КОМБИНИРОВАННЫЕ ЛЕКАРСТВЕННЫЕ СРЕДСТВА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ИНФЕКЦИЙ Российский патент 2013 года по МПК A61K31/427 A61K31/4412 A61K31/4427 A61P31/04 

Изобретение относится к применению монобактамового антибиотика формулы (I), как описано в настоящей заявке ниже, и к новым фармацевтическим продуктам, содержащим комбинацию, содержащую указанное соединение и карбапанемовый антибиотик.

β-лактамовые антибиотики широко используются для лечения бактериальных инфекций как в больницах, так и в домашних условиях. Известно несколько классов β-лактамовых антибиотиков, которые применяются для лечения, и они включают пенициллины, цефалоспорины, цефамицины, карбацефемы, оксацефемы, карбапанемы и монобактамы.

Эффективность всех этих классов для лечения бактериальных инфекций ограничивается появлением бактерий, которые устойчивы к антибиотикам. Основной причиной такой устойчивости у грамотрицательных бактерий является экспрессия бактериями ферментов, известных как β-лактамазы, которые способны гидролизовать β-лактамовые антибиотики, делая их неактивными. Бактерии способны продуцировать различные β-лактамазы, включая пенициллиназы, цефалоспориназы, цефамициназы, карбапенемазы, монобактамазы, β-лактамазы широкого спектра и β-лактамазы расширенного спектра.

Монобактамовые антибиотики (например, азтреонам) считались стабильными к действию различных β-лактамаз. Тем не менее, существуют много штаммов грамотрицательных бактерий, которые в настоящее время проявляют опосредованную β-лактамазой устойчивость к азтреонаму.

Комбинации между Азтреонамом, то есть (Z)-2-[[[(2-амино-4-тиазолил)[[(2S,3S)-2-метил-4-оксо-1-сульфо-3-азетидинил]карбамоил]метилен]амино]окси]-2-метилпропионовой кислотой, и карбапенемами (Имипенемом или Меропенемом) исследовали в качестве возможного пути преодоления бактериальной устойчивости. Несмотря на то, что наблюдали определенный синергизм между азтреонамом и карбапенемом по отношению к бактериям, принадлежащим к Enterobacteriaceae [Sader HS, Huynh HK, Jones KN; Contemporary in vitro synergy rates for aztreonam combined with newer fluoroquinolones and β-lactams tested against Gram-negative bacilli; Diagn. Microbiol. Infect. Dis. 47 (2003) 547-550], но в действии комбинаций по отношению к Pseudomonas aeruginosa отсутствует синергизм или даже проявляется антагонизм [Sader HS, Huynh HK, Jones RN; Contemporary In vitro synergy rates for aztreonam combined with newer fluoroquinolones and β-lactams tested against Gram-negative bacilli; Diagn. Microbiol. Infect. Dis. 47 (2003) 547-550; Yamaki К, Tanaka Т, Takagi К, Ohta M; Effects of aztreonam in combination with antipseudomonal antibiotics against Pseudoznonas aeruginosa isolated from patients with chronic or recurrent lower respiratory tract infection. J. Infect.Chemother. 4(1998) 50-55].

В WO 98/47895 описаны производные 2-оксо-1-азетидин сульфоновой кислоты общей формулы

в которой оксиимино фрагмент имеет 'анти' ориентацию, как показано на формуле выше. 'Анти' является устаревшим термином для обозначения транс-изомера оксимного соединения (префикс 'син', таким образом, используется для обозначения цис-оксима); ср. IUPAC Gold Book; IUPAC Compendium of Chemical Terminology, электронная версия, http://goldbook.iupac.org/E0204.html и РАС, 1996, 68, 2193 Basic terminology of stereochemistry (IUPAC Recommendations 1996) на странице 2207. Раскрытые производные 2-оксо-1-азетидин сульфоновой кислоты используются в комбинации с карбапенемовыми антибиотиками, включая Имипенем, Меропенем или Биапенем для лечения бактериальных инфекций. R1_Ref предпочтительно представляет собой 2-тиенильную группу и используется во всех представленных заявленных соединениях указанной ссылки. R2_Ref. может, в частности, например, представлять собой группу формулы:

Указано, что 'анти' (транс) ориентация оксиимино фрагмента обеспечивает очень хороший синергизм с цефтазидимом. Пример 1 ссылки, например, относится к (3S)-транс-3-[(Е)-2-(2-тиенил)-2-{(1,5-дигидрокси-4-пиридон-2-илметокси)имино}-ацетамидо]-4-метил-2-оксазетидин-1-сульфоновой кислоте и показано, что она обладает, совместно с цефтазидимом, антибактериальной активностью по отношению к различным штаммам патогенных бактерий.

Однако наблюдается повышенное формирование устойчивости к общепринятым монобактамовым антибиотикам, таким как, например, Азтреонам. Принимая во внимание эту возросшую устойчивость, существует настоятельная потребность новых альтернатив известным монобактамовым антибиотикам, а также выявление новых комбинаций антибиотиков.

Настоящее изобретение основывается на недавно обнаруженных новых монобактамовых антибиотиках и, более предпочтительно, на новых данных, что специфический вариант осуществления этих монобактамов, монобактамовый антибиотик формулы (I), как описано в настоящей заявке ниже, при использовании в комбинации с другими антибиотиками, в особенности, карбапенемовыми антибиотиками, проявляет улучшенную эффективность по отношению к широкому спектру бактерий, включая грамположительные и, в особенности грамотрицательные бактерии, включая Enterobacteriaceae и Pseudomonas aeruginosa. В особенности, эффективность новых комбинаций монобактамового антибиотика формулы (I) с карбапенемовыми антибиотиками для многих штаммов важных патогенных бактерий существенно улучшена по отношению к комбинациям Азтреонама с соответствующими карбапенемовыми антибиотиками, например комбинациями Азтреонама с Меропенемом или Имипенемом.

Кроме того, комбинации согласно настоящему изобретению часто проявляют существенно улучшенную эффективность по отношению к бактериям при сравнении с максимальной эффективностью с компонентами комбинаций отдельно, и часто проявляют синергетическое действие, то есть действие, которое является более эффективным по сравнению с ожидаемым действием исключительно аддитивного эффекта.

Таким образом, настоящее изобретение относится к применению монобактамового антибиотика формулы (I)

в которой оксиимино группа, то есть >C=N-O-, находится в Z-ориентации (что соответствует = цис-ориентации или син-ориентации в вышеуказанном понимании для источника 98/47895), или его фармацевтически приемлемой соли для приготовления лекарственного средства для лечения бактериальной инфекции в комбинации с одним или несколькими карбапенемовыми антибиотиками, или их фармацевтически приемлемыми солями.

В другом аспекте изобретение относится к фармацевтическим продуктам, содержащим монобактамовый антибиотик формулы (I), как описано выше, или его фармацевтически приемлемую соль и один или несколько карбапенемовых антибиотиков, или их фармацевтически приемлемую соль.

Эти фармацевтические продукты являются улучшенными лекарственными средствами для лечения инфекций, вызываемых патогенными бактериями, включая грамположительные и, в особенности, грамотрицательные бактерии.

Особенно предпочтительным в соответствии с изобретением является применение монобактамового антибиотика формулы (I) или его соли для приготовления лекарственного средства для лечения бактериальной инфекции в комбинации с одним карбапенемовым антибиотиком или его фармацевтически приемлемой солью.

Монобактамовый антибиотик формулы (I) может быть получен, например, в соответствии с общей схемой 1:

Схема 1

где "НОВТ" обозначает "гидроксибензотриазол", "DCC" обозначает "дициклогексилкарбодиимид" и "ТФК" обозначает "трифторуксусную кислоту". Взаимодействие соединения общей формулы 1а и соединения 2 в соответствии с указанной схемой описано в Org. Process Res.& Dev. 2002, 863. Альтернативно реакцию сочетания соединения общей формулы 1а с соединением 2 можно осуществлять, например, с соответствующим ацилхлоридом (Chem. Pharm. Bull. 1983, 2200) или с активированным сложным эфиром соединения 1, таким как N-гидроксисукцинимидиловый сложный эфир (см. Org. Process Res.& Dev. 2002, 863), или бензотиазолиловый сложный тиоэфир (см. J. Antibiotics 2000, 1071). Альтернативно другие связующие реагенты, такие как гидроксиазабензотриазол (НОАТ), 2-(1Н-7-азабензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметил уроний гексафторфосфат метанаминий (HATU), O-Бензотриазол-N,N,N',N'-тетраметил-уроний-гексафтор-фосфат (HBTU), применяемые для реакций сочетания аминокислот, можно использовать вместо гидроксибензотриазола (НОВТ) или бензотриазолилокситрис (диметиламино)фосфоний гексафторфосфата (РуВОР) (для более подробной информации относительно подходящих связующих реагентов см. N. Sewald, H.-D. Jakubke, Peptides: Chemistry and Biology, Wiley-VCH, 2002).

