КОМПОЗИЦИИ ДЛЯ МЕСТНОГО НАНЕСЕНИЯ, СОДЕРЖАЩИЕ N-АЦИЛ-ДИПЕПТИДНЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ И ГЛИКОЛЕВУЮ КИСЛОТУ Российский патент 2024 года по МПК A61K8/18 A61K8/365 A61K8/64 A61Q19/00 A61Q19/08 

ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

В настоящем изобретении предложены композиции для местного нанесения, содержащие комбинацию N-ацил-дипептидного производного и гликолевой кислоты. Композиции обеспечивают улучшенное проникновение дипептидного производного в кожу.

ПРЕДПОСЫЛКИ СОЗДАНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

В патенте США № 9,067,969 описаны различные N-ацил-дипептидные производные для лечения заболеваний и расстройств, варьирующих от рака и иммунных расстройств до патологий и расстройств кожной системы. В патенте ‘969 описана подгруппа N-ацил-дипептидных производных, содержащих валин (Val) и аланин (Ala), в качестве предпочтительных соединений для лечения, помимо прочего, изменений кожи, связанных со старением. В патенте ‘969 описаны различные способы введения указанных соединений, включая местные. Описаны композиции для местного нанесения, такие как растворы, гели, лосьоны, кремы, эмульсии и т. п., и количество N-ацил-дипептидного производного в таких композициях может находиться в диапазоне от 0,001% до 99,9 процента от массы или объема всей композиции. Обладатели патента также указывают, что эти композиции могут содержать другие косметические или фармацевтические агенты, включая гидроксикислоты, такие как гликолевая кислота, помимо сотен других агентов.

Хотя дипептидные производные из патента ‘969 содержат щелочной радикал, такой как аминогруппа, модифицированная путем ацилирования, в результате чего они теряют свою амфотерную природу и, следовательно, легче проникают в кожу, по-прежнему имеется потребность в улучшении их свойств проникновения в кожу.

На данный момент заявители обнаружили улучшенные композиции и способы увеличения проникновения N-ацил-дипептидных производных, содержащих Val и Ala, в кожу. В частности, заявители обнаружили, что проникновение этих соединений неожиданно повышается при сочетании с конкретными количествами гликолевой кислоты. Соответственно, предложены новые композиции и способы использования комбинации N-ацил-дипептидных производных формулы R₁-Val-Ala-R₂ и гликолевой кислоты.

ИЗЛОЖЕНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

В настоящем изобретении предложена композиция для местного нанесения, содержащая N-ацил-дипептидное производное, имеющее формулу:

R₁-Val-Ala-R₂,

или его изомер или соль, причем Val представляет собой валин, Ala представляет собой аланин, R₁ представляет собой ацильный радикал, имеющий до 19 атомов углерода; R₂ представляет собой OR₃, NHR₄ или NHNHR₅; R₃ представляет собой H, алкильный, аралкильный или арильный радикал, имеющий до 19 атомов углерода; и каждый из R₄ и R₅ независимо представляет собой H, ОН, алкильный, аралкильный, арильный или ацильный радикал, имеющий до 19 атомов углерода, и гликолевую кислоту, причем композиция содержит до около 10% масс. гликолевой кислоты.

В настоящем изобретении также предложен способ лечения признаков старения кожи, включающий местное нанесение на кожу, требующую лечения по меньшей мере одного признака старения кожи, композиции для местного нанесения, содержащей N-ацил-дипептидное производное, имеющее формулу:

R₁-Val-Ala-R₂,

или его изомер или соль, причем Val представляет собой валин, Ala представляет собой аланин, R₁ представляет собой ацильный радикал, имеющий до 19 атомов углерода; R₂ представляет собой OR₃, NHR₄ или NHNHR₅; R₃ представляет собой H, алкильный, аралкильный или арильный радикал, имеющий до 19 атомов углерода; и каждый из R₄ и R₅ независимо представляет собой H, ОН, алкильный, аралкильный, арильный или ацильный радикал, имеющий до 19 атомов углерода, и гликолевую кислоту, причем композиция содержит до около 10% масс. гликолевой кислоты.

В настоящем изобретении дополнительно предложен способ увеличения проникновения в кожу N-ацил-дипептидного производного, имеющего формулу:

R₁-Val-Ala-R₂,

или его изомера или соли, причем Val представляет собой валин, Ala представляет собой аланин, R₁ представляет собой ацильный радикал, имеющий до 19 атомов углерода; R₂ представляет собой OR₃, NHR₄ или NHNHR₅; R₃ представляет собой H, алкильный, аралкильный или арильный радикал, имеющий до 19 атомов углерода; и каждый из R₄ и R₅ независимо представляет собой H, ОН, алкильный, аралкильный, арильный или ацильный радикал, имеющий до 19 атомов углерода, включающий местное нанесение N-ацил-дипептидного производного на кожу в композиции для местного нанесения, содержащей гликолевую кислоту, причем количество гликолевой кислоты составляет до около 10% масс. композиции.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Если не указано иное, все технические и научные термины, используемые в настоящем документе, имеют общепринятое значение, понятное любому среднему специалисту в области, к которой имеет отношение изобретение. Все публикации, заявки на патенты, патенты и другие ссылки, упоминаемые в настоящем документе, включены в него путем ссылки.

В настоящем документе термин «местное нанесение» означает непосредственное наложение или распределение по внешней поверхности кожи, волосистой части кожи головы или волосам, например руками или с применением аппликатора, такого как салфетка, ролик или аэрозоль.

В настоящем документе термин «косметически приемлемый» означает, что ингредиенты, которые описывают термином, являются приемлемыми для применения в контакте с тканями (например, кожей или волосами) без нежелательного токсического воздействия, несовместимости, нестабильности, раздражения, аллергической реакции или т.п.

В настоящем документе термин «косметически приемлемый активный агент» означает соединение (синтетическое или натуральное), которое производит косметический или терапевтический эффект на кожу или волосы.

Композиции настоящего изобретения приемлемы для лечения признаков старения кожи. В настоящем документе термин «признаки старения кожи» включает в себя наличие линий, включая тонкие линии и морщины, потерю эластичности, неровный тон кожи, пятнистость, уменьшенную толщину кожи и ненормальный или сниженный синтез коллагена, гликозаминогликанов, протеогликанов, эластина или гликопротеинов, включая фибронектин. В одном варианте осуществления признак старения выбран из наличия линий, тонких линий, морщин, потери эластичности и ненормального или сниженного синтеза коллагена, гликозаминогликанов, протеогликанов, эластина или гликопротеинов, включая фибронектин.

В настоящем документе термин «лечение» означает облегчение, профилактику или обращение вспять состояния, заболевания или расстройства или по меньшей мере его заметного симптома. В одном варианте осуществления термин «лечение» относится к облегчению, профилактике или обращению вспять по меньшей мере одного измеримого физического параметра, относящегося к состоянию, болезни или расстройству, которое подвергается лечению, необязательно различимого у пациента, получающего лечение, или таким пациентом. В другом варианте осуществления термин «лечение» относится к ингибированию или замедлению прогрессирования состояния, заболевания или расстройства - либо физически, например путем стабилизации различимого симптома, либо физиологически, например путем стабилизации физического параметра, либо обоими способами. В другом варианте осуществления термин «лечение» относится к отсрочке начала состояния, заболевания или расстройства.

В определенных вариантах осуществления композицию изобретения наносят в качестве профилактической меры. В настоящем документе термины «предотвращение» или «профилактика» относятся к снижению риска возникновения конкретного состояния, заболевания или расстройства.

