РАСТИТЕЛЬНЫЕ КОМБИНИРОВАННЫЕ ПРЕПАРАТЫ НА ОСНОВЕ КРИОПОРОШКОВ Российский патент 2017 года по МПК A61K36/73 A61K36/738 A61P13/00 A61P31/04 A61K9/28 A61K9/48 

Изобретение относится к медицине, более конкретно к растительным комбинированным препаратам, содержащим криопорошки травы репейничка аптечного и корня шиповника собачьего, обладающим мочегонной, литолитической и антибактериальной активностями.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Репейничек аптечный (репейничек) - Agrimonia eupatoria L. Семейство розоцветные - Rosaceae Juss. относится к роду Agrimonia L, насчитывающему 7 видов, и представлен многолетними травянистыми растениями. В этимологических словарях и народных травниках репейничек аптечный называют: репешок аптечный, репяшок аптечный (репей, репейник), земляничник, лепильник, сороканедужник, полевой самец, валетовы вши, пятилистник, греческая печеночная трава, косичка, липник; в английском варианте - common agrimony; в немецком - kleiner Odermennig m, Odermennig m, n, n, Hagemundiskraut n, Heilandstee m, Leberklette f, griechisches Leberkraut n, medizinaler Odermennig m, Steinwurz f. Название рода растения происходит от искаженного argemone - растения семейства маковых, с которым имеет сходство; видовое - в честь понтийского царя Митридата Евпатора, знатока лекарственных растений. Травянистый многолетник, имеющий утолщенный разветвленный корень, прямой, ветвистый, волосистый стебель высотой до 1 м. Все листья стеблевые, самые нижние - чешуевидные, следующие за ними розеткообразно-сближенные очередные, с зубчатыми листочками, снизу бархатисто-волосистые, сверху мелкоопушенные. Цветки собраны в колосовидное соцветие, лепестки желтые. Плод ложный, гипантий при плодах 4…5 мм длины, чашевидный, обратно-конусовидный, весь покрыт шипиками, коричневого или серовато-зеленого цвета, содержит один орешек. В центре тупой столбик, нижняя коническая часть продольно-10-бороздчатая. Плодовый рубчик выдающийся, тупой. Поверхность покрыта длинными, тонкими вверх направленными волосками, матовая. Длина ложных плодов 4…6 мм, ширина и толщина - 3…5 мм. Цветет в июне-августе, плоды созревают в августе-октябре. Репейничек аптечный широко распространен в европейской части, встречается во многих районах Северного Кавказа, кроме высокогорий. Растет среди кустарников, на опушках лиственных лесов, в садах, вдоль дорог, берегов рек и ручьев. Растение можно обнаружить в обилии на дренированных почвах, на травянистых склонах, суходольных пастбищах, на полях и в оврагах. С лечебной целью заготавливают траву (Agrimoniae herba) во время цветения, срезая при этом верхушки стеблей на уровне 25…30 см от основания растения. Собранное сырье сушат или в тени, раскладывая ее на воздухе или подвешивая в пучках. При искусственной сушке, чтобы исключить разрушение действующих веществ, температура в сушилках не должна превышать 40°С. В траве репейничка аптечного найдены углеводы (глюкоза, фруктоза, сахароза), органические кислоты (лимонная, яблочная, щавелевая, винная, хинная), стероиды, азотсодержащие соединения (холин, никотиновая кислота), витамин С, фенолкарбоновые кислоты и их производные (кофейная, хлорогеновая, эллаговая, гомопротокатеховая, протокатеховая, гентизиновая, n-гидроксибензойная, n-кумаровая, ванилиновая, феруловая, салициловая), кумарины, дубильные вещества, флавоноиды (кверцетин, гиперозид, кверцитрин, рутин, лютеолин и др.), высшие алифатические спирты (цериловый), воск (пальмитат и стеарат церилового спирта), жирные кислоты (масляная, пальмитиновая, стеариновая). В корнях и плодах - дубильные вещества, катехины. В цветках - дубильные вещества, флавоноиды (кверцитрин, изокверцитрин, гиперозид, рутин). В семенах - жирные кислоты (масляная, линолевая, линоленовая и пальмитиновая). Трава репейничка обладает антибактериальными, антигельминтными, диуретическими, вяжущими, противовоспалительными, обезболивающими, желчегонными и кровоостанавливающими свойствами, а также регулирует работу печени, усиливает деятельность кишечника, улучшает его работу. Препараты растения проявляют активность в отношении вируса гриппа, герпеса, вируса Ауески, аденовируса типа 12. Водные извлечения растения принимают при различных заболеваниях желудка, печени, желчного пузыря, при циррозе, злокачественных и доброкачественных новообразованиях, фурункулезе, внутренних кровотечениях, асците, гельминтозах, бронхите, геморрое, малярии, энурезе. Траву растения используют для лечения стоматита, в том числе афтозного, а также при гингивите, пародонтозе, болезнях горла, полости рта; наружно - при ранах, раковых опухолях, болезнях кожи и для полоскания носа при насморке. Порошок из высушенного растения употребляют при ангине, спазме вен. Трава в эксперименте оказывает антидиабетическое действие. В народной медицине Ингушетии отвар травы применяют при маточных и легочных кровотечениях.

