СПОСОБ ПОВЫШЕНИЯ АКТИВНОСТИ АНТИБИОТИКА СТРЕПТОМИЦИНА В ОТНОШЕНИИ УСТОЙЧИВЫХ К НЕМУ М. TUBERCULOSIS Российский патент 2010 года по МПК C12P19/54 C12Q1/00 C12R1/32 

Изобретение относится к микробиологии, биотехнологии и фтизиатрии и может быть использовано при лечении больных лекарственно устойчивым туберкулезом легких.

При заболевании туберкулезом основным видом лечения является антибактериальная терапия, одним из основных антибиотиков используется стрептомицин. Однако при заболевании туберкулезом и массивной микробной популяции или вследствие нерационального использования антибиотика могут путем селекции или адаптации развиваться устойчивые к нему М.tuberculosis.

В последнее время выделение М.tuberculosis, устойчивых к стрептомицину, отмечается у до 20% впервые выявленных больных (М.В.Шилова. Туберкулез в России в 2006 году. - Воронеж, 2007. - 150 с.).

Развитие лекарственно устойчивых форм туберкулеза требует изменения режимов лечения и использования более токсичных и дорогостоящих препаратов резервного ряда (канамицин, фторхинолоны). При развитии полирезистентности возбудителя снижается эффективность лечения и ухудшается эпидемическая ситуация, что приводит к снижению качества жизни человека и экономическим потерям общества.

Основным механизмом формирования устойчивости к аминогликозидам, в том числе и стрептомицину, является ферментативная инактивация антибиотика путем модификации, в результате чего препарат не может связываться с рибосомами микроорганизма и подавлять синтез белка в ядре последнего (С.В.Сидоренко и М.В.Эйдельштейн. Механизмы резистентности микроорганизмов // Практическое руководство по антиинфекционной химиотерапии. Под ред. Л.С.Страчунского, Ю.Б.Белоусова, С.Н.Козлова. Смоленск: МАКМАХ, 2007. - 464 с). С целью повышения активности антибиотиков в отношении устойчивых к ним микроорганизмов используются, в основном, методы введения в состав антибиотика ингибиторов.

В настоящее время наиболее близким к заявляемому изобретению является получение антибиотика амоксициллин/клавуланат, когда с целью повышения активности препарата для воздействия на устойчивые к нему микроорганизмы в состав введен ингибитор b-лактамаз - клавулановая кислота (С.В.Сидоренко, С.Н.Козлов. Группа пенициллинов // Практическое руководство по антиинфекционной химиотерапии. Под ред. Л.С.Страчунского, Ю.Б.Белоусова, С.Н.Козлова. Смоленск: МАКМАХ, 2007. - 464 с). К недостаткам прототипа можно отнести то, что полученный этим способом препарат не действует на М.tuberculosis.

Цель изобретения - повышение активности антибиотика стрептомицина в отношении устойчивых к нему М.tuberculosis. В результате будет повышена эффективность лечения туберкулеза, вызванного устойчивыми к стрептомицину М.tuberculosis.

Поставленная цель достигается полимеризацией и детоксикацией антибиотика раствором формалина с концентрацией не более 0,15±0,05 при температуре 40,0±2,0°С в течение 5-7 суток. При таком способе обработки исходная концентрация антибиотика не изменяется, а концентрация формалина в лиофилизированном виде снижается до 0,01%.

Пример осуществления способа.

Было использовано 40 флаконов лиофилизированного стрептомицина, в которое с помощью шприца внесли по 5,0 мл 0,2% раствора формалина для детоксикации и полимеризации при 42°С в течении 7 суток.

При проведении исследований по повышению эффективности антибиотика стрептомицина путем его полимеризации и обработки формалином были получены следующие результаты. У десяти больных туберкулезом различной продолжительности и с различными клиническими формами были выделены из мокроты М.tuberculosis, путем разведений определена их чувствительность к антибактериальным препаратам, в том числе и к стрептомицину. Анамнестически и с учетом режима проводимой терапии у четырех больных определена вторичная (приобретенная) и у шести - первичная лекарственная устойчивость микобактерий (ЛУ МБТ) к стрептомицину и другим антибактериальным препаратам (АБП). Выделенные культуры были посеяны на классические среды Левенштейна, одна из которых содержала обычный стандартный стрептомицин (субстанция), а вторая, опытная - модифицированный антибиотик стрептомицин, обработанный по заявляемому способу. Исследуемые препараты антибиотика вносили в среду в виде водных растворов из расчета 10 ЕД на 1 мл среды.

Учет результатов роста проводили последовательно каждые десять дней в течение 45 дней. Результаты представлены в таблице.

№ больного Форма туберкулеза Характер ЛУ МБТ ЛУ МБТ к АБП Результат роста МБТ опыт контроль 1 ИТЛ Первичная S - + 2 ФКТЛ Вторичная HSP + + 3 ФКТЛ Вторичная SH - + 4 ДТЛ Первичная S - + 5 ДТЛ Первичная S - + 6 ИТЛ Первичная S - + 7 ЦТЛ Вторичная SE - + 8 ИТЛ Первичная S - + 9 ДТЛ Вторичная S - + 10 ФКТЛ Первичная SH + + В таблице обозначены: 1) клинические формы: ИТЛ - инфильтративный, ДТЛ - диссеминированный, ЦТЛ - цирротический и ФКТЛ - фиброзно-кавернозный туберкулез легких; 2) ЛУ к АБП: S - к стрептомицину, Н - изониазиду, Р - ПАСК и Е - этамбутолу; 3) рост культуры: «-» - роста нет, «+» - рост имеется.

Таким образом, положительный результат роста МБТ получен на двух культурах, которые были выделены у больных с далеко зашедшими формами туберкулеза органов дыхания как с первичной, так и вторичной ЛУ МБТ, при этом в обоих случаях - с полирезистентными штаммами М.tuberculosis.

Однако получены отрицательные результаты роста МБТ и по полирезистентным штаммам М.tuberculosis с первичной и вторичной ЛУ МБТ, но не более чем к двум антибактериальным препаратам.

Изобретение относится к микробиологии, биотехнологии и фтизиатрии и может быть использовано при лечении больных лекарственно устойчивым туберкулезом легких. Способ повышения активности антибиотика стрептомицина в отношении устойчивых к нему M.tuberculosis заключается в полимеризации и детоксикации стрептомицина путем обработки 0,15±0,05% раствором формалина при 40,0±2,0°С в течение 5-7 суток. Использование препаратов антибиотика стрептомицина, полученного способом по изобретению, позволяет, не изменяя концентрации антибиотика, уменьшить концентрацию формалина в лиофилизированном виде до 0,01%, в результате повышается эффективность лечения туберкулеза, вызванного устойчивыми к стрептомицину M.tuberculosis. 1 табл.

Способ повышения активности антибиотика стрептомицина в отношении устойчивых к нему M.tuberculosis, отличающийся тем, что проводят его полимеризацию и детоксикацию путем обработки 0,15±0,05%-ным раствором формалина при 40,0±2,0°С в течение 5-7 суток.