НОВЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ АЗЕТИДИНА, ПОЛЕЗНЫЕ В КАЧЕСТВЕ МОДУЛЯТОРОВ КОРТИКАЛЬНОЙ КАТЕХОЛАМИНЕРГИЧЕСКОЙ НЕЙРОТРАНСМИССИИ Российский патент 2020 года по МПК C07D205/04 A61K31/397 A61P25/00 A61P25/14 A61P25/18 A61P25/22 A61P25/28 

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ

Настоящее раскрытие относится к новым производным 3-бензил-азетидина, полезным для модуляции уровней моноаминов, таких как допамин, норэпинефрин и серотонин, в областях коры головного мозга млекопитающих, и, более конкретно, для лечения заболеваний центральной нервной системы. Настоящее раскрытие также относится к применению этих соединений в способе для терапии и к фармацевтическим композициям, содержащим соединения по настоящему раскрытию.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Кора головного мозга содержит несколько главных областей, которые вовлечены в высшую нервную деятельность, такую как мысли, чувства, память и планирование. Моноамины, такие как допамин, норэпинефрин и серотонин, являются важными в качестве нейромедиаторов для функционирования коры головного мозга млекопитающих. Восходящие серотонинэргические и норадренергические проводящие пути возбуждают фактически все области мозга, включая кору головного мозга. Допаминергические нейроны центральной нервной системы имеют более явные проекции, включая мезокортикальный проводящий путь, возбуждающий в первую очередь фронтальную кору, в дополнение ко многим специфичным подкорковым проводящим путям. Первичные или вторичные дисфункции в активности моноаминных проводящих путей, возбуждающих кору головного мозга, приводят к нарушениям активности кортикальных рецепторов допамина, норэпинефрина и серотонина и, впоследствии, к проявлениям психиатрических и неврологических симптомов.

Моноамины коры модулируют несколько аспектов кортикальных функций, управляющих аффектом, беспокойством, мотивацией, познанием, вниманием, возбуждением и бодрствованием. Таким образом, катехоламины допамин и норэпинефрин оказывают сильное влияние на фронтальные области коры головного мозга, функциональность которых является необходимой для так называемых управляющих когнитивных функций, связанных, например, с вниманием, планированием действий и контролированием импульсов. Норэпинефрин является главной частью в схеме, регулирующей беспокойство и страх, и поэтому считается, что его регуляция нарушается при тревожных расстройствах, таких как паническое расстройство, общее тревожное расстройство (GAD) и специфические фобии. В отношении настроения и аффективных функций, полезность соединений, способствующих, в частности, нейротрансмиссии норэпинефрина и серотонина, в лечении депрессии и беспокойства внесла большой вклад в общепринятую концепцию того, что оба этих нейромедиатора вовлечены в регуляцию аффективных функций.

В работе Хамона и соавт. (Prog Neuro-Psychopharm & Bio Psych, 2013, 45, 54-63) раскрывается, что соединения, специфично влияющие на передачу моноаминов, более конкретно, норэпинефрин, допамин и серотонин, успешно применяются для облегчения аффективных, когнитивных или относящихся к вниманию симптомов у пациентов, страдающих, например, депрессией, беспокойством и синдромом гиперактивности с дефицитом внимания (ADHD). Кроме того, Арнстен (Biol Psych, 201 1, 69(12); 89-99) раскрывает, что все имеющиеся в настоящий момент фармакологические терапии ADHD способствуют передаче катехоламинов. Кроме того, Ванг (Front Cell Neurosci, 2015, 9; 1-23), раскрывает, что модуляция моноаминергической передачи была предложена в качестве перспективного принципа для лечения нарушений аутического спектра.

Трилло и соавт. (Neurosci & Biobehav Rev, 2013, 37; 1363-79) раскрывают, что в болезни Альцгеймера прогрессирующая дегенерация восходящих моноаминных систем была связана как с когнитивными, так и с некогнитивными симптомами, и фармакологические вмешательства, приводящие к улучшению передачи моноаминов, были предложены в качестве стратегии как для симптоматического, так и для изменяющего течение заболевания лечения болезни Альцгеймера.

Кроме того, моноаминные системы в коре, как известно, прямо или косвенно вовлечены в основные симптомы шизофрении. Было предположено, что это нарушение возникает, когда различные патологические этиологии сходятся на кортикальных синаптических процессах, что приводит к нарушению регуляции микросхем коры, которое клинически проявляется как симптомы шизофрении (Харрисон и соавт., Mol Psych, 2005, 10; 40-68). Эти микросхемы коры регулируются несколькими нейромедиаторами, включая глутамат, GABA и допамин. Было также предложено, что фармакологическое улучшение кортикальной передачи допамина могло бы восстановить функционирование этих микросхем, обеспечивая полезную стратегию улучшенного лечения шизофрении (Abi-Dargham и соавт., Eur Psych, 2005, 20; 15-27).

WO 2004/113297 раскрывает аза-кольцевые производные и их применение в качестве ингибиторов обратного захвата моноаминных нейромедиаторов. EP 2754653 раскрывает производные азетидина и их применение в качестве ингибиторов обратного захвата моноаминных нейромедиаторов.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Цель настоящего раскрытия состоит в предоставлении новых терапевтически активных соединений, являющихся особенно полезными в лечении нарушений в центральной нервной системе. Еще одна цель состоит в предоставлении соединений для модуляции нейротрансмиссии норэпинефрина в мозге млекопитающего, включая мозг человека. Еще одна цель состоит в предоставлении новых соединений с профилем усилителей кортикальной активности. Еще одна цель состоит в предоставлении соединений с терапевтическими эффектами после перорального приема. Еще одна цель состоит в предоставлении соединений с более оптимальными фармакодинамическими и фармакокинетическими свойствами, такими как, например, период полураспада в плазме, биологическая доступность, растворимость и эффективность in vitro и in vivo. Еще одна цель состоит в предоставлении соединений, превосходящих известные в настоящее время соединения в лечении нескольких нарушений, связанных с дисфункциями центральной нервной системы, с точки зрения эффективности и/или побочных эффектов.

Настоящее раскрытие относится к соединениям, в соответствии с раскрытым в настоящем описании, демонстрирующим определенное воздействие на моноамины в коре головного мозга, и применению этих соединений в лечении определенных заболеваний центральной нервной системы. Неожиданно, было обнаружено, что соединения по настоящему раскрытию обеспечивают селективное по областям повышение уровней катехоламина во фронтальной коре, но также и повышение уровней серотонина в отделах головного мозга, включая фронтальную кору. Вследствие специфичных модулирующих воздействий моноаминов на кортикальные функции, связанные с познанием, вниманием и аффектом, соединения в соответствии с раскрытым в настоящем описании могут применяться в лечении нарушений, характеризующихся нарушением таких функций. Таким образом, соединения в соответствии с раскрытым в настоящем описании могут применяться в лечении когнитивных, аффективных и тревожных расстройств. Соединения могут также применяться для лечения симптомов шизофрении, которая характеризуется дисфункциями коры головного мозга, проявляющимися в когнитивных нарушениях и психозе.

Настоящее раскрытие предоставляет соединения с формулой I,

включая их зеркальные изомеры или смесь их зеркальных изомеров,

или их фармацевтически приемлемые соли,

Формула I,

где

R¹ представляет собой F,

R² представляет собой F,

R³ представляет собой F,

R⁴ представляет собой F или CH₃,

R⁵ представляет собой H или C₁-C₄ алкил, замещенный 0, 1, 2 или 3 F, и

n имеет значение 0, 1, 2 или 3.

Настоящее раскрытие также предоставляет фармацевтическую композицию, содержащую терапевтически эффективное количество соединения с формулой I по настоящему раскрытию, включая любой из его зеркальных изомеров или любую смесь его зеркальных изомеров, или его фармацевтически приемлемую соль, вместе по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым носителем, эксципиентом или растворителем.

Кроме того, также предоставляется соединение с формулой I по настоящему раскрытию, включая любой из его зеркальных изомеров или любую смесь его зеркальных изомеров, или его фармацевтически приемлемую соль, для применения в качестве медикамента. Медикамент может представлять собой медикамент для лечения и/или профилактики заболевания, нарушения и/или состояния, при условии что заболевание, нарушение или состояние реагируют на модуляцию моноаминов в коре головного мозга.

Кроме того, также предоставляется соединение с формулой I в соответствии с описанным в настоящем раскрытии, включая любой из его зеркальных изомеров или любую смесь его зеркальных изомеров, или его фармацевтически приемлемую соль, для применения в лечении и/или профилактике заболевания, нарушения и/или состояния, при условии что заболевание, нарушение или состояние реагируют на модуляцию моноаминов в коре головного мозга.

Кроме того, также предоставляется соединение с формулой I в соответствии с описанным в настоящем раскрытии, включая любой из его зеркальных изомеров или любую смесь его зеркальных изомеров, или его фармацевтически приемлемую соль, для производства медикамента для применения в лечении и/или профилактике заболевания, нарушения и/или состояния, при условии что заболевание, нарушение или состояние реагируют на модуляцию моноаминов в коре головного мозга.

Также предоставляется способ для лечения и/или профилактики или облегчения заболевания, нарушения и/или состояния человека, при условии что заболевание, нарушение или состояние реагируют на модуляцию моноаминов в коре головного мозга, и этот способ включает этап введения нуждающемуся в этом человеку терапевтически эффективного количества соединения с формулой I по настоящему раскрытию, включая любой из его зеркальных изомеров или любую смесь его зеркальных изомеров, или его фармацевтически приемлемую соль, или терапевтически активные метаболиты соединений в соответствии с раскрытым в настоящем описании.

Другие аспекты настоящего раскрытия будут очевидны для специалиста в данной области техники из приведенных ниже подробного описания и примеров.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ

Следующие сокращения будут использоваться в настоящем раскрытии:

NA: норэпинефрин, NM: норадреналин; DA: допамин, DOPAC: 3,4-дигидрокифенилуксусная кислота; 3-MT: 3-метокситирамин; 5-HT: серотонин (5-гидрокситриптамин), TEA: триэтиламин.

Настоящее раскрытие предоставляет соединения с формулой I,

включая их зеркальные изомеры или смесь их зеркальных изомеров, или их фармацевтически приемлемые соли:

Формула I,

где

R¹ представляет собой F,

R² представляет собой F,

R³ представляет собой F,

R⁴ представляет собой F или CH₃,

R⁵ представляет собой H или C₁-C₄ алкил, замещенный 0, 1, 2 или 3 F, и

n имеет значение 0, 1, 2 или 3.

Так как каждый из R¹, R² и R³ представляет собой F, то соединения с формулой I также могут быть изображены как:

Формула I.

В формуле I n может иметь значение 0 или 1.

Соединения с формулой I, для которых n равно 0, представляют собой соединения, замещаемые двумя F в фенильном кольце. Таким образом, предоставляются соединения с формулой II, включая их зеркальные изомеры или смесь их зеркальных изомеров, или их фармацевтически приемлемые соли:

Формула II,

где R¹, R², R⁴ и R⁵ могут иметь значения, указанные для соединений с формулой I. Поскольку R¹ и R² представляют собой F, соединения с формулой II могут также быть изображены как:

Формула II

Соединения с формулой могут быть выбраны группы, состоящей из соединений с формулой IIa, формулой IIb, формулой IIc, формулой IId, формулой IIe и формулой IIf,

включая их зеркальные изомеры или смесь их зеркальных изомеров, и/или их фармацевтически приемлемые соли:

Формула IIa Формула IIb

Формула IIc Формула IId

Формула IIe Формула IIf

где R¹, R², R⁴ и R⁵ могут иметь значения, указанные для соединений с формулой I.

Так как R¹ и R² представляют собой F, то соединения с формулой IIa, формулой IIb, формулой IIc, формулой IId, формулой IIe и формулой IIf могут также быть изображены как:

формула IIa формула IIb

формула IIc формула IId

формула IIe формула IIf

В одном из примеров R⁴ может представлять собой F, и R⁵ может представлять собой H, таким образом, предоставляя соединения с формулой II'

Формула II'

где и R¹, и R² представляют собой F.

Поскольку и R¹, и R² представляют собой F, то соединения с формулой ΙI' могут также быть изображены как:

Формула II'.

Соединения с формулой II' могут быть выбраны из группы, состоящей из соединений с формулой II'a, формулой II'b, формулой II'c, формулой II'd, формулой II'e и формулой II'f, включая

их зеркальные изомеры или смесь их зеркальных изомеров, и/или их фармацевтически приемлемые соли:

Соединения с формулой I, для которых n равно 1, представляют собой соединения, замещаемые тремя F в фенильном кольце. Таким образом, предоставляются соединения с формулой III, включая их зеркальные изомеры или смесь их зеркальных изомеров, или их фармацевтически приемлемые соли:

Формула III

где R¹, R², R³, R⁴ и R⁵ могут иметь значения, указанные для соединений с формулой I. Поскольку каждый из R¹, R² и R³ представляют собой F, соединения с формулой III могут также быть изображены как:

Формула III

Соединения с формулой III могут быть выбраны из группы, состоящей из соединений с формулой IIIa, формулой IIIb, формулой IIIc, формулой IIId и формулой IIIe, включая их зеркальные изомеры или смесь их зеркальных изомеров, или их фармацевтически приемлемые соли:

Формула IIIa Формула IIIb

Формула IIIc Формула IIId

Формула IIIe

где R¹, R², R³, R⁴ и R⁵ могут иметь значения, указанные для соединений с формулой I.

Поскольку каждый из R¹, R² и R³ представляет собой F, то соединения с формулой IIIa, формулой IIIb, формулой IIIc, формулой IIId и формулой IIIe также могут быть изображены как:

Формула IIIa Формула IIIb

Формула IIIc Формула IIId

Формула IIIe

В соединениях с формулой I n может иметь значение 2 или 3.

Соединения с формулой I, для которых n равно 2, представляют собой соединения, замещаемые четырьмя F в фенильном кольце. Таким образом, предоставляются соединения с формулой IVa, формулой IVb или формулой IVc, включая их зеркальные изомеры или смесь их зеркальных изомеров, или их фармацевтически приемлемые соли:

Формула IVa Формула IVb

Формула IVc

где R⁴ и R⁵ могут иметь значения, указанные для соединений с формулой I.

Соединения с формулой I, для которых n равно 3, представляют собой соединения, замещаемые пятью F в фенильном кольце. Таким образом, предоставляются соединения с формулой V, включая их зеркальные изомеры или их фармацевтически приемлемые соли:

Формула V.

В соответствии с раскрытым в настоящем описании, также предоставляется соединение, в котором R⁴ представляет собой F. Альтернативно или дополнительно, в соответствии с раскрытым в настоящем описании предоставляется соединение, в котором R⁴ представляет собой CH₃. Для каждого из этих значений R⁴, R⁵ может представлять собой H или C₁-C₄ алкил, замещенный 0, 1, 2 или 3 F. В одном из примеров C₁-C₄ алкил, замещенный 0, 1, 2 или 3 F, может быть выбран из группы, состоящей из метила, этила, пропила, изопропила, циклопропила, н-бутила, втор-бутила, изобутила, трет-бутила и циклобутила. В еще одном примере C₁-C₄ алкил, замещенный 0, 1, 2 или 3 F, может быть выбран из группы, состоящей из метила, этила, пропила и н-бутила. R⁵ также может быть выбран из группы, состоящей из водорода, метила, этила, пропила, изопропила, циклопропила, н-бутила, втор-бутила, изобутила, трет-бутила и циклобутила. Кроме того, R⁵ может быть выбран из группы, состоящей из водорода, метила, этила, пропила, и н-бутила.

В соответствии с раскрытым в настоящем описании также предоставляется соединение, включая его зеркальный изомер или смесь зеркальных изомеров, или его фармацевтически приемлемую соль, в котором

из формулы I

выбирают из группы, состоящей из следующего:

3-[(2,3-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ],

3-[(3,5-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ],

3-[(3,4-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ],

3-[(2,5-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ],

3-[(2,6-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ],

3-[(2,4-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ],

3-[ФТОР(2,3,5-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ],

3-[ФТОР(2,4,6-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ],

3-[ФТОР(2,3,4-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ],

3-[ФТОР(3,4,5-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ],

3-[ФТОР(2,3,5,6-ТЕТРАФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ] и

3-[ФТОР(ПЕНТАФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]

и

R⁵ выбирают из группы, состоящей из водорода, метила, этила и пропила.

Следует понимать, что при использовании в настоящем описании предполагается, что все ссылки на соединения с формулой I, такие как соединения с формулой II, формулой III, формулой IVa, формулой IVb, формулой IVc, формулой V и формулой VI включают в себя все возможные фармацевтически приемлемые соли, сокристаллы, сольваты, гидраты, полиморфные модификации, стереоизомеры и таутомерные изомеры указанного.

Кроме того, соединения с формулой I, такие как соединения с с формулой II, формулой III, формулой IVa, формулой IVb, формулой IVc, формулой V и формулой VI могут быть введены в форме пролекарства. Пролекарство представляет собой соединение, которое само по себе может не обладать фармакологической активностью или может обладать невысокой фармакологической активностью, но когда такое соединение вводят в тело или на тело пациента, оно преобразуется в соединение с формулой I, обладающее требуемой активностью. Различные пролекарства известны в технике (например, Раутио и соавт., Nat Rev Drug Discov, 2008, 7(3); 255-70).

Также в пределах объема настоящего раскрытия находятся метаболиты соединений с формулой I, такие как соединения с формулой II, формулой III, формулой IVa, формулой IVb, формулой IVc, формулой V и формулой VI, то есть, соединения, которые образуются in vivo после введения соединений с формулой I.

Настоящее раскрытие предоставляет соединение, выбираемое из следующего:

(-)-3-[(2,3-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН,

(+)-3-[(2,3-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН,

(-)-3-[(3,5-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН,

(+)-3-[(3,5-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН,

3-[(3,4-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН,

3-[(2,5-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН,

3-[(2,6-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН,

3-[(2,4-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН,

3-[ФТОР(2,3,5-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН,

3-[ФТОР(2,4,6-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН,

3-[ФТОР(2,3,4-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН,

3-[ФТОР(3,4,5-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН,

3-[(3,5-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН,

3-[(2,3-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН,

3-[(2,3-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]-1-ЭТИЛАЗЕТИДИН,

3-[(2,3-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]-1-ПРОПИЛАЗЕТИДИН,

3-[(3,5-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]-1-МЕТИЛАЗЕТИДИН,

3-[(3,5-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]-1-ЭТИЛАЗЕТИДИН,

3-[(3,5-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]-1-ПРОПИЛАЗЕТИДИН,

3-[ФТОР(2,3,5-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]-1-МЕТИЛАЗЕТИДИН,

1-ЭТИЛ-3-[ФТОР(2,3,5-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН,

3-[ФТОР(2,3,5-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]-1-ПРОПИЛАЗЕТИДИН

1-ЭТИЛ-3-[ФТОР(2,3,4-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН,

3-[ФТОР(2,3,4-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]-1-ПРОПИЛАЗЕТИДИН

1-ЭТИЛ-3-[ФТОР(3,4,5-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН,

3-[ФТОР(3,4,5-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]-1-ПРОПИЛАЗЕТИДИН,

3-[ФТОР(2,3,5,6-ТЕТРАФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН,

3-[ФТОР(ПЕНТАФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН,

3-[ФТОР(2,3,5,6-ТЕТРАФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]-1-МЕТИЛАЗЕТИДИН,

1-ЭТИЛ-3-[ФТОР(2,3,5,6-ТЕТРАФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]-АЗЕТИДИН и

3-[ФТОР(2,3,5,6-ТЕТРАФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]-1-ПРОПИЛАЗЕТИДИН

или фармацевтически приемлемая соль любого из приведенных выше соединений.

Настоящее раскрытие предоставляет соединение, выбираемое из следующего:

(-)-3-[(2,3-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН

(+)-3-[(2,3-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН

(-)-3-[(3,5-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН

(+)-3-[(3,5-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН

3-[(3,4-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН

3-[(2,5-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН

3-[(2,6-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН

3-[(2,4-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН

3-[ФТОР(2,3,5-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН,

3-[ФТОР(2,4,6-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН,

3-[ФТОР(2,3,4-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН,

3-[ФТОР(3,4,5-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН,

3-[(3,5-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН

3-[(2,3-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН

3-[ФТОР(2,3,5,6-ТЕТРАФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН и

3-[ФТОР(ПЕНТАФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН

или фармацевтически приемлемая соль любого из приведенных выше соединений.

В еще одном примере предоставляется соединение, выбираемое из следующего:

3-[(2,3-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]-1-МЕТИЛАЗЕТИДИН,

3-[(2,3-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]-1-ЭТИЛАЗЕТИДИН,

3-[(2,3-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]-1-ПРОПИЛАЗЕТИДИН

3-[(3,5-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]-1-МЕТИЛАЗЕТИДИН,

3-[(3,5-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]-1-ЭТИЛАЗЕТИДИН,

3-[(3,5-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]-1-ПРОПИЛАЗЕТИДИН

3-[ФТОР(2,3,5-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]-1-МЕТИЛАЗЕТИДИН,

1-ЭТИЛ-3-[ФТОР(2,3,5-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН,

3-[ФТОР(2,3,5-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]-1-ПРОПИЛАЗЕТИДИН,

1-ЭТИЛ-3-[ФТОР(2,3,4-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН,

3-[ФТОР(2,3,4-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]-1-ПРОПИЛАЗЕТИДИН,

1-ЭТИЛ-3-[ФТОР(3,4,5-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН,

3-[ФТОР(3,4,5-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]-1-ПРОПИЛАЗЕТИДИН,

3-[ФТОР(2,3,5,6-ТЕТРАФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]-1-МЕТИЛАЗЕТИДИН,

1-ЭТИЛ-3-[ФТОР(2,3,5,6-ТЕТРАФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]-АЗЕТИДИН и

3-[ФТОР(2,3,5,6-ТЕТРАФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]-1-ПРОПИЛАЗЕТИДИН

или фармацевтически приемлемая соль любого из приведенных выше соединений.