Приготовление соединения общей формулы 1a можно осуществлять общепринятым способом путем взаимодействия подходящей кетокислоты 1-А3 с подходяще эстерифицированным гидроксиламином 1-А4, как показано ниже на схеме 2:

Схема 2

На вышеописанной схеме 2 приготовление соединения 1-А4 из койевой кислоты и его взаимодействие с соединением 1-А3 описаны подробно, например, в ЕР-А-0251299. Соединение 1-А3 может быть получено, используя в качестве исходного вещества соединение 1-А0, как показано в верхней части вышеприведенной схемы 2. Соединения 1-А0 могут быть приготовлено согласно известным методам и являются частично коммерчески доступными, например, этил 2-(2-амино-1,3-тиазол-4-ил)ацетат (R в формуле 1-А0 = этил) от CHEMOS GmbH, 93128 Regenstauf, Germany). Окисление 1-А0 до 1-А2, например, с диоксидом селена можно осуществить аналогично окислению, описанному на второй стадии примера 1 документа GB-A-1575804.

Соединение 2 со Схемы 1, например, может быть приготовлено согласно пути, описанному на схеме 3:

Схема 3

где "ДМФА·SO₃" обозначает комплекс диметилформамид-трехокись и "ТFA" обозначает трифторуксусную кислоту. На вышеприведенной схеме 3 исходное вещество 2-A3 может быть приготовлено, как описано на странице 2790 Tetrahedron Lett. 1986, cc.2789-2792 (прямой синтез для оптически активного (S)-N-Boc-3-гидроксивалина, необходимый, в свою очередь, здесь в качестве исходного вещества, можно найти в последнем примере J.Org.Chem. 2003, 68, cc.177-179). Превращения из 2-A3 в 2-А4, в 2-А5 и в 2 более подробно описаны, например, в примерах J. Antibiotics, 1985, cc.1536-1549 (см. Схему 1 вышеуказанной ссылки).

На схеме 1 выше:

R^A представляет собой аминозащитную группу, такую как формил, трифторацетил, O-нитрофеноксиацетил, хлорацетил, трихлорацетил, γ-хлорбутирил, бензилоксикарбонил, п-хлорбензилоксикарбонил, п-нитробензилоксикарбонил, п-бромбензилоксикарбонил, п-метоксибензилоксикарбонил, дифенилметоксикарбонил, трет-бутилоксикарбонил, изопропилоксикарбонил, дифенилметил, трифенилметил, бензил, п-метоксибензил, 3,4-диметоксибензил; и

R^B и R^C независимо друг от друга представляют собой спиртовую защитную группу, такую как бензилоксикарбонил, п-хлорбензилоксикарбонил, п-нитробензилоксикарбонил, п-бромбензилоксикарбонил, п-метоксибензилоксикарбонил, дифенилметоксикарбонил, трет-бутилоксикарбонил, изопропилоксикарбонил, дифенилметил, трифенилметил, бензил, п-метоксибензил, 3,4-диметоксибензил, триалкилсилан, такой как триметилсилан, триэтилсилан или трет-бутилдиметилсилан.

Указанные амино- и спиртовые защитные группы легко могут быть удалены, например, путем кислотного гидролиза или других хорошо известных методик [для дальнейших подробностей см., например, Т.W.Greene и др. Protective Groups in Organic Chemistry, Wiley intersience, 1999]. Защитные в соединения общей формулы 1а легко могут быть введены с помощью хорошо известных синтетических методов [для дальнейших подробностей см., например, Т.W.Greene и др. Protective Groups in Organic Chemistry, Wiley intersience, 1999].

Снятие защиты с функциональных групп может быть осуществлено либо путем гидрирования или гидролиза с подходящими кислотами, такими как соляная кислота, муравьиная кислота, уксусная кислота, трифторуксусная кислота, фосфорная кислота, NaH₂PO₄, Na₂HPO₄, п-толуолсульфоновая кислота или метансульфоновая кислота, в растворителях, таких как метанол, этанол, пропанол, этилацетат, ацетонитрмл, метиленхлорид или этиленхлорид. Гидрирование обычно осуществляют в присутствии катализатора-металла, такого как Pd, Pt или Rh при давлении от нормального до повышенного. Снятие защиты с различных функциональных групп можно осуществлять либо одновременно, либо последовательно.

Растворители для реакции выбирают на основании используемых реагентов и из таких растворителей, таких как бензол, толуол, ацетонитрил, тетрагидрофуран, этанол, метанол, хлороформ, этилацетат, метиленхлорид, диметилформамид, диметилсульфоксид, гексаметил-фосфорный триамид или другие. Также можно использовать смеси растворителей.

Температура реакций обычно будет находиться в диапазоне от -70°С до 150°С. Предпочтительное молярное соотношение реагентов составляет от 1:1 до 1:5. Время реакций находится в в диапазоне от 0,5 до 72 часов, в зависимости от реагентов.

Примеры фармацевтически приемлемых солей соединения формулы (I) включают, например, соли неорганического основания, такие как соли аммония, соли щелочных металлов, в особенности соли натрия или калия, соли щелочноземельных металлов, в особенности соли магния или кальция; соли органических оснований, в особенности, производные от циклогексиламина, бензиламина, октиламина, этаноламина, диэтилоламина, диэтиламина, триэтиламина, этилендиамина, прокаина, морфолина, пирролина, пиперидина, N-этилпиперидина, N-метилморфолина, пиперазина в качестве органического основания; или соли с основными аминокислотами, например, лизином, аргинином, орнитином, гистидином и др.

Такие соли могут быть приготовлены способом, известным per se, например, путем взаимодействия соединения формулы (I) с подходящим основанием, предпочтительно при комнатной температуре или ниже, например, от приблизительно 2°С до приблизительно 25°С и выделения образованной соли, например, путем лиофилизации.

Соединения формулы (I) необязательно используют по существу в кристаллической форме. По существу кристаллическое соединение формулы (I) не было описано ранее. Оно может быть получено путем методов кристаллизации/ например, как описано в примерах данной заявки. Для целей настоящего изобретения термин "по существу кристаллический" обозначает, что диаграмма порошковой рентгеновской дифракции (XRPD) соответствующего вещества проявляет один или более четких пиков, которые имеют максимальную высоту, соответствующую по меньшей мере пятикратной их ширине при полумаксимуме. В целом, степень кристалличности вещества повышается при повышении средней величины соотношения высоты определенного пика к его ширине при полумаксимуме. Кроме того, XRPD диаграмма должна показывать по существу постоянную нулевую линию (исходная линия = линия, связывающая минимум кривой диаграммы XRPD) в течение всего просканированного диапазона 2-тета, указывающая на по существу отсутствие аморфного вещества, в анализируемом образце. "По существу постоянная исходная линия" обозначает для целей настоящего изобретения, что исходная линия предпочтительно не повышается более чем, на высоту наиболее низкого пика указанной диаграммы.

Следовательно, дальнейшим объектом настоящего изобретения является соединение формулы (I) по существу в кристаллической форме.

