ПРОЛЕКАРСТВА PTH Российский патент 2021 года по МПК C07K14/575 A61K47/60 A61P5/20 

Настоящее изобретение относится к пролекарствам РТН, фармацевтическим композициям, содержащим такие пролекарства РТН и их применениям.

Гипопаратиреоидизм - это редкая эндокринная болезнь с низким сывороточным кальцием и ненадлежаще низкими (недостаточными) уровнями цирулирующего паратиреоидного гормона, наиболее часто у взрослых, в следствии хирургического вмешательство на щитовидной железе. Стандартное лечение включает активированные аналоги витамина D и добавки, содержащие кальций, что увеличивает абсорбцию и сывороточные уровни кальция и фосфора и уровень сыворотки за счет аномально повышенной экскреции кальция в моче. Гипопаратиреоидизм является единственным основным эндокринным заболеванием на сегодняшний день, когда гормональная недостаточность вообще не лечится заменой отсутствующего гормона (РТН).

Распространенность гипопаратиреоидизма в последнее время систематически изучалась в Дании, где было выявлено в общей сложности более 2000 пациентов с распространенностью ~ 24/100000 человек, среди которых только меньшинство (2/100000) имели гипопаратиреоидизм, не обусловленный хирургическим воздействием. Эти оценки согласуются с недавними данными из США, показывающими распространенность такой же величины у пациентов с хроническим гипопаратиреоидизмом.

Эндогенный РТН синтезируется и секретируется паращитовидными железами и является основным эндокринным гормоном, регулирующим системный гомеостаз кальция и фосфора. Физиологические действия РТН включают высвобождение кальция и фосфора из кости, накапливание кальция, но не фосфора в почках посредством увеличения почечной канальцевой реабсорбции кальция, но снижения почечной канальцевой реабсорбции фосфата, и стимулирование почечной продукции активного витамина D (1,25 (ОН)₂витамин D3), который, в свою очередь, усиливает абсорбцию кальция и фосфора в кишечнике. Без ренальных действий РТН в отношении сохранения кальция и выделения фосфора, обычная терапия аналогами витамина D и добавлением кальция может привести к почечной недостаточности или неудачному лечению из-за прогрессирующего нефрокальциноза, а также эктопическим кальцификациям (в базальных ядрах, хрусталиках глаза и сосудистой системе) из-за хронически увеличенного продукта кальция х фосфора, который выпадает в виде кристаллов фосфата кальция, когда этот продукт поддерживается повышенным в течение длительных периодов времени.

Недавно продукт Natpara®, РТН (1-84) был одобрен FDA для лечения гипопаратиреоидизма. Исторически, продукт Forteo® РТН (1-34) также использовался в виде ежедневных инъекций для гипопаратиреоидизма один, два или три раза в день, несмотря на то, что не был одобрен для этого назначения.

Когда РТН доставляется периодически, как например, посредством ежедневных или многократных ежедневных инъекций РТН (1-84) или РТН (1-34), он действует на кости как анаболический агент, предпочтительно активируя остеобласты по сравнению с остеокластами. Этот анаболический эффект периодического воздействия РТН отличается от катаболизма костной ткани, который может возникать при непрерывном воздействии РТН. Анаболический потенциал периодического введения агонистов РТН был успешно использован для лечения остеопороза, когда метаболизм костной ткани обычно является высоким, а минеральная плотность кости (BMD) низкой, тогда как обратная ситуация имеет место для гипопаратиреоидизма.

Основным осложнением гипопаратиреоидизма является гиперкальциурия из-за отсутствия реабсорбции кальция, зависимой от РТН в дистальных почечных канальцах. Гиперкальциурия связана с повышенным риском нефрокальциноза, нефролитиаза и почечной недостаточности. Согласно FDA обзору Natpara, ежедневные инъекции РТН не обеспечивали адекватный контроль экскреции кальция в моче из-за короткого периода полувыведения этого агониста РТН в организме.

Кроме того, нефизиологические уровни РТН могут быть связаны с гиперкальциемией и гипокальциемией. Лечение с помощью Natpara не уменьшало частоту возникновения этих осложнений по сравнению с плацебо. Частично это можно объяснить неблагоприятным РК продукта Natpara. Например, введение одобренных в настоящее время доз Natpara приводит к значительным супрафизиологическим уровням РТН с C_max 300 пг/мл, которая возвращается к исходному уровню через 12 часов. В результате пациенты усиленно лечатся в начальной фазе после введения и ослаблено лечатся в фазе, предшествующей последующему введению дозы.

Гипокальциемия связана с многочисленными симптомами, некоторые из которых могут угрожать жизни, в том числе: судороги; парестезия; ухудшение когнитивной деятельности; потеря сознания с судорогами (большой эпилептический припадок); нарушение функционирования почек; сердечная аритмия и обмороки, и даже сердечная недостаточность.

Как таковая, существует высокая неудовлетворенная потребность в более физиологической терапии РТН, обеспечивающей устойчивое воздействие РТН, что позволяет облегчить симптомы, связанные с гипокальциемией, гиперкальциурией и гиперфосфатаземией, не вызывая гиперкальциемию.

РТН заместительная терапия была бы более физиологической, если бы доставлялась посредством непрерывной инфузии, например, как в случае применения инсулиновой помпы. Это для примера было продемонстрировано Winer et al. (J Pediatr, 2014, 165 (3), 556-563), где доставка посредством помпы одновременно нормализовала маркеры метаболизма костной ткани и минеральные уровни в моче и сыворотке, в то время как периодическая инъекционная доставка этого не обеспечивала.

Нормальный диапазон РТН составляет 15-50 пг/мл, и важно понимать, что периодическое введение агониста РТН не представляет собой физиологическую заместительную терапию. Полипептиды РТН имеют по своей природе короткие циркулирующие периоды полувыведения в связи с быстрым метаболизмом в печени. Быстрое выведение лекарственного средства из организма предотвращает достаточный спектр действия лекарственного средства в течение интервала дозирования, несмотря на начальные супрафизиологические уровни лекарственного средства.

Применялось несколько подходов к созданию более длительной действующей версии РТН, включая инкапсуляцию РТН в микрочастицах PLGA и перманентное конъюгирование молекулы РТН с синтетическими или пептидными полимерами. В Kostenuik et al. (J Bone Miner Res, 2007, 22 (10), 1534-1547) описан слитый белок PTH-Fc с более длительным периодом полувыведения, чем РТН (1-34), и были проведены исследования на остеопенических крысах и мышах после овариэктомии для определения будут ли периодические (от одного до двух раз в неделю) инъекции PTH-Fc увеличивать массу, плотность и прочность костей, несмотря на длительную продолжительность воздействия РТН. Было продемонстрировано, что молекула, полученная из РТН, с длительным периодом полувыведения из крови обеспечивает анаболическое воздействие на трубчатую и губчатую кость сопоставимое с ежедневным введением РТН, но при уменьшенной частоте дозирования. Другой подход был предложен Ponnapakkam et al. (Drug Discov Today, 2014, 19(3), 204.208), в котором гибридный полипептид РТН и коллаген-связывающего домена вызвал продолжительное (до 12 месяцев), увеличение минеральной плотности кости у нормальных самцов мышей после однократной дозы.

Пациенты с гипопаратиреоидизмом обычно демонстрируют аномально низкую скорость обмена костной ткани, приводящую к увеличению минеральной плотности костной ткани, и поэтому следует избегать анаболических эффектов РТН при лечении гипопаратиреоидизма, и оптимальное лечение должно нормализовать их скорость обмена костной ткани, но не увеличивать ее выше нормального диапазона, как было продемонстрировано при ежедневном лечении РТН(1-34) и РТН(1-84).

В общем существует потребность в более эффективном лечении РТН.

Следовательно, задача настоящего изобретения состоит в по меньшей мере частичном преодолении описанных выше недостатков.

Эта задача решается посредством РТН пролекарства или его фармацевтически приемлемой соли, где пролекарство имеет формулу (Ia) или (Ib)

где

-D представляет собой РТН составляющую;

-L¹- представляет собой обратимую линкерную составляющую пролекарства, соединенную с РТН составляющей -D через функциональную группу РТН;

-L²- представляет собой простую химическую связь или спейсерную составляющую;

-Z представляет собой растворимую в воде составляющую-носитель;

х представляет собой целое число, выбранное из группы, состоящей из 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 или 16; и

у представляет собой целое число, выбранное из группы, состоящей из 1, 2, 3,4 и 5.

Неожиданно было обнаружено, что пролекарства РТН согласно настоящему изобретению проявляют низкую остаточную активность пролекарства и обеспечивают пролонгированное высвобождение РТН. В результате, введение пролекарствах РТН согласно настоящему изобретению приводит к одновременной нормализации кальция в сыворотке и уменьшению фосфата в сыворотке и, таким образом, к увеличенному соотношению кальция в сыворотке и фосфата в сыворотке по сравнению с лечением с помощью РТН1-84, существующим на сегодняшний день стандартом лечения. В то же время при введении физиологических доз не наблюдалось никаких побочных эффектов на маркеры резорбцию и образования костной ткани и общее состояние костей в соответствующей животной модели животных для состояния человека. В то же время никаких нежелательных эффектов на резорбцию кости и маркеры костеобразования и общее состояние костей в соответствующей экспериментальной модели на животном для состояния человека не наблюдалось при введении физиологических доз.

Неожиданно было обнаружено, что такие пролекарства РТН способны достигать стабильного профиля РТН в плазме, который обеспечивает физиологические уровни кальция в сыворотке и моче или даже более низкие, чем нормальные уровни кальция в моче.

В контексте настоящего изобретения применяемые термины имеют следующие значения.

Как применяется в настоящей заявке термин "РТН" относится ко всем полипептидам РТН, предпочтительно видов млекопитающих, более предпочтительно человека и видов млекопитающих, более предпочтительно человека и видов мышиные, а также их вариантам, аналогам, ортологам, гомологам и производным и фрагментам, которые характеризуются увеличением сывороточного кальция и экскреции фосфора почками, и уменьшением сывороточного фосфора и экскреции кальция почками. Термин "РТН" также относится ко всем полипептидам PTHrP, как например полипептид согласно SEQ ID NO: 121, который связывается с и активирует общий рецептор РТН/PTHrP1. Предпочтительно, термин "РТН" относится к полипептиду РТН согласно SEQ ID NO: 51 а также к его вариантам, гомологам и производным, проявляющим по существу такую же биологическую активность, т.е. увеличивающим сывороточный кальций и экскрецию фосфора почками, и уменьшающим сывороточный фосфор и экскрецию кальция почками.

Предпочтительно, термин "РТН" относится к следующим полипептидным последовательностям:

SEQ ID NO: 1 (РТН 1-84)

SEQ ID NO: 2 (РТН 1-83)

SEQ ID NO: 3 (РТН 1-82)

SEQ ID NO: 4 (РТН 1-81)

SEQ ID NO: 5 (РТН 1-80)

SEQ ID NO: 6 (PTH 1-79)

SEQ ID NO: 7 (PTH 1-78)

SEQ ID NO: 8 (PTH 1-77)

SEQ ID NO: 9 (PTH 1-76)

SEQ ID NO: 10 (PTH 1-75)

SEQ ID NO: 11 (PTH 1-74)

SEQ ID NO: 12 (PTH 1-73)

SEQ ID NO: 13 (PTH 1-72)

SEQ ID NO: 14 (PTH 1-71)

SEQ ID NO: 15 (PTH 1-70)

SEQ ID NO: 16 (PTH 1-69)

SEQ ID NO: 17 (PTH 1-68)

SEQ ID NO: 18 (РТН 1-67)

SEQ ID NO: 19 (РТН 1-66)

SEQ ID NO: 20 (PTH 1-65)

SEQ ID NO: 21 (PTH 1-64)

SEQ ID NO: 22 (PTH 1-63)

SEQ ID NO: 23 (PTH 1-62)

SEQ ID NO: 24 (PTH 1-61)

SEQ ID NO: 25 (PTH 1-60)

SEQ ID NO:26 (PTH 1-59)

SEQ ID NO: 27 (PTH 1-58)

SEQ ID NO: 28 (PTH 1-57)

SEQ ID NO: 29 (PTH 1-56)

SEQ ID NO: 30 (PTH 1-55)

SEQ ID NO: 31 (РТН 1-54)

SEQ ID NO: 32 (PTH 1-53)

SEQ ID NO: 33 (PTH 1-52)

SEQ ID NO: 34 (PTH 1-51)

SEQ ID NO: 35 (PTH 1-50)

SEQ ID NO: 36 (PTH 1-49)

SEQ ID NO: 37 (PTH 1-48)

SEQ ID NO: 38 (РТН 1-47)

SEQ ID NO: 39 (PTH 1-46)

SEQ ID NO: 40 (PTH 1-45)

SEQ ID NO: 41 (PTH 1-44)

SEQ ID NO: 42 (PTH 1-43)

SEQ ID NO: 43 (PTH 1-42)

SEQ ID NO: 44 (PTH 1-41)

SEQ ID NO: 45 (PTH 1-40)

SEQ ID NO: 46 (PTH 1-39)

SEQ ID NO: 47 (PTH 1-38)

SEQ ID NO: 48 (PTH 1-37)

SEQ ID NO: 49 (PTH 1-36)

SEQ ID NO: 50 (PTH 1-35)

SEQ ID NO: 51 (PTH 1-34)

SEQ ID NO: 52 (PTH 1-33)

SEQ ID NO: 53 (PTH 1-32)

SEQ ID NO: 54 (PTH 1-31)

SEQ ID NO: 55 (PTH 1-30)

SEQ ID NO: 56 (PTH 1-29)

SEQ ID NO: 57 (PTH 1-28)

SEQ ID NO: 58 (PTH 1-27)

SEQ ID NO: 59 (PTH 1-26)

SEQ ID NO: 60 (PTH 1-25)

SEQ ID NO: 61 (амидированный PTH 1-84)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 62 (амидированный РТН 1-83)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 63 (амидированный РТН 1-82)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 64 (амидированный РТН 1-81)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 65 (амидированный РТН 1-80)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 66 (амидированный РТН 1-79)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 67 (амидированный РТН 1-78)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 68 (амидированный PTH 1-77)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 69 (амидированный PTH 1-76)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 70 (амидированный РТН 1-75)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 71 (амидированный РТН 1-74)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 72 (амидированный РТН 1-73)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 73 (амидированный РТН 1-72)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 74 (амидированный РТН 1-71)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 75 (амидированный РТН 1-70)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 76 (амидированный РТН 1-69)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 77 (амидированный РТН 1-68)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 78 (амидированный РТН 1-67)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 79 (амидированный РТН 1-66)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 80 (амидированный РТН 1-65)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO:81 (амидированный PTH 1-64)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 82 (амидированный PTH 1-63)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 83 (амидированный PTH 1-62)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 84 (амидированный РТН 1-61)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 85 (амидированный РТН 1-60)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 86 (амидированный РТН 1-59)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 87 (амидированный РТН 1-58)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 88 (амидированный РТН 1-57)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO:89 (амидированный РТН 1-56)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 90 (амидированный РТН 1-55)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 91 (амидированный РТН 1-54)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 92 (амидированный РТН 1-53)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 93 (амидированный РТН 1-52)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 94 (амидированный PTH 1-51)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 95 (амидированный PTH 1-50)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO:96 (амидированный PTH 1-49)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO:97 (амидированный PTH 1-48)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 98 (амидированный РТН 1-47)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 99 (амидированный РТН 1-46)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 100 (амидированный РТН 1-45)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 101 (амидированный РТН 1-44)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 102 (амидированный РТН 1-43)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 103 (амидированный РТН 1-42)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 104 (амидированный РТН 1-41)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 105 (амидированный РТН 1-40)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 106 (амидированный РТН 1-39)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 107 (амидированный PTH 1-38)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 108 (амидированный PTH 1-37)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 109 (амидированный РТН 1-36)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 110 (амидированный РТН 1-35)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 111 (амидированный РТН 1-34)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 112 (амидированный РТН 1-33)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 113 (амидированный РТН 1-32)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 114 (амидированный PTH 1-31)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 115 (амидированный PTH 1-30)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 116 (амидированный PTH 1-29)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 117 (амидированный PTH 1-28)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 118 (амидированный РТН 1-27)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 119 (амидированный РТН 1-26)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 120 (амидированный РТН 1-25)

где С-конец амидирован

SEQ ID NO: 121 (PTHrP)

Более предпочтительно, термин "PTH" относится к последовательности SEQ ID:NO 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114 и 115. Даже более предпочтительно, термин "РТН" относится к последовательности SEQ ID:NO 50, 51, 52, 110, 111 и 112. В особенно предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения термин "РТН" относится к последовательности SEQ ID NO: 51.

