ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ МЕСТНОГО ПРИМЕНЕНИЯ Российский патент 2019 года по МПК A61K31/4045 A61K47/10 A61K45/06 A61K9/06 A61K9/107 A61P17/00 A61P17/06 

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ

Настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции для местного применения, содержащей соединение формулы I, 3-{4-[2-{5-хлор-1-(дифенилметил)-2-[2-({[2-(трифторметил)бензил]сульфонил}амино)этил]-1H-индол-3-ил}этил]сульфонил}фенил}пропионовую кислоту, или его фармацевтически приемлемые соли; и к способам лечения воспаления, включающим местное применение композиции, содержащей соединение формулы I.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Цитозольная фосфолипаза А2 (cPLA2), член семейства фосфолипазы A2 (PLA2), высвобождает арахидоновую кислоту из фосфолипидной мембраны и является ограничивающим скорость ферментом в биосинтезе простагландинов (PGs), тромбоксанов (Txs) и лейкотриенов (LTs), все из которых участвуют в воспалительной реакции организма. Поэтому ингибирование этого фермента и других членов семейства PLA2 является потенциальным способом для облегчения воспалительных заболеваний и состояний (Tibes & Friebe, Phospholipase A2 inhibitors in development. Expert Opin Investig Drugs. 1997 Mar;6(3):279-98).

Соединение 3-{4-[2-{5-хлор-1-(дифенилметил)-2-[2-({[2-(трифторметил)бензил]сульфонил}амино)этил]-1H-индол-3-ил}этил]сульфонил}фенил}пропионовая кислота было идентифицировано как часть работы по выявлению новых высокоэффективных ингибиторов cPLA2α (McKew et al. J Med Chem. 2008 Jun 26;51(12):3388-413). Оно может быть получено, как описано в заявке WO2006/128142, содержание которой включено в настоящую заявку посредством ссылки.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Воспаление кожи является симптомом многих кожных заболеваний и состояний. Такие состояния включают в себя, например, атопический дерматит, буллезные расстройства, коллагенозы, псориаз, псориатические поражения, себорейный дерматит или контактный дерматит, экзему, крапивницу, кожный зуд, розацею, узловатую почесуху, гипертрофические рубцы, образование келоидных рубцов, склеродермию, келоидный фолликулит затылка, болезнь Кавасаки, синдром Шегрена-Ларссона, болезнь Гровера, первую, вторую, третью и четвертую степени ожогов, муциноз кожи, солнечный кератоз, плоскоклеточный рак и меланому. Лечение воспаления при этих состояниях с помощью агентов, специфических к семейству PLA2, является оптимальным.

Ранее ученые исследовали методы лечения воспалений, специфических к семейству PLA2, через пероральный и легочный пути введения. В целом, эти методы лечения были направлены на оптимизацию терапевтических агентов для перорального пути, что способствует хорошей биодоступности при пероральном введении и большому периоду полураспада в сыворотке, при направленном воздействии на PLA2 для лечения воспаления. Несмотря на требования к разработке лекарств, активность агента является менее определяющей при воздействии пероральным путем, так как увеличить дозу просто путем включения большего количества агента в дозированную форму или путем увеличения кратности приема доз. В самом деле, общей чертой ингибиторов PLA2, известных из уровня техники, является их относительно низкая активность, например, SB 203347 показало полное ингибирование активности PLA2 в извлеченном кислотой гомогенате интактных человеческих нейтрофилов с величиной IC₅₀ 4,7 мкМ (Marshall et al. J Pharmacol Exp Ther. 1995 Sep;274(3):1254-62).

В общем, пероральный путь является неоптимальным способом для лечения заболеваний кожи. В частности, системное введение (пероральным путем или иным образом) несет с собой риск побочных эффектов в тканях, не связанных с состоянием, например, желудочно-кишечного раздражения и/или токсичности. Кроме того, соединения, вводимые перорально, подвержены эффекту первого прохождения через печень. Вместо этого, местное применение может зачастую быть предпочтительным путем, если может быть достигнуто. Местное применение препарата имеет множество преимуществ при лечении локализованного состояния. Так как препарат становится доступным в месте, где он требуется, избегается эквивалентная концентрация системно циркулирующего лекарственного средства. Это может уменьшить или устранить побочные эффекты, упомянутые выше.

Таким образом, несмотря на то, что ингибиторы cPLA2α, подходящие для перорального введения, были разработаны, существует потребность в эффективных ингибиторах cPLA2α, которые могут быть введены локально.

К сожалению, соединения, оптимизированные для перорального введения, как правило, непригодны для местного применения, часто из-за описанной низкой эффективности. Для дермального применения требуется очень высокая активность. Кроме того, предпочтительно, чтобы соединение выводилось из организма быстро, когда оно не связано с его мишенью. Этот набор свойств позволяет лекарственному средству оказывать сильное действие только на кожу и избежать нежелательных системных эффектов.

Однако пригодный состав для дермального применения может быть сложным, поскольку препарат наносят на кожу, которая обычно считается барьером для проникания ксенобиотиков. Предыдущее исследование препаратов местного применения для нанесения на кожу показывает, что соединения с низкой молекулярной массой (<500 дальтон) и умеренным log P (0-3) идеально подходят для такого применения.

Неожиданно авторы настоящего изобретения обнаружили, что соединение по настоящему изобретению, ингибитор cPLA2α, разработанный для перорального введения, является эффективным и хорошо переносимым при доставке в составе композиции для местного применения. До сих пор не было продемонстрировано, что ингибиторы этого класса ферментов являются применимыми через местный путь введения. Это открытие особенно неожиданно, учитывая относительно высокую молекулярную массу (823,35 дальтон) 3-{4-[2-{5-хлор-1-(дифенилметил)-2-[2-({[2-(трифторметил)бензил]сульфонил}амино)этил]-1H-индол-3-ил}этил]сульфонил}фенил}пропионовой кислоты и ее высокий log P.

Показано, что соединения по настоящему изобретению, когда находятся в составе подходящей композиции, удивительно и неожиданно обладают противовоспалительным действием в модели воспаления кожи животного и проникают в более глубокие слои кожи человека.

В ходе исследований, приведших к настоящему изобретению, было обнаружено, что соединение формулы I может быть применено к коже в качестве активного компонента композиции для местного применения и доступно для проникновения в кожу. Кроме того, указанное соединение обладает противовоспалительным действием.

Таким образом, настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции для местного применения, содержащей соединение формулы I:

или его фармацевтически приемлемые соли и фармацевтически приемлемый разбавитель или носитель.

В описании настоящей заявки соединение формулы (I), также именуется как соединение I. Следует понимать, что везде, где делается ссылка на соединение I, также предполагается использование фармацевтически приемлемой соли соединения.

Фармацевтически приемлемые соли соединений формулы (I), имеющих кислотный остаток, могут быть получены из органических и неорганических оснований. Подходящие соли с основаниями представляют собой, например, соли металлов, такие как соли щелочных металлов или соли щелочноземельных металлов, например, соли натрия, калия, или магния; или соли с аммиаком или с органическим амином, таким как морфолин, тиоморфолин, пиперидин, пирролидин, моно-, ди- или три низший алкиламин, например, этил-трет-бутил-, диэтил-, диизопропил-, триэтил-, трибутил- или 5 диметилпропиламин, или моно-, ди- или тригидрокси низший алкиламин, например, моно-, ди- или триэтаноламин.

Термин «местное применение» относится к применению вещества непосредственно к поверхности тела, такой как кожа. В особенно предпочтительных вариантах осуществления местное применение является накожным, т.е. непосредственно на поверхность кожи. Оно может иногда именоваться как дермальное применение. Композиция может быть представлена в любой форме, подходящей для местного применения, включая, но не ограничиваясь ими, мази, гели, кремы, лосьоны, эмульсии типа «масло в воде» (м/в), эмульсии типа «вода в масле» (в/м), эмульсии типа «масло в воде в масле» (м/в/м), эмульсии типа «вода в масле в воде» (в/м/в), микроэмульсии, пенки, спреи, муссы, пластыри, порошки, пасты, лечебные пластыри и тому подобное, с использованием хорошо известных методик и эксципиентов. Предпочтительно композиция представлена в виде крема, мази, лосьона или геля. Наиболее предпочтительно композиция представлена в виде крема или мази.

Особенно предпочтительные композиции (которые могут также именоваться в данном документе как составы) описаны в таблицах с 3 по 7. Наиболее предпочтительные композиции включают, но не ограничиваются ими:

Мазь О2 (Таблица 3)

Мазь O2X (Таблица 3)

Мазь O4v4 (Таблица 3)

Мазь O4v4E (Таблица 3)

Мазь O5v2 (Таблица 3)

Мазь О7 (Таблица 3)

Крем 7PE (Таблица 5)

Крем 9 (Таблица 5)

Гель 1V3 (Таблица 7)

Гель 4V3 (Таблица 7)

Эмульгированный гель 1V2 (Таблица 7)

В предпочтительных вариантах осуществления настоящего изобретения соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль присутствует в количестве от приблизительно 0,01% до приблизительно 10% (масс./масс.). Более предпочтительно соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль присутствует в количестве от приблизительно 0,3% до приблизительно 3%. В других предпочтительных вариантах осуществления настоящего изобретения соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль присутствует в количестве приблизительно 0,01, 0,02, 0,03, 0,04, 0,05, 0,06, 0,07, 0,08, 0,09, 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10% (масс./масс.).

Носитель может представлять собой растворитель, в котором растворим активный компонент.

Подходящие растворители включают в себя, но не ограничиваются ими, воду (от приблизительно 0 до приблизительно 25% масс./масс.); спирты (от приблизительно 0 до приблизительно 20% масс./масс.), выбранные из одноатомных спиртов, содержащих от 1 до 18 атомов углерода, таких как метанол, этанол, пропанол, изопропанол, бутанол, гексанол, цетиловый спирт, стеариловый спирт и тому подобное; двухатомные и многоатомные спирты, такие как пропиленгликоль, глицерин; гексантриолы, такие как 1,2,6-гексантриол, сорбит, 1,3-бутандиол, 2,3-бутандиол и т.д.; низшие алкиловые эфиры гликолей, содержащие от 1 до 6 атомов углерода, такие как простой монометиловый или простой моноэтиловый эфир этилен- или диэтилен- или пропилен- или дипропиленгликоля, простые монометиловые эфиры пропиленгликоля или дипропиленгликоля, простой моноэтиловый эфир диэтиленгликоля, простой монометиловый эфир этиленгликоля и т.д.; полиэтиленгликоли, имеющие молекулярную массу от 100 до 8000, предпочтительно около 4000; сложные эфиры одноосновных и двухосновных кислот, содержащие от 2 до 22 атомов углерода, и одноатомные спирты, содержащие от 1 до 20 атомов углерода, ди- и многоатомные спирты, содержащие от 2 до 20 атомов углерода, и сахарные спирты, такие как изопропилмиристат, изопропилпальмитат, миристилмиристат, цетилстеарат, метилстеарат, изопропилсебакат, метилсебакат, монолаурат сахарозы, моностеарат сахарозы и тому подобное. Другие подходящие растворители включают маннит, ксилит, сорбит и одноатомные спирты, содержащие от 1 до 6 атомов углерода в диапазоне 0-20% (масс./масс.), такие как метанол, этанол, пропанол, изопропанол, бутанол или гексанол.

