ПРОТИВОСУДОРОЖНОЕ СРЕДСТВО Российский патент 2015 года по МПК A61K31/4188 A61P25/08 

Изобретение относится к лекарственным средствам, а именно к противосудорожным препаратам, используемым при лечении эпилепсии. Эпилепсия - это хроническое заболевание головного мозга, характеризующееся повторными непровоцируемыми приступами нарушения двигательных, чувствительных, вегетативных, мыслительных или психических функций, возникающими вследствие чрезмерных нейронных разрядов [Реабилитация детей с эпилепсией: Методическое пособие / О.В. Халецкая, В.А. Воробьева, Н.В. Караштина, О.В. Конурина. Н. Новгород: Изд-во Нижегородской государственной медицинской академии, 2001. С. 3].

В настоящее время фармакотерапия эпилепсии является одной из актуальных медицинских проблем. При этом за последние 15 лет в России не было зарегистрировано ни одного нового оригинального противоэпилептического препарата.

По данным Международной противоэпилептической лиги (МПЭЛ), в Западной и Центральной Европе эпилепсией страдают 6 млн человек, в течение ближайших 20 лет предположительно будут болеть около 15 млн. Соответствующие цифры для России ориентировочно составляют около полумиллиона больных эпилепсией при заболеваемости 54 тыс. в год [Зенков Л.Р. Лечение эпилепсии / Под ред. чл.-корр. РАМН Н.Н. Яхно. Москва, 2001. С. 8].

Альтернативные методы лечения только в редких случаях оказываются эффективными, при этом не существует профилактических мер по предотвращению развития эпилепсии. Противоэпилептические препараты первого и второго поколений представляются эффективными только в купировании остро возникающих приступов, а также некоторых симптомов, связанных с хроническим течением болезни [Белоусов Ю.Б. и др. Клинико-экономическая оценка эффективности лечения больных с эпилепсией // Качественная клиническая практика. - 2002. - №.3. - С. 54-59].

Известны средства, используемые при эпилепсии, - карбамазепин, фенитоин, фенобарбитал, этосуксимид, диазепам [Зенков Л.Р. Фармакологическое лечение эпилепсии // Русский медицинский журнал. - 2000. - Т. 8. - № 10. - С. 411-417].

Однако они вызывают серьезные побочные эффекты, которые связаны с воздействием на нервную систему и психическую сферу, а также прямым токсическим действием на внутренние органы. К наиболее частым побочным реакциям относятся: сонливость, снижение памяти, внимания, работоспособности, головокружение, тошнота, влияние на желудочно-кишечный тракт и печень, кроветворную систему, а также другие проявления, свойственные каждому препарату в отдельности [Glauser Т., Ben-Menachem E., Bourgeois В., Cnaan A., Chadwick D., Guerreiro С. et al. ILAE treatment guidelines: evidence-based analysis of antiepileptic drug efficacy and effectiveness as initial monotherapy for epileptic seizures and syndromes // Epilepsia. - 2006. - V. 47. - P. 1094-120]. Значительная выраженность этих проявлений и плохая переносимость напрямую отражается на качестве жизни пациентов и часто является поводом для поиска альтернативного препарата.

Известны средства - этосуксимид [Evason К. et al. Anticonvulsant medications extend worm life-span // science. - 2005. - Т. 307. - № 5707. - С. 258-262], фенитоин [Rajasekhar К.К. et al. Comparative study of conventional and microwave induced synthesis of selected heterocyclic molecules // International Journal of ChemTech Research. - 2010. - Т. 2. - №.1], примидон [Bogdanov G.N. et al. [Anticonvulsants as bioantioxidants under stress conditions] // Biomeditsinskaia khimiia. - 2008. - Т. 55. - № 4. - С. 519-524], бензодиазепины [Narayana В. et al. Synthesis of some new substituted triazolo [4, 3 - a] [1, 4] benzodiazepine derivatives as potent anticonvulsants // European journal of medicinal chemistry. - 2006. - Т. 41. - № 3. - С. 417-422] и др., относящиеся к гетероциклическим структурам.

Известны средства с ГАМК-эргическим действием (прогабид, тиагабин) [Sato К. et al. An analysis of anticonvulsant actions of GABA agonists (progabide and baclofen) in the kindling model of epilepsy // Epilepsy research. - 1990. - Т. 5. - №.2. - С. 117-124] [Winhusen Т.М. et al. A placebo-controlled screening trial of tiagabine, sertraline and donepezil as cocaine dependence treatments // Addiction. - 2005. - Т. 100. - № s1. - С. 68-77]. Однако данные препараты проявляют значительную токсичность и могут обладать проконвульсивной активностью [Stahl, S. Stahl′s Essential Psychopharmacology: Prescriber′s Guide. Cambridge University Press: New York, NY. 2009. Р. 523-526].

