СПОСОБ ОЦЕНКИ ФОРМИРОВАНИЯ ГИПОКСИИ В ТРЕТЬЕМ ТРИМЕСТРЕ ГЕСТАЦИИ ПРИ СНИЖЕНИИ УРОВНЯ РН И ОКСИГЕМОГЛОБИНА, ВЫЗВАННЫХ ОБОСТРЕНИЕМ ЦИТОМЕГАЛОВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ Российский патент 2014 года по МПК G01N33/52 

Цель работы - показать отрицательное влияние цитомегаловирусной инфекции на уровень pH периферической крови беременных, снижающей формирование в эритроцитах оксигемоглобина, что становится угрозой формирования в третьем триместре гестации при титре антител к цитомегаловирусу 1:1600 гемической гипоксии.

Сродство гемоглобина к кислороду уменьшается при его взаимодействии с 2,3-ДФГ [2, 4]. Это открытие установило прямую взаимосвязь между дыхательной функцией гемоглобина и метаболизмом в эритроцитах. Многие заболевания, возникающие в организме при недостатке O₂, сопряжены с тем, что гемоглобин теряет связь с кислородом. Это оказалось зависимым с увеличением связи гемоглобина с избыточным количеством 2,3-дифосфоглицерофосфатом [3].

Степень образования комплекса 2,3-ДФГ с гемоглобином зависит от уровня pH. Связь 2,3-дифосфоглицерофосфата с гемоглобином нарастает по мере снижения pH [3]. Водородный показатель имеет большое значение, так как он влияет на скорость ферментативных процессов. Постоянство pH биологических жидкостей является необходимым условием нормального течения жизненных процессов.

При нарушении обмена гемоглобина и появлении фракции HbH, pH среды, при которой он выявлялся, была равна 6,5. Таким образом pH среды может сильно отражаться на характере метаболических процессов в организме. Влияние цитомегаловирусной инфекции на изменение pH крови мы в доступной литературе не обнаружили.

Заявленный способ имеет следующие приемы:

1. Исследования проводились на базе акушерского отделения ФГБУ Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания СО РАМН. Обследовано 20 рожениц в возрасте 18-25 лет с хронической цитомегаловирусной инфекцией в стадии обострения (основная группа) и 20 беременных без патологии (контрольная группа). Диагноз обострения хронической цитомегаловирусной инфекции устанавливался при комплексном исследовании периферической крови на наличие IgM или четырехкратного и более нарастания титра антител IgG в парных сыворотках в динамике через 10 дней, индекса авидности (65%), а также наличия ДНК к ЦМВ.

2. Исследования проводились с учетом требований Хельсинской декларации Всемирной медицинской ассоциации «Этические принципы проведения научных исследований с учетом человека» с поправками 2000 г. И правилами клинической практики в Российской Федерации, утвержденными приказом Министерства РФ №266 от 19.06.2003 г.

3. Верификация ЦМВ, определение типоспецифических антител, индекса авидности осуществлялись методами ИФА на спектрофотометре «Stat Fax 2100» (USA) с использованием тест-систем ЗАО «Вектор-Бест» (Новосибирск), методами ПЦР на аппарате ДТ-96 (Россия) с использованием наборов НПО «ДНК-технология» (Москва).

4. pH периферической крови и оксигемоглобин определяли на биохимическом анализаторе «IRMA Tru Point» (USA).

5. Содержание оксигемоглобина определяли по методу Эвелина и Мэллой [1].

Исследования показали, что при обострении цитомегаловирусной инфекции во время гестации на третьем триместре беременности при титре антител к цитомегаловирусу 1:1600 в периферической крови отмечается снижение pH до 7,25±0,03 (контроль - 7,4±0,07). На этом фоне в эритроцитах увеличивается 2,3-ДФГ до 6,7±0,07 мкмоль/мл (контроль - 4,9±0,15 мкмоль/мл). Это приводит к снижению оксигенации гемоглобина до 90,15±0,35% (контроль - 95,20±0,45%).

Таким образом, обострение цитомегаловирусной инфекции до титра 1:1600 приводит к снижению pH до 7,25 и уменьшению оксигенации гемоглобина до 90,15±0,35% при контроле - 95,20±0,45%, что создает угрозу формирования гемической гипоксии на третьем триместре гестации.

Литература

1. Покровский А.А. Биохимические методы исследования // Справочник. М.: Медицина - 1969. - С.337.

2. Benesch R., Benesch R.E. The effect of organic phosphate from the human erythrocyte on the allosterte properties of hemoglobin // Bicheni biophys. Res. Commen., 1967. Vol.26. P.162.

3. Garby L., Gerber G. Bindung of 2,3-diphosphoglycerate and adenosinetrophosphate to human hemoglobin // Europ. J. Biochem. 1969. V.10., P.286.

4. Perutz M.F. Stereochemistry of cooperative effect of hemoglobine. The Bohr effect and combination with organic phosphates // Nature (London), 1970. V.228, p.734.

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для оценки угрозы формирования гипоксии в третьем триместре гестации. Способ включает: определение в периферической крови титра антител к цитомегаловирусу, уровня рН крови и содержания оксигемоглобина на биохимическом анализаторе, и при нарастании титра антител к цитомегаловирусу до 1:1600, уменьшении рН крови до 7,25±0,03, а оксигемоглобина до 90,15±0,35% при контроле 95,20% оценивают угрозу формирования гемической гипоксии.

Способ оценки угрозы формирования гипоксии в третьем триместре гестации, включающий определение в периферической крови титра антител к цитомегаловирусу, уровня pH крови и содержания оксигемоглобина на биохимическом анализаторе, и при нарастании титра антител к цитомегаловирусу до 1:1600, уменьшении pH крови до 7,25±0,03, а оксигемоглобина до 90,15±0,35% при контроле 95,20% оценивают угрозу формирования гемической гипоксии.