НОВОЕ ИМИДАЗООКСАЗИНОВОЕ СОЕДИНЕНИЕ ИЛИ ЕГО СОЛЬ Российский патент 2016 года по МПК C07D498/04 C07D498/14 A61K31/5365 A61P35/00 

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к новому имидазооксазиновому соединению или к его соли, и к фармацевтической композиции, содержащей имидазооксазиновое соединение или его соль в качестве активного ингредиента, и в частности, к противоопухолевому лекарству, обладающему ингибирующей активностью в отношении AKT киназы. Кроме того, настоящее изобретение относится к ингибитору AKT, к способу предупреждения или лечения злокачественной опухоли, и к применению имидазооксазинового соединения или его соли для получения противоопухолевого лекарства.

Предпосылки создания настоящего изобретения

AKT представляет собой серин-треониновую киназу, идентифицированную в качестве онкогена в вирусе лейкемии мышей, и было выявлено, что ее активность важна для различных функций, таких как клеточная пролиферация, выживаемость, метаболизм, метастазирование и инвазия (непатентные документы 1 и 2). Сообщалось о трех изоформах (AKT1/PKBα, AKT2/PKBβ и AKT3/PKBγ) присутствующих у человека (непатентные документы 3 и 4). Активация AKT влечет за собой размещение в цитоплазматической мембране посредством связывания с фосфатидилинозитол-3-фосфатом, образованным PI3 киназой и фосфорилирование многочисленными киназами (непатентный документ 5). Сообщалось, что во многих случаях рака (например, при раке молочной железы, раке поджелудочной железы, раке печени, раке предстательной железы, раке желудка, раке легкого, раке яичников, раке головы и шеи, раке мочевыводящих путей и эндометриальном раке) экспрессия активированной AKT усилена посредством активации PI3 киназы вследствие мутации, и т.п., или инактивации ее отрицательного регулятора, PTEN (непатентный документ 6). Кроме того сообщалось, что усиленная экспрессия активированной AKT ассоциирована с неблагоприятными прогнозами в случаях различных видов рака (например, рака молочной железы, рака поджелудочной железы, рака печени, рака предстательной железы, рака желудка и эндометриального рака) (непатентный документ 7).

В этой связи, в случаях рака с усиленной активностью AKT ожидается, что лекарство, которое специфически ингибирует AKT, обеспечит супрессию пролиферации, выживаемости, метастазирования, инвазии и т.п. раковых клеток, при введении указанного лекарства, и предлагается в качестве нового противоракового средства, которое поспособствует увеличению продолжительности жизни и улучшению качества жизни пациентов. При существующих методах терапии, поскольку аномалия PI3 киназы, аномалия PTEN или активация AKT служат в качестве показателя для стратификации, становится возможным подбор пациентов, основанный на стратификации; поэтому, это является высоко предпочтительным с этической точки зрения.

Список процитированных документов

Непатентные документы

Непатентный документ 1: Cell, 129, p. 1261-1274 (2007)

Непатентный документ 2: Cell Cycle. 7. p. 2991-2996 (2008)

Непатентный документ 3: Proc. Natl. Acad. Sci. USA 84. p. 5034-5037 (1987)

Непатентный документ 4: J. Biol. Chem. 274. p. 9133-9136 (1999)

Непатентный документ 5: FEBS Letters. 546. p. 108-112 (2003)

Непатентный документ 6: Nature Reviews Drug Discovery, 8, p. 627-644 (2009)

Непатентный документ 7: Anticancer Research, 18, p. 861-874 (2007)

Краткое описание сущности настоящего изобретения

Техническая задача

Задача настоящего изобретения состоит в предоставлении нового имидазооксазинового соединения, обладающего ингибирующей активностью в отношении AKT1 и AKT2 киназ, а также ингибирующей активностью в отношении процессов фосфорилирования AKT и рибосомального белка S6. Кроме того, другая задача настоящего изобретения заключается в предоставлении лекарственного средства, которое применимо для предотвращения и/или лечения заболевания с участием AKT1 и AKT2 киназ, в частности рака, что обусловлено его ингибирующей активностью в отношении AKT1 и AKT2.

Решение задачи

Авторы настоящего изобретения провели обширные исследования соединений, обладающих ингибирующей активностью в отношении AKT1 и AKT2 киназ, и обнаружили, что новое имидазооксазиновое соединение, представленное формулой (I), обладает чрезвычайно высокой ингибирующей активностью в отношении AKT киназы. Настоящее изобретение было оформлено на основании полученных результатов.

Конкретно, настоящее изобретение относится к новому имидазооксазиновому соединению или к его соли, к фармацевтической композиции, содержащей имидазооксазиновое соединение или его соль в качестве активного ингредиента, к противоопухолевому лекарству, содержащему имидазооксазиновое соединение или его соль в качестве активного ингредиента, к ингибитору AKT, содержащему имидазооксазиновое соединение или его соль в качестве активного ингредиента, к способу предупреждения или лечения злокачественной опухоли и к использованию имидазооксазинового соединения или его соли для получения противоопухолевого лекарства.

(1) Имидазооксазиновое соединение, представленное формулой (I), или его соль

,

где

А, B, C и D представляют собой атом N или C-R^1a, атом N или C-R^1b, атом N или C-R^1c, и атом N или C-R^1d, соответственно;

R^1a, R^1b, R^1c и R^1d являются одинаковыми или отличаются друг от друга, и каждый представляет собой водород, галоген, циано, необязательно замещенный C_1-6алкил, необязательно замещенный C_1-6алкокси, замещенный карбонил или необязательно замещенную ненасыщенную гетероциклическую группу;

R² представляет собой необязательно замещенный арил или необязательно замещенную ненасыщенную гетероциклическую группу; и

R³ и R⁴ являются одинаковыми или отличаются друг от друга, и каждый представляет собой водород, гидрокси, необязательно замещенный C_1-6алкил или необязательно замещенный C_3-7циклоалкил.

(2) Имидазооксазиновое соединение согласно пункту (1) или его соль, где

A, B, C и D представляют собой атом N или C-R^1a, атом N или C-R^1b, атом N или C-R^1c, и атом N или C-R^1d, соответственно;

R^1a, R^1b, R^1c и R^1d являются одинаковыми или отличаются друг от друга, и каждый представляет собой водород, галоген, циано, необязательно замещенный C_1-6алкил, C_1-6алкокси, замещенный карбонил или необязательно замещенную ненасыщенную гетероциклическую группу;

R² представляет собой С_6-10арил или 5-6-членную моноциклическую ненасыщенную гетероциклическую группу, содержащую от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из N, S и O;

R³ представляет собой водород, необязательно замещенный С_1-6алкил или необязательно замещенный C_3-7циклоалкил; и

R⁴ представляет собой водород или гидрокси.

(3) Имидазооксазиновое соединение согласно пунктам (1) или (2) или его соль, где

A, B, C и D представляют собой C-R^1a, C-R^1b, C-R^1c и C-R^1d, соответственно, или один или два из A, B, C и D представляют собой атом N;

по меньшей мере, два из R^1a, R^1b, R^1c и R^1d представляют собой водород, а другой(ие) представляет(ют) собой галоген, циано, C_1-6алкил, который может иметь гидроксильную(ые) группу(ы) в качестве заместителя(ей), C_1-6алкокси, карбонил, содержащий гидроксил, амино или моно- или ди-(C_1-6алкокси)амино в качестве заместителя, необязательно замещенный моно- или ди-(C_1-6алкил)аминокарбонил или ненасыщенную гетероциклическую группу,

R² представляет собой фенил, пиридил или тиенил;

R³ представляет собой водород, метил, этил или циклопропил; и

R⁴ представляет собой водород или гидрокси.

(4) Имидазооксазиновое соединение согласно пунктам (1) или (2), или его соль, где

A, B, C и D представляют собой C-R^1a, C-R^1b, C-R^1c и C-R^1d, соответственно, или один или два из A, B, C и D представляют собой атом N;

по меньшей мере, два из R^1a, R^1b, R^1c и R^1d представляют собой водород, а другой(ие) представляет(ют) собой хлор, фтор, циано, метил, гидроксиметил, метокси, этокси, амино, карбоксил, карбамоил, метиламинокарбонил, диметиламинокарбонил, этиламинокарбонил, гидроксиэтиламинокарбонил, этоксиаминокарбонил или пиразолил;

R² представляет собой фенил, пиридил или тиенил;

R³ представляет собой водород, метил, этил или циклопропил; и

R⁴ представляет собой водород или гидрокси.

(5) Имидазооксазиновое соединение, выбранное из группы, состоящей из последующих соединений (a)-(t), или его соль:

(a) транс-3-амино-1-циклопропил-3-(4-(10-фтор-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол,

(b) транс-3-амино-1-циклопропил-3-(4-(10-фтор-3-(пиридин-4-ил)-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол,

(c) транс-3-амино-1-циклопропил-3-(4-(3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол,

(d) транс-3-амино-1-циклопропил-3-(4-(10-метокси-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол,

(e) транс-3-амино-1-циклопропил-3-(4-(9-метокси-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол,

(f) транс-3-амино-1-циклопропил-3-(4-(8-метокси-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол,

(g) транс-3-амино-1-циклопропил-3-(4-(3-фенил-5H-имидазо[1,2-c]пиридо[2,3-e][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол,

(h) транс-3-амино-1-метил-3-(4-(3-фенил-5H-имидазо[1,2-с]пиридо[2,3-e][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол,

(i) транс-3-амино-1-этил-3-(4-(3-фенил-5H-имидазо[1,2-c]пиридо[2,3-е][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол,

(j) транс-3-амино-1-циклопропил-3-(4-(3-фенил-5H-имидазо[1,2-с]пиридо[3,4-e][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол,

(k) транс-3-амино-1-метил-3-(4-(3-фенил-5H-имидазо[1,2-c]пиридо[3,4-e][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол,

(l) транс-3-амино-1-циклопропил-3-(4-(3-фенил-5H-имидазо[1,2-c]пиридо[4,3-е][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол,

(m) транс-3-амино-1-метил-3-(4-(3-фенил-5H-имидазо[1,2-с]пиридо[4,3-e][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол,

(n) транс-3-амино-1-циклопропил-3-(4-(3-фенил-5H-имидазо[1,2-c]пиридо[3,2-e][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол,

(o) транс-3-амино-1-циклопропил-3-(4-(3-фенил-5H-имидазо[1,2-c]пиразино[2,3-e][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол,

(p) транс-3-амино-3-(4-(9-(гидроксиметил)-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)-1-метилциклобутанол,

(q) 2-(4-(транс-1-амино-3-гидрокси-3-метилциклобутил)фенил)-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-9-карбонитрил,

(r) транс-3-амино-1-метил-3-(4-(3-фенил-9-(1H-пиразол-5-ил)-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол,

(s) 2-(4-(транс-1-амино-3-гидрокси-3-метилциклобутил)фенил)-N-метил-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-8-карбоксамид, и

(t) 2-(4-(транс-1-амино-3-гидрокси-3-метилциклобутил)фенил)-N-этокси-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-е][1,3]оксазин-8-карбоксамид.

(6) Фармацевтическая композиция, содержащая эффективное количество имидазооксазинового соединения в соответствии с любым из пунктов (1)-(5) или его соли и фармацевтический носитель.

(7) Противоопухолевое лекарство, содержащее эффективное количество имидазооксазинового соединения в соответствии с любым из пунктов (1)-(5) или его соли и фармацевтический носитель.

(8) Ингибитор AKT, содержащий имидазооксазиновое соединение в соответствии с любым из пунктов (1)-(5) или его соль в качестве активного ингредиента.

(9) Ингибитор AKT в соответствии с пунктом (8), который представляет собой ингибитор AKT1 и AKT2.

(10) Способ предупреждения или лечения рака, включающий введение млекопитающему имидазооксазинового соединения в соответствии с пунктами (1) или (2) или его соли в количестве, эффективном для предупреждения рака или лечения рака.

(11) Применение имидазооксазинового соединения в соответствии с пунктами (1) или (2) или его соли для получения профилактического или терапевтического средства против рака.

(12) Имидазооксазиновое соединение в соответствии с пунктами (1) или (2) или его соль для применения в профилактике или терапии рака.

Полезные эффекты настоящего изобретения

Настоящее изобретение относится к новому соединению, представленному вышеуказанной формулой (I), или его соли, которые используются в качестве ингибитора AKT1 и AKT2 киназ.

Было выявлено, что соединение или его соль согласно настоящему изобретению обладает превосходной ингибирующей активностью в отношении AKT1 и AKT2 киназ, а также проявляет ингибирующую активность в отношении процессов фосфорилирования AKT и рибосомального белка S6. Поэтому, исходя из его превосходной ингибирующей активности в отношении AKT киназы, соединение или его соль согласно настоящему изобретению используется в качестве средства для предупреждения и/или лечения заболевания с участием AKT киназы, такого как рак.

Описание вариантов осуществления

Соединение согласно настоящему изобретению, которое представлено формулой (I), представляет собой имидазооксазиновое соединение, содержащее циклобутил в пара-положении фенильной группы в 2-положении в имидазооксазиновом скелете формулы (I), и является новым соединением, не описанным в вышеупомянутой литературе.

Например, в Can. J. Chem., Vol. 63, p. 632 (1985) имидазооксазиновое соединение представлено в качестве промежуточного соединения синтеза каннабиноидов (например, соединение 10). Тем не менее, заместитель, присутствующий в фенильной группе в 2-положении в имидазооксазиновом скелете, отличается от представленного в настоящем изобретении, и в Can. J. Chem., Vol. 63, p. 632 (1985) также не указаны противоопухолевые эффекты.

В описании настоящего изобретения, примеры «заместителей» необязательно замещенных групп включают галоген, гидроксил, циано, амино, нитро, оксо, карбокси, карбамоил, алкил, циклоалкил, алкенил, алкинил, алкокси, ацил, ацилокси, алкоксикарбонил, насыщенную гетероциклическую группу, ненасыщенную гетероциклическую группу, арил, галогеналкил, аралкил, насыщенный гетероциклический алкил, алкиламино, ациламино и аралкилокси. Если присутствуют заместители, то обычно их число составляет от 1 до 3, и, в частности, от 1 до 2.

В заместителях, примеры галогена включают хлор, бром, фтор и йод.

В заместителях, алкил предпочтительно представляет собой неразветвленную или разветвленную C_1-6алкильную группу, и его примеры включают метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, пентил и гексил.

В заместителях, циклоалкил предпочтительно представляет собой C_3-7циклоалкильную группу, и его примеры включают циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил и циклогептил.

В заместителях, алкенил предпочтительно представляет собой C_2-6алкенильную группу, содержащую двойную углерод-углеродную связь, и его примеры включают винил, аллил, метилвинил, пропенил, бутенил, пентенил и гексенил.

В заместителях, алкинил предпочтительно представляет собой C_2-6алкинильную группу, содержащую тройную углерод-углеродную связь, и его примеры включают этинил и пропаргил.

В заместителях, алкокси предпочтительно представляет собой неразветвленную или разветвленную C_1-6алкоксигруппу, и его примеры включают метокси, этокси, н-пропокси, изопропокси, н-бутокси, изобутокси и трет-бутокси.

В заместителях, ацил предпочтительно представляет собой C_1-6алканоильную группу или C_7-12ароильную группу, и его примеры включают формил, ацетил, пропионил, н-бутирил, изобутирил, валерил, изовалерил, пивалоил и бензоил.

В заместителях, ацилокси представляет собой оксигруппу, замещенную вышеупомянутой ацильной группой, и предпочтительно оксигруппа замещена C_1-6алканоильной группой или C_7-12ароильной группой. Ее примеры включают формилокси, ацетокси, пропионилокси, н-бутирилокси, изобутирилокси, валерилокси, изовалерилокси, пивалоилокси и бензоилокси.

В заместителях, алкоксикарбонил представляет собой карбонильную группу, замещенную вышеупомянутой алкоксигруппой, и предпочтительно карбонильную группу, замещенную C_1-6алкоксигруппой. Его примеры включают метоксикарбонил, этоксикарбонил, н-пропоксикарбонил, изопропоксикарбонил, н-бутоксикарбонил, изобутоксикарбонил, втор-бутоксикарбонил и трет-бутоксикарбонил.

В заместителях, насыщенная гетероциклическая группа предпочтительно представляет собой 5-10-членную моноциклическую или бициклическую насыщенную гетероциклическую группу, содержащую от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из N, S и O. Ее примеры включают пирролидинил, пиперидинил, пиперазинил, гексаметиленимино, морфолино, тиоморфолино, гомопиперазинил, тетрагидрофуранил, тетрагидропиранил, метилендиоксифенил, этилендиоксифенил и дигидробензофуранил.

В заместителях, ненасыщенная гетероциклическая группа предпочтительно представляет собой 5-10-членную моноциклическую или бициклическую ненасыщенную гетероциклическую группу, содержащую от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из N, S и O. Ее примеры включают имидазолил, тиенил, фурил, пирролил, оксазолил, изоксазолил, тиазолил, изотиазолил, пиразолил, триазолил, тетразолил, пиридил, пиразил, пиримидинил, пиридазинил, индолил, изоиндолил, индазолил, бензофуранил, бензимидазолил, бензоксазолил, бензотиазолил, пуринил, хинолил, изохинолил, хиназолинил и хиноксалил.

В заместителях, арил предпочтительно представляет собой C_6-14арильную группу, и его примеры включают фенил и нафтил.

В заместителях, галогеналкил представляет собой группу, в которой от одного до всех атомов водорода вышеупомянутой алкильной группы замещены описанным выше галогеном, и предпочтительно группу, в которой от одного до всех атомов водорода вышеупомянутой неразветвленной или разветвленной C_1-6алкильной группы замещены описанным выше галогеном. Его примеры включают дифторметил и трифторметил.

В заместителях, аралкил предпочтительно представляет собой неразветвленную или разветвленную C_1-6алкильную группу, замещенную C_6-14ароматической углеводородной группой, и его примеры включают бензил, фенилэтил, фенилпропил, нафтилметил и нафтилэтил.

В заместителях, насыщенный гетероциклический алкил представляет собой вышеупомянутую алкильную группу, замещенную описанной выше насыщенной гетероциклической группой, и предпочтительно, вышеупомянутую неразветвленную или разветвленную C_1-6алкильную группу, замещенную 5-7-членной моноциклической насыщенной гетероциклической группой, содержащей 1 или 2 гетероатома, выбранных из группы, состоящей из N, S и O. Его примеры включают морфолинометил и пиперидинилэтил.

В заместителях, алкиламино представляет собой аминогруппу, моно- или ди-замещенную вышеупомянутой алкильной группой, и предпочтительно, если аминогруппа моно- или ди-замещена неразветвленной или разветвленной C_1-6алкильной группой. Ее примеры включают метиламино, этиламино, диэтиламино, метилэтиламино, циклобутилметиламино, диметиламино и 2-гидроксиэтил(метил)амино.

В заместителях, ациламино представляет собой аминогруппу, замещенную вышеупомянутой ацильной группой, и предпочтительно, если аминогруппа замещена C_1-6алканоильной группой или C_7-12ароильной группой. Ее примеры включают формиламино, ацетиламино, пропиониламино, бутириламино, 2-метилпропиониламино, пивалоиламино, пенталоиламино, 3-метилбутириламино и гексаноиламино.

В заместителях, аралкилокси представляет собой оксигруппу, содержащую вышеупомянутую аралкильную группу, и предпочтительно, если оксигруппа замещена неразветвленной или разветвленной C_1-6алкильной группой, с которой связана C_6-14ароматическая углеводородная группа. Ее примеры включают бензилокси, фенэтилокси, фенилпропилокси, нафтилметилокси и нафтилэтилокси.

В формуле (I) A, B, C и D представляют собой атом N или C-R^1a, атом N или C-R^1b, атом N или C-R^1c, и атом N или C-R^1d, соответственно.

Примеры галогена, представленного R^1a, R^1b, R^1c или R^1d, включают вышеупомянутый галоген, и предпочтительно хлор или фтор.