В более широком смысле композиции изобретения можно также применять для лечения или предотвращения косметических, дерматологических или других состояний и расстройств, включая, без ограничений, инфекции, нарушение или повреждение кожной или слизисто-кожной ткани, относящейся к коже, ногтям и волосам; ротовой, вагинальной и анальной слизистой оболочки; нарушение кератинизации; воспаление; изменения, связанные со старением, вызванным внутренними и внешними факторами, и другие состояния и расстройства, которые могут быть связаны или не связаны с кожной системой. Аллергические проявления включают в себя, без ограничений, жирную кожу; угревую сыпь; розацеа; возрастные пятна; поврежденную кожу; пятна; целлюлит; дерматозы; дерматит; инфекции кожи, волос и ногтей; перхоть; сухость или ослабленность кожи, ногтей и волос; ксероз; воспаление или экзему; эластоз; герпес; гиперкератоз; гиперпигментированную кожу; ихтиоз; кератозы; лентиго; мелазмы; мраморность кожи; псевдофолликулит зоны роста бороды; старение и повреждение кожи под воздействием ультрафиолетового излучения; зуд; псориаз; линии на коже; растяжки; истончение кожи, ногтевых пластин и волос; бородавки; морщины; заболевания полости рта или десен; раздражения, воспаления, покраснения, болезненность, повреждения или патологии слизистой оболочки, кожи, волос, ногтей, ноздрей, слухового прохода, анальные или вагинальные патологические состояния; разложение, дефекты синтеза или восстановления компонентов кожи; ненормальный или сниженный синтез коллагена, гликозаминогликанов, протеогликанов и эластина, а также снижение уровней этих компонентов в дерме; неровный тон кожи; неровную и огрубевшую поверхность кожи, ногтей и волос; потерю или уменьшение стойкости, эластичности и упругости кожи, ногтей и волос; вялость; недостаток смазки и блеска кожи, ногтей и волос; хрупкость и расслоение ногтей и волос; пожелтение кожи; склонность кожи к аллергическим реакциям, воспалению или телеангиэктазии; и тусклые и постаревшие на вид кожу, ногти и волосы. Кроме того, композиции настоящего изобретения можно применять для общего ухода за кожей, ногтями и волосами; для улучшения текстуры кожи и пор, уменьшения шероховатости и покраснения; для придания коже мягкости, гладкости, свежести, для достижения баланса, визуальной чистоты, выравнивания тона и осветления; для увеличения толщины кожи и повышения ее упругости; и для отбеливания и осветления кожи и заживления ран; для уменьшения или предотвращения потения или перспирации подмышечной области, паховой области, ладоней или других частей тела.

В настоящем документе термин «пациент» означает любое животное, предпочтительно млекопитающее, наиболее предпочтительно человека, на которого будет или была нанесена композиция изобретения. Используемый в настоящем документе термин «млекопитающее» охватывает любое млекопитающее. Примеры млекопитающих включают в себя, без ограничений, коров, лошадей, овец, свиней, кошек, собак, мышей, крыс, кроликов, морских свинок, обезьян и людей. В предпочтительном варианте осуществления пациент представляет собой человека.

В настоящем документе термин «морщина» включает в себя тонкие линии, тонкие морщины или глубокие морщины. Примеры морщин включают в себя, без ограничений, тонкие линии вокруг глаз (например, «гусиные лапки»), морщины на лбу и щеках, межбровные складки и мимические складки вокруг рта.

В настоящем документе термин «потеря эластичности» относится к потере эластичности или целостности структуры кожи или ткани, включая, без ограничений, обвисание, вялость и дряблость ткани. Потеря эластичности или целостности структуры ткани может быть результатом воздействия ряда факторов, включая, без ограничений, заболевание, старение, гормональные изменения, механическую травму, отрицательное воздействие окружающей среды, либо результатом нанесения на ткань продуктов, таких как косметические или фармацевтические средства.

В настоящем документе термин «неровный тон кожи» означает состояние кожи, связанное с диффузной или пятнистой пигментацией, которую можно классифицировать как гиперпигментацию, например поствоспалительную гиперпигментацию.

В настоящем документе термин «пятнистость» означает состояние кожи, связанное с покраснением или эритемой.

В настоящем документе термин «косметическое средство» относится к улучшающему внешний вид веществу или препарату, который сохраняет, восстанавливает, придает, имитирует или повышает физическую привлекательность или обеспечивает эффект повышения привлекательности или молодости, особенно в отношении внешнего вида ткани или кожи.

В настоящем документе термин «косметически эффективное количество» означает количество, достаточное для лечения или профилактики одного или более признаков старения кожи, но довольно низкое, чтобы не вызывать серьезных побочных эффектов. Косметически эффективное количество соединения или композиции будет варьироваться в зависимости от конкретного состояния, подвергающегося лечению, возраста и физического состояния конечного потребителя, степени тяжести состояния, подвергающегося лечению/профилактике, продолжительности лечения, характера других вариантов лечения, конкретного применяемого соединения или продукта/композиции, конкретного используемого косметически приемлемого носителя и подобных факторов.

Если не указано иное, процентную долю или концентрацию указывают как процентную долю или концентрацию по массе (т. е. % масс./масс.). Если не указано иное, все диапазоны приведены с учетом предельных значений, например, диапазон «от 4 до 9» включает в себя предельные значения 4 и 9.

N-ацил-дипептидные производные

Композиция содержит одно или более N-ацил-дипептидных производных, имеющих формулу:

R₁-Val-Ala-R₂,

или их изомеров или солей, причем Val представляет собой валин, Ala представляет собой аланин, R₁ представляет собой ацильный радикал, имеющий до 19 атомов углерода; R₂ представляет собой OR₃, NHR₄ или NHNHR₅; R₃ представляет собой H, алкильный, аралкильный или арильный радикал, имеющий до 19 атомов углерода; и каждый из R₄ или R₅ независимо представляет собой H, OH, алкильный, аралкильный, арильный или ацильный радикал, имеющий до 19 атомов углерода. Можно применять смеси вышеуказанных веществ.

В одном варианте осуществления дипептидное производное выбрано из группы, состоящей из N-Ac-Val-Ala-NH₂, N-Ac-Val-Ala-OH, N-Ac-Val-Ala-NHOH, N-Pr-Val-Ala-NH₂ и N-Pr-Val-Ala-OH, причем Ac представляет собой ацетил и Pr представляет собой пропаноил.

В другом варианте осуществления дипептидное производное представляет собой N-Ac-Val-Ala-NH₂, причем Ac представляет собой ацетил (N-ацил-L-валин-L-аланинамид).

N-ацил-дипептидное производное может быть получено с помощью стандартных способов синтеза, известных в данной области.

Количество N-ацил-дипептидного производного в композиции может, например, находиться в диапазоне от около 0,001 до около 90% масс. в расчете на общую массу композиции. В одном варианте осуществления количество N-ацил-дипептидного производного в композиции составляет от около 0,01 до около 2% масс. в расчете на общую массу композиции. В дополнительном варианте осуществления количество N-ацил-дипептидного производного в композиции составляет от около 0,1 до около 1% масс. в расчете на общую массу композиции. В другом варианте осуществления количество N-ацил-дипептидного производного в композиции составляет около 0,5% масс. в расчете на общую массу композиции.

В одном варианте осуществления дипептидное производное представляет собой N-Ac-Val-Ala-NH₂ и композиция содержит от около 0,1 до около 1, предпочтительно около 0,5, % масс. N-Ac-Val-Ala-NH₂ в расчете на общую массу композиции.

Гликолевая кислота

Композиция также содержит гликолевую кислоту. Количество гликолевой кислоты в композиции составляет около 10% масс. или меньше в расчете на общую массу композиции.

В одном варианте осуществления композиция содержит от около 1 до около 8% масс. гликолевой кислоты в расчете на общую массу композиции.

В другом варианте осуществления композиция содержит от около 1 до около 4% масс. гликолевой кислоты в расчете на общую массу композиции.

Гликолевая кислота доступна в продаже из различных источников, например в виде продукта GLYPURE от DuPont, представляющего собой раствор 70% масс. гликолевой кислоты в воде.

Другие косметически приемлемые активные агенты

Композиция может содержать один или более других косметически приемлемых активных агентов.

Косметически приемлемые активные агенты включают в себя, например, агенты для лечения угревой сыпи, агенты для регулирования блеска, противомикробные агенты, противовоспалительные агенты, противогрибковые агенты, противопаразитарные агенты, анальгетики для наружного применения, солнцезащитные фильтры, фотопротекторы, антиоксиданты, кератолитические агенты, поверхностно-активные вещества, увлажнители, питательные вещества, витамины, агенты для повышения энергии, антиперспирационные агенты, вяжущие вещества, дезодоранты, уплотняющие агенты, противомозольные агенты и агенты для кондиционирования волос и/или кожи

Количество других косметически активных агентов в композиции может находиться в диапазоне от около 0,001% до около 20% масс. композиции, например от около 0,005% до около 10% масс. композиции, например от около 0,01% до около 5% масс. композиции, в расчете на общую массу композиции.