Как применяется в настоящей заявке, термин "вариант полипептида РТН " относится к полипептиду из того же самого вида, который отличается от ссылочного полипептида РТН или PTHrP. Предпочтительно, таким ссылочным полипептидом является РТН полипептидная последовательность SEQ ID NO: 51. В общем, различия ограничены таким образом, что аминокислотные последовательности ссылочного полипептида и варианта в общем очень подобны и, во многих областях, идентичны. Предпочтительно, варианты полипептида РТН на по меньшей мере 70%, 80%, 90%, или 95% идентичны ссылочному полипептиду РТН или PTHrP, предпочтительно полипепиду РТН с SEQ ID NO: 51. Под полипептидном, имеющим аминокислотную последовательность на по меньшей мере, например, 95% "идентичную" рассматриваемой аминокислотной последовательности понимается, что аминокислотная последовательность данного полипептида идентична рассматриваемой последовательности, за исключением того, что данная полипептидная последовательность может включать вплоть до пяти аминокислотных изменений на каждые 100 аминокислот рассматриваемой аминокислотной последовательности. Эти замены в ссылочной последовательности могут происходить при амино (N-концевое) или карбокси концевых (С-концевое) положениях ссылочной аминокислотной последовательности или в любом мести между этими концевыми положениями, распределяясь либо по отдельности среди остатков в ссылочной последовательности, либо в виде одной или более соприкасающихся групп в ссылочной последовательности. Рассматриваемая последовательность может быть либо полностью аминокислотной последовательностью ссылочной последовательности, либо любым фрагментом, уточненным как описано в настоящей заявке. Предпочтительно, рассматриваемой последовательностью является последовательность SEQ ID NO: 51.

Такие варианты полипептида РТН могут быть вариантами, встречающимися в природе, как например встречающиеся в природе аллельные варианты, кодируемые одной из нескольких альтернативных форм РТН или PTHrP, занимающих данный локус на хромосоме или организме, или изоформы, кодируемые встречающимися в природе вариантами сплайсинга, происходящими из одного первичного транскрипта. Альтернативно вариант полипептида РТН может быть вариантом, который, как известно, не встречается в природе, и который может быть получен методиками мутагенеза, известными в данной области техники.

В данной области известно, что одна или более аминокислот могут быть удалены с N-конца или С-конца биоактивного полипептида без существенной потери биологической функции. Такие N- и/или С-концевые делеции также охватываются термином вариант полипептида РТН.

Специалистам в данной области техники также известно, что некоторые аминокислотные последовательности полипептидов РТН или PTHrP могут быть изменены без значительного влияния структуры или функции полипептида. Такие мутанты включают делеции, вставки, инверсии, повторы и замены, выбранные в соответствии с общими правилами, известными в данной области техники, чтобы иметь небольшой эффект на активность. Например, указания относительно того, как сделать фенотипически молчащие аминокислота замены, приведены в Bowie et al. (1990), Science 247:1306-1310, который полностью включен в настоящее описание посредством ссылки, где авторы указывают, что существуют два основных подхода к изучению толерантности аминокислотной последовательности к изменению.

Термин полипептид РТН также охватывает все полипептиды РТН и PTHrP, кодируемые аналогами, ортологами и/или видовыми гомологами РТН и PTHrP. Специалистам в данной области техники также понятно, что аналоги PTHrP и PTHrP связываются с активированием общего рецептора РТН/PTHrPl, поэтому термин РТН полипептид также охватывает все аналоги PTHrP. Как применяется в настоящей заявке, термин "РТН аналог" относится к РТН и PTHrP о различных и не связанных между собой организмов, которые выполняют одни и те же функции в каждом организме, но которые не происходят из родовой структуры, которую имели предки организмов. Вместо этого аналогичные РТН и PTHrP возникали отдельно, а затем эволюционировали для выполнения одних и тех же или подобных функций. Другими словами, аналогичные полипептиды РТН и PTHrP представляют собой полипептиды с совершенно различными аминокислотными последовательностями, но которые имеют одну и ту же биологическую активность, а именно увеличение сывороточного кальция и экскреции фосфора почками, и уменьшение сывороточного фосфора и экскреции кальция почками.

Как применяется в настоящей заявке термин "отртолог РТН" относится к РТН и PTHrP двух различных видов, последовательности которых связаны друг с другом через общий гомологичный РТН в родоначальном виде, но которые в ходе эволюции стали отличными друг от друга.

Как применяется в настоящей заявке, термин "гомолог РТН" относится к РТН и PTHrP различных организмов, которые осуществляют одну и ту же функцию в каждом организме и которые происходят из родоначальной структуры, которую в общем имели предки организмов. Другими словами, гомологичные РТН полипептиды представляют собой полипептиды с совершенно подобными аминокислотными последовательностями, которые имеют одну и ту же биологическую активность, а именно увеличение сывороточного кальция и экскреции фосфора почками, и уменьшение сывороточного фосфора и экскреции кальция почками. Предпочтительно, гомологи полипептида РТН могут определяться как полипептиды, имеющие идентичность по меньшей мере 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% или 95% со ссылочным полипептидом РТН или PTHrP, предпочтительно РТН полипептидом с SEQ ID NO: 51

Таким образом, полипептидом РТН в соответствии с настоящим изобретением может быть, например: (i) полипептид, в котором по меньшей мере один из аминокислотных остатков имеет в качестве заместителя консервативный или неконсервированный аминокислотный остаток, предпочтительно консервативный аминокислотный остаток, и такой замещенный аминокислотный остаток может или не может быть кодирован генетическим кодом; и/или (ii) полипептид, в котором по меньшей мере один из аминокислотных остатков включает группу заместителя; и/или (iii) полипептид, где полипептид РТН слит с другим соединением, как например соединение для увеличения периода полувысвобождения полипептида (например, полиэтилэтенгликоль); и/или (iv) полипептид, в котором дополнительные аминокислоты слиты с полипептидом РТН, как например, полипептидная или лидерная или секреторная последовательность области слияния IgG Fc или последовательность, которая используется для очистки вышеуказанной формы полипептида, или последовательность белка-предшественника.

Как применяется в настоящей заявке, термин "фрагмент полипептида РТН" относится к любому пептиду, содержащему последовательный промежуток части аминокислотной последовательности РТН или PTHrP полипептида, предпочтительно полипептида последовательности SEQ ID NO: 51.

Более конкретно, фрагмент полипептида РТН содержит по меньшей мере 6, как например по меньшей мере 8, по меньшей мере 10 или по меньшей мере 17 последовательных аминокислот РТН или PTHrP полипептида, более предпочтительно полипептида последовательности SEQ ID NO: 51. Фрагмент полипептида РТН может быть дополнительно описан как подвид РТН или PTHrP полипептидов, содержащих по меньшей мере 6 аминокислот, где "по меньшей мере 6" определяется как целое число между 6 и целым числом, обозначающим С-концевую аминокислоту РТН или PTHrP полипептида, предпочтительно полипептида последовательности SEQ ID No: 51. Также включены виды фрагментов полипептида РТН или PTHrP из по меньшей мере 6 аминокислот в длину, как описано выше, которые дополнительно уточнены с точки зрения их N-концевых и С- концевых положений. Также термином "фрагмент полипептида РТН" охватываются в качестве отдельных видов все фрагменты полипептида РТН или PTHrP из по меньшей мере 6 аминокислот в длину, как описано выше, которые могут быть в частности уточнены их N-концевым и С-концевым положением. То есть, каждая комбинация N-концевого и С-концевого положения, которые составляющая из по меньшей мере 6 последовательных аминокислотных остатков в длину может занимать, на любой данной аминокислотной последовательности РТН или PTHrP полипептида, предпочтительно РТН полипептида последовательности SEQ ID:NO51, включена в настоящее изобретение.

Термин "РТН" также включает поли(аминокислотные) конъюгаты, которые имеют последовательность, как описано выше, но имеющие основную цепь, содержит как амидные, так и неамидные связи, как например сложноэфирные связи, как например депсипептиды. Депсипептиды представляют собой цепи аминокислотных остатков, в которых основная цепь содержит как амидные (пептидные), так и сложноэфирные связи. Соответственно, термин "боковая цепь", как применяется в настоящей заявке, относится либо к составляющей, присоединенной к альфа-атому углерода аминокислотной составляющей, если аминокислотная составляющая соединена через аминные связи, как например в полипептидах, либо к любой составляющей, содержащей атом углерода, присоединенной к основной цепи поли(аминокислотного) конъюгата, как например в случае депсипептидов. Предпочтительно, термин "РТН" относится к полипептидам, имеющим основную цепь, образованную через амидные (пептидные) связи.

Поскольку термин РТН включает вышеописанные варианты, аналоги, ортологи, гомологи, производные и фрагменты РТН и PTHrP, все ссылки на конкретные положения в ссылочной последовательности также включают эквивалентные положения в вариантах, аналогах, ортологах, гомологах, производных и фрагментах РТН или PTHrP составляющей, даже если специально не указано.

Как применяется в настоящей заявке, термин «случайная спираль» относится к пептиду или белку, принимающему/имеющему/образующему, предпочтительно имеющему, конформацию, которая по существу не имеет определенной вторичной и третичной структуры, как определено с помощью спектроскопии кругового дихроизма, осуществляемой в водном буфере при температуре окружающей среды и рН 7,4. Предпочтительно, температура окружающей среды составляет около 20°С, то есть между 18°С и 22°С, наиболее предпочтительная температура окружающей среды составляет 20°С.

Как применяется в настоящей заявке термин "фармацевтическая композиция" относится к композиции, содержащей один или более активных ингредиентов, например лекарственное средство или пролекарство, в настоящей заявке в частности РТН пролекарства согласно настоящему изобретению и необязательно один или более эксципиентов, а также любой продукт, который, прямо или косвенно, является результатом комбинации, комплексообразования или агрегация любых двух или более ингредиентов композиции, или диссоциации одного или более ингредиентов, или других типов реакций или взаимодействий одного или более ингредиентов. Соответственно, фармацевтическая композиция согласно настоящему изобретению охватывает любую композицию, полученную путем смешивания одного или более РТН пролекарств согласно настоящему изобретению и необязательно фармацевтически приемлемого эксципиента.

Как применяется в настоящей заявке термин "жидкая композиция" относится к смеси, содержащей растворимое в воде пролекарство РТН и один или более растворителей, как например вода.

Термин "композиция в виде суспензии" относится к смеси, содержащей нерастворимое в воде пролекарство РТН, где например носитель Z' представляет собой гидрогель, и один или более растворителей, как например вода. Из-за нерастворимого в воде полимера, полимерное пролекарство не может быть растворено, и пролекарство находится в форме частиц.

Как применяется в настоящей заявке, термин "сухая композиция" означает, что фармацевтическая композиция обеспечивается в сухой форме. Подходящими способами сушки является распылительная сушка и лиофилизация, т.е. сушка замораживанием. Такая сухая композиция пролекарства имеет остаточное содержание воды, равное максимум 10%, предпочтительно менее 5% и более предпочтительно менее 2%, как определено по методу Карла Фишера. Предпочтительно, фармацевтическая композиция согласно настоящему изобретению высушивается посредством лиофилизации.

Термин "лекарственное средство", как применяется в настоящей заявке, относится к веществу, применяемому для лечения, облегчения, профилактики или диагностике заболевания или, в противном случае, для улучшения физического или умственного здоровья. Если лекарственное средство конъюгирована с другой составляющей, составляющая полученного продукта, которая происходит из лекарственного средства, обозначается как "биологически активная составляющая". Пролекарство РТН согласно настоящему изобретению содержит РТН составляющую, которая высвобождается из РТН пролекарства в форме лекарственного средства РТН.

Как применяется в настоящей заявке термин "пролекарство" относится к конъюгату, содержащему биологически активную составляющую, обратимо и ковалентно соединенную со специализированной защитной группой через обратимую линкерную составляющую пролекарства, которая представляет собой линкерную составляющую, содержащую обратимую связь с биологически активной составляющей, и где специализированная защитная группа изменяет или уменьшает нежелательные свойства в родоначальной молекуле. Это также включает усиления желательных свойств лекарственного средства и подавление нежелательных свойств. Специализированная нетоксичная защитная группа обозначается как "носитель". Пролекарство высвобождает обратимо и ковалентно связанную биологически активную составляющую в форме соответствующего ей лекарственного средства. Другими словами, пролекарство представляет собой конъюгат, содержащий биологически активную составляющую, которая обратимо и ковалентно конъюгирована с составляющей-носителем через обратимую линкерную составляющую пролекарства, где ковалентное или обратимое конъюгирование носителя с обратимой линкерной составляющей пролекарства является либо непосредственным, либо через спейсер. Такой конъюгат высвобождает прежде конъюгированную биологически активную составляющую в форме свободного лекарственного средства.

Термины "биодеградируемая связь" или "обратимая связь" означает связь, которая является гидролитически разрушаемой, т.е. расщепляемой, в отсутствии ферментов при физиологических условиях (водный буфер при рН 7.4, 37°С) с периодом полувысвобождения в интервале от одного часа до двух месяцев, предпочтительно от одного часа до одного месяца. Соответственно, стабильная связь представляет собой связь, имеющую период полувысвобождения при физиологических условиях (водный буфер при рН 7.4, 37°С), равный более чем два месяца.

Соответственно, "обратимая линкерная составляющая пролекарства" представляет собой составляющую, которая ковалентно конъюгирована с биологически активной составляющей, как например РТН, через обратимую связь и также ковалентно конъюгирована с составляющей-носителем, как например -Z или Z', где ковалентное конъюгирование с указанной составляющей-носителем является либо непосредственным, либо через спейсерную составляющую, как например -L²-. Предпочтительно связью между -Z или Z' и L²- является стабильная связь.

Как применяется в настоящей заявке, термин "бесследный линкер пролекарства" означает обратимый линкер пролекарства, который при расщеплении высвобождает лекарственное средство в его свободной форме. Как применяется в настоящей заявке, термин "свободная форма" лекарственного средства означает лекарственное средство в его немодифицированной, фармакологически активной форме.

Как применяется в настоящей заявке, термин "эксципиент" относится к разбавителю, вспомогательному средству или носителю, совместно с которым вводится терапевтическое средство, как например лекарственное средство или пролекарство. Такой фармацевтический эксципиент может представлять собой стерильную жидкость, такую как вода и масла, включая жидкости нефтяного, животного, растительного или синтетического происхождения, включая, но без ограничения к этому, арахисовое масло, соевое масло, минеральное масло, сезамовое масло и тому подобное. Вода является предпочтительным эксципиентом, когда фармацевтическая композиция вводится перорально. Соляной раствор и водный раствор декстрозы являются предпочтительными наполнителями, когда фармацевтическая композиция вводится внутривенно. Соляные растворы и водные растворы декстрозы и глицерина предпочтительно применяются в качестве жидких эксципиентов для инъецируемых растворов. Подходящие фармацевтические эксципиенты включают крахмал, глюкозу, лактозу, сахарозу, маннит, трегалозу, желатин, солод, рис, муку, мел, силикагель, стеарат натрия, глицерин моностеарат, тальк, хлорид натрия, сухое молоко, глицерин, пропиленгликоль, воду, этанол и тому подобное. Композиция при желании может содержать также небольшие количества увлажняющих или эмульгирующих средств, рН-буферных средств, таких как, например, ацетат, сукцинат, трис, карбонат, фосфат, HEPES (4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинэтансульфокислота, MES (2-(N-морфолин)этансульфокислота) или может содержать детергенты, такие как Tween, полоксамеры, полоксамины, CHAPS, Igepal, или аминокислоты, такие как, например, глицин, лизин или гистидин. Такие фармацевтические композиции могут иметь форму растворов, суспензий, эмульсий, таблеток, пилюль, капсул, порошков, препаратов с замедленным высвобождением и тому подобное. Фармацевтическая композиция может иметь вид суппозитория, с традиционными связующими средствами и эксципиентами, такими как триглицериды. Препарат для перорального введения может содержать стандартные эксципиенты, такие как фармацевтические марки маннита, лактозы, крахмала, стеарата магния, сахарина натрия, целлюлозы, карбоната магния и т.д. Такие композиции содержат терапевтически эффективное количество лекарственного средства или биологически активной составляющей, вместе с подходящим количеством эксципиента, так чтобы получилась форма, подходящая для введения пациенту. Композиция должна соответствовать способу введения.

Как применяется в настоящей заявке, термин "реагент" означает химическое соединение, которое содержит по меньшей мере одну функциональную группу для реакции с функциональной группой другого химического соединения или лекарственного средства. Понятно, что лекарственное средство, содержащее функциональную группу (как например первичный или вторичный амин или гидроксильная функциональная группа) также представляет собой реагент.

Как применяется в настоящей заявке, термин "составляющая" означает часть молекулы, в которой отсутствует один или более атомов по сравнению с соответствующим реагентов. Если, например, реагент формулы "Н-Х-Н" реагирует с другим реагентом и становится частью продукта реакции, соответствующая составляющая продукта реакции имеет структуру "Н-Х-" или "-Х- ", где каждый "- " обозначает присоединение к другой составляющей. Соответственно, биологически активная составляющая высвобождается из пролекарства в качестве лекарственного средства.