Указанное по существу кристаллическое соединение формулы (I) проявляет пики на порошковой дифрактограмме рентгеновских лучей (XRPD), имеющие относительную интенсивность более 50%, записанные с помощью Cu К-альфа-излучения и выраженные в виде [°2-тета], приблизительно при 6,8±0,1, 15,1±0,1, 15,6±0,1 и 25,4±0,1, и проявляет порошковую рентгенограмму, записанную с помощью Cu К-альфа-излучения, по существу, как представлено ниже:

2© [°±0,1°] Отн. инт. 6,86 m 13,32 w 13,72 w 15,11 st 15,57 vst 22,84 w 25,37 m 26,32 w 27,08 w 28,38 w 28,74 w

где vst обозначает относительную интенсивность от 100% до 90%; st обозначает относительную интенсивность меньше чем 90% до 65%; m обозначает относительную интенсивность меньше чем 65% до 50%; и w обозначает относительную интенсивность меньше чем 50% до 30%, более специфически, следующую порошковую рентгенограмму, записанную с помощью Cu К-альфа-излучения и проявляющую пики дифракции при относительной интенсивности 20% и более:

2Θ [°±0,1°] Отн. инт.** × 2Θ [°±0,1°] Отн. инт.** 6,86 64±13 24,49 22±4 13,32 27±6 25,37 52±10 13,72 28±6 26,32 36±7 15,11 69±14   27,08 34±7 15,57 100±20 28,38 33±7 17,41 29±6 28,74 32±6 17,88 20±4 31,00 23±5 22,84 31±6   ** с типичным отклонением указанных значений для относительной эффективности

Известно, что значения для относительной интенсивности пиков более существенно зависят от определенных свойств анализируемого образца, чем от положения линии, например, от размера кристаллов и/или их ориентации в образце. Следовательно, возможно проявление отклонений около ±20% показанных интенсивностей пиков.

На фиг.1 представлена XRPD диаграмма обычного кристаллического вещества соединения формулы (I), записанная с Cu К-альфа-излучением.

Соединение формулы (I) и его фармацевтически совместимые соли применяются в соответствии с изобретением в комбинации с другими антибиотиками, такими как, в частности, карбапенемовые антибиотики или их фармацевтически приемлемыми солями в качестве антибиотически эффективных лекарственных средств для борьбы или предотвращения инфекционных заболеваний у млекопитающих, людей и отличных от людей, в особенности бактериальных инфекций, более предпочтительно инфекций, в которые вовлечены грамположительные бактерии и, наиболее предпочтительно, грамотрицательные бактерии, такие как, например, внутрибольничная пневмония, внебольничная пневмония, инфекция мочевых путей, осложненная инфекция брюшной полости, осложненная инфекция кожи/подкожной клетчатки, инфекционные обострения кистозного фиброза, сепсис, мелиодоз.

В этом значении соединение формулы (I)и его фармацевтически приемлемые соли применяются в соответствии с изобретением в комбинации с карбапанемовым антибиотиком или его фармацевтически приемлемой солью для такого лечения. Хотя это и не является предпочтительным, могут быть определенные ситуации, при которых может быть благоприятным и показанным применение соединения (I) или его соли с двумя или даже более различными карбапенемовыми антибиотиками.

Для целей настоящего изобретения, термин "карбапенемовый антибиотик" относится к соединениям, эффективным в качестве антибиотиков, содержащим структурный элемент:

В данной области известны различные карбапенемовые антибиотики, и они могут, в целом, применяться для целей настоящего изобретения. Подходящие примеры описаны, например, в A. BRYSKIER "Carbapenems", ANTIMICROBIA1 AGENTS: ANTIBACTERIALS AND ANTIFUNGALS, cc.270-321, Издатель: American Society for Microbiology, Washington D.C., 2005, и ссылках, процитированных в этом источнике. Термин "карбапенемовый антибиотик" внутренние соли, такие как, например, ME 1036 или Биапенем.

Дополнительно к указанным внутренним солям, также могут использоваться другие фармацевтически приемлемые соли карбапенемовых антибиотиков для целей настоящего изобретения, например, соли присоединения кислоты, производные фармацевтически приемлемых органических и/или неорганических кислот.

Предпочтительно карбапенемовые антибиотики, используемые в соответствии с настоящим изобретением, представляют собой соединения формулы (II), или их фармацевтически приемлемую соль:

где R¹ представляет собой водород или C₁-С₆алкил;

R² представляет собой водород или C₁-С₆алкил;

R³ представляет собой водород, C₁-С₆алкил, C₁-С₆алкокси; -(C_1nH_2n)-R⁵ или -O-(C_1nH_2n)-R⁵

где R⁵ представляет собой галоген, циано, C₁-С₆алкокси, амино, (C₁-С₆алкил) амино, ди (C₁-С₆алкил) амино, или группу формулы -СО-R⁶, -NH-CO-R⁶ -CO-NH₂, -NH-CO-NH₂, -NH-SO₂-NH₂ или -NH-(C=NH)-NH_2, в этих группах один или несколько атомов водорода также могут быть заменены R⁶ или -NH₂ остаток группы может быть заменен 5-ти - 6-ти членным гетероциклическим кольцом, связанным с группой посредством атома азота, присутствующего в кольце, где гетероциклическое кольцо может быть незамещено или замещено одним или несколькими заместителями S², где каждый S² имеет, независимо от других заместителей S², одно из значений, приведенных ниже; и

R⁶ представляет собой C₁-С₆алкил, фенил или 5-ти - 6-ти членное гетероциклическое кольцо и может быть незамещен или замещен одним или несколькими заместителями S¹, где каждый S¹ имеет, независимо от других заместителей S¹, одно из значений, приведенных ниже; и n представляет собой целое число от 1 до 6;

R⁴ представляет собой группу формулы -(S)_m-R⁷, где

m представляет собой 0 или 1 и

R⁷ представляет собой водород; C₁-С₆алкил, незамещенный или замещенный одним или несколькими заместителями S¹; фенил, незамещенный или замещенный одним или несколькими заместителями S¹; или 3-х - 6-ти членную гетероциклильную группу, содержащую один или больше гетероатомов, выбранных из азота, серы и кислорода, где гетероциклильная группа, кроме того, необязательно может быть сопряжена с фенильным кольцом или 5-ти - 6-ти членным гетероциклическим кольцом и где вся группа незамещена или замещена одним или несколькими заместителями S¹; где каждый

S¹ независимо от других заместителей S¹ выбирают из C₁-С₆алкила, незамещенного или замещенного одним или несколькими заместителями S²; фенила, незамещенного или замещенного одним или несколькими заместителями S²; или 3-х - 6-ти членной гетероциклильной группы, содержащей один или больше гетероатомов, выбранных из азота, серы и кислорода, где гетероциклильная группа, кроме того, необязательно может быть сопряжена с фенильным кольцом или 5-ти - 6-ти членным гетероциклическим кольцом и где вся группа незамещена или замещена одним или несколькими заместителями S²; C₁-С₆алкокси, гидроксила, карбокси, амино, C₁-С₆алкил амино, ди (C₁-C₆)алкил амино, циано, галогена, или группы формулы -CO-R⁸, -NH-CO-NH₂, -CO-NH₂, -NH-CH=NH, -(C=NH)-C₁-С₆алкила, -NH-CO-NH₂, -NH-SO₂-NH₂ или -NH-(C=NH)-NH₂, в этих группах один или несколько атомов водорода также могут быть заменены R⁸ или -NH₂ остаток группы может быть заменен 5-ти - 6-ти членным гетероциклическим кольцом, связанным с группой посредством атома азота, присутствующего в кольце, где гетероциклическое кольцо может быть незамещено или замещено одним или несколькими заместителями S², где каждый S² имеет, независимо от других заместителей S², одно из значений, приведенных ниже; и

R⁸ представляет собой C₁-С₆алкил, незамещенный или замещенный одним или несколькими заместителями S²; фенил, незамещенный или замещенный одним или несколькими заместителями S²; или 3-х - 6-ти членную гетероциклильную группу, содержащую один или больше гетероатомов, выбранных из азота, серы и кислорода, где гетероциклильная группа, кроме того, необязательно может быть сопряжена с фенильным кольцом или 5-ти - 6-ти членным гетероциклическим кольцом и где вся группа незамещена или замещена одним или несколькими заместителями S², где каждый

