НАБОР РЕАГЕНТОВ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ СТЕПЕНИ НЕЙРОВОСПАЛЕНИЯ Российский патент 2019 года по МПК G01N33/86 

Описание патента на изобретение RU2698206C1

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ

Настоящее изобретение относится к биотехнологии и медицине, в частности, к набору для диагностики степени тяжести нейрозаболеваний по образцу плазмы крови.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Согласно статистическим данным ВОЗ, нейрозаболевания, в частности, инсульт, являются второй причиной смертности в мире. Наиболее распространенным типом инсульта является ишемический инсульт (ИИ, патогенетически подразделяемый на атеротромботический, кардиоэмболический, лакунарный), формирующийся при окклюзии артерии, вследствие чего нарушается кровоснабжение той или иной области мозга. При ишемическом поражении в тканях мозга возникают лактатацидоз, цитотоксический отек, аноксическая деполяризация мембран и смерть клеток. Для всех форм инсульта характерно развитие нейровоспаления в очагах поражения тканей мозга.

Нейровоспаление в неврологии является частным случаем системного неинфекционного воспаления и обычно связано с локальным повреждением гематоэнцефалического барьера и проникновением клеточных и плазменных элементов крови в паренхиму головного мозга. В результате чего в очаге инсульта наблюдается локальное появление клеток крови (макрофагов, нейтрофилов, лимфоцитов), фибриногена и выпадение фибрина и продуктов его деградации (ПДФ). Известно, что фибрин(оген) и ПДФ активно взаимодействуют с клетками микроглии, макрофагами и нейтрофилами в паренхиме мозга через образование комплекса с рецептором интегрина CD11b/CD18. При этом формируется ответ иммунной системы, сопровождающийся активной генерацией хемокинов, провоспалительных цитокинов и активных форм кислорода. Фибрин в центральной нервной системе (ЦНС) стимулирует инфильтрацию в очаг инсульта и последующую активацию миелин-специфических Т-клеток, которые вырабатывают аутоантитела к тканям мозга с последующими аутоиммунными расстройствами. При нейровоспалении также наблюдается фибрин(оген)-стимулируемая активация микроглии, которая приводит к апоптозу клеток мозга и гибели нейронов в очаге инсульта.

В качестве биологических маркеров нейровоспаления используют оценку состояния систем свертывания и фибриндеструкции, а изучение специфики молекулярных механизмов фибриндиструкции открывает новые стратегии для мониторинга и лечения неврологических заболеваний. Изменение коагулологического - фибриндеструктивного статуса больного, коррелирующее с неврологическим статусом может быть использовано для диагностики нейрозаболеваний, оценки тяжести состояния больных ишемическим инсультом и прогнозирования исходов заболевания.

Из уровня техники известны способы оценки состояния системы лизиса, которые основаны на определении времени и степени растворения сгустков крови или эуглобулиновой фракции плазмы крови (где в основном содержатся плазминоген и его активаторы, а ингибиторы фибринолиза удаляются), определении концентрации плазминогена и его активаторов, D-димеров. Косвенно фибринолиз оценивают глобальными тестами - тестом генерации тромбина и тромбоэластографией. Однако известные методики не способны оценить систему фибриндеструкцииа в целом, оценивая только ее составляющие части в отдельности.

Основными реагентами, которые используются для исследования системы свертывания и последующей деструкции фибрина в лабораторной диагностике, являются агенты, ингибирующие контактную фазу, раствор соли кальция, активирующие смеси, дополнительные компоненты (субстраты, носители с антителами, отдельные факторы, буферные растворы и т.д.).

Так из уровня техники известен набор, описанный в публикации американской заявки US 2008/0268483, кл. C12Q 1/56, G01N 33/86, где для исследования формирования и лизиса тромба (CloFAL) используют буферный раствор, реагент одного или более активаторов свертывания, таких, как тканевой фактор (TF) и/или тромбин, и одного или более активатора лизиса тромба, таких как тканевый активатор плазминогена (TPА). Буферный раствор может содержать TRIS-буферный солевой раствор хлористого кальция.

Основным недостатком использования жидких реагентов в широкой практике является необходимость работы с растворами, которые нужно точно дозировать, что сказывается на качестве проведения теста, кроме того, приготовленные растворы, как правило, мало хранятся.

