ПРОТИВООПУХОЛЕВОЕ СРЕДСТВО Российский патент 2012 года по МПК A61K33/24 A61P35/00 

Изобретение относится к биологически активным веществам и может быть использовано в медицине и биологии в качестве самостоятельного противоопухолевого средства нового класса, так же как и средства для возможного комбинированного использования с другими противораковыми препаратами с целью усиления их терапевтического эффекта.

В настоящее время в клинической практике известно более 60-ти противоопухолевых препаратов (Противоопухолевая химиотерапия. Справочник. /Под ред. Н.И.Переводчиковой. М.: 1996; Safit J.T., Bonavida В., Cancer Res., 1992, V.52., P.630; Михайлов И.Б. Настольная книга врача по клинической фармакологии - руководство для врачей. СПб. 2001. стр.615; Стуков А.Н., Гершановвич М.Л., Бланк М.А., Бланк О.А., Махнова Е.В. Противоопухолевые лекарственные средства. - СПб.: NIKA, 2011. - 656 с.). Однако эффективность большинства их них недостаточна и спектр онкологических заболеваний, чувствительных к химиотерапии, ограничен. Среди наиболее доступных и применяемых в настоящее время цитостатиков известны такие препараты, как цисплатин и 5-фторурацил, которые используются отдельно или в комплексной терапии рака желудка, рака толстой кишки, рака молочной железы, рака печени (гепатомы), меланомы и др. При этом как и большинство препаратов, используемых для лечения злокачественных заболеваний, цисплатин и 5-фторурацил обладают высокой токсичностью. При их применении, как правило, наблюдаются тошнота, рвота, выраженные нарушения функций почек, нарушения функций нервной системы, угнетение кроветворения и т.д. (Машковский М.Д. Лекарственные средства. М. 2001. стр.425-428). Поэтому разработка новых, более активных в отношении злокачественных новообразований лекарственных средств, одновременно обладающих незначительной токсичностью, является актуальным направлением научных исследований в области современной фармакологии и онкологии.

Задачей, на решение которой направлено предлагаемое изобретение, является создание нового нетоксичного противоопухолевого средства.

Поставленная задача решена за счет использования в качестве противоопухолевого средства соли осмата калия K₂[OsO₂(OH)₄] на основе изотопа ¹⁸⁷Os (далее - соединение).

Изучение противоопухолевой активности соединения было проведено в ФГУ НИИ онкологии им. Н.Н.Петрова в системе in vivo на мышах, которым внутрибрюшинно перевивали клетки солидной опухоли Эрлиха, которые обычно используются для предварительного скрининга соединений с возможной противоопухолевой активностью (Экспериментальная оценка противоопухолевых препаратов в СССР и США. /Под ред. З.П.Софьиной, А.Б.Сыркина (СССР). А.Голдина, А.Клейна (США). М.: Медицина, 1979, 296 стр.). Штамм перевиваемой опухоли Эрлиха поддерживается в НИИ онкологии в виде асцитного рака, представляющего суспензию опухолевых клеток, перевиваемых внутрибрюшинно. Внутрибрюшинный метод введения соединения был выбран для проведения опытов в связи с тем, что он является наиболее эффективным методом доставки соединения к опухолевым клеткам при наименьшем необходимом количестве вводимого соединения. Для получения солидной опухоли данную суспензию вводили мышам подкожно.

При проведении исследований использовали здоровых половозрелых животных - 74 мыши-самца весом 30-33 г аутбредной линии SHR разводки ФГУ НИИ онкологии им. Н.Н.Петрова. Контрольные и опытные животные содержались в виварии в одинаковых условиях: в пластиковых клетках типа Т-2 с мелкой древесной стружкой (не более 10 особей в одной клетке) со стальными решетками при стандартном световом режиме и температуре 20-22°С, получали воду и полнорационный брикетированный корм ПК-120 (производства ООО «Лабораторкорм», Москва) ad libirtum.

