АНТАГОНИСТЫ ПРОГЕСТЕРОНА Российский патент 2017 года по МПК C07J1/00 C07J21/00 C07J41/00 C07J43/00 C07J51/00 C07J71/00 A61K31/58 A61K31/567 A61P5/36 

1. Область изобретения

[0001] Настоящее изобретение относится к идентификации класса соединений, которые действуют либо как чистые антипрогестины, либо как антипрогестины с частичной агонистической активностью, также называемые мезопрогестины. Как известно, чистые антипрогестины подавляют рост рака и другие пролиферативные заболевания, в то время как мезопрогестины, как было показано, являются применимыми при лечении фибромы и эндометриоза и т.д. Настоящее изобретение также относится к способам получения и применению в терапии этих новых соединений.

2. Описание предшествующего уровня техники

[0002] Как предполагалось раньше, антагонисты прогестерона являются потенциально полезными при лечении рака молочной железы, при котором первичный очаг содержит рецепторы как эстрогена, так и прогестерона. В недавнем исследовании на in vivo крысиной модели положительного по рецептору прогестерона рака молочной железы было показано, что введение нового антипрогестина (проэллекс, CDB-4124) приводило в результате к регрессии размера опухоли, а также к снижению развития новых опухолей. Ниже показан ряд выбранных модуляторов рецептора прогестерона, которые, как было показано, являются эффективными in vitro и in vivo. Прототипный антагонист, мифепристон, характеризуется 19-нор-4,9-диеновым стероидным ядром, 17α-пропинил-17β-гидрокси функциональной группой и 11β-(4-диметиламино)фенильной функциональной группой, которая, как полагают, отвечает за его антагонистическую активность. В то время как мифепристон является сильным антагонистом прогестерона, его долгосрочное клиническое применение ограничено по причине его выраженного антагонизма по отношению к рецептору глюкокортикоидов. Дальнейшая разработка, предпринятая несколькими группами, привела к открытию нескольких новых антагонистов прогестерона, которые являются как более активными, чем мифепристон, так и более разделенными в том, что касается антагонизма по отношению к глюкокортикоидам. Некоторые важные примеры включают онапристон, асоприснил, ORG-33628, проэллекс и лонапризан (ZK-230211).

[0003] Выше изображено несколько известных модуляторов рецептора прогестерона и чистых антагонистов.

[0004] Среди этих примеров лонапризан является наиболее важным, так как он проявляет высокую антипрогестагенную активность и демонстрирует только незначительные антиглюкокортикоидные эффекты.

[0005] В то время как разновидности антипрогестиновой терапии были эффективными при лечении некоторых форм рака (в том числе форм рака молочной железы), все еще существует потребность в разработке более эффективных разновидностей терапии.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0006] В одном варианте осуществления антагонист прогестерона имеет структуру формулы (I)

где

R¹ представляет собой атом водорода, С₁-С₅ алкильную группу с прямой цепью, разветвленную С₁-С₅ алкильную группу, С₃-С₅ циклоалкильную группу или атом галогена;

R² представляет собой атом водорода, С₁-С₅ алкильную группу с прямой цепью, разветвленную С₁-С₅ алкильную группу, С₃-С₅ циклоалкильную группу или атом галогена; или

R¹ и R² вместе представляют собой метиленовую группу,

R³ представляет собой атом водорода, С₁-С₅ алкильную группу с прямой цепью, разветвленную С₁-С₅ алкильную группу, С₃-С₅ циклоалкильную группу или атом галогена;

R⁴ представляет собой атом водорода, С₁-С₅ алкильную группу с прямой цепью, разветвленную С₁-С₅ алкильную группу, С₃-С₅ циклоалкильную группу или атом галогена; или

R³ и R⁴ вместе представляют собой дополнительную связь или метиленовую группу, R⁵ представляет собой радикал Y или арильный радикал, который необязательно замещен Y,

Y представляет собой атом водорода, атом галогена, -OR⁸, -NO₂, -N₃, -CN, -NR^8aR^8b, -NHSO₂R⁸, -CO₂R⁸, C₁-С₁₀алкил, замещенный C₁-С₁₀алкил, C₁-С₁₀циклоалкил, C₁-С₁₀алкенил, C₁-С₁₀алкинил, С₁-С₁₀алкокси, C₁-С₁₀циклоалкокси, C₁-С₁₀алканоилокси, бензоилокси, арилацил, C₁-С₁₀алкилацил, С₁-С₁₀циклоалкилацил, С₁-С₁₀гидроксиалкил, арил, арилалкил, гетероарил с двумя или тремя гетероатомами или гетероарилацил, содержащий до трех гетероатомов;

R⁶ представляет собой -ОН, -OR⁸, -OC(O)R⁸, -C≡C-R¹⁰, -C(O)CH₂R⁸, алкил, -Н, -(CH₂)_mCH₂R⁹ или

-CH=CH-(CH₂)_m-R⁹;

R⁷ представляет собой -ОН, -OR⁸, -OC(O)R⁸, -C≡C-R¹⁰, -C(O)CH₂R⁸, алкил, -H, -(CH₂)_mCH₂R⁹,

-CH=CH-(CH₂)_m-R⁹; радикал формулы C_nF_mH_o, где n равно 2, 3, 4, 5 или 6 при m≥1 и m+о<2n+1, или -CF₂-CH₂-CH₃; или

R⁶ и R⁷ вместе образуют

R⁸ представляет собой Н, алкил, алкилокси или арил;

R⁹ представляет собой Н, циано, гидроксил, алкокси, ацилокси; и

R¹⁰ представляет собой Н, хлор, фтор, алкил, гидроксиалкил;

где волнистые линии представляют заместитель либо в α-, либо в β-положении.

[0007] В варианте осуществления

R⁵ представляет собой радикал Y или арильный радикал, который необязательно замещен Y, при этом Y представляет собой атом водорода, атом галогена, -OR⁸, -NO₂, -N₃, -CN, -NR^8aR^8b, -NHSO₂R⁸, -CO₂R⁸, C₁-С₁₀алкил, замещенный C₁-С₁₀алкил, С₁-С₁₀циклоалкил, С₁-С₁₀алкенил, C₁-С₁₀алкинил, С₁-С₁₀алкокси, С₁-С₁₀циклоалкокси, C₁-С₁₀алканоилокси, бензоилокси, арилацил, C₁-С₁₀алкилацил, C₁-С₁₀циклоалкилацил, C₁-С₁₀гидроксиалкил, арил или арилалкил, пяти- или шестичленный гетероциклический радикал, содержащий до грех гетероагомов,

R⁶ представляет собой -ОН, -OR⁸ или -OC(O)R⁸; и

R⁷ обозначает радикал формулы C_nF_mH_o, при этом n равно 2, 3, 4, 5 или 6 при m≥1 и m+о<2n+1,

или R⁶=ОН и R⁷=-CF₂-CH₂-CH₃.

В некоторых конкретных вариантах осуществления R⁷ представляет собой -C≡C-CF₃, -C=CH-CF₃, -CH₂-CF=CF₂, -CH₂-CF₂-CH=CH₂, -CF2-CH₂-CH₃ или -C₂F₅.

В варианте осуществления

R⁵ представляет собой циклоалкилацил, или арилацил, или гетероарил с двумя или тремя гетероатомами, или гетероарилацил, содержащий до трех гетероатомов; и

R⁶ и R⁷ представляют собой

-OR⁸ и -≡-R¹⁰, соответственно;

-≡-R¹⁰ и -OR⁸, соответственно;

-OR⁸ и -COCH₂R⁸, соответственно;

-COCH₂R⁸ и -OR⁸, соответственно;

-СН₃ и -COCH₂R⁸, соответственно;

-COCH₂R⁸ и -СН₃, соответственно;

-Н и -COCH₂R⁸, соответственно;

-COCH₂R⁸ и -Н, соответственно;

-OR⁸ и -(CH₂)_mCH₂-R⁹, соответственно;

-OR⁸ и -CH=CH-(CH₂)_m-R⁹, соответственно; или

R⁶ и R⁷ в комбинации образуют

R⁷ обозначает радикал формулы C_nF_mH_o, при этом n равно 2, 3, 4, 5 или 6 при m=0, 1, 2, 3 и m+o≤2n+1.

В некоторых конкретных вариантах осуществления R⁷ представляет собой -С≡С-СН₃, -СН₂-СН₂-СН₂-ОН или -СН=СН-СН₂-ОН.

[0008] Волнистые линии в вариантах осуществления, описанных в данном документе, означают, что указанный заместитель может быть в α- или β-положении.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ

Преимущества настоящего изобретения станут очевидными для специалистов в данной области с учетом следующего подробного описания вариантов осуществления и при помощи ссылки на прилагаемые графические материалы, на которых:

В то время как настоящее изобретение может допускать различные модификации и альтернативные формы, его конкретные варианты осуществления показаны в качестве примера в графических материалах и будут подробно описаны в данном документе. Графические материалы могут не быть выполненными в масштабе. Следует понимать, однако, что графические материалы и подробное описание к ним не предназначены для ограничения настоящего изобретения раскрытой конкретной формой, но напротив, предполагается охватить все модификации, эквиваленты и альтернативы, попадающие в пределы сущности и объема настоящего изобретения, как определено при помощи прилагаемой формулы изобретения.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ПРЕДПОЧТИТЕЛЬНЫХ ВАРИАНТОВ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ

[0009] Следует понимать, что настоящее изобретение не ограничивается определенными устройствами или биологическими системами, которые, конечно, могут варьировать. Также следует понимать, что терминология, используемая в данном документе, предназначена только для цели описания определенных вариантов осуществления и не предназначена для ограничения. Используемые в данном описании и прилагаемой формуле изобретения формы единственного числа включают определяемые объекты в единственном числе и множественном числе, если содержание явно не предписывает иное. Таким образом, например, упоминание "линкера" охватывает один или несколько линкеров.

[0010] Если не указано иное, все технические и научные выражения, используемые в данном документе, имеют такое же значение, как то, которое является понятным специалисту в данной области.

[0011] Соединения, описанные в данном документе, охватывают как рацемические, так и оптически активные соединения. Подразумевается, что химические структуры, изображенные в данном документе, для которых не обозначена конкретная стереохимия, охватывают все возможные виды стереохимии.

[0012] Специалисты в данной области поймут, что соединения, имеющие один или несколько хиральных центров могут существовать и быть выделенными в оптически активных и рацемических формах. Некоторые соединения могут характеризоваться полиморфизмом. Следует понимать, что настоящее изобретение охватывает любую рацемическую, оптически активную, полиморфную или стереоизомерную форму соединения или их смеси. Используемое в данном документе выражение "один стереоизомер" относится к соединению, имеющему один или несколько хиральных центров, которое, в то время как оно может существовать в виде двух или более стереоизомеров, выделяют при более чем приблизительно 95% избытке одного из возможных стереоизомеров. Как используется в данном документе, соединение, которое имеет один или несколько хиральных центров, рассматривается как "оптически активное", если его выделяют или используют в виде одного стереоизомера.

[0013] Выражение "алкил", используемое в данном документе, как правило, относится к химическому заместителю, содержащему одновалентную группу C_nH_2n, где n равно целое число более нуля. В некоторых вариантах осуществления n равно 1-12. Выражение "алкил" включает разветвленный или неразветвленный одновалентный углеводородный радикал. Примеры алкильных радикалов включают, но без ограничения, метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, втор-бутил, пентил, 3-пентил, гексил, гептил, октил, нонил. децил, ундецил, додецил. Если алкильная группа имеет от 1 до 6 атомов углерода, ее называют "низший алкил". Подходящие радикалы, относящиеся к низшим алкилам, включают, но без ограничения, метил, этил, н-пропил, изопропил, 2-пропенил (или аллил), н-бутил, трет-бутил и изобутил (или 2-метилпропил).

[0014] Выражение "замещенные алкилы", используемое в данном документе, как правило, относится к алкильным радикалам, которые включают одну или несколько функциональных групп, присоединенных к любому углероду алкильного радикала. Функциональные группы включают, но без ограничения, арил, аралкил, ацил, галогены, гидроксил, амино, алкиламино, ациламино, ацилокси, алкокси и меркапто. Используемое в данном документе выражение "замещенный низший алкил" относится к алкильному остатку, имеющему от 1 до 6 атомов углерода и одну или несколько функциональных групп, присоединенных к любому углероду алкильного радикала.

[0015] Выражение "алкокси" как правило, относится к группе -OR, где R представляет собой низший алкил, замещенный низший алкил, арил, замещенный арил, аралкил или замещенный аралкил. Подходящие алкоксирадикалы включают, но без ограничения, метокси, этокси, фенокси, трет-бутокси, метоксиэтокси и метоксиметокси.

[0016] Выражение "ацилокси" используют в данном документе для обозначения органического радикала, полученного из органической кислоты посредством удаления водорода. Органический радикал также может быть замещен одной или несколькими функциональными группами, в том числе, без ограничения, алкилом, арилом, аралкилом, ацилом, галогеном, амино, тиолом, гидроксилом, алкокси и т.д. Подходящие ацилоксигруппы включают, например, ацетокси, т.е. СН₃СОО-, которая получена из уксусной кислоты.

[0017] Выражение "галоген" используют в данном документе для обозначения атомов фтора, брома, хлора и йода.

[0018] Выражение "гидроксил" используют в данном документе для обозначения группы -ОН.

[0019] Выражение "алкилацил" обозначает группы -C(O)R, где R представляет собой алкил или замещенный алкил, арил или замещенный арил, как определено в данном документе.