Шиповник собачий или аптечный - Rosa canina L. Семейство розоцветные - Rosaceae. В этимологических словарях и народных травниках шиповник собачий называют: дикая роза, чипорас, шипчик, терпигуз. В России шиповник называли в старину своробориной, свороборинником, то есть усеянным колючками (от своробъ - чесотка). И до сих пор в разных местностях его именуют по-разному: шипшицей, шипшиной и др. Древние греки называли его «собачьей розой», так как считали лучшим средством от укуса собак; в английском варианте - dog rose, wild rose, canker rose, bird brier; в немецком - wilde Heidenrose f, Hundsrose f, Hagebutte f, Hagrose f, Frauendorn m, Hainrose f, Heckenrose f, Zaunrose f, Dornrose f. Название рода растения происходит от латинского названия растения Rosa L. Представляет собой кустарник до 2…2,5 мм высоты, с дуговидно-изогнутыми ветвями, шипы все однотипные, крепкие, серповидно-изогнутые или крючковидные, у основания расширенные, сплюснутые. Шиповник - обладатель мощной корневой системы. Корень шиповника уходит в землю на 2-3 м глубины вертикально. Корневище шиповника - это разветвленная структура горизонтальных корней длиной от 5 до 40 см. Листья цветоносных побегов до 10 см длины, из 7 листочков; листочки с обеих сторон голые, иногда по главной жилке коротко опушенные, ярко или серо-зеленые, эллиптические, коротко заостренные, 2…4 см длины и 1…2 см ширины, по краю остропильчатые с зубцами, загнутыми к верхушке листа, на зубцах имеются зазубринки с железками; прилистники узкие, с расходящимися острыми ушками, голые, по краю железисто-реснитчатые. Цветки собраны в щитковидные соцветия по 3…5 (10), иногда одиночные, цветоножки голые, равные величине зрелого плода или длиннее его; чашелистики крупные (20…25 мм длины) с хорошо выраженными боковыми придатками (перьями), после цветения отклоняются вниз и прижимаются к плоду, опадают рано. Лепестки бледно- или ярко-розовые; головка рылец волосистая, шаровидная или конусовидная, на ножке. Плоды крупные, широкоовальные или удлиненно-овальные, голые, по созревании красные или оранжево-красные. Цветет в мае-июне, плоды созревают в августе-сентябре. Геоксильный кустарник, палеарктический элемент, широко распространен по всей территории страны, растет на травянистых склонах, среди кустарников, по балкам, опушкам, вдоль дорог, поднимается иногда высоко в горы (до 2300 м). Растение не показывает определенной приуроченности к тем или иным растительным сообществам, встречается и на сухих каменистых склонах горной полупустыни, в лесном поясе предгорий и на субальпийских лугах. Ведет себя, как настоящий сорняк, всюду следующий за человеком. Плоды шиповника являются поливитаминным лекарственным растительным сырьем, в своем составе содержат углеводы (глюкозу, фруктозу, ксилозу, в связанном виде арабинозу), тритерпеновые спирты, витамины С, Е, Р, каротиноиды и другие соединения. В корнях найдены тритерпеноиды (эглантозид), дубильные вещества; в ветвях и листьях - витамины С, Р, каротиноиды, углеводы (полисахариды), фенолкарбоновые кислоты и их производные (галловая, гентизиновая, кофейная, феруловая, пирокатеховая, n-гидроксибензойная, n-гидроксифенилуксусная, n-кумаровая, сиреневая, ванилиновая, салициловая, эллаговая), дубильные вещества, флавоноиды. В лепестках - эфирное масло, представляющее собой жидкость желтоватого цвета с приятным запахом, флавоноиды (гиперозид, астрагалин, рамноглюкозид кемпферола), воск [в его составе альдегиды, высшие алифатические углеводороды, высшие алифатические спирты, высшие жирные кислоты, тритерпеновые кислоты, стероиды (β-ситостерин, стигмастерин, кампестерин, холестерин)]. В семенах - жирное масло (в его составе олеиновая кислота), каротиноиды и токоферолы. Для лечебных целей заготавливают зрелые плоды различных видов шиповника (розы) под общим названием - Fructus Rosae. В августе-октябре собирают плоды вручную, в корзины или ведра, очищают от примеси листьев, поврежденных плодов. Сырье, размещенное на металлических сетках сушилок слоем в 2-3 см, сушат быстро при температуре 80…90°С, периодически помешивая. После сушки отделяют чашелистики, удаляют изменившие окраску и подгоревшие плоды. Корни шиповника (Radix Rosae) выкапывают осенью, промывают холодной водой и высушивают в тени, под навесом. Препараты плодов шиповника являются поливитаминным средством и используются при лечении неврозов, астении, малокровия, нарушений обмена веществ, при сахарном диабете, гипертонической болезни и атеросклерозе. Шиповник повышает сопротивляемость организма к инфекционным и простудным заболеваниям. Плоды растения показаны при вяло заживающих ранах, способствуют ускорению срастания костей при переломах. В народной медицине растение используется для лечения гиповитаминозов, в качестве желчегонного, общеукрепляющего, адаптогенного средства при инфекционных заболеваниях, переломах костей, ранениях, анемии, астении, ожогах, обморожениях. Препараты шиповника применяют для усиления потенции, улучшения сна, при анорексии, при лечении хронических анацидных и ахилических гастритов; отвар плодов назначают при простудных заболеваниях, болезнях. Плоды шиповника входят в состав комплексного противовоспалительного и противомикробного препарата «Фарингал». Плоды шиповника входят также в состав следующих комплексных растительных сборов: «Касмин» - применяется в качестве анальгезирующего, антиагрегантного, антикоагулянтного, гиполипидемического, гастропротективного, гипотензивного, диуретического и седативного средства; «Бруснивер» - оказывает диуретическое, антимикробное и противовоспалительное действие; «Роглидис» - применяется в качестве иммуномодулирующего, противовирусного и противовоспалительного средства. Отвар, назначают при болезнях почек, мочевого пузыря, мочекаменной болезни, головной боли. Экспериментально установлены антиоксидантные свойства лейкоантоцианов, выделенных из растения. Жирное масло, содержащееся в семенах, применяют для лечения неспецифического язвенного колита (в виде клизм), дерматозов; наружно - при трофических язвах голени, пролежнях, трещинах сосков, ссадинах. В народной медицине отвар семян используют в качестве диуретического, желчегонного, вяжущего и противовоспалительного средства. Корень шиповника проявляет противомикробные свойства, оказывает желчегонное и вяжущее действие, обладает уникальными способностями растворять в организме любые конкрементные отложения (образования). В народной медицине корень растения широко используют при лечении почечнокаменной и мочекаменной болезней. В быту лепестки растения используют на варенье, пастилу, повидло, для ароматизации чая. Витаминные экстракты используют для производства карамельных начинок, кетчупа, мороженого, киселей, хлебопекарных изделий. Семена - суррогат кофе. Кора ветвей дает бурую краску. Неприхотлив, засухоустойчив.