Также предоставляется соединение, выбираемое из следующего:

3-[ФТОР(2,3,5-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН,

3-[ФТОР(2,4,6-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН,

3-[ФТОР(2,3,4-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН,

3-[ФТОР(3,4,5-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН,

3-[ФТОР(2,3,5-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]-1-МЕТИЛАЗЕТИДИН,

1-ЭТИЛ-3-[ФТОР(2,3,5-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН,

3-[ФТОР(2,3,5-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]-1-ПРОПИЛАЗЕТИДИН,

1-ЭТИЛ-3-[ФТОР(2,3,4-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН,

3-[ФТОР(2,3,4-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]-1-ПРОПИЛАЗЕТИДИН и

3-[ФТОР(3,4,5-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]-1-ПРОПИЛАЗЕТИДИН

или фармацевтически приемлемая соль любого из приведенных выше соединений.

Примерами конкретных соединений в соответствии с формулой II' являются:

(±)-3-[(2,3-дифторфенил)(фтор)метил]азетидин;

(±)-3-[(3,5-дифторфенил)(фтор)метил]азетидин;

(±)-3-[(3,4-дифторфенил)(фтор)метил]азетидин;

или фармацевтически приемлемые соли любого из приведенных выше соединений.

Кроме того, примерами конкретных соединений в соответствии с формулой II' являются:

(+)-3-[(2,3-дифторфенил)(фтор)метил]азетидин;

(-)-3-[(2,3-дифторфенил)(фтор)метил]азетидин;

(+)-3-[(3,5-дифторфенил)(фтор)метил]азетидин;

(-)-3-[(3,5-дифторфенил)(фтор)метил]азетидин;

(+)-3-[(3,4-дифторфенил)(фтор)метил]азетидин;

(-)-3-[(3,4-дифторфенил)(фтор)метил]азетидин;

или фармацевтически приемлемые соли любого из приведенных выше соединений.

В соответствии с раскрытым в настоящем описании также предоставляется соединение в форме (+)-зеркальный изомер. Кроме того, предоставляется соединение в соответствии с раскрытым в настоящем описании в форме (-)-зеркальный изомер.

Считается, что соединения по настоящему раскрытию обладают удовлетворительным фармакологическим профилем и перспективными биофармацевтическими свойствами, такими как токсикологический профиль, метаболизм и фармакокинетические свойства, растворимость и проницаемость, в частности, для того, чтобы обеспечить удовлетворительную биологическую доступность после их перорального введения.

Соединения по настоящему раскрытию могут обладать выгодными свойствами по сравнению с соединениями предшествующего уровня техники, такими как повышенная активность и/или повышенная селективность. Такие преимущества могут обеспечивать соответствующие полезные свойства при практическом применении. Например, при применении в качестве медикамента, соединения с формулой I могут иметь более низкую ежедневную клиническую дозу, более длительную продолжительность действия и/или улучшенный профиль побочных эффектов по сравнению с соединениями предшествующего уровня техники.

Однозамещенные соединения

Настоящее раскрытие также охватывает соединения, в которых R¹ представляет собой H, то есть, соединения, в которых фенильное кольцо несет один заместитель. Таким образом, предоставляются соединения с формулой VI, включая их зеркальные изомеры или смесь их зеркальных изомеров, или их фармацевтически приемлемые соли:

Формула VI

где

R¹ представляет собой H,

R² представляет собой F

R⁴ представляет собой F или CH₃ и

R⁵ представляет собой H или C₁-C₄ алкил, замещенный 0, 1, 2 или 3 F.

Поскольку R¹ представляет собой H, и R² представляет собой F, соединения с формулой VI могут быть изображены как:

Формула VI.

Например, когда R⁴ представляет собой F, и R⁵ представляет собой H, предоставляются соединения с формулой VI':

Формула VI'.

Соединения с формулой VI' могут также быть изображены как:

Формула VI'.

Соединения с формулой VI могут быть выбраны из группы, состоящей из соединений с формулой VIa, формулой VIb и формулой VIc:

формула VIa формула VIb

формула VIc

где

R⁴ представляет собой F или CH₃, и

R⁵ представляет собой H или C₁-C₄ алкил, замещенный 0, 1, 2 или 3 F.

В примере R⁴ может представлять собой F, и R⁵ может представлять собой H для соединений с формулой VIa, формулой VIb и формулой VIc. В конкретном примере R⁴ может представлять собой F, и R⁵ может представлять собой H для соединений с формулой VIb.

Фармацевтически приемлемые соли

Соединения по настоящему раскрытию могут быть предоставлены в любой форме, подходящей для предполагаемого введения. Подходящие формы включают в себя фармацевтически (то есть, физиологически) приемлемые соли соединения в соответствии с раскрытым в настоящем описании (GS Paulekuhn и соавт., J Med Chem, 2007, 50; 6665-72 и СМ Berge и соавт., J Pharm Sci, 1977, 66; 1-19). При использовании в настоящем описании "фармацевтически приемлемая соль", если такие соли возможны, включает в себя соли, приготовленные из фармацевтически приемлемых нетоксичных кислот, то есть фармацевтически приемлемые соли, полученные посредством добавления кислоты.

Примеры фармацевтически приемлемых солей включают, без ограничения, нетоксичные соли, полученных посредством добавления неорганических и органических кислот, такие как хлоргидрат, бромгидрат, борат, нитрат, перхлорат, фосфат, сульфат, формиат, ацетат, аконат, аскорбат, бензолсульфонат, бензоат, циннамат, цитрат, эмбонат, энантат, фумарат, глутамат, гликолят, лактат, малеат, малонат, соль миндальной кислоты, метансульфонат, нафталин-2-сульфонат, фталат, пропионат, салицилат, сорбат, стеарат, сукцинат, тартрат, толуол-p-сульфонат, и т.п. Также могут быть сформированы полусоли кислот, например, гемисульфат. Такие соли могут быть сформированы посредством процедур, известных и описанных в технике.

Другие кислоты, такие как щавелевая кислота, которую нельзя считать фармацевтически приемлемой, могут быть полезными в приготовлении солей, полезных в качестве промежуточных соединений при получении соединения по настоящему раскрытию и его фармацевтически приемлемой соли, полученной посредством добавления кислоты.

Сокристаллы

В соли протонный перенос может происходить между активным фармацевтическим ингредиентом и противоионом соли. Однако в некоторых случаях протонный перенос отсутствует или происходит только частично, и твердая фаза не является истинной солью. Принимается, что протонная передача фактически представляет собой континуум, и может изменяться с изменением температуры, и поэтому точка, в которой соль лучше описывается как "сокристалл" может являться субъективной. Термин "сокристалл" при использовании в настоящем описании относится к многокомпонентной системе, в которой существует молекула-основа или молекулы-основы (активный фармацевтический ингредиент) и гостевая (или совместно формирующая) молекула или молекулы. Гостевая, или совместно формирующая, молекула определяется как существующая в твердой форме при комнатной температуре, с тем чтобы отличать сокристалл от сольватов. Однако сокристалл может сам формировать сольваты. В сокристалле обычно имеется общая предрасположенность к взаимодействию через неионные силы, такие как образование водородной связи.

Сольваты

Следует также понимать, что определенные соединения по настоящему раскрытию могут существовать в сольватированных формах, включая сольваты свободных соединений или сольваты соли соединения, а также в несольватированных формах. Термин "сольват" используется в настоящем раскрытии для описания молекулярного комплекса, содержащего соединение по настоящему раскрытию и молекулы одного или более фармацевтически приемлемых растворителей, например, этанола. Термин "гидрат" используется, когда указанный растворитель представляет собой воду. Таким образом, сольватированные формы могут включать в себя гидратированные формы, такие как моногидрат, дигидрат, полугидрат, тригидрат, тетрагидрат, и т.п.

Полиморфные модификации

Соединения по настоящему раскрытию могут существовать в континууме твердых состояний в пределах от полностью аморфного до полностью кристаллического. Таким образом, следует понимать, что все полиморфные модификации, такие как смеси различных полиморфных модификации, включены в объем заявляемых соединений.

Изомеры

Специалисту в данной области техники будет понятно, что соединения, раскрытые в настоящее описании, могут существовать в форме различных зеркальных изомеров. Соединения по настоящему раскрытию включают в себя все такие зеркальные изомеры, их рацемические смеси, а также смеси в различных соотношениях отдельных зеркальных изомеров.

Рацемические формы могут быть расщеплены на оптические антиподы посредством известных способов и методик. Одним из способов разделить соединения-зеркальные изомеры (такие как промежуточные зеркальные изомеры) является - в случае, когда соединение представляет собой хиральное основание - применение оптически активной кислоты и высвобождение являющейся зеркальным изомером расщепленной соли посредством обработки основанием. Другой способ для расщепления рацематов на оптические антиподы основан на хроматографии на оптической активной матрице. Рацемические соединения по настоящему раскрытию могут, таким образом, быть расщеплены на их оптические антиподы, например, посредством фракционной кристаллизации, например, D- или L-тартратов, солей миндальной кислоты или солей сульфоната камфоры.

Соединения, раскрытые в настоящем описании, могут также быть расщеплены путем формирования диастереизомерных амидов посредством реакции химических соединений по настоящему раскрытию с оптически активной активированной карбоновой кислотой, например, полученной из (+) или (-) фенилаланина, (+) или (-) фенилглицина, (+) или (-) камфановой кислоты, или путем формирования диастереизомерных карбаминатов посредством реакции соединения по настоящему раскрытию с оптически активным хлорформиатом и т.п.

Помеченные соединения

Соединения по настоящему раскрытию могут использоваться в их помеченной или непомеченной форме. В контексте настоящего раскрытия помеченное соединение имеет один или более атомов, замещенных атомами, имеющими атомную массу или массовое число, отличающееся от атомной массы или массового числа, обычно встречающегося в природе. Мечение позволяет легко проводить количественное обнаружение указанного соединения.

Помеченные соединения по настоящему раскрытию могут являться полезными в качестве диагностических инструментов, радиоактивных индикаторов или средств контроля в различных диагностических способах, и для визуализации рецепторов in vivo.

Помеченные соединения по настоящему раскрытию могут содержать по меньшей мере один радионуклид в качестве метки. Все испускающие позитроны радионуклиды являются кандидатами на применение. В контексте настоящего раскрытия радионуклид может быть выбран из изотопов водорода, углерода, азота, фтора и кислорода, таких как 2H (дейтерий), 3H (тритий), 11C, 13C, 14C, 18O, 17O, 19F и 18F. Известно, что замещение более тяжелыми изотопами, такое как замещение одним или более атомов водорода дейтерием (2H), могло бы в некоторых случаях обеспечить фармакологические преимущества, такие как повышенная метаболическая устойчивость.

Физический метод для обнаружения помеченного соединения по настоящему раскрытию может быть выбран из позитронно-эмиссионной томографии (PET), однофотонной эмиссионной компьютерной томографии (SPECT), магнитно-резонансной спектроскопии (MRS), магнитно-резонансной визуализации (MRI) и аксиальной рентгеновской компьютерной томографии (CAT), или комбинации указанного.

Способы приготовления

Соединения по настоящему раскрытию могут быть приготовлены посредством обычных способов химического синтеза, например, описанных в рабочих примерах. Исходные материалы для процессов, описанных в настоящей заявке, являются известными или могут быть легко приготовлены посредством обычных способов из коммерчески доступных химических веществ.

Также одно из соединений по настоящему раскрытию может быть преобразовано в другое соединение по настоящему раскрытию с применением обычных способов.

Конечные продукты реакций, описанных в настоящем раскрытии, могут быть выделены посредством обычных методик, например, экстракции, кристаллизации, дистилляции, хроматографии и т.д.

Специалистам в данной области техники будет понятно, что в целях получения соединений по настоящему раскрытию альтернативным - и, в некоторых случаях, более удобным способом - индивидуальные этапы процесса, упомянутые выше, могут быть выполнены в другом порядке, и/или индивидуальные реакции могут быть выполнены на другой стадии в общем цикле (то есть, химические превращения могут быть выполнены на промежуточных соединениях, отличных от ассоциированных с конкретной реакцией выше в настоящем описании).

Описание используемых животных моделей

Изменение в обороте допамина в терминальных областях восходящих допаминергических проекций мозга млекопитающего может быть проиллюстрировано путем измерения изменений биохимических индексов в мозге, например, изменения концентраций метаболитов допамина, таких как 3,4-дигидроксифенил-уксусная кислота (DOPAC) в стриатуме и фронтальной коре.

Измерение содержания DOPAC в ткани является общепризнанным в данной области исследований с 1960-ых. Кратко, самцам крыс Спрага-Доули вводят тестируемое соединение за 60 минут до декапитации. Мозг быстро вынимают и разрезают. Стриатум быстро замораживают и впоследствии количественно анализируют в отношении содержания в нем DOPAC посредством HPLC и электрохимического обнаружения. Количество животных, используемых для каждого тестируемого соединения/наполнителя, составляет 5 на группу.

Методика микродиализа (см., например, Коллин и Унгерштедт, Microdialysis: user's guide, Carnegie Medicin, Стокгольм, 1988) является общепризнанной методикой для измерения внеклеточных уровней нейромедиаторов (Ungerstedt, J Int Med, 1991, 230; 365-73). Методика микродиализа применялась для измерения эффекта соединений, раскрытых в настоящем описании, после оттока моноаминных трансмиттеров (NA, DA и 5-HT) в стриатуме и фронтальной коре у находящихся в сознании свободно перемещающихся крыс.

Сесак и соавт. (Anatom Substr Glut-Dopamine Inter. Annals of NY AcadSci, 2003, 1003; 36-52) раскрывают, что допаминергические системы мозга сильно взаимодействуют с центральной нейротрансмиссией глутамата. Для того, чтобы исследовать потенциальное влияние соединений в соответствии с раскрытым в настоящем описании на кортикальную и стриатальную передачу синаптических сигналов, ассоциированную с рецепторами глутамата NMDA-типа, оценивалась индукция мРНК Arc после однократного введения. Комплекс (регулируемый активностью Arc/Arg3.1 связанный с цитоскелетом белок/регулируемый активностью ген 3.1; (Link W и соавт., Proc Natl Acad Sci, USA, 1995, 92; 5734-8 и GL Lyford и соавт., Neuron, 1995, 14; 433-45), немедленно-ранний ген (IEG), индуцируемый синаптической активностью, экспрессия и локализация которого в синаптических рецепторах вызываются специфично активацией рецептора NMDA и сильно связаны с нейронной пластичностью (Стюард и Ворли, Neuron, 2001, 30; 227-40, Кавашима и соавт., PNAS, 2009, 106(1); 316-21 и Брамхам и соавт. Exp Brain Res, 2010, 200; 125-40).

Влияние соединений по настоящему раскрытию на двигательную активность у не получавших лекарственный препарат крыс также было исследовано. Животные были помещены в измерители подвижности непосредственно после введения лекарственного препарата, и двигательная активность записывалась в течение 60 минут (отсчеты/60 мин ± SEM). Результаты представлены как процент от контроля.

Биологическая активность

Соединения в соответствии с раскрытым в настоящем описании оказывают модулирующее воздействие на моноамины в коре головного мозга, и они сами и их фармацевтические композиции являются полезными в лечении многочисленных заболеваний центральной нервной системы, таких как психиатрические нарушения. В частности, соединения в соответствии с раскрытым в настоящем описании и их фармацевтические композиции являются полезными в лечении заболеваний центральной нервной системы, в которых кортикальные моноаминергические системы имеют нарушения по прямым или косвенным причинам. Соединения согласно настоящему раскрытию могут применяться для лечения аффективных расстройств и когнитивных нарушений, таких как нейродегенеративные и связанные с неврологическим развитием нарушения и/или заболевания. Кроме того, соединения, оказывающие модулирующее воздействие на допаминергические системы, могут применяться для улучшения моторных функций у пациентов, страдающих двигательными расстройствами.

Соединения, оказывающие модулирующее воздействие на моноамины в коре головного мозга могут применяться для улучшения моторных и когнитивных функций и в лечении нервных расстройств, связанных со старением, нейродегенеративными нарушениями и/или заболеваниями (например, болезнь Альцгеймера, лобно-височная деменция, возрастные когнитивные нарушения и сосудистая деменция) и нарушениями развития (такими как нарушения аутического спектра, ADHD, церебральный паралич, синдром Жиля де ла Туретта), а также после повреждения головного мозга. Такое повреждение головного мозга может быть вызвано травматическими, воспалительными, инфекционными, относящимися к новообразованию, сосудистыми, гипоксическими или метаболическими причинами, или токсическими реакциями на экзогенные химикаты, где экзогенные химикаты выбирают из группы, состоящей из психоактивных веществ, фармацевтических соединений, соединений из окружающей среды, и фармацевтические композиции согласно настоящему раскрытию могут также применяться при нарушениях поведения, обычно впервые диагностированных в грудном возрасте, детстве или пубертатном периоде, а также при расстройствах контроля над побуждениями.

Расстройства настроения и тревожные расстройства, депрессия и обсессивно-компульсивное расстройство также могут подвергаться лечению соединениями и композициями согласно настоящему раскрытию.

Соединения по настоящему раскрытию могут применяться для лечения расстройств, связанных со злоупотреблением психоактивными веществами, а также расстройств, характеризуемых неправильным употреблением еды. Соединения по настоящему раскрытию также являются полезными для лечения состояния, выбираемого из группы, состоящей из нарушений сна, половых расстройств, расстройств пищевого поведения, ожирения и головных болей и других болей в состояниях, характеризуемых повышенным мышечным тонусом.

Неврологические показания включают применение соединений, раскрытых в настоящем описании, и их фармацевтических композиций для улучшения умственных и моторных функций при болезни Паркинсона, и в связанных синдромах паркинсонизма, при дискинезиях (таких как вызванные L-DOPA дискинезии) и дистониях. Соединения, раскрытые в настоящем описании, могут также применяться для снижения тиков и тремора различных органов. Кроме того, соединения, раскрытые в настоящем описании, могут применяться для облегчения боли в состояниях, характеризуемых повышенным мышечным тонусом.

Соединения, раскрытые в настоящем описании, могут также применяться в лечении болезни Хантингтона и других двигательных расстройств, а также двигательных расстройств, вызванных лекарственными препаратами. Синдром беспокойных ног и связанные нарушения, так же как нарколепсия, могут также подвергаться лечению соединениями согласно настоящему раскрытию.

Соединения, раскрытые в настоящем описании, считают полезными для лечения и/или профилактики всех форм психозов, таких как шизофрения и шизофреноформное расстройство, и биполярные расстройства, а также вызванных лекарственными препаратами психотических нарушений. Также могут подвергаться лечению ятрогенный и неятрогенный психоз и галлюциноз.

Фармацевтические композиции

Также предоставляется фармацевтическая композиция, содержащая терапевтически эффективное количество соединения по настоящему раскрытию, или его фармацевтически приемлемую соль, и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель, эксципиент или растворитель.

При использовании в настоящем описании, термин "терапевтически эффективное количество" означает количество соединения в соответствии с раскрытым в настоящем описании, которое является достаточным для вызывания требуемого терапевтического эффекта у пациента, которому вводят соединение.

Настоящее раскрытие относится к фармацевтической композиции, содержащей соединение по настоящему изобретению, и ее применению в лечении заболеваний центральной нервной системы. Как органические, так и неорганические кислоты могут применяться для формирования нетоксичных фармацевтически приемлемых солей, солей, полученных посредством добавления кислоты, соединений согласно настоящему раскрытию. Соответствующие полученные посредством добавления кислоты соли соединений по настоящему раскрытию включают в себя сформированные с фармацевтически приемлемыми солями, такие как упомянутые выше. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение согласно настоящему раскрытию, может также содержать эксципиенты, используемые в целях способствования производству фармацевтического препарата или введению препарата. Такие эксципиенты известны специалистам в данной области техники, и могут представлять собой, например, фармацевтически приемлемые адъюванты, разбавители, носители и консерванты.

В клинической практике соединения согласно настоящему раскрытию будут обычно вводиться перорально, ректально, через нос или посредством инъекции, в форме фармацевтического препарата, содержащего активный ингредиент в виде свободного основания или фармацевтически приемлемой нетоксичной соли, такой как полученная посредством добавления кислоты соль, например, хлоргидрат, лактат, ацетат или сульфамат, в соединении с фармацевтически приемлемым носителем, эксципиентом или разбавителем. Носитель, эксципиент или разбавитель могут представлять собой твердый, полутвердый или жидкий препарат. Обычно активное вещество будет составлять между 0,1 и 99% от веса препарата, более конкретно, между 0,5 и 20% веса для препаратов, предназначенных для инъекции, и между 0,2 и 50% по весу для препаратов, подходящих для перорального приема.

Для производства фармацевтических препаратов, содержащих соединение согласно настоящему раскрытию в форме единиц дозирования для орального введения, выбранное соединение может быть смешано с твердым эксципиентом, например, лактозой, сахарозой, сорбитом, маннитолом, крахмалами, такими как картофельный крахмал, кукурузный крахмал или амилопектин, производными целлюлозы, связывающим веществом, таким как желатин или поливинил-пирролидин, и смазывающим веществом, таким как стеарат магния, стеарат кальция, полиэтиленгликоль, воски, парафин, и т.п., и затем спрессовано в таблетки. Если требуются таблетки, покрытые оболочкой, то сердцевина (приготовленная как описано выше) может быть покрыта концентрированным сахарным раствором, который может содержать, например, гуммиарабик, желатин, тальк, двуокись титана, и т.п. Альтернативно, таблетка может быть покрыта полимером, известным специалисту в данной области техники, растворенным в летучем органическом растворителе или смеси органических растворителей. Красители могут быть добавлены к этим покрытиям, чтобы было легко различать таблетки, содержащие различные активные вещества или различное количество активного соединения.

