Анальгезирующее средство на основе замещённой 2-[1-(1Н-бензимидазол-2-ил)-3-фенил-1Н-1,2,4-триазол-5-ил]пропановой кислоты Российский патент 2018 года по МПК A61K31/4196 A61P29/00 

Описание патента на изобретение RU2661603C1

Изобретение относится к медицине и фармации и касается нового анальгезирующего средства, в том числе анальгезирующего средства, дополнительно обладающего противовирусной активностью, на основе замещенной 2-[1-(1H-бензимидазол-2-ил)-3-фенил-1H-1,2,4-триазол-5-ил]пропановой кислоты формулы I:

где

R=NO2 (Ia - 2-[1-(1H-бензимидазол-2-ил)-3-(4-нитрофенил)-1H-1,2,4-триазол-5-ил]пропановая кислота;

R=ОСН3 (Iб - 2-[1-(1Н-бензимидазол-2-ил)-3-(4-метоксифенил)-1Н-1,2,4-триазол-5-ил]пропановая кислота;

R=СН3 (Iв - 2-[1-(1H-бензимидазол-2-ил)-3-(4-метилфенил)-1H-1,2,4-триазол-5-ил]пропановая кислота;

R=Н (Iг - 2-[1-(1H-бензимидазол-2-ил)-3-фенил-1H-1,2,4-триазол-5-ил]пропановая кислота.

Замещенные соединения 2-[1-(1H-бензимидазол-2-ил)-3-фенил-1H-1,2,4-триазол-5-ил]пропановой кислоты, их строение, физико-химические свойства и способ получения известны [Особенности реакций 2,5-замещенных 4-гидрокси-6Н-1,3-оксазин-6-онов с бензимидазол-2-илгидразином (статья) / Л.Н. Овсянникова; Б.Ю. Лалаев; И.П Яковлев; Т.Л. Семакова//ЖОРХ. - 2016. Т. 52. - Вып. 4. - С. 617-618]. Однако не изучена была токсичность этих соединений, анальгезирующая и противовирусная активности не были выявлены, что не позволяло говорить о лекарственных средствах на их основе.

Наиболее близким по структуре и фармакологическим свойствам к заявляемому средству является обладающий анальгезирующей и противовоспалительной активностью ибупрофен (II)

К недостаткам данного соединения можно отнести более высокую токсичность, чем у предлагаемых соединений, а также отсутствие каких-либо данных по его противовирусной активности.

Задачей предлагаемого изобретения является расширение арсенала имеющих низкую токсичность анальгезирующих средств на основе замещенной 2-[1-(1H-бензимидазол-2-ил)-3-фенил-1H-1,2,4-триазол-5-ил]пропановой кислоты (I), превышающих указанную активность применяющихся в медицинской практике препаратов, в том числе средства, дополнительно обладающего противовирусной активностью.

Указанная задача достигается созданием анальгезирующего средства на основе замещенной 2-[1-(1H-бензимидазол-2-ил)-3-фенил-1H-1,2,4-триазол-5-ил]пропановой кислоты (I).

Указанная задача достигается также созданием анальгезирующего средства на основе 2-[1-(1H-бензимидазол-2-ил)-3-(4-нитрофенил)-1H-1,2,4-триазол-5-ил]пропановой кислоты (Ia), дополнительно обладающего противовирусной активностью.

Изобретение иллюстрируется способом получения и примерами исследования фармакологических свойств.

Замещенные соединения 2-[1-(1H-бензимидазол-2-ил)-3-фенил-1H-1,2,4-триазол-5-ил]пропановой кислоты получали путем взаимодействия 2,5-замещенного-4-гидрокси-6H-1,3-оксазин-6-она с бензимидазол-2-илгидразином в среде безводного полярного органического растворителя (метанол), причем смесь перемешивали в течение 41-48 часов при комнатной температуре, полученный осадок отфильтровывали и промывали небольшими порциями этилацетата.

Способ получения замещенных 2-[1-(1H-бензимидазол-2-ил)-3-фенил-1H-1,2,4-триазол-5-ил]пропановых кислот (Iа, б, в, г) осуществлен в лабораторных условиях на стандартном товарном сырье.