Понятно, что если обеспечивается последовательность или химическая структура группы атомов, где группа атомов присоединяется к двум составляющим или прерывает составляющую, указанная последовательность или структура может быть присоединена к двум составляющим в любой ориентации, если иного не указано. Например, составляющая "-C(O)N(R¹²)-" может быть присоединена к двум составляющим или прерывать составляющую либо как "-C(O)N(R)-", либо как "-N(R)C(O)-". Подобным образом, составляющая

может быть присоединена к двум составляющим или может прерывать составляющую либо как либо как

Как применяется в настоящей заявке, термин "функциональная группа" означает группу атомов, которая может реагировать с другими группами атомов. Функциональные группы включают, но без ограничения к этому, следующие группы: карбоновая кислота (-(С=O)ОН), первичный и вторичный амин (-NH₂, -NH-), малеимид, тиол (-SH), сульфоновая кислота (-(O=S=O)OH), карбонат, карбамат (-O(C=O)N<), гидроксил (-ОН), альдегид (-(С=O)Н), кетон (-(С=O)-), гидразин (>N-N<), изоцианат, изотиоцианат, фосфорная кислота (-O(Р=O)ОНОН), фосфоновая кислота (-O(Р=O)ОНН), галоацетил, алкилгалогенид, акрилоил, арилфторид, гидроксиламин, дисульфид, сульфонамиды, серная кислота, винилсульфон, винилкетон, диазоалкан, оксиран и азиридин.

В случае, если пролекарства согласно настоящему изобретению содержат одну или более кислотных или основных групп, настоящее изобретение включает также их соответствующие фармацевтически или токсикологически приемлемые соли, в частности их фармацевтически применимые соли. Таким образом, пролекарства согласно настоящему изобретению, содержащие кислотные группы, могут применяться по настоящему изобретению, например, в виде солей щелочных металлов, солей щелочноземельных металлов или аммониевых солей. Более конкретные примеры таких солей включают соли натрия, соли калия, соли кальция, соли магния или соли аммония или с органическими аминами, такими как, например, этиламин, этаноламин, триэтаноламин или аминокислоты. Пролекарства согласно настоящему изобретению, содержащие одну или более основных групп, т.е. групп, которые могут быть протонированы, могут присутствовать и использоваться согласно настоящему изобретению в форме их аддитивных солей с неорганическими или органическими кислотами. Примеры подходящих кислот включают хлорид водорода, бромид водорода, фосфорную кислоту, серную кислоту, азотную кислоту, метансульфокислоту, п-толуолсульфокислоту, нафталинсульфокислоту, щавелевую кислоту, уксусную кислоту, винную кислоту, молочную кислоту, салициловую кислоту, бензойную кислоту, муравьиную кислоту, пропионовую кислоту, пивалоиловую кислоту, диэтилуксусную кислоту, малоновую кислоту, янтарную кислоту, пимелиновую кислоту, фумаровую кислоту, малеиновую кислоту, яблочную кислоту, сульфаминовую кислоту, фенилпропионовую кислоту, глюконовую кислоту, аскорбиновую кислоту, изоникотиновую кислоту, лимонную кислоту, адипиновую кислоту и другие кислоты, известные квалифицированным специалистам в данной области. Специалистам в данной области техники известно превращение основной группы в катион, такие как алкилирование аминной группы с получением положительно заряженной аммониевой группы и соответствующего противоиона соли. Если пролекарства согласно настоящему изобретению одновременно содержат кислотные и основные группы, настоящее изобретение также включает, в дополнение к упомянутым солевым формам, внутренние соли или бетаины (цвиттерионы). Соответствующие соли могут быть получены обычными методами, известными квалифицированным специалистам в данной области, например путем контакта этих пролекарств с органической или неорганической кислотой или основанием в растворителе или диспергирующем средстве, или путем анионного обмена или катионного обмена с другими солями. Настоящее изобретение также включает все соли пролекарств согласно настоящему изобретению, которые, вследствие низкой физиологической совместимости не пригодны непосредственно для применения в фармацевтических продуктах, но которые могут использоваться, например, как промежуточные соединения для химических реакций или для получения фармацевтически приемлемых солей.

Термин "фармацевтически приемлемый" означает вещество, которое не наносит вред при введении пациенту и предпочтительно одобрено надзорным органом, таким как ЕМЕА (Европа) и/или FDA (США) и/или любым другим национальным надзорным органом для применения в отношении животных, предпочтительно человека.

Как применяется в настоящей заявке термин "около" в комбинации с числовым значением применяется для указания на диапазон в интервале и включая числовое значение плюс и минус не более 10% от указанного числового значения, более предпочтительно не более 8% от указанного значения, даже более предпочтительно не более 5% от указанного значения и наиболее предпочтительно не более 2% от указанного значения. Например, фраза "около 200" применяется для обозначения диапазона в интервале и включая 200+/-10%, т.е. в интервале и включая 180-220; предпочтительно 200+/-8%, т.е. в интервале и включая 184-216; даже более предпочтительно в интервале и включая 200+/-5%, т.е. в интервале и включая 190-210; и наиболее предпочтительно 200+/-2%, т.е. в интервале и включая 196-204. Понятно, что процент, приведенный как "около 20%" не означает "20%+/-10%", т.е. в интервале и включая 10-30%, но "около 20%" означает в интервале и включая 18-22%, т.е. плюс и минус 10% от числового значения, которое равно 20.

Как применяется в настоящей заявке, термин «полимер» означает молекулу, содержащую повторяющиеся структурные единицы, т.е. мономеры, связанные химическими связями линейным, кольцевым, разветвленным, сшитым или дендримерным образом или их комбинацией, которая может быть синтетического или биологического происхождения или комбинацией обоих. Понятно, что полимер может также содержать одну или более других химических групп и/или составляющей/ составляющих, таких как, например, одна или более функциональные группы. Предпочтительно, растворимый полимер имеет молекулярную массу, равную по меньшей мере 0.5 кДа, например, молекулярную массу, равную по меньшей мере 1 кДа, молекулярную массу, равную по меньшей мере 2 кДа, молекулярную массу, равную по меньшей мере 3 кДа, или молекулярную массу, равную по меньшей мере 5 кДа. Если полимер является растворимым, он предпочтительно имеет молекулярную массу, равную самое большее 1000 кДа, как например самое большее 750 кДа, как например самое большее 500 кДа, как например самое большее 300 кДа, как например самое большее 200 кДа, как например самое большее 100 кДа. Понятно, что для нерастворимых полимеров, как например гидрогели, нет значимых диапазонов молекулярной массы. Понятно также, что белок представляет собой полимер, в котором аминокислоты являются повторяющимися структурными звеньями, даже не смотря на то, что боковые цепи каждой аминокислоты могут быть различными.

Как применяется в настоящей заявке, термин "полимерный" означает реагент или составляющую, содержащую один или более полимеров или полимерную составляющую/составляющие. Полимерный реагент или составляющая может необязательно также содержать одну или более других составляющих, которые предпочтительно выбирают из группы, состоящей из::

• С_1-50 алкила, С_2-50 алкенила, С_2-50 алкинила, С_3-10 циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, 8-11-членного гетеробициклила, фенила, нафтила, инденила, инданила и тетралинила; и

• связей, выбранных из группы, содержащей

где

пунктирные линии обозначают присоединение к оставшейся части составляющей или реагента, и

-R и R^a независимо друг от друга выбирают из группы, состоящей из -Н, метила, этила, пропила, бутила, пентила и гексила.

Специалист в данной области понимает, что продукты полимеризации, полученные из реакции полимеризации, не все имеют одинаковую молекулярную массу, а скорее имеют молекулярно-массовое распределение. Следовательно, диапазоны молекулярных масс, молекулярные массы, диапазоны количества мономеров в полимере и количества мономеров в полимере, как применяется в настоящей заявке, относятся к среднечисловой молекулярной массе и среднему числу мономеров, т.е. к среднему арифметическому молекулярной массы полимера или полимерного фрагмента и среднему арифметическому числа мономеров полимера или полимерного фрагмента.

Соответственно, в полимерной составляющей, содержащей "х" мономерных единиц, любое целое число, приведенное для "х", поэтому соответствует арифметическому среднему числу мономеров. Любой диапазон целых чисел, приведенный для "х", обеспечивает диапазон целых чисел, в котором лежит арифметическое среднее число мономеров. Целое число для "х", приведенное как "около х", означает, что арифметические средние числа мономеров лежат в диапазоне целых чисел х +/- 10%, предпочтительно х +/- 8%, более предпочтительно х +/- 5% и наиболее предпочтительно х +/- 2%.

Как применяется в настоящей заявке, термин "среднечисловая молекулярная масса" означает обычное среднее арифметическое молекулярных масс отдельных полимеров.

Как применяется в настоящей заявке термин "растворимый в воде" со ссылкой на носитель означает, что когда такой носитель является частью РТН пролекарства согласно настоящему изобретению по меньшей мере 1 г РТН пролекарства, содержащего такой растворимый в воде носитель, может быть растворено в одном литре воды при 20°С с образованием гомогенного раствора. Соответственно, термин "не растворимый в воде" со ссылкой на носитель означает, что когда такой носитель является частью РТН пролекарства согласно настоящему изобретению менее 1 г РТН пролекарства, содержащего такой растворимый в воде носитель, может быть растворено в одном литре воды при 20°С с образованием гомогенного раствора.

Как применяется в настоящей заявке, термин "гидрогель" означает гидрофильную или амфифильную полимерную сеть, состоящую из гомополимеров или сополимеров, которая является не растворимой из-за присутствия водородных связей, ионных взаимодействий и/или ковалентных химических поперечных связей. Поперечные связи образуют структуру сети и физическую целостность.

Как применяется в настоящей заявке термин «термогелевое» означает соединение, которое представляет собой жидкость или раствор с низкой вязкостью, имеющий вязкость менее 500 сПз при 25°С при скорости сдвига около 0,1/с при низкой температуре, причем низкая температура находится в интервале от около 0°С до около 10°С, но которое представляет собой соединение с более высокой вязкостью менее 10000 сПз при 25°С со скоростью сдвига около 0,1/с при более высокой температуре, причем более высокая температура находится в интервале от около 30°С до около 40°С, например, при температуре около 37°С.

Как применяется в настоящей заявке, термин "на основе ПЭГ" в отношении составляющей или реагента означает, что указанная составляющая или реагент содержит ПЭГ. Предпочтительно, составляющая или реагент на основе ПЭГ содержит по меньшей мере 10% (мас./мас.) ПЭГ, как например по меньшей мере 20% (мас./мас.) ПЭГ, как например по меньшей мере 30% (мас./мас.) ПЭГ, как например по меньшей мере 40% (мас./мас.) ПЭГ, как например по меньшей мере 50% (мас./мас.), как например по меньшей мере 60 (мас./мас.) ПЭГ, как например по меньшей мере 70% (мас./мас.) ПЭГ, как например по меньшей мере 80% (мас./мас.) ПЭГ, как например по меньшей мере 90% (мас./мас.) ПЭГ, как например по меньшей мере 95%. Оставшиеся массовые проценты составляющей или реагента на основе ПЭГ составляют другие составляющие, предпочтительно выбранные из следующих составляющих и связей:

• C_1-50 алкил, С_2-50 алкенил, С_2-50 алкинил, С_3-10 циклоалкил, 3-10-членный гетероциклил, 8-11-членный гетеробициклил, фенил, нафтил, инденил, инданил и тетралинил; и

• связей, выбранных из группы, содержащей

где

пунктирные линии обозначают присоединение к оставшейся части составляющей или реагента, и

-R и R^a независимо друг от друга выбирают из группы, состоящей из -Н, метила, этила, пропила, бутила, пентила и гексила.

Как применяется в настоящей заявке, термин "на основе ПЭГ, содержащий по меньшей мере Х% ПЭГ" в отношении составляющей или реагента означает, что указанная составляющая или реагент содержит по меньшей мере Х% (мас./мас.) единиц этиленгликоля (-СН₂СН₂О-), где единицы этиленгликоля могут быть расположены блочным, чередующимся образом или могут быть расположены случайным образом в составляющей или реагента, и предпочтительно все единицы этиленгликоля указанной составляющей или реагента присутствуют в одном блоке; оставшиеся массовые проценты составляющей или реагента на основе ПЭГ составляют другие составляющие, предпочтительно выбранные из следующих составляющих и связей:

• C_1-50 алкил, C_2-50 алкенил, С_2-50 алкинил, С_3-10 циклоалкил, 3-10-членный гетероциклил, 8-11-членный гетеробициклил, фенил, нафтил, инденил, инданил и тетралинил; и

• связей, выбранных из группы, содержащей

где

пунктирные линии обозначают присоединение к оставшейся части составляющей или реагента, и

-R и R^a независимо друг от друга выбирают из группы, состоящей из -Н, метила, этила, пропила, бутила, пентила и гексила.

Термин "на основе гиалуроновой кислоты, содержащая по меньшей мере Х% гиалуроновая кислота" применяется соответствующим образом.

Термин "замещенный", как применяется в настоящей заявке, означает, что один или более атомов водорода молекулы или составляющей замещены другим атомом или группой атомов, которые обозначаются как "заместитель".

Предпочтительно, одни или более дополнительные необязательные заместители независимо друг от друга выбирают из группы, состоящей из галогена, -CN, -COOR^x1, -OR^x1, -C(O)R^x1, -C(O)N(R^x1R^x1a), -S(O)₂N(R^x1R^x1a), -S(O)N(R^x1R^x1a), -S(O)₂R^x1, -S(O)R^x1, -N(R^x1)S(O)₂N(R^x1aR^x1b), -SR^x1, -N(R^x1R^x1a), -NO₂, -OC(O)R^x1, -N(R^x1)C(O)R^x1a, -N(R^x1)S(O)₂R^x1a, -N(R^x1)S(O)R^x1a, -N(R^x1)C(O)OR^x1a, -N(R^x1)C(O)N(R^x1aR^x1b), -OC(O)N(R^x1R^x1a), -T⁰, C_1-50 алкила, C_2-50 алкенила и C_2-50 алкинила; где -T°, C_1-50 алкил, C_2-50 алкенил и C_2-50 алкинил необязательно замещены одним или более -R^x2, которые являются одинаковыми или различными, и где С_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и C_2-50 алкинил необязательно прерываются одной или более группами, выбранными из группы, состоящей из -Т⁰-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^x3)-, -S(O)₂N(R^x3)-, -S(O)N(R^x3)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^x3)S(O)₂N(R^x3a)-, -S-, -N(R^x3)-, -OC(OR^x3)(R^x3a)-, -N(R^x3)C(O)N(R^x3a)- и -OC(O)N(R^x3)-;

-R^x1, -R^x1a, -R^x1b независимо друг от друга выбирают из группы, состоящей из -Н, -Т⁰, С_1-50 алкила, С_2-50 алкенила и С_2-50 алкинила; где -Т⁰, С_1-50 алкил, С_2-50 алкенил, и С_2-50 алкинил необязательно замещены одним или более заместителями -R^x2, которые являются одинаковыми или различными, и где С_1-50 алкил, C_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно прерваны одной или более группами, выбранными из группы, состоящей из -Т⁰-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^x3)-, -S(O)₂N(R^x3)-, -S(O)N(R^x3)-; -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^x3)S(O)₂N(R^x3a)-, -S-, -N(R^x3)-, -OC(OR^x3)(R^x3a)-, -N(R^x3)C(O)N(R^x3a)- и -OC(O)N(R^x3)-;

каждый T⁰ независимо выбирают из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила, С_3-10 циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила и 8-11-членного гетеробициклила; где каждый Т⁰ независимо необязательно замещен одним или более заместителями -R^x2, которые являются одинаковыми или различными;

каждый -R^x2 независимо выбирают из группы, состоящей из галогена, -CN, оксо (=O), -COOR^x4, -OR^x4, -C(O)R^x4, -C(O)N(R^x4R^x4a), -S(O)₂N(R^x4R^x4a), -S(O)N(R^x4R^x4a), -S(O)₂R^x4, -S(O)R^x4, -N(R^x4)S(O)₂N(R^x4aR^x4b), -SR^x4, -N(R^x4R^x4a), -NO₂, -OC(O)R^x4, -N(R^x4)C(O)R^x4a, -N(R^x4)S(O)₂R^x4a, -N(R^x4)S(O)R^x4a, -N(R^x4)C(O)OR^x4a, -N(R^x4)C(O)N(R^x4aR^x4b), -OC(O)N(R^x4R^x4a) и C_1-6 алкила; где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или более заместителями галоген, которые являются одинаковыми или различными;

каждый -R^x3, -R^x3a, -R^x4, -R^x4a, -R^x4b независимо выбирают из группы, состоящей из -Н и С_1-6 алкил а; где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или более заместителями галоген, которые являются одинаковыми или различными.