В качестве ближайшего аналога заявляемого решения выбран набор, описанный в публикации евразийской заявки №201300544 от 06.06.2013 г., где для исследования роста фибринового сгустка используют реагенты в лиофилизированной форме, содержащие стабилизирующие и формирующие присадки, а в качестве активатора свертывания выбран тканевой фактор, мобилизованный на торце поверхности пластиковой вставки-активатора.

Однако, недостатком указанного аналога является отсутствие возможности его использования при исследовании системы фибриндеструкции в полной мере и, как следствие, невозможность диагностики степени тяжести нейрозаболеваний по образцу плазмы крови.

СУЩЕСТВО ЗАЯВЛЯЕМОГО РЕШЕНИЯ

Активность фибриндеструкции пропорциональна остроте системного воспаления, которое, в свою очередь, пропорционально остроте нейровоспаления и тяжести состояния пациента при ишемическом инсульте (ИИ). У больных с ИИ при измерении пространственно-временных параметров лизиса фибринового сгустка определяется суммарная литическая активность, отражающая изменения нейрологического статуса больного. Изменение в системе фибриндеструкции у больных ИИ может быть использовано для оценки тяжести состояния больных острым ишемическим инсультом и в прогнозировании исходов заболевания. Поэтому крайне важно иметь возможность оперативно, точно и правильно диагностировать изменения/отклонения в работе системы фибриндеструкции в целом.

Разработанный авторами тест оценки системы фибриндеструкции и набор реагентов для его проведения, позволяют качественно и количественно описать динамику процесса свертывания и фибриндеструкции, визуализируя процессы роста и лизиса фибринового сгустка в реальном времени.

Задача, на решение которой направлено заявляемое изобретение, заключается в устранении недостатков аналогов, известных из уровня техники.

Технический результат, который может быть получен при реализации заявляемого решения, заключается в повышении точности оценки состояния системы фибриндеструкции для последующего использования в диагностике нейрозаболеваний.

Выбранная форма используемых реагентов (маркированные лиофилизированные аликвоты) позволяет быстро, комфортно и унифицировано проводить исследование, повышая качество тестирования. Точно дозируемое количество реагентов в виде сухой формы не приводит к дополнительному разбавлению исследуемого образца, что крайне важно при измерении параметров роста фибринового сгустка в плазме крови и его растворения, поскольку данное измерение подразумевает индивидуальное аликвотирование малого объема. Выбранные дополнительные компоненты обеспечивают долгое и безопасное хранение составляющих набора без угрозы бактериального загрязнения.

Указанный технический результат обеспечивается подготовкой набора реагентов для диагностики степени нейровоспаления, включающего буферную соль и соль кальция ацетата, при этом он содержит ингибитор контактной активации системы свертывания и активатор плазминогена, где указанный ингибитор контактной активации и соль кальция ацетата в смеси с активатором плазминогена, выполнены в виде лиофилизата с присадкой, а в качестве активатора плазминогена выбран рекомбинантный активатор плазминогена урокиназного типа (р-Урокиназа).

А также тем, что в качестве ингибитора контактной активации системы свертывания выбран кукурузный ингибитор фактора Хагемана.

А также тем, что активатор плазминогена берут в концентрации 105 ед/мл.

А также тем, что в качестве буферной соли выбран HEPES-буфер. А также тем, что в качестве присадки выбран поливинилпирролидон (ПВП 360000).

С созданием авторами упомянутого набора возросло удобство постановки и качество теста определения состояний коагуляции и фибриндеструкции исследуемого образца плазмы крови. Полученные авторами маркированные аликвоты реагентов позволили быстро, комфортно и унифицировано проводить пробоподготовку теста.

Предложенный авторами набор, включает в себя в качестве первого реагента -лиофилизированный ингибитор контактной активации системы свертывания с буфером и присадкой, и в качестве второго реагента - лиофилизированную соль кальция с активатором плазминогена и присадкой.

Заявляемое техническое решение может быть проиллюстрировано следующими фигурами чертежей, где

на Фиг.1 представлен внешний вид второго реагента после лиофильного высушивания с добавлением разных присадок, а также внешний вид второго реагента (лиофильная форма) после ускоренного хранения;

на Фиг.2 приведены снимки, соответствующие 2 и 40-й минутам исследования пространственного роста и последующего лизиса фибринового сгустка;

на Фиг.3 проиллюстрированы результаты сравнения параметров фибриндеструкции на референсной замороженной плазме до и после сушки для выбранных концентраций активатора плазминогена. Графическое представление параметров LP и LOT, где «столбец» представляет собой среднее значение для полученных данных, «усы» - 2SD;

на Фиг.4 приведены сравнительные результаты для основных параметров фибриндеструкции с использованием «гипо-», «гипер-фибринолизных»- и нормальной плазм. Графическое представление параметров LP и LOT, где «коробочка» представляет собой среднее значение для полученных данных, «усы» - 2SD, точки - измеренные значения, горизонтальная линия - медиана данных.