Известны различные способы криогенного измельчения, например, не ограничиваясь, способами, описанными в патентах РФ №№2099978 (заявка: 96117436/13, 06.09.1996), 2129393 (заявка: 98107741/13, 23.04.1998), 2163814 (заявка 98110827/14, 05.06.1998), 2168900 (99119925/13, 15.09.1999); патентообладатель - ЗАО «Биофит»; с помощью устройств, описанных, в частности в патентах РФ №№2185884 (заявка: 2000124568/03, 27.09.2000), 2234374 (заявка 2002131118/03, 19.11.2002); патентообладатель - ЗАО «Биофит». Использование этих способов и устройств позволяет существенно упростить процесс подготовки сырья для изготовления лекарственной формы растительного комбинированного препарата, т.к. позволяет избежать большую часть проблем, связанных с изготовлением сырья классическими способами сушки и перемалывания.

Известны различные растительные сборы и препараты, содержащие в том или ином виде сырье корня шиповника и травы репейничка (см., например: Махов А.А. Зеленая аптека: Лекарственные растения Красноярского края / Изд. 3-е, испр. и доп. - Красноярск: Кн. изд-во, 1986; ФИТОЧАЙ ЛУГАНСКИЙ №3. / [Электронный ресурс], 2013. URL: http://tovari-zdorovie.com.ua/zhelchekamennaya_bolezn_fitochay_luganskiy_3 (дата обращения 23.06.2015 г.); Данников Н.И. Целебный шиповник. / М. - Эксмо. - 2013 и т.п.).

Известно совместное применение репейничка аптечного и корня шиповника в составе композиции для снижения аллергических реакций на краски для волос (см. международную заявку №WO/2010/146142, опубл. 23.12.2010).

Известно совместное применение растительных экстрактов репейничка аптечного и шиповника в составе композиции медицинского, косметического, окрашивающего или дерматологического назначения, причем слой продуктов растительных экстрактов нанесен на слой волокнистого растительного продукта (см. заявку на патент США №20150056255, опубл. 26.02.2015 г.). Известен также и аналогичный пищевой продукт (см. заявку на патент США №20150037389, опубл. 05.02.2015 г.). Данный пищевой продукт может быть выбран в качестве прототипа.

Вместе с тем, известные препараты и сборы не могут быть использованы для лечения воспалительных заболеваний мочевыводящих путей, а также не могут быть использованы в качестве литолитических препаратов и в качестве антибактериальных препаратов, либо не обладают достаточной эффективностью при таком использовании, а процессы изготовления сырья для создания конкретных лекарственных форм являются трудоемкими и сложными.

Ближайшим аналогом заявленного комбинированного растительного препарата является растительный комбинированный препарат, описанный в документе «Растворяем камни в желчном», опубл. 17.02.2014 по адресу URL: http://secretwomangg.ru/?m=20140217&paged=2. Указанный растительный комбинированный препарат предназначен для растворения камней в желчном и содержит помимо других компонентов корень шиповника и траву репешка аптечного, взятых в соотношении 1:1.

Однако указанный растительный комбинированный препарат не содержит именно корень шиповника собачьего, а в качестве компонентов не использованы криопорошки, в связи с чем указанный растительный комбинированный препарат обладает невысокой эффективностью в сравнении с заявленным.

РАСКРЫТИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Исходя из вышесказанного, задачей заявленного изобретения является создание нового эффективного растительного комбинированного препарата, обладающего мочегонной, литолитической и антибактериальной активностями, изготовление которого упрощено.

Техническим результатом, достигаемым при реализации настоящего изобретения, является повышение эффективности растительного комбинированного препарата в сравнении с прототипом. Другим техническим результатом является упрощение технологии изготовления растительного комбинированного препарата. Другим техническим результатом, в отличие от прототипа, является обеспечение одновременно и диуретических, и антибактериальных, и литолитических свойств заявленного препарата.

Технический результат достигается за счет того, что заявленный растительный комбинированный препарат содержит в качестве активных компонентов репейничек аптечный траву и корень шиповника собачьего в виде криопорошков, а также вспомогательные вещества, что позволяет существенным образом упростить технологию изготовления препарата, а также приводит к созданию высокоэффективного растительного комбинированного препарата за счет синергетического эффекта, проявляющегося из-за комбинирования именно криопорошков корня шиповника собачьего и травы репейничка аптечного,

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

Иллюстративные варианты осуществления настоящего изобретения описываются далее подробно со ссылкой на прилагаемые чертежи, которые включены в данный документ посредством ссылки, и на которых:

Фиг. 1-3 иллюстрируют убыль массы (%) уролитов различной химической природы в зависимости от времени экспозиции и концентрации водных взвесей растительного комбинированного препарата на основе криопорошков травы репейничка аптечного и корня шиповника собачьего.

Фиг. 4 иллюстрирует кристаллизацию оксалата кальция в модельной системе кристаллообразования за 30 минут (увеличение ×100; ×200).

Фиг. 5 иллюстрирует кристаллизацию оксалата кальция в модельной системе кристаллообразования за 30 минут в присутствии растительного комбинированного препарата в концентрации 5 мг/мл (увеличение ×100; ×200).

Фиг. 6 иллюстрирует кристаллизацию оксалата кальция в модельной системе кристаллообразования за 30 минут в присутствии растительного комбинированного препарата в концентрации 200 мг/мл (увеличение ×100; ×200).

Фиг. 7 иллюстрирует динамику изменения светорассеивания при индукции кристаллообразования в модельной системе в присутствии водной взвеси растительного комбинированного препарата.

Фиг. 8 иллюстрирует экспериментальный уролитиаз, 3 недели, и многочисленные крупные кристаллы в осадке мочи крыс контрольной группы (увеличение ×50).

Фиг. 9 иллюстрирует экспериментальный уролитиаз, 3 недели, и многочисленные кристаллы крупных размеров в осадке мочи крыс опытной группы - 1 (увеличение ×50).

