ГЕТЕРОАРОМАТИЧЕСКИЕ СОЕДИНЕНИЯ КАК МОДУЛЯТОРЫ ФОСФОИНОЗИТИД-3-КИНАЗЫ Российский патент 2018 года по МПК C07D471/04 C07D487/04 A61K31/444 A61K31/4545 A61K31/519 A61P35/00 

ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ

[001] Данная заявка испрашивает приоритет по предварительной заявке США серийный номер 61/767,721, поданной 21 февраля ноября 2013 года, которая включена в данное описание посредством ссылки во всей полноте.

ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[002] Настоящее изобретение, описанное здесь, относится к области протеинкиназ и их ингибиторов. В частности, настоящее изобретение относится к модуляторам сигнальных путей фосфатидилинозитол-3-киназы (англ., PI3 kinases или PI3Ks) и способам их применения.

ПРЕДПОСЫЛКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[003] Было обнаружено, что фосфоинозитид-3-киназы (фосфатидилинозитол-3-киназы), семейство липидных киназ, выполняет основную регуляторную роль во многих клеточных процессах, включая выживаемость клеток, пролиферацию и дифференцировку. В качестве основных эффекторов, находящихся ниже рецепторных тирозинкиназ (RTK) и сопряженных с G-белком рецепторов (GPCR,), фосфатидилинозитол-3-киназы преобразовывают сигналы различных факторов роста и цитокинов во внутриклеточный массаж, генерируя фосфолипиды, которые активируют серин-треониновую протеинкиназу АКТ (также известную как протеинкиназа В (РКВ)) и другие пути нижележащих эффекторов. Онкосупрессор или PTEN (гомолог фосфатазы и тензина) является самым важным негативным регулятором сигнального пути фосфатидилинозитол-3- киназы («Низкомолекулярные ингибиторы сигнальных путей РI3К». Медицинская химия будущего (Future Med. Chem.), 2011, 3, 5, 549-565).

[004] Путь фосфоинозитид-3-киназы (PI3K) является важным путем трансдукции сигнала, который обычно активируется при раке. Активированный PI3K-путь приводит к фосфорилированию фосфатидилинозит-4,5-бисфосфата (PIP2) для генерирования фосфатидилинозит-3,4,5-трифосфата (PIP3). PIP3 может дефосфорилироваться с помощью гомолога фосфатазы и тензина (PTEN), который прекращает передачу сигнала PI3K. Накопление PIP3 активирует сигнальный каскад, начиная с фосфорилирования (активации) белка серин-треонин киназы АКТ в треонин 308 с помощью фосфоинозитидно-зависимой киназы 1 (PDK1). Фосфолирированная АКТ активирует мишень рапамицина в клетках млекопитающих (mTOR), что приводит к фосфорилированию ее нижележащих мишеней.

[005] Существует три класса PI3K, отличающиеся по своей структуре и характеристикам. Класс I далее можно разделить на подкласс Ia и подкласс Iб. Фосфоинозитид-3-киназы класса II представляют собой крупные (170-210 кДа) белки, которые имеют каталитические домены, обеспечивающие кальцевое/липидное связывание в классических изоформах протеинкиназы С. Фосфоинозитид-3-киназы класса III являются типичными представителями дрожжевого белка, кодированного геном VPS34, и фосфорилируют только фосфатидилинозитол (PtdIns) до фосфатидилинозитол-3-фосфата (PtdIns(3)P), и считается, что они регулируют транспортировку пузырьков («Ориентация PI3K-сигнализации при раке: возможности, проблемы и ограничения». Нейчер Ревю Кансер, 2009, 9, 550 ("Targeting PI3K signaling in cancer: opportunities, challenges and limitations", Nature Review Cancer, 2009, 9, 550)).

[006] Подкласс PI3K Ia (PI3Kα, PI3Kβ PI3Kγ и PI3Kδ) содержит гетеродимеры, состоящие из каталитической субъединицы р110 (р110α, р110β, р110γ и p110δ соответственно) и регуляторной субъединицы-адаптера р85 (т.е. р85α, р85β, р55δ, р55α или р50α). Каталитическая субъединица р110 использует АТФ для фосфорилирования фосфатидилинозитола, фосфатидилинозитол-4-фосфата и фосфатидилинозитол-4,5-бифосфата. Роль подкласса PI3K Ia в заболевании раком подтвердилась, когда было открыто, что ген α-изоформы каталитической субъединицы PI3K (PIK3CA), который кодирует р110α, часто мутирует или усиливается в ряде опухолей человека, таких как рак яичников (Кэмпбелл и др. Исследование рака (Cancer Res) 2004, 64, 7678-7681; Левайн и др. Клинические исследование рака (Clin Cancer Res) 2005, 11, 2875-2878;. Вэнг и др. Человеческие мутации (Hum Mutat) 2005, 25, 322;. Ли и др. Гинекологическая онкология (Gynecol Oncol) 2005, 97, 26-34), рак шейки матки, рак груди (Бэчмен и др. Биологическая терапия рака (Cancer Biol Ther) 2004, 3, 772-775; Левайн и др., то же; Ли и др. Исследования в области терапии рака груди (Breast Cancer Res Treat) 2006, 96, 91-95; Саал и др. Исследование рака (Cancer Res) 2005, 65, 2554-2559; Сэмюэлс и Велкулеску, Цикл клетки (Cell Cycle) 2004, 3, 1221-1224), колоректальный рак (Сэмюэлс и др. Наука (Science) 2004, 304, 554; Велью и др. Европейский журнал рака (Eur J Cancer) 2005, 41, 1649-1654), рак эндометрия (Ода и др. Исследование рака (Cancer Res) 2005, 65, 10669-10673), желудочные карциномы (Бьюн и др. Медицинский журнал рака (М J Cancer) 2003, 104, 318-327; Ли и др., то же; Велью и др., то же; Ли и др., Онкоген (Oncogene) 2005, 24, 1477-1480), гепатоцеллюлярная карцинома (Ли и др., то же), мелкоклеточный и немелкоклеточный рак легких (Танг и др. Рак легких (Lung Cancer) 2006, J1, 181-191; Массион и др. Американский журнал респираторной медицины и реаниматологии (Am J Respir Crit Care Med) 2004, 170, 1088-1094), рак щитовидной железы (By и др. Журнал клинической эндокринологии и метаболизма (J Clin Endocrinol Metab) 2005, 90, 4688-4693), острый миелобластный лейкоз (ОМЛ) (Суджоберт и др. Кровь (Blood) 1997, 106, 1063-1066), хронический миелолейкоз (ХМЛ) (Хики и Коттер. Журнал биологической химии (J Biol Chem) 2006, 281, 2441-2450) и глиобластома (Хартманн и др. Неврологическая деятельность (Acta Neuropathol), Берлин 2005, 109, 639-642; Сэмуелс и др., то же).

[007] Мишень рапамицина в клетках млекопитающих (mTOR) является высоко консервативной серин-треонин киназой с липидно-киназной активностью и принимает участие в пути PI3K/АКТ как эффектор. mTOR существует в двух различных комплексах, mTORCl и mTORC₂, и играет важную роль в пролиферации клеток путем мониторинга уровней доступности питательных веществ и клеточной энергии. Нижележащие мишени mTORC1 представляют собой киназу 1 рибосомного белка S6 и эукариотический фактор инициации трансляции 4Е-связывающего белка 1, оба из которых имеют решающее значение для регуляции синтеза белка. («Настоящее и будущее торможения пути PI3K при раке: Перспективы и ограничения». Современная медицинская химия 2011, 18, 647-2685. (Present and future of PI3K pathway inhibition in cancer: perspectives and limitations. Current Med. Chem. 2011, 18, 2647-2685).

[008] Информацию о последствиях нарушения регуляции сигнализации mTOR для канцерогенеза получают в основном из исследований фармакологических нарушений mTOR с помощью рапамицина и его аналогов, таких как Темсиролимус (CCI-779) и Эверолимус (RAD001). Рапамицин был изобретен для ингибирования mTOR, чтобы тем самым стимулировать остановку G1 и апоптоз. Было установлено, что механизм ингибирования роста рапамицином связан с образованием комплексов рапамицина с FK-связывающим белком 12 (FKBP-12). Эти комплексы затем связываются с высокой степенью сродства с mTOR, предотвращая активацию и приводя к ингибированию трансляции белка и роста клеток. Клеточное влияние торможения mTOR еще более выражено в клетках, которые имеют сопутствующую инактивацию PTEN. Впоследствии была выявлена противоопухолевая активность рапамицина, и некоторые его аналоги, например, Темсиролимус и Эверолимус, были одобрены Администрацией США по пищевым продуктам и лекарственным веществам для лечения некоторых видов рака.

[009] В связи с важной ролью PI3K и mTOR в биологических процессах и при болезненных состояниях, ингибиторы этих киназ являются желательными («Изоформы фосфатидилинозит-3-киназы как мишени для разработки новых лекарственных препаратов». Мишени современных лекарственных препаратов (Current Drug Targets), 2011, 12, 1056-1081; «Прогресс в доклиническом открытии и клиническом развитии класса I и двойного класса I/IV ингибиторов фосфоинозитид-3-киназы (PI3K)». Современная медицинская химия (Current Med Chem), 2011, 18, 2686-2714).

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[010] Ниже приведены только некоторые аспекты изобретения, которые не несут ограничительные данные. Эти и другие аспекты, а также варианты осуществления описаны более подробно ниже. Все источники, приведенные в данном описании, включены в него посредством ссылки во всей полноте. В случае несоответствия между кратким описанием данной спецификации и источниками, включенными посредством ссылки, краткое описание настоящей спецификации имеет преимущество.

[011] В настоящем описании представлены соединения, которые ингибируют, регулируют и/или модулируют PI3K и/или mTOR, и полезны при лечении гиперпролиферативных заболеваний у человека, таких как рак. Также в настоящем документе предложены способы получения соединений, способы применения таких соединений в лечении гиперпролиферативных заболеваний у человека и фармацевтические композиции, содержащие такие соединения.

[012] Первый аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I):

или его стереоизомеру, геометрическому изомеру, таутомеру, оксиду азота, сольвату, метаболиту, фармацевтической соли или его пролекарственную форму, где каждый из Y, R¹, Z, W₁, W₂ и W3 соответствует тому, что указанному в данном описании.

[013] В некоторых вариантах осуществления каждый из W₁, W₂ и W₃ независимо обозначает N или CR^c;

Z является D, CN, N³ или ;

X представляет собой Н, D, (С₁-С₆)алкил, (С₃-С₆)циклоалкил, (С₃-С₆)гетероциклил, -(С₁-С₄)алкилен-(С₃-С₆)циклоалкил, -(С₁-С₄)алкилен-(С₃-С₆)гетероциклил, (С₆-С₁₀)арил или 5-10-членный гетероарил, содержащий 1, 2, 3 или 4 гетероатома, независимо выбранных из О, S и N, где каждый (С₁-С₆)алкил, (С₃-С₆)циклоалкил, (С₃-С₆)гетероциклил, -(С₁-С₄)алкилен-(С₃-С₆)циклоалкил, -(С₁-С₄)алкилен-(С₃-С₆)гетероциклил, (С₆-С₁₀)арил и 5-10-членный гетероарил необязательно замещены 1, 2, 3 или 4 заместителями, независимо выбранными из D, F, Cl, Br, CN, N₃, OR^a, SR^a, NR^aR^b, -C(=O)NR^aR^b, (С₁-С₆)алкила, (С₁-С₆)галогеналкила, (С₂-С₆)алкенила, (С₂-С₆)алкинила, -(С₁-С₄)алкилен-СМ, -(C_l-C₄)алкилен-OR^a, -(С₁-С₄)алкилен- NR^aR^b, (С₆-С₁₀)арила и 5-10-членного гетероарила;

Y представляет собой (С₁-С₆)алкил, (С₃-С₆)циклоалкил, (С₃-С₆)гетероциклил, -(С₁-С₄)алкилен-(С₃-С₆)циклоалкил, -(С₁-С₄)алкилен-(С₃-С₆)гетероциклил, (С₂-С₆)алкенил, (С₂-С₆)алкинил, (С₆-С₁₀)арил и 5-10-членный гетероарил, содержащий 1, 2, 3 или 4 гетероатома, независимо выбранных из О, S и N, где каждый (С₁-С₆)алкил, (С₃-С₆)циклоалкил, (С₃-С₆)гетероциклил, -С₁-С₄алкилен-(С₃-С₆)циклоалкил, -С₁-С₄алкилен-(С₃-С₆)гетероциклил, (С₂-С₆)алкенил, (С₂-С₆)алкинил, (С₆-С₁₀)арил и 5-10-членный гетероарил, необязательно замещены 1, 2, 3 или 4 заместителями, независимо выбранными из D, F, Cl, Br, CN, N₃, OR^a, SR^a, NR^aR^b, -C(=O)NR^aR^b, (С₁-С₆)алкила, (С₁-С₆)галогеналкила, (С₂-С₆)алкенила, (С₂-С₆)алкинила, -С₁-С₄алкилен-CN, -(C_l-C₄)алкилен-OR^a, -С₁-С₄алкилен-NR^aR^b, (С₆-С₁₀)арила и 5-10-членного гетероарила;

R1 представляет собой Н, D, Cl, OR^a, NR^aR^b, (С₁-С₆)алифатический или (С₃-С₆)циклоалкил, где каждый (С₁-С₆)алифатический или (С₃-С₆)циклоалкил необязательно замещены 1, 2, 3 или 4 заместителями, независимо выбранными из D, F, Cl, CN, N₃, OR^a, SR^a и NR^aR^b;

каждый R^a и R^b независимо обозначает Н, (С₁-С₆)алкил, (С₃-С₆)циклоалкил, (С₃-С₆)гетероциклил, (С₆-С₁₀)арил, 5-10-членный гетероарил, содержащий 1, 2, 3 или 4 гетероатома независимо выбранных из О, S и N, -(С₁-С₄)алкилен-(С₆-С₁₀)арила или -С₁-С₄алкилен-(5-10-членный гетероарил); или, если R^a и R^b присоединены к одному и тому же атому азота, R^a и R^b вместе с атомом азота, к которому они присоединены, необязательно образуют замещенное или незамещенное 3-8-членное гетероциклическое кольцо, в котором каждый из упомянутых выше заместителей необязательно замещен 1, 2, 3 или 4 заместителями, независимо выбранными из D, F, Cl, CN, N₃, ОН, NH₂, (С₁-С₆)алкокси и (С₁-С₆)алкиламино; и

каждый Rc независимо обозначает Н, D, F, Cl, Br, I, N₃, CN, ОН, NH₂, (С₁-С₆)алкил, (С₁-С₆)алкокси, (С₁-С₆)алкиламино, (С₃-С₆)циклоалкил, (С₃-С₆)гетероциклил, (С₆-С₁₀)арил или 5-10-членный гетероарил, содержащий 1, 2, 3 или 4 гетероатома, независимо выбранных из О, S и N, где каждый (C₁-С₆)алкил, (С₁-С₆)алкокси, (С₁-С₆)алкиламино, (С₃-С₆)циклоалкил, (С₃-С₆)гетероциклил, (С₆-С₁₀)арил или 5-10-членный гетероарил необязательно замещен 1, 2, 3 или 4 заместителями, независимо выбранными из D, F, Сl1, CN, N₃, ОН, NH₂, (С₁-С₆)алкила, (С₃-С₆)циклоалкила, (С₁-С₆)галогеналкила, (С₁-С₆)алкокси и (С₁-С₆)алкиламино.

[014] В другом варианте осуществления W₁ обозначает N или CR^c; а каждый W₂ и W₃ независимо представляет собой CR^c.

[015] В другом варианте осуществления Z представляет собой CN, N₃, или .

[016] В другом варианте осуществления X представляет собой Н, D, (С₁-С₆)алкил, (С₃-С₆)циклоалкил, (С₃-С₆)гетероциклил, -(С₁-С₄)алкилен-(С₃-С₆)циклоалкил или -С₁-С₄алкилен-(С₃-С₆)гетероциклил, где каждый (С₁-С₆)алкил, (С₃-С₆)циклоалкил, (С₃-С₆)гетероциклил, -(С₁-С₄)алкилен-(С₃-С₆)циклоалкил и -С₁-С₄алкилен-(С₃-С₆)гетероциклил необязательно замещен 1, 2, 3 или 4 заместителями, независимо выбранными из D, F, Cl, Br, CN, N₃, OR^a, SR^a, NR^aR^b, -C(=O)NR^aR^b, (С₁-С₃)алкила, (C₁-С₃)галогеналкила, (С₂-С₄)алкенила и (С₂-С₄)алкинила.

[017] В другом варианте осуществления Y представляет собой (С₁-С₆)алкил, (С₃-С₆)циклоалкил, (С₂-С₆)алкенил, (С₂-С₆)алкинил, (С₆-С₁₀)арил или 5-10-членный гетероарил, содержащий 1, 2, 3 или 4 гетероатома, независимо выбранных из О, S и N, где каждый (С₁-С₆)алкил, (С₃-С₆)циклоалкил, (С₂-С₆)алкенил, (С₂-С₆)алкинил, (С₆-С₁₀)арил или 5-10-членный гетероарил необязательно замещен 1, 2, 3 или 4 заместителями, независимо выбранными из D, F, Cl, Br, CN, N₃, OR^a, SR^a, NR^aR^b, -C(=O)NR^aR^b, (С₁-С₃)алкила, (C₁-С₃)галогеналкила, (С₂-С₄)алкинила, (С₆-С₁₀)арила или 5-10-членного гетероарила.

[018] В другом варианте осуществления R¹ представляет собой Н, D, Cl, СН₃, СН₂СН₃, CF₃, CH₂CF₃, ОСН₃, или ОСН₂СН₃.

[019] В другом варианте осуществления каждый R^c независимо обозначает Н, D, F, Cl, N³, CN, NH2, (С₁-С₃)алкил, (С₁-С₃)алкокси, (С₁-С₃)алкиламино, (С₃-С₆)циклоалкил или (С₃-С₆)гетероциклил, где каждый (С₁-С₃)алкил, (С₁-С₃)алкокси, (С₁-С₃)алкиламино, (С₃-С₆)циклоалкил или (С₃-С₆)гетероциклил необязательно замещен 1,2,3 или 4 заместителями, независимо выбранными из D, F, CN, N₃, ОН, NH₂, (С₁-С₃)алкила, (С₃-С₆)циклоалкила и (С₁-С₃)галогеналкила.

[020] В другом аспекте, представленном в настоящем описании, приводятся фармацевтические композиции, содержащие соединение, описанное в настоящем описании, или его стереоизомер, геометрический изомер, таутомер, сольват, метаболит, фармацевтически приемлемую соль или пролекарственную форму и необязательный фармацевтически приемлемый носитель, наполнитель, разбавитель, вспомогательное вещество, основа или их комбинации. В некоторых вариантах осуществления соединение представляет собой модулятор PI3K.

[021] В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция, раскрываемая далее в настоящем описании, содержит дополнительный терапевтический агент. В других вариантах осуществления терапевтический агент является химиотерапевтическим агентом, антипролиферативным средством, средством для лечения атеросклероза, средством для лечения фиброза легких или их комбинацией.

[022] В некоторых вариантах осуществления дополнительный терапевтический агент представляет собой хлорамбуцил, мелфалан, циклофосфамид, ифосфамид, бусульфан, кармустин, ломустин, стрептозоцин, цисплатин, карбоплатин, оксалиплатин, дакарбазин, темозоломид, прокарбазин, метотрексат, фторурацил, цитарабин, гемцитабин, меркаптопурин, флударабин, винбластин, винкристин, винорелбин, паклитаксел, доцетаксел, топотекан, иринотекан, этопозид, трабектедин, дактиномицин, доксорубицин, эпирубицин, даунорубицин, митоксантрон, блеомицин, митомицин, иксабепилон, тамоксифен, флутамид, аналоги гонадорелина, мегестрол, преднидон, дексаметазон, метилпреднизолон, талидомид, интерферон альфа, лейковорин, сиролимус, темсиролимус, эверолимус, афатиниб, алисертиб, амуватиниб, апатиниб, акситиниб, бортезомиб, босутиниб, бриваниб, кабозантиниб, седираниб, креноланиб, кризотиниб, дабрафениб, дакомитиниб, данусертиб, дазатиниб, довитиниб, эрлотиниб, форетиниб, ганетеспиб, гефитиниб, ибрутиниб, икотиниб, иматиниб, инипариб, лапатиниб, ленватиниб, линифаниб, линситиниб, маситиниб, момелотиниб, мотезаниб, нератиниб, нилотиниб, нирапариб, опрозомиб, олапариб, пазопаниб, пиктилисиб, понатиниб, квизартиниб, регорафениб, ригосертиб, рукапариб, руксолитиниб, саракатиниб, саридегиб, сорафениб, сунитиниб, тасоцитиниб, телатиниб, тивантиниб, тивозаниб, тофацитиниб, траметиниб, вандетаниб, велипариб, вемурафениб, висмодегиб, воласертиб, алемтузумаб, бевацизумаб, брентуксимаб ведотин, катумаксомаб, цетуксимаб, деносумаб, гемтузумаб, ипилимумаб, нимотузумаб, офатумумаб, панитумумаб, рамуцирумаб, ритуксимаб, тозитумомаб, трастузумаб или их комбинации.

[023] В другом аспекте, представленном в настоящем описании, приводятся способы предотвращения, контроля, лечения или уменьшения тяжести пролиферативного нарушения у пациента, имеющего пролиферативное расстройство, которые включают прием пациентом фармацевтически эффективного количества соединения или фармацевтической композиции, раскрываемых в настоящем описании.

[024] В другом аспекте, представленном в настоящем описании, приводится применение описанного здесь соединения или фармацевтической композиции в производстве лекарственного средства, предназначенного для профилактики, контроля, лечения или ослабления тяжести пролиферативного нарушения у пациента.

[025] В некоторых вариантах осуществления, представленных в настоящем описании, пролиферативное расстройство является метастатическим раком. В других вариантах осуществления, пролиферативное расстройство представляет собой рак толстой кишки, аденокарциному желудка, рак мочевого пузыря, рак молочной железы, рак почки, рак печени, рак легких, рак кожи, рак щитовидной железы, рак головы и шеи, рак предстательной железы, рак поджелудочной железы, рак ЦНС, глиобластому или миелопролиферативное расстройство. В других вариантах осуществления нарушение пролиферации является атеросклерозом или фиброзом легких.

[026] В другом аспекте, представленном в настоящем описании, приводится способ ингибирования или модуляции PI3K и/или активности mTOR в биологическом образце, включающий контактирование биологического образца с соединением, раскрываемом в данном описании, или фармацевтической композицией, описанной здесь.

[027] В некоторых вариантах осуществления, представленных в настоящем описании, приводится способ ингибирования или модуляции PI3K или mTOR, причем способ включает контактирование киназы с соединением или с композицией в соответствии с настоящим изобретением. В некоторых вариантах осуществления данное изобретение представляет собой способ ингибирования или модуляции PI3K или mTOR сигналов, причем способ включает контактирование рецептора с соединением или с композицией в соответствии с настоящим изобретением. В некоторых вариантах осуществления ингибирование или модуляция активности PI3K или mTOR может проходить в клетке или многоклеточном организме. В отношении многоклеточного организма способ в соответствии с данным аспектом настоящего изобретения включает в себя введение в организм соединения или композиции согласно настоящему изобретению. В некоторых вариантах осуществления организм представляет собой млекопитающее. В других вариантах осуществления он представляет собой человека. Еще в другом варианте осуществления способ дополнительно включает контактирование киназы с дополнительным терапевтическим агентом.

[028] В другом аспекте, представленном в настоящем описании, приводится способ ингибирования пролиферативной активности клетки, причем способ включает контактирование клетки с эффективным для пролиферативного ингибирования количеством соединения, описанном в настоящем изобретении, или его композиции. В некоторых вариантах осуществления способ дополнительно включает контактирование клетки с дополнительным терапевтическим агентом.

[029] В другом аспекте, представленном в настоящем описании, приводится способ лечения клеточных пролиферативных заболеваний у пациента, причем способ включает введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, эффективного терапевтического количества соединения или его композиции в соответствии с настоящим изобретением. В некоторых вариантах осуществления способ также включает введение дополнительного терапевтического агента.

[030] В некоторых вариантах осуществления, представленных в настоящем описании, приводится способ ингибирования роста опухоли у пациента, причем способ включает введение нуждающемуся в этом пациенту эффективного терапевтического количества соединения или его композиции в соответствии с настоящим изобретением. В некоторых вариантах осуществления способ также включает введение дополнительного терапевтического агента.

[031] В другом аспекте, представленном в настоящем описании, приводятся методы получения, разделения и очистки соединений формулы (I).

[032] Вышеприведенные варианты осуществления просто суммируют некоторые аспекты изобретения и не имеют ограничительный характер. Данные аспекты и другие аспекты и варианты осуществления описаны более подробно ниже.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

ОПРЕДЕЛЕНИЯ И ОБЩИЕ ТЕРМИНЫ

[033] Далее приводится подробная ссылка на некоторые варианты осуществления изобретения, примеры которых проиллюстрированы в прилагаемых рисунках структур и формулах. Изобретение охватывает все альтернативы, модификации и эквиваленты, которые могут быть включены в область настоящего изобретения, в соответствии с формулой изобретения. Для специалистов в данной области техники будут очевидны многочисленные способы и материалы, подобные или эквивалентные описанным здесь, которые можно использовать в практике настоящего изобретения. Настоящее изобретение никоим образом не ограничивается способами и материалами, описанными в настоящей заявке. В случае, если один или более из включенных документов, патентов и аналогичных материалов отличается или противоречит настоящей заявке, включая, но не ограничиваясь, определенные термины, использование терминов, описанные способы или т.п., настоящая заявка имеет приоритет.