Наряду с этим обнаружены производные бензимидазола проявляющие агонистическое взаимодействие с ГАМК-А рецепторами [Larsen J.S. et al. Benzimidazole derivatives and their use for modulating the GABAA receptor complex: пат. 8492408 США. - 2013]. Данный класс веществ рассматривается как высокоперспективный в отношении поиска новых антиконвульсивных средств [Jain P. et al. Design, synthesis and biological evaluation of some novel benzimidazole derivatives for their potential anticonvulsant activity // Archives of pharmacal research. - 2010. - Т. 33. - № 7. - С. 971-980].

Наиболее часто применяемым противосудорожным средством, рекомендуемым ВОЗ при эпилепсии, является вальпроат натрия [Зенков Л.Р. Фармакологическое лечение эпилепсии // Русский медицинский журнал. - 2000. - Т. 8. - № 10. - С. 411-417].

Вальпроат натрия эффективно подавляет коразоловые судороги.

Однако его противосудорожная активность остается недостаточно высокой.

Техническим результатом изобретения является повышение противосудорожной активности.

Технический результат достигается дигидрохлоридом 9-диалкиламиноэтил-2-(4-хлорфенил)имидазо[1,2-а]бензимидазола общей формулы I:

где Iа NR₂ = диметиламино- (РУ-1192)

Iб NR₂ = диэтиламино- (РУ-1193)

Дигидрохлорид 9-(2-диметиламиноэтил)-2-(4-хлорфенил)имидазо[1,2-а]бензимидазола и дигидрохлорид 9-(2-диэтиламиноэтил)-2-(4-хлорфенил)имидазо[1,2-а]бензимидазола известны как обладающие гемореологическими свойствами (патент РФ №2290404, МПК C07D 487/04, 2005 г.), проявляющие антиагрегантную, антиоксидантную, антиаритмическую, различные виды рецепторной активностей (В.А. Анисимова, А.А. Спасов, И.Е. Толпыгин, В.И. Минкин и др. Хим.-фарм. журнал, 2010, т.44, №7, с. 7-13). В предлагаемом случае соединения проявляют противосудорожное действие, новое в ряду имидазо[1,2-а]бензимидазола.

Ниже приведены испытания противосудорожной активности соединений I.

МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Объекты исследования: соединение РУ-1192 (дигидрохлорид 9-(2-диметиламиноэтил)-2-(4-хлорфенил)имидазо[1,2-а]бензимидазола) и РУ-1193 дигидрохлорид 9-(2-диэтиламиноэтил)-2-(4-хлорфенил)имидазо[1,2-а]бензимидазола, синтезированные в НИИ физической и органической химии Южного федерального университета (НИИ ФОХ ЮФУ). Эксперименты проводили в соответствии с правилами лабораторной практики (GLP), со статьей 11 Федерального закона от 12 апреля 2010 г. №61-Ф3 «Об обращении лекарственных средств» (Собрание законодательства Российской Федерации, 2010, №16, ст. 1815; №31, ст. 4161), «Руководством по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ» под ред. Р.У. Хабриева, М.: ОАО «Издательство “Медицина”». Москва, 2005.

Исследования проведены на 250 самцах белых нелинейных мышей массой 20-22 г, содержащихся в условиях вивария (температура 22-24°С, относительная влажность воздуха 40-50%) с естественным световым режимом на стандартной диете лабораторных животных в соответствии с ГОСТ Р 50258 92 [1993] с соблюдением правил лабораторной практики при проведении доклинических исследований в РФ, регламентированных ГОСТ Р 51000.3 96 [1996] и ГОСТ Р 51000.4 96 [1996], а также правил и Международных рекомендаций «Европейской конвенции о защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в иных научных целях» [European convention for the protection of vertebral animals used for experimental and other scientific purpose: Council of Europe 18.03.1986. - Strasbourg, 1986. - 52 p/].

Противосудорожную активность оценивали на стандартной модели эпилептогенеза, вызванного подкожным введением антагониста ГАМК рецепторов коразолом («SIGMA», США) [Swinyard, 1969].

