ПРОТИВОПАРАЗИТАРНЫЙ ПРЕПАРАТ С ИММУНОМОДУЛИРУЮЩИМИ СВОЙСТВАМИ Российский патент 2018 года по МПК A61K36/70 A61K31/365 A61P33/14 A61P37/02 A01N63/00 

Изобретение относится к фармакологии, ветеринарии и предназначено для профилактики и лечения гельминтозов и арахно-энтомозов животных.

Предлагаемый препарат в качестве действующего начала содержит гемисукцинат авермектина B_1a или смесь гемисукцината авермектина В_1а и абамектина в соотношении 1:1, а в качестве иммуномодулятора содержит меланины растения гречихи. Растворителями действующего начала служат изопропиловый спирт и пропиленгликоль, а в качестве основы (адсорбента) - перлит при определенном соотношении ингредиентов. Предлагаемый препарат применяют перорально с кормом, что определяет его преимущество в случае, когда затруднено использование инъекционных или накожных лекарственных средств, например для лечения пушных зверей, лошадей, птиц. Разработанный препарат проявляет высокую противопаразитарную активность и защищает иммунную систему животных.

Возникающие патологические процессы при паразитарных заболеваниях приводят к нарушению гомеостаза организма, проявляющегося комплексом разнообразных изменений, в т.ч. в иммунной системе животного. В связи с этим актуально совершенствование терапии паразитозов с учетом коррекции иммунной системы животных путем создания комплексных паразицидов широкого спектра действия с иммуномодулирующими свойствами.

Известен препарат (патент RU 2155052, А61K 35/70, опубл. 27.08.2000), который содержит в своем составе в качестве антипаразитарного средства авертин и иммуностимулирующий и противовоспалительный компонент риботан. Недостатком препарата является необходимость фиксации животных при проведении инъекции, локальная припухлость в месте инъекции, трудность обработки пушных зверей, лошадей.

Наиболее близкими по технической сущности к заявленному изобретению (прототипом) является препарат для профилактики и лечения заболеваний, вызванных эндо- и эктопаразитами животных, содержащий авермектиновый комплекс, иммуномодулятор – рибав, и твердый носитель перлит (патент RU 2212891, А61Р 33/00, опубл. 27.09.2003). Недостатком этого препарата является то, что иммуномодулятор рибав имеет неопределенный, многокомпонентный состав (Топурия Л.Ю. Структурно-функциональная и клиническая оценка влияния иммуномодуляторов природного происхождения на организм животных: Автореф. дис.…док. биол. наук. - Оренбург, 2008. - 43 с.), а активным действующим началом являются хорошо известные и давно применяемые в ветеринарной медицине вещества авермектинового ряда, к которым появились резистентные формы паразитов (Викторов В.А., Дриняев В.А. Развитие резистентности к авемектину //Ветеринария. - Москва, 2002. - №4. - С. 50-55).

Задачей предлагаемого изобретения является разработка лекарственного средства для перорального применения, обладающего не только высокой противопаразитарной активностью в связи с содержанием не известного ранее действующего вещества (ДВ), но и иммуномодулирующим эффектом и упрощенным способом применения.

Технический результат от применения заявленного изобретения - создание препарата, включающего новое антипаразитарное ДВ - гемисукцинат авермектина В_1а или гемисукцинат авермектина B_1a и абамектин, меланины гречихи, перлит, изопропиловый спирт, пропиленгликоль и дистиллированную воду, а также преодоление резистентности возбудителей паразитозов к ранее применяющимся авермектинсодержащим лекарственным средствам.

Технический результат изобретения достигается тем, что в состав препарата в форме порошка вводят в качестве противопаразитарного начала гемисукцинат авермектина B_1a или гемисукцинат авермектина В_1а и абамектин. В качестве иммуномодулирующего вещества используют меланины растения гречихи, в качестве адсорбента (носителя) используют перлит, а изопропиловый спирт, пропиленгликоль и дистиллированная вода служат жидкой основой для ДВ. Разработанный состав и соотношение ингредиентов представлены в Таблице 1.

