Способ трансплантации фрагмента опухоли рака яичника человека в яичник самки иммунодефицитной мыши Российский патент 2021 года по МПК A61B17/00 G09B23/28 

Описание патента на изобретение RU2740443C1

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной онкологии, и касается способа трансплантации фрагмента рака яичника человека в яичник самки иммунодефицитной мыши для получения пациентоподобной модели, достоверно передающей особенности опухоли и наиболее адекватно отражающей картину развития рака яичников у человека.

Рак яичников является вторым по частоте гинекологическим злокачественным новообразованием. Более чем в 60% случаев заболевание диагностируется на III-IV стадии, когда в процесс вовлекаются органы брюшной полости, малого таза или ретроперитонеальные лимфоузлы, (см. К.Д. Гусейнов, И.В. Берлев, A.M. Беляев, А.Ф. Урманчеева, Т.В. Городнова, Г.С. Киреева, М.Г. Яковлева, М.Г. Шихзадаева. Возможности гипертермической интраперитонеальной интраоперационной химиоперфузии в лечении рецидивирующего рака яичников // Гинекологическая онкология. 2020. Т 19. №1 С. 62).

Для изучения особенностей механизмов развития рака яичников и новых терапевтических препаратов необходимо создание моделей данного заболевания, наиболее адекватно отражающие индивидуальные черты патологического процесса.

Данному требованию может отвечать ортотопическая пациентоподобная модель рака яичников, клеточный состав которой является гетерогенным сходным реальным опухолям, а ортотопическое микроокружение оказывает влияние на онкогенез (см. Хохлова С.В. Новое в лечении high grade серозного рака яичников // Эффективная фармакотерапия. 2019. Т. 15. №38. С. 24-29.; An Advanced Orthotopic Ovarian Cancer Model in Mice for Therapeutic Trials).

Известен способ ортотопической имплантации рака яичников, включающий рассечение кожи и брюшной стенки мыши, инъекцию опухолевой суспензии в яичник самки иммунодефицитной мыши, полученной из фрагмента человеческой опухоли рака яичников. Недостатком данного способа является имплантация опухолевой взвеси, а не целого участка опухоли, взятого от пациента (см. Ying Zhang, Li Luo, Xueling Zheng et al. An Advanced Orthotopic Ovarian Cancer Model in Mice for Therapeutic Trials // BioMed Research International. - 2016. №4. Р.1.).

Известен способ трансплантации культуры клеток карциномы яичников ES-2 и OVCA 429 методом внутрибрюшинной инъекции. Недостатком данного способа является имплантация культуры клеток в несоответствующий сайт трансплантации. Из технических трудностей метода является потенциальная утечка клеток в брюшную полость (см. Elizabeth Magnotti, Wayne A. Marasco. The latest animal models of ovarian cancer for novel drug discovery // Expert Opin Drug Discov. 2018. №13(3). P. 249-257).

В качестве прототипа нами выбран «Способ моделирования лимфогенного и гематогенного метастазирования мышиной меланомы В16 у белых нелинейных крыс» (см. патент RU 2615908 С1, опубл. 11.04.2017, Бюл. №11), заключавшийся в выведении селезенки под кожу животного с последующей инъекцией в нее взвеси опухолевых клеток. Способ обладал существенным недостатком. Он не предполагал пересадку в орган части опухоли, что позволило бы создать как местный опухолевый процесс (в самой селезенке), так и его метастазы в других внутренних органах.

Техническим результатом предлагаемого изобретения является разработка способа трансплантации фрагмента опухоли рака яичника человека в яичник самки иммунодифицитной мыши, что позволяет создать ортотопическую модель опухолевого роста, достоверно отражающую особенности онкогенеза данного заболевания у человека.

Технический результат изобретения достигается тем, что пересаживают фрагмент опухоли рака яичника человека в яичник самки иммунодифицитной мыши, для чего располагают иммунодефицитную мышь на операционном столике в положении на животе, рассекают кожу, подкожную клетчатку, брюшину животного параллельно позвоночнику, ниже реберной дуги, выводят яичник под кожу, фиксируют яичник к брюшине проксимально непосредственно за ткань яичника, дистально - за маточную трубу отдельными лигатурами, не передавливая сосуды, кровоснабжающие яичник, рассекают яичник по краю, противоположному сосудистой ножке на протяжении 2 мм, фиксируют опухолевый материал непосредственно в ране яичника, ушивают кожу над яичником.

Способ осуществляют следующим образом.

