1-Бензоилзамещенные-6-(метилтио)-4-хлор-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидины и способ их получения Российский патент 2019 года по МПК C07D471/04 A61K31/519 A61P31/04 

Изобретение относится к области органической и медицинской химии, а именно: к новым соединениям и способу получения соединений класса гетероциклических систем - производным 1-бензоилзамещенных-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидинов общей формулы I, которые могут быть использованы для синтеза новых гетероциклических соединений и в медицине в качестве потенциального противомикробного средства.

R=H, R₁-фенил (Iа) - 1-бензоил-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин;

R=H, R₁=2-бромфенил (Iб) - 1-(2-бромбензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин;

R=H, R₁=2-метилфенил (Iв) - 1-(2-метилбензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин;

R=H, R₁=2-метоксифенил (Iг) - 1-(2-метоксибензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин;

R=H, R₁=3,4-димeтoкcифeнил (Iд) - 1-(3,4-диметоксибензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин;

R=H, R₁=3-бpoмфeнил (Ie) - 1-(3-бромбензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло [3,4-d]пиримидин;

R=H, R₁=3-мeтилфeнил (Iж) - 1-(3-метилбензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин;

R=H, R₁=3-мeтoкcифeнил (Iз) - 1-(3-метоксибензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d] пиримидин;

R=H, R₁=4-бpoмфeнил (Iи) - 1-(4-бромбензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин;

R=H, R₁=4-мeтилфeнил (Iк) - 1-(4-метилбензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло [3,4-d]пиримидин;

R=H, R₁=4-мeтoкcифeнил (Iл) - 1-(4-метоксибензоил)-6-(метилтио)-4-хлop-1H-пиразоло[3,4-d] пиримидин;

R=H, R₁=2-фурил (Iм) - 6-(метилтио)-1-(2-фуроил)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин;

R=H, R₁=2-тиенил (Iн) - 6-(метилтио)-1-(2-тиенилкарбонил)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин.

В литературе описан способ получения (6-метилтио)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидина [Eur. Journal of Med. Chem. (2012). 56: 30-35]. В качестве исходного соединения для синтеза (6-метилтио)-1H-пиразоло[3,4-d] пиримидина был взять метил ими дотиокарбамат (II), который обрабатывают этил-2-циано-3-этоксиакрилатом в присутствии поташа. Полученный 4-гидрокси-2-(метилтио)пиримидин-5-карбонитрил (III) в толуоле и хлорокиси фосфора нагревают в течение 6 ч. при 110°С. В результате взаимодействия 2-(метилтио)пиримидин-4-хлор-5-карбонитрила (IV) и гидразингидрата в присутствии н-бутанола (0,5 ч при комнатной температуре) получают необходимый пиразоло[3,4-d]пиримидин.

(6-метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин XI можно получить путем последовательных превращений, исходным соединением для синтеза которого является этоксиметиленмалононитрил (VI) [Eur. Journal of Med. Chem., 38(2003), 525-532]. Этоксиметиленмалононитрил (VI) циклизуется при обработке гидразингидратом, при этом полученный 3-амино-4-цианопиразол (VII) превращают в 3-амино-4-пиразолокарбоксамид (VIII) в результате гидролиза нитрильной группы в присутствии 95% серной кислоты. Продукт гидролиза 3-амино-4-пиразолокарбоксамид (VIII) взаимодействует с тиомочевинной с 70% выходом, при этом был получен целевой пиразолопиримидин (IX). Далее проводят S-алкилирование йодистым метилом с количественным выходом. Гидроксигруппу в молекуле приведенного соединения (X) хлорируют в присутствии хлорокиси фосфора.

По данным литературных источников (Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 21, 2011, 5928-5933) соответствующий пиразолопиримидин синтезируют из замещенного пиразола (XII), который в свою очередь был получен из 2-(фенилэтил)гидразина (R₁=H) или 2-(фенилпропил)гидразина (R₁=СН₃) путем взаимодействия с этил(этоксиметилен)цианоацетатом. Далее пиразол (XIII) обрабатывают бензоилизоцианатом и кипят в безводном тетрагидрофуране в течение 12 ч. Конденсированный пиразоло[3,4-d]пиримидин (XIV) алкилируют по атому серы.

Авторы статьи [ACS Comb. Sci. 2014, 16, 168-175] описывают способ получения (6-метилтио)-4-хлор-пиразоло[3,4-d]пиримидинов через формильное производное, которое было получено в результате формилирования 2-метилтиобарбитуровой кислоты (XVII) по Вильсмаеру-Хааку хлорокисью фосфора. Особенностью данной реакции является параллельное введение формальной группы в молекулу и нуклеофильное замещение гидроксигрупп. Выделенный альдегид (XVIII) взаимодействует с гидразингидратом при комнатной температуре в течение 5 ч. в присутствии триэтиламина. Конденсируемый (6-метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин (XIX) обрабатывают трифенилфосфином в среде абсолютного тетрагидрофурана в присутствии DIAD (диэтилазодикарбоксилата) в течение 15 мин. при 4°С, затем реакционную смесь облучают в микроволновой печи при 100°С (3 мин.), остаток хроматографируют. В результате получают замещенный пиразоло[3,4-d]пиримидин (XX-XXI).