Фиг. 10 иллюстрирует экспериментальный уролитиаз, 5 недель, и кристаллы солей в осадке мочи крысы контрольной группы (увеличение ×50).

Фиг. 11 иллюстрирует экспериментальный уролитиаз, 5 недель, и кристаллы солей в осадке мочи крысы-самки после 14-ти дневного применения растительного комбинированного препарата в дозе 50+50 мг/кг (увеличение ×50).

Фиг. 12 иллюстрирует экспериментальный уролитиаз, 5 недель, и кристаллы солей в осадке мочи крысы-самки после 14-ти дневного применения растительного комбинированного препарата в дозе 100+100 мг/кг (увеличение ×50).

ОСУЩЕСТВЛЕНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Далее приводятся варианты осуществления настоящего изобретения, раскрывающие примеры его реализации в частных исполнениях. Тем не менее, само описание не предназначено для ограничения объема прав, предоставляемых данным патентом. Скорее, следует исходить из того, что заявленное изобретение также может быть осуществлено другими способами таким образом, что будет включать в себя отличающиеся элементы и условия или комбинации элементов и условий, аналогичных элементам и условиям, описанным в данном документе, в сочетании с другими существующими и будущими технологиями.

В первом варианте осуществления настоящего изобретения обеспечивается растительный комбинированный препарат, содержащий криопорошки травы репейничка аптечного и корня шиповника собачьего и дополнительно содержащий вспомогательные вещества.

В другом варианте осуществления настоящего изобретения обеспечивается препарат по первому варианту осуществления, отличающийся тем, что представляет собой таблетку или твердую желатиновую капсулу.

В другом варианте осуществления настоящего изобретения обеспечивается препарат по второму варианту осуществления, отличающийся тем, что в качестве вспомогательных веществ содержит стеарат магния и микрокристаллическую целлюлозу или кальция гидрофосфат.

В другом варианте осуществления настоящего изобретения обеспечивается препарат по любому из вариантов осуществления с первого по третий, представляющий собой таблетку без оболочки, отличающийся тем, что содержит:

криопорошок травы репейничка аптечного в количестве от 580 мг до 1160 мг;

криопорошок корня шиповника собачьего в количестве от 580 мг до 1160 мг;

стеарат магния в количестве от 15 мг до 30 мг;

микрокристаллическую целлюлозу в количестве от 100 мг до 300 мг.

В другом варианте осуществления настоящего изобретения обеспечивается препарат по четвертому варианту осуществления, отличающийся тем, что криопорошки травы репейничка аптечного и корня шиповника собачьего взяты в соотношении 1:1.

В другом варианте осуществления настоящего изобретения обеспечивается препарат по любому из вариантов осуществления с первого по третий, представляющий собой твердую желатиновую капсулу, отличающийся тем, что содержит:

криопорошок травы репейничка аптечного в количестве от 580 мг до 1160 мг;

криопорошок корня шиповника собачьего в количестве от 580 мг до 1160 мг;

стеарат магния в количестве от 15 мг до 30 мг;

кальция гидрофосфат в количестве от 100 мг до 300 мг.

В другом варианте осуществления настоящего изобретения обеспечивается препарат по шестому варианту осуществления, отличающийся тем, что криопорошки травы репейничка аптечного и корня шиповника собачьего взяты в соотношении 1:1.

Описанные далее возможные осуществления вариантов настоящего изобретения представлены на не ограничивающих объем правовой охраны примерах, применительно к конкретным вариантам осуществления настоящего изобретения, которые во всех их аспектах предполагаются иллюстративными и не накладывающими ограничения. Альтернативные варианты реализации настоящего изобретения, не выходящие за пределы объема его правовой охраны, являются очевидными специалистам в данной области, имеющим обычную квалификацию, на которых это изобретение рассчитано.

Исследование растительного комбинированного препарата на основе криопорошков травы репейничка аптечного и корня шиповника собачьего показало наличие в нем соединений фенольной природы - фенолкарбоновыми кислотами (галловая, хлорогеновая, феруловая, коричная), дубильными веществами (ЭГКГаллат), флавоноидами (витексин, лютеолин-7-гликозид, гиперозид и рутин), тритерпеноидом эглантозидом. Мажорыми соединениями отмечены ЭГКГаллат (26,48%); феруловая (14,31%), галловая (9,54%) и хлорогеновая (7,91%) кислоты; флавоноиды - лютеолин-7-гликозид (10,58%) и гиперозид (3,94%). Полифенольные соединения (дубильные вещества, флавоноиды, фенолкарбоновые кислоты) обладают высокой биологической активностью, обладают выраженными антиоксидантными, антибактериальными, противовоспалительными свойствами.

Исследование диуретической активности растительного комбинированного препарата.

Исследование мочегонного действия криопорошков из корня шиповника собачьего и травы репейничка выполнялось на крысах линии «Вистар» обоего пола массой 240,0-260,0 г. Животных получали из питомника Пятигорского медико-фармацевтического института - филиала ГБОУ ВПО ВолгГМУ Минздрава РФ, прошедших двухнедельный карантин и содержавшихся в стандартных условиях вивария при естественном освещении.

Эксперимент осуществляли отдельно на группах самцов и самок. Из навесок криопорошков, тщательно растираемых в агатовой ступке с дистиллированной водой, готовилась водная взвесь, которая вводилась предварительно голодавшим животным (в течение 5 часов) перорально в объеме 2,0 мл в дозах 50,0 и 100,0 мг/кг, в связи с отсутствием достоверного мочегонного эффекта криопорошков в дозе 25,0 мг/кг. Через 0,5 часа после введения водной взвеси криопорошков животным перорально давали водную нагрузку из расчета 25,0 мл/кг и помещали в мочеприемники. Мочу собирали в градуированные пробирки в течение каждого из последующих 5 часов. Регистрировали почасовую динамику диуреза в перерасчете на 1 кг массы животных и общий диурез за 5 часов в сравнении с контрольной группой. Мочегонный эффект каждой дозы исследовался на 6 животных. В контрольной группе крысы вместо исследуемых веществ получали соответствующий объем (2,0 мл) физраствора. Статистически обработанные результаты исследований приведены в таблицах 1, 2.