[034] Далее следует понимать, что отдельные характеристики изобретения, которые для облегчения понимания описаны в контексте отдельных вариантов воплощения, также могут быть представлены совместно в одном варианте воплощения. И наоборот, различные характеристики изобретения, которые для краткости описаны в контексте одного варианта воплощения, также могут быть представлены по отдельности или в любой иной приемлемой подкомбинации.

[035] Если не указано иное, все технические и научные термины, используемые в настоящем описании, имеют то же самое значение, что и понимается обычно специалистами в области, к которой данное изобретение принадлежит. Все патенты и публикации, упомянутые в настоящей заявке, включены в качестве ссылок.

[036] В данном описании, применяются следующие определения, если иное не указано. Для целей настоящего изобретения химические элементы идентифицируются в соответствии с периодической таблицей элементов, версия CAS, и Справочником по химии и физике, 75-е изд. 1994 Кроме того, общие принципы органической химии описаны в «Органической химии» Сорелл и другие, Изд.: Юнивесити Сайенс Бук, Саусалито: 1999, и «Передовая органическая химия Марча» Смит и другие, Изд.: Джон Вили энд Соне, Нью-Йорк: 2007, все из которых включены сюда посредством ссылки.

[037] В данной спецификации и формуле изобретения артикли "a," "an," "the" и подобные слова, используемые в контексте настоящего изобретения, следует толковать как охватывающее понятия и в единственном, и во множественном числе, если иное не указано в настоящем описании или явно не противоречит контексту. Таким образом артикли используются в настоящем описании для указания одного или более одного (т.е. как минимум одного) грамматических объектов артикля. Например, термин "компонент" означает один или более компонентов, тем самым допуская, что количество компонентов, рассматриваемых, задействуемых или используемых в реализации описываемых вариантов воплощения, может быть более одного.

[038] В настоящем описании термин "субъект" относится к животным. Как правило, под животным понимают млекопитающее. Субъект также относится, например, к приматам (напр., людям мужского и женского пола), коровам, овцам, козам, лошадям, собакам, котам, кроликам, крысам, мышам, рыбам, птицам и другим. В некоторых воплощениях в качестве субъектов выступают приматы. В отдельных воплощениях в качестве субъектов выступают люди.

[039] В настоящем описании термин «пациент» относится к человеку (в том числе взрослым и детям) или различным животным. В еще другом варианте осуществления «пациент» означает человека.

[040] Термин «Состоящий» не является исчерпывающим, т.е. включает в себя указанный компонент, но не исключает другие элементы.

[041] Термин «Стереоизомеры» относится к соединениям, имеющим идентичный химический состав, но отличающимся друг от друга по расположению атомов или групп в пространстве. Стереоизомеры включают энантиомеры, диастереомеры, конформеры (ротамеры), геометрические (цис/транс) изомер, атропизомеры и др.

[042] Термин «Хиральный» относится к молекулам, которые обладают свойством несовмещения с зеркальным отражением партнера в то время, как термин "Архиральный" относится к молекулам, совмещенным с зеркальными отражениями партнера.

[043] Термин «Энантиомеры» относится к двум стереоизомерам соединения, которые не являются совмещаемыми зеркальными отражениями друг друга.

[044] Термин «Диастеромер» относится к стереоизомеру с двумя или более центрами хиральности, молекулы которого не являются зеркальными отражениями друг друга. Диастеромеры обладают различными физическими свойствами, например, имеют разные температуры плавления, температуры кипения, спектральные свойства и биологические активности. Смесь диастеромеров может быть отделена при проведении аналитических процедур с высокой разрешающей способностью, например, электрофореза или хромотографии как ВЭЖХ.

[045] Стереохимические определения и условные обозначения, которые используется в настоящем описании, как правило, взяты из С.П. Паркер, изд., Словарь химических терминов МакГроу-Хилл (1984) Макгроу-Хилл Компани, Нью-Йорк; и Елиил Е. и Вилен С, «Стереохимия органических соединений», Джон Вили энд Соне, Инк., Нью-Йорк, 1994.

[046] Многие органические соединения существуют в оптически активных формах, т.е. они обладают способностью вращать плоскость плоскополяризованного света. При описании оптически активного соединения префиксы D и L, или R и S, используются для обозначения абсолютной конфигурации молекулы относительно ее хирального центра(-ов). Префиксы D и L или (+) и (-) используются для обозначения знака вращения плоскости поляризованного света соединением, причем (-) или L означает, что соединение является левовращающим. Соединение с префиксом (+) или D является правовращающим. Зеркальный стереоизомер может также называться энантиомером, а смесь таких изомеров часто называют энантиомерной смесью. Смесь энантиомеров 50:50 называют рацемической смесью или рацематом, который может образовываться в результате химической реакции или процесса при отсутствии стереоселективности или стереоспецифичности.

[047] Любой асимметричный атом (например, углерод и т.п.) соединения (-ий) настоящего изобретения может присутствовать в рацемической или энантиомерно-обогащенной конфигурации, например, в конфигурациях (R)-, (S)- или (R,S)-. В некоторых вариантах осуществления, каждый асимметрический атом имеет энантиомерный избыток, по крайней мере, 50%, по крайней мере, 60%, по крайней мере, 70%, по крайней мере, 80%, по крайней мере, 90%, по крайней мере, 95% или, по крайней мере, 99% при (R)-или (S)-конфигурации.

[048] В зависимости от выбора исходных материалов и процедур, соединения могут присутствовать в форме одного из возможных изомеров или в виде их смесей, например, рацематы и диастереоизомерные смеси, в зависимости от числа асимметричных атомов углерода. Оптически активные (R)- и (S)- изомеры могут быть получены с использованием хиральных синтонов или хиральных реагентов, или расщеплены с помощью традиционных методик. Если соединение содержит двойную связь, заместителем может быть Е или Z конфигурация. Если соединение содержит дизамещенный циклоалкил, циклоалкильный заместитель может иметь цис-или транс-конфигурацию.

[049] Все полученные смеси изомеров можно разделить на основе физико-химических различий их компонентов на чистые или практически чистые геометрические или оптические изомеры, энантиомеры, диастереомеры, например, с помощью хроматографии и/или фракционной кристаллизации.

[050] Любые полученные рацематы конечных продуктов или промежуточных соединений можно разделить на оптические антиподы с помощью методов, известных специалистам в данной области, например, путем разделения диастереомерных солей. Рацемические продукты также могут быть расщеплены с помощью хиральной хроматографии, например, высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием хирального адсорбента. Необходимые энантиомеры также могут быть получены путем асимметрического синтеза. См., например, Жак и др. Энантиомеры, рацематы и расщепление (Вили Интерсайенс, Нью-Йорк, 1981); Принципы асимметрического синтеза (2-е изд. Роберт Е. Гоули, Джеффри Об. Эльсевиер, Оксфорд, Великобритания, 2012.); Елиел Е.Л. Стереохимия соединений углерода (Макгроу-Хилл, Нью-Йорк, 1962); и Вилен С.Х. Таблицы разделяющих агентов и оптическое расщепление. С.268 (Е.Л. Елиел, ред. Ун-та «Нотр-Дам Пресс», Нотр-Дам, Индиана, США, 1972 г.), Субраманиан Технологии хирального расщепления: Практический подход, издательство Вили-Ви-Си-Эйч Ферлаг Гмбх энд Ко, Вайнхайм, Германия 2007.

[051] Термин «таутомер» или «таутомерная форма» относится к структурным изомерам с разной энергией, которые являются равноценными благодаря низкому энергетическому барьеру. Там, где таутомеризация возможна (например, в растворе), может быть достигнуто химическое равновесие таутомеров. Например, протонные таутомеры (также известные как прототропные таутомеры) включают взаимопревращения посредством миграции протона, например, кето-енольной и имин-енаминовой изомеризации. Валентные таутомеры включают взаимопревращения посредством реорганизации некоторых связывающих электронов. Конкретным примером кето-енольной таутомеризации является взаимопревращение таутомеров пентан-2,4-диона и 4-гидроксипент-3-ен-2-он. Другим примером таутомеризации является фенол-кето таутомеризация. Конкретным примером фенол-кето таутомеризации является взаимопревращение таутомеров пиридин-4-ол и пиридин-4(1H)-он. Если не указано иное, все таутомерные формы описанных в настоящей заявке соединений находятся в пределах области настоящего изобретения.

[052] Согласно настоящей заявке, соединения, описанные здесь, необязательно должны быть замещены одним или несколькими заместителями, такими как заместители, представленные ниже или представленные на примере конкретных классов, подклассов и видов изобретения. Следует иметь в виду, что фраза «необязательно замещен» взаимозаменяема фразой «замещен или незамещен». В основном, термин «замещенный», независимо от того дополнен он термином «необязательно» или нет, относится к замене одного или нескольких водородных радикалов в данной структуре радикалом конкретного заместителя. Термин «необязательный» или «необязательно» означает, что описанное далее событие или обстоятельство может, но не обязательно должно произойти, и что описание включает случаи, когда событие или обстоятельство имеет место, и случаи, в которых оно не имеет места. Если не указано иное, необязательно замещенная группа может иметь заместитель в каждом замещаемом положении группы. Если более чем одно положение в данной структуре может быть замещено более чем одним заместителем, выбранным из указанной группы, заместитель может быть или одинаковым или отличаться в каждом положении.

[053] В разных пунктах настоящей спецификации заместители соединений, описанные здесь, раскрываются в группах или рядах. Специально предполагается, что изобретение включает каждую и все отдельные подкомбинации членов таких групп или рядов. Например, термин «C₁-С₆ алкил» специально предназначен для отдельного раскрытия метила, этила, С₃ алкила, С₄ алкила, С₅ алкила и С₆ алкила.

[054] В разных пунктах настоящей спецификации описаны связующие заместители. В случае, когда в структуре четко востребована связующая группа, под связующими группами необходимо понимать переменные Маркуша, указанные для данной группы. Например, если для структуры необходима связующая группа и в определении групп Маркуша для данной переменной указано «алкил» или «арил», это означает что «алкил» или «арил» представляет собой связующую алкиленовую группу или ариленовую группу соответственно.

[055] Термин «алкил» или «алкильная группа», используемый в настоящем описании, означает насыщенную линейную или разветвленную цепь одновалентного углеводородного радикала, содержащую от 1 до 20 атомов углерода. Если не указано иное, алкильные группы содержат 1-20 атомов углерода. В некоторых вариантах осуществления алкильные группы содержат 1-10 атомов углерода. В других вариантах осуществления алкильные группы содержат 1-8 атомов углерода. В других вариантах осуществления алкильные группы содержат 1-6 атомов углерода. В других вариантах осуществления алкильные группы содержат 1-4 атомов углерода и в других вариантах алкильные группы содержат 1-3 атомов углерода.

[056] Примеры алкильных групп включают, но не ограничиваются ими, метил (Ме,-СН₃), этил (Et, -СН₂СН₃), 1-пропил (n-Pr, н-пропил, -СН₂СН₂СН₃), 2- пропил (i-Pr, изопропил, -СН(СН₃)₂), 1-бутил (n-Bu, н-бутил, СН₂СН₂СН₂СН₃), 2-метил-1-пропил (i-Bu, изо-бутил, -СН₂СН(СН₃)₂), 2-бутил (s-Bu, втор-бутил, -СН(СН₃)СН₂СН₃), 2-метил-2-пропил (t-Bu, трет-бутил, -С(СН₃)₃), 1-пентил (н-пентил, -СН₂СН₂СН₂СН₂СН₃), 2-пентил (-СН(СН₃)СН₂СН₂СН₃), 3-пентил (-СН(СН₂СН₃)₂), 2-метил-2-бутил (-С(СН₃)2СН₂СН₃), 3-метил-2-бутил (-СН(СН₃)СН(СН₃)₂), 3-метил-1-бутил (-СН₂СН₂СН(СН₃)₂), 2-метил-1-бутил (-СН₂СН(СН₃)СН₂СН₃), 1-гексил (-СН₂СН₂СН₂СН₂СН₂СН₃), 2-гексил (-СН(СН₃)СН₂СН₂СН₂СН₃), 3-гексил (-СН(СН₂СН₃)(СН₂СН₂СН₃)), 2-метил-2-пентил (-С(СН₃)₂СН₂СН₂СН₃), 3-метил-2-пентил(-СН(СН₃)СН(СН₃)СН₂СН₃), 4-метил-2-пентил(-СН(СН₃)СН₂СН(СН₃)₂), 3-метил-3-пентил(-С(СН₃)(СН₂СН₃)₂), 2-метил-3-пентил (-СН(СН₂СН₃)СН(СН₃)₂), 2,3-диметил-2-бутил (-С(СН₃)₂СН(СН₃)₂), 3,3-диметил-2-бутил (-СН(СН₃)С(СН₃)₃, 1-гептил, 1-октил и т.д. Алкильные радикалы, представленные в настоящем описании, необязательно замещены одним или несколькими заместителями, описанными здесь, независимо друг от друга.

[057] Префикс «алк-», используемый в настоящем описании, включают вещества как к с линейной цепью, так и насыщенные алкилы с разветвленной цепью углеродных атомов.

[058] Термин «алкилен», используемый в настоящем описании, означает насыщенную двухвалентную углеводородную группу, полученную из линейного или разветвленного насыщенного углеводорода путем удаления двух атомов водорода. Если не указано иное, алкиленовые группы содержат 1-10 атомов углерода. В некоторых вариантах осуществления алкиленовые группы содержат 1-6 атомов углерода. В других вариантах алкиленовые группы содержат 1-4 атомов углерода. Также в других вариантах осуществления алкиленовые группы содержат 1-3 атомов углерода, и в других вариантах осуществления алкиленовые группы содержат 1-2 атома углерода. В качестве неограничивающих примеров алкиленовой группы можно привести метилен (-СН₂-), этилен (-СН₂СН₂-), изопропилен (-СН(СН₃) СН₂-) и т.д.

[059] Термин «алкенил» означает одновалентный углеводородный радикал с линейной или разветвленной цепью, содержащий от 2 до 12 атомов углерода и, по меньшей мере, одну ненасыщенную, т.е. углерод-углеродную, двойную связь, в которой алкенильный радикал необязательно независимо замещен одним или более заместителями, описанными в настоящей заявке, и включает радикалы, имеющие «цис-» и «транс-» ориентацию, или же «Е-» и «Z-» ориентацию. В некоторых вариантах осуществления алкениловая группа содержит 2-8 атомов углерода. В других вариантах осуществления алкениловая группа содержит 2-6 атомов углерода. Также в других вариантах осуществления алкениловая группа содержит 2-4 атомов углерода. В качестве неограничивающих примеров можно привести этиленил или винил (-СН=СН₂), аллил (-СН₂СН=СН₂) и т.д.

[060] Термин «алкинил» означает одновалентный углеводородный радикал с линейной или разветвленной цепью, содержащий от 2 до 12 атомов углерода и, по крайней мере, одну ненасыщенную, т.е. углерод-углеродную, тройную связь, в которой алкинильный радикал необязательно независимо замещен одним или несколькими заместителями, описанными здесь. В некоторых вариантах осуществления алкинильная группа содержит 2-8 атомов углерода. В других вариантах осуществления алкинильная группа содержит 2-6 атомов углерода. Также в других вариантах осуществления алкинильная группа содержит 2-4 атомов углерода. В качестве неограничивающих примеров алкинильной группы можно привести этинил (-С≡СН), пропинил (пропаргил, -СН₂С≡СН), -С≡С-СН₃ и т.д.

[061] Термин «алифатический» или «алифатическая группа», используемый в настоящем описании, означает линейную (т.е. неразветвленную) или разветвленную, замещенную или незамещенную углеводородную цепь, которая полностью насыщена или которая содержит одно или несколько ненасыщенных звеньев. Если не указано иное, алифатические группы содержат 1-20 атомов углерода. В некоторых вариантах осуществления алифатические группы содержат 1-10 атомов углерода. В других вариантах осуществления алифатические группы содержат 1-8 атомов углерода. Еще в других вариантах осуществления алифатические группы содержат 1-6 атомов углерода. В некоторых других вариантах осуществления алифатические группы содержат 1-4 атомов углерода. Также в некоторых вариантах осуществления алифатические группы содержат 1-3 атома углерода, а еще в некоторых содержат 1-2 атома углерода. Неограничивающие примеры алифатической группы включают линейные или разветвленные, замещенные или незамещенные алкильные, алкенильные или алкинильные группы. Например, (С₁-С₆)-алифатические группы включают неразветвленные или разветвленные, незамещенные или соответствующим образом замещенные (С₁-С₆)-алкильные, (С₂-С₆)-алкенильные или (С₂-С₆)-алкинильные группы.

Алифатические группы в данном описании необязательно независимо замещены одним или несколькими заместителями, описанными здесь.

[062] Термин «алкокси», используемый в настоящем описании, означает алкильную группу, определенную ранее, присоединенную к основному атому углерода через атом кислорода. Если не указано иное, алкокси-группы содержат 1-20 атомов углерода. В некоторых вариантах осуществления алкокси-группы содержат 1-10 атомов углерода. В других вариантах осуществления алкокси-группы содержат 1-8 атомов углерода. В некоторых других вариантах осуществления алкокси-группы содержат 1-6 атомов углерода. В некоторых других вариантах осуществления алкокси-группы содержат 1-4 атомов углерода, и еще в других вариантах алкокси-группы содержат 1-3 атома углерода.

[063] Примеры алкокси-групп включают, но не ограничиваются ими, метокси (МеО, -ОСН₃), этокси (EtO, -ОСН₂СН₃), 1-пропокси (n-Pro, н-пропокси, -ОСН₂СН₂СН₃), 2-пропокси(i-Рrо, изо-пропокси, -ОСН(СН₃)₂), 1-бутокси (n-BuО, н-бутокси, -ОСН₂СН₂СН₂СН₃), 2-метил-1-пропокси (i-BuO, изо-бутокси, -ОСН₂СН(СН₃)₂), 2-бутокси (s-BuO, втор-бутокси, -ОСН(СН₃)СН₂СН₃), 2-метил-2-пропокси (t-BuO, трет-бутокси, -ОС(СН₃)₃), 1-пентокси (н-пентокси, -ОСН₂СН₂СН₂СН₂СН₃), 2-пентокси (-ОСН(СН₃)СН₂СН₂СН₃), 3-пентокси (-ОСН(СН₂СН₃)₂), 2-метил-2-бутокси (-ОС(СН₃)₂СН₂СН₃), 3-метил-2-бутокси (-ОСН(СН₃)СН(СН₃)₂), 3-метил-1-бутокси (-ОСН₂СН₂СН(СН₃)₂), 2-метил-1-бутокси (-ОСН₂СН(СН₃)СН₂СН₃) и т.д. Группа алкокси, представленная в настоящем описании, необязательно независимо замещена одним или несколькими заместителями, описанными здесь.

[064] Термины «галогеналкил» и «галогеналкенил» означают алкил или алкенил, в зависимости от обстоятельств, замещенный одним или несколькими атомами галогена.

[065] Термин «алкиламино» охватывает «N-алкиламино» и «N,N-диалкиламино», где аминогруппы независимо замещены одним алкильным радикалом и двумя алкильными радикалами соответственно. Чаще всего алкиламино-радикалы являются «низшими алкиламино»-радикалами, которые содержат 1 или 2 алкильных радикала с 1-6 атомами углерода, присоединенных к атому азота. Подходящие алкиламино-радикалы могут быть моно- или диалкиламино, такие как N-метиламино, N-этиламино, N,N-диметиламино, N,N-диэтиламино и т.д. Группа алкиламино, представленная в настоящем описании, необязательно независимо замещена одним или несколькими заместителями, описанными здесь.

[066] Термин «ариламино» обозначает аминогруппы, которые замещены одним или двумя арильные радикалами, такими как N-фениламино. Ариламино-радикалы также могут быть замещены на арильной кольцевой части радикала.

[067] Термин «аминоалкил» охватывает линейные или разветвленные алкильные радикалы, имеющие от одного до десяти атомов углерода, любой из которых может быть замещен одним или более радикалами аминокислот. Чаще всего аминоалкильные радикалы являются «низшими аминоалкильными» радикалами, которые имеют от одного до шести атомов углерода и один или несколько аминорадикалов. Некоторые неограничивающие примеры аминоалкильной группы включают аминометил, аминоэтил, аминопропил, аминобутил и аминогексил.

[068] Термины «карбоцикл», «карбоциклил», «карбоциклическое кольцо» означают одновалентное или мультивалентное неароматическое, насыщенное или частично ненасыщенное кольцо, содержащее от 3 до 12 атомов углерода в моноциклической, бициклической или трициклической кольцевой системе. Карбобициклическая система включает в себя спирокарбобициклил или конденсированный карбобициклил. Некоторые неограничивающие примеры группы карбоциклила включают циклоалкил, циклоалкенил и циклоалкинил. Следующие неограничивающие примеры карбоциклильных групп включают циклопропил, циклобутил, циклопентил, 1-циклопент-1-енил, 1-циклопент-2-енил, 1-циклопент-3-енил, циклогексил, 1-циклогекс-1-енил, 1-циклогекс-2-енил, 1-циклогекс-3-енил, циклогексадиенил и т.д.

[069] Термин «циклоалкил» означает одновалентное насыщенное или мультивалентное кольцо, имеющее от 3 до 12 атомов углерода в моноциклической, бициклической или трициклической кольцевой системе. Если не указано иное, циклоалкил содержит 3-12 атомов углерода. В некоторых вариантах осуществления циклоалкил содержит от 3 до 8 атомов углерода. В других вариантах осуществления циклоалкил содержит от 3 до 6 атомов углерода. Радикал циклоалкила необязательно независимо замещается одним или несколькими заместителями, описанными выше.

[070] Термин «гетероцикл», «гетероциклил» или «гетероциклический», которые в настоящем описании используются как взаимозаменяемые понятия, означают моноциклическую, бициклическую или трициклическую кольцевую систему, в которой одним или более кольцевых членов является независимо выбранный гетероатом, и которая является полностью насыщенной или содержит одно или более ненасыщенных звеньев, но не является ароматической, имея одну или более точек присоединения к остальной части молекулы. Один или несколько кольцевых атомов необязательно должны быть независимо замещены одним или несколькими заместителями, описанными здесь. В некоторых вариантах осуществления «гетероцикл», «гетероциклил» или «гетероциклическая» группа представляет собой моноцикл, имеющий от 3 до 7 кольцевых членов (от 2 до 6 атомов углерода и от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из N, О, Р и S, причем S или Р необязательно замещены одним или более оксо для образования группы SO или SO₂, PO или PO₂). В других вариантах осуществления это моноцикл, имеющий от 3 до 6 кольцевых членов (от 2 до 5 атомов углерода и от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из N, О, Р и S, где S или Р необязательно замещены одним или несколькими оксо для образования группы SO или SO₂, РО или PO₂), или бицикл, имеющий от 7 до 10 членов в кольце (от 4 до 9 атомов углерода и от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из N, О, Р и S, где S или Р необязательно замещены одним или более оксо для образования группы SO или SO₂, РО или PO₂).

[071] Гетероциклил может быть углеродным радикалом или гетероатомным радикалом. Некоторые неограничивающие примеры гетероциклического кольца включают пирролидинил, тетрагидрофуранил, дигидрофуранил, тетрагидротиенил, тетрагидропиранил, дигидропиранил, тетрагидротиопиранил, пиперидино, морфолино, тиоморфолино, тиоксанил, пиперазинил, гомо-пиперазинил, азетидинил, оксетанил, тиетанил, гомопиперидинил, оксепанил, тиепанил, оксазепинил, диазепинил, тиазепинила, 2-пирролинил, 3-пирролинил, индолинил, 2Н-пиранил, 4Н-пиранил, диоксанил, 1,3-диоксоланил, пиразолинил, дитианил, дитиоланил, дигидропиранил, дигидротиенил, дигидрофуранил, пиразолидинил, имидазолинил, имидазолидинил, и 1,2,3,4-тетрагидро изо-хинолинил. Некоторые неограничивающие примеры гетероциклической группы, где 2 кольцевых атома углерода замещены оксо (=O) частицами, представляют собой пиримидиндионил и 1,1-диоксо-тиоморфолинил.

[072] Термин «гетероатом» означает один или более атомов кислорода, серы, азота, фосфора или кремния, включая любую окисленную форму азота, серы или фосфора; кватернизованную форму любого основного азота; или замещаемый азот гетероциклического кольца, например, N (как в 3,4-дигидро-2Н-пирролиле), NH (как в пирролидиниле) или NR (как в N-замещенном пирролидиниле).

[073] Термин «галоген» означает Фтор (F), Хлор (Cl), Бром (Br) или Йод (I).

[074] Термин «Н» обозначает одиночный атом водорода. Этот радикал может быть присоединен, например, к атому кислорода с образованием гидроксильного радикала.

[075] Термин «D» или «²Н» обозначает один атом дейтерия. Один из этих радикалов может быть присоединен, например, к метальной группе с образованием монодейтерированной метильной группы (CDH₂), два атома дейтерия могут быть прикреплены к метильной группе с образованием дейтерированного диметила (CD₂H) и три атома дейтерия могут быть присоединены к метильной группе с образованием дейтерированной триметильной группы (CD₃).