C_1-6алкил «необязательно замещенного C_1-6алкила», представленного R^1a, R^1b, R^1c или R^1d, представляет собой вышеупомянутую неразветвленную или разветвленную C_1-6алкильную группу, и предпочтительно C_1-3алкильную группу, и более предпочтительно метил. В качестве заместителя предпочтительным является гидроксил.

C_1-6алкокси «необязательно замещенного C_1-6алкокси», представленного R^1a, R^1b, R^1c или R^1d, представляет собой вышеупомянутую неразветвленную или разветвленную C_1-6алкоксигруппу, и предпочтительно C_1-3алкоксигруппу, и более предпочтительно метокси или этокси.

Заместитель «замещенного карбонила», представленного R^1a, R^1b, R^1c или R^1d, предпочтительно представляет собой гидроксил, амино, необязательно замещенный моно- или ди-(C_1-6алкил)амино или моно- или ди-(C_1-6алкокси)амино.

Моно- или ди-(C_1-6алкил)аминокарбонил «необязательно замещенного моно- или ди-(C_1-6алкил)аминокарбонила» представляет собой аминокарбонильную группу, содержащую одну или две описанные выше C_1-6алкильные группы; предпочтительной является моно- или ди-(C_1-3алкил)аминокарбонильная группа; и более предпочтительными являются метиламинокарбонил, диметиламинокарбонил и этиламинокарбонил. В качестве заместителя предпочтительным является гидроксил.

Моно- или ди-(C_1-6алкокси)аминокарбонил представляет собой аминокарбонильную группу, содержащую одну или две описанные выше C_1-6алкоксигруппы, предпочтительно моно- или ди-(C_1-3алкокси)аминокарбонильную группу, и более предпочтительно этоксиаминокарбонил.

В качестве «замещенного карбонила», представленного R^1a, R^1b, R^1c или R^1d, особенно предпочтительным является карбоксил, карбамоил, метиламинокарбонил, этиламинокарбонил, гидроксиэтиламинокарбонил и этоксиаминокарбонил.

Ненасыщенная гетероциклическая группа «необязательно замещенной ненасыщенной гетероциклической группы», представленной R^1a, R^1b, R^1c или R^1d, представляет собой вышеупомянутую ненасыщенную гетероциклическую группу, и предпочтительно пиразолил.

Арил «необязательно замещенного арила», представленного R² в формуле (1), предпочтительно представляет собой C_6-14арильную группу, и более предпочтительно фенил.

Ненасыщенная гетероциклическая группа «необязательно замещенной ненасыщенной гетероциклической группы», представленной R², представляет собой вышеупомянутую ненасыщенную гетероциклическую группу, предпочтительно 5-6-членную моноциклическую ненасыщенную гетероциклическую группу, содержащую от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из N, S и O, и более предпочтительно пиридил или тиенил.

R³ и R⁴ являются одинаковыми или отличаются друг от друга, и каждый представляет собой водород, гидрокси, необязательно замещенный C_1-6алкил или необязательно замещенный C_3-7циклоалкил.

C_1-6алкил «необязательно замещенного C_1-6алкила», представленного R³ или R⁴, представляет собой вышеупомянутую неразветвленную или разветвленную C_1-6алкильную группу, и предпочтительно C_1-3алкильную группу; и предпочтительными являются метил и этил.

C_3-7циклоалкил «необязательно замещенного C_3-7циклоалкила», представленного R³ или R⁴, представляет собой циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил или циклогептил; предпочтительной является C_3-6циклоалкильная группа; и более предпочтительным является циклопропил.

Способ получения соединения, представленного формулой (I)

Соединение согласно настоящему изобретению может быть получено, например, следующими способами получения или способами, представленными в примерах. Тем не менее, способ получения соединения согласно настоящему изобретению не ограничивается указанными примерами.

Соединение (I) согласно настоящему изобретению может быть получено, например, следующим способом получения A и способом получения B.

Способ получения A

(В формуле L1, L2, L3 и L4 являются одинаковыми или отличаются друг от друга, и каждый представляет собой уходящую группу; а другие символы определены выше).

Стадия 1

Указанная стадия представляет собой способ получения соединения 2 из альдегидного соединения 1.

Исходное соединение 1 представляет собой коммерчески доступный продукт, или оно может быть получено известным способом. Первая стадия может проводиться способом, описанным в документах (например, J. Med. Chem., Vol. 46, p. 5416, 2003; J. Org. Chem., Vol. 68, p. 5415, 2003), основанного на них способа или комбинаций указанных способов с обычными способами.

Например, при использовании в реакции водного раствора аммиака и водного раствора глиоксаля количество используемого водного раствора аммиака составляет от 1 до 10 эквивалентов относительно соединения 1. Количество используемого водного раствора глиоксаля составляет от 1 до 10 эквивалентов относительно соединения 1.

Примеры используемых растворителей включают метанол, этанол, тетрагидрофуран, этилацетат, N,N-диметилформамид, уксусную кислоту и воду. Растворители могут использоваться по отдельности или в комбинации. Время реакции составляет от 0,1 до 100 часов, и предпочтительно от 0,5 до 24 часов. Температура реакции составляет от 0°C до температуры кипения растворителя, и предпочтительно от 0 до 100°C.

Полученное таким образом соединение 2 может быть выделено и очищено известными способами разделения и очистки, такими как концентрирование, концентрирование при пониженном давлении, кристаллизация, экстрагирование растворителем, повторное осаждение и хроматография, а затем использовано на следующей стадии; или оно может быть использовано на следующей стадии без выделения и очистки.

Стадия 2

Указанная стадия представляет собой способ получения соединения 4, при котором проводят реакцию алкилирования соединения 2 соединением 3 в присутствии основания.

Соединение 3, в котором упомянуты L1 и L2, хлор, бром, йод и т.д., представляет собой коммерчески доступный продукт, или оно может быть получено известным способом.

Соединение 3 может использоваться в количестве от 1 до 100 эквивалентов, и предпочтительно от 1 до 10 эквивалентов, относительно соединения 2.

Примеры основания включают неорганические основания, такие как гидрокарбонат натрия, карбонат натрия, карбонат калия, карбонат цезия и гидроксид цезия, и органические амины, такие как триметиламин, триэтиламин, трипропиламин, диизопропилэтиламин, N-метилморфолин, пиридин, 4-(N,N-диметиламино)пиридин, лутидин и коллидин. Основание может использоваться в количестве от 1 до 100 эквивалентов, и предпочтительно от 2 до 10 эквивалентов.

Примеры подходящих растворителей включают N,N-диметилформамид, N,N-диметилацетамид, диметилсульфоксид, тетрагидрофуран, 1,4-диоксан, N-метилпирролидин-2-он, ацетонитрил и воду. Растворители могут использоваться по отдельности или в комбинации. Время реакции составляет от 0,1 до 100 часов, и предпочтительно от 0,5 до 24 часов. Температура реакции составляет от 0°C до температуры кипения растворителя, и предпочтительно от 0 до 100°C.

Полученное таким образом соединение 4 может быть выделено и очищено известными способами разделения и очистки, а затем использовано на следующей стадии; или оно может быть использовано на следующей стадии без выделения и очистки.

Стадия 3

Указанная стадия представляет собой способ получения соединения 6 из соединения 5.

Соединение 5, в котором упомянуты L3, хлор, бром, йод и т.д., представляет собой коммерчески доступный продукт, или оно может быть получено известным способом.

Стадия 3 может проводиться тем же способом, что и стадия 1.

Стадия 4

Указанная стадия представляет собой способ получения соединения 4, при котором взаимодействие соединения 6 с формальдегидом проводят в присутствии основания.

Формальдегид может использоваться в количестве от 1 до 100 эквивалентов, и предпочтительно от 1 до 10 эквивалентов, относительно соединения 6. Формальдегид может использоваться в форме водного раствора или в форме параформальдегида.

Примеры основания включают гидроксид натрия, карбонат натрия, гидроксид калия, карбонат цезия, трет-бутоксид натрия и трет-бутоксид калия. Основание может использоваться в количестве от 1 до 100 эквивалентов, и предпочтительно от 2 до 10 эквивалентов.

Примеры используемых растворителей включают N,N-диметилформамид, N,N-диметилацетамид, диметилсульфоксид, тетрагидрофуран, 1,4-диоксан, N-метилпирролидин-2-он, ацетонитрил и воду. Растворители могут использоваться по отдельности или в комбинации. Время реакции составляет от 0,1 до 100 часов, и предпочтительно от 0,5 до 24 часов. Температура реакции составляет от 0°C до температуры кипения растворителя, и предпочтительно от 0 до 100°C.

Полученное таким образом соединение 4 может быть выделено и очищено известными способами разделения и очистки, а затем использовано на следующей стадии; или оно может быть использовано на следующей стадии без выделения и очистки.

Стадия 5

Указанная стадия представляет собой способ получения соединения 7 путем проведения галогенирования, например, путем осуществления воздействия галогенирующего агента на соединение 4 (L⁴=Cl, Br или I). Галогенирование может проводиться общеизвестным способом; например, галогенирование может проводиться в реакционном растворителе, который не оказывает негативное влияние на реакцию.

Полученное таким образом соединение 7 может быть выделено и очищено известными способами разделения и очистки, а затем использовано на следующей стадии; или оно может быть использовано на следующей стадии без выделения и очистки.

Стадия 6

Указанная стадия представляет собой способ получения соединения 8 путем осуществления взаимодействия соединения 7 с арилбороновой кислотой, сложным эфиром арилбороновой кислоты, ненасыщенной гетероциклической бороновой кислотой или сложным эфиром ненасыщенной гетероциклической арилбороновой кислоты.

Указанная стадия может проводиться общеизвестным способом (например, Chemical Reviews, Vol. 95, p. 2457, 1995); например, указанная стадия может проводиться в растворителе, который не оказывает негативное влияние на реакцию, в присутствии катализатора, содержащего металл переменной валентности, и основания.

Арилбороновая кислота, сложный эфир арилбороновой кислоты, ненасыщенная гетероциклическая бороновая кислота или сложный эфир ненасыщенной гетероциклической арилбороновой кислоты могут использоваться в количестве от 1 до 10 эквивалентов, и предпочтительно от 1 до 3 эквивалентов, относительно соединения 7.

Примеры подходящих катализаторов, содержащих металл переменной валентности, включают палладиевые катализаторы (например, ацетат палладия, хлорид палладия, тетракис(трифенилфосфин)паддалий и т.д.) и никелевые катализаторы (например, хлорид никеля и т.д.). При необходимости, могут быть добавлены лиганды (например, трифенилфосфин, три-трет-бутилфосфин и т.д.), и в качестве сокатализаторов могут использоваться оксиды металлов (например, оксид меди, оксид серебра и т.д.), и т.п. Хотя количество используемого катализатора, содержащего металл переменной валентности, изменяется в зависимости от типа катализатора, как правило, оно составляет приблизительно от 0,0001 приблизительно до 1 моль, и предпочтительно приблизительно от 0,01 приблизительно до 0,5 моль относительно соединения 7 (1 моль). Как правило, количество используемого лиганда составляет приблизительно от 0,0001 приблизительно до 4 моль, и предпочтительно приблизительно от 0,01 приблизительно до 2 моль относительно соединения 7 (1 моль). Как правило, количество используемого сокатализатора составляет приблизительно от 0,0001 приблизительно до 4 моль, и предпочтительно приблизительно от 0,01 приблизительно до 2 моль относительно соединения 7 (1 моль).

Примеры основания включают органические амины (например, триметиламин, триэтиламин, диизопропилэтиламин, N-метилморфолин, 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ен, пиридин, N,N-диметиланилин и т.д.), соли щелочных металлов (например, гидрокарбонат натрия, гидрокарбонат калия, карбонат натрия, карбонат калия, карбонат цезия, фосфат натрия, фосфат калия, гидроксид натрия, гидроксид калия и т.д.), гидриды металлов (например, гидрид калия, гидрид натрия и т.д.), алкоксиды щелочных металлов (например, метоксид натрия, этоксид натрия, трет-бутоксид натрия, трет-бутоксид калия и т.д.), дисилазиды щелочных металлов (например, дисилазид лития, дисилазид натрия, дисилазид калия и т.д.). Среди них предпочтительными являются соли щелочных металлов, такие как карбонат калия, карбонат цезия, фосфат натрия и фосфат калия; алкоксиды щелочных металлов, такие как трет-бутоксид натрия и трет-бутоксид калия; органические амины, такие как триэтиламин и диизопропилэтиламин; и т.п. Количество используемого основания, как правило, составляет от 0,1 до 10 моль, и предпочтительно приблизительно от 1 приблизительно до 5 моль относительно соединения 7 (1 моль).

Могут использоваться любые растворители при условии, если они не оказывают негативное влияние на реакцию. Их примеры включают углеводороды (например, бензол, толуол, ксилол, и т.д.), галогенированные углеводороды (например, хлороформ, 1,2-дихлорэтан, и т.д.), нитрилы (например, ацетонитрил, и т.д.), эфиры (например, диметоксиэтан, тетрагидрофуран, 1,4-диоксан, и т.д.), спирты (например, метанол, этанол, и т.д.), апротонные полярные растворители (например, диметилформамид, диметилсульфоксид, гексаметилфосфорамид, и т.д.), вода и их смеси. Время реакции составляет от 0,1 до 100 часов, и предпочтительно от 0,5 до 24 часов. Температура реакции составляет от 0°C до температуры кипения растворителя, и предпочтительно от 0 до 150°C.

Полученное таким образом соединение 8 может быть выделено и очищено известными способами разделения и очистки, а затем использовано на следующей стадии; или оно может быть использовано на следующей стадии без выделения и очистки.

Способ получения B

(В формуле L⁵ являются одинаковыми или отличаются друг от друга, и каждый представляет собой уходящую группу; P представляет собой защитную группу; а другие символы определены выше).

Стадия 7

Стадия 7 может проводиться тем же способом, что и стадия 5.

Стадия 8

Указанная стадия представляет собой способ преобразования любого из A-D соединения 8 в любой из A1-D1, соответственно, путем проведения реакции сочетания и т.д. с применением общеизвестного способа.

Если любой из A-D соединения 8 содержит уходящую группу, такую как галоген, то реакцию соединения проводят в присутствии катализатора, содержащего металл переменной валентности, с получением соединения 10.

В случае преобразования уходящей группы, такой как галоген, в цианогруппу используют цианид цинка. В случае преобразования в ароматическое кольцо или гетероароматическое кольцо используют коммерчески доступную бороновую кислоту или сложный бороновый эфир, или бороновую кислоту или сложный бороновый эфир, которые могут быть получены известным способом. В случае преобразования в сложноэфирную группу использую монооксид углерода.

Полученное таким образом соединение 10 может быть выделено и очищено известными способами разделения и очистки, а затем использовано на следующей стадии; или оно может быть использовано на следующей стадии без выделения и очистки.

Стадия 9

Стадия 9 может проводиться тем же способом, что и стадия 5.

Стадия 10

Указанная стадия представляет собой способ получения соединения 13 путем осуществления реакции сочетания соединения 9 и соединения 12.

Соединение 12 может быть получено способом, описанным в документах (например, в WO2008/070016, WO2009/148877, WO2009/148916, WO2010/088177, WO2010/114780, WO2010/104933), или основанным на нем способом.

Указанная стадия может проводиться тем же способом, что и стадия 6.

Полученное таким образом соединение 13 может быть выделено и очищено известными способами разделения и очистки, а затем использовано на следующей стадии; или оно может быть использовано на следующей стадии без выделения и очистки.

Стадия 11

Указанная стадия представляет собой способ преобразования любого из A-D соединения 9 в любой из A1-D1, соответственно, путем проведения реакции преобразования функциональных групп и т.д. с применением общеизвестного способа.

Если любое из A-D соединения 9 содержит сложноэфирную группу, то соединение 11 получают путем преобразования сложноэфирной группы в спирт с применением общеизвестной реакции восстановления.

Полученное таким образом соединение 11 может быть выделено и очищено известными способами разделения и очистки, а затем использовано на следующей стадии; или оно может быть использовано на следующей стадии без выделения и очистки.

Стадия 12

Стадия 12 может проводиться тем же способом, что и стадия 10.

Стадия 13

Указанная стадия представляет собой способ получения соединения 14 путем проведения гидролиза при основных условиях, если любое из A-D соединения 13 содержит сложноэфирную группу.

Основание, такое как гидрокарбонат натрия, карбонат натрия, карбонат калия, карбонат цезия, гидроксид натрия, гидроксид калия и гидроксид лития, может использоваться в количестве от 1 до 100 эквивалентов, и предпочтительно от 1 до 30 эквивалентов.

Примеры используемых растворителей включают воду, метанол, этанол, изопропанол, тетрагидрофуран, 1,4-диоксан, N,N-диметилформамид. Растворители могут использоваться по отдельности или в комбинации. Время реакции составляет от 0,1 до 100 часов, и предпочтительно от 0,5 до 24 часов. Температура реакции составляет от 0°C до температуры кипения растворителя, и предпочтительно от 0 до 100°C.

Полученное таким образом соединение 14 может быть выделено и очищено известными способами разделения и очистки, а затем использовано на следующей стадии; или оно может быть использовано на следующей стадии без выделения и очистки.

Стадия 14

Указанная стадия представляет собой способ получения соединения 13 путем проведения реакции амидирования соединения 14 амином в органическом растворителе.

Амидирование может проводиться общеизвестным способом. Примеры такого способа включают способ, при котором реакцию соединения 14 с соответствующим амином проводят в присутствии агента конденсации (см. «Pepuchido Gosei No Kiso To Jikken [Foundation and Experiments of Peptide Synthesis]», Nobuo Izumiya, et al., опубликовано Maruzen Co. в 1983 г.). Полученное таким образом соединение 13 может быть выделено и очищено известными способами разделения и очистки, а затем использовано на следующей стадии; или оно может быть использовано на следующей стадии без выделения и очистки.

Стадия 15

Указанная стадия представляет собой способ получения соединения (I) снятием защитных групп с защищенных аминогрупп соединения 13. Снятие защитных групп может проводиться общеизвестным способом, например, способом, раскрытым в Protective Groups in Organic Synthesis, T.W. Greene, John Wiley & Sons (1981); или основанным на нем способом.

Примеры защитной группы включают трет-бутилоксикарбонил и фталимид. Например, при использовании в качестве защитной группы трет-бутилоксикарбонила, снятие защитных групп предпочтительно проводят в кислых условиях. Примеры кислоты включают соляную кислоту, уксусную кислоту, трифторуксусную кислоту, серную кислоту и толуолсульфоновую кислоту.

Количество используемой кислоты предпочтительно составляет приблизительно от 1 приблизительно до 100 эквивалентов относительно соединения 13.

В реакции могут использоваться любые растворители при условии, если они не оказывают негативное влияние на реакцию. Например, могут использоваться спирты (например, метанол, и т.д.), углеводороды (например, бензол, толуол, ксилол и т.д.), галогенированные углеводороды (например, хлористый метилен, хлороформ, 1,2-дихлорэтан и т.д.), нитрилы (например, ацетонитрил и т.д.), эфиры (например, диметоксиэтан, тетрагидрофуран и т.д.), апротонные полярные растворители (например, N,N-диметилформамид, диметилсульфоксид, гексаметилфосфорамид и т.д.), или их смеси. Время реакции составляет от 0,1 до 100 часов, и предпочтительно от 0,5 до 24 часов. Температура реакции составляет от 0 до 100°C, и предпочтительно от 0 до 50°C.

При использовании фталимида в качестве защитной группы может проводиться обработка гидразином. Количество используемого гидразина предпочтительно составляет от 1 до 100 эквивалентов относительно соединения 13.

Для проведения синтеза реакция может проводиться при нагревании с использованием микроволнового реактора или тому подобногоп. В реакции могут использоваться любые растворители при условии, если они не оказывают негативное влияние на реакцию. Например, могут использоваться спирты (например, метанол, этанол и т.д.), углеводороды (например, бензол, толуол, ксилол и т.д.), галогенированные углеводороды (например, хлористый метилен, хлороформ, 1,2-дихлорэтан и т.д.), нитрилы (например, ацетонитрил и т.д.), эфиры (например, диметоксиэтан, тетрагидрофуран и т.д.), апротонные полярные растворители (например, N,N-диметилформамид, диметилсульфоксид, гексаметилфосфорамид и т.д.) или их смеси. Время реакции составляет от 0,1 до 100 часов, и предпочтительно от 0,5 до 24 часов. Температура реакции составляет от 0 до 200°C, и предпочтительно от 0 до 150°C.