Полученные результаты свидетельствуют о достоверно более интенсивной динамике диуреза у крыс-самцов в обеих экспериментальных группах в сравнении с контрольной группой животных. Суммарный диурез в экспериментальных группах за 5 часов достоверно почти в 3 раза выше, чем в контрольной. Это обеспечивает полное выведение за 5 часов объема предварительной водной нагрузки (6,25 мл/250 граммовую крысу), в то время как в контрольной группе суммарный диурез составляет лишь 40% от ее величины. Максимум диуретического эффекта в обеих исследуемых дозах приходится на окончание 1-го часа наблюдения и составляет в дозе 50,0 мг/кг 66%, а в дозе 100,0 мг/кг 79% от всего диуреза. Вместе с тем достоверных различий в диуретической активности между двумя исследуемыми дозами криопорошка из корня шиповника собачьего во все сроки наблюдений не отмечается (Р>0,5).

Таким образом, криопорошок из корня шиповника собачьего вызывает практически одинаковое усиление диуретического эффекта у крыс-самцов в дозах 50,0 мг/кг и 100,0 мг/кг.

Из полученных результатов следует, что динамика мочегонного эффекта криопорошка корня шиповника собачьего у крыс-самок достоверно более интенсивна в сравнении с контролем в каждом из пяти часов эксперимента в обеих исследуемых дозах. Суммарный абсолютный диурез в экспериментальных группах за 5 часов достоверно в 2,5 раза выше, чем в контрольной группе, достигая величины водной нагрузки (6,25 мл). За это время в контрольной группе конечный суммарный диурез составил лишь 43% от водной нагрузки. Максимум диуретического эффекта в обеих дозах приходится на 1-й час и составляет в дозе 50,0 мг/кг 45%, а в дозе 100,0 мг/кг 75% от всего диуреза. Остальные 55% и 25% соответственно приходятся на последующие сроки. В экспериментальной группе с дозой 100,0 мг/кг диурез достоверно выше, чем в дозе 50,0 мг/кг на 1 часе наблюдения.

Таким образом, криопорошок из корня шиповника собачьего вызывает практически одинаковое усиление диуретического эффекта у крыс-самок с достоверно большим усилением в дозе 100,0 мг/кг в 1-й час.

Сравнение конечного диуреза под действием равновеликих доз криопорошка из корня шиповника собачьего в группах самцы-самки не выявило статистически достоверных различий. Исследовано влияние криопорошка травы репейничка аптечного на диурез крыс самцов и самок, результаты эксперимента представлены в таблицах 3, 4.

Из полученных результатов следует, что динамика мочегонного эффекта криопорошка из травы репейничка у крыс-самцов достоверно более интенсивна по отношению к контролю в каждом из пяти часов эксперимента в обеих исследуемых дозах. Суммарный диурез в экспериментальных группах за 5 часов достоверно в 2,5-3 раза выше, чем в контрольной, достигая величины предварительной водной нагрузки (6,25 мл) и даже несколько превосходя ее. За это время в контрольной группе конечный суммарный диурез составил лишь 40% от водной нагрузки. Максимум диуретического эффекта в обеих дозах приходится на 1-й час и составляет в дозе 50,0 мг/кг 81%, а в дозе 100,0 мг/кг 80,3% от всего диуреза. Остальные 19% и 19,7% соответственно приходятся на последующие сроки эксперимента. Вместе с тем достоверных различий между двумя исследуемыми дозами во все сроки наблюдений нет, хотя тенденция к более высокому диурезу в дозе 50,0 мг/кг имеется.

Таким образом, криопорошок из травы репейничка вызывает практически одинаковое усиление диуретического эффекта у крыс-самцов в дозах 50,0 мг/кг и 100,0 мг/кг.

Из полученных результатов следует, что динамика мочегонного эффекта криопорошка из травы репейничка у крыс-самок достоверно более интенсивна по отношению к контролю в каждом из пяти часов эксперимента в обеих исследуемых дозах. Суммарный абсолютный диурез в экспериментальных группах за 5 часов достоверно в 2-2,5 раза выше, чем в контрольной, и практически соответствует объему предварительной водной нагрузки (6,25 мл). За это время в контрольной группе конечный суммарный диурез составил лишь 43% от объема водной нагрузки. Максимум диуретического эффекта в обеих дозах приходится на 1-й час и составляет в дозе 50,0 мг/кг 82,5%, а в дозе 100,0 мг/кг 80,6% от всего диуреза. Остальные 17,5% и 19,4% соответственно приходятся на оставшиеся сроки эксперимента.

Таким образом, криопорошок из травы репейничка вызывает практически одинаковое усиление диуретического эффекта у крыс-самок в дозах 50,0 мг/кг и 100,0 мг/кг.

Сравнение величин конечного диуреза равновеликих доз криопорошка из травы репейничка в экспериментальных группах самцы-самки не выявило статистически достоверных различий.

Выводы по результатам изучения мочегонного действия криопорошков из корня шиповника собачьего и травы репейничка:

1. Криопорошки оказывают практически одинаковый мочегонный эффект, выводя к 5 часу весь объем водной нагрузки, в то время как контрольные животные выводят лишь около 50%-60% ее объема.

2. Нет статистически достоверных различий между мочегонными эффектами исследуемых доз веществ: 50,0 мг/кг и 100,0 мг/кг.

3. Криопорошки из корня шиповника собачьего и травы репейничка обладают практически одинаковым диуретическим эффектом, как по его динамике, так и по результирующей величине диуреза.

Исследование мочегонного действия комбинаций криопорошков из корня шиповника собачьего и травы репейничка выполнялось на крысах линии «Вистар» обоего пола массой 240,0-260,0 г. Животных получали из питомника Пятигорского медико-фармацевтического института - филиала ГБОУ ВПО ВолгГМУ Минздрава РФ, прошедших двухнедельный карантин и содержавшихся в стандартных условиях вивария при естественном освещении.