Более конкретно, растворитель может содержать нетоксичный гликоль или гликолевый эфир, выбранный из группы, состоящей из пропиленгликоля, бутиленгликоля, диэтиленгликоля и диэтиленгликолевого эфира. Другие предпочтительные растворители включают, но не ограничиваются ими, этанол, деионизированную воду, бензиловый спирт, ПЭГ 400, диметилизосорбид (Арласолв dmi), моноэтиловый эфир диэтиленгликоля (Транскутол P), глицерин (глицерол), изопропилмиристат (IPM), изопропанол (изопропиловый спирт), октилдодеканол, феноксиэтанол, олеиловый спирт, минеральное масло (жидкий парафин), Crodamol GTCC (каприловый/каприновый триглицерид или триглицериды средней цепи), касторовое масло, изопропил пальмитат (IPP), пропиленгликоль дикаприлат/дикапрат и сложные эфиры косточкового абрикосового масла и ПЭГ-6 (Лабрафил M1944CS).

Композиция также может содержать сорастворитель, который может быть выбран из списка растворителей, приведенных выше. В частности, сорастворитель выбирают из группы, состоящей из воды, маннита, ксилита, сорбита и одноатомных спиртов, содержащих от 1 до 6 атомов углерода в диапазоне 0-20% (масс./масс.), таких как метанол, этанол, пропанол, изопропанол, бутанол или гексанол; и когда другой сорастворитель выбирают из одного или нескольких из группы, состоящей из пропиленгликоля (в диапазоне 0-35% масс./масс.), глицерина (в диапазоне 0-10% масс./масс.), полиэтиленгликолей, таких как ПЭГ400 (в диапазоне 0-80% масс./масс.) или ПЭГ4000 (или агенты с аналогичной молекулярной массой в классе) (в диапазоне 0-30% масс./масс.).

Кроме того, два или более различных растворителей могут быть объединены в системы растворителей с желаемыми свойствами. Примеры подходящих систем растворителей приведены в Таблице 1:

Таблица 1
Примеры подходящих систем растворителей Системы растворителей Композиция (% масс./масс.) 1 85% ПЭГ-400, 15% Арласолв DMI 2 75% ПЭГ-400, 25% Транскутол P 3 80% ПЭГ-400, 20% пропиленгликоль 4 20% EtOH, 55% ПЭГ-400, 25% Транскутол P 5 20% EtOH, 80% ПЭГ-400 6 20% вода, 55% ПЭГ-400, 25% Транскутол P 7 20% EtOH, 20% вода, 2% бензиловый спирт, 33% ПЭГ-400, 25% Транскутол P 8 20% EtOH, 20% вода, 33% ПЭГ-400, 25% Транскутол P, 2% феноксиэтанол

Когда композиция находится в форме эмульсии (типа «масло в воде» (м/в), типа «вода в масле» (в/м), типа «масло в воде в масле» (м/в/м) и типа «вода в масле в воде» (в/м/в)), композиция может дополнительно содержать эмульгатор. Он может быть включен, чтобы регулировать размер капелек масла в масляной фазе, которые могут иметь диаметр до 200 мкм, до меньшего размера, как правило, в диапазоне 1-50 мкм, таким образом, улучшая косметический внешний вид композиции. Эмульгатор может соответственно представлять собой эмульгатор типа «вода в масле», например, выбранный из группы, состоящей из эмульгаторов типа «вода в масле», таких как, например, полиоксиалкилен C12-20 алкиловые эфиры, такие как полиоксиэтилен-2-цетиловый эфир, полиоксиэтилен-2-лауриловый эфир, полиоксиэтилен-2-олеиловый эфир или полиоксиэтилен-2-стеариловый эфир, полиоксиалкилен алкиловые эфиры, сорбитан олеат, сорбитан изостеарат, сорбитан сесквиолеат, сложные глицериновые эфиры изостеариновой кислоты и адипиновой кислоты, полиглицерил-3-диизостеарат и полиглицерил-6-гексарицинолеат. Эмульгатор может соответственно представлять собой эмульгатор типа «масло в воде», например, выбранный из группы, состоящей из эмульгаторов типа «масло в воде», таких как, например, полиоксиалкилен C12-20 алкиловые эфиры и сложные эфиры, такие как полиоксиэтилен-20-цетиловый эфир, полиоксиэтилен-20-лауриловый эфир, полиоксиэтилен-20-олеиловый эфир или полиоксиэтилен-20-стеариловый эфир, полисорбат 20, полисорбат 60, полисорбат 80 и тому подобное.

Композиция по настоящему изобретению может быть приготовлена в соответствии с методами, хорошо известными специалистам в области фармацевтических композиций. Количество отдельных компонентов в композиции будет, в некоторой степени, зависеть от концентрации активного компонента, включенного в нее. Количество активного компонента в композиции может варьироваться в широких пределах в зависимости от тяжести состояния, подлежащего лечению, возраста и состояния пациента и усмотрения лечащего врача.

В дополнение к вышеупомянутым ингредиентам, настоящая композиция может содержать один или несколько дополнительных ингредиентов, таких, как:

1. другие терапевтически активные вещества, применяемые при лечении кожных воспалительных состояний, в том числе:

a. кортикостероиды, такие как гидрокортизон;

b. нестероидные противовоспалительные средства, такие как салициловая кислота, салицилаты, аналоги витамина D, такие как кальципотриол (Dovonex), иммунофилины, ингибиторы киназы р38, ингибиторы кальциневрина, такие как Такролимус и Пимекролимус; и каннабиноиды;

c. вазомодуляторы, такие как лиганды альфа-адренорецепторов; а также

d. местные анестетики, такие как бупивакаин, хлорпрокаин, дибукаин, кетамин и прамоксин.

2. Противоинфекционные препараты, такие как:

a. местные антибиотики, такие как клиндамицин.

b. противогрибковые средства

c. противовирусные средства

Другие подходящие агенты для совместного введения являются хорошо известными специалистам в данной области, включая, но не ограничиваясь ими:

1. Антагонисты рецептора гистамина H₁

2. Антагонисты рецептора гистамина H₂

3. Антагонисты рецептора гистамина H₃

4. Антагонисты лейкотриена, в том числе антагонисты LTB₄, LTC₄, LTD₄ и LTE₄, например, Монтелукаст

5. Ингибиторы фосфодиэстеразы, в том числе ингибиторы PDE3, ингибиторы PDE4, ингибиторы PDE5, ингибиторы PDE7 и ингибиторы двух или более фосфодиэстераз, таких как двойные ингибиторы PDE3/PDE4

6. Ингибиторы обратного захвата нейромедиатора, в частности флуоксетин, сертралин, пароксетин, зипразидон

7. Ингибиторы 5-липоксигеназы (5-LO) или ингибиторы белка, активирующего 5-липоксигеназу (FLAP),

8. Сосудосуживающие симпатомиметические агенты, являющиеся агонистами α₁- и α₂-адренорецепторов

9. Антагонисты мускаринового рецептора М3 или антихолинергические агенты

10. Агонисты β₂-адренорецептора

11. Агенты двойного действия β₂/M3

12. Ксантины, такие как теофиллин и аминофиллин

13. Нестероидные противовоспалительные средства, такие как кромогликат натрия и недокромил натрия

14. Кетотифен

15. Ингибиторы COX-1 (NSAIDs) и селективные ингибиторы COX-2

16. Пероральные, ингаляционные, интраназальные и местные глюкокортикостероиды

17. Моноклональные антитела, активные против эндогенных воспалительных факторов

18. Агенты анти-фактора некроза опухолей (анти-TNF-α)

19. Ингибиторы молекул адгезии, в том числе антагонисты VLA-4

20. Антагонисты кинин-B₁- и В₂-рецептора

21. Иммунодепрессивные средства

22. Ингибиторы матричных металлопротеаз (ММРs)

23. Антагонисты тахикининовых рецепторов NK₁, NK₂ и NK₃

24. Ингибиторы эластазы

25. Агонисты аденозинового рецептора А2а

26. Ингибиторы урокиназы

27. Соединения, которые действуют на дофаминовые рецепторы, например, агонисты D2

28. Модуляторы пути NFκb, например, ингибиторы IKK

29. Вещества, которые могут быть классифицированы как муколитические средства или антитуссивные средства

30. Антибиотики

31. Модуляторы цитокиновых сигнальных путей, такие как ингибиторы киназы р38, ингибиторы киназы SYK или ингибиторы киназы JAK

32. Модуляторы простагландиновых путей, в том числе ингибиторы H-PDGS и антагонисты DP-1 и CRTH2

33. Антагонисты хемокиновых рецепторов CXCR1 и CXCR2

34. Антагонисты хемокиновых рецепторов CCR3, CCR4 и CCR5

35. Ингибиторы цитозольной и растворимой фосфолипазы А₂ (cPLA₂ и sPLA₂)

36. Ингибиторы фосфоинозитид-3-киназы,

37. Ингибиторы HDAC,

38. р38 ингибиторы и/или

39. Антагонисты CXCR2.

40. Ингибиторы кальциневрина

41. Агенты против интерлейкина 17 (анти-IL-17)

42. Агенты против рецептора интерлейкина 4 (анти-IL4R)

43. Агенты против интерлейкина 31 (анти-IL-31)

Действие активного агента или агентов в любой композиции может быть улучшено путем использования средств, способствующих чрезкожному прониканию. Примеры подходящих средств, способствующих чрезкожному прониканию, раскрыты в документе Int J Pharm. 2013 Apr 15;447(1-2):12-21 (включен в настоящую заявку посредством ссылки). Таким образом, композиция по настоящему изобретению может содержать одно или несколько средств, способствующих прониканию. Средства, способствующие прониканию включают, но не ограничиваются ими, 2-(2-этоксиэтокси)этанол и диметилизосорбид в диапазоне 5-30% (масс./масс.). Другие неограничивающие примеры средств, способствующих прониканию, включают C8-C22 жирные кислоты, такие как изостеариновая кислота, октановая кислота и олеиновая кислота; С8-С22 жирные спирты, такие как олеиловый спирт и лауриловый спирт; низшие алкиловые сложные эфиры С8-С22 жирных кислот, такие как этилолеат, изопропилмиристат, бутилстеарат и метиллаурат; ди(низшие)алкиловые сложные эфиры С6-C8 двухосновных кислот, такие как диизопропиладипат; моноглицериды С8-С22 жирных кислот, такие как глицерилмонолаурат; эфир тетрагидрофурфурилового спирта и полиэтиленгликоля; полиэтиленгликоль; пропиленгликоль; 2-(2-этоксиэтокси)этанол; монометиловый эфир диэтиленгликоля; алкилариловые эфиры полиэтиленоксида; монометиловые эфиры полиэтиленоксида; диметиловые эфиры полиэтиленоксида; диметилсульфоксид; глицерин; этилацетат; ацетоуксусный эфир; N-алкилпирролидон; терпены; макроциклические средства, способствующие прониканию, такие как макроциклические кетоны, например, 3-метилциклопентадеканон, 9-циклопентадецен-1-он, циклогексадеканон и циклопентадеканон; макроциклические сложные эфиры, такие как пентадекалактон.