Полученное таким образом соединение (I) может быть выделено и очищено известными способами разделения и очистки, такими как концентрирование, концентрирование при пониженном давлении, кристаллизация, экстрагирование растворителем, повторное осаждение и хроматография.

Если соединение (I) согласно настоящему изобретению используют в качестве лекарственного средства, то при необходимости может быть добавлен фармацевтический носитель, с формированием тем самым подходящей лекарственной формы в соответствии с профилактическими или лечебными целями. Примеры лекарственной формы включают пероральные препараты, инъецируемые препараты, суппозитории, мази, пластыри и т.п. Среди них пероральные препараты являются предпочтительно используемыми. Такие лекарственные формы могут быть получены обычными способами получения, известными специалисту в данной области техники.

В качестве фармацевтического носителя, различные органические и неорганические вещества-носители, обычно используемые в качестве веществ для приготовления, могут быть смешаны в качестве наполнителя, связующего вещества, разрыхлителя, лубриканта или красителя в твердых препаратах; или в качестве растворителя, солюбилизатора, суспендирующего агента, изотонического агента, буфера или успокаивающего средства в жидких препаратах. Более того, при необходимости, может быть использована добавка к фармацевтическому препарату, такая как, антисептик, антиоксидант, краситель, подсластитель и стабилизатор.

Пероральные твердые препараты получают следующим образом. Наполнитель, необязательно вместе со связующим веществом, разрыхлителем, смазкой, красителем, подсластителм/вкусоароматизатором, и т.п., добавляют к соединению согласно настоящему изобретению с получением таблеток, таблеток с покрытием, гранул, порошков, капсул или т.п., с использованием обычного способа.

Примеры наполнителей включают лактозу, сахарозу, D-маннит, глюкозу, крахмал, карбонат кальция, каолин, микрокристаллическую целлюлозу и ангидрид кремниевой кислоты.

Примеры связующих веществ включают воду, этанол, 1-пропанол, 2-пропанол, простой сироп, жидкую глюкозу, жидкий α-крахмал, жидкий желатин, D-маннит, карбоксиметилцеллюлозу, гидроксипропилцеллюлозу, гидроксипропилкрахмал, метилцеллюлозу, этилцеллюлозу, шеллак, фосфат кальция и поливинилпирролидон.

Примеры разрыхлителей включают сухой крахмал, альгинат натрия, порошок агара, гидрокарбонат натрия, карбонат кальция, лаурилсульфат натрия, моноглицерид стеариновой кислоты и лактозу.

Примеры смазок включают очищенный тальк, стеарат натрия, стеарат магния, тетраборат натрия и полиэтиленгликоль.

Примеры красителей включают оксид титана и оксид железа.

Примеры подсластителей/вкусоароматизаторов включают сахарозу, кожуру дикого апельсина, лимонную кислоту и винную кислоту.

Пероральные жидкие препараты готовят следующим образом. Подсластитель/вкусоароматизатор, буфер, стабилизатор и т.п. добавляют к соединению согласно настоящему изобретению с получением жидкого лекарственного средства для внутреннего применения, сиропа, эликсира, и т.п., с использованием обычного способа. В этом случае, применимы описанные выше подсластители/вкусоароматизаторы. Примеры буферов включают цитрат натрия, и примеры стабилизаторов включают трагакант, аравийскую камедь и желатин. При необходимости, посредством способов, известных для пероральных препаратов, может быть нанесено кишечнорастворимое покрытие или покрытие для увеличения продолжительности эффектов. Примеры покровных средств включают гидроксипропилметилцеллюлозу, этилцеллюлозу, гидроксиметилцеллюлозу, гидроксипропилцеллюлозу, полиоксиэтиленгликоль и Твин 80 (зарегистрированная торговая марка).

Инъецируемые препараты готовят следующим образом. Регулятор рН, буфер, стабилизатор, изотоническое средство, местный анестетик и т.п. добавляют к соединению согласно настоящему изобретению с получением подкожно инъецируемого препарата, внутримышечно инъецируемого препарата или внутривенно инъецируемого препарата с использованием обычного способа. Примеры используемых в этом случае регуляторов рН и буферов включают цитрат натрия, ацетат натрия и фосфат натрия. Примеры используемых стабилизаторов включают пиросульфит натрия, EDTA, тиогликолевую кислоту и тиомолочную кислоту. Примеры используемых местных анестетиков включают гидрохлорид прокаина и гидрохлорид лидокаина. Примеры используемых изотонических средств включают хлорид натрия, глюкозу, D-маннит и глицерин.

Суппозитории готовят следующим образом. Фармацевтический носитель, известный в данной области техники, такой как полиэтиленгликоль, ланолин, какао-масло и триглицерид жирной кислоты, добавляют к соединению согласно настоящему изобретению, необязательно вместе с Твин 80 (зарегистрированная торговая марка) или подобным поверхностно-активным веществом, с последующим получением с использованием обычного способа.

Мази готовят следующим образом. Обычную основу, стабилизатор, увлажнитель, консервант и т.п. добавляют при необходимости к соединению согласно настоящему изобретению, смешивают и приготавливают с использованием обычного способа. Примеры основ включают жидкий парафин, белый вазелин, белый пчелиный воск, октилдодециловый спирт и парафин. Примеры консервантов включают метилпарагидроксибензоат, этилпарагидроксибензоат и пропилпарагидроксибензоат.

Пластыри могут быть получены путем покрытия обычной основы дополнительной мазью, кремом, гелем, пастой и т.п. с использованием обычного способа. Примеры основ включают тканые и нетканые материалы, изготовленные из хлопковых, штапельных волокон и химических волокон; и пленки и пенопластовые листы из мягкого винилхлорида, полиэтилена и полиуретана.

Количество соединения согласно настоящему изобретению, которое должно содержаться в такой стандартной лекарственной форме, варьирует в зависимости от состояния пациента или от лекарственной формы. Желаемое количество в одной стандартной лекарственной форме составляет приблизительно от 0,05 приблизительно до 1000 мг в случае перорального препарата, приблизительно от 0,01 приблизительно до 500 мг в случае инъецируемого препарата и приблизительно от 1 приблизительно до 1000 мг в случае суппозитория.

Суточная доза лекарственного средства в такой лекарственной форме зависит от состояния, массы тела, возраста, пола и т.п. пациента. Например, суточная доза для взрослого (масса тела 50 кг) может, как правило, составлять приблизительно от 0,05 приблизительно до 5000 мг и предпочтительно от 0,1 до 1000 мг, и предпочтительно вводится одной дозой или в виде двух или трех раздельных доз в сутки.

Соединение согласно настоящему изобретению представляет собой сильный ингибитор серин-треониновой киназы AKT, в частности ингибитор AKT1 и AKT2. Было выявлено, что AKT важна для различных функций, таких как клеточная пролиферация, выживаемость, метаболизм, метастазирование и инвазия. Соединение формулы (I) согласно настоящему изобретению обладает ингибирующей активностью в отношении AKT и используется в качестве средства для предупреждения или лечения рака, при которой усилена экспрессия AKT, такого как рак молочной железы, рак поджелудочной железы, рак печени, рак предстательной железы, рак желудка, рак легкого, рак яичников, рак головы и шеи, рак мочевыводящих путей и эндометриальный рак.

В описании настоящего изобретения, «противоопухолевое лекарство» используется для предупреждения/лечения рака или опухоли и/или для предупреждения рецидива рака или опухоли. Таким образом, настоящее изобретение относится к средству для предупреждения/лечения рака или опухоли, и к средству для предупреждения рецидива рака или опухоли. В настоящем документе, предупреждение рецидива означает предотвращение рецидива рака или опухоли после того, как в результате хирургического вмешательства, лучевой терапии, химиотерапии и т.п. рак или опухолевые ткани исчезают или не могут быть более обнаружены. Период введения для предотвращения рецидива обычно составляет приблизительно от 1 месяца приблизительно до 1 года, в частности, приблизительно от 3 месяцев приблизительно до 6 месяцев. Рецидив рака или опухоли может быть предотвращен путем продолжения приема противоопухолевого лекарства в течение указанного периода.

Примеры

Настоящее изобретение подробно описано ниже со ссылкой на примеры, которые не предназначены для ограничения объема настоящего изобретения. Если иное не указано особо, то реагенты, использованные в примерах, являются коммерчески доступными продуктами. Для проведения хроматографии на силикагеле использовали Purif-Pack SI производства Shoko Co. или Biotage SNAP Cartridge KP-Sil производства Biotage, и для проведения хроматографии на щелочном силикагеле использовали Purif-Pack NH производства Shoko Co. или Biotage SNAP Cartridge KP-NH производства Biotage.

Для проведения препаративной тонкослойной хроматографии использовали Kieselgel TM60F254, Art. 5744 производства Merck & Co. или NH2 Silica Gel 60 F254 Plate-Wako производства Wako. Для проведения препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии с обращенной фазой использовали CombiPrep Pro C18 (φ30×50 мм) производства YMC Co.

¹H-ЯМР спектры измеряли с использованием спектрометров AL400 (400 МГц) производства JEOL, Mercury (400 МГц) производства Varian; или Inova (400 МГц) производства Varian; используя тетраметилсилан в качестве стандартного вещества. Кроме того, масс-спектры измеряли с использованием спектрометров Micromass ZQ или SQD производства Waters с ионизацией электрораспылением (ESI) или с химической ионизацией при атмосферном давлении (APCI). Реакции с микроволновой обработкой проводили с использованием реактора Initiator производства Biotage.

Ниже определены сокращения.

с: синглет; д: дублет; т: триплет; кв: квартет; дд: двойной дублет; дт: двойной триплет; тд: тройной дублет; тт: тройной триплет; ддд: двойной двойной дублет; ддт: двойной двойной триплет; дтд: двойной тройной дублет; тдд: тройной двойной дублет; м: мультиплет; ушир.: уширенный; DMSO-d₆: дейтерированный диметилсульфоксид; CDCl₃: дейтерированный хлороформ; THF: тетрагидрофуран; DMF: N,N-диметилформамид; DMSO: диметилсульфоксид; WSC: 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлорид; HOBt: 1-гидроксибензотриазола моногидрат; Pd(PPh₃)₄: тетракис(трифенилфосфин)палладий

Справочный пример 1

10-Фтор-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин

К раствору 2-фтор-6-гидроксибензальдегида (500 мг) в метаноле (7,0 мл) добавляли 28% водный раствор аммиака (2,2 мл) и 40% водный раствор глиоксаля (1,3 мл), и перемешивали смесь при комнатной температуре в течение 5 часов. Реакционную смесь разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом. Объединенный органический слой промывали насыщенным хлоридом натрия, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали в условиях пониженного давления. Полученный остаток очищали методом хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением соответствующего имидазофенольного соединения. Полученное имидазофенольное соединение использовали в следующей реакции без дополнительной очистки. К раствору полученного имидазофенольного соединения в DMF (7,2 мл) добавляли карбонат калия (1,98 г) и дийодметан (0,44 мл), и перемешивали смесь при 80°C в течение 3 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли водой, а затем экстрагировали этилацетатом. Объединенный органический слой промывали насыщенным хлоридом натрия, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали в условиях пониженного давления. Полученный остаток очищали методом хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением целевого продукта (415 мг, выход: 61%) в виде бесцветного твердого вещества.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 7,32-7,22 (2H, м), 6,98-6,88 (3H, м), 5,82 (2H, с).

ESI-MS m/z 191(MH+)

Справочный пример 2

Справочный пример 2(1) 2-Бром-3-(1H-имидазол-2-ил)пиридин

К раствору 2-бромникотинальдегида (10 г) в метаноле (90 мл) добавляли 28% водный раствор аммиака (50 мл) и 40% водный раствор глиоксаля (50 мл), и перемешивали смесь при комнатной температуре в течение 14 часов. Реакционную смесь фильтровали, и концентрировали фильтрат в условиях пониженного давления. Полученный остаток очищали методом хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением целевого продукта (4,62 г, выход: 38%) в виде бесцветного твердого вещества.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 10,71-10,28 (1H, уш.м), 8,61 (1H, дд, J=7,8, 2,0 Гц), 8,35 (1H, дд, J=4,6, 2,0 Гц), 7,40 (1H, дд, J=7,8, 4,6 Гц), 7,30-7,23 (2H, уш.м).

ESI-MS m/z 224,226 (MH+)

Справочный пример 2(2) 5H-имидазо[1,2-c]пиридо[3,2-e][1,3]оксазин

К раствору продукта (44,8 мг), полученного в справочном примере 2(1), в 2-пропаноле (2,0 мл) добавляли гидроксид калия (66 мг) и 37% водный раствор формалина (0,20 мл), и перемешивали смесь при 80°C в течение 14 часов. После охлаждения до комнатной температуры, реакционную смесь концентрировали в условиях пониженного давления. Полученный остаток очищали методом хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением целевого продукта (16,7 мг, выход: 48%) в виде бесцветного твердого вещества.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,29-8,24 (2H, м), 7,25 (1H, д, J=1,2 Гц), 7,17 (1H, дд, J=7,3, 5,1 Гц), 6,98 (1H, д, J=1,2 Гц), 6,01 (2H, с).

ESI-MS m/z 174(MH+)

Справочные примеры 3-21

Соединения, представленные ниже в таблице 1, синтезировали в соответствии с любым способом, представленным в справочном примере 1 или 2.

Таблица 1 Справочный пример Исходное вещество Целевой продукт Способ получения 3 Справочный пример 1 4 Справочный пример 1 5 Справочный пример 1 6 Справочный пример 1 7 Справочный пример 1 8 Справочный пример 1 9 Справочный пример 1 10 Справочный пример 1

11 Справочный пример 1 12 Справочный пример 1 13 Справочный пример 1 14 Справочный пример 1 15 Справочный пример 1 16 Справочный пример 1 17 Справочный пример 1 18 Справочный пример 1 19 Справочный пример 1

20 Справочный пример 1 21 Справочный пример 1

Соединения справочных примеров 20 и 21, представленных в таблице 1, синтезировали следующими способами в соответствии со способом, представленным в справочном примере 1, или способом, представленным в справочном примере 2, с использованием коммерчески доступных исходных веществ, представленных в таблице, или исходных веществ, которые могут быть синтезированы известным способом.

Справочный пример 20

Справочный пример 20(1) 2-(1H-имидазол-2-ил)-3-метоксипиразин

К раствору 3-метоксипиразин-2-карбальдегида (480 мг) в метаноле (7,5 мл) добавляли 40% водный раствор глиоксаля (0,80 мл), и медленно по каплям добавляли 28% водный аммиак (1,94 мл) при 8°C. Реакционную смесь перемешивали в течение 10 минут, а затем перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Остаток, полученный путем концентрирования реакционной смеси в условиях пониженного давления, очищали методом хроматографии на щелочном силикагеле (хлороформ/метанол) с получением целевого продукта (410 мг, выход: 66%) в виде светло-коричневато-красного аморфного вещества.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 10,52 (1H, уш.с), 8,25 (1H, д, J=2,4 Гц), 8,10 (1H, д, J=2,4 Гц), 7,38 (1H, уш.с), 7,21 (1H, уш., с), 4,20 (3H, с).

ESI-MS m/z 177 (MH+)

Справочный пример 20(2) 5H-имидазо[1,2-c]пиразино[2,3-e][1,3]оксазин

Раствор продукта (460 мг), полученного в справочном примере 20(1), в 5M соляной кислоте (15 мл) перемешивали при 120°C в течение 30 минут с использованием микроволнового реактора. Реакционную смесь охлаждали, подвергали азеотропной перегонке с этанолом и концентрировали в условиях пониженного давления. К раствору полученного остатка в DMF (50 мл) добавляли карбонат калия (1,79 г) и дийодметан (0,42 мл), и перемешивали смесь при 80°C в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой и хлороформом, и экстрагировали хлороформом. Объединенный органический слой промывали водой и насыщенным хлоридом натрия, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали в условиях пониженного давления. Полученный остаток очищали методом препаративной тонкослойной хроматографии на силикагеле (хлороформ/метанол) с получением целевого продукта (36 мг, выход: 8%) в виде бесцветного твердого вещества.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,43 (1H, д, J=2,8 Гц), 8,19 (1H, д, J=2,8 Гц), 7,41 (1H, д, J=1,2 Гц), 7,06 (1H, д, J=1,2 Гц), 6,11 (2H, с).

ESI-MS m/z 175 (MH+)

Справочный пример 21

Справочный пример 21(1) Метил-6-бром-3-(метоксиметокси)пиколинат

К раствору метил-6-бром-3-гидроксипиридин-2-карбоксилата (970 мг) в хлороформе (20 мл) добавляли диизопропилэтиламин (1,46 мл) и помещали в атмосферу азота. Затем, реакционную смесь охлаждали до 0°C, и добавляли к ней хлорметоксиметан (0,38 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 5 минут, а затем перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь охлаждали до 0°C, разбавляли водой и экстрагировали хлороформом. Объединенный органический слой промывали насыщенным хлоридом натрия, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали в условиях пониженного давления. Полученный остаток очищали методом хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением целевого продукта (1,22 г, выход: 100%) в виде бесцветного масла.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 7,54 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,51 (1H, д, J=8,8 Гц), 5,26 (2H, с), 3,96 (3H, с), 3,51 (3H, с).

ESI-MS m/z 276,278(MH+)

Справочный пример 21(2) 6-Бром-3-(метоксиметокси)пиколинальдегид

Раствор продукта (1,22 г), полученного в справочном примере 21(1), в THF (20 мл) помещали в атмосферу азота. Реакционную смесь затем охлаждали до -78°C, и добавляли к ней 0,99 M раствор диизобутилалюминийгидрида в толуоле (5,08 мл). Реакционную смесь перемешивали при -78°C в течение 1 часа. Затем, к смеси добавляли еще 0,99 M раствор диизобутилалюминийгидрида в толуоле (0,51 мл), и перемешивали смесь при -78°C в течение 1 часа. К реакционной смеси добавляли насыщенный водный раствор сегнетовой соли, а затем нагревали смесь до комнатной температуры. Реакционную смесь экстрагировали этилацетатом. Объединенный органический слой промывали насыщенным хлоридом натрия, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали в условиях пониженного давления с получением целевого продукта (1,03 г, выход: 100%) в виде бесцветного масла.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 10,20 (1H, с), 7,61 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,58 (1H, д, J=8,8 Гц), 5,33 (2H, с), 3,52 (3H, с).

ESI-MS m/z 246,248 (MH+)

Справочный пример 21(3) 6-Бром-2-(1H-имидазол-2-ил)-3-(метоксиметокси)пиридин

К раствору продукта (1,03 г), полученного в справочном примере 21(2), в метаноле (16 мл) добавляли 40% водный раствор глиоксаля (0,96 мл), и медленно в условиях охлаждения на льду по каплям добавляли 28% водный аммиак (2,32 мл). После перемешивания при комнатной температуре в течение 4 часов, реакционную смесь концентрировали в условиях пониженного давления. Полученный остаток очищали методом хроматографии на щелочном силикагеле (хлороформ/метанол) с получением целевого продукта (0,91 г, выход: 77%) в виде бледно-желтовато-коричневого твердого вещества.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 10,46 (1H, уш.с), 7,53 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,35 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,33 (1H, уш.с), 7,17 (1H, уш.с), 5,39 (2H, с), 3,54 (3H, с).

