СУПРАМОЛЕКУЛЯРНЫЙ КОМПЛЕКС С НИКЛОЗАМИДОМ И СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ Российский патент 2016 года по МПК A61K31/609 A61K47/30 A61P33/10 

Изобретение относится к области сельского хозяйства, в частности ветеринарной гельминтологии, и может быть использовано для лечения цестодозов животных.

Цестодозы животных широко распространены в России и в других странах и причиняют большой экономический ущерб животноводству вследствие снижения всех видов продуктивности, отставания в росте и развитии молодняка и гибели животных, особенно при мониезиозе [4].

Одним из широко применяемых антигельминтиков для борьбы с цестодозами является никлозамид (син.: фенасал, йомезан), который обладает цестодоцидным действием в дозе 100 мг/кг [1].

Наиболее близким техническим решением, выбранным в качестве прототипа, является фенасал, который применяют на овцах, козах и крупном рогатом скоте против цестодозов, включая мониезиоз, авителлиноз, тизанизиоз; лошадям против аноплоцефалидозов, плотоядным против дипилидиоза и других тениозов. Препарат безопасен для организма животных, не обладает побочным действием. Применяют перорально с кормом в дозе 100 мг/кг овцам, телятам в дозе 150 мг/кг, собакам в дозе 250 мг/кг, лошадям 200-300 мг/кг [1, 3]. Недостатком этого препарата является низкая растворимость, плохая абсорбция слизистой оболочки кишечника и, как следствие, плохая биодоступность и высокие дозы против цестодозов, особенно при групповом применении [3, 5].

В связи с этим в задачу данных исследований входило создание супрамолекулярного комплекса с никлозамидом с повышенной эффективностью с использованием механохимической технологии.

Предлагаемый супрамолекулярный комплекс включает в себя механокомплекс, полученный путем механохимической обработки никлозамида и водорастворимого полимера поливинилпирролидона (ПВП) в весовом соотношении 1:2-1:10 в измельчителях ударно-истирающего типа. Супрамолекулярный комплекс с никлозамидом - «Супраник» представляет собой порошок бежевого цвета. Способ получения супраника характеризуется тем, что смешивают никлозамид с ПВП, затем смесь подвергают механохимической обработке путем ударно-истирающих воздействий до образования агрегатов - измельченных частиц размером от 0,1 до 10 микрон. Полученный механокомплекс более растворим в воде, более эффективен и обладает также следующими преимуществами:

1. Для получения супрамолекулярного комплекса используется водорастворимый, доступный, дешевый полимер - поливинилпирролидон, который позволяет улучшить свойства никлозамида за счет повышения водорастворимости.

2. Снижается стоимость супраника по сравнению с никлозамидом за счет использования дешевого полимера.

3. Никлозамид равномерно распределяется в порах и на поверхности полимерного носителя, что способствует повышению водорастворимости, проницаемости, биодоступности и антигельминтной эффективности.

4. Способ получения супрамолекулярного комплекса происходит в одну стадию механохимической обработки в ударно-истирающих мельницах сухим способом без участия жидких фаз, исключается процесс сушки, отсутствуют при получении супраника отходы.

Эффективность способа получения демонстрируется примерами.

Пример 1. Получение супрамолекулярного комплекса - супраника на основе никлозамида и полимера ПВП. В барабан валковой шаровой мельницы типа LE-101 объемом 3,0 кг загружали 50 г никлозамида и 500 г ПВП с добавлением в барабан 700 г металлических шаров диаметром 12 мм. Барабан устанавливали на валках и обрабатывали смесь в течение 2 часов при вращении барабана со скоростью 90 оборю/мин. Полученный продукт - супрамолекулярный комплекс: никлозамид: ПВП в соотношении 1:10 в виде бежевого сыпучего порошка выгружали из барабана и изучали его эффективность на лабораторной модели при гименолепидозе белых мышей.

Пример 2. Аналогично примеру 1 из 100 г никлозамида и 500 г ПВП получали сыпучий порошок - супрамолекулярный комплекс никлозамида: ПВП в соотношении 1:5, который затем изучали на эффективность при гименолепидозе белых мышей.