Косметически приемлемый активный агент может быть выбран, например, из других альфа-гидроксикислот, полигидроксикислот, других дипептидов, трипептидов, бензоилпероксида, D-пантенола каротиноидов, ретиноидов, таких как ретинол и ретинилпальмитат, церамидов, полиненасыщенных жирных кислот, незаменимых жирных кислот, ферментов, таких как лакказа, ингибиторов ферментов, минеральных веществ, гормонов, таких как эстрогены, стероидов, таких как гидрокортизон, 2-диметиламиноэтанола, солей меди, таких как хлорид меди, пептидов, таких как аргирелин и Syn-ake, медьсодержащих пептидов, кофермента Q10, аминокислот, таких как пролин, витаминов, лактобионовой кислоты, ацетил-кофермента A, ниацина, рибофлавина, тиамина, рибозы, переносчиков электронов, таких как NADH и FADH2, природных экстрактов, таких как экстракты алоэ вера, пиретрума девичьего, овса, укропа, ежевики, павловнии войлочной, лимонной осины, резорцинов, таких как 4-гексилрезорцин, куркуминоидов, аминосахаров, таких как N-ацетилглюкозамин, и их производных и смесей.

Примеры витаминов включают, без ограничений, витамин А, витамины группы В, такие как витамин B3, витамин B5 и витамин B12, витамин C, витамин K и различные формы витамина E, такие как альфа-, бета-, гамма- или дельта-токоферолы или их смеси, и их производные.

Примеры других гидроксикислот включают, без ограничений, молочную кислоту, яблочную кислоту, салициловую кислоту, лимонную кислоту и винную кислоту.

Примеры антиоксидантов включают, без ограничений, водорастворимые антиоксиданты, такие как сульфгидрильные композиции и их производные (например, метабисульфит натрия и N-ацилцистеин), липоевую кислоту и дигидролипоевую кислоту, ресвератрол, лактоферрин и аскорбиновую кислоту и производные аскорбиновой кислоты (например, аскорбилпальмитат и аскорбиловый полипептид). Жирорастворимые антиоксиданты, приемлемые для применения в композициях данного изобретения, включают в себя, без ограничений, бутилированный гидрокситолуол, ретиноиды (например, ретинол и ретинилпальмитат), токоферолы (например, токоферолацетат), токотриенолы и убихинон. Природные экстракты, содержащие антиоксиданты, приемлемые для применения в композициях данного изобретения, включают в себя, без ограничений, экстракты, содержащие флавоноиды и изофлавоноиды и их производные (например, генистеин и диадзеин), экстракты, содержащие ресвератрол, и т. п. Примеры таких натуральных экстрактов включают в себя виноградные косточки, зеленый чай, сосновую кору и прополис.

Композиции для местного нанесения

Композиции настоящего изобретения наносят местно на кожу или волосы. Соответственно, композиция может дополнительно включать в себя косметически приемлемый носитель для местного нанесения. Носитель может составлять от около 25% до около 99,99% масс. композиции (например, от около 80% до около 99% масс. композиции). В предпочтительном варианте осуществления изобретения косметически приемлемый носитель для местного нанесения включает в себя воду.

В одном варианте осуществления носитель содержит один или более из глицерилдилаурата, стеарета-10 и глицерина.

Композиции могут быть получены в виде широкого спектра типов продуктов, которые включают, без ограничений, лосьоны, кремы, гели, карандаши, аэрозоли, мази, очищающие жидкости и твердые бруски мыла, шампуни и кондиционеры для волос, средства фиксации волос, пасты, пены, порошки, муссы, кремы для бритья, салфетки, пластыри, гидрогели, пленкообразующие продукты, маски для лица и маски для кожи, пленки и средства декоративной косметики, такие как основы под макияж и туши для ресниц и бровей. Данные типы продуктов могут содержать множество косметически приемлемых носителей для местного нанесения, включая, без ограничений, растворы, суспензии, эмульсии, такие как микроэмульсии и наноэмульсии, гели, твердые вещества и липосомы. Ниже приведены не имеющие ограничительного характера примеры таких носителей. Обычные специалисты в данной области могут вводить в составы другие носители.

Композиции, используемые в настоящем изобретении, могут быть изготовлены в виде растворов. Растворы, как правило, включают в себя водный или органический растворитель (например, от около 50% до около 99,99% или от около 90% до около 99% косметически приемлемого водного или органического растворителя). Примеры приемлемых органических растворителей включают в себя пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, полипропиленгликоль, глицерин, 1,2,4-бутантриол, сложные эфиры сорбита, 1,2,6-гексантриол, этанол и их смеси.

Композиции, используемые в заявленном изобретении, могут быть изготовлены в виде раствора, содержащего мягчитель. Такие композиции предпочтительно содержат от около 2% до около 50% мягчителя (-ей). При использовании в настоящем документе термин «мягчители» относится к материалам, используемым для предотвращения или устранения сухости, например путем предотвращения трансэпидермальной потери воды из кожи. Примеры мягчителей включают в себя, без ограничений, перечисленные в International Cosmetic Ingredient Dictionary and Handbook, eds. Pepe, Wenninger and McEwen, pp. 2930-36 (The Cosmetic, Toiletry, and Fragrance Assoc., Washington, D.C., 9th Edition, 2002) (далее - ICI Handbook). Примеры особо приемлемых мягчителей включают в себя растительные масла, минеральные масла, сложные эфиры жирных кислот и т. п.

Из такого раствора может быть изготовлен лосьон. Лосьоны обычно содержат от около 1% до около 20% (например, от около 5% до около 10%) мягчителя (-ей) и от около 25% до около 90% (например, от около 60% до около 80%) воды.

Другой тип продукта, который может быть изготовлен из раствора, - это крем. Крем обычно содержит от около 5% до около 50% (например, от около 10% до около 20%) мягчителя (-ей) и от около 25% до около 85% (например, от около 50% до около 75%) воды.

Композиция настоящего изобретения может включать в себя воду, или альтернативно быть безводной, или представлять собой мазь, которая не включает в себя воду, но содержит органические и/или силиконовые растворители, масла, липиды и воски. Мазь может содержать простую основу из животных или растительных масел или полутвердых углеводородов. Мазь может содержать от около 2% до около 10% мягчителя (-ей) плюс от около 0,1% до около 2% загустителя (-ей). Примеры загустителей включают в себя, без ограничений, перечисленные в ICI Handbook, pp. 2979-84.

Композиция может быть изготовлена в виде эмульсии. Если носитель для местного нанесения представляет собой эмульсию, то от около 1% до около 10% (например, от около 2% до около 5%) носителя для местного нанесения составляет (-ют) эмульгатор (-ы). Эмульгаторы могут быть неионными, анионными или катионными. Примеры эмульгаторов включают в себя, без ограничений, перечисленные в ICI Handbook, pp. 2962-71.

Лосьоны и кремы могут быть изготовлены в виде эмульсий. Как правило, такие лосьоны содержат от 0,5% до около 5% эмульгатора (-ов). Такие кремы, как правило, содержат от около 1% до около 20% (например, от около 5% до около 10%) мягчителя (­ей); от около 20% до около 80% (например, от 30% до около 70%) воды; и от около 1% до около 10% (например, от около 2% до около 5%) эмульгатора (-ов).

Составы для ухода за кожей на основе однофазной эмульсии типа «масло в воде» и типа «вода в масле», такие как лосьоны и кремы, хорошо известны в косметической области и могут использоваться в заявленном изобретении. Композиции на основе многофазной эмульсии, например типа «вода в масле в воде» или типа «масло в воде в масле», также используются в заявленном изобретении. Обычно такие одно- или многофазные эмульсии в качестве основных ингредиентов содержат воду, мягчители и эмульгаторы.

Композиции данного изобретения могут также быть изготовлены в виде геля (например, водного, спиртового, водно-спиртового или масляного геля с применением приемлемого (-ых) гелеобразующего (-их) агента (-ов)). Приемлемые гелеобразующие агенты для водных и/или спиртовых гелей включают в себя, без ограничений, природные камеди, акриловую кислоту и акрилатные полимеры и сополимеры, производные целлюлозы (например, гидроксиметилцеллюлозу и гидроксипропилцеллюлозу). Приемлемые гелеобразующие агенты для масел (таких как минеральное масло) включают в себя, без ограничений, гидрогенизированный сополимер бутилена/этилена/стирола и гидрогенизированный сополимер этилена/пропилена/стирола. Такие гели, как правило, содержат от около 0,1% до 5% масс. таких гелеобразующих агентов.

Композиции настоящего изобретения могут также быть изготовлены в виде твердого состава (например, карандаша на основе воска, композиции бруска мыла, порошка или салфетки, содержащей порошок).

Композиции могут содержать, в дополнение к вышеуказанным компонентам, широкий спектр дополнительных жирорастворимых материалов и/или водорастворимых материалов, традиционно используемых в композициях для применения на коже и волосах, при известных в данной области уровнях.