Для приготовления мягких желатиновых капсул соединение может быть смешано, например, с растительным маслом или полиэтиленгликолем. Твердые желатиновые капсулы могут содержать гранулы активного вещества с использованием или указанных эксципиентов для таблеток, например, лактозы, сахарозы, сорбита, маннитола, крахмалов (например, картофельный крахмал, кукурузный крахмал или амилопектин), производных целлюлозы, или с использованием желатина. Также жидкие или полумягкие формы лекарственного средства могут быть помещены в твердые желатиновые капсулы.

Примеры таблеток с немедленным высвобождением и капсульных форм, подходящих для перорального введения, приведены ниже:

Таблетка 1 мг/таблетка Соединение 100 Лактоза, Европейская фармакопея 182,75 Кроскармеллоза натрия 2,0 Паста кукурузного крахмала (паста 5% вес/объем) 2,25 Стеарат магния 3,0 Таблетка 2 мг/таблетка Соединение 50 Лактоза, Европейская фармакопея 223,75 Кроскармеллоза натрия 6,0 Кукурузный крахмал 15,0 Поливинилпирролидон (паста 5% вес/объем) 2,25 Стеарат магния 3,0 Таблетка 3 мг/таблетка Соединение 1,0 Лактоза, Европейская фармакопея 93,25 Кроскармеллоза натрия 4,0 Паста кукурузного крахмала (паста 5% вес/объем) 0,75 Стеарат магния 1,0 Капсула мг/капсула Соединение 10 Лактоза, Европейская фармакопея 488,5 Магний 1,5

Единицы дозирования для ректального применения могут представлять собой растворы или суспензии, или могут быть приготовлены в форме суппозиториев, содержащих активное вещество в смеси с нейтральной жирной основой, или желатиновых ректальных капсул, содержащих активное вещество в смеси с растительным маслом или жидким парафином. Жидкие препараты для орального применения могут быть в форме сиропов или суспензий, например, растворов, содержащих от около 0,2% до около 20% по весу активного вещества, описанного в настоящем раскрытии, где наполнитель до 100% представляет собой сахар и смесь этанола, воды, глицерина и пропиленгликоля. Дополнительно такие жидкие препараты могут содержать красители, ароматизирующие вещества, сахарин и карбоксиметилцеллюлозу в качестве загустителя, или другие эксципиенты, известные специалисту в данной области техники.

Растворы для парентеральных применений посредством инъекции могут быть приготовлены в водном растворе водорастворимой фармацевтически приемлемой соли активного вещества, предпочтительно в концентрации от 0,5% до около 10% по весу. Эти растворы могут также содержать стабилизаторы и/или буферные вещества и могут быть предоставлены в различных удобных ампулах с однократной дозой. Применение и введение пациенту, который будет подвергаться лечению, будут очевидны для специалиста в данной области техники.

Для внутриносового введения или введения посредством ингаляции, соединения по настоящему изобретению могут быть предоставлены в форме раствора, сухого порошка или суспензии. Введение может происходить с помощью контейнера с пульверизатором, который сжимается или накачивается пациентом, или путем испускания аэрозольного распыления из герметичной емкости или распылителя, с использованием соответствующего пропеллента, например, дихлордифторметана, трихлорфторметана, дихлортетрафторэтана, углекислого газа или другого подходящего газа. Соединения по изобретению могут также быть введены через порошковый ингалятор, в форме мелкодисперсного порошка в комбинации с веществом-носителем (например, сахаридом) или в форме микросфер. Ингалятор, пульверизатор или аэрозоль могут содержать одну или множество доз. Дозировку можно контролировать через клапан, который доставляет измеренный объем активного соединения.

Соединения по настоящему раскрытию могут также быть введены в лекарственной форме с регулируемым высвобождением. Соединение затем высвобождается с заданной скоростью, с тем чтобы поддерживать постоянную фармакологическую активность в течение требуемого интервала времени. Такие формы дозировки обеспечивают доставку лекарственного препарата в организм в течение предварительно заданного интервала времени и, таким образом, поддерживают уровни лекарственного препарата в терапевтическом диапазоне в течение более длительных интервалов времени, чем обычные нерегулируемые соединения. Соединения могут также иметь лекарственную форму с регулируемым высвобождением, в которых высвобождение активного соединения является направленным. Например, высвобождение соединения может быть ограничено конкретной областью пищеварительной системы через чувствительность соединения к pH-фактору. Такие соединения известны специалистам в данной области техники.

В зависимости от нарушения и пациента, который будет подвергаться лечению, и способа введения, композиции могут вводиться в различных дозах. Дозировка будет также зависеть от соотношения активности и поглощаемости, а также частоты и способа введения. Такие дозы могут вводиться один, два, или три и более раз в день. Соединения по настоящему изобретению могут вводиться субъектам в дозах в пределах от 0,01 мг до 500 мг на кг массы тела в сутки, хотя изменения будут обязательно встречаться в зависимости от веса, пола и состояния подвергающегося лечению субъекта, подвергаемого лечению заболевания и конкретного выбранного способа введения. Однако, уровень дозы, который находится в диапазоне от 0,1 мг до 10 мг на кг массы тела в сутки, в виде однократной или разделенной дозы, является наиболее предпочтительным для применения в лечении заболеваний у людей. Альтернативно, уровень дозы является таким, чтобы получить концентрацию соединения в сыворотке крови, составляющую от 0,1 нМ до 10 мкМ.

Кроме того, предоставляется соединение, раскрытое в настоящем описании, и/или конкретные соединения, приведенные в качестве примеров в настоящем описании, или их фармацевтически приемлемые соли, для применения в лечении и/или профилактике заболевания, нарушения и/или состояния, которое является чувствительным к модуляции моноаминов в коре головного мозга.

Также предоставляется применение соединения, раскрытого в настоящем описании, и/или конкретных соединений, приведенных в качестве примеров в настоящем описании, или их фармацевтически приемлемых солей, для производства медикамента для лечения и/или профилактики заболевания, нарушения и/или состояния, которое является чувствительным к модуляции моноаминов в коре головного мозга. Альтернативно или дополнительно, заболевание, нарушение и/или состояние могут соответствовать описанным в другом месте настоящего описания.

Также предоставлен способ для лечения и/или профилактики заболевания, нарушения и/или состояния, которое является чувствительным к модуляции моноаминов в коре головного мозга, при этом указанный способ включает в себя этап введения терапевтически эффективного количества соединения раскрытого в настоящем описании, и/или конкретных соединений, приведенных в качестве примеров в настоящем описании, или их фармацевтически приемлемых солей, нуждающемуся в этом пациенту. Альтернативно или дополнительно, заболевание, нарушение и/или состояние могут соответствовать описанным в другом месте настоящего описания.

Также предоставляется применение соединения и/или конкретных соединений, приведенных в качестве примеров в настоящем описании, или их фармацевтически приемлемых солей, для производства медикамента для лечения и/или профилактики заболевания, нарушения и/или состояния, которое может быть выбрано из группы, состоящей из деменции, возрастного когнитивного нарушения, когнитивных нарушений, связанных с нейродегенеративными нарушениями и/или заболеваниями, нарушений аутического спектра, синдрома гиперактивности с дефицитом внимания (ADHD), аффективных расстройств, депрессии, шизофрении, тревожных расстройств и двигательных расстройств. Альтернативно или дополнительно, заболевание, нарушение и/или состояние могут соответствовать описанным в другом месте настоящего описания.

Например, заболевание, нарушение и/или состояние могут быть выбраны из группы, состоящей из деменции, возрастного когнитивного нарушения, когнитивных нарушений, связанных с нейродегенеративными нарушениями и/или заболеваниями, нарушений аутического спектра, синдрома гиперактивности с дефицитом внимания (ADHD), аффективных расстройств, шизофрении, тревожных расстройств и двигательных расстройств. Примеры деменции включают болезнь Альцгеймера и лобно-височную деменцию. Примеры нарушений аутического спектра включают синдром Аспергера и аутизм. Примеры аффективных расстройств включают тяжелое депрессивное расстройство, биполярное расстройство и депрессию. Примеры тревожных расстройств включают двигательные расстройства, общее тревожное расстройство (GAD) и социофобию. Примеры двигательных расстройств включают болезнь Хантингтона и болезнь Паркинсона. Альтернативно или дополнительно, заболевание, нарушение и/или состояние могут соответствовать описанным в другом месте настоящего описания.

В еще одном примере заболевание, нарушение и/или состояние могут быть выбраны из группы, состоящей из деменции, возрастного когнитивного нарушения, когнитивных нарушений, связанных с нейродегенеративными нарушениями и/или заболеваниями, нарушений аутического спектра, аффективных расстройств, шизофрении, тревожных расстройств, синдрома гиперактивности с дефицитом внимания (ADHD) и двигательных расстройств. В еще одном примере заболевание, нарушение и/или состояние могут быть выбраны из группы, состоящей из деменции, возрастного когнитивного нарушения и шизофрении.

В настоящем описании лечение и/или профилактика заболевания, нарушения и/или состояния могут включать в себя облегчение симптомов, связанных с указанным заболеванием, нарушением и/или состоянием. Например, облегчение симптомов может заключаться в сокращении симптомов или обеспечения меньшей тяжести симптомов.

Комбинированная терапия

Одно или более соединений в соответствии с раскрытым в настоящем описании, таких как соединение с формулой I, формулой II, формулой II', формулой III, формулой IVa, IVb, IVc, формулой V или формулой VI, могут быть скомбинированы по меньшей мере с одним другим терапевтически активным средством, при этом указанное терапевтически активное средство является полезным в лечении и/или профилактике заболевания, нарушения и/или состояния, которое является чувствительным к модуляции моноаминов в коре головного мозга. Например, заболевание, нарушение или состояние могут быть выбраны из группы, состоящей из деменции, возрастного когнитивного нарушения, связанных с нейродегенерацией когнитивных нарушений и/или заболеваний, нарушений аутического спектра, синдрома гиперактивности с дефицитом внимания (ADHD), аффективных расстройств, депрессии, шизофрении, тревожных расстройств и двигательных расстройств. Альтернативно или дополнительно, заболевание, нарушение и/или состояние могут соответствовать описанным в другом месте настоящего описания.

Комбинация одного или более соединений в соответствии с раскрытым в настоящем описании по меньшей мере с одним другим терапевтически активным средством может быть предоставлена в форме одной композиции. Альтернативно, комбинация может быть предоставлена как набор частей.

Таким образом, предоставляется набор частей, содержащих указанное ниже или состоящих из указанного ниже:

(i) соединение в соответствии с раскрытым в настоящем описании, и

(ii) терапевтически активное средство, при этом указанное терапевтически активное средство является полезным в лечении, профилактике или облегчении заболевания, нарушения или состояния, которое является чувствительным к модуляции моноаминов в коре головного мозга.

Соединение из компонента (i) из набора частей может быть предоставлено вместе с фармацевтически приемлемым носителем, эксципиентом и/или разбавителем. Кроме того, терапевтически активное средство из компонента (ii) из набора частей может быть предоставлено вместе с фармацевтически приемлемым носителем, эксципиентом и/или разбавителем.

Набор частей может также содержать инструкции по применению, такие как инструкции для одновременного, последовательного или отдельного введения соединения из компонента (i) и терапевтически активного средства из компонента (ii) из набора частей.

Также предоставляется комбинация, такая как единственная композиция или набор частей, в соответствии с раскрытым в настоящем описании, для применения в качестве медикамента.

Кроме того, предоставляется комбинация, такая как единственная композиция или набор частей, в соответствии с раскрытым в настоящем описании, для применения в лечении и/или профилактике заболевания, нарушения или состояния, которое является чувствительным к модуляции моноаминов в коре головного мозга.

Кроме того, предоставляется комбинация, такая как единственная композиция или набор частей в соответствии с раскрытым в настоящем описании, для применения в производстве медикамента для лечения заболевания, нарушения и/или состояния, которое является чувствительным к модуляции моноаминов в коре головного мозга.

Кроме того, предоставляется способ лечения заболевания, нарушения и/или состояния, которое является чувствительным к модуляции моноаминов в коре головного мозга, при этом указанный способ включает в себя введение эффективного количества такой единственной композиции или компонентов из набора частей, в соответствии с раскрытым в настоящем описании, нуждающемуся в этом пациенту.

Следует понимать, что соединение из компонента (i), и терапевтически активное средство из компонента (ii) из набора частей, раскрытых в настоящем описании, могут быть введены одновременно, последовательно или отдельно.

Кроме того, в контексте комбинации, такой как единственная композиция, или набор частей, раскрытые в настоящем описании, будет понятно, что заболевание, нарушение и/или состояние могут быть выбраны из группы, состоящей из деменции, возрастного когнитивного нарушения, связанных с нейродегенерацией когнитивных нарушений и/или заболеваний, нарушений аутического спектра, синдрома гиперактивности с дефицитом внимания (ADHD), аффективных расстройств, депрессии, шизофрении, тревожных расстройств и двигательных расстройств. Альтернативно или дополнительно, заболевание, нарушение или состояние могут соответствовать описанным в другом месте настоящего описания.

ПРИМЕРЫ

Изобретение дополнительно иллюстрируется на приведенных ниже примерах и в соответствии с описанным ниже, при этом такое описание никоим образом не предназначено для ограничения объема изобретения.

Применялись следующие общие процедуры проведения экспериментов:

(i) Масс-спектры низкого разрешения были записаны на приборе HP 5970A, функционирующем при ионизационном потенциале, составляющем 70 эВ. Детектор массы был соединен с помощью интерфейса с газовым хроматографом HP5700, оборудованным колонкой HP-5MS UI GC (15 м, 0,25 мм, 0,25 мкм) с потоком газа He, составляющим 40 см/с.

(ii) Эксперименты NMR выполнялись на магните Oxford 800, спектрометре Bruker Avance III HD с 4 каналами, 5 мм холодным зондом TXO и ASTM 13C S/N 3300

^*Протоны из противоиона фумаровой кислоты.

(iii) Температура плавления была определена посредством Buchi B-545 и не корректировалась.

(iv) Для флэш-хроматографии использовались Biotage Isolera версия 1,2 с SNAP Cartridge KP-Sil, градиентные смеси подвижной фазы изооктана/этилацетата/метанола.

(v) Разделение зеркальных изомеров выполнялось с применением Kromasil 10-Cellucoat с подвижной фазой (гептан/2-пропанол/диэтиламин, 98:2:0,1), дискретизация на 255-265 нм, измеренная с помощью УФ-детектора Merck HITACHI I-7400(единственная длина волны) на приборе Nova Prep 200. Анализ энантиомерной чистоты был проведен количественно с помощью колонки Kromasil 5-cellucoat CT8031(4,6*250 мм) с использованием УФ-детектора на одной длине волны Gynotek с программным обеспечением Chromeleon версия 6.8. Вращение плоскости поляризации было измерено на поляриметре PerkinElmer 241 с использованием лампы Na589(60-80 мкАмп/5 сек интеграции).

(vi) Испарение растворителей выполнялось с применением Laborota 4000, соединенным с вакуумным насосом Vario PC2001.

Наименование соединений в соответствии с раскрытым в настоящем описании было сделано с применением пакета программного обеспечения J Chem для Excel, версия 14.8.2600.753. В настоящем описании в случае, если химическое наименование и химическая структура являются несогласованными, корректной следует считать химической структуру.

Пример 1

(-)-3-[(2,3-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН СОЛЬ СОЛЯНОЙ КИСЛОТЫ

(-)ЗЕРКАЛЬНЫЙ ИЗОМЕР

(-)-Трет-бутил 3-[(2,3-дифторфенил)(фтор)метил]азетидин-1- карбоксилат (E1) (1,30 г, 4,32 ммоль) растворяли в метиленхлориде (30 мл), и добавляли трифторуксусную кислоту (3 мл), после чего смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 15 ч. Растворитель испаряли, и неочищенный продукт добавляли в SPE-колонку SCX-3, промывали метанолом и экстрагировали метанолом/TEA в соотношении 4:1. Растворители испаряли, и неочищенный продукт (0,55 г, 2,73 ммоль) растворяли в 5 мл этанола, и соляную кислоту (1,25 M, 3,5 мл) добавляли к этанолу. Растворитель испаряли, и неочищенную соль (название соединения) перекристаллизовывали из 2-пропанола: M.p. 149-150°C (HCI). MS m/z (относительная интенсивность, 70 эВ) 201(М+, 3), 171(43), 153(bp), 151(44), 145(38). ¹H NMR (800 МГц, MeOD) δ Мд. 3,45-3,56(m, 1 H) 4,00-4,11(m, 2 H) 4,11-4,19(m, 1 H) 4,14(dd, J=17,12, 10,27 Гц, 1 H) 5,95-6,10(m, 1 H) 7,26(d, J=2,93 Гц, 1 H) 7,29-7,37(m, 1 H). [α]_D=-28,1° (измерено на основании с концентрацией 10 мг/мл).

Пример 2

(+)-3-[(2,3-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН СОЛЬ СОЛЯНОЙ КИСЛОТЫ

(+)ЗЕРКАЛЬНЫЙ ИЗОМЕР

(+)-Трет-бутил 3-[(2,3-дифторфенил)(фтор)метил]азетидин-1-карбоксилат (E2) (1,00 г, 3,32 ммоль) растворяли в метиленхлориде (25 мл), и добавляли трифторуксусную кислоту (3 мл), после чего смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 15 ч. Растворитель испаряли, и неочищенный продукт добавляли в SPE-колонку SCX-3, промывали метанолом и экстрагировали метанолом/TEA в соотношении 4:1. Растворители испаряли, и неочищенный продукт (0,5 г, 2,48 ммоль) растворяли в 5 мл этанола, и соляную кислоту (1,25 m, 2,0 мл) добавляли к этанолу. Растворитель испаряли, и неочищенную соль (указанное в заголовке соединение) перекристаллизовывали из 2-пропанола: M.p. 153-154°C (HCI). MS m/z (относительная интенсивность, 70 эВ) 201(М+, 3), 171(43), 153(bp), 151(44), 145(38). ¹H NMR (800 МГц, MeOD) δ Мд. 3,45-3,58(m, 1 H) 4,07-4,16(m, 2 H) 4,11(dd, J=11,25, 4,89 Гц, 1 H) 4,16-4,22(m, 2 H) 5,97-6,11(m, 1 H) 7,26(d, J=3,42 Гц, 2 H) 7,33(td, J=10,27, 7,34 Гц, 1 H). [α]_D=+18,4° (измерено на основании с концентрацией 10 мг/мл).

Пример 3

(-)-3-[(3,5-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН СОЛЬ ФУМАРОВОЙ КИСЛОТЫ

(-)-ЗЕРКАЛЬНЫЙ ИЗОМЕР

Трет-бутил 3-[(3,5-дифторфенил)(фтор)метил]азетидин-1-карбоксилат (E1) (0,38, 1,26 ммоль) растворяли в метиленхлориде (25 мл), и добавляли трифторуксусную кислоту (3 мл), после чего смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 15 ч. Растворитель испаряли, и неочищенный продукт добавляли в SPE-колонку SCX-3, промывали метанолом и экстрагировали метанолом/TEA в соотношении 4:1. Растворители испаряли, и неочищенный продукт (0,20 г, 1,0 ммоль) растворяли в 5 мл этанола, и добавляли фумаровую кислоту (0,11 г, 1,0 ммоль).

Растворители испаряли, и неочищенную соль (указанное в заголовке соединение) перекристаллизовывали из метанола/диэтилового эфира: M.p. 146-147°C (фумарат). MS m/z (относительная интенсивность, 70 эВ) 201(М+, 3), 171(64), 153(bp), 151(63), 145(43). ¹H NMR (800 МГц, MeOD) δ Мд. 3,41-3,52(m, 1 H) 4,04(t, Гц J=10,03, 1 H) 4,11(dd, J=13,20, 7,34 Гц, 2 H) 4,17(t, J=10,03 Гц, 1 H) 5,72-5,86(m, 1 H) 6,67^* (s, 1,5 H) 6,92-6,99(m, 1 H) 6,99-7,05(m, 2 H). [α]_D=-34,4° (измерено на основании с концентрацией 10 мг/мл).

Пример 4

(+)-3-[(3,5-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН СОЛЬ ФУМАРОВОЙ КИСЛОТЫ

(+)-ЗЕРКАЛЬНЫЙ ИЗОМЕР

Трет-бутил 3-[(3,5-дифторфенил)(фтор)метил]азетидин-1-карбоксилат (E2) (0,41 г, 1,36 ммоль) растворяли в метиленхлориде (25 мл), и добавляли трифторуксусную кислоту (3 мл), после чего смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 15 ч. Растворитель испаряли, и неочищенный продукт добавляли в SPE-колонку SCX-3, промывали метанолом и экстрагировали метанолом/TEA в соотношении 4:1. Растворители испаряли, и неочищенный продукт (0,25 г, 1,24 ммоль) растворяли в 5 мл этанола, и добавляли фумаровую кислоту (0,16 г, 1,24 ммоль). Растворители испаряли, и неочищенную соль (указанное в заголовке соединение) перекристаллизовывали из метанола/диэтилового эфира: M.p. 155-156°C (Фумарат). MS m/z (относительная интенсивность, 70 эВ) 201(М+, 3), 171(64), 153(bp), 151(63), 145(43). ¹H NMR (800 МГц, MeOD) δ Мд. 3,41-3,52(m, 1 H) 4,04(t, J=9,78 Гц, 1 H) 4,11(dd, J=16,14, 7,34 Гц, 2 H) 4,17(t, J=10,03 Гц, 1 H) 5,71-5,86(m, 1 H) 6,67^* (с, 1,5 H) 6,94-6,98(m, 1 H) 7,00-7,04(m, 2 H). [α]_D=+28,5° (измерено на основании с концентрацией 10 мг/мл).

