СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ПРЕЖДЕВРЕМЕННЫХ РОДОВ У ЖЕНЩИН С УГРОЗОЙ ПРЕРЫВАНИЯ БЕРЕМЕННОСТИ Российский патент 2019 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования преждевременных родов у пациенток с угрозой прерывания беременности.

Преждевременные роды являются одной из важнейших проблем медицины и основной причиной перинатальной заболеваемости и длительной инвалидизации. Частота преждевременных родов во многих странах достигает 15% и не имеет тенденции к снижению. Недоношенная беременность лидирует среди причин смертности новорожденных в мире, составляя около 35%. Риск нарушения нейропсихического развития, респираторных и желудочно-кишечных осложнений значительно повышен у детей, родившихся раньше срока. Преждевременные роды также сопряжены с высокими экономическими затратами на реабилитацию данного контингента новорожденных (Савельева Г.М., Шалина Р.И., Панина О.Б., Астраханцева М.М., Спиридонов Д.С. Проблема преждевременных родов в современном акушерстве // Российский медицинский журнал. - 2014. - №5. - с. 4-9).

Основываясь на различных фактических данных, преждевременные роды являются результатом как отягощенного акушерского анамнеза, инфекции, так и ранней активации медиаторов воспаления, которые, в свою очередь, предшествуют активации и сокращению миометрия.

Вышеизложенные данные о частоте преждевременных родов о тяжести сопутствующих осложнений определяют необходимость разработки прогностических критериев, что позволит снизить процент данного осложнения беременности за счет своевременного формирования групп риска и комплекса лечебно-профилактических мероприятий.

Известен способ прогнозирования исхода беременности при угрожающих преждевременных родах путем определения в периферической крови популяций CD3+ и CD16+ иммунокомпетентных клеток (патент РФ №2132069, 1999).

К недостаткам метода можно отнести: наличие дорогостоящего оборудования, что затрудняет широкое использование данного способа, время проведения методики 4 часа.

Известен способ прогнозирования преждевременных родов с помощью определения в периферической крови беременных женщин после 20 недель гестации относительного содержания Т-лимфоцитов, несущих на своей поверхности структуры, реагирующие с альфа₂-микроглобулином фертильности (Т-АМГФ-РОК). При уровне данных показателей менее 20% прогнозируют угрожающие преждевременные роды с точностью 94% (патент РФ №2103693, 1998 г. ).

Недостатком данного метода является его трудоемкость.

Известен способ прогнозирования угрожающих преждевременных родов у женщин с угрозой невынашивания ранних сроков, заключающийся в определении в периферической крови женщин с угрозой невынашивания в 6-12 недель гестации соотношения показателей относительного содержания CD25+ к IL-2+ лимфоцитам. При его значении, равном или более 1,0, прогнозируют развитие угрожающих преждевременных родов (патент РФ №2344424, 2009 г.).

Недостатком данного способа является его высокая стоимость, необходимость закупки лечебным учреждением специфических реактивов для выполнения данного анализа.

Известен способ прогнозирования исхода беременности при угрозе невынашивания поздних сроков (патент РФ №2475752, 2013 г.), путем забора периферической крови у исследуемой пациентки, определяют относительное содержание СД62(+) нейтрофилов и при его значении, равном или менее 65%), прогнозируют преждевременные роды в сроки 22-33 недели.

Недостатки способа: не позволяет прогнозировать исход беременности при неосложненном течении, ограничен гестационным сроком применения метода (только в 22-33 недели).

Известен способ прогнозирования преждевременных родов при урогенитальной инфекции, основанный на увеличении экспрессии TLR2, с большой степенью вероятности, приводящей к преждевременным родам за счет гиперактивации гуморальных факторов врожденного иммунитета (провоспалительных цитокинов) (патент РФ №2334233, 2006 г.).

Недостатком данного способа является его специфичность относительно пациенток, имеющих урогенитальную инфекцию, не подходящая остальной группе женщин с угрозой преждевременных родов.

Известен способ прогнозирования исходов беременности (Патент №2268466, 2006 г). Суть данного способа состоит в том, что методом двумерного ультразвукового сканирования определяют сторону локализации плаценты, затем производят забор крови у пациентки и подсчитывают процентное содержание лимфоцитов. При наличии левостороннего расположения плаценты и содержания лимфоцитов в формуле крови 20% и менее прогнозируют осложненное течение беременности фетоплацентарной недостаточностью, хронической гипоксией плода и угрожающими преждевременными родами.

Недостатками способа являются его трудоемкость за счет проведения аппаратного исследования, ограничение контингента пациенток для возможности раннего прогнозирования (УЗИ проводят не ранее 11-14 недель), недостаточная прогностическая точность, т.к. показатель формулы крови является непостоянным, реагирующим на различные факторы, не связанные с развитием данной акушерской патологии.