[0020] Выражение "циклоалкилацил" обозначает группы -C(O)R, где R представляет собой циклоалкил или замещенный циклоалкил, такой как, например, циклопропилацил-, циклопентилацил и циклогексилацил.

[0021] Выражение "арил" используют для обозначения ароматического заместителя, который может представлять собой одно кольцо или несколько колец, которые конденсированы вместе, ковалентно связаны или связаны с общей группой, такой как этиленовый фрагмент. Ароматическое(ие) кольцо(а) включают, но без ограничения, фенил, нафтил, бифенил, дифенилметил и 2,2-дифенил-1-этил. Арильная группа также может быть замещена заместителями, в том числе, без ограничения, алкильными группами, атомами галогена, нитрогруппами, карбоксильными группами, алкокси и фенокси с получением "замещенной арильной группы." Заместители могут быть присоединены по любому положению на арильном радикале, которое в других случаях было бы занято атомом водорода.

[0022] Выражение "гетероцикл", используемое в данном документе, как правило, относится к структуре с замкнутым кольцом, в которой один или несколько атомов в кольце представляют собой элемент, отличный от углерода. Гетероцикл может включать ароматические соединения или соединения, не относящиеся к ароматическим. Гетероциклы могут включать кольца, такие как тиофен, пиридин, изоксазол, фталимид, пиразол, индол, фуран или бензоконденсированные аналоги этих колец. Примеры гетероциклов включают тетрагидрофуран, морфолин, пиперидин, пирролидин и другие. В некоторых вариантах осуществления подразумевается, что "гетероцикл" означает стабильное 5-7-членное моноциклическое или бициклическое или 7-10-членное бициклическое гетероциклическое кольцо, которое является либо насыщенным, либо ненасыщенным, и которое состоит из атомов углерода и от 1 до 4 гетероатомов (например, N, О и S), и где гетероатомы азота и серы необязательно могут быть окисленными, и азот необязательно может быть кватернизированным, и включает любую бициклическую группу, в которой любое из определенных выше гетероциклических колец конденсировано с бензольным кольцом. В некоторых вариантах осуществления гетероциклы могут включать циклические кольца, содержащие атомы бора. Гетероциклическое кольцо может быть присоединено к его боковой группе по любому гетероатому или атому углерода, что приводит в результате к стабильной структуре. Гетероциклические кольца, описанные в данном документе, могут быть замещены по углероду или по атому азота, если полученное в результате соединение является стабильным. Примеры таких гетероциклов включают, но без ограничения, 1Н-индазол, 2-пирролидонил, 2Н,6Н-1,5,2-дитиазинил, 2Н-пирролил, 3Н-индолил, 4-пиперидонил, 4аН-карбазол, 4Н-хинолизинил, 6Н-1,2,5-тиадиазинил, акридинил, азоцинил, бензофуранил, бензотиофенил, карбазол, хроманил, хроменил, циннолинил, декагидрохинолинил, фуранил, фуразанил, имидазолидинил, имидазолинил, имидазолил, индолинил, индолизинил, индолил, изобензофуранил, изохроманил, изоиндолинил, изоиндолил, изохинолинил (бензимидазолил), изотиазолил, изоксазолил, морфолинил, нафтиридинил, октагидроизохинолинил, оксазолидинил, оксазолил, фенантридинил, фенантролинил, фенарсазинил, феназинил, фенотиазинил, феноксатиинил, феноксазинил, фталазинил, пиперазинил, пиперидинил, птеридинил, пуринил, пиранил, пиразинил, пиразолидинил, пиразолинил, пиразолил, пиридазинил, пиридинил, пиридил, пиримидинил, пирролидинил, пирролинил, пирролил, хиназолинил, хинолинил, хиноксалинил, хинуклидинил, карболинил, тетрагидрофуранил, тетрагидроизохинолинил, тетрагидрохинолинил, тетразолил, тиантренил, тиазолил, тиенил, тиофенил, триазинил, ксантенил. Также охвачены соединения с конденсированными кольцами и спиросоединения, содержащие, например, указанные выше гетероциклы.

[0023] Выражение "алкилкарбонат" используют в данном документе для обозначения группы -OC(O)OR, где R представляет собой алкил, замещенный алкил, арил или замещенный арил, как определено в данном документе.

[0024] Выражение "S-алкил" используют в данном документе для обозначения группы -SR, где R представляет собой низший алкил или замещенный низший алкил.

[0025] Выражение "S-ацил" используют в данном документе для обозначения сложного тиоэфира, полученного из реакции тиольной группы с ацилирующим средством. Примеры S-ацильиых радикалов включают, но без ограничения, S-ацетил, S-пропионил и S-пивалоил. Специалисты в данной области будут знать, что S-ацил относится к этим сложным тиоэфирам независимо от способа их получения.

[0026] Выражения "N-оксим" и "N-алкилоксим" используют в данном документе для обозначения группы =N-OR⁵, где R⁵ представляет собой, например, водород (N-оксим) или алкил (N-алкилоксим). Специалисты в данной области поймут, что оксимы могут включать синизомер, антиизомер или смесь как син-, так и антиизомеров.

[0027] Используемые в данном документе выражения "алкенил" и "олефин", как правило, относятся к любой структуре или фрагменту, имеющему ненасыщенность С=С. Примеры алкенильных радикалов включают, но без ограничения, винил, 1-пропенил, 2-пропенил, 1-бутенил, 2-бутенил, 3-бутенил, 1-пентенил, 2-пентенил, 3-пентенил, 4-пентенил, 1-гексенил, 2-гексенил, 3-гексенил, 4-гексенил, 5-гексенил, 1-гептенил, 2-гептенил, 3-геитенил, 4-гептенил, 5-гептенил, 1-ноненил, 2-ноненил, 3-ноненил, 4-ноненил, 5-ноненил, 6-ноненил, 7-ноненил, 8-ноненил, 1-деценил, 2-деценил, 3-деценил, 4-деценил, 5-деценил, 6-деценил, 7-деценил, 8-деценил, 9-деценил; 1-ундеценил, 2-ундеценил, 3-ундеценил, 4-ундеценил, 5-ундеценил, 6-ундеценил, 7-ундеценил, 8-ундеценил, 9-ундеценил, 10-ундеценил, 1-додеценил, 2-додеценил, 3-додеценил, 4-додеценил, 5-додеценил, 6-додеценил, 7-додеценил, 8-додеценил, 9-додеценил, 10-додеценил и 11-додеценил.

[0028] Выражение "фторированный алкенил", используемое в данном документе, как правило, относится к алкенильным радикалам, которые содержат один или несколько атомов фтора, присоединенных к любому углероду алкенильного радикала вместо атома водорода.

[0029] Используемое в данном документе выражение "алкинил", как правило, относится к любой структуре или фрагменту, имеющему ненасыщенность C≡С. Примеры алкинильных радикалов включают, но без ограничения, этинил, 1-пропинил, 2-пропинил, 1-бутинил, 2-бутинил и 3-бутиыил.

[0030] Выражение "фторированный алкинил", используемое в данном документе, как правило, относится к алкинильным радикалам, которые содержат один или несколько атомов фтора, присоединенных к любому углероду алкинильного радикала вместо атома водорода.

[0031] Выражение "фармацевтически приемлемые соли" охватывает соли, полученные путем реакции фармацевтически приемлемых нетоксичных оснований или кислот, в том числе неорганических или органических оснований, с неорганическими или органическими кислотами. Фармацевтически приемлемые соли могут включать соли, полученные из неорганических оснований, в том числе соли алюминия, аммония, кальция, меди, трехвалентного железа, двухвалентного железа, лития, магния, трехвалентного марганца, двухвалентного марганца, калия, натрия, цинка и т.д. Примеры включают соли аммония, кальция, магния, калия и натрия. Соли, полученные из фармацевтически приемлемых органический нетоксичных оснований, включают соли первичных, вторичных и третичных аминов, замещенных аминов, в том числе замещенных аминов, встречающихся в природе, циклических аминов и основных ионообменных смол, например, аргинин, бетаин, кофеин, холин, N,N'-дибензилэтилендиамин, диэтиламин, 2-дибензилэтилендиамин, 2-диэтиламиноэтанол, 2-диметиламиноэтанол, этаноламин, этилендиамин, N-этилморфолин, N-этилпиперидин, глюкамин, глюкозамин, гистидин, гидрабамин, изопропиламин, лизин, метилглюкамин, морфолин, пиперазин, пиперидин, полиаминные смолы, прокаин, пурины, теобромин, триэтиламин, триметиламин, трипропиламин, трометамин и т.д.

Антагонисты прогестерона

[0032] Как отмечено выше, введение фторированного заместителя, как, например, в лонапризане, оказывало значительное влияние на антипрогестагенную активность соединения. Введение ненасыщенных фторированных групп по С-17α-положению 11β-арил-19-норстероидов в одном варианте осуществления может приводить к соединениям с более высокой антипрогестагенной активностью и сниженной активностью по отношению к другим стероидным рецепторам, чем у известных антагонистов прогестерона.

[0033] В одном варианте осуществления антагонист прогестерона имеет структуру формулы (I)

где

R¹ представляет собой атом водорода, С₁-С₅ алкильную группу с прямой цепью, разветвленную С₁-С₅ алкильную группу, С₃-С₅ циклоалкильную группу или атом галогена;

R² представляет собой атом водорода, С₁-С₅ алкильную группу с прямой цепью, разветвленную С₁-С₅ алкильную группу, С₃-С₅ циклоалкильную группу или атом галогена; или

R¹ и R² вместе представляют собой метиленовую группу,

R³ представляет собой атом водорода, С₁-С₅ алкильную группу с прямой цепью, разветвленную С₁-С₅ алкильную группу, С₃-С₅ циклоалкильную группу или атом галогена;

R⁴ представляет собой атом водорода, С₁-С₅ алкильную группу с прямой цепью, разветвленную С₁-С₅ алкильную группу, С₃-С₅ циклоалкильную группу или атом галогена; или

R³ и R⁴ вместе представляют собой дополнительную связь или метиленовую группу,

R⁵ представляет собой радикал Y или арильный радикал, который необязательно замещен Y, при этом Y представляет собой атом водорода, атом галогена, -OR⁸, -NO₂, -N₃, -CN, -NR^8aR^8b, -NHSO₂R⁸, -CO₂R⁸, C₁-С₁₀алкил, C₁-С₁₀ замещенный алкил, С₁-С₁₀циклоалкил, C₁-С₁₀алкенил, C₁-С₁₀алкинил, C₁-С₁₀алкокси, C₁-С₁₀циклоалкокси, C₁-С₁₀алканоилокси, бензоилокси, арилацил, C₁-С₁₀алкилацил, C₁-С₁₀циклоалкилацил, C₁-С₁₀гидроксиалкил, арил или арилалкил, пяти- или шестичленный гетероциклический радикал, содержащий до трех гетероатомов,

R⁶ обозначает свободную, этерифицированную или эстерифицированную гидроксильную группу.

R⁷ обозначает радикал формулы C_nF_mH_o, при этом n равно 2, 3, 4, 5 или 6 при m≥1 и m+о<2n+1,

или R⁶=ОН и R⁷=-CF₂-CH₂-CH₃;

R⁸=атом водорода, гидроксильная группа, О-алкил, О-алкилокси.

[0034) Согласно другому варианту осуществления антагонист прогестерона имеет структуру формулы (I),

где

R¹ представляет собой атом водорода, С₁-С₅ алкильную группу с прямой цепью, разветвленную С₁-С₅ алкильную группу, С₃-С₅ циклоалкильную группу или атом галогена;

R² представляет собой атом водорода, С₁-С₅ алкильную группу с прямой цепью, разветвленную С₁-С₅ алкильную группу, С₃-С₅ циклоалкильную группу или атом галогена; или

R¹ и R² вместе представляют собой метиленовую группу,

R³ представляет собой атом водорода, С₁-С₅ алкильную группу с прямой цепью, разветвленную С₁-С₅ алкильную группу, С₃-С₅ циклоалкильную группа или атом галогена;

R⁴ представляет собой атом водорода, С₁-С₅ алкильную группу с прямой цепью, разветвленную С₁-С₅ алкильную группу, С₃-С₅ циклоалкильную группу или атом галогена; или

R³ и R⁴ вместе представляют собой дополнительную связь или метиленовую группу, и если

R⁵ представляет собой циклоалкилацил, или арилацил, или гетероарил с двумя или тремя гетероатомами, или гетероарилацил, содержащий до трех гетероатомов, то

R⁶ и R⁷ представляют собой

-OR⁸/-≡-Y,

-≡-Y/-OR⁸,

-OR⁸/-COCH₂R⁸,

-COCH₂R⁸/-OR⁸,

-CH₃/-COCH₂R⁸,

-COCH₂R⁸/-CH₃,

-H/-COCH₂R⁸,

-COCH₂R⁸/-H,

-OR⁸/-(CH₂)_mCH₂-R⁹,

-OR⁸/-CH=CH-(CH₂)_m-R⁹,

Y=H, хлор, фтор, алкил, гидроксиалкил,

R⁸=атом водорода, гидроксильная группа, О-алкил, О-алкилокси,

R⁹=водород, циано, гидроксил,алкокси, ацилокси,

R⁷ обозначает радикал формулы C_nF_mH_o, при этом n равно 1, 2, 3, 4, 5 или 6 при m=0, 1, 2, 3 и m+o≤2n+1.

Волнистые линии означают, что указанный заместитель может быть в α- или β-положении.