Композиция по настоящему изобретению может содержать воду, но она также может быть по существу или полностью не содержать воду. Предпочтительно содержание воды в композиции составляет от приблизительно 0 до приблизительно 80% (масс./ масс.).

Настоящая композиция может также содержать другие компоненты, обычно используемые в составах для местного применения, включая, но не ограничиваясь ими, антиоксиданты (например, альфа-токоферол, бутилированный гидрокситолуол, бутилированный гидроксианизол), стабилизаторы, хелатирующие агенты, загустители, мягчительные средства, смазывающие вещества, консерванты, смягчающие вещества, пигменты, отдушки, успокаивающие кожу средства, заживляющие кожу средства, кондиционирующие кожу агенты, такие как мочевина, глицерин, аллантоин или бисаболол.

Композиция может также содержать поверхностно-активное вещество или эмульгатор, включая, но не ограничиваясь ими, сложные эфиры косточкового абрикосового масла и ПЭГ-6 (Лабрафил M1944CS), Цетеарет-12 (Brij С20), каприлокапроил макрогол-8 глицериды (Лабразол), цетостеариловый спирт, моностеарат глицерина, лаурил макрогол-6 глицериды (лабрафил M2130CS), макрогол 15 гидроксистеарат, (полиоксил 15 гидроксистеарат), макрогол цетостеариловый эфир (цетомакрогол 1000), стеарат ПЭГ-100 (Myrj S100), полиоксил 35 касторовое масло (макроголглицерин рицинолеат), полиоксил 40 гидрогенизированное касторовое масло, стеарат ПЭГ-40 (макрогол стеарат, полиоксил стеарат), полисорбат 60 (Твин 60), полисорбат 80 (Твин 80), Спан 60 (моностеарат сорбита), стеарет-2 (Brij S2), стеарет-20 (Brij S20) и стеариновую кислоту.

Композиция может также содержать одно или несколько средств, повышающих вязкость. Повышающие вязкость средства включают, но не ограничиваются ими, поливинилпирролидон, поливинилполипирролидон (кросповидон), метилцеллюлозу, гидроксипропилцеллюлозу (HPC), гидроксипропилметилцеллюлозу (гипромеллозу, НРМС), гидроксиэтилцеллюлозу (НЕС), ксантановую камедь, карбопол (карбомер) и гиалуронат натрия (гиалуроновую кислоту).

В особенно предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения композиция содержит:

(a) Соединение формулы I;

(b) Растворитель;

(c) Сорастворитель;

(d) Средство, способствующее прониканию; и

(e) Воду.

В другом аспекте предлагается фармацевтическая композиция для местного применения, содержащая соединение формулы I:

или его фармацевтически приемлемые соли и фармацевтически приемлемый разбавитель или носитель, для применения в терапии.

Предпочтительно терапия включает в себя местное применение.

В еще одном аспекте предлагается фармацевтическая композиция для местного применения, содержащая соединение формулы I:

или его фармацевтически приемлемые соли и фармацевтически приемлемый разбавитель или носитель, для применения в лечении кожных воспалительных заболеваний или состояний.

Настоящее изобретение также предлагает применение соединения формулы I:

или его фармацевтически приемлемых солей в изготовлении лекарственного средства для лечения кожных воспалительных заболеваний или состояний.

Кожное воспалительное заболевание или состояние, подлежащее лечению, предпочтительно представляет собой зависимое от цитозольной фосфолипазы A2α или опосредованное цитозольной фосфолипазой A2α заболевание или состояние.

Более предпочтительно кожное воспалительное заболевание или состояние выбирают из группы, включающей рубцевание, дерматит, пролиферативное заболевание или состояние, заболевание или состояние тучных клеток, ожог или контакт с аллергеном и/или раздражающим веществом.

Еще более предпочтительно кожное воспалительное заболевание или состояние выбирают из группы, включающей атопический дерматит, буллезные расстройства, коллагенозы, псориаз, псориатические поражения, себорейный дерматит или контактный дерматит, экзему, крапивницу, зуд, розацею, узловатую почесуху, гипертрофическое рубцевание, образование келоидных рубцов, склеродермию, келоидный фолликулит затылка, болезнь Кавасаки, синдром Шегрена-Ларссона, болезнь Гровера, ожог первой степени, ожог второй степени, ожог третьей степени, ожог четвертой степени, муциноз кожи, солнечный кератоз, плоскоклеточный рак или меланому, астеатозную экзему, монетовидную экзему, экзему рук, гравитационную/варикозную экзему, экзематозный лекарственный дерматит, простой лишай, склероатрофический лишай, красный плоский лишай, раздражающий аллергический контактный дерматит, фотоаллергический дерматит/дерматит, обостряющийся от воздействия света, инфекционный (вторичный по отношению к бактериальной/вирусной/грибковой инфекции) дерматит, зудящие заболевания, включая те, которые связаны с хроническими системными расстройствами, такие как уремический зуд, холестатический зуд, блашкит взрослых, аквадиния, аквагенный зуд, перуанский бальзам, зуд при желтухе, брахиорадиальный зуд, зуд, обусловленный действием лекарственного средства, зуд, вызванный гидроксиэтилкрахмалом, зудящие точки, простой хронический лишай, нейродермит, зуд при прионных болезнях, почесуха, почесуха пигментная, почесуха простая, анальный зуд, зуд мошонки, генитальный зуд, зудящие пятна, рефлекторный зуд, почечный зуд, зуд кожи головы, старческий зуд, ксеротическая экзема, зуд, связанный с ВИЧ-инфекцией, Т-клеточная лимфома, синдром Сезари и грибовидный микоз.

Наиболее предпочтительно кожное воспалительное заболевание или состояние представляет собой псориаз или атопический дерматит.

В другом аспекте предлагается способ лечения воспаления и/или отека у пациента, нуждающегося в этом, причем указанный способ включает местное применение композиции, содержащей соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль, к области, нуждающейся в лечении.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

На фигуре 1 показано количество соединения I (нг), извлеченного из донорской камеры, поверхности, рогового слоя, эпидермиса, дермы и жидкости приемника после конечной временной точки (t=48 ч) после применения систем растворителей SS1 и SS2 к дерматомированной человеческой коже. Каждая точка представляет собой средний уровень извлеченного соединения I с планками погрешностей, представляющими собой диапазон, n=2-3.

На фигуре 2 показаны те же данные, что и на фигуре 1, но с количеством извлеченного с поверхности, удаленного для простоты интерпретации данных.

На фигуре 3 показано совокупное количество соединения I в донорской камере на единицу площади (нг/см²) в течение 48 ч экспериментального периода после применения систем растворителей FSS1 и FSS2. Каждая точка представляет средний уровень соединения I±SD, обнаруженный в жидкости приемника через кожу от трех доноров, n=9-10.

На фигуре 4 и 5 показано проникание in vitro соединения I из систем растворителей (FSS1 и FSS2) через дерматомированную кожу живота от трех доноров. Каждая точка представляет средний уровень извлеченного соединения I±SEM, n=9-10.

На фигуре 6 показано изменение толщины уха с течением времени (в часах после нанесения РМА) для различных доз соединения I.

На фигуре 7 показано сравнение соединения I с другими соединениями.

Примеры

Настоящее изобретение далее будет истолковано со ссылкой на следующие примеры.

Пример 1

Получение 3-{4-[2-{5-хлор-1-(дифенилметил)-2-[2-({[2-(трифторметил)бензил]сульфонил}амино)этил]-1H-индол-3-ил}этил]сульфонил}фенил}пропионовой кислоты

Соединение формулы I может быть получено, как описано в заявке WO2006/128142, содержание которой включено в настоящую заявку посредством ссылки. Осуществляются следующие стадии:

Стадия 1: 2-Бром-4-хлоранилин (1,0 экв.) растворяли в CH₂Cl₂ (0,25 М), затем добавляли триэтиламин и трифторацетилангидрид (1,1 экв. каждый). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Растворитель выпаривали, и остаток очищали с помощью флэш-хроматографии с CH₂Cl₂ в качестве элюента с получением амида с выходом 97%. м/з(М-Н)^- 300,0

Стадия 2: N-(2-Бром-4-хлорфенил)-2,2,2-трифторацетамид (стадия 1, 1,0 экв.) смешивали с 3-бутин-1-олом (2,0 экв.), дихлорбис(трифенилфосфин)палладием (II) (2,5% экв.), триэтиламином (3,0 экв.), CuI (5% экв.) в ДМФА (0,2 М) в герметичном сосуде в атмосфере N₂ и нагревали до 120°C в течение 4-х часов. Реакционную смесь затем разбавляли этилацетатом, промывали насыщенным раствором соли и сушили над Na₂SO₄. Очистка с помощью колоночной флэш-хроматографии с 2% MeOH/CH₂Cl₂ давала алкин с выходом 67%. м/з(М-Н)^- 194,09

Стадия 3: 2-(5-Хлор-1Н-индол-2-ил)этанол (стадия 2, 1,0 экв.) и имидазол (2,0 экв.) растворяли в ДМФА (0,3 М) при комнатной температуре при перемешивании прежде, чем добавляли трет-бутилхлордифенилсилан (1,2 экв.). Полученную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, прежде чем ее гасили насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и экстрагировали этилацетатом. Органическую фазу промывали водой и насыщенным раствором соли и сушили над Na₂SO₄. Очистка с помощью флэш-хроматографии с CH₂Cl₂ в качестве элюента давала силиловый эфир в виде коричневой смолы с выходом более 90%. м/з(М-Н)^- 433,0

Стадия 4: 2-({[трет-Бутил(дифенил)силил]окси}этил)-5-хлор-1H-индол (стадия 3, 1,0 экв.) растворяли в эфире (0,4 М), и раствор охлаждали до 0°С. Оксалилхлорид (1,2 экв.) добавляли к вышеуказанному охлажденному раствору при интенсивном перемешивании. Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч прежде, чем добавляли EtOH с последующим добавлением по NEt₃. Полученную смесь затем разбавляли еще EtOH прежде, чем смесь выливали в воду и экстрагировали EtOAc. Органическую фазу промывали насыщенным раствором соли, сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением сложного кетоэфира в виде желтого твердого вещества с выходом 70%. м/з(М-Н)^- 533,0

Стадия 5: Этил [2-({[трет-бутил(дифенил)силил]окси}этил)-5-хлор-1H-индол-3-ил](оксо)ацетат (стадия 4, 1 экв.), Ph₂CHBr (1,5 экв.) и Cs₂CO₃ (1,5 экв.) смешивали в сухом ацетонитриле (0,1 М). Смесь нагревали с обратным холодильником в течение 2-х часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом. Органическую фазу концентрировали, и остаток хроматографировали с использованием CH₂Cl₂ в качестве элюента с получением N-бензгидрилиндола в виде оранжевой смолы с выходом 45%. м/з(М+Н)⁺ 701,3

