилацетатом и промывают водой. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Неочищенное производное N,N-бис-метансульфониланилина растворяют в ТГФ (20 мл) и обрабатывают 2н NaOH (3 мл). Через 2 ч смесь гасят насыщенным водным NH₄Cl и экстрагируют этилацетатом. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюента смесь гептан/этилацетат 1/0→0/1 (об./об.).

Выход: 950 мг. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=629,2/631,2.

(f). N-[2-(3-Аминобензилокси)-3-бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)фенил]метансульфонамид

Смесь N-[3-бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-2-(3-нитробензилокси)фенил]метансульфонамида (950 мг) и сульфида натрия (350 мг) в этаноле (12 мл) и воде (250 мкл) нагревают при кипячении с обратным холодильником в течение 2 ч. Смесь разбавляют этилацетатом и промывают водой. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме.

Выход: 709 мг. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=599,2/601,2.

(g). N-[3-Бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-2-(3-метансульфониламинобензилокси)фенил]метансульфонамид

К раствору N-[2-(3-аминобензилокси)-3-бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)фенил]метансульфонамида (709 мг) и пиридина (286 мкл) в дихлорметане (20 мл) добавляют метансульфонилхлорид (138 мкл). После перемешивания в течение 18 ч смесь разбавляют этилацетатом и промывают водой. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают препаративной ВЭЖХ (способ B).

Выход: 172 мг. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=677,2/679,2; анал. ВЭЖХ: R_t=22,37 мин (способ 3).

Пример 25

4-[3-Бром-5-циано-4-(3-метоксибензилокси)фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-3-карбонитрил

Раствор соединения, описанного в примере 22d (54 мг) в дихлорметане (1,2 мл) охлаждают до 0°C. Добавляют триэтиламин (58 мкл), с последующим добавлением по каплям ангидрида трифторуксусной кислоты (25 мкл). Смеси предоставляют возможность достичь комнатной температуры. Снова добавляют триэтиламин (58 мкл) и ангидрид трифторуксусной кислоты (25 мкл). После перемешивания в течение 1 ч смесь экстрагируют водой. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают препаративной ВЭЖХ (способ B).

Выход: 26 мг. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=546,2/548,2; анал. ВЭЖХ: R_t=24,86 мин (способ 2).

Пример 26

N-[2-Бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-6-(пропан-1-сульфониламино)фенил]-N-(3-метоксибензил)ацетамид

(a). [3-Бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-2-(3-метоксибензиламино)фенил]амид пропан-1-сульфоновой кислоты

Конденсацию соединения, описанного в примере 17a (688 мг), с м-анизальдегидом (605 мкл) в присутствии уксусной кислоты (570 мкл) и цианоборгидрида натрия (317 мг) в метаноле (6 мл) осуществляют, как описано в примере 17b.

Выход: 300 мг. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=641,4/643,4.

(b). N-[2-Бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-6-(пропан-1-сульфониламино)фенил]-N-(3-метоксибензил)ацетамид

Раствор [3-бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-2-(3-метоксибензиламино)фенил]амида пропан-1-сульфоновой кислоты (120 мг) в пиридине (3 мл) обрабатывают уксусным ангидридом (153 мкл). После перемешивания в течение 17 ч смесь разбавляют этилацетатом и промывают водой. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюента смесь гептан/этилацетат 1/0→0/1 (об./об.).

Выход: 27 мг. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=683,2/685,2; анал. ВЭЖХ: R_t=21,09 мин (способ 2).

Пример 27

{3-Бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-2-[(3-метоксибензил)-метиламино]фенил}амид пропан-1-сульфоновой кислоты

Смесь соединения, описанного в примере 26a, (180 мг), 37% формальдегида в воде (230 мкл) и уксусной кислоты (160 мкл) в метаноле (5 мл) перемешивают в течение 2 ч. Добавляют цианоборгидрид натрия (176 мг) и продолжают перемешивание в течение 17 ч. Смесь разбавляют этилацетатом и промывают водой. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают препаративной ВЭЖХ (способ B).