[0035] Конкретный пример соединения, имеющего формулу (I), включает соединение, имеющее структуру (1)

где R⁷ представляет собой 1a: -C≡C-CF₃,

1b: (E)-CH=CH-CF₃,

1c: -CH₂-CF=CF₂,

1d: -CF₂-CH=CH₂ или

1e: -CF₂-CH₂-CH₃.

[0036] Другой пример соединения, имеющего формулу (I), включает соединение, имеющее структуру (2)

где

2а: R⁶ представляет собой -ОН и R⁷ представляет собой C₂F₅;

2b: R⁶ представляет собой -ОН и R⁷ представляет собой -С≡С-СН₃;

2с: R⁶ представляет собой -ОН и R⁷ представляет собой -СН₂-СН₂-СН₂-ОН;

2d: R⁶ представляет собой -ОН и R⁷ представляет собой (Z)-CH=CH-CH₂-OH

или

2е: R⁶ и R⁷ вместе образуют .

[0037] Другой пример соединения, имеющего формулу (I), включает соединение, имеющее структуру (3)

где R⁷ представляет собой

3а: (E)-CH=CH-CF₃ или

3b: -CF₂-CH=CH₂.

[0038] Другой пример соединения, имеющего формулу (I), включает соединение, имеющее структуру (4)

[0039] Синтез соединений 1a, 1b, 1c, 1d, 1е, 2а, 2b, 2с, 2d, 2е, 3а, 3b и 4 можно получить согласно следующим схемам.

Промежуточное соединение 5 можно синтезировать согласно методике Rao et al., Steroids, 1998, 63, 523. Обработка 2-бром-3,3,3-трифторпропена 2 эквивалентами LDA приводила к получению необходимого 3,3,3-трифторпропиниллития при -78°С, и его добавляли к 5 с получением 6. При восстановлении 6 при помощи Red-Al при -78°С избирательно получали транс-двойную связь. При гидролизе как 6, так и 7 получали 1а и 1b, соответственно.

Раскрытие эпоксида 8 при помощи трифторвиниллития (полученного из 1,1,1,2-тетрафторэтана и н-BuLi при -78°С) в присутствии эфирата трехфтористого бора приводило к образованию 9. При последующем эпоксидировании, присоединении конъюгата по Гриньяру и гидролизе получали 1с.

Дегидрирования 17-кетопроизводного (5) достигали путем обработки избытком уксусного ангидрида в пиридине при 70°С в течение 30 ч. с образованием 12. Присоединение дифтораллиллития к 12 при -100°С приводило к получению продукта присоединения, при кислотном гидролизе которого получали 1d. Двойную связь боковой цепи по С-17 можно избирательно гидрировать с применением 10% Pd/C в атмосфере водорода с получением 1е.

Присоединение пентафторэтиллития к 13 осуществляли, как описано в Fuhrmann Ulrike et al., WO 2008058767 с образованием 14. При последующем эпоксидировании и присоединении арила по Гриньяру получали 16. Снятие защитных силильных групп с использованием TBAF с последующим окислением в присутствии TPAP/NMO приводило в результате к необходимому бензальдегиду 18. Присоединение бромистого циклопропила магния, кислотный гидролиз с последующим окислением приводили к получению конечного продукта 2а.

Присоединение арилкупрата к эпоксиду 21 с последующим десилилированием приводило к превращению в диол 23. Обработка 23 избытком бромистого пропинила магния приводила к введению пропинильной группы по С-17. Окисление бензилового спирта 24 с последующим присоединением бромистого циклопропила магния приводило к образованию 26, которое при дальнейшем окислении и кислотном гидролизе давало необходимый продукт 2b.

Присоединение избытка защищенного литерованным тетрагидропираном пропаргилового спирта к 13 давало 28, которое при эпоксидировании с последующим присоединением конъюгата и арила по Гриньяру давало в результате 30. Десилилирование 30 при помощи TBAF, гидрирование, опосредованное палладием на угле, и окисление приводило к образованию соответствующего бензальдегида (33). Конечные этапы, предусматривающие присоединение циклопропила по Гриньяру, окисление и опосредованный кислотой гидролиз, давали конечный продукт 2с.

Схема 7

Согласно схеме 7 осуществляли превращения, подобные таковым на схеме 6, за исключением того, что гидрирование проводили с использованием Pd/BaSO₄ с получением соответствующего цис-олефина. Остальные этапы окисления, присоединения циклопропила, окисления и гидролиза давали в результате 2d.

Эпоксид 40 можно получать согласно Jiang et al. "New progesterone receptor antagonists: Phosphorus-containing 11β-aryl-substituted steroids." Bioorg Med Chem (2006) 14:6726-6732. Присоединение арилкупрата с последующим снятием защитных групп приводило к образованию 42, которое при окислении и присоединении циклопропила по Гриньяру давало диол 44. Окисление 44 и кислотный гидролиз давали необходимый 2е.

Эпоксид 21 обрабатывали избытком бромистого п-бромфенила магния в присутствии каталитического хлорида меди с получением 46, который при десилилировании давал 17-кетопроизводное 47. При присоединении избытка 3,3,3-трифторпропиниллития к 47 с последующим восстановлением при помощи Red-Al получали 49. Гидролиз 49 с последующим опосредованным палладием сочетанием Судзуки давал 3а.

Дегидрирования 17-кетопроизводного 47 достигали путем обработки избытком уксусного ангидрида в пиридине при 60°С в течение 48 ч. с образованием 51. Присоединение дифтораллиллития к 51 при -100°С приводило к получению продукта присоединения, при кислотном гидролизе которого получали 52. При конечном опосредованном палладием сочетании Судзуки 52 с пиридинил-3-бороновой кислотой получали 3b.

Присоединение бромистого п-цианофенила магния к альдегиду 25 давало продукт присоединения 53, при окислении которого с последующим гидролизом получали 4.

[0040] Любой подходящий путь введения можно использовать для предоставления пациенту эффективной дозы соединений, относящихся к антагонистам прогестерона, описанных в данном документе. Например, можно использовать пероральный, ректальный, местный, парентеральный, глазной, легочный, назальный и т.п. Лекарственные формы включают таблетки, пастилки, дисперсии, суспензии, растворы, капсулы, кремы, мази, аэрозоли и т.п. В определенных вариантах осуществления преимущественным может быть то, что композиции, описанные в данном документе, вводят перорально.

[0041] Агонистическое и антагонистическое действия описанных антагонистов прогестерона можно тестировать с использованием клеток рака молочной железы. Известные клеточные линии рака молочной железы человека, например, MCF-7, T47D, MDMB231 и SKBR-3 и производные этих клеточных линий с экспрессией/без экспрессии PR, можно применять для тестирования эффекта новых антагонистов прогестерона.

[0042] В одном варианте осуществления систему на основе репортерного гена для рецептора прогестерона можно применять для оценки агонистических и антагонистических активностей заявленных антагонистов прогестерона. Агонистические и антагонистические активности также можно подтверждать с применением анализа трансактивации по отношению к прогестерону наряду с анализом пролиферативного эффекта антагонистов прогестерона на эти клетки.

[0043] In vitro биологическую активность антагонистов прогестерона можно сравнивать с активностью контролей Р4 (агонист) и RU486 (антагонист) с применением клеточного анализа с использованием элемента рецептора прогестерона (PRE)-люциферазы, как описано в Giangrande et al. "The Opposing Transcriptional Activities of the Two Isoforms of the Human Progesterone Receptor Are Due to Differential Cofactor Binding." Mol Cell Biol (2000) 20:3102-3115, который включен в данный документ при помощи ссылки. Люциферазные (luc) репортеры 2XPRE-tk-luc содержат две копии прогестерон-отвечающего элемента (PRE) выше промотора тимидинкиназы (tk). Этот вектор использовали во многочисленных исследованиях для тестирования эффекта различных антагонистов прогестерона. Исследуемые антагонисты прогестерона в этом анализе можно оценивать на предмет агонизма и антагонизма по отношению к PR. Исследование агонистических и антагонистических активностей по отношению к PR при различных концентрациях антагонистов прогестерона можно применять для определения их способности блокировать или усиливать активность PRE-люциферазы и в качестве измерения их способности к связыванию и влиянию на регуляцию PR с использованием линии клеток T47D рака молочной железы. Эта линия клеток экспрессирует как человеческие PR-A, так и PR-B формы PR и широко используется для тестирования эффектов P4/PR. После определения оптимальной концентрации антагонисты прогестерона можно тестировать на различных клеточных линиях при оптимальной концентрации. Также их агонизм и антагонизм можно тестировать при помощи PR-зависимого анализа трансактивации.

[0044] В люциферазном анализе клетки сначала трансфицируют репортерным вектором. После ограниченного количества времени клетки лизируют и субстрат для люциферазы, люциферин, вводят в клеточный экстракт наряду с Mg и избытком АТР. При этих условиях фермент люцифераза, экспрессируемый репортерным вектором, будет катализировать окислительное карбоксилирование люциферина. Люминесценцию в результате этой химической реакции можно считывать и количественно оценивать при помощи люминометра. Количество свечения, обнаруживаемое в клеточном лизате, непосредственно коррелирует со связывающей активностью транскрипционного фактора. Пустой контрольный вектор можно применять в качестве отрицательного контроля для вычитания любой фоновой активности. Пустой контрольный вектор не содержит вставку отвечающего элемента для транскрипционного фактора; причем он содержит только минимальный ТАТА-промотор и не обеспечивает ответ на любое соединение для специфической трансактивации.

[0045] Трансфекции можно осуществлять в культурах возрастом 24 часа с 80% конфлюэнтностью. Для временной трансфекции можно использовать 200 мг/лунка ДНК PRE-люциферазы. Липофектамин 2000 можно использовать для трансфекции согласно инструкциям производителя. Если не указано иное, 5 нг/лунка других оптических репортеров можно применять для нормализации трансфекции при исследованиях с временной трансфекцией. Клетки можно анализировать после инкубации в течение 24 часов при 37°С при 5% CO₂ со специфической концентрацией для каждого антагониста прогестерона. Трансфицированные клетки можно лизировать в 200 мл ледяного 1X буфера для пассивного лизиса, поставляемого Promega, и затем можно встряхивать в течение 15 мин. на льду. Клеточные лизаты можно центрифугировать в течение 5 мин. при 1,3×10⁴ g при 4°С с удалением клеточного детрита. Для определения активности люциферазы Renilla 20 мл надосадочной жидкости можно анализировать при помощи добавления 0,5 мг целентеразина в 100 мл 0,5 М натриевого PBS при рН 7,0 (PBS) с последующим подсчетом фотонов на люминометре (модель Т 20/20; Turner Designed, Саннивейл, Калифорния) в течение 10 с. Активность люциферазы светлячка можно определять, как описано применительно к активности люциферазы Renilla, за исключением того, что будут использовать 100 мл субстрата LARII от Promega. Концентрации белка в клеточных лизатах можно определять при помощи анализа по Бредфорду (Bio-Rad Laboratories, Геркулес, Калифорния). Активности люциферазы Renilla можно нормализовать по отношению к содержанию белка и по отношению к эффективности трансфекции с использованием активности люциферазы светлячка, и они будут выражены как относительные световые единицы (RLU) на микрограмм белка за минуту подсчета.

[0046] Для измерения активации PR можно проводить анализ трансактивации PR на основе ELISA согласно руководствам производителя (Panomics). Вкратце, ядерные лизаты клеток или опухолей можно получать, как описано производителем. Связывание лиганда (агониста или антагониста), например, Р4 или RU486 индуцирует конформационное изменение рецептора, что обеспечивает связывание рецептора со специфическими сайтами на ДНК, прогестерон-отвечающими элементами. Можно обеспечивать связывание активированных PR из ядерных экстрактов с консенсусным сайтом связывания для PR (зонд для PR) на биотинилированном олигонуклеотиде. Эти олигонуклеотиды затем можно иммобилизовать на покрытом стрептавидином 96-луночном планшете. PR, связанный с олигонуклеотидом, можно обнаруживать при помощи антитела, направленного против PR. Дополнительное вторичное антитело, конъюгированное с пероксидазой хрена, может обеспечивать колориметрическое считывание, количественно оцениваемое при помощи считывания поглощения при 450 нм.

[0047] С применением анализа при помощи PRE-люциферазы и дальнейшего подтверждения при помощи трансактивации PR на основе ELISA возможно определять агонистическую и антагонистическую активности антагонистов прогестерона. Если наблюдается смешанная активность, соединения, относящиеся к чистым антагонистам, можно тестировать для определения их эффективности на животных моделях in vivo. Дополнительное тестирование можно осуществлять для определения активности агонистов и антагонистов по отношению к другим тканям репродуктивной системы, в особенности для применения при лечении и предупреждении рака молочной железы.

[0048] В данной патентной заявке определенные патенты США, заявки на патент США и другие материалы (например, статьи) были включены при помощи ссылки. Текст этих патентов США, заявок на патент США и других материалов, однако, включен при помощи ссылки только в той мере, в которой не существует противоречия между этим текстом и другими утверждениями и графическими материалами, изложенными в данном документе. В случае такого противоречия любой такой противоречащий текст в этих включенных при помощи ссылки патентах США, заявках на патент США и других материалах специально не включен при помощи ссылки в данную патентную заявку.