Данные элементного анализа, выход продукта реакции, температура плавления и величина Rf приведены в табл. 1, спектральные характеристики - в табл. 2.

Пример 1. Определение острой токсичности

Острую токсичность синтезируемых соединений определяли на нелинейных белых мышах-самцах массой тела 18-20 г. Животных распределяли на равные по численности и массе тела группы, по 10 животных в каждой. Суспензии соединения в воде, стабилизированные твином-80, вводили однократно внутрибрюшинно в интервале доз 50 мг/кг - 2000 мг/кг. Выживаемость животных определяли, наблюдая через 24 часа и через 48 часов от момента введения исследуемого соединения. Наблюдение за животными осуществляли в течение 72 часов. Регистрировали развитие основных симптомов и время гибели животных.

Расчет среднесмертельной дозы (LD50) проводили с помощью экспресс-метода В.Б. Прозоровского [Прозоровский В.Б. Статистическая обработка результатов фармакологических исследований // Псохофармакол. биол. наркол. - 2007. Т. 7, №3-4 - С. 2090-2120] и пробит-анализа по методу Миллера-Тейнтера [М.Л. Беленький. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта (2-е изд, перераб. и доп.). - Л.: Гос. изд-во мед. лит., 1963. С. 412]. Токсичность заявляемых субстанций составляет 2000 мг/кг (табл 3). Согласно классификации токсичности препаратов соединения I относятся к классу малотоксичных веществ [Измеров И.Ф., Саноцкий И.В., Сидоров К.К. Параметры токсикометрии промышленных ядов. - М.: Медицина, 1977. С. 196-197]. Оно более чем в 8 раз менее токсично метамизола натрия - препарата сравнения по анальгезирующей активности (табл. 3).

Пример 2. Определение анальгезирующей активности

Для экспериментальной оценки анальгезирующей активности использовали модель генерации уксуснокислых «корчей» у мышей-самцов. Судороги у животных вызывали при помощи внутрибрюшинного введения 3% раствора уксусной кислоты. Эксперимент проводили на белых нелинейных мышах-самцах массой тела 15-22 г. Для эксперимента использовали 3 группы животных по 7 особей в каждой. Суспензии замещенных соединений 2-[1-(1H-бензимидазол-2-ил)-3-фенил-1H-1,2,4-триазол-5-ил]пропановой кислоты (Iа, б, в, г) в смеси ДМСО с водой (1:5) (стабилизатор твин-80) вводили однократно, внутрибрюшинно в дозах 1/10 LD50 3a 40 минут до внутрибрюшинного введения 3% раствора уксусной кислоты. Животным контрольной группы вводили смесь ДМСО: вода (1:5). В качестве препарата сравнения использовали метамизол натрия в дозе 25 мг/мл. Регистрировали время начала судорог и их количество в течение 20 минут [Харкевич Д.А. Фармакология: Учебник. - 10-е изд. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009. - С. 628-640]. Анальгетическая активность заявляемых субстанций выше препарата сравнения метамизола натрия, исследуемая субстанция в 8 раз менее токсична (табл 3).

Пример 3. Изучение токсичности в отношении линии нормальных эпителиальных клеток почек собак (MDCK, Sigma-Aldrich, USI)