Эксперимент осуществляли отдельно на группах самцов и самок по изложенной ранее схеме. Использовались дозы 50,0 мг/кг + 50,0 мг/кг, 50,0 мг/кг + 100,0 мг/кг, 100,0 мг/кг + 50,0 мг/кг, 10,0 мг/кг + 100,0 мг/кг и 100,0 мг/кг + 10,0 мг/кг.

Как следует из таблицы 5 динамика мочегонного эффекта комбинаций криопорошков из корня шиповника собачьего и травы репейничка в обеих исследованных дозах у крыс-самцов достоверно более интенсивна в сравнении с контролем в каждом из пяти часов эксперимента. Максимум диуретического эффекта в дозах 100,0 мг/кг + 100,0 мг/кг растянут на первые 2 часа наблюдения, но статистически не отличается (Р>0,5) от максимума в дозах 50,0 мг/кг + 50,0 мг/кг в 1 час наблюдения. Конечный диурез во всех экспериментальных группах статистически неразличим и свидетельствует о полном выведении за 5 часов наблюдения всего объема предварительной водной нагрузки (6,25 мл). В контрольной группе животных конечный диурез составил лишь 40% от объема предварительной водной нагрузки. Таким образом, комбинации криопорошков объектов оказывают практически одинаковый мочегонный эффект.

Динамика диуреза у крыс-самок отличается от таковой у крыс самцов (таблица 6). В ней отсутствует четко выраженный пик, а количество собираемой мочи распределяется во все сроки более или менее равномерно. Тем не менее, динамика мочегонного эффекта комбинаций криопорошков из корня шиповника собачьего и травы репейничка в обеих исследованных дозах у крыс-самок достоверно более интенсивна в сравнении с контролем, начиная со второго часа и до конца эксперимента. Конечный диурез в обеих экспериментальных группах статистически неразличим и свидетельствует о полном выведении за 5 часов наблюдения всего объема предварительной водной нагрузки (6,25 мл). В контрольной группе животных конечный диурез составил лишь 43% от объема предварительной водной нагрузки. Таким образом, комбинации криопорошков также оказывают практически одинаковый мочегонный эффект.

Результаты исследований статистически обработаны и приведены в таблицах 5, 6.

Выводы по результатам мочегонного действия комбинаций криопорошков из корня шиповника собачьего и травы репейничка:

1. Комбинации доз криопорошков из корня шиповника собачьего и травы репейничка оказывают практически одинаковый мочегонный эффект, выводя к 5-му часу весь объем водной нагрузки, в то время как контрольные животные выводят лишь 50%-60% ее объема.

2. Нет статистически достоверных различий между мочегонными эффектами исследуемых комбинаций доз веществ.

3. Больший эффект по сравнению с монопрепаратами криопорошков, предположительно, обусловлен синергией криопопрошков травы репейничка аптечного и корня шиповника собачьего в растительном комбинированном препарате.

Исследование антибактериальной активности растительного комбинированного препарата.

При исследовании антибактериальной активности были использованы 20% водные взвеси растительного комбинированного препарата, содержащего криопорошки травы репейничка аптечного и корня шиповника собачьего в соотношении компонентов от 10 до 100 мг/кг (в сравнении с 20% водной взвесью криопорошка корня шиповника собачьего) и тест-культуры микроорганизмов в посевных дозах с 10² по 10⁸. Чувствительность различных микроорганизмов к растительному комбинированному препарату в виде зоны торможения роста представлена в таблице 7.

Согласно представленным данным зона ингибирования роста Pseudomonas aeroginosa в посевных дозах 10²-10³ под влиянием 20% водной взвеси растительного комбинированного препарата соответствует умеренному ингибированию активности. В результате исследования также была зарегистрирована задержка роста колоний Klebsiella pneumoniae под действием растительного комбинированного препарата.

В отношении Streptococcus faecalis 20% водная взвесь растительного комбинированного препарата также показала тормозящую рост колоний активность.

Таким образом, результаты микробиологического исследования показали, что водная взвесь растительного комбинированного препарата, содержащего криопорошки травы репейничка аптечного и корня шиповника собачьего, обладает антимикробной активностью, степень которой статистически не разнится в зависимости от соотношения компонентов в 20% водной взвеси.

Исследование литолитической активности растительного комбинированного препарата in vitro.

Литолиз мочевых камней изучали в водных взвесях растительного комбинированного препарата, содержащего криопорошки травы репейничка аптечного и корня шиповника собачьего, в концентрациях 20 мг/мл. Результаты исследования растворимости нефролитов различной химической природы, проводимого путем сравнения массы образцов мочевых камней до и после экспозиции в исследуемых водных взвесях, наглядно представлены в таблицах 8, 9.

По представленным данным видно, что масса образцов мочевых оксалатов кальция, выдержанных во взвеси с содержанием растительного комбинированного препарата при указанных соотношениях компонентов, за 21 день снизилась в среднем на 11,6% (максимум 15,2% при соотношении компонентов 100,0 мг + 50 мг), в то время как масса указанных образцов, выдержанных в 20% водной взвеси криопорошка корня шиповника собачьего, снизилась только на 6%. Экспозиция в воде на указанном периоде привела к уменьшению массы лишь на 4%.

Контакт кальциевых фосфатов с водной взвесью растительного комбинированного препарата в указанных соотношениях и концентрации 20 мг/мл в течение 21 дня привел к уменьшению массы образцов в среднем на 11,4% (максимум 14,1% при соотношении компонентов 100,0 мг + 50 мг), в то время как масса указанных образцов, выдержанных в 20% водной взвеси криопорошка корня шиповника собачьего, снизилась только на 7,2%. Экспозиция в воде на указанном периоде привела к уменьшению массы лишь на 6% (таблица 9).