ESI-MS m/z 284,286 (MH+)

Справочный пример 21(4) 9-Бром-5H-имидазо[1,2-c]пиридо[2,3-e][1,3]оксазин

К раствору продукта (0,91 г), полученного в справочном примере 21(3), в хлороформе (12 мл) по каплям в условиях охлаждения на льду добавляли трифторуксусную кислоту (6,0 мл). После перемешивания при комнатной температуре в течение 14 часов, реакционную смесь подвергали азеотропной перегонке с толуолом/хлороформом и концентрировали в условиях пониженного давления. К полученному остатку добавляли DMF (20 мл), карбонат калия (2,22 г) и дийодметан (0,52 мл), и перемешивали смесь при 80°C в течение полутора часов. Затем к смеси добавляли еще карбонат калия (0,22 г) и дийодметан (0,052 мл), и перемешивали смесь при 80°C в течение 30 минут. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой и хлороформом, и фильтровали через целит. Полученный фильтрат экстрагировали 10% раствором метанола в хлороформе. Объединенный органический слой промывали насыщенным хлоридом натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, подвергали азеотропной перегонке с толуолом и концентрировали в условиях пониженного давления. Полученный остаток очищали методом хроматографии на щелочном силикагеле (хлороформ/метанол) с получением целевого продукта (0,67 г, выход: 82%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 7,38 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,34 (1H, д, J=1,2 Гц), 7,24 (1H, д, J=8,8 Гц), 6,99 (1H, д, J=1,2 Гц), 5,89 (2H, с).

ESI-MS m/z 252,254 (MH+)

Справочный пример 22

Справочный пример 22(1) 3-Бром-10-фтор-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин

Раствор продукта (349 мг), полученного в справочном примере 1, в хлороформе (7,0 мл) охлаждали до 0°C. К раствору добавляли N-бромсукцинимид (343 мг), и перемешивали смесь при 0°C в течение 1 часа. Реакционную смесь очищали методом хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением целевого продукта (360 мг, выход: 73%) в виде бесцветного твердого вещества.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 7,32-7,26 (1H, м), 7,25 (1H, с), 6,99-6,91 (2H, м), 5,78 (2H, с).

ESI-MS m/z 269,271 (MH+).

Справочный пример 22(2) 2-Бром-10-фтор-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин

К раствору продукта (513 мг), полученного в справочном примере 22(1), в 1,4-диоксане (10 мл) и воде (1,3 мл) добавляли фенилбороновую кислоту (349 мг) и карбонат цезия (1,55 г), и помещали смесь в атмосферу азота. К смеси добавляли Pd(PPh₃)₄ (221 мг), и перемешивали смесь при 100°C в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли этилацетатом, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали в условиях пониженного давления. Полученный остаток очищали методом хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением соответствующего продукта сочетания. Полученный продукт сочетания использовали в следующей реакции без дополнительной очистки. Раствор полученного продукта сочетания в хлороформе (5,0 мл) охлаждали до 0°C. К раствору добавляли N-бромсукцинимид (380 мг), и перемешивали смесь при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь очищали методом хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением целевого продукта (602 мг, выход: 91%) в виде бесцветного твердого вещества.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 7,55-7,42 (5H, м), 7,32-7,27 (1H, м), 6,99-6,94 (1H, м), 6,92-6,89 (1H, м), 5,73 (2H, с).

ESI-MS m/z 345,347(MH+).

Справочный пример 23

Справочный пример 23(1) 3,9-Дибром-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин

Целевой продукт (389 мг, выход: 98%) получали в виде бесцветного твердого вещества тем же способом, что и описанный в справочном примере 22(1), с использованием в реакции продукта (300 мг), полученного в справочном примере 15.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,03 (1H, д, J=2,4 Гц), 7,41 (1H, дд, J=8,8, 2,4 Гц), 7,16 (1H, с), 6,96 (1H, д, J=8,8 Гц), 5,76 (2H, с).

ESI-MS m/z 331 (MH+).

Справочный пример 23(2) 9-Бром-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин

К раствору продукта (9,44 г), полученного в справочном примере 23(1), в 1,4-диоксане (250 мл) и воде (40 мл) добавляли фенилбороновую кислоту (3,35 г) и карбонат цезия (23,3 г), и помещали смесь в атмосферу азота. Затем, к смеси добавляли Pd(PPh₃)₄ (3,30 г), и перемешивали смесь при комнатной температуре в течение 14 часов и при 50°C в течение 5 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли этилацетатом, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали в условиях пониженного давления. Полученный остаток очищали методом хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением целевого продукта (7,32 г, выход: 78%) в виде бесцветного твердого вещества.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,11 (1H, д, J=2,4 Гц), 7,50-7,32 (6H, м), 7,28 (1H, с), 6,95 (1H, д, J=8,5 Гц), 5,84 (2H, с).

ESI-MS m/z327,329(MH+).

Справочный пример 23(3) Метил-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-9-карбоксилат

К раствору продукта (5,0 г), полученного в справочном примере 23(2), в DMF (30 мл) и метаноле (30 мл) добавляли диизопропилэтиламин (8,0 мл) и комплекс дихлор[1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]палладия(II) и дихлорметана (1,38 г), и помещали смесь в атмосферу моноксида углерода, а затем перемешивали при 70°C в течение 28 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и экстрагировали этилацетатом. Объединенный органический слой промывали насыщенным хлоридом натрия, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали в условиях пониженного давления. Полученный остаток очищали методом хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением целевого продукта (2,12 г, 45%) в виде бесцветного твердого вещества.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,70 (1H, д, J=2,0 Гц), 8,02 (1H, дд, J=8,5, 2,0 Гц), 7,52-7,46 (2H, м), 7,44-7,36 (3H, м), 7,31 (1H, с), 7,13 (1H, д, J=8,5 Гц), 5,93 (2H, с), 3,93 (3H, с).

ESI-MS m/z 307 (MH+).

Справочный пример 23(4) Метил-2-бром-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-9-карбоксилат

К раствору продукта (1,0 г), полученного в справочном примере 23(3), в хлороформе (16 мл) добавляли N-бромсукцинимид (754 мг), и перемешивали смесь при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь фильтровали, и промывали остаток хлороформом с получением целевого продукта (800 мг, выход: 64%) в виде бесцветного твердого вещества.

¹H-ЯМР (CDCl ₃) δ: 8,71 (1H, д, J=2,0 Гц), 8,04 (1H, дд, J=8,5, 2,0 Гц), 7,56-7,42 (5H, м), 7,12 (1H, д, J=8,5 Гц), 5,80 (2H, с), 3,93 (3 H, с).

ESI-MS m/z 385,387 (MH+).

Справочный пример 24

(2-Бром-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-9-ил)метанол

Раствор продукта (550 мг), полученного в справочном примере 23(4), в хлористом метилене (14 мл) охлаждали до 0°C. К раствору добавляли 0,99 M раствора диизобутилалюминийгидрида в толуоле (4,3 мл), и перемешивали смесь при 0°C в течение 1 часа. К реакционной смеси добавляли насыщенный раствор сегнетовой соли, после чего смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь экстрагировали этилацетатом. Объединенный органический слой промывали насыщенным хлоридом натрия, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали в условиях пониженного давления. Полученный остаток очищали методом хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением целевого продукта (397 мг, выход: 78%) в виде бесцветного твердого вещества.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 7,98 (1H, д, J=2,0 Гц), 7,55-7,42 (5H, м), 7,37 (1H, дд, J=8,3, 2,2 Гц), 7,07 (1H, д, J=8,3 Гц), 5,73 (2H, с), 4,74-4,70 (2H, уш.м).

ESI-MS m/z 357, 359 (MH+).

Справочный пример 25

2-Бром-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-9-карбонитрил

К раствору продукта (500 мг), полученного в справочном примере 23(2), в 1,4-диоксане (3,0 мл) и DMF (3,0 мл) в атмосфере азота добавляли цианид цинка (360 мг) и ди-трет-бутилпалладий (78,2 мг), и перемешивали смесь при 100°C в течение 3 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли этилацетатом и фильтровали. Фильтрат последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным хлоридом натрия, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали в условиях пониженного давления. Полученный остаток очищали методом хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением соответствующего цианосоединения. Цианосоединение использовали в следующей реакции без дополнительной очистки. К раствору полученного цианосоединения в хлороформе (8,0 мл) добавляли N-бромсукцинимид (352 мг), и перемешивали смесь при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь фильтровали, и промывали остаток хлороформом с получением целевого продукта (207 мг, выход: 36%) в виде бесцветного твердого вещества.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,26 (1H, д, J=2,0 Гц), 7,58 (1H, дд, J=8,5, 2,0 Гц), 7,53-7,40 (5H, м), 7,14 (1H, д, J=8,5 Гц), 5,80 (2H, с).

ESI-MS m/z 352,354 (MH+).

Справочный пример 26

2-Бром-3-фенил-9-(1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-5-ил)-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин

К раствору продукта (100 мг), полученного в справочном примере 23(2), в 1,4-диоксане (3,0 мл) и воде (0,5 мл) добавляли 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол (198 мг) и карбонат цезия (250 мг), и помещали смесь в атмосферу азота. Затем, к смеси добавляли Pd(PPh₃)₄ (35,4 мг), и перемешивали смесь при 100°C в течение 1 часа. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли этилацетатом, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали в условиях пониженного давления. Полученный остаток очищали методом хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением соответствующего продукта сочетания. Полученный продукт сочетания использовали в следующей реакции без дополнительной очистки. К раствору полученного продукта сочетания в хлороформе (3,0 мл) добавляли N-бромсукцинимид (65,4 мг), и перемешивали смесь при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь очищали методом хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением целевого продукта (150 мг, выход: 93%) в виде бесцветного твердого вещества.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,16 (1H, д, J=2,2 Гц), 7,70 (1H, дд, J=8,3, 2,2 Гц), 7,57 (1H, д, J=1,7 Гц), 7,54-7,42 (5H, м), 7,15 (1H, д, J=8,3 Гц), 6,45 (1H, д, J=1,7 Гц), 5,77 (2H, с), 5,45 (2H, с), 3,77-3,71 (2H, м), 0,99-0,94 (2H, м), 0,00 (9H, с).

ESI-MS m/z 523,525(MH+).

Справочный пример 27

2-Бром-3-фенил-9-(1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-4-ил)-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин

К раствору продукта (100 мг), полученного в справочном примере 23(2), в 1,4-диоксане (3,0 мл) и воде (0,5 мл) добавляли 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол (148 мг) и карбонат цезия (250 мг), и помещали смесь в атмосферу азота. Затем, к смеси добавляли Pd(PPh₃)₄ (35,4 мг), и перемешивали смесь при 100°C в течение 1,5 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли этилацетатом, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали в условиях пониженного давления. Полученный остаток очищали методом хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением соответствующего продукта сочетания. Полученный продукт сочетания использовали в следующей реакции без дополнительной очистки. К раствору полученного продукта сочетания в хлороформе (3,0 мл) добавляли N-бромсукцинимид (60,0 мг), и перемешивали смесь при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь очищали методом хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением целевого продукта (120 мг, выход: 75%) в виде бесцветного твердого вещества.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,12 (1H, д, J=2,2 Гц), 7,86-7,85 (2H, м), 7,55-7,43 (6H, м), 7,09 (1H, д, J=8,5 Гц), 5,75 (2H, с), 5,46 (2H, с), 3,64-3,58 (2H, м), 0,97-0,92 (2H, м), 0,00 (9H, с).

ESI-MS m/z 523,525 (MH+).

Справочный пример 28

9-Метил-5H-имидазо[1,2-c]пиридо[2,3-e][1,3]оксазин

К раствору продукта (50 мг), полученного в справочном примере 21(4), в 1,4-диоксане (2,0 мл) и воде (0,32 мл) добавляли метилбороновую кислоту (17,8 мг) и карбонат цезия (162 мг), и помещали смесь в атмосферу азота. Затем, к смеси добавляли Pd(PPh₃)₄ (22,9 мг), и перемешивали смесь при 80°C в течение 4 часов. К реакционной смеси добавляли метилбороновую кислоту (17,8 мг), и перемешивали смесь при 110°C в течение 2 часов. К смеси дополнительно добавляли метилбороновую кислоту (17,8 мг), и перемешивали смесь при 110°C в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой и экстрагировали хлороформом. Объединенный органический слой промывали насыщенным хлоридом натрия, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали в условиях пониженного давления. Полученный остаток очищали методом хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением целевого продукта (15,2 мг, выход: 41%) в виде бесцветного масла.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 7,30 (1H, д, J=1,2 Гц), 7,26 (1H, д, J=8,4 Гц), 7,08 (1H, д, J=8,4 Гц), 6,97 (1H, д, J=1,2 Гц), 5,84 (2H, с), 2,60 (3H, с).

ESI-MS m/z 188 (MH+).

Справочный пример 29

9-Метокси-5H-имидазо[1,2-c]пиридо[2,3-e][1,3]оксазин

Раствор продукта (80 мг), полученного в справочном примере 21(4), в метаноле (2,0 мл) добавляли к 25 масс.% раствору метоксида натрия в метаноле (0,36 мл), и перемешивали смесь при 110°C в течение 22 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой и хлороформом и экстрагировали хлороформом. Объединенный органический слой промывали насыщенным хлоридом натрия, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали в условиях пониженного давления. Полученный остаток очищали методом препаративной тонкослойной хроматографии на щелочном силикагеле (хлороформ/метанол) с получением целевого продукта (58,4 мг, выход: 91%) в виде бесцветного твердого вещества.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 7,32 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,31-7,30 (1H, м), 6,96 (1H, д, J=0,8 Гц), 6,71 (1H, д, J=8,8 Гц), 5,81 (2H, с), 4,05 (3H, с).

ESI-MS m/z 204 (MH+).

Справочные примеры 30-55

Соединения, представленные ниже в таблице 2, синтезировали в соответствии с любым способом, представленным в справочных примерах 22-25.

Таблица 2 Справочный пример Исходное вещество Борная кислота или слож-ный эфир борной кислоты Целевой продукт Способ получения 30 Справочный пример 1 Справочный пример 22 31 Справочный пример 1 Справочный пример 22 32 Справочный пример 3 Справочный пример 22 33 Справочный пример 4 Справочный пример 22 34 Справочный пример 5 Справочный пример 22 35 Справочный пример 6 Справочный пример 22

36 Справочный пример 6 Справочный пример 22 37 Справочный пример 6 Справочный пример 22 38 Справочный пример 7 Справочный пример 22 39 Справочный пример 8 Справочный пример 22 40 Справочный пример 9 Справочный пример 22 41 Справочный пример 10 Справочный пример 22 42 Справочный пример 11 Справочный пример 22 43 Справочный пример 12 Справочный пример 22 44 Справочный пример 13 Справочный пример 22

45 Справочный пример 14 Справочный пример 22 46 Справочный пример 17 Справочный пример 22 47 Справочный пример 18 Справочный пример 22 48 Справочный пример 19 Справочный пример 22 49 Справочный пример 2 Справочный пример 22 50 Справочный пример 20 Справочный пример 22 51 Справочный пример 16 Справочный пример 23 52 Справочный пример 16 Справочный пример 24 53 Справочный пример 16 Справочный пример 25

54 Справочный пример 28 Справочный пример 22 55 Справочный пример 29 Справочный пример 22

Справочный пример 56

Справочный пример 56(1) 1-(4-бромфенил)циклобутанкарбонитрил

Раствор гидроксида калия (56,5 г) и тетрабутиламмония бромида (2,92 г) в толуоле (400 мл) и воде (30 мл) нагревали до 70°C. Затем, к раствору последовательно добавляли 1,3-дибромпропан (39,0 г) и 2-(4-бромфенил)ацетонитрил (35,5 г), и перемешивали смесь при 100°C в течение 3 часов. После охлаждения реакционной смеси до 80°C, к ней добавляли гептан (100 мл), и дополнительно охлаждали смесь до комнатной температуры. Реакционную смесь фильтровали и промывали гексаном, и разделяли органический слой. Полученный органический слой промывали насыщенным хлоридом натрия, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали в условиях пониженного давления. Полученный остаток очищали методом хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением целевого продукта (24,0 г, выход: 56%) в виде бесцветного масла.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 7,53 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,29 (2H, д, J=8,8 Гц), 2,87-2,79 (2H, м), 2,63-2,54 (2H, м), 2,50-2,38 (1H, м), 2,13-2,03 (1H, м).

ESI-MS m/z 236, 238 (MH+).

Справочный пример 56(2) 1-(4-Бромфенил)циклобутанкарбоновая кислота

К раствору продукта (24,0 г), полученного в справочном примере 56(1), в бутаноле (100 мл) добавляли 50% водный раствор гидроксида натрия (35 мл), и перемешивали смесь при 120°C в течение 14 часов. После охлаждения до комнатной температуры, к реакционной смеси добавляли воду (100 мл), а затем промывали эфиром. Эфирный слой дополнительно дважды экстрагировали 1 M водным раствором гидроксида натрия (50 мл). К объединенному водному слою добавляли 5 M соляную кислоту, доводили значение pH до 2, а затем экстрагировали этилацетатом. Объединенный органический слой промывали насыщенным хлоридом натрия, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали в условиях пониженного давления. Путем добавления к полученному остатку гексана и проведения фильтрования получали целевой продукт (20,4 г, выход: 79%) в виде бесцветного твердого вещества.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 7,45 (2 H, д, J=8,5 Гц), 7,17 (2H, д, J=8,5 Гц), 2,88-2,79 (2H, м), 2,53-2,43 (2 H, м), 2,15-2,02 (1 H, м), 1,93-1,81 (1H, м).

ESI-MS m/z 255, 257 (MH+).

Справочный пример 56(3) трет-Бутил-1-(4-бромфенил)циклобутилкарбамат

К раствору продукта (12,7 г), полученного в справочном примере 56(2), в THF (150 мл) последовательно добавляли ди-трет-бутилдикарбонат (12,0 г), азид натрия (11,3 г), тетрабутиламмония бромид (2,41 г) и цинка трифторметансульфонат (181 мг), и смесь нагревали с обратным холодильником в течение 14 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли этилацетатом и водой и экстрагировали этилацетатом. Объединенный органический слой промывали насыщенным хлоридом натрия, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали в условиях пониженного давления. Полученный остаток очищали методом хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением целевого продукта (14,7 г, выход: 91%) в виде бесцветного твердого вещества.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 7,45 (2H, д, J=8,5 Гц), 7,30 (2H, д, J=8,5 Гц), 5,08 (1H, уш.с), 2,56-2,43 (4H, м), 2,16-2,04 (1H, м), 1,91-1,79 (1H, м), 1,37 (9H, с).

ESI-MS m/z 326, 328 (MH+).

Справочный пример 56(4) трет-Бутил-1-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)циклобутилкарбамат

К раствору продукта (3,21 г), полученного в справочном примере 56(3), в DMF (25 мл) последовательно добавляли калия ацетат (2,41 г) и 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-би(1,3,2-диоксаборолан) (6,25 г), и помещали смесь в атмосферу азота. К смеси добавляли комплекс дихлор[1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]палладия(II) и дихлорметана (360 мг), и перемешивали смесь при 80°C в течение 10 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, добавляли к ней воду, а затем экстрагировали этилацетатом. Объединенный органический слой промывали насыщенным хлоридом натрия, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали в условиях пониженного давления. Полученный остаток очищали методом хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением целевого продукта (3,20 г, выход: 87%) в виде бесцветного твердого вещества.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 7,79 (2H, д, J=8,0 Гц), 7,43 (2H, д, J=8,0 Гц), 5,07 (1H, уш.с), 2,59-2,31 (4H, м), 2,14-2,03 (1H, м), 1,90-1,78 (1H, м), 1,36 (9H, с), 1,34 (12H, с).

ESI-MS m/z 374 (MH+).