Наиболее близким к заявляемому способу является «Способ прогнозирования исхода беременности при угрожающих преждевременных родах путем определения в сыворотке периферической крови количественного показателя нитрат-ионов (патент РФ №2272574, 2006 г.). По данному способу у беременных с 28 недель гестации при угрожающих преждевременных родах в сыворотке крови до и после проведения курса сохраняющей терапии определяют количественный показатель нитрат-ионов и при его увеличении на 10% или более, относительно первоначального значения, прогнозируют исход беременности в виде преждевременных родов.

Данный способ был выбран нами в качестве прототипа, однако он имеет ряд существенных недостатков:

-ограничение применения метода гестационным сроком (III триместр беременности);

- неоднократное исследование периферической крови беременной;

- способ не позволяет до начала сохраняющей терапии прогнозировать исход беременности при преждевременных родах;

- отсутствует унифицированная методика определения количественного показателя нитрит-ионов.

Указанные недостатки устраняются в заявленном способе.

Задача изобретения - усовершенствование способа прогнозирования преждевременных родов для определения оптимальной тактики ведения беременных группы высокого риска.

Сущность изобретения состоит в том, что у беременных женщин с угрозой прерывания беременности в сроке 18-22 нед. проводят определение иммуноферментным методом в сыворотке крови уровня интерлейкина 33 (ИЛ-33). При значении уровня ИЛ-33 в сыворотке крови выше 0,98 пг/мл прогнозируют высокий риск преждевременных родов.

Техническим результатом предлагаемого способа является повышение точности прогнозирования преждевременных родов с возможностью выбора адекватного профилактического лечения.

Технический результат достигается за счет определения в сыворотке крови уровня ИЛ -33, тестируемого методом иммуноферментного анализа. Изобретение обеспечивает повышение точности прогнозирования за счет использования в качестве количественного показателя уровня ИЛ-33, определяющего каскад биохимических и иммунологических реакций, опосредованных повышенной выработкой цитокинов и соответственно простагландинов, что обуславливает гипертонус миометрия.

Успешная беременность зависит от гомеостатического баланса в сложной цитокиновой сети во время плацентарного развития. Иммуномодулирующие факторы являются основными регуляторами функции трофобласта, кроме того, нарушение уровня цитокинов связано с тяжелыми осложнениями беременности. Провоспалительные цитокины играют важную роль в иммуномодуляции, и дисбаланс их продукции может привести к преждевременным родам (Дятлова Л.И., Михайлов А.В., Чеснокова Н.П., Понукалина Е.В., Глухова Т.Н. О нарушении баланса цитокинов в патогенезе преждевременного отхождения околоплодных вод, их диагностическое и прогностическое значение // Фундаментальные исследования. - 2013. - №5-2 - С. 271-275; URL: http://www.fundamental-research.ru/ru/article/view?id=31601 (дата обращения: 27.03.2019).

Интерлейкин-33 (ИЛ -33) является новым членом семейства цитокинов IL-1, группы ключевых регуляторов воспаления. Кроме своего влияния на различные популяции лейкоцитов ИЛ-33 также повышает активацию, пролиферацию эндотелиальных клеток. Экспрессия ИЛ-33 в децидуализирующих стромальных клетках необходима на этапе провоспалительной имплантации, однако его длительная экспрессия может привести к потере беременности. ИЛ-33 оказывает провоспалительное действие на тучные клетки, базофилы, эозинофилы, моноциты, макрофаги, NK-клетки и активированные нейтрофилы, вызывая активацию киназ NFkB и MAP и продукцию различных цитокинов и хемокинов. Преждевременная активация этого провоспалительного пути может привести к нарушению толерантности беременности и преждевременным родам (Topping V., Than N. G., Tarca A. L., Z.Xu, Kim S.Y. Interleukin-33 in the human placenta // J Matern Fetal Neonatal Med. - 2013. - 26 (4). - P. 327-338).

Нами была поставлена задача поиска прогностических маркеров преждевременных родов. В качестве материала для исследования была использована сыворотка крови в связи с легкостью получения материала, отсутствия необходимости введения инструментов во влагалище, нежелательного при угрозе прерывания беременности.

Было обследовано 62 беременных женщин с угрозой прерывания беременности, поступившие в патологию беременности ФГБОУ ВО РостГМУ в сроке 18-22 недели (основная группа). Из них 32 женщины родили преждевременно (в сроке 34-37 недели беременности), остальные 30 пациенток доносили беременность до срока. Контрольную группу составили 24 женщины с физиологическим течением беременности. При изучении уровня ИЛ -33 в сыворотке крови беременных в сроке 18-22 недели были получены следующие результаты. Уровень ИЛ - 33 у пациенток, родивших преждевременно, составил 1,0 пг/мл и выше, у пациенток, доносивших в срок - 0,98 пг/мл, у пациенток контрольной группы - 0,97 пг/мл и ниже. Полученные данные позволяют использовать полученные цифровые значения уровня ИЛ-33 для прогнозирования преждевременных родов.