Фрагмент опухоли рака яичников после иссечения сразу же помещают в среду Хенкса. Перед трансплантацией вырезают кусочки объемом 15 мм3. Время от момента резекции опухолевого материала у человека до имплантации в яичник иммунодефицитной мыши не должно превышать 20 минут. В качестве реципиента опухолевого материала служат самки иммунодефицитных мышей. При премедикации используют ксилазин концентрацией 20 мг/мл. Животных наркотизируют при помощи золетила концентрацией 22,57 мг/мл. Располагают иммунодефицитную мышь на операционном столике в положении на животе. Затем рассекают кожу, подкожную клетчатку, брюшину животного параллельно позвоночнику, ниже реберной дуги. Выводят яичник под кожу. Фиксируют яичник к брюшине проксимально непосредственно за его ткань отдельной лигатурой. Фиксируют яичник дистально за маточную трубу отдельной лигатурой. В ходе вмешательства при прошивании маточной трубы с помощью операционного микроскопа следят за целостностью сосудов, кровоснабжающих яичник. Рассекают яичник по краю, противоположному сосудистой ножке на протяжении 2 мм. Фиксируют опухолевый материал непосредственно в ране яичника отдельной лигатурой 6-0 под контролем операционного микроскопа. Ушивают кожу над яичником.

Изобретение иллюстрируется фигурами 1-2.

На Фиг. 1 изображена фиксация яичника к брюшине отдельной лигатурой по проксимальному углу раны непосредственно за верхний полюс яичника.

На Фиг. 2. изображен яичник с опухолью, зафиксированный к брюшине, кожа ушита над яичником.

Данным способом произведена трансплантация фрагмента опухоли яичников человека в яичники самок иммунодефицитных мышей в нескольких сериях экспериментов. Нами использовались мыши Balb/c Nude. Всего исследование проведено на 60 мышах, в 10% случаев был получен рост опухоли яичника.

Приводим пример применения способа.

Данным способом была прооперирована самка иммунодефицитной мыши Balb/c Nude возрастом 6 недель массой 24,5 г. Трансплантантом служил фрагмент опухоли яичников объемом 12 мм3, который после выделения из организма человека был незамедлительно помещен в среду Хенкса. Время от момента резекции опухолевого материала у человека до имплантации в яичник самки иммунодефицитной мыши составило 11 минут. Проводили премедикацию с использованием ксилазина концентрацией 20 мг/мл. Наркоз животных осуществляли при помощи золетила концентрацией 22,57 мг/мл. Пересаживают фрагмент опухоли рака яичника человека в яичник самки иммунодифицитной мыши, для чего располагают иммунодефицитную мышь на операционном столике в положении на животе, рассекают кожу, подкожную клетчатку, брюшину животного параллельно позвоночнику, ниже реберной дуги, выводят яичник под кожу, фиксируют яичник к брюшине проксимально непосредственно за ткань яичника (см. Фиг. 1), дистально - за маточную трубу отдельными лигатурами, не передавливая сосуды, кровоснабжающие яичник, рассекают яичник по краю, противоположному сосудистой ножке на протяжении 2 мм, фиксируют опухолевый материал непосредственно в ране яичника, ушивают кожу над яичником (см. Фиг. 2). Через 6 недель при вскрытии животного обнаружен опухолевый инфильтрат, исходящий из яичника, прорастающий в почку. При морфологическом исследовании опухоли - рак яичников.

Технико-экономическая эффективность данного способа заключается в том, что он позволяет получить пациентоподобную модель рака яичников наиболее достоверно отражающую особенности онкогенеза, и являющуюся важной тест-системой для доклинических исследований различных способов лечения рака яичников. Размещение яичников под кожей при сохранении его сосудистой ножки позволяет получить уникальные условия, когда ортотопическая опухоль (размещена в яичнике) доступна для ежедневного контроля в ходе проведения эксперимента.