[076] Термин «азидо» или «N₃» означает молекулу азида. Этот радикал может быть присоединен, например, к метильной группе с образованием азидометана (метил-азида, MeN₃); или присоединен к фенильной группе с образованием фенил-азида (PhN₃).

[077] Термин «арил» означает моноциклические, бициклические и трициклические карбоциклические кольцевые системы, имеющие в общей сложности от 6 до 14 кольцевых членов, в основном от 6 до 12 кольцевых членов и чаще всего от 6 до 10 кольцевых членов, в которых, по меньшей мере, одно кольцо в системе является ароматическим, каждое кольцо в системе содержит 3-7 кольцевых членов и которые имеют одну или более точек присоединения к остальной части молекулы. Термин «арил» может использоваться вместо термина «арильное кольцо» или «ароматическое кольцо». Некоторые неограничивающие примеры арильной группы включают фенил, нафтил и антрацен. Арильный радикал необязательно независимо замещен одним или несколькими заместителями, описанными здесь.

[078] Термин «гетероарил» означает моноциклические, бициклические и трициклические кольцевые системы, имеющие в общей сложности от 5 до 14 кольцевых членов, в основном, от 5 до 12 кольцевых членов и чаще всего от 5 до 10 кольцевых членов, в которых, по меньшей мере, одно кольцо в системе является ароматическим, и по меньшей мере, одно ароматическое кольцо в системе содержит один или более гетероатомов, каждое кольцо в системе содержит от 5 до 7 кольцевых членов и которые имеют одну или несколько точек присоединения к остальной части молекулы. Термин «гетероарил» может быть использован вместо термина «гетероарильное кольцо» или термина «гетероароматическое кольцо». В некоторых вариантах осуществления 5-10-членный гетероарил включает 1, 2, 3 или 4 гетероатома, независимо выбранных из О, S и N. В других вариантах осуществления 5-6-членный гетероарил включает 1, 2, 3 или 4 гетероатома, независимо выбранных из О, S и N. Гетероарильный радикал необязательно должен быть независимо замещаться одним или несколькими заместителями, описанными здесь.

[079] Некоторые неограничивающие примеры гетероарильной группы включают следующее моноциклы: 2-фуранил, 3-фуранил, N-имидазолил, 2-имидазолил, 4-имидазолил, 5-имидазолил, 3-изоксазолил, 4-изоксазолил, 5-изоксазолил, 2-оксазолил, 4-оксазолил, 5-оксазолил, N-пирролил, 2-пирролил, 3-пирролил, 2-пиридил, 3-пиридил, 4-пиридил, 2-пиримидинил, 4-пиримидинил, 5-пиримидинил, пиридазинил (например, 3-пиридазинил), 2-тиазолил, 4 тиазолил, 5-тиазолил, тетразолил (например, 5-тетразолил), триазолил (например, 2-триазолил и 5-триазолил), 2-тиенил, 3-тиенил, пиразолил (например, 2-пиразолил), изотиазолил, 1,2,3-оксадиазолил, 1,3,4-оксадиазолил, 1,2,5-оксадиазолил, 1,2,4-оксадиазолил, 1,2,3-триазолил, 1,2,3-тиадиазолил, 1,3,4-тиадиазолил, 1,2,5-тиадиазолил, пиразинил, 1,3,5-триазинил и следующие бициклы: бензимидазолил, бензофурил, бензотиофенил, индолил (например, 2-индолил), пуринил, хинолинил (например, 2-хинолинил, 3-хинолинил, 4-хинолинил) и изохинолинил (например, 1-изохинолинил, 3-изохинолинил или 4-изохинолинил), имидазо[1,2-а]пиридил, пиразоло[1,5-а]пиридил, пиразоло[1,5-а]пиримидил, имидазо[1,2-b]пиридазинил, [1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазинил, [1,2,4]триазоло[1,5-а]пиримидинил или [1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридил.

[080] Термин «карбокси» или «карбоксил», используемый как отдельно так и вместе с другими терминами, например с термином «карбоксиалкил», представляет -СO₂Н. Термин «карбонил», используемый как отдельно, так и с другими терминами, например с термином «аминокарбонил» означает -(С=O)-.

[081] Термины «конденсированное бициклическое кольцо» «конденсированный циклический», «конденсированный бициклильный» и «конденсированный циклильный» являются взаимозаменяемыми и относятся к одновалентной или поливалентной насыщенной или частично насыщенной параллельной кольцевой системе, которая является бициклической кольцевой системой, но не является ароматической. Такая система может содержать в своей основной структуре изолированную или сопряженную ненасыщенную связь, но не ароматические или гетероароматические кольца (но может содержать ароматический заместитель).

[082] Термины «спироциклильный», «спироциклический», «спиробициклильный» или «спиробициклический» используются взаимозаменяемо и относятся к одновалентной или поливалентной насыщенной или частично насыщенной кольцевой системе, в которой кольцо представляет собой конкретный кольцевой атом углерода другого кольца. Например, как показано ниже в Структуре А, насыщенная кольцевая система с внутренним мостиком (кольцо В и В') называется «конденсированная бициклическая» система, тогда как кольцо А и кольцо В имеют общий атом между двумя насыщенными кольцевыми системами, которые называются «спироциклильными» или «спиробициклильными». Все циклические кольца в конденсированном бициклиле или спиробициклиле могут быть либо карбоциклилом либо гетероциклилом, и каждое кольцо необязательно независимо замещается одним или более заместителем, описанным здесь.

[083] Термин «гетероциклоалкил» означает одновалентное или мультивалентное насыщенное кольцо, имеющее от 3 до 12 кольцевых атомов в моноциклической, бициклической или трициклической кольцевой системе, где как минимум один кольцевой атом отобран из азота, серы и кислорода.

[084] Термин «n-членный», где n - целое число, как правило, указывает количество атомов, образующих кольцо, в молекуле, в которой количество атомов, образующих кольцо, равно n. Например, пиперидинил представляет собой типичный пример 6-членного гетероциклоалкила, и 1,2,3,4-тетрагидро-нафтален является примером 10-членной циклоалкильной группы.

[085] Термин «ненасыщенный» означает молекулу, имеющую одно или более ненасыщенных звеньев.

[086] Термин «защитная группа» или «ЗГ» означает заместитель, который обычно используется для блокирования или защиты конкретной функциональности в процессе взаимодействия с другими функциональными группами соединения. Например, «амино-защитная группа» обозначает заместитель, присоединенный к аминогруппе, который блокирует или защищает аминную функциональность в соединении. Подходящие амино- защитные группы включают ацетил, трифторацетил, t-бутоксикарбонил (ВОС, Воc), бензилоксикарбонил (CBZ, Cbz) и 9-флуоренилметиленоксикарбонил (Fmoc). Аналогичным образом, «гидрокси-защитная группа» означает заместитель гидроксигруппы, который блокирует или защищает гидроксильную функциональность. Подходящие защитные группы включают ацетил и силил. «Карбокси-защитная группа» означает заместитель карбоксигруппы, который блокирует или защищает карбоксильную функциональность. Обычные карбокси-защитные группы включают -CH₂CH₂SO2Ph, цианоэтил, 2-(триметилсилил)этил, 2-(триметилсилил)-этокси-мети-1, 2-(п-толуолсульфонил)-этил, 2-(п-нитрофенилсульфенил)-этил, 2-(дифенилфосфино)-этил, нитроэтил и т.д. Чтобы узнать подробнее о защитных группах и их использовании см. их общее описание Т.У. Грин, «Защитные группы в органическом синтезе», Джон Вили энд Сонс, Нью-Йорк, 1991 и П. Дж. Косьенски, «Защитные группы», Тием, Штутгарт, 2005.

[087] Термин «пролекарство» представляет собой соединение, которое в живом организме преобразуется в соединение формулы (I). Такое преобразование может зависеть, например, от гидролиза в крови или ферментного изменения пролекарственной формы в исходную форму в крови или ткани. Пролекарственные формы соединений, описанных здесь, например, могут представлять собой сложные эфиры. Сложные эфиры, которые могут быть использованы в качестве пролекарства в настоящем изобретении, это- фенил эфиры, алифатические (C₁-C₂₄) эфиры, ацилоксиметильные сложные эфиры, карбонаты, карбаматы и эфиры аминокислоты. Например, описанное здесь соединение, которое содержит ОН-группу, можно ацилировать в этом положении в его пролекарственную форму. Другие пролекарственные формы включают фосфаты, например, такие как фосфаты, образующиеся в результате фосфинирования ОН-группы в исходное соединение. Подробно тема пролекарств рассматривается в публикациях Т. Хигучи «Пролекарства как новое средство доставки лекарств», том 14, выпуск Симпозиума Американского общества химиков, «Биообратимые носители в области разработки лекарств», под ред. Эдварда Б. Роше, Американская фармацевтическая ассоциация и «Пергамон Пресс», 1987, Дж Раутио. и др. «Пролекарства: Разработка и клиническое применение», Нейчер Ревю Драг Дискавери, 2008, 7, 255-270 и С.Дж. Хекер и др. «Пролекарства из фосфатов и фосфонатов», Журнал медицинской химии, 2008, 51, 2328-2345, каждая из которых включена здесь в качестве ссылки.

[088] «Метаболитом» является продукт, образованный путем метаболизма в организме указанного соединения или его соли. Метаболиты соединения можно идентифицировать с помощью обычных методов, известных в данной области, а их действие определяется с помощью анализов, таких как описанные в данном документе. Например, такие продукты могут образовываться в результате окисления, восстановления, гидролиза, амидирования, дезаминирования, этерификации, деэтерификации, ферментативного расщепления, и т.п. вводимого соединения. Соответственно, изобретение включает метаболиты соединений, описанные здесь, в том числе соединений, полученных в результате контактирования соединения данного изобретения с млекопитающим в течение периода времени, достаточного для получения его метаболического продукта.

[089] «Фармацевтически приемлемая соль» означает органические или неорганические соли соединения, описанного здесь. Фармацевтически приемлемые соли хорошо известны в данной области. Например, С.М. Бердж и др. подробно описывают фармацевтически приемлемые соли в Журнале фармацевтических наук, 1977, 66, 1-19, который включен в настоящее описание посредством ссылки. Некоторые неограничивающие примеры фармацевтически приемлемых солей включают соли аминогруппы, образованные неорганическими кислотами, такими как соляная кислота, бромистоводородная кислота, фосфорная кислота, серная кислота и хлорная кислота, или органическими кислотами, такими как уксусная кислота, щавелевая кислота, малеиновая кислота, винная кислота, лимонная кислота, янтарная кислота или малоновая кислота, или с помощью других методов, применяемых в данной области, таких как ионный обмен.

[090] Другие примеры фармацевтически приемлемой соли включают адипат, альгинат, аскорбат, аспартат, бензолсульфонат, бензоат, бисульфат, борат, бутират, камфорат, камфорсульфонат, цитрат, циклопентанпропионат, диглюконат, додецилсульфат, этансульфонат, формиат, фумарат, глюкогептонат, глицерофосфат, глюконат, гемисульфат, гептаноат, гексаноат, гидроиодид, 2-гидрокси-этансульфонат, лактобионат, лактат, лаурат, лаурилсульфат, малат, малеат, малонат, метансульфонат, 2-нафталинсульфонат, никотинат, нитрат, олеат, оксалат, пальмитат, памоат, пектинат, персульфат, 3-фенилпропионат, фосфат, пикрат, пивалат, пропионат, стеарат, сукцинат, сульфат, тартрат, тиоцианат, р-толуолсульфонат, ундеканоат, соли валериановой кислоты и т.д.

[091] Фармацевтически приемлемые соли, полученные из соответствующих оснований, включают щелочной металл, щелочноземельный металл, аммоний и соли N⁺(С_1-4алкил)₄. Данное изобретение также предусматривает кватернизацию любых основных азотсодержащих групп соединений, описанных здесь. Растворимые в воде или в масле, или диспергируемые продукты могут быть получены с помощью такой кватернизации. Типичные соли щелочных или щелочноземельных металлов включают соли натрия, лития, калия, кальция, магния и т.д. Дополнительные примеры фармацевтически приемлемых солей включают, если это приемлемо, нетоксичный аммоний, четвертичный аммоний и аминные катионы, образованные с помощью противоионов, таких как галид, гидроксид, карбоксилат, сульфат, фосфат, нитрат, С_1-8 сульфонат и арилсульфонат.

[092] «Сольват» означает ассоциацию или комплекс, состоящий из одной или более молекул растворителя и соединения, раскрываемого в настоящем описании. Некоторые неограничивающие примеры растворителей, которые образуют сольваты, включают воду, изопропанол, этанол, метанол, ДМСО, этилацетат, уксусную кислоту и этаноламин. Термин «гидрат» означает комплекс, в котором молекулой растворителя является вода.

[093] Термины «лечить» или «лечение» заболевания или любого нарушения в одном варианте относятся к смягчению заболевания или нарушения (т.е. замедлению, приостановлению или ослаблению развития заболевания или, по крайней мере, одного из его клинических симптомов). В другом варианте осуществления «лечить» или «лечение» относятся к снятию или облегчению, по меньшей мере, одного физического симптома, включая те, которые не ощутимы для пациента. Еще в одном варианте термины «лечить» или «лечение» относятся к модуляции заболевания или нарушения, либо физически (напр., стабилизация заметного симптома), физиологически (напр., стабилизация физического параметра) либо обоими способами. Еще в одном варианте «лечить» или «лечение» относятся к предотвращению или задержке начала, развития или прогрессирования заболевания или нарушения.

[094] В контексте настоящего описания термин «фармацевтически приемлемый носитель» включает любой и все растворители, дисперсионные среды, покрытия, поверхностно-активные вещества, антиоксиданты, консерванты (например, антибактериальные агенты, противогрибковые агенты), изотонические агенты, замедляющие абсорбцию агенты, соли, консерванты, стабилизаторы лекарственных препаратов, связующие вещества, наполнители, разрыхлители, смазывающие вещества, подсластители, ароматизаторы, красители и т.п., а также их комбинации, которые должны быть известны специалистам в данной области (см., например, «Ремингтон Фармасьютикал Сайенсиз», 18-изд. Мак Принтинг Компани, 1990, стр. 1289-1329). За исключением некоторых случаев, любой обычный носитель несовместим с активным ингредиентом, его применение в терапевтических или фармацевтических композициях только предполагается.

[095] Термин «терапевтически эффективное количество» соединения, раскрываемого в настоящем описании, означает количество описываемого соединения, которое будет вызывать биологическую или медицинскую реакцию субъекта, например, уменьшение или ингибирование фермента или активности белка, или будет облегчать симптомы, состояние, замедлять или приостанавливать прогрессирование заболевания, либо предотвращать заболевание и т.д. В одном неограничивающем варианте осуществления изобретения термин «терапевтически эффективное количество» относится к количеству соединения, раскрываемого здесь, которое при введении субъекту является эффективным для: (1), по меньшей мере, частичного снятия симптомов, ингибирования, предотвращения и/или облегчения состояния, расстройства или заболевания, (I) опосредованного PI3K, (II) связанного с PI3K активностью, или (III) характеризующегося активностью (нормальной или ненормальной) PI3K; (2) снижения или подавления активности PI3K; или (3) снижения или подавления экспрессии PI3K. В другом неограничивающем варианте осуществления изобретения термин «терапевтически эффективное количество» относится к количеству соединения, раскрываемого здесь, которое при введении в клетку, ткань, неклеточный биологический материал или среду является эффективным для, по крайней мере, частичного снижения или ингибирования активности PI3K; или для, по крайней мере, частичного снижения или ингибирования экспрессии PI3K. Значение термина «терапевтически эффективное количество», как показано для PI3K в приведенном выше варианте осуществления, таким же образом относится к любым другим соответствующим белкам/пептидам/энзимам.

[096] Термин "рак" или "раковый" относится к или описывает физиологическое состояние у млекопитающих, которое обычно характеризуется неконтролируемым ростом клеток. "Опухоль" включает одну или более раковых клеток. Некоторые неограничивающие примеры рака включают карциному, лимфому, бластому, саркому и лейкоз или лимфоидные злокачественные опухоли. Другие конкретные примеры таких раковых заболеваний включают в себя плоскоклеточный рак (например, эпителиальный плоскоклеточный рак), рак легких, включая рак малых клеток легких, немелкоклеточный рак легких (НМРЛ), аденокарциномы легких и плоскоклеточный рак легких, рак брюшной полости, гепатоцеллюлярный рак желудка, рак ЖКТ или рак желудка, включая желудочно-кишечный рак, рак поджелудочной железы, глиобластомы, рак шейки матки, рак яичников, рак печени, рак мочевого пузыря, гепатомы, рак молочной железы, рак толстой кишки, рак прямой кишки, рак ободочной и прямой кишки, эндометриальный рак или рак матки, рак слюнной железы, рак почек или ренальный рак, рак предстательной железы, рак вульвы, рак щитовидной железы, карциному печени, анальную карциному, карциному полового члена, а также рак головы и шеи.

ОПИСАНИЕ СОЕДИНЕНИЙ, РАСКРЫВАЕМЫХ В НАСТОЯЩЕМ ИЗОБРЕТЕНИИ

[097] В настоящем описании представлены гетероароматические соединения, соли и их фармацевтические формы, которые потенциально полезны в лечении заболеваний, состояний и расстройств, модулируемых протеинкиназами, особенно PI3K и МРМ. Более конкретно, настоящее изобретение относится к соединению формулы (I):

или его стереоизомеру, геометрическому изомеру, таутомеру, N-оксиду, сольвату, метаболиту, фармацевтической соли или пролекарству, где каждый из Y, R¹, Z, W₁, W₂ и W₃ должен соответствовать данному описанию.

[098] В некоторых вариантах осуществления, каждый из W₁, W₂ и W₃ является независимо N или CR^c;

Z является D, CN, N₃ или .

X представляет собой Н, D, (С₁-С₆)алкил, (С₃-С₆)циклоалкил, (С₃-С₆)гетероциклил, -С₁-С₄алкилен-(С₃-С₆)циклоалкил, -С₁-С₄алкилен-(С₃-С₆)гетероциклил, (С₆-С₁₀)арил или 5-10-членный гетероарил, содержащий 1, 2, 3 или 4 гетероатома, независимо выбранных из О, S и N, где каждый (C₁-С₆)алкил, (С₃-С₆)циклоалкил, (С₃-С₆)гетероциклил, -С₁-С₄алкилен-(С₃-С₆)циклоалкил, -С₁-С₄алкилен-(С₃-С₆)гетероциклил, (С₆-С₁₀)арил и 5-10-членный гетероарил необязательно замещен 1, 2, 3 или 4 заместителями, независимо выбранными из D, F, Cl, Br, CN, N₃, OR^a, SR^a, NR^aR^b, -C(=O)NR^aR^b, (С₁-С₆)алкила, (С₁-С₆)галогеналкила, (С₂-С₆)алкенила, (С₂-С₆)алкинила, -(С₁-С₄)алкилен-CN, -(C₁-C₄)алкилен-OR^a, -С₁-С₄алкилен-NR^aR^b, (С₆-С₁₀)арила и 5-10-членного гетероарила;

Y представляет собой (С₁-С₆)алкил, (С₃-С₆)циклоалкил, (С₃-С₆)гетероциклил, -С₁-С₄алкилен-(С₃-С₆)циклоалкил, -С₁-С₄алкилен-(С₃-С₆)гетероциклил, (С₂-С₆)алкенил, (С₂-С₆)алкинил, (С₆-С₁₀)арил и 5-10-членный гетероарил, содержащий 1, 2, 3 или 4 гетероатома, независимо выбранных из О, S и N, где каждый (С₁-С₆)алкил, (С₃-С₆)циклоалкил, (С₃-С₆)гетероциклил, -(С₁-С₄)алкилен-(С₃-С₆)циклоалкил, -(С₁-С₄)алкилен-(С₃-С₆)гетероциклил, (С₂-С₆)алкенил, (С₁-С₆)алкинил, (С₆-С₁₀)арил и 5-10-членный гетероарил необязательно замещен 1, 2, 3 или 4 заместителями, независимо выбранными из D, F, Cl, Br, CN, N₃, OR^a, SR^a, NR^aR^b, -C(=O)NR^aR^b, (С₁С₆)алкила, (С₁-С₆)галогеналкила, (С₂-С₆)алкенила, (С₂-С₆)алкинила, -С₁-С₄алкилен-CN, -(C_l-C₄)алкилен-OR^a, -(C₁-C₄)алкилен-NR^aR^b, (С₆-С₁₀)арила и 5-10-членного гетероарила;

R¹ представляет собой Н, D, Cl, OR^a, NR^aR^b, (С₁-С₆)алифатический или (С₃-С₆)циклоалкил, где каждый (С₁-С₆)алифатический или (С₃-С₆)циклоалкил необязательно замещен 1, 2, 3 или 4 заместителями, независимо выбранными из D, F, Cl, CN, N₃, OR^a, SR^a и NR^aR^b;

каждый R^a и R^b независимо обозначает Н, (С₁-С₆)алкил, (С₃-С₆)циклоалкил, (С₃-С₆)гетероциклил, (С₆-С₁₀)арил, 5-10-членный гетероарил, содержащий 1, 2, 3 или 4 гетероатома, независимо выбранных из О, S и N, -(С₁-С₄)алкилен-(С₆-С₁₀)арила, -С₁-С₄алкилен-(5-10-членный гетероарила); или, если R^a и R^b присоединены к одному и тому же атому азота, R^a и R^b вместе с атомом азота, к которому они присоединены, необязательно образуют замещенное или незамещенное 3-8-членное гетероциклическое кольцо, в котором каждый из вышеупомянутых заместителей необязательно замещен 1, 2, 3 или 4 заместителями, независимо выбранными из D, F, Cl, CN, N₃, ОН, NH₂, (С₁-С₆)алкокси и (С₁-С₆)алкиламино; и

каждый R^c независимо обозначает Н, D, F, Cl, Br, I, N₃, CN, ОН, NH₂, (С₁-С₆)алкил, (С₁-С₆)алкокси, (С₁-С₆)алкиламино, (С₃-С₆)циклоалкил, (С₃-С₆)гетероциклил, (С₆-С₁₀)арил или 5-10-членный гетероарил, содержащий 1, 2, 3 или 4 гетероатома, независимо выбранных из О, S и N, где каждый (С₁-С₆)алкил, (С₁-С₆)алкокси, (С₁-С₆)алкиламино, (С₃-С₆)циклоалкил, (С₃-С₆)гетероциклил, (С₆-С₁₀)арил или 5-10-членный гетероарил необязательно замещен 1,2,3 или 4 заместителями, независимо выбранными из D, F, Cl, CN, N₃, ОН, NH₂, (С₁-С₆)алкила, (С₃-С₆)циклоалкила, (С₁-С₆)галогеналкила, (С₁-С₆)алкокси и (С₁-С₆)алкиламино.

[100] В другом варианте осуществления каждый W₁ является N или CR^c, а каждый W₂ и W₃ независимо представляет собой CR^c.

[101] В другом варианте осуществления Z представляет собой CN, N³, или .

[102] В другом варианте осуществления X представляет собой Н, D, (С₁-С₆)алкил, (С₃-С₆)циклоалкил, (С₃-С₆)гетероциклил, -С₁-С₄алкилен-(С₃-С₆)циклоалкил или -(С₁-С₄)алкилен-(С₃-С₆)гетероциклил, где каждый (С₁-С₆)алкил, (С₃-С₆)циклоалкил, (С₃-С₆)гетероциклил, -С₁-С₄алкилен-(С₃-С₆)циклоалкил и -С₁-С₄алкилен-(С₃-С₆)гетероциклил необязательно замещен 1, 2, 3 или 4 заместителями, независимо выбранными из D, F, Сl, Br, CN, N₃, OR^a, SR^a, NR^aR^b, -C(=O)NR^aR^b, (С₁-С₃)алкила, (С₁-С₃)галогеналкила, (С₂-С₄)алкенила и (С₂-С₄)алкинила.

[103] В другом варианте осуществления Y представляет собой (С₁-С₆)алкил, (С₃-С₆)циклоалкил, (С₂-С₆)алкенил, (С₂-С₆)алкинил, (С₆-С₁₀)арил или 5-10-членный гетероарил, содержащий 1, 2, 3 или 4 гетероатома, независимо выбранных из О, S и N, где каждый (С₁-С₆)алкил, (С₃-С₆)циклоалкил, (С₂-С₆)алкенил, (С₂-С₆)алкинил, (С₆-С₁₀)арил или 5-10-членный гетероарил необязательно замещен 1,2,3 или 4 заместителями, независимо выбранными из D, F, Cl, Br, CN, N₃, OR^a, SR^a, NR^aR^b, -C(=O)NR^aR^b, (С₁-С₃)алкила, (C₁-С₃)галогеналкила, (С₂-С₄)алкинила, (С₆-С₁₀)арила или 5-10-членного гетероарила.

[104] В другом варианте осуществления R¹ представляет собой Н, D, Cl, СН₃, СН₂СН₃, CF₃, CH₂CF₃, ОСН₃ или ОСН₂СН₃.