Подробное описание способа и примеры его клинического выполнения

Способ осуществляют следующим образом. У беременных с угрозой прерывания беременности в сроках 18-22 недели производят забор 5 мл крови из локтевой вены. В сыворотке крови определяют уровень ИЛ-33 методом иммуноферментного анализа с использованием диагностических наборов фирмы Bender MedSystems согласно рекомендациям производителя.

Работоспособность заявленного способа подтверждается следующими клиническими примерами.

Пример 1.

Пациента П-ва, 32 года. На учете в ж/консультации состояла с 10 недель беременности. Соматические заболевания: хр. холецистит (ремиссия). Беременность протекала с угрозой прерывания. В сроке 18 нед. беременности поступила в отделение патологии беременных «НИИАП» РостГМУ с диагнозом: угроза прерывания беременности. У данной пациентки уровень ИЛ-33 в сыворотке крови составил 0,98 пг/мл, что согласно нашей методике свидетельствует о высокой вероятности развития преждевременных родов.

С учетом полученных данных беременной была назначена адекватная терапия, направленная на пролонгирование беременности. После выписки из стационара она наблюдалась в женской консультации по месту жительства. Роды произошли в сроке 37 нед. беременности. Продолжительность родов 5 часов, безводный промежуток 2 часа. Родился живой доношенный мальчик 3021 г, 51 см, с оценкой по шкале Апгар на 1 минуте 8 баллов, на 5 минуте 9 баллов. Ребенок выписан вместе с матерью на 4 сутки после родов.

Таким образом, данный клинический пример показывает точность прогнозирования заявляемого метода.

Пример 2.

Беременная К-ко, 29 лет. Пациентке по показаниям со стороны генетиков проводилась инвазивная пренатальная диагностика со взятием сыворотки крови в 18- нед. беременности для определения наиболее частых анэоплоидий. Уровень ИЛ -33 в сыворотке крови составил 0,97пг/мл, что согласно нашей методике свидетельствует о низкой вероятности развития преждевременных родов. Диагноз хромосомной аномалии не был подтвержден, признаков угрозы прерывания беременности у пациентки не обнаружено.

Поступила в родильное отделение НИИАП РостГМУ в сроке 38-39 недель беременности. Роды 1, самопроизвольные. Продолжительность родов 6 часов 20 минут, Родилась живая доношенная девочка 3820 г, 53 см, с оценкой по шкале Апгар 9 баллов. Ребенок выписан вместе с матерью на 4 сутки.

Пример 3.

Беременная М., 30 лет. На учете в ж/консультации состояла с 8 недель беременности. Соматические заболевания: хр. тонзиллит (ремиссия). Поступила в стационар в сроке 22 недели беременности с диагнозом: угроза преждевременных родов. У данной пациентки уровень ИЛ -33 в сыворотке крови составил 1,3 пг/мл, что согласно нашей методике свидетельствует о высокой вероятности развития преждевременных родов. Несмотря на проводимую терапию в сроке 33-34 недели развилась родовая деятельность. Роды проведены под эпидуральной анестезией. Продолжительность родов 5 часов 25 минут, безводный промежуток 3,5 часа. Родилась живая недоношенная девочка 1870 г, 44 см, с оценкой по шкале Апгар на 1 минуте 7 баллов, на 5 минуте 8 баллов. Ребенок переведен в отделение патологии новорожденных с диагнозом гипоксически-ишемическое поражение ЦНС, синдром дыхательных расстройств.

Предложенный способ удобен в применении, высоко информативен и чувствителен (96%). Заявленное изобретение позволит осуществлять прогнозирование преждевременных родов у пациенток с угрозой прерывания во II триместре и отбор беременных в группу риска для назначения профилактической терапии с помощью конкретного критерия.

Апробация заявляемого изобретения проведена на достаточном по объему клиническом материале, что подтвердило работоспособность метода и возможность его применения в клинической практике.

Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования преждевременных родов при угрозе прерывания беременности. Для этого у женщин с угрозой прерывания беременности в сроке 18-22 нед проводят определение иммуноферментным методом в сыворотке крови уровня интерлейкина 33 (ИЛ-33). При значении уровня ИЛ-33 в сыворотке крови 0,98 пг/мл и выше прогнозируют высокий риск развития преждевременных родов. Использование данного способа позволяет прогнозировать преждевременные роды при угрозе прерывания беременности и отобрать беременных в группу риска с возможностью выбора профилактической терапии. 3 пр.

Способ прогнозирования преждевременных родов у женщин с угрозой прерывания беременности, включающий исследование крови, отличающийся тем, что в сыворотке крови беременной в 18-22 нед определяют иммуноферментным методом уровень ИЛ-33 и при его значении выше 0,98 пг/мл прогнозируют исход беременности в виде преждевременных родов.