S² независимо от других заместителей S² выбирают из C₁-С₆алкила, незамещенного или замещенного одним или несколькими заместителями S³; фенила, незамещенного или замещенного одним или несколькими заместителями S³; или 3-х - 6-ти членной гетероциклильной группы, содержащей один или больше гетероатомов, выбранных из азота, серы и кислорода, где гетероциклильная группа, кроме того, необязательно может быть сопряжена с фенильным кольцом или 5-ти - 6-ти членным гетероциклическим кольцом и где вся группа незамещена или замещена одним или несколькими заместителями S³; C₁-С₆алкокси, гидроксила, карбокси, амино, C₁-С₆алкил амино, ди(C₁-C₆)алкил амино, циано, галогена, или группы формулы -CO-R⁹, -NH-CO-R⁹; -CO-NH₂, -NH-CH=NH, -NH-CO-NH₂, -NH-SO₂-NH₂ или -NH-(C=NH)-NH₂, в этих группах один или несколько атомов водорода также могут быть заменены R⁹ или -NH₂ остаток группы может быть заменен 5-ти - 6-ти членным гетероциклическим кольцом, связанным с группой посредством атома азота, присутствующего в кольце, где гетероциклическое кольцо может быть незамещено или замещено одним или несколькими заместителями S³, где каждый S³ имеет, независимо от других заместителей S³, одно из значений, приведенных ниже; и

R⁹ представляет собой C₁-С₆алкил, незамещенный или замещенный одним или несколькими заместителями S³; фенил, незамещенный или замещенный одним или несколькими заместителями S³; или 3-х - 6-ти членную гетероциклильную группу, содержащую один или больше гетероатомов, выбранных из азота, серы и кислорода, где гетероциклильная группа, кроме того, необязательно может быть сопряжена с фенильным кольцом или 5-ти - 6-ти членным гетероциклическим кольцом и где вся группа незамещена или замещена одним или несколькими заместителями S³, где каждый

S³ независимо от других заместителей S³ представляет собой незамещенный C₁-С₆алкил, незамещенный фенил или незамещенное 5-ти - 6-ти членное гетероциклическое кольцо; C₁-С₆алкокси, гидроксил, карбокси, амино, C₁-С₆алкил амино, ди (C₁-C₆)алкил амино, циано, галоген, или группу формулы -NH-CO-NH₂, -CO-NH₂, -NH-CH=NH, -NH-CO-NH₂, -NH-SO₂-NH₂ или-NH-(C=NH)-NH₂;

или R³ и R⁴ вместе образуют С₃-С₇полиметиленовую группу, которая незамещена или замещена одним или несколькими заместителями S³, где каждый S³ имеет, независимо от других заместителей S³, одно из значений, указанных выше.

Термин "C₁-С₆алкил" и "-(C_1nH_2n)-", как используется в настоящей заявке, относится к разветвленному или, предпочтительно, неразветвленному C₁-С₆алкилу или -(C_1nH_2n)-, где n представляет собой целое число от 1 до 6, предпочтительно от 1 до 4, такому как, в особенности, метил, этил, пропил, бутил, пентил, гексил, изопропил, изобутил, трет-бутил или неопентил. Предпочтительными являются С₁-С₄алкильные группы. Термин "C₁-С₆алкокси" обозначает алкокси группу на основе C₁-С₆алкила в соответствии с вышеприведенным определением.

Термин "С₃-С₇полиметиленовая группа" относится к группе формулы -(СН₂)_3-7-, которая может содержать одну или две двойные связи и которая может быть незамещена или замещена, как указано.

Термины "гетероциклильная группа" и "гетероциклическое кольцо" относятся к соответствующим группам, которые являются насыщенными или ненасыщенными.

Термин "3-х - 6-ти членная гетероциклильная группа, содержащая один или больше гетероатомов, выбранных из азота, серы и кислорода, где гетероциклильная группа, кроме того, необязательно может быть сопряжена с фенильным кольцом или 5-ти - 6-ти членным гетероциклическим кольцом" относится, например, к азетидину, тиофену, бензотиофену, фурану, пирану, бензофурану, изобензофурану, пирролу, имидазолу, пиразолу, пиридину, пиразину, пиримидину, пиридазину, индазолину, индолу, изоиндолу, индазолу, пурину, оксазолу, изооксазолу, фуразану, пирролидину, пирролину, имидазолидину, пиперидину, пиперазину, тиазолу, изотиазолу, тиазепину или гидротиазепину. Специалистам в данной области техники известны многие другие подходящие гетероциклические группы для целей изобретения и/или подробно описаны в литературе. Предпочтительными являются 5-ти - 6-ти членные гетероциклические группы, содержащие один или больше гетероатомов, выбранных из азота, серы и кислорода, в особенности, азота и серы, где гетероциклильная группа, кроме того, необязательно может быть сопряжена с фенильным кольцом или 5-ти - 6-ти членным гетероциклическим кольцом, содержащую один или больше гетероатомов, выбранных из азота, серы и кислорода, в особенности, азота и серы.

"Замещенный одним или несколькими" обозначает предпочтительно ""замещенный одним или двумя", например, "замещенный одним".

Более предпочтительно R⁵ представляет собой галоген, циано, C₁-С₆алкокси, амино, (C₁-С₆алкил) амино, ди (C₁-С₆алкил) амино, или группу формулы -CO-R⁶, -NH-CO-R⁶ -CO-NH₂, -NH-CO-NH₂, -NH-SO₂-NH₂ или -NH-(C=NH)-NH₂, где R⁶ представляет собой C₁-С₆алкил, фенил или 5-ти - 6-ти членное гетероциклическое кольцо и может быть незамещен или замещен одним или несколькими заместителями, выбранных из одного из заместителей S³, как определено выше.

Термин галоген относится к фтору, хлору, брому и йоду, предпочтительно фтору и хлору.

Другой группой особенно предпочтительных соединений формулы (II) являются соединения, где R⁴ представляет собой группу формулы -(S)_m-R⁷, m представляет собой 0 или 1 и R⁷ представляет собой 3-х - 6-ти членную гетероциклическую группу, содержащую один или больше гетероатомов, выбранных из азота, серы и кислорода, где гетероциклильная группа, кроме того, необязательно может быть сопряжена с фенильным кольцом или 5-ти - 6-ти членным гетероциклическим кольцом и где вся группа незамещена или замещена, как более подробно определено выше. Еще более предпочтительными являются такие соединения формулы (II), в которых m представляет собой 1.

Также предпочтительными являются соединения формулы (II), где

R¹ представляет собой водород или C₁-С₆алкил;

R² представляет собой водород или C₁-С₆алкил; и

R³ представляет собой C₁-С₆алкил;

в особенности, где один из R¹ и R² представляет собой водород, а другой представляет собой -СН₃ и R³ представляет собой -СН₃.

Соединения формулы (III)

где

Y представляет собой азот или >СН-;

S⁴ представляет собой водород или имеет значения S¹, как определено выше; и

R представляет собой водород; С₁-С₄алкил, в особенности, метил, или -(N=H)- С₁-С₄алкил, в особенности, -(N=Н)-СН₃, или

S⁴ и R вместе с атомом азота или группой Y, к которой они присоединены, образуют 5-ти - 6-ти членное гетероциклическое кольцо;

R наиболее предпочтительно представляет собой водород или метил,

или их фармацевтически приемлемые соли,

образуют другую группу вариантов осуществления карбапенема, которая особенно предпочтительна для целей настоящего изобретения.

Следующие карбапенемовые антибиотики или их фармацевтически приемлемые соли являются особенно предпочтительными примерами, пригодными в настоящем изобретении:

В лечебной практике Панипенем обычно используется совместно с Бетамипроном, почечным ингибитором, который ингибирует поглощение почками Панипенема, как известно в данной области.

Особенно предпочтительными карбапенемовыми антибиотиками для применения в настоящем изобретении выбирают из следующих соединений:

или их фармацевтически приемлемой соли.

Дальнейшим предпочтительным объектом настоящего изобретения является применение монобактамового антибиотика формулы (I), как описано выше, или его фармацевтически приемлемой соли для приготовления лекарственного средства для лечения бактериальной инфекции в комбинации с Имипенемом или его фармацевтически приемлемой солью. В лечебной практике Имипенем обычно используется совместно с Циластином, ингибитором почечной дипептидазы в проксимальных канальцах почек, который применяется для стабилизации Имипенема относительно инактивации, аналогично использованию Бетамипрона в комбинации с Панипенемом, как описано выше.

Дальнейшим предпочтительным объектом настоящего изобретения является применение монобактамового антибиотика формулы (I), как описано выше, или его фармацевтически приемлемой соли для приготовления лекарственного средства для лечения бактериальной инфекции в комбинации с Меропенем или его фармацевтически приемлемой солью. Меропенем иногда также используют совместно с Циластином аналогично Имипенему (Antimicrob. Agents Chemother. 2000, 44, 885-890).