Для измерения параметров фибриндеструкции в исследуемом образце in vitro было предложено использовать специальный тест, разработанный заявителем, где пространственно-временная динамика свертывания крови инициирована локализованным активатором свертывания в условиях, близких к условиям свертывания крови in vivo, а начало процесса лизиса ускорено добавлением активатора фибриндиструкции.

Для проведения теста образцы плазмы крови смешивают с первым и вторым реагентами через установленный промежуток времени и помещают в каналы измерительной кюветы, а затем исследуемый образец приводится в контакт с активатором свертывания. Процесс роста и лизиса фибринового сгустка регистрируется цифровой видеокамерой методом темного поля. Полученная серия снимков дает информацию о динамике коагуляции и фибриндеструкции в образце плазмы крови. На основе полученных снимков рассчитываются численные параметры динамики роста и фибриндеструкции, отображенные в таблице 1.

Характерные времена свертывания плазмы и фибриндеструкции сгустка сильно отличаются, лизис in vitro наблюдается через десятки минут или часов, а образование сгустка занимает минуты. Однако, при определенных условиях, in vitro можно добиться относительного ускорения начала фибриндеструкции путем добавления небольших концентраций активатора лизиса.

Было установлено, что для получения стабильной и качественной сухой формы первого реагента наилучшее соотношение компонентов, входящих в состав реагента (ингибитор контактной активации системы свертывания (ИКА), используемый для подавления артефактной активности системы свертывания, полученной в результате пробоподготовки; стабилизирующие и формирующие присадки) следующее: ИКА: ПВП: HEPES=0,02:0,24:0,74 (m/m).

В качестве источника кальция была выбрана соль - кальция ацетат, позволяющая улучшить гигроскопические свойства реагента. С целью выбора рабочей концентрации эффектора фибриндеструкции, известного из уровня техники, для использования в наборе, изучали лизис фибринового сгустка, используя широкий диапазон концентраций р-Урокиназы.

Для тестирования в референсную свежезамороженную плазму крови добавляли активатор фибринолиза в жидком виде в разных концентрациях, разбавление образца не превышало 6% (v/v). На Фиг.2 показаны снимки, соответствующие 2 и 40-й минутам исследования. При концентрации р-Урокиназы 75ед/мл до 40 мин наблюдался нормальный рост сгустка, к 40й минуте были видны первые признаки лизиса. При увеличении концентрации р-Урокинаы до 225ед/мл сгусток начинал растворяться раньше, чем успевал сформироваться, также имело место артефактное формирование спонтанных сгустков. По результатам предварительных исследований было решено приготовить лиофилизированную форму второго реагента с концентрацией р-Урокиназы 105 и 120 ед/мл. Лиофилизация производилась известным из аналога способом.

После окончания процесса лиофилизации, продукт контролировали по показателям: внешний вид (таблетированная форма), тест на исследование пространственно-временной динамики свертывания и фибриндеструкции, концентрация ионов кальция.

Значения концентрации кальция, измеренные в образцах до и после лиофилизации, находились в допустимых пределах. Для реагента с 105 ед/мл р-Урокиназы было получено значение концентрации, равное (20,6±0,6)мМ (среднее±SD), для 120 ед/мл р-Урокиназы - (19,1±0,3)мМ, при референсном диапазоне [17-23]мМ.

Внешний вид реагента имел вид таблетки.

На Фиг.3 приведено сравнение параметров фибриндеструкции с использованием референсной замороженной плазмы до и после лиофилизации второго реагента. Процесс лиофилизации активатора фибринолиза совместно с реагентом, содержащим соль кальция с присадками, приводил к снижению активности веществ, активирующих фибринолиз. Однако, остаточной активности было достаточно для уверенной фиксации процесса фибринолиза за время исследования (для минимальной достаточной концентрации 105ед/мл р-Урокиназы).

Таким образом, было установлено, что для получения стабильной и качественной сухой формы второго реагента наилучшее соотношение компонентов, входящих в состав реагента, следующее: Кальция ацетат: р-Урокиназа: ПВП=0,7465:0,0004:0,2631 (m/m).