В качестве контрольного препарата для проверки противоопухолевой активности соединения использовался цисплатин фирмы Унтерах, Австрия в растворе 50 мг/100 мл.

Всех животных после перевивки опухоли методом рандомизации разбили на группы:

1) контрольная группа - введение физиологического раствора однократно через 48 ч после перевивки опухоли;

2) контрольная группа - введение физиологического раствора три раза в неделю через день, начиная через 48 ч после перевивки опухоли;

3) группа - введение цисплатина - 125 мкг/мышь однократно через 48 ч после перевивки опухоли:

4) группа - введение соединения - 500 мкг/мышь в физиологическом растворе однократно через 48 ч после перевивки опухоли;

5) группа - 12-ти кратное введение соединения - 500 мкг/мышь в физиологическом растворе три раза в неделю через день, начиная через 48 ч после перевивки опухоли.

Все исследования проводились в одно и то же время суток - утром.

Всем животным опухоль Эрлиха перевивали подкожно в правый бок в количестве 0.2 мл 10% суспензии клеток асцитного рака (10⁷ клеток/мышь).

Соединение в физиологическом растворе, цисплатин и физиологический раствор вводили по 0.25 мл внутрибрюшинно через 48 ч после перевивки опухоли,

Отмечено, что мыши хорошо переносили введение соединения.

В процессе проведения исследований, начиная с 14 дня после перевивки, 2 раза в неделю измеряли длину и ширину опухолевых узлов и определяли объем опухоли, как объем соответствующего эллипсоида.

Эффективность терапии оценивали по торможению роста опухоли, которую определяли в процентах как отношение разности между средним объемом опухоли в контрольной группе и средним объемом опухоли в опытной группе к среднему объему опухоли в контрольной группе.

Результаты, полученные при проведении исследований, были подвергнуты статистической обработке с целью установления достоверности выявленных различий. Различия считались достоверными при р<0,05 с использованием t-критерия Стьюдента.

В результате проведенных исследований статистически достоверно установлено, что с 14-го по 31-й день после перевивки:

1. Не выявлено заметных различий в росте среднего значения объема опухоли у мышей из контрольных групп 1 и 2 при соответственно однократном и трехкратном в неделю через день введении физиологического раствора.

2. Однократное внутрибрюшинное введении цисплатина в дозе 125 мкг/мышь мышам 3-й группы статистически достоверно тормозило рост солидной опухоли Эрлиха. При этом максимальное торможение роста опухоли составило 50%.

3. Однократное внутрибрюшинное введении соединения в дозе 500 мкг/мышь мышам 4-й группы статистически достоверно тормозило рост солидной опухоли Эрлиха. При этом максимальное торможение роста опухоли составило 71%.

4. 12-Кратное три раза в неделю через день внутрибрюшинное введение соединения в дозе 500 мкг/мышь мышам 5-й группы статистически достоверно тормозило рост солидной опухоли Эрлиха. При этом максимальное торможение роста опухоли составило 80%.

Проведенные исследования показали, что исследуемое соединение проявляет в системе in vivo высокие противоопухолевые свойства. При этом не выявлено проявления нежелательных побочных эффектов.

Результаты исследований позволяют достоверно констатировать наличие у соединения - соли осмата калия K₂[OsO₂(OH)₄] на основе изотопа ¹⁸⁷Os выраженной высокой противоопухолевой активности. Данное соединение можно рекомендовать для практического применения как самостоятельное противоопухолевое средство нового класса, так и как средство для возможного комбинированного использования с другими противораковыми препаратами с целью усиления терапевтического эффекта.

Изобретение относится к применению соли осмата калия K₂[OsO₂(OH)₄] на основе изотопа ¹⁸⁷Os в качестве противоопухолевого средства. Указанная соль обладает высокой противоопухолевой активностью в системе in vivo при отсутствии нежелательных побочных эффектов.

Применение соли осмата калия K₂[OsO₂(OH)₄] на основе изотопа ¹⁸⁷Os в качестве противоопухолевого средства.