Следующие примеры включены для демонстрации предпочтительных вариантов осуществления настоящего изобретения. Специалистам в данной области следует принять во внимание, что методики, раскрытые в примерах, представляют собой методики, хорошее функционирование которых при осуществлении настоящего изобретения на практике было выявлено автором настоящего изобретения, и, таким образом, они могут рассматриваться как представляющие предпочтительные способы для его осуществления на практике. Однако специалистам в данной области в свете настоящего описания следует принять во внимание, что в конкретные раскрытые варианты осуществления могут быть внесены многие изменения, и при этом, тем не менее, может быть получен подобный или аналогичный результат без отступления от сущности и объема настоящего изобретения.

3,3-этилендиокси-5α,17β-дигидрокси-17-(3,3,3-трифтор-1-пропинил)-11β-{4'-[1',1'-(этилендиокси)-этил]фенил}-эстр-9-ен (6)

К раствору диизопропиламина (21,6 мл, 154 ммоль) в THF (40 мл) при -78°С в атмосфере аргона добавляли н-бутиллитий (55 мл, 2,5 н, 137,5 ммоль) в течение 10 минут и перемешивали в течение 30 минут. Отдельно получали раствор 2-бром-3,3,3-трифторпропена (12 г, 68,5 ммоль) в THF (80 мл), охлаждали до -78°С и медленно добавляли полученный выше LDA в течение 20 минут. После перемешивания в течение 15 минут раствор 3,3-этилендиокси-5α-гидрокси-11β-{4'-[1',1'-(этилендиокси)-этил]фенил}-эстра-9-ен-17-она (5) (6 г, 12,1 ммоль) (Rao et al., Steroids, 1998, 63, 523) в THF (80 мл) вводили в течение 15 минут и перемешивали при -78°С в течение 1 ч., и позволяли ему медленно нагреться до комнатной температуры в течение 15 ч. Реакционную смесь гасили водным хлоридом аммония (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×100 мл). Объединенный органический слой дополнительно промывали водой и соляным раствором, высушивали над сульфатом натрия и выпаривали в вакууме с получением неочищенного продукта. Очистку проводили на силикагеле при помощи 25% этилацетата в гексане с получением 6 (5,0 г, 70%).

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,45 (s, 3Н), 1,63 (s, 3Н), 1,1-2,5 (m, 19Н), 3,7-4,1 (m, 8Н), 4,34 (d, J=6,3 Гц, 1Н), 4,44 (s, 1H), 7,17 (d, J=8,2 Гц, 2Н), 7,34 (d, J=8,2 Гц).

¹³С-ЯМР (75 МГц) 13,5, 23,4, 23,9, 24,1, 27,5, 35,1, 38,3, 38,7, 39,21, 39,25, 47,37, 47,49, 50,1, 59,54, 64,15, 64,53, 64,6, 64,76, 70,1, 74,1 (q, J=52 Гц) 80,0 (d, J=1,1 Гц), 90,5 (q, J=6,5 Гц), 108,7, 108,9, 114 (q, J=255 Гц), 125,2, 127,0, 133,2, 135,1, 140,6, 146,2.

11β-(4'-ацетилфенил)-17β-гидрокси-17-(3,3,3-трифтор-1-пропинил)-эстра-4,9-диен-3-он (1а)

В раствор 3,3-этилендиокси-5α,17β-дигидрокси-17-(3,3,3-трифтор-1-пропинил)-11β-{4'-[1',1'-(этилендиокси)-этил]фенил}-эстр-9-ена (6) (3,5 г, 6 ммоль) в метаноле (35 мл) при 0°С вводили 50% серную кислоту (2,2 мл) и оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь осторожно гасили раствором бикарбоната натрия (15 мл) и экстрагировали дихлорметаном (3×20 мл). Объединенный органический слой дополнительно промывали водой и соляным раствором, высушивали над сульфатом нагрия и выпаривали в вакууме с получением неочищенного продукта. Очистку проводили на силикагеле при помощи 25% этилацетата в гексане с получением 1а (2,5 г, 87%).

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,52 (s, 3Н), 1,3-2,9 (m, 17Н), 2,58 (s, 3Н), 4,0 (bs, 1Н), 4,46 (d, J=7,1 Гц, 1Н), 5,81 (s, 1Н), 7,26 (d, J=8,3 Гц, 2Н), 7,89 (d, J=8,4 Гц, 2Н).

¹³С-ЯМР (75 МГц) 13,6, 23,4, 25,8, 26,4, 27,3, 31,0, 36,5, 38,3, 39,071, 39,169, 40.6, 47,5, 50,1, 73,5 (q, J=52 Гц), 79,3 (d, J=1 Гц), 90,8 (q, J=6,3 Гц), 114,3 (q, J=256 Гц), 123,3, 126,8, 127,2, 128,8, 130,3, 134,9, 144,0, 150,4, 156,5, 197,9, 199,6.

3,3-этилендиокси-5α,17β-дигидрокси-17-(3,3,3-трифторпроп-1(E)-енил)-11β-{4'-[1',1'-(этилендиокси)-этил]фенил}-эстр-9-ен (7)

Во взвесь 3,3-этилендиокси-5α,17β-дигидрокси-17-(3,3,3-трифтор-1-пропинил)-11β-{4'-[1',1'-(этилендиокси)-этил]фенил}-эстр-9-ена (6) (1,2 г, 2 ммоль) в эфире (10 мл) и толуоле (10 мл) при -78°С вводили раствор гидрида натрия и бис(2-метоксиэтокси)алюминия ≥65 вес.% в толуоле (2,1 мл, 7,1 ммоль) и оставляли перемешиваться в течение 3 ч. при -78°С. Реакционной смеси позволяли нагреться до комнатной температуры в течение 1 ч. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором хлорида аммония (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×20 мл). Объединенный органический слой дополнительно промывали водой и соляным раствором, высушивали над сульфатом натрия и выпаривали в вакууме с получением 7 (1.2 г неочищенного продукта).

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,51 (s, 3Н), 1,64 (s, 3Н), 1,1-2,5 (m, 21Н), 3,7-4,1 (m, 8Н), 4,30 (d, J=6 Гц, 1Н), 4,45 (s, 1Н), 5,80-6,00 (m, 1Н), 6,54 (d, J=15,5 Гц, 1Н), 7,19 (d, J=8,2 Гц, 2Н), 7,34 (d, J=8,3 Гц, 2Н).

11β-(4'-ацетилфенил)-17β-гидрокси-17-(3,3,3-трифторпроп-1(E)-енил)-эстра-4,9-диен-3-он (1b)

В соответствии с процедурой, изложенной в общих чертах для синтеза соединения 1а, проводили гидролиз 7 (1,2 г) при помощи 50% серной кислоты с получением 1b (700 мг) после обработки и очистки.

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,59 (s, 3Н), 2,57 (s, 3Н), 1,3-2,8 (m, 19Н), 4,42 (d, J=7,0 Гц, 1Н), 5,80 (s, 1Н), 5,80-6,00 (m, 1H), 6,57 (d, J-15,5 Гц, 1Н), 7,28 (d, J=8,0 Гц, 2Н), 7,87 (d, J=8,2 Гц, 2Н).

3,3-этилендиокси-17β-гидрокси-17-(2,3,3-трифторпроп-2-енил)-5(10),9(11)-эстрадиен (9)

В раствор 1,1,1,2-тетрафторэтана (820 мг, 8 ммоль) в эфире (10 мл) при -78°С вводили н-BuLi (2,5 М, 2,4 мл, 6,1 ммоль) в течение 10 минут и оставляли перемешиваться в течение 1 ч. при -78°С. Вводили раствор спиро-2'-(1'-оксациклопропан)-17(S)-[3,3-(этилендиокси)-5(10),9(11)-эстрадиена] (8) (1 г, 3,04 ммоль) (Liu et al., J. Med. Chem., 1992, 35, 2113) в эфире (7 мл) с последующим добавлением по каплям эфирата трехфтористого бора (0,38 мл, 3,04 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение 1 ч. и позволяли ей нагреться до комнатной температуры в течение 1 ч. Гасили раствором бикарбоната натрия (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×15 мл). Объединенный органический слой дополнительно промывали водой и соляным раствором, высушивали над сульфатом натрия и выпаривали в вакууме с получением неочищенного продукта. Очистку проводили на силикагеле при помощи 20% этилацетата в гексане с получением 9 (430 мг, 35%).

¹H-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,90 (s, 3Н), 1,0-2,7 (m, 20Н), 3,99 (s, 4Н), 5,50-5,60 (bs, 1Н).

¹³С-ЯМР (75 МГц) 14,4, 23,6, 24,6, 27,6, 31,2, 31,3, 32,8, 33,7 (dd, J=2,8, 18,6 Гц), 34,7, 39,4, 41,3, 45,3, 46,2, 46,8, 64,36, 64,49, 82 (m), 108,2, 117,7, 126,1, 125-130 (m), 130,2, 136,5. 154,8 (ddd, J=285, 271, 47,2 Гц).

3,3-этилендиокси-5α,10α-эпокси-17β-гидрокси-17-(2,3,3-трифторпроп-2-енил)-эстр-9(11)-он (10)

Пероксид водорода (0,18 мл, 30%, 1,6 ммоль) добавляли к ледяному раствору тригидрата гексафторацетона (350 мг, 1,6 ммоль) в дихлорметане (3 мл). Вводили твердый Na₂HPO₄ (180 мг, 1,3 ммоль), и перемешивали реакционную смесь в течение 1 ч. при 0°С. Добавляли ледяной раствор 3,3-этилендиокси-17β-гидрокси-17-(2,3,3-трифторпроп-2-енил)-5(10),9(11)-эстрадиена (9) (410 мг, 1 ммоль) в дихлорметане (3 мл), и смесь перемешивали при 0°С в течение 3 ч., затем при 5°С в течение 15 ч. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном (15 мл) и промывали 10% раствором сульфита натрия (15 мл), водой, высушивали над сульфатом натрия и концентрировали в вакууме с получением смеси неочищенных эпоксидов. Разделение изомерных эпоксидов проводили на колонке с силикагелем при помощи 20% этилацетата в гексане с получением 10 (240 мг, 56%) в виде чистого α-изомера.

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,9 (s, 3Н), 1,0-2,8 (m, 20Н), 3,8-4,0 (m, 4Н), 5,90-6,10 (m, 1Н).

3,3-этилендиокси-5α,17β-дигидрокси-17-(2,3,3-трифторпроп-2-енил)-11β-{4'-[1',1'-(этилендиокси)-этил]фенил}-эстр-9-ен (11)

Брали взвесь магния (220 мг, 9 ммоль) в THF (10 мл), содержащую кристалл йода, и нагревали с обратным холодильником в течение 10 минут до обесцвечивания. Раствор 2-(4-бромфенил)-2-метил-1,3-диоксолана (2,1 г, 8,5 ммоль) в THF (5 мл) вводили в течение 5 минут и оставляли нагреваться с обратным холодильником в течение 1 ч. Реакционную смесь охлаждали во льду, и к ней добавляли твердый CuCl (150 мг, 1,5 ммоль), и ее продолжали перемешивать при 0°С в течение 30 минут. В конце раствор 3,3-этилендиокси-5α,10α-эпокси-17β-гидрокси-17-(2,3,3-трифторпроп-2-енил)-эстр-9(11)-ена (10) (730 мг, 1,7 ммоль) в THF (5 мл) добавляли в раствор, содержащий ионы меди, и оставляли перемешиваться в течение 2 ч. при 0°С. Гасили водным раствором хлорида аммония (30 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×25 мл). Объединенный органический слой дополнительно промывали водой и соляным раствором, высушивали над сульфатом натрия и выпаривали в вакууме с получением неочищенного продукта. Очистку проводили на силикагеле при помощи 25% этилацегата в гексане с получением 11 (810 мг, 80%).

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,48 (s, 3Н), 0,8-2,7 (m, 24Н), 3,6-4,6 (m, 10Н), 6,79 (d, J-8,8 Гц, 1H), 7,18 (d, J=8,2 Гц, 2Н), 7,30-7,40 (m, 3Н).

11β-(4'-ацетилфенил)-17β-гидрокси-17-(2,3,3-трифторпроп-2-енил)-эстра-4,9-диен-3-он (1с)

В соответствии с процедурой, изложенной в общих чертах для синтеза соединения 1а, проводили гидролиз 11 (1,5 г) при помощи 50% серной кислоты с получением 1с (1,1 г) после обработки и очистки.

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,56 (s, 3Н), 1,0-2,8 (m, 22Н), 4,48 (d, J=6,7 Гц, 1Н), 5,80 (s, 1Н), 7,29 (d, J=8,4 Гц, 2Н), 7,88 (d, J=8,4 Гц, 2Н).

¹³С-ЯМР (75 МГц) 15,2, 22,7, 23,5, 25,8, 26,4, 27,4, 30,9, 33,5 (d, J-18,7 Гц), 34,3, 36,6, 37,1, 39,3, 40,5, 46,7, 50,0, 82,8 (d, J=2,7 Гц), 123,4, 125-130 (m), 127,0, 128,6, 130,2, 134,9, 143,9, 150,0, 154,7 (ddd, J=47, 272, 286 Гц), 155,9, 197,4, 198,9.

3,3-этилендиокси-11β-{4'-[1',1'-(этилендиокси)-этил]фенил}-эстра-4,9-диен-17-он (12)

К раствору 3,3-этилендиокси-5α-гидрокси-11β-{4'-[1',1'-(этилендиокси)-этил]фенил}-эстра-9-ен-17-она (5) (3 г, 6 ммоль) в пиридине (30 мл) добавляли DMAP (150 мг) и уксусный ангидрид (3 мл) и нагревали при 70°С в течение 30 ч. Реакционную смесь концентрировали в вакууме и непосредственно очищали на силикагеле при помощи 10% этилацетата в гексане, содержащего 1% TEA, с получением 12 (2,3 г, 80%).