Для установления гарантированного срока годности и стабильности второго реагента было проведено ускоренное хранение экспериментальных наборов, укомплектованных образцами реагента на основе р-Урокиназы в концентрации 105ед/мл при температуре 37С, в соответствии с ГОСТ Р ЕН 13640-2010. По истечению каждой временной точки хранения для образцов измеряли параметры коагуляции и лизиса, концентрацию кальция, проводили визуальный контроль. Тестирование расходного материала проводилось в соответствии с планом - графиком, через 0-6-14-25 дней хранения при 37С, соответственно. Критерием стабильности реагентов считали попадание значений проверяемых параметров в диапазон референсных значений.

В Таблице 2 приведены значения параметров пространственно-временного свертывания, лизиса и измеренной концентрации кальция в указанных временных точках после хранения при 37С в суховоздушном термостате. Представлены средние значения±SD.

Визуальный контроль: внешний вид реагентов сохранялся в виде плотной таблетки на протяжении 25 дней хранения.

Значения параметров, измеренные для проверяемых реагентов, попадали в диапазоны указанных референсных значений на протяжении всего исследования, что свидетельствует о выполнении критерия стабильности реагентов.

Время ускоренного хранения при 37С пересчитывали на время прямого хранения при температуре 4С по правилу Вант-Гоффа, получив: для 25 дней хранения при 37С рассчитываемое время хранения при 4С составило ~200 дней. Таким образом, по результатам проведенного ускоренного хранения, срок годности наборов, укомплектованных образцами второго реагента на основе р-Урокиназы, 105ед/мл составил не менее 6 месяцев при 4°С.

Применение заявляемого набора далее иллюстрируется на неисчерпывающих примерах 1 и 2.

Пример 1.

Была проведена унифицированная постановка теста пространственно-временного свертывания и фибриндеструкции с использованием нормальной и модельных «гипер»- «гипофибринолизных» плазм. Для проведения теста 120 микролитров образца плазмы крови смешивали с готовыми, точно дозированными лиофилизированными аликвотами (в виде таблетки) первого и второго заявляемых реагентов и помещали в измерительную кювету, после чего приводили в контакт с активаторной вставкой - пластиковой пластиной с нанесенным на торец пластины активатором свертывания. От активирующей поверхности вглубь плазмы начинался рост фибринового сгустка и его последующий лизис.Параметры процессов рассчитывались после окончания тестирования, с помощью разработанного заявителем программного обеспечения.

Модельную гиперфибринолизную плазму готовили, добавляя тканевой активатор плазминогена - Альтеплазу в плазму в конечной концентрации 0,02 мг/мл. Модельную гипофибринолизнуюплазму готовили, добавляя ингибитор активации плазминогена - транексамовую кислоту в плазму в конечной концентрации 0,0005 мг/мл. Были произведены повторные измерения с использованием второго реагента на основе р-Урокиназы, 105ед/мл для всех типов плазм. В таблице 3 приведены результаты измерений. Представлены средние значения±SD.

Полученные измерения показывают, что время до начала лизиса на модельной гипо-плазме по лизису заметно выше, чем на нормальной плазме. На гипер- плазме наблюдается уменьшение времени до начала лизиса и заметно выше скорость лизиса, по сравнению с нормальной плазмой.

Анализ на статистически достоверное различие распределений параметров Фибринолиза для различных типов плазм показал:

- полученные параметры LP (динамика лизиса) для гипер-плазмы достоверно отличаются от нормальной и гипо-плазмы (критерий Вилкоксона, р<0.005).

- полученные параметры LP для нормальной и гипо-плазмы, LOT (Время до начала лизиса) для всех типов плазм достоверно различаются (критерий независимого непарного t-test, р<0.005).

Пример 2.

Унифицированное проведение теста пространственно-временного свертывания и фибриндеструкции с использованием свежеприготовленной плазмы крови. Параметры роста фибринового сгустка и лизиса в норме и патологии.

Заявляемый набор реагентов был использован для тестирования образцов свежеприготовленной патоплазмы с гиперфибринолизным статусом системы гемостаза (разновидность нейрологичекого заболевания, параноидная шизофрения).

Приготовление исследуемого образца и проведение теста осуществлялось как в Примере 1.