R=-СН₂СН₂С₆Н₅; -СН₂С₆Н₅; -СН₂СН(ОМе)С₆Н₅

Из патентной и научно-технической литературы не выявлены ни способы получения новых, заявляемых авторами соединений, ни сама структура.

Задачей предполагаемой группы изобретений является создание новых неописанных в литературе соединений 1-бензоилзамещенных-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидинов (I).

Техническими результатами, на решение которых направлена группа изобретений, являются получение новых гетероциклических соединений формулы I, которые могут быть использованы в качестве исходных продуктов для синтеза новых гетероциклических систем и в медицине, например, в качестве антимикробного средства; разработка простого способа их получения с высоким выходом продукта.

Поставленная задача осуществляется путем взаимодействия 4,6-дихлор-2-(метилтио)пиримидина-5-карбальдегида, растворенного в тетрагидрофуране с добавлением расчетного количества соответствующего R₁-замещенного бензгидразида (1:1) и избытка триэтиламина, смесь кипятят. Охлаждают. Полученный осадок заливают водой и перемешивают при комнатной температуре в течение 3 часов. Перерожденный осадок фильтруют.

Способ получения производных 1-бензоилзамещенных-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидинов (Ia-н) изучен и проведен в лабораторных условиях на стандартном товарном сырье.

Пример 1. Получение 1-бензоил-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидина (Iа).

В плоскодонную колбу емкостью 25 мл загружают 0,5 г (2,24 ммоль) 4,6-дихлор-2-(метилтио)пиримидин-5-карбальдегида и 10 мл тетрагидрофурана, а затем добавляют 0,305 г (2,24 ммоль) бензгидразида и 0,37 мл триэтиламина (2,69 ммоль). Реакционную смесь кипятят при активном перемешивании в течение 8 часов. Реакционную массу охлаждают, заливают 30 мл воды и перемешивают в течение 3 часов. В ходе перемешивания происходит перерождение осадка. В результате выпадает осадок светло-желтого цвета. Смесь отфильтровывают и промывают небольшими порциями воды очищенной.

Выделенный продукт светло-желтого цвета составляет 0,547 г, 80% от теоретического из расчета на 4,6-дихлор-2-(метилтио)пиримидин-5-карбальдегида. Температура плавления 130-131°С. Хроматографическая однородность целевого продукта подтверждалась хроматографированием раствора его в системе метанол : дихлорметан (1:10) в системе. R_f=0,839. Состав синтезированного соединения подтвержден элементным анализом. Брутто-формула: C₁₃H₉ClN₄OS. Найдено %: С - 51,19, Н - 3,07, N - 18,56, O - 5,12. Вычислено %: С - 51,23, Н - 2,98, N - 18,34, О - 5,25.

Строение синтезированного вещества было доказано физико-химическими методами идентификации органических соединений: ЯМР ¹Н и масс-спектрометрией.

В спектре ЯМР ¹Н полученного соединения в ДМСО-d₆ присутствуют сигналы протонов метальной группы (δ 2.46 с), сигналы бензольного кольца: δ 7,57-7,61 т (2Н, Наром), δ 7,71-7,75 т (1H, Наром), δ 7,91 м (2Н, Наром), и сигнал протона пиразольного кольца δ 8,68 с. Также строение полученного вещества было доказано с помощью масс-спектрометрии. Рассчитанная молекулярная масса полностью совпала с экспериментально полученной (М⁺=304,82).

Пример 2. Получение 1-(2-бромбензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидина 1 л-

В плоскодонную колбу емкостью 25 мл загружают 0,5 г (2,24 ммоль) 4,6-дихлор-2-(метилтио)пиримидин-5-карбальдегида и 10 мл тетрагидрофурана, а затем добавляют 0,482 г (2,24 ммоль) о-бромбензгидразида и 0,37 мл триэтиламина (2,69 ммоль). Реакционную смесь кипятят при активном перемешивании в течение 10 часов. Охлаждают, заливают 30 мл воды и перемешивают в течение 3 часов. В ходе перемешивания происходит перерождение осадка. В результате выпадает осадок белого цвета. Смесь отфильтровывают и промывают небольшими порциями воды очищенной.

Выделенный продукт белого цвета составляет 0,556 г, 65% от теоретического из расчета на 4,6-дихлор-2-(метилтио)пиримидин-5-карбальдегида. Температура плавления 166-168°С. Хроматографическая однородность целевого продукта подтверждалась хроматографированием раствора его в системе метанол : дихлорметан (1:10) в системе. R_f=0,771. Состав синтезированного соединения подтвержден элементным анализом. Брутто-формула: C₁₃H₈BrClN₄OS. Найдено %: С - 40,62, Н - 2,03, N - 14,55, О - 4,12. Вычислено %: С - 40,70, Н - 2,10, N - 14,60, O - 4,17.

Строение синтезированного вещества было доказано физико-химическими методами идентификации органических соединений: ЯМР ¹Н и масс-спектрометрией.

В спектре ЯМР ¹Н полученного соединения в ДМСО-d₆ присутствуют сигналы протонов метальной группы (δ 2.31 с), сигналы бензольного кольца: δ 7,53-7,61 м (2Н, Наром), δ 7,72 д (1Н, Наром), δ 7,80 д (1H, Наром) и сигнал протона пиразольного кольца δ 8,71 с. Также строение полученного вещества было доказано с помощью масс-спектрометрии. Рассчитанная молекулярная масса полностью совпала с экспериментально полученной (М⁺=383,59).