Дальнейшим предпочтительным объектом настоящего изобретения является применение монобактамового антибиотика формулы (I), как описано выше, или его фармацевтически приемлемой соли для приготовления лекарственного средства для лечения бактериальной инфекции в комбинации с Эртапенемом или его фармацевтически приемлемой солью.

Кроме того, дальнейшим предпочтительным объектом настоящего изобретения является применение монобактамового антибиотика формулы (I), как описано выше, или его фармацевтически приемлемой соли для приготовления лекарственного средства для лечения бактериальной инфекции в комбинации с Дорипенемом или его фармацевтически приемлемой солью.

Соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соли могут вводиться в соответствии с изобретением перед, одновременно с или после введения карбапенемового антибиотика или его фармацевтически приемлемой соли. Как правило, предпочтительным является по существу одновременное или полностью одновременное введение активных компонентов комбинации.

Соединения формулы (I) или их фармацевтически приемлемые соли и карбапенемовые антибиотики или их фармацевтически приемлемые соли могут вводиться с помощью любого пути введения, предпочтительно в форме фармацевтической композиции, адаптированной для такого пути. Дозировку и путь введения следует определять с помощью чувствительности патогенных микроорганизмов, тяжести и участка инфекции, и специфического состояния пациента и их выбирают надлежащим образом. Предпочтительными типами фармацевтических композиций являются, например, композиции, которые вводят перорально, путем ингаляции или более предпочтительно парентерально, например, внутривенно или внутримышечно.

Лекарственные средства для парентерального введения включают, но не ограничиваясь только ими, формы водных изотонических стерильных инъекций, растворов, концентратов или растворов для дальнейших разведении (например, для инфузий), или суспензий, включая наносуспензии и нанокристаллы. Такие растворы или суспензии могут быть приготовлены из стерильных порошков, гранул или лиофилизатов. Соединения могут быть растворены в стерильной воде или в различных стерильных буферах, которые могут содержать, но не ограничиваясь только ими, хлорид натрия, полиэтиленгликоль, пропиленгликоль, этанол, сахарозу, глюкозу, аргинин, лизин, лимонную кислоту, молочную кислоту фосфорную кислоту и соответствующие соли. Лекарственное средство может содержать от 0,1% до 99% по весу, предпочтительно 10%-90% по весу, каждого из активных компонентов. Если композиции содержат единицы дозирования, то каждая единица предпочтительно содержит от 50 мг до 4 г каждого активного вещества,

Следовательно, дальнейшим объектом настоящего изобретения является фармацевтический препарат, содержащий соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль и карбапенемовый антибиотик или его фармацевтически приемлемую соль.

Фармацевтический препарат в соответствии с изобретением может содержать, например, одну или несколько единиц дозирования соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли и одну или несколько единиц дозирования, содержащих карбапенемовый антибиотик или его фармацевтически приемлемую соли и не содержащих соединения формулы (I). В качестве примера, фармацевтический препарат по изобретению может содержать две отдельные упаковки, каждая из которых содержит лекарственное средство, содержащее только один из активных компонентов комбинации в соответствующей дозированной форме.

Другой вариант осуществления фармацевтического препарата в соответствии с изобретением содержит одну или несколько единиц дозирования, и каждая единица дозирования содержит оба активных компонента, соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль и карбапенемовый антибиотик или его фармацевтически приемлемую соль. Такая фиксированная доза комбинации обычно содержит соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль и карбапенемовый антибиотик или его фармацевтически приемлемую соль, а также фармацевтически приемлемый носитель и необязательно подходящие дополнительные наполнители, которые являются типическими для соответствующей дозированной формы.

Фармацевтические препараты в соответствии с настоящим изобретением содержат соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль и карбапенемовый антибиотик или его фармацевтически приемлемую соль в подходящем весовом соотношении, например, в весовом соотношении от 10:1 до 1:10, предпочтительно от 5:1 до 1:5, более предпочтительно от 3:1 до 1:3, таком как, например, от 2:1 до 1:2 или приблизительно 1:1.

Фармацевтические препараты в соответствии с настоящим изобретением являются активными по отношению к различным бактериям, в особенности, по отношению в грамположительным бактериям, включая, например, Skaphylococcus aureus, Skaphylococccus epidermidis, Enkerococcus faecalis, Streptococcus pneumonia и грамотрицательным бактериям, включая Enterobacteriaceae, например, Escherichia coli, Enkerobacter cloacae, Enkerobacter aerogenes, Cikrobacter freundii, Klebsiella pneumoniae, Klebsiella okcuntoca, Proteus vulgaris, Providencia rettgeri; Pseudomonas, например, Р.aeruginosa; Acinetobacber, например, A.baumannii; Burkholderia, например, В.серасеа; В.mallei; В.pseudomallei; Stenotrophomonas, например, S.maltophilia; Haemophilus influenzae.

Таким образом, препараты могут использоваться для лечения инфекционных заболеваний, включая, например, внутрибольничную пневмонию, внебольничную пневмонию, инфекцию мочевых путей, осложненную инфекцию брюшной полости, осложненную инфекцию кожи/подкожной клетчатки, кистозный фиброз, сепсис.

Дозировка соединения формулы (I) и их фармацевтически совместимых солей и карбапенемовых антибиотиков или их солей для указанного лечения может изменяться в широких пределах и может быть приспособлена в каждом конкретном случае для индивидуальных требований пациента, подвергаемого лечению, и относительно патогенов, на которых направлено лечение. В целом, подходящей будет являться доза от приблизительно 0,1 до приблизительно 4 г, например, от приблизительно 0,5 до приблизительно 2 г, общего количества антибиотика, вводимого от одного до четырех раз в течение периода времени 24 часа.

Настоящее изобретение в дальнейшем иллюстрируется следующими неограничивающими примерами.

Пример 1

Приготовление гидроксисульфоната (3S)-3-{(2Z)-2-(2-амино(1,3-тиазол-4-ил))-3-[(1,5-дигидрокси-4-оксо(2-гидропиридил))метокси]-3-азапроп-2-еноиламино}-4,4-диметил-2-оксоазетидинила (соединение формулы (I))

Монобактамовый антибиотик I получают в соответствии с синтезом, представленном на схеме 4 и в соответствии с процедурами, описанными выше.

Схема 4

Приготовление гидроксисульфоната (3S)-3-{(2Z)-3-{[1,5-бис(дифенилметокси)-4-оксо(2-гидропиридил)]метокси}-2-{2-[(трифенилметил)амино](1,3-тиазол-4-ил)}-3-азапроп-2-еноиламино}-4,4-диметил-2-оксоазетидинила (3)

Использование HOBt в качестве связующего реагента (2Z)-3-{[1,5-Бис(дифенилметокси)-4-оксо(2-гидропиридил)]-метокси}-2-{2-[(трифенилметил) амино](1,3-тиазол-4-ил)}-3-азапроп-2-еновую кислоту 1 (0,89 г, 0,95 ммоль, J.Antibiotics 1990, 1-450 и WO-A-02/22613), гидроксибензотриазол (HOBT) (0,14 г, 1,03 ммоль) и дициклогексилкарбодиимид (0,26 г, 1,41 ммоль) растворяли в ДМФА (25 мл) при комнатной температуре. Сначала гидроксисульфонат (35)-3-Амино-4,4-диметил-2-оксоазетидинила 2 (0,20 г, 0,95 ммоль, J.Org. Chem. 2003, 177 и Tetrahedron Lett. 1986, 2786) и затем, через 30 минут, NaHCO₃ (0,09 г, 1,05 ммоль) добавляли к вышеописанному раствору. Полученную смесь перемешивали в течение 18 часов. Образованный осадок отфильтровывали и к фильтрату добавляли этилацетат. Органическую фазу промывали два раза с помощью водного раствора, насыщенного NaCl, высушивали над Na₂SO₄ и растворители упаривали в вакууме. Остаток растирали в порошок в этилацетате (30 мл), получая 0,5 г желательного соединения 3 в виде белого твердого вещества после фильтрации.

ВЭЖХ чистота: 98%.