Полученные в результате типичных исследований количественные характеристики значений сведены в Таблице 4. Как видно из таблицы, значения параметров для патологических состояний отличаются от нормы в большую сторону (за исключением параметра Tlag, который ожидаемо находится в норме), соответственно, однозначно разделяя гиперфибринолизные состояния.

Выше описанный пример подтверждает, что заявляемый набор реагентов может быть использован для тестирования патологических образцов нейрологичекой этиологии. Также подтверждает удобство их использования (таблетированная форма) и точность определения параметров теста за счет заранее аликвотированных реагентов.

Похожие патенты RU2698206C1

название год авторы номер документа
ВЫСОКОСЕЛЕКТИВНЫЙ ИНГИБИТОР КОНТАКТНОЙ АКТИВАЦИИ НА ОСНОВЕ ИНФЕСТИНА 4 2013
  • Колядко Владимир Николаевич
  • Вуймо Татьяна Алексеевна
  • Овсепян Рузанна Арменовна
  • Суров Степан Сергеевич
  • Корнеева Вера Анатольевна
  • Пантелеев Михаил Александрович
  • Атауллаханов Фазоил Иноятович
RU2556116C2
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АКТИВАТОРА ПЛАЗМИНОГЕНА 2007
  • Исаев Вячеслав Арташесович
  • Семенова Светлана Александровна
  • Лютова Людмила Васильевна
  • Руденская Галина Николаевна
  • Медведева Елена Александровна
RU2346983C1
КОМПОЗИЦИИ ДЛЯ АНТИФИБРИНОЛИТИЧЕСКОГО ЛЕЧЕНИЯ 2008
  • Орбе-Лопатеги Хосуне
  • Парамо-Фернандес Хосе-Антонио
  • Родригес-Гарсия Хосе-Антонио
  • Серрано-Варгас Росарио
RU2453337C2
СПОСОБ ИНГИБИРОВАНИЯ ТРОМБООБРАЗОВАНИЯ И УСКОРЕНИЯ ФИБРИНОЛИЗА С ПОМОЩЬЮ ДНК АПТАМЕРОВ, ИНГИБИРУЮЩИХ АКТИВНОСТЬ ТРОМБИНА, В ЭКСПЕРИМЕНТЕ 2014
  • Добровольский Анатолий Борисович
  • Мазуров Алексей Владимирович
  • Спиридонова Вера Алексеевна
RU2559545C1
ДИАГНОСТИКА ТРОМБОЭМБОЛИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ВЕН ПУТЕМ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ D-ДИМЕРОВ И РАСТВОРИМОГО ФИБРИНА 2007
  • Миршахи Биби Шах Сольтан
  • Сориа Джанет
RU2475760C2
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТКАНЕВОГО АКТИВАТОРА ПЛАЗМИНОГЕНА 2003
  • Айсина Р.Б.
  • Булыгин О.Ю.
  • Варфоломеев С.Д.
  • Воюшина Т.Л.
  • Мухаметова Л.И.
  • Мамаев А.Н.
  • Момот А.П.
RU2252421C1
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФИБРИНОЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ МОЧИ 1998
  • Колесникова О.И.
  • Шахова Н.В.
  • Суворова А.В.
RU2160448C2
ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ, СОДЕРЖАЩАЯ ФАКТОР VIIA И ФАКТОР XIII 2001
  • Петерсен Ларс Кристиан
  • Хеднер Улла
  • Рейкьер Расмус
RU2272648C2
ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ, ОБЛАДАЮЩАЯ ФИБРИНОЛИТИЧЕСКИМ ДЕЙСТВИЕМ 2007
  • Белогуров Анатолий Александрович
  • Бибилашвили Роберт Шалвович
  • Гурский Ярослав Георгиевич
  • Дельвер Евгений Петрович
  • Сарибекян Альберт Сарибекович
RU2323001C1
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПРОСТРАНСТВЕННО-ВРЕМЕННОГО РАСПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ ПРОТЕОЛИТИЧЕСКОГО ФЕРМЕНТА В ГЕТЕРОГЕННОЙ СИСТЕМЕ, УСТРОЙСТВО ДЛЯ РЕАЛИЗАЦИИ УКАЗАННОГО СПОСОБА И СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ НАРУШЕНИЙ СИСТЕМЫ ГЕМОСТАЗА ПО ИЗМЕНЕНИЮ ПРОСТРАНСТВЕННО-ВРЕМЕННОГО РАСПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ ПРОТЕОЛИТИЧЕСКОГО ФЕРМЕНТА В ГЕТЕРОГЕННОЙ СИСТЕМЕ 2011
  • Атауллаханов Фазоил Иноятович
  • Дашкевич Наталья Михайловна
  • Ованесов Михаил Владимирович
  • Сарбаш Василий Иванович
  • Пантелеев Михаил Александрович
  • Карамзин Сергей Сергеевич
  • Кондратович Андрей Юрьевич
RU2518247C2