Более предпочтительно, один или более дополнительных необязательных заместителей независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из галогена, -CN, -COOR^x1, -OR^x1, -C(O)R^x1, -C(O)N(R^x1R^x1a), -S(O)₂N(R^x1R^x1a), -S(O)N(R^x1R^x1a), -S(O)₂R^x1, -S(O)R^x1, -N(R^x1)S(O)₂N(R^x1aR^x1b), -SR^x1, -N(R^x1R^x1a), -NO₂, -OC(O)R^x1, -N(R^x1)C(O)R^x1a, -N(R^x1)S(O)₂R^x1a, -N(R^x1)S(O)R^x1a, -N(R^x1)C(O)OR^x1a, -N(R^x1)C(O)N(R^x1aR^x1b), -OC(O)N(R^x1R^x1a), -T⁰, С_1-10алкила, C_2-10 алкенила и С_2-10 алкинила; где -Т⁰, C_1-10 алкил, С_2-10 алкенил и С_2-10 алкинил необязательно замещены одним или более -R^x2, которые являются одинаковыми или различными, и где С_1-10 алкил, С_2-10 алкенил и С_2-10 алкинил необязательно прерываются одной или более группами, выбранными из группы, состоящей из -Т⁰ -, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^x3)-, -S(O)₂N(R^x3)-, -S(O)N(R^x3)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^x3)S(O)₂N(R^x3a)-, -S-, -N(R^x3)-, -OC(OR^x3)(R^x3a)-, -N(R^x3)C(O)N(R^x3a)- и -OC(O)N(R^x3)-;

каждый -R^x1, -R^x1a, -R^x1b, -R^x3, -R^x3a независимо выбран из группы, состоящей из Н, галогена, C_1-6алкила, С_2-6 алкенила и С_2-6 алкинила;

каждый Т⁰ независимо выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила, С_3-10 циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, и 8-11-членного гетеробициклила; где каждый Т⁰ независимо необязательно замещен одним или более -R^x2, которые являются одинаковыми или различными;

каждый -R^x2 независимо выбран из группы, состоящей из галогена, -CN, оксо (=O), -COOR^x4, -OR^x4, -C(O)R^x4, -C(O)N(R^x4R^x4a), -S(O)₂N(R^x4R^x4a), -S(O)N(R^x4R^x4a), -S(O)₂R^x4, -S(O)R^x4, -N(R^x4)S(O)₂N(R^x4aR^x4b), -SR^x4, -N(R^x4R^x4a), -NO₂, -OC(O)R^x4, -N(R^x4)C(O)R^x4a, -N(R^x4)S(O)₂R^x4a, -N(R^x4)S(O)R^x4a, -N(R^x4)C(O)OR^x4a, -N(R^x4)C(O)N(R^x4aR^x4b), -OC(O)N(R^x4R^x4a), и C_1-6 алкила; где С_1-6 алкил необязательно замещен одним или более галогенами, которые являются одинаковыми или различными;

каждый -R^x4, -R^x4a, -R^x4b независимо выбран из группы, состоящей из Н, галогена, С_1-6 алкила, С_2-6 алкенила и С_2-6 алкинила;

Даже более предпочтительно, один или более дополнительных необязательных заместителей независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из галогена, -CN, -COOR^x1, -OR^x1, -C(O)R^x1, -C(O)N(R^x1R^x1a), -S(O)₂N(R^x1R^x1a), -S(O)N(R^x1R^x1a), -S(O)₂R^x1, -S(O)R^x1, -N(R^x1)S(O)₂N(R^x1aR^x1b), -SR^x1, -N(R^x1R^x1a), -NO₂, -OC(O)R^x1, -N(R^x1)C(O)R^x1a, -N(R^x1)S(O)₂R^x1a, -N(R^x1)S(O)R^x1a, -N(R^x1)C(O)OR^x1a, -N(R^x1)C(O)N(R^x1aR^x1b), -OC(O)N(R^x1R^x1a), -T⁰, C_1-6 алкила, С_2-6 алкенила и С_2-6 алкинила; где -Т⁰, С_1-6 алкил, С_2-6 алкенил и С_2-6 алкинил необязательно замещены одним или более -R^x2, которые являются одинаковыми или различными, и где C_1-6 алкил, С_2-6 алкенил и С_2-6 алкинил необязательно прерываются одной или более группами, выбранными из группы, состоящей из -Т⁰-, -С(O)O-, -O-, -С(O)-, -C(O)N(R^x3)-, -S(O)₂N(R^x3)-, -S(O)N(R^x3)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^x3)S(O)₂N(R^x3a)-,-S-, -N(R^x3)-, -OC(OR^x3)(R^x3a)-, -N(R^x3)C(O)N(R^x3a)-, и -OC(O)N(R^x3)-;

каждый -R^x1, -R^x1a, -R^x1b, -R^x2, -R^x3, -R^x3a независимо выбран из группы, состоящей из Н, галогена, C_1-6 алкила, С_2-6 алкенила и С_2-6 алкинила;

каждый Т⁰ независимо выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила, С_3-10 циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, и 8-11-членного гетеробициклила; где каждый Т⁰ независимо необязательно замещен одним или более -R^x2, которые являются одинаковыми или различными.

Предпочтительно, максимум 6 -Н атомов необязательно замещенной молекулы независимо замещены заместителем, например, 5 -Н атомов независимо замещены заместителем, 4 -Н атома независимо замещены заместителем, 3 -Н атома независимо замещены заместителем, 2 -Н атома независимо замещены заместителем, или 1 -Н атом замещен заместителем.

Термин "прерванный" означает, что фрагмент вставлен между двумя атомами углерода или - если вставка находится на одном из концов составляющей -между атомом углерода или гетероатомом и атомом водорода, предпочтительно между атомом углерода и атомом водорода.

Термин "спейсер" относится к любой составляющей, которая является подходящей для соединения двух составляющих. Предпочтительно, спейсер выбран из группы, состоящей из -Т-, -С(O)О, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^y1)-, -S(O)₂N(R^y1)-, -S(O)N(R^y1)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^y1)S(O)₂N(R^y1a)-, -S-, -N(R^y1)-, -OC(OR^y1)(R^y1a)-, -N(R^y1)C(O)N(R^y1a)-, -OC(O)N(R^y1)-, C_1-50 алкила, C_2-50 алкенила и C_2-50 алкинила; где -T-, C_1-50 алкил, C_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно замещены одним или более -R^y2, которые являются одинаковыми или различными, и где C_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно прерываются одной или более группами, выбранными из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^y3)-, -S(O)₂N(R^y3)-, -S(O)N(R^y3)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^y3)S(O)₂N(R^y3a)-, -S-, -N(R^y3)-, -OC(OR^y3)(R^y3a)-, -N(R^y3)C(O)N(R^y3a)-, и -OC(O)N(R^y3)-;

-R^y1 и -R^y1a независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из Н, -Т, С_1-50 алкила, C_2-50 алкенила и С_2-50 алкинила; где -Т, С_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно замещены одним или более -R^y2, которые являются одинаковыми или различными, и где С_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно прерываются одной или более группами, выбранными из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^y4)-, -S(O)₂N(R^y4)-, -S(O)N(R^y4)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^y4)S(O)₂N(R^y4a)-, -S-, -N(R^y4)-, -OC(OR^y4)(R^y4a)-, -N(R^y4)C(O)N(R^y4a)-, и -OC(O)N(R^y4)-;

каждый Т независимо выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила, С_3-10 циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, 8-11-членного гетеробициклила, 8-30-членного карбополициклила, и 8-30-членного гетерополициклила; где каждый Т независимо необязательно замещен одним или более -R^y2, которые являются одинаковыми или различными;

каждый -R^y2 независимо выбран из группы, состоящей из галогена, -CN, оксо (=O), -COOR^y5, -OR^y5, -C(O)R^y5, -C(O)N(R^y5R^y5a), -S(O)₂N(R^y5R^y5a), -S(O)N(R^y5R^y5a), -S(O)₂R^y5, -S(O)R^y5, -N(R^y5)S(O)₂N(R^y5aR^y5b), -SR^y5, -N(R^y5R^y5a), -NO₂, -OC(O)R^y5, -N(R^y5)C(O)R^y5a, -N(R^y5)S(O)₂R^y5a, -N(R^y5)S(O)R^y5a, -N(R^y5)C(O)OR^y5a, -N(R^y5)C(O)N(R^y5aR^y5b), -OC(O)N(R^y5R^y5a), и C_1-6 алкила; где С_1-6 алкил необязательно замещен одним или более галогенами, которые являются одинаковыми или различными; и

каждый -R^y3, -R^y3a, -R^y4, -R^y4a, -R^y5, -R^y5a и R^y5b независимо выбран из группы, состоящей из Н, и C_1-6 алкила, где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или более галогенами, которые являются одинаковыми или различными.

Даже более предпочтительно спейсер выбран из -Т-, -С(O)O-, -O-, -С(О)-, -C(O)N(R^y1)-, -S(O)₂N(R^y1)-, -S(O)N(R^y1)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^y1)S(O)₂N(R^y1a)-, -S-, -N(R^y1)-, -OC(OR^y1)(R^y1a)-, -N(R^y1)C(O)N(R^y1a)-, -OC(O)N(R^y1)-, C_1-50 алкила, C_2-50 алкенила, и C_2-50 алкинила; где -T-, С_1-20 алкил, С_2-20 алкенил и С_2-20 алкинил необязательно замещены одним или более -R^y2, которые являются одинаковыми или различными, и где C_1-20 алкил, С_2-20 алкенил и С_2-20 алкинил необязательно прерываются одной или более группами, выбранными из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -O-, -С(O)-, -C(O)N(R^y3)-, -S(O)₂N(R^y3)-, -S(O)N(R^y3)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^y3)S(O)₂N(R^y3a)-, -S-, -N(R^y3)-, -OC(OR^y3)(R^y3a)-, -N(R^y3)C(O)N(R^y3a)-, и -OC(O)N(R^y3)-;

-R^y1 и -R^y1a независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из Н, -Т, C_1-10 алкила, С_2-10 алкенила и С_2-10 алкинила; где -Т, С_1-10 алкил, С_2-10 алкенил и С_2-10 алкинил необязательно замещены одним или более -R^y2, которые являются одинаковыми или различными, и где С_1-10 алкил, С_2-10 алкенил и С_2-10 алкинил необязательно прерываются одной или более группами, выбранными из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^y4)-, -S(O)₂N(R^y4)-, -S(O)N(R^y4)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^y4)S(O)₂N(R^y4a)-, -S-, -N(R^y4)-, -OC(OR^y4)(R^y4a)-, -N(R^y4)C(O)N(R^y4a)- и -OC(O)N(R^y4)-;

каждый T независимо выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила, С_3-10 циклоалкил, 3-10-членного гетероциклила, 8-11-членного гетеробициклила, 8-30-членного карбополициклила, и 8-30-членного гетерополициклила; где каждый Т независимо необязательно замещен одним или более -R^y2, которые являются одинаковыми или различными;

-R^y2 выбран из группы, состоящей из галогена, -CN, оксо (=O), -COOR^y5, -OR^y5, -C(O)R^y5, -C(O)N(R^y5R^y5a), -S(O)₂N(R^y5R^y5a), -S(O)N(R^y5R^y5a), -S(O)₂R^y5, -S(O)R^y5, -N(R^y5)S(O)₂N(R^y5aR^y5b), -SR^y5, -N(R^y5R^y5a), -NO₂, -OC(O)R^y5, -N(R^y5)C(O)R^y5a, -N(R^y5)S(O)₂R^y5a, -N(R^y5)S(O)R^y5a, -N(R^y5)C(O)OR^y5a, -N(R^y5)C(O)N(R^y5aR^y5b), -OC(O)N(R^y5R^y5a), и С_1-6 алкила; где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или более галогенами, которые являются одинаковыми или различными; и

каждый -R^y3, -R^y3a, -R^y4, -R^y4a, -R^y5, -R^y5a и R^y5b независимо от каждого другого выбран из группы, состоящей из Н, и C_1-6 алкила; где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или более галогенами, которые являются одинаковыми или различными.

Даже более предпочтительно спейсер выбран из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -O-, -С(O)-, -C(O)N(R^y1)-, -S(O)₂N(R^y1)-, -S(O)N(R^y1)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^y1)S(O)₂N(R^y1a)-, -S-, -N(R^y1)-, -OC(OR^y1)(R^y1a)-, -N(R^y1)C(O)N(R^y1a)-, -OC(O)N(R^y1)-, C_1-50 алкила, C_2-50 алкенила и C_2-50 алкинила; где -T-, C_1-50 алкил, C_2-50 алкенил и C_2-50 алкинил необязательно замещены одним или более -R^y2, которые являются одинаковыми или различными, и где С_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно прерываются одной или более группами, выбранными из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^y3)-, -S(O)₂N(R^y3)-, -S(O)N(R^y3)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^y3)S(O)₂N(R^y3a)-, -S-, -N(R^y3)-, -OC(OR^y3)(R^y3a)-, -N(R^y3)C(O)N(R^y3a)-, и -OC(O)N(R^y3)-;

-R^y1 и -R^y1a независимо выбраны из группы, состоящей из Н, -Т, С_1-10 алкила, С_2-10 алкенила и С_2-10 алкинила;

каждый Т независимо выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила, С_3-10 циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, 8-11-членного гетеробициклила, 8-30-членного карбополициклила, и 8-30-членного гетерополициклила;

каждый -R^y2 независимо выбран из группы, состоящей из галогена и C_1-6 алкила; и

каждый -R^y3, -R^y3a, -R^y4, -R^y4a, -R^y5, -R^y5a и R^y5b независимо от каждого другого выбран из группы, состоящей из -Н и C_1-6 алкила; где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или более галогенами, которые являются одинаковыми или различными.

Как применяется в настоящей заявке, термин "C_1-4 алкил" сам по себе или в комбинации означает неразветвленную или разветвленную алкильную составляющую, имеющую от 1 до 4 атомов углерода. Если присутствует на конце молекулы, примерами неразветвленного или разветвленного С_1-4 алкила являются метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор.-бутил и трет.-бутил. Когда две составляющие молекулы связаны С_1-4 алкилом, примерами таких С_1-4 алкильных групп являются -СН₂-, -СН₂-СН₂-, -СН(СН₃)-, -СН₂-СН₂-СН₂-, -CH(C₂H₅)-, -С(СН₃)₂-. Каждый водород C_1-4 алкильного углерода может необязательно быть замещен заместителем, как определено выше. Необязательно, C_1-4 алкил может быть прерван одной или более составляющими, как определено далее.

Как применяется в настоящей заявке, термин "С_1-6 алкил" сам по себе или в комбинации означает неразветвленную или разветвленную алкильную составляющую, имеющую от 1 до 6 атомов углерода. Если присутствует на конце молекулы, примерами неразветвленных или разветвленных C_1-6 алкильных групп являются метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор.-бутил, трет-бутил, н-пентил, 2-метилбутил, 2,2-диметилпропил, н-гексил, 2-метилпентил, 3-метилпентил, 2,2-диметилбутил, 2,3-диметилбутил и 3,3-диметилпропил. Когда две составляющие молекулы связаны C_1-6 алкильной группой, примерами таких C_1-6 алкильных групп являются -СН₂-, -СН₂-СН₂-, -СН(СН₃)-, -СН₂-СН₂-СН₂-, -СН(С₂Н₅)- и С(СН₃)₂-. Каждый атом водорода при С_1-6 атоме углерода может необязательно быть замещен заместителем, как определено выше. Необязательно, С_1-6 алкил может быть прерван одной или более составляющими, как определено далее.

Соответственно, "С_1-10 алкил", "С_1-20 алкил" или "С_1-50 алкил" означает алкильную цепь, имеющую от 1 до 10, от 1 до 20 или от 1 до 50 атомов углерода, соответственно, где каждый атом водорода при С_1-10, C_1-20 или C_1-50 атоме углерода может необязательно быть замещен заместителем, как определено выше. Необязательно, C_1-10 или C_1-50 алкил может быть прерван одной или более составляющими, как определено далее.

Как применяется в настоящей заявке, термин "C_2-6 алкенил" сам по себе или в комбинации означает неразветвленную или разветвленную углеводородную составляющую, содержащую по меньшей мере одну двойную связь углерод-углерод, имеющую от 2 до 6 атомов углерода. Если присутствует на конце молекулы, примерами являются СН=СН₂, -СН=СН-СН₃, -СН₂-СН=СН₂, -СН=СНСН₂-СН₃ и -СН=СН-СН=СН₂. Когда две составляющие молекулы связаны С_2-6 алкенильной группой, тогда примером такого С_2-6 алкенила является -СН=СН-. Каждый атом водорода C_2-6 алкенильной составляющей может необязательно быть замещен заместителем, как определено выше. Необязательно, С_2-6 алкенил может быть прерван одной или более составляющими, как определено далее.

