СПОСОБ ВВЕДЕНИЯ ЗАЩИТНОЙ СРЕДЫ В БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫЙ МАТЕРИАЛ Российский патент 2012 года по МПК A61K9/08 C12N1/20 A61K9/10 A61K9/14 A61J3/00 A61K39/395 A61K35/74 A61K47/26 A61K47/36 B82B3/00 

Изобретение относится к медицине, биотехнологии и фармацевтической промышленности и касается способа введения защитной среды в микрокапельные порошки, содержащие биологически активные действующие вещества в жидкой фазе.

В результате большого числа экспериментальных исследований учеными разных стран мира была показана возможность сохранения жизнеспособности многих микроорганизмов после обезвоживания и хранения в сухом состоянии.

Значительные достижения в этой области были связаны не столько с совершенствованием методов обезвоживания, сколько с применением эффективных защитных сред.

Однако методы введения защитных сред в высушиваемые материалы не отличались многообразием.

Известен способ получения сухого пробиотического препарата, согласно которому культуру бифидобактерий или стрептококка, выращенную в условиях глубинного культивирования, с защитной средой смешивают (патент RU №2067114 C1, C12N 1/20, 1/04, А61К 35/74, 27.09.1996).

Известна сахарозожелатиновая среда на калийфосфатном буфере для лиофилизации вакцинного штамма Ersysipielothrix rhusiopthicae suis ВР-2, которой выращенный и концентрированный штамм Ersysipielothrix rhusiopthicae suis ВР-2 разводят (патент RU №1589448 С, А61К 39/00, 15.11.1994).

Известен сухой пробиотический препарат и способ его получения, в соответствии с которым жидкую биомассу из нативной культуры лактобактерий (штамм Lb. plantarum) получают путем смешения-растворения углеводно-белкового комплекса (патент RU 2268926 С2, C12N 1/20, А23С 9/12, F26B 5/16, 10.03.2005).

Основным недостатком известных способов является невозможность обеспечения высокой дисперсности биологически активных материалов, содержащих действующие вещества в жидкой фазе.

В основу заявляемого изобретения положена задача повышения дисперсности биологически активных материалов, содержащих действующие вещества в жидкой фазе.

Задача решена тем, что защитную среду вводят в жидкую фазу при диспергировании биологически активного материала.

В результате проведенных исследований нами впервые показано, что при получении микрокапельных порошков - материалов с жидкой фазой в высокодисперсном микрокапельном состоянии, стабилизированном высокодисперсным инертным гидрофобным разобщителем с наноразмерами частиц - введение защитной среды в препараты перед их высушиванием возможно не только на стадии приготовления объекта обезвоживания (перед получением микрокапельного порошка), но и непосредственно в готовый микрокапельный порошок. Для этого необходимо защитную среду вводить в жидкую фазу препарата при его диспергировании, при этом диспергированию также будет подвергаться вводимая защитная среда. Капли жидкой фазы препарата, теряя при диспергировании стабилизирующий слой высокодисперсного разобщителя, объединяются с каплями защитной среды, вновь диспергируются, уменьшаясь при этом в размерах, и вновь покрываются стабилизирующим слоем высокодисперсного гидрофобного разобщителя. В результате дисперсность полученных материалов увеличивается, и поскольку продолжительность процесса введения защитной среды составляет несколько секунд, это не сказывается на активности действующих веществ. Кроме того, заявляемый способ не зависит от вида действующего вещества, составляющего основу биологически активного материала.

Согласно изобретению повышение дисперсности биологически активных материалов, содержащих действующие вещества в жидкой фазе, обеспечивается тем, что защитную среду вводят в жидкую фазу при диспергировании биологически активного материала.

Заявляемый способ введения защитной среды в биологически активный материал является новым и в литературе не описан.

Техническим результатом заявляемого изобретения является повышение дисперсности биологически активных материалов, содержащих действующие вещества в жидкой фазе.

Сущность изобретения поясняется на следующих примерах, показывающих повышение дисперсности биологически активных материалов, содержащих действующие вещества в жидкой фазе, при использовании заявляемого способа.

Содержание в препаратах жизнеспособных аэробных микроорганизмов Serratia marcescens, Entherococcus faecium определяли методом Пастера-Коха на твердых питательных средах. Биологическую активность препаратов иммуноглобулинов характеризовали антисальмонеллезной активностью (в титрах РИГА) [ФС 42-3347-97]. Дисперсность готовых препаратов измеряли на лазерном анализаторе зернистости «Malvern Instruments)) 2600С по методике разработчика.

Пример 1. Введение лактозной защитной среды в жидкую фазу микрокапельного порошка на основе S.marcescens шт. ВКМ-851 осуществляли при его диспергировании в электромагнитном аппарате. Защитную среду следующего состава: лактоза - 20,0, тиомочевина - 6,6, полиглюкин - 1,5, аскорбиновая кислота - 3,6, вода дистиллированная - 68,3, дозировали в диспергируемый материал в течение 15 с в таком количестве, чтобы обеспечить ее соотношение к жидкой фазе порошка как 1:2.