[105] В другом варианте осуществления каждый R^c независимо обозначает Н, D, F, Cl, N₃, CN, NH₂, (С₁-С₃)алкил, (С₁-С₃)алкокси, (С₁-С₃)алкиламино, (С₃-С₆)циклоалкил или (С₃-С₆)гетероциклил, где каждый (С₁-С₃)алкил, (С₁-С₃)алкокси, (С₁-С₃)алкиламино, (С₃-С₆)циклоалкил или (С₃-С₆)гетероциклил необязательно замещен 1, 2, 3 или 4 заместителями, независимо выбранными из D, F, CN, N₃, ОН, NH₂, (С₁-С₃)алкила, (С₃-С₆)циклоалкила и (С₁ С₃)галогеналкила.

[106] Некоторые неограничивающие примеры соединений и их фармацевтически приемлемых солей и сольватов, раскрываемых в настоящем описании, приведены в следующей таблице:

[107] Настоящее изобретение также включает применение соединения, описанного здесь, или его фармацевтически приемлемой соли при изготовлении лекарственного средства для лечения острого или хронического гиперпролиферативного болезненного состояния и/или опосредованного ангиогенеза болезненного состояния, включая описанные выше. Соединения, раскрываемые в настоящем описании, пригодны для производства противоракового лекарственного средства. Соединения, раскрываемые в настоящем описании, также пригодны для изготовления лекарственного средства для ослабления или предотвращения нарушений путем ингибирования протеинкиназы. Настоящее изобретение включает фармацевтическую композицию, содержащую терапевтически эффективное количество соединения формулы (I) в сочетании, по меньшей мере, с одним фармацевтически приемлемым носителем, адъювантом или разбавителем.

[108] Настоящее изобретение также включает способ лечения гиперпролиферативного заболевания и расстройства, связанных с ангиогенезом у субъекта, который имеет такое расстройство или восприимчив к нему, причем способ включает лечение субъекта терапевтически эффективным количеством соединения формулы (I).

[109] Если не указано иное, все стереоизомеры, геометрические изомеры, таутомеры, сольваты, метаболиты, соли и их фармацевтически приемлемые пролекарственные формы соединений, описанных в данном документе, находятся в области настоящего изобретения.

[110] В некоторых вариантах осуществления соль представляет собой фармацевтически приемлемую соль. Фраза «фармацевтически приемлемый» означает, что вещество или композиция должны быть совместимы химически и/или токсикологически с другими ингредиентами, которые содержит препарат, и/или с млекопитающим, которого им лечат.

[111] Соединения, описанные в настоящей заявке, включают соли таких соединений, которые не обязательно являются фармацевтически приемлемыми солями и которые могут быть полезны в качестве промежуточных соединений при получении и/или очистке соединений формулы (I) и/или для разделения энантиомеров соединений формулы (I).

[112] Фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли могут быть образованы неорганическими кислотами и органическими кислотами, например: ацетат, аспартат, бензоат, безилата, бромид/гидробромид, бикарбонат/карбонат, бисульфат/сульфат, камфорсульфонат, хлорид/гидрохлорид, хлортеофинилонат, цитрат, этандисульфонат, фумарат, глюцептат, глюконат, глюкуронат, гиппурат, гидройодид/йодид, изетионат, лактат, лактобионат, лаурилсульфат, малат, малеат, малонат, манделат, мезилат, метилсульфат, нафтоат, напсилат, никотинат, нитрат, октадеканоат, олеат, оксалат, пальмитат, памоат, фосфат/гидроген фосфат/дигидроген-фосфат, полигалактуронат, пропионат, стеарат, сукцинат, субсалицилат, тартрат, тозилат и трифторацетатные соли.

[113] Неорганические кислоты, из которых могут быть получены соли, например, включают соляную кислоту, бромистоводородную кислоту, серную кислоту, азотную кислоту, фосфорную кислоту и т.п.

[114] Органические кислоты, из которых могут быть получены соли, например, включают уксусную кислоту, пропионовую кислоту, гликолевую кислоту, щавелевую кислоту, малеиновую кислоту, малоновую кислоту, янтарную кислоту, фумаровую кислоту, винную кислоту, лимонную кислоту, бензойную кислоту, миндальную кислоту, метансульфоновую кислоту, этансульфоновую кислоту, толуолсульфоновую кислоту, сульфосалициловую кислоту и т.п.

[115] Фармацевтически приемлемые основные аддитивные соли могут быть образованы неорганическими и органическими основаниями.

[116] Неорганические основания, из которых могут быть получены соли, например, включают аммониевые соли и металлы из столбцов с I по XII периодической таблицы. В некоторых вариантах осуществления соли получают из натрия, калия, аммония, кальция, магния, железа, серебра, цинка и меди; практически пригодные соли включают соли аммония, калия, натрия, кальция и магния.

[117] Органические основания, из которых могут быть получены соли, например, включают первичные, вторичныхе и третичные амины, замещенные амины, в том числе природные замещенные амины, циклические амины, основные ионообменные смолы и т.п. Некоторые органические амины включают изопропиламин, бензатин, холинат, диэтаноламин, диэтиламин, лизин, меглумин, пиперазин и трометамин.

[118] Фармацевтически приемлемые соли по настоящему изобретению могут быть синтезированы из основной или кислотной молекулы обычными химическими способами. Как правило, такие соли могут быть получены в результате взаимодействия форм свободной кислоты этих соединений со стехиометрическим количеством соответствующего основания (такого как Na, Са, Mg или K гидроксид, карбонат, бикарбонат или т.п.) или в результате взаимодействия форм свободного основания этих соединений со стехиометрическим количеством соответствующей кислоты. Такие реакции обычно проводят в воде или в органическом растворителе или в смеси обоих. Как правило, использование неводных сред, таких как эфир, этилацетат, этанол, изопропанол или ацетонитрил желательно, если это практически возможно. Списки дополнительных подходящих солей можно найти, например, в «Ремингтон Фармасьютикал Сайенсиз», 20-е изд., Мак Паблишинг Компани, Истон, Пенсильвания, (1985); и в «Справочнике фармацевтических солей: Свойства, выбор и применение» Шталь и Вермут (Вили-Ви-Си-Эйч, Вайнхайм, Германия, 2002 г. ).

[119] Кроме того, соединения, описанные в данном документе, включая их соли, также можно получить в виде их гидратов, или они могут включать другие растворители, используемые для их кристаллизации. Соединения, описанные здесь, могут по своей природе или по структуре образовывать сольваты с фармацевтически приемлемыми растворителями (включая воду); таким образом, предполагается, что настоящее изобретение охватывает как сольватированные, так и несольватированные формы.

[120] В другом аспекте в настоящем описании представлены методы получения, методы разделения и методы очистки соединений формулы (I). Соединения, описанные в настоящем документе, в целом имеют несколько асимметричных центров и, как правило, изображаются в виде рацемических смесей. Предполагается, что данное изобретение охватывает рацемические смеси, частично рацемические смеси и отдельные энантиомеры и диастереомеры.

[121] Соединения, описанные здесь, могут быть представлены в виде одного из возможных изомеров, ротамеров, атропоизомеров, таутомеров или их смесей. Предполагается, что данное изобретение охватывает смеси изомеров, ротамеров, атропизомеров, таутомеров, частично смешанных изомеров, ротамеров, атропизомеров или таутомеров, а также изомеры, ротамеры, атропизомеры и таутомеры отдельно.

[122] Также предполагается, что любая формула, представленная в настоящем описании, предназначена для немеченных форм, а также изотопно-меченных форм соединений. Изотопно-меченные соединения имеют структуры, отображенные в формулах, приведенных в настоящем документе, за исключением того, что один или более атомов заменены атомами, имеющими выбранную атомную массу или массовое число. Примеры изотопов, которые могут быть включены в соединения, раскрытые в данном документе, включают изотопы водорода, углерода, азота, кислорода, фосфора, фтора и хлора, такие как ²Н, ³Н, ¹¹С, ¹³С, ¹⁴С, ¹⁵N, ¹⁸F, ³¹Р, ³²Р, ³⁶S, ³⁷Сl и ¹²⁵I соответственно.

[123] В другом аспекте соединения, описанные здесь, включают изотопно-меченные соединения, как указано в настоящем описании, например, такие, в которые включены радиоактивные изотопы, напр., ³Н, ¹⁴С и ¹⁸F, или такие, в которых присутствуют нерадиоактивные изотопы, напр., ²Н и ¹³С. Такие изотопно-меченные соединения могут быть использованы в метаболических исследованиях (с ¹⁴С), кинетических исследованиях реакций (например, с ²Н или ³Н), методах обнаружения или визуализации, таких как позитронно-эмиссионная томографиия (ПЭТ) или однофотонная эмиссионная компьютерная томография (ОФЭКТ), включая анализ распределения препарата или основы в тканях, или в радиологическом лечении пациентов. В частности, ¹⁸F или меченое соединение особенно подходит для ПЭТ- или ОФЭКТ-исследований. Изотопно-меченные соединения формулы (I) в основном могут быть получены обычными способами, известными специалистам в данной области, или способами, аналогичными тем, которые описаны в прилагаемых Примерах приготовления, с использованием соответствующего изотопно-меченного реагента вместо немеченого реагента, применявшегося ранее.

[124] Кроме того, замещение более тяжелыми изотопами, в частности дейтерием (т.е. ²Н или D), может дать определенные терапевтические преимущества в результате более высокой метаболической стабильности, например, повышения естественного полураспада, снижения требований дозировки или улучшения терапевтического индекса. Понятно, что дейтерий в данном контексте рассматривается как заместитель соединения формулы (I). Концентрацию такого более тяжелого изотопа, в частности дейтерия, можно определить с помощью коэффициента изотопного обогащения. Термин «коэффициент изотопного обогащения», используемый в настоящем описании, означает соотношение между имеющимся изотопным составом и природным составом конкретного изотопа. Если заместитель в соединении настоящего изобретения обозначает дейтерий, такое соединение имеет коэффициент изотопного обогащения для каждого указанного атома дейтерия, по меньшей мере, 3500 (52,5% введения дейтерия в каждом определенном атоме дейтерия), по меньшей мере, 4000 (60% введения дейтерия), по меньшей мере, 4500 (67,5% введения дейтерия), по меньшей мере, 5000 (75% введения дейтерия), по меньшей мере, 5500 (82,5% введения дейтерия), по меньшей мере, 6000 (90% введения дейтерия), по меньшей мере, 6333,3 (95% введения дейтерия), по меньшей мере, 6466,7 (97% введения дейтерия), по меньшей мере, 6600 (99% введения дейтерия) или, по меньшей мере, 6633,3 (99,5% введения дейтерия). Фармацевтически приемлемые сольваты в соответствии с изобретением включают те, в которых растворитель кристаллизации может быть изотопно-замещенным, например D₂O, ацетон-d6, и ДМСО-d6.

КОМПОЗИЦИЯ, СОСТАВЫ И ВВЕДЕНИЕ СОЕДИНЕНИЙ, ОПИСАННЫХ В НАСТОЯЩЕЙ ЗАЯВКЕ

[125] Согласно одному аспекту изобретение предусматривает фармацевтические композиции, которые включают в себя соединение формулы (I), соединение из перечисленных в таблице 1 и фармацевтически приемлемый носитель, адъювант или наполнитель. Количество соединения в композициях, раскрытых в настоящем описании, является эффективным для детектируемого ингибирования протеинкиназы в биологическом образце или у пациента.

[126] Следует также отметить, что некоторые из описанных в настоящей заявке соединений могут существовать в свободной форме, предназначенной для лечения, или в качестве их фармацевтически приемлемого производного, если это уместно. В соответствии с настоящим изобретением, несколько неограничивающих примеров фармацевтически приемлемых производных включает фармацевтически приемлемые пролекарства, соли, сложные эфиры, соли таких эфиров или любой другой аддукт или производное, которое при введении нуждающемуся пациенту может обеспечить, прямо или косвенно, соединение, описанное в данном документе иным, или его метаболит или остаток.

[127] Как описано выше, фармацевтически приемлемые композиции, раскрытые в данном изобретении, дополнительно содержат фармацевтически приемлемый носитель, адъювант или наполнитель, который в данном описании включает любой и все растворители, разбавители или другие жидкие наполнители, диспергирующие или суспендирующие агенты, поверхностно-активные агенты, изотонические агенты, загустители или эмульгаторы, консерванты, твердые связующие вещества, лубриканты и т.п., в количестве, подходящем для конкретной дозировки необходимой формы. В «Ремингтон: Научная и практическая фармация», 21-е издание, 2005 г., ред. Д.Б. Троя, Липпинкотт Уильяме энд Уилкинс, Филадельфия и в Энциклопедии фармацевтической технологии, ред. Дж. Суорбрика 1988-1999, Марсель Деккер, Нью-Йорк, содержание каждого из которых включено сюда посредством ссылки, описываются различные носители, используемые при составлении фармацевтически приемлемых композиций и известные способы их получения. За исключением случаев, когда любая обычная среда-носитель несовместима с соединениями, раскрытыми в настоящем описании, например, поскольку создает какой-либо нежелательный биологический эффект или иным образом негативно воздействует на любой другой компонент(ы) фармацевтически приемлемой композиции, ее использование предполагается в пределах объема, указанного в настоящем изобретении.

[128] Некоторые неограничивающие примеры материалов, которые могут служить в качестве фармацевтически приемлемых носителей включают ионообменники, оксид алюминия, стеарат алюминия, лецитин, сывороточные белки, такие как сывороточный альбумин человека, буферные вещества, такие как фосфаты, глицин, сорбиновая кислота или сорбат калия, смеси неполных глицеридов насыщенных растительных жирных кислот, воду, соли или электролиты, такие как протамин сульфат, динатрий гидрофосфат, гидрофосфат калия, хлорид натрия, соли цинка, коллоидный диоксид кремния, трисиликат магния, поливинилпирролидон, полиакрилаты, воски, полиэтилен-полиоксипропилен-блок полимеры, ланолин, сахара, такие как лактоза, глюкоза и сахароза; крахмалы, такие как кукурузный крахмал и картофельный крахмал; целлюлоза и ее производные, такие как натрийкарбоксиметилцеллюлоза, этилцеллюлоза и ацетат целлюлозы; порошкообразный трагакант; солод; желатин; тальк; наполнители, такие как масло какао и воски для суппозиториев; масла, такие как арахисовое масло, хлопковое масло, сафлоровое масло, кунжутное масло, оливковое масло, кукурузное масло и соевое масло; гликоли, например, пропиленгликоль или полиэтиленгликоль; сложные эфиры, такие как этилолеат и этиллаурат; агар; буферные агенты, такие как гидроксид магния и гидроксид алюминия; альгиновые кислоты; апирогенную воду; изотонический солевой раствор; раствор Рингера; этиловый спирт и фосфатные буферные растворы, а также другие нетоксичные совместимые лубриканты, такие как лаурилсульфат натрия и стеарат магния, а также красители, разделительные агенты, агенты-покрытия, подсластители, ароматизаторы и отдушки, консерванты и антиоксиданты также могут присутствовать в композиции, согласно мнению составителя.

[129] Композиции, раскрытые в настоящем описании, могут быть введены перорально, парентерально, путем ингаляции, местно, ректально, назально, трансбуккально, вагинально или через имплантированный резервуар. Термин «парентеральный» в настоящем описании включает подкожные, внутривенные внутримышечные, внутрисуставные, внутрисиновиальные, интрастернальные, интратекальные, внутриглазные, внутрипеченочные, внутриочаговые и внутричерепные инъекции или инфузии. Предпочтительно вводить композиции перорально, внутрибрюшинно или внутривенно. Стерильные инъекционные формы композиций, согласно данному изобретению, могут быть водной или масляной суспензией. Эти суспензии могут быть получены в соответствии со способами, известными в данной области, с использованием подходящих диспергирующих или смачивающих агентов и суспендирующих агентов. Стерильный инъекционный препарат может также быть стерильным инъекционным раствором или суспензией в нетоксичном парентерально приемлемом разбавителе или растворителе, например как раствор в 1,3-бутандиоле. Среди приемлемых носителей и растворителей, которые могут быть использованы, можно назвать воду, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, в качестве растворителя или суспендирующей среды обычно используются стерильные нелетучие масла.

[130] Для этого может быть использовано любое мягкое нелетучее масло, в том числе синтетические моно- или диглицериды. Жирные кислоты, такие как олеиновая кислота и производные ее глицеридов, пригодны для приготовления инъекционных препаратов, так как они являются природными фармацевтически приемлемыми маслами, например, оливковое масло или касторовое масло, особенно в их полиоксиэтилированных вариантах. Эти масляные растворы или суспензии могут также содержать длинноцепочечный спиртовой разбавитель или диспергатор, такой как карбоксиметилцеллюлоза или подобные диспергирующие агенты, которые обычно используются в композиции фармацевтически приемлемых лекарственных форм, включая эмульсии и суспензии. Другие обычно используемые поверхностно-активные вещества, такие как Tweens, Spans и другие эмульгаторы или усилители биодоступности, которые обычно используются в производстве фармацевтически приемлемых твердых, жидких или других лекарственных форм, также могут быть использованы для целей разработки.

[131] Фармацевтически приемлемые композиции, согласно данному изобретению, можно вводить перорально в любой перорально приемлемой лекарственной форме, включая, но, не ограничиваясь ими, капсулы, таблетки, водные суспензии или растворы. В случае таблеток для перорального применения, обычно используемые носители включают лактозу и кукурузный крахмал. Также обычно добавляют смазывающие агенты, такие как стеарат магния. Для перорального применения в форме капсулы, пригодные разбавители включают лактозу и высушенный кукурузный крахмал. Если для перорального применения требуются водные суспензии, активный ингредиент должен идти в сочетании с эмульгирующими и суспендирующими агентами. При желании также могут быть добавлены определенные подсластители, ароматизаторы или красители.

[132] Кроме того, фармацевтически приемлемые композиции, согласно данному изобретению, можно вводить в форме суппозиториев для ректального применения. Они могут быть получены путем смешивания агента с подходящим нераздражающим эксципиентом, который при комнатной температуре имеет твердое состояние, а при ректальной температуре - жидкое и, следовательно, будет плавиться в прямой кишке с высвобождением лекарственного средства. Такие материалы включают масло какао, пчелиный воск и полиэтиленгликоли.

[133] Фармацевтически приемлемые композиции согласно настоящему изобретению можно также вводить местно, особенно, когда мишень лечения включает участки или органы, легкодоступные для местного применения, включая болезни глаз, кожи или нижнего отдела кишечника. Подходящие композиции для местного применения для каждого из этих участков или органов легко получить.

[134] Местное применение для нижнего отдела кишечника может осуществляться в виде ректальных суппозиторий (смотри выше) или в виде подходящего раствора для клизмы. Также могут быть использованы местно-чрескожные пластыри. Для местного применения фармацевтически приемлемые композиции могут быть приготовлены в виде подходящей мази, содержащей активный компонент, суспендированный или растворенный в одном или нескольких носителях. Носители для местного введения соединений, согласно настоящему изобретению, включают, но не ограничиваются ими, минеральное масло, жидкий вазелин, белый вазелин, пропиленгликоль, полиоксиэтилен, полиоксипропилен, эмульгирующий воск и воду. В качестве альтернативы, фармацевтически приемлемые композиции могут быть составлены в виде подходящего лосьона или крема, содержащего активные компоненты, суспендированные или растворенные в одном или более фармацевтически приемлемом носителе. Подходящие носители включают, но не ограничиваются ими, минеральное масло, моностеарат сорбитана, полисорбат 60, воск цетиловых эфиров, цетеариловый спирт, 2-октилдодеканол, бензиловый спирт и воду.

[135] Для офтальмологического применения фармацевтически приемлемые композиции могут быть составлены, например, в виде микронизированных суспензий в изотоническом, рН-стерильном физиологическом растворе или в другом водном растворе, или, предпочтительно, в виде растворов в изотоническом, рН-стерильном физиологическом растворе или в другом водном растворе, с консервантом или без него, таким как хлорид бензалкония. Кроме того, для офтальмологического применения фармацевтически приемлемые композиции могут быть составлены в виде мази, такой как вазелин. Фармацевтически приемлемые композиции данного изобретения могут также вводиться с помощью назального аэрозоля или ингаляции. Такие композиции получают в соответствии с методами, хорошо известными в области фармацевтических составов, и могут быть получены в виде растворов в хлориде натрия с использованием бензилового спирта или других подходящих консервантов, промоторов абсорбции для повышения биодоступности, фторуглеродов и/или других обычных солюбилизирующих или диспергирующих агентов.

[136] Жидкие лекарственные формы для перорального введения включают, но не ограничиваются ими, фармацевтически приемлемые эмульсии, микроэмульсии, растворы, суспензии, сиропы и эликсиры. В дополнение к активным соединениям, жидкие лекарственные формы могут содержать инертные разбавители, обычно используемые в данной области, такие как, например, вода или другие растворители, солюбилизирующие агенты и эмульгаторы, такие как этиловый спирт, изопропиловый спирт, этилкарбонат, этилацетат, бензиловый спирт, бензилбензоат, пропиленгликоль, 1,3-бутиленгликоль, диметилформамид, масла (в частности, хлопковое, арахисовое, кукурузное, масло зародышей, оливковое, касторовое и кунжутное масла), глицерин, етрагидрофурфуриловый спирт, полиэтиленгликоли и сложные эфиры жирных кислот сорбита и их смесей. Кроме инертных разбавителей, пероральные композиции могут также включать адъюванты, такие как смачивающие агенты, эмульгаторы и суспендирующие агенты, подсластители, вкусовые и ароматизирующие агенты.

[137] Препараты для инъекций, например, стерильные инъецируемые водные или маслянистые суспензии могут быть получены с помощью известных методов в данной области с использованием подходящих диспергирующих или смачивающих агентов и суспендирующих агентов. Стерильный инъекционный препарат также может быть представлен стерильным инъекционным раствором, суспензией или эмульсией в нетоксичном парентерально приемлемом разбавителе или растворителе, например, в виде раствора в 1,3-бутандиоле. Среди приемлемых носителей и растворителей, которые можно использовать, можно указать воду, раствор Рингера, Фармакопею США и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, стерильные нелетучие масла обычно используют в качестве растворителя или суспендирующей среды. Для этого может быть использовано любое мягкое нелетучее масло, в том числе синтетические моно- или диглицериды. Кроме того, в приготовлении инъекционных препаратов используются жирные кислоты, такие как олеиновая кислота.

[138] Инъекционные составы могут быть стерилизованы, например, фильтрованием через противобактериальный фильтр или включением стерилизующих агентов в форме стерильных твердых композиций, которые могут быть растворены или диспергированы в стерильной воде или другой стерильной среде для инъекций непосредственно перед использованием. Для того чтобы продлить эффект соединения, раскрытого в настоящем описании, часто требуется замедлить абсорбцию соединения из подкожной или внутримышечной инъекции. Это может быть достигнуто путем использования жидкой суспензии кристаллического или аморфного материала с плохой растворимостью в воде. Скорость абсорбции соединения тогда будет зависеть от скорости его растворения, которая, в свою очередь, может зависеть от размера кристаллов и кристаллической формы. В качестве альтернативы, замедленное всасывание парентерально вводимого соединения можно достичь с помощью растворения или суспендирования соединения в масляном носителе.

[139] Инъекционные депо-формы получают путем формирования микроинкапсулированных матриц соединения, в биоразлагаемых полимерах, таких как полилактид-полигликолид. В зависимости от соотношения соединения и конкретного используемого полимера и его природы, скоростью высвобождения соединения можно управлять. Примеры других биоразлагаемых полимеров включают поли(ортоэфиры) и поли(ангидриды). Инъекционные депо-составы также получают путем включения соединения в липосомы или микроэмульсии, которые совместимы с тканями организма.

[140] Композициями для ректального или вагинального введения предпочтительно являются суппозитории, которые могут быть получены путем смешивания соединений данного изобретения с подходящими нераздражающими наполнителями или носителями, такими как масло какао, полиэтиленгликоль или воск для суппозиториев, которые находятся в твердом состоянии при комнатной температуре, но в жидком при температуре тела и, следовательно, плавятся в прямой кишке или вагинальной полости и высвобождают активное соединение.

[141] Твердые лекарственные формы для перорального введения включают капсулы, таблетки, пилюли, порошки и гранулы. В таких твердых лекарственных формах активное соединение смешивают, по крайней мере, с одним инертным фармацевтически приемлемым эксципиентом или носителем, таким как цитрат натрия или дикальцийфосфат, и/или: а) наполнителями или сухими разбавителями, такими как крахмалы, лактоза, сахароза, глюкоза, маннит и кремниевая кислота; б) связующими веществами, такими как, например, карбоксиметилцеллюлоза, альгинаты, желатин, поливинилпирролидон, сахароза и гуммиарабик; в) увлажнителями, такими как глицерин; г) дезинтегрирующими агентами, такими как агар-агар, карбонат кальция, картофельный крахмал или крахмал тапиоки, альгиновая кислота, некоторые силикаты и карбонат натрия; д) замедляющими растворение агентами, такими как парафин; е) ускорителями абсорбции, такими как четвертичные аммониевые соединения; ж) смачивающими агентами, такими как, например, цетиловый спирт и моностеарат глицерина;

з) абсорбентами, такими как каолин и бентонитовая глина; и

и) смазывающими веществами, такими как тальк, стеарат кальция, стеарат магния, твердые полиэтиленгликоли, лаурилсульфат натрия и их смесями. В случае капсул, таблеток и пилюль дозированная форма может также содержать буферные агенты.