Пример 3. Получение 1-(2-метилбензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидина (Iв).

В плоскодонную колбу емкостью 25 мл загружают 0,5 г (2,24 ммоль) 4,6-дихлор-2-(метилтио)пиримидин-5-карбальдегида и 10 мл тетрагидрофурана, а затем добавляют 0,337 г (2,24 ммоль) о-метилбензгидразида и 0,37 мл триэтиламина (2,69 ммоль). Реакционную смесь кипятят при активном перемешивании в течение 8 часов. Охлаждают, заливают 30 мл воды и перемешивают в течение 3 часов. В ходе перемешивания происходит перерождение осадка. В результате выпадает осадок белого цвета. Смесь отфильтровывают и промывают небольшими порциями воды очищенной.

Выделенный продукт белого цвета составляет 0,55 г, 77% от теоретического из расчета на 4,6-дихлор-2-(метилтио)пиримидин-5-карбальдегида. Температура плавления 143-145°С. Хроматографическая однородность целевого продукта подтверждалась хроматографированием раствора его в системе метанол : дихлорметан (1:10) в системе. R_f=0,819. Состав синтезированного соединения подтвержден элементным анализом. Брутто-формула: C₁₄H₁₁ClN₄OS. Найдено %: С - 52,71, Н - 3,33, N - 17,49, О - 5,00. Вычислено %: С - 52,75, Н - 3,48, N - 17,58, O - 5,02.

Строение синтезированного вещества было доказано физико-химическими методами идентификации органических соединений: ЯМР 1Н и масс-спектрометрией.

В спектре ЯМР 1Н полученного соединения в ДМСО-d6 присутствуют сигналы протонов двух метальных групп (δ 2,29 с и δ 2,35 соответственно), сигналы бензольного кольца: δ 7,32-7,36 т (1Н, Н_аром), δ 7,40 д (1Н, Н_аром), δ 7,50-7,54 т (2Н, Н_аром), и сигнал протона пиразольного кольца δ 8,68 с. Также строение полученного вещества было доказано с помощью масс-спектрометрии. Рассчитанная молекулярная масса полностью совпала с экспериментально полученной (М+=318,91).

Пример 4. Получение 1-(2-метоксибензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидина (Iг).

В плоскодонную колбу емкостью 25 мл загружают 0,5 г (2,24 ммоль) 4,6-дихлор-2-(метилтио)пиримидин-5-карбальдегида и 10 мл тетрагидрофурана, а затем добавляют 0,372 г (2,24 ммоль) о-метоксибензгидразида и 0,37 мл триэтиламина (2,69 ммоль). Реакционную смесь кипятят при активном перемешивании в течение 6 часов. Охлаждают, заливают 30 мл воды и перемешивают в течение 3 часов. В ходе перемешивания происходит перерождение осадка. В результате выпадает осадок светло-желтого цвета. Смесь отфильтровывают и промывают небольшими порциями воды очищенной.

Выделенный продукт светло-желтого цвета составляет 0,563 г, 75% от теоретического из расчета на 4,6-дихлор-2-(метилтио)пиримидин-5-карбальдегида. Температура плавления 153-154°С. Хроматографическая однородность целевого продукта подтверждалась хроматографированием раствора его в системе метанол: дихлорметан (1:10) в системе. R_f=0,792. Состав синтезированного соединения подтвержден элементным анализом. Брутто-формула: C₁₄H₁₁CIN₄O₂S. Найдено %: С - 50,18, Н - 3,29, N - 16,75, О - 9,46. Вычислено %: С - 50,23, Н - 3,31, N - 16,74, O - 9,58.

Строение синтезированного вещества было доказано физико-химическими методами идентификации органических соединений: ЯМР 1Н и масс-спектрометрией.

В спектре ЯМР 1Н полученного соединения в ДМСО-d6 присутствуют сигналы протонов метильной группы (δ 2.58 с), метоксигруппы (δ 3,77 с), сигналы бензольного кольца: δ 7,25-7,28 м (2Н, Наром), δ 7,38-7,42 м (1Н, Наром), δ 7,92 д (1Н, Наром), и сигнал протона пиразольного кольца δ 8,76 с. Также строение полученного вещества было доказано с помощью масс-спектрометрии. Рассчитанная молекулярная масса полностью совпала с экспериментально полученной (М+=334,81).

Пример 5. Получение 1-(3,4-диметоксибензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидина (Iд).

В плоскодонную колбу емкостью 25 мл загружают 0,5 г (2,24 ммоль) 4,6-дихлор-2-(метилтио)пиримидин-5-карбальдегида и 10 мл тетрагидрофурана, а затем добавляют 0,439 г (2,24 ммоль) 3,4-диметоксибензгидразида и 0,37 мл триэтиламина (2,69 ммоль). Реакционную смесь кипятят при активном перемешивании в течение 6 часов. Охлаждают, заливают 30 мл воды и перемешивают в течение 3 часов. В ходе перемешивания происходит перерождение осадка. В результате выпадает осадок белого цвета. Смесь отфильтровывают и промывают небольшими порциями воды очищенной.