Лекарственная субстанция - гемисукцинат авермектина В_1а - синтезирована и идентифицирована авторами данного предложения и защищенная патентом - Патент RU 2453553, С07Н 19/01, С07Н 17/08, опубл. 20.06.2012.

Химическое название: 5-О-сукциноилавермектин В₁ (гемисукцинат авермектина В_1а). Молекулярная масса: 974. Эмпирическая формула: C₅₂H₇₈O₁₇. Субстанция содержит не менее 93,7% C₅₂H₇₈O₁₇ в пересчете на сухое вещество. По внешнему виду представляет собой белый (с желтоватым оттенком) кристаллический порошок. В воде не растворяется, хорошо растворяется в органических растворителях: спирт изопропиловый, спирт этиловый, ацетонитрил, ацетон и др.

Гемисукцинат авермектина B_1a, как и все известные авермектины (ивермектин, абамектин, дорамектин и др.), в очень низкой концентрации (терапевтической дозе) 200 мкг/кг массы тела обладает широким спектром противопаразитарной активности.

Меланины растения гречихи, получают по ТУ №9169-001-35231285-13, Экстракт лузги гречихи «Мелавит» от 27.06.2013 г., выпускаются в виде раствора и сухого порошка. По имеющимся данным, меланины относятся к химическим веществам (пигментам) полифенольной природы. В последнее время опубликовано множество работ, показывающих способность меланинов оказывать иммуномодулирующее, антиоксидантное, радиопротекторное, противовоспалительное и др. позитивные действия на организм животных и людей.

Спирт изопропиловый - растворитель. Смешивается во всех соотношениях с водой, хлороформом, глицерином; все соединения авермектинового ряда хорошо растворяются в изопропиловом спирте.

Перлит-перлитовые вспученные песок и щебень из Арагатского месторождения (Армения) - носитель (адсорбент) (ГОСТ 10832-2009).

Пропиленгликоль - бесцветное органическое соединение, почти без запаха, прозрачное, вязкое со слабовыраженным сладким вкусом, также называемое 1,2-пропандиол, пропан-1,2-диол или α-пропиленгликоль, чтобы отличить его от изомера пропана-1,3-диола (β-пропиленгликоль). Пропиленгликоль - гигроскопичная бесцветная жидкость, содержащая асимметричный атом углерода, растворимая в воде, этаноле, диэтиловом спирте, ацетоне и хлороформе. Широко применение пропиленгликоля в пищевой промышленности и в качестве растворителя в традиционной медицине. На основе пропиленгликоля создаются пероральные и инъекционные медикаменты.

Доступные источники информации не содержат данные, свидетельствующие о том, что известна предлагаемая совокупность существенных признаков, позволяющая достичь заявляемый технический результат, поэтому предлагаемое изобретение отвечает требованиям патентоспособности. Заявителю не известны противопаразитарные средства, в которых были бы раскрыты отличительные признаки заявляемого изобретения. Отсюда, предлагаемое изобретение полностью соответствует требованиям патентоспособности.

Возможность промышленной реализации заявляемого предложения подтверждается следующими конкретными примерами.

Пример 1. В смесительную емкость на 20 л при перемешивании вносят 4,0 л спирта изопропилового, 900 мл пропиленгликоля, 37,5 г гемисукцината авермектина В_1а, 30 г меланина в 2,587 л воды и 2,42 кг перлита. Содержимое перемешивают в течение 20-25 минут, выдерживают для стабилизации 2-3 часа, сушат и получают 2,5 кг готовой лекарственной формы.

Пример 2. Все операции осуществляют, как в примере 1, но в качестве ДВ добавляют 18,75 г гемисукцината авермектина В_1а и 18,75 г абамектина.