Выход: 17 мг. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=675,2/677,2; анал. ВЭЖХ: R_t=28,11 мин (способ 2).

Пример 28

[3-Бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-2-(3-метоксибензиламино)фенил]метиламид пропан-1-сульфоновой кислоты

Смесь соединения, описанного в примере 26a, (180 мг), метилиодида (19 мкл) и карбоната калия (19 мг) в ДМФА (1 мл) перемешивают на протяжении 65 ч. Смесь разбавляют этилацетатом и промывают водой. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают препаративной ВЭЖХ (способ B).

Выход: 31 мг. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=655,4/657,4; анал. ВЭЖХ: R_t=25,00 мин (способ 2).

Пример 29

N-[2-Бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-6-(пропан-1-сульфониламино)фенил]никотинамид

Смесь соединения, описанного в примере 17a, (100 мг), TBTU (123 мг), никотиновой кислоты (47 мг) и N,N-диизопропилэтиламина (168 мкл) в 2 мл дихлорметана и 2 мл ТГФ перемешивают в течение 65 ч. Смесь разбавляют дихлорметаном и экстрагируют водой и насыщенным водным NaHCO₃. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают препаративной ВЭЖХ (способ A).

Выход: 74 мг (в виде соли TFA). МС-ЭРИ: [M+H]⁺=626,4/628,4; анал. ВЭЖХ: R_t=12,03 мин (способ 2).

Пример 30

N-(2-{[2-Бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-6-(пропан-1-сульфониламино)фениламино]метил}фенил)ацетамид

(a). [3-Бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-2-(2-нитробензиламино)фенил]амид пропан-1-сульфоновой кислоты

Конденсацию соединения, описанного в примере 17a, (1,05 г), с 2-нитробензальдегидом (1,61 г) в присутствии уксусной кислоты (1,21 мл) и цианоборгидрида натрия (1,34 г) в метаноле (25 мл) осуществляют, как описано в примере 17b.

Выход: 1,21 г. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=676,2/678,2.

(b). [2-(2-аминобензиламино)-3-бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)фенил]амид пропан-1-сульфоновой кислоты

[3-Бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-2-(2-нитробензиламино)фенил]амид пропан-1-сульфоновой кислоты (1,21 г) и уксусную кислоту (1,6 мл) растворяют в ТГФ (150 мл). Добавляют при энергичном перемешивании цинковую пыль (2,32 г). Через 3 ч смесь фильтруют, разбавляют этилацетатом и промывают насыщенным водным NaHCO₃. Остаток очищают хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюента смесь гептан/этилацетат 1/0→0/1 (об./об.).

Выход: 430 мг. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=626,4/628,4.

(c). N-(2-{[2-Бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-6-(пропан-1-сульфониламино)фениламино]метил}фенил)ацетамид

Раствор [2-(2-аминобензиламино)-3-бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)фенил]амида пропан-1-сульфоновой кислоты (430 мг) и N,N-диизопропилэтиламина (120 мкл) в 1,2-дихлорпропане (50 мл) охлаждают до 0°C и затем обрабатывают ацетилхлоридом (49 мкл) в 1,2-дихлорпропане (15 мл). После перемешивания в течение 2 ч смесь разбавляют этилацетатом и промывают водой. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают препаративной ВЭЖХ (способ A).

Выход: 45 мг (в виде соли TFA). МС-ЭРИ: [M+H]⁺=668,2/670,2; анал. ВЭЖХ: R_t=18,91 мин (способ 2).

Пример 31

Метиловый эфир (2-{[2-Бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-6-(пропан-1-сульфониламино)фениламино]метил}фенил)карбаминовой кислоты

К раствору соединения, описанного в примере 30b, (100 мг) в дихлорметане (5 мл) добавляют N,N-диизопропилэтиламин (84 мкл) и метилхлорформиат (12 мкл). После перемешивания в течение 17 ч смесь разбавляют этилацетатом и промывают водой. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают препаративной ВЭЖХ (способ A).