Стадия 6: К раствору этил [1-бензгидрил-2-({[трет-бутил(дифенил)силил]окси}этил)-5-хлор-1Н-индол-3-ил](оксо)ацетата (стадия 5, 1 экв.) в ТГФ (0,1 М) добавляли BH₃⋅Me₂S (2М в ТГФ) (2 экв.). Полученную смесь нагревали с обратным холодильником в течение ночи в атмосфере N₂. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, а затем медленно гасили 1н NaOH, экстрагировали с помощью EtOAc и промывали насыщенным раствором соли. После концентрирования получали спирт с выходом 65%. м/з(М+Н)⁺ 645,0

Стадия 7: К раствору 2-[1-бензгидрил-2-({[трет-бутил(дифенил)силил]окси}этил)-5-хлор-1H-индол-3-ил]этанола (стадия 6, 1 экв.) в CH₂Cl₂ (0,08 М) добавляли 1,3-бис(дифенилфосфино)пропан (ДФФП, 0,75 экв.). Раствор охлаждали до 0°С в атмосфере N₂, затем добавляли CBr₄ (1,25 экв.). Температуре реакционной смеси давали вернуться к комнатной температуре в течение 2 ч. Растворитель выпаривали, и остаток очищали с применением короткой колонки с силикагелем с использованием CH₂Cl₂ в качестве элюента с получением бромида с количественным выходом. м/з(М+Н)⁺ 708,0

Стадия 8: 1-Бензгидрил-3-(2-бромэтил)-2-({[трет-бутил(дифенил)силил]окси}этил)-5-хлор-1H-индол (стадия 7, 1 экв.) смешивали с метил-3-(4-меркаптолфенил)пропионатом (1,5 экв.) и K₂CO₃ (1,5 экв.) в ДМФА (0,1 М). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N₂ в течение 2 ч, затем разбавляли водой и экстрагировали с помощью EtOAc. Органический экстракт промывали насыщенным раствором соли, концентрировали и очищали с помощью флэш-хроматографии (CH₂Cl₂ в качестве элюента) с получением тиоэфира в виде коричневатой смолы с выходом 80%. м/з(М+Н) 823,0

Стадия 9: Метил 3-[4-({2-[1-бензгидрил-2-({[трет-бутил(дифенил)силил]окси}этил)-5-хлор-1H-индол-3-ил]этил}сульфанил)фенил]пропаноат (стадия 8, 1 экв.) растворяли в ацетонитриле (0,1 М), затем добавляли молекулярные сита (порошок, 4А,) и 4-метилморфолин N-оксид (NMO) (4 экв.) в атмосфере N₂. Через 5 мин добавляли н-Pr₄NRuO₄ (ТРАР) (5% экв.). Полученную смесь нагревали при 40°С в течение 1,5 ч. Смесь концентрировали, и остаток очищали с помощью флэш-хроматографии с использованием CH₂Cl₂, а затем 1% EtOAc/CH₂Cl₂ в качестве элюента с получением сульфона в виде белой пены с выходом 44%. м/з(М+Н)⁺ 855,1

Стадия 10: Метил 3-(4-{2-[1-бензгидрил-2-({[трет-бутил(дифенил)силил]окси}этил)-5-хлор-1H-индол-3-ил]этокси}фенил)пропаноат (стадия 9, 1 экв.) растворяли в ТГФ (0,1 М) и охлаждали до 0°С, затем обрабатывали с помощью н-Bu₄NF (1 М в ТГФ) (1,2 экв.). Полученную смесь перемешивали при 0°С в течение 5 мин, а затем нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 30 мин. Растворитель выпаривали, и остаток очищали с помощью флэш-хроматографии с использованием EtOAc/CH₂Cl₂ (с 1:9 до 1:4) в качестве элюента с получением спирта в виде белой пены с выходом 90%. м/з(М+Н)⁺ 616,20

Стадия 11: Метил 3-[4-{2-[1-бензгидрил-5-хлор-2-(гидроксиэтил)-1H-индол-3-ил]этил}-сульфонил)фенил]пропаноат (стадия 10, 1 экв.) в CH₂Cl₂ (0,02 М) обрабатывали при 0°C с помощью MeSO₂Cl (2,0 экв.) и Et₃N (2,5 экв.) и перемешивали в течение 1 часа. Ледяную баню удаляли, и реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре прежде, чем ее разбавляли CH₂Cl₂, промывали NaH₂PO₄, насыщенным раствором соли и сушили над Na₂SO₄. После выпаривания растворителя получали мезилат с количественным выходом. м/з(М+Н)⁺ 695,0

Стадия 12: Метил 3-(4-{[2-(1-бензгидрил-5-хлор-2-{2-[(метилсульфонил)окси]этил}-1Н-индол-3-ил)этил]сульфонил}фенил)пропаноат (стадия 11, 1,0 экв.) растворяли в ДМФА (0,03 М) и обрабатывали с помощью NaN₃ (3,0 экв.). Полученную смесь нагревали до 60°С и перемешивали в течение 2 ч, затем охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой, экстрагировали этилацетатом, промывали насыщенным раствором соли и сушили над Na₂SO₄. После выпаривания растворителя получали азид с количественным выходом, м/з(М+Н)⁺ 641,1

Стадия 13: Метил 3-[4-({2-[2-(2-азидоэтил)-1-бензгидрил-5-хлор-1Н-индол-3-ил]этил}сульфонил)фенил]пропаноат (стадия 12, 1 экв.) растворяли в ТГФ (0,1 М) и обрабатывали трифенилфосфином (1,1 экв.). После 2-х дней добавляли воду, и полученную смесь перемешивали в течение ночи, концентрировали и очищали с помощью флэш-хроматографии с использованием 4% MeOH:CH₂Cl₂ в качестве элюента с получением амина с выходом 71%. м/з(М+Н)⁺ 615,2

Стадия 14: К суспензии (2-трифторметилфенил)метансульфоновой кислоты (20,3 г, 84 ммоль) в ТГФ (1,9 л) и ДМФА (5,0 мл) при -20°С добавляли оксалилхлорид (44,7 мл, 0,5 моль) медленно по каплям в течение 1 часа. Температуру бани поддерживали ниже 0°С в течение 4 ч, после чего реакционную смесь упаривали до объема приблизительно 250 мл и разбавляли 500 мл этилацетата. Этот раствор промывали насыщенным раствором соли в делительной воронке и сушили над сульфатом магния. Затем раствор упаривали до коричневого масла. Это масло переносили в 500 мл петролейного эфира (30-50°C) и нагревали с помощью фена, пока масло не переходило в раствор. Затем раствор помещали в ацетоновую баню с сухим льдом для охлаждения, приводящего к образованию белого кристаллического вещества. Это вещество собирали с помощью фильтрации и сушили с получением 19 г (85%) (2-трифторметилфенил)метансульфонилхлорида в виде белого твердого вещества.

Стадия 15: К этил 3-[4-({2-[2-(2-аминоэтил)-1-бензгидрил-5-хлор-1Н-индол-3-ил]этил}сульфонил)фенил]пропионату (стадия 14, 200 мг, 0,32 ммоль) и насыщенному раствору NaHCO₃ (0,14 М) в CH₂Cl₂ (0,07 М) добавляли (2-трифторметилфенил)метансульфонилхлорид (стадия 14, 110 мг, 0,42 ммоль). Через 16 ч смесь выливали в насыщенный раствор бикарбоната натрия и экстрагировали с помощью CH₂Cl₂. Объединенную органическую фазу промывали насыщенным раствором соли, сушили над сульфатом натрия и очищали колоночной хроматографией с получением 250 мг сульфонамида в виде бледно-желтой пены, с выходом 93%. ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 1,23 (т, J=1,2 Гц, 3H), 2,62-2,71 (м, 2H), 2,76-2,93 (м, 4H), 2,98-3,17 (м, 4Н), 3,27-3,38 (м, 2H), 4,11 (д, J=7,2 Гц, 2H), 4,35 (с, 2H), 4,57 (т, J=5,3 Гц, 1Н), 6,43 (д, J=9,1 Гц, 1H), 6,77 (дд, J=8,8, 2,0 Гц, 1H), 6,81 (с, 1H), 7,18 (д, J=2,0 Гц, 1Н), 7,24-7,35 (м, 10Н), 7,41 (д, J=8,6 Гц, 3H), 7,49 (т, J=8,3 Гц, 1H), 7,60-7,77 (м, 2H), 7,88 (д, J=8,6 Гц, 2Н).

Стадия 16: Полученный сульфонамидный сложный эфир (220 мг, 0,26 ммоль) подвергали гидролизу при перемешивании с 1н NaOH (5 экв.) в ТГФ (0,07 М) и достаточным количеством МеОН для получения прозрачного раствора. Реакцию контролировали с помощью ТСХ (10% MeOH-CH₂Cl₂) относительно исчезновения исходного вещества. Когда реакция была завершена, смесь концентрировали, разбавляли H₂O и подкисляли до рН 2-4 с помощью 1М HCl. Водную фазу экстрагировали с помощью EtOAc, и органическую фазу промывали насыщенным раствором соли, сушили над сульфатом натрия и концентрировали с получением 200 мг (92%) 3-{4-[2-{5-хлор-1-(дифенилметил)-2-[2-({[2-(трифторметил)бензил]сульфонил}амино)этил]-1H-индол-3-ил}этил]сульфонил}фенил}пропановой кислоты в виде белой пены. ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 2,65 (т, J=7,6 Гц, 2H), 2,91-3,13 (м, 8Н), 3,60 (дд, J=9,7, 5,4 Гц, 12Н), 4,46 (с, 2Н), 6,48 (д, J=8,8 Гц, 1H), 6,83 (дд, J=8,7, 2,1 Гц, 1H), 7,05-7,16 (м, 5Н), 7,19 (д, J=2,3 Гц, 1H), 7,33-7,47 (м, 6H), 7,53-7,72 (м, 6H), 7,80 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,94 (д, J=8,3 Гц, 2Н), 12,26 (с, 1H); МСВР: Вычислено для C₄₂H₃₈ClF₃N₂O₆S₂+H+, 823,18847; найдено (ИЭС-МСФП, [М+Н]¹⁺), 823,1887; чистота по ВЭЖХ H₂O/CH₃CN: 100%, H₂₀MeOH: 100%.

Пример 2 «Экспериментальная проверка концепции» эксперимент in vitro по пенетрации и проникновению лекарственного средства

Как правило, эксперименты in vitro по кожному прониканию включают в себя использование диффузионных ячеек, предназначенных для имитации физиологических и анатомических условий кожи in situ. Модель, используемая в данном эксперименте, представляла собой диффузионные ячейки Франца (документ Finnin et al. Topical and Transdermal Drug Delivery 2012: 85-100, Benson and Watkinson (Eds), включенный в настоящую заявку посредством ссылки). Кожу подготовленную, как описано ниже, располагали между двумя половинами ячейки с роговым слоем, обращенным к донорской камере, допускающей применение лекарственного средства. Целью работы являлось сравнение концентрации препарата, проникающего в и через дерматомированную человеческую кожу при нанесении из различных составов/систем растворителей. Там, где это возможно, метод проводили в соответствии с рекомендациями OECD 428.

Подготовка кожи

Использовали человеческую кожу из пластической операции по удалению лишней кожи. Подкожный жир удаляли механическим способом, и кожу дерматомировали до толщины 400±100 мкм с использованием скальпеля Nouvag.