Масса образцов уратных нефролитов, выдержанных во взвеси с содержанием растительного комбинированного препарата при указанных соотношениях компонентов, за 21 день снизилась в среднем на 9,9% (максимум 11,5% при соотношении компонентов 100,0 мг + 50 мг), в то время как масса указанных образцов, выдержанных в 20% водной взвеси криопорошка корня шиповника собачьего, снизилась только на 6,6%. Экспозиция в воде на указанном периоде привела к уменьшению массы лишь на 6% (таблица 10).

Наглядно особенности растворимости различных по химической природе мочевых камней в водных взвесях растительного комбинированного препарата представлены на фиг. 1-3 (данные представлены в том числе для 5% и 10% концентраций).

Согласно диаграммам, наибольшую литолитическую активность in vitro растительный комбинированный препарат проявил в отношении оксалатных и уратных камней. При этом пик активности литолиза согласно кривой убыли массы мочевых камней пришелся для оксалатов на конец второй недели, для уратов - на конец первой недели экспозиции. Менее чувствительны к действию растительного комбинированного препарата in vitro оказались фосфатные камни. Растворимость их оказалась максимальной к концу третьей недели. Четкой зависимости между концентрацией водной взвеси растительного комбинированного препарата и интенсивностью литолиза не прослеживалось.

Дальнейшее исследование литолитической активности растительного комбинированного препарата in vitro заключалось в изучении его возможного ингибирующего влияния на процессы кристаллизации в модельной системе кристаллообразования. Использовался профильтрованный настой продукта в концентрациях 5 мг/мл; 10 мг/мл; 20 мг/мл. Исследования проводили в условиях гомогенной нуклеации (без добавления экзогенных микрокристаллов оксалата кальция).

Световые микрофотографии, сделанные в процессе кристаллизации в модельной системе, подтвердили образование большого количества кристаллов оксалата кальция. Кристаллические частицы имели большие размеры, отмечался активный процесс их агрегации (фиг. 4). Введение настоя растительного комбинированного препарата концентрацией 5 мг/мл в модельную систему кристаллообразования проявилось ингибирующим действием (фиг. 5). Количество и размеры образовавшихся кристаллов в присутствии растительного комбинированного препарата оказались значительно меньших размеров, нежели в чистой модельной системе. Было установлено, что торможение процессов кристаллизации увеличивается с повышением концентрации вводимого в систему настоя растительного комбинированного препарата (фиг. 6). Влияние растительного комбинированного препарата на процессы нуклеации, роста кристаллических частиц и их агрегации определяли посредством измерения интенсивности светорассеивания поверхностью образующихся монокристаллов в искусственной системе кристаллообразования с помощью спектрофотометрии. Как видно из фиг. 7, в модельной системе кристаллообразования наблюдалось повышение мутности раствора, связанное с образованием микрокристаллов оксалата кальция.

Динамика кристаллообразования в присутствии растительного комбинированного препарата при не отличающейся в сравнении с чистой модельной системой начальной скорости нуклеации проявилась значительно продолжительной фазой агрегации. И если в модельной системе момент полного просветления раствора, свидетельствующий об образовании агрегатов кристаллов, наступил уже на 40 минуте, то в модельных системах в присутствии растительного комбинированного препарата как в концентрации 5 мг/мл, так и в концентрации 10 мг/мл и 20 мг/мл, полная агрегация кристаллов наступила после истечения 120 минут.

Таким образом, участие растительного комбинированного препарата на основе криопорошков травы репейничка аптечного и корня шиповника собачьего в процессе кристаллообразования оксалатов кальция существенно замедляет рост и агрегацию кристаллов. При повышении концентрации растительного комбинированного препарата ингибирующее действие увеличивается.

Исследование литолитической активности растительного комбинированного препарата in vivo.

По результатам микроскопической оценки осадка мочи к концу третьей недели формирования экспериментального уролитиаза во всех группах животных, как у самок, так и у самцов было выявлено большое количество кристаллов в моче, что свидетельствует о развивающемся нарушении выделительной функции почек и развитии мочекаменной болезни. Как у крыс-самцов, так и у крыс-самок к концу третьей неделе потребления этиленгликоля была зарегистрирована кристаллурия. Кристаллические частицы мочевого осадка крыс были представлены преимущественно оксалатами кальция и трипельфосфатами (фиг. 8-9).

Развитие патологии почек во всех группах крыс подтверждалось и характером изменений ряда свойств мочи у экспериментальных животных, а именно наличием в моче белка, повышенного количества эритроцитов и лейкоцитов в моче (таблица 11).

В последующие две недели крысы всех групп продолжали потреблять раствор этиленгликоля. Животным 1-й и 2-й опытных групп в течение 14 дней применяли растительный комбинированный препарат в количестве 50+50 мг/кг и 100+100 мг/кг, соответственно. После 2-х недельного применения растительного комбинированного препарата проводилась микроскопия осадка мочи у всех животных. В контрольной группе животных, как у самок, так и у самцов, получавших только этиленгликоль, сохранялось наличие большого количества кристаллов в моче (фиг. 8). Часто встречались кристаллы больших размеров, составляющих в среднем 33,4±1,5 мкм.

В моче крыс, которым применялся растительный комбинированный препарат, как в дозе 50+50 мг/кг, так и 100+100 мг/кг, количество кристаллов оказалось сравнительно меньше, нежели в группе контроля. Средний размер кристаллов составил 15,4+1,5 мкм (фиг. 11-12). Выявленных отличий в результатах микроскопии осадка мочи в зависимости от половой принадлежности животных не отмечалось.

Обобщая результаты, можно говорить о разных механизмах литолитического действия изучаемого растительного комбинированного препарата. В процессе in vitro основные механизмы литолиза мочевых конкрементов, вероятно, обусловлены как механическим вымыванием и действием биологически активных компонентов растительного комбинированного препарата на вещества мочевых конкрементов, так и особенностью веществ, выделяющихся при разрушении нефролитов, изменять уровень рН, который определяется и качеством, и количеством этих веществ.

Установленная литолитическая активность растительного комбинированного препарата in vivo связана как с усилением выведения образующихся кристаллов за счет мочегонного действия, так и не исключающимися противовоспалительными свойствами растительного комбинированного препарата, снижающими возможность адгезии крупных кристаллов в почечных тканях.