Выход: 19 мг (в виде соли TFA). МС-ЭРИ: [M+H]⁺=684,2/686,2; анал. ВЭЖХ: R_t=17,90 мин (способ 2).

Пример 32

N-[2-Бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-6-(пропан-1-сульфониламино)фенил]-3-(2-пиперазин-1-илацетиламино)бензамид

(а). N-[2-Бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-6-(пропан-1-сульфониламино)фенил]-3-нитробензамид

К раствору соединения, описанного в примере 17a, (400 мг), и N,N-диметиланилина (350 мкл) в ТГФ (10 мл) добавляют 3-нитробензоилхлорид (150 мкл). Смесь перемешивают в течение 17 ч, затем выливают в воду и экстрагируют этилацетатом. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюента смесь гептан/этилацетат 1/3 (об./об.).

Выход: 412 мг. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=670,2/672,2.

(b). 3-Амино-N-[2-бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-6-(пропан-1-сульфониламино)фенил]бензамид

К раствору N-[2-бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-6-(пропан-1-сульфониламино)фенил]-3-нитробензамида (412 мг) и уксусной кислоты (520 мкл) в ТГФ (10 мл), охлажденному до 0°C, добавляют при энергичном перемешивании цинковую пыль (810 мг). После перемешивания в течение 4 ч смесь фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток растворяют в дихлорметане и промывают водой. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме.

Выход: 257 мг. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=640,4/642,4.

(c). N-[2-Бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-6-(пропан-1-сульфониламино)фенил]-3-(2-хлорацетиламино)бензамид

К раствору 3-амино-N-[2-бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-6-(пропан-1-сульфониламино)фенил]бензамида (257 мг) в ТГФ (6 мл) добавляют N,N-диизопропилэтиламин (205 мкл) и хлорацетилхлорид (50 мкл). Смесь перемешивают в течение 17 ч, затем разбавляют дихлорметаном и экстрагируют водой и насыщенным водным NaHCO₃. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме.

Выход: 287 мг. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=716,2/718,2.

(d). N-[2-Бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-6-(пропан-1-сульфониламино)фенил]-3-(2-пиперазин-1-илацетиламино)бензамид

К раствору N-[2-бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-6-(пропан-1-сульфониламино)фенил]-3-(2-хлорацетиламино)бензамида (143 мг) в дихлорметане (4 мл) добавляют пиперазин (172 мг). Смесь перемешивают в течение 17 ч, затем разбавляют дихлорметаном и экстрагируют насыщенным водным NaHCO₃. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают препаративной ВЭЖХ (способ A).

Выход: 18 мг (в виде соли TFA). МС-ЭРИ: [M+H]⁺=766,4/768,4; анал. ВЭЖХ: R_t=4,87 мин (способ 2).

Пример 33

4-[3-Бром-5-(2-гидроксиэтокси)-4-(3-метоксибензилокси)фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-3-карбонитрил

(a). 3-Бром-5-гидрокси-4-(3-метоксибензилокси)бензальдегид

Смесь 3-бром-4,5-дигидроксибензальдегида (1 г), карбоната лития (314 мг), 3-метоксибензилхлорида (742 мкл) и каталитического количества иодида тетрабутиламмония в ДМФА (5 мл) перемешивают при 60°C в течение 17 ч. Смесь разбавляют этилацетатом и промывают водой. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме.

Выход: 1,48 г. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=337,2/339,2.

(b). 4-[3-Бром-5-гидрокси-4-(3-метоксибензилокси)фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-3-карбонитрил

Смесь 3-бром-5-гидрокси-4-(3-метоксибензилокси)бензальдегида (1,43 г), 3-аминокротонитрила (350 мг) и 5-пропилциклогексан-1,3-диона (654 мг) в этаноле (100 мл) нагревают при 80°C в течение 17 ч. Смесь концентрируют в вакууме и затем очищают хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюента смесь гептан/этилацетат 1/0→0/1 (об./об.).

Выход: 1,31 г. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=537,2/539,2.

