СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАРАТА ИЗ МЕДИЦИНСКОЙ ПИЯВКИ Российский патент 2012 года по МПК A61K35/62 

Изобретение относится к новым препаратам для медицинских целей, а именно к лечебным средствам на основе биологически активных веществ, продуцируемых медицинской пиявкой, и способу их получения.

Указанный препарат относится к поликомпонентным физиологически активным препаратам, обладающим противовоспалительным, рассасывающим, анальгезирующим действием, снижает реологические свойства крови, ингибируя агрегацию тромбоцитов и эритроцитов, является иммуномодулятором, проявляет нейротрофические свойства.

Известны различные способы выделения биологически активных веществ, продуцируемых медицинской пиявкой:

1. Способ получения секрета слюнных желез медицинской пиявки. Баскова И.П., Патент России №2045954, 1994 г.

2. Экстракты из медицинских пиявок:

а) экстракт из головной части медицинской пиявки и туловищ:

Markward F. Untersuchungen uber Hirudin. Naturwissenschaften, 1955, 42, p.537-538.

Markward F. Die isolierung und Chemische Charakterisierung des Hirudins. Hoppe Seylers Z. Physiol., 1957, 308, p.147-156.

Markward F. Blutgerinnungshemender Wirkstoff aus Blutsaugenden Tieren. Iena, 1963.

Walsman P., Markward F. On the isolation of the thrombin inhibitor Hirudin. Thromb Res., 1995, 40, p.563-570.

Баскова И.П. и др. Сравнительная характеристика гирудина из цельных пиявок, головок и туловищ. Биохимия, 1980, 45, с.266-272.

б) экстракты из цельных медицинских пиявок:

Refers F.J., Zebe E. Protease inhibitors in the alimentary tract of the medicinal leech Hirudo medicinalis in vivo and in vitro studies. J. Comp. Physiol. Biochem., 1992, 162, p.82-92.

Баскова И.П. и др. Сравнительная характеристика гирудина из цельных пиявок, головок и туловищ. Биохимия, 1980, 45, с.266-272.

Известен лечебный гель "Пиявит +", представляющий собой водно-солевой экстракт цельной медицинской пиявки (Горбань В.И. и др. Патент РФ №2268739 от 05.01.04 г.).

Известен также препарат «Пиявит», представляющий собой порошок из лиофильно высушенной цельной медицинской пиявки (Баскова И.П. и др., патент РФ №2033173 от 31.01.92 г. - прототип).

Однако на наш взгляд лиофилизация не позволяет в полной мере сохранить биологическую активность веществ белковой природы, а экстракция не позволяет полностью выделить биологически активные вещества из тела медицинской пиявки.

Целью изобретения является разработка нового препарата для медицинских целей, расширяющего арсенал средств аналогичного назначения - лечебного средства на основе биологических активных веществ, продуцируемых медицинской пиявкой и способа его получения.

Указанная цель достигается путем исключения лиофильной сушки и экстракции, но с использованием консерванта и связующего - водного раствора поливинилового спирта и хлорида магния.

Пример 1. Приготовление консервирующего раствора.

В колбу с мешалкой и обратным холодильником помещают 2,0 л воды, 0,5 кг хлорида магния и 0,25 кг поливинилового спирта (ПВС 20/1) (ГОСТ 10779-78).

Массу нагревают на кипящей водяной бане и перемешивают до полного растворения исходных компонентов. После самоохлаждения получают прозрачную вязкую массу.

Пример 2. Приготовление препарата.

Пиявок, выдержанных в режиме активного голодания не менее 4 месяцев до полного освобождения кишечного канала от крови, вводят в анабиоз при температуре 5…10 градусов. после чего промывают холодной водой (температура 5…10 градусов), помещают в полотняный мешочек и подвешивают в холодильнике при температуре 5…10 градусов на срок 2…4 часа для удаления избыточной влаги. После чего пиявку перекладывают в полиэтиленовый пакет и замораживают при температуре -25…-28 градусов. Замороженную таким образом пиявку измельчают в гомогенизаторе. Полученную массу смешивают с консервирующим раствором в соотношении 1:1 и распределяют на протвене из нержавеющей стали, который помещают в сушильный шкаф, где и высушивают при температуре 30…37 градусов до образования пленки.

Получают эластичную пленку темно-коричневого цвета, которая обладает самоадгезией. Из получаемого материла изготавливают таблетки, драже, пленки.

Полученный препарат проверяли на антикоагулянтную активность в сравнении с прототипом.

Таблица 1 Антикоагулянтная активность водных экстрактов препарата "Пиявит" (прототип) и заявляемого объекта (среднее из 5 параллельных) № пробы Состав Цвет раствора Антикоагулянтная активность, АКБ 1 Препарат "Пиявит" + физраствор (прототип) Темно-коричневый 3600+/-100 2 Заявляемый объект + физраствор Темно-коричневый 3750+/-110

Как видно из представленных данных, антикоагулянтная активность образцов практически одинакова. Однако следует учесть тот факт, что указанные образцы (прототип и заявляемый объект) - это поликомпонентные препараты и не все стороны их биологического действия изучались количественно.

Также проводились исследования на микробиологическую чистоту заявляемого объекта (на соответствие ФСП 42-0543-06 с12) после хранения при комнатной температуре в течение 6 месяцев.

Таблица 2 Микробиологические исследования* № п/п Определяемые показатели, ед. измерения Результаты исследования Величина допустимого уровня 1 ОМЧ КОЕ/г 4,0*100 KOE/г Не более 1000 аэробных бактерий КОЕ/г 2 Дрожжи плесени Не обнаружены Не более 100 КОЕ/г 3 E.coli Не обнаружены Отсутствие в 1,0 г 4 S.aureus Не обнаружены Отсутствие в 1,0 г 5 Salmonella Не обнаружены Отсутствие в 1,0 г 6 P.aeruginosa Не обнаружены Отсутствие в 1,0 г 7 Другие кишечные бактерии Не обнаружены Не более 100 КОЕ/г *Нормативная документация на методы исследования - Госфармакопея XI издания - том 11 от Изменения 3. Категория 4.2; выпуск 2, М.: Медицина, 1990. - с.187.

Изобретение относится к фармакологической промышленности, в частности к способу получения препарата из медицинской пиявки. Способ получения препарата из медицинской пиявки, в котором пиявку выдерживают в режиме активного голодания не менее 4 месяцев, промывают, замораживают и измельчают в гомогенную массу, полученную массу смешивают с водным раствором поливинилового спирта и хлорида магния в определенном соотношении и высушивают в условиях, при которых не происходит денатурация белка до образования эластичной пленки. Заявленный способ позволяет получить препарат с повышенной антикоагулянтной и антихимотриптической активностью и микробиологической чистотой. 2 табл.

Способ получения препарата из медицинской пиявки, в котором пиявку выдерживают в режиме активного голодания не менее 4 месяцев, промывают, замораживают и измельчают в гомогенную массу, отличающийся тем, что полученную массу смешивают с водным раствором поливинилового спирта и хлорида магния в соотношении 1:1 (по весу) и высушивают в условиях, при которых не происходит денатурация белка до образования эластичной пленки.