Использование HATU в качестве связующего реагента

Раствор ДМСО (10 мл), содержащий HATU (1,38 г, 3,64 ммоль) добавляли при комнатной температуре к суспензии (2Z)-3-{[1,5-Бис(дифенилметокси)-4-оксо(2-гидропиридил)]метокси}-2-{2-[(трифенилметил) амино](1,3-тиазол-4-ил)}-3-азапроп-2-еновой кислоты 1 (3,0 г, 3,16 ммоль, J.Antibiotics 1990, 1450 и WO-A-02/22613) и гидроксисульфоната (3S)-3-мино-4,4-диметил-2-оксоазетидинила 2 (1,18 г, 5,06 ммоль, J.Org.Chem. 2003, 177 и Tetrahedron Lett. 1986, 2786) в ДМСО (20 мл). Затем добавляли NaHCO₃ (0,81 г, 9,65 ммоль) в виде твердого вещества. Полученную смесь, которая становилась раствором через 1 час, перемешивали в течение 24 часов при комнатной температуре. Затем добавляли этилацетат (50 мл) и полученный раствор промывали 6 раз соляным раствором (6×30 мл). Органическую фазу высушивали над Na₂SO₄ и смесь концентрировали путем упаривания растворителя в вакууме до тех пор, пока в колбе не оставалось около 25 мл раствора. При комнатной температуре к желтому раствору по каплям добавляли циклогексан (40 мл). Полученный осадок собирали путем фильтрации и затем осадок после фильтрации промывали циклогексаном (2×5 мл), получая 3,3 г желательного соединения 3.

ВЭЖХ чистота: 95%.

При осуществлении обоих методов получали продукт с одинаковыми спектрами ЯМР и МС.

1Н-ЯМР (ДМСО-d₆) δ: 1,05 (s, 3Н), 1,34 (s, 3H), 4,49 (d, 1H, J=7,8 Гц), 4,62 (m, 2H), 6,12 (s, 1H), 6,33 (s, 1H), 6,39 (s, 1H), 6,72 (s, 1H), 7,20-7,43 (то, 35Н), 7,72 (s, 1H), 8,83 (1, 1H), 9,52 (d, 1H, J=7,8 Гц).

Приготовление гидроксисульфоната (3S)-3-{(2Z)-2-(2-амино(1,3-тиазол-4-ил))-3-[(1,5-дигидрокси-4-оксо(2-гидропиридил))метокси]-3-азапроп-2-еноиламино}-4,4-диметил-2-оксоазетидинила (I)

(a) Использование трифторуксусной кислоты

Гидроксисульфонат (3S)-3-{(2Z)-3-{[1,5-Бис(дифенилметокси)-4-оксо(2-гидропиридил)]метокси}-2-{2-[(трифенилметил)амино](1,3-тиазол-4-ил)}-3-азапроп-2-еноиламино}-4,4-диметил-2-оксоазетидинила 3 (0,25 г, 0,23 ммоль) и триэтилсилан (0,08 г, 0,69 ммоль) растворяли в дихлорметане (15 мл) и охлаждали при -10°С. Затем к охлажденной смеси медленно добавляли трифторуксусную кислоту (1,04 г, 9,2 ммоль). Температура медленно повышалась до 25°С и реакционную смесь перемешивали дополнительно в течение 4 часов. Растворитель удаляли в вакууме и остаток растирали в порошок со смесью растворителей, содержащей гексан и этилацетат (1:4), получая 0,11 г желательного соединения I в виде твердого вещества.

ВЭЖХ чистота: 94%.

(b) Использование муравьиной кислоты

В муравьиной кислоте (3 мл) при 5°С добавляли гидроксисульфонат (3S)-3-{(2Z)-3-{[1,5-Бис(дифенилметокси)-4-оксо(2-гидропиридил)]метокси}-2-{2-[(трифенилметил)амино](1,3-тиазол-4-ил)}-3-азапроп-2-еноиламино}-4,4-диметил-2-оксоазетидинила 3 (0,40 г, 0,31 ммоль) и прозрачный раствор перемешивали в течение 5 часов при 5-10°С. Затем добавляли этилацетат (40 мл) и полученный осадок отфильтровывали. Белый осадок промывали дополнительным количеством этилацетата (2×5 мл) и получали, после высушивания в вакууме, 0,09 г желательного соединения I

ВЭЖХ чистота: 92%.

При осуществлении обоих методов получали продукт с одинаковыми спектрами ЯМР и МС.

1Н-ЯМР (ДМСО-d₆) δ: 1,22 (s, 3Н), 1,42 (s, 3H), 4,63 (d, 1H, J=7,7 Гц), 5,28 (s, 2H), 6,81 (s, 1H), 7,13 (s, 1H), 7,27 (br s, 2H), 8,19 (s, 1H), 9,59 (d, 1H, J=7,7 Гц).

-ESI-MC спектр: m/z: 517 [М-Н]⁺.

В соответствии с методами, описанными выше, соединение формулы (I), как правило, получают в аморфной форме. Хотя оно может использоваться в указанной форме, но оно необязательно может быть превращено в кристаллический материал, например, как описано в настоящей заявке ниже.

Процедура кристаллизации для соединения формулы I

Неочищенный материал предварительно полученного соединения формулы I (1,31 г) суспендировали в ацетонитриле (15 мл) при комнатной температуре. Затем к описанной выше суспензии добавляли воду (3,30 мл). Прозрачный раствор (если раствор не является прозрачным, то суспензию можно осторожно нагреть) перемешивали при комнатной температуре в течение нескольких минут до начала кристаллизации. Суспензию перемешивали в течение 1 часа при комнатной температуре и дополнительно в течение часа при 0°С. После фильтрации, получали 1,05 г соединения формулы I в виде белого кристаллического вещества, которое имело такие же ЯМР и МС спектры, что и представленные выше для аморфного вещества.

Кристаллическое вещество характеризуется инфракрасным спектром, как приведено в таблице ниже (FTIR записывали с порошком при разрешении 2 см^-1, собирая 16 сканирований от 4000 до 500 см^-1, на спектрометре Bruker Vector 22 с НПВО Золотыми воротами).

FTIR спектр кристаллического вещества соединения формулы (I)

Длина волны (см^-1) Длина волны (см^-1) 3102,51 1010,65 2739,68 941,13 1766,15 907,87 1634,10 861,18 1587,99 823,99 1527,49 802,53 1449,58 712,18 1357,88 678,48 1335,03 628,91 1286,46 583,63 1239,18 569,68 1204,65 550,26 1165,49 536,37 1129,59 525,52 1044,69 515,44 1021,99

Кристаллическое вещество проявляет картину порошковой рентгеновской дифракции ("XRPD"), полученной с помощью CuKα-излучения, как показано в нижеприведенной таблице и на фиг.1.

XRPD Диаграмма

Угол 2θ (°) Отн. Интенсивность %   Угол 2θ (°) Отн. Интенсивность % 6,86 64 24,49 22 7,19 3 24,87 16 10,73 7 25,37 52 10,97 5 26,32 36

13,32 27   27,08 34 13,72 28 27,74 12 15,11 69 28,38 33 15,57 100 28,74 32 17,41 29 29,17 11 17,68 13 29,97 10 17,88 20 30,53 12 18/78 15 31,00 23 18,95 14 32,47 2 19,34 16 33,27 17 19,76 4 34,47 5 20,38 8 36,12 3 20,66 16 37,04 9 20,86 15 37,44 6 21,55 3 37,98 12 22,27 10 38,19 12 22,84 31 38,68 9 23,45 18 39,30 5 23,62 19 39,75 7 23,97 16  

Углы 2θ имеют погрешность приблизительно ±0,1°. Известно, что значения для относительной интенсивности пиков более существенно зависят от определенных свойств анализируемого образца, чем от положения линии, например от размера кристаллов и их ориентации в образце. Следовательно, возможно проявление отклонений ±20% показанных интенсивностей пиков.

Кроме того, кристаллическое вещество характеризуется данными термогравиметрического анализа ("TGA"), как показано в таблице ниже, и которые получены с помощью скорости сканирования 10 градусов/минуту (Perkin-Elmer TGS2). Потеря веса вещества составляет приблизительно 7%, когда температура вещества повышается от комнатной температуры до 100°С. Дальнейшая потеря веса наблюдается при 192-193°С, что соответствует температуре плавления/разложения образца.