Соответственно, термин "С_2-10 алкенил", "С_2-20 алкенил" или "С_2-50 алкенил" сам по себе или в комбинации означает неразветвленную или разветвленную углеводородную составляющую, содержащую по меньшей мере одну двойную связь углерод-углерод, имеющую от 2 до 10, от 2 до 20 или от 2 до 50 атомов углерода. Каждый атом водорода С_2-10 алкенильной, С_2-20 алкенильной или С_2-50 алкенильной группы может необязательно быть замещен заместителем, как определено выше. Необязательно, С_2-10 алкенил, С_2-20 алкенил или С_2-50 алкенил может быть прерван одной или более составляющими, как определено далее.

Как применяется в настоящей заявке, термин "С_2-6 алкинил" сам по себе или в комбинации означает неразветвленную или разветвленную углеводородную составляющую, содержащую по меньшей мере одну тройную связь углерод-углерод, имеющую от 2 до 6 атомов углерода. Если присутствует на конце молекулы, примерами являются -С≡СН, -СН₂-С≡СН, СН₂-СН₂-С≡СН и СН₂-С≡С-СН₃. Когда две составляющие молекулы связаны алкинильной группой, тогда примером является -С≡С-. Каждый атом водорода С_2-6 алкинильной группы может необязательно быть замещен заместителем, как определено выше. Необязательно, могут присутствовать одна или более двойных связей. Необязательно, C_2-6 алкинил может быть прерван одной или более составляющими, как определено далее.

Соответственно, как применяется в настоящей заявке, термин "С_2-10 алкинил", "С_2-20 алкинил" и "С_2-50 алкинил" сам по себе или в комбинации означает неразветвленную или разветвленную углеводородную составляющую, содержащую по меньшей мере одну тройную связь углерод-углерод, имеющую от 2 до 10, от 2 до 20 или от 2 до 50 атомов углерода, соответственно. Каждый атом водорода С_2-10 алкинильной, С_2-20 алкинильной или C_2-50 алкинильной группы может необязательно быть замещен заместителем, как определено выше. Необязательно, могут присутствовать одна или более двойных связей. Необязательно, C_2-10 алкинил, С_2-20 алкинил или С_2-50 алкинил может быть прерван одной или более составляющими, как определено далее.

Как упомянуто выше, С_1-4 алкил, C_1-6 алкил, С_1-10 алкил, C_1-20 алкил, C_1-50 алкил, C_2-6 алкенил, C_2-10 алкенил, C_2-20 алкенил, С_2-50 алкенил, С_2-6 алкинил, С_2-10 алкинил, C_2-20 алкенил или С_2-50 алкинил может необязательно быть прерван одной или более составляющими, которые предпочтительно выбирают из группы, состоящей из

где

пунктирные линии обозначают присоединение к оставшейся части составляющей или реагента,; и

-R и R^a независимо друг от друга выбирают из группы, состоящей из -Н, метила, этила, пропила, бутила, пентила и гексила.

Как применяется в настоящей заявке, термин "С_3-10 циклоалкил" означает циклическую алкильную цепь, имеющую от 3 до 10 атомов углерода, которая может быть насыщенной или ненасыщенной, например, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогексенил, циклогептил, циклооктил, циклононил или циклодецил. Каждый атом водорода С_3-10 циклоалкильного углерода может быть замещен заместителем, как определено выше. Термин "С_3-10 циклоалкил" также включает мостиковые бициклы, такие как норборнан или норборнен.

Термин "8-30-членный карбополициклил" или "8-30-членный карбополицикл" означает циклическую составляющую из двух или более колец с 8-30 кольцевыми атомами, где два соседних кольца разделяют по мере один кольцевой атом, и которая может содержать до максимального числа двойных связей (ароматическое или неароматическое кольцо, которое является полностью насыщенным, частично ненасыщенным или ненасыщенным). Предпочтительно 8-30-членный карбополициклил означает циклическую составляющую из двух, трех, четырех или пяти колец, более предпочтительно двух, трех или четырех колец.

Как применяется в настоящей заявке, термин "3-10-членный гетероциклил" или "3-10-членный гетероцикл" означает кольцо с 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10 кольцевыми атомами, которое может содержать до максимального числа двойных связей (ароматическое или неароматическое кольцо, которое является полностью насыщенным, частично ненасыщенным или ненасыщенным), где по меньшей мере от одного кольцевого атома до четырех кольцевых атомов замещены гетероатомом, выбранным из группы, состоящей из серы (включая -S(O)-, -S(O)₂-), кислорода и азота (включая = N(O)-), и где кольцо связано с остатком молекулы через атом углерода или азота. Примеры 3-10-членных гетероциклов включают, но без ограничения к этому, азиридин, оксиран, тиран, азирин, оксирен, тиирен, азетидин, оксетан, тиетан, фуран, тиофен, пиррол, пирролин, имидазол, имидазолин, пиразол, пиразолин, оксазол, оксазолин, изоксазол, изоксазолин, тиазол, тиазолин, изотиазол, изотиазолин, тиадиазол, тиадиазолин, тетрагидрофуран, тетрагидротиофен, пирролидин, имидазолидин, пиразолидин, оксазолидин, изоксазолидин, тиазолидин, изотиазолидин, тиадиазолидин, сульфолан, пиран, дигидропиран, тетрагидропиран, имидазолидин, пиридин, пиридазин, пиразин, пиримидин, пиперазин, пиперидин, морфолин, тетразол, триазол, триазолидин, тетразолидин, диазепан, азепин или гомопиперазин. Каждый атом водорода 3-10-членного гетероциклила или 3-10-членной гетероциклической группы может быть замещен заместителем, как определено далее.

Как применяется в настоящей заявке, термин "8-11-членный гетеробициклил" или "8-11-членный гетеробицикл" означает гетероциклическую составляющую из двух колец с 8 - 11 кольцевыми атомами, где по меньшей мере один кольцевой атом разделен между двумя кольцами, и которая содержит до максимального числа двойных связей (ароматическое или неароматическое кольцо, которое является полностью насыщенным, частично ненасыщенным или ненасыщенным), где по меньшей мере от одного кольцевого атома до шести кольцевых атомов замещены гетероатомом, выбранным из группы, состоящей из серы (включая -S(O)-, -S(O)₂-), кислорода и азота (включая = N(O)-), и где кольцо связано с остатком молекулы через атом углерода или азота. Примерами 8-11-членного гетеробицикла являются индол, индолин, бензофуран, бензотиофен, бензоксазол, бензизоксазол, бензотиазол, бензизотиазол, бензимидазол, бензимидазолин, хинолин, хиназолин, дигидрохиназолин, хинолин, дигидрохинолин, тетрагидрохинолин, декагидрохинолин, изохинолин, декагидроизохинолин, тетрагидроизохинолин, дигидроизохинолин, бензазепин, пурин или птеридин. Термин 8-11-членный гетеробицикл также включает спиро-структуры из двух циклов, такие как 1,4-диокса-8-азаспиро[4.5]декан или мостиковые гетероциклы, такие как 8-аза-бицикло[3.2.1]октан. Каждый атом водорода 8-11-членного гетеробициклила или 8-11-членного гетеробицикла может быть замещен заместителем, как определено далее.

Подобным образом, термин "8-30-членный гетерополициклил" или "8-30-членный гетерополицикл" означает гетероциклическую составляющую из более чем двух колец с 8-30 кольцевыми атомами, предпочтительно тремя, четырьмя или пятью кольцами, где два соседних кольца разделяют по мере один кольцевой атом, и которая может содержать до максимального числа двойных связей (ароматическое или неароматическое кольцо, которое является полностью насыщенным, частично ненасыщенным или ненасыщенным), где по меньшей мере от одного кольцевого атома до 10 кольцевых атомов замещены гетероатомом, выбранным из группы, состоящей из серы (включая -S(O)-, -S(O)₂-), кислорода и азота (включая = N(O)-), и где кольцо связано с остатком молекулы через атом углерода или азота.

Понятно, что фраза "пара R^x/R^y, соединяется вместе с атомом, к которому они присоединены, с образованием С_3-10 циклоалкила или 3-10-членного гетероциклила" в отношении составляющей структуры

означает, что Rx и Ry образуют следующую структуру:

где R представляет собой С_3-10 циклоалкил или 3-10-членный гетероциклил.

Также понятно, что фраза "пара R^x/R^y, соединяется вместе с атомом, к которому они присоединены, с образованием кольца А" в отношении составляющей структуры

означает, что R^x и R^y образуют следующую структуру:

Как применяется в настоящей заявке, термин "концевой алкин" означает составляющую

Как применяется в настоящей заявке, "галоген" означает фтор, хлор, бром или иод. В общем предпочтительно, что галогеном является фтор или хлор.

В общем, термин "содержит" или "содержащий" также охватывает "состоит из" или "состоящий из".

Понятно, что в формуле (Ia) и (Ib) -D соединена с -L¹- посредством ковалентной или обратимой связи.

Другим объектом настоящего изобретения является пролекарство РТН или его фармацевтически приемлемая соль, содержащее конъюгат D-L, где

-D представляет собой РТН составляющую; и

-L содержит обратимую линкерную составляющую пролекарства -L¹-, которая представляет собой составляющую -L¹-, соединенную с РТН составляющей -D через функциональную группу РТН;

где -L¹ - замещена -L²-Z' и необязательно дополнительно замещен; где

-L² - представляет собой простую химическую связь или спейсерную составляющую; и

-Z' представляет собой растворимую в воде составляющую-носитель.

Понятно, что совокупность составляющих -L²-L¹-D соединена с нерастворимым в воде носителем -Z', и что связь между -D и L¹- является ковалентной и обратимой.

Предпочтительно, -D имеет последовательность SEQ ID NO: 47, SEQ ID NO: 48, SEQ ID NO: 49, SEQ ID NO: 50, SEQ ID NO: 51, SEQ ID NO: 52, SEQ ID NO: 53, SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 55, SEQ ID NO: 107, SEQ ID NO: 108, SEQ ID NO: 109, SEQ ID NO: 110, SEQ ID NO: 111, SEQ ID NO: 112, SEQ ID NO: 113, SEQ ID NO: 114 или SEQ ID NO: 115. Более предпочтительно -D имеет последовательность SEQ ID NO: 50, SEQ ID NO: 51, SEQ ID NO: 52, SEQ ID NO: 110, SEQ ID NO: 111 или SEQ ID NO: 112.

В одном варианте выполнения настоящего изобретения -D имеет последовательность SEQ ID NO: 50.

В другом варианте выполнения настоящего изобретения -D имеет последовательность SEQ ID NO: 52.

В другом варианте выполнения настоящего изобретения -D имеет последовательность SEQ ID NO: 110.

В другом варианте выполнения настоящего изобретения -D имеет последовательность SEQ ID NO: 111.

В другом варианте выполнения настоящего изобретения -D имеет последовательность SEQ ID NO: 112.

Наиболее предпочтительно -D имеет последовательность SEQ ID NO: 51.

Составляющая -L¹- либо конъюгирована с функциональной группой боковой цепи остатка аминокислоты -D, с N-концевой аминовой функциональной группой или с С-концевой карбоксильной функциональной группой -D, либо с атомом азота основной полипептидной цепи -D. Присоединение либо к N-концу, либо к С-концу может быть либо непосредственно через соответствующую аминовую или карбоксильную функциональную группу, соответственно, либо не напрямую, когда спейсерная составляющая сначала конъюгируется с аминовой или карбоксильной функциональной группой, с которой коъюгирована спейсерная составляющая -L¹-.

Предпочтительно, аминокислотный остаток РТН, с которым -L¹- конъюгирована, содержит функциональную группу, выбранную из группы, состоящей из карбоновой кислоты, первичного и вторичного амина, малеимида, тиола, сульфоновой кислоты, карбоната, карбамата, гидроксила, альдегида, кетона, гидразина, изоцианата, изотиоцианата, фосфорной кислоты, фосфоновой кислоты, галоацетила, алкилгалогенида, акрилоила, арилфторида, гидроксиламина, сульфата, дисульфида, винилсульфона, винилкетона, диазоалкана, оксирана, гуанидина и азиридина. Даже более предпочтительно аминокислотный остаток РТН, с которым -L¹- конъюгирована, содержит функциональную группу, выбранную из группы, состоящей из гидроксила, первичного и вторичного амина и гуанидина. Даже более предпочтительно аминокислотный остаток РТН, с которым -L¹- конъюгирована, содержит функциональную группу первичного или вторичного амина. Наиболее предпочтительно аминокислотный остаток РТН, с которым -L¹- конъюгирована, содержит функциональную группу первичного амина.

Если составляющая -L¹- конъюгирована с функциональной группой боковой цепи аминокислотного остатка РТН указанный аминокислотный остаток выбран из группы, состоящей из протеогенных аминокислотных остатков и непротеогенных аминокислотных остатков.

В одном варианте выполнения настоящего изобретения -L¹- конъюгирована с функциональной группой боковой цепи непротеогенного аминокислотного остатка РТН. Понятно, что такая непротеогенная аминокислота не обнаруживается в последовательности природного РТН или его фрагментов, и что она может присутствовать только в вариантах, аналогах, ортологах, гомологах и производных РТН.

В другом варианте выполнения настоящего изобретения -L¹- конъюгирована с функциональной группой боковой цепи остатка протеогенной кислоты в РТН. Предпочтительно, указанная аминокислота выбрана из группы, состоящей из состоящей из гистидина, лизина, триптофана, серина, треонина, тирозина, аспарагиновой кислоты, глутаминовой кислоты и аргинина. Даже более предпочтительно указанная аминокислота выбрана из группы, состоящей из состоящей из лизина, аспарагиновой кислоты, аргинина и серина. Даже более предпочтительно указанная аминокислота выбрана из группы, состоящей из состоящей из лизина, аргинина и серина.

В одном варианте выполнения настоящего изобретения -L¹- конъюгирована с функциональной группой боковой цепи гистидина РТН.

В другом варианте выполнения настоящего изобретения -L¹- конъюгирована с функциональной группой боковой цепи лизина РТН.

В другом варианте выполнения настоящего изобретения -L¹- конъюгирована с функциональной группой боковой цепи триптофана РТН.

В другом варианте выполнения настоящего изобретения -L¹- конъюгирована с функциональной группой боковой цепи серина РТН.

В другом варианте выполнения настоящего изобретения -L¹- конъюгирована с функциональной группой боковой цепи треонина РТН.

В другом варианте выполнения настоящего изобретения -L¹- конъюгирована с функциональной группой боковой цепи тирозина РТН.

В другом варианте выполнения настоящего изобретения -L¹- конъюгирована с функциональной группой боковой цепи аспарагиновой кислоты РТН.

В другом варианте выполнения настоящего изобретения -L¹- конъюгирована с функциональной группой боковой цепи глутаминовой кислоты РТН.

В другом варианте выполнения настоящего изобретения -L¹- конъюгирована с функциональной группой боковой цепи аргинина РТН.

Понятно, что не каждая составляющая РТН может содержать все эти аминокислотные остатки.

В предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения -L¹-конъюгирована с N-концевой аминовой функциональной группой РТН, лио непосредственно через соответствующую аминовую функциональную группу, либо не напрямую, когда спейсерная составляющая сначала конъюгирована с аминовой функциональной группой, с которой конъюгирована спейсерная составляющая -L¹-. Даже более предпочтительно, -L¹- напрямую конъюгирована с N-концевой аминовой функциональной группой РТН, предпочтительно РТН 1-34, т.е. РТН, имеющим последовательность SEQ ID NO: 51.

Неожиданно было обнаружено, что N-концевое присоединение L¹ является предпочтительным, то есть присоединение L¹ к N-концу РТН, поскольку было обнаружено, что такой сайт присоединения защищает N-конец, который имеет основное значение для активности РТН. Кроме того, неожиданно было обнаружено, что основным метаболитом, образованным из пролекарства РТН с N-концевым присоединением L¹, является РТН 1-33, то есть 33 N-концевых аминокислот РТН, метаболит которого, как известно, является активным.

В другом варианте выполнения настоящего изобретения -L¹- конъюгирована с С-концевой функциональной группой РТН либо непосредственно через соответствующую карбоксильную функциональную группу, либо не напрямую, когда спейсерная составляющая сначала конъюгирована с карбоксильной функциональной группой, с которой конъюгирована спейсерная составляющая -L¹-.

Наиболее предпочтительно L¹- непосредственно конъюгировна с N-концевой аминовой функциональной группой РТН.

Составляющая -L¹- может быть соединена с -D через любой тип связи, при условии, что она является обратимой. Предпочтительно, -L¹- соединена с -D через связь, выбранную из группы, состоящей из амида, сложного эфира, карбамата, ацеталя, аминаля, имина, оксима, гидразона, дисульфида и ацилгуанидина. Даже более предпочтительно -L¹- соединена с -D через связь, выбранную из группы, состоящей из амида, сложного эфира, карбамата и ацилгуанидина. Понятно, что некоторые из этих связей сами по себе не являются обратимыми, но в настоящем изобретении соседние группы, содержащиеся в L¹, делают эти связи обратимыми.