Мелкомасштабное исследование чрезкожного проникания

Эксперимент, проводимый с целью определения выполнимости, проводили следующим образом:

Подготовка ячеек Франца

(I) Использовали диффузионные ячейки Франца со средней площадью поверхности приблизительно 0,6 см² и объемом приблизительно 2,0 мл.

(II) Кожу (полученную, как описано выше) закрепляли между донорской и приемной камерой, и ячейки герметизировали вместе с использованием парафильма и скоб.

(III) Для проверки целостности кожи донорские и приемные камеры заполняли раствором PBS (приготовленного растворением 1 таблетки PBS в 100 мл воды), и небольшую магнитную мешалку помещали в приемной камере.

(IV) Ячейки выдерживали в водяной бане, обеспечивая температуру мембраны 32°С в течение 30 мин (температура водяной бани 37°С).

(V) Сопротивление кожи в каждой ячейке Франца измеряли с помощью LCR 6401 DataBridge.

(VI) Электроды помещали в приемную камеру через отвод для отбора проб и донорскую камеру.

(VII) LCR устанавливали на уровне 100 Гц, и устанавливали на 'R' для сопротивления.

(VIII) Ячейки с сопротивлением ниже допустимых пределов отбрасывали и собирали заново. Допустимые пределы определяют в соответствии с измерением контрольных образцов для дерматомированной кожи, где кожа была намеренно нарушена. Ячейки с сопротивлением более чем в два раза (кОм), чем у контрольных образцов признавали приемлемыми и выбирали для эксперимента по прониканию с применением ячеек Франца.

(IX) После тестирования целостности кожи приемной камеры приемлемые ячейки заполняли жидкостью приемника. Каждую ячейку затем уравновешивали, чтобы обеспечить температуру поверхности 32°C (внешняя температура поверхности кожи) в течение, по меньшей мере, 30 мин перед дозированием (температура водяной бани 37°С).

(Х) Дополнительные ячейки Франца (в расчете на донора кожи) также устанавливали, но не дозировали (для участия в качестве контроля) для оценки помех для количественного анализа образцов.

Дозирование анализируемых систем растворителей и методика отбора образцов

Две системы растворителей выбирали для мелкомасштабного исследования in vitro проникания лекарственного средства и дозировали, как описано ниже:

(I) Ячейки собирали, как описано выше.

(II) Собирали девять ячеек. Две системы растворителей (n=3), соответствующую систему растворителей-плацебо (n=1) и пустую ячейку (n=1) оценивали в ходе эксперимента, проводимого с целью определения выполнимости.

(III) Выбранные системы растворителей (6 мг) применяли непосредственно к поверхности кожи с помощью пипетки прямого вытеснения (в результате в дозе приблизительно 10 мг/см²). Пипетку проверяли на количество отмеряемого количества перед дозированием для обеспечения воспроизводимости дозы. Проверку отмеряемого количества проводили путем взвешивания 6 повторений в стеклянной виале. Применяемые массы и объемы (для обеспечения дозы 6 мг) записывали.

(IV) Жидкость приемника (200 мкл) удаляли в следующих временных точках t=0, 1, 2, 4, 6, 24, 30 и 48 ч. Каждый образец разделяли на 2×виалы для ЖХМС (100 мкл на пробирку), где одну виалу обрабатывали с использованием внутреннего стандарта (1:1) и анализировали с помощью ЖХ-МС/МС. Вторую виалу хранили при -20°С в качестве запасной.

(V) Свежую предварительно нагретую жидкость приемника (200 мкл) использовали для замены жидкости приемника, удаленной в каждый момент времени.

(VI) После временной точки 48 ч, соединение I извлекали из ячейки Франца, как описано ниже.

Исследование проникания

После окончания эксперимента по прониканию, количественное определение остаточного соединения I из донорской камеры, на поверхности кожи, в роговом слое, эпидермисе и частичной дерме проводили с использованием следующей методики:

Извлечение из донорской камеры

(I) Для извлечения соединения I из донорской камеры (I) использовали три ватных тампона.

(II) После разборки ячейки Франца один из сухих ватных тампонов использовали для удаления остатков растворителя из всех внутренних поверхностей донорской камеры, и тампон помещали в виалу емкостью 7 мл.

(III) Второй тампон затем погружали в экстрагент и затем использовали, чтобы протереть внутреннюю поверхность ячейки Франца, этот тампон помещали в виалу, содержащую первый тампон.

(IV) Последний тампон использовали сухим, чтобы протереть внутри ячейку Франца, а затем помещали в стеклянную виалу, содержащую два других тампона.

(V) С помощью пипетки 2 мл экстргента добавляли в стеклянную виалу, содержащую ватные тампоны.

(VI) Виалы встряхивали на орбитальном встряхивателе при температуре окружающей среды в течение 16-20 ч.

(VII) После процедуры экстракции, экстракционную систему растворителей удаляли из виал и центрифугировали при 13000 оборотах в минуту (16060g-сила) в течение 10 мин с использованием центрифуги Heraeus Labofuge pico, чтобы удалить нерастворенные вещества и твердые частицы.

(VIII) Надосадочную жидкость разделяли на 2 аликвоты (100 мкл в одной виале, а остальная часть во второй виале), где одну виалу обрабатывали с использованием внутреннего стандарта (1:1) и анализировали с помощью ЖХ-МС/МС. Вторую виалу хранили при -20°C в качестве запасной.

Извлечение с верхней поверхности кожи

(I) Для извлечения соединения I с поверхности кожи (I) использовали три ватных тампона.

(II) После того как отсоединили донорскую камеру от ячейки Франца один из сухих ватных тампонов использовали для удаления всех остатков растворителя с поверхности кожи, и тампон помещали в виалу емкостью 7 мл.

(III) Второй тампон затем погружали в растворитель для экстракции и использовали, чтобы протереть поверхность кожи, этот тампон затем помещали в виалу, содержащую растворитель для промывки и первый тампон.

(IV) Последний тампон использовали сухим, чтобы протереть поверхность кожи, а затем помещали в стеклянную виалу, содержащую два других тампона.

(V) Первую ленточную полоску с поверхности кожи также помещали с ватными тампонами со стадии (IV)

(VI) Выполняли стадии (V)-(VIII) способа извлечения из донорской камеры, чтобы завершить извлечение соединения I с поверхности кожи.

Извлечение из рогового слоя

(I) До 5 ленточных полосок удаляли с поверхности кожи, чтобы отделить роговой слой от эпидермиса и помещали в виалу емкостью 7 мл.

(II) Выполняли стадии (V)-(VIII) способа извлечения из донорской камеры, чтобы завершить извлечение соединения I из рогового слоя.

Способ разделения и извлечения из эпидермальной мембраны и частичной дермы

Оставшийся эпидермис и частичную дерму обрабатывали следующим образом:

(I) Эпидермис и дерму помещали в инкубатор при 60°С в течение 2 мин.

(II) Эпидермис и дерму затем удаляли из инкубатора и вручную разделяли, используя руки в перчатках.

(III) Эпидермальный и дермальный слои кожи помещали в отдельные виалы для гомогенизатора Precellys 24, и добавляли 1 мл растворителя для экстракции.

(IV) Виалу Precellys со стадии (III) помещали в Precellys 24, и содержимое гомогенизировали при 5800 оборотах в минуту в течение 2 × 20 секунд при температуре 2-8°С.

(V) Содержимое виалы Precellys со стадии (IV) переливали в стеклянную виалу емкостью 7 мл.

(VI) Экстракционный разбавитель (1 мл) добавляли в пустую виалу Precellys со стадии (V), и виалу подвергали вихревому перемешиванию в течение приблизительно 30 секунд, содержимое затем выливали в стеклянную виалу со стадии (V).

(VII) Выполняли стадии (VI)-(VIII) способа извлечения из донорской камеры, чтобы завершить извлечение соединения I из эпидермиса и дермы.

Полномасштабное исследование проникания и пенетрации

Полномасштабный эксперимент in vitro по пенетрации и прониканию лекарственного средства проводили, как описано по отношению к мелкомасштабным экспериментам, со следующими изменениями:

(I) Исследовали две системы растворителей с соединением I, близкие к насыщению: одна со средствами, способствующими прониканию (n=4 активное соединение, n=1 плацебо), и одна без средств, способствующих прониканию (n=4 активное соединение, n=1 плацебо)

(II) Использовали кожу от 3 доноров, т.е. в общей сложности 33 ячейки (n=12 ячеек на активное соединение, n=3 ячейки на плацебо в расчете на состав и n=3 ячейки в качестве контроля в расчете на донора кожи).

Анализ данных

Анализ полученных данных и статистическое сравнение образцов, полученных в ходе эксперимента in vitro по кожному прониканию, проводили следующим образом:

(I) Концентрацию (нг/мл) соединения I, обнаруженного в каждом образце, количественно измеряли на основании калибровочных стандартов, анализируемых в то же время на ЖХ-МС/МС.

(II) Рассчитывали общее количество (нг) соединения I на единицу отобранного объема (общий объем/отобранный объем=нг/мл×отобранный объем).

(III) Затем рассчитывали общее количество (нг) соединения I, извлеченного в каждый момент времени (общая сумма=нг/мл×общий объем каждой ячейки Франца).

(IV) Совокупное количество (нг) соединения I рассчитывали путем сложения общего количества (нг, стадия (III)) в каждый момент времени с общим количеством, извлеченным (нг) в каждой из предыдущих временных точек (стадия (II)).

(V) Совокупное количество на единицу площади соединения I (нг/см²) рассчитывали путем деления совокупного количества (нг, стадия (IV)) на площадь диффузии (нг/см²=совокупное количество (нг)/площадь диффузии),

(VI) Любые выпадающие значения отклоняли в соответствии с внутренними процедурами, однако описывали все данные

(VII) Скорости потока (где это возможно) и проникание рассчитывали исходя из концентраций соединения I, измеренных в жидкости приемника в течение долгого времени и концентрации, извлеченной из дермы, соответственно.

Определение выпадающих значений

Предполагаемые выпадающие значения в эксперименте по прониканию/пенетрации подтверждали и исключали из дальнейшего анализа данных, если их данные проникания превышали пределы, определенные следующим образом:

среднее значение+(2×стандартное отклонение)<выпадающее значение<среднее значение-(2×стандартное отклонение)

Статистический анализ

Статистический анализ данных проникания и степени извлечения из донорской камеры, поверхности, рогового слоя, эпидермиса, дермы и жидкости приемника проводили с помощью программы SPSS. Данные по степени извлечения анализировали, чтобы подтвердить, была ли дисперсия каждой группы одинаковой с использованием критерия Левена. Если данные были одинаковой или неодинаковой дисперсии, определенное значение р составляло либо р>0,05, либо р≤0,05, соответственно. Впоследствии, независимый критерий Стьюдента использовали с учетом одинаковой (то есть р>0,05) или неодинаковой дисперсии (то есть р<0,05), и статистическое сравнение проводили для количества соединения I, извлеченного из каркасов кожи. Сравнение между степенью извлечения соединения I из рогового слоя, эпидермиса и дермы из одних и тех же составов анализировали на нормальность с помощью критерия Шапиро-Уилка, чтобы определить, если данные были либо параметрическими, либо непараметрическими, где определенное значение р составляло либо р>0,05, либо р≤0,05, соответственно. Если данные были параметрическими (т.е. нормально распределены, р>0,05, определенная с помощью критерия Шапиро-Уилка) статистическое сравнение проводили с использованием однофакторного анализа ANOVA Tukey's HSD. Однако, если устанавливали, что данные были непараметрическими (т.е. неодинаковая дисперсия р≤0,05, определенная с помощью критерия Шапиро-Уилка) статистическое сравнение данных проводили с использованием однофакторного анализа ANOVA с Post Hoc Tamhane.