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,48 (s, 3Н), 1,2-2,8 (m, 17Н), 1,63 (s, 3Н), 3,7-4,1 (m, 8Н), 4,31 (d, J=7,1 Гц, 1Н), 5,4 (s, 1Н), 7,18 (d, J=8,2 Гц, 2Н), 7,34 (d, J-8,3 Гц, 2Н).

¹³С-ЯМР (75 МГц) 14,5, 22,0, 24,3, 27,4, 27,5, 30,5, 33,2, 35.5, 37,5, 37,7, 39.6, 47,8, 51,0, 64,5, 64,6, 64,7, 106,2, 108,9, 121,9, 125,4, 127,0, 130,4, 137,5, 139,3, 140,7, 144,6, 219,6.

11β-(4'-ацетилфенил)-17β-гидрокси-17-(1,1-дифторпроп-2-енил)-эстра-4,9-диен-3-он (1d)

К раствору 3,3-этилендиокси-11β-{4'-[1',1'-(этилендиокси)-этил]фенил}-эстра-4,9-диен-17-она (12) (400 мг, 0,84 ммоль) и 3-бром-3,3-дифторпропена (530 мг, 3,4 ммоль) в смеси THF-эфир-пентан (4:1:1) (6 мл) при -100°С по каплям добавляли n-BuLi (1,3 мл, 2,5 М, 3,2 ммоль). Реакционную смесь оставляли перемешиваться в течение 90 минут при -95°С, и ей позволяли нагреться до комнатной температуры в течение 3 ч. Гасили раствором хлорида аммония (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×15 мл). Объединенный органический слой концентрировали досуха, растворяли в метаноле (5 мл) и обрабатывали 50% серной кислотой (0,25 мл) при 0°С. Реакционную смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение 2 ч. и осторожно гасили раствором бикарбоната натрия (15 мл). Органические материалы экстрагировали дихлорметаном (3×10 мл), и объединенные слои дихлорметана высушивали над сульфатом натрия, концентрировали в вакууме. Очистку осуществляли на колонке с силикагелем при помощи 25% этилацетата в гексане с получением 1d (160 мг, 40%).

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,52 (s, 3Н), 1,2-2,8 (m, 17Н), 2,52 (s, 3Н), 4,42 (bs, 1Н), 5,50 (d, J=11,1 Гц, 1H), 5,68 (d, J=17,3 Гц, 1Н), 5,74 (s, 1H), 6,0-6,3 (m, 1H), 7,26 (d, J=8,1 Гц, 2H), 7,83 (d, J=8,3 Гц, 2H).

¹³С-ЯМР (75 МГц) 16,9, 24,5, 25,8, 26,5, 27,7, 31,1, 33,6, 36,7, 38,8, 39,5, 41,0, 48,2, 51,0, 85,1 (t, J=26 Гц), 120,7 (t, J=9,5 Гц), 123,0 (t, J=247 Гц), 123,2, 127,1, 128,7, 129,9, 131,2 (t, J=25,2 Гц), 134,9, 144,3,150,7, 156,3, 197,7, 199,3.

11β-(4'-ацетилфенил)-17β-гидрокси-17-(1,1-дифторпропил)-эстра-4,9-диен-3-он (1e)

К раствору 11β-(4'-ацетилфенил)-17β-гидрокси-17-(1,1-дифторпроп-2-енил)-эстра-4,9-диен-3-она (1d) (160 мг, 0,34 ммоль) в этаноле (5 мл), содержащем 10% Pd/C (20 мг), под давлением в баллоне примешивали водород в течение 2 ч. Катализатор отфильтровывали через ватный тампон, растворители удаляли в вакууме, и проводили очистку на колонке с силикагелем с получением 1е (120 мг, 75%).

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,53 (s, 3Н), 1,03 (t, J=7,4 Гц, 3Н), 1,1-2,8 (m, 19Н), 2,55 (s, 3Н), 4,44 (bs, 1Н), 5,76 (s, 1Н), 7,28 (d, J=8,4 Гц), 7,86 (d, J=8,4 Гц).

¹³С-ЯМР (75 МГц) 1,0, 5,5 (t, J=6,1 Гц), 17,1, 24,7, 25,9, 26,1, 26,6, 27,7, 31,1, 34,1, 36,8, 39,1, 39,4, 41,2, 48,6, 51,4, 85,7 (t, J=26 Гц), 123,3, 127,2, 127,8 (t, J=249 Гц), 128,8, 130,0, 135,0, 144,3, 150,9, 156,3, 197,7, 199,3.

3,3-этилендиокси-17β-гидрокси-17-(1,1,2,2,2-пентафторэтил)-эстра-5(10),9(11)-диен (14)

К раствору 3,3-этилендиоксиэстра-5(10),9(11)-диен-17-она (13) (2,5 г, 8 ммоль) в толуоле (32 мл) при -78°С добавляли конденсированный пентафторйодэтан (4 г, 16 ммоль) и оставляли перемешиваться в течение 10 мин. Раствор метиллития и бромида лития в эфире (1,5 М, 9,8 мл) вводили по каплям в течение 5 мин. и продолжали перемешивать при -78°С в течение 1 ч. Реакционную смесь нагревали до 0°С и перемешивали в течение 1 ч. во льду перед гашением водой. Экстрагировали этилацетатом (2×25 мл), и объединенный органический слой однократно промывали соляным раствором, высушивали над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением 14 (3,0 г, 85%), применяемого для эпоксидирования без дополнительной очистки.

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,93 (s, 3Н), 1,2-2,8 (m, 18Н), 3,98 (s, 4Н), 5,6 (bs, 1H).

3,3-этилендиокси-5α,10α-эпокси-17β-гидрокси-17-(1,1,2,2,2-пентафторэтил)-эстра-9(11)-ен (15)

В соответствии с процедурой, изложенной в общих чертах для синтеза соединения 10, эпоксидирование 14 (3,0 г) проводили при помощи пероксида водорода и гексафторацетона в дихлорметане и после обработки и очистки получали 15 (1,8 г).

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,92 (s, 3Н), 1,1-2,8 (m, 18Н), 3,70-4,00 (m, 4Н), 6,0 (bs, 1Н).

¹³С-ЯМР (75 МГц) 15,8, 22,8, 25,1, 25,2, 28,1, 31,8, 34,4, 35,4 (dd, J=3,6, 8,1 Гц), 38,4, 40,3, 48.8, 49.0, 49,1, 60,1, 61,7, 64,1, 64,4, 84,2 (dd, J=25,1, 21,5 Гц), 107,1, 117 (m), 122 (m), 126,86, 126,89, 135,1.

3,3-этилендиокси-5α,17β-дигидрокси-17-(1,1,2,2,2-пентафторэтил)-11β-[4'-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)фенил]-эстр-9-ен (16)

В соответствии с процедурой, изложенной в общих чертах для синтеза соединения 11, реакцию Гриньяра с 15 (230 мг) проводили при помощи 4-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)бромбензола и магния и после обработки и очистки получали требуемый продукт 16 (340 мг).

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,08 (s, 6Н), 0,53 (s, 3Н), 0,93 (s, 9Н), 1,2-2,5 (m, 18Н), 3,8-4,1 (m, 4Н), 4,4 (bd, 1Н), 4,70 (s, 2Н), 7,0-7,2 (m, 4Н).

3,3-этилендиокси-5α,17β-дигидрокси-17-(1,1,2,2,2-пентафторэтил)-11β-[4'-(гидроксиметил)фенил]-эстр-9-ен (17)

В раствор 3,3-этилендиокси-5α,17β-дигидрокси-17-(1,1,2,2,2-пентафторэтил)-11β-[4'-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)фенил]-эстр-9-ена (16) (340 мг) в THF (3 мл) в атмосфере аргона вводили TBAF (1,0 М, 1,3 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Растворители удаляли при пониженном давлении и непосредственно очищали на колонке с силикагелем при помощи 60% этилацетата в гексане с получением 17 (210 мг, 75%).

3,3-этилендиокси-5α,17β-дигидрокси-17-(1,1,2,2,2-пентафторэтил)-11β-(4'-формилфенил)-эстр-9-ен (18)

Во взвесь 3,3-этилендиокси-5α,17β-дигидрокси-17-(1,1,2,2,2-пентафторэтил)-11β-[4'-(гидроксиметил)-фенил]-эстр-9-ена (17) (210 мг), NMO (66 мг) и порошкообразного молекулярного сита 4А (190 мг) в дихлорметане (8 мл) моментально вводили ТРАР (7 мг) и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Чистый продукт получали путем непосредственного пропускания через колонку с силикагелем при помощи 30% этилацетата в гексане с получением 200 мг 18.

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,51 (s, 3Н), 1,0-2,8 (m, 18Н), 3,8-4,1 (m, 4Н), 4,2-4,4 (m, 2Н), 7,41 (d, J=8,1 Гц, 2Н), 7,78 (d, J=8,3 Гц, 2Н), 9,96 (s, 1Н).

11β-(4'-[1-циклопропилгидроксиметил]фенил)-17β-гидрокси-17-(1,1,2,2,2-пентафторэтил)-эстра-4,9-диен-3-он (20)

К раствору 3,3-этилендиокси-5α,17β-дигидрокси-17-(1,1,2,2,2-пентафторэтил)-11β-(4'-формилфенил)-эстр-9-ена (18) (650 мг) в THF (16 мл) при -5°С добавляли бромистый циклопропилмагний (0,5 М, 9,3 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Гасили водой и экстрагировали этилацетатом (3×20 мл). Объединенный органический слой однократно промывали соляным раствором, высушивали над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта. Гидролиз неочищенного спирта 19 проводили при помощи 50% серной кислоты согласно процедуре, подробно описанной для 1а. Очистку осуществляли на колонке с силикагелем при помощи 30% этилацетата в гексане с получением 500 мг 20 (80%).

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,2-0,3 (m, 1Н), 0,4-0,5 (m, 2Н), 0,60 (s, 3Н), 0,5-0,7 (m, 1Н), 1,0-1,2 (m, 1H), 1,3-2,8 (m, 16Н), 3,24 (s, 3Н), 3,53 (d, J=8 Гц, 1H), 4,46 (d, J=6,7 Гц, 1Н), 5,78 (s, 1Н), 7,14 (d, J=8,0 Гц, 2Н), 7,23 (d, J=8,2 Гц, 2Н).

¹³С-ЯМР (75 МГц) 1,6, 4,12, 4,15, 16,4, 16,98, 17,04, 24,8, 25,68, 27,5, 30,9, 33,0, 36,5, 38,49, 38,6, 39,11, 39,14, 40,45, 50,36, 51,64, 51,70, 56,42, 84,1 (dd, J=24,8, 21,2 Гц), 86,99, 87,01, 117(m), 121 (m), 122,9, 126,5, 126,9, 129,6, 139,1, 143,2, 144,6, 156,4, 199,5.

11β-(4'-[циклопропилкарбонил]фенил)-17β-гидрокси-17-(1,1,2,2,2-пентафторэтил)-эстра-4,9-диен-3-он (2а)

К взвеси 11β-(4'-[1-циклопропилгидроксиметил]фенил)-17β-гидрокси-17-(1,1,2,2,2-пентафторэтил)-эстра-4,9-диен-3-она (20) (500 мг) и молекулярного сита 3А (500 мг) в дихлорметане (10 мл) добавляли РСС (800 мг) и перемешивали в течение ночи. Очистку осуществляли непосредственно на колонке с силикагелем при помощи 20% этилацетата в гексане с получением 350 мг (70%) 2а.

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,58 (s, 3Н), 1,0-2,9 (m, 21Н), 4,48 (d, J=6,9 Гц, 1Н), 5,78 (s, 1Н), 7,30 (d, J=8,2 Гц, 2Н), 7,92 (d, J=8,2 Гц, 2Н).

3,3-этилендиокси-17β-циано-5α-гидрокси-17α-триметилсилилокси-11β-[4'-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)фенил]-эстр-9-ен (22)

В соответствии с процедурой, изложенной в общих чертах для синтеза соединения 11, реакцию Гриньяра с 21 (15 г) проводили при помощи 4-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)бромбензола и магния, и после обработки и очистки получали 22 (15,4 г).

3,3-этилендиокси-5α-гидрокси-11β-[4'-(гидроксиметил)фенил]-эстр-9-ен-17-он (23)

В раствор 3,3-этилендиокси-17β-циано-5α-гидрокси-17α-триметилсилилокси-11β-[4'-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)фенил]-эстр-9-ена (22) (15,4 г) в THF (150 мл) вводили по каплям раствор TBAF (1 М, 59 мл) в THF и оставляли перемешиваться в течение 1 ч. THF удаляли при пониженном давлении, и полученное в результате масло суспендировали в смеси воды (90 мл), метанола (10 мл) и CH₂Cl₂ (10 мл) и охлаждали до 0°С. Вводили раствор гидроксида натрия (2 М, 80 мл) и оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение 2 ч. В конце к реакционной смеси добавляли воду (50 мл) и экстрагировали дихлорметаном (3×50 мл). Объединенный органический слой однократно промывали водой (30 мл), высушивали над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта. Очистку проводили на колонке с силикагелем при помощи 5% ацетона в дихлорметане с получением 10 г (23).