(c). 4-[3-Бром-5-(2-гидроксиэтокси)-4-(3-метоксибензилокси)фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-3-карбонитрил

Смесь 4-[3-бром-5-гидрокси-4-(3-метоксибензилокси)фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-3-карбонитрила (100 мг), 2-бромэтанола (16 мкл), иодида тетрабутиламмония (5 мг) и карбоната калия (50 мг) в ДМФА (2 мл) перемешивают при 70°C в течение 17 ч. Смесь разбавляют этилацетатом и промывают водой. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают препаративной ВЭЖХ (способ B).

Выход: 36 мг. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=581,4/583,4; анал. ВЭЖХ: R_t=20,57 мин (диастереомер 1) R_t=20,91 мин (диастереомер 2) (способ 2).

Пример 34

4-[3-Бром-4-(3-метоксибензилокси)-5-(2-метоксиэтокси)фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-3-карбонитрил

Осуществляют алкилирование соединения, описанного в примере 33b, (100 мг) согласно способу, описанному в примере 33c, используя 2-метоксибромэтан (22 мкл), карбонат калия (50 мг) и иодид тетрабутиламмония (5 мг) в ДМФА (2 мл).

Выход: 48 мг. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=595,2/597,2; анал. ВЭЖХ: R_t=24,72 мин (диастереомер 1) Rt=25,08 мин (диастереомер 2) (способ 2).

Пример 35

4-[3-Бром-5-гидрокси-4-(3-метоксибензилокси)фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-3-карбонитрил

100 мг соединения, описанного в примере 33b, очищают препаративной ВЭЖХ (способ B).

Выход: 54 мг. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=537,4/539,4; анал. ВЭЖХ: R_t=21,85 мин (способ 2).

Пример 36

3-Бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-N,N-диэтил-2-(пиридин-3-илметокси)бензолсульфонамид

(a). 3-Бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-N,N-диэтил-2-гидроксибензолсульфонамид

Смесь соединения, описанного в примере 37b, (1,5 г) и диэтиламина (3,1 мл) в диоксане (30 мл) перемешивают в течение 17 ч. Смесь разбавляют этилацетатом и промывают водой. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме.

Выход: 1,43 г. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=536,2/538,2.

(b). 3-Бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-N,N-диэтил-2-(пиридин-3-илметокси)бензолсульфонамид

Смесь 3-бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-N,N-диэтил-2-гидроксибензолсульфонамида (1,43 г), 3-пиколилхлорида (689 мг), карбоната калия (774 мг) и иодида калия (93 мг) в ДМФА (40 мл) перемешивают при 70°C в течение 2 часов и затем при комнатной температуре в течение 17 ч. Смесь разбавляют этилацетатом и экстрагируют водой. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают препаративной ВЭЖХ (способ A).

Выход: 991 мг (в виде соли TFA). МС-ЭРИ: [M+H]⁺=627,2/629,2; анал. ВЭЖХ: R_t=17,36 мин (способ 3).

Пример 37

3-Бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-N-метил-2-(пиридин-3-илметокси)бензолсульфонамид

(a). 4-(3-Бром-4-гидроксифенил)-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-3-карбонитрил

Смесь 3-бром-4-гидроксибензальдегида (13,07 г), 5-пропилциклогексан-1,3-диона (10,02 г) и 3-аминокротонитрила (5,34 г) в этаноле (165 мл) перемешивают при 80°C в течение 17 ч. Образуется осадок, который собирают фильтрацией. Фильтрат концентрируют в вакууме и затем растирают в этилацетате. Твердые вещества объединяют и сушат в вакууме.

Выход: 20,25 г. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=401,2/403,2.

(b). 3-Бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-2-гидроксибензолсульфонилхлорид

К 47 мл хлорсульфоновой кислоты, охлажденной до -10°C в автоклаве в атмосфере азота, медленно добавляют 4-(3-бром-4-гидроксифенил)-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-3-карбонитрил (20,25 г). Смеси предоставляют возможность достичь комнатной температуры. После перемешивания в течение 17 ч смесь выливают на 800 мл дробленого льда и экстрагируют этилацетатом. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток растирают в этилацетате. Твердые вещества собирают и сушат в вакууме.