[142] Твердые композиции подобного типа также могут использоваться в качестве наполнителей в мягких и твердых желатиновых капсулах с добавлением таких эксципиентов, как лактоза или молочный сахар, а также высокомолекулярные полиэтиленгликоли и т.п. Твердые дозированные формы таблеток, драже, капсул, пилюль и гранул могут быть получены с покрытиями и оболочками, такими как энтеросолюбильные покрытия и другие покрытия, хорошо известные в области фармацевтических препаратов. Они необязательно должны содержать контрастные агенты, а также могут представлять собой композицию, которая высвобождает активный ингредиент(ы) только или предпочтительно, в определенной части кишечного тракта, необязательно замедленным образом. Примеры композиций, которые могут быть использованы, включают полимерные вещества и воски. Твердые композиции подобного типа могут также быть использованы в качестве наполнителей в мягких и твердых желатиновых капсулах с применением таких эксципиентов, как лактоза или молочный сахар, а также высокомолекулярных гликолей и т.п.

[143] Активные соединения также могут быть представлены в форме микрокапсул с одним или несколькими наполнителями, как отмечалось выше. Твердые дозированные формы таблеток, драже, капсул, пилюль и гранул могут изготавливаться с покрытиями и оболочками, такими как энтеросолюбильные покрытия, контролирующие высвобождение покрытия и другими покрытиями, хорошо известными в сфере фармацевтических препаратов. В таких твердых дозированных формах активное соединение может быть смешано, по крайней мере, с одним инертным разбавителем, таким как сахароза, лактоза или крахмал. Эти лекарственные формы могут также содержать, что является обычной практикой, вспомогательные вещества, отличные от инертных разбавителей, например, смазывающие вещества для таблетирования и другие вспомогательные вещества для таблетирования, такие как стеарат магния и микрокристаллическая целлюлоза. В случае капсул, таблеток и пилюль дозированные формы могут также содержать буферные агенты. Они необязательно должны содержать смягчающие агенты, а также могут представлять собой композицию, которая высвобождает активный ингредиент(ы) только или предпочтительно, в определенной части кишечного тракта, необязательно замедленным образом. Примеры композиций, которые могут быть использованы, включают полимерные вещества и воски.

[144] Лекарственные формы для местного или трансдермального применения соединения данного изобретения включают мази, пасты, кремы, лосьоны, гели, порошки, растворы, спреи, ингаляторы или пластыри. Активный компонент в стерильных условиях смешивают с фармацевтически приемлемым носителем и любыми необходимыми консервантами или буферными растворами, которые могут потребоваться. Офтальмологические составы, ушные капли и глазные капли также рассматриваются как входящие в область данного изобретения. Кроме того, настоящее изобретение включает применение трансдермальных пластырей, которые имеют дополнительное преимущество, обеспечивая контролируемое введение соединения в организм. Такие лекарственные формы могут быть изготовлены путем растворения или диспергирования соединения в соответствующей среде. Усилители абсорбции также могут быть использованы для увеличения проникновения соединения через кожу. Скорость может регулироваться либо с помощью регулирующей скорость мембраны, либо с помощью диспергирования соединения в полимерной матрице или геле.

[145] Соединения, описанные в настоящей заявке, чаще всего приготавливают в единичной дозированной форме для более легкого введения и однородности дозировки. Выражение «лекарственная форма», используемое в настоящем описании, означает физически дискретную единицу агента, подходящую для пациента, который подлежит лечению. Следует понимать, однако, что общая суточная доза соединений и композиций, описанных в данном документе, будет определяться лечащим врачом в рамках здравого медицинского суждения. Удельный уровень эффективной дозы для любого конкретного пациента или организма будет зависеть от различных факторов, включая нарушение, которое лечат, и тяжесть этого нарушения; от активности конкретного используемого соединения; от конкретно используемой композиции; от возраста, массы тела, общего состояния здоровья, пола и диеты пациента; от времени введения, способа введения и скорости экскреции конкретно используемого соединения; от продолжительности лечения; от препаратов, применяемых в комбинации или совместно с конкретным используемым соединением, и тому подобных факторов, хорошо известных в области медицины.

[146] Количество соединения настоящего изобретения, которое может быть соединено с материалами-носителями для получения композиции в единичной дозированной форме, будет изменяться в зависимости от пациента и конкретного способа введения. Предпочтительно, чтобы композиции составлялись с расчетом такой дозы - пациенту, получающему эти композиции, можно вводить 0,01-200 мг ингибитора/кг массы тела в день.

[147] Соединения настоящего изобретения можно вводить в виде единственного фармацевтического агента или в сочетании с одним или несколькими другими дополнительными терапевтическими (фармацевтическими) агентами, если сочетание не вызывает неприемлемых побочных эффектов. Это может иметь большое значение для лечения гиперпролиферативных заболеваний, таких как рак. В этом случае, соединение согласно данному изобретению может быть объединено с известными цитотоксическими агентами, ингибиторами сигнальной трансдукции или с другими противораковыми агентами, а также с добавками и их комбинациями. В контексте данного описания дополнительные терапевтические агенты, которые обычно вводят для лечения конкретного заболевания или состояния, известны как «подходящие для лечения заболевания или состояния». В контексте данного описания «дополнительные терапевтические агенты» означает включение химиотерапевтических агентов и других антипролиферативных агентов.

[148] Например, химиотерапевтические агенты или другие антипролиферативные агенты могут быть объединены с соединениями данного изобретения для лечения пролиферативного заболевания или рака. Примерами химиотерапевтических агентов или других антипролиферативных агентов являются ингибиторы гистондеацеталазы, включая, но, не ограничиваясь ими, субероиланилид гидроксамовой кислоты (SAHA), MS-275, MGO 103, агенты, которые описаны в патентах WO 2006/010264, WO 03/024448, WO 2004/069823, US 2006/0058298, US 2005/0288282, WO 00/71703, WO 01/38322, WO 01/70675, WO 03/006652, WO 2004/035525, WO 2005/030705, WO 2005/092899, и деметилирующие агенты, включая, но, не ограничиваясь, 5-аза-dC, Видаза и Децитабин, а также агенты, описанные в патентах US 6,268,137, US 5,578,716, US 5,919,772, US 6,054,439, US 6,184,211, US 6,020,318, US 6,066,625, US 6,506,735, US 6,221,849, US 6,953,783, US 11/393,380.

[149] В другом варианте осуществления настоящего изобретения, например, химиотерапевтические агенты или другие антипролиферативные агенты могут быть объединены с соединениями настоящего изобретения для лечения пролиферативных заболеваний и рака. Примеры известных химиотерапевтических агентов включают применение, но не ограничиваются ими, например, другой терапии или противораковых агентов, которые могут быть использованы в сочетании с изобретенными противоопухолевыми агентами настоящего изобретения, и включают операцию, лучевую терапию (в нескольких примерах, гамма-излучение, нейтронно-лучевую терапию, электронную лучевую терапию, протонную терапию, брахитерапию и применение системных радиоактивных изотопов и т.д.), эндокринную терапию, таксаны (паклитаксел, таксотер), производные платины (цисплатин, карбоплатин, оксалиплатин), модификаторы биологического ответа (интерфероны, интерлейкины), фактор некроза опухоли (агенты, направленные на рецепторы ФНО, ФНО-апоптоз индуцирующий лиганд и т.д.), гипертермию и криотерапию, агенты для ослабления любых неблагоприятных эффектов (например, противорвотные средства) и другие одобренные химиотерапевтические препараты, в том числе, но не ограничиваясь ими, алкилирующие препараты (хлорметин, хлорамбуцил, циклофосфамид, ифосфамид, мелфалан и т.д.), антиметаболиты (метотрексат, ралтитрексед, пеметрексед и т.д.), пуриновые антагонисты и пиримидиновые антагонисты (6-меркаптопурин, 5-фторурацил, цитарабин, гемцитабин), яды шпинделя (винбластин, винкристин, винорелбин), подофиллотоксины (этопозид, иринотекан, топотекан), антибиотики (доксорубицин, блеомицин, митомицин), нитрозомочевины (кармустин, ломустин), ингибиторы клеточного цикла (ингибиторы митотического кинезина KSP, CENP-E и ингибиторы CDK), ферменты (аспарагиназа), гормоны (тамоксифен, леупролид, флутамид, мегестрол, дексаметазон), антиангиогенные агенты (авастин и другие), моноклональные антитела (Белимумаб (BENLYSTA®), брентуксимаб (ADCETRIS®), цетуксимаб (ERBITUX®) гемтузумаб (MILOTARG®), ипилимумаб (YERVOY®), офатумумаб (ARZERRA®), панитумумаб (VECTIBIX®), ранибизумаб (LUCENTIS®) ритуксимаб (RITUXAN®), тозитумомаб (BEXXAR®), трастузумаб (HERCEPTIN®), ингибиторы киназы (иматиниб (GLEEVEC®)), сунитиниб (SUTENT®), сорафениб (NEXAVAR®), эрлотиниб (TARCEVA®), гефитиниб (IRESSA®), дазатиниб (SPRYCEL®), нилотиниб (TASIGNA®), лапатиниб (TYKERB®), кризотиниб (XALKORI®), руксолитиниб (JAKAFI®), вермурафениб (ZELBORAF®), вандетаниб (CAPRELSA®), пазопаниб (VOTRIENT®) и другие), и агенты, ингибирующие или активирующие раковые пути, такие как пути mTOR и ГИФ (гипоксия-индуцированный фактор) (например, эверолимус и темсиролимус) и другие. Чтобы узнать больше о современных методах лечения рака, см. http://www.nci.nih.gov/, перечень онкологических препаратов, одобренных Управлением по контролю за пищевыми продуктами и лекарственными средствами США см. http://www.fda.gov/cder/cancer/druglist-R^ame.htm и Справочник Мерка, Восемнадцатое изд. 2006, полное содержание которых включено в настоящее описание посредством ссылки.

[150] В другом варианте осуществления соединения, описанные здесь, могут быть объединены с цитотоксическими противораковыми агентами. Примеры таких агентов можно найти в 13-ом издании Справочника Мерка (2001). Эти агенты включают, но не ограничиваются, аспарагиназы, блеомицин, карбоплатин, кармустин, хлорамбуцил, цисплатин, коласпейс, циклофосфамид, цитарабин, дакарбазин, дактиномицин, даунорубицин, доксорубицин (адриамицин), эпирубицин, этопозид, 5-фторурацил, гексаметилмеламин, гидроксимочевина, ифосфамид, иринотекан, лейковорин, ломустин, мехлоретамин, 6-меркаптопурин, месна, метотрексат, митомицин С, митоксантрон, преднизолон, преднизон, прокарбазин, ралоксифен, стрептозоцин, тамоксифен, тиогуанин, топотекан, винбластин, винкристин и виндезин.

[151] Другие цитотоксические лекарственные средства, пригодные для использования с описанным соединением, включают, но не ограничиваются, те соединения, которые признаны пригодными для лечения опухолевых заболеваний, например, такие, что описаны в «Фармакологические основы терапии Гудмена и Гилмана» (Девятое изд., 1996 года, Макгроу-Хилл). Эти агенты включают, но не ограничиваясь, аминоглютетимид, 1-аспарагиназу, азатиоприн, 5-азацитидин кладрибин, бусульфан, диэтилстильбестрол, 2,2-дифлуородеоксицитидин, доцетаксел, эритрогидроксинониладенин, этинилэстрадиол, 5-флуородеоксиуридин, 5- флуородеоксиуридин монофосфат, флударабин фосфат, флюоксиместерон, флутамид, гидроксипрогестерон капроат, идарубицин, интерферон, медроксипрогестерон ацетат, мегестролацетат, мелфалан, митотан, паклитаксел, пентостатин, n-фосфоноацетил-1-аспартат (PALA), пликамицин, семустин, тенипозид, тестостерон пропионат, тиотепа, триметилмеламин, уридин и винорелбин.

[152] Другие цитотоксические противораковые агенты, пригодные для использования в сочетании с соединением, описанным в настоящем патенте, также включают недавно обнаруженные цитотоксические элементы, такие как оксалиплатин, гемцитабин, капецитабин, эпотилон и его природные или синтетические производные, темозоломид (Куинн и др., Журнал гинекологической онкологии, 2003, 21 (4), 646-651), тозитумомаб (BEXXAR®), трабектедин (Видаль и др., Материалы Американского общества клинической онкологии 2004, 23, аннотация 3181) и ингибиторы белка Eg5 веретена деления кинезина (Вуд и др., Общепринятое мнение в фармакологии, 2001, 1, 370-377).

[153] В другом варианте осуществления соединения, описанные в настоящем патенте, могут быть объединены с другими ингибиторами передачи сигнала. Некоторые неограничивающие примеры таких агентов включают препараты терапии антител, такие как трастузумаб (HERCEPTIN®), цетуксимаб (ERBITUX®), ипилимумаб (YERVOY®) и пертузумаб. Другие неограничивающие примеры таких терапевтических средств также включают низкомолекулярные ингибиторы киназы, такие как иматиниб (GLEEVEC®), сунитиниб (SUTENT®), сорафениб (NEXAVAR®), эрлотиниб (TARCEVA®), гефитиниб (IRESSA®), дазатиниб (SPRYCEL®), нилотиниб (TASIGNA®), лапатиниб (TYKERB®), кризотиниб (XALKORI®), руксолитиниб (JAKAFI®), вемурафениб (ZELBORAF®), вандетаниб (CAPRELSA®), пазопаниб (VOTRIENT®), афатиниб, алисертиб, амуватиниб, акситиниб, босутиниб, бриваниб, канертиниб, кабозантиниб, седираниб, креноланиб, дабрафениб, дакомитиниб, данусертиб, довитиниб, форетиниб, ганетеспиб, ибрутиниб, инипариб, ленватиниб, линифаниб, линситиниб, маситиниб, момелотиниб, мотезаниб, нератиниб, нирапариб, опрозомиб, олапариб, пиктилисиб, понатиниб, квизартиниб, регорафениб, ригосертиб, рукапариб, саракатиниб, саридегиб, тандутиниб, тасоцитиниб, телатиниб, тивантиниб, тивозаниб, тофацитиниб, траметиниб, ваталаниб, велипариб, висмодегиб, воласертиб, BMS-540215, BMS777607, JNJ38877605, TKI258, GDC-0941 (Фолькс и др., Журнал медицинской химии, 2008, 51:5522), BZE235 и другие.

[154] В другом варианте осуществления соединения, описанные в настоящем патенте, могут быть объединены с ингибиторами гистондеацетилазы. Некоторые неограничивающие примеры таких агентов включают субероиланилид гидроксамовой кислоты (SAHA), LAQ-824 (Оттманн и др. Материалы Американского общества клинической онкологии за 2004 год, 23, аннотация 3024), LBH-589 (Бек и др. Материалы Американского общества клинической онкологии за 2004 год, 23, аннотация 3025), MS-275 (Райан и др. Материалы Американской ассоциации исследований рака за 2004 год, 45, аннотация 2452), FR-901228 (Пьекарц и др. Материалы Американского общества клинической онкологии за 2004 год, 23, аннотация 3028) и MGCDOl 03 (US 6,897,220).

[155] В другом варианте осуществления соединения, описанные здесь, могут быть объединены с другими противораковыми агентами, такими как ингибиторы протеасом и ингибиторы mTOR. Они включают, но не ограничиваются, бортезомиб и CCI-779 (By и др. Материалы Американской ассоциации исследований рака за 2004 год, 45, аннотация 3849). Соединения, описанные в настоящей заявке, могут быть объединены с другими противораковыми агентами, такими как ингибиторы топоизомеразы, включая, но, не ограничиваясь, камптотецин.

[156] Эти дополнительные агенты могут вводиться отдельно от композиции, содержащей соединение, как часть режима многократного дозирования.

Кроме того, эти средства могут быть частью разовой лекарственной формы, смешанной вместе с соединением настоящего изобретения в единой композиции. При введении как части режима многократного дозирования два активных агента могут вводиться одновременно, последовательно или через некоторый период времени после приема первого, что должно привести к желаемому действию агентов.

[157] Количество как соединения, так и вспомогательного терапевтического агента (в тех композициях, которые содержат вспомогательный терапевтический агент, описанный выше), которые могут быть объединены с материалами-носителями для изготовления разовой лекарственной формы, будет отличаться в зависимости от пациента и конкретного способа введения. Как правило, количество вспомогательного терапевтического агента, присутствующего в композициях настоящего изобретения, должно быть не больше, чем количество, которое обычно вводится в композицию, содержащую данный терапевтический агент в качестве единственного активного агента. Предпочтительно, чтобы количество вспомогательного терапевтического агента в описанных в настоящей заявке композициях соответствовало диапазону примерно 50%-100% от количества агента, обычно присутствующего в композиции, содержащей его в качестве единственного терапевтически активного агента. В тех композициях, которые содержат вспомогательный терапевтический агент, и вспомогательный терапевтический агент, и соединение настоящего изобретения могут действовать синергически.

ПРИМЕНЕНИЕ СОЕДИНЕНИЙ И КОМПОЗИЦИЙ, РАСКРЫТЫХ В НАСТОЯЩЕЙ ЗАЯВКЕ

[158] Настоящее изобретение относится к фармацевтическим композициям, которые включают соединение формулы (I) или одно из соединений, перечисленных в таблице 1, и фармацевтически приемлемый носитель, адъювант или наполнитель. Количество соединения в композициях, раскрытых в настоящем описании, является эффективным для детектируемого ингибирования или моделирования протеинкиназы, например, PI3K- или mTOR-активности. Соединения, описанные здесь, являются пригодными в терапии как противоопухолевые препараты, а также могут свести к минимуму негативные эффекты PI3K- или mTOR-сигнализации.

[159] Соединения, описанные в данном документе, пригодны для, но не ограничиваются этим, профилактики или лечения пролиферативных заболеваний, состояний или нарушений у пациентов путем введения пациенту соединения или композиции, описанных в данном документе, в эффективном количестве. Такие заболевания, состояния или нарушения включают рак, особенно метастатический рак, атеросклероз и фиброз легких.

[160] Соединения, описанные в данном документе, пригодны для лечения новообразований, в том числе рака и метастазов, включая, но не ограничиваясь ими: карциномы, такие как рак мочевого пузыря, молочной железы, толстого кишечника, почек, печени, легких (в том числе мелкоклеточный рак легких), пищевода, желчного пузыря, яичников, поджелудочной железы, желудка, шейки матки, щитовидной железы, предстательной железы и кожи (включая плоскоклеточный рак); гемопоэтические опухоли лимфосистемы (включая лейкемию, острую лимфотическую лейкемию, острый лимфобластный лейкоз, В-клеточную лимфому, Т-клеточную лимфому, лимфому Ходжкина, неходжкинскую лимфому, волосатоклеточный лейкоз и лимфому Беркетта); гемопоэтические опухоли миелоидного ростка (в том числе острые и хронические миелогенные лейкимии, миелодиспластический синдром и промиелоцитарная лейкемия); опухоли мезенхимального происхождения (в том числе фибросаркома, рабдомиосаркома и другие саркомы, например, мягких тканей и костей); опухоли центральной и периферической нервной системы (в том числе астроцитома, нейробластома, глиома и шванномы); и другие опухоли (включая меланому, семиномы, тератокарциному, остеосаркому, пигментную ксеродерму, роговая кератома, фолликулярный рак щитовидной железы и саркому Капоши).

[161] Соединения также будут пригодны для лечения офтальмологических состояний, таких как отторжение трансплантата роговицы, глазная неоваскуляризация, неоваскуляризация сетчатки, включая неоваскуляризацию после травмы или инфекции, диабетическая ретинопатия, ретролентальная фиброплазия и неоваскулярная глаукома; ретинальная ишемия; кровоизлияния в стекловидное тело; язвенных заболеваний, таких как язва желудка; патологических, но не злокачественных опухолей, таких как гемангиомы, включая инфантильные гемангиомы, ангиофиброму носоглотки и асептический некроз кости; и нарушений женской репродуктивной системы, таких как эндометриоз. Соединения также пригодны для лечения отека и состояний проницаемости сосудистых стенок.

[162] Соединения, описанные в данном документе, также пригодны для лечения диабетических состояний, таких как диабетическая ретинопатия и микроангиопатии. Соединения, описанные в данном документе, также пригодны для уменьшения кровотока в опухоли у субъекта. Соединения, описанные в данном документе, также пригодны для снижения метастазирования опухоли у субъекта.

[163] Кроме того, что эти соединения пригодны для лечения человека, они также могут быть использованы в ветеринарии для лечения домашних животных, экзотических животных и сельскохозяйственных животных, включая млекопитающих, грызунов и т.п. Более всего соединение пригодно для таких животных, как лошади, собаки и кошки. В контексте настоящего описания, соединения, расктытые здесь, включают их фармацевтически приемлемые производные.

[164] В случае, если форма множественного числа используется в отношении соединений, солей и т.п., это также относится и к одному взятому соединению, соли и т.д.

[165] Способ лечения, который включает введение соединения или композиции, описанных в настоящей заявке, может дополнительно включать введение пациенту вспомогательного терапевтического агента (комбинированная терапия), выбранного из: химиотерапевтического или антипролиферативного агента, или противовоспалительного агента, отличающегося тем, что вспомогательный терапевтический агент является пригодным для лечения имеющегося заболевания и вводится совместно с соединением иди композицией, раскрытыми здесь, в виде единой лекарственной формы или отдельно от соединения или композиции как часть формы многократного дозирования. Вспомогательный терапевтический агент можно вводить одновременно в виде соединения, описанного здесь, или в другое время. В последнем случае, прием препарата может осуществляться в шахматном порядке, например, через 6 часов, 12 часов, 1 день, 2 дня, 3 дня, 1 неделя, 2 недели, 3 недели, 1 месяц или 2 месяца.

[166] Настоящее изобретение также относится к способу ингибирования роста клетки, которая генерирует PI3K или mTOR, что включает контактирование клетки с соединением или композицией, описанными в данном документе, тем самым вызывая ингибирование роста клетки. Примеры клеток, чей рост может быть ингибирован включают: раковые клетки молочной железы, клетки колоректального рака, раковые клетки легких, папиллярный рак, раковые клетки простаты, клетки лимфомы, раковые клетки толстой кишки, поджелудочной железы, раковые клетки яичника, раковые клетки шейки матки, раковые клетки центральной нервной системы, остеогенная саркома, раковые клетки почки, клетки гепатоцеллюлярной карциномы, раковые клетки мочевого пузыря, клетки карциномы желудка, плоскоклеточный рак головы и шеи, клетки меланомы или клетки лейкемии.

[167] Настоящее изобретение относится к способу ингибирования или модуляции активности PI3K или mTOR в биологическом образце, включающему контактирование биологического образца с соединением или композицией, раскрытым в настоящем документе. Термин «биологический образец», используемый здесь, означает образец вне живого организма и включает в себя, без ограничения, клеточные культуры или их экстракты; материал биопсии, полученный от млекопитающего, или его экстракты; и кровь, слюну, мочу, кал, сперму, слезы или другие жидкости тела или их экстракты. Ингибирование или модуляция активности киназы, в частности PI3K- или mTOR-активности, в биологическом образце применимо в различных целях, известных специалистам в данной области. Примеры таких целей включают, но не ограничиваются ими, переливание крови, трансплантацию органов, хранение биологических образцов и биологические анализы.

[168] В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения «эффективное количество» или «эффективная доза» соединения или фармацевтически приемлемой композиции означает количество, эффективное для лечения или уменьшения тяжести одного или более из указанных выше нарушений. Соединения и композиции, в соответствии со способом по настоящему изобретению, могут вводиться в любом количестве и с помощью любого пути введения, эффективного для лечения или уменьшения тяжести нарушения или заболевания. Точное необходимое количество, будет варьироваться от субъекта к субъекту, в зависимости от вида, возраста и общего состояния субъекта, тяжести инфекции, конкретного агента, способа его введения и т.д. Соединение или композицию также можно вводить с одним или несколькими другими терапевтическими агентами, как описано выше.

[169] Соединения настоящего изобретения или их фармацевтические композиции могут также использоваться для покрытия имплантируемых медицинских устройств, таких как протезы, искусственные клапаны, сосудистые трансплантаты, стенты и катетеры. Например, сосудистые стенты, применяются для преодоления рестеноза (повторного сужения стенок сосудов после повреждения). Однако пациенты, использующие стенты или другие имплантируемые устройства, имеют риск образования тромбов или активации тромбоцитов. Эти нежелательные эффекты можно предотвратить или смягчить путем предварительного покрытия устройства фармацевтически приемлемой композицией, содержащей соединение настоящего изобретения.

[170] Подходящие покрытия и общая подготовка покрытых имплантируемых устройств описаны в патентах США №№6,099,562; 5,886,026; и 5,304,121, содержание каждого из которых включено в настоящее описание посредством ссылки. Покрытия, как правило, представляют собой биосовместимые полимерные материалы, такие как гидрогель полимера, полиметилдисилоксан, поликапролактон, полиэтиленгликоль, полимолочная кислота, этиленвинилацетат и их смеси. Покрытия необязательно должны дополнительно покрываться подходящим верхним слоем фторсиликона, полисахаридов, полиэтиленгликоля, фосфолипидов или их комбинациями для придания композиции характеристик контролируемого высвобождения. Имплантируемые устройства, покрытые соединением настоящего изобретения, являются еще одним из вариантов осуществления настоящего изобретения. Соединения также могут быть нанесены на имплантируемые медицинские устройства, такие как шарики, или соединены с полимером или другой молекулой, чтобы обеспечить «лекарственное депо», таким образом, позволяя препарату высвобождаться в течение более длительного времени, чем при применении водного раствора препарата.