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,49 (s, 3Н), 1,0-2,8 (m, 18Н), 3,8-4,1 (m, 4Н), 4,20-4,35 (m, 1Н), 4,40 (s, 1Н), 4,60-4,70 (m, 2Н), 7,2-7,4 (m, 4Н).

3,3-этилендиокси-5α,17β-дигидрокси-17-(1-пропинил)-11β-[4'-(гидроксиметил)фенил]-эстр-9-ен (24)

К раствору 3,3-этилендиокси-5α-гидрокси-11β-[4'-(гидроксиметил)фенил]-эстр-9-ен-17-она (23) (2 г) в THF (40 мл) по каплям добавляли бромистый пропинилмагний (0,5 М, 44 мл) и оставляли перемешиваться при 50°С в течение 2 ч. Реакционную смесь гасили с помощью NaHCO₃ (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×20 мл). Объединенный органический слой однократно промывали водой (20 мл), высушивали над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта. Неочищенный материал растирали в порошок с дихлорметаном с получением 1,45 г 24.

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,45 (s, 3Н), 1,0-2,6 (m, 18Н), 1,89 (s, 3Н), 3,8-4,1 (m, 4Н), 4,2-4,5 (m, 2Н), 4,60-4,70 (m, 2Н), 7,10-7,35 (m, 4Н).

3,3-этилендиокси-5α,17β-дигидрокси-17-(1-пропинил)-11β-(4'-формилфенил)-эстр-9-ен (25)

В соответствии с процедурой, изложенной в общих чертах для синтеза соединения 18, проводили окисление 24 (1,42 г) при помощи ТРЛР и NMO, и после обработки и очистки получали требуемый продукт 25 в количественном выходе.

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,42 (s, 3Н), 1,1-2,6 (m, 18Н), 1,89 (s, 3Н), 3,8-4,1 (m, 4Н), 4,3-4,4 (m, 1Н), 4,45 (s, 1Н), 7,41 (d, J=8,1 Гц, 2Н), 7,78 (d, J=8,3 Гц, 2Н), 9,96 (s, 1Н).

3,3-этилендиокси-5α,17β-дигидрокси-17-(1-пропинил)-11β-(4'-[1-циклопропилгидроксиметил]фенил)-эстр-9-ен (26)

К раствору 3,3-этилендиокси-5α,17β-дигидрокси-17-(1-пропинил)-11β-(4'-формилфенил)-эстр-9-ена (25) (1,4 г) в THF (35 мл) при -5°С добавляли бромистый циклопропилмагний (0,5 М, 23,5 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Гасили водой и экстрагировали этилацетатом (3×20 мл). Объединенный органический слой однократно промывали водой (20 мл), высушивали над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта. Очистку проводили на колонке с силикагелем с получением 750 мг 26.

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,44 (s, 3Н), 0,2-0,8 (m, 5Н), 1,0-2,6 (m, 18Н), 1,90 (s, 1Н), 3,8-4,1 (m, 4Н), 4,2-4,4 (m, 1H), 4,45 (s, 1Н), 7,19 (d, J=7,8 Гц, 2Н), 7,30 (d, J=8 Гц, 2Н).

3,3-этилендиокси-5α,17β-дигидрокси-17-(1-пропинил)-11β-(4'-[циклопропилкарбонил]фенил)-эстр-9-ен (27)

В соответствии с процедурой, изложенной в общих чертах для синтеза соединения 18, окисление 26 проводили при помощи TPAP и NMO и после обработки и очистки получали требуемый продукт 27 в количественном выходе.

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,44 (s, 3Н), 1,0-2,7 (m, 23Н), 1,9 (s, 3Н), 3,6-4,1 (m, 4Н), 4,30-4,40 (m, 1Н), 4,45 (s, 1Н), 7,34 (d, J=8,4 Гц, 2Н), 7,92 (d, J=8,3 Гц, 2Н).

11β-(4'-[циклопропилкарбонил]фенил)-17β-гидрокси-17-(1-пропинил)-эстра-4,9-диен-3-он (2b)

В соответствии с процедурой, изложенной в общих чертах для синтеза соединения 1а, гидролиз 27 (690 мг) проводили при помощи 50% серной кислоты с получением 2b (460 мг) после обработки и очистки.

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,5 (s, 3Н), 1,00-1,15 (m, 2Н), 1,20-3,00 (m, 19Н), 1,91 (s, 3Н), 4,4-4,5 (m, 1Н), 5,8 (s, 1Н), 7,31 (d, J=7,7 Гц, 2Н), 7,95 (d, J=7,8 Гц, 2Н).

3,3-этилендиокси-17β-гидрокси-17-(3-тетрагидропиранилокси-1-пропинил)-эстра-5(10),9(11)-диен (28)

К раствору тетрагидро-2-(2-пропинилокси)-2Н-пирана (13,4 г) в THF (50 мл) при 0°С по каплям добавляли н-BuLi (2,5 М раствор в гексане, 38 мл) и оставляли перемешиваться в течение 30 мин. при 0°С. Раствор 3,3-этилендиоксиэстра-5(10),9(11)-диен-17-она (13) (10 г) в THF (50 мл) по каплям добавляли в реакционную смесь и оставляли перемешиваться в течение 2 ч. при 0°С. Гасили насыщенным раствором хлорида аммония (100 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×25 мл). Объединенный органический слой однократно промывали водой, высушивали над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. После очистки на колонке с силикагелем получали 28 (13 г).

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,84 (s, 3Н), 1,10-2,8 (m, 24Н), 3,4-3,6 (m, 1Н), 3,7-3,9 (m, 1Н), 4,00 (s, 4Н), 4,20-4,40 (m, 2Н), 4,80 (s, 1Н), 5,61 (s, 1Н).

3,3-этилендиокси-5α,10α-эпокси-17β-гидрокси-17-(3-тетрагидропиранилокси-1-пропинил)-эстра-9(11)-ен (29)

В соответствии с процедурой, изложенной в общих чертах для синтеза соединения 10, опоксидирование 28 (10 г) проводили при помощи пероксида водорода и гексафторацетона в дихлорметане, и после обработки и очистки получали 29 (5,2 г).

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,84 (s, 3Н), 1,0-2,8 (m, 24Н), 3,4-3,6 (m, 1Н), 3,7-4,1 (m, 5Н), 4,20-4,40 (m, 2Н), 4,79 (s, 1Н), 6,07 (s, 1Н).

3,3-этилендиокси-5α,17β-дигидрокси-17-(3-тетрагидропиранилокси-1-пропинил)-11β-[4'-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)фенил]-эстр-9-ен (30)

В соответствии с процедурой, изложенной в общих чертах для синтеза соединения 11, реакцию Гриньяра с 29 (5,2 г) проводили при помощи 4-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)бромбензола и магния и после обработки и очистки получали 30 (5,8 г).

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,09 (s, 6Н), 0,46 (s, 3Н), 0,94 (s, 9Н), 1,10-2,60 (m, 24Н), 3,5-3,7 (m, 1Н), 3,75-4,10 (m, 5Н), 4,25-4,50 (m, 3Н), 4,70 (s, 2Н), 4,80 (s, 1H), 7,10-7,30 (m, 4Н).

3,3-этилендиокси-5α,17β-дигидрокси-17-(3-тетрагидропиранилокси-1-пропинил)-11β-[4'-(гидроксиметил)фенил]-эстр-9-ен (31)

В соответствии с процедурой, изложенной в общих чертах для синтеза соединения 17, снятие защитных групп с 30 (5,8 г) проводили при помощи TBAF с получением 31 (4,7 г) после обработки и очистки.

¹H-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,47 (s, 3Н), 1,0-2,5 (m, 24Н), 3,40-3,60 (m, 1Н), 3,75-4,20 (m, 5Н), 4,20-4,50 (m, 3Н), 4,66 (s, 2Н), 4,83 (s, 1Н), 7,10-7,30 (m, 4Н).

3,3-этилендиокси-5α,17β-дигидрокси-17-(3-тетрагидропиранилокси-1-пропил)-11β-[4'-(гидроксиметил)фенил]-эстр-9-ен (32)

Раствор 31 (2,0 г) в THF (20 мл) гидрировали в аппарате Paar при помощи 5% Pd/C (190 мг) под давлением водорода 15 фунт/кв. дюйм в течение ночи. Катализатор отфильтровывали и промывали этилацетатом (25 мл). Объединенный органический слой концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта 32 (1,9 г).

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,48 (s, 3Н), 1,10-2,60 (m, 28Н), 3,30-3,60 (m, 2Н), 3,70-4,10 (m, 6Н), 4,20-4,40 (m, 2Н), 4,50-4,70 (m, 3Н), 7,10-7,30 (m, 4Н).

3,3-этилендиокси-5α,17β-дигидрокси-17-(3-тетрагидропиранилокси-1-пропил)-11β-(4'-формилфенил)-эстр-9-ен (33)

В соответствии с процедурой, изложенной в общих чертах для синтеза соединения 18, окисление 32 (1,9 г) проводили при помощи ТРАР и NMO и после обработки и очистки получали 33 (1,6 г).

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,46 (s, 3Н), 1,10-2,6 (m, 28Н), 3,30-3,60 (m, 2Н), 3,60-4,10 (m, 5Н), 4,38 (s, 2Н), 4,60 (s, 1Н), 7,42 (d, J=8,2 Гц, 2Н), 7,77 (d, J=8,2 Гц, 2Н).

3,3-этилендиокси-5α,17β-дигидрокси-17-(3-тетрагидропиранилокси-1-пропил)-11β-(4'-[1-циклопропилгидроксиметил]фенил)-эстр-9-ен (34)

В соответствии с процедурой, изложенной в общих чертах для синтеза соединения 26, присоединение циклопропила к 33 (1,55 г) проводили при помощи 4 эквивалентов бромистого циклопропилмагния и после обработки и очистки получали 34 (XX г).

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,2-0,8 (m, 7Н), 0,8-2,6 (m, 29Н), 3,30-3,60 (m, 2H), 3,60-4,20 (m, 6Н), 4,20-4,40 (m, 2Н), 4,61 (s, 1Н), 7,10-7,40 (m, 4Н).

3,3-этилендиокси-5α,17β-дигидрокси-17-(3-тетрагидропиранилокси-1-пропил)-11β-(4'-[циклопропилкарбонил]фенил)-эстр-9-ен (35)

В соответствии с процедурой, изложенной в общих чертах для синтеза соединения 18, окисление 34 (XX г) проводили при помощи ТРАР и NMO и после обработки и очистки получали 35 (XX г).

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,49 (s, 3Н), 0,9-2,80 (m, 32Н), 3,30-3,60 (m, 2Н), 3,60-4,20 (m, 6Н), 4,40 (bs, 2Н), 4,62 (s, 1Н), 7,30 (d, J=8,2 Гц, 2Н), 7,93 (d, J=8,3 Гц, 2Н).

11β-(4'-[циклопропилкарбонил]фенил)-17β-гидрокси-17-(3-гидроксипропил)-эстра-4,9-диен-3-он (2с)

В соответствии с процедурой, изложенной в общих чертах для синтеза соединения 1а, гидролиз 35 (XX г) проводили при помощи 50% серной кислоты с получением 2с (XX г) после обработки и очистки.

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,53 (s, 3Н), 1,0-1,1 (m, 2Н), 1,15-1,25 (m, 2Н), 1,25-2,8 (m, 20Н), 3,50-3,80 (m, 2Н), 4,30-4,55 (m, 1Н), 5,79 (s, 1Н), 7,28 (d, J=8,3 Гц, 2Н), 7,93 (d, J=8,4 Гц, 2Н).

3,3-этилендиокси-5α,17β-дигидрокси-17-(3-тетрагидропиранилоксипроп-1(Z)-енил)-11β-[4'-(гидроксиметил)фенил]-эстр-9-ен (36)

Раствор 3,3-этилендиокси-5α,17β-дигидрокси-17-(3-тетрагидропиранилокси-1-пропинил)-11β-[4'-(гидроксиметил)фенил]-эстр-9-ена (31) (2,2 г) в этаноле (40 мл), содержащий 5% Pd/BaSO₄ (0,2 г) и пиридин (2 мл), гидрировали при помощи водорода под давлением в баллоне, что непрерывно отслеживалось с помощью TLC. По завершении катализатор отфильтровывали и промывали этилацетатом (30 мл). Объединенный фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного 36 (2,1 г).

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,50 (s, 3Н), 1,0-2,8 (m, 24Н), 3,30-3,60 (m, 2Н), 3,70-4,15 (m, 5Н), 4,20-4,80 (m, 6Н), 5,50-5,80 (m, 2Н), 7,10-7,30 (m, 4Н).

3,3-этилендиокси-5α,17β-дигидрокси-17-(3-тетрагидропиранилоксипроп-1(Z)-енил)-11β-(4'-формилфенил)-эстр-9-ен (37)

В соответствии с процедурой, изложенной в общих чертах для синтеза соединения 18, окисление 36 (2,5 г) проводили при помощи ТРАР и NMO и после обработки и очистки получали 37 (2,0 г).

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,48 (s, 3Н), 1,25-2,40 (m, 24Н), 3,40-3,60 (m, 2Н), 3,80-4,10 (m, 4Н), 4,10-4,60 (m, 4Н), 4,73 (bs, 1Н), 5,50-5,80 (m, 2Н), 7,30-7,45 (m, 2Н), 7,76 (d, J=8,3 Гц, 2Н), 9,95 (s, 1Н).