Справочный пример 57

Справочный пример 57(1) цис-1-(4-Бромфенил)-3-гидроксициклобутанкарбоновая кислота

Раствор 4-бромфенилуксусной кислоты (107,8 г) в THF (100 мл) при перемешивании в условиях охлаждения на льду по каплям добавляли к раствору 2 M изопропилмагнийхлорида в THF (560 мл), смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 1 часа. К полученной суспензии при комнатной температуре по каплям добавляли эпихлоргидрин (73 мл), и смесь нагревали от 26°C до температуры реакции, охлаждали, и перемешивали в течение 3 часов с поддержанием указанной температуры. К полученной темно-коричневой реакционной смеси при комнатной температуре по каплям добавляли раствор 2 M изопропилмагнийхлорида в THF (560 мл), и перемешивали смесь в течение ночи на водяной бане. К реакционной смеси в условиях охлаждения на льду осторожно добавляли 2 M соляную кислоту (900 мл), и экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали 1 M соляной кислотой, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали в условиях пониженного давления. Полученный остаток суспендировали в этилацетате, твердое вещество отделяли фильтрованием, а затем промывали этилацетатом и сушили в условиях пониженного давления, с получением целевого продукта (91,46 г, выход: 68%) в виде бесцветного твердого вещества.

¹H-ЯМР (CD₃OD) δ: 7,49 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,34 (2H, д, J=8,8 Гц), 4,01 (1H, кв., J=7,3 Гц), 2,88-2,80 (2H, м), 2,69-2,61 (2H, м).

ESI-MS m/z 269, 271 (MH-).

Справочный пример 57(2) Метил-цис-1-(4-бромфенил)-3-гидроксициклобутанкарбоксилат

Продукт (116,0 г), полученный в справочном примере 57(1), растворяли в метаноле (500 мл). К нему при комнатной температуре добавляли концентрированную серную кислоту (3,5 мл), и нагревали смесь с обратным холодильником в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали в условиях пониженного давления для удаления метанола, разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом. Объединенный органический слой промывали 1M водным раствором гидроксида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали в условиях пониженного давления с получением целевого продукта (112,5 г, выход: 99%) в виде светло-желтого твердого вещества.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 7,47 (2H, д, J=8,5 Гц), 7,22 (2H, д, J=8,5 Гц), 4,19 (1H, м), 3,64 (3H, с), 2,93-2,85 (2H, м), 2,76-2,69 (2H, м), 2,21 (1H, д, J=6,3 Гц).

Справочный пример 57(3) Метил-1-(4-бромфенил)-3-оксоциклобутанкарбоксилат

Продукт (112,5 г), полученный в справочном примере 57(2), растворяли в хлороформе (500 мл), и добавляли к нему N-метилморфолин-N-оксид (63,3 г) и измельченные 4А молекулярные сита (120 г). Смесь охлаждали на льду, добавляли к ней тетра-н-пропиламмония перрутенат (2,76 г), и перемешивали смесь в течение 24 часов в процессе нагревания до комнатной температуры. Реакционную смесь разбавляли гексаном, адсорбировали на силикагеле, элюировали смесью гексана/этилацетата (3/1), и концентрировали элюат в условиях пониженного давления. Полученное светло-желтое твердое вещество суспендировали в гексане, твердое вещество отделяли фильтрованием, а затем промывали гексаном и сушили в условиях пониженного давления с получением целевого продукта (83,4 г, выход: 69%) в виде бесцветного твердого вещества.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 7,52 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,24 (2H, д, J=8,8 Гц), 3,95-3,87 (2H, м), 3,71 (3H, с), 3,57-3,49 (2H, м).

Справочный пример 57(4)

транс-3-Амино-3-(4-бромфенил)-1-циклопропилциклобутанол

Раствор продукта (18,57 г), полученного в справочном примере 57(3), в толуоле (200 мл) охлаждали до -40°C, и по каплям добавляли к нему раствор 0,7 M циклопропилмагнийбромида в THF (310 мл). После перемешивания при -40°C в течение 15 минут и при 0°C в течение 3 часов, к реакционной смеси осторожно добавляли лед, а затем насыщенный водный раствор хлорида аммония, и экстрагировали этилацетатом. Объединенный органический слой сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали в условиях пониженного давления. Полученный остаток растворяли в 1,4-диоксане (100 мл), при комнатной температуре добавляли к нему 1 M водный раствор гидроксида натрия (150 мл), а затем перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали в условиях пониженного давления, и удаляли 1,4-диоксан. Водный слой промывали толуолом. Полученный водный раствор подкисляли добавлением 2 M соляной кислоты и экстрагировали этилацетатом. Объединенный органический слой сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали в условиях пониженного давления. Полученный остаток растворяли в 1,4-диоксане (215 мл), и при комнатной температуре добавляли к нему N,N-диизопропилэтиламин (7,60 мл) и трифенилфосфорилазид (8,77 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов, а затем при 63°C в течение 4 часов, и охлаждали до комнатной температуры. Полученную реакционную смесь по каплям добавляли к энергично перемешиваемой 0,5 M соляной кислоте (1000 мл), и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Реакционную смесь промывали этилацетатом, и подщелачивали полученный водный раствор добавлением 2M водного раствора гидроксида натрия. После растворения хлорида натрия до насыщения, проводили экстрагирование хлороформом. Объединенный органический слой сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали в условиях пониженного давления с получением целевого продукта (5,52 г, выход: 30%) в виде светло-желтого масла.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 7,46 (2Н, д, J=8,8 Гц), 7,34 (2Н, д, J=8,8 Гц), 2,60-2,54 (2Н, м), 2,31-2,26 (2Н, м), 1,36-1,29 (1Н, м), 0,61-0,55 (2Н, м), 0,47-0,42 (2Н, м).

ESI-MS m/z 282, 284 (MH+).

Справочный пример 57(5) 2-(транс-1-(4-бромфенил)-3-циклопропил-3-гидроксициклобутил)изоиндолин-1,3-дион

К раствору продукта (882 мг), полученного в справочном примере 57(4), в хлороформе (15,6 мл) добавляли триэтиламин (0,52 мл) и N-этоксикарбонилфталимид (683 мг), и перемешивали смесь при 70°C в течение 38 часов. Реакционную смесь охлаждали, разбавляли водой и экстрагировали хлороформом. Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали в условиях пониженного давления. Полученный остаток очищали методом хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением целевого продукта (1,18 г, выход: 92%) в виде бесцветного твердого вещества.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 7,77-7,73 (2Н, м), 7,70-7,66 (2Н, м), 7,60-7,56 (2Н, м), 7,47-7,43 (2Н, м), 3,11-2,99 (4Н, м), 1,49 (1Н, с), 1,16-1,12 (1Н, м), 0,51-0,45 (2Н, м), 0,32-0,27 (2Н, м).

Справочный пример 57(6)

2-(транс-3-Циклопропил-3-гидрокси-1-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)циклобутил)изоиндолин-1,3-дион

К раствору продукта (1,26 г), полученного в справочном примере 57(5), в 1,4-диоксане (15 мл) добавляли 4,4,4',4',5,5,5',5'-октааметил-2,2'-би(1,3,2-диоксаборолан) (1,14 г), калия ацетат (883 мг) и комплекс дихлор(1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен)палладия(II) и дихлорметана (245 мг), и перемешивали смесь в атмосфере азота при 80°C в течение 16 часов. Реакционную смесь охлаждали, разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом. Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали в условиях пониженного давления. Полученный остаток очищали методом хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) и концентрировали в условиях пониженного давления. Полученное твердое вещество промывали этилацетатом/гексаном с получением целевого продукта (1,12 г, выход: 81%) в виде бесцветного твердого вещества.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 7,81-7,63 (8H, м), 3,14-3,05 (4H, м), 1,49 (1H, с), 1,32 (12H, с), 1,16-1,10 (1H, м), 0,50-0,44 (2H, м), 0,33-0,28 (2H, м).

Справочный пример 58

Справочный пример 58(1) транс-1-(4-Бромфенил)-3-гидрокси-3-метилциклобутанкарбоновая кислота

Раствор продукта (11,62 г), полученного в справочном примере 57(3), в THF (210 мл) охлаждали до -40°C, и по каплям добавляли раствор 3 M метилмагнийхлорида в THF (48 мл). После перемешивания при -40°C в течение 15 минут и при 0°C в течение 2 часов, к реакционной смеси осторожно добавляли лед, а затем насыщенный водный раствор хлорида аммония, и экстрагировали этилацетатом. Объединенный органический слой сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали в условиях пониженного давления. Полученный остаток растворяли в 1,4-диоксане (60 мл), к нему при комнатной температуре добавляли 1 M водный раствор гидроксида натрия (62 мл), а затем перемешивали в течение ночи. Полученную реакционную смесь концентрировали в условиях пониженного давления для удаления 1,4-диоксана и вливали в 0,5 M водный раствор гидроксида натрия, и промывали водный слой этилацетатом. Полученный щелочной водный раствор подкисляли добавлением 2 M соляной кислоты и экстрагировали этилацетатом. Объединенный органический слой сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали в условиях пониженного давления. Полученный остаток кристаллизовали из смеси хлороформа/гексана с получением целевого продукта (5,92 г, выход: 51%) в виде бесцветного твердого вещества.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 7,45 (2Н, д, J=8,5 Гц), 7,17 (2Н, д, J=8,5 Гц), 3,09-3,04 (2Н, м), 2,62-2,56 (2Н, м), 1,43 (3Н, с).

ESI-MS m/z 283, 285 (MH-).

Справочный пример 58(2)

транс-3-Амино-3-(4-бромфенил)-1-метилциклобутанол

К раствору продукта (4,28 г), полученного в справочном примере 58(1), в 1,4-диоксане (60 мл) добавляли триэтиламин (2,20 мл) и дифенилфосфорилазид (3,40 мл), и перемешивали смесь при 80°C в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, добавляли к охлажденной на льду 1 M соляной кислоте (60 мл), и перемешивали смесь при комнатной температуре в течение 2 часов. К реакционной смеси добавляли воду, смесь промывали диэтиловым эфиром, подщелачивали добавлением 5 M раствора гидроксида натрия, и экстрагировали хлороформом. Объединенный органический слой сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали в условиях пониженного давления с получением целевого продукта (3,23 г, выход: 84%) в виде бесцветного масла.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 7,49-7,43 (2Н, м), 7,27-7,22 (2Н, м), 2,64-2,57 (2Н, м), 2,40-2,33 (2Н, м), 1,64 (3Н, с).

ESI-MS m/z 256, 258 (MH+).

Справочный пример 58(3) трет-Бутил-транс-1-(4-бромфенил)-3-гидрокси-3-метилциклобутилкарбамат

К раствору продукта (3,23 г), полученного в справочном примере 58(2), в 1,4-диоксане (63 мл) добавляли ди-трет-бутил-дикарбонат (3,30 г), и перемешивали смесь при 70°C в течение 3 часов. Реакционную смесь концентрировали в условиях пониженного давления и перекристаллизовывали из гексана/этилацетата с получением целевого продукта (3,50 г, выход: 78%) в виде бесцветного твердого вещества.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 7,47-7,42 (2Н, м), 7,28 (2Н, д, J=8,5 Гц), 4,96 (1Н, уш.с), 2,77-2,47 (4Н, м), 1,67 (1Н, с), 1,58 (3Н, с), 1,38 (9Н, уш.с).

ESI-MS m/z 356, 358 (MH+).

Справочный пример 58(4) трет-Бутил-транс-3-гидрокси-3-метил-1-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)циклобутилкарбамат

К раствору продукта (3,74 г), полученного в справочном примере 58(3), в DMF (42 мл) добавляли 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-би(1,3,2-диоксаборолан) (3,47 г) и калия ацетат (3,09 г), и помещали смесь в атмосферу азота. К раствору добавляли комплекс дихлор[1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]палладия(II) и дихлорметана (0,43 г), и перемешивали смесь при 80°C в течение 5 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, добавляли к ней воду, а затем экстрагировали этилацетатом. Объединенный органический слой промывали насыщенным хлоридом натрия, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали в условиях пониженного давления. Полученный остаток очищали методом хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением целевого продукта (3,39 г, выход: 80%) в виде бесцветного твердого вещества.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 7,78 (2H, д, J=8,1 Гц), 7,41 (2H, д, J=8,1 Гц), 4,95 (1H, уш.с), 2,78-2,49 (4H, м), 1,65 (1H, с), 1,58 (3H, с), 1,37 (9H, уш.с), 1,34 (12H, с).

ESI-MS m/z 404 (MH+).

Справочный пример 59 трет-Бутил-транс-3-этил-3-гидрокси-1-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)циклобутилкарбамат

Целевой продукт получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием в реакции продукта, полученного в справочном примере 57(3), тем же способом, что и описанный в справочном примере 58, но используя этилмагнийбромид вместо метилмагнийхлорида в справочном примере 58(1).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 7,78 (2H, д, J=7,8 Гц), 7,43 (2H, д, J=7,8 Гц), 4,92 (1H, уш.с), 2,80-2,45 (4H, м), 1,83 (2H, кв., J=7,2 Гц), 1,53 (1H, с), 1,45-1,25 (9Н, м), 1,34 (12H, с), 0,97 (3H, т, J=7,2 Гц).

ESI-MS m/z 418 (MH+).

Пример 1

транс-3-Амино-1-циклопропил-3-(4-(10-фтор-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол

К раствору продукта (15,0 мг), полученного в справочном примере 22(2) в 1,4-диоксане (1,0 мл) и воде (0,13 мл) добавляли продукт (30,0 мг), полученный в справочном примере 57(6), и карбонат цезия (35,4 мг), и помещали смесь в атмосферу азота. Затем, к ней добавляли Pd(PPh₃)₄ (5,0 мг), и перемешивали смесь при 100°C в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли этилацетатом, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали в условиях пониженного давления. Полученный остаток очищали методом хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением соответствующего продукта сочетания. Полученный продукт сочетания использовали в следующей реакции без дополнительной очистки. К раствору полученного продукта сочетания в этаноле (2,0 мл) добавляли гидразина моногидрат (0,5 мл), и перемешивали смесь при 110°C в течение 20 минут с использованием микроволнового реактора. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли насыщенным гидрокарбонатом натрия, и экстрагировали хлороформом. Объединенный органический слой промывали насыщенным хлоридом натрия, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали в условиях пониженного давления. Полученный остаток очищали методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии с обращенной фазой (0,1% трифторуксусная кислота, ацетонитрил/вода), и концентрировали в условиях пониженного давления. Затем, проводили процедуру обессоливания с использованием Bond Elut (зарегистрированный товарный знак) (метанол) производства Varian, Inc. с получением указанного в заголовке соединения (16,8 мг, выход: 83%) в виде бесцветного твердого вещества.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 7,60 (2H, д, J=8,3 Гц), 7,48 (1H, дд, J=5,0, 3,0 Гц), 7,38-7,32 (3H, м), 7,28-7,23 (1H, м), 7,08 (1H, дд, J=5,0, 1,3 Гц), 6,99-6,93 (1H, м), 6,92-6,88 (1H, м), 5,69 (2H, с), 2,64-2,58 (2H, м), 2,33-2,27 (2H, м), 1,34 (1H, тт, J=8,3, 5,4 Гц), 0,59-0,53 (2H, м), 0,48-0,43 (2H, м).

ESI-MS m/z 468 (MH+).

Пример 2

транс-3-Амино-3-(4-(10-фтор-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)-1-метилциклобутанол

К раствору продукта (15,0 мг), полученного в справочном примере 22(2), в 1,4-диоксане (1,0 мл) и воде (0,13 мл) добавляли продукт (28,3 мг), полученный в справочном примере 58(4) и карбонат цезия (35,4 мг), и помещали смесь в атмосферу азота. Затем, к ней добавляли Pd(PPh₃)₄ (5,0 мг), и перемешивали смесь при 100°C в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли этилацетатом, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали в условиях пониженного давления. Полученный остаток очищали методом хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением соответствующего продукта сочетания. Полученный продукт сочетания использовали в следующей реакции без дополнительной очистки. К раствору полученного продукта сочетания в хлороформе (1,0 мл) добавляли трифторуксусную кислоту (0,5 мл), и перемешивали смесь при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрировали в условиях пониженного давления, полученный остаток очищали методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии с обращенной фазой (0,1% трифторуксусная кислота, ацетонитрил/вода) и концентрировали в условиях пониженного давления. Затем, проводили процедуру обессоливания с использованием Bond Elut (зарегистрированный товарный знак) (метанол) производства Varian, Inc. с получением указанного в заголовке соединения (15,2 мг, выход: 79%) в виде бесцветного твердого вещества.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 7,57-7,53 (2H, м), 7,50-7,42 (3H, м), 7,38-7,33 (2H, м), 7,28-7,20 (3H, м), 6,99-6,93 (1H, м), 6,91-6,87 (1H, м), 5,65 (2H, с), 2,63-2,58 (2H, м), 2,39-2,32 (2H, м), 1,62 (3H, с).

ESI-MS m/z 442 (MH+).

Пример 3

1-(4-(10-Фтор-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанамин

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 22(2), и того же способа, что и описанный в примере 2, но с использованием продукта, полученного в справочном примере 56(4), вместо продукта, полученного в справочном примере 58(4).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 7,57 (2H, д, J=8,3 Гц), 7,51-7,44 (3H, м), 7,39-7,35 (2H, м), 7,30-7,22 (3H, м), 7,00-6,94 (1H, м), 6,92-6,88 (1H, м), 5,66 (2H, с), 2,57-2,48 (2H, м), 2,17-1,99 (3H, м), 1,78-1,69 (1H, м).

ESI-MS m/z 412 (MH+).

Пример 4

транс-3-Амино-1-циклопропил-3-(4-(10-фтор-3-(тиофен-3-ил)-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 30, и того же способа, что и описанный в примере 1.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 7,60 (2H, д, J=8,3 Гц), 7,48 (1H, дд, J=5,0, 3,0 Гц), 7,38-7,32 (3H, м), 7,28-7,23 (1H, м), 7,08 (1H, дд, J=5,0, 1,3 Гц), 6,99-6,93 (1H, м), 6,92-6,88 (1H, м), 5,69 (2H, с), 2,64-2,58 (2H, м), 2,33-2,27 (2H, м), 1,34 (1H, тт, J=8,3, 5,4 Гц), 0,59-0,53 (2H, м), 0,48-0,43 (2H, м).

ESI-MS m/z 474 (MH+).

Пример 5

транс-3-Амино-1-циклопропил-3-(4-(10-фтор-3-(пиридин-4-ил)-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 31, и того же способа, что и описанный в примере 1.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,71 (2H, д, J=6,1 Гц), 7,53 (2H, д, J=8,5 Гц), 7,37 (2H, д, J=8,5 Гц), 7,33-7,24 (3H, м), 7,01-6,91 (2H, м), 5,74 (2H, с), 2,64-2,58 (2H, м), 2,34-2,28 (2H, м), 1,35 (1H, тт, J=8,3, 5,4 Гц), 0,60-0,54 (2H, м), 0,49-0,44 (2H, м).

ESI-MS m/z 469 (MH+).

Пример 6

транс-3-Амино-3-(4-(10-фтор-3-(тиофен-3-ил)-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)-1-метилциклобутанол

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 30, и того же способа, что и описанный в примере 2.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 7,59 (2H, д, J=8,5 Гц), 7,48 (1H, дд, J=4,9, 2,9 Гц), 7,33 (1H, дд, J=3,0, 1,3 Гц), 7,29-7,23 (3H, м), 7,08 (1H, дд, J=4,9, 1,3 Гц), 6,99-6,93 (1H, м), 6,92-6,88 (1H, м), 5,69 (2H, с), 2,66-2,60 (2H, м), 2,41-2,34 (2H, м), 1,64 (3H, с).

ESI-MS m/z 448 (MH+).

Пример 7

транс-3-Амино-3-(4-(10-фтор-3-(пиридин-4-ил)-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)-1-метилциклобутанол

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 31, и того же способа, что и описанный в примере 2.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,68 (2H, д, J=5,9 Гц), 7,51 (2H, д, J=8,3 Гц), 7,32-7,22 (5H, м), 7,00-6,90 (2H, м), 5,73 (2H, с), 2,66-2,60 (3H, м), 2,41-2,35 (2H, м), 1,64 (3H, с).

ESI-MS m/z 443 (MH+).

Пример 8

транс-3-Амино-3-(4-(9-фтор-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)-1-метилциклобутанол

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 32, и того же способа, что и описанный в примере 2.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 7,80-7,76 (1H, м), 7,55-7,43 (5H, м), 7,37-7,33 (2H, м), 7,25-7,21 (2H, м), 7,05-6,96 (2H, м), 5,65 (2H, с), 2,64-2,58 (2H, м), 2,38-2,32 (2H, м), 1,62 (3H, с).