Выделенный продукт белого цвета составляет 0,67 г, 82% от теоретического из расчета на 4,6-дихлор-2-(метилтио)пиримидин-5-карбальдегида. Температура плавления 123-125°С. Хроматографическая однородность целевого продукта подтверждалась хроматографированием раствора его в системе метанол: дихлорметан (1:10) в системе. R_f=0,796. Состав синтезированного соединения подтвержден элементным анализом. Брутто-формула: C₁₅H₁₃CIN₄O₃S. Найдено %: С - 49,28, Н - 3,63, N - 15,28, О - 13,09. Вычислено %: С - 49,39, Н - 3,59, N - 15,36, О - 13,16.

Строение синтезированного вещества было доказано физико-химическими методами идентификации органических соединений: ЯМР 1Н и масс-спектрометрией.

В спектре ЯМР 1Н полученного соединения в ДМСО-d6 присутствуют сигналы протонов метальной группы (δ 2,46 с), метоксигрупп (δ 3,80 с и δ 3,89 соответственно), сигналы бензольного кольца: 7,13 д (1Н, _Наром), 7,51 с (1Н, _Наром), 7,60 д (1Н, _Наром), и сигнал протона пирразольного кольца δ 8,63 с. Также строение полученного вещества было доказано с помощью масс-спектрометрии. Рассчитанная молекулярная масса полностью совпала с экспериментально полученной (М+=364,76).

Пример 6. Получение 1-(3-бромбензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидина (Iе).

В плоскодонную колбу емкостью 25 мл загружают 0,5 г (2,24 ммоль) 4,6-дихлор-2-(метилтио)пиримидин-5-карбальдегида и 10 мл тетрагидрофурана, а затем добавляют 0,482 г (2,24 ммоль) м-бромбензгидразида и 0,37 мл триэтиламина (2,69 ммоль). Реакционную смесь кипятят при активном перемешивании в течение 10 часов. Охлаждают, заливают 30 мл воды и перемешивают в течение 3 часов. В ходе перемешивания происходит перерождение осадка. В результате выпадает осадок светло-желтого цвета. Смесь отфильтровывают и промывают небольшими порциями воды очищенной.

Выделенный продукт светло-желтого цвета составляет 0,49 г, 57% от теоретического из расчета на 4,6-дихлор-2-(метилтио)пиримидин-5-карбальдегида. Температура плавления 173-175°С. Хроматографическая однородность целевого продукта подтверждалась хроматографированием раствора его в системе метанол : дихлорметан (1:10) в системе. R_f=0,824. Состав синтезированного соединения подтвержден элементным анализом. Брутто-формула: C₁₃H₈ BrClN₄OS. Найдено %: С - 40,58, Н - 2,08, N - 14,47, О - 4,11. Вычислено %: С - 40,70, Н - 2,10, N - 14,60, O - 4,17.

Строение синтезированного вещества было доказано физико-химическими методами идентификации органических соединений: ЯМР ¹Н и масс-спектрометрией.

В спектре ЯМР ¹Н полученного соединения в ДМСО-d₆ присутствуют сигналы протонов метальной группы (δ 2.59 с), сигналы бензольного кольца: δ 7,52-7,58 м (1Н, Н_аром), δ 7,82-7,86 м (1Н, Н_аром), δ 7,91-7,97 м (1Н, Н_аром), δ δ 8,10-8,15 м (1Н, Н_аром) и сигнал протона пиразольного кольца δ 8,72 с. Также строение полученного вещества было доказано с помощью масс-спектрометрии. Рассчитанная молекулярная масса полностью совпала с экспериментально полученной (M⁺=383,61).

Пример 7. Получение 1-(3-метилбензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидина (Iж).

В плоскодонную колбу емкостью 25 мл загружают 0,5 г (2,24 ммоль) 4,6-дихлор-2-(метилтио)пиримидин-5-карбальдегида и 10 мл тетрагидрофурана, а затем добавляют 0,337 г (2,24 ммоль) м-метилбензгидразида и 0,37 мл триэтиламина (2,69 ммоль). Реакционную смесь кипятят при активном перемешивании в течение 9 часов. Охлаждают, заливают 30 мл воды и перемешивают в течение 3 часов. В ходе перемешивания происходит перерождение осадка. В результате выпадает осадок светло-желтого цвета. Смесь отфильтровывают и промывают небольшими порциями воды очищенной.

Выделенный продукт светло-желтого цвета составляет 0,608 г, 85% от теоретического из расчета на 4,6-дихлор-2-(метилтио)пиримидин-5-карбальдегида. Температура плавления 145-147°С. Хроматографическая однородность целевого продукта подтверждалась хроматографированием раствора его в системе метанол : дихлорметан (1:10) в системе. R_f=0,833. Состав синтезированного соединения подтвержден элементным анализом. Брутто-формула: C₁₄H₁₁ClN₄OS. Найдено %: С - 52,69, Н - 3,45, N - 17,50, О - 4,99. Вычислено %: С - 52,75, Н - 3,48, N - 17,58, O - 5,02.

Строение синтезированного вещества было доказано физико-химическими методами идентификации органических соединений: ЯМР 1Н и масс-спектрометрией.