Результаты

Мелкомасштабный эксперимент по проникновению/пенетрации

Мелкомасштабный эксперимент по проникновению проводили с помощью следующей процедуры:

Оценивали соединение I в ПЭГ-400 (SS1) и соединение I в ПЭГ-400 (75% масс./масс.) и Транскутоле Р (25% масс./масс.) (SS2), n=3 ячейки в расчете на систему растворителей с использованием кожи от одного донора (дерматомированная человеческая кожа)

Дозировка: приблизительно 6 мг (т.е. 10 мг/см²)

EtOH (20% об./об.) в воде использовали в качестве жидкости приемника

Образцы жидкости приемника брали в t=0, 1, 2, 4, 6, 24, 30 и 48 ч. Два объема образца исследовали из-за низкой растворимости соединения I в возможных жидкостях приемника; 200 мкл и 1,5 мл.

После последней временной точки соединения I извлекали из донорской камеры, поверхности, рогового слоя, эпидермиса и дермы с использованием гомогенизации тканей и экстракции растворителем (разбавитель: 90:10, EtOH:вода).

Мелкомасштабный эксперимент использовали для подтверждения протокола для полномасштабного эксперимента по прониканию/пенетрации. Соединение I не обнаруживали в жидкости приемника больше времени протекания эксперимента 48 ч независимо от объема образца.

Значения для степени извлечения соединения I после применения систем растворителей SS1 и SS2 показаны на фигуре 1 с количеством извлеченного с поверхности, удаленного на фигуре 2 для простоты интерпретации данных. Для каждой примененной системы растворителей общая степень извлечения соединения I находилась в диапазоне 90,00-109,72% от примененной дозы. Наибольшее количество соединения I извлекали из системы растворителя, остающегося на поверхности. Соединение I также извлекали из рогового слоя, эпидермиса и дермы в аналогичных количествах.

Полномасштабный эксперимент in vitro по проникновению и пенетрации

Проникновение и пенетрацию соединения I из двух систем растворителей оценивали с использованием кожи живота от трех доноров кожи. Среднее совокупное количество (нг/см²) соединения I, проникшего после применения систем растворителей через дерматомированную кожу, наносили на график в зависимости от времени (ч). Эти системы растворителей представляли собой: Соединение I в ПЭГ-400 (FSS1) и соединение I в ПЭГ-400 (60% масс./масс.), Арласолве dmi (15% масс./масс.) и Транскутоле Р (25% масс./масс.) (FSS2). Количество соединения I (нг, среднее значение±SEM) из донорской камеры, поверхности, рогового слоя, кожи, эпидермиса, дермы и жидкости приемника определяли у всех трех доноров кожи.

Проникновение in vitro соединения I из двух систем растворителей (FSS1 и FSS2) через дерматомированную кожу живота от трех доноров в течение 48-часового времени эксперимента показано на фигуре 3. Проникновение соединения I наблюдали при низких уровнях от обеих систем растворителей в течение 24 ч экспериментального периода с соединением I, которое впервые обнаруживали в жидкости приемника через 1 ч после применения систем растворителей (FSS1 и FSS2). Профили проникновения соединения I для обеих систем растворителей после аналогичной тенденции с соединением I, присутствующим в жидкости приемника в t=1 ч, за которым следует плато, уменьшение к концу профиля были в пределах ошибки и считали результатом низкого уровня соединения I, которое количественно оценивали, и изменчивости от донора к донору. Несмотря на низкие уровни обнаруженного соединения I в жидкости приемника проникновение соединения I после нанесения FSS1 наблюдалось значительно выше (р <0,05), чем проникание соединения I после применения FSS2. Проникновение in vitro соединения I из систем растворителей (FSS1 и FSS2) через дерматомированную кожу живота от трех доноров показано на фигурах 4 и 5. Наблюдалось, что степень извлечения соединения I после последней временной точки составляет 101,47% и 87,39% от применяемой дозы для систем растворителей FSS1 и FSS2, соответственно. Соединение I извлекали в самых высоких количествах с поверхности кожи после применения FSS1 и FSS2, которое находилось в диапазоне приблизительно 82% (FFS2)-приблизительно 97% (FSS1) от примененной дозы.

Для облегчения интерпретации данных количество соединения I, извлеченного с поверхности, было удалено на фигуре 5, чтобы выделить степень извлечения соединения I из рогового слоя, эпидермиса, дермы и жидкости приемника между системами растворителей (FSS1 и FSS2). Количество соединения I, извлеченного после применения FSS1, было самым высоким (на основании средних количеств) в эпидермисе (3281±1435 нг)>в роговом слое (1976±729 нг)>в дерме (1593±609 нг)>в жидкости приемника (4,67±0,58 нг). Количество соединения I, извлеченного из слоев кожи и жидкости приемника после применения FSS2, было ниже (хотя никаких существенных различий не наблюдалось между слоями кожи, р>0,05, количество приемного соединения I, извлеченного из приемной жидкости было значительно ниже, (р<0,05)), чем извлеченное количество после применения FSS1. Порядок ранжирования соединения I, извлеченного из каркасов кожи отличается от того, который наблюдался с применением FSS1, с наибольшим количеством (на основании среднего количества) соединения I, извлеченного из дермы (1126±543 нг)>в роговом слое (931±310 нг)>в эпидермисе (352±113 нг)>в жидкости приемника (0,89±0,27 нг). Тем не менее, разницу в порядке ранжирования не рассматривали, поскольку уровни, извлеченные в роговом слое, эпидермисе и дерме существенно не отличались (р>0,05) для каждой системы растворителей.

Примерную концентрацию соединения I в эпидермисе и дерме рассчитывали, используя следующую процедуру:

a. Предполагалось, что толщина эпидермиса и частичной дермы находится между 30-130 и 250-350 мкм, соответственно (использовали диапазон толщины кожи, чтобы обеспечить лучший и худший сценарий для уровня соединения I, обнаруженного в эпидермисе).

b. Площадь использованной кожи составляла приблизительно до 0,6 см², и, следовательно, объем эпидермиса и частичной дермы составлял 0,0018-0,0078 и 0,015-0,021 см³, соответственно.

c. Предполагая, что плотность кожи 1, и что 1 см³=1 г, масса эпидермиса и частичной дермы будет составлять 0,0018-0,0078 и 0,015-0,021 г, соответственно.

d. Общее количество соединения I, извлеченного из эпидермиса и частичной дермы, затем делили на массу, чтобы получить приблизительное количество (нг/г) извлеченного соединения I.

e. Извлеченное количество (нг/г) затем делили на молекулярную массу (823,34 Да), чтобы обеспечить концентрацию в наномоль/г, которую впоследствии преобразовывали в микромоль/кг (микромолярность) соединения I, извлекаемого из эпидермиса и дермы (эквивалент микромолярности (мкмоль/л; мкМ) при предположении о том, что плотность кожи составляет 1 г/см³).

Результаты расчета приведены в таблице 2. Соединение I представляет собой субнизкий наномолярный ингибитор активности cPLA2α в клеточных и ферментных анализах. Концентрации, обнаруженные в эпидермисе и дерме, свидетельствует, что они являются достаточными, чтобы значительно ингибировать биологическую активность cPLA2α на этих участках.

Таблица 2. Диапазон концентраций соединения I (мкМ) в эпидермисе и дерме (на основании средних количеств и диапазона толщины кожи) после применения FSS1 и FSS2 в момент времени 48 ч. Значения представляют собой диапазон, основанный на толщине кожи и среднем извлеченном количестве, n=9-10.

Слой кожи Средняя концентрация (мкМ) FSS1 FSS2 Эпидермис 511-2214 55-238 Дерма 92-129 65-91

Пример 3 - Воздействие на PMA-индуцированное воспаление у мышей

Форбол 12-миристат-13-ацетат (РМА) обычно используется, чтобы вызвать воспаление и отек кожи лабораторных животных в качестве доклинической модели воспаления.

В настоящем примере РМА растворяли в 10%-ном растворе этанола до конечной концентрации 0,4 мкг на мкл. 10 мкл наносили на уши лабораторных мышей Balb/C через 1 час после местного применения 3-{4-[2-{5-хлор-1-(дифенилметил)-2-[2-({[2-(трифторметил)бензил]сульфонил}амино)этил]-1H-индол-3-ил}этил]сульфонил}фенил}пропионовой кислоты (соединение I) в 10%-ном растворе этанола при либо 0,3%, либо 3% масс./масс. В качестве отрицательного контроля применяли растворитель (плацебо) без активного соединения. Положительный контроль представлял собой индометацин (нестероидный противовоспалительный препарат) и CAY10650 (известный ингибитор cPLA2α).

Уровень отека контролировали путем измерения толщины уха с помощью штангенциркуля с интервалами 1, 3, 6 и 24 часов.

На фигуре 6 показано изменение толщины уха с течением времени (в часах после нанесения РМА) для различных доз 3-{4-[2-{5-хлор-1-(дифенилметил)-2-[2-({[2-(трифторметил)бензил]сульфонил}амино)этил]-1H-индол-3-ил}этил]сульфонил}фенил}пропионовой кислоты (обозначено как соединение I).

На фигуре 7 показано сравнение 3-{4-[2-{5-хлор-1-(дифенилметил)-2-[2-({[2-(трифторметил)бензил]сульфонил}амино)этил]-1H-индол-3-ил}этил]сульфонил}фенил}пропионовой кислоты (обозначено как соединение I) другими соединениями.

Было установлено, что локально нанесенная 3-{4-[2-{5-хлор-1-(дифенилметил)-2-[2-({[2-(трифторметил)бензил]сульфонил}амино)этил]-1H-индол-3-ил}этил]сульфонил}фенил}пропионовая кислота демонстрирует дозозависимое уменьшение PMA-опосредованного отека кожи с эффективностью, сравнимой с перорально введенной дозой индометацина.

Это свидетельствует о том, что препарат эффективен in vivo при местном применении.

Пример 4 - Получение мазей на основе ПЭГ

Несколько мазей, как описано в таблице 3, получали в соответствии со следующей процедурой:

(I) Взвешивали ПЭГ-400 в стеклянном контейнере соответствующего размера.

(II) Соединение I взвешивали (где это применимо) в блюдце весов, а затем переносили в систему со стадии (I) и перемешивали до тех пор, пока не наблюдали полное растворение.

(III) Следующие эксципиенты (где это применимо), пропиленгликоль, этанол, вода и глицерин, последовательно взвешивали в контейнере со стадии (II), помещали магнитную мешалку, и содержимое перемешивали до тех пор, пока не наблюдали визуально однородный раствор.

(IV) ПЭГ 400 взвешивали в отдельном стеклянном контейнере соответствующего размера и нагревали на водяной бане, предварительно точно установленной на 65°С.