Пример 5

3-[(3,4-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН СОЛЬ СОЛЯНОЙ КИСЛОТЫ

Трет-бутил 3-[(3,4-дифторфенил)(фтор)метил]азетидин-1-карбоксилат (0,66, 2,22 ммоль) растворяли в метиленхлориде (25 мл), и добавляли трифторуксусную кислоту (5 мл), после чего смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 15 ч. Растворитель испаряли, и неочищенный продукт добавляли в SPE-колонку SCX-3, промывали метанолом и экстрагировали метанолом/TEA в соотношении 4:1. Растворители испаряли, и неочищенный продукт (0,41 г, 2,03 ммоль) растворяли в 5 мл этанола, и добавляли соляную кислоту в этаноле (1,25 М, 3,1 мл). Растворители испаряли, и неочищенную соль (указанное в заголовке соединение) перекристаллизовывали из метанола/диэтилового эфира: M.p. 109-110°C (HCI). MS m/z (относительная интенсивность, 70 эВ) 201(М+, 2), 15 171(42), 153(bp), 151(36), 145(36). ¹H NMR (800 МГц, MeOD) δ Мд. 3,47(dddd, J=18,65, 16,57, 9,05, 4,65 Гц, 1 H) 4,06-4,11(m, 2 H) 4,11-4,19(m, 2 H) 5,70-5,88(m, 1 H) 7,21(d, J=7,82 Гц, 1 H) 7,28-7,39(m, 2 H).

Пример 6

3-[(2,5-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН СОЛЬ ЩАВЕЛЕВОЙ КИСЛОТЫ

3-[(2,5-дифторфенил)(фтор)медил]-1-(дифенилметил)азетидин (1,2 г, 3,27 ммоль) растворяли в метиленхлориде (15 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли 1-хлоэтил хлорфомат (0,7 г, 4,9 ммоль), после чего смесь перемешивали при 0°C в течение 18 ч. Растворитель испаряли, и неочищенный продукт повторно растворяли в метаноле (20 мл) и перемешивали при температуре окружающей среды в течение 3 часов. Раствор метанола добавляли в SPE-колонку SCX-3, промывали метанолом и экстрагировали с помощью метанола/триэтиламина в соотношении 4:1. Растворители испаряли, и неочищенный продукт (0,77 г) затем очищали с помощью колонки для флэш-хроматографии на силикагеле (этилацетат:метанол, от 1:0 до 1:1) с получением указанного в заголовке соединения (0,28 г, 1,38 ммоль).

Указанное в заголовке соединение растворяли в 5 мл этанола, и добавляли дигидрат щавелевой кислоты (0,17 г, 1,38 ммоль), растворенный в этаноле (5 мл), и смесь выпаривали досуха, и неочищенную соль (указанное в заголовке соединение) перекристаллизовывали из метанола/диэтилового эфира: M.p. 149°C (оксалат). MS m/z (относительная интенсивность, 70 эВ) 201(М+, 2), 171(54), 153(bp), 151(46), 145(48). 1 H NMR (800 МГц, диметилсульфоксид-d6) δ Мд. 3,43(m, 1 H), 3,82(m, 1 H) 4,01-4,09(m, 3 H), 6,03-6,1(m, 1 H), 7,31-7,38(m, 3 H).

Пример 7

3-[(2,6-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН СОЛЬ ЩАВЕЛЕВОЙ КИСЛОТЫ

Трет-бутил-3-[(2,6-дифторфенил)(фтор)метил]азетидин-1-карбоксилат (1,2 г, 3,98 ммоль) растворяли в метиленхлориде (15 мл), и добавляли трифторуксусную кислоту (6 мл, 78 ммоль), и смесь перемешивали при температуре среды в течение 1 часа. Затем смесь испаряли, и неочищенный продукт добавляли в SPE-колонку SCX-3, промывали метанолом и экстрагировали с помощью метанола/триэтиламина в соотношении 4:1. Растворители испаряли, и неочищенный продукт (0,82 г) затем очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (этилацетат:метанол, от 1:0 до 1:1) с получением указанного в заголовке соединения (0,74 г, 3,66 ммоль). Указанное в заголовке соединение растворяли в 5 мл этанола, и добавляли дигидрат щавелевой кислоты (0,46 г, 3,66 ммоль), растворенный в этаноле (5 мл), и смесь выпаривали досуха, и неочищенную соль (указанное в заголовке соединение) перекристаллизовывали из метанола/диэтилового эфира: M.p. 169,4°C (оксалат). MS m/z (относительная интенсивность, 70 эВ) 201(М+, 2), 171(42), 153(bp), 151(31), 145(48). 1 H NMR (800 МГц, CD30D) δ Мд. 3,6(m, 1 H), 3,99(m, 1 H) 4,17(m, 1 H), 4,26(m, 1 H), 4,34(m, 1 H), 4,5(m, 1 H), 6,06-6,22(dd, 1 H), 7,05(m, 2H), 7,48(m, 1 H).

Пример 8

3-[(2,4-ДИФТОРФЕНИЛ(ФТОР)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН СОЛЬ ЩАВЕЛЕВОЙ КИСЛОТЫ

Трет-бутил-3-[(2,4-дифторфенил)(фтор)метил]азетидин-1-карбоксилат (0,54 г, 1,79 ммоль) растворяли в метиленхлориде (10 мл), и добавляли трифторуксусную кислоту (4 мл, 52 ммоль), и смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 1 часа. Затем смесь испаряли, и неочищенный продукт добавляли в SPE-колонку SCX-3, промывали метанолом и экстрагировали с помощью метанола/триэтиламина в соотношении 4:1. Растворители испаряли, и неочищенный продукт (0,34 г, 1,71 ммоль) растворяли в 5 мл этанола, и добавляли дигидрат щавелевой кислоты (0,216 г, 1,71 ммоль), растворенный в этаноле (5 мл), и смесь выпаривали досуха, и неочищенную соль (указанное в заголовке соединение) перекристаллизовывали из метанола/диэтилового эфира: M.p. 152,5°C (оксалат). MS m/z (относительная интенсивность, 70 эВ) 201(М+, 1), 171(41), 153(bp), 151(34), 145(47). 1 H NMR (800 МГц, CD30D) δ Мд. 3,5(m, 1 H), 4,06(m, 1 H), 4,13(m, 1 H), 4,19(m, 2 H), 5,94/5,99(dd, 1 H), 7,03(m, 2H), 7,48(m, 1 H).

Пример 9

3-[ФТОР(2,3,5-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН СОЛЬ ЩАВЕЛЕВОЙ КИСЛОТЫ

Трет-бутил-3-[ФТОР(2,3,5-трифторфенил)метил]азетидин-1-карбоксилат (1,62 г, 5,09 ммоль) растворяли в метиленхлориде (20 мл), и добавляли трифторуксусную кислоту (6 мл, 78 ммоль), и смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 1 часа. Затем смесь испаряли, и неочищенный продукт повторно растворяли в 10% Na₂CO₃, и водную фазу экстрагировали с применением этилацетата, и объединенную органическую фазу высушивали (Na₂SO₄), фильтровали и испаряли (выход 1,09 г, 5,0 ммоль). Неочищенный продукт растворяли в 5 мл этанола, и добавляли дигидрат щавелевой кислоты (0,63 г, 5,0 ммоль), растворенный в этаноле (5 мл), и смесь выпаривали досуха, и неочищенную соль (указанное в заголовке соединение) перекристаллизовывали из метанола/диэтилового эфира: M.p. 138,2°C (оксалат). MS m/z (относительная интенсивность, 70 эВ) 219(М+, 5), 189(33), 171(bp), 169(40), 163(43). 1 H NMR (800 МГц, CD30D) δ Мд. 3,5(m, 1 H), 4,1(m, 2 H), 4,2(m, 2 H), 6,01/6,07(dd, 1 H), 7,09(m, 1 H), 7,23(m, 1 H).

Пример 10

3-[ФТОР(2,4,6-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН СОЛЬ ЩАВЕЛЕВОЙ КИСЛОТЫ

Трет-бутил-3-[фтор(2,4,6-трифторфенил)метил]азетидин-1-карбоксилат (0,995 г, 3,12 ммоль) растворяли в метиленхлориде (10 мл), и добавляли трифторуксусную кислоту (4 мл, 52 ммоль), и смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 1 часа. Затем смесь испаряли, и неочищенный продукт повторно растворяли в 10% Na₂CO₃, и водную фазу экстрагировали с применением этилацетата, и объединенную органическую фазу высушивали (Na₂SO₄), фильтровали и испаряли (выход 0,67 г, 3,06 ммоль). Неочищенный продукт растворяли в 5 мл этанола, и добавляли дигидрат щавелевой кислоты (0,385 г, 3,06 ммоль), растворенный в этаноле (5 мл), и смесь выпаривали досуха, и неочищенную соль (указанное в заголовке соединение) перекристаллизовывали из метанола/диэтилового эфира: M.p. 149,6°C (оксалат). MS m/z (относительная интенсивность, 70 эВ) 219(М+, 2), 171(bp), 169(24), 163(56), 145(25). 1 H NMR (800 МГц, диметилсульфоксид-d6) δ Мд. 3,5(m, 1 H), 3,7(m, 1 H), 4,01(m, 1 H), 4,13(m, 2 H), 6,12/6,17(dd, 1 H), 7,31(m, 2H).

Пример 11

3-[ФТОР(2,3,4-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН СОЛЬ ЩАВЕЛЕВОЙ КИСЛОТЫ

Трет-бутил-3-[ФТОР(2,3,4-трифторфенил)метил]азетидин-1-карбоксилат (1,2 г, 3,77 ммоль) растворяли в метиленхлориде (10 мл), и добавляли трифторуксусную кислоту (4 мл, 52 ммоль), и смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 1 часа. Затем смесь испаряли, и неочищенный продукт повторно растворяли в 10% Na₂CO₃, и водную фазу экстрагировали с применением этилацетата, и объединенную органическую фазу высушивали (Na₂SO₄), фильтровали и испаряли (0,67 г, 3,06 ммоль). Неочищенный продукт растворяли в 5 мл этанола, и добавляли дигидрат щавелевой кислоты (0,385 г, 3,06 ммоль), растворенный в этаноле (5 мл), и смесь выпаривали досуха, и неочищенную соль (указанное в заголовке соединение) перекристаллизовывали из метанола/диэтилового эфира: M.p. 157,7°C (оксалат). MS m/z (относительная интенсивность, 70 эВ) 219(М+, 3), 189(27), 171(bp), 169(29), 163(41). 1 H NMR (800 МГц, CD30D) δ Мд. 3,5(m, 1 H), 4,07(m, 1 H), 4,14(m, 1 H), 4,20(m, 2 H), 5,96/6,12(dd, 1 H), 7,20(m, 1 H), 7,26(m, 1 H).

Пример 12

3-[ФТОР(3,4,5-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН СОЛЬ ЩАВЕЛЕВОЙ КИСЛОТЫ

Трет-бутил-3-[фтор(3,4,5-трифторфенил)метил]-азетидин-1-карбоксилат (1,2 г, 3,77 ммоль) растворяли в метиленхлориде (10 мл), и добавляли трифторуксусную кислоту (4 мл, 52 ммоль), и смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 1 часа. Затем смесь испаряли, и неочищенный продукт повторно растворяли в 10% Na₂CO₃, и водную фазу экстрагировали с применением этилацетата, и объединенную органическую фазу высушивали (Na₂SO₄), фильтровали и испаряли (выход 0,64 г, 2,92 ммоль). Неочищенный продукт растворяли в 5 мл этанола, и добавляли дигидрат щавелевой кислоты (0,37 г, 2,92 ммоль), растворенный в этаноле (5 мл), и смесь выпаривали досуха, и неочищенную соль (указанное в заголовке соединение) перекристаллизовывали из метанола/диэтилового эфира: M.p. 123,2°C (оксалат). MS m/z (относительная интенсивность, 70 эВ) 219(М+, 2), 189(24), 171(bp), 169(30), 163(34). 1 H NMR (800 МГц, CD30D) δ Мд. 3,45(m, 1 H), 4,04-4,13(m, 3 H), 4,17(m, 1 H), 5,73/5,78(dd, 1 H), 7,20(t, 2H).

Пример 13

3-[(3,5-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН

Трет-бутил-3-[(3,5-дифторфенил)(фтор)метил]азетидин-1-карбоксилат (1,0 г, 3,32 ммоль) растворяли в метиленхлориде (10 мл), и добавляли трифторуксусную кислоту (4 мл, 52 ммоль), и смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 1 часа. Затем смесь испаряли, и неочищенный продукт повторно растворяли в 10% Na₂CO₃, и водную фазу экстрагировали с применением этилацетата, и объединенную органическую фазу высушивали (Na₂SO₄), фильтровали и испаряли (0,54 г, 2,69 ммоль). MS m/z (относительная интенсивность, 70 эВ) 201(М+, 2), 171(63), 153(bp), 151(52), 145(40).

Пример 14

3-[(2,3-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН

Трет-бутил-3-[(2,3-дифторфенил)(фтор)метил]азетидин-1-карбоксилат (1,0 г, 3,32 ммоль) растворяли в метиленхлориде (10 мл), и добавляли трифторуксусную кислоту (4 мл, 52 ммоль), и смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 1 часа. Затем смесь испаряли, и неочищенный продукт повторно растворяли в 10% Na₂CO₃, и водную фазу экстрагировали с применением этилацетата, и объединенную органическую фазу высушивали (Na₂SO₄), фильтровали и испаряли (660 мг, 3,3 ммоль). MS m/z (относительная интенсивность, 70 эВ) 201(М+, 2), 171(41), 153(bp), 151(42), 145(39).

Пример 15

3-[(2,3-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]-1-МЕТИЛАЗЕТИДИН

3-[2,3-Дифторфенил)(фтор)метил]азетидин (90 мг, 0,45 ммоль) растворяли в ацетонитриле (4 мл), и добавляли параформальдегид (37% водный раствор, 0,17 мл, 2,23 ммоль). Смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 5 минут, и затем цианоборогидрид натрия (56 мг, 0,89 ммоль) добавляли небольшими порциями к смеси. Итоговую смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 2 часов, и затем добавляли воду и насыщенный водный раствор NaHCO₃, и экстрагировали с применением этилацетата. Объединенную органическую фазу высушивали (Na2C0₃), фильтровали и выпаривали досуха (5,1 мг). MS m/z (относительная интенсивность, 70 эВ) 215(М+, bp), 171(62), 151(82), 145(81), 57(49).). 1 H NMR (800 МГц, CDCI3) δ Мд. 2,36(s, 3H), 3,0(m, 1 H), 3,1(t, 1 H), 3,3(t, 1 H) 3,43(m, 2 H), 5,82/5,88(dd, 1 H), 7,13(m, 3H)

Пример 16

3-[(2,3-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]-1-ЭТИЛАЗЕТИДИН СОЛЬ СОЛЯНОЙ КИСЛОТЫ

3-[2,3-Дифторфенил)(фтор)метил]азетидин (250 мг, 1,24 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (15 мл), и добавляли NEt₃(0,52 мл, 3,73 ммоль) и иодэтан (0,15 мл, 1,86 ммоль). Смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 24 часов, и затем выпаривали досуха. Неочищенный продукт повторно растворяли в 10% водном растворе HCl и экстрагировали с помощью метил-трет-бутилового эфира. Водную фазу затем ощелачивали 10%-м водным раствором Na₂CO₃ и экстрагировали с помощью метил-трет-бутилового эфира. Объединенную органическую фазу высушивали (Na₂SO₄), фильтровали и выпаривали досуха. Неочищенный продукт затем очищали посредством колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (этилацетат:метанол, от 100:0 до 70:30) с получением указанного в заголовке соединения (165 мг, 0,72 ммоль). Неочищенный продукт растворяли в 5 мл этанола, и добавляли соляную кислоту в этаноле (1,25 M, 5 мл). Растворители испаряли, и неочищенную соль (указанное в заголовке соединение) перекристаллизовывали из метанола/диэтилового эфира: M.p. 130,8°C (HCI). MS m/z (относительная интенсивность, 70 эВ) 229(М+, 35), 214(bp), 151(29), 145(56), 57(67). 1 H NMR (800 МГц, CD30D) δ Мд. 1,24(t, 3H), 3,33(m, 3H), 3,53(m, 1 H), 4,03-4,44(m, 3 H), 6,09(m, 1 H), 7,3(m, 2H), 7,36(m, 1 H)

Пример 17

3-[(2,3-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]-1-ПРОПИЛАЗЕТИДИН СОЛЬ ЩАВЕЛЕВОЙ КИСЛОТЫ

3-[2,3-Дифторфенил)(фтор)метил]азетидин (200 мг, 0,99 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (8 мл), и добавляли NEt₃(0,42 мл, 2,98 ммоль) и 1-иодпропан (0,14 мл, 1,49 ммоль). Смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 24 часов, и затем испаряли досуха. Неочищенный продукт повторно растворяли в 10% водном растворе HCl и экстрагировали с помощью метил-трет-бутилового эфира. Водную фазу затем ощелачивали 10%-м водным раствором Na₂CO₃ и экстрагировали с помощью метил-трет-бутилового эфира. Объединенную органическую фазу высушивали (Na₂S0₄), фильтровали и выпаривали досуха. Неочищенный продукт затем очищали посредством колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (этилацетат:метанол, от 100:0 до 85:15), с получением указанного в заголовке соединения (101 мг, 0,41 ммоль). Очищенный продукт растворяли в 5 мл этанола, и добавляли дигидрат щавелевой кислоты (52,4 мг, 0,41 ммоль), растворенный в этаноле (5 мл), и смесь выпаривали досуха, и неочищенную соль (указанное в заголовке соединение) перекристаллизовывали из метанола/диэтилового эфира: M.p. 137,4°C (оксалат) MS m/z (относительная интенсивность, 70 эВ) 243(М+, 8), 215(14), 214(bp), 153(1 1), 145(25). 1 H NMR (800 МГц, диметилсульфоксид-d6) δ Мд. 0,86(t, 3H), 1,47(m, 2H), 3,03(t, 2 H), 3,41(m, 1 H), 3,83(t, 1 H), 4,04-4,15(m, 3 H), 6,09/6,15(dd, 1 H), 7,29(m, 2H), 7,51(m, 1 H)

Пример 18

3-[(3,5-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]-1-МЕТИЛАЗЕТИДИН

3-[3,5-Дифторфенил)(фтор)метил]азетидин (100 мг, 0,5 ммоль) растворяли в ацетонитриле (4,5 мл), и добавляли параформальдегид (37% водный раствор, 0,19 мл, 2,48 ммоль). Смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 5 минут, и затем цианоборогидрид натрия (62 мг, 0,99 ммоль) добавляли небольшими порциями к смеси. Итоговую смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 2 часов, и затем добавляли воду и насыщенный водный раствор NaHCO₃, и экстрагировали с применением этилацетата. Объединенную органическую фазу высушивали (Na₂SO₄), фильтровали и выпаривали досуха. Неочищенный продукт затем очищали посредством колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (этилацетат:метанол, от 100:0 до 75:25), с получением указанного в заголовке соединения (5 мг, 0,023 ммоль) MS m/z (относительная интенсивность, 70 эВ) 215(М+, 76), 171(67), 151(bp), 145(82), 57(76).

Пример 19

3-[(3,5-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]-1-ЭТИЛАЗЕТИДИН СОЛЬ ЩАВЕЛЕВОЙ КИСЛОТЫ

3-[3,5-Дифторфенил)(фтор)метил]азетидин (285 мг, 1,42 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (8 мл), и добавляли NEt₃(0,59 мл, 4,25 ммоль) и иодэтан (0,17 мл, 2,12 ммоль). Смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 20 часов, и затем выпаривали досуха. Неочищенный продукт повторно растворяли в 10% водном растворе HCl и экстрагировали с помощью метил-трет-бутилового эфира. Водную фазу затем ощелачивали 10%-м водным раствором Na₂CO₃ и экстрагировали с помощью метил-трет-бутилового эфира. Объединенную органическую фазу высушивали (Na₂SO₄), фильтровали и выпаривали досуха. Неочищенный продукт затем очищали посредством колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (этилацетат:метанол, от 100:0 до 70:30), с получением указанного в заголовке соединения (выход 117 мг, 0,51 ммоль). Очищенный продукт растворяли в 5 мл этанола, и добавляли дигидрат щавелевой кислоты (64 мг, 0,51 ммоль), растворенный в этаноле (5 мл), и смесь выпаривали досуха, и неочищенную соль (указанное в заголовке соединение) перекристаллизовывали из метанола/диэтилового эфира: M.p. 137,3°C (оксалат). MS m/z (относительная интенсивность, 70 эВ) 229(М+, 44), 214(bp), 151(39), 145(54), 57(87). 1 H NMR (800 МГц, диметилсульфоксид-d6) δ Мд. 1,05(t, 3H), 3,09(m, 2H), 3,33(m, 1 H), 3,89(m, 1 H), 4,0-4,06(m, 3 H), 5,85/5,91(dd, 1 H), 7,17(m, 2H), 7,28(m, 1 H)

Пример 20

3-[(3,5-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]-1-ПРОПИЛАЗЕТИДИН СОЛЬ ЩАВЕЛЕВОЙ КИСЛОТЫ

3-[3,5-Дифторфенил)(фтор)метил]азетидин (150 мг, 0,74 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (8 мл), и добавляли NEt₃(0,31 мл, 2,23 ммоль) и 1-иодпропан (0,11 мл, 1,11 ммоль). Смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 24 часов, и затем выпаривали досуха. Неочищенный продукт повторно растворяли в 10% водном растворе HCl и экстрагировали с помощью метил-трет-бутилового эфира. Водную фазу затем ощелачивали 10%-м водным раствором Na₂CO₃ и экстрагировали с помощью метил-трет-бутилового эфира. Объединенную органическую фазу высушивали (Na₂SO₄), фильтровали и выпаривали досуха. Неочищенный продукт затем очищали посредством колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (этилацетат:метанол, 100:0 до 95:5), с получением указанного в заголовке соединения (выход 85 мг, 0,35 ммоль). Очищенный продукт (80 мг) растворяли в 5 мл этанола, и добавляли дигидрат щавелевой кислоты (41,55 мг, 0,329 ммоль), растворенный в этаноле (5 мл), и смесь выпаривали досуха, и неочищенную соль (указанное в заголовке соединение) перекристаллизовывали из метанола/диэтилового эфира: M.p. 156,9°C (оксалат). MS m/z (относительная интенсивность, 70 эВ) 243(М+, 8), 215(14), 214(bp), 145(22), 70(11). 1 H NMR (800 МГц, диметилсульфоксид-d6) δ Мд. 0,87(t, 3H), 1,47(m, 2H), 3,0(t, 2 H), 3,3(m, 1 H), 3,9(t, 1 H), 4,01-4,06(m, 3 H), 5,84/5,90(dd, 1 H), 7,17(m, 2H), 7,28(m, 1 H)

Пример 21

3-[ФТОР(2,3,5-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]-1-МЕТИЛАЗЕТИДИН

3-[2,3,5-Трифторфенил)(фтор)метил]азетидин (135 мг, 0,61 ммоль) растворяли в ацетонитриле (6 мл), и добавляли параформальдегид (37% водный раствор, 0,23 мл, 3,08 ммоль). Смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 5 минут, и затем цианоборогидрид натрия (77,4 мг, 1,23 ммоль) добавляли небольшими порциями к смеси. Итоговую смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 2 часов, и затем добавляли воду и насыщенный водный раствор NaHCO₃, и экстрагировали с применением этилацетата. Объединенную органическую фазу высушивали (Na₂SO₄), фильтровали и выпаривали досуха. Неочищенный продукт затем очищали посредством колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (этилацетат:метанол, от 100:0 до 90:10), с получением указанного в заголовке соединения (0,74 г, 3,66 ммоль). MS m/z (относительная интенсивность, 70 эВ) 233(М+, bp), 171(44), 169(67), 163(76), 57(56). 1 H NMR (800 МГц, CDCI3) δ Мд. 2,35(s,3H), 2,95(m, 1 H), 3,10(t, 1 H), 3,26(t, 1 H), 3,40(m, 2H), 5,81/5,87(dd, 1 H), 6,87-6,93(m, 2H).