В композиции также могут присутствовать различные другие материалы, как известно в данной области. В их число входят увлажнители, регуляторы pH, хелатирующие агенты (например, ЭДТА), ароматизаторы, красители и консерванты (например, парабены).

Композиции и составы и продукты, содержащие такие композиции настоящего изобретения, могут быть получены с применением методики, хорошо известной среднему специалисту в данной области.

В одном варианте осуществления композиция для местного нанесения содержит эмульсию, содержащую по меньшей мере две фазы, выбранные из водной фазы, масляной фазы и неионной липидной фазы.

Водная фаза содержит воду.

Водная фаза может также содержать структурирующие агенты, такие как карбомеры, или другие загустители, например ксантановую камедь, каррагинановую камедь, полиакрилат-13; полиизобутен; полисорбат-20; смеси полиакрилата-13/полиизобутилена/полисорбата-20, стеаралкония гекторит и т. п., включая их смеси.

Предпочтительно композиция содержит загуститель, и загуститель представляет собой сополимер гидроксиэтилакрилата/акрилоилдиметилтаурата натрия.

Масляная фаза содержит по меньшей мере одно косметически приемлемое масло.

В настоящем документе термин «масло» означает гидрофобный материал, который может способствовать обеспечению баланса межмолекулярных сил для образования агрегатов мицелл или для ограничения их размеров. Масла также служат в качестве умягчающих ингредиентов для обеспечения благоприятного воздействия на растекаемость продукта, ощущение на коже и доставку гидрофобных активных ингредиентов, таких как, без ограничений, витамины D, E, K и A и солнцезащитные фильтры.

Масла, используемые в композиции, включают в себя множество масел на основе углеводородов, силиконы, производные жирных кислот, глицериды, растительные масла, производные растительных масел, сложные алкильные эфиры, сложные восковые эфиры, производные пчелиного воска, стерины и фосфолипиды и их комбинации в диапазоне от приблизительно 20% до 50% в расчете на общую массу композиции.

Приемлемые углеводородные масла включают в себя вазелин, минеральное масло, микрокристаллические воски, сквален и их комбинации.

Силиконовые масла включают в себя диметикон, диметиконол, фенилдиметикон и циклические полисилоксаны и их комбинации. Силиконовые масла, имеющие вязкость от около 0,5 до около 100 000 сантистокс при 25°C, также можно использовать в композиции.

Глицериды включают в себя касторовое масло, подсолнечное масло, кокосовое масло и производные, растительные масла и производные, пальмовое масло, масло жожоба, масло ши, ланолин и их комбинации.

Масла сложных алкильных эфиров включают в себя, без ограничений, сложные изопропиловые эфиры жирных кислот и сложные эфиры длинноцепочечных жирных кислот. Более предпочтительно используются следующие сложные алкильные эфиры: изопропилпальмитат, изопропилмиристат, миристилмиристат, изогексилпальмитат, децилолеат, изононилизононаноат и их комбинации.

Неионная липидная фаза содержит один или более неионных липидов, таких как сложные глицериловые моноэфиры, имеющие цепь жирной кислоты, содержащую от около 3 до около 50 атомов углерода и предпочтительно от около 10 до около 18 атомов углерода; сложные глицериловые диэфиры, имеющие цепь жирной кислоты, содержащую от около 5 атомов углерода до около 25 атомов углерода и предпочтительно от около 10 атомов углерода до около 18 атомов углерода; алкоксилированные спирты; алкоксилированные алкилфенолы; алкоксилированные кислоты; алкоксилированные амиды; алкоксилированные производные сахара; алкоксилированные производные натуральных масел или восков; блок-сополимеры полиоксиэтилен-полиоксипропилена; простой полиоксиэтиленовый эфир жирных кислот, имеющий цепь жирной кислоты, содержащую от около 10 атомов углерода до около 18 атомов углерода; стероиды; сложные эфиры жирных кислот спиртов, в которых жирная кислота имеет прямую или разветвленную цепь, имеющую от около 10 атомов углерода до около 20 атомов углерода и спирт имеет прямую или разветвленную цепь, имеющую от 1 до 10 атомов углерода; и их смеси, причем алкоксилированные липиды алкоксилированы с этиленоксидом или пропиленоксидом, предпочтительно с этиленоксидом.

Примеры приемлемых сложных глицериловых моноэфиров включают в себя, без ограничений, глицерилкапрат, глицерилкаприлат, глицерилкокат, глицерилэрукат, глицерилгидроксистерат, глицерилизостеарат, глицерилланолат, глицериллаурат, глицериллинолат, глицерилмиристат, глицерилолеат, глицерил-PABA, глицерилпальмитат, глицерилрицинолеат, глицерилстеарат, глицерилтигликолят и их смеси, предпочтительно с глицериллауратом и глицерилмиристатом.

Примеры приемлемых сложных глицериловых диэфиров включают в себя, без ограничений, глицерилдилаурат, глицерилдиолеат, глицерилдимиристат, глицерилдистерат, глицерилсескиолеат, глицерилстеаратлактат и их смеси, предпочтительно с глицерилдилауратом и глицерилдимиристатом.

Примеры приемлемых простых эфиров полиоксиэтилена и жирных спиртов включают в себя, без ограничений, простой полиоксиэтиленцетиловый/стеариловый эфир, простой полиоксиэтиленхолестериновый эфир, полиоксиэтиленлаурат или дилаурат, полиоксиэтиленстеарат или дистеарат, простой полиоксиэтиленлауриловый или стеариловый эфир и их смеси, причем число концевых групп полиоксиэтилена находится в диапазоне от около 2 до около 100 групп. Предпочтительные простые эфиры полиоксиэтилена и жирных спиртов включают в себя простой полиоксиэтиленстеариловый эфир, простой полиоксиэтиленмиристиловый эфир и простой полиоксиэтиленлауриловый эфир, имеющий от около 3 до около 10 оксиэтиленовых звеньев.

Примеры приемлемых стероидов включают в себя, без ограничений, холестерин, бета-ситостерол, бисаболол и их смеси.

Примеры приемлемых сложных эфиров жирных кислот спиртов включают изопропилмиристат, алифатический изопропил-н-бутират, изопропил-н-гексаноат, изопропил-н-деканоат, изопропилпальмитат, октйидодецилмиристат.

Примеры алкоксилированных спиртов, используемых в качестве неионного липида в композициях изобретения, имеют структуру, показанную в следующей формуле:

R₅--(OCH₂CH₂)y--OH,

где R₅ представляет собой разветвленную или неразветвленную алкильную группу, имеющую от около 6 до около 22 атомов углерода, и y составляет от около 4 до около 100 и предпочтительно от около 10 до около 100. Предпочтительный алкоксилированный спирт - это соединение, где R₅ представляет собой лауриловую группу и y имеет среднее значение 23, которое известно как лаурет 23 и доступно в ICI Americas, Inc., г. Уилмингтон, штат Делавэр, под торговым названием BRIJ 35.

Другой пример алкоксилированного спирта представляет собой этоксилированное производное ланолинового спирта. Ланолиновый спирт представляет собой смесь органических спиртов, полученных в результате гидролиза ланолина. Примером этоксилированного производного ланолинового спирта является ланет-10, который представляет собой простой полиэтиленгликолевый эфир ланолинового спирта со средним значением этоксилирования 10.

Другой пример алкоксилированного спирта представляет собой простой полиоксипропилен-полиоксиэтиленовый алкильный эфир, например ППГ-12-бутет-16. Этот материал доступен в Amerchol Corp., г. Эдисон, штат Нью-Джерси, под торговым названием UCON Fluid 50-HB-660.

Другой тип неионных липидов включает в себя алкоксилированные алкилфенолы, например ноноксинол-14, и доступен под торговым названием MAKON 14 в Stepan Company, г. Нортфилд, штат Иллинойс.

Другой тип неионных липидов - это алкоксилированные кислоты, которые представляют собой сложные эфиры кислоты, чаще всего жирной кислоты, с полиалкиленгликолем, например ПЭГ-8 лаурат.

Другой тип неионных липидов включает в себя алкоксилированные амиды, например ПЭГ-6 кокоамид.

Другой тип неионных липидов включает в себя алкоксилированные производные сахара, например полисорбат 20, смесь сложных эфиров (лаурат) сорбита и ангидридов сорбита, состоящую главным образом из сложного моноэфира, конденсированного с использованием около 20 моль этиленоксида. Данный материал доступен под торговым названием TWEEN 20 в ICI Americas, г. Уилмингтон, штат Делавэр.