Клетки MDCK сеяли в 96-луночные планшеты и культивировали при 36°С на минимальной поддерживающей среде (MEM) с добавлением 10% сыворотки крупного рогатого скота в атмосфере 5% СО2 (в газопроточном инкубаторе Sanyo-175) до состояния монослоя. Из исследуемого соединения (Iа) готовили маточный раствор концентрации 10 мг/мл в диметилсульфоксиде, после чего готовили серию трехкратных разведений препаратов в среде MEM от 300 до 3 μg/ml. Растворенные препараты вносили в лунки планшетов и инкубировали 2 суток при 36°С. По истечении этого срока клетки промывали 2 раза по 5 минут фосфатно-солевым буфером, и количество живых клеток оценивали при помощи микротетразолиевого теста (МТТ). С этой целью в лунки планшетов добавляли по 100 мкл раствора (5 мг/мл) 3-(4,5-диметилтиазолил-2) 2,5-дифенилтетразолия бромида (ICN Biochemicals Inc., Aurora, Ohio) на физиологическом растворе. Клетки инкубировали при 36°С в атмосфере 5% СО2 в течение 2 часов и промывали 5 минут фосфатно-солевым буфером. Осадок растворяли в 100 мкл на лунку ДМСО, после чего оптическую плотность в лунках планшетов измеряли на многофункциональном ридере Victor 1420 (Perkin Elmer, Finland) при длине волны 535 нм. По результатам теста для каждого продукта определяли концентрацию соединения, вызывающую гибель 50% клеток в культуре - 50% цитотоксическую дозу (СС50). Для соединения Iа она составила 2552 мкг/мл, что лучше, чем у препарата сравнения по противовирусной активности рибавирина - 2130 мкг/мл.

Пример 4. Определение противовирусной активности

Определение противовирусной активности соединения (Iа) проводили на клетках MDCK в 96-луночных планшетах для клеточных культур. Соединение растворяли в поддерживающей среде для клеток, вносили в лунки панелей с клеточным монослоем и инкубировали в течение 1 часа при 36°С в атмосфере 5% СО2.

Из вируссодержащей жидкости (штамм A/Puerto Rico/8/34 (H1N1) готовили серию десятикратных разведении от 10-1 до 10-7, добавляли в лунки с препаратами и инкубировали при 36°С в течение 48 часов в атмосфере 5% CO2. По окончании срока инкубации 100 мкл культуральной жидкости переносили в отдельные планшеты с круглым дном и смешивали с равным объемом 1% куриных эритроцитов. Учет результатов проводили через 60 минут инкубации при 20°С. За титр вируса принимали величину, обратную наибольшему разведению исходного вируса, способного вызвать положительную реакцию гемагглютинации в лунке, и выражали титр в количестве 50% инфекционных доз (ID50). Вирусингибирующее действие исследуемого соединения оценивали по снижению титра вируса в опыте по сравнению с контролем. На основании полученных данных рассчитывали концентрацию препарата, снижающую титр вируса вдвое - 50% ингибирующую концентрацию IС50, для соединения (Iа) она составила - 88,9 мкг/мл. Химиотерапевтический индекс, или индекс селективности (SI), представляющий собой отношение СС50 к IC50, для соединения (Iа) составил 15, что сопоставимо с препаратом сравнения рибавирином - 67, который, однако, не обладает анальгетической активностью и имеет ряд противопоказаний по применению.

Таким образом, заявляемые средства (I) являются малотоксичными, обладают значительно большей анальгезирующей активностью и низкой токсичностью по сравнению с широко известным и применяемым в медицине препаратом сравнения метамизол натрия. Кроме того, средство на основе 2,2'-[(6-метилпиримидин-2,4-диил)бис(3-(4-нитрофенил)-1H-1,2,4-триазол-1,5-диил)]дипропановой кислоты (Iа) дополнительно обладает противовирусной активностью.