В одном варианте выполнения настоящего изобретения -L¹- соединена с -D через простоэфирную связь.

В другом варианте выполнения настоящего изобретения -L¹- соединена с -D через карбаматную связь.

В другом варианте выполнения настоящего изобретения -L¹- соединена с -D через ацилгуанидиновую связь.

В предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения-L¹- соединена с -D через амидную связь.

Составляющая -L¹- представляет собой обратимый линкер про лекарства, из которого лекарственное средство, т.е. РТН, высвобождается в его свободной форме, т.е. представляет собой бесследный линкер пролекарства. Подходящие пролекарственные линкеры известны в данной области техники, как например обратимые линкерные составляющие пролекарства, раскрываются в WO 2005/099768 А2, WO 2006/136586 А2, WO 2011/089216 А1 и WO 2013/024053 А1, которые включены в настоящую заявку посредством ссылки.

В другом варианте выполнения настоящего изобретения -L¹- представляет собой обратимый пролекарственный линкер, как описано в WO 2011/012722 A1, WO 2011/089214 A1, WO 2011/089215 A1, WO 2013/024052 А1 и WO 2013/160340 А1, которые включены в настоящую заявку посредством ссылки.

Особенно предпочтительная составляющая -L¹- раскрывается в WO 2009/095479 А2. Соответственно, в предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения составляющая -L¹- имеет формулу (II):

где пунктирная линия обозначает присоединение к атому азота, гидроксилу или тиолу составляющей -D, которая представляет собой РТН составляющую;

-Х- представляет собой -C(R⁴R^4a)-; -N(R⁴)-; -О-; -C(R⁴R^4a)-C(R⁵R^5a)-; -C(R⁵R^5a)-C(R⁴R^4a)-; -C(R⁴R^4a)-N(R⁶)-; -N(R⁶)-C(R⁴R^4a)-; -C(R⁴R^4a)-O-; -O-C(R⁴R^4a)-; или C(R⁷R^7a)-;

X¹ представляет собой С; или S(O);

-X²- представляет собой -C(R⁸R^8a)-; или C(R⁸R^8a)-C(R⁹R^9a)-;

=Х³ представляет собой =O; =S; или =N-CN;

-R¹, -R^1a, -R², -R^2a, -R⁴, -R^4a, -R⁵, -R^5a, -R⁶, -R⁸, -R^8a, -R⁹, -R^9a независимо выбраны из группы, состоящей из -Н; и C_1-6 алкила;

-R³, -R^3a независимо выбирают из группы, состоящей из -Н; и С_1-6 алкила, при условии, что в случае, если один из -R³, -R^3a или оба отличны от водорода, они соединены с N, к которому они присоединены через SP³-гибридизованный атом углерода;

-R⁷ представляет собой -N(R¹⁰R^10a); или -NR¹⁰-(C=O)-R¹¹;

-R^7a, -R¹⁰, -R^10a, -R¹¹ независимо друг от друга представляют собой -Н; или С_1-6 алкил;

необязательно, одна или более из пар -R^1a/-R^4a, -R^1a/-R^5a, -R^1a/-R^7a, -R^4a/-R^5a, -R^8a/-R^9a образуют химическую связь;

необязательно, одна или более из пар -R¹/-R^1a, -R²/-R^2a, -R⁴/-R^4a, -R⁵/-R^5a, -R⁸/-R^8a, -R⁹/-R^9a соединяются вместе с атомом, к которому они присоединены, с образованием С_3-10 циклоалкила; или 3-10-членного гетероциклила;

необязательно, одна или более из пар -R¹/-R⁴, -R¹/-R⁵, -R¹/-R⁶, -R¹/-R^7a, -R⁴/-R⁵, -R⁴/-R⁶, -R⁸/-R⁹, -R²/-R³ соединяются вместе с атомами, к которым они присоединены, с образованием кольца А;

необязательно, R³/R^3a соединяются вместе с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием 3-10-членного гетероцикла;

А выбирают из группы, состоящей из фенила; нафтила; инденила; инданила; тетралинила; С_3-10 циклоалкила; 3-10-членного гетероциклила; и 8-11-членного гетеробициклила; и

где -L¹- имеет в качестве заместителя -L²-Z или -L²-Z', и где -L¹-необязательно дополнительно замещена, при условии, что водород, отмеченный звездочкой в формуле (II), не замещен -L²-Z или -L²-Z' или заместителем;

где

-L²- представляет собой простую химическую связь или спейсер;

-Z представляет собой растворимый в воде носитель; и

-Z' представляет собой нерастворимый в воде носитель.

Предпочтительно -L¹- формулы (II) имеет в качестве заместителя одну составляющую -L²-Z или -L²-Z'.

В одном варианте выполнения настоящего изобретения -L¹- формулы (II) дополнительно не замещена.

Понятно, что если -R³/-R^3a формулы (II) соединяются вместе с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием 3-10-членного гетероцикла, только такие 3-10-членные гетероциклы могут быть образованы, в которых атомы, непосредственно соединенные с атомом азота, представляют собой SP³-гибридизованные атомы углерода. Другими словами, такой 3-10-членный гетероцикл, образованный -R³/-R^3a вместе с атомом азота, с которыми они соединены, имеет следующую структуру:

где

пунктирная линия обозначает присоединение к остатку -L¹-;

кольцо содержит от 3 до 10 атомов, включая по меньшей мере один атом азота; и

R^# и R^## представляют собой SP³-гибридизованный атом углерода.

Также понятно, что 3-10-членный гетероцикл может быть дополнительно замещен.

Примерными вариантами выполнения подходящих 3-10-членных гетероциклов, образованных -R³/-R^3a формулы (II) вместе с атомом азота, к которому они присоединены, являются следующие:

где

пунктирная линия обозначает присоединение к остатку молекулы; и

-R выбирают из группы, состоящей из -Н и C_1-6 алкила.

-L¹- формулы (II) может необязательно быть дополнительно замещенной. В общем, любой заместитель может применяться, до тех пор, пока принцип расщепления не затронут, т.е. водород, помеченный звездочкой в формуле (II), не заменен, а азот составляющей

формулы (II) остается частью первичного, вторичного или третичного амина, т.е. -R³ и R^3a независимо друг от друга представляют собой -Н или соединены с -N < через SP³-гибридизованный атом углерода.

В одном варианте выполнения настоящего изобретения -R¹ или R^1a формулы (II) имеет в качестве заместителя -L²-Z или L²-Z'. В другом варианте выполнения настоящего изобретения -R² или R^2a формулы (II) имеет в качестве заместителя - L²-Z или L²-Z'. В другом варианте выполнения настоящего изобретения -R или R^3a формулы (II) имеет в качестве заместителя -L²-Z или L²-Z'. В другом варианте выполнения настоящего изобретения -R⁴ формулы (II) имеет в качестве заместителя -L²-Z или L²-Z'. В другом варианте выполнения настоящего изобретения -R⁵ или R^5a формулы (II) имеет в качестве заместителя -L²-Z или L²-Z'. В другом варианте выполнения настоящего изобретения -R⁶ формулы (II) имеет в качестве заместителя -L²-Z или L²-Z'. В другом варианте выполнения настоящего изобретения -R⁷ или R^7a формулы (II) имеет в качестве заместителя - L²-Z или L²-Z'. В другом варианте выполнения настоящего изобретения -R⁸ или R^8a формулы (II) имеет в качестве заместителя -L²-Z или L²-Z'. В другом варианте выполнения настоящего изобретения -R⁹ или R^9a формулы (II) имеет в качестве заместителя -L²-Z или L²-Z'. В другом варианте выполнения настоящего изобретения -R¹⁰ имеет в качестве заместителя -L²-Z или -L²-Z'. В другом варианте выполнения настоящего изобретения -R¹¹ имеет в качестве заместителя -L²-Z или -L²-Z'.

Предпочтительно, -Х- формулы (II) выбран из группы, состоящей из -C(R⁴R^4a)-, -N(R⁴)- и -C(R⁷R^7a)-.

В одном варианте выполнения настоящего изобретения -Х- формулы (II) представляет собой -C(R⁴R^4a)-.

В одном предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения- X -формулы (II) представляет собой -C(R⁷R^7a)-.

Предпочтительно, -R⁷ формулы (II) представляет собой -NR¹⁰-(C=O)-R¹¹.

Предпочтительно, -R^7a формулы (II) выбран из Н, метила и этила. Наиболее предпочтительно -R^7a формулы (II) представляет собой -Н.

Предпочтительно, -R¹⁰ выбран из Н, метила и этила. Наиболее предпочтительно -R¹⁰ представляет собой метил.

Предпочтительно, -R¹¹ выбран из Н, метила и этила. Наиболее предпочтительно -R¹¹ представляет собой -Н.

Предпочтительно, -R¹¹ замещен -L²-Z или -L²-Z'.

В другом предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения -X-формулы (II) представляет собой -N(R⁴)-.

Предпочтительно, -R⁴ выбран из группы, состоящей из Н, метила и этила. Предпочтительно, -R⁴ представляет собой -Н.

Предпочтительно, X¹ формулы (II) представляет собой С.

Предпочтительно,=Х³ формулы (II) представляет собой=O.

Предпочтительно, -X²- формулы (II) представляет собой -C(R⁸R^8a)-.

Предпочтительно -R⁸ и -R^8a формулы (II) независимо выбраны из группы, состоящей из Н, метила и этила. Более предпочтительно по меньшей мере один из -R⁸ и -R^8a формулы (II) представляет собой -Н. Даже более предпочтительно как - R⁸, так и -R^8a формулы (II) представляет собой -Н.

Предпочтительно, -R¹ и -R^1a формулы (II) независимо выбраны из группы, состоящей из Н, метила и этила.

В одном предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения по меньшей мере один из -R¹ и -R^1a формулы (II) представляет собой -Н, более предпочтительно оба -R¹ и -R^1a формулы (II) представляют собой -Н.

В другом предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения по меньшей мере один из -R¹ и -R^1a формулы (II) представляет собой метил, более предпочтительно оба -R¹ и R^1a формулы (II) представляют собой - метил.

Предпочтительно, -R² и R^2a формулы (II) независимо выбраны из группы, состоящей из Н, метила и этила. Более предпочтительно, по меньшей мере один из -R² и R^2a формулы (II) представляет собой -Н. Даже более предпочтительно оба -R² и R^2a формулы (II) представляют собой -Н.

Предпочтительно, -R³ и R^3a формулы (II) независимо выбраны из группы, состоящей из Н, метила, этила, пропила и бутила.

В одном предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения по меньшей мере один из -R³ и -R^3a формулы (II) представляет собой метил, более предпочтительно -R³ формулы (II) представляет собой метил и R^3a формулы (II) представляет собой -Н.

В другом предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения -R³ и -R^3a формулы (II) оба представляют собой -Н.

Предпочтительно, -D соединена с -L¹- через атом азота посредством образования амидной связи.

В одном предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения составляющая -L¹- имеет формулу (IIa-i):

где

где пунктирная линия обозначает присоединение к атому азота составляющей D, которая представляет собой РТН составляющую, путем образования амидной связи;

-R¹, -R^1a, -R², -R^2a, -R³, -R^3a, -R⁷, -R^7a и -X²- имеют значения, как определено в формуле (II); и

где -L¹- замещена -L²-Z или L²-Z', и где -L¹- необязательно дополнительно замещена, при условии, что водород, отмеченный звездочкой в формуле

(IIa-i) не замещен -L²-Z или -L²-Z' или заместителем.

Предпочтительно -L¹- формулы (IIa-i) замещена одной составляющей -L²-Z или -L²-Z'.

Предпочтительно составляющая -L¹- формулы (IIa-i) дополнительно не замещена.

Предпочтительно, -R¹ и R^1a формулы (IIa-i) независимо выбраны из группы, состоящей из Н, метила и этила. Более предпочтительно, по меньшей мере один из -R¹ и -R^1a формулы (IIa-i) представляет собой -Н. Даже более предпочтительно оба -R¹ и -R^1a формулы (IIa-i) представляют собой -Н.

Предпочтительно, -R⁷ формулы (IIa-i) представляет собой -NR¹⁰-(C=O)-R¹¹.

Предпочтительно, -R^7a формулы (II-i) выбран из Н, метила и этила. Наиболее предпочтительно -R^7a формулы (II-i) представляет собой -Н.

Предпочтительно, -R¹⁰ формулы (IIa-i) выбран из Н, метила и этила. Наиболее предпочтительно -R¹⁰ формулы (IIa-i) представляет собой метил.

Предпочтительно, -R¹¹ формулы (IIa-i) выбран из Н, метила и этила. Наиболее предпочтительно -R¹¹ формулы (IIa-i) представляет собой -Н.

Предпочтительно, -R¹¹ формулы (IIa-i) замещен -L²-Z или L²-Z'.

Предпочтительно, -X²- формулы (IIa-i) представляет собой -C(R⁸R^8a)-.

Предпочтительно -R⁸ и -R^8a формулы (IIa-i) независимо выбраны из группы, состоящей из Н, метила и этила. Более предпочтительно по меньшей мере один из -R⁸ и -R^8a формулы (IIa-i) представляет собой -Н. Даже более предпочтительно оба -R⁸ и -R^8a формулы (IIa-i) представляют собой -Н.

Предпочтительно, -R² и -R^2a формулы (IIa-i) независимо выбраны из группы, состоящей из Н, метила и этила. Более предпочтительно, по меньшей мере один из -R² и -R^2a формулы (IIa-i) представляет собой -Н. Даже более предпочтительно оба -R² и -R^2a формулы (IIa-i) представляют собой -Н.

Предпочтительно, -R³ и -R^3a формулы (IIa-i) независимо выбраны из группы, состоящей из Н, метила, этила, пропила и бутила. Даже более предпочтительно по меньшей мере один из -R³ и -R^3a формулы (IIa-i) представляет собой метил.

Предпочтительно, -R³ формулы (IIa-i) представляет собой -Н, и -R^3a формулы (IIa-i) представляет собой метил.

Более предпочтительно составляющая -L¹- имеет формулу (IIa-ii):

где пунктирная линия обозначает присоединение к атому азота составляющей D, которая представляет собой РТН составляющую, путем образования амидной связи;

-R², -R^2a, -R¹⁰, -R¹¹ и -X²- имеют значения, как определено в формуле (II); и

где -L¹- замещена -L²-Z или L²-Z' и где -L¹- необязательно дополнительно замещена, при условии, что водород, отмеченный звездочкой в формуле (IIa-ii) не замещен -L²-Z или -L²-Z' или заместителем.

Предпочтительно -L¹- формулы (IIa-ii) замещена одной составляющей -L²-Z или -L²-Z'.

Предпочтительно составляющая -L¹- формулы (IIa-ii) дополнительно не замещена.

Предпочтительно, -X²- формулы (IIa-ii) представляет собой -C(R⁸R^8a)-.

Предпочтительно -R⁸ и -R^8a формулы (IIa-ii) независимо выбраны из группы, состоящей из Н, метила и этила. Более предпочтительно по меньшей мере один из -R⁸ и R^8a формулы (IIa-ii) представляет собой -Н. Даже более предпочтительно оба -R⁸ и R^8a формулы (IIa-ii) представляют собой -Н.

Предпочтительно, -R³ и R^3a формулы (IIa-ii) независимо выбраны из группы, состоящей из Н, метила, этила, пропила и бутила. Даже более предпочтительно по меньшей мере один из -R³ и R^3a формулы (IIa-ii) представляет собой метил.

Предпочтительно, -R³ формулы (IIa-ii) представляет собой -Н, и R^3a формулы (IIa-ii) представляет собой метил.

Предпочтительно, -R¹⁰ формулы (IIa-ii) выбран из Н, метила и этила. Наиболее предпочтительно -R¹⁰ формулы (IIa-ii) представляет собой метил.

Предпочтительно, -R¹¹ формулы (IIa-ii) выбран из Н, метила и этила. Наиболее предпочтительно -R¹¹ формулы (IIa-ii) представляет собой -Н.

Предпочтительно, -R¹¹ формулы (IIa-ii) замещен -L²-Z или L²-Z'.

В еще более предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения составляющая -L¹- имеет формулу (IIa-ii'):

где

где пунктирная линия обозначает присоединение к атому азота составляющей D, которая представляет собой РТН составляющую, путем образования амидной связи;

пунктирная линия, отмеченная звездочкой, означает присоединение к -L²-;

-R³,-R^3a, -R¹⁰ и X²- имеют значения, как определено в формуле (II); и

где -L¹- необязательно дополнительно замещена, при условии, что водород, отмеченный звездочкой в формуле (IIa-ii') не замещен заместителем.

Предпочтительно составляющая -L¹- формулы (IIa-ii') дополнительно не замещена.

Предпочтительно, -X²- формулы (IIa-ii') представляет собой -C(R⁸R^8a)-.