Температура [°С] Потеря веса [%] 25 1,12 50 4,46 75 5,70 100 8,05 125 8,09 150 8,14 175 8,29 200 55,60 225 56,10 250 56,31 275 56,52 300 56,75 325 57,06 350 57,55 375 58,35 400 29,54 425 60,99 450 62,51 475 63,95 500 65,30

Пример 2

(а) Приготовление натриевой соли соединения формулы I

Гидрокарбонат натрия (0,0077 г, 0,095 ммоль) порциями добавляли к водному раствору (20 мл), охлажденному при 5°С, содержащему соединение формулы I (0,05 г, 0,1 ммоль) (рН 2-3). Прозрачный раствор перемешивали в течение 15 минут при 5°С (рН 5-6). Раствор замораживали и лиофилизировали в течение ночи, получая 0,052 г белого твердого вещества.

1Н-ЯМР (ДМСО-d₆) δ: 1,24 (s, 3Н), 1,45 (s, 3H), 4,65 (d, 1H, J=7,7 Гц), 5,20 (s, 2H), 6,82 (s, 1H), 6,90 (s, 1H), 7,26 (br s, 2H), 7,95 (s, 1H), 9,60 (d, 1H, J=7,7 Гц).

(b) Приготовление L-аргининовой соли соединения формулы I

Соединение формулы I (0,20 г, 0,39 ммоль) и L-аргинин (0,0672 г, 0,39 ммоль) интенсивно смешивали вместе в виде твердых веществ при комнатной температуре. Полученный порошок растворяли в воде (40 мл) и перемешивали в течение 2-3 минут при комнатной температуре. Раствор замораживали и лиофилизировали в течение ночи, получая 0,260 г белого твердого вещества.

1Н-ЯМР (ДМСО-d₆) δ: 1,24 (s, 3Н), 1,44 (s, 3H), 1,50-1,80 (m, 4H), 3,11 (br m, 2H), 3,53 (br m, 1H), 4,65 (d, 1H, J=7,7 Гц), 5,10 (s, 2H), 6,72 (s, 1H), 6,80 (s, 1H), 7,22 (br s, 2H), 7,72 (s, 1H), 8,13 (br s, 1H), 9,60 (d, 1H, J=7,7 Гц).

(c) Приготовление L-лизиновой соли соединения формулы I

Соединение формулы I (0,20 г, 0,39 ммоль) и L-лизин (0,0564 г, 0,39 ммоль) интенсивно смешивали совместно в виде твердых веществ при комнатной температуре. Полученный порошок растворяли в воде (45 мл) и перемешивали в течение 2-3 минут при комнатной температуре. Раствор замораживали и лиофилизировали в течение ночи, получая 0,250 г белого твердого вещества.

1Н-ЯМР (ДМСО-d₆) δ: 1,24 (s, 3Н), 1,30-1,80 (m, 9H), 2,77 (br m, 2H), 3,50 (br m, 1H), 4,66 (d, 1H, J=7,7 Гц), 5,11 (s, 2H), 6,73 (s, 1H), 6,79 (s, 1H), 7,22 (br s, 2H), 7,73 (s, 1H), 9,61 (d, 1H, J=7,7 Гц).

Пример 3

Противомикробную активность соединений и их комбинаций определяли по отношению к выбранным организмам согласно стандартным методикам, описанным Национальным комитетом по клиническим лабораторным стандартам (National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS документ М7-А6)). Соединения растворяли в 100% ДМСО или стерильной питательной среде в соответствии с их растворимостью в воде и разводили до конечных реакционных концентраций (0,06-32 мкг/мл) в среде для роста микроорганизмов (IsoSensiTest Broth + 16 мкг/мл 2,2'-бипиридила). Во всех случаях конечная концентрация ДМСО, инкубируемого с бактериями, составляла меньше или равно 1%. Для оценки минимальных ингибирующих концентраций (МИК) 2-кратные разведения соединений добавляли в лунки микротитровального планшета, содержащие 10⁶ бактерий/мл. Планшеты инкубировали в течение ночи при подходящей температуре (30°С или 37°С) и оптические плотности оценивали визуально. Значение МИК определяли в виде наиболее низкой концентрации соединения, которая ингибирует видимый рост тестируемого организма. Тесты для определения синергизма осуществляли в тех же самых условиях, что и описано выше, но с двумя противомикробными средствами, диспергированными в шахматном порядке [Isenberg HD (1992) Synergism testing: Broth microdilution checkerboard and broth macrodilution methods. B: Clinical Microbiology Procedures Manual, том 1. Washington, DC: American Society for Microbiology, разделы 5.18.1-5.18.28]. Использованными штаммами были: Pseudomonas aeruginosa 6067 (регистрационный номер в DSMZ-Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH, Inhoffenstr. 7 В, D-38124 Braunschweig: DSM 18987), Pseudomonas aeruginosa (67/2B) 2R.A. (DSM 18988), Achromobacter (ранее Alcaligenes) xylosoxidans QK3/96 (DSM 18991), Enterobacter aerogenes Zayakosky 5 (DSM 18992).

В качестве сравнительных компонентов использовали азтреонам, а также соединение А и соединение В, оба последних соединения описаны в WO 98/47895, которые структурно сходны с соединением формулы I.

В таблице 1 показано, что при комбинировании идентичных весов монобактамового антибиотика формулы (I) в соответствии с настоящим изобретением и карбапенемов формулы II снижается МИК карбапенемов для устойчивых к карбапенемам штаммам на величину, которая превышает ожидаемую для комбинирования двух активных соединений. МИК комбинаций в соответствии с изобретением также является меньшей, чем МИК аналогичной эквигравиметрической комбинации азтреонама и соответствующих карбапенемов. В завершение, показано, что комбинации согласно настоящему изобретению проявляют более низкие значения МИК по сравнению со значениями комбинаций в соответствии WO 98/47895, например, WO 98/47895, Пример 1, что соответствует Соединению А со ссылкой на таблицу 1.

Таблица 1 Минимальные ингибирующие концентрации (мг/л) репрезентативных комбинаций между монобактамовыми антибиотиками и карбапенемами Вещество/комбинация Минимальная ингибирующая концентрация (мг/л) P.aeruginosa 6067 [DSM 18987] A.xylosoxidans QK3/96 [DSM 18991] E.aerogenes Zayakosky 5 [DSM 18992] P.aeruginosa (67/2B) 2R.A. [DSM 18988] Соединение формулы I* 16 16 16 32 Азтреонам 16 >64 64 4 Соединение А >64 >64 >64 >64 Соединение В >64 >64 >64 >64 Меропенем 16 16 16 4 Меропенем + Соединение формулы I* 4 8 8 2 Меропенем + азтреонам 16 16 16 8 Меропенем + Соединение А 16 16 16 8 Меропенем + Соединение В 16 16 16 8 Имипенем 4 4 32 16 Имипенем + Соединение формулы I* 2 4 16 8 Имипенем + азтреонам 4 32 32 16 Имипенем + Соединение А 4 32 32 16 Имипенем + Соединение В 4 32 32 16 Эртапенем >32 >32 >32 >32 Эртапенем + Соединение формулы I* 16 8 16 8 Дорипенем 16 16 8 4 Дорипенем + Соединение формулы I* 8 8 4 4 * настоящей заявки

Фракционная ингибирующая концентрация (ФИК) определяется согласно формуле:

$ФИК=\frac{\text{МИК лекарства A в комбинации}}{МИК\text{ лекарства A отдельно }}+\frac{\text{МИК лекарства B в комбинации}}{\text{МИК}\text{}\text{ лекарства B отдельно }}$

[Isenberg HD (1992); Eliopoulos, G.M. & Moellering, R.С.(1996). В Antibiotics in Laboratory Medicine, 4-е изд. (Lorian, V., Ed.), cc.330-96. Williams и Wilkins, Baltimore, MD].

В таблице 2 показано взаимодействие между соединением формулы I или эталонными соединениями Азтреонамом, соединением А и соединением В, и карбапенемами при использовании методов «шахматной доски» (с использованием серийных разведений). Аддитивные или синергетические взаимодействия наблюдаются только между соединением формулы I и карбапенемовыми антибиотиками. В идентичных условиях комбинации с Азтреонамом, соединением А или соединением В проявляют нейтральность или даже антагонизм.