Похожие патенты RU2661603C1

название год авторы номер документа
Анальгезирующее и противовирусное средство на основе замещенной 2-[1-(1Н-бензимидазол-2-ил)-3-фенил-1Н-1,2,4-триазол-5-ил]пропановой кислоты 2018
  • Овсянникова Лилия Николаевна
  • Лалаев Борис Юрьевич
  • Яковлев Игорь Павлович
  • Зарубаев Владимир Викторович
  • Оршанская Яна Рафаэловна
  • Штро Анна Андреевна
RU2684781C1
Анальгезирующее средство на основе замещённой 2,2'-[(6-метилпиримидин-2,4-диил)бис(3-фенил-1Н-1,2,4-триазол-1,5-диил)]дипропановой кислоты 2017
  • Овсянникова Лилия Николаевна
  • Лалаев Борис Юрьевич
  • Яковлев Игорь Павлович
  • Зарубаев Владимир Викторович
  • Оршанская Яна Рафаэловна
  • Штро Анна Андреевна
RU2676092C1
Анальгезирующее и противовирусное средство на основе 2,2'-[(6-метилпиримидин-2,4-диил)бис(3-(4-нитрофенил)-1H-1,2,4-триазол-1,5-диил)]дипропановой кислоты 2017
  • Овсянникова Лилия Николаевна
  • Лалаев Борис Юрьевич
  • Яковлев Игорь Павлович
  • Зарубаев Владимир Викторович
  • Оршанская Яна Рафаэловна
  • Штро Анна Андреевна
RU2672878C1
ЗАМЕЩЁННЫЕ 2-(1,3-БЕНЗОТИАЗОЛ-2-ИЛ)-3-ФЕНИЛ-1Н-1,2,4-ТРИАЗОЛ-5-ИЛ) ПРОПАНОВЫЕ КИСЛОТЫ И СПОСОБ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ 2015
  • Овсянникова Лилия Николаевна
  • Лалаев Борис Юрьевич
  • Яковлев Игорь Павлович
  • Ксенофонтова Галина Владимировна
  • Семакова Тамара Леонидовна
RU2603958C1
Замещённые 2-(1-(3-оксо-3,4-дигидрохиноксалин-2-ил)-3-фенил-1H-1,2,4-триазол-5-ил)пропановые кислоты и способ их получения 2017
  • Овсянникова Лилия Николаевна
  • Лалаев Борис Юрьевич
  • Яковлев Игорь Павлович
  • Фам Ань Туан
  • Кириллова Евгения Никитична
  • Куваева Елена Владимировна
RU2645683C1
6-(2'-АМИНО-2'-КАРБОКСИЭТИЛТИО)-2-МЕТИЛТИО-4-ПИВАЛОИЛОКСИМЕТИЛ-1,2,4-ТРИАЗОЛО[5,1-c]1,2,4-ТРИАЗИН-7(4Н)-ОН 2011
  • Русинов Владимир Леонидович
  • Чупахин Олег Николаевич
  • Чарушин Валерий Николаевич
  • Уломский Евгений Нарциссович
  • Медведева Наталья Розыевна
  • Киселев Олег Иванович
  • Деева Элла Германовна
RU2455304C1
Замещённые 2,2'-[(6-метилпиримидин-2,4-диил)бис(3-фенил-1Н-1,2,4-триазол-1,5-диил)]дипропановые кислоты и способ их получения 2016
  • Овсянникова Лилия Николаевна
  • Лалаев Борис Юрьевич
  • Яковлев Игорь Павлович
  • Фам Ань Туан
  • Ксенофонтова Галина Владимировна
  • Семакова Тамара Леонидовна
RU2631325C1
ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ РАКА И ВИРУСНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ, СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ РАКА, СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ НА ЕЕ ОСНОВЕ 1996
  • Кэмден Джеймс Бергер
RU2177316C2
ПРОИЗВОДНЫЕ 2-(ФЕНИЛ ИЛИ ПИРИД-3-ИЛ)АМИНОПИРИМИДИНА В КАЧЕСТВЕ МОДУЛЯТОРОВ БОГАТОЙ ЛЕЙЦИНОМ ПОВТОРНОЙ КИНАЗЫ 2 (LRRK2) ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ БОЛЕЗНИ ПАРКИНСОНА 2012
  • Бейкер-Гленн Чарльз
  • Чэмберс Марк
  • Чань Брайан К.
  • Эстрада Энтони
  • Свини Закари Кевин
RU2647849C2
МЕТИЛ, ХЛОР И НИТРОПРОИЗВОДНЫЕ N-{3, 5-ДИОКСО-4-АЗАТЕТРАЦИКЛО[5.3.2.0.0]ДОДЕЦ-11-ЕН-4-ИЛ}-2-ГИДРОКСИБЕНЗАМИДА-ПРОТИВОВИРУСНЫЕ ПРЕПАРАТЫ, ИНГИБИРУЮЩИЕ РЕПЛИКАЦИЮ РАЗЛИЧНЫХ ВИДОВ ОРТОПОКСВИРУСОВ 2010
  • Селиванов Борис Алексеевич
  • Тихонов Алексей Яковлевич
  • Беланов Евгений Федорович
  • Бормотов Николай Иванович
  • Балахнин Сергей Маркович
  • Серова Ольга Алексеевна
  • Святченко Виктор Александрович
  • Киселев Николай Николаевич
  • Казачинская Елена Ивановна
  • Локтев Валерий Борисович
RU2440983C1