Иллюстрации к изобретению RU 2 698 206 C1

Реферат патента 2019 года НАБОР РЕАГЕНТОВ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ СТЕПЕНИ НЕЙРОВОСПАЛЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к биотехнологии и медицине и раскрывает набор реагентов для оценки роста и деструкции фибринового сгустка. Набор реагентов характеризуется тем, что включает буферную соль и соль кальция ацетата, при этом он содержит ингибитор контактной активации системы свертывания и активатор плазминогена, где указанный ингибитор контактной активации и соль кальция ацетата в смеси с активатором плазминогена выполнены в виде лиофилизата с присадкой, а в качестве активатора плазминогена выбран рекомбинантный активатор плазминогена урокиназного типа. Изобретение позволяет повышать точность дозирования количества реагентов, увеличивать срок их хранения, набор удобен при использовании в процессе постановки теста. Набор для оценки роста и деструкции фибринового сгустка может быть использован для диагностики нейрозаболеваний по образцу плазмы крови. 1 з.п. ф-лы, 4 ил., 4 табл., 2 пр.

Формула изобретения RU 2 698 206 C1

1. Набор реагентов для оценки роста и деструкции фибринового сгустка, включающий буферную соль, выбранную из HEPES буфера, и соль кальция ацетата, при этом он содержит ингибитор контактной активации системы свертывания (ИКА), представляющий собой кукурузный ингибитор фактора Хагемана, и активатор плазминогена, представляющий собой рекомбинантный активатор плазминогена урокиназного типа, где указанный ингибитор контактной активации и соль кальция ацетата в смеси с активатором плазминогена выполнены в виде лиофилизата с присадкой, представляющей собой поливинипиролидон (ПВП), причем массовое соотношение компонентов, подходящее для получения стабильной сухой формы первого реагента, а именно соотношение ИКА:ПВП:НЕРЕS, составляет 0,02:0,24:0,74, а также массовое соотношение компонентов, подходящее для получения стабильной сухой формы второго реагента, а именно соотношение кальция ацетата:р-Урокиназы:ПВП, составляет 0,7465:0,0004:0,2631.

2. Набор по п. 1, где активатор плазминогена берут предпочтительно в концентрации 105 ед./мл.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2019 года RU2698206C1

EA 201300544 A1, 30.12.2014
Способ отделки вискозной текстильнойНиТи 1979
  • Гайдуков Константин Алексеевич
  • Федорченко Валерия Михайловна
  • Пышкина Тамара Гавриловна
  • Журавская Алина Ивановна
  • Резник Константин Яковлевич
  • Козачек Борис Климентьевич
SU823476A1
US 6100072 A, 08.08.2000
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ С1-ЭСТЕРАЗНОГО ИНГИБИТОРА ЧЕЛОВЕКА И ПРОДУКТ ДЛЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В МЕДИЦИНЕ 2004
  • Игонин А.А.
  • Пальцева Е.М.
  • Уваров В.Ю.
  • Иванов А.А.
  • Сергеева Е.В.
  • Берковский А.Л.
RU2256464C1
CAMPOS I.T
Печь для непрерывного получения сернистого натрия 1921
  • Настюков А.М.
  • Настюков К.И.
SU1A1
Acta Crystallogr.Biol.Crystallogr
Изложница с суживающимся книзу сечением и с вертикально перемещающимся днищем 1924
  • Волынский С.В.
SU2012A1
Способ получения смеси хлоргидратов опийных алкалоидов (пантопона) из опийных вытяжек с любым содержанием морфия 1921
  • Гундобин П.И.
SU68A1
p.695-702
Изложница с суживающимся книзу сечением и с вертикально перемещающимся днищем 1924
  • Волынский С.В.
SU2012A1

RU 2 698 206 C1

Авторы

Атауллаханов Фазоил Иноятович

Коротина Наталья Геннадьевна

Фадеева Ольга Александровна

Даты

2019-08-23Публикация

2018-07-02Подача