В спектре ЯМР 1Н полученного соединения в ДМСО-d6 присутствуют сигналы протонов двух метальных групп (δ 2.39 с и δ 2,60 соответственно), сигналы бензольного кольца: δ 7,19 д (1H, Н_аром), 7,43 с (1Н, Н_аром), 7,90-7,94 т (2Н, Н_аром), и сигнал протона пиразольного кольца δ 8,52 с. Также строение полученного вещества было доказано с помощью масс-спектрометрии. Рассчитанная молекулярная масса полностью совпала с экспериментально полученной (М+=318,93).

Пример 8. Получение 1-(3-метоксибензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидина (Iз).

В плоскодонную колбу емкостью 25 мл загружают 0,5 г (2,24 ммоль) 4,6-дихлор-2-(метилтио)пиримидин-5-карбальдегида и 10 мл тетрагидрофурана, а затем добавляют 0,372 г (2,24 ммоль) м-метоксибензгидразида и 0,37 мл триэтиламина (2,69 ммоль). Реакционную смесь кипятят при активном перемешивании в течение 8 часов. Охлаждают, заливают 30 мл воды и перемешивают в течение 3 часов. В ходе перемешивания происходит перерождение осадка. В результате выпадает осадок желтого цвета. Смесь отфильтровывают и промывают небольшими порциями воды очищенной.

Выделенный продукт желтого цвета составляет 0,653 г, 87% от теоретического из расчета на 4,6-дихлор-2-(метилтио)пиримидин-5-карбальдегида. Температура плавления 150-152°С. Хроматографическая однородность целевого продукта подтверждалась хроматографированием раствора его в системе метанол : дихлорметан (1:10) в системе. R_f=0,784. Состав синтезированного соединения подтвержден элементным анализом. Брутто-формула: С₁₄H₁₁СlN₄O₂S. Найдено %: С - 50,18, Н - 3,29, N - 16,75, О - 9,46. Вычислено %: С - 50,23, Н - 3,31, N - 16,74, О - 9,58.

Строение синтезированного вещества было доказано физико-химическими методами идентификации органических соединений: ЯМР 1H и масс-спектрометрией.

В спектре ЯМР 1Н полученного соединения в ДМСО-d6 присутствуют сигналы протонов метальной группы (δ 2.47 с), метоксигруппы (δ 3,81 с), сигналы бензольного кольца: δ 7,98-7,31 м (1Н, Н_аром), δ 7,45 с (1Н, Н_аром), δ 7,49-7,53 т (2Н, Н_аром), и сигнал протона пиразольного кольца δ 8,68 с. Также строение полученного вещества было доказано с помощью масс-спектрометрии. Рассчитанная молекулярная масса полностью совпала с экспериментально полученной (М+=334,84).

Пример 9. Получение 1-(4-бромбензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидина (Iи).

В плоскодонную колбу емкостью 25 мл загружают 0,5 г (2,24 ммоль) 4,6-дихлор-2-(метилтио)пиримидин-5-карбальдегида и 10 мл тетрагидрофурана, а затем добавляют 0,482 г (2,24 ммоль) п-бромбензгидразида и 0,37 мл триэтиламина (2,69 ммоль). Реакционную смесь кипятят при активном перемешивании в течение 8 часов. Охлаждают, заливают 30 мл воды и перемешивают в течение 3 часов. В ходе перемешивания происходит перерождение осадка. В результате выпадает осадок светло-желтого цвета. Смесь отфильтровывают и промывают небольшими порциями воды очищенной.

Выделенный продукт светло-желтого цвета составляет 0,49 г, 57% от теоретического из расчета на 4,6-дихлор-2-(метилтио)пиримидин-5-карбальдегида. Температура плавления 187-189°С. Хроматографическая однородность целевого продукта подтверждалась хроматографированием раствора его в системе метанол : дихлорметан (1:10) в системе. R_f=0,782. Состав синтезированного соединения подтвержден элементным анализом. Брутто-формула: C₁₃H₈BrClN₄OS. Найдено %: С - 40,62, Н - 2,03, N - 14,55, O - 4,12. Вычислено %: С - 40,70, Н - 2,10, N - 14,60, O - 4,17.

Строение синтезированного вещества было доказано физико-химическими методами идентификации органических соединений: ЯМР ¹Н и масс-спектрометрией.

В спектре ЯМР ¹Н полученного соединения в ДМСО-d₆ присутствуют сигналы протонов метальной группы (δ 2,60 с), сигналы бензольного кольца: δ 7,98 д (2Н, Наром), δ 8,24 д (2Н, Наром), δ 7,80 д (1Н, Наром) и сигнал протона пиразольного кольца δ 8,85 С. Также строение полученного вещества было доказано с помощью масс-спектрометрии. Рассчитанная молекулярная масса полностью совпала с экспериментально полученной (М⁺=383,62).

Пример 10. Получение 1-(4-метилбензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидина (Iк).

В плоскодонную колбу емкостью 25 мл загружают 0,5 г (2,24 ммоль) 4,6-дихлор-2-(метилтио)пиримидин-5-карбальдегида и 10 мл тетрагидрофурана, а затем добавляют 0,337 г (2,24 ммоль) п-метилбензгидразида и 0,37 мл триэтиламина (2,69 ммоль). Реакционную смесь кипятят при активном перемешивании в течение 6 часов. Охлаждают, заливают 30 мл воды и перемешивают в течение 3 часов. В ходе перемешивания происходит перерождение осадка. В результате выпадает осадок желтого цвета. Смесь отфильтровывают и промывают небольшими порциями воды очищенной.