В качестве контроля использовали микрокапельный порошок, полученный диспергированием в том же аппарате смеси суспензии S. marcescens шт.ВКМ-851 с лактозной защитной средой при соотношении 2:1.

Результаты представлены в таблицах.

Способ введения защитной среды Выживаемость (%) бактерий в опыте Среднее   1 2 3 4 5 6 7   Контроль 100 99,1 100 100 95,9 98,1 100 99,0 Заявляемый 97,1 100 97,9 100 100 96,5 96,3 98,4

Параметр дисперсности Способ введения защитной среды Величина параметра в опыте Среднее 1 2 3   Средний медианный диаметр, мкм контроль 30,6 31,5 31,0 31,0 заявляемый 22,8 20,5 24,4 22,6 Содержание (%) капель фракции 1-10 мкм контроль 9,2 8,6 8,9 8,9 заявляемый 16,5 20,4 15,4 17,4 Содержание (%) капель фракции 1-25 мкм контроль 36,4 35,0 35,8 35,7 заявляемый 52,1 58,0 48,3 52,8

Пример 2. Введение сахарозо-желатиновой защитной среды в жидкую фазу микрокапельного порошка на основе Е.faecium осуществляли при его диспергировании в электромагнитном аппарате. Защитную среду следующего состава: сахароза - 10, желатин - 1, вода дистиллированная - 89, дозировали в диспергируемый материал в течение 15 с в таком количестве, чтобы обеспечить ее соотношение к жидкой фазе порошка как 1:2.

В качестве контроля использовали микрокапельный порошок, полученный диспергированием в том же аппарате смеси суспензии Е.faecium с сахарозо-желатиновой защитной средой при соотношении 2:1.

Результаты представлены в таблицах.

Способ введения защитной среды Выживаемость (%) бактерий в опыте Среднее 1 2 3 4 5 6 7   Контроль 100 100 98,8 100 99,4 100 97,6 99,4 Заявляемый 99,6 100 100 98,4 100 100 100 99,7

Параметр дисперсности Способ введения защитной среды Величина параметра в опыте Среднее 1 2 3 Средний медианный диаметр, мкм контроль 35,1 30,9 38,0 34,7 заявляемый 25,3 21,2 27,4 24,6 Содержание (%) капель фракции 1-10 мкм контроль 10,1 9,8 11,3 10,4 заявляемый 17,4 21,7 16,6 18,5 Содержание (%) капель фракции 1-25 мкм контроль 31,7 33,1 32,4 32,4 заявляемый 50,2 54,0 49,7 51,3

Пример 3. Введение глициновой защитной среды в жидкую фазу микрокапельного порошка на основе иммуноглобулинов IgG, IgA, IgM осуществляли при его диспергировании в дисковом аппарате. Защитную среду следующего состава: глицин - 1, глюкоза - 2, вода дистиллированная - 97, дозировали в диспергируемый материал в течение 10 с в таком количестве, чтобы обеспечить ее соотношение к жидкой фазе порошка как 1:2.

В качестве контроля использовали микрокапельный порошок, полученный диспергированием в том же аппарате смеси раствора иммуноглобулинов IgG, IgA, IgM с глициновой защитной средой при соотношении 2:1.

Результаты представлены в таблицах.

Способ введения защитной среды Сохранение антисальмонеллезной активности (%) в опыте Среднее 1 2 3 4 5 6 7 Контроль 100 100 100 100 100 100 100 100 Заявляемый 100 100 100 100 100 100 100 100

Параметр дисперсности Способ введения защитной среды Величина параметра в опыте Среднее 1 2 3 Средний медианный диаметр, мкм контроль 14,3 15,1 14,1 14,5 заявляемый 11,0 10,6 11,9 11,2 Содержание (%) капель фракции 1-10 мкм контроль 41,3 40,4 41,6 41,1 заявляемый 56,1 57,0 56,5 56,5 Содержание (%) капель фракции 1-25 мкм контроль 67,7 65,9 66,4 66,6 заявляемый 79,4 78,1 77,6 78,3

Как следует из анализа представленных материалов, заявляемый способ введения защитных сред не зависит ни от вида действующих веществ, составляющих основу препарата, ни от состава защитной среды и приводит к повышению дисперсности препарата за счет введения защитной среды в жидкую фазу при диспергировании биологически активного материала.

Изобретение относится к способу введения защитной среды в биологически активный материал, который заключает во введение защитной среды в жидкую фазу при диспергировании биологически активного материала. Биологически активный материал содержит жидкую фазу с действующими веществами в микрокапельном состоянии, которое стабилизировано высокодисперсным гидрофобным разобщителем с наноразмерами частиц. Технический результат заявленного изобретения заключается в повышении дисперсности биологически активных материалов, содержащих действующие вещества в жидкой фазе. 6 табл., 3 пр.

Способ введения защитной среды в биологически активный материал, содержащий жидкую фазу с действующими веществами в микрокапельном состоянии, стабилизированном высокодисперсным гидрофобным разобщителем с наноразмерами частиц, характеризующийся тем, что защитную среду вводят в жидкую фазу при диспергировании биологически активного материала.