3,3-этилендиокси-5α,17β-дигидрокси-17-(3-тетрагидропиранилоксипроп-1(Z)-енил)-11β-(4'-[1-циклопропилгидроксиметил]фенил)-эстр-9-ен (38)

В соответствии с процедурой, изложенной в общих чертах для синтеза соединения 26, присоединение циклопропила к 37 (1,2 г) проводили при помощи 4 эквивалентов бромистого циклопропилмагния и после обработки и очистки получали 38 (1,15 г).

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,25-0,70 (m, 4Н), 0,50 (s, 3Н), 1,25-2,50 (m, 25Н), 3,25-3,60 (m, 2Н), 3,80-4,10 (m, 6Н), 4,15-4,60 (m, 4Н), 4,73 (bs, 1Н), 5,50-5,80 (m, 2Н), 7,10-7,35 (m, 4Н).

3,3-этилендиокси-5α,17β-дигидрокси-17-(3-тетрагидропиранилоксипроп-1(Z)-енил)-11β-(4'-[циклопропилкарбонил]фенил)-эстр-9-ен (39)

В соответствии с процедурой, изложенной в общих чертах для синтеза соединения 18, окисление 38 (1,15 г) проводили при помощи ТРАР и NMO и после обработки и очистки получали 39 (1,0 г).

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,51 (s, 3Н), 1,00-2,75 (m, 29Н), 3,40-3,65 (m, 2Н), 3,80-4,10 (m, 5Н), 4,15-4,60 (m, 3Н), 4,74 (bs, 1Н), 5,50-5,80 (m, 2Н), 7,26-7,40 (m, 2Н), 7,92 (d, J=8,3 Гц, 2H).

11β-(4'-[циклопропилкарбонил]фенил)-17β-гидрокси-17-(3-гидроксипроп-1(Z)-енил)-эстра-4,9-диен-3-он (2d)

В соответствии с процедурой, изложенной в общих чертах для синтеза соединения 1а, гидролиз 39 (1,0 г) проводили при помощи 50% серной кислоты с получением 2d (500 мг) после обработки и очистки.

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,57 (s, 3Н), 0,9-1,10 (m, 2Н), 1,10-2,90 (m, 19Н), 4,20-4,50 (m, 3Н), 5,60-5,80 (m, 3Н), 7,30 (d, J=8,4 Гц, 2Н), 7,95 (d, J=8,4 Гц, 2Н).

¹³С-ЯМР (75 МГц) 11,7, 14,3, 15,2, 17,1, 21,1, 23,7, 25,9, 27,6, 31,1, 36,9, 38,8, 39,4, 39,5, 40,7, 47,6, 50,3, 60,5, 85,5, 123,5, 127,2, 128,5, 128,8, 130,1, 135,8, 135,9, 144,7, 150,2, 156,2, 199,2, 200,1.

3,3-этилендиокси-5α-гидрокси-11β-(4'-[трет-бутилдиметилсилилоксиметил]фенил)-17,23-эпокси-19,24-динор-17α-хола-9,20-диен (41)

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,08 (s, 6Н), 0,51 (s, 3Н), 0,93 (s, 9Н), 1,0-2,7 (m, 20Н), 3,6-4,1 (m, 6Н), 4,1-4,2 (m, 1Н), 4,70 (s, 2Н), 4,82 (s, 1Н), 5,08 (s, 1Н), 7,1-7,4 (m, 4Н).

В соответствии с процедурой, изложенной в общих чертах для синтеза соединения 11, реакцию Гриньяра с 40 (900 мг) (Jiang et al., Bioorganic and Medicinal Chemistry, 2006, 14, 6726) проводили при помощи 4-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)бромбензола и магния и после обработки и очистки получали 41 (1,4 г).

3,3-этилендиокси-5α-гидрокси-11β-(4'-[гидроксиметил]фенил)-17,23-эпокси-19,24-динор-17α-хола-9,20-диен (42)

В соответствии с процедурой, изложенной в общих чертах для синтеза соединения 17, снятие защитных групп с 41 (1,4 г) проводили при помощи TBAF с получением требуемого продукта 42 (700 мг) после обработки и очистки.

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,52 (s, 3Н), 0,9-2,7 (m, 20Н), 3,7-4,3 (m, 7Н), 4,36 (s, 1Н), 4,65 (s, 2Н), 4,82 (s, 1Н), 5,09 (s, 1Н), 7,0-7,3 (m, 4Н).

3,3-этилендиокси-5α-гидрокси-11β-(4'-формилфенил)-17,23-эпокси-19,24-динор-17α-хола-9,20-диен (43)

В соответствии с процедурой, изложенной в общих чертах для синтеза соединения 18, окисление 42 (700 мг) проводили при помощи TP АР и NMO, и после обработки и очистки получали 43 (540 мг).

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,50 (s, 3Н), 1,0-2,8 (m, 20Н), 3,6-4,0 (m, 6Н), 4,2-4,3 (m, 1Н), 4,38 (s, 1Н), 4,83 (s, 1Н), 5,1 (s, 1Н), 7,38 (d, J=8,2 Гц, 2Н), 7,78 (d, J=8,3 Гц, 2Н), 9,96 (s, 1Н).

3,3-этилендиокси-5α-гидрокси-11β-(4'-[1-циклопропилгидроксиметил]фенил)-17,23-эпокси-19,24-динор-17α-хола-9,20-диен (44)

В соответствии с процедурой, изложенной в общих чертах для синтеза соединения 26. присоединение циклопропила к 43 (540 мг) проводили при помощи 4 эквивалентоЕ бромистого циклопропилмагния и после обработки и очистки получали 44 (450 мг).

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,51 (s, 3Н), 0,2-0,7 (m, 4Н), 1,0-2,7 (m, 21Н), 3,6-4,0 (m, 6Н), 4,1-4,2 (m, 1Н), 4,37 (s, 1Н), 4,82 (s, 1Н), 5,09 (s, 1Н), 7,17 (d, J=8,0 Гц, 2Н), 7,30 (d, J=8,2 Гц, 2H).

3,3-этилендиокси-5α-гидрокси-11β-(4'-[циклопропилкарбонил]фенил)-17,23-эпокси-19,24-динор-17α-хола-9,20-диен (45)

В соответствии с процедурой, изложенной в общих чертах для синтеза соединения 18, окисление 44 (450 мг) проводили при помощи TPAP и NMO и после обработки и очистки получали 45 (400 мг).

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,51 (s, 3Н), 1,0-2,8 (m, 25Н), 3,6-4,0 (m, 6Н), 4,1-4,3 (m, 1Н), 4,38 (s, 1H), 4,83 (s, 1Н), 5,10 (s, 1H), 7,31 (d, J=8,2 Гц, 2H), 7,91 (d, J=8,2 Гц, 2H).

11β-(4'-[циклопропилкарбонил]фенил)-17,23-эпокси-19,24-динор-17α-хола-4,9,20-триен-3-он (2e)

В соответствии с процедурой, изложенной в общих чертах для синтеза соединения 1а, шдролиз 45 (400 мг) проводили при помощи 50% серной кислоты с получением 2е (350 мг) после обработки и очистки.

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,57 (s, 3Н), 0,90-1,30 (m, 4Н), 1,30-2,80 (m, 19Н), 3,70-3,90 (m, 2Н), 4,35 (d, J=7,4 Гц, 1Н), 4,86 (s, 1Н), 5,15 (s, 1Н), 5,78 (s, 1Н), 7,28 (d, J=8,4 Гц, 2Н), 7,95 (d, J=8,4 Гц, 2Н).

¹³С-ЯМР (75 МГц) 11,56, 11,59, 15,2, 17,0, 23,7, 25,81, 27,5, 31,1, 34,2, 35,01, 36,7, 39,08, 39,9, 40,8, 46,8, 49,01, 59,5, 64,8, 94,5, 107,3, 123,3, 127,2, 128,4, 129,7, 135,8, 144,9, 150,32, 154,1, 156,2, 199,1, 200,0.

3,3-этилендиокси-17β-циано-5α-гидрокси-17α-триметилсилилокси-11β-[4'-бромфенил]-)стр-9-ен (46)

В соответствии с процедурой, изложенной в общих чертах для синтеза соединения 11, за исключением того, что реакцию Гриньяра проводили при комнатной температуре путем перемешивания 1,4-дибромбензола и магния при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакцию проводили при помощи эпоксида 21 (5,15 г) и после обработки и очистки получали 46 (6 г).

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,24 (s, 9Н), 0,51 (s, 3Н), 1,0-2,5 (m, 18Н), 3,8-4,0 (m, 4Н), 4,3 (m, 1Н), 4,45 (s, 1Н), 7,1 (d, J=8,5 Гц, 2Н), 7,38 (d, J=8,5 Гц, 2Н).

3,3-этилендиокси-5α-гидрокси-11β-[4'-бромфенил]-эстр-9-ен-17-он (47)

В соответствии с процедурой, изложенной в общих чертах для синтеза соединения 23, снятие защитных групп с 46 (6,5 г) осуществляли при помощи TBAF/NaOH и после обработки и очистки получали 47 (5,2 г).

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,48 (s, 3Н), 1,0-2,6 (m, 18Н), 3,8-4,0 (m, 4Н), 4,26 (d, J=7,3 Гц, 1Н), 4,38 (s, 1Н), 7,10 (d, J=8,4 Гц, 2Н), 7,37 (d, J=8,5 Гц, 2Н).

3,3-этилендиокси-5α,17β-дигидрокси-17-(3,3,3-трифтор-1-пропинил)-11β-[4'-бромфенил]-эстр-9-ен (48)

В соответствии с процедурой, изложенной в общих чертах для синтеза соединения 6, присоединение трифторпропина к 47 (1,0 г) проводили при помощи 2-бром-3,3,3-грифгорпропена и LDA при -78°С, и после обработки и очистки получали 48 (1,0 г).

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,48 (s, 3Н), 1,0-2,8 (m, 18Н), 3,8-4,2 (m, 4Н), 4,3 (bs, 1Н), 4,42 (s, 1Н), 7,09 (d, J=8,4 Гц, 2Н), 7,37 (d, J=8,5 Гц, 2Н).

11β-(4'-бромфенил)-17β-гидрокси-17-(3,3,3-трифторпроп-1(E)-енил)-эстра-4,9-диен-3-он (49)

В соответствии с процедурой, изложенной в общих чертах для синтеза соединения 7, восстановление 48 (1,0 г) при помощи Red-Al проводили при -78°С, и неочищенный продукт, полученный после обработки, подвергали гидролизу при помощи процедуры, изложенной в общих чертах для 1а. В результате реакции после обработки и очистки при помощи 20% этилацетата в гексане получали 50 (750 мг).

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,59 (s, 3Н), 1,2-2,8 (m, 16Н), 4,32 (d, J=7,2 Гц, 1Н), 5,78 (s, 1Н), 5,95 (dq, J=15,5, 6,5 Гц, 1Н), 6,53 (dd, J=2, 15,5 Гц, 1Н), 7,03 (d, J=8,3 Гц, 2Н), 7,39 (d, J=8,5 Гц, 2Н).

11β-(4'-[3-пиридинил]фенил)-17β-гидрокси-17-(3,3,3-трифторпроп-1(Е)-енил)-эстра-4,9-диен-3-он (3а)

Брали смесь 11β-(4'-бромфенил)-17β-гидрокси-17-(3,3,3-трифторпроп-1(E)-енил)-эстра-4,9-диен-3-она (50) (500 мг), 3-пиридинилбороновой кислоты (295 мг), хлорида бис(трифенилфосфин)палладия (II) (34 мг) и трифениларсина (35 мг) в диоксане (24 мл). Реакционную смесь дегазировали путем применения низкого вакуума с последующим заполнением аргоном и в конце вводили водный раствор карбоната калия (200 мг в 4,2 мл). Реакционную смесь снова дегазировали и оставляли нагреваться с обратным холодильником в течение 4 ч. при 100°С. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли водой (20 мл), и органический материал экстрагировали лилацетатом (3×20 мл). Объединенный органический слой однократно промывали соляным раствором (15 мл), высушивали над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении и очищали на силикагеле при помощи 50% этилацетата в гексане с получением За (400 мг).

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,64 (s, 3Н), 1,2-2,9 (m, 16Н), 4,43 (d, J=7,2 Гц, 1H), 5,80 (s, 1Н), 6,00 (dq, J=15,5, 6,5 Гц, 1Н), 6,57 (dd, J=2, 15,5 Гц, 1Н), 7,26 (d, J=8,3 Гц, 2Н), 7,3-7,4 (m, 1H), 7,50 (d, J=8,2 Гц, 2Н), 7,87 (d, J=7,9 Гц, 1Н), 8,57 (d, J=4,7 Гц, 1Н), 8,82 (d, J=2,2 Гц, 1Н).

3,3-этилендиокси-11β-(4'-бромфенил)-эстра-4,9-диен-17-он (51)

В соответствии с процедурой, изложенной в общих чертах для синтеза соединения 12, дегидрирование 47 (2,0 г) проводили при помощи уксусного ангидрида и пиридина, и после очистки получали 51 (1,5 г)

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,49 (s, 3Н), 1,2-2,8 (m, 16Н), 3,7-4,0 (m, 4Н), 4,2 (m, 1Н), 5,40 (s, 1Н), 7,1 (d, J=8,0 Гц, 2Н), 7,37 (d, J=8,2 Гц, 2Н).

11β-(4',-бромфенил)-17β-гидрокси-17-(1,1-дифторпроп-2-енил)-эстра-4,9-диен-3-он (52)

В соответствии с процедурой, изложенной в общих чертах для синтеза соединения 1d, при присоединении дифторпропена к 51 (1,05 г) с последующим кислотным гидролизом получали 52 (350 мг).