Другой пример алкоксилированного производного сахара, используемого в композициях изобретения, - это ПЭГ-20 метилглюкоза сесквистеарат, который представляет собой простой полиэтиленгликолевый эфир сложного сесквиэфира метилглюкозы и стеариновой кислоты, содержит в среднем 20 моль этиленоксида и доступен под торговым названием Glucamate SSE-20 в Amerchol Corp., г. Эдисон, штат Нью-Джерси.

Другой тип неионных липидов включает в себя алкоксилированные производные натуральных масел и восков. Примеры данного класса материала включают в себя ПЭГ-40 ланолин, ПЭГ-40 касторовое масло и ПЭГ-40 гидрогенизированное касторовое масло.

Другой тип неионных липидов включает в себя блок-сополимеры полиоксиэтилен-полиоксипропилена, например Poloxamer 101 и Poloxamer 182.

Предпочтительные неионные липиды включают в себя простые эфиры полиоксиэтилена и жирных спиртов, сложные глицериловые диэфиры и их смеси. Более предпочтительные неионные липиды включают в себя простой полиоксиэтиленстеариловый эфир, простой полиоксиэтиленмиристиловый эфир и простой полиоксиэтиленлауриловый эфир, глицерилдилаурат, глицерилдимистат, глицерилдистеарат и их смеси, причем каждый простой эфир имеет от около 5 до около 10 оксиэтиленовых звеньев.

В варианте осуществления, в котором снижение раздражения кожи представляет собой проблему, предпочтительным является применение неионного липида, имеющего большее число атомов углерода на гидрофильном фрагменте концевой группы, или, в качестве альтернативы, неионного липида, имеющего большее число атомов углерода на гидрофобном фрагменте цепи жирной кислоты. Первого можно достичь путем увеличения числа атомов углерода в концевой группе, например, простого полиоксиэтилен-10-стеарилового эфира до значения от около 10 атомов углерода до около 15-20 атомов углерода. Последнего можно достичь путем увеличения числа атомов углерода на хвосте жирной кислоты с 12 атомами углерода, например, сложных глицериловых диэфиров до значения от около 14 атомов углерода до около 16 атомов углерода.

Композиция настоящего изобретения включает, в расчете на общую массу композиции, от около 1 процента до около 10 процентов и предпочтительно от около 3 процентов до около 7 процентов неионного липида.

В предпочтительном варианте осуществления фаза неионного липида содержит воду, глицериддилаурат, стеарет-10 и глицерин.

pH

В одном варианте осуществления композиция для местного нанесения имеет низкий pH. Например, pH может составлять менее чем около 4 или менее чем около 3,3. Вместе с тем не требуется, чтобы композиция имела низкий pH.

Композиция для местного нанесения может содержать буферное вещество, такое как молочная кислота, лимонная кислота, яблочная кислота, винная кислота, глюконовая кислота или глюконолактон. Предпочтительно буферное вещество представляет собой молочную кислоту.

Как правило, композиция содержит от около 3 до около 12, или от около 4 до около 8, % масс. буферного вещества.

Способы ухода за кожей

В соответствии с изобретением признаки старения кожи можно лечить путем местного нанесения композиции для местного нанесения, содержащей N-ацил-дипептидное производное, описанное в настоящем документе, и до около 10% масс. гликолевой кислоты, на кожу, требующую лечения по меньшей мере одного признака старения кожи.

Также в соответствии с изобретением проникновение N-ацил-дипептидного производного в кожу может быть увеличено путем его местного введения в композицию, которая также содержит до около 10% масс. гликолевой кислоты.

В одном варианте осуществления композиция в соответствии с изобретением, содержащая N-ацил-дипептидное производное и гликолевую кислоту в количестве до около 10% масс. композиции, обеспечивает увеличение по меньшей мере приблизительно в два раза, предпочтительно приблизительно в три раза или до семи раз, совокупной доставки N-ацил-дипептидного производного в кожу по сравнению с композицией, не содержащей гликолевой кислоты или содержащей более 10% масс. гликолевой кислоты, но в остальном идентичной.

Следующие не имеющего ограничительного характера примеры дополнительно иллюстрируют изобретение. Использовали следующий способ проникновения в кожу и способ высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрией (ВЭЖХ-МС).

Способ проникновения в кожу

Эксперименты по проникновению в кожу в условиях in vitro проводили в соответствии с руководящими принципами, изложенными Организацией экономического сотрудничества и развития (ОЭСР).

Расщепленные пробы кожи с трупа человека с помощью дерматома доводили до номинальной толщины 300 мкм и хранили при -80 °C в растворе Мемориального института Розуэлл-Парка (RPMI)-1640 с добавлением оксациллина натрия и гентамицина. Один полный комплект (ок. ¼ кв. фут.) кожи, полученный от одного донора, использовали в каждом исследовании проникновения в кожу для получения ок. 50-60 проб кожи на исследование. После подготовки и использованию кожу быстро размораживали и промывали в деионизированной воде, прежде чем разрезать на куски площадью ок. 2,25 см², которые фиксировали в статических стеклянных ячейках вертикальной диффузии Франца. Не закупоренное донорское отделение состояло из колпачка из стекла с низкой излучательной способностью, проходящего на 12 мм выше открытой поверхности площадью 0,79 см². Принимающее отделение содержало 4,5 мл солевого раствора с фосфатно-солевым буфером Дульбекко (рН 7,4) и 0,02% азида натрия с образованием физиологически совместимой текучей среды, которая сдерживает рост микроорганизмов. Каждую диффузионную ячейку Франца помещали в алюминиевый паз нагревательных и перемешивающих модулей Pierce Reacti-Therm™ (г. Рокфорд, штат Иллинойс), установленных на температуру человеческого тела (37°C), чтобы получить температуру поверхности кожи 32°C, сопоставимую с условиями in vivo. Принимающий раствор перемешивали на скорости приблизительно 400 об./мин магнитными мешалками для обеспечения однородности содержимого резервуара.

Испытания на целостность кожи выполняли с применением процедуры скрининга тритиевой воды (3H₂O) перед началом измерений проникновения в кожу для обеспечения неизменности барьерной функции. Пробы кожи выдерживали в диффузионных ячейках Франца в течение 2 часов для обеспечения частичной гидратации рогового слоя, чтобы имитировать кожные патологии in vivo, в отличие от проведения испытаний на проникновение в кожу на полностью гидратированной коже сразу после размораживания, что увеличивает проницаемость кожи. Дозу 150 мкл раствора 3H₂0 (0,4 мкКи/мл) добавляли в каждое донорское отделение и впоследствии удаляли с поверхности кожи после 5-минутного периода контакта с помощью ватной палочки. Содержимое принимающего отделения собирали через 30 минут после нанесения дозы и немедленно повторно заполняли свежим принимающим раствором, поддерживаемым при 37 °C. Принимающие пробы перемешивали с 10 мл жидкого сцинтилляционного коктейля Ultima Gold XR и выполняли подсчет в течение 1 минуты с помощью жидкостного сцинтилляционного счетчика Beckman LS6500. Пробы кожи с проникновением 3H₂O более 2,0 мкл/см² после 30-минутного воздействия исключали из использования в исследовании проникновения в кожу и вместо этого использовали в качестве необработанных контрольных проб, чтобы обеспечить холостые матрицы для аналитического количественного определения или для оценки эффективности экстракции опытного дипептидного производного из проб кожи. Пробы кожи, прошедшие испытание на целостность кожи, ранжировали в зависимости от проницаемости для 3H₂O и каждый образец определяли в группу лечения на основании рандомизированного полноблочного плана для учета естественной вариабельности в значениях проницаемости через кожу, чтобы обеспечить более высокую надежность сравнений воздействия обработки на проникновение в кожу дипептидного производного. Диффузионные ячейки Франца промывали несколько раз для удаления остаточного 3H, выдерживали в течение ночи и промывали утром принимающим раствором, содержащим 0,1% Олет-20, который использовали для оставшейся части исследования проникновения в кожу в качестве усилителя растворимости с целью поддержания условий достаточного растворения.