Пример 22

1-ЭТИЛ-3-[ФТОР(2,3,5-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН СОЛЬ ЩАВЕЛЕВОЙ КИСЛОТЫ

3-[2,3,5-Трифторфенил)(фтор)метил]азетидин (250 мг, 1,14 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (8 мл), и добавляли NEt₃(0,48 мл, 3,42 ммоль) и иодэтан (0,14 мл, 1,71 ммоль). Смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 20 часов, и затем выпаривали досуха. Неочищенный продукт повторно растворяли в 10% водном растворе HCl и экстрагировали с помощью метил-трет-бутилового эфира. Водную фазу затем ощелачивали 10%-м водным раствором Na₂CO₃ и экстрагировали с помощью метил-трет-бутилового эфира. Объединенную органическую фазу высушивали (Na₂SO₄), фильтровали и выпаривали досуха. Неочищенный продукт затем очищали посредством колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (этилацетат:метанол, от 100:0 до 80:20), с получением указанного в заголовке соединения (77 мг, 0,31 ммоль). Очищенный продукт (77 мг) растворяли в 5 мл этанола, и добавляли дигидрат щавелевой кислоты (39,3 мг, 0,31 ммоль), растворенный в этаноле (5 мл), и смесь выпаривали досуха, и неочищенную соль (указанное в заголовке соединение) перекристаллизовывали из метанола/диэтилового эфира: M.p. 127,1°C (оксалат). MS m/z (относительная интенсивность, 70 эВ) 247(М+, 26), 232(87), 169(29), 163(61), 57(bp). 1 H NMR (800 МГц, диметилсульфоксид-d6) δ Мд. 1,06(t, 3H), 3,10(q, 2H), 3,39(m, 1 H), 3,83(m, 1 H), 4,04-4,10(m, 3 H), 6,10/6,16(dd, 1 H), 7,25(m, 1 H), 7,64(m, 1 H)

Пример 23

3-[ФТОР(2,3,5-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]-1-ПРОПИЛАЗЕТИДИН СОЛЬ ЩАВЕЛЕВОЙ КИСЛОТЫ

3-[2,3,5-Трифторфенил)(фтор)метил]азетидин (200 мг, 0,91 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (8 мл), и добавляли NEt₃(0,38 мл, 2,74 ммоль) и 1-иодпропан (0,13 мл, 1,37 ммоль). Смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 24 часов, и затем выпаривали досуха. Неочищенный продукт повторно растворяли в 10% водном растворе HCl и экстрагировали с помощью метил-трет-бутилового эфира. Водную фазу затем ощелачивали 10%-м водным раствором Na₂CO₃ и экстрагировали с помощью метил-трет-бутилового эфира. Объединенную органическую фазу высушивали (Na₂SO₄), фильтровали и выпаривали досуха. Неочищенный продукт затем очищали посредством колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (этилацетат:метанол, от 100:0 до 95:5), с получением указанного в заголовке соединения (75 мг, 0,29 ммоль). Очищенный продукт (75 мг) растворяли в 5 мл этанола, и добавляли дигидрат щавелевой кислоты (99,5 мг, 0,79 ммоль), растворенный в этаноле (5 мл), и смесь выпаривали досуха, и неочищенную соль (указанное в заголовке соединение) перекристаллизовывали из метанола/диэтилового эфира: M.p. 129,8°C MS m/z (относительная интенсивность, 70 эВ) 247(М+, 40), 232(bp), 169(29), 163(58), 57(82).

Пример 24

1-ЭТИЛ-3-[ФТОР(2,3,4-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН

3-[2,3,4-трифторфенил)(фтор)метил]азетидин (300 мг, 1,37 ммоль) растворяли в 1,2-дихлорэтане (10 мл), и добавляли ацетальдегид (0,090 мл, 1,64 ммоль) и уксусную кислоту (0,078 мл, 1,37 ммоль). Смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 5 минут, и затем триацетоксиборогидрид натрия (435 мг, 2,05 ммоль) добавляли небольшими порциями к смеси. Итоговую смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 20 часов, и затем добавляли 10% водный раствор NaHCO₃, и экстрагировали с помощью метиленхлорида. Объединенную органическую фазу промывали (солевым раствором), высушивали (Na₂SO₄), фильтровали и выпаривали досуха (0,33 г). Неочищенный продукт затем очищали посредством колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (этилацетат:метанол, от 100:0 до 70:30) с получением указанного в заголовке соединения (144 мг). MS m/z (относительная интенсивность, 70 эВ) 247(M+, 20), 232(62), 163(68), 71(24), 57(bp).

Пример 25

3-[ФТОР(2,3,4-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ}-1-ПРОПИЛАЗЕТИДИН

3-[2,3,4-трифторфенил)(фтор)метил]азетидин (90 мг, 0,41 ммоль) растворяли в 1,2-дихлорэтане (5 мл), и добавляли пропиональдегид (0,036 мл, 0,49 ммоль) и уксусную кислоту (0,024 мл, 0,41 ммоль). Смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 5 минут, и затем триацетоксиборогидрид натрия (130,5 мг, 0,62 ммоль) добавляли небольшими порциями к смеси. Итоговую смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 20 часов, и затем добавляли 10% водный раствор NaHCO₃, и экстрагировали с помощью метиленхлорида. Объединенную органическую фазу промывали (солевым раствором), высушивали (Na₂SO₄), фильтровали и выпаривали досуха (95 мг). MS m/z (относительная интенсивность, 70 эВ) 261(M+, 54), 189(18), 171(bp), 169(22), 163(38).

Пример 26

1-ЭТИЛ-3-[ФТОР-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН СОЛЬ ЩАВЕЛЕВОЙ КИСЛОТЫ

3-[3,4,5-трифторфенил)(фтор)метилазетидин (350 мг, 1,60 ммоль) растворяли в 1,2-дихлорэтане (15 мл), и добавляли ацетальдегид (0,105 мл, 1,92 ммоль) и уксусную кислоту (0,092 мл, 1,60 ммоль). Смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 5 минут, и затем триацетоксиборогидрид натрия (508 мг, 2,39 ммоль) добавляли небольшими порциями к смеси. Итоговую смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 20 часов, и затем добавляли 10% водный раствор NaHCO₃, и экстрагировали с помощью метиленхлорида. Объединенную органическую фазу промывали (солевым раствором), высушивали (Na₂SO₄), фильтровали и выпаривали досуха (350 мг). Неочищенный продукт затем очищали посредством колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (этилацетат:метанол, от 100:0 до 75:25) с получением указанного в заголовке соединения (208 мг). Очищенный продукт (195 мг) затем растворяли в 5 мл этанола, и добавляли дигидрат щавелевой кислоты (99,5 мг, 0,79 ммоль), растворенный в этаноле (5 мл), и смесь выпаривали досуха, и неочищенную соль (указанное в заголовке соединение) перекристаллизовывали из метанола/диэтилового эфира: M.p. 129,8°C MS m/z (относительная интенсивность, 70 эВ) 247(M+, 40), 232(bp), 169(29), 163(58), 57(82).

Пример 27

3-[ФТОР(3,4,5-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]-1-ПРОПИЛАЗЕТИДИН

3-[3,4,5-Трифторфенил)(фтор)метил]азетидин (200 мг, 0,91 ммоль) растворяли в 1,2-дихлорэтане (10 мл), и добавляли пропиональдегид (0,079 мл, 1,095 ммоль) и уксусную кислоту (0,052 мл, 0,91 ммоль). Смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 5 минут, и затем триацетоксиборогидрид натрия (290 мг, 1,36 ммоль) добавляли небольшими порциями к смеси. Итоговую смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 20 часов, и затем добавляли 10% водный раствор Na₂CO₃, и экстрагировали с помощью метиленхлорида. Объединенную органическую фазу промывали (солевым раствором), высушивали (Na₂SO₄), фильтровали и выпаривали досуха (193 мг). MS m/z (относительная интенсивность, 70 эВ) 261(М+, 61), 189(18), 171(bp), 169(22), 163(31).

Пример 28

3-[ФТОР(2,3,5,6-ТЕТРАФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИНА СОЛЬ ЩАВЕЛЕВОЙ КИСЛОТЫ

Трет-бутил-3-[(2,3,5,6-тетрафторфенил)(фтор)метил]азетидин-1-карбоксилат (2,27 г, 6,73 ммоль) растворяли в метиленхлориде (15 мл), и добавляли трифторуксусную кислоту (4 мл, 52 ммоль), и смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 1 часа. Затем смесь испаряли, и неочищенный продукт повторно растворяли в 10% Na₂CO₃, и водную фазу экстрагировали с применением этилацетата, и объединенную органическую фазу высушивали (Na₂SO₄), фильтровали и испаряли (выход 1,36 г, 5,72 ммоль). Неочищенный продукт (555 мг, 2,34 ммоль) растворяли в 10 мл этанола, и добавляли дигидрат щавелевой кислоты (295 мг, 2,34 ммоль), растворенный в этаноле (5 мл), и смесь выпаривали досуха, и неочищенную соль (указанное в заголовке соединение) перекристаллизовывали из теплого метанола: M.p. 181,6°C. MS m/z (относительная интенсивность, 70 эВ) 237(М+, 5), 217(41), 189(bp), 181(49), 169(46).

Пример 29

3-[ФТОР(ПЕНТАФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН

Трет-бутил-3-[(2,3,4,5,6-пентафторфенил)(фтор)метил]азетидин-1-карбоксилат (3 г, 8,55 ммоль) растворяли в метиленхлориде (20 мл) и добавляли трифторуксусную кислоту (5 мл, 65 ммоль), и смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 1 часа. Затем смесь испаряли, и неочищенный продукт повторно растворяли в 10% Na₂CO₃, и водную фазу экстрагировали с применением этилацетата, и объединенную органическую фазу высушивали (Na₂SO₄), фильтровали и испаряли (выход 2,1 г). MS m/z (относительная интенсивность, 70 эВ) 255(М+, 3), 208(24), 207(bp), 199(52), 187(35).

Пример 30

3-[ФТОР(2,3,5,6-ТЕТРАФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]-1-МЕТИЛАЗЕТИДИН

3-[2,3,5,6-тетрафторфенил)(фтор)метило]азетидин (85 мг, 0,36 ммоль) растворяли в метиленхлориде (4 мл), и добавляли параформальдегид (37% водный раствор, 0,08 мл, 1,07 ммоль) и уксусную кислоту (0,041 мл, 0,72 ммоль). Смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 15 минут, и затем к смеси добавляли одну порцию триацетоксиборогидрида натрия (227,8 мг, 1,08 ммоль). Итоговую смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 1 часа, и затем добавляли 10% водный раствор Na₂CO₃, и экстрагировали с помощью метиленхлорида. Объединенную органическую фазу промывали солевым раствором, высушивали (Na₂SO₄), фильтровали и выпаривали досуха (67 мг, 0,27 ммоль). MS m/z (относительная интенсивность, 70 эВ) 251(М+, bp), 187(38), 181(66), 169(35), 57(60).

Пример 31

1-ЭТИЛ-3-[ФТОР(2,3,5,6-ТЕТРАФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН СОЛЬ ЩАВЕЛЕВОЙ КИСЛОТЫ

3-[2,3,5,6-тетрафторфенил)(фтор)метил]азетидин (300 мг, 1,265 ммоль) растворяли в 1,2-дихлорэтане (10 мл), и добавляли уксусный альдегид (0,09 мл, 1,65 ммоль), и уксусную кислоту (0,072 мл, 1,27 ммоль). Смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 5 минут, и затем триацетоксиборогидрид натрия (402 мг, 1,9 ммоль) добавляли небольшими порциями к смеси. Итоговую смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 16 часов, и затем добавляли 10% водный раствор NaHCO₃, и экстрагировали с помощью метиленхлорида. Объединенную органическую фазу промывали (солевым раствором), высушивали (Na₂SO₄), фильтровали и выпаривали досуха (306 мг). Неочищенный продукт затем очищали посредством колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (этилацетат:метанол, от 100:0 до 80:20), с получением указанного в заголовке соединения (133 мг). Очищенный продукт (130 мг, 0,49 ммоль) растворяли в 5 мл этанола, и добавляли дигидрат щавелевой кислоты (61,8 мг, 0,49 ммоль), растворенный в этаноле (5 мл), и смесь выпаривали досуха, и неочищенную соль (указанное в заголовке соединение) перекристаллизовывали из метанола/диэтилового эфира: M.p. 145,9°C MS m/z (относительная интенсивность, 70 эВ) 265(М+, 30), 250(bp), 181(39), 163(15), 57(57)

Пример 32

3-[ФТОР(2,3,5,6-ТЕТРАФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]-1-ПРОПИЛАЗЕТИДИН

5 3-[2,3,5,6-тетрафторфенил)(фтор)метил]азетидин (200 мг, 0,84 ммоль) растворяли в 1,2-дихлорэтане (10 мл), и добавляли пропиональдегид (0,09 мл, 1,26 ммоль) и уксусную кислоту (0,048 мл, 0,84 ммоль). Смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 5 минут, и затем триацетоксиборогидрид натрия (321 мг, 1,52 ммоль) добавляли небольшими порциями к смеси. Итоговую смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 16 часов, и затем добавляли 10% водный раствор NaHCO₃, и экстрагировали с помощью метиленхлорида. Объединенную органическую фазу промывали (солевым раствором), высушивали (Na₂SO₄), фильтровали и выпаривали досуха (204 мг). MS m/z (относительная интенсивность, 70 эВ) 279(М+, 94), 217(27), 190(29), 189(bp), 181(35)

Промежуточные соединения, описанные ниже в настоящем раскрытии, были использованы в приведенных выше примерах. Эти промежуточные соединения могут быть приготовлены с применением реакций, описанных ниже, но также могут применяться другие процедуры и реакции, как будет понятно специалистам в данной области техники.

Препарат 1

ТРЕТ-БУТИЛ 3-[(2,3-ДИФТОРФЕНИЛ)(ГИДРОКСИ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН-1-КАРБОКСИЛАТ

К раствору 2,3-дифторбромбензола (10,0 г, 51,8 ммоль) в сухом диэтиловом эфире (120 мл), под азотом при -78°C, был добавлен по каплям н-гексиллитий (2,3 М в гексане, 22,5 мл, 51,8 ммоль). Смесь перемешивали в течение 10 минут, после чего раствор трет-бутила 3-формилазетидин-1-карбоксилата (12,2 г, 49,2 ммоль) в сухом диэтиловом эфире (30 мл) добавляли по каплям. Итоговую смесь перемешивали при -78°C в течение 0,5 ч, и затем переносили в условия температуры окружающей среды и перемешивали в течение 1 ч. Добавляли воду (50 мл), и смесь экстрагировали с применением этилацетата (2×50 мл). Объединенную органическую фазу промывали солевым раствором, высушивали (MgSO₄), фильтровали и выпаривали досуха. Неочищенный продукт затем очищали посредством колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (этилацетат/изооктан, от 0:1 до 1:1) с получением указанного в заголовке соединения (6,55 г). MS m/z (относит. интенсивность, 70 эВ) 30 299(М+, 2), 244(36), 225(29), 153(99), 57(bp).

Препарат 2

ТРЕТ-БУТИЛ 3-[(2,3-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН-1-карбоксилат

Трет-бутил 3-[(2,3-дифторфенил)(гидрокси)метил]азетидин-1-карбоксилат (5,54 г, 18,5 ммоль) растворяли в метиленхлориде (100 мл) и охлаждали до -78°C. Добавляли дезоксофтор (50%, 8,2 мл, 22,2 ммоль) по каплям в течение 10 минут, и итоговую смесь перемешивали при -78°C в течение 0,5 ч, нагревали до температуры окружающей среды и перемешивали в течение 3 ч. Добавляли воду (50 мл), и собирали органическую фазу. Водную фазу экстрагировали с помощью метиленхлорида (2×50 мл), и объединенную органическую фазу высушивали (MgSO₄), фильтровали и испаряли. Неочищенный продукт затем очищали посредством колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (этилацетат/изооктан, от 0:1 до 1:2), с получением указанного в заголовке соединения (2,8 г, 9,2 ммоль). MS m/z (относит. интенсивность, 70 эВ) 301(М+, 2), 246(62), 153(66), 145(34), 57(bp).

Препарат 3

(-)-ТРЕТ-БУТИЛ 3-[(2,3-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН-1-КАРБОКСИЛАТ

Зеркальные изомеры трет-бутила 3-[(2,3-дифторфенил)(фтор)метил]азетидин-1-карбоксилата (2,8 г, 9,3 ммоль) разделяли посредством HPLC на 10-Cellucoat Kromasil (гептан/2-пропанол/диэтиламин, 98:2:0,1). (-)-Зеркальный изомер (1,0 г, 3,3 ммоль). [α]D =-14,6° (метанол).

Препарат 4

(+)-ТРЕТ-БУТИЛ 3-[(2,3-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН-1-КАРБОКСИЛАТ

Зеркальные изомеры трет-бутила 3-[(2,3-дифторфенил)(фтор)метил]азетидин-1-карбоксилата (2,8 г, 9,3 ммоль) разделяли посредством HPLC на 10-Cellucoat Kromasil (гептан/2-пропанол/диэтиламин, 98:2:0,1). (+)-Зеркальный изомер (1,3 г, 4,3 ммоль). [α]D=+29,6° (метанол).

Препарат 5

ТРЕТ-БУТИЛ 3-[(3,5-ДИФТОРФЕНИЛ)(ГИДРОКСИ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН-1-карбоксилат

К раствору 3,5-дифторбромбензола (2,0 г, 10,3 ммоль) в сухом тетрагидрофуране (50 мл) под азотом добавляли Mg (0,26 г, 10,8 ммоль) и крупинку I₂, и смесь мягко нагревали до тех пор, пока не начиналась экзотермическая реакция. Смесь перемешивали в течение 2 ч, после чего по каплям добавляли раствор трет-бутила 3-формилазетидин-1-карбоксилата (1,8 г, 10,3 ммоль) в сухом диэтиловом эфире (20 мл). Итоговую смесь перемешивали в течение 0,5 ч, добавляли насыщенный водный хлорид аммония (50 мл), и собирали органическую фазу. Водную фазу извлекали с помощью этилацетата (2×50 мл). Объединенную органическую фазу промывали солевым раствором, высушивали (MgSO₄), фильтровали и выпаривали досуха. Неочищенный продукт затем очищали посредством колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (этилацетат/изооктан, от 0:1 до 1:1), с получением указанного в заголовке соединения (1,92 г, 6,42 ммоль). MS m/z (относит. интенсивность, 70 эВ) 299(М+, 2), 244(34), 153(54), 127(23), 57(bp).

Препарат 6

ТРЕТ-БУТИЛ 3-[(3,5-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН-1-карбоксилат

Трет-бутил 3-[(3,5-дифторфенил)(гидрокси)метил]азетидин-1-карбоксилат (1,92 г, 6,42 ммоль) растворяли в метиленхлориде (90 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли по каплям трифторид диэтиламиносеры (1,72 мл, 13,02 ммоль), растворенный в метиленхлориде (10 мл), в течение 10 минут, и итоговую смесь перемешивали при 0°C в течение 0,5 ч, нагревали до температуры окружающей среды и перемешивали в течение 0,5 ч. Добавляли воду (50 мл), и собирали органическую фазу. Водную фазу экстрагировали с помощью метиленхлорида (2×50 мл), и объединенную органическую фазу высушивали (MgSO₄), фильтровали и выпаривали. Неочищенный продукт затем очищали посредством колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (этилацетат/изооктан, от 0:1 до 1:3, с получением указанного в заголовке соединения (1,04 г, 3,45 ммоль). MS m/z (относит. интенсивность, 70 эВ) 301(М+, 1), 246(56), 165(31), 153(40), 57(bp).

Препарат 7

ТРЕТ-БУТИЛ 3-[(3,5-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН-1-карбоксилат, E1

Зеркальные изомеры трет-бутила 3-[(3,5-дифторфенил)(фтор)метил]азетидин-1-карбоксилата (1,04 г, 3,45 ммоль) разделяли посредством HPLC на 10-Cellucoat Kromasil (гептан/2-пропанол/диэтиламин, 98:2:0,1).