Интерпретацию значений ФИК осуществляли в соответствии с определениями, представленными Sader HS, Huynh HK, Jones RN; Contemporary in vitro synergy rates for aztreonam combined with newer fluoroquinolones и β-lactams tested against Gram-negative bacilli; Diagn. Microbiol. Infect. Dis. 47 (2003) 547-550, а именно следующим образом:

S = ФИК≤0,5: синергизм s = 0,5<ФИК<1: частичный синергизм D = ФИК=1: аддитивный эффект I = 1<ФИК<4: нейтральность N = 4≤ФИК: антагонизм

Таблица 2 Фракционная ингибирующая концентрация (ФИК), наблюдаемая для репрезентативных комбинаций между монобактамовыми антибиотиками и Карбапенемами Вещество/комбинация Фракционная ингибирующая концентрация A.xylosoxidans QK3/96 E.aerogenes Zayakosky 5 P.aeruginosa (67/2B) 2R.A. P.aeruginosa 6067 Меропенем + Соединение формулы I 0,51 0,48 0,62 0,72   (s) (S) (s) (s) Меропенем + Азтреонам 1,8 1,3 1,1 1,1   (I) (I) (I) (I) Меропенем + Соединение А 2,1 (I) 1,8 (I) 3,3(I) 2,2(I) Меропенем + Соединение В 2,0 1,7 3,3 3,3   (I) (I) (I) (I) Имипенем + Соединение формулы I 0,78 0,69 1,0 0,62   (s) (s) (D) (s) Имипенем + Азтреонам 9,0 2,1 1,8 2,2   (N) (I) (I) (I) Имипенем + Соединение А 5,8 2,4 2,8 14   (N) (I) (I) (N) Имипенем + Соединение В 9,9 2,6 2,7 13   (N) (I) (I) (N) Эртапенем + Соединение формулы I 0,7 0,85 0,65 2,0   (s) (s) (s) (I) Дорипенем + Соединение формулы I 0,37 0,43 1,2 1,0   (S) (S) (I) (D) Дорипенем + Соединение А 3,1 3,1 7,3 2,4   (I) (I) (N) (I) Дорипенем + Соединение В 2,3 1,9 4,6 2,4   (I) (I) (N) (I)

Изобретение относится к области фармацевтики и медицины касается применении монобактамового антибиотика формулы (I), в которой оксиимино группа, то есть >C=N-O-, имеет Z-ориентацию, или его фармацевтически приемлемой соли для приготовления лекарственного средства для лечения бактериальной инфекции в комбинации с карбапанемовым антибиотиком, выбранным из группы, состоящей из Меропенема, Имипенема, Эртапенема и Дорипенема. Изобретение обеспечивает высокую эффективность лечения. 3 н. и 21 з. п. ф-лы, 1 ил, 2 табл., 3 пр.

1. Применение монобактамового антибиотика формулы (I)

в которой оксииминовая группа, то есть >C=N-O-, имеет Z-ориентацию, или его фармацевтически приемлемой соли для приготовления лекарственного средства для лечения бактериальной инфекции в комбинации с одним или несколькими карбапенемовыми антибиотиками или их фармацевтически приемлемыми солями, где карбапенемовый антибиотик выбран из группы, состоящей из Меропенема, Имипенема, Эртапенема и Дорипенема.

2. Применение по п.1, где лекарственное средство предназначено для лечения инфекции, вызванной грамотрицательными бактериями.

3. Применение по п.1 или 2 для лечения бактериальной инфекции в комбинации с одним карбапенемовым антибиотиком или его фармацевтически приемлемой солью.

4. Применение по п.3, где карбапенемовый антибиотик представляет собой

или его фармацевтически приемлемую соль.

5. Применение по п.3, где карбапенемовый антибиотик представляет собой:

или его фармацевтически приемлемую соль.

6. Применение по п.3, где карбапенемовый антибиотик представляет собой:

или его фармацевтически приемлемую соль.

7. Применение по п.3, где карбапенемовый антибиотик представляет собой:

или его фармацевтически приемлемую соль.

8. Фармацевтический препарат для лечения бактериальной инфекции, вызванной грамотрицательными бактериями, содержащий монобактамовый антибиотик формулы (I)

в которой оксииминовая группа, то есть >C=N-O-, имеет Z-ориентацию, или его фармацевтически приемлемую соль и один или несколько карбапенемовых антибиотиков или их фармацевтически приемлемые соли, где карбапенемовый антибиотик выбран из группы, состоящей из Меропенема, Имипенема, Эртапенема и Дорипенема.

9. Фармацевтический препарат по п.8, содержащий один карбапенемовый антибиотик или его фармацевтически приемлемую соль.

10. Фармацевтический препарат по п. 8, содержащий одну или более чем одну единую дозу, содержащую соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль, и одну или более чем одну единую дозу, содержащую карбапенемовый антибиотик или его фармацевтически приемлемую соль.

11. Фармацевтический препарат по п.8, содержащий одну или более чем одну единую дозу, где каждая из указанных единых доз содержит оба компонента - монобактамовый антибиотик формулы (I)

в которой оксииминовая группа, то есть >C=N-O-, имеет Z-ориентацию, или его фармацевтически приемлемую соль, и карбапенемовый антибиотик или его фармацевтически приемлемую соль, где карбапенемовый антибиотик выбран из группы, состоящей из Меропенема, Имипенема, Эртапенема и Дорипенема.

12. Фармацевтический препарат по п.10 или п.11, где карбапенемовый антибиотик представляет собой Имипенем или его фармацевтически приемлемую соль.

13. Фармацевтический препарат по п.10 или п.11, где карбапенемовый антибиотик представляет собой Меропенем или его фармацевтически приемлемую соль.

14. Фармацевтический препарат по п.10 или п.11, где карбапенемовый антибиотик представляет собой Эртапенем или его фармацевтически приемлемую соль.

15. Фармацевтический препарат по п.10 или 11, где карбапенемовый антибиотик представляет собой Дорипенем или его фармацевтически приемлемую соль.

16. Фармацевтический препарат по п. 10 или п. 11, содержащий монобактамовый антибиотик формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль и карбапенемовый антибиотик или его фармацевтически приемлемую соль в весовом соотношении от 10:1 до 1:10, предпочтительно от 5:1 до 1:5.

17. Фармацевтический препарат по п.16, где весовое соотношение монобактамового антибиотика формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли и карбапенемового антибиотика или его фармацевтически приемлемой соли составляет от 3:1 до 1:3, предпочтительно от 2:1 до 1:2, например, приблизительно 1:1.

18. Фармацевтический препарат по п.11, который представляет собой композицию, содержащую монобактамовый антибиотик формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль и карбапенемовый антибиотик или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый носитель.

19. Фармацевтический препарат по п.10 или п. 11, который проявляет синергетическую эффективность по отношению к грамотрицательным бактериям по сравнению с эффективностью соединения формулы (I) и карбапенемового антибиотика или его фармацевтически приемлемой соли, проявляющейся в препарате при отдельном использовании.

20. Фармацевтический препарат по п.10 или п.11, предназначенный для лечения внутрибольничной пневмонии, внебольничной пневмонии, инфекции мочевых путей, осложненной инфекции брюшной полости, осложненной инфекции кожи/подкожной клетчатки, кистозного фиброза или сепсиса.

21. Способ лечения бактериальной инфекции, вызванной грамотрицательными бактериями, у млекопитающего, нуждающегося в таком лечении, который включает введение указанному млекопитающему монобактамового антибиотика формулы (I)

в которой оксииминовая группа, то есть >C=N-O-, имеет Z-ориентацию, или его фармацевтически приемлемой соли в комбинации с одним или несколькими карбапенемовыми антибиотиками или их фармацевтически приемлемыми солями, в дозе, эффективной для лечения указанной инфекции, где карбапенемовый антибиотик выбран из группы, состоящей из Меропенема, Имипенема, Эртапенема и Дорипенема.

22. Способ по п.21, где синергетическую комбинацию монобактамового антибиотика формулы (I) или его соли и карбапенемового антибиотика или его соли вводят указанному млекопитающему.

23. Способ по п.22, где указанное млекопитающее представляет собой человека.

24. Способ по п.21, предназначенный для лечения внутрибольничной пневмонии, внебольничной пневмонии, инфекции мочевых путей, осложненной инфекции брюшной полости, осложненной инфекция кожи/подкожной клетчатки, кистозного фиброза или сепсиса