Полутвердые испытуемые составы встряхивали непосредственно перед применением и при необходимости на протяжении всей схемы дозирования для тщательного смешивания содержимого. Поверхность пробы кожи высушивали перед дозированием путем аккуратного прикладывания к коже ватных палочек, после чего пробы кожи обрабатывали в соответствии с назначенными типами обработки. Испытание проводили минимум с 4 повторениями на каждый тип обработки. В случае со всеми испытуемыми составами на кожу с помощью пипетки с положительным вытеснением наносили по 5 мкл испытуемого состава. Состав равномерно распределяли по всей площади поверхности открытой ткани (0,79 см₂) с помощью стеклянной палочки, предварительно смоченной испытуемым составом. Принимали меры по обеспечению того, чтобы вязкая доза оставалась на поверхности кожи, а не растекалась по стенкам донорской камеры. Количество испытуемого состава, добавленного/удаленного во время процедуры распределения, рассчитывали гравиметрически. Дозирование проводили с перерывами в зависимости от времени, необходимого для выполнения конечного взятия проб из принимающего отделения через 48 часов после дозирования, промывки поверхности кожи, соскоба липкой лентой и разделения кожи на фракции, содержащие дерму/эпидермис, чтобы обеспечить единообразное время сбора для всех проб.

Всю текучую среду, содержащуюся в принимающем отделении, собирали через 6, 24 и 48 часов после дозирования и после сборов через 6 и 24 часа принимающее отделение повторно заполняли свежим принимающим раствором. После 48-часового воздействия и конечного взятия проб из принимающего отделения неабсорбированный состав удаляли путем промывки разбавленным и слабым раствором поверхностно-активного вещества, содержащим 5% олет-20 в деионизированной воде. Аликвоту промывочного раствора объемом 300 мкл наносили на поверхность кожи пипеткой с положительным вытеснением, перемешивали в течение 30 секунд с помощью стеклянной палочки для имитации процедуры промывки in vivo и затем переносили из донорского отделения в пробирку Эппендорфа 1,5, используя пластиковую пипетку с одной меткой. Затем кожу дважды промывали аликвотами деионизированной воды объемом 500 мкл, которые перемешивали на поверхности кожи в течение 30 секунд стеклянной палочкой и собирали в ту же пробирку, что и промывочный раствор поверхностно-активного вещества. Донорскую камеру извлекали и промывали 1,5 мл экстрагирующего растворителя, состоящего из смеси метанол : вода 2 : 1, для сбора остаточных концентраций испытуемого изделия, которые не были абсорбированы через 48 часов, и этот объем пипеткой переносили в отдельную пробирку Эппендорфа 1,5. Поверхности кожи позволяли высохнуть на воздухе в течение приблизительно 30 минут, прежде чем выполнить липкой лентой соскоб рогового слоя для удаления потенциально неабсорбированной дозы, которая не была надлежащим образом удалена из промывочной жидкости с поверхности кожи, или для имитации количества, которое было бы удалено in vivo посредством десквамации через 48 часов. Чтобы выполнить это, пробы кожи помещали на стеклянную пластину, ленты D100 D-Squame помещали над обработанной поверхностью площадью 0,79 см² и на 15 секунд прикладывали равномерное давление с помощью дискообразного аппликатора D-Squame в соответствии с инструкциями производителя. Ленту удаляли с помощью щипцов и помещали в пробирку Эппендорфа, содержащую жидкость для промывки из донорской камеры, при этом обращая липкую сторону вовнутрь и одновременно обеспечивая надлежащее погружение ленты в экстрагирующий растворитель. Затем использовали щипцы для аккуратного отслаивания эпидермиса от дермы и отделенные образцы кожи помещали в отдельные короткие виалы по 2 мл. В каждую из виал, содержащих пробы эпидермальной и дермальной кожи, добавляли 1,5 мл экстрагирующего растворителя, состоящего из смеси метанол : вода 2 : 1. Концентрации дипептидного производного в промывочной жидкости с поверхности кожи, на липкой ленте и в пробах кожи экстрагировали путем встряхивания проб на орбитальном шейкере при комнатной температуре в течение 24 часов при 150 об./мин. Впоследствии пробы фильтровали через шприцевой фильтр, содержащий мембрану с порами 0,45 мкм, и собирали в виалы для ВЭЖХ по 2 мл для количественного анализа.

Для расчета массового баланса общее содержание аналита в каждом составе (3 повторения на состав) измеряли путем переноса пипеткой дозы 5 мкл в хроматографическую виалу вместимостью одна драхма, содержащую 2 мл экстрагирующего растворителя (метанол : вода 2 : 1). Пробы встряхивали на орбитальном шейкере при комнатной температуре в течение 48 ч при 150 об./мин, а затем фильтровали через шприцевой фильтр, содержащий мембрану с порами 0,45 мкм, и собирали в виалы для ВЭЖХ по 2 мл для количественного анализа.

Способ высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрией (ВЭЖХ-МС)

Высокоэффективную жидкостную хроматографию с масс-спектрометрией (ВЭЖХ-МС) использовали для анализа количества N-ацетил-L-валин-L-аланинамида в клейких лентах (Т), эпидермисе (Е), дерме (D), промывочной жидкости (W) и растворе из принимающего отделения (R), собранных с использованием способа проникновения в кожу.

2-ацетамидо-N-(2-амино-2-оксоэтил)-3-метилбутанамид (Aurora Fine Chemicals LLC, чистота > 95%, серия № A06.430.527_4) использовали в качестве внутреннего стандарта (IS). Использовали систему для ВЭЖХ/MSD Agilent, ид. № системы: SK_1519. Использовали подвижные фазы A: муравьиную кислоту (FA) 0,1% (Sigma, степень чистоты реагента (> 95%), партия №: SHBJ2924) в воде (EMD, степень чистоты для ВЭЖХ, партия №: 57256), и B: 0,1% FA (Sigma) и 2 мМ формиата аммония (Fluka, степень чистоты для ВЭЖХ, партия №: BCBQ4532V) в метаноле (EMD, степень чистоты для ВЭЖХ, партия №: 25777). Использовали колонку Zorbax Eclipse XDB-C18 (3,5 мкм, 150 × вн. диам. 4,6 мм, сер. №: USWA016962) от Agilent при 40 °C. Использовали бинарное градиентное элюирование, как показано в таблице X. Детектор программировали с использованием параметров, приведенных в таблице Y.

Таблица X

Время (мин) Скорость потока (мл/мин) Подвижная фаза A (%) Подвижная фаза B (%) 0,0 0,8 90,0 10,0 0,5 0,8 90,0 10,0 8,0 0,8 10,0 90,0 9,0 0,8 10,0 90,0 9,1 0,8 90,0 10,0 14,0 0,8 90,0 10,0

Таблица Y

Параметры МС Значения Отслеженные положительные ионы (а.е.м.) N-ацетил-L-валин-L-аланинамид: 229,8 IS: 216,0 Фрагмент 70 Протекание высушивающего газа (л/мин) 12 Давление небулайзера (фунт/кв. дюйм изб.) 31 Температура сушильного газа 20 Напряжение на капилляре (IS) 5000

Маточный стандартный раствор (1,0 мг/мл) N-ацетил-L-валин-L-аланинамида получали следующим образом. Приблизительно 50 г референтного препарата N-ацетил-L-валин-L-аланинамида помещали в мерный флакон на 50 мл и добавляли 30 мл MeOH. Смесь подвергали ультразвуковой обработке в течение 2 мин, доводили до метки MeOH и хорошо перемешивали. Выполняли серийное разведение маточного стандартного раствора в разбавителе (MeOH : вода 2 : 1, об./об.) с целью получения рабочих стандартов (W-STD) в конечных концентрациях 0,1, 0,2, 0,5, 2,0 и 5,0 мкг/мл и рабочих стандартов для контроля качества (W-QC) в конечных концентрациях 0,3, 1,0 и 4,0 мкг/мл. Маточный раствор внутреннего стандарта (1,0 мг/мл) получали в MeOH с последующим разбавлением в разбавителе для приготовления внутреннего рабочего раствора (W-IS) в концентрации 100 нг/мл.

Калибровочный стандарт получали следующим образом. 180 мкл разбавителя добавляли в виалу для ВЭЖХ на 2,0 мл. Затем добавляли 20 мкл раствора W-STD или разбавителя (в качестве холостой пробы), после чего добавляли 800 мкл внутреннего стандартного рабочего раствора с концентрацией 100 нг/мл или разбавителя (в качестве второй холостой пробы) и встряхивали в течение 1 минуты. Пробы для контроля качества (QC) получали следующим образом. 180 мкл эпидермиса, или дермы, или промывочной жидкости, или холостой матрицы принимающего отделения добавляли в виалу для ВЭЖХ на 2,0 мл и добавляли 20 мкл раствора W-QC. 800 мкл внутреннего стандартного рабочего раствора с концентрацией 100 нг/мл добавляли в виалу для ВЭЖХ и встряхивали в течение 1 минуты.