Выход: 23,7 г. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=499,0/501,0.

(c). 3-Бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-2-гидрокси-N-метилбензолсульфонамид

В течение 30 мин монометиламин барботируют через раствор 3-бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-2-гидроксибензолсульфонилхлорида (240 мг) в диоксане (5 мл). Смесь перемешивают в течение 17 ч. Реакционную смесь разбавляют водой и экстрагируют этилацетатом. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают препаративной ВЭЖХ (способ B).

Выход: 60 мг. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=494,2/494,2.

(d). 3-Бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-N-метил-2-(пиридин-3-илметокси)бензолсульфонамид

Смесь 3-бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-2-гидрокси-N-метилбензолсульфонамида (52 мг), 3-пиколилхлорида. HCl (24 мг) и карбоната калия (88 мг) в ДМФА (2 мл) нагревают при 70°C в течение 2 ч, затем при комнатной температуре в течение 17 ч. Реакционную смесь разбавляют водой и экстрагируют этилацетатом. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают препаративной ВЭЖХ (способ A).

Выход: 15,5 мг (в виде соли TFA). МС-ЭРИ: [M+H]⁺=585,2/587,2; анал. ВЭЖХ: R_t=8,73 мин (диастереомер 1) R_t=9,44 мин (диастереомер 2) (способ 2). Диастереомерное соотношение: 10:1.

Пример 38

4-[3-Бром-5-гидрокси-4-(пиридин-3-илметокси)фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-3-карбонитрил

(a). 3-Бром-5-гидрокси-4-(пиридин-3-илметокси)бензальдегид

Смесь 3-бром-4,5-дигидроксибезальдегида (1 г), 3-пиридинкарбинола (448 мкл), диизопропилазодикарбоксилата (DIAD) (908 мкл) и нанесенного на полимерную подложку трифенилфосфина (1,53 г, загрузка 3 ммоль/г) в ТГФ (50 мл) перемешивают в атмосфере азота в течение 17 ч. Смесь фильтруют, разбавляют этилацетатом и промывают водой. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюента смесь гептан/этилацетат 1/0→0/1 (об./об.).

Выход: 330 мг. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=308,2/310,2.

(b). 4-[3-Бром-5-гидрокси-4-(пиридин-3-илметокси)фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-3-карбонитрил

Смесь 3-бром-5-гидрокси-4-(пиридин-3-илметокси)бензальдегида (165 мг), 3-аминокротонитрила (44 мг) и 5-пропилциклогексан-1,3-диона (83 мг) в этаноле (25 мл) перемешивают при 80°C в течение 17 ч. Затем смесь концентрируют в вакууме и остаток перекристаллизовывают из ацетонитрила.

Выход: 105 мг (в виде соли TFA). МС-ЭРИ: [M+H]⁺=508,4/510,4; анал. ВЭЖХ: R_t=7,65 мин (способ 2).

Пример 39

4-[3-Бром-5-фторметокси-4-(пиридин-3-илметокси)фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-3-карбонитрил

Смесь соединения, описанного в примере 38b (700 мг), бромфторметана (1557 мг) и карбоната калия (761 мг) в ДМФА (10 мл) перемешивают в автоклаве в течение 20 ч. Смесь разбавляют этилацетатом и промывают водой. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюента смесь гептан/этилацетат 2/8 (об./об.).

Выход: 842 мг (в виде соли TFA). МС-ЭРИ: [M+H]⁺=540,2/542,2; анал. ВЭЖХ: R_t=5,84 мин (способ 1). Диастереомерное соотношение: 7:1.

Пример 40

4-[3-Бром-5-(2,2-дифторэтокси)-4-(пиридин-3-илметокси)фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-3-карбонитрил

Смесь соединения, описанного в примере 38b (150 мг), 2,2-дифтор-1-бромэтана (86 мг), карбоната калия (82 мг) и каталитического количества иодида тетрабутиламмония в ДМФА (5 мл) перемешивают при 40°C в течение 17 ч. Смесь разбавляют этилацетатом и промывают водой. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают препаративной ВЭЖХ (способ A).