Похожие патенты RU2740443C1

название год авторы номер документа
Способ выбора оптимального доступа для ортотопической трансплантации фрагмента опухоли рака яичника человека в яичник самки иммунодифицитной мыши 2020
  • Вереникина Екатерина Владимировна
RU2740423C1
СПОСОБ ТРАНСПЛАНТАЦИИ ФРАГМЕНТА НЕЙРОЭНДОКРИННОЙ ОПУХОЛИ ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ ЧЕЛОВЕКА В ПОДЖЕЛУДОЧНУЮ ЖЕЛЕЗУ ИММУНОДЕФИЦИТНЫХ МЫШЕЙ 2019
  • Трифанов Владимир Сергеевич
  • Максимов Алексей Юрьевич
  • Кит Сергей Олегович
  • Гончарова Анна Сергеевна
  • Волкова Анастасия Владимировна
  • Лукбанова Екатерина Александровна
  • Миндарь Мария Вадимовна
  • Ходакова Дарья Владиславовна
  • Ткачев Сергей Юрьевич
  • Заикина Екатерина Владиславовна
  • Протасова Татьяна Пантелеевна
RU2725273C1
Способ трансплантации фрагмента опухоли толстой кишки человека в нисходящий отдел толстой кишки иммунодефицитных мышей 2020
  • Кит Сергей Олегович
  • Егоров Георгий Юрьевич
  • Максимов Алексей Юрьевич
  • Гончарова Анна Сергеевна
  • Лукбанова Екатерина Алексеевна
  • Ходакова Дарья Владиславовна
  • Миндарь Мария Вадимовна
  • Заикина Екатерина Владиславовна
  • Ткачев Сергей Юрьевич
  • Волкова Анастасия Владимировна
RU2753144C1
Способ доступа к телу желудка иммунодефицитных мышей при ортотопической трансплантации фрагмента опухоли желудка человека 2022
  • Кит Сергей Олегович
  • Максимов Алексей Юрьевич
  • Курбанова Луиза Зулкаидовна
  • Карасёв Тимофей Сергеевич
  • Колесников Евгений Николаевич
  • Гончарова Анна Сергеевна
  • Миндарь Мария Вадимовна
  • Заикина Екатерина Владиславовна
  • Галина Анастасия Владимировна
  • Гурова София Валерьевна
  • Ходакова Дарья Владиславовна
  • Комарова Екатерина Фёдоровна
RU2790950C1
СПОСОБ ТРАНСПЛАНТАЦИИ ФРАГМЕНТА ОПУХОЛИ ТОЛСТОЙ КИШКИ ЧЕЛОВЕКА В СЛЕПУЮ КИШКУ ИММУНОДЕФИЦИТНЫХ МЫШЕЙ 2020
  • Кит Олег Иванович
  • Егоров Георгий Юрьевич
  • Максимов Алексей Юрьевич
  • Гончарова Анна Сергеевна
  • Лукбанова Екатерина Александровна
  • Ходакова Дарья Владиславовна
  • Миндарь Мария Вадимовна
  • Протасова Татьяна Пантелеевна
  • Заикина Екатерина Владиславовна
  • Ткачев Сергей Юрьевич
  • Волкова Анастасия Владимировна
RU2727868C1
Способ создания ксенографта рака пищевода внутригрудной локализации на иммунодефицитных мышах 2020
  • Максимов Алексей Юрьевич
  • Кит Сергей Олегович
  • Гончарова Анна Сергеевна
  • Лукбанова Екатерина Алексеевна
  • Колесников Евгений Николаевич
  • Миндарь Мария Вадимовна
  • Ходакова Дарья Владиславовна
  • Волкова Анастасия Владимировна
  • Заикина Екатерина Владиславовна
  • Протасова Татьяна Пантелеевна
  • Ткачев Сергей Юрьевич
RU2738308C1
Способ создания ортотопической модели саркомы мягких тканей человека, прорастающей в кость, на иммунодефицитных мышах линии BALB/C NUDE 2023
  • Галина Анастасия Владимировна
  • Максимов Алексей Юрьевич
  • Росторгуев Владимир Эдуардович
  • Аушева Татьяна Валерьевна
  • Алиханова Сарижат Сурхаевна
  • Гончарова Анна Сергеевна
  • Аверкин Михаил Александрович
  • Кит Сергей Олегович
  • Дурицкий Максим Николаевич
  • Власов Сергей Николаевич
  • Гурова София Валерьевна
  • Ходакова Дарья Владиславовна
  • Шульга Анна Александровна
  • Головинов Игорь Викторович
RU2818462C1
Способ получения ортотопической PDX-модели плоскоклеточного рака пищевода человека для исследования лучевой терапии в эксперименте 2021
  • Кит Сергей Олегович
  • Анисимов Александр Евгеньевич
  • Максимов Алексей Юрьевич
  • Гончарова Анна Сергеевна
  • Непомнящая Евгения Марковна
  • Колесников Евгений Николаевич
  • Зинькович Михаил Сергеевич
  • Стасов Виталий Викторович
  • Лукбанова Екатерина Алексеевна
  • Заикина Екатерина Владиславовна
  • Волкова Анастасия Владимировна
  • Миндарь Мария Вадимовна
  • Ходакова Дарья Владиславовна
  • Курбанова Луиза Зулкаидовна
RU2760084C1
СПОСОБ ОПТИМАЛЬНОГО ДОСТУПА К АБДОМИНАЛЬНОМУ ОТДЕЛУ ПИЩЕВОДА ИММУНОДЕФИЦИТНЫХ МЫШЕЙ ПРИ ОРТОТОПИЧЕСКОЙ ТРАНСПЛАНТАЦИИ ФРАГМЕНТА ОПУХОЛИ ПИЩЕВОДА ЧЕЛОВЕКА 2018
  • Колесников Евгений Николаевич
  • Лукбанова Екатерина Александровна
  • Гончарова Анна Сергеевна
  • Кит Сергей Олегович
  • Коробейникова Елена Петровна
  • Максимов Алексей Юрьевич
RU2709835C1
Способ создания ортотопической модели рака эндометрия 2024
  • Франциянц Елена Михайловна
  • Шихлярова Алла Ивановна
  • Каплиева Ирина Викторовна
  • Бандовкина Валерия Ахтямовна
  • Погорелова Юлия Александровна
  • Нескубина Ирина Валерьевна
  • Трепитаки Лидия Константиновна
  • Сурикова Екатерина Игоревна
  • Моисеенко Татьяна Ивановна
  • Черярина Наталья Дмитриевна
  • Котиева Виолетта Михайловна
  • Верескунова Александра Алексеевна
  • Меньшенина Анна Петровна
  • Рогозин Марк Андреевич
  • Кутилин Денис Сергеевич
  • Ишонина Оксана Георгиевна
RU2818464C1