Исследуемые пробы получали следующим образом. В виалу для ВЭЖХ на 2,0 мл добавляли 200 мкл пробы. Добавляли 800 мкл внутреннего стандартного рабочего раствора с концентрацией 100 нг/мл и встряхивали в течение 1 минуты. Раствор пробы по мере необходимости разбавляли MeOH : H2O (2 : 1, об./об.). Калибровочные стандарты, пробы QC и исследуемые пробы подвергали анализу методом ВЭЖХ-МС с использованием условий, описанных выше.

Пример 1

Группу испытуемых композиций, содержащих N-Ac-Val-Ala-NH₂, испытывали на проникновение в пробы кожи человека, используя способ проникновения в кожу и способ ВЭЖХ-МС. Композиции содержали ингредиенты, показанные в таблицах 1, 2 и 3. Количества ингредиентов приведены в % масс. в расчете на общую массу композиции. Композиции A-G были сравнительными. Композиция 1 соответствовала изобретению.

N-Ac-Val-Ala-NH₂ приобретали в Nanjing Pharmatechs Co., Ltd. Вещество представляло собой порошок.

Гликолевая кислота была в форме раствора в воде 70% масс. (GLYPURE, доступно в продаже от DuPont)

ТАБЛИЦА 1

Название по INCI Компо-зиция A Компо-зиция В Компо-зиция С Компо-зиция D Компо-зиция E Компо-зиция 1 Очищенная вода по Фарм. США 62,04 62,54 62,94 57,54 51,54 58,54 Магний-алюминия силикат 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 Динатриевая соль ЭДТА 0,03 0,03 0,03 0,03 0,03 0,03 Гликолевая кислота 0 0 0 0 0 4,00 N-ацетилвалилаланиламид 1,00 0,50 0,10 0,50 0,50 0,50 Пропиленгликоль 16,00 16,00 16,00 16,00 16,00 16,00 Ксантановая камедь 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08 Сорбитанстеарат 1,95 1,95 1,95 1,95 1,95 1,95 ПЭГ-40 стеарат 1,95 1,95 1,95 1,95 1,95 1,95 Белый вазелин по Фарм. США/Нац. форм. 4,80 4,80 4,80 4,80 4,80 4,80 Стеариловый спирт 2,40 2,40 2,40 2,40 2,40 2,40 Цетиловый спирт 0,60 0,60 0,60 0,60 0,60 0,60 Диметикон 0,60 0,60 0,60 0,60 0,60 0,60 Белый пчелиный воск SP-422P 2,40 2,40 2,40 2,40 2,40 2,40 Полисорбат 80 0 0 0 5,00 0 0 Минеральное масло 4,80 4,80 4,80 4,80 4,80 4,80 Каприлилгликоль/хлорофенезин/феноксиэтанол 1,20 1,20 1,20 1,20 1,20 1,20 Очищенная вода по Фарм. США 0 0 0 0 9,00 0 Глицерилдилаурат 0 0 0 0 1,00 0 Стеарет-10 0 0 0 0 0,50 0 Глицерин 0 0 0 0 0,50 0 Итого 100,00 100,00 100,00 100,00 100,00 100,00 pH 4,87 5,33 4,92 5,14 4,80 3,80

ТАБЛИЦА 2

Композиция F Название по INCI Весовое процентное содержание Диметикон, циклопентасилоксан, полисиликон-11, нейлон-12, кремнезем, ПЭГ-10 диметикон, полисорбат 40, изогексадекан, полиакрилодиметилтаурат аммония 39,50 Сополимер гидроксиэтилакрилата/акрилоилдиметилтаурата натрия 0,40 Ацетат витамина Е 1,00 Ксантановая камедь 0,20 ПЭГ-10 диметикон 0,80 Феноксиэтанол, хлорфенезин, каприлилгликоль 1,00 Бутилоктилсалицилат 5,00 Бутилгидрокситолуол (БГТ) 0,98 Очищенная вода 45,25 N-ацетилвалилаланиламид 0,50 Глицерин 5,00 Лимонная кислота 0,27 Динатриевая соль ЭДТА 0,10 Итого 100,00 pH 2,90

ТАБЛИЦА 3

Композиция G Название по INCI Весовое процентное содержание Очищенная вода 73,25 N-ацетилвалилаланиламид 0,50 Пропиленгликоль 5,00 Гидроксиэтилцеллюлоза 0,15 Ксантановая камедь 0,30 Динатриевая соль ЭДТА 0,10 Диметикон 2,00 Стеариновая кислота 2,75 Глицерилстеарат/ПЭГ-100 стеарат 4,00 Дикаприлиловый простой эфир 4,00 Изопропилпальмитат 2,75 Цетиловый спирт 4,00 Феноксиэтанол, каприлилгликоль, хлорфенезин 1,20 Итого 100 pH 4,22

Результаты показаны в таблице 4.

ТАБЛИЦА 4

Испытуемая композиция Количества (нг/см²), собранные через 48 часов,
среднее ± среднеквадратичное отклонение, n=4/обработка Совокупное
проникно-вение
через кожу^a Совокупное
проникно-вение в кожу^b Общая
биодоступ-ность в коже^c Не абсорби-ровано^d Итого восстанов-лено Композиция A 0 ± 0 257 ± 190 257 ± 190 67 771 ± 23 934 68 028 ±
24 053 Композиция B 163 ± 190 496 ± 393 658 ± 386 28 746 ± 17 471 29 404 ±
17 824 Композиция C 75 ± 125 601 ± 240 677 ± 220 5864 ± 2265 6540 ± 2440 Композиция D 130 ± 205 232 ± 99 362 ± 169 42 453 ± 26 119 42 815 ±
26 057 Композиция 1 576 ± 424 4135 ± 2472 4711 ± 2057 23 627 ± 5711 28 338 ±
7580 Композиция Е 2019 ± 2657 635 ± 550 2654 ± 3203 20 995 ± 2694 23 649 ±
4363 Композиция F 13 ± 26 640 ± 140 653 ± 137 29 335 ± 9880 29 988 ±
9963 Композиция G 136 ± 154 564 ± 223 701 ± 293 24 885 ± 1363 25 585 ±
1546 ^a Сумма количеств, собранных в принимающем отделении через 6, 24 и 48 часов после дозирования
^b Сумма количеств, извлеченных из эпидермиса и дермы
^c Сумма совокупных количеств, проникших через кожу (столбец 1) и совокупных количеств, проникших в кожу (столбец 2)
^d Сумма количеств, удаленных из промывочной жидкости с поверхности кожи и полученных с клейкой ленты

Вышеприведенные результаты показывают, что композиция 1, содержащая комбинацию N-ацетилвалилаланиламида и гликолевой кислоты, обеспечивала наибольшее проникновение в кожу N-ацетилвалилаланиламида среди всех испытанных композиций. Посредством композиции 1 в кожу доставлялись существенно более высокие (p < 0,01) совокупные количества дипептидного производного по сравнению со всеми прочими композициями, и она обеспечивала наибольшее общее биодоступное количество из всех композиций, достоверно (p < 0,05) более высокое биодоступное количество, чем все композиции, за исключением композиции Е. Например, композиция 1 доставляла в кожу приблизительно в семь раз больше общего биодоступного количества дипептидного производного по сравнению с тем, что обеспечивала композиция В.

Можно отметить, что композиция E доставляла в кожу в четыре раза больше общего биодоступного количества дипептидного производного по сравнению с композицией В, отражая то, что наличие одного или более из глицерилдилаурата, стеарета-10 и глицерина в составе также увеличивает доставку дипептидного производного в кожу.

В отличие от этого увеличение дозы одного N-ацетилвалилаланиламида не приводило к увеличению его проникновения в кожу.

Пример 2

Группу испытуемых композиций, содержащих 0,5% масс. N-Ac-Val-Ala-NH₂ и 0, 1, 4, 8 или 11% масс. гликолевой кислоты испытывали на проникновение в пробы человеческой кожи, применяя способ проникновения в кожу и способ ВЭЖХ-МС. Композиции содержали ингредиенты, показанные в таблице 5. Количества ингредиентов приведены в % масс. в расчете на общую массу композиции. Композиции H-L были сравнительными. Композиции 2-4 соответствовали изобретению.

N-Ac-Val-Ala-NH₂ и гликолевая кислота были получены так, как описано в примере 1.