ESI-MS m/z 442 (MH+).

Пример 9

транс-3-Амино-3-(4-(8-фтор-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)-1-метилциклобутанол

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 33, и того же способа, что и описанный в примере 2.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,07 (1H, дд, J=8,5, 6,1 Гц), 7,55-7,33 (7H, м), 7,24 (2H, д, J=8,3 Гц), 6,92 (1H, тд, J=8,7, 2,4 Гц), 6,84-6,79 (1H, м), 5,68 (2H, с), 2,65-2,59 (2H, м), 2,39-2,34 (2H, м), 1,63 (3H, с).

ESI-MS m/z 442 (MH+).

Пример 10

транс-3-Амино-1-циклопропил-3-(4-(7-фтор-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 34, и того же способа, что и описанный в примере 1.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 7,88-7,85 (1H, м), 7,55 (2H, д, J=8,5 Гц), 7,51-7,45 (3H, м), 7,38-7,32 (4H, м), 7,15-7,10 (2H, м), 5,73 (2H, с), 2,63-2,57 (2H, м), 2,32-2,27 (2H, м), 1,34 (1H, тт, J=8,3, 5,4 Гц), 0,59-0,53 (2H, м), 0,48-0,43 (2H, м).

ESI-MS m/z 468 (MH+).

Пример 11

транс-3-Амино-1-циклопропил-3-(4-(3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 35, и того же способа, что и описанный в примере 1.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,09 (1H, дд, J=7,7, 1,6 Гц), 7,58-7,29 (10H, м), 7,21-7,16 (1H, м), 7,07 (1H, дд, J=8,0, 1,0 Гц), 5,67 (2H, с), 2,62-2,56 (2H, м), 2,31-2,25 (2H, м), 1,33 (1H, тт, J=8,3, 5,4 Гц), 0,58-0,52 (2H, м), 0,42-0,47 (2H, м).

ESI-MS m/z 450 (MH+).

Пример 12

транс-3-Амино-1-метил-3-(4-(3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 35, и того же способа, что и описанный в примере 2.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,09 (1H, дд, J=7,7, 1,6 Гц), 7,56-7,43 (5H, м), 7,37-7,29 (3H, м), 7,25-7,16 (3H, м), 7,06 (1H, дд, J=8,3, 1,0 Гц), 5,67 (2H, с), 2,64-2,58 (2H, м), 2,38-2,32 (2H, м), 1,62 (3H, с).

ESI-MS m/z 424 (MH+).

Пример 13

1-(4-(3-Фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанамин

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 35, и того же способа, что и описанный в примере 2, но с использованием продукта, полученного в справочном примере 56(4), вместо продукта, полученного в справочном примере 58(4).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,09 (1H, дд, J=7,7, 1,6 Гц), 7,55 (2H, д, J=8,5 Гц), 7,50-7,43 (3H, м), 7,39-7,27 (5H, м), 7,22-7,17 (1H, м), 7,07 (1H, дд, J=8,0, 1,0 Гц), 5,68 (2H, с), 2,58-2,49 (2H, м), 2,19-2,00 (3H, м), 1,79-1,71 (1H, м).

ESI-MS m/z 394 (MH+).

Пример 14

1-(4-(3-(Тиофен-3-ил)-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанамин

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 36, и того же способа, что и описанный в примере 2, но с использованием продукта, полученного в справочном примере 56(4), вместо продукта, полученного в справочном примере 58(4).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,07 (1H, дд, J=8,0, 1,6 Гц), 7,59-7,57 (2H, м), 7,47 (1H, дд, J=4,8, 2,8 Гц), 7,34-7,30 (4H, м), 7,21 (1H, ддд, J=7,6, 7,6, 1,2 Гц), 7,10-7,06 (2H, м), 5,71 (2H, с), 2,58-2,51 (2H, м), 2,17-2,03 (3H, м), 1,79-1,70 (1H, м).

ESI-MS m/z 400 (MH+).

Пример 15

1-(4-(3-(Пиридин-4-ил)-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанамин

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 37, и того же способа, что и описанный в примере 2, но с использованием продукта, полученного в справочном примере 56(4), вместо продукта, полученного в справочном примере 58(4).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,69 (2H, дд, J=4,4, 1,6 Гц), 8,09 (1H, дд, J=7,6, 1,6 Гц), 7,52 (2H, д, J=7,6 Гц), 7,38-7,34 (3H, м), 7,27-7,26 (2H, м), 7,21 (1H, ддд, J=7,6, 7,6, 1,2 Гц), 7,10 (1H, дд, J=7,6, 1,2 Гц), 5,76 (2H, с), 2,58-2,52 (2H, м), 2,19-2,02 (3H, м), 1,79-1,70 (1H, м).

ESI-MS m/z 395 (MH+).

Пример 16

транс-3-Амино-1-циклопропил-3-(4-(10-метокси-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 38, и того же способа, что и описанный в примере 1.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 7,59 (2H, д, J=8,3 Гц), 7,49-7,43 (3H, м), 7,38-7,35 (2H, м), 7,32-7,23 (3H, м), 6,77 (1H, дд, J=8,5, 0,7 Гц), 6,72 (1H, дд, J=8,0, 0,7 Гц), 5,58 (2H, с), 4,06 (3H, с), 2,62-2,56 (2H, м), 2,31-2,25 (2H, м), 1,33 (1H, тт, J=8,3, 5,4 Гц), 0,58-0,42 (4H, м).

ESI-MS m/z 480 (MH+).

Пример 17

транс-3-Амино-1-циклопропил-3-(4-(9-метокси-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 39, и того же способа, что и описанный в примере 1.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 7,61-7,53 (3H, м), 7,50-7,41 (3H, м), 7,39-7,31 (4H, м), 7,00 (1H, д, J=8,8 Гц), 6,68 (1H, дд, J=9,0, 2,9 Гц), 5,63 (2H, с), 3,89 (3H, с), 2,64-2,57 (2H, м), 2,33-2,26 (2H, м), 1,38-1,29 (1H, м), 0,60-0,42 (4H, м).

ESI-MS m/z 480 (MH+).

Пример 18

транс-3-амино-1-циклопропил-3-(4-(8-метокси-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 40, и того же способа, что и описанный в примере 1.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,00 (1H, д, J=8,5 Гц), 7,54 (2H, д, J=8,3 Гц), 7,49-7,40 (3H, м), 7,38-7,30 (4H, м), 6,76 (1H, дд, J=8,7, 2,3 Гц), 6,62 (1H, д, J=2,2 Гц), 5,64 (2H, с), 3,85 (3H, с), 2,63-2,57 (2H, м), 2,32-2,26 (2H, м), 1,38-1,28 (1H, м), 0,59-0,42 (4H, м).

ESI-MS m/z 480 (MH+).

Пример 19

транс-3-Амино-1-циклопропил-3-(4-(7-метокси-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 41, и того же способа, что и описанный в примере 1.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 7,71 (1H, дд, J=7,8, 1,0 Гц), 7,55 (2H, д, J=8,3 Гц), 7,50-7,41 (3H, м), 7,38-7,30 (4H, м), 7,18-7,11 (1H, м), 6,95 (1H, дд, J=8,3, 1,2 Гц), 5,71 (2H, с), 3,93 (3H, с), 2,63-2,57 (2H, м), 2,32-2,26 (2H, м), 1,38-1,29 (1H, м), 0,59-0,42 (4H, м).

ESI-MS m/z 480 (MH+).

Пример 20

транс-3-Амино-3-(4-(9-метокси-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)-1-метилциклобутанол

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 39, и того же способа, что и описанный в примере 2.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 7,59 (1H, д, J=2,9 Гц), 7,53 (2H, д, J=8,5 Гц), 7,49-7,42 (3H, м), 7,37-7,32 (2H, м), 7,25 (2H, д, J=8,5 Гц), 6,99 (1H, д, J=9,0 Гц), 6,87 (1H, дд, J=9,0, 2,9 Гц), 5,62 (2H, с), 3,88 (3H, с), 2,65-2,59 (2H, м), 2,41-2,35 (2H, м), 1,62 (3H, с).

ESI-MS m/z 454 (MH+).

Пример 21

транс-3-Амино-3-(4-(8-метокси-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)-1-метилциклобутанол

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 40, и того же способа, что и описанный в примере 2.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,00 (1H, д, J=8,5 Гц), 7,52 (2H, д, J=8,3 Гц), 7,48-7,40 (3H, м), 7,36-7,32 (2H, м), 7,24 (2H, д, J=8,3 Гц), 6,76 (1H, дд, J=8,5, 2,4 Гц), 6,61 (1H, д, J=2,4 Гц), 5,63 (2H, с), 3,84 (3H, с), 2,64-2,58 (2H, м), 2,39-2,33 (2H, м), 1,62 (3H, с).

ESI-MS m/z 454 (MH+).

Пример 22

транс-3-Амино-3-(4-(10-хлор-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)-1-циклопропилциклобутанол

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 42, и того же способа, что и описанный в примере 1.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 7,60 (2H, д, J=8,3 Гц), 7,51-7,44 (3H, м), 7,39-7,30 (4H, м), 7,27-7,18 (2H, м), 7,00 (1H, дд, J=7,9, 1,3 Гц), 5,62 (2H, с), 2,63-2,57 (2H, м), 2,33-2,27 (2H, м), 1,33 (1H, тт, J=8,5, 5,6 Гц), 0,58-0,52 (2H, м), 0,47-0,42 (2H, м).

ESI-MS m/z 484 (MH+).

Пример 23

транс-3-Амино-1-циклопропил-3-(4-(10-этокси-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 43, и того же способа, что и описанный в примере 1.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 7,60 (2H, д, J=8,4 Гц), 7,50-7,41 (3H, м), 7,39-7,35 (2H, м), 7,30 (2H, д, J=8,4 Гц), 7,22 (1H, дд, J=8,4, 8,2 Гц), 6,75 (1H, д, J=8,4 Гц), 6,70 (1H, д, J=8,2 Гц), 5,55 (2H, с), 4,28 (2H, кв., J=7,0 Гц), 2,62-2,56 (2H, м), 2,32-2,26 (2H, м), 1,63 (3H, т, J=7,0 Гц), 1,37-1,28 (1H, м), 0,57-0,42 (4H, м).

ESI-MS m/z 494 (MH+).

Пример 24

транс-3-Амино-3-(4-(10-этокси-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)-1-метилциклобутанол

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 43, и того же способа, что и описанный в примере 2.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 7,60 (2H, д, J=8,6 Гц), 7,50-7,42 (3H, м), 7,39-7,35 (2H, м), 7,25-7,19 (3H, м), 6,76 (1H, дд, J=8,4, 0,8 Гц), 6,70 (1H, дд, J=8,2, 0,8 Гц), 5,55 (2H, с), 4,28 (2H, кв., J=7,0 Гц), 2,64-2,59 (2H, м), 2,38-2,32 (2H, м), 1,63 (3H, т, J=7,0 Гц), 1,62 (3H, с).

ESI-MS m/z 468 (MH+).

Пример 25

транс-3-Амино-1-циклопропил-3-(4-(8,10-диметокси-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 44, и того же способа, что и описанный в примере 1.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 7,56-7,52 (2H, м), 7,46-7,41 (3H, м), 7,35-7,24 (4H, м), 6,32 (1H, д, J=2,2 Гц), 6,27 (1H, д, J=2,2 Гц), 5,56 (2H, с), 3,98 (3H, с), 3,84 (3H, с), 2,64-2,56 (2H, м), 2,38-2,30 (2H, м), 1,35-1,25 (1H, м), 0,55-0,49 (2H, м), 0,46-0,40 (2H, м).

ESI-MS m/z 510 (MH+).

Пример 26

транс-3-Амино-1-циклопропил-3-(4-(7-метил-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 45, и того же способа, что и описанный в примере 1.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 7,93 (1H, д, J=6,6 Гц), 7,56 (2H, д, J=8,5 Гц), 7,49-7,42 (3H, м), 7,39-7,35 (2H, м), 7,33 (2H, д, J=8,5 Гц), 7,19-7,16 (1H, м), 7,11-7,06 (1H, м), 5,69 (2H, с), 2,62-2,57 (2H, м), 2,32-2,27 (5H, м), 1,34 (1H, тт, J=8,0, 5,4 Гц), 0,59-0,53 (2H, м), 0,48-0,43 (2H, м).

ESI-MS m/z 464 (MH+).

Пример 27

транс-3-Амино-1-циклопропил-3-(4-(3-фенил-5H-имидазо[1,2-c]пиридо[2,3-e][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 46, и того же способа, что и описанный в примере 1.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,49 (1H, дд, J=4,8, 1,6 Гц), 7,68 (2H, д, J=8,0 Гц), 7,52-7,48 (3H, м), 7,41-7,38 (3H, м), 7,30 (2H, д, J=8,0 Гц), 7,25 (1H, дд, J=8,0, 4,8 Гц), 5,71 (2H, с), 2,62-2,58 (2H, м), 2,31-2,28 (2H, м), 1,38-1,31 (1H, м), 0,58-0,53 (2H, м), 0,47-0,44 (2H, м).

ESI-MS m/z 451 (MH+).

Пример 28

транс-3-Амино-1-метил-3-(4-(3-фенил-5H-имидазо[1,2-c]пиридо[2,3-e][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 46, и того же способа, что и описанный в примере 2.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,49 (1H, дд, J=4,8, 1,6 Гц), 7,67 (2H, д, J=8,0 Гц), 7,52-7,48 (3H, м), 7,42-7,37 (3H, м), 7,26-7,20 (3H, м), 5,71 (2H, с), 2,63-2,60 (2H, м), 2,38-2,34 (2H, м), 1,64 (3H, с).

ESI-MS m/z 425 (MH+).

Пример 29

1-(4-(3-Фенил-5H-имидазо[1,2-c]пиридо[2,3-e][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанамин

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 46, и того же способа, что и описанный в примере 2, но с использованием продукта, полученного в справочном примере 56(4), вместо продукта, полученного в справочном примере 58(4).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,49 (1H, дд, J=4,8, 1,3 Гц), 7,67 (2H, д, J=8,5 Гц), 7,52-7,47 (3H, м), 7,43-7,36 (3H, м), 7,28-7,22 (3H, м), 5,71 (2H, с), 2,57-2,49 (2H, м), 2,16-2,00 (3H, м), 1,79-1,69 (1H, м).

ESI-MS m/z 395 (MH+).

Пример 30

транс-3-Амино-1-этил-3-(4-(3-фенил-5H-имидазо[1,2-c]пиридо[2,3-e][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 46, и того же способа, что и описанный в примере 2, но с использованием продукта, полученного в справочном примере 59, вместо продукта, полученного в справочном примере 58(4).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,49 (1H, дд, J=4,4, 1,6 Гц), 7,67 (2H, д, J=8,0 Гц), 7,52-7,48 (3H, м), 7,41-7,36 (3H, м), 7,29-7,21 (3H, м), 5,71 (2H, с), 2,57-2,54 (2H, м), 2,37-2,34 (2H, м), 1,91 (2H, кв., J=7,2 Гц), 0,97 (3H, т, J=7,2 Гц).

ESI-MS m/z 439 (MH+).

Пример 31

транс-3-Амино-1-циклопропил-3-(4-(3-фенил-5H-имидазо[1,2-c]пиридо[3,4-e][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 47, и того же способа, что и описанный в примере 1.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,49 (1H, дд, J=4,8, 1,6 Гц), 7,68 (2H, д, J=8,0 Гц), 7,52-7,48 (3H, м), 7,41-7,38 (3H, м), 7,30 (2H, д, J=8,0 Гц), 7,25 (1H, дд, J=8,0, 4,8 Гц), 5,71 (2H, с), 2,62-2,58 (2H, м), 2,31-2,28 (2H, м), 1,38-1,31 (1H, м), 0,58-0,53 (2H, м), 0,47-0,44 (2H, м).

ESI-MS m/z 451 (MH+).

Пример 32

транс-3-Амино-1-метил-3-(4-(3-фенил-5H-имидазо[1,2-c]пиридо[3,4-e][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 47, и того же способа, что и описанный в примере 2.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 9,26 (1H, с), 8,49 (1H, д, J=5,6 Гц) 7,58-7,44 (5H, м), 7,40-7,33 (2H, м), 7,29-7,22 (2H, м), 6,99 (1H, д, J=5,6 Гц), 5,76 (2H, с), 2,66-2,58 (2H, м), 2,40-2,33 (2H, м), 1,64 (3H, с), 1,61 (3H, уш.с).

ESI-MS m/z 425 (MH+).

Пример 33

1-(4-(3-Фенил-5H-имидазо[1,2-c]пиридо[3,4-e][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанамин

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 47, и того же способа, что и описанный в примере 2, но с использованием продукта, полученного в справочном примере 56(4), вместо продукта, полученного в справочном примере 58(4).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 9,27 (1H, с), 8,50 (1H, д, J=5,6 Гц), 7,58 (5H, м), 7,40-7,25 (4H, м), 7,00 (1H, д, J=5,6 Гц), 5,76 (2H, с), 2,59-2,48 (2H, м), 2,20-1,98 (3H, м), 1,82-1,69 (1H, м).

ESI-MS m/z 395 (MH+).

Пример 34

транс-3-Амино-1-этил-3-(4-(3-фенил-5H-имидазо[1,2-c]пиридо[3,4-e][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 47, и того же способа, что и описанный в примере 2, но с использованием продукта, полученного в справочном примере 59, вместо продукта, полученного в справочном примере 58(4).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 9,27 (1H, с), 8,49 (1H, д, J=5,6 Гц), 7,59-7,44 (5H, м), 7,40-7,34 (2H, м), 7,29 (2H, д, J=8,3 Гц), 7,00 (1H, д, J=5,6 Гц), 5,76 (2H, с), 2,60-2,53 (2H, м), 2,40-2,33 (2H, м), 1,90 (2H, кв., J=7,3 Гц), 1,62 (3H, уш.с), 0,97 (3H, т, J=7,3 Гц).

ESI-MS m/z 439 (MH+).

Пример 35

транс-3-Амино-1-циклопропил-3-(4-(3-фенил-5H-имидазо[1,2-c]пиридо[4,3-e][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 48, и того же способа, что и описанный в примере 1.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 9,26 (1H, с), 8,49 (1H, д, J=5,6 Гц), 7,59-7,43 (5H, м), 7,40-7,32 (4H, м), 6,99 (1H, д, J=5,6 Гц), 5,76 (2H, с), 2,63-2,57 (2H, м), 2,33-2,26 (2H, м), 1,61 (3H, уш.с), 1,34 (1H, тт, J=8,3, 5,4 Гц), 0,61-0,41 (4H, м).

ESI-MS m/z 451 (MH+).

Пример 36

транс-3-Амино-1-метил-3-(4-(3-фенил-5H-имидазо[1,2-c]пиридо[4,3-e][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 48, и того же способа, что и описанный в примере 2.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,45-8,45 (1H, м), 8,42 (1H, дд, J=4,9, 1,0 Гц), 7,91 (1H, дд, J=4,9, 0,7 Гц), 7,54-7,47 (5H, м), 7,38-7,34 (2H, м), 7,27-7,23 (2H, м), 5,74 (2H, с), 2,64-2,59 (2H, м), 2,39-2,32 (2H, м), 1,63 (3H, с).

ESI-MS m/z 425 (MH+).

Пример 37

1-(4-(3-Фенил-5H-имидазо[1,2-c]пиридо[4,3-e][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанамин

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 48, и того же способа, что и описанный в примере 2, но с использованием продукта, полученного в справочном примере 56(4), вместо продукта, полученного в справочном примере 58(4).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,47 (1H, д, J=0,6 Гц), 8,45 (1H, д, J=5,1 Гц), 7,92 (1H, дд, J=5,1, 0,6 Гц), 7,56-7,47 (5H, м), 7,40-7,36 (2H, м), 7,31 (2H, д, J=8,5 Гц), 5,75 (2H, с), 2,57-2,49 (2H, м), 2,18-2,00 (3H, м), 1,79-1,70 (1H, м).