Пример 3. Противопаразитарную эффективность и действие на иммунную систему животных проверяют на спонтанно инвазированных чесоточными клещами овцах. Из 22 голов животных сформировали 4 подопытные группы: 1 группа из 4 голов служила контролем и препарат не получала; 2 группа животных из 6 голов обработана известным инъекционным препаратом Ниацид; 3 группа животных из 6 голов получала заявляемый препарат, изготовленный по примеру 1, а 4 группа животных из 6 голов получала препарат, изготовленный по примеру 2. Препарат Ниацид вводили подкожно в дозе 1 мл/50 (0,2 мг/кг по ДВ) массы тела в соответствии с утвержденной Инструкцией по применению, а заявляемый препарат давали с кормом в дозе 14 мг/кг, что соответствует 0,2 мг/кг по ДВ. Препараты применяли двукратно с интервалом 12 суток, экстенеэффективность (ЭЭ, %) определяли по количеству выздоровевших животных.

Полученные результаты обрабатывали статистически (Г.Ф. Лакин, 1990) с использованием ПЭВМ, сравнивались между собой и соответствующими клиническими нормами животных.

Как видно из представленных данных в Таблице 2, в результате опыта экстенсинвазированность (ЭИ) животных всех групп в начале опыта была 100%, через 30 суток после первого введения препарата 100%-ный терапевтический эффект наблюдается у овец всех опытных групп. Обращает внимание то, что выздоровление овец в группах 3 и 4 наступает быстрее, чем в группе 2, обработанной известным препаратом Ниацид, содержащим абамектин и не содержащим меланины.

Вместе с тем данные Таблицы 3 показывают динамику лимфоцитов в крови зараженных клещами подопытных овец. У овец, подвергшихся воздействию исследуемых препаратов, количество иммунокомпетентных клеток на начальном этапе терапии значительно снижается (р<0,05), но негативное действия препаратов нивелируется при введении в их состав меланинов на 25 и 30 сутки.

Таким образом, предлагаемый комплексный препарат оказывает стимулирующее действие на Т- и В-системы иммунитета, проявляет 100% эффект против эктопаразитов животных и исключает проблему иммуносупрессивных свойств авермектиновых субстанций, используемых в качестве ДВ антипаразитарных средств.

Пример 4. Антигельминтную эффективность нового препарата, содержащего в качестве активного начала гемисукцинат авермектина B_1a, оценивали на овцах, пораженных смешанными инвазиями. В качестве контроля использовали известный препарат Ивермек, который вводили в дозе 1 мл/50 кг (0,2 мг/кг по ДВ) массы тела. Заявляемый препарат, полученный по примерам 1 и 2, давали с кормом в дозе 14 мг/кг, т.е. 0,2 мг/кг по ДВ.

Эффективность дегельминтизации оценивали по результатам исследования образцов фекалий через 14 суток после применения препаратов. При этом выявляли количество выздоровевших животных, а терапевтический эффект оценивали по относительному числу полностью выздоровевших овец - экстенсэффективность (ЭЭ).

Данные, полученные при сравнительной оценке противопаразитарной активности препаратов, представлены в Таблице 4. Как видно из этих данных, эффективность препаратов высокая и находится в пределах 88,2-100%.

Существенной разницы по эффективности между препаратами не наблюдается и это свидетельствует о том, что заявляемый препарат по целевым требованиям не уступает известному аналогу.

Иммунобиологические показатели животных свидетельствуют о том, что заявляемое лекарственное средство, содержащее меланины и гемисукцинат авермектина В_1а, в значительно меньшей степени угнетает иммунную систему животных (Таблица 5).

Такие показатели иммунобиологического статуса организма подопытных животных, как содержание лизоцима, бактерицидная активность сыворотки крови (БАСК), содержание циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) и фагоцитарная активность компетентных клеток, достоверно отличаются в зависимости от применяемого противопаразитарного препарата.

Примечание: * - р<0,05 **-р<0,001 (Г.Ф. Лакин, 1990).

Содержание лизоцима в сыворотке крови животных, обработанных препаратом по примеру 2, на 17,67% выше, чем у животных, обработанных ивермеком, а бактерицидная активность сыворотки крови животных, обработанных препаратом по примеру 1, выше на 14,98%, чем у животных, обработанных ивермеком.

Следовательно, заявляемый препарат обладает как противопаразитарным, так и иммуностимулирующим действием при применении против смешанных инвазий овец, вызванных нематодами.