ТАБЛИЦА 5

Название по INCI Композиция Н Композиция 2 Композиция 3 Композиция 4 Композиция I Композиция J Композиция K Композиция L Очищенная вода по Фарм. США 62,54 61,54 58,54 54,53 51,53 62,44 58,54 58,54 Магний-алюминия силикат 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 Динатриевая соль ЭДТА 0,03 0,03 0,03 0,03 0,03 0,03 0,03 0,03 Глюконолактон 0 0 0 0 0 0 4,00 0 Гликолевая кислота (70% активного вещества) 0 1,00 4,00 8,01 11,01 0 0 0 Миндальная кислота 0 0 0 0 0 0 0 4,00 N-ацетилвалила-ланиламид 0,50 0,50 0,50 0,50 0,50 0,50 0,50 0,50 Пропиленгли-коль 16,00 16,00 16,00 16,00 16,00 16,00 16,00 16,00 Ксантановая камедь 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08 Сорбитанстеарат 1,95 1,95 1,95 1,95 1,95 1,95 1,95 1,95 ПЭГ-40 стеарат 1,95 1,95 1,95 1,95 1,95 1,95 1,95 1,95 Белый вазелин по Фарм. США/Нац. форм. 4,80 4,80 4,80 4,80 4,80 4,80 4,80 4,80 Стеариловый спирт 2,40 2,40 2,40 2,40 2,40 2,40 2,40 2,40 Цетиловый спирт 0,60 0,60 0,60 0,60 0,60 0,60 0,60 0,60 Диметикон 0,60 0,60 0,60 0,60 0,60 0,60 0,60 0,60 Белый пчелиный воск SP-422P 2,40 2,40 2,40 2,40 2,40 2,40 2,40 2,40 Минеральное масло 4,80 4,80 4,80 4,80 4,80 4,80 4,80 4,80 Каприлилгли-коль/хлорофе-незин/фенокси-этанол 1,20 1,20 1,20 1,20 1,20 1,20 1,20 1,20 Соляная кислота (раствор 10%) 0 0 0 0 0 0,10 0 0 Итого 100,00 100,00 100,00 100,00 100,00 100,00 100,00 100,00 pH 5,33 3,84 3,80 3,80 3,80 3,83 3,81 3,80

Результаты показаны в таблице 6.

ТАБЛИЦА 6

Испытуемая композиция Количества (нг/см²), собранные через 48 часов,
среднее ± среднеквадратичное отклонение, n=4/обработка Совокупное
проникно- вение
через кожу^a Совокупное
проникно-вение в кожу^b Общая
биодоступ-ность в коже^c Не абсорбир- овано^d Итого восстановлено Композиция H 50 ± 99 1173 ± 1163 1222 ± 1261 29 496 ± 5461 30 768 ± 4876 Композиция 2 0 ± 0 3891 ± 1269 3891 ± 1269 23 265 ± 5986 27 156 ± 5734 Композиция 3 0 ± 0 4183 ± 810 4183 ± 810 29 023 ± 7708 33 206 ± 7753 Композиция 4 140 ± 192 2982 ± 1087 3122 ± 1058 47 535 ± 8320 50 798 ± 7535 Композиция I 9 ± 17 1728 ± 1021 1736 ± 1011 33 296 ± 6725 35 041 ± 7338 Композиция J 0 ± 0 1067 ± 298 1067 ± 298 38 550 ± 6342 39 614 ± 6252 Композиция К 425 ± 824 1611 ± 689 2037 ± 1442 57 813 ± 13 010 60 275 ± 12 290 Композиция L 10 ± 20 1824 ± 1381 1834 ± 1374 32 142 ± 3665 33 986 ± 4175 ^a Сумма количеств, собранных в принимающем отделении через 6, 24 и 48 часов после дозирования
^b Сумма количеств, извлеченных из эпидермиса и дермы
^c Сумма совокупных количеств, проникших через кожу (столбец 1) и совокупных количеств, проникших в кожу (столбец 2)
^d Сумма количеств, удаленных из промывочной жидкости с поверхности кожи и полученных с клейкой ленты

Эти результаты показывают, что композиции 2, 3 и 4, содержащие 1%, 4% и 8% гликолевой кислоты соответственно, доставляли в кожу наибольшее количество дипептидного производного. Каждая из этих композиций доставляла в кожу существенно (p < 0,05) более высокие совокупные количества дипептидного производного, чем композиция Н (такая же базовая формула, содержащая 0% гликолевой кислоты), обеспечивая существенно более высокие биодоступные концентрации дипептидного производного в коже. Например, композиции 2-4 доставляли в кожу приблизительно в три раза больше общего биодоступного количества дипептидного производного по сравнению с тем, что обеспечивала композиция Н.

Неожиданно было обнаружено, что увеличение концентрации гликолевой кислоты до 11% масс. (композиция I) приводило к уменьшению доставки дипептидного производного в кожу по сравнению с композициями с 1%, 4% и 8% гликолевой кислоты и существенному (p < 0,05) уменьшению доставки дипептидного производного в кожу по сравнению с композициями с 1% и 4% гликолевой кислоты. Например, композиции I доставляли в кожу приблизительно в два-три раза меньше общих биодоступных количеств дипептидного производного по сравнению с тем, что обеспечивали композиции 2-3.

Более того, композиция 3, содержащая 4% масс. гликолевой кислоты, обеспечивала в два раза больше биодоступного количества дипептидного производного в коже по сравнению с композицией К и композицией L, содержащими 4% масс. глюконолактона и миндальной кислоты соответственно.

Наконец, простая корректировка pH в базовой формуле (композиция H) до 3,8 (рН композиций, содержащих гликолевую кислоту) не влияла на уровень дипептидного производного, доставляемого в кожу, как видно по результатам для композиции J.

Группа изобретений относится к области фармацевтической промышленности, а именно к композициям для местного нанесения. Композиция для местного нанесения, содержащая N-ацил дипептидное производное, имеющее формулу: N-Ac-Val-Ala-NH₂, или его изомер или соль, причем Val представляет собой валин, Ala представляет собой аланин, Ac представляет собой ацетил и гликолевую кислоту, причем композиция содержит от 0,01 до 2% мас. N-Ac-Val-Ala-NH₂ и от 1 до 8% мас. гликолевой кислоты. Композиция для местного нанесения, содержащая от 0,01 до 2% мас. N-Ac-Val-Ala-NH₂, причем Ac представляет собой ацетил, от 1 до 8% мас. гликолевой кислоты и косметически приемлемый носитель для местного нанесения. Композиция для местного нанесения, содержащая от 0,01 до 2% мас. в расчете на общую массу композиции N-Ac-Val-Ala-NH₂, причем Ac представляет собой ацетил и косметически приемлемый носитель для местного нанесения, содержащий 1,0% мас. в расчете на общую массу композиции глицерилдилаурата, 0,50% мас. в расчете на общую массу композиции стеарета-10 и 0,50% мас. в расчете на общую массу композиции глицерина. Использование группы изобретений позволяет обеспечить повышенное проникновение дипептида в кожу. 3 н. и 2 з.п. ф-лы, 8 табл., 2 пр.

1. Композиция для местного нанесения, содержащая N-ацилдипептидное производное, имеющее формулу:

N-Ac-Val-Ala-NH₂,

или его изомер или соль, причем Val представляет собой валин, Ala представляет собой аланин, Ас представляет собой ацетил и гликолевую кислоту, причем композиция содержит от 0,01 до 2% мас. N-Ac-Val-Ala-NH₂ и от 1 до 8% мас. гликолевой кислоты.

2. Композиция для местного нанесения по п. 1, дополнительно содержащая косметически приемлемый носитель для местного нанесения.

3. Композиция для местного нанесения по п. 2, в которой носитель содержит один или более из глицерилдилаурата, стеарета-10 и глицерина.

4. Композиция для местного нанесения, содержащая от 0,01 до 2% мас. N-Ac-Val-Ala-NH₂, причем Ас представляет собой ацетил, от 1 до 8% мас. гликолевой кислоты и косметически приемлемый носитель для местного нанесения.

5. Композиция для местного нанесения, содержащая от 0,01 до 2% мас. в расчете на общую массу композиции N-Ac-Val-Ala-NH₂, причем Ас представляет собой ацетил, и косметически приемлемый носитель для местного нанесения, содержащий 1,0% мас. в расчете на общую массу композиции глицерилдилаурата, 0,50% мас. в расчете на общую массу композиции стеарета-10 и 0,50% мас. в расчете на общую массу композиции глицерина.