Выделенный продукт желтого цвета составляет 0,643 г, 90% от теоретического из расчета на 4,6-дихлор-2-(метилтио)пиримидин-5-карбальдегида. Температура плавления 95-97°С. Хроматографическая однородность целевого продукта подтверждалась хроматографированием раствора его в системе метанол : дихлорметан (1:10) в системе. R_f=0,817. Состав синтезированного соединения подтвержден элементным анализом. Брутто-формула: C₁₄H₁₁ClN₄OS. Найдено %: С - 52,71, Н - 3,40, N - 17,55, О - 4,97. Вычислено %: С - 52,75, Н - 3,48, N - 17,58, О - 5,02.

Строение синтезированного вещества было доказано физико-химическими методами идентификации органических соединений: ЯМР 1Н и масс-спектрометрией.

В спектре ЯМР 1Н полученного соединения в ДМСО-d6 присутствуют сигналы протонов двух метальных групп (δ 2.43 с и δ 2,48 соответственно), сигналы бензольного кольца: δ 7,39 д (2Н, Н_аром), δ 7,83 д (2Н, Н_аром), и сигнал протона пиразольного кольца δ 8,68 с. Также строение полученного вещества было доказано с помощью масс-спектрометрии. Рассчитанная молекулярная масса полностью совпала с экспериментально полученной (М+=318,76).

Пример 11. Получение 1-(4-метоксибензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидина (Iл).

В плоскодонную колбу емкостью 25 мл загружают 0,5 г (2,24 ммоль) 4,6-дихлор-2-(метилтио)пиримидин-5-карбальдегида и 10 мл тетрагидрофурана, а затем добавляют 0,372 г (2,24 ммоль) п-метоксибензгидразида и 0,37 мл триэтиламина (2,69 ммоль). Реакционную смесь кипятят при активном перемешивании в течение 5 часов. Охлаждают, заливают 30 мл воды и перемешивают в течение 3 часов. В ходе перемешивания происходит перерождение осадка. В результате выпадает осадок светло-желтого цвета. Смесь отфильтровывают и промывают небольшими порциями воды очищенной.

Выделенный продукт светло-желтого цвета составляет 0,69 г, 92% от теоретического из расчета на 4,6-дихлор-2-(метилтио)пиримидин-5-карбальдегида. Температура разложения 195-197°С. Хроматографическая однородность целевого продукта подтверждалась хроматографированием раствора его в системе метанол : дихлорметан (1:10) в системе. R_f=0,839. Состав синтезированного соединения подтвержден элементным анализом. Брутто-формула: C₁₄H₁₁ClN₄O₂S. Найдено %: С - 50,15, Н - 3,30, N - 16,57, О - 9,52. Вычислено %: С - 50,23, Н - 3,31, N - 16,74, O - 9,58.

Строение синтезированного вещества было доказано физико-химическими методами идентификации органических соединений: ЯМР 1H и масс-спектрометрией.

В спектре ЯМР 1Н полученного соединения в ДМСО-d6 присутствуют сигналы протонов метальной группы (δ 2.60 с), метоксигруппы (δ 3,89 с), сигналы бензольного кольца: δ 7,13 д (2Н, Н_аром), δ 7,96 д (2Н, Н_аром), и сигнал протона пиразольного кольца δ 8,68 с. Также строение полученного вещества было доказано с помощью масс-спектрометрии. Рассчитанная молекулярная масса полностью совпала с экспериментально полученной (М+=334,77).

Пример 12. Получение 6-(метилтио)-(1-(2-фуроил))-4-хлор-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидина (Iм).

В плоскодонную колбу емкостью 25 мл загружают 0,5 г (2,24 ммоль) 4,6-дихлор-2-(метилтио)пиримидин-5-карбальдегида и 10 мл тетрагидрофурана, а затем добавляют 0,283 г (2,24 ммоль) гидразида 2-фуранкарбоновой кислоты и 0,37 мл триэтиламина (2,69 ммоль). Реакционную смесь кипятят при активном перемешивании в течение 9 часов. Охлаждают, заливают 30 мл воды и перемешивают в течение 3 часов. В ходе перемешивания происходит перерождение осадка. В результате выпадает осадок белого цвета. Смесь отфильтровывают и промывают небольшими порциями воды очищенной.

Выделенный продукт белого цвета составляет 0,495 г, 75% от теоретического из расчета на 4,6-дихлор-2-(метилтио)пиримидин-5-карбальдегида. Температура плавления 123-124°С. Хроматографическая однородность целевого продукта подтверждалась хроматографированием раствора его в системе метанол : дихлорметан (1:10) в системе. R_f=0,875. Состав синтезированного соединения подтвержден элементным анализом. Брутто-формула: C₁₄H₁₁ClN₄O₂S. Найдено %: С - 44,79, Н - 2,41, N - 19,03, О - 10,79. Вычислено %: С - 44,83, Н - 2,39, N - 19,01, O - 10,86.

Строение синтезированного вещества было доказано физико-химическими методами идентификации органических соединений: ЯМР 1Н и масс-спектрометрией.