ESI-MS m/z 395 (MH+).

Пример 38

транс-3-Амино-1-циклопропил-3-(4-(3-фенил-5H-имидазо[1,2-c]пиридо[3,2-e][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 49, и того же способа, что и описанный в примере 1.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,40 (1H, дд, J=7,6, 2,0 Гц), 8,26 (1H, дд, J=5,0, 2,0 Гц), 7,56-7,45 (5H, м), 7,39-7,32 (4H, м), 7,20 (1H, дд, J=7,6, 5,0 Гц), 5,85 (2H, с), 2,63-2,57 (2H, м), 2,32-2,26 (2H, м), 1,33 (1H, тт, J=8,3, 5,4 Гц), 0,59-0,53 (2H, м), 0,48-0,42 (2H, м).

ESI-MS m/z 451 (MH+).

Пример 39

транс-3-Амино-1-метил-3-(4-(3-фенил-5H-имидазо[1,2-c]пиридо[3,2-e][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 49, и того же способа, что и описанный в примере 2.

¹H-ЯМР (DMSO-D₆) δ: 8,30 (1H, дд, J=7,3, 2,0 Гц), 8,26 (1H, дд, J=4,9, 2,0 Гц), 7,56-7,49 (3H, м), 7,45-7,39 (4H, м), 7,33-7,28 (3H, м), 5,96 (2H, с), 4,74 (1H, с), 2,39-2,33 (2H, м), 2,18-2,13 (2H, м), 1,48 (3H, с).

ESI-MS m/z 425 (MH+).

Пример 40

1-(4-(3-Фенил-5H-имидазо[1,2-c]пиридо[3,2-e][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанамин

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 49, и того же способа, что и описанный в примере 2, но с использованием продукта, полученного в справочном примере 56(4), вместо продукта, полученного в справочном примере 58(4).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,41 (1H, дд, J=7,6, 2,0 Гц), 8,27 (1H, дд, J=4,9, 2,0 Гц), 7,55-7,45 (5H, м), 7,40-7,36 (2H, м), 7,33-7,29 (2H, м), 7,20 (1H, дд, J=7,6, 4,9 Гц), 5,86 (2H, с), 2,58-2,48 (2H, м), 2,18-1,99 (3H, м), 1,79-1,69 (1H, м).

ESI-MS m/z 395 (MH+).

Пример 41

транс-3-Амино-1-циклопропил-3-(4-(3-фенил-5H-имидазо[1,2-c]пиразино[2,3-e][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол

Указанное в заголовке соединение получали в виде светло-желтого твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 50, и того же способа, что и описанный в примере 1.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,46 (1H, д, J=2,8 Гц), 8,19 (1H, д, J=2,8 Гц), 7,65 (2H, д, J=8,4 Гц), 7,53-7,50 (3H, м), 7,42-7,40 (2H, м), 7,32 (2H, д, J=8,4 Гц), 5,92 (2H, с), 2,62-2,58 (2H, м), 2,31-2,28 (2H, м), 1,38-1,30 (1H, м), 0,58-0,54 (2H, м), 0,47-0,43 (2H, м).

ESI-MS m/z 452 (MH+).

Пример 42

транс-3-Амино-1-метил-3-(4-(3-фенил-5H-имидазо[1,2-c]пиразино[2,3-e][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол

Указанное в заголовке соединение получали в виде светло-желтого твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 50, и того же способа, что и описанный в примере 2.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,46 (1H, д, J=2,8 Гц), 8,19 (1H, д, J=2,8 Гц), 7,64 (2H, д, J=8,4 Гц), 7,54-7,52 (3H, м), 7,42-7,40 (2H, м), 7,23 (2H, д, J=8,4 Гц), 5,92 (2H, с), 2,63-2,60 (2H, м), 2,37-2,34 (2H, м), 1,64 (3H, с).

ESI-MS m/z 426 (MH+).

Пример 43

транс-3-Амино-1-этил-3-(4-(3-фенил-5H-имидазо[1,2-c]пиразино[2,3-e][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 50, и того же способа, что и описанный в примере 2, но с использованием продукта, полученного в справочном примере 59, вместо продукта, полученного в справочном примере 58(4).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,47 (1H, д, J=2,4 Гц), 8,20 (1H, д, J=2,4 Гц), 7,65 (2H, д, J=8,4 Гц), 7,54-7,52 (3H, м), 7,43-7,40 (2H, м), 7,30-7,23 (2H, м), 5,92 (2H, с), 2,57-2,54 (2H, м), 2,37-2,34 (2H, м), 1,91 (2H, кв., J=7,6 Гц), 0,97 (3H, т, J=7,6 Гц).

ESI-MS m/z 440 (MH+).

Пример 44

транс-3-Амино-3-(4-(9-(гидроксиметил)-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)-1-метилциклобутанол

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 24, и того же способа, что и описанный в примере 2.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,10 (1H, д, J=1,7 Гц), 7,56-7,44 (5H, м), 7,38-7,23 (5H, м), 7,06 (1H, д, J=8,0 Гц), 5,66 (2H, с), 4,72 (2H, с), 2,65-2,60 (2H, м), 2,39-2,33 (2H, м), 1,63 (3H, с).

ESI-MS m/z 454 (MH+).

Пример 45

транс-3-Амино-3-(4-(8-(гидроксиметил)-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)-1-метилциклобутанол

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 52, и того же способа, что и описанный в примере 2.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,06 (1H, д, J=7,8 Гц), 7,54 (2H, д, J=8,3 Гц), 7,50-7,42 (3H, м), 7,38-7,34 (2H, м), 7,24 (2H, д, J=8,3 Гц), 7,17 (1H, дд, J=7,8, 1,5 Гц), 7,10 (1H, д, J=1,5 Гц), 5,66 (2H, с), 4,72 (2H, с), 3,49 (1H, с), 2,65-2,60 (2H, м), 2,39-2,33 (2H, м), 1,63 (3H, с).

ESI-MS m/z 454 (MH+).

Пример 46

2-(4-(транс-1-Амино-3-гидрокси-3-метилциклобутил)фенил)-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-9-карбонитрил

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 25, и того же способа, что и описанный в примере 2.

¹H-ЯМР (DMSO-D₆) δ: 8,28 (1H, д, J=2,0 Гц), 7,85 (1H, дд, J=8,5, 2,0 Гц), 7,57-7,29 (10H, м), 5,94 (2H, с), 2,39-2,32 (2H, м), 2,17-2,11 (2H, м), 1,50 (3H, с).

ESI-MS m/z 449 (MH+).

Пример 47

2-(4-(транс-1-Амино-3-гидрокси-3-метилциклобутил)фенил)-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-8-карбонитрил

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 53, и того же способа, что и описанный в примере 2.

¹H-ЯМР (DMSO-D₆) δ: 8,03 (1H, д, J=8,0 Гц), 7,72 (1H, д, J=1,5 Гц), 7,66 (1H, дд, J=8,0, 1,5 Гц), 7,55-7,49 (3H, м), 7,45-7,38 (4H, м), 7,30 (2H, д, J=8,5 Гц), 5,90 (2H, с), 2,36-2,30 (2H, м), 2,15-2,10 (2H, м), 1,48 (3H, с).

ESI-MS m/z 449 (MH+).

Пример 48

транс-3-Амино-1-метил-3-(4-(3-фенил-9-(1H-пиразол-5-ил)-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 26, и того же способа, что и описанный в примере 2.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,47 (1H, д, J=2,2 Гц), 7,77 (1H, дд, J=8,5, 2,2 Гц), 7,62 (1H, д, J=2,4 Гц), 7,55 (2H, д, J=8,5 Гц), 7,50-7,43 (3H, м), 7,39-7,35 (2H, м), 7,27-7,23 (2H, м), 7,12 (1H, д, J=8,5 Гц), 6,70 (1H, д, J=2,2 Гц), 5,70 (2H, с), 2,66-2,60 (2H, м), 2,41-2,35 (2H, м), 1,62 (3H, с).

ESI-MS m/z 490 (MH+).

Пример 49

транс-3-Амино-1-метил-3-(4-(3-фенил-9-(1H-пиразол-4-ил)-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 27, и того же способа, что и описанный в примере 2.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,23 (1H, д, J=2,2 Гц), 7,94-7,93 (2H, м), 7,56 (2H, д, J=8,3 Гц), 7,50-7,44 (4H, м), 7,39-7,36 (2H, м), 7,28-7,24 (2H, м), 7,09 (1H, д, J=8,5 Гц), 5,69 (2H, с), 2,66-2,60 (2H, м), 2,40-2,34 (2H, м), 1,64 (3H, с).

ESI-MS m/z 490 (MH+).

Пример 50

транс-3-Амино-1-метил-3-(4-(9-метил-3-фенил-5H-имидазо[1,2-c]пиридо[2,3-e][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 54, и того же способа, что и описанный в примере 2.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 7,65 (2H, д, J=8,0 Гц), 7,52-7,48 (3H, м), 7,40-7,38 (2H ,м), 7,28-7,26 (1H, м), 7,21 (2H, д, J=8,0 Гц), 7,10 (1Н, д, J=8,4 Гц), 5,67 (2H, с), 2,65 (3H, с), 2,63-2,60 (2H, м), 2,38-2,34 (2H, м), 1,64 (3H, с).

ESI-MS m/z 439 (MH+).

Пример 51

транс-3-Амино-3-(4-(9-метокси-3-фенил-5H-имидазо[1,2-c]пиридо[2,3-e][1,3]оксазин-2-ил)фенил)-1-метилциклобутанол

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества с использованием продукта, полученного в справочном примере 55, и того же способа, что и описанный в примере 2.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 7,60 (2H, д, J=8,0 Гц), 7,52-7,46 (3H, м), 7,38-7,36 (2H, м), 7,32 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,22 (2H, д, J=8,0 Гц), 6,72 (1H, д, J=8,8 Гц), 5,65 (2H, с), 4,11 (3H, с), 2,63-2,60 (2H, м), 2,38-2,34 (2H, м), 1,64 (3H, с).

ESI-MS m/z 455 (MH+).

Пример 52

Пример 52(1) Метил-2-(4-(транс-1-(трет-бутоксикарбониламино)-3-гидрокси-3-метилциклобутил)фенил)-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-9-карбоксилат

К раствору продукта (148 мг), полученного в справочном примере 23(4), в 1,4-диоксане (2,4 мл) и воде (0,4 мл) добавляли трет-бутил-транс-3-гидрокси-3-метил-1-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)циклобутилкарбамат (125 мг) и карбонат цезия (194 мг), и помещали смесь в атмосферу азота. Затем, к ней добавляли Pd(PPh₃)₄ (27,5 мг), и перемешивали смесь при 100°C в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли этилацетатом, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали в условиях пониженного давления. Полученный остаток очищали методом хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением целевого продукта (191 мг, выход: 71%) в виде бесцветного твердого вещества.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,79 (1H, д, J=2,2 Гц), 8,02 (1H, дд, J=8,5, 2,2 Гц), 7,57-7,19 (7H, м), 7,11 (1H, д, J=8,5 Гц), 6,75 (2H, д, J=8,8 Гц), 5,73 (2H, с), 5,23-5,13 (1H, уш.м), 3,94 (3H, с), 2,79-2,60 (4H, м), 1,56 (3H, с), 1,44-1,29 (9H, уш.м).

ESI-MS m/z 582 (MH+).

Пример 52(2)

2-(4-(транс-1-(трет-бутоксикарбониламино)-3-гидрокси-3-метилциклобутил)фенил)-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-9-карбоновая кислота

К раствору продукта (140 мг), полученного в примере 52(1), в метаноле (2,5 мл) добавляли 2 M водный раствор гидроксида калия (0,6 мл), и перемешивали смесь при комнатной температуре в течение 5 часов. К реакционной смеси добавляли 0,5 M водный раствор гидросульфата калия, и экстрагировали хлороформом. Объединенный органический слой промывали насыщенным хлоридом натрия, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали в условиях пониженного давления с получением целевого продукта (120 мг, выход: 88%) в виде бесцветного твердого вещества.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 9,14 (1H, д, J=1,8 Гц), 8,03 (1H, дд, J=8,4, 1,8 Гц), 7,60 (2H, д, J=8,3 Гц), 7,47-7,06 (7H, м), 6,71 (1H, д, J=8,4 Гц), 5,71 (2H, с), 5,11-4,89 (1H, уш.м), 2,76-2,45 (4H, м), 1,53 (3H, с), 1,45-1,24 (9H, уш.м).

ESI-MS m/z 568 (MH+).

Пример 52(3) 2-(4-(транс-1-Амино-3-гидрокси-3-метилциклобутил)фенил)-N-метил-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-9-карбоксамид

К раствору продукта (20 мг), полученного в примере 52(2), в DMF (0,5 мл) добавляли метиламина гидрохлорид (5,0 мг), триэтиламин (0,025 мл), WSC гидрохлорид (13,5 мг) и HOBt (10,8 мг), и перемешивали смесь при комнатной температуре в течение 2 часов и при 90°C в течение 1 часа. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом. Объединенный органический слой сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали в условиях пониженного давления. Полученный остаток очищали методом хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением соответствующего соединения. Полученное соединение использовали в следующей реакции без дополнительной очистки. К раствору полученного соединения в хлороформе (1,0 мл) добавляли трифторуксусную кислоту (0,5 мл), и перемешивали смесь при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрировали в условиях пониженного давления, и очищали полученный остаток методом хроматографии на силикагеле (хлороформ/метанол) с получением указанного в заголовке соединения (14,8 мг, выход: 87%) в виде бесцветного твердого вещества.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,37 (1H, д, J=2,2 Гц), 7,91 (1H, дд, J=8,5, 2,2 Гц), 7,51-7,44 (5H, м), 7,37-7,32 (2H, м), 7,23-7,18 (2H, м), 7,11 (1H, д, J=8,5 Гц), 6,67-6,57 (1H, уш.м), 5,70 (2H, с), 2,99-2,94 (3H, м), 2,63-2,56 (2H, м), 2,37-2,30 (2H, м), 1,62 (3H, с).

ESI-MS m/z 481 (MH+).

Пример 53

2-(4-(транс-1-Амино-3-гидрокси-3-метилциклобутил)фенил)-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-9-карбоксамид

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества тем же способом, что и описанный в примере 52, но с использованием 28% водного аммиака вместо метиламина гидрохлорида в примере 52(3).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,45 (1H, д, J=2,0 Гц), 7,96 (1H, дд, J=8,5, 2,0 Гц), 7,55-7,44 (5H, м), 7,39-7,34 (2H, м), 7,28-7,24 (2H, м), 7,16 (1H, д, J=8,5 Гц), 5,74 (2H, с), 2,66-2,60 (2H, м), 2,39-2,33 (2H, м), 1,63 (3H, с).

ESI-MS m/z 467 (MH+).

Пример 54

2-(4-(транс-1-Амино-3-гидрокси-3-метилциклобутил)фенил)-N,N-диметил-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-9-карбоксамид

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества тем же способом, что и описанный в примере 52, но с использованием диметиламина гидрохлорида вместо метиламина гидрохлорида в примере 52(3).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,14 (1H, д, J=2,2 Гц), 7,55-7,42 (6H, м), 7,38-7,34 (2H, м), 7,23 (2H, д, J=8,5 Гц), 7,10 (1H, д, J=8,3 Гц), 5,69 (2H, с), 3,16-3,02 (6H, м), 2,64-2,58 (2H, м), 2,38-2,32 (2H, м), 1,62 (3H, с).

ESI-MS m/z 495 (MH+).

Пример 55

2-(4-(транс-1-Амино-3-гидрокси-3-метилциклобутил)фенил)-N-этил-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-9-карбоксамид

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества тем же способом, что и описанный в примере 52, но с использованием этиламина гидрохлорида вместо метиламина гидрохлорида в примере 52(3).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,38 (1H, д, J=2,2 Гц), 7,93 (1H, дд, J=8,5, 2,2 Гц), 7,52-7,44 (5H, м), 7,38-7,33 (2H, м), 7,25-7,21 (2H, м), 7,13 (1H, д, J=8,5 Гц), 6,60-6,50 (1H, м), 5,71 (2H, с), 3,54-3,45 (2H, м), 2,64-2,58 (2H, м), 2,38-2,32 (2H, м), 1,62 (3H, с), 1,27 (3H, т, J=7,3 Гц).

ESI-MS m/z 495 (MH+).

Пример 56

2-(4-(транс-1-Амино-3-гидрокси-3-метилциклобутил)фенил)-N-метил-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-8-карбоксамид

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества тем же способом, что и описанный в примере 52, но с использованием в реакции продукта, полученного в справочном примере 51, вместо продукта, полученного в справочном примере 23(4).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,12 (1H, д, J=8,0 Гц), 7,56-7,45 (7H, м), 7,39-7,35 (2H, м), 7,28-7,23 (2H, м), 6,18-6,11 (1H, м), 5,71 (2H, с), 3,04 (3H, д, J=4,9 Гц), 2,65-2,60 (2H, м), 2,39-2,34 (2H, м), 1,64 (3H, с).

ESI-MS m/z 481 (MH+).

Пример 57

2-(4-(транс-1-Амино-3-гидрокси-3-метилциклобутил)фенил)-N,N-диметил-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-8-карбоксамид

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества тем же способом, что и описанный в примере 52, но с использованием диметиламина гидрохлорида вместо метиламина гидрохлорида в примере 52(3), а также с использованием в реакции продукта, полученного в справочном примере 51, вместо продукта, полученного в справочном примере 23(4).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,10 (1H, д, J=8,0 Гц), 7,56-7,44 (5H, м), 7,38-7,35 (2H, м), 7,28-7,21 (3H, м), 7,16 (1H, д, J=1,5 Гц), 5,69 (2H, с), 3,13 (3H, с), 3,03 (3H, с), 2,65-2,60 (2H, м), 2,40-2,35 (2H, м), 1,64 (3H, с).

ESI-MS m/z 495 (MH+).

Пример 58

2-(4-(транс-1-Амино-3-гидрокси-3-метилциклобутил)фенил)-N-(2-гидроксиэтил)-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-8-карбоксамид

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества тем же способом, что и описанный в примере 52, но с использованием 2-аминоэтанола вместо метиламина гидрохлорида в примере 52(3), а также с использованием в реакции продукта, полученного в справочном примере 51, вместо продукта, полученного в справочном примере 23(4).

¹H-ЯМР (CDCl₃-CD₃OD) δ: 8,09 (1H, д, J=8,0 Гц), 7,62-7,57 (2H, м), 7,52-7,44 (5H, м), 7,36-7,31 (2H, м), 7,29-7,25 (2H, м), 5,70 (2H, с), 3,81-3,75 (2H, м), 3,61-3,54 (2H, м), 2,69-2,64 (2H, м), 2,43-2,37 (2H, м), 1,60 (3H, с).

ESI-MS m/z 511 (MH+).

Пример 59

2-(4-(транс-1-Амино-3-гидрокси-3-метилциклобутил)фенил)-N-этокси-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-8-карбоксамид

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества тем же способом, что и описанный в примере 52, но с использованием O-этилгидроксиламина гидрохлорида вместо метиламина гидрохлорида в примере 52(3), а также с использованием в реакции продукта, полученного в справочном примере 51, вместо продукта, полученного в справочном примере 23 (4).

¹H-ЯМР (CDCl₃-CD₃OD) δ: 8,04-8,00 (1H, м), 7,52-7,43 (7H, м), 7,33-7,23 (4H, м), 5,66 (2H, с), 4,08 (2H, кв., J=7,1 Гц), 2,69-2,63 (2H, м), 2,42-2,35 (2H, м), 1,59 (3H, с), 1,34 (3H, т, J=7,1 Гц).

ESI-MS m/z 511 (MH+).

Пример 60

2-(4-(транс-1-Амино-3-гидрокси-3-метилциклобутил)фенил)-N-(2-гидроксиэтил)-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-9-карбоксамид

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества тем же способом, что и описанный в примере 52, но с использованием 2-аминоэтанола вместо метиламина гидрохлорида в примере 52(3).