Предпочтительно -R⁸ и R^8a формулы (IIa-ii') независимо выбраны из группы, состоящей из Н, метила и этила. Более предпочтительно по меньшей мере один из -R⁸ и R^8a формулы (IIa-ii') представляет собой -Н. Даже более предпочтительно оба -R⁸ и R^8a формулы (IIa-ii') представляют собой -Н.

Предпочтительно, -R³ и R^3a формулы (IIa-ii') независимо выбраны из группы, состоящей из Н, метила, этила, пропила и бутила. Даже более предпочтительно по меньшей мере один из -R³ и R^3a формулы (IIa-ii') представляет собой метил.

Предпочтительно, -R³ формулы (IIa-ii') представляет собой -Н, и R^3a формулы (IIa-ii') представляет собой метил.

Предпочтительно, -R¹⁰ формулы (IIa-ii') выбран из Н, метила и этила. Наиболее предпочтительно -R¹⁰ формулы (IIa-ii') представляет собой метил.

Даже более предпочтительно составляющая -L¹- имеет формулу (IIa-iii):

где пунктирная линия обозначает присоединение к атому азота составляющей D, которая представляет собой РТН составляющую, путем образования амидной связи; и

где -L¹ - замещена -L²-Z или -L²-Z', и где -L¹- необязательно дополнительно замещена, при условии, что водород, отмеченный звездочкой в формуле (IIa-iii) не замещен -L²-Z или -L²-Z' или заместителем.

Предпочтительно -L¹- формулы (IIa-iii) замещена одной составляющей -L²-Z или -L²-Z'.

Предпочтительно составляющая -L¹- формулы (IIa-iii) дополнительно не замещена.

Наиболее предпочтительно составляющая -L¹- имеет формулу (IIa-iii'):

где

пунктирная линия обозначает присоединение к атому азота составляющей D, которая представляет собой РТН составляющую, путем образования амидной связи;

пунктирная линия, отмеченная звездочкой, означает присоединение к -L²-;

-R², -R^2a, -R³, -R^3a и X²- имеют значения, как определено в формуле (II); и

где -L¹- необязательно дополнительно замещена, при условии, что водород, отмеченный звездочкой в формуле (IIa-iii') не замещен заместителем.

Предпочтительно составляющая -L¹- формулы (IIa-iii') дополнительно не замещена.

В другом предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения составляющая -L¹- имеет формулу (IIb-i)

где

где пунктирная линия обозначает присоединение к атому азота составляющей D, которая представляет собой РТН составляющую, путем образования амидной связи;

-R¹, -R^1a, -R², -R^2a, -R³, -R^3a, -R⁴ и X²- имеют значения, как определено в формуле (II); и

где -L¹- замещена -L²-Z или -L²-Z', и где -L¹- необязательно дополнительно замещена, при условии, что водород, отмеченный звездочкой в формуле (IIb-i) не замещен -L²-Z или -L²-Z' или заместителем.

Предпочтительно -L¹- формулы (IIb-i) замещена одной составляющей -L²-Z или -L²-Z'.

Предпочтительно составляющая -L¹- формулы (IIb-i) дополнительно не замещена.

Предпочтительно, -R¹ и R^1a формулы (IIb-i) независимо выбраны из группы, состоящей из Н, метила и этила. Более предпочтительно, по меньшей мере один из -R¹ и R^1a формулы (IIb-i) представляет собой метил. Даже более предпочтительно оба -R¹ и R^1a формулы (IIb-i) представляют собой -метил.

Предпочтительно, -R⁴ формулы (IIb-i) выбран из группы, состоящей из Н, метила и этила. Более предпочтительно, -R⁴ формулы (IIb-i) представляет собой -Н.

Предпочтительно, -X²- формулы (IIb-i) представляет собой -C(R⁸R^8a)-.

Предпочтительно -R⁸ и R^8a формулы (IIb-i) независимо выбраны из группы, состоящей из Н, метила и этила. Более предпочтительно по меньшей мере один из

-R⁸ и R^8a формулы (IIb-i) представляет собой -Н. Даже более предпочтительно оба

-R⁸ и R^8a формулы (IIb-i) представляют собой -Н.

Предпочтительно, -R² и R^2a формулы (IIb-i) независимо выбраны из группы, состоящей из Н, метила и этила. Более предпочтительно, по меньшей мере один из -R² и R^2a формулы (IIb-i) представляет собой -Н. Даже более предпочтительно оба -R² и R^2a формулы (IIb-i) представляют собой -Н.

Предпочтительно, -R³ и R^3a формулы (IIb-i) независимо выбраны из группы, состоящей из Н, метила, этила, пропила и бутила. Даже более предпочтительно по меньшей мере один из -R³ и R^3a формулы (IIb-i) представляет собой -Н. Даже более предпочтительно оба -R³ и R^3a формулы (IIb-i) представляют собой -Н.

Более предпочтительно составляющая -L¹- имеет формулу (IIb-ii):

где пунктирная линия обозначает присоединение к атому азота составляющей D, которая представляет собой РТН составляющую, путем образования амидной связи;

-R², -R^2a, -R³, -R^3a и X²- имеют значения, как определено в формуле (II); и

где -L¹- замещена -L²-Z или -L²-Z', и где -L¹- необязательно дополнительно замещена, при условии, что водород, отмеченный звездочкой в формуле (IIb-ii) не замещен -L²-Z или -L²-Z' или заместителем.

Предпочтительно -L¹- формулы (IIb-ii) замещена одной составляющей -L²-Z или -L²-Z'.

Предпочтительно составляющая -L¹- формулы (IIb-ii) дополнительно не замещена.

Предпочтительно, -X²- формулы (IIb-ii) представляет собой -C(R⁸R^8a)-.

Предпочтительно -R⁸ и R^8a формулы (IIb-ii) независимо выбраны из группы, состоящей из Н, метила и этила. Более предпочтительно по меньшей мере один из -R⁸ и R^8a формулы (IIb-ii) представляет собой -Н. Даже более предпочтительно оба -R⁸ и R^8a формулы (IIb-ii) представляют собой -Н.

Предпочтительно, -R² и R^2a формулы (IIb-ii) независимо выбраны из группы, состоящей из Н, метила и этила. Более предпочтительно, по меньшей мере один из -R² и R^2a формулы (IIb-ii) представляет собой -Н. Даже более предпочтительно оба -R² и R^2a формулы (IIb-ii) представляют собой -Н.

Предпочтительно, -R³ и R^3a формулы (IIb-ii) независимо выбраны из группы, состоящей из Н, метила, этила, пропила и бутила. Даже более предпочтительно по меньшей мере один из -R³ и R^3a формулы (IIb-ii) представляет собой -Н. Даже более предпочтительно оба -R³ и R^3a формулы (IIb-ii) представляют собой -Н.

Даже более предпочтительно составляющая -L¹- имеет формулу (IIb-ii'):

где

где пунктирная линия обозначает присоединение к атому азота составляющей D, которая представляет собой РТН составляющую, путем образования амидной связи;

-R², -R^2a, -R³, -R^3a и X² - имеют значения, как определено в формуле (II); и

где -L¹- замещена -L²-Z или L²-Z', и где -L¹- необязательно дополнительно замещена, при условии, что водород, отмеченный звездочкой в формуле (IIb-ii') не замещен -L²-Z или -L²-Z' или заместителем.

Предпочтительно составляющая -L¹- формулы (IIb-ii') дополнительно не замещена.

Предпочтительно, -X²- формулы (IIb-ii') представляет собой -C(R⁸R^8a)-.

Предпочтительно -R⁸ и R^8a формулы (IIb-ii') независимо выбраны из группы, состоящей из Н, метила и этила. Более предпочтительно по меньшей мере один из -R⁸ и R^8a формулы (IIb-ii') представляет собой -Н. Даже более предпочтительно оба -R⁸ и R^8a формулы (IIb-ii') представляют собой -Н.

Предпочтительно, -R² и R^2a формулы (IIb-ii') независимо выбраны из группы, состоящей из Н, метила и этила. Более предпочтительно, по меньшей мере один из -R² и R^2a формулы (IIb-ii') представляет собой -Н. Даже более предпочтительно оба -R² и R^2a формулы (IIb-ii') представляют собой -Н.

Предпочтительно, -R³ и R^3a формулы (IIb-ii') независимо выбраны из группы, состоящей из Н, метила, этила, пропила и бутила. Даже более предпочтительно по меньшей мере один из -R³ и R^3a формулы (IIb-ii') представляет собой -Н. Даже более предпочтительно оба -R³ и R^3a формулы (IIb-ii') представляют собой -Н.

Даже более предпочтительно составляющая -L¹- имеет формулу (IIb-iii):

где

где пунктирная линия обозначает присоединение к атому азота составляющей D, которая представляет собой РТН составляющую, путем образования амидной связи; и

где -L¹- замещена -L²-Z или L²-Z', и где -L¹- необязательно дополнительно замещена, при условии, что водород, отмеченный звездочкой в формуле (IIb-iii) не замещен -L²-Z или L²-Z' или заместителем.

Предпочтительно -L¹- формулы (IIb-iii) замещена одной составляющей -L²-Z или L²-Z'.

Предпочтительно составляющая -L¹- формулы (IIb-iii) дополнительно не замещена.

Наиболее предпочтительно составляющая -L¹- имеет формулу (IIb-iii'):

где

где пунктирная линия обозначает присоединение к атому азота составляющей D, которая представляет собой РТН составляющую, путем образования амидной связи;

-R², -R^2a, -R³, -R^3a и X²- имеют значения, как определено в формуле (II); и

где -L¹- замещена -L²-Z или L²-Z', и где -L¹- необязательно дополнительно замещена, при условии, что водород, отмеченный звездочкой в формуле

(IIb-iii') не замещен -L²-Z или L²-Z' или заместителем.

Предпочтительно составляющая -L¹- формулы (IIb-iii') дополнительно не замещена.

Другая предпочтительная составляющая-L¹- раскрывается в неопубликованной европейской заявке на патент 14180004, которой соответствует международная заявка с номером заявки РСТ/ЕР2015/067929. Соответственно, в другом предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения составляющая -L¹- имеет формулу (III):

где

пунктирная линия показывает присоединение к первичному или вторичному амину или гидроксилу составляющей D путем образования амидной или сложноэфирной связи, соответственно;

-R¹, -R^1a, -R², -R^2a, -R³ и R^3a независимо друг от друга выбирают из группы, состоящей из -Н, -C(R⁸R^8aR^8b), -C(=O)R⁸, -C≡N, -C(=NR⁸)R^8a, -CR⁸(=CR^8aR^8b), -C≡CR⁸ и Т;

-R⁴, -R⁵ и R^5a независимо друг от друга выбирают из группы, состоящей из -Н, -C(R⁹R^9aR^9b) и Т;

а1 и а2 независимо друг от друга представляют собой 0 или 1;

каждый -R⁶, -R^6a, -R⁷, -R^7a, -R⁸, -R^8a, -R^8b, -R⁹, -R^9a, -R^9b независимо друг от друга выбирают из группы, состоящей из -Н, галогена, -CN, -COOR¹⁰, -OR¹⁰, -C(O)R¹⁰, -C(O)N(R¹⁰R^10a), -S(O)₂N(R¹⁰R^10a), -S(O)N(R¹⁰R^10a), -S(O)₂R¹⁰, -S(O)R¹⁰, -N(R¹⁰)S(O)₂N(R^10aR^10b), -SR¹⁰, N(R¹⁰R^10a), -NO₂, -OC(O)R¹⁰, -N(R¹⁰)C(O)R^10a, -N(R¹⁰)S(O)₂R^10a, N(R¹⁰)S(O)R^10a, -N(R¹⁰)C(O)OR^10a, -N(R¹⁰)C(O)N(R^10aR^10b), -OC(O)N(R¹⁰R^10a), -Т, С_1-20 алкила, C_2-20 алкенила и C_2-20 алкинила; где -Т, С_1-20 алкил, С_2-20 алкенил и C_2-20 алкинил необязательно замещены одним или более заместителями -R¹¹, которые являются одинаковыми или различными, и где С_1-20 алкил, C_2-20 алкенил и C_2-20 алкинил необязательно прерваны одной или более группами, выбранными из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -O-, -С(O)-, -C(O)N(R¹²)-, -S(O)₂N(R¹²)-, -S(O)N(R¹²)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R¹²)S(O)₂N(R^12a)-, -S-, -N(R¹²)-, -OC(OR¹²)(R^12a)-, -N(R¹²)C(O)N(R^12a)- и -OC(O)N(R¹²)-;

каждый -R¹⁰, -R^10a, -R^10b независимо выбирают из группы, состоящей из -Н, -Т, С_1-20 алкила, C_2-20 алкенила и C_2-20 алкинила; где -Т, С_1-20 алкил, C_2-20 алкенил и C_2-20 алкинил необязательно замещены одним или более заместителями -R¹¹, которые являются одинаковыми или различными, и где С_1-20 алкил, C_2-20 алкенил и C_2-20 алкинил необязательно прерваны одной или более группами, выбранными из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -O-, -С(O)-, -C(O)N(R¹²)-, -S(O)₂N(R¹²)-, -S(O)N(R¹²)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R¹²)S(O)₂N(R^12a)-, -S-, -N(R¹²)-, -OC(OR¹²)(R^12a)-, -N(R¹²)C(O)N(R^12a)- и -OC(O)N(R¹²)-;

каждый Т независимо друг от друга выбирают из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила, С_3-10 циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила и 8-11-членного гетеробициклила; где каждый Т независимо необязательно замещен одним или более заместителями -R¹¹, которые являются одинаковыми или различными;

каждый -R¹¹ независимо друг от друга выбирают из галогена, -CN, оксо (=O), -COOR¹³, -OR¹³, -C(O)R¹³, -C(O)N(R¹³R^13a), -S(O)₂N(R¹³R^13a), -S(O)N(R¹³R^13a), -S(O)₂R¹³, -S(O)R¹³, -N(R¹³)S(O)₂N(R^13aR^13b), -SR¹³, -N(R¹³R^13a), -NO₂, -OC(O)R¹³, -N(R¹³)C(O)R^13a, -N(R¹³)S(O)₂R^13a, -N(R¹³)S(O)R^13a, -N(R¹³)C(O)OR^13a, -N(R¹³)C(O)N(R^13aR^13b), -OC(O)N(R¹³R^13a) и C_1-6 алкила; где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или более заместителями галоген, которые являются одинаковыми или различными;

каждый -R¹², -R^12a, -R¹³, -R^13a, -R^13b независимо выбирают из группы, состоящей из -Н и C_1-6 алкила; где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или более заместителями галоген, которые являются одинаковыми или различными;

необязательно, одна или более из пар -R¹/-R^1a, -R²/-R^2a, -R³/-R^3a, -R⁶/-R^6a, -R⁷/-R^7a соединяются вместе с атомом, к которому они присоединены, с образованием С_3-10 циклоалкила или 3-10-членного гетероциклила;

необязательно, одна или более из пар -R¹/-R², -R¹/-R³, -R¹/-R⁴, -R¹/-R⁵, -R¹/-R⁶, -R¹/R⁷, -R²/-R³, -R²/-R⁴, -R²/-R⁵, -R²/-R⁶, -R²/-R⁷, -R³/-R⁴, -R³/-R⁵, -R³/-R⁶, -R³/-R⁷, -R⁴/-R⁵, -R⁴/-R⁶, -R⁴/-R⁷, -R⁵/-R⁶, -R⁵/-R⁷, -R⁶/-R⁷ соединяются вместе с атомами, к которым они присоединены, с образованием кольца А;

А выбирают из группы, состоящей из фенила; нафтила; инденила; инданила; тетралинила; С_3-10 циклоалкила; 3-10-членного гетероциклила; и 8-11-членного гетеробициклила;

где -L¹- имеет в качестве заместителя -L²-Z или L²-Z', и где -L¹- необязательно дополнительно замещена;

где

-L²- представляет собой простую химическую связь или спейсер;

-Z представляет собой растворимый в воде носитель; и

-Z' представляет собой нерастворимый в воде носитель.

Необязательные другие заместители составляющей -L¹- формулы (III) предпочтительно являются такими, как описано выше.

Предпочтительно -L¹- формулы (III) имеет в качестве заместителя одну составляющую -L²-Z или L²-Z'.

В одном варианте выполнения настоящего изобретения -L¹- формулы (III) дополнительно не замещена.

Дополнительные предпочтительные варианты выполнения для -L¹- раскрываются в ЕР 1536334 В1, WO 2009/009712 A1, WO 2008/034122 A1, WO 2009/143412 A2, WO 2011/082368 A2 и US 8618124 B2, которые включены в настоящую заявку посредством ссылки в полном объеме.