Пример 5. Противопаразитарная эффективность заявляемого препарата проверена на молодняке крупного рогатого скота. Путем исследования фекалий известным методом Фюллеборна в опыт отобрали 18 голов, инвазированных стронгилятами желудочно-кишечного тракта телят. Из отобранных животных сформировали 4 группы: 1 группа из 5 голов получала препарат, изготовленный по примеру 1; 2 группа из 5 голов получала препарат, изготовленный по примеру 2; 3 группа из 5 голов получала препарат Ивермек, а 4 группа из 3 голов служила контролем и не подвергалась обработке препаратами. Дозы и способ применения препаратов, как в примере 4. Терапевтическую эффективность препаратов оценивали путем подсчета числа яиц в фекалиях телят методом Фюллеборна через 14 суток после лечения.

Выявлено, что в фекалиях телят контрольной группы содержится 389-1167 яиц разных видов стронгилят. Животные 1, 2 и 3 групп полностью освободились от паразитов, т.е. 100% ЭЭ проявили все препараты.

Таким образом, представленные конкретные примеры реализации предложения свидетельствует о том, что технология получения заявляемого препарата относительно простая, а сам препарат обладает высокой противопаразитарной активностью и иммуностимулирующим действием на организм инвазированных животных.

Источники информации

1. Викторов В.А., Дриняев В.А. Развитие резистентности к авемектину // Ветеринария. - Москва, 2002. - №4. - С. 50-55).

2. ГОСТ 10832-2009 Песок и щебень перлитовые вспученные. Технические условия. - Москва, 2011. - 17 с.

3. Лакин Г.Ф. Биометрия. - М.: Высшая школа, 1990. - 350 с.

4. Патент RU 2155052, А61K 35/70, опубл. 27.08.2000.

5. Патент RU 2212891, А61Р 33/00, опубл. 27.09.2003.

6. Патент RU 2453553, С07Н 19/01, С07Н 17/08, опубл. 20.06.2012.

7. Топурия Л.Ю. Структурно-функциональная и клиническая оценка влияния иммуномодуляторов природного происхождения на организм животных: Автореф. дис.…док. биол. наук. - Оренбург, 2008. - 43 с.

8. ТУ №9169-001-35231285-13 Экстракт лузги гречихи «Мелавит» от 27.06.2013 г.

Изобретение относится к фармакологии и ветеринарии, в частности к области разработки ветеринарного средства в форме порошка для профилактики и лечения гельминтозов и арахно-энтомозов животных. Препарат содержит в качестве противопаразитарного начала гемисукцинат авермектина B_1a или гемисукцинат авермектина B_1a и абамектин. В качестве иммуномодулирующего вещества используют меланины растения гречихи, в качестве адсорбента - перлит, а жидкой основой для ДВ служат изопропиловый спирт, пропиленгликоль и дистиллированная вода. Ингредиенты препарата представлены при определенном соотношении компонентов, мас. %: вещества авермектинового ряда 1,25-1,75; меланины 0,6-1,2; изопропиловый спирт 35,0-45,0; пропиленгликоль 8,0-10,0; перлит 20,1-28,3 и дистиллированная вода до 100. Изобретение обеспечивает высокую терапевтическую эффективность при гельминтозах и арахно-энтомозах животных за счет создания препарата с удобной формой применения - порошка, а также включения в состав препарата меланинов гречихи, повышающих иммунный статус организма. 5 табл., 5 пр.

Противопаразитарный препарат с иммуномодулирующими свойствами, включающий вещества авермектинового ряда и вспомогательные компоненты, отличающийся тем, что дополнительно содержит иммунокорректор - меланины растения гречихи, при следующем соотношении компонентов, мас. %: гемисукцинат авермектина B_1a или гемисукцинат авермектина B_1a и абамектин в соотношении 1:1-1,25-1,75; меланины - 0,6-1,2; вспомогательные вещества - изопропиловый спирт - 35,0-45,0; пропиленгликоль - 8,0-10,0; перлит - 20,1-28,3, и дистиллированная вода до 100.