Выход: 113 мг (в виде соли TFA). МС-ЭРИ: [M+H]⁺=572,2/574,2; анал. ВЭЖХ: R_t=10,99 мин (способ 2).

Пример 41

3-Бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-N,N-диметил-2-(тиазол-4-илметокси)бензолсульфонамид

(a). 3-Бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-2-гидрокси-N,N-диметилбензолсульфонамид

В течение 30 мин диметиламин барботируют через раствор соединения, описанного в примере 37b (4,1 г), в диоксане (85 мл). Смесь разбавляют водой и дихлорметаном. В водном слое образуется объемистый осадок, который собирают фильтрацией и сушат в вакууме.

Выход: 2,19 г. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=508,2/510,2.

(b). 3-Бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-N,N-диметил-2-(тиазол-4-илметокси)бензолсульфонамид

Смесь 3-бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-2-гидрокси-N,N-диметилбензолсульфонамида (200 мг), карбоната калия (109 мг), иодида калия (5 мг) и 4-хлорметилтиазола. HCl (71 мг) в ДМФА (4,5 мл) нагревают при 60°C в течение 6 ч. Смесь разбавляют водой и экстрагируют этилацетатом. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают препаративной ВЭЖХ (способ B).

Выход: 110 мг. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=605,2/607,2; анал. ВЭЖХ: R_t=19,62 мин (способ 2).

Пример 42

3-Бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолин-4-ил)-2-(2,5-диметил-2Н-пиразол-3-илметокси)-N,N-диметилбензолсульфонамид

Смесь соединения, описанного в примере 41a, (153 мг), карбоната калия (125 мг) и 5-хлорметил-1,3-диметил-1Н-пиразола (55 мг) в ДМФА (1,4 мл) нагревают при 60°C в течение 3 ч. Смесь разбавляют 1н. хлористоводородной кислотой и экстрагируют этилацетатом. Органический слой сушат (MgSO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают препаративной ВЭЖХ (способ B), затем очищают хроматографией на оксиде алюминия, используя этилацетат в качестве элюента.

Выход: 51 мг. МС-ЭРИ: [M+H]⁺=616,2/618,2; анал. ВЭЖХ: R_t=18,40 мин (способ 2).

Пример 43

Агонистическая активность соединений в отношении человеческого рецептора FSH, экспрессированного в клетках CHO

Агонистическую активность соединений в отношении человеческого рецептора FSH испытывают в клетках яичника китайского хомячка (CHO), стабильно трансфицированных человеческим рецептором FSH и котрансфицированных чувствительным к цАМФ элементом (CRE)/промотором, направляющим экспрессию репортерного гена люциферазы светлячков. Связывание соединения с рецептором FSH, связанным с Gs-белком, обычно приводит к увеличению цАМФ, что, в свою очередь, индуцирует повышенную трансактивацию репортерной конструкции люцеферазы. Активность люциферазы определяют количественно, используя люминесцентный счетчик. Соединения испытывают в диапазоне концентраций от 0,1 нМ до 10 мкМ. Этот анализ используют для определения EC₅₀ (концентрация испытуемого соединения, вызывающая полумаксимальную (50%) стимуляцию люциферазы) и эффективности соединений по сравнению с рекомбинантным человеческим FSH. Для этого используют программное обеспечение XLfit (Excel version 2.0, built 30, ID Business Solutions Limited).

Соединения, описанные в вышеприведенных примерах, все имеют EC50 меньше чем 5,10^-6M. Некоторые из соединений, как, например, соединения примеров 2, 10, 17, 19, 20, 24, 30-32, 36, 37 и 39-42, демонстрируют EC₅₀ меньше чем 10^-8M.