ОСНОВНОЙ МЕТОД СИНТЕЗА

[171] Для того чтобы проиллюстрировать изобретение, приведены следующие примеры метода. Тем не менее, следует понимать, что эти примеры не ограничивают изобретение и предназначены только для того, чтобы предложить способ практического применения изобретения.

[172] Как правило, соединения настоящего изобретения можно получить способами, описанными в данном документе, при котором заместители являются такими, как определено для формулы (I) выше, за исключением случаев, обозначенных далее. Следующие неограничивающие схемы и примеры представлены для дополнительной иллюстрации изобретения. Специалистам в данной области будет понятно, что химические реакции, описанные здесь, можно легко адаптировать для получения ряда других соединений, описанных в настоящем документе, а также в область настоящего изобретения входят альтернативные способы получения соединений по настоящему изобретению. Например, синтез не приведенных в примерах соединений согласно изобретению может быть успешно выполнен с помощью модификации, известной специалистам в данной области, например, с помощью надлежащей защиты интерферирующих групп, используя другие подходящие реагенты, известные в данной области, кроме тех, которые описаны, и/или путем обычной модификации условий реакции. Кроме того, другие реакции, раскрытые в настоящем описании или известные в данной области, считаются приемлемыми для получения других соединений, описанных здесь.

[173] В описанных ниже примерах, если не указано иное, все температурные показатели приведены в градусах Цельсия. Реагенты были приобретены у коммерческих поставщиков, таких как химическая компания «Алдрич» (Aldrich Chemical Company), химическая компания «Арко» (Arco Chemical Company) и химическая компания «Альфа» (Alfa Chemical Company), «Шанхай Медпеп Ко., Лтд.» (Shanghai Medpep Со Ltd), «Аладдин-Шанхай Джинчан Реагенте, Лтд.» (Aladdin-Shanghai Jinchun Reagents, Ltd), и были использованы без дополнительной очистки, если не указано иное. Обычные растворители были приобретены у коммерческих поставщиков, таких как химические заводы «Шаньтоу Ксилонг Кемикал Фектори» (Shantou XiLong Chemical Factory), «Гуандун Гуангуа Реагент Кемикал Фектори Ко. Лтд.» (Guangdong Guanghua Reagent Chemical Factory Co. Ltd), «Гуанчжоу Реагент Кемикал Фектори» (Guangzhou Reagent Chemical Factory), «Тайнджин ЮЮ Файн Кемикал Лтд. (Tainjin YuYu Fine Chemical Ltd.), Циндао Тенглонг Реагент Кемикал Лтд.» (Quingdao Tenglong Reagent Chemical Ltd.) и «Циндао Оушн Кемикал Фектори» (Quingdao Ocean Chemical Factory).

[174] Безводный ТГФ, диоксан, толуол и простой эфир получили путем нагревания с обратным холодильником растворителя с натрием. Безводный СН₂Сl₂ и СНCl₃ были получены путем нагревания с обратным холодильником растворителя с СаН₂. EtOAc, ПЭ, гексан, ДМА и ДМФ предварительно обработали безводным Na₂SO₄.

[175] Реакции, приведенные ниже, были проведены в основном под избыточным давлением азота или аргона или с осушительной трубкой (если не указано иное) в безводных растворителях, а реакционные колбы, как правило, были снабжены резиновыми перегородками для введения субстратов и реагентов с помощью шприца. Лабораторную посуду сушили в печи и/или при нагреве.

[176] Колоночную хроматографию проводили с использованием колонки с силикагелем. Силикагель (300-400 меш) был приобретен у «Циндао Оушн кемикал Фектори». Протонный магнитный резонанс регистрировали на спектрометре «Брукер» (Bruker) 400МГц или спектрометре «Брукер» (Bruker) 600МГц при температуре окружающей среды. Протонный магнитный резонанс был получен в растворах CDCl₃, DMSO-d6, CD₃OD или ацетон-d6 (в м.д.), с использованием ТМС (0 м.д.) или хлороформа (7,26 м.д.) в качестве эталонного стандарта. Для сообщения пиковой мультиплетности используются следующие аббревиатуры: s - с (синглет), d - д (дублет), t - т (триплет), m - м (мультиплет), br -шир (широкий), dd - дд (дублет дублетов), dt - дт (дублет триплетов). Константы взаимодействия приводятся в Герцах (Гц).

[177] Данные масс-спектров низкого разрешения (МС), в основном, были определены на квадруполе ВЭЖХ-МС «Аджилент» (Agilent) 6120 (Зорбакс SB-C₁8, 2,1×30 мм, 3,5 мкм, 6 минут запуска, скорость потока 0,6 мл/мин, от 5% до 95% (0,1% муравьиной кислоты в CH₃CN) в (0,1% муравьиной кислоты в Н20)) с УФ-детектированием при 210 нм / 254 нм и в режиме ионизации электрораспылением (РИЭ).

[178] Чистоту соединений оценивали с помощью прибора предварительной ВЭЖХ «Аджилент» (Agilent) 1260 или насоса предварительной ВЭЖХ «Калесеп» (Calesep) 250 (колонка «Новасеп» (NOVASEP)50/80 мм ЦАП) с УФ-детектированием при 210 нм / 254 нм.

[179] В описании используются следующие сокращения:

Ac₂O - ангидрит уксусной кислоты

BBr₃ - трибромид бора

BINAP - 2,2'-бис(дифенилфосфино) -1,1'-бинафтил

ВОС, Boc -бутоксикарбонил

BSA- бычий сывороточный альбумин

CDCl₃ - дейтерированный хлороформ

CHCl₃ - хлороформ

СН₂Сl₂, DCM - метиленхлорид

CH₃CN - ацетонитрил

CH₃SO₂Cl, MsCl - метансульфонилхлорид

Cs₂CO₃ - карбонат цезия

Cu - медь

Cul - кольцевой йодид меди

DAST - диэтиламиносульфотрифторид

DBU- 1,8-диаза-бицикло[5.4.0]-ундец-7-ен

DEAD - диметилазодикарбоксилат

DIAD - диизопропилазодикарбоксилат

DIB AL - диизобутилалюминийгидрид

DIEA, DIPEA- диизопропилэтиламин

DMAP - 4-диметиламинопиридин

DME - диметоксиэтан

DMF - диметилформамид

DMSO - диметилсульфоксид

DMSO-d6 - дейтерированный диметилсульфоксид

DPPA - дифенилфосфорилазид

EDCI - 1-(3-диметиламинопропил) -3-этилкарбодиимид гидрохлорид

EtOАc, EA - этилацетат

EtOH - этанол

Et₂O - диэтиловый эфир

Et₃N, TEA - триэтиламин

FBS - эмбриональная бычья сыворотка

Fe - железо

g - грамм

h - час

HATU -O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметилуроний гексафторфосфат

HBr - бромистоводородная кислота

HBTU - О -бензотриазол-1-ил-N,N,N',N'-тетраметилуроний гексафторфосфат

HCl - хлористоводородная кислота

Н₂ - водород

H₂O - вода

H₂O₂ - перекись водорода

НОАс, АсОН - уксусная кислота

HOBt - 1-гидроксибензотриазол гидрат

i-Pr₂NH - диизопропиламин

K₂CO₃ - карбонат калия

КОН - гидроксид калия

LiHMDS - бис(триметилсилил) амид лития

LDA - литийдиизопропиламид

МСРВА - мета-хлорпербензойная кислота

MeCN, CH₃CN - ацетонитрил

Mel - йодистый метил

МеОН, СН₃ОН - метанол

2-MeTHF - 2-метил тетрагидрофуран

MgSO₄- сульфат магния

MsCl - метансульфонилхлорид

mL, ml - миллилитр

min - минута

N₂ - азот

NaBH₄ - натрийборгидрид

NaBH₃CN - цианоборгидрид натрия

NaCl - хлористый натрий

NaClO₂ - хлорит натрия

NaH - гидрид натрия

Na₂CO₃ - карбонат натрия

NaHCO₃ - бикарбонат натрия

NaH₂PO₄ - бифосфат натрия

NaI - йодистый натрий

NaO(t-Bu) - трет-бутоксид натрия

NaOH - гидроокись натрия

Na₂SO₄ - сульфат натрия

NBS - N-бромсукцинимид

NIS - N-йодосукцинимид

NH₃ - аммиак

NH₄Cl - хлорид аммония

NMP - N-метилпирролидинон

PBS - фосфатный буферный солевой раствор

P(t-Bu)₃ - три(трет-бутил)фосфин

Pd/C - палладий на угле

Pd₂(dba)₃ - бис(дибензилиденацетон) палладий

Pd(dppf)Cl₂ - 1,1-бис(дифенилфосфино)ферроцен дихлорид

Pd(dppf)Cl₂'CH₂Cl₂ - дихлор[1,1'бис(дифенилфосфино)ферроцен]палладий (II) дихлорметан аддукт

Pd(OAc)₂ - ацетат палладия

Pd(OH)₂ - гидроксид палладия

Pd(PPh₃)₂Cl₂ - бис(трифенилфосфин)палладий (II) хлорид

РЕ - петролейный эфир (60-90°С)

РОСl₃ - оксихлорид фосфора

PCl₅ - хлорид фосфора (V)

РуВор - бензотриазол-1-ил- окситрипирролидинофосфоний гексафторфосфат

RT, rt, r.t., комн. темп.- комнатная температура

Rt - время удерживания

ТВАВ - тетрабутиламмонийбромид

TBAF - тетрабутиламмонийфторид

TBAHSO₄ - тетрабутиламмониевый сульфат водорода

TBTU - O-бензотриазол-1-ил-N,N,N',N'-тетраметилуроний тетрафторборат

TFA - трифторуксусная кислота

ТЕАС- бис(tetra-этиламмоний)карбонат

THF - тетрагидрофуран

μL, мкл - микролитр

X-Phos - 5-бром-4-хлор-3-индолилфосфат-п-Толуидиновая соль

[180] Типичные методы синтеза для подготовки соединений данного описания изложены ниже в следующих схемах. Если не указано иное, R¹, W₁, W₂, W₃, Y и Z имеют определения, изложенные выше в связи с формулой (I).

X' представляет собой Cl, Br или I.

Схема 1

[181] Некоторые соединения со структурами, как определено в формуле (I), можно получить, используя основной метод, как показано на схеме 1. Производное нитропиридина (1) преобразуют в аминопиридин (2) при восстановительных условиях, таких как гидрирование в присутствии катализатора порошка Pd/C или железа в водных кислых условиях. Аминопиридин (2) затем подвергают соединению с сульфонилхлоридом (3) с получением сульфонамида (4) в присутствии основания, такого как Na₂CO₃, Et3N или пиридин в апротонном растворителе (например, СН₂Сl₂, СНСl₃ и т.д.) или в пиридине с каталитическим количеством DMAP, или при условии Шоттена-Баумана. Последующее соединение сульфонамида (4) с бис(пинаколато)дибороном (5) в присутствии подходящего катализатора Pd приводит к образованию борного эфира (6).

[182] Синтез соединения (12) также представлен на схеме 1. Йодирование галогенсодержащего соединения (7) с N-йодсукцинимидом при комнатной температуре дает йодосоединение (8). Это соединение (8) затем подвергают сочетанию с соединением (9) (т.е. производными ацетилена, цианидом или азидом) с получением промежуточного продукта при основных условиях или в присутствии катализатора Pd. Необходимые ингибиторы киназы (12) получают путем сочетания соединения (10) с бороновым эфиром (6) в присутствии подходящего катализатора Pd (11).

Схема 2

[183] Кроме того, соединения, описанные в настоящей заявке, могут быть получены способом, описанным в схеме 2. Соединение (7) сначала сочетают с (хлорметиленом) хлоридом диметилиминиума (13) с получением альдегида (14). Соединение (14) конденсируют с гидрохлоридом гидроксиламина (15) с получением оксим (16), которые далее сочетают с ангидридом уксусной кислоты (17) с получением нитрил (18). Сочетание нитрил (18) с бороновым эфиром (6) в присутствии подходящего катализатора Pd (11) приводит к получению необходимых ингибиторов киназы (19).

Схема 3

[184] Схема 3 показывает другой способ получения ингибиторов киназы, раскрытых в данном документе. Сочетание галогенированного соединения (7) с бороновым эфиром (6) в присутствии подходящего катализатора Pd может дать соединение (20). Последующее йодирования соединения (20) с N-иодсукцинимидом может привести к получению соединения (21). Взаимодействие соединения (21) с соединением (9) (т.е. производных ацетилена, цианида и азида) при основных условиях или в присутствии катализатора Pd дает необходимые ингибиторы киназы (12).

ПРИМЕРЫ

Пример 1. 2,4-дифтор-N-(5-(3-(3-гидроксипроп-1-ин-1-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)-2-метоксипиридин-3-ил)бензолсульфонамид

Шаг 1) 5-бром-2-метокси-3-нитропиридин

[185] К раствору метилата натрия (0,52 г, 9,64 ммоль) в МеОН (10 мл) добавляли 5-бром-2-хлор-3-нитропиридина (0,57 г, 2,41 ммоль) при 0°С. Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 часа, затем нагревали до комнатной температуры и снова перемешивали в течение 18 часов. Смесь быстро охладили водой (20 мл), довели до рН 7 с помощью водн. HCl(3М) и затем отфильтровали. Органическую фазу отделили и концентрировали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде светло-желтого твердого вещества (0,4 г, 71,4%).

MS (ESI, положит. ион) м/з: 233.0 [М+Н]+;

¹Н NMR (400 МГц, CDCl3) δ (ppm): 3.93 (s, 3Н), 8.08 (s, 1H), 8.89 (s, 1H).

Шаг 2) 5-бром-2-метоксипиридин-3-амин

[186] К суспензии 5-бром-2-метокси-3-нитропиридина (0,4 г, 1,72 ммоль) в ЕtOН (5 мл) и H₂O (5 мл) добавили порошок железа (0,38 г, 6,87 ммоль) и NH₄Cl (0,39 г, 7,21 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником и перемешивали еще в течение 1 часа, после чего подвергли концентрированию в вакууме. Остаток разбавили этилацетатом (10 мл) и в завершение отфильтровали смесь через слой целита (CELITE®). Фильтрат экстрагировали этилацетатом (10 мл ×3). Объединенные органические фазы промыли солевым раствором (10 мл), высушили над безводным Na₂SO₄ и подвергли концентрированию вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества (0,30 г, 86%).

MS (ESI, положит. ион) м/з: 203.0 [М+Н]+;

¹Н NMR (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 3.92 (s, 3Н), 4.86 (s, 2Н), 7.03 (d, J=2.0 Гц, 1Н), 7.41 (d, J=2.0 Гц, 1H).

Шаг 3) N-(5-бром-2-метилпиридин-3-ил)-2,4-дифтор бензолсульфонамид

[187] К раствору 5-бром-2-метоксипиридин-3-амин (10,15 г, 50 ммоль) в пиридине (50 мл) медленно добавили хлорид 2,4-дифторбензол-1-сульфонил (11,68 г, 60 моль) при 0°С. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 19 ч и подвергли концентрированию в вакууме. Остаток растворили в MeOH (100 мл) и NaOH (2,50 г, 60 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 часов и подвергли концентрированию в вакууме. Остаток растворили в H₂O (50 мл) и в результате смесь экстрагировали, используя DCM (100 мл ×3). Объединенные органические фазы промыли рассолом (100 мл ×3), высушили над безводным Na₂SO₄ и подвергли концентрированию в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде коричневого твердого вещества (16,90 г, 89,1%).

MS (ESI, положит. ион) м/з: 379.0 [М+Н]+.

Шаг 4) 2,4-дифтор-N-(2-метокси-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил) пиридин-3-ил) бензолсульфонамид

[188] К суспензии N-(5-бром-2-метоксипиридин-3-ил)-2,4-дифтор бензол сульфонамид (16,90 г, 44,6 ммоль) в 1,4-диоксане (300 мл) добавили бис(пинаколато)диборон (13,59 г, 53,5 ммоль) с последующим добавлением Pd(dppf)Cl₂⋅CH₂Cl₂ (3,67 г, 4,5 ммоль) и ацетат калия (13,12 г, 133,8 ммоль). Реакционную смесь трижды дегазировали, используя N₂, затем нагрели до 90°С и перемешивали еще в течение 7 часов. После этого смесь охладили до комнатной температуры, используя H₂O (100 мл), и экстрагировали этилацетатом (500 мл ×3). Объединенные органические фазы промыли солевым раствором (500 мл ×3), высушили над безводным Na₂SO₄ и подвергли концентрированию в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого твердого вещества (24,00 г, 100%).

MS (ESI, полож. ион) м/з: 427.0 [М+Н]+.

¹Н NMR (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 8.25 (d, J=1.0 Гц, 1H), 8.04 (s, 1Н), 7.85 (m, 1H), 7.14 (s, 1H), 6.93 (m, 2Н), 3.91 (s, 3Н), 1.33 (s, 12Н).

Шаг 5) 5-хлор-3-иодопиразоло[1,5-а]пиримидин

[189] К раствору 5-хлор-пиразоло[1,5-а]пиримидин (200 мг, 1,30 ммоль) в ДМФА (DMF) (2 мл) добавили N-йодсукцинимид (322 мг, 1,86 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем разбавили этилацетатом (100 мл) и промыли Н₂O (50 мл), насыщенным водным раствором Na₂S₂O₃ (50 мл) и насыщенным раствором соли (50 мл). Отделенную органическую фазу высушили над безводным Na₂SO₄ и подвергли концентрированию в вакууме. Остаток очистили с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (EtOAc / РЕ (об/об)=1/4) с получением указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого твердого вещества (390 мг, 100%).

MS (ESI, полож. ион) м/з: 279.9 [М+Н]+.

¹Н NMR (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 8.57 (d, J=7.2 Гц, 1H), 8.16 (s, 1Н), 6.86 (d, J=7.2 Гц, 1H).

Шаг 6) 3- (5-хлор-пиразоло[1,5-а]пиридин-3-ил) проп-2-ин-1-ол

[190] К суспензии 5-хлор-3-йод-пиразоло[1,5-а]пиримидин (363 мг, 1,30 ммоль), Pd(PPh₃)₂Cl₂ (91 мг, 0,13 ммоль), CuI (25 мг, 0,13 ммоль) и триэтиламин (658 мг, 6,50 ммоль) в ДМФ (15 мл) добавили проп-2-ин-1-ол (73 мг, 1,30 ммоль). Реакционную смесь трижды дегазировали, используя N₂, и перемешивали при комнатной температуре в течение 20 часов, затем быстро охладили H₂O (15 мл) и экстрагировали этилацетатом (50 мл ×3). Объединенные органические фазы промыли рассолом (50 мл ×3), высушили над безводным Na₂SO₄ и подвергли концентрированию в вакууме. Остаток очистили с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (EtOAc / РЕ (об/об)=1/2) с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества (220 мг, 81,5%).

MS (ESI, полож. ион) м/з: 208.0 [M+H]+.

¹Н NMR (400 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 8.58 (d, J=7.4 Гц, 1Н), 8.23 (s, 1Н), 6.90 (d, J=7.2 Гц, 1H), 4.58 (s, 2Н).

Шаг 7) 2,4-дифтор-N-(5-(3-(3-гидроксипроп-1-ин-1-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил) -2-метоксипиридин-3-ил) бензолсульфонамид

[191] К суспензии 3-(5-хлорпиразоло[1,5-а]пиримидин-3-ил) проп-2-ин-1-ол (208 мг, 1 ммоль), 2,4-дифтор-N-(2-метокси-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-3-ил) бензолсульфонамид (618 мг, 1,5 ммоль) и Pd(dppf) Cl₂⋅CH₂Cl₂ (82 мг, 0,1 ммоль) в DME (20 мл) добавили раствор Na₂CO₃ (318 мг, 3 ммоль) в H₂O (2,5 мл). Реакционную смесь трижды дегазировали, используя N₂, а затем нагрели до 100°С и перемешивали еще в течение 5 часов. После этого смесь довели до комнатной температуры, быстро охладили H₂O (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (500 мл ×3). Объединенные органические фазы промыли рассолом (50 мл ×3), высушили над безводным Na₂SO₄ и подвергли концентрированию в вакууме. Остаток очистили с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (EtOAc / РЕ (об/об)=1/2) с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества (80 мг, 17%).

MS (ESI, полож. ион) м/з: 472.0 [М+Н]⁺;

¹Н NMR (400 МГц, DMSO-d6) δ (ppm): 10.46 (s, 1H), 9.23 (d, J=7.4 Гц, 1Н), 8.88 (d, J=1.7 Гц, 1H), 8.42 (d, J=2.1 Гц, 1Н), 8.41 (s, 1Н), 7.82 (dd, J=8.4, 6.2 Гц, 1H), 7.76 (d, J=7.5 Гц, 1H), 7.59 (td, J=10.0, 2.2 Гц, 1Н), 7.24 (td, J=8.6, 2.0 Гц, 1Н), 5.38 (t, J=5.9 Гц, 1H), 4.41 (d, J=5.9 Гц, 2Н), 3.72 (s, 3Н).

Пример 2. N-(5-(3-цианопиразоло[1,5-а] пиримидин-5-ил)-2-метоксипиридин-3-ил)-2,4-дифтор бензолсульфонамид

Шаг 1) 5-хлор-пиразоло[1,5-а]пиридин-3-карбальдегида

[192] К раствору 5-хлор-пиразоло[1,5-а]пиримидин (295 мг, 1,92 ммоль) в DCM (10 мл) добавили (хлорметилен)диметилиминиум хлорид (1,06 г, 6 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 45°С в течение ночи и подвергли концентрированию в вакууме. Остаток растворили в насыщенном водном растворе NaHCO₃ (50 мл), после чего смесь экстрагировали этилацетатом (50 мл ×3). Объединенные органические фазы высушили над безводным Na₂SO₄ и подвергли концентрированию в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде светло-желтого твердого вещества (380 мг, 100%).

MS (ESI, полож. ион) м/з: 182.2 [М+Н]+.

Шаг 2) (E)-5-хлор-пиразоло[1,5-а1пиримидин-3-карбальдегид оксим

[193] К суспензии 5-хлор-пиразоло[1,5-а] пиримидин-3-карбальдегид (380 мг, 2,1 ммоль) в этаноле (20 мл) и H₂O (10 мл) добавили гидрохлорид гидроксиламина (220 мг, 3,15 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 85°С в течение 2 часов, а затем подвергли концентрированию в вакууме. Остаток довели до рН 7 с помощью насыщенного водного раствора NaHCO₃. Полученную смесь отфильтровали и высушили осадок на фильтре в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества (280 мг, 74,4%).

MS (ESI, полож. ион) м/з: 197.1 [M+H]+.

Шаг 3) 5-хлор-пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбонитрила

[194] Раствор (Е)-5-хлор-пиразоло[1,5-а] пиримидин-3-карбальдегида (280 мг, 1,42 ммоль) в AC₂O (20 мл) перемешивали при 140°С в течение 18 часов, после чего охладили до комнатной температуры и подвергли концентрированию в вакууме. Остаток промыли, используя Et2O (20 мл), с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества (106 мг, 42%).

MS (ESI, полож. ион) м/з: 179.1 [М+Н]+.

Шаг 4) N-(5-(3-цианопиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)-2-метоксипиридин-3-ил)-2,4-дифтор бензолсульфонамид

[195] 2,4-дифтор-N-(2-метокси-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил) пиридин-3-ил) бензол сульфонамид (383 мг, 0,9 ммоль), 5-хлор-пиразоло[1,5-а]пиримидин-3-карбонитрил (106 мг, 0,6 ммоль), Pd(dppf)Cl₂⋅CH₂Cl₂ (49 мг, 0,06 ммоль) и Na₂CO₃ (254 мг, 2,5 ммоль) поместили в двухгорлую колбу, после чего трижды дегазиоровали, используя N2, с последующим добавлением 1,4-диоксана (12 мл) и воды (2 мл). Затем смесь снова трижды дегазировали, используя N₂, нагрели до 90°С и перемешивали еще в течение 5 часов. После этого смесь охладили до комнатной температуры и отфильтровали. Полученный фильтрат подвергли концентрированию в вакууме и очистили остаток с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (ПЭ/EtOAc(об/об)=4/3) с получением указанного в заголовке соединения в виде светло-желтого твердого вещества (200 мг, 75,3%).

ВЭЖХ: 97%

MS (ESI, полож. ион) м/з: 443.2 [М+Н]+;

¹H NMR (400 МГц, DMSO-d6) δ (ppm): 10.51 (s, 1H), 9.41 (d, J=7.4 Гц, 1H), 8.93 (d, J=2.1 Гц, 1H), 8.81 (s, 1H), 8.45 (d, J=2.2 Гц, 1H), 7.99 (d, J=7.5 Гц, 1H), 7.85-7.78 (m, 1H), 7.61-7.52 (m, 1H), 7.25 (t, J=8.4 Гц, 1H), 3.77 (s, 3H).

Пример 3. N-(5-(3-цианопиразоло[1,5-а]пиридин-5-ил)-2-метоксипиридин-3-ил)-2,4-дифтор бензолсульфонамид

Шаг 1) 5-бром-пиразоло[1,5-а]пиридина

[196] Раствор этил-5-бром-пиразоло[1,5-а]пиридин-3-карбоновой кислоты (240 мг, 0,89 ммоль) в 40% H₂SO₄ (12 мл) перемешивали при 100°С в течение 4 часов, после чего охладили до комнатной температуры и нейтрализовали до рН 7 с помощью водн. NaOH (6 М) на бане со льдом. Полученную смесь экстрагировали DCM (25 мл ×2). Объединенные органические фазы высушили над безводным Na₂SO₄ и подвергли концентрированию в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде светло-желтого твердого вещества (175 мг, 99,5%).