Представленные выше данные позволяют рассматривать заявленный растительный комбинированный препарат на основе криопорошков травы репейничка аптечного и корня шиповника собачьего в качестве лекарственного средства, обладающего диуретической, антибактериальной и литолитической активностями.

Далее представлены возможные варианты осуществления настоящего изобретения в конкретных лекарственных формах, одной из которых является таблетка без оболочки, а другой - твердая желатиновая капсула. Количество активных веществ в каждой таблетке или капсуле было выбрано на основании методики, описанной в Руководстве по проведению доклинических исследований лекарственных средств (Часть первая. - М.: Гриф и К, 2012. - 944 с; см. «Метод деления»), согласно которой формула для расчета эквивалентной дозы для человека (ЭДЧ):

где ДБНОЭ - доза без наблюдаемого отрицательного эффекта; К_п - коэффициент пересчета для человека для метода деления. За средний вес человека принято 70 кг.

Лекарственные формы, представляющие собой таблетки (в том числе без оболочки), содержащие криопорошки травы репейничка аптечного и корня шиповника собачьего, создаются стандартным способом прямого прессования. Криопорошки, как это упоминалось выше, получают известными способами путем, в частности, перемалывания в среде хладагента. Далее, в качестве примера, перемешивают все компоненты, включая вспомогательные вещества, (кроме магния стеарата) до гомогенной порошкообразной смеси, используя, например, Y-образный смеситель или аналогичное оборудование. Затем добавляют магния стеарат и полученную смесь перемешивают в течение 30 минут. Полученную таблетмассу передают на таблетирование. Лекарственные формы, представляющие собой твердые желатиновые капсулы, создаются стандартными технологическими приемами путем смешивания активных и вспомогательных ингредиентов в нужной пропорции и дальнейшего капсулирования.

Растительный комбинированный препарат №1 (таблетка без оболочки):

криопорошок травы репейничка аптечного - 580 мг;

криопорошок шиповника корня - 580 мг;

стеарат магния - 15 мг;

микрокристаллическая целлюлоза - 100 мг.

Растительный комбинированный препарат №2 (таблетка без оболочки):

криопорошок травы репейничка аптечного - 870 мг;

криопорошок шиповника корня - 870 мг;

стеарат магния - 22,5 мг;

микрокристаллическая целлюлоза - 200 мг.

Растительный комбинированный препарат №3 (таблетка без оболочки):

криопорошок травы репейничка аптечного - 1160 мг;

криопорошок шиповника корня - 1160 мг;

стеарат магния - 30 мг;

микрокристаллическая целлюлоза - 300 мг.

Растительный комбинированный препарат №4 (твердая желатиновая капсула):

криопорошок травы репейничка аптечного - 580 мг;

криопорошок шиповника корня - 580 мг;

стеарат магния - 15 мг;

кальция гидрофосфат - 100 мг.

Растительный комбинированный препарат №5 (твердая желатиновая капсула):

криопорошок травы репейничка аптечного - 870 мг;

криопорошок шиповника корня - 870 мг;

стеарат магния - 22,5 мг;

кальция гидрофосфат - 200 мг.

Растительный комбинированный препарат №6 (твердая желатиновая капсула):

криопорошок травы репейничка аптечного - 1160 мг;

криопорошок шиповника корня - 1160 мг;

стеарат магния - 30 мг;

кальция гидрофосфат - 300 мг.

Настоящее описание осуществления заявленного изобретения демонстрирует лишь частный вариант осуществления и не ограничивает иные варианты реализации заявленного изобретения, поскольку возможные альтернативные варианты осуществления заявленного изобретения, не выходящие за пределы объема информации, изложенной в настоящей заявке, должны быть очевидными для специалиста в данной области техники, имеющего обычную квалификацию, на которого рассчитано заявленное изобретение.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к препарату, обладающему диуретическим, и/или антибактериальным, и/или литолитическим действием. Растительный комбинированный препарат, обладающий диуретическим, и/или антибактериальным, и/или литолитическим действием, содержащий криопорошки травы репейничка аптечного и корня шиповника собачьего и вспомогательные вещества. Вышеописанный препарат обладает эффективным диуретическим, и/или антибактериальным, и/или литолитическим действием. 6 з.п. ф-лы, 12 ил., 11 табл.

1. Растительный комбинированный препарат, обладающий диуретическим, и/или антибактериальным, и/или литолитическим действием, содержащий криопорошки травы репейничка аптечного и корня шиповника собачьего и вспомогательные вещества.

2. Препарат по п. 1, отличающийся тем, что представляет собой таблетку без оболочки или твердую желатиновую капсулу.

3. Препарат по п. 2, отличающийся тем, что в качестве вспомогательных веществ содержит стеарат магния и микрокристаллическую целлюлозу или кальция гидрофосфат.

4. Препарат по любому из пп. 1-3, представляющий собой таблетку без оболочки, отличающийся тем, что содержит:

криопорошок травы репейничка аптечного в количестве от 580 мг до 1160 мг;

криопорошок корня шиповника собачьего в количестве от 580 мг до 1160 мг;

стеарат магния в количестве от 15 мг + до 30 мг;

микрокристаллическую целлюлозу в количестве от 100 мг до 300 мг.

5. Препарат по п. 4, отличающийся тем, что криопорошки травы репейничка аптечного и корня шиповника собачьего взяты в соотношении 1:1.

6. Препарат по любому из пп. 1-3, представляющий собой твердую желатиновую капсулу, отличающийся тем, что содержит:

криопорошок травы репейничка аптечного в количестве от 580 мг до 1160 мг;

криопорошок корня шиповника собачьего в количестве от 580 мг до 1160 мг;

стеарат магния в количестве от 15 мг до 30 мг;

кальция гидрофосфат в количестве от 100 мг до 300 мг.

7. Препарат по п. 6, отличающийся тем, что криопорошки травы репейничка аптечного и корня шиповника собачьего взяты в соотношении 1:1.