Иллюстрации к изобретению RU 2 740 443 C1

Реферат патента 2021 года Способ трансплантации фрагмента опухоли рака яичника человека в яичник самки иммунодефицитной мыши

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной онкологии. Пересаживают фрагмент опухоли рака яичника человека в яичник самки иммунодефицитной мыши. Располагают иммунодефицитную мышь на операционном столике в положении на животе. Рассекают кожу, подкожную клетчатку, брюшину животного параллельно позвоночнику, ниже реберной дуги. Выводят яичник под кожу. Фиксируют яичник к брюшине проксимально непосредственно за ткань яичника, дистально - за маточную трубу отдельными лигатурами, не передавливая сосуды, кровоснабжающие яичник. Рассекают яичник по краю, противоположному сосудистой ножке, на протяжении 2 мм. Фиксируют опухолевый материал непосредственно в ране яичника. Ушивают кожу над яичником. Способ позволяет получить пациентоподобную модель рака яичников, наиболее достоверно отражающую особенности онкогенеза и являющуюся важной тест-системой для доклинических исследований различных способов лечения рака яичников. 2 ил., 1 пр.

Формула изобретения RU 2 740 443 C1

Способ трансплантации фрагмента опухоли яичников в яичник самки иммунодефицитных мышей, включающий рассечение кожи, подкожной клетчатки и брюшины на спине животного в положении его на животе, отличающийся тем, что пересаживают фрагмент опухоли рака яичника человека в яичник самки иммунодефицитной мыши, для чего располагают иммунодефицитную мышь на операционном столике в положении на животе, рассекают кожу, подкожную клетчатку, брюшину животного параллельно позвоночнику, ниже реберной дуги, выводят яичник под кожу, фиксируют яичник к брюшине проксимально непосредственно за ткань яичника, дистально - за маточную трубу отдельными лигатурами, не передавливая сосуды, кровоснабжающие яичник, рассекают яичник по краю, противоположному сосудистой ножке, на протяжении 2 мм, фиксируют опухолевый материал непосредственно в ране яичника, ушивают кожу над яичником.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2021 года RU2740443C1

Способ моделирования лимфогенного и гематогенного метастазирования мышиной меланомы В у белых нелинейных крыс 2016
  • Кит Олег Иванович
  • Франциянц Елена Михайловна
  • Каплиева Ирина Викторовна
  • Трепитаки Лидия Константиновна
RU2615908C1
Муразов Я.Г
Экспериментальное моделирование карциномы яичника
Лабораторные животные для научных исследований
Переносная печь для варки пищи и отопления в окопах, походных помещениях и т.п. 1921
  • Богач Б.И.
SU3A1
Нивелир для отсчетов без перемещения наблюдателя при нивелировании из средины 1921
  • Орлов П.М.
SU34A1
CN 106421751 A, 22.02.2017
Hui Zhang et al
New construction of an animal model for the orthotopic transplantation of an ovarian tumor
Способ защиты переносных электрических установок от опасностей, связанных с заземлением одной из фаз 1924
  • Подольский Л.П.
SU2014A1
p
Печь для непрерывного получения сернистого натрия 1921
  • Настюков А.М.
  • Настюков К.И.
SU1A1

RU 2 740 443 C1

Авторы

Вереникина Екатерина Владимировна

Даты

2021-01-14Публикация

2020-07-22Подача