В спектре ЯМР 1Н полученного соединения в ДМСО-d6 присутствуют сигналы протонов метильной группы (δ 2,63 с), сигналы фуранового кольца: δ 6,86-6,87 м (1Н, Наром), δ 7,85 д (1Н, Наром), δ 8,23 д (1Н, Наром) и сигнал протона пирразольного кольца δ 8,70 с. Также строение полученного вещества было доказано с помощью масс-спектрометрии. Рассчитанная молекулярная масса полностью совпала с экспериментально полученной (М+=294,69).

Пример 13. Получение 1-(2-тиенилкарбонил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидина (Iн).

В плоскодонную колбу емкостью 25 мл загружают 0,5 г (2,24 ммоль) 4,6-дихлор-2-(метилтио)пиримидин-5-карбальдегида и 10 мл тетрагидрофурана, а затем добавляют 0,319 г (2,24 ммоль) гидразида 2-тиофенкарбоновой кислоты и 0,37 мл триэтиламина (2,69 ммоль). Реакционную смесь кипятят при активном перемешивании в течение 10 часов. Охлаждают, заливают 30 мл воды и перемешивают в течение 3 часов. В ходе перемешивания происходит перерождение осадка. В результате выпадает осадок светло-желтого цвета. Смесь отфильтровывают и промывают небольшими порциями воды очищенной.

Выделенный продукт светло-желтого цвета составляет 0,501 г, 72% от теоретического из расчета на 4,6-дихлор-2-(метилтио)пиримидин-5-карбальдегида. Температура плавления 135-137°С. Хроматографическая однородность целевого продукта подтверждалась хроматографированием раствора его в системе метанол : дихлорметан (1:10) в системе. R_f=0,865 Состав синтезированного соединения подтвержден элементным анализом. Брутто-формула: C₁₁H₇ClN₄OS₂. Найдено %: С - 42,49, Н - 2,25, N - 18,01, О - 5,11. Вычислено %: С - 42,51, Н - 2,27, N - 18,03, O - 5,15. Строение синтезированного вещества было доказано физико-химическими методами идентификации органических соединений: ЯМР 1Н и масс-спектрометрией.

В спектре ЯМР 1Н полученного соединения в ДМСО-d6 присутствуют сигналы протонов метальной группы (δ 2,65 с), сигналы тиофенового кольца: δ 7,33-7,35 м (1Н, Н_аром), δ 8,21 д (1Н, Н_аром), δ 8,33 д (1H, Н_аром),и сигнал протона пиразольного кольца δ 8,74 с. Также строение полученного вещества было доказано с помощью масс-спектрометрии. Рассчитанная молекулярная масса полностью совпала с экспериментально полученной (М+=310,75).

Пример 14. Соединения (Ia-н) обладают противомикробной активностью.

Определение минимально ингибирующих концентраций (МИК) проводили методом серийных разведений в мясопептонном бульоне в отношении тест-культур микроорганизмов Staphylococcus aureus (штамм 209-Р), Escherichia coli (штамм 1257), Candida albicans (штамм АТСС 885-635), рекомендованных Государственной Фармакопеей [Государственная Фармакопея СССР. Вып. 2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье / МЗ СССР - 11 изд. доп. - М.: Медицина, 1989. 400 с.]. Исследуемые соединения ограниченно растворяются в воде, поэтому в качестве растворителя использовали 20% раствор ДМСО, не подавляющий роста ни одной из использованных тест-культур в условиях эксперимента. Минимальная ингибирующая концентрация соединения Iа на Е. coli и С. albicans составляет 32 и 64 мкг/мл соответственно, а на St. aureus составляет 16 мкг/мл, соединения Iб на Е. coli и С.albicans составляет 62,5 и 16 мкг/мл соответственно, а на St. aureus составляет 32 мкг/мл, соединения Iв на Е. coli и С.albicans составляет 16 и 32 мкг/мл соответственно, а на St. aureus составляет 62,5 мкг/мл, соединения Iг на Е. coli и С.albicans составляет 62,5 и 16 мкг/мл соответственно, а на St. aureus составляет 32 мкг/мл, соединения Iд на Е. coli и С.albicans составляет 62,5 и 125 мкг/мл соответственно, а на St. aureus составляет 32 мкг/мл, соединения Iе на Е. coli и С.albicans составляет 16 и 16 мкг/мл соответственно, а на St. aureus составляет 16 мкг/мл, соединения Iж на Е. coli и С.albicans составляет 125 и 62,5 мкг/мл соответственно, а на St. aureus составляет 32 мкг/мл, соединения Iз на Е. coli и С.albicans составляет 32 и 16 мкг/мл соответственно, а на St. aureus составляет 32 мкг/мл, соединения Iи на Е. coli и С.albicans составляет 125 и 62,5 мкг/мл соответственно, а на St. aureus составляет 62,5 мкг/мл, соединения Iк на Е. coli и С.albicans составляет 16 и 12 мкг/мл соответственно, а на St. aureus составляет 16 мкг/мл, соединения Iл на Е. coli и С.albicans составляет 32 и 32 мкг/мл соответственно, а на St. aureus составляет 16 мкг/мл, соединения Iм на Е. coli и С.albicans составляет 62,5 и 32 мкг/мл соответственно, а на St. aureus составляет 32 мкг/мл, соединения Iн на Е. coli и С.albicans составляет 62,5 и 125 мкг/мл соответственно, а на St. aureus составляет 62,5 мкг/мл, что находится на уровне широко используемого на практике антибиотика (офлоксацин - 16 мкг/мл).