Пример 3. Аналогично примеру 1 из 250 г никлозамида и 500 г ПВП с добавлением в барабан 700 г металлических шаров и обработке в мельнице LE-101 получали бежевый сыпучий порошок - супрамолекулярный комплекс на основе никлозамида и ПВП в весовом соотношении 1:2, который испытали при гименолепидозе белых мышей.

Пример 4. Изучение эффективности заявляемого супрамолекулярного комплекса с никлозамидом (супраник) на модели Hymenolepis nana. Изучение цестодоцидной активности заявляемых супрамолекулярных комплексов (супраник) проводили на лабораторной модели гименолепидоза на белых мышах, экспериментально инвазированных Hymenolepis nana. Мышей заражали перорально с помощью шприца, снабженного специальной канюлей, из расчета 200 инвазионных яиц на животное. Собранных при вскрытии кишечника мышей цестод Н. папа растирали пестиком в ступке или разрушали в небольшом объеме водопроводной воды посредством неоднократного насасывания в шприц с насаженной на него иглой-канюлей для перорального заражения. На 13-е сутки после заражения в желудок мышей трех первых подопытных групп вводили различные тестируемые препараты однократно в дозе 10 мг/кг по ДВ в 1% крахмальном геле.

Животные четвертой группы получали прототип - никлозамид в дозе 10,0 мг/кг. Животным контрольной группы вводили крахмальный гель в соответствующих объемах. На 4-е сутки после введения препаратов мышей убивали декапитацией.

Активность препаратов (супрамолекулярных комплексов и прототипа) учитывали по результатам гельминтологического вскрытия кишечника. Извлеченных при вскрытии цестод подсчитывали. Учет эффективности препаратов проводили по типу «контрольный тест» с расчетом среднего количества обнаруженных цестод и интенсэффективности (ИЭ).

Результаты представлены в таблице 1.

При гименолепидозе белых мышей заявляемый препарат - супраник проявил 100% эффективность при соотношении никлозамида и ПВП 1:5. Препарат был эффективным как против имагинальных, так и неполовозрелых гименолеписов. При вскрытии кишечника мышей, получавших супраник, цестод не обнаруживали. После введения супрамолекулярных комплексов, полученных по примеру 1 и 3, в кишечнике животных находили нежизнеспособных гименолеписов и единичные экземпляры подвижных цестод. Эффективность составила соответственно 95,73 и 97,44%.

Базовый препарат - никлозамид в испытанной дозе не проявил активности против Н.папа (6,0%).

В кишечнике животных контрольной группы обнаруживали, в среднем, по 23,4±2,4 экз./гол. Н.папа, из них 35% составляли неполовозрелые цестоды.

Пример 5. Изучение эффективности заявляемого антигельминтного средства «Супраника» при мониезиозе овец. Испытание антигельминтного средства «Супраника» в дозе 10 мг/кг по ДВ или 50 мг/кг по препарату проводили на 48 ягнятах, спонтанно инвазированных мониезиями в колхозе «Красный путь» Пестравского района Самарской области. Ягнятам трех подопытных групп по 9-10 голов в каждой задавали однократно перорально новые лекарственные формы - супрамолекулярные комплексы никлозамида с полимером ПВП при разном их соотношении в дозе 10 мг/кг по ДВ (никлозамиду).

Овцы четвертой группы получали прототип - никлозамид в дозе 10 мг/кг. Животные контрольной группы препарат не получали.

Эффективность препаратов (супрамолекулярных комплексов и прототипа) учитывали по результатам гельминтологического вскрытия через 10 суток после дегельминтизации. Учет эффективности препаратов проводили по типу «контрольный тест» с расчетом среднего числа обнаруженных мониезий (1). Результаты представлены в таблице 2.

Результаты испытания препаратов при мониезиозе овец показали наивысшую эффективность против Moniezia expansa заявляемого супрамолекулярного комплекса «Супраника» при соотношении никлозамида и ПВП 1:5. Этот комплекс в дозе 50 мг/кг по препарату и 10 мг/кг по ДВ субстанции никлозамида показало 100% эффективность. После введения супрамолекулярных комплексов, полученных по примеру 1 и 3, в кишечнике ягнят находили единичные экземпляры мониезий в количестве соответственно 0,22 и 0,33 экз./гол. Эффективность составила 96,04 и 91,08% соответственно. Базовый препарат - никлозамид (прототип) в испытанной дозе 10 мг/кг проявил 8,11%-ю эффективность. В кишечнике ягнят контрольной группы обнаруживали, в среднем, по 3,7±0,4 экз. мониезий/гол.