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,57 (s, 3Н), 1,2-2,8 (m, 16Н), 4,3 (m, 1Н), 5,55 (d, J=11 Гц, 1Н), 5,73 (d, J=17,5 Гц, 1Н), 5,77 (s, 1Н), 6,0-6,3 (m, 1Н), 7,06 (d, J=8,1 Гц, 2Н), 7,39 (d, J=8,5 Гц, 2Н).

11β-(4'-[3-пиридинил]фенил)-17β-гидрокси-17-(1,1-дифторпроп-2-енил)-эстра-4,9-диен-3-он (3b)

В соответствии с процедурой, изложенной в общих чертах для синтеза 3а, в результате реакции сочетания Судзуки с 52 (350 мг) получали 3b (100 мг).

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,62 (s, 3Н), 1,2-2,8 (m, 16Н), 4,47 (bs, 1Н), 5,56 (d, J=11 Гц, 1Н), 5,74 (d, J=17,4 Гц, 1Н), 5,8 (s, 1Н), 6,1-6,3 (m, 1Н), 7,10-7,27 (m, 2Н), 7,35 (dd, J=8,4 Гц, 1Н), 7,4-7,5 (m, 2Н), 7,84 (dt, J=8,1 Гц, 1H), 8,57 (dd, J=4,8, 1,5 Гц, 1Н), 8,82 (d, J=1,8 Гц, 1Н).

3,3-этилендиокси-5α,17β-дигидрокси-17-(1-пропинил)-11β-(4'-[1-{4-цианофенил}-гидроксиметил]фенил)-эстр-9-ен (53)

Раствор 4-бромбензонитрила (2,67 г, 14,68 ммоль) в сухом THF (10 мл) охлаждали до -8°С в ледяной бане с солью, добавляли по каплям раствор комплекса хлористый изопропилмагний-хлорид лития в THF (1,3 М, 11,3 мл, 14,68 ммоль) в течение периода 20 мин. Полученный в результате раствор желтого цвета перемешивали при 0°С в течение 3 ч. Раствор 25 (1,4 г, 2,93 ммоль) в сухом THF (10 мл) добавляли по каплям и перемешивали в течение 2 ч. Определяли, что к этому времени реакция завершилась, и реакционную смесь гасили путем добавления насыщенного раствора NH₄Cl (10 мл). Реакционную смесь экстрагировали при помощи этилацетата (2×50 мл). Объединенные экстракты промывали водой (100 мл), соляным раствором (100 мл) и высушивали над Na₂SO₄. Растворитель удаляли в вакууме и неочищенный продукт (2,78 г) очищали при помощи колоночной флэш-хроматографии (SiO₂, гексан:EtOAc 80:20) с получением 1,44 г 53 в виде белого рыхлого твердого вещества с выходом 85%.

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,39 (s, 3Н), 1,86 (s, 3Н), 3,90-3,98 (m, 4Н), 4,30 (d, J=7,0 Гц, 1Н), 4,43 (s, 1Н), 5,80 (s, 1Н), 7,15-7,19 (m, 4Н), 7,48 (d, J=8,1 Гц, 2Н), 7,61 (d, J=8,1 Гц, 2Н).

¹³С-ЯМР (75 МГц) 3,76, 13,58, 23,16, 23,54, 23,94, 34,95, 38,17, 38,90, 38,97, 46,57, 47,29, 49.28, 59,36, 63,97, 64,60, 70,08, 75,21, 80,13, 82,20, 82,36, 108,57, 110,94, 111,0, 118,77, 126,43, 126,50, 126,93, 126,98, 127,55, 127,57, 132,13, 132,16, 133,99, 134,31, 139,80, 139,83, 147,13, 147,19, 149,0.

3,3-этилендиокси-5α,17β-дигидрокси-17-(1-пропинил)-11β-(4'-[4-цианобензоил]фенил)-эстр-9-ен (54)

В соответствии с процедурой, изложенной в общих чертах для синтеза соединения 18, окисление 53 (1,4 г) проводили при помощи ТРАР и NMO и после обработки и очистки получали 54 (1,15 г).

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,45 (s, 3Н), 1,88 (s, 3Н), 3,92-4,0 (m, 4Н), 4,41 (d, J=7,1 Гц, 1Н), 4,46 (s, 1Н), 7,39 (d, J=8,4 Гц, 2Н), 7,71 (d, J=8,4 Гц, 2Н), 7,78-7,87 (m, 4Н).

11β-(4'-[4-цианобензоил]фенил)-17β-гидрокси-17-(1-пропинил)-эстра-4,9-диен-3-он (4)

В соответствии с процедурой, изложенной в общих чертах для синтеза соединения 1а, гидролиз 54 (1,15 г) проводили при помощи 50% серной кислоты с получением 4 (830 мг) после обработки и очистки.

¹Н-ЯМР (δ, 300 МГц) 0,52 (s, 3Н), 1,91 (s, 3Н), 4,51 (d, J-6,9 Гц, 1Н), 4,46 (s, 1Н), 5,80 (s, 1Н), 7,3 (d, J=8,2 Гц, 2Н), 7,73 (d, J=8,2 Гц), 7,77-7,87 (m, 4Н).

¹³С-ЯМР (75 МГц) 3,79, 13,86, 14,16, 21,01, 23,30, 25,91, 27,32, 31,03, 36,72, 38,89, 39,20, 40,72, 46,87, 49,57, 60,35, 79,97, 82,04, 82,83, 115,53, 117,98, 123,40, 127,32, 130,07, 130,52, 133,90, 141,35, 144,34, 151,26, 156,07, 194,36, 199,03.

Пример 1

Анализ спектра ядерных рецепторов

Определение агонистической/антагонистической природы исследуемых соединений проводили с применением системы на основе клеток для анализа спектра ядерных рецепторов SelectScreen™ от Invitrogen, в которой применяется репортерная технология на основе бета-лактамазы GeneBLAzer®. В основном в данном анализе применяют кДНК бета-лактамазы с управлением транскрипцией с помощью активирующей последовательности (UAS). UAS активируют с помощью ДНК-связывающего домена (DBD) фактора транскрипции GAL4, который экспрессируется в виде белка слияния с лиганд-связывающим доменом (LBD) целевого рецептора. При связывании лиганда GAL4(DBD)-NR(LDB) связывается с UAS, которая управляет транскрипцией бета-лактамазы. Бета-лактамаза расщепляет специально разработанный флуоресцентный субстрат, что приводит к изменению измеряемой длины волны флуоресценции.

Обобщенный протокол, применяемый для скрининга в отношении антагониста прогестерона, активируемого с помощью контрольного агониста R5020, представляет собой следующее:

Клетки HEK 293Т с рецептор прогестерона-LBD-UAS-bla размораживают и готовят, как описано выше для скрининга в отношении агониста. 4 мкл 10Х серийных разведений контрольного антагониста RU-486 (начальная концентрация, 100 нМ) или исследуемых соединений добавляли в подходящие лунки обработанного для ТС аналитического планшета. 32 мкл клеточной суспензии добавляют в лунки, которые затем предварительно инкубируют при 37°С/5% CO2 во влажной камере с исследуемыми соединениями и титром контрольного антагониста в течение 30 минут. 4 мкл 10Х контрольного агониста (см. выше) при предварительно определенной концентрации ЕС80 добавляют в лунки, содержащие контрольный антагонист или исследуемые соединения. Планшет инкубируют в течение 16-24 часов при 37°С/5% CO2 во влажной камере. 8 мкл 1 мкМ загрузочного раствора субстрата добавляют в каждую лунку и планшет инкубируют в течение 2 часов при комнатной температуре. Планшет считывают на флуоресцентном планшете-ридере (Tecan Safire).

Обобщенный протокол для скрининга в отношении антагониста глюкокортикоида, активируемого контрольным агонистом дексаметазона проводили, как описано для скрининга антагониста прогестерона, за исключением того, что применяли клетки HEK 293Т с рецептор глюкокортикоида-LBD-UAS-bla. Контрольным антагонист, применяемый для анализа глюкокортикоида, был также RU-486.

Результаты данных тестов для указанных исследуемых соединений показаны в таблице I

Таблица I

Пример 2

Ангинидационные тесты на крысах

Для каждого соединения, в отношении которого собирались проводить скрининг на крысах (Спрага-Доули), использовали 3 контрольные крысы (обработанные носителем, п.к.), 3 крысы, обработанные (п.к.) известным антагонистом прогестина, и 3 крысы, обработанные (п.к.) исследуемым соединением (3 мг/сутки). Самок крыс содержали с самцами крыс в течение 3-4 дней и влагалища проверяли в отношении копулятивных пробок каждое утро. Присутствие копулятивной пробки указывало на день 1 беременности. Беременных крыс обрабатывали ежедневно 3 мг соединения, в отношении которого проводят скрининг, начиная с дня 5 беременности. На день 9 гестации крыс умерщвляли и подсчитывали участки нидации:

Пример 3

Антипролиферативная активность in vitro в клетках линии T47D рака молочной железы человека

После низкотемпературного хранения увеличивали количество клеток в колбах для клеточной культуры Т75. В ходе эксперимента клетки в фазе логарифмического роста (70% конфлюэнтность) культивировали в течение 3 дней без эстрадиола и затем промывали PBS, отделяли путем обработки трипсином и суспендировали в 5 мл свежей среды RPMI-1640. Клетки центрифугировали в течение 5 мин. при 1000 об/мин. и осадок ресуспендировали в среде RPMI-1640.

Клетки сеяли в 96-луночные планшеты при плотности 5000 клеток/лунка/ в 0,18 мл среды RPMI-1640. Клеткам позволяли прикрепиться в течение 24 ч. Осуществляли визуальный контроль в отношении жизнеспособности через 24 ч и замену среды культуры клеток. В этот момент времени добавляли соединения в 20 мкл до конечной концентрации. Через 3 дня среду и соединения снова заменяли. В конце, через 7 дней после посева клеток, в каждую лунку добавляли 20 мкл МТТ-раствора и спустя 4 ч измеряли содержание образованной соли тетразолия с помощью фотометра:

Пример 4

Значения веса матки морских свинок

3 небеременных морских свинок на лютеиновой фазе цикла обрабатывали 10 мг соединения путем подкожного введения, начиная с дня 10 цикла. Животных умерщвляли в день 18 после начала обработки и получали значения веса матки на момент умерщвления. Проводили сравнения с животными, обработанными онапристоном путем подкожного введения при 10 мг/животное/сутки:

* Вес матки необработанной морской свинки составлял 1,2 г, при этом значения веса матки выше 1,2 г указывали на то, что тестовые соединения проявляли чистую антагонистическую активность по отношению к прогестерону и, следовательно, беспрепятственное эстрогенное действие, что приводило к стимуляции роста ткани матки. Дополнительные модификации и альтернативные варианты осуществления различных аспектов настоящего изобретения будут очевидными для специалистов в данной области в свете данного описания. Соответственно, данное описание следует толковать как исключительно иллюстративное и предназначенное для цели сообщения специалистам в данной области общего характера осуществления настоящего изобретения. Следует понимать, что формы настоящего изобретения, показанные и описанные в данном документе, следует считать примерами вариантов осуществления. Все элементы и материалы, которые могут быть заменены теми, которые проиллюстрированы и описаны в данном документе, части и способы, порядок которых можно изменить, и определенные признаки настоящего изобретения, которые можно использовать независимо, будут очевидными для специалиста в данной области после ознакомления с данным описанием настоящего изобретения. Можно проводить изменения элементов, описанных в данном документе, без отступления от сущности и объема настоящего изобретения, описанного в нижеследующей формуле изобретения.

Изобретение относится к соединениям формулы (I), обладающим свойствами антипрогестинов, и способу лечения рака молочной железы с применением этих соединений. В общей формуле (I) X представляет собой О; R¹, R², R³ и R⁴ представляют собой атом водорода; R⁵ представляет собой радикал Y, Y представляет собой ацетил, С₃-циклоалкил или пиридинил; R⁶ представляет собой -ОН; и R⁷ представляет собой радикал формулы C_nF_mH_o, где n равно 3, m равно 2 или 3, о равно 2 или 3 и m плюс о равно 5. 2 н. и 3 з.п. ф-лы, 1 табл., 4 пр.

1. Соединение, имеющее структуру формулы (I)

в котором

X представляет собой О;

R¹, R², R³ и R⁴ представляют собой атом водорода;

R⁵ представляет собой радикал Y,

Y представляет собой ацетил, С₃-циклоалкил или пиридинил;

R⁶ представляет собой -ОН; и

R⁷ представляет собой радикал формулы C_nF_mH_o, где n равно 3, m равно 2 или 3, о равно 2 или 3 и m плюс о равно 5.

2. Соединение по п. 1, где

R⁷ представляет собой -CH=CH-CF₃, -CH₂-CF=CF₂ или -CF₂-CH=CH₂.

3. Соединение по п. 1, где данное соединение имеет структуру

где R⁷ представляет собой (E)-CH=CH-CF₃, -CH₂-CF=CF₂ или -CF₂-CH=CH₂.

4. Соединение по п. 1, где данное соединение имеет структуру

где R⁷ представляет собой (E)-CH=CH-CF₃ или -CF₂-CH=CH₂.

5. Способ лечения рака молочной железы у субъекта, включающий введение субъекту лекарственного препарата, содержащего эффективное количество соединения по любому из пп. 1-4.