(V) ПЭГ 400 перемешивали до тех пор, пока не наблюдали получение прозрачного расплава, и в этот момент его добавляли в систему растворителей (стадия (III)), которую подогревали до 61°С.

(VI) Композицию (стадия (IV)) перемешивали до тех пор, пока она визуально не становилась однородной, и затем удаляли из водяной бани.

(VII) Композицию перемешивали до тех пор, пока она не достигала температуры окружающей среды.

Таблица 3

Состав (% масс./масс.) композиций мазей

Состав (% масс./масс.) Назва-ние мази ПЭГ-400 ПГ Этанол Вода Глице-рин ПЭГ-4000 Соединение I ВСЕГО O2 69,9 5,1 0 5 0 17 3 100 O2X 69,9 5,1 0 0 5 17 3 100 O4 50 19 0 5 5 20 1 100 O4v4 52,5 16,5 0 5 5 20 1 100 O4v4E 52,5 16,5 5 5 0 20 1 100 O5v2 45 25 0 10 0 19,7 0,3 100 O5v2E 45 25 5 5 0 19,7 0,3 100 O5X 45 25 0 0 10 19,7 0,3 100 O5EX 45 25 5 0 5 19,7 0,3 100 O7 59,9 0 10 5 5,1 17 3 100 O8 59,9 5 10 0 5,1 17 3 100

Пример 5 - Приготовление композиций кремов и лосьонов

Композиции кремов и лосьонов, как описано в таблицах 4, 5 и 6, получали, как описано ниже:

(I) Взвешивали ПЭГ-400 в стеклянном контейнере соответствующего размера.

(II) Соединение I взвешивали (где это применимо) в блюдце весов, а затем переносили в систему со стадии (I), и перемешивали в течение ночи.

(III) Оставшиеся эксципиенты водной фазы взвешивали в контейнере со стадии (II), и содержимое перемешивали.

(IV) Гелеобразующий агент (если это применимо) добавляли во флакон со стадии (III) и гомогенизировали в течение 30 секунд или до тех пор, пока не наблюдалась полная дисперсия гелеобразующего агента.

(V) В отдельном подходящего размера стеклянном контейнере эксципиенты масляной фазы взвешивали, и масляную фазу нагревали на водяной бане, предварительно точно установленной на 65°С.

(VI) Масляную фазу перемешивали до тех пор, пока не наблюдали прозрачный расплав.

(VII) Когда наблюдали прозрачный расплав масляной фазы со стадии (III), водную фазы со стадии (V) предварительно нагревали в течение не более 5 мин на водяной бане, точно установленной на 61°С.

(VIII) Масляную фазу медленно переносили в водную фазу, и композицию со стадии (VII) гомогенизировали на максимальном значении скорости (10000 оборотов в минуту) в течение 2 мин. До гомогенизации композиции днище гомогенизатора предварительно нагревали.

(IX) Композицию затем перемешивали вручную, пока она не охладилась до комнатной температуры.

Таблица 4

Примеры кремов на основе Твин/Спан

Состав (% масс./масс.) Эксципиент Крем 1 на основе Твин/Спан Крем 2 на основе Твин/Спан Крем 4 на основе Твин/Спан Этанол 5 - 5 Вода 19,7 19,7 11,5 ПЭГ-400 36 41 43,5 Транскутол P 15 - 15 Арласолв DMI - 15 - Бензиловый спирт 2 2 2 Феноксиэтанол - - - Карбопол 980 - - - Твин 60 5 5 5 Спан 60 2 2 2 Белый мягкий парафин - - - Жидкий парафин - - - Цетостеариловый спирт 5 5 5 Цетомакрогол 1000 - - - Кромадол GTCC 10 10 10 Соединение I 0,3 0,3 1 ВСЕГО 100 100 100

Таблица 5

Примеры композиций кремов (цетомакрогол)

Состав (% масс./масс.) Эксципиент Крем 1 Крем 2 Крем 3 Крем 4 Крем 6 Крем 7 Крем 7PE Крем 9 Этанол - 5 5 - - 5 5 5 Вода 19,7 15,7 5 19,5 19,7 13,7 13,7 10,5 ПЭГ-400 41 33 38 41 51,7 36 37 43,5 Транскутол P - 15 15 - - 15 15 15 Арласолв DMI 15 - - 15 15 - - - Бензиловый спирт 2 2 2 2 2 2 - 2 Феноксиэтанол - - - - - - 1 - Карбопол 980 - - - 0,5 0,5 1 1 1 Твин 60 - - - - - 5 5 - Белый мягкий парафин 8 6 10 8 1 8 8 8 Жидкий парафин 6 10 10 6 - 6 6 6 Цетостеариловый спирт 6 10 12 6 3 6 6 6 Цетомакрогол 1000 2 3 3 2 1,8 2 2 2 Кромадол GTCC - - - - 5 - - - Соединение I 0,3 0,3 - - 0,3 0,3 0,3 1 ВСЕГО 100 100 100 100 100 100 100 100

Таблица 6

Примеры композиций лосьонов

Состав (% масс./масс.) Эксципиент Лосьон 1 на основе цето-макрогола Лосьон 2 на основе цето-макрогола Лосьон 3 на основе цето-макрогола Лосьон 4 на основе Твин/Спан Лосьон 5 на основе Твин/Спан Лосьон 6 на основе цето-макрогола Лосьон 7 на основе Myrj/GMS Лосьон 8 на основе Myrj/GMS Вода 19,5 19,5 19,5 20 20 20 20 19,2 ПЭГ-400 41 41 41 48 49 51,7 51,75 52,25 Арласолв DMI 15 15 15 15 15 15 15 15 Бензиловый спирт 2 2 2 2 2 2 2 2 Карбопол 980 - - - - - 0,5 0,5 0,5 Белый мягкий парафин 4 - - - - 1 - - Жидкий парафин 9,5 13,5 16,3 - - - - 5 Кромадол GTCC - - - 5 5 5 5 - Цетостеариловый спирт 7,2 7,2 5 3 2 3 3 3 Цетомакрогол 1000 1,8 1,8 1,2 - - 1,8 - - Твин 60 - - - 5 5 - Спан 60 - - - 2 2 - Myrj S40 - - - - - - 2 2 GMS - - - - - - 0,75 0,75 Соединение I 0 0 0 0 0 0 0 0,3 ВСЕГО 100 100 100 100 100 100 100 100

Пример 6 - Получение композиций гелей

Несколько композиций гелей, как описано в таблице 7, получали следующим образом:

Композиции гелей

(I) Взвешивали ПЭГ-400 в стеклянном контейнере соответствующего размера.

(II) Соединение I взвешивали (где это применимо) в блюдце весов, а затем переносили в систему со стадии (I), и перемешивали до тех пор, пока не наблюдали полное растворение.

(III) Следующие эксципиенты (этанол, вода, пропиленгликоль, Транскутол P, Арласолв DMI, бензиловый спирт и феноксиэтанол, где это применимо) последовательно взвешивали в стеклянном флаконе со стадии (II).

(IV) Помещали магнитную мешалку во флакон со стадии (III), и содержимое флакона перемешивали до визуально однородного состояния.

(V) Гелеобразующий агент (HPC/Карбопол 980) взвешивали в блюдце весов и переносили медленно (уменьшая риск агломерации гелеобразующего агента) во флакон со стадии (IV) при постоянном перемешивании.

(VI) Для получения гелей на основе Карбопола проверяли значение рН, чтобы убедиться, что оно составляло приблизительно рН 6, когда не возникало бы необходимости регулирования рН.

(VII) Композиции перемешивали до тех пор, пока не наблюдали полной гидратации гелеобразующего агента.

Композиции эмульгированных гелей

(I) Взвешивали ПЭГ-400 в стеклянном контейнере соответствующего размера.

(II) Соединение I взвешивали (где это применимо) в блюдце весов, а затем переносили в систему со стадии (I), и перемешивали до тех пор, пока не наблюдали полное растворение.

(III) Следующие эксципиенты (этанол, вода, пропиленгликоль, Транскутол P, Арласолв DMI, бензиловый спирт, феноксиэтанол и полоксамер 407, где это применимо) взвешивали в стеклянном флаконе со стадии (II).

(IV) Помещали магнитную мешалку во флакон со стадии (III), и содержимое флакона перемешивали до визуально однородного состояния.

(V) Гелеобразующий агент (карбопол 980) взвешивали в блюдце весов и переносили медленно (уменьшая риск агломерации гелеобразующего агента) во флакон со стадии (IV) при постоянном перемешивании.

(VI) Проверяли значение рН, чтобы убедиться, что оно составляло приблизительно рН 6, когда не возникало бы необходимости регулирования рН.

(VII) Циклометикон взвешивали в стеклянном флаконе со стадии (V), и систему гомогенизировали в течение 2 мин при 10000 оборотах в минуту до тех пор, пока не наблюдали полную дисперсию циклометикона.

(VIII) Композиции затем перемешивали до тех пор, пока не наблюдали полной гидратации гелеобразующего агента.

Таблица 7

Примеры составов гелей

Эксципиент
(% масс./масс.) Этанол Вода ПЭГ-400 ПГ Транскутол P Арласолв DMI Бензиловый спирт Феноксиэтанол Циклометикон IPM Полоксамер 407 HPC HF Карбопол 980 Соединение I ВСЕГО Гель 1 (HPC) 10 10 51 - 22 - 2 - - - - 2 - 3 100 Гель 1 (C980) 10 10 51 - 22 - 2 - - - - - 2 3 100 Гель 1v2 (C908) 10 10 52 - 22 - 2 - - - - - 1 3 100 Гель 1v3(C980) 10 10 51,5 - 22 - 2 - - - - - 1,5 3 100 Гель 4 (HPC) 10 9,5 59 - - 15 2 - - - - 1,5 - 3 100 Гель 4v3(C980) 10 9,5 59 - - 15 2 - - - - - 1,5 3 100 Гель 7v3(C980) 10 19 26,5 - 25 15 2 - - - - - 1,5 1 100 Гель 7PE - 19 27,5 10 25 15 - 1 - - - - 1,5 1 100 Гель 7BA - 19 26,5 10 25 15 2 - - - - - 1,5 1 100 Эмульгированный гель 1 (IPM) 10 11,5 40,5 5 15 - 2 - - 13 1 - 1 1 100 Эмульгированный гель 1 (циклометикон) 10 11,5 40,5 5 15 - 2 - 13 - 1 - 1 1 100 Эмульгированный гель 1v2 10 11,25 40,5 5 15 - 2 - 13 - 1 - 1,25 1 100

В то время как изобретение было описано подробно и со ссылкой на конкретные варианты его осуществления, будет очевидно для специалиста в данной области техники, что различные изменения и модификации могут быть сделаны в нем без отступления от сущности и объема изобретения. Кроме того, все варианты осуществления, описанные в настоящем документе, считаются широко применимыми и комбинируемыми с любыми и всеми другими соответствующими вариантами осуществления в зависимости от обстоятельств.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и представляет собой фармацевтическую композиция для местного нанесения на кожу для лечении воспаления и/или отека у пациента, содержащая от 0,01% до 10% масс./масс. соединения формулы I или его фармацевтически приемлемую соль, где композиция находится в форме для местного применения и содержит растворитель, сорастворитель, вещество, способствующее проникновению и воду. Изобретение обеспечивает проникновение в более глубокие слои кожи и противовоспалительное действие. 4 н. и 37 з.п. ф-лы. 6 пр., 7 табл., 7 ил.