MS (ESI, полож. ион) м/з: 196.9 [М+Н]+.

Шаг 2) 5-бром-пиразоло[1,5-а]пиридин-3-карбальдегида

[197] К раствору 5-бром-пиразоло[1,5-а]пиридина (175 мг, 0,89 ммоль) в DCM (6 мл) добавили (хлорметилен)хлорид диметилиминиума (632 мг, 3,56 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 44°С в течение ночи и подвергли концентрированию в вакууме. Затем остаток растворили в насыщенном водном растворе NaHCO₃ (25 мл) и экстрагировали полученную смесь этилацетатом (25 мл ×3). Объединенные органические фазы высушили над безводным Na₂SO₄ и подвергли концентрированию в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде светло-желтого твердого вещества (225 мг, 100%).

MS (ESI, полож. ион) м/з: 225.0 [М+Н]+.

Шаг 3) (Е)-5-бром-пиразоло[1,5-а]пиридин-3-карбальдегид оксим

[198] К суспензии 5-бром-пиразоло[1,5-а]пиридин-3-карбальдегида (225 мг, 1 ммоль) в EtOH (10 мл) и H₂O (5 мл) добавили гидрохлорид гидроксиламина (104 мг, 1,5 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 85°С в течение 2 часов, после чего охладили до комнатной температуры и подвергли концентрированию в вакууме. Остаток довели до рН7 с помощью насыщенного водного раствора NaHCO₃. Затем полученную смесь отфильтровали и высушили осадок на фильтре в вакууме с получением целевого соединения в виде желтого твердого вещества (240 мг, 99%).

MS (ESI, полож. ион) м/з: 240.0 [М+Н]+.

Шаг 4) 5-бром-пиразоло[1,5-а]пиридин-3-карбонитрил

[199] Раствор (E)-5-бром-пиразоло[1,5-а]пиридин-3-карбальдегида оксим (240 мг, 1 ммоль) в Ac₂O (6 мл) перемешивали при 140°С в течение 18 часов, после чего охладили до комнатной температуры и подвергли концентрированию в вакууме. Остаток промыли, используя Et₂O (1 мл), с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества (44 мг, 22,5%).

MS (ESI, полож. ион) м/з: 222.0 [М+Н]+.

Шаг 5) N-(5-(3-цианопиразоло[1,5-а]пиридин-5-ил)-2-метоксипиридин-3-ил)-2,4-дифтор бензолсульфонамид

[200] 2,4-дифтор-N-(2-метокси-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2- ил)пиридин-3-ил) бензол сульфонамид (612 мг, 1,5 ммоль), 5-бром-пиразоло[1,5-а]пиридин-3-карбонитрил (222 мг, 1 ммоль), Pd(dppf)Cl₁⋅CH₂Cl₂ (16 мг, 0,02 ммоль) и Na₂CO₃ (85 мг, 0,8 ммоль) поместили в двухгорлую колбу, после чего трижды дегазировали, используя N₂, с последующим добавлением 1,4-диоксана (5 мл) и воды (1 мл). Полученную смесь снова трижды дегазировали, используя N2, затем нагрели до 90°С и перемешивали еще в течение 5 часов. После этого смесь охладили до комнатной температуры и отфильтровали. Фильтрат подвергли концентрированию в вакууме, и очистили остаток с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (ПЭ/ EtOAc (об/об)=1/2) с получением указанного в заголовке соединения в виде светло-желтого твердого вещества (400 мг, 81,6%).

MS (ESI, полож. ион) м/з: 442.0 [М+Н]+;

¹Н NMR (400 МГц, DMSO-d6) δ (ppm): 10.37 (s, 1Н), 9.02 (d, J=7.2 Гц, 1Н), 8.67 (s, 1H), 8.60 (d, J=2.2 Гц, 1Н), 8.26-8.16 (m, 2Н), 7.82-7.72 (т, 1H), 7.57 (dd, J=13.2, 5.8 Гц, 2Н), 7.21 (t, J=8.5 Гц, 1H), 3.67 (s, 3Н).

Пример 4. 2,4-дифтор-N-(5-(3-(3-гидроксипроп-1-ин-1-ил) пиразоло[1,5-а]пиридин-5-ил)-2-метоксипиридин-3-ил)бензол сульфонамид

Шаг 1) 5-бром-пиразоло[1,5-а]пиридина

[201] Раствор этил-5-бром-пиразоло[1,5-а]пиридин-3-карбоновой кислоты (1,2 г, 4,46 ммоль) в 40% H₂SO₄ (60 мл) перемешивали при 100°С в течение 4 часов, затем охладили до комнатной температуры и нейтрализовали до рН7 с помощью водн. NaOH (6М) на бане со льдом. Полученную смесь экстрагировали DCM (120 мл ×2). Объединенные органические фазы высушили над безводным Na₂SO₄ и подвергли концентрированию в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде светло-желтого твердого вещества (900 мг, 100%).

MS (ESI, полож. ион) м/з: 196.9 [М+Н]+.

Шаг 2) 5-бром-3-иод-пиразоло [1,5-а]пиридина

[202] К раствору 5-бром-пиразоло[1,5-а]пиридина (900 мг, 4,46 ммоль) в метаноле (100 мл) медленно добавляли N-йодсукцинимид (1 г, 4,46 ммоль) при минус 10°С. Смесь перемешивали при минус 10°С в течение 0,5 ч, после чего нагрели до комнатной температуры и перемешивали еще в течение 18 часов. Затем смесь подвергли концентрированию в вакууме и растворили остаток в ДХМ (200 мл). Полученную смесь промыли насыщенным водным раствором Na₂S₂O₃ (200 мл). Отделенную органическую фазу подвергли концентрированию в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде светло-розового твердого вещества (1,4 г, 97,5%).

MS (ESI, полож. ион) м/з: 322.8 [М+Н]+.

Шаг 3) 3-(5-бром-пиразоло[1,5-а]пиридин-3-ил) проп-2-ин-1-ол

[203] Смесь 5-бром-3-иод-пиразоло[1,5-а]пиридина (644 мг, 2 ммоль), проп-2-ин-1-ол (112 мг, 2 ммоль), Pd(PPH₃)₂Cl₂ (140 мг, 0,2 ммоль), CuI (38 мг, 0,2 ммоль) и диизопропилэтиламина (645 мг, 5 ммоль) в DMF (32 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере с высоким содержанием газообразного N2 в течение 3 часов, после чего разбавили с H₂O (200 мл) и экстрагировали этилацетатом (200 мл ×3). Объединенные органические фазы высушили над безводным Na₂SO₄, подвергли концентрированию в вакууме и очистили остаток с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (чистый DCM) с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества (200 мг, 4%).

MS (ESI, полож. ион) м/з: 251.0 [M+H]+.

Шаг 4) 2,4-дифтор-N-(5-(3-(3-гидроксипроп-1-ин-1-ил)пиразоло[1,5-а]пиридин-5-ил)-2-метоксипиридин-3-ил)бензолсульфонамид

[204] 2,4-дифтор-N-(2-метокси-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-3-ил)бензол сульфонамид (509 мг, 1,2 ммоль), 3-(5-бром-пиразоло[1,5-а]пиридин-3-ил) проп-2-ин-1-ол (200 мг, 0,8 ммоль), Pd (DPPF) Cl₂⋅CH₂Cl₂ (65 мг, 0,08 ммоль) и Na₂CO₃ (339 мг, 3,2 ммоль) помещали в двухгорловую колбу и трижды дегазировали полученную смесь, используя N2, с последующим добавлением 1,4-диоксана (15 мл) и воды (2,5 мл). Затем полученную смесь снова трижды дегазировали, используя N2. Смесь нагрели до 90°С и перемешивали еще в течение 5 часов, после чего охладили до комнатной температуры и отфильтровали. Фильтрат подвергли концентрированию в вакууме и очистили остаток с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (ПЭ / EtOAc (об/об)=3/1) с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (122 мг, 32,5%).

ВЭЖХ: 91%.

MS (ESI, полож. ион) м/з: 471.0 [М+Н]+;

¹H NMR (400 МГц, DMSO-d6) δ (ppm): 10.37 (s, 1Н), 8.83 (d, J=7.2 Гц, 1H), 8.53 (d, J=2.3 Гц, 1H), 8.23 (s, 1H), 8.05 (d, J=2.3 Гц, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.77 (dd, J=14.8, 8.5 Гц, 1H), 7.59 (dd, J=13.9, 5.9 Гц, 1H), 7.33 (dd, J=7.3, 1.9 Гц, 1H), 7.22 (t, J=8.4 Гц, 1H), 5.33 (t, J=5.9 Гц, 1H), 4.39 (d, J=5.8 Гц, 2H), 3.67 (s, 3H).

Пример 5. 2,4-дифтор-N-(5-(3-(3-гидроксибут-1-ин-1-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)-2-метоксипиридин-3-ил)бензол сульфонамид

Шаг 1) 2,4-дифтор-N-(2-метокси-5-(пиразол[1,5-а]пиримидин-5-ил)пиридин-3-ил) бензол сульфонамид

[205] К смеси 5-хлор-пиразоло[1,5-а]пиримидин (0,46 г, 3,0 ммоль) в 60 мл DME добавили Pd(dppf)₂Cl₂⋅CH₂Cl₂ (0,25 г, 0,3 ммоль) и раствор карбонат натрия (0,95 г, 9,0 ммоль) в воде (8 мл). Смесь продули азотом несколько раз и затем перемешивали при комнатной температуре в течение некоторого времени. К полученному раствору добавили 2,4-дифтор-N-(2-метокси-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил) пиридин-3-ил) бензол сульфонамид (1,53 г, 3,6 ммоль). Смесь снова продули азотома и перемешивали при 100°С в течение 6 часов, после чего охладили до комнатной температуры и подвергли концентрированию в вакууме. Остаток очистили с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (DCM/MeOH (об/об)=20/1) с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества (1,24 г, 100%).

MS (ESI, полож. ион) м/з: 418.2 [М+Н]+.

Шаг 2) 2,4-дифтор-N-(5-(3-иод-пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)-2-метоксипиридин-3-ил) бензол сульфонамид

[206] К раствору 2,4-дифтор-N-(2-метокси-5- (пиразол[1,5-а]пиримидин-5-ил) пиридин-3-ил) бензолсульфонамида (1,98 г, 10,0 ммоль) в метаноле (50 мл) добавили N-йодсукцинимид (2,47 г, 11,0 ммоль) порциями при комнатной температуре. Смесь перемешивали при 45°С в течение 10 часов, после чего подвергли концентрированию в вакууме и разбавили остаток в H₂O (40 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов, затем отфильтровали и разбавили собранное твердое вещество с EtOAc/РЕ (40 мл/ 4 мл). Полученную суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа, после чего отфильтровали с получением указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого твердого вещества (1,05 г, 80,57%).

MS (ESI, полож. ион) м/з: 544.0 [М+Н]+;

Шаг 3) 2,4-дифтор-N-(5-(3-(3-гидроксибут-1-ин-1-ил) пиразоло [1,5-а]пиримидин-5-ил)-2-метоксипиридин-3-ил)бензол сульфонамид

[207] К суспензии 2,4-дифтор-N-(5-(3-иод-пиразоло [1,5-а]пиримидин-5-ил) -2- метилпиридин-3-ил) бензол сульфонамида (2,32 г, 4,27 ммоль), Pd(PPh₃)₂Cl₂ (0,31 г, 0,43 ммоль) и CuI (82 мг, 0,43 ммоль) в 15 мл ДМФА добавили триэтиламин (2,15 г, 21,3 ммоль). После продувки смеси азотом несколько раз добавили бут-3-ин-2-ол (1,08 г, 15,4 ммоль) с помощью шприца. Смесь перемешивали при 50°С в атмосфере N2 в течение 6 часов, затем охладили водой (40 мл) и затем полученную смесь перемешивали в течение 1 часа. Фильтр и осадок на фильтре очистили с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (EtOAc/РЕ (об/об)=1/2) с получением неочищенного продукта, который разбавили смесью DCM/MeOH/PE (15 мл/3 мл/65 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов, после чего отфильтровали с получением указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого твердого вещества (1,01 г, 48,77%).

MS (ESI, отр. ион) м/з: 484.1 [М-Н]-;

¹Н NMR (600 МГцг, DMSO-d6) δ (ppm): 10.45 (s, 1Н), 9.21 (d, J=7.4 Hz, 1Н), 8.88 (d, J=2.0 Гц, 1H), 8.44 (d, J=2.0 Гц, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.80 (dd, J=14.8, 8.4 Гц, 1H), 7.75 (d, J=7.4 Гц, 1H), 7.58 (t, J=8.8 Гц, 1H), 7.23 (t, J=7.4 Гц, 1H), 4.69 (dd, J=13.1, 6.5 Гц, 1H), 3.72 (s, 3H), 1.45 (d, J=6.6 Гц, 3Н).

Пример 6. 2,4-дифтор-N-(5-(3-(3-гидрокси-3-метилбут-1-ин-1-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)-2-метоксиперидин-3-ил)бензол сульфонамид

[208] К смеси 2,4-дифтор-N-(5-(3-иод-пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)-2-метилпиридин-3-ил)бензолсульфонамид (1,05 г, 1,93 ммоль), Pd(PPh₃)₂Cl₂ (0,136 г, 0,19 ммоль) и CuI (37 мг, 0,19 ммоль) в 5 мл DMF добавили диизопропилэтиламин (0,98 г, 7,60 ммоль). После продувки смеси азотом несколько раз добавили 2-метилбут-3-ин-2-ол с помощью шприца (0,49 г, 5,79 ммоль). Смесь перемешивали при 50°С в течение 4 часов в атмосфере N₂. Затем реакционную смесь подвергли концентрированию в вакууме и охладили водой (25 мл). Полученную смесь перемешивали в течение 1 часа и отфильтровали. Собранное твердое вещество очистили с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (РЕ/ЕtOАс (об/об)=3/1) с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества (520 мг, 53,99%).

MS (ESI, отр. ион) м/з: 498.0 [М-Н]-.

ВЭЖХ: 96.74%

¹Н NMR (600 МГц, DMSO-d6) δ (ppm): 10.45 (s, 1H), 9.22 (d, J=7.4 Гц, 1H), 8.89 (d, J=1.8 Гц, 1H), 8.48 (d, J=2.1 Гц, 1Н), 8.36 (s, 1Н), 7.80 (dd, J=14.8, 8.5 Гц, 1H), 7.76 (d, J=7.4 Гц, 1Н), 7.65-7.53 (m, 1Н), 7.24 (td, J=8.5, 2.3 Гц, 1H), 5.52 (s, 1Н), 3.74 (s, 3Н), 1.54 (s, 6Н).

Пример 7. 2,4-дифтор-N-(2-метокси-5-(3-(проп-1-ин-1-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)пиридин-3-ил)бензол сульфонамид

[209] К смеси 2,4-дифтор-N-(5-(3-иод-пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)-2-метилпиридин-3-ил) бензолсульфонамид (1,50 г, 2,76 ммоль), Pd(PPh₃)₂Cl₂ (0,189 г, 0,27 ммоль) и CuI (52 мг, 0,27 ммоль) в DMF (20 мл) добавили диизопропилэтиламин (1,78 г, 13,8 ммоль). После продуски смеси азотом несколько раз добавили пропин (0,44 г, 11,04 ммоль) с помощью шприца. Смесь перемешивали при 45°С в течение 10 часов в атмосфере N₂, после чего подвергли концентрированию в вакууме и охладили водой (40 мл). Полученную смесь перемешивали в течение 1 часа, затем отфильтровали и очистили собранное твердое вещество с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (DCM/MeOH (об/об)=300/1) с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества (220 мг 17,52%).

MS (ESI, полож. ион) м/з: 456.1 [М+Н]+;

¹Н NMR (600 МГц, DMSO-d6) δ (ppm): 10.46 (s, 1H), 9.18 (d, J=7.3 Гц, 1H), 8.86 (s, 1H), 8.41 (s, 1Н), 8.34 (s, 1H), 7.78 (dd, J=14.6, 8.0 Гц, 1H), 7.72 (d, J=7.3 Гц, 1Н), 7.58 (t, J=9.1 Гц, 1Н), 7.21 (t, J=7.6 Гц, 1Н), 3.71 (s, 3Н), 2.14 (s, 3Н).

Пример 8. 2,4-дифтор-N-(5-(3-(3-гидрокси-3-метилбут-1-ин-1-ил)пиразоло[1,5-а]пиридин-5-ил)-2-метоксиперидин-3-ил)бензолсульфонамид

Шаг 1) 2,4-дифтор-N-(2-метокси-5-(пиразоло[1,5-а]пиридин-5-ил)пиридин-3-ил)бензолсульфонамид

[210] Смесь 5-бром-пиразоло[1,5-а]пиридина (197 мг, 1 ммоль), 2,4-дифтор-N-(2-метокси-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил) пиридин-3-ил) бензол-сульфонамид (639 мг, 1,5 ммоль), Na₂CO₃ (318 мг, 3,0 ммоль) и Pd(PPh₃)₂Cl₂ (35 мг, 0,05 ммоль) в 1,4-диоксане / H₂O (5 мл/1 мл) перемешивали при 90°С в атмосфере азота с контролем реакционной смеси посредством ТСХ. После завершения реакции реакционную смесь охладили до комнатной температуры и экстрагировали, используя диэтиловый эфир (10 мл). Органическую фазу промыли рассолом (10 мл ×2), высушили над безводным сульфатом натрия и подвергли концентрированию в вакууме. Затем очистили остаток с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (РЕ/EtOAc (об/об)=30/1), с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (303 мг, 73%).

MS (ESI, полож. ион) м/з: 416.9 [М+Н]+.

Шаг 2) 2,4-дифтор-N-(5-(3-йодопиразоло[1,5-а]пиридин-5-ил)-2-метоксипиридин-3-ил)бензолсульфонамид

[211] К раствору 2,4-дифтор-N-(2-метокси-5- (пиразоло[1,5-а]пиридин-5-ил) пиридин-3-ил)бензол сульфонамид (2,3 г, 5,52 ммоль) в DMF (10 мл) добавляли N-йодсукцинимид (1,3 г, 5,8 ммоль) порциями при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1,0 ч, после чего охладили водным раствором Na₂S₂O₃ (10 мл) и отфильтровали данную смесь с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (2,87 г, 96%).

MS (ESI, полож. ион) м/з: 542.9 [М+Н]+;

¹Н NMR (600 МГц, CDCl3) δ (ppm): 8.52 (d, J=7.2 Гц, 1Н), 8.19 (d, J=2.2, 1Н), 8.03-7.98 (m, 2H), 7.97-7.91 (m, 1H) 7.49 (d, J=1.0 Гц, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.05-6.91 (m, 2H), 4.00 (s, 3H), 2.80 (s, 1H).

Шаг 3) 2,4-дифтор-N-(5-(3-(3-гидрокси-3-метилбут-1-ин-1-ил)пиразоло[1,5-а]пиридин-5-ил)-2-метоксипиридин-3-ил) бензол-сульфонамид

[212] Смесь 2,4-дифтор-N-(5-(3-иод-пиразоло[1,5-а]пиридин-5-ил)-2-метилпиридин-3-ил)бензолсульфонамид (1,0 г, 1,85 ммоль), 2-метилбут-3-ин-2-ол (0,23 г, 2,76 ммоль), Pd(PPh₃)₂Cl₂ (0,13 г, 0,19 ммоль), CuI (36 мг, 0,19 ммоль) и диизопропилэтиламин (0,74 г, 0,57 ммоль) в DMF (20 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов в атмосфере N₂. Затем смесь подвергли концентрированию в вакууме и очистили остаток с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (PE/EtOAc (об/об)=10/1) с получением указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого твердого вещества (0,42 г, 46%).

MS (ESI, полож. ион) м/з: 499.0 [М+Н]+;

¹Н NMR (600 МГц, CDCl3) δ (ppm): 8.52 (d, J=6.1 Гц, 1Н), 8.20 (d, J=2.1 Гц, 1Н), 8.08 (s, 1H), 8.03 (d, J=2.1 Гц, 1H), 7.92 (dd, J=14.5, 8.3 Гц, 1H), 7.68 (s, 1Н), 7.59-7.52 (m, 1H), 7.51-7.42 (m, 1Н), 7.05-6.94 (m, 2Н), 4.00 (s, 3Н), 1.60 (s, 6Н).

Пример 9. N-(5-(3-цианопиразоло[1,5-а]пиридин-5-ил)-2-метоксипиридин-3-ил)циклопропансульфонамид

[213] К раствору 5-бром-пиразоло[1,5-а]пиридин-3-карбонитрила (50 мг, 0,225 ммоль) в 1,4-диоксане (5 мл) и воде (0,5 мл) добавили N-(2-метокси-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил) пиридин-3-ил) циклопропан-сульфонамид (96 мг, 0,270 ммоль), Na₂CO₃ (48 мг, 0,45 ммоль) и Pd(dppf)Cl₂⋅CH₂Cl₂ (37 мг, 0,045 ммоль) в атмосфере N₂. Реакционную смесь перемешивали при 90°С в течение 3,5 ч в атмосфере N₂, после чего охладили до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Затем смесь разбавили с помощью EtOAc (30 мл), отфильтровали через слой целита (СELIТЕ®) и промыли осадок на фильтре, используя EtOAc (20 мл). После этого промыли фильтрат, используя Н₂O (30 мл) и рассол (30 мл). Затем высушили отделенную органическую фазу над безводным Na₂SO₄ и подвергли концентрированию в вакууме. Остаток очистили с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (DCM/EtOAc (об/об)=10/1) с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (55 мг, 66%).

MS (ESI, полож. ион) м/з: 370.0 [М+Н]+;

¹Н NMR (300 МГц, CDCl3) δ (ppm): 8.61 (d, J=7.26 Гц, 1Н), 8.27-8.25 (m, 2Н), 8.09 (d, J=2.07 Гц, 1Н), 7.87 (s, 1H), 7.21 (dd, J=1.77, 7.35 Гц, 1Н), 6.80 (br s, 1Н), 4.11 (s, 3Н), 2.60-2.51 (m, 1H), 1.33-1.22 (m, 2Н), 1.07-0.99 (m, 2Н).

Пример 10. N-(5-(3-цианопиразоло[1,5-а]пиридин-5-ил)-2-метоксипиридин-3-ил)-2,2,2-трифторэтансульфонамид

Шаг 1) N-(5-бром-2-метоксипиридин-3-ил)-2,2,2-трифтор этансульфонамид

[214] К раствору 5-бром-2-метоксипиридин-3-амин (500 мг, 2,46 ммоль) в пиридине (10 мл) добавили хлорид 2,2,2-трифтор этансульфонамида (898 мг, 4,92 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 часов, затем подвергли концентрированию в вакууме и разбавили остаток водой (30 мл). Полученную смесь экстрагировали, используя DCM (20 мл ×3). Объединенные органические фазы промыли водой (25 мл ×2) и рассолом (25 мл), высушили над безводным Na₂SO₄ и подвергли концентрированию в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества (859 мг, 100%), который использовали непосредственно в следующей стадии реакции без дополнительной очистки.

MS (ESI, полож. ион) м/з: 348.9 [М+Н]+;

¹Н NMR (300 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 8.03 (d, J=2.19 Гц, 1H), 7.91 (d, J=2.22 Гц, 1Н), 7.00 (br s, 1Н), 4.00 (s, 3Н), 3.87 (q, J=8.73 Гц, 2Н).

Шаг 2) 2,2,2-трифтор-N-(2-метокси-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-3-ил)этансульфонамид

[215] Смесь N-(5-бром-2-метилпиридин-3-ил)-2,2,2-трифтор этана сульфонамида (500 мг, 1,43 ммоль), 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-би-1,3,2-диоксаборолан (1,45 г, 5,729 ммоль) и КОАс (562 мг, 5,729 ммоль) в 1,4-диоксане (10 мл) продули азотом несколько раз, после чего добавили Pd(dppf)Cl₂⋅CH₂Cl₂ (248 мг, 0,304 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 80°С в течение 3,5 часов и затем подвергли концентрированию в вакууме. Остаток растворили в DCM (50 мл). Полученную смесь отфильтровали через слой целита (CELITE®) и промыли фильтрат водой (25 мл ×3) и рассолом (35 мл). Отделенную органическую фазу высушили над безводным Na₂SO₄ и подвергли концентрированию в вакууме. Остаток очистили с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (РЕ/EtOAc (об/об)=5/1) с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого масла (395 мг, 70%).

MS (ESI, полож. ион) м/з: 397.0 [М+Н]+;

¹Н NMR (300 МГц, CDCl₃) δ (ppm): 8.36 (d, J=1.59 Гц, 1H), 8.05 (d, J=1.59 Гц, 1H), 6.94 (br s, 1Н), 4.04 (s, 3Н), 3.85 (q, J=7.82 Гц, 2Н), 1.33 (s, 12Н).