Препарат 8

ТРЕТ-БУТИЛ 3-[(3,5-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН-1-карбоксилат, E2

Зеркальные изомеры трет-бутила 3-[(3,5-дифторфенил)(фтор)метил]азетидин-1-карбоксилата (1,04 г, 3,45 ммоль) разделяли посредством HPLC на 10-Cellucoat Kromasil (гептан/2-пропанол/диэтиламин, 98:2:0,1).

Препарат 9

ТРЕТ-БУТИЛ 3-[(3,4-ДИФТОРФЕНИЛ)(ГИДРОКСИ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН-1-карбоксилат

К раствору 3,4-дифторбромбензола (4,0 г, 20,7 ммоль) в сухом диэтиловом эфире (50 мл) под азотом добавляли Mg (0,50 г, 20,6 ммоль) и крупинку I₂, и смесь мягко нагревали до тех пор, пока не начиналась экзотермическая реакция. Смесь перемешивали в течение 15 минут, после чего раствор трет-бутила 3-формилазетидин-1-карбоксилата (3,8 г, 20,5 ммоль) в сухом диэтиловом эфире (20 мл) добавляли по каплям. Итоговую смесь перемешивали в течение 15 минут, добавляли воду (50 мл), и собирали органическую фазу. Водную фазу экстрагировали с помощью метил-трет-бутилового эфира (2×50 мл). Объединенную органическую фазу промывали солевым раствором, высушивали (MgSO₄), фильтровали и выпаривали досуха. Неочищенный продукт затем очищали посредством колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (этилацетат/изооктан, от 0:1 до 1:1), с получением указанного в заголовке соединения (4,1 г, 13,7 ммоль). MS m/z (относит. интенсивность, 70 эВ) 299(М+, 1), 244(24), 225(27), 153(72), 57(bp).

Препарат 10

ТРЕТ-БУТИЛ 3-[(3,4-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН-1-карбоксилат

Трет-бутил 3-[(3,4-дифторфенил)(гидрокси)метил]азетидин-1-карбоксилат (4,1 г, 13,7 ммоль) растворяли в метиленхлориде (120 мл) и охлаждали до 0°C. Добавляли по каплям трифторид диэтиламиносеры (3,35 мл, 27,4 ммоль), растворенный в метиленхлориде (30 мл) в течение 10 минут, и итоговую смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч, нагревали до температуры окружающей среды и перемешивали в течение 0,5 ч. Добавляли воду (50 мл), и собирали органическую фазу. Водную фазу экстрагировали с помощью метиленхлорида (2×50 мл), и объединенную органическую фазу высушивали (MgSO₄), фильтровали и выпаривали. Неочищенный продукт затем очищали посредством колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (этилацетат/изооктан, от 0:1 до 1:3, с получением указанного в заголовке соединения (1,04 г, 3,45 ммоль). MS m/z (относит. интенсивность, 70 эВ) 301(М+, 2), 246(49), 153(54), 145(30), 57(bp).

Препарат 11

(2,5-ДИФТОРФЕНИЛ)[1-(ДИФЕНТИЛМЕТИЛ)АЗЕТИДИН-3-ИЛ]МЕТАНОЛ

К раствору комплекса изопропилмагния хлорида-лития хлорида в тетрагидрофуране (1,3 М, 12,5 мл, 16,3 ммоль) добавляли 1-бром-2,5-дифторбензол (3 г, 15,5 ммоль), растворенный в сухом тетрагидрофуране (5 мл), и смесь перемешивали под азотом при температуре окружающей среды в течение 1,5 часов. Реакционную смесь охлаждали до -10°C, добавляли одну порцию 1-(дифенилметил)азетидин-3-карбальдегида (4,1 г, 16,3 ммоль), растворенного в сухом тетрагидрофуране (5 мл), и температуру повышали до 0°C, и смесь перемешивали в течение 20 минут, и затем доводили до температуры окружающей среды и перемешивали в течение дополнительных 30 минут. Реакцию в смеси останавливали с помощью насыщенного раствора хлорида аммония, и реакционную смесь экстрагировали с применением этилацетата. Объединенную органическую фазу промывали солевым раствором, высушивали (Na₂SO₄), фильтровали и выпаривали досуха. Неочищенный продукт (4,76 г) затем очищали посредством колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (этилацетат:метанол, 70:30), с получением указанного в заголовке соединения (1,56 г, 4,27 ммоль). MS m/z (относит. интенсивность, 70 эВ) 365(М+, 15), 288(72), 167(bp), 165(34), 152(20)

Препарат 12

3-[(2,5-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]-1-(ДИФЕНИЛМЕТИЛ)АЗЕТИДИН

(2,5-Дифторфенил)[1-(дифенилметил)азетидин-3-ил]метанол (1,55 г, 4,24 ммоль) растворяли в сухом метиленхлориде (30 мл) и охлаждали до -78°C под азотом.

Добавляли одну порцию трифторида диэтиламиносеры (DAST, 1,04 мл, 8,48 ммоль), и смесь перемешивали в течение 10 минут, и затем доводили до температуры окружающей среды и дополнительно перемешивали в течение 1 часа. Реакцию в смеси останавливали с помощью насыщенного водного раствора NaHCO₃, и проводили экстракцию с помощью метиленхлорида. Объединенную органическую фазу промывали водой, солевым раствором и высушивали (Na₂SO₄), фильтровали, и, наконец, выпаривали досуха. Неочищенный продукт (1,66 г) затем очищали посредством колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (этилацетат:метанол, 80:20), с получением указанного в заголовке соединения (1,22 г, 3,31 ммоль). MS m/z (относит. интенсивность, 70 эВ) 367(М+, 21), 291(20), 290(bp), 167(84), 165(34)

Препарат 13

ТРЕТ-БУТИЛ 3-[(2,4-ДИФТОРФЕНИЛ)(ГИДРОКСИ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН-1-карбоксилат

К раствору комплекса изопропилмагния хлорида-лития хлорида в тетрагидрофуране (1,3 М, 8,4 мл, 10,9 ммоль) добавляли 1-бром-2,4-дифторбензол (2,0 г, 10,4 ммоль), растворенный в сухом тетрагидрофуране (5 мл), и смесь перемешивали под азотом при температуре окружающей среды в течение 1 часа. Реакционную смесь охлаждали до -10°C, и добавляли одну порцию трет-бутил 3-формилазетидин-1-карбоксилата (2,17 г, 11,7 ммоль), растворенного в сухом тетрагидрофуране (5 мл), и температуру повышали до 0°C, и перемешивали в течение 20 минут, и затем доводили до температуры окружающей среды и перемешивали в течение дополнительных 30 минут. Реакцию в смеси останавливали с помощью насыщенного раствора хлорида аммония, и экстрагировали с применением этилацетата. Объединенную органическую фазу промывали солевым раствором, высушивали (Na₂SO₄), фильтровали и выпаривали досуха. Неочищенный продукт (2,27 г) затем очищали посредством колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (этилацетат:метанол, 50:50), с получением указанного в заголовке соединения (0,93 г, 3,11 ммоль). MS m/z (относит. интенсивность, 70 эВ) 299(М+, 2), 244(17), 225(36), 153(97), 57(bp)

Препарат 14

ТРЕТ-БУТИЛ 3-[(2,4-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН-1-карбоксилат

Трет-бутил 3-[(2,4-дифторфенил)(гидрокси)метил]азетидин-1-карбоксилат (0,92 г, 3,09 ммоль) растворяли в сухом тетрагидрофуране (5 мл) и охлаждали до 0°C под азотом. Добавляли одну порцию дезоксофтора (50% в тетрагидрофуране, 1,59 мл, 3,7 ммоль), и смесь перемешивали в течение 1 часа, и затем доводили до температуры окружающей среды и перемешивали в течение дополнительных 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до 0°C, и воду добавляли по каплям, чтобы остановить реакцию в смеси. Итоговый водный раствор экстрагировали с применением этилацетата. Объединенную органическую фазу промывали солевым раствором, высушивали (Na₂SO₄), фильтровали, и, наконец, выпаривали досуха. Неочищенный продукт затем очищали посредством колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (изооктан:этилацетат, от 1:0 до 9:1), с получением указанного в заголовке соединения (0,54 г, 1,8 ммоль). MS m/z (относит. интенсивность, 70 эВ) 301(М+, 2), 246(47), 153(73), 145(33), 57(bp)

Препарат 15

ТРЕТ-БУТИЛ 3-[(2,6-ДИФТОРФЕНИЛ)(ГИДРОКСИ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН-1-карбоксилат

К раствору комплекса изопропилмагния хлорида-лития хлорида в тетрагидрофуране (1,3 М, 6,3 мл, 8,16 ммоль) добавляли 1-бром-2,6-дифторбензол (1,5 г, 7,77 ммоль), растворенный в сухом тетрагидрофуране (3 мл), и смесь перемешивали под азотом при температуре окружающей среды в течение 1 часа. Реакционную смесь охлаждали до -10°C, и добавляли одну порцию трет-бутил 3-формилазетидин-1-карбоксилата (1,5 г, 8,16 ммоль), растворенного в сухом тетрагидрофуране (5 мл), и температуру повышали до 0°C и перемешивали в течение 20 минут, и затем доводили до температуры окружающей среды и перемешивали в течение дополнительных 30 минут. Реакцию в смеси останавливали с помощью насыщенного раствора хлорида аммония и проводили экстракцию с помощью этилацетата. Объединенную органическую фазу промывали солевым раствором, высушивали (Na₂SO₄), фильтровали и выпаривали досуха. Неочищенный продукт (2,47 г) затем очищали посредством колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (изооктан:этилацетат от 100:0 до 65:35), с получением указанного в заголовке соединения (2,05 г, 6,85 ммоль). MS m/z (относит. интенсивность, 70 эВ) 299(М+, 2), 225(37), 154(21), 153(bp), 57(76)

Препарат 16

ТРЕТ-БУТИЛ 3-[(2,6-ДИФТОРФЕНИЛ)(ФТОР)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН-1-карбоксилат

Трет-бутил 3-[(2,6-дифторфенил)(гидрокси)метил]азетидин-1-карбоксилат (2,0 г, 6,81 ммоль) растворяли в сухом метиленхлориде (15 мл) и охлаждали до -78°C под азотом.

Добавляли одну порцию трифторида диэтиламиносеры (DAST, 1,8 мл, 13,6 ммоль), и смесь перемешивали в течение 10 минут, и затем доводили до температуры окружающей среды и перемешивали дополнительно в течение 1 часа. Реакцию в смеси останавливали с помощью насыщенного водного раствора NaHCO₃, и проводили экстракцию с помощью метиленхлорида. Объединенную органическую фазу промывали водой, солевым раствором и высушивали (Na₂SO₄), фильтровали, и, наконец, выпаривали досуха. Неочищенный продукт (1,74 г) затем очищали посредством колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (изооктан:этилацетат, от 100:0 до 85:15), с получением указанного в заголовке соединения (1,22 г, 4,03 ммоль). MS m/z (относит. интенсивность, 70 эВ) 301(М+, 2), 246(54), 153(87), 145(37), 57(100)

Препарат 17

ТРЕТ-БУТИЛ 3-[ГИДРОКСИ (2,3,5-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН-1-карбоксилат

К раствору комплекса изопропилмагния хлорида-лития хлорида в тетрагидрофуране (1,3 М, 5,6 мл, 7,3 ммоль) добавляли 1-бром-2,3,5-трифторбензол (1,5 г, 6,97 ммоль), растворенный в сухом тетрагидрофуране (2 мл), и смесь перемешивали под азотом при температуре окружающей среды в течение 2,5 часов. Реакционную смесь охлаждали до -10°C, и добавляли одну порцию трет-бутил 3-формилазетидин-1-карбоксилата (1,4 г, 7,31 ммоль), растворенного в сухом тетрагидрофуране (3 мл), и температуру повышали до 0°C, и смесь перемешивали в течение 20 минут и затем доводили до температуры окружающей среды и перемешивали в течение дополнительных 30 минут. Реакцию в смеси останавливали с помощью насыщенного раствора хлорида аммония, и проводили экстракцию с помощью этилацетата. Объединенную органическую фазу промывали солевым раствором, высушивали (Na₂SO₄, фильтровали и выпаривали досуха. Неочищенный продукт (2,56 г) затем очищали посредством колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (изооктан:этилацетат, от 100:0 до 80:20), с получением указанного в заголовке соединения (1,02 г, 3,2 ммоль). MS m/z (относит. интенсивность, 70 эВ) 317(М+, 2), 262(33), 199(14), 171(60), 57(bp)

Препарат 18

ТРЕТ-БУТИЛ 3-[ФТОР(2,3,5-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН-1-карбоксилат

Трет-бутил 3-[гидрокси(2,3,5-трифторфенил)метил]азетидин-1- карбоксилат (1,53 г, 4,82 ммоль) растворяли в сухом метиленхлориде (25 мл) и охлаждали до -78°C под азотом.

Добавляли одну порцию трифторида диэтиламиносеры (DAST, 1,27 мл, 9,64 ммоль), и смесь перемешивали в течение 10 минут, и затем доводили до температуры окружающей среды и перемешивали дополнительно в течение 1 часа. Реакцию в смеси останавливали с помощью насыщенного водного раствора NaHCO₃, и проводили экстракцию с помощью метиленхлорида. Объединенную органическую фазу промывали водой, солевым раствором и высушивали (Na₂SO₄), фильтровали, и, наконец, выпаривали досуха. Неочищенный продукт (1,39 г) затем очищали посредством колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (изооктан:этилацетат, от 100:0 до 85:15), с получением указанного в заголовке соединения (0,98 г, 3,06 ммоль). MS m/z (относит. интенсивность, 70 эВ) 319(М+, 2), 264(52), 171(60), 163(31), 57(bp)

Препарат 19

ТРЕТ-БУТИЛ 3-[ГИДРОКСИ(3,4,5-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН-1-карбоксилат

К раствору комплекса изопропилмагния хлорида-лития хлорида в тетрагидрофуране (1,3 М, 5,68 мл, 7,4 ммоль) добавляли 1-бром-3,4,5-трифторбензол (1,5 г, 7,04 ммоль), растворенный в сухом тетрагидрофуране (3 мл), и смесь перемешивали под азотом при температуре окружающей среды в течение 2,5 часов. Реакционную смесь охлаждали до -10°C, и добавляли одну часть трет-бутил 3-формилазетидин-1-карбоксилата (1,41 г, 7,4 ммоль), растворенного в сухом тетрагидрофуране (3 мл), и температуру повышали до 0°C и перемешивали в течение 20 минут, и затем доводили до температуры окружающей среды и перемешивали в течение дополнительных 30 минут. Реакцию в смеси останавливали с помощью насыщенного раствора хлорида аммония, и проводили экстракцию с помощью этилацетата. Объединенную органическую фазу промывали солевым раствором, высушивали (Na₂SO₄), фильтровали и выпаривали досуха. Неочищенный продукт (2,41 г) затем очищали посредством колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (изооктан: этилацетат, от 100:0 до 65:35), с получением указанного в заголовке соединения (1,89 г, 5,95 ммоль). MS m/z (относит. интенсивность, 70 эВ) 317(М+, 2), 262(29), 171(52), 145(16), 57(bp)

Препарат 20

ТРЕТ-БУТИЛ 3-[ФТОР(3,4,5-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН-1-карбоксилат

Трет-бутил 3-[гидрокси(3,4,5-трифторфенил)метил]азетидин-1-карбоксилат (1,59 г, 5,01 ммоль) растворяли в сухом метиленхлориде (15 мл) и охлаждали до -78°C под азотом.

Добавляли одну порцию трифторида диэтиламиносеры (DAST, 1,32 мл, 10,02 ммоль), и смесь перемешивали в течение 10 минут, и затем доводили до температуры окружающей среды и перемешивали дополнительно в течение 1 часа. Реакцию в смеси останавливали с помощью насыщенного водного раствора NaHCO₃, и проводили экстракцию с помощью метиленхлорида. Объединенную органическую фазу промывали водой, солевым раствором и высушивали (Na₂SO₄), фильтровали, и, наконец, выпаривали досуха. Неочищенный продукт (1,6 г) затем очищали посредством колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (изооктан:этилацетат, 100:0 до 85:15), с получением указанного в заголовке соединения (1,2 г, 3,77 ммоль). MS m/z (относит. интенсивность, 70 эВ) 319(М+, 1), 264(33), 171(34), 163(21), 57(bp)

Препарат 21

ТРЕТ-БУТИЛ 3-[ГИДРОКСИ (2,4,6-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН-1-карбоксилат

К раствору комплекса изопропилмагния хлорида-лития хлорида в тетрагидрофуране (1,3 М, 5,74 мл, 7,46 ммоль) добавляли 1-бром-2,4,6-трифторбензол (1,5 г, 7,10 ммоль), растворенный в сухом тетрагидрофуране (2 мл), и смесь перемешивали под азотом при температуре окружающей среды в течение 3 часов. Реакционную смесь охлаждали до -10°C, и добавляли одну порцию трет-бутил 3-формилазетидин-1-карбоксилата (1,38 г, 7,24 ммоль), растворенного в сухом тетрагидрофуране (5 мл), и температуру повышали до 0°C, и смесь перемешивали в течение 20 минут и затем доводили до температуры окружающей среды и перемешивали в течение дополнительных 30 минут. Реакцию в смеси останавливали с помощью насыщенного раствора хлорида аммония, и проводили экстракцию с помощью этилацетата. Объединенную органическую фазу промывали солевым раствором, высушивали (Na₂SO₄), фильтровали и выпаривали досуха. Неочищенный продукт (1,6 г) затем очищали посредством колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (изооктан: этилацетат, от 100:0 до 75:25), с получением указанного в заголовке соединения (1,46 г, 4,6 ммоль). MS m/z (относит. интенсивность, 70 эВ) 317(М+, 2), 262(20), 243(28), 171(bp), 57(90)

Препарат 22

ТРЕТ-БУТИЛ 3-[ФТОР(2,4,6-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН-1-карбоксилат

Трет-бутил 3-[гидрокси(2,4,6-трифторфенил)метил]азетидин-1-карбоксилат (1,45 г, 4,57 ммоль) растворяли в сухом метиленхлориде (15 мл) и охлаждали до -78°C под азотом.

Добавляли одну порцию трифторида диэтиламиносеры (DAST, 1,21 мл, 9,14 ммоль), и смесь перемешивали в течение 10 минут, и затем доводили до температуры окружающей среды и перемешивали дополнительно в течение 1 часа. Реакцию в смеси останавливали с помощью насыщенного водного раствора NaHCO₃ и проводили экстракцию с помощью метиленхлорида. Объединенную органическую фазу промывали водой, солевым раствором и высушивали (Na₂SO₄), фильтровали, и, наконец, выпаривали досуха. Неочищенный продукт (1,31 г) затем очищали посредством колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (изооктан:этилацетат, от 100:0 до 85:15), с получением указанного в заголовке соединения (1,0 г, 3,13 ммоль). MS m/z (относит. интенсивность, 70 эВ) 319(М+, 1), 264(41), 171(76), 163(36), 57(bp)

Препарат 23

ТРЕТ-БУТИЛ 3-[ГИДРОКСИ (2,3,4-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН-1-карбоксилат

К раствору комплекса изопропилмагния хлорида-лития хлорида в тетрагидрофуране (1,3 М, 5,68 мл, 7,4 ммоль) добавляли 1-бром-2,3,4-трифторбензол (1,5 г, 7,04 ммоль), растворенный в сухом тетрагидрофуране (3 мл), и смесь перемешивали под азотом при температуре окружающей среды в течение 2,5 часов. Реакционную смесь охлаждали до -10°C, и добавляли одну часть трет-бутил 3-формилазетидин-1-карбоксилата (1,41 г, 7,4 ммоль), растворенного в сухом тетрагидрофуране (3 мл), и температуру повышали до 0°C, и смесь перемешивали в течение 20 минут и затем доводили до температуры окружающей среды и перемешивали в течение дополнительных 30 минут. Реакцию в смеси останавливали с помощью насыщенного раствора хлорида аммония, и проводили экстракцию с помощью этилацетата. Объединенную органическую фазу промывали солевым раствором, высушивали (Na₂SO₄), фильтровали и выпаривали досуха. Неочищенный продукт затем очищали посредством колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (изооктан: этилацетат, от 100:0 до 70:30), с получением указанного в заголовке соединения (2,0 г, 6,3 ммоль). MS m/z (относит. интенсивность, 70 эВ) 317(М+, 2), 262(29), 243(18), 171(81), 57(bp)

Препарат 24

ТРЕТ-БУТИЛ 3-[ФТОР(2,3,4-ТРИФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН-1-КАРБОКСИЛАТ

Трет-бутил 3-[гидрокси(2,3,4-трифторфенил)метил]азетидин-1-карбоксилат (2,0 г, 6,3 ммоль) растворяли в сухом метиленхлориде (25 мл) и охлаждали до -78°C под азотом.

Добавляли одну часть трифторида диэтиламиносеры (DAST, 1,66 мл, 12,6 ммоль), и смесь перемешивали в течение 10 минут, и затем доводили до температуры окружающей среды и перемешивали дополнительно в течение 1 часа. Реакцию в смеси останавливали с помощью насыщенного водного раствора NaHCO₃ и проводили экстракцию с помощью метиленхлорида. Объединенную органическую фазу промывали водой, солевым раствором и высушивали (Na₂SO₄), фильтровали, и, наконец, выпаривали досуха. Неочищенный продукт (1,55 г) затем очищали посредством колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (изооктан:этилацетат, от 100:0 до 85:15), с получением указанного в заголовке соединения (1,2 г, 3,8 ммоль). MS m/z (относит. интенсивность, 70 эВ) 319(М+, 2), 264(45), 171(55), 163(27), 57(bp).