Исследуемые вещества вводили внутрибрюшинно в скрининговой дозе 10 мг/кг. Препарат сравнения - вальпроат натрия («Конвулекс», Австрия) вводили аналогично, но в дозе 100 мг/кг. Контрольным животным инъецировали эквивалентный объем растворителя (дистиллированная вода). Противосудорожную активность веществ оценивали по способности предотвращать развитие клонических судорог продолжительностью более 3 секунд, а также регистрировали выживаемость животных.

Для исследуемых соединений и эталонного препарата определяли величины ЭД₅₀ методом наименьших квадратов.

Острая токсичность изучалась на 60 белых нелинейных мышах-самцах массой 18-22 г при внутрибрюшинном введении. Расчет ЛД₅₀ производили по классическому методу Личфилда-Вилкоксона с использованием регрессионной статистики (Microsoft Excel), позволяющей рассчитывать этот показатель на основе результатов фармакологических испытаний изучаемых веществ по тестам с альтернативной формой реакции.

В качестве интегрального показателя условной широты терапевтического действия (ТИ) использовали условный терапевтический индекс соединений, который рассчитывали как отношение ЛД₅₀ к ЭД₅₀.

Статистическая обработка данных проводилась с помощью стандартных пакетов статистических программ Statistica 6,0 (StatSoft, Inc., США), Microsoft Office Excel 2003 (Microsoft, США) с использованием непараметрического метода сравнения независимых групп Манна-Уитни (U-test), рангового однофакторного анализа Крускала-Уоллиса.

Уровень значимости р<0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИСПЫТАНИЙ

В таблице 1 приведены данные о влиянии исследуемых веществ (10 мг/кг, в/бр) и препарата сравнения - вальпроата натрия (100 мг/кг, в/бр) на развитие клонических судорог продолжительностью более 3 секунд у мышей в тесте антагонизма с коразолом.

Как видно, в тесте судорог, вызванных коразолом, соединения РУ-1192 [2-(4-хлорфенил)-9-диметиламиноэтилимидазо[1,2-a]бензимидазол) и РУ-1193 [2-(4-хлорфенил)-9-диэтиламиноэтилимидазо[1,2-a]бензимидазол) проявляют дозозависимое противосудорожное действие.

В таблице 2 приведены данные о влиянии исследуемых веществ (10 мг/кг, в/бр) и препарата сравнения - вальпроата натрия (100 мг/кг, в/бр) на выживаемость мышей в тесте антагонизма с коразолом.

Как видно, соединения существенно повышают уровень выживаемости животных по сравнению с группой негативного контроля на указанной модели хемоиндуцированногоэпилептогенеза.

Для соединений (РУ-1192, РУ-1193) рассчитаны медианные эффективные дозы для противосудорожного действия, а также изучена острая токсичность. В таблице 3 приведены величины противосудорожной активности (ЭД₅₀), показатель острой токсичности (ЛД₅₀) и терапевтический индекс (ТИ=ЛД₅₀/ЭД₅₀) исследуемых веществ РУ-1192, РУ-1193 и вальпроата натрия в тесте судорог с коразолом

Примечание:* - по данным Register of Toxic Effects of Chemical Substances.

Как видно, соединения РУ-1192 и РУ-1193 проявляют выраженную противосудорожную активность и превосходят референтный препарат по уровню ЭД₅₀ и величине терапевтического индекса в 16,5 и 11,2; 4,7 и 2,7 раз соответственно.

Изобретение относится к лекарственным средствам, а именно к противосудорожным препаратам, используемым при лечении эпилепсии. В качестве соединения, обладающего противосудорожной активностью, предложен дигидрохлорид 9-диалкиламиноэтил-2-(4-хлорфенил)имидазо[1,2-а]бензимидазола общей формулы I. Технический результат: выявлена противосудорожная активность соединений, превышающая активность вальпроата натрия, при этом терапевтический индекс дигидрохлорида 9-диалкиламиноэтил-2-(4-хлорфенил)имидазо[1,2-а]бензимидазола был на порядок выше, чем у вальпроата натрия. 1 з.п. ф-лы, 3 табл.

Общая формула I

где Iа NR₂ = диметиламино-

Iб NR₂ = диэтиламино-

1. Применение дигидрохлорида 9-диалкиламиноэтил-2-(4-хлорфенил)-имидазо[1,2-а]бензимидазола общей формулы I:

где Iа NR₂ = диметиламино-
Iб NR₂ = диэтиламино-
в качестве соединения, обладающего противосудорожной активностью

2. Применение по п. 1 для изготовления противосудорожного средства.