Реферат патента 2018 года Анальгезирующее средство на основе замещённой 2-[1-(1Н-бензимидазол-2-ил)-3-фенил-1Н-1,2,4-триазол-5-ил]пропановой кислоты

Изобретение относится к медицине и фармации и представляет собой анальгезирующее средство, включающее замещенную 2-[1-(1H-бензимидазол-2-ил)-3-фенил-1H-1,2,4-триазол-5-ил]пропановую кислоту (I), выбранную из группы: Iа - 2-[1-(1H-бензимидазол-2-ил)-3-(4-нитрофенил)-1H-1,2,4-триазол-5-ил]пропановая кислота; Iб - 2-[1-(1Н-бензимидазол-2-ил)-3-(4-метоксифенил)-1Н-1,2,4-триазол-5-ил]пропановая кислота; Iв - 2-[1-(1H-бензимидазол-2-ил)-3-(4-метилфенил)-1H-1,2,4-триазол-5-ил]пропановая кислота; Iг - 2-[1-(1H-бензимидазол-2-ил)-3-фенил)-1H-1,2,4-триазол-5-ил]пропановая кислота, - в качестве активного вещества. Осуществление изобретения позволяет получить малотоксичное анальгезирующее средство, которое проявляет значительно большую анальгезирующую активность, чем препараты сравнения, широко применяемые в медицине. 4 пр., 3 табл.

Формула изобретения RU 2 661 603 C1

Анальгезирующее средство, включающее замещенную 2-[1-(1H-бензимидазол-2-ил)-3-фенил-1H-1,2,4-триазол-5-ил]пропановую кислоту формулы I, выбранную из группы: R=NO2 (Ia - 2-[1-(1H-бензимидазол-2-ил)-3-(4-нитрофенил)-1H-1,2,4-триазол-5-ил]пропановая кислота); R=OCH3 (Iб - 2-[1-(1H-бензимидазол-2-ил)-3-(4-метоксифенил)-1H-1,2,4-триазол-5-ил]пропановая кислота); R=CH3 (Iв - 2-[1-(1H-бензимидазол-2-ил)-3-(4-метилфенил)-1H-1,2,4-триазол-5-ил]пропановая кислота); R=H (Iг - 2-[1-(1H-бензимидазол-2-ил)-3-фенил)-1H-1,2,4-триазол-5-ил]пропановая кислота), - в качестве активного вещества:

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2018 года RU2661603C1

Аппарат для очищения воды при помощи химических реактивов 1917
  • Гордон И.Д.
SU2A1
Овсянникова; Б.Ю
Лалаев; И.П Яковлев; Т.Л
Семакова//ЖОРХ
Токарный резец 1924
  • Г. Клопшток
SU2016A1
Т
Устройство для устранения мешающего действия зажигательной электрической системы двигателей внутреннего сгорания на радиоприем 1922
  • Кулебакин В.С.
SU52A1
- Вып
Очаг для массовой варки пищи, выпечки хлеба и кипячения воды 1921
  • Богач Б.И.
SU4A1
- С
СЪЕМНЫЙ ПРЕДОХРАНИТЕЛЬ ПЛАТЬЯ 1922
  • Иоффе Ф.О.
SU617A1
WO 2016141065 A1, 09.09.2016
Аппарат для очищения воды при помощи химических реактивов 1917
  • Гордон И.Д.
SU2A1

RU 2 661 603 C1

Авторы

Овсянникова Лилия Николаевна

Лалаев Борис Юрьевич

Яковлев Игорь Павлович

Зарубаев Владимир Викторович

Оршанская Яна Рафаэловна

Штро Анна Андреевна

Даты

2018-07-17Публикация

2017-04-12Подача