Препарат 25

ТРЕТ-БУТИЛ 3-[ГИДРОКСИ(2,3,5,6-ТЕТРАФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН-1-карбоксилат

1-бром-2,3,5,6-тетрафторбензол (1,59 мл, 12,71 ммоль) растворяли в сухом диэтиловом эфире (30 мл) под атмосферой азота. Затем добавляли магний (350 мг, 14,41 ммоль) и несколько крупиц I2. Добавляли 1,2-дибромэтан (0,011 мл, 0,13 ммоль), и итоговую смесь перемешивали при комнатной температуре в течение одного часа. Трет-бутил 3-формилазетидин-1-карбоксилат (2,55 г, 13,34 ммоль), растворенный в сухом диэтиловом эфире (20 мл), добавляли по каплям, плюс 15 мл сухого тетрагидрофурана, и итоговую смесь перемешивали в течение одного часа при комнатной температуре. Реакцию в смеси останавливали с помощью насыщенного раствора хлорида аммония, и проводили экстракцию с помощью этилацетата. Объединенную органическую фазу промывали солевым раствором, высушивали (Na₂SO₄), фильтровали, и, наконец, выпаривали досуха. Неочищенный продукт (4,58 г) затем очищали посредством колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (изооктан:этилацетат, от 100:0 до 70:30), с получением указанного в заголовке соединения (2,8 г, 8,35 ммоль). MS m/z (относит. интенсивность, 70 эВ) 335(М+, 1), 280(36), 217(17), 10 189(67), 57(bp).

Препарат 26

ТРЕТ-БУТИЛ 3-[ФТОР(2,3,5,6-ТЕТРАФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН-1-карбоксилат

Трет-бутил 3-[гидрокси(2,3,5,6-тетрафторфенил)метил]азетидин-1-карбоксилат (2,79 г, 8,36 ммоль) растворяли в сухом метиленхлориде (30 мл) и охлаждали до -78°C под азотом. Добавляли одну порцию трифторида диэтиламиносеры (DAST, 2,2 мл, 16,6 ммоль), и смесь перемешивали в течение 10 минут, и затем доводили до температуры окружающей среды и перемешивали дополнительно в течение 1 часа. Реакцию в смеси останавливали с помощью насыщенного водного раствора NaHCO₃ и проводили экстракцию с помощью метиленхлорида. Объединенную органическую фазу промывали водой, солевым раствором и высушивали (Na₂SO₄), фильтровали, и, наконец, выпаривали досуха. Неочищенный продукт (2,72 г) затем очищали посредством колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (изооктан:этилацетат, от 100:0 до 85:15), с получением указанного в заголовке соединения (2,28 г, 6,76 ммоль). MS m/z (относит. интенсивность, 70 эВ) 337(М+, 1), 282(44), 189(35), 181(23), 57(bp).

Препарат 27

ТРЕТ-БУТИЛ 3-[ГИДРОКСИ(2,3,4,5,6-ПЕНТАФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН-1-карбоксилат

1-бром-2,3,4,5,6-пентафторбензол (1,98 мл, 12,03 ммоль) растворяли в сухом диэтиловом эфире (30 мл) под атмосферой азота. Затем добавляли магний (321 мг, 13,23 ммоль) и несколько крупиц I2. Добавляли 1,2-дибромэтан (0,0104 мл, 0,121 ммоль), и итоговую смесь перемешивали при комнатной температуре в течение одного часа. Трет-бутил 3-формилазетидин-1-карбоксилат (2,41 г, 12,63 ммоль), растворенный в сухом диэтиловом эфире (20 мл), добавляли по каплям, и итоговую смесь перемешивали в течение одного часа при комнатной температуре. Реакцию в смеси останавливали с помощью насыщенного раствора хлорида аммония, и проводили экстракцию с помощью этилацетата. Объединенную органическую фазу промывали солевым раствором, высушивали (Na₂SO₄), фильтровали, и, наконец, выпаривали досуха. Неочищенный продукт (4,12 г) затем очищали посредством колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (изооктан:этилацетат, от 100:0 до 65:35), с получением указанного в заголовке соединения (3,38 г, 9,58 ммоль). MS m/z (относит. интенсивность, 70 эВ) 353(М+, 1), 298(33), 235(14), 207(65), 57(bp).

Препарат 28

ТРЕТ-БУТИЛ 3-[ФТОР(2,3,4,5,6-ПЕНТАФТОРФЕНИЛ)МЕТИЛ]АЗЕТИДИН-1-карбоксилат

Трет-бутил 3-[гидрокси(2,3,4,5,6-пентафторфенил)метил] азетидин-1-карбоксилат (3,38 г, 9,57 ммоль) растворяли в сухом метиленхлориде (30 мл) и охлаждали до -78°C под азотом. Добавляли одну порцию трифторида диэтиламиносеры (DAST, 2,52 мл, 19,14 ммоль), и смесь перемешивали в течение 10 минут, и затем доводили до температуры окружающей среды и перемешивали дополнительно в течение 1 часа. Реакцию в смеси останавливали с помощью насыщенного водного раствора NaHCO₃ и проводили экстракцию с помощью метиленхлорида. Объединенную органическую фазу промывали водой, солевым раствором и высушивали (Na₂SO₄), фильтровали, и, наконец, выпаривали досуха. Неочищенный продукт (3,48 г) затем очищали посредством колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (изооктан:этилацетат, от 100:0 до 85:15), с получением указанного в заголовке соединения (3,05 г, 8,58 ммоль). MS m/z (относит. интенсивность, 70 эВ) 355(М+, 1), 300(37), 207(33), 199(24), 57(bp).

Следующие тесты применялись для оценки соединений в соответствии с раскрытым в настоящем описании.

Тест in vivo: Поведение

Поведенческая активность была измерена c использованием восьми мониторов активности Digiscan (RXYZM (16) TAO, Omnitech Electronics, Колумбус, Огайо, США), подключенных к Omnitech Digiscan Analyzer и компьютеру Apple Macintosh, оборудованному платой цифрового интерфейса (DIO NB 24, National Instruments, США). Каждый монитор активности состоял из квадратного металлического каркаса (W×L=40см×40см), оборудованного фотодатчиками. Во время измерений поведенческой активности крысу помещали в прозрачную акриловую клетку (W×L×H, 40×40×30 см), которую, в свою очередь, размещали в мониторе активности. Каждый монитор активности был оборудован тремя рядами инфракрасных фотодатчиков, при этом каждый ряд состоял из 16 датчиков. Два ряда были размещены вдоль передней и боковой сторон клетки под углами 90°, и третий ряд был размещен на 10 см выше дна в целях измерения вертикальной активности. Фотодатчики были размещены с интервалами 2,5 см. Каждый монитор активности был вставлен в идентичный ослабляющий звук и свет бокс, содержащий слабую лампу и вентилятор.

Программное обеспечение было написано с применением объектно-ориентированного программирования (LabVIEW™, National Instruments, Остин, Техас, США).

Поведенческие данные от каждого монитора активности, представляющие положение (горизонтальный центр тяжести и вертикальную активность) животного в каждый момент времени, были записаны на частоте дискретизации, составляющей 25 Гц, и собраны с использованием специально написанного приложения LABView™. Данные из каждой процедуры записи сохранились и анализировались в отношении пройденного расстояния. Каждый сеанс записи поведения продолжался 60 минут и начинался приблизительно через 5 минут после инъекции тестируемого соединения.

Соединения, раскрытые в настоящем описании, были протестированы в отношении влияния на спонтанную двигательную активность у не подвергавшихся ранее лечению крыс Спрага-Доули (на основании суммарного расстояния, пройденного в течение 0-60 минут после введения дозы), и с дозировками до 33 мкмоль/кг (подкожно).

Отсутствовали какие-либо значимые эффекты, что указывает на отсутствие существенного влияния протестированных соединений на сенсорно-двигательные способности (таблица 1)

Таблица 1: Влияние соединений, раскрытых в настоящем описании, на двигательную активность у крыс, которым ранее не вводился лекарственный препарат.

Пример 11 мкмоль/кг 33 мкмоль/кг Пример 1 61% 91% Пример 2 152% 159%* Пример 3 68% 46%

Животные были помещены в измерители подвижности непосредственно после введения лекарства, и двигательную активность записывали в течение 60 минут (отсчеты/60 мин). Результаты представлены как процент от среднего по контролям. Статистическую значимость оценивали с применением двустороннего критерия Стьюдента по сравнению с контрольными группами. ^*обозначает p<0,05, n=5,

Анализ in vivo: Нейрохимия

После сеансов поведенческой активности крысы были обезглавлены, и их мозги быстро вынимали и помещали на ледяные чашки Петри. Мозги были разрезаны на правую и левую части, при этом правую часть анализировали в отношении нейрохимических веществ посредством HPLC и левую часть анализировали в отношении экспрессии генов. Лимбический передний мозг, стриатум, фронтальная кора, гиппокамп и остальные части полушария каждой крысы были разрезаны и заморожены. Каждая часть мозга затем была проанализирована в отношении содержания в ней моноаминов и их метаболитов.

Моноаминные трансмиттерные вещества (NA (норадреналин), DA (допамин), 5-HT (серотонин)), а также одна соответствующая кислота, (DOPAC (3,4-дигидроксифенилуксусная кислота), были определены количественно в гомогенатах мозговой ткани посредством разделения на HPLC и электрохимического обнаружения.

Способ анализа основан на двух хроматографических разделениях, выделенных для аминов или кислот. Две хроматографических системы совместно используют общий автоматический инжектор с 10-портовым клапаном и двумя пробоотборными петлями для одновременной инжекции на этих двух системах. Обе системы были оборудованы колонками с обращенной фазой (Luna C18(2), dp 3 мкм, 50^*2 мм i.d., Phenomenex), и электрохимическое обнаружение выполняли на двух потенциалах на стеклографитовых электродах (MF 1000, Bioanalytical Systems, Inc.). Элюат проходит T-соединение к ячейке обнаружения или к сливному отверстию. Это достигается с помощью двух электромагнитных клапанов, которые блокируют сливное отверстие или отверстие детектора. Посредством препятствования достижения хроматографическим фронтом детектора, получают лучшие условия обнаружения. Водная подвижная фаза (0,4 мл/мин) для кислотной системы содержит 14мМ лимонную кислоту, 10 мМ цитрат натрия, 15% метанол (объем/объем) и 0,1 мМ EDTA. Потенциалы обнаружения относительно контроля Ag/AgCl составляют 0,45 и 0,60 В. Водная подвижная фаза для образования ионных пар (0,5 мл/мин) для аминной системы содержит 5 мМ лимонную кислоту, 10 мМ цитрат натрия, 9% метанол (объем/объем), 10,5% MeCN (объем/объем), 0,45 мМ декансульфоновую кислоту и 0,1 мМ EDTA. Потенциалы обнаружения относительно контроля Ag/AgCl составляют 0,45 и 0,65 В.

Было показано, что соединения, раскрытые в настоящем описании, повышают уровни DOPAC с предпочтением по отделам во фронтальной коре (таблица 2).

Таблица 2: Влияние на уровни DOPAC в ткани в двух различных отделах головного мозга после подкожного введения крысам (33 мкмоль/кг)

Соединение DOPAC в стриатуме ± SEM DOPAC во фронтальной коре ± SEM Пример 1 100±8 188±20** Пример 3 83±2** 161±6*** Пример 6 76±3* 139±10**

Каждое из соединений примера 1, примера 3 и примера 6, соответственно, было введено подкожно (s.c) за 65 минут до умерщвления животного. Результаты DOPAC представлены как процент от среднего по контролям ± SEM (стандартная ошибка среднего значения). Статистическую значимость оценивали с применением двустороннего критерия Стьюдента по сравнению с контрольными группами. ^*обозначает p<0,05, ^**p<0,01, ^***p<0,001, n=5.

Тест in vivo: оральная биологическая доступность

Эксперименты выполняли спустя 48 часов после имплантации артериальных и венозных катетеров. Тестируемое соединение вводили перорально в концентрации 12,5 мкг/кг или внутривенно в концентрации 5 мкг/кг с применением венозных катетеров, n=3 на группу. Образцы артериальной крови затем собирали в течение шести часов в 0, 3, 9, 27, 60, 120, 180, 240, 300 и 360 минут после введения тестируемого соединения. Оральную биологическую доступность вычисляли как отношение AUC (площадь под кривой), полученной после перорального введения, к AUC, полученной после внутривенного введения для каждой крысы. Параметр AUC вычисляли согласно следующему:

AUC: площадь под кривой плазменной концентрации в зависимости от времени с начала отсчета времени до последнего измерения концентрации (Clast), вычисленная с помощью логарифмического/линейного метода трапеций.

Уровни тестируемого соединения измеряли посредством жидкостной хроматографии-масс-спектрометрии (LC-MS) (Hewlett-Packard серия 1100MSD). Модуль LC-MS включает в себя насос для четырехкомпонентных смесей, вакуумный дегазатор, термостатированный автоматический дозатор, термостатированное колоночное отделение, детектор на диодной матрице и распылительную камеру API-ES. Обработка данных выполнялась с помощью системы HP ChemStation версия 06.03. Настройки инструмента: режим MSD: контроль заданных ионов (SIM) MSD, полярность: положительная, температура газа: 350°C, сушильный газ: 13,0 л/мин, распыляемый газ: 345 кПа, капиллярное напряжение: 5000 В, напряжение фрагментора: 70 В

Аналитическая колонка: ACE EXCEL 3 C18-PFP (3,0*100 мм, 3,0 мкм) при 20°C. Подвижная фаза представляла собой уксусную кислоту (0,03%) (растворитель A) и ацетонитрил (растворитель B). Скорость потока подвижной фазы составляла 0,5 мл/мин. Элюция начиналась при 5% растворителя B, затем линейно возрастая до 70% за 7 минут.

Процедура экстракции:

100 мкл образцов плазмы смешивали с 400 мкл ACN, содержащим внутренний стандарт. После смешивания образцы центрифугировали в течение 10 минут, при 4°C, на 14000 об/мин. Супернатанты переносили в другие пробирки и испаряли под потоком азота. Остаток затем растворяли в 150 мкл 0,1% HAc, центрифугировали и переносили в 100 мкл стеклянные пробирки для анализа LC-MS (инъецировали 10 мкл). Контролировали селективный ион (MH+). Строили калибровочную кривую в диапазоне 1-500 пкмоль путем добавления соответствующего количества тестируемых соединений к пустым образцам плазмы.

Анализ in vitro: метаболическая устойчивость в микросомах печени крыс

Объединенные микросомы печени крыс-самцов (RLM) (20 мг/мл) были закуплены у BD Bioscience (#452501). Объединенные микросомы печени собак-самцов (DLM) (20 мг/мл) были закуплены у BD Bioscience (#452601).

Объединенные микросомы печени человека (HLM) (20 мг/мл) были закуплены у BD Bioscience (#452161). 1 мкл тестируемого вещества в концентрации 0,2 или 1 мМ разбавляли в воде, и 10 мкл микросом печени крыс в концентрации 20 мг/мл смешивали со 149 мкл буфера 1 при 37°C, и реакцию запускали путем добавления 40 мкл NADPH в концентрации 4,1 мг/мл. После 15 или 60 минут инкубации при в 37°C в нагревательном блоке (нагреватель LAB-LINE MULTI-BLOK или термошейкер lab4you TS-100 на 700 об/мин) реакция была остановлена путем добавления 100 мкл чистого ацетонитрила. Белковый осадок затем удаляли путем удаления осадка после центрифугирования на 10000 об/мин в течение 10 минут (Heraeus, Biofuge fresco) при 4°C. Тестируемое соединение анализировали с применением HPLC-MS (Hewlett-Packard серия 1100MSD) с использованием колонки Zorbax SB-C18 (2,1*150 мм, 5 мкм) с использованием 0,03% муравьиной кислоты и ацетонитрила в качестве подвижной фазы (градиента) или ACE EXCEL 3 C18-PFP (3,0*100 мм, 3,0 мкм) с использованием 0,03% муравьиной кислоты и ацетонитрила в качестве подвижной фазы (градиента). 15 мин оборот вычисляли как долю тестируемого соединения, удаленную после 15 минут, выраженную в процентах от уровня в 0 мин, то есть, 100*[конц. тестируемого соединения в 0 мин - концентрация в 15 минут]/конц. в 0 минут. Протоколы для инкубации с микросомами печени приведены в Crespi CL и Stresser MD, J Pharm Tox Meth, 2000, 44; 325-31 и Renwick AB и соавт., Xenobiotica, 2001, 31(4); 187-204.

Микродиализ

Крысы-самцы Спрага-Доули, весящие 280-320 г, использовались в течение экспериментов. Перед экспериментом животные проживали в группах, максимум пять животных в каждой клетке, со свободным доступом к воде и еде. Животные проживали в течение по меньшей мере одной недели до хирургии и использования в экспериментах.

Модифицированная версия (Waters и соавт., J Neural Transm Gen Sect, 1994, 98(1); 39-55) зонда I-формы (Santiago и Westerink, N-S Arch Pharmacol, 1990, 342; 407-14) с сополимером полиакрилонитрила AN69/метилсульфоната натрия (HOSPAL; o.d/i.d. 310/220 мкм: мембрана для диализа (Gambro, Лунд, Швеция)) использовалась в экспериментах по микродиализу. В дорсальном стриатуме использовались зонды с экспонированной длиной 3 мм из мембраны для диализа, и в префронтальной коре соответствующая длина составляла 2,5 мм. Крысы были прооперированы под анестезией из ингаляции изофлюрана при размещении в стереотаксическом устройстве Kopf. Координаты были вычислены относительно брегмы; дорсальный стриатум AP+1,0, ML ± 2,6, DV 6,2; Пф кора, AP+3,2, ML ±1,2, DV-4,0 8°, согласно Пэксиносу и Уотсону (New York, Academic Press, 1986; рисунок 8 и рисунок 14). Зонд для диализа был размещен в трепанационном отверстии при стереотаксической хирургии и цементирован фосфатиновым зубным цементом (DAB Dental).

Крысы были размещены индивидуально в клетках в течение 48 ч перед экспериментами по диализу, что позволяло им регенерировать после хирургии и минимизировать риск лекарственных взаимодействий с анестезирующими средствами во время последующих экспериментов. В течение этого периода у крыс был свободный доступ к еде и воде. В день эксперимента крысы были подключены к микроперфузионному насосу через шарнирное соединение и были помещены в клетку, где они могли двигаться свободно в пределах ее ограничений. Среда перфузии представляла собой физиологический раствор, содержащий (в ммоль/л): NaCl; 140, CaCl2; 1,2, KCl; 3,0, MgCl2; 1,0 (Moghaddam и Bunney. Neurochem., 1989, 53; 652-4). Насос был настроен на скорость перфузии, составляющую 2 мкл/мин, и образец объемом 40 мкл собирали каждые 20 минут.

Крысы подвергались перфузии по меньшей мере в течение 40 минут до начала сбора образцов. Пять фракций из каждых 20 минут были собраны, и последние три использовались для установления базового уровня. После накопления начальных фракций начиналось введение фармакологических веществ в эксперименте по диализу. Тестовые соединения вводили посредством инъекции (подкожно) в объеме 5 мл/кг, с использованием 0,9% NaCl (солевой раствор) в качестве носителя.

Способ анализа был основан на двух хроматографических разделениях, относящихся к аминам или кислотам. Две хроматографических системы совместно использовали общий автоматический инжектор с 10-портовым клапаном и двумя пробоотборными петлями для одновременной инжекции на этих двух системах.

Кислоты были отделены посредством хроматографии с обращенной фазой, тогда как амины были отделены посредством хроматографии с обращенной фазой с образованием ионов, которой предшествовало разделение с обращенной фазой в конфигурации с переключением колонок. Использовали три разделительных колонки (Luna C18(2), dp 3 мкм, 2 мм i.d., Phenomenex) различных длин. Электрохимическое обнаружение выполняли на стеклографитовых электродах (MF 1000, Bioanalytical Systems, Inc.)

Водная подвижная фаза (0,6 мл/минуты) для кислотной системы содержала 40мМ лимонную кислоту, 10мМ вторичный кислый фосфат калия, 8-11% метанол (объем/объем) и 0,1 мМ EDTA. Длина колонки составляла 30 мм, и потенциал обнаружения относительно контроля Ag/AgCl составлял 0,74 В.

Водная подвижная фаза для образования ионных пар (0,4 мл/мин) для аминной системы содержала 5 мМ лимонную кислоту, 10мМ цитрат натрия, 9% ацетон (объем/объем), 3% тетрагидрофуран (объем/объем), 0,025 мМ додекансульфокислоту и 0,1 мМ EDTA. Длина колонки составляла 50 мм, и предшествующая колонка имела длину 20 мм. Потенциалы обнаружения относительно Ag/AgCl составляли 0,45 и 0,65 В. Водная подвижная фаза для сопряженного разделения обратной фазы была идентична мобильной фазе для образования ионов, за исключением того, что додекансульфокислоту не добавляли.

После эксперимента крыс отсоединяли от перфузионного насоса, умерщвляли с использованием ветеринарного пентобарбитала и обезглавливали. Крысиные мозги быстро вынимали и хранили на -20°C в течение около 30 минут до последующего контроля локализации зонда. Комитет по этике отношений к животным, Гетеборг, Швеция одобрил процедуры, примененные в этих экспериментах.

Анализ данных: Только результаты для крыс с правильно размещенными зондами диализа, в соответствии с проверенным посредством визуального посмертного исследования мозговой ткани, были включены в статистические анализы. Исходные значения до введения лекарственного средства для каждого анализируемого вещества и области были вычислены путем усреднения уровней, измеренных в трех последовательных фракциях, собранных непосредственно перед введением тестируемого соединения. Содержание диализата моноаминов в каждый момент времени после введения дозы затем вычисляли как процент от исходных уровней. Данные для всех крыс затем усредняли по каждому моменту времени. В таблицах, представленных в настоящем описании, показаны максимальные увеличения, наблюдаемые после введения дозы, то есть, максимальные значения средних процентов от исходного уровня до введения лекарственного средства. Количество крыс, используемых для вычисления средних процентов для каждого анализируемого вещества и области, также приведено в таблицах.