Изобретение относится к новым производным 4-фенил-5-оксо-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолина, представленным формулой I,

где R¹ представляет собой (1-6С)алкил; R² представляет собой галоген, (1-4С)алкокси; R³ представляет собой ОН, NO₂, CN, фторированный (1-4С)алкокси, (1-4С)алкокси(2-4С)алкокси, гидрокси(2-4С)алкокси, (1-4С)алкоксикарбонил, R⁷,R⁸-амино, R⁹,R^l0-амино, R⁹,R^l0-аминокарбонил, R⁹,R^l0-аминосульфонил или фенил(1-4С)алкокси, где фенильное кольцо в составе фенил(1-4С)алкокси необязательно замещено одним или несколькими заместителями, выбранными из (1-4С)алкокси; R⁴ представляет собой R¹¹-фенил или R¹¹-(4-5С)гетероарил, который представляет собой гетероароматическую группу, содержащую 4-5 атомов углерода и по меньшей мере один гетероатом, выбранный из N и S, где фенильная или гетероарильная группа необязательно дополнительно замещена одним или несколькими заместителями, выбранными из нитро, (1-4С)алкила, (1-4С)алкокси; R⁷ представляет собой Н, (1-4С)алкил; R⁸ представляет собой (1-4С)алкилсульфонил, (1-4С)алкилкарбонил, (1-4С)алкоксикарбонил, (1-4С)алкокси(1-4С)алкилкарбонил, фурилкарбонил; фенил(1-4С)алкилкарбонил, где фенильное кольцо необязательно замещено одним или несколькими заместителями, выбранными из (1-4С)алкокси; R⁹ и R¹⁰ необязательно выбраны из Н, (1-6С)алкила и (1-4С)алкокси(2-4С)алкила; или R⁹ и R¹⁰ могут быть соединены вместе с образованием морфолинильного кольца; R¹¹ представляет собой Н, R¹²,R¹³-амино, R¹⁴,R¹⁵-аминокарбонил или R¹⁴,R¹⁵-аминосульфонил; R¹² представляет собой H;R¹³ представляет собой (1-4С)алкилсульфонил, (1-4С)алкилкарбонил, (1-4С)алкоксикарбонил или пиперазинил(1-4С)алкилкарбонил; R¹⁴ и R¹⁵ независимо выбраны из Н, (1-6С)алкила, (1-4С)алкокси(2-4С)алкила и имидазолил(1-4С)алкила; Х представляет собой О или R¹⁶-N; Y представляет собой СН₂ или C(O); Z представляет собой CN; R¹⁶ представляет собой Н, (1-4С)алкил, (1-4С)алкилкарбонил; или к их фармацевтически приемлемым солям.

Изобретение также относится к фармацевтической композиции, а также к применению производных 4-фенил-5-оксо-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолина по любому из п.п.1-10. Технический результат - получение новых биологически активных соединений, обладающих агонистической активностью в отношении рецептора FSH. 3 н. и 10 з.п. ф-лы.

1. Производное 4-фенил-5-оксо-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолина, представленное формулой I