¹H-ЯМР (CDCl₃-CD₃OD) δ: 8,35 (1H, д, J=2,0 Гц), 7,99-7,94 (1H, м), 7,50-7,43 (5H, м), 7,35-7,26 (4H, м), 7,15 (1H, д, J=8,5 Гц), 5,72 (2H, с), 3,83-3,78 (2H, м), 3,63-3,58 (2H, м), 2,70-2,65 (2H, м), 2,43-2,37 (2H, м), 1,60 (3H, с).

ESI-MS m/z 511 (MH+).

Пример 61

2-(4-(транс-1-Амино-3-гидрокси-3-метилциклобутил)фенил)-N-этокси-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-9-карбоксамид

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества тем же способом, что и описанный в примере 52, но с использованием O-этилгидроксиламина гидрохлорида вместо метиламина гидрохлорида в примере 52(3).

¹H-ЯМР (CDCl₃-CD₃OD) δ: 8,19 (1H, д, J=2,0 Гц), 7,96 (1H, дд, J=8,8, 2,0 Гц), 7,50-7,42 (5H, м), 7,35-7,27 (4H, м), 7,17 (1H, д, J=8,8 Гц), 5,72 (2H, с), 4,11 (2H, кв., J=7,1 Гц), 2,71-2,65 (2H, м), 2,44-2,37 (2H, м), 1,61 (3H, с), 1,38 (3H, т, J=7,1 Гц).

ESI-MS m/z 511 (MH+).

Пример 62

2-(4-(транс-1-Амино-3-гидрокси-3-метилциклобутил)фенил)-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-8-карбоксамид

Указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества тем же способом, что и описанный в примере 52, но с использованием 28% водного аммиака вместо метиламина гидрохлорида в примере 52(3), а также с использованием в реакции продукта, полученного в справочном примере 51, вместо продукта, полученного в справочном примере 23(4).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,05 (1H, д, J=8,5 Гц), 7,55-7,42 (7H, м), 7,34-7,29 (2H, м), 7,22 (2H, д, J=8,3 Гц), 6,62-6,35 (1H, уш.м), 6,14-5,82 (1H, уш.м), 5,65 (2H, с), 2,64-2,58 (2H, м), 2,36-2,31 (2H, м), 1,61 (3H, с).

ESI-MS m/z 467 (MH+).

Пример 63

2-(4-(транс-1-Амино-3-гидрокси-3-метилциклобутил)фенил)-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-9-карбоновой кислоты гидрохлорид

К раствору продукта (19,5 мг), полученного в примере 52(2), в этилацетате (1,0 мл) добавляли раствор (0,5 мл) 4 M соляной кислоты в этилацетате, и перемешивали смесь при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь фильтровали, и промывали остаток этилацетатом с получением указанного в заголовке соединения (6,0 мг, выход: 35%) в виде бесцветного твердого вещества.

¹H-ЯМР (DMSO-D₆) δ: 8,69-8,59 (3H, уш.м), 8,58 (1H, д, J=2,2 Гц), 8,00 (1H, дд, J=8,5, 2,2 Гц), 7,59-7,47 (9H, м), 7,31 (1H, д, J=8,5 Гц), 5,94 (2H, с), 2,71-2,59 (4H, м), 1,42 (3H, с).

ESI-MS m/z 468 (MH+).

Пример 64

2-(4-(транс-1-Амино-3-гидрокси-3-метилциклобутил)фенил)-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-8-карбоновой кислоты гидрохлорид

2-(4-(транс-1-(трет-бутоксикарбониламино)-3-гидрокси-3-метилциклобутил)фенил)-3-фенил-5H-бензо[e]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-8-карбонвой кислоты получали тем же способом, что и описанный в примере 52, но с использованием продукта, полученного в справочном примере 51, вместо продукта, полученного в справочном примере 23(4). Затем, указанное в заголовке соединение получали в виде бесцветного твердого вещества тем же способом, что и описанный в примере 63.

¹H-ЯМР (DMSO-D₆) δ: 8,68-8,57 (3H, уш.м), 8,12 (1H, д, J=8,0 Гц), 7,82 (1H, дд, J=8,0, 1,5 Гц), 7,62 (1H, д, J=1,5 Гц), 7,58-7,45 (9H, м), 5,90 (2H, с), 2,69-2,58 (4H, м), 1,41 (3H, с).

ESI-MS m/z 468 (MH+).

Перечень соединений представлен ниже в таблице 3.

Тестовый Пример 1

Подтверждение действия ингибирующей активности в отношении AKT1 и AKT2 киназ

Получение AKT1 и AKT2 и измерение ингибирующей активности вышеупомянутых соединений in vitro в отношении AKT1 и AKT2 киназ проводили со ссылкой на способ, раскрытый в Biochem. J. Vol. 385, pp. 399-408 (2005). Для получения AKT1 и AKT2, AKT1 и AKT2 человека, к которым была добавлена метка среднего Т-антигена, экспрессировали в клетках насекомых Sf 9, а затем получали AKT1 и AKT2 с последующей аффинной очисткой и активацией посредством PDK1. Полученные AKT1 и AKT2 хранили при температуре -80°C до момента измерения ингибирующей активности соединений. Для измерения ингибирующей активности соединений AKT1 или AKT2 и каждое соединение согласно настоящему изобретению предварительно инкубировали при температуре 25°C в течение 120 минут в буферном растворе для реакций (15 мМ Tris-HCl pH 7,5, 0,01% Твин-20, 2 мМ DTT). В качестве субстрата добавляли биотинилированный Crosstide (биотон-KGSGSGRPRTSSFAEG), MgCl₂ и ATP в конечных концентрациях 500 нМ, 10 мМ и 150 мкМ, соответственно, и проводили реакции при температуре 25°C в течение 60 минут. Реакции останавливали путем добавления EDTA в конечной концентрации 80 мМ. Затем добавляли жидкость для обнаружения, в которой содержалось меченое Eu антифосфо-Crosstide антитело (PerkinElmer) и SureLight APC-SA (PerkinElmer) в конечной концентрации 0,5 нМ и 62,5 М, соответственно, и проводили реакции при комнатной температуре в течение 2 часов. В заключение, на PHERAstar FS (BMG LABTECH) измеряли величину флуоресценции на двух длинах волн 620 нм и 665 нм при возбуждении светом с длиной волны 337 нм. Величину фосфорилирования определяли из соотношения величин флуоресценции при двух длинах волн. Концентрация соединения, при которой фосфорилирование могло быть ингибировано на 50%, определяли как IC50 (нМ), и результаты представлены ниже в таблице 4.

Как очевидно из таблицы 4, было подтверждено, что соединения согласно настоящему изобретению проявляют высокую ингибирующую активность в отношении AKT1 и AKT2.

Таблица 4    

Тестовый Пример 2

Измерение ингибирующей активности соединений в отношении процессов фосфорилирования AKT и рибосомального белка S6 в культурах клеток

Для оценки ингибирующей активности вышеуказанных соединений в отношении AKT, в экстрактах культур клеток, обработанных представленными выше соединениями, измеряли фосфорилирование AKT по Ser473 и фосфорилирование рибосомального белка S6 (S6RP) (последующий фактор в цепи передачи сигнала через AKT) по Ser240/Ser244, которые служат в качестве показателя для активированного статуса AKT. Для измерения использовали методы анализа (производства Meso Scale Discovery) с использованием электрохемилюминесценции, основанной на принципе ELISA, для обоих AKT Ser473 и S6RP Ser240/Ser244.

(Получение культур клеток)

В среду RPMI1640 с добавлением 10% FBS (Invitrogen) в 96-луночных плоскодонных планшетах, покрытых полилизином, высевали клетки злокачественной опухоли яичника A2780 в фазе логарифмического роста в количестве 4,5×10⁴ клеток/150 мкл/лунку, и культивировали в течение одних суток в инкубаторе при 5% CO₂, 37°C и 100% влажности.

(Получение соединений и добавление в культуры клеток)

Каждое соединение согласно настоящему изобретению поставлялось в виде маточного раствора, приготовленного в концентрации 10 мМ в DMSO. С использованием этого раствора проводили серии разведений в DMSO до 200-кратных конечных концентраций (10, 3, 1, 0,3, 0,1, 0,03, 0,01, 0,003 мкМ). Через сутки после высевания клеток, серии разведений соединения в 200-кратной концентрации разбавляли в 50 раз средой для клеточных культур. В каждую лунку указанных выше планшетов с культурами клеток A2780 добавляли 50 мкл разбавленных серий разведения соединения. Затем планшеты помещали обратно в инкубатор и продолжали культивирование в течение 3 часов при 5% CO₂, 37°C и 100% влажности.

(Измерение фосфорилирования AKT и S6RP в клеточных экстрактах)

Использовали метод анализа Scale Discovery's 96-Well Multi-Spot Phospho-AKT (Ser473) (K151CAA-3) и метод анализа Phospho (Ser240/244)/Total S6RP (K11139D-2). Предварительно распределяли необходимое количество предоставленного буфера для клеточных экстрактов, добавляли туда смесь ингибиторов протеаз и смесь ингибиторов протеинфосфатаз, и хранили холодным на льду. Из инкубатора извлекали культуральные планшеты с клетками, культивируемыми с соединениями в течение 3 часов, и удаляли среду. В каждую лунку добавляли 100 мкл холодного буфера для клеточных экстрактов, а затем экстрагировали встряхиванием при 300 об./мин в течение 1 часа с использованием планшетного шейкера с поддержанием температуры 4°C. С применением полученных экстрактов в количестве 40 мкл/лунку для метода анализа Phospho-AKT (Ser473) и 15 мкл/лунку для метода анализа Phospho(Ser240/244)/Total S6RP проводили реакции при температуре 4°C в течение ночи со встряхиванием при 300 об./мин в соответствии с документом, приложенным к набору. На следующий день, после трехкратного промывания лунок предоставленным буфером для промывания, добавляли 50 мкл/лунку раствора иммуносэндвича SULFO-TAG™, и проводили реакции при комнатной температуре в течение 1 часа. Лунки трижды промывали буфером для промывания, и добавляли в каждую лунку 150 мкл предоставленного Read Buffer T. Величины фосфорилирования AKT и S6RP измеряли с помощью планшет-ридера SECTOR Imager 6000 (производства Meso Scale Discovery) не позднее, чем через 30 минут после добавления Read Buffer T.

(Вычисление клеточной активности соединений)

Из всех измеренных значений вычитали фоновое значение полученное в экстракционном буфере, и принимали за 100% сигналы фосфорилирования AKT и S6RP в контрольном клеточном экстракте, обработанном только DMSO. Концентрации соединения и уровни фосфорилированных AKT и S6PR (выраженные в процентах относительно контроля) при каждой концентрации представляли графически и определяли IC50 концентрацию (нМ), при которой достигается 50% ингибирования относительно контроля.

(Обеспечение достоверности)

Значения IC50 ингибирующей активности в отношении процессов фосфорилирования AKT и S6RP в клетках для соединений согласно настоящему изобретению получали путем проведения трех независимых друг от друга описанных выше серий операций и представляли в виде «среднее значение ± среднеквадратическое отклонение». Результаты представлены ниже в таблицах 5 и 6.

Как очевидно из таблиц 5 и 6, было подтверждено, что соединения согласно настоящему изобретению сильно ингибируют фосфорилированную AKT в клетках, а также проявляют высокую ингибирующую активность в отношении рибосомального белка S6 (S6RP), последующего фактора в цепи передачи сигнала через AKT. По этим результатам было подтверждено, что соединения согласно настоящему изобретению применимы в качестве ингибитора AKT, и было предположено, что соединения согласно настоящему изобретению применимы в качестве противоопухолевого лекарства.

Таблица 5
Ингибирующая активность каждого соединения в отношении фосфорилированной AKT в культуре клеток A2780    

Таблица 6
Ингибирующая активность каждого соединения в отношении фосфорилированного S6RP в культуре клеток A2780    

Настоящее изобретение относится к имидазооксазиновому соединению формулы (I) или к его соли, где А, В, С и D представляют собой атом N или C-R^1a, атом N или C-R^1b, атом N или C-R^1c, и атом N или C-R^1d соответственно; R^1a, R^1b, R^1c и R^1d являются одинаковыми или отличаются друг от друга и каждый представляет собой водород, галоген, циано, С₁-₆алкил, который может содержать гидроксильную(ые) группу(ы) в качестве заместителя(ей), С₁-₆алкокси, карбонил, содержащий гидроксил, амино или моно- или ди- (С₁ ^_ ₆алкокси)амино в качестве заместителя, необязательно замещенный моно- или ди- (С₁-₆алкил)аминокарбонил или пиразол; R² представляет собой фенил, пиридил или тиенил; и R³ и R⁴ являются одинаковыми или отличаются друг от друга и каждый представляет собой водород, гидрокси, С_1-6алкил или С₃-₇циклоалкил, а также изобретение относится к фармацевтической композиции на основе этих соединений, обладающей противоопухолевой активностью, ингибитору АКТ, способу лечения и предупреждения рака и применению указанных соединений для получения противоракового средства.7 н. и 5 з.п. ф-лы, 6 табл., 64 пр.

,

1. Имидазооксазиновое соединение, представленное формулой (I), или его соль
,
где
А, В, С и D представляют собой атом N или C-R^1a, атом N или C-R^1b, атом N или C-R^1c, и атом N или C-R^1d соответственно;
R^1a, R^1b, R^1c и R^1d являются одинаковыми или отличаются друг от друга, и каждый представляет собой водород, галоген, циано, С₁-₆алкил, который может содержать гидроксильную(ые) группу(ы) в качестве заместителя(ей), С₁-₆алкокси, карбонил, содержащий гидроксил, амино или моно- или ди- (С₁ ^_ ₆алкокси)амино в качестве заместителя, необязательно замещенный моно- или ди- (С₁-₆алкил)аминокарбонил или пиразол;
R² представляет собой фенил, пиридил или тиенил; и
R³ и R⁴ являются одинаковыми или отличаются друг от друга и каждый представляет собой водород, гидрокси, С_1-6алкил или С₃-₇циклоалкил.

2. Имидазооксазиновое соединение по п. 1 или его соль, где
R³ представляет собой водород, С_1-6алкил или С_3-7циклоалкил; и
R⁴ представляет собой водород или гидрокси.

3. Имидазооксазиновое соединение по п. 1 или 2 или его соль,
где
А, В, С и D представляют собой C-R^1a, C-R^1b, C-R^1c и C-R^1d соответственно, или один, или два из А, В, С и D представляют собой атом N;
по меньшей мере, два из R^1a, R^1b, R^1c и R^1d представляют собой водород, а другой(ие) представляет(ют) собой галоген, циано, C₁-₆алкил, который может содержать гидроксильную(ые) группу(ы) в качестве заместителя(ей), С₁-₆алкокси, карбонил, содержащий гидроксил, амино, или моно-, или ди- (С_1-6алкокси)амино в качестве заместителя, необязательно замещенный моно- или ди- (C₁-₆алкил)аминокарбонил или пиразол,
R² представляет собой фенил, пиридил или тиенил;
R³ представляет собой водород, метил, этил или циклопропил; и
R⁴ представляет собой водород или гидрокси.

4. Имидазооксазиновое соединение по п. 1 или 2 или его соль, где
А, В, С и D представляют собой C-R^1a, C-R^1b, C-R^1c и C-R^1d соответственно, или один или два из А, В, С и D представляют собой атом N;
по меньшей мере, два из R^1a, R^1b, R^1c и R^1d представляют собой водород, а другой(ие) представляет(ют) собой хлор, фтор, циано, метил, гидроксиметил, метокси, этокси, амино, карбоксил, карбамоил, метиламинокарбонил, диметиламинокарбонил, этиламинокарбонил, гидроксиэтиламинокарбонил, этоксиаминокарбонил или пиразолил;
R² представляет собой фенил, пиридил или тиенил;
R³ представляет собой водород, метил, этил или циклопропил; и
R⁴ представляет собой водород или гидрокси.

5. Имидазооксазиновое соединение, выбранное из группы, состоящей из следующих соединений (a)-(t), или его соль:
(a) транс-3-амино-1-циклопропил-3-(4-(10-фтор-3-фенил-5Н-бензо[е]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол,
(b) транс-3-амино-1-циклопропил-3-(4-(10-фтор-3-(пиридин-4-ил)-5Н-бензо[е]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол,
(c) транс-3-амино-1-циклопропил-3-(4-(3-фенил-5Н-бензо[е]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол,
(d) транс-3-амино-1-циклопропил-3-(4-(10-метокси-3-фенил-5Н-бензо[е]имидазо[1,2-с][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол,
(e) транс-3-амино-1-циклопропил-3-(4-(9-метокси-3-фенил-5Н-бензо[е]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол,
(f) транс-3-амино-1-циклопропил-3-(4-(8-метокси-3-фенил-5Н-бензо[е]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол,
(g) транс-3-амино-1-циклопропил-3-(4-(3-фенил-5Н-имидазо[1,2-c]пиридо[2,3-е][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол,
(h) транс-3-амино-1-метил-3-(4-(3-фенил-5Н-имидазо[1,2-с]пиридо[2,3-е][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол,
(i) транс-3-амино-1-этил-3-(4-(3-фенил-5Н-имидазо[1,2-с]пиридо[2,3-е][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол,
(j) транс-3-амино-1-циклопропил-3-(4-(3-фенил-5Н-имидазо[1,2-c]пиридо[3,4-е][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол,
(k) транс-3-амино-1-метил-3-(4-(3-фенил-5Н-имидазо[1,2-
с]пиридо[3,4-е][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол,
(l) транс-3-амино-1-циклопропил-3-(4-(3-фенил-5Н-имидазо[1,2-c]пиридо[4,3-е][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол,
(m) транс-3-амино-1-метил-3-(4-(3-фенил-5Н-имидазо[1,2-с]пиридо[4,3-е][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол,
(n) транс-3-амино-1-циклопропил-3-(4-(3-фенил-5Н-имидазо[1,2-c]пиридо[3,2-е][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол,
(o) транс-3-амино-1-циклопропил-3-(4-(3-фенил-5Н-имидазо[1,2-c]пиразино[2,3-е][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол,
(p) транс-3-амино-3-(4-(9-(гидроксиметил)-3-фенил-5Н-бензо[е]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)-1-метилциклобутанол,
(q) 2-(4-(транс-1-амино-3-гидрокси-3-метилциклобутил)фенил)-3-фенил-5Н-бензо[е]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-9-карбонитрил,
(r) транс-3-амино-1-метил-3-(4-(3-фенил-9-(1Н-пиразол-5-ил)-5Н-бензо[е]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол,
(s) 2-(4-(транс-1-амино-3-гидрокси-3-метилциклобутил)фенил)-N-метил-3-фенил-5Н-бензо[е]имидазо[1,2-c][1,3]оксазин-8-карбоксамид и
(t) 2-(4-(транс-1-амино-3-гидрокси-3-метилциклобутил)фенил)-N-этокси-3-фенил-5Н-бензо[е]имидазо[1,2-е][1,3]оксазин-8-карбоксамид.

6. Фармацевтическая композиция, обладающая противоопухолевой активностью, содержащая эффективное количество имидазооксазинового соединения по любому из пп. 1-5 или его соли и фармацевтический носитель.

7. Противоопухолевое лекарственное средство, содержащее эффективное количество имидазооксазинового соединения по любому из пп. 1-5 или его соли и фармацевтический носитель.

8. Ингибитор АКТ, содержащий имидазооксазиновое соединения по любому из пп. 1-5 или его соль в качестве активного ингредиента.

9. Ингибитор АКТ по п. 8, который представляет собой ингибитор АКТ1 и АКТ2.

10. Способ предупреждения или лечения рака, включающий введение млекопитающему имидазооксазинового соединения по любому из пп. 1-5 или его соли в количестве, эффективном для предупреждения или лечения рака.

11. Применение имидазооксазинового соединения по любому из пп. 1-5 или его соли для получения профилактического или терапевтического противоракового средства.

12. Имидазооксазиновое соединение по любому из пп. 1-5 или его соль, предназначенное для предупреждения или лечения рака.