С применением микродиализа в мозгу in vivo было показано, что соединения, раскрытые в настоящем описании, повышали внеклеточные уровни допамина и норэпинефрина с предпочтением по области в отношении фронтальной коры (FC) по сравнению со стриатумом (Stri). В некоторых случаях серотонин также повышался в отделах головного мозга (таблица 3).

Таблица 3: максимальный эффект по сравнению с исходными значениями (процент контроля ± SEM) для 16,7^* и 50 мкмоль/кг подкожно.

Соединение NA Stri ± SEM DA Stri ± SEM 5-HT Stri ± SEM NA FC ± SEM DA FC ± SEM 5-HT FC ± SEM Пример 1* 150±30^c 135±19^d 171±21^c 688±102^e 495±58^e 146±8^e Пример 1 145^a 204±90^b 184^a 2018±411^c 1534±205^c 188±16^C Пример 2 126±7^b 149±7^b 249±5^b 394±273^b 580±223^b 253±92^b Пример 3* 137^a 116±4^C 124±6^C 534±45^c 444±51^c 137±16^c Пример 4* 122^a 116^a 198^a 198^a 226^a 170^a Пример 5 480^a 136±4^b 435±61^b 1107±399^b 330±75^b 234^a Пример 6 1375^a 242^a 208^a 2374±1390^b 1354±567^b 182±12^b Пример 7 nd** 130^a 213^a 570±6^b 860±283^b 404±21^b Пример 8 nd 133±15^b 402±12^b 400±28^b 549±163^b 428±118^b Пример 9 860^a 127±13^b 231±106^b 840±122^b 1019±397^b 207±21^b Пример 11 nd 85±14^b 366^a 342^a 263^a 236^a Пример 12 nd 131^a 359±105^b 214±28^b 252±70^b 322±4^b Пример 16 nd 139±4^b 313±23^b 272±58^b 229±23^b 197±124^b Пример 19 nd 144±10^c 170±63^c 354±54^c 399±30^c 212±15^c Пример 20 nd 111^a 145^a 264^a 362^a 171^a Пример 22 nd 158^a nd 1261±21^b 654±212^b 140^a

^an=1, ^bn=2, ^cn=3, ^dn=4, ^en=7; ^**nd=данные отсутствуют

Анализ мРНК

Животные были умерщвлены посредством декапитации через 60 минут после инъекции препаратов, и мозги были рассечены на четыре различных области: лимбическая система (содержащая прилежащее ядро, большинство частей обонятельного бугорка, передний палеостриатум), стриатум, фронтальная кора, гиппокамп и остальная кора.

Тотальная РНК была выделена гуанидинизотиоцианатным способом (Chomczynski P и Sacchi N, Anal Biochem, 1987, 162(1); 156-9). Гранулы РНК были растворены в не содержащей РНКаз воде и хранились на -80°C. Концентрация образцов была определена спектрофотометрическим способом посредством NanoDrop ND1000 (Saveen Werner). Значение показателя качества и значение целостности рРНК были измерены с помощью Experion (Bio-rad).

Двухэтапную обратную транскрипцию выполняли с применением набора SuperScript III (Invitrogen). 1 мкг тотальной РНК был подвергнут обратной транскрипции с 5 мкл реакционной смеси 2XRT, 1 мкл смеси ферментов RT, в суммарном объеме, доведенном до 10 мкл обработанной DEPC водой. Добавляли 1 ед. РНК-азы E. coli H. кДНК была разведена в 40 раз и хранилась на -20 °C.

Три последовательности (один интересующий ген и два контрольных гена) совместно амплифицировали в триплексной ПЦР. Для измерений ПЦР в реальном времени: 5 мкл реакционной кДНК амплифицировали в 20 мкл реакционных смесях, содержащих 10 мкл PerfeCta Multiplex qPCR SuperMix (Quanta, VWR), 3,5 мкл не содержащей РНКаз воды, 0,15 мкМ каждого праймера и 0,1 мкМ каждого зонда. ПЦР в реальном времени измеряли на CFX96(Bio-rad), используя следующие настройки для всех генов: 3 мин предварительной инкубации на 95°C, затем 40 циклов денатурации на 95°C в течение 15 с, отжиг и удлинение на 60°C в течение 1 минуты.

Референсными генами являлись PRT и циклофилин.

Было показано, что соединения, раскрытые в настоящем описании, повышают уровни мРНК Arc с предпочтением по отделам для фронтальной коры (таблица 3).

Таблица 4: Влияние на уровни в ткани Arc в двух различных отделах головного мозга после подкожного введения крысам (33 мкмоль/кг)

Соединение Arc в стриатуме ± SEM Arc во фронтальной коре ± SEM Пример 1 133±9* 169±8** Пример 3 90±7 137±6*

Соединения из примера 1 и примера 3, соответственно, вводили подкожно за 65 минут до умерщвления животных. Результаты представлены как процент от средних значений контроля ± SEM. Статистическую значимость оценивали с применением двустороннего критерия Стьюдента по сравнению с контрольными группами. ^*обозначает p<0,05, ^** p<0,01, n=5

СПИСОК ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

Последовательности праймеров и зондов для измерения arc были следующими:

Регулируемый активностью ген (Arc) (код доступа U19866)

Смысловая:5'- GGA GTT CAA GAA GGA GTT TC-3' (SEQ ID (идентификатор последовательности) NO:1)

Антисмысловая 5'- CCA CAT ACA GTG TCT GGT A -3' (SEQ ID NO:2)

Зонд: CCG CTT ACG CCA GAG GAA CT (SEQ ID NO:3)

Краситель: 5'FAM Гаситель: 3'BHQ1

Размер продукта: 149

Гипоксантин-фосфорибозилтрансфераза (HPRT) (код доступа AF001282)

Смысловая:5'- AGG GAT TTG AAT CAT GTT TG -3' (SEQ ID NO:4)

Антисмысловая 5'- CTG CTA GTT CTT TAC TGG C -3' (SEQ ID NO:5)

Зонд: TGT AGA TTC AAC TTG CCG CTG TC (SEQ ID NO:6)

Краситель: 5'HEX Гаситель: 3'BHQ1

Размер продукта: 121

Циклофилин A (цикло) (код доступа M19533)

Смысловая:5'- CTG GAC CAA ACA CAA ATG-3' (SEQ ID NO:7)

Антисмысловая 5'- ATG CCT TCT TTC ACC TTC -3' (SEQ ID NO:8)

Зонд: TTG CCA TCC AGC CAC TCA GT (SEQ ID NO:9)

Краситель: 5'Техасский красный Гаситель: 3'BHQ2

Размер продукта: 100

Последовательности праймеров и зондов для измерения bdnf, cfos, gad, glud, penk были следующими:

Нейротрофический фактор головного мозга (bdnf) (код доступа NM_012513)

Смысловая:5'- AAA TTA CCT GGA TGC CGC AAA C-3' (SEQ ID NO:10)

Антисмысловая 5'- TGT GAC CCA CTC GCT AAT ACT G-3' (SEQ ID NO:1 1 )

Зонд: CAC ACA CGC TCA GCT CCC CAC GG (SEQ ID NO: 12)

Краситель: 5'FAM Гаситель: 3'BHQ1

Размер продукта: 106

Прото-онкоген Rattus norvegicus (c-fos) (код доступа DQ089699)

Смысловая:5'- CAG AGC ATC GGC AGA AGG-3' (ref N Zoric) (SEQ ID NO: 13) Антисмысловая 5'- AGT TGA TCT GTC TCC GCT TGG-3' (SEQ ID NO: 14)

Зонд: TCT GTC AGC TCC CTC CTC CGA TTC CG (SEQ ID NO: 15)

Краситель: 5'FAM Гаситель: 3'BHQ1

Размер продукта: 155

Декарбоксилаза глутаминовой кислоты (GAD 67) (код доступа 34445)

Смысловая:5'-CTG TTT ATG GAG CGT TTG ATC C-3' (SEQ ID NO:16)

Антисмысловая:5'-GAC TGA GAC TGA CCT TTC TAT G-3' (SEQ ID NO:17)

Зонд: GAC TGA ATT GGC CCT TTC TAT G (SEQ ID NO:18)

Краситель: 5'FAM Гаситель: 3'BHQ1

Размер продукта: 153

Глутаматдегидрогеназа (glud) (код доступа NM_012570)

Смысловая:5'-AGC CTC TCC TTC CCC ATC C-3' (SEQ ID NO: 19)

Антисмысловая 5'-CGC CTT CAC CTC ATC CAC AC-3' (SEQ ID NO:20)

Зонд: AGC ACA GCC AGC ACC GCA CGC (SEQ ID NO:21 )

Краситель: 5'FAM Гаситель: 3'BHQ1

Размер продукта: 141

Препроэнкефалин (код доступа NM_017139.1)

Смысловая:5'-CAT GTG CTG CTT GTG CTG T-3' (SEQ ID NO:22)

Антисмысловая 5'-CAG TTG GGT TCA CGG GTT T-3' (SEQ ID NO:23)

Зонд: TGC CCT CGT GGT CTG GAT AAC TGC (SEQ ID NO:24)

Краситель: 5'FAM Гаситель: 3'BHQ1

Размер продукта: 228

Гипоксантин-фосфорибозилтрансфераза (HPRT) (код доступа AF001282)

Смысловая:5'-GGC CAG ACT TTG TTG GAT TTG-3' (SEQ ID NO:25)

Антисмысловая 5'-CCG CTG TCT TTT AGG CTT TG-3' (SEQ ID NO:26)

Зонд: TTT CCA CTT TCG CTG ATG ACA CAA ACA T (SEQ ID NO:27) Краситель: 5'HEX Гаситель: 3'BHQ1

Размер продукта: 144

Циклофилин A (цикло) (код доступа M19533)

Смысловая:5'-GTC TCT TTT CGC CGC TTG CT-3' (SEQ ID NO:28)

Антисмысловая 5'-TCT GCT GTC TTT GGA ACT TTG TCT G-3' (SEQ ID NO:29)

Зонд: ATG GTC AAC CCC ACC GTG TTC TTC GAC A (SEQ ID NO:30)

Краситель: 5' техасский красный Гаситель: 3'BHQ2

Размер продукта: 127

Корректные ПЦР-продукты подтверждают электрофорезом в агарозном геле (2%), продукты PCR очищают набором для ПЦР-очистки Qiagen (Валенсия, Калифорния, США). Все гены были отсеквенированы в MWG, Германия. Количество представляющих интерес генов нормализовано на два референсных гена HPRT и циклофилин по формуле дельта-дельта CT.

--->

СПИСОК ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

<110> Integrative Research Laboratories Sweden AB

<120> НОВЫЕ МОДУЛЯТОРЫ КОРТИКАЛЬНОЙ КАТЕХОЛАМИНЕРГИЧЕСКОЙ НЕЙРОТРАНСМИССИИ

<130> PG20474

<160> 30

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Регулируемый активностью ген (Arc) (код доступа U19866) смысловой

праймер

<400> 1

ggagttcaag aaggagtttc 20

<210> 2

<211> 19

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Регулируемый активностью ген (Arc) (код доступа U19866) антисмысловой

праймер

<400> 2

ccacatacag tgtctggta 19

<210> 3

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Регулируемый активностью ген (Arc) (код доступа U19866) probe

<400> 3

ccgcttacgc cagaggaact 20

<210> 4

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Гипоксантин-фосфорибозилтрансфераза (HPRT) (код доступа

AF001282) смысловой праймер 01

<400> 4

agggatttga atcatgtttg 20

<210> 5

<211> 19

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Гипоксантин-фосфорибозилтрансфераза (HPRT) (код доступа

AF001282) антисмысловой праймер 01

<400> 5

ctgctagttc tttactggc 19

<210> 6

<211> 23

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Гипоксантин-фосфорибозилтрансфераза (HPRT) (код доступа

AF001282) probe 01

<400> 6

tgtagattca acttgccgct gtc 23

<210> 7

<211> 18

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Циклофилин A (цикло) (код доступа M19533) смысловой праймер 01

<400> 7

ctggaccaaa cacaaatg 18

<210> 8

<211> 18

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Циклофилин A (цикло) (код доступа M19533) антисмысловой праймер

01

<400> 8

atgccttctt tcaccttc 18

<210> 9

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Циклофилин A (цикло) (код доступа M19533) probe 01

<400> 9

ttgccatcca gccactcagt 20

<210> 10

<211> 22

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Нейротрофический фактор головного мозга (bdnf) (код доступа

NM_012513) смысловой праймер

<400> 10

aaattacctg gatgccgcaa ac 22

<210> 11

<211> 22

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Нейротрофический фактор головного мозга (bdnf) (код доступа

NM_012513) антисмысловой праймер

<400> 11

tgtgacccac tcgctaatac tg 22

<210> 12

<211> 23

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Нейротрофический фактор головного мозга (bdnf) (код доступа

NM_012513) probe

<400> 12

cacacacgct cagctcccca cgg 23

<210> 13

<211> 18

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Прото-онкоген Rattus norvegicus (c-fos) (код доступа

DQ089699) смысловой праймер

<400> 13

cagagcatcg gcagaagg 18

<210> 14

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Прото-онкоген Rattus norvegicus (c-fos) (код доступа

DQ089699) антисмысловой праймер

<400> 14

agttgatctg tctccgcttg g 21

<210> 15

<211> 26

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Прото-онкоген Rattus norvegicus (c-fos) (код доступа

DQ089699) probe

<400> 15

tctgtcagct ccctcctccg attccg 26

<210> 16

<211> 22

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Декарбоксилаза глутаминовой кислоты (GAD 67) (код доступа 34445)

смысловой праймер

<400> 16

ctgtttatgg agcgtttgat cc 22

<210> 17

<211> 22

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Декарбоксилаза глутаминовой кислоты (GAD 67) (код доступа 34445)

антисмысловой праймер

<400> 17

gactgagact gacctttcta tg 22

<210> 18

<211> 22

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Декарбоксилаза глутаминовой кислоты (GAD 67) (код доступа 34445)

probe

<400> 18

gactgaattg gccctttcta tg 22

<210> 19

<211> 19

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Глутаматдегидрогеназа (glud) (код доступа NM_012570) смысловой

праймер

<400> 19

agcctctcct tccccatcc 19

<210> 20

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Глутаматдегидрогеназа (glud) (код доступа NM_012570)

антисмысловой праймер

<400> 20

cgccttcacc tcatccacac 20

<210> 21

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Глутаматдегидрогеназа (glud) (код доступа NM_012570) probe

<400> 21

agcacagcca gcaccgcacg c 21

<210> 22

<211> 19

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Препроэнкефалин (penk) (код доступа NM_017139.1) смысловой

праймер

<400> 22

catgtgctgc ttgtgctgt 19

<210> 23

<211> 19

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Препроэнкефалин (penk) (код доступа NM_017139.1) антисмысловой

праймер

<400> 23

cagttgggtt cacgggttt 19

<210> 24

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Препроэнкефалин (penk) (код доступа NM_017139.1) probe

<400> 24

tgccctcgtg gtctggataa ctgc 24

<210> 25

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Гипоксантин-фосфорибозилтрансфераза (HPRT) (код доступа

AF001282) смысловой праймер 02

<400> 25

ggccagactt tgttggattt g 21

<210> 26

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Гипоксантин-фосфорибозилтрансфераза (HPRT) (код доступа

AF001282) антисмысловой праймер 02

<400> 26

ccgctgtctt ttaggctttg 20

<210> 27

<211> 28

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Гипоксантин-фосфорибозилтрансфераза (HPRT) (код доступа

AF001282) probe 02

<400> 27

tttccacttt cgctgatgac acaaacat 28

<210> 28

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Циклофилин A (цикло) (код доступа M19533) смысловой праймер 02

<400> 28

gtctcttttc gccgcttgct 20

<210> 29

<211> 25

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Циклофилин A (цикло) (код доступа M19533) антисмысловой праймер

02

<400> 29

tctgctgtct ttggaacttt gtctg 25

<210> 30

<211> 28

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Циклофилин A (цикло) (код доступа M19533) probe 02

<400> 30

atggtcaacc ccaccgtgtt cttcgaca 28

<---

Изобретение относится к области органической химии, а именно к новым гетероциклическим соединениям формулы I или к их изомерам или фармацевтически приемлемым солям, где R⁴ представляет собой F, R⁵ представляет собой H или C₁-C₄ алкил, замещенный 0 F, и n имеет значение 0, 1, 2 или 3. Также описывается фармацевтическая композиция на основе соединения формулы I и применение соединения формулы I в качестве модулятора уровней моноаминов. Технический результат: получены новые производные 3-бензил-азетидина, полезные для модуляции уровней моноаминов. 3 н. и 12 з.п. ф-лы, 32 пр., 4 табл.

формула I

1. Соединение формулы I:

Формула I

или его стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль,

где

R⁴ представляет собой F,

R⁵ представляет собой H или C₁-C₄ алкил, замещенный 0 F, и

n имеет значение 0, 1, 2 или 3.

2. Соединение по п. 1 или его фармацевтически приемлемая соль, которое представляют собой соединение формулы II:

Формула II.

3. Соединение по п. 2 или его фармацевтически приемлемая соль, которое выбирают из группы, состоящей из соединений формулы IIa, формулы IIb, формулы IIc, формулы IId, формулы IIe и формулы IIf:

4. Соединение по п. 1 или его фармацевтически приемлемая соль, которое представляет собой соединение формулы III:

5. Соединение по п. 4 или его фармацевтически приемлемая соль, которое выбирают из группы, состоящей из соединений формулы IIIa, формулы IIIb, формулы IIIc, формулы IIId и формулы IIIe:

6. Соединение по любому из предшествующих пунктов или его фармацевтически приемлемая соль, где R⁵ представляет собой H.

7. Соединение по п. 1, которое представляет собой:

(-)-3-[(2,3-дифторфенил)(фтор)метил]азетидин,

(+)-3-[(2,3-дифторфенил)(фтор)метил]азетидин,

(-)-3-[(3,5-дифторфенил)(фтор)метил]азетидин,

(+)-3-[(3,5-дифторфенил)(фтор)метил]азетидин,

3-[(3,4-дифторфенил)(фтор)метил]азетидин,

3-[(2,5-дифторфенил)(фтор)метил]азетидин,

3-[(2,6-дифторфенил)(фтор)метил]азетидин,

3-[(2,4-дифторфенил)(фтор)метил]азетидин,

3-[фтор(2,3,5-трифторфенил)метил]азетидин,

3-[фтор(2,4,6-трифторфенил)метил]азетидин,

3-[фтор(2,3,4-трифторфенил)метил]азетидин,

3-[фтор(3,4,5-трифторфенил)метил]азетидин,

3-[(3,5-дифторфенил)(фтор)метил]азетидин,

3-[(2,3-дифторфенил)(фтор)метил]азетидин,

3-[(2,3-дифторфенил)(фтор)метил]-1-метилазетидин,

3-[(2,3-дифторфенил)(фтор)метил]-1-этилазетидин,

3-[(2,3-дифторфенил)(фтор)метил]-1-пропилазетидин,

3-[(3,5-дифторфенил)(фтор)метил]-1-метилазетидин,

3-[(3,5-дифторфенил)(фтор)метил]-1-этилазетидин,

3-[(3,5-дифторфенил)(фтор)метил]-1-пропилазетидин,

3-[фтор(2,3,5-трифторфенил)метил]-1-метилазетидин,

1-этил-3-[фтор(2,3,5-трифторфенил)метил]азетидин,

3-[фтор(2,3,5-трифторфенил)метил]-1-пропилазетидин

1-этил-3-[фтор(2,3,4-трифторфенил)метил]азетидин,

3-[фтор(2,3,4-трифторфенил)метил]-1-пропилазетидин,

1-этил-3-[фтор(3,4,5-трифторфенил)метил]азетидин,

3-[фтор(3,4,5-трифторфенил)метил]-1-пропилазетидин,

3-[фтор(2,3,5,6-тетрафторфенил)метил]азетидин,

3-[фтор(пентафторфенил)метил]азетидин,

3-[фтор(2,3,5,6-тетрафторфенил)метил]-1-метилазетидин,

1-этил-3-[фтор(2,3,5,6-тетрафторфенил)метил]-азетидин и

3-[фтор(2,3,5,6-тетрафторфенил)метил]-1-пропилазетидин или фармацевтически приемлемую соль любого из предшествующих соединений.

8. Соединение по п. 1, которое представляет собой (-)-3-[(2,3-дифторфенил)(фтор)метил]азетидин, или его фармацевтически приемлемая соль.

9. Соединение по п. 1, которое представляет собой (-)-3-[(3,5-дифторфенил)(фтор)метил]азетидин, или его фармацевтически приемлемая соль.

10. Соединение по п. 1, которое представляет собой (-)-3-[фтор(2,3,5-трифторфенил)метил]азетидин, или фармацевтически приемлемая соль.

11. Соединение по любому из предшествующих пунктов или его фармацевтически приемлемая соль, где соединение формулы I представляет собой (-)-зеркальный изомер.

12. Фармацевтическая композиция для модуляции уровней моноаминов, содержащая терапевтически эффективное количество соединения по любому из пп. 1-11 или его фармацевтически приемлемой соли вместе по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым носителем, эксципиентом и/или растворителем.

13. Соединение по любому из пп. 1-11 или его фармацевтически приемлемая соль для применения в качестве медикамента для модуляции уровней моноаминов.

14. Применение соединения по любому из пп. 1-11 для получения медикамента для лечения и/или профилактики заболевания, нарушения и/или состояния, которое является чувствительным к модуляции моноаминов в коре головного мозга,

где указанное заболевание, нарушение и/или состояние выбирают из группы, состоящей из деменции, возрастного когнитивного нарушения, когнитивных нарушений, связанных с нейродегенеративными нарушениями и/или заболеваниями, нарушений аутического спектра, аффективных расстройств, шизофрении, тревожных расстройств, синдрома гиперактивности с дефицитом внимания (ADHD) и двигательных расстройств.

15. Применение по п. 14, в котором указанное заболевание, нарушение и/или состояние выбирают из группы, состоящей из деменции, возрастного когнитивного нарушения и шизофрении.