Пример 6. Изучение острой токсичности супрамолекулярного комплекса «Супраника». Для определения параметров острой токсичности исследуемые комплексы вводили в желудок однократно беспородным белым мышам в дозах 5000; 7500; 10000 и 12500 мг/кг. Исследование каждой дозы проводили на 10 белых мышах. В течение 14 суток проводили наблюдение за общим состоянием и поведением животных, проявлением симптомов интоксикации и возможной гибели. Павших животных подвергали патологоанатомическому вскрытию.

Результаты изучения острой токсичности супрамолекулярных комплексов с никлозамидом при введении в желудок белым мышам представлены в таблице 3.

Результаты изучения показателей острой токсичности препаратов показали, что все испытанные супрамолекулярные комплексы, полученные по примеру 1, 2 и 3, оказались нетоксичными для организма белых мышей при введении в желудок. Ни одна мышь не пала после введения препарата в дозе 12500 мг/кг. Базовый препарат - никлозамид (прототип) напротив проявил токсичность. От дозы 12500 мг/кг пали две мыши. При вскрытии павших животных отмечали гиперемию стенок желудка и тонкого кишечника, точечные кровоизлияния на печени и почках. Следовательно, супрамолекулярные комплексы, полученные по примеру 1, 2 и 3, оказались безопасными для организма животных в дозах от 5000 до 12500 мг/кг, в то время как базовый препарат в дозе 12500 мг/кг вызвал падеж двух из 10 животных.

Полученные результаты показывают, что применение супрамолекулярного комплекса «Супраник» обеспечивает повышение антигельминтной эффективности против цестод, снижение терапевтической дозы в 10 раз и токсичности по сравнению с прототипом - никлозамидом.

Литература

1. Архипов И.А. Антигельминтики: фармакология и применение. - М.: Изд-во РАСХН. - 2009. - 405 с.

2. Инструкция о мероприятиях по предупреждению и ликвидации заболеваний животных гельминтозами. - М.: Информагротех. - 1999. - 72 с.

3. Котельников Г.А., Худошин В.И. Применение фенасала при мониезиозе и тизаниезиозе овец // Ветеринария. - 1971. - №10. - С.84-85.

4. Сафиуллин Р.Т. Распространение и экономический ущерб от основных гельминтозов жвачных животных // Ветеринария. - 1997. - №6. - С. 28-32.

5. The Biopharmaceutics Classification System (BCS) Guidance, Available at: //www.fda.gov/About FDA/Center Offices/CDER/ucm 128219, htm (accessed 25 may 2009).

Изобретение относится к области сельского хозяйства, в частности ветеринарной гельминтологии, и может быть использовано для лечения цестодозов животных. Изобретение направлено на повышение водорастворимости, биодоступности и антигельминтной эффективности никлозамида при снижении его дозы более чем в 10 раз после механохимической обработки субстанции никлозамида и полимера поливинилпирролидона в шаровой мельнице ударно-истирающего типа. Указанный технический результат достигается заявляемым составом супрамолекулярного комплекса никлозамида с полимером поливинилпирролидоном в соотношении 1:5 по весу и заявляемым способом получения, заключающимся в совместной механохимической обработке в валковой шаровой мельнице с добавлением 700 г металлических шаров в течение 2 часов при вращении барабана со скоростью 90 оборотов в минуту до получения частиц супрамолекулярного комплекса размером до 10 микрон. 6 пр., 3 табл.

Супрамолекулярный комплекс для лечения цестозов животных, включающий никлозамид, отличается тем, что он смешивается с поливинилпирролидоном в весовом соотношении 1:5 и подвергается совместной механохимической обработке в валковой шаровой мельнице с регулируемой энергонапряженностью до получения частиц супрамолекулярного комплекса размером до 10 микрон.