Шаг 3) N-(5-(3-цианопиразоло [1,5-а]пиридин-5-ил)-2-метоксипиридин-3-ил)-2,2,2-трифтор этансульфонамида

[216] К раствору 5-бром-пиразоло[1,5-а]пиридин-3-карбонитрил (100 мг, 0,450 ммоль) в 1,4-диоксане (20 мл) и воде (4 мл) добавили 2,2-трифтор-N-(2-метокси-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-3-ил) метансульфонамида (196 мг, 0,495 ммоль), КОАс (88 мг, 0,900 ммоль) и Pd(dppf)Cl₂⋅CH₂Cl₂ (74 мг, 0,09 ммоль) в атмосфере N2. Реакционную смесь перемешивали при 90°С в течение 2,5 часов в атмосфере N2, затем охладили до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Смесь подвергли концентрированию в вакууме, после чего разбавили остаток этилацетатом (35 мл) и отфильтровали полученную смесь через слой целита (CELITE®). Осадок на фильтре промыли, используя EtOAc (35 мл), а фильтрат -используя Н₂O (15 мл) и рассол (20 мл). Отделенную органическую фазу высушили над безводным Na₂SO₄ и подвергли концентрированию в вакууме.

Затем остаток очистили с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (РЕ/EtOAc (об/об)=2,5/1) с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества (94 мг, 51%).

MS (ESI, полож. ион) м/з: 412.0 [М+Н]+;

¹Н NMR (300 МГц, DMSO-d6) δ (ppm): 10.15 (s, 1Н), 9.03 (d, J=7.32 Гц, 1H), 8.67 (s, 1Н), 8.65 (d, J=2.25 Гц, 1H), 8.24 (d, J=1.05 Гц, 1H), 8.18 (d, J=2.28 Гц, 1Н), 7.59 (dd, J=1.80, 7.26 Гц, 1Н), 4.63 (q, J=9.78 Гц, 2Н), 4.00 (s, 3Н).

Пример 11. N-(2-хлор-5-(3-цианопиразоло[1,5-а]пиридин-5-ил)пиридин-3-ил)-2,4-дифтор бензолсульфонамид

[217] К раствору 5-бром-пиразоло[1,5-а]пиридин-3-карбонитрил (110 мг, 0,5 ммоль) добавили в N-(2-хлор-5 1,4-диоксан (20 мл)-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил) пиридин-3-ил) -2,4-дифтор бензолсульфонамид (235 мг, 0,55 ммоль), КОАс (98 мг, 1 ммоль), H₂O (2 мл) и Pd(dppf)Cl₂⋅CH₂Cl₂ (81 мг, 0,1 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 93°С в атмосфере N₂ в течение 2 часов, затем подвергли концентрированию в вакууме и экстрагировали остаток, используя этилацетат (20 мл ×3). Объединенные органические фазы высушили безводным Na₂SO₄ и подвергли концентрированию в вакууме. После этого остаток очистили с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (РЕ/EtOAc (об/об)=4,5/1) с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (130 мг, 59%).

MS (ESI, полож. ион) м/з: 446.0 [М+Н]+;

¹H NMR (300 МГц, DMSO-d6) δ (ppm): 10.98 (br s, 1H), 9.08 (d, J=7.29 Гц, 1H), 8.87 (d, J=2.67 Гц, 1H), 8.71 (s, 1H), 8.41-8.39 (m, 2H), 7.84-7.76 (m, 1H), 7.63-7.54 (m, 2H), 7.26-7.20 (m, 1H).

БИОЛОГИЧЕСКОЕ ТЕСТИРОВАНИЕ

[218] Эффективность описанных здесь соединений в качестве ингибиторов РI3-киназы и mTOR-киназы можно оценить следующим образом. Результаты анализа показывают, что определенные соединения, раскрытые в данном документе, эффективно ингибируют PI3K и mTOR.

[219] Метод ЖХ/МС/МС, используемый в анализе, включает применение вакууматора серии «Аджилент» 1200, двоичного насоса, луночно-планшетный пробоотборник, термостатируемая колонка-купе, тройной квадрупольный масс-спектрометр с режимом ионизации электрораспылением (РИЭ) «Алиджент» G6430. Количественный анализ проводили с использованием режима ММР (мониторинг множественных реакций). Параметры ММР-переходов приведены в таблице А.

[220] Для анализа использовали колонку «Аджилент» (Agilent) XDB-C18, 2,1×30 мм, 3,5 мкМ. Вводили по 5 мкл образца. Анализ состояния: Подвижная фаза составила 0,1% муравьиной кислоты в воде (А) и 0,1% муравьиной кислоты в метаноле (Б). Скорость потока составляла 0,4 мл/мин. И градиент подвижной фазы представлен в таблице В.

[221] Кроме того, в анализе были использованы ЖХ/МС/МС-спектрометр серии «Аджилент» 6330, снабженный бинарными насосами G1312A, автоматическим дозатором G1367A и датчиком G1314C УФ. Режим РИЭ был использован на ЖХ/МС/МС-спектрометре. Анализ проводился в режиме положительных ионов в нажлежащих условиях и ММР-переход для каждого анализируемого агента был оптимизироваа с помощью стандартного раствора. В ходе анализа была использована колонка Capcell МР-С18 100×4,6 мм I.D., 5 мкм («Феноменикс» (Phenomenex), Торранс, Калифорния, США). Подвижная фаза составила 5 мкм ацетата аммония, 0,1% МеОН в воде (А): 5 мкм ацетата аммония, 0,1% МеОН в ацетонитриле (В) (70/30, об/об). Скорость потока составляла 0,6 мл/мин. Колонки поддерживали при температуре окружающей среды. Вводили 20 мкл образца.

Пример А; Стабильность соединения в микросомах печени человека и крыс

[222] Микросомы инкубации печени человека или крысы были взяты в двух экземплярах и помещены в полипропиленовые колбы. Типичные инкубационные смеси состояли из микросом печени человека или крысы (0,5 мг белка/мл), соединений, представляющих интерес (5 мкм), и восстановленного никотинамидадениндинуклеотидфосфата (1,0 мМ) в общем объеме 200 мкл калий-фосфатного буфера (PBS, 100 мМ, рН=7,4). Соединения растворили в DMSO и разбавили PBS так, чтобы конечная концентрация DMSO была 0,05%. Ферментативные реакции были начаты с добавления белка после 3-минутной предварительной инкубации, и инкубирование проводилось на водяной бане и открытом воздухе при 37°С. Реакции прекращались в различные моменты времени (0, 5, 10, 15, 30, 60 мин) путем добавления равного объема охлажденного льдом ацетонитрила. До ЖХ/МС/МС анализов образцы хранили при -80°С.

[223] Концентрация соединений в инкубационной смеси микросом печени человека или крысы определялась по методу ЖХ/МС/МС. Диапазоны линейности в диапазоне концентраций были определены для каждого тестируемого соединения.

[224] Параллельная инкубация проводилась с использованием денатурированных микросом, в качестве отрицательного контроля, и реакции были прекращены в различные моменты времени (0, 15, 60 мин) после инкубации при 37°С.

[225] Декстрометорфан (70 мкм) был выбран для положительного контроля, и реакции были прекращены в различные моменты времени (0, 5, 10, 15, 30, 60 мин) после инкубации при 37°С.Положительные и отрицательные контрольные образцы были включен в каждом анализе в целях обеспечения целостности системы микросомальной инкубации.

Анализ данных

[226] Концентрация соединений в инкубационных микросомах печени человека или крысы определялась в виде процента от соответствующего точки контроля нулевого времени для каждой реакции. Cl_int был экстраполирован в естественных условиях (Ссылка: Наритоми Ю., Терашита С., Кимура С., Сузуки А., Кагаяама А., Сугияма Ю. Прогнозирование печеночного клиренса человека в естественных экспериментах на животных и в лабораторных метаболических исследованиях микросом печени животных и человека. Метаболизм лекарственных препаратов и их планировка (Drug Metabolism and Disposition) 2000, 29: 1316-1324).

Пример В: Оценка фармакокинетики после внутривенного и перорального введения описанных в настоящем патенте соединений у мышей, крыс, собак и обезьян

[227] Соединения, описанные в данном документе, оценивали в фармакокинетических исследованиях на мышах, крысах, собаках или обезьянах. Соединения вводят в виде водного раствора, 2% НРМС+1% ТВИН®80 в водном растворе, 5% DMSO+5% солутола в физиологическом растворе, 4% МС суспензии или капсулы. Для внутривенного введения, животным, как правило, дают препарат в дозе 1 или 2 мг/кг. Для перорального введения, мышам и крысам, как правило, дают дозу 5 или 10 мг/кг, и собакам и обезьянам, как правило, - дозу 10 мг/кг. Образцы крови (0,3 мл) были взяты через 0,25, 0,5, 1,0, 2,0, 3.0, 4.0, 6.0, 8.0, 12 и 24 ч или 0,083, 0,25, 0,5, 1,0, 2,0, 4,0, 6,0, 8,0 и 24 ч и подверглись центрифугированию при 3000 или 4000 оборотов в минуту в течение от 2 до 10 мин. Плазменные растворы собрали и хранили при температуре от минус 20°С до минус 70°С до анализа методом ЖХ/МС/МС, как описано выше.

Пример С: Анализ активности киназы

[228] Эффективность описанных в настоящем изобретении соединений в качестве ингибиторов РI3-киназы и mTOR-киназы можно оценить следующим образом.

Общее описание анализы киназы

[229] Анализы киназы могут проводиться путем измерения объединения γ-³³Р АТФ с иммобилизованным основным белком миелина (ОБМ). Высокосвязывающие белые 384-луночные планшеты (Грейнер) покрываются ОБМ (Сигма # М-1891) путем инкубации 60 мкл/лунку 20 мкг/мл ОБМ в Трис-буферном солевом растворе (TBS; 50 мМ Трис, рН 8,0, 138 мМ NaCl, 2,7 мМ КCl) в течение 24 ч при 4°С. Планшеты промывают 3 раза 100 мкл TBS. Реакции киназы проводят в общем объеме 34 мкл в буфере киназы (5 мМ Гепес рН 7,6, 15 мМ NaCl, 0,01% бычьего гамма-глобулина (Сигма # 1-5506), 10 мМ MgCl₂, 1 мМ ДТТ, 0,02% ТритонХ-100). Разведение соединения выполняю в DMSO и добавляют в лунки для анализа до конечной концентрации DMSO 1%. Каждая точка данных измеряется в двух экземплярах, по меньшей мере, для каждого отдельного определения соединения проводят два повторяющихся анализа. Энзим добавляют до достижения конечной концентрации, например, 10 нМ или 20 нМ. Смесь немеченого АТФ и γ-³³Р АТФ добавляют, чтобы начать реакцию (2 × 106 импульсов в минуту γ-³³Р АТФ на лунку (3000 Ки / ммоль) и, как правило, 10 мкм немеченого АТФ. Реакции проводятся в течение 1 ч при комнатной температуре при встряхивании. Планшеты промывают TBS 7 раз, с последующим добавлением 50 мкл/лунку сцинтилляционной жидкости (Валлак) (Wallac) Данные с планшеты считываются с помощью счетчика «Валлак Трилюкс» (Wallac Trilux). Это только одна форма такого анализа, но возможны и другие формы, известные специалистам в данной области.

[230] Описанная выше процедура анализа может быть использован для определения IC50 для ингибирования и/или постоянной торможения, кДж. IC50 определяют как концентрацию соединения, необходимую для снижения активности энзима на 50% при условиях данного анализа. Значение IC50 определяется путем построения 10-точечной кривой, используя серию разбавлений (например, типичную кривую можно получить, используя следующие концентрации соединения: 10 мкм, 3 мкм, 1 мкм, 0,3 мкм, 0,1 мкм, 0,03 мкм, 0,01 мкм, 0,003 мкм, 0,001 мкм и 0 мкм).

ПРОТОКОЛ ОБЩЕГО АНАЛИЗА РI3-КИНАЗЫ

PI3Kp110α/р85α (ч) [Нерадиоактивный анализ]

[231] PI3K р110α/р85α (ч) инкубируется в буфере для анализа, содержащем 10 мкм Фосфатидилинозитол- 4,5-бисфосфат аи MgATФ (в необходимой концентрации). Реакцию инициируют добавлением раствора АТФ. После инкубации в течение 30 минут при комнатной температуре, реакцию останавливают с помощью добавления стоп-раствора, содержащего ЭДТА и биотинилированный фосфатидилинозитол-3,4,5-трифосфат. Наконец, добавляется идентифицирующий буфер, который содержит европий-меченное моноклональное антитело анти-GST, GST-меченый GRP1 РН домен и стрептавидин аллофикоцианин. Затем планшет читают в режиме разрешенной во времени флуоресценции и сигнал разрешенной во времени гомогенной флуоресценции (HTRF) определяется по формуле HTRF=10000×(Em665 нм / Em620 нм).

PI3Kp110p/р85а (ч) [Нерадиоактивный анализ]

[232] PI3K (р110β/p85α) (ч) инкубируют в буфере для анализа, содержащем 10 мкм фосфатидилинозитол-4, 5-бисфосфата и MgАТФ (в необходимой концентрации). Реакцию инициируют добавлением смеси MgАТФ. После инкубации в течение 30 минут при комнатной температуре реакцию останавливают путем добавления стоп-раствора, содержащего ЭДТА и биотинилированный фосфатидилинозитол-3,4,5-трифосфат. Наконец, добавляют идентифицирующий буфер, который содержит европий-меченное моноклональное антитело анти-GST, GST-меченый GRP1 РН домен и стрептавидин-аллофикоцианин. Затем планшет считывают в режиме разрешенной во времени флуоресценции и сигнал разрешенной во времени гомогенной флуоресценции (HTRF) определяется по формуле =10000×(Еm665 нм / Еm620 нм).

PI3K (р110δ/р85а) (ч) [Нерадиоактивный анализ]

[233] PI3K (р110δ/р85α) (ч) инкубируют в буфере для анализа, содержащем 10 мкм фосфатидилинозитол-4, 5-бисфосфата и MgATФ (в необходимой концентрации). Реакцию инициируют добавлением смеси MgATФ. После инкубации в течение 30 минут при комнатной температуре реакцию останавливают путем добавления стоп-раствора, содержащего ЭДТА и биотинилированный фосфатидилинозитол-3,4,5-трифосфат. Наконец, добавляют идентифицирующий буфер, который содержит европий-меченное моноклональное антитело анти-GST, GST-меченый GRP1 РН домен и стрептавидин-аллофикоцианин. Затем планшет считывают в режиме разрешенной во времени флуоресценции и сигнал гомогенной флуоресценции (HTRF) определяется по формуле

HTRF=10000×(Еm665 нм / Еm620 нм).

PI3K (р120γ) (ч) [Нерадиоактивный анализ]

[234] PI3K (р120у) (ч) инкубируют в буфере для анализа, содержащем 10 мкм фосфатидилинозитол-4, 5-бисфосфата и MgATФ (в необходимой концентрации). Реакцию инициируют путем добавления смеси MgATФ. После инкубации в течение 30 минут при комнатной температуре, реакцию останавливают посредством добавления стоп-раствора, содержащего ЭДТА и биотинилированный фосфатидилинозитол-3,4,5-трифосфат. Наконец, добавляют идентифицирующий буфер, который содержит европий-меченное моноклональное антитело анти-GST, GST-меченый GRP1 РН домен и стрептавидин-аллофикоцианин. Затем планшет считывают в режиме разрешенной во времени флуоресценции и сигнал гомогенной флуоресценции (HTRF) определяется по формуле

HTRF=10000×(Em665нм / Em620нм).

mTOR (ч)

[235] mTOR (ч) инкубируют с 50 мМ Гепес, рН 7,5, 1 мМ ЭДТА, 0,01% ТВИН®20 (TWEEN®20), 2 мг/мл субстрата, 3 мМ хлорида марганца и [γ-³³Р-АТФ] (удельная активность прибл. 500 имп/пмоль, в необходимой концентрации). Реакцию инициируют добавлением смеси МnАТФ. После инкубации в течение 40 минут при комнатной температуре, реакцию останавливают посрежством добавления 3% -ного раствора фосфорной кислоты. Аликвоту реакции в 10 мкл затем наносят на Р30 фильтр и промывают три раза в течение 5 минут в 75 мМ фосфорной кислоты и один раз в метаноле перед сушкой и сцинтилляционным измерением.

[236] Анализы киназы, описанные в настоящей заявке, проводились на «Миллипор ЮК Лтд.» (Millipore UK Ltd, Dundee Technology Park, Dundee DD2 1SW, UK), Технологический парк Данди, Данди DD2 1SW, Великобритания.

[237] Соединения, описанные в данном документе, показали мощное действие в анализах PI3Kα (ч) и mTOR (ч). В таблице 5 приведены некоторые примеры IC50S, описанные в данном документе по анализу PI3Kα (ч) и mTOR (ч).

[238] Кроме того, активность киназы соединений может быть измерена с помощью КИНОМЕскан™, который основан на конкурсном анализе связывания и количественно измеряет способность соединения, чтобы можно было конкурировать с иммобилизованным, активным центром направленного лиганда. Анализ проводили путем объединения трех компонентов: ДНК-меченной киназы; иммобилизованного лиганда; и тестируемого соединения. Способность тестируемого соединения конкурировать с иммобилизованным лигандом измеряли с помощью количественной ПЦР тега ДНК.

[239] Для большинства анализов киназо-меченные Т7 штаммы фагов были подготовлены в кишечной палочке хозяина, полученной из штамма BL21. Кишечную палочку выращивали до лог-фазы и инфицировали фагом Т7, а затем инкубировали при встряхивании при 32°С до лизиса. Лизаты центрифугировали и профильтровали, чтобы удалить остатки клеток. Остальные киназы были произведены в клетках НЕК-293, а затем помечены ДНК для обнаружения КПЦР. Покрытые стрептавидином магнитные гранулы обрабатывали биотинилированными малыми молекулами лигандов в течение 30 минут при комнатной температуре, чтобы генерировать сродство для киназы анализов. Лигандные шарики были заблокированы с помощью избытка биотина и промыты блокирующим буфером (СЕАБЛОК™ (Пьере) (SEABLOCK^ТМ (Pierce), 1x BSA, 0,05% TBИH®20(TWEEN®20), 1 мM DTT) для удаления несвязанного лиганда и снижения неспецифического связывания. Реакции связывания были объединены путем сочетания киназы, сродных лигандных шариков и тестируемого соединения в связующем буфере (20% СЕАБЛОК™, 0.17×PBS, 0,05% ТВИН®20, 6 мМ DTT). Все реакции проводили в полистироловых 96-луночных планшетах в конечном объеме 0,135 мл. Аналитические планшеты инкубировали при комнатной температуре при встряхивании в течение 1 часа и сродные шарики промывали промывочным буфером (1× PBS, 0,05% ТВИН®20). Затем шарики повторно суспендировали в буфере для элюирования (l× PBS, 0,05% ТВИН®20, 0,5 мкм небиотинилированного сродного лиганда) и инкубировали при комнатной температуре при встряхивании в течение 30 минут.Концентрация киназы в элюате измеряли с помощью количественной кПЦР.

[240] Анализы киназы, описанные в данном документе, были выполнены с использованием КИНОМЕскан™ (KINOME_scan™) «Профайлинг Сервис Дискавери Корпорейшн» (Profiling Service at DiscoveRx Corporation), 42501 Альбре Сент Фремонт, Калифорния 94538, США.

Пример D: Модели ксенотрансплантатов опухолей

[241] Эффективность описанных здесь соединений оценивали в стандартной модели онкогенеза мыши. Опухолевые клетки человека (клетки глиобластомы U87MG от АТСС) были выращены в культуре, собраны и введены подкожно в заднюю флангу 6-7 недельных самок бестимусных голых мышей (BALB/cA ед.изм./ед.изм., «Хунань СЛАК Лаборатори Энимал, Ко.») (Hunan SLAC Laboratory Animal, Co.) (n=6-10 на группу -носителя и для каждой группы дозирования). Когда опухоли достигли объема 100-250 мм3, животных в случайном порядке поделили на группы контроля носителя (например, 5% DMSO+70% КАПТИЗОЛ® (30%) (CAPTISOL®), 7% HCl (pHl), 18% КАПТИЗОЛ® (30%) или 7% DMSO, 7% HC1 (pHl), 70% КАПТИЗОЛ® (30%>), 16%) КАПТИЗОЛ® (30%) или т.п) и контроля соединения. Последующее введение соединения через желудочный зонд начинается где-то с 0 дня по 15 день после заражения опухолевыми клетками и обычно продолжается один раз в день в течение всего срока эксперимента.

Анализ торможения роста опухоли (TGI)

[242] Прогрессирование опухолевого роста оценивается объемов опухолей и записывается как функция времени. Длинные (L) и короткие (W) оси подкожных опухолей измерялись с суппортами два раза в неделю, а объем опухоли (ОО) рассчитывался как (L × W²)/2). TGI рассчитывают из разности между средним объемом опухолей, обработанных носителем и обработанных лекарством мышей, выраженное в процентах от среднего объема опухоли в контрольной группе, обработанной наполнителем, следующим соотношением:

[243] Первоначальный статистический анализ выполняется путем повторного анализа дисперсии (РМАНОВА), а затем, исходя из полученных результатов, методом множественных сравнений Шеффе. Наполнитель сам по себе (5% DMSO+70% КАПТИЗОЛ® (30%), 7% НСl (pHl), 18% КАПТИЗОЛ® (30%); или 7% DMSO, 7% НСl (pHl), 70% КАПТИЗОЛ® (30%), 16% КАПТИЗОЛ® (30%) или т.п) является отрицательной контрольной пробой.

[244] Наконец, следует отметить, что существуют альтернативные способы реализации настоящего изобретения. Соответственно, настоящие варианты осуществления должны рассматриваться как иллюстративные, а не ограничивающие, и изобретение не ограничивается деталями, приведенными здесь, но может быть модифицировано в пределах объема и эквивалентов прилагаемой формулы изобретения. Все публикации и патенты, цитированные в настоящем описании, приведены в качестве ссылки.

Изобретение относится к области органической химии, а именно к гетероциклическому соединению формулы (I), где W₁ является N или CR^C; W₂ и W₃ являются CR^C; Z представляет собой CN или X представляет собой Н, (С₁-С₆)алкил, где (С₁-С₆)алкил необязательно замещен 1 заместителем, независимо выбранным из OR^a; Y представляет собой (С₃-С₆)циклоалкил или (С₆-С₁₀)арил, где каждый (С₆-С₁₀)арил замещен 2 заместителями, выбранными из F; R¹ представляет собой Cl или OR^a; каждый R^a независимо обозначает Н или (С₁-С₆)алкил; и каждый R^c независимо обозначает Н. Также изобретение относится к фармацевтической композиции на основе соединения формулы (I). Технический результат: получены новые гетероциклические соединения, модулирующие активность тирозинкиназы, представляющей собой фосфатидилинозитол 3-киназу (PI3К) и МРМ (mTOR), и полезные при лечении пролиферативных заболеваний. 3 н. и 5 з.п. ф-лы, 8 табл., 15 пр.

1. Соединение формулы (I):

где:

W₁ является N или CR^C; W₂ и W₃ являются CR^C;

Z представляет собой CN или

X представляет собой Н, (С₁-С₆)алкил, где (С₁-С₆)алкил необязательно замещен 1 заместителем, независимо выбранным из OR^a;

Y представляет собой (С₃-С₆)циклоалкил или (С₆-С₁₀)арил, где каждый (С₆-С₁₀)арил замещен 2 заместителями, выбранными из F;

R¹ представляет собой Cl или OR^a;

каждый R^a независимо обозначает Н или (С₁-С₆)алкил; и

каждый R^c независимо обозначает Н.

2. Соединение по п. 1, в котором R¹ представляет собой Cl, ОСН₃ или ОСН₂СН₃.

3. Соединение по п. 1, имеющее одну из следующих структур:

4. Соединение по любому из пп. 1-3, применяемое для предотвращения, контроля, лечения или ослабления тяжести пролиферативного нарушения у пациента.

5. Соединение по п. 4, в котором пролиферативное нарушение представляет собой метастатический рак, рак толстой кишки, аденокарциному желудка, рак мочевого пузыря, рак молочной железы, рак почки, рак печени, рак легких, рак кожи, рак щитовидной железы, рак головы и шеи, рак предстательной железы, рак поджелудочной железы, рак ЦНС, глиобластому, миелопролиферативное расстройство или фиброз легких.

6. Фармацевтическая композиция, включающая эффективное количество соединения по любому из пп. 1-3, и фармацевтически приемлемый носитель, наполнитель, разбавитель, адъювант, основу или их комбинации, применяемая для профилактики, контроля, лечения или ослабления тяжести пролиферативного нарушения у пациента, где пролиферативное нарушение представляет метастатический рак, рак толстой кишки, аденокарциномы желудка, рак мочевого пузыря, рак молочной железы, рак почки, рак печени, рак легких, рак кожи, рак щитовидной железы, рак головы и шеи, рак предстательной железы, рак поджелудочной железы, рак ЦНС, глиобластому, миелопролиферативное расстройство или фиброз легких.

7. Соединение по любому из пп. 1-3, предназначенное для использования при ингибировании или модуляции активности протеинкиназы в биологическом образце, включающее контактирование биологического образца с соединением, при этом протеинкиназа представляет собой рецептор тирозинкиназы, представляющий собой PI3K, mTOR или их комбинацию.

8. Фармацевтическая композиция, включающая эффективное количество соединения по любому из пп. 1-3 и фармацевтически приемлемый носитель, наполнитель, разбавитель, адъювант, основу или их комбинации, предназначенная для использования при ингибировании или модуляции активности протеинкиназы в биологическом образце, включающих контактирование биологического образца с композицией, при этом протеинкиназа представляет собой рецептор тирозинкиназы, представляющий собой PI3K, mTOR или их комбинацию.