R¹ представляет собой (1-6С)алкил;
R² представляет собой галоген, (1-4С)алкокси;
R³ представляет собой ОН, NO₂, CN, фторированный (1-4С)алкокси, (1-4С)алкокси(2-4С)алкокси, гидрокси(2-4С)алкокси, (1-4С)алкоксикарбонил, R⁷,R⁸-амино, R⁹,R¹⁰-амино, R⁹,R¹⁰-аминокарбонил, R⁹,R¹⁰-аминосульфонил или фенил(1-4С)алкокси, где фенильное кольцо в составе фенил(1-4С)алкокси необязательно замещено одним или несколькими заместителями, выбранными из (1-4С)алкокси;
R⁴ представляет собой R¹¹-фенил или R¹¹-(4-5C)гетероарил, который представляет собой гетероароматическую группу, содержащую 4-5 атомов углерода и по меньшей мере один гетероатом, выбранный из N и S, где фенильная или гетероарильная группа необязательно дополнительно замещена одним или несколькими заместителями, выбранными из нитро, (1-4С)алкила, (1-4С)алкокси;
R⁷ представляет собой Н, (1-4С)алкил;
R⁸ представляет собой (1-4С)алкилсульфонил; (1-4С)алкилкарбонил, (1-4С)алкоксикарбонил, (1-4С)алкокси(1-4С)алкилкарбонил, фурилкарбонил;
фенил(1-4С)алкилкарбонил, где фенильное кольцо необязательно замещено одним или несколькими заместителями, выбранными из (1-4С)алкокси;
R⁹ и R¹⁰ необязательно выбраны из Н, (1-6С)алкила и (1-4С)алкокси(2-4С)алкила
или R⁹ и R¹⁰ могут быть соединены вместе с образованием морфолинильного кольца;
R¹¹ представляет собой Н, R¹²,R¹³-амино, R¹⁴,R¹⁵-аминокарбонил или R¹⁴,R¹⁵-аминосульфонил;
R¹² представляет собой Н;
R¹³ представляет собой (1-4С)алкилсульфонил, (1-4С)алкилкарбонил, (1-4С)алкоксикарбонил или пиперазинил(1-4С)алкилкарбонил;
R¹⁴ и R¹⁵ независимо выбраны из Н, (1-6С)алкила, (1-4С)алкокси(2-4С)алкила и имидазолил(1-4С)алкила;
Х представляет собой О или R¹⁶-N;
Y представляет собой СН₂ или С(O);
Z представляет собой CN;
R¹⁶ представляет собой Н, (1-4С)алкил, (1-4С)алкилкарбонил,
или его фармацевтически приемлемая соль.

2. Производное 4-фенил-5-оксо-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолина по п.1, где
R² представляет собой галоген.

3. Производное 4-фенил-5-оксо-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолина по п.1 или 2, где R³ представляет собой R⁹,R¹⁰-аминосульфонил.

4. Производное 4-фенил-5-оксо-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолина по п.3, где R⁹ и R¹⁰ представляют собой независимо (1-6С)алкил.

5. Производное 4-фенил-5-оксо-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолина по п.4, где R⁴ представляет собой R¹¹-фенил или R¹¹-(4-5C)гетероарил, который представляет собой гетероароматическую группу, содержащую 4-5 атомов углерода и по меньшей мере один гетероатом, выбранный из N и S, где фенильная или гетероарильная группа необязательно дополнительно замещена одним или несколькими заместителями, выбранными из (1-4С)алкокси.

6. Производное 4-фенил-5-оксо-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолина по п.1 или 2, где R⁴ представляет собой R¹¹-фенил или R¹¹-(4-5C)гетероарил, который представляет собой гетероароматическую группу, содержащую 4-5 атомов углерода и по меньшей мере один гетероатом, выбранный из N и S, где фенильная или гетероарильная группа необязательно дополнительно замещена одним или несколькими заместителями, выбранными из (1-4С)алкокси.

7. Производное 4-фенил-5-оксо-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолина по п.6, где R¹¹ представляет собой Н или R¹²,R¹³-амино.

8. Производное 4-фенил-5-оксо-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолина по п.1 или 2, где Х представляет собой О.

9. Производное 4-фенил-5-оксо-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолина по п.1 или 2, где Y представляет собой СН₂.

10. Производное 4-фенил-5-оксо-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолина по п.5, где R¹¹ представляет собой Н или R¹²,R¹³-амино, Z представляет собой CN, Х представляет собой О и Y представляет собой СН₂.

11. Производное 4-фенил-5-оксо-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолина по п.1 или 2, обладающее агонистической активностью в отношении рецептора FSH.

12. Фармацевтическая композиция, обладающая агонистической активностью в отношении рецептора FSH, содержащая производное 4-фенил-5-оксо-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолина по любому из пп.1-10 и фармацевтически подходящие вспомогательные вещества.

13. Применение производного 4-фенил-5-оксо-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолина по любому из пп.1-10, или его фармацевтически приемлемой соли, или сольвата для получения лекарственного средства для лечения нарушений фертильности.