1. Фармацевтическая композиция для местного нанесения на кожу для лечении воспаления и/или отека у пациента, содержащая от 0,01% до 10% масс./масс. соединения формулы I:

или его фармацевтически приемлемой соли,

где композиция находится в форме для местного применения,

где композиция содержит растворитель, сорастворитель, вещество, способствующее проникновению, и воду.

2. Композиция по п. 1, в которой соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль присутствует в количестве от 0,3% до 3% масс./масс.

3. Композиция по п. 1, в которой соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль присутствует в количестве 0,01, 0,02, 0,03, 0,04, 0,05, 0,06, 0,07, 0,08, 0,09, 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10% масс./масс.

4. Композиция по п. 1, где композиция находится в форме, выбранной из мазей, гелей, кремов, лосьонов, эмульсий типа «масло в воде», эмульсий типа «вода в масле», микроэмульсий, пенок, спреев, муссов, пластырей, порошков, паст и лечебных пластырей.

5. Композиция по п. 2, где композиция находится в форме, выбранной из мазей, гелей, кремов, лосьонов, эмульсий типа «масло в воде», эмульсий типа «вода в масле», микроэмульсий, пенок, спреев, муссов, пластырей, порошков, паст и лечебных пластырей.

6. Композиция по п. 3, где композиция находится в форме, выбранной из мазей, гелей, кремов, лосьонов, эмульсий типа «масло в воде», эмульсий типа «вода в масле», микроэмульсий, пенок, спреев, муссов, пластырей, порошков, паст и лечебных пластырей.

7. Композиция по п.4, где композиция находится в форме мази, которая содержит 69,9% масс./масс. ПЭГ-400, 5,1% масс./масс. пропиленгликоля, 5% масс./масс. воды, 17% масс./масс. ПЭГ-4000 и 3% масс./масс. соединения формулы I.

8. Композиция по п.5, где композиция находится в форме мази, которая содержит 69,9% масс./масс. ПЭГ-400, 5,1% масс./масс. пропиленгликоля, 5% масс./масс. воды, 17% масс./масс. ПЭГ-4000 и 3% масс./масс. соединения формулы I.

9. Композиция по п.6, где композиция находится в форме мази, которая содержит 69,9% масс./масс. ПЭГ-400, 5,1% масс./масс. пропиленгликоля, 5% масс./масс. воды, 17% масс./масс. ПЭГ-4000 и 3% масс./масс. соединения формулы I.

10. Композиция по п.4, где композиция находится в форме мази, которая содержит 59,9% масс./масс. ПЭГ-400, 10% масс./масс. этанола, 5% масс./масс. воды, 5,1% масс./масс. глицерина, 17% масс./масс. ПЭГ-4000 и 3% масс./масс. соединения формулы I.

11. Композиция по п.5, где композиция находится в форме мази, которая содержит 59,9% масс./масс. ПЭГ-400, 10% масс./масс. этанола, 5% масс./масс. воды, 5,1% масс./масс. глицерина, 17% масс./масс. ПЭГ-4000 и 3% масс./масс. соединения формулы I.

12. Композиция по п.6, где композиция находится в форме мази, которая содержит 59,9% масс./масс. ПЭГ-400, 10% масс./масс. этанола, 5% масс./масс. воды, 5,1% масс./масс. глицерина, 17% масс./масс. ПЭГ-4000 и 3% масс./масс. соединения формулы I.

13. Композиция по любому одному из пп. 1-12, где композиция также содержит дополнительные терапевтические агенты.

14. Композиция по любому из пп. 1-12, которая дополнительно содержит эмульгатор.

15. Композиция по любому из пп. 1-12, дополнительно содержащая средство, повышающее вязкость.

16. Композиция по любому из пп. 1-12, дополнительно содержащая дополнительные терапевтические средства и эмульгатор.

17. Композиция по любому из пп. 1-12, дополнительно содержащая дополнительные терапевтические средства и средство, повышающее вязкость.

18. Композиция по любому из пунктов 1-12, которая дополнительно содержит эмульгатор и средство, повышающее вязкость.

19. Композиция по любому из пп. 1-12, дополнительно содержащая дополнительные терапевтические средства и средство, повышающее вязкость.

20. Применение фармацевтической композиция для местного нанесения по п.1 для лечения кожных воспалительных заболеваний или состояний.

21. Применение композиция по п. 20, где кожное воспалительное заболевание или состояние представляет собой зависимое от цитозольной фосфолипазы A2α или опосредованное цитозольной фосфолипазой A2α заболевание или состояние.

22. Применение композиции по п. 20, где кожное воспалительное заболевание или состояние выбирают из группы, включающей рубцевание, дерматит, пролиферативное заболевание или состояние, заболевание или состояние тучных клеток, ожог или контакт с аллергеном и/или раздражающим веществом.

23. Применение композиция по п. 20, где кожное воспалительное заболевание или состояние выбирают из группы, включающей атопический дерматит, буллезные расстройства, коллагенозы, псориаз, псориатические поражения, себорейный дерматит или контактный дерматит, экзему, крапивницу, зуд, розацею, узловатую почесуху, гипертрофическое рубцевание, образование келоидных рубцов, склеродермию, келоидный фолликулит затылка, болезнь Кавасаки, синдром Шегрена-Ларссона, болезнь Гровера, ожог первой степени, ожог второй степени, ожог третьей степени, ожог четвертой степени, муциноз кожи, солнечный кератоз, плоскоклеточный рак или меланому, астеатозную экзему, монетовидную экзему, экзему рук, гравитационную/варикозную экзему, экзематозный лекарственный дерматит, простой лишай, склероатрофический лишай, красный плоский лишай, раздражающий аллергический контактный дерматит, фотоаллергический дерматит/дерматит, обостряющийся от воздействия света, инфекционный дерматит, вторичный по отношению к бактериальной/вирусной/грибковой инфекции, зудящие заболевания, включая те, которые связаны с хроническими системными расстройствами, такие как уремический зуд, холестатический зуд, блашкит взрослых, аквадиния, аквагенный зуд, перуанский бальзам, зуд при желтухе, брахиорадиальный зуд, зуд, обусловленный действием лекарственного средства, зуд, вызванный гидроксиэтилкрахмалом, зудящие точки, простой хронический лишай, нейродермит, зуд при прионных болезнях, почесуха, почесуха пигментная, почесуха простая, анальный зуд, зуд мошонки, генитальный зуд, зудящие пятна, рефлекторный зуд, почечный зуд, зуд кожи головы, старческий зуд, ксеротическая экзема, зуд, связанный с ВИЧ-инфекцией, Т-клеточная лимфома, синдром Сезари и грибовидный микоз.

24. Применение композиции по п. 20, где кожное воспалительное заболевание или состояние выбирают из атопического дерматита и псориаза.

25. Применение композиции по п. 20, где композиция содержит дополнительные терапевтические агенты.

26. Фармацевтическая композиция для местного нанесения на кожу для лечения воспаления и/или отека у пациента, содержащая 3% масс./масс. соединения формулы I:

или его фармацевтически приемлемой соли,

69,9% масс./масс ПЭГ-400, 5,1% масс./масс. пропиленгликоля, 5% масс./масс. воды, и 17% (масс./масс.) ПЭГ-4000.

27. Композиция по п. 26, где композиция находится в форме, выбранной из мазей, гелей, кремов, лосьонов, эмульсий типа «масло в воде», эмульсий типа «вода в масле», микроэмульсий, пенок, спреев, муссов, пластырей, порошков, паст и лечебных пластырей.

28. Композиция по п. 27, где композиция находится в форме мази.

29. Композиция по любому из пп. 26-28, где композиция включает дополнительные терапевтические средства.

30. Композиция по любому из пп. 26-28, которая дополнительно содержит эмульгатор.

31. Композиция по любому из пп. 26-28, дополнительно содержащая средство, повышающее вязкость.

32. Композиция по любому из пп. 26-28, дополнительно содержащая дополнительные терапевтические средства и эмульгатор.

33. Композиция по любому из пп. 26-28, дополнительно содержащая дополнительные терапевтические средства и средство, повышающее вязкость.

34. Композиция по любому из пп. 26-28, которая дополнительно содержит эмульгатор и средство, повышающее вязкость.

35. Композиция по любому из пп. 26-28, дополнительно содержащая дополнительные терапевтические средства и средство, повышающее вязкость.

36. Применение фармацевтической композиция для местного нанесения по п. 26 для лечения кожных воспалительных заболеваний или состояний.

37. Применение композиции по п. 36, где кожное воспалительное заболевание или состояние представляет собой зависимое от цитозольной фосфолипазы A2α или опосредованное цитозольной фосфолипазой A2α заболевание или состояние.

38. Применение композиции по п. 36, где кожное воспалительное заболевание или состояние выбирают из группы, включающей рубцевание, дерматит, пролиферативное заболевание или состояние, заболевание или состояние тучных клеток, ожог или контакт с аллергеном и/или раздражающим веществом.

39. Применение композиции по п. 36, где кожное воспалительное заболевание или состояние выбирают из группы, включающей атопический дерматит, буллезные расстройства, коллагенозы, псориаз, псориатические поражения, себорейный дерматит или контактный дерматит, экзему, крапивницу, зуд, розацею, узловатую почесуху, гипертрофическое рубцевание, образование келоидных рубцов, склеродермию, келоидный фолликулит затылка, болезнь Кавасаки, синдром Шегрена-Ларссона, болезнь Гровера, ожог первой степени, ожог второй степени, ожог третьей степени, ожог четвертой степени, муциноз кожи, солнечный кератоз, плоскоклеточный рак или меланому, астеатозную экзему, монетовидную экзему, экзему рук, гравитационную/варикозную экзему, экзематозный лекарственный дерматит, простой лишай, склероатрофический лишай, красный плоский лишай, раздражающий аллергический контактный дерматит, фотоаллергический дерматит/дерматит, обостряющийся от воздействия света, инфекционный дерматит, вторичный по отношению к бактериальной/вирусной/грибковой инфекции, зудящие заболевания, включая те, которые связаны с хроническими системными расстройствами, такие как уремический зуд, холестатический зуд, блашкит взрослых, аквадиния, аквагенный зуд, перуанский бальзам, зуд при желтухе, брахиорадиальный зуд, зуд, обусловленный действием лекарственного средства, зуд, вызванный гидроксиэтилкрахмалом, зудящие точки, простой хронический лишай, нейродермит, зуд при прионных болезнях, почесуха, почесуха пигментная, почесуха простая, анальный зуд, зуд мошонки, генитальный зуд, зудящие пятна, рефлекторный зуд, почечный зуд, зуд кожи головы, старческий зуд, ксеротическая экзема, зуд, связанный с ВИЧ-инфекцией, Т-клеточная лимфома, синдром Сезари и грибовидный микоз.

40. Применение композиции по п. 36, где кожное воспалительное заболевание или состояние выбирают из атопического дерматита и псориаза.

41. Применение композиции по п. 36, где композиция содержит дополнительные терапевтические агенты.