Полученные новые соединения - 1-бензоилзамещенные-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидины (Iа-н) могут быть использованы для синтеза новых гетероциклических соединений и в медицине в качестве потенциального антимикробного средства; разработан простой способ их синтеза.

Изобретение относится к области органической и медицинской химии, а именно: к новым производным 1-бензоилзамещенные-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидина общей формулы I, где R=H, R₁=фенил (Iа) - 1-бензоил-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d] пиримидин; R=H, R₁=2-бромфенил (Iб) - 1-(2-бромбензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин; R=H, R₁=2-метилфенил (Iв) - 1-(2-метилбензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин; R=H, R₁=2-метоксифенил (Iг) - 1-(2-метоксибензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин; R=H, R₁=3,4-диметоксифенил (Iд) - 1-(3,4-диметоксибензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин; R=H, R₁=3-бpoмфeнил (Ie) - 1-(3-бромбензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин; R=H, R₁=3-мeтилфeнил (Iж) - 1-(3-метилбензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин; R=H, R₁=3-мeтoкcифeнил (Iз) - 1-(3-метоксибензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин; R=H, R₁=4-бpoмфeнил (Iи) - 1-(4-бромбензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин; R=H, R₁=4-метилфенил (Iк) - 1-(4-метилбензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4 d]пиримидин; R=H, R₁=4-мeтoкcифeнил (Iл) - 1-(4-метоксибензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин; R=H, R₁=2-фypил (Iм) - 6-(метилтио)-1-(2-фуроил)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин; R=H, R₁=2-тиенил (Iн) - 6-(метилтио)-1-(2-тиенилкарбонил)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин. Также изобретение относится к способу получения соединения формулы (I). Технический результат: получены новые гетероциклические соединения, обладающие противомикробной активностью. 2 н.п. ф-лы, 14 пр.

1. 1-Бензоилзамещенные-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидины общей формулы I

R=H, R₁=фенил (Iа) - 1-бензоил-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d] пиримидин;

R=H, R₁=2-бромфенил (Iб) - 1-(2-бромбензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин;

R=H, R₁=2-метилфенил (Iв) - 1-(2-метилбензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин;

R=H, R₁=2-метоксифенил (Iг) - 1-(2-метоксибензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин;

R=H, R₁=3,4-диметоксифенил (Iд) - 1-(3,4-диметоксибензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин;

R=H, R₁=3-бpoмфeнил (Ie) - 1-(3-бромбензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин;

R=H, R₁=3-мeтилфeнил (Iж) - 1-(3-метилбензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин;

R=H, R₁=3-мeтoкcифeнил (Iз) - 1-(3-метоксибензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин;

R=H, R₁=4-бpoмфeнил (Iи) - 1-(4-бромбензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин;

R=H, R₁=4-метилфенил (Iк) - 1-(4-метилбензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4 d]пиримидин;

R=H, R₁=4-мeтoкcифeнил (Iл) - 1-(4-метоксибензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин;

R=H, R₁=2-фypил (Iм) - 6-(метилтио)-1-(2-фуроил)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин;

R=H, R₁=2-тиенил (Iн) - 6-(метилтио)-1-(2-тиенилкарбонил)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин.

2. Способ получения 1-бензоилзамещенных-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидинов общей формулы I

R=H, R₁=фeнил (Ia) - 1-бензоил-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин;

R=H, R₁=2-бpoмфeнил (Iб) - 1-(2-бромбензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин;

R=H, R₁=2-мeтилфeнил (Iв) - 1-(2-метилбензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло [3,4-d]пиримидин;

R=H, R₁=2-метоксифенил (Iг) - 1-(2-метоксибензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин;

R=H, R₁=3,4-димeтoкcифeнил (Iд) - 1-(3,4-диметоксибензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин;

R=H, R₁=3-бpoмфeнил (Ie) - 1-(3-бромбензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин;

R=H, R₁=3-метилфенил (Iж) - 1-(3-метилбензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин;

R=H, R₁=3-мeтoкcифeнил (Iз) - 1-(3-метоксибензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин;

R=H, R₁=4-бромфенил (Iи) - 1-(4-бромбензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин;

R=H, R₁=4-мeтилфeнил (Iк) - 1-(4-метилбензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин;

R=H, R₁=4-мeтoкcифeнил (Iл) - 1-(4-метоксибензоил)-6-(метилтио)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин;

R=H, R₁=2-фypил (Iм) - 6-(метилтио)-1-(2-фуроил)-4-хлор-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин;

R=H, R₁=2-тиeнил (Iн) - 6-(метилтио)-1-(2-тиенилкарбонил)-4-хлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин, - путем взаимодействия 4,6-дихлор-2-(метилтио)пиримидина-5-карбальдегида, растворенного в тетрагидрофуране с добавлением расчетного количества соответствующего R₁-замещенного бензгидразида при их мольном соотношении 1:1 и избытка триэтиламина, смесь кипятят 5-10 часов, охлаждают, полученный осадок заливают водой и перемешивают в течение 3 часов, целевой продукт выделяют в виде перерожденного осадка.