Дополнительные предпочтительные варианты выполнения для -L¹- раскрываются в US 8946405 B2 и US 8754190 B2, которые включены в настоящую заявку посредством ссылки в полном объеме. Соответственно, предпочтительная составляющая -L¹- имеет формулу (IV):

где

пунктирная линия показывает присоединение к -D, которая представляет собой РТН составляющую, и где присоединение осуществляется через функциональную группу составляющей -D, выбранную из группы, состоящей из -ОН, -SH и NH₂;

m равно 0 или 1;

по меньшей мере один или оба из -R¹ и R² выбирается/независимо друг от друга выбирают из группы, состоящей из -CN, -NO₂, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероарила, необязательно замещенного алкенила, необязательно замещенного алкинила, -C(O)R³, -S(O)R³, -S(O)₂R³ и -SR⁴,

один и только один из -R¹ и R² выбирают из группы, состоящей из -Н, необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного арилалкила и необязательно замещенного гетероарилалкила;

-R³ выбирают из группы, состоящей из -Н, необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного арилалкила, необязательно замещенного гетероарила, необязательно замещенного гетероарилалкила, -OR⁹ и N(R⁹)₂;

-R⁴ выбирают из группы, состоящей из необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного арилалкила, необязательно замещенного гетероарила и необязательно замещенного гетероарилалкила;

каждый -R⁵ независимо выбирают из группы, состоящей из -Н, необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного алкенилалкила, необязательно замещенного алкинилалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного арилалкила, необязательно замещенного гетероарила и необязательно замещенного гетероарилалкила;

-R⁹ выбирают из группы, состоящей из -Н и необязательно замещенного алкила;

-Y- отсутствует, и -Х- представляет собой -О- или S-; или

-Y- представляет собой -N(Q)CH₂-, и Х- представляет собой -O-;

Q выбирают из группы, состоящей из необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного арилалкила, необязательно замещенного гетероарила и необязательно замещенного гетероарилалкила;

необязательно, -R¹ и R² могут соединяться с образованием 3-8-членного кольца; и

необязательно, оба -R⁹ вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют гетероциклическое кольцо;

где -L¹- имеет в качестве заместителя -L²-Z или L²-Z', и где -L¹- необязательно дополнительно замещена;

где

-L²- представляет собой простую химическую связь или спейсер;

-Z представляет собой растворимый в воде носитель; и

-Z' представляет собой нерастворимый в воде носитель.

Только в контексте формулы (IV) применяемые термины имеют следующие значения:

Термин "алкил", как применяется в настоящей заявке, включает линейные, разветвленные или циклические насыщенные углеводородные группы, имеющие от 1 до 8 атомов углерода, или в некоторых вариантах выполнения настоящего изобретения от 1 до 6 или от 1 до 4 атомов углерода.

Термин "алкокси" включает алкильные группы, связанные с кислородом, включая метокси, этокси, изопропокси, циклопропокси, циклобутокси и подобное.

Термин "алкенил" включает неароматические ненасыщенные углеводороды с двойными связями углерод-углерод.

Термин "алкинил" включает неароматические ненасыщенные углеводороды с тройными связями углерод-углерод.

Термин "арил" включает ароматические углеводородные группы, имеющие от 6 до 18 атомов углерода, предпочтительно от 6 до 10 атомов углерода, включая группы, такие как фенил, нафтил и антраценил. Термин "гетероарил" включает ароматические кольца, содержащие от 3 до 15 атомов углерода, содержащие по меньшей мере один N, О или S атом, предпочтительно от 3 до 7 атомов углерода, содержащие по меньшей мере один N, О или S атом, включая группы, такие как пирролил, пиридил, пиримидинил, имидазолил, оксазолил, изооксазолил, тиазолил, изотиазолил, хинолил, индолил, инденил и подобное.

В некоторых случаях, алкенильные, алкинильные, арильные или гетероарильные составляющие могут быть соединены с оставшейся частью молекулы через алкиленовую связь. При этих обстоятельствах заместитель будет называться алкенилалкил, алкинилалкил, арилалкил или гетероарилалкил, что указывает на то, что алкиленовая составляющая находится между алкенилом, алкинилом, арилом или гетероарилом и молекулой, с которой связан алкенил, алкинил, арил или гетероарил.

Термин "галоген" включает бром, фтор, хлор и иод.

Термин "гетероциклическое кольцо" относится к 4-8-членному ароматическому или неароматическому кольцу, содержащему от 3 до 7 атомов углерода и по меньшей мере один N, О, или S атом. Примерами являются пиперидинил, пиперазинил, тетрагидропиранил, пирролидин и тетрагидрофуранил, а также примерные группы, приведенные вые для термина "гетероарил".

Когда кольцевая система необязательно замещена, подходящие заместители выбирают из группы, состоящей из алкила, алкенила, алкинила или дополнительного кольца, где каждый необязательно дополнительно замещен. Необязательные заместители в любой группе, включая вышеуказанные, включают гало, нитро, циано, OR, -SR, -NR₂, -OCOR, -NRCOR, -COOR, -CONR₂, -SOR, -SO₂R, -SONR₂, -SO₂NR₂, где каждый R независимо представляет собой алкил, алкенил, алкинил, арил или гетероарил, или две R группы, взятые вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют кольцо.

Предпочтительно -L¹- формулы (IV) имеет в качестве заместителя одну составляющую -L²-Z или L²-Z'.

Дополнительный предпочтительный вариант -L¹- раскрывается в WO 2013/036857 A1, который включен в настоящую заявку в полном объеме посредством ссылки. Соответственно, предпочтительная составляющая -L¹- имеет формулу (V):

где

пунктирная линия показывает присоединение к -D, которая представляет собой

РТН составляющую, и где присоединение осуществляется через аминную функциональную группу составляющей -D;

-R¹ выбирают из группы, состоящей из необязательно замещенного C₁-С₆ линейного, разветвленного, или циклического алкила; необязательно замещенного арила; необязательно замещенного гетероарила; алкокси; и NR⁵₂;

-R² выбирают из группы, состоящей из -Н; необязательно замещенного C₁-С₆ алкила; необязательно замещенного арила; и необязательно замещенного гетероарила;

-R³ выбирают из группы, состоящей из -Н; необязательно замещенного C₁-С₆ алкила; необязательно замещенного арила; и необязательно замещенного гетероарила;

-R⁴ выбирают из группы, состоящей из -Н; необязательно замещенного C₁-С₆ алкила; необязательно замещенного арила; и необязательно замещенного гетероарила;

каждый -R⁵ независимо друг от друга выбирают из группы, состоящей из -Н; необязательно замещенного C₁-С₆ алкила; необязательно замещенного арила; и необязательно замещенного гетероарила; или взятые вместе два -R⁵ могут представлять собой циклоалкил или циклогетероалкил;

где -L¹- имеет в качестве заместителя -L²-Z или L²-Z', и где -L¹- необязательно дополнительно замещена;

где

-L²- представляет собой простую химическую связь или спейсер;

-Z представляет собой растворимый в воде носитель; и

-Z' представляет собой нерастворимый в воде носитель.

Только в контексте формулы (V) применяемые термины имеют следующие значения:

"Алкил", "алкенил" и "алкинил" включают линейные, разветвленные или циклические углеводородные группы, имеющие от 1 до 8 атомов углерода или 1-6 атомов углерода или 1-4 атомов углерода, где алкилом является насыщенный углеводород, алкенил включает одну или более двойных связей углерод-углерод, и алкинил включает одну или более тройных связей углерод-углерод. Если иного не указано, они содержат 1-6 атомов углерода.

"Арил" включает ароматические углеводородные группы, имеющие от 6 до 18 атомов углерода, предпочтительно 6-10 атомов углерода, включая группы, такие как фенил, нафтил и антрацен. "Гетероарил" включает ароматические кольца, содержащие 3-15 атомов углерода, содержащие по меньшей мере один N, О или S атом, предпочтительно 3-7 атомов углерода, содержащие по меньшей мере один N, О или S атом, включая группы, такие как пирролил, пиридил, пиримидинил, имидазолил, оксазолил, изооксазолил, тиазолил, изотиазолил, хинолил, индолил, инденил и подобное.

Термин "замещенный" означает алкильную, алкенильную, алкинильную, арильную или гетероарильную группу, включающую одну или более групп заместителей вместо одного или более атомов водорода. Заместители могут в общем быть выбраны из галогена, включая F, C1, Br и I; низшего алкила, включая линейный, разветвленный и циклический; низшего галоалкила, включая фторалкил, хлоралкил, бромалкил и иодалкил; ОН; низшего алкокси, включая линейные, разветвленные и циклические; SH; низшего алкилтио, включая линейный, разветвленный и циклический; амино, алкиламино, диалкиламино, силила, включая алкилсилил, алкоксисилил и арилсилил; нитро; циано; карбонила; карбоновой кислоты, сложного эфира карбоновой кислоты, карбоксильного амида, аминокарбонила; аминоацила; карбамата; мочевины; тиокарбамата; тиомочевины; кетона; сульфона; сульфонамида; арила, включая фенил, нафтил и антраценил; гетероарила, включая 5-членные гетероарилы, включая пиррол, имидазол, фуран, тиофен, оксазол, тиазол, изоксазол, изотиазол, тиадиазол, триазол, оксадиазол и тетразол, 6-членные гетероарилы, включая пиридин, пиримидин, пиразин, и конденсированные гетероарилы, включая бензофуран, бензотиофен, бензоксазол, бензимидазол, индол, бензотиазол, бензизоксазол и бензизотиазол.

Предпочтительно -L¹- формулы (V) имеет в качестве заместителя одну составляющую -L²-Z или L²-Z'.

Другой предпочтительный вариант -L¹- раскрывается в US 7585837 B2, который включен в настоящую заявку в полном объеме посредством ссылки. Соответственно, предпочтительная составляющая -L¹- имеет формулу (VI):

где

пунктирная линия показывает присоединение к -D, которая представляет собой РТН составляющую, и где присоединение осуществляется через аминную функциональную группу составляющей -D;

R¹ и R² независимо выбирают из группы, состоящей из водорода, алкила, алкокси, алкоксиалкила, арила, алкарила, аралкила, галогена, нитро, -SO₃H, -SO₂NHR⁵, амино, аммония, карбоксила, РО₃Н₂ и ОРО₃Н₂;

R³, R⁴ и R⁵ независимо выбирают из группы, состоящей из водорода, алкила и арила;

где -L¹- имеет в качестве заместителя -L²-Z или L²-Z', и где -L¹- необязательно дополнительно замещена;

где

-L²- представляет собой простую химическую связь или спейсер;

-Z представляет собой растворимый в воде носитель; и

-Z' представляет собой нерастворимый в воде носитель.

Подходящими заместителями для формулы (VI) являются составляющие алкил (как например C_1-6 алкил), алкенил (как например С_2-6 алкенил), алкинил (как например С_2-6 алкинил), арил (как например фенил), гетероалкил, гетероалкенил, гетероалкинил, гетероарил (как например ароматический 4-7-членный гетероцикл) или галоген.

Только в контексте формулы (VI) применяемые термины имеют следующие значения:

Термины "алкил", "алкокси", "алкоксиалкил", "арил", "алкарил" и "аралкил" означают алкильные радикалы, содержащие 1-8, предпочтительно 1-4 атомов углерода, например, метил, этил, пропил, изопропил и бутил, и арильные радикалы, содержащие 6-10 атомов углерода, например, фенил и нафтил. Термин "галоген" включает бром, фтор, хлор и иод.

Предпочтительно -L¹- формулы (VI) имеет в качестве заместителя одну составляющую -L²-Z или L²-Z'.

Другой предпочтительный вариант -L¹- раскрывается в WO 2002/089789 A1, который включен в настоящую заявку в полном объеме посредством ссылки. Соответственно, предпочтительная составляющая -L¹- имеет формулу (VII):

где

пунктирная линия показывает присоединение к -D, которая представляет собой РТН составляющую, и где присоединение осуществляется через аминную функциональную группу составляющей -D;

L₁ представляет собой бифункциональную связывающую группу,

Y₁ и Y₂ независимо представляют собой О, S или NR⁷;

R², R³, R⁴, R⁵, R⁶ и R⁷ независимо выбирают из группы, состоящей из водорода, C_1-6 алкилов, C_3-12 разветвленных алкилов, С_3-8 циклоалкилов, C_1-6 замещенных алкилов, С_3-8 замещенных циклоалкилов, арилов, замещенных арилов, аралкилов, C_1-6 гетероалкилов, замещенных C_1-6 гетероалкилов, C_1-6 алкокси, фенокси и C_1-6 гетероалкокси;

Ar представляет собой составляющую, которая при включении в формулу (VII), образует мультизамещенный ароматический углеводород или мульти-замещенную гетероциклическую группу;

Х представляет собой химическую связь или составляющую, которая активно переносится в клетку-мишень, гидрофобную составляющую или их комбинацию,

у равно 0 или 1;

где -L¹- имеет в качестве заместителя -L²-Z или L²-Z', и где -L¹- необязательно дополнительно замещена;

где

-L²- представляет собой простую химическую связь или спейсер;

-Z представляет собой растворимый в воде носитель; и

-Z' представляет собой нерастворимый в воде носитель.

Только в контексте формулы (VII) применяемые термины имеют следующие значения:

Термин "алкил", как следует понимать, включает, например, неразветвленные, разветвленные, замещенные C_1-12 алкилы, включая алкокси, С_3-8 циклоалкилы или замещенные циклоалкилы, и т.д.

Термин "замещение", как следует понимать, включает добавление или замещение одного или более атомов, содержащихся в функциональной группе, или соединения с одним или более отличными атомами.

Замещенные алкилы включают карбоксиалкилы, аминоалкилы, диалкиламины, гидроксиалкилы и меркаптоалкилы; замещенные циклоалкилы включают составляющие, как например 4-хлорциклогексил; арилы включают составляющие, как например нафтил; замещенные арилы включают составляющие, как например 3-бром-фенил; аралкилы включают составляющие, как например толуил; гетероалкилы включают составляющие, как например этилтиофен; замещенный гетероалкилы включают составляющие, как например 3-метокситиофен; алкокси включает составляющие, как например метокси; и фенокси включает составляющие, как например 3-нитрофенокси. Гало-, как необходимо понимать, включает фтор, хлор, иод и бром.

Предпочтительно -L¹- формулы (VII) имеет в качестве заместителя одну составляющую -L²-Z или L²-Z'.

В другом предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения -L¹- содержит подструктуру формулы (VIII)

где

пунктирная линия, отмеченная звездочкой, обозначает присоединение к атому азота составляющей- D, которая представляет собой РТН составляющую, путем образования амидной связи;

непомеченные пунктирные линии показывают присоединение к оставшейся части -L¹-; и

где -L¹- имеет в качестве заместителя -L²-Z или L²-Z', и где -L¹- необязательно дополнительно замещена;

где

-L²- представляет собой простую химическую связь или спейсер;

-Z представляет собой растворимый в воде носитель; и

-Z' представляет собой нерастворимый в воде носитель.

Предпочтительно -L¹- формулы (VIII) имеет в качестве заместителя одну составляющую -L²-Z или L²-Z'.

В одном варианте выполнения настоящего изобретения -L¹- формулы (VIII) дополнительно не замещена.

В другом предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения -L¹- содержит подструктуру формулы (IX)

где

пунктирная линия, отмеченная звездочкой, обозначает присоединение к атому азота составляющей- D, которая представляет собой РТН составляющую, путем образования карбаматной связи;

непомеченные пунктирные линии показывают присоединение к оставшейся части -L¹-; и

где -L¹- имеет в качестве заместителя -L²-Z или L²-Z', и где -L¹- необязательно дополнительно замещена;

где

-L²- представляет собой простую химическую связь или спейсер;

-Z представляет собой растворимый в воде носитель; и

-Z' представляет собой нерастворимый в воде носитель.

Предпочтительно -L¹- формулы (IX) имеет в качестве заместителя одну составляющую -L²-Z или L²-Z'.

В одном варианте выполнения настоящего изобретения -L¹- формулы (IX) дополнительно не замещена.

В одном варианте выполнения настоящего изобретения -L¹- формулы (IX) дополнительно не замещена.

В пролекарствах согласно настоящему изобретению -L²- представляет собой химическую вязь или спейсерную составляющую.

В одном варианте выполнения настоящего изобретения -L²- представляет собой химическую вязь.

В другом варианте выполнения настоящего изобретения -L²- представляет собой спейсерную составляющую.

Когда -L²- отлична от простой химической связи, -L²- предпочтительно выбрана из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -O-, -С(O)-, -С(O)N(R^y1)-, -S(O)₂N(R^y1)-, -S(O)N(R^y1)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^y1)S(O)₂N(R^y1a)-, -S-, -N(R^y1)-, -ОС(OR^y1)(R^y1a)-, -N(R^y1)C(O)N(R^y1a)-, -OC(O)N(R^y1)-, C_1-50 алкила, C_2-50 алкенила и C_2-50 алкинил; где -Т-, С_1-50 алкил, C_2-50 алкенил и C_2-50 алкинил необязательно замещены одним или более -R^y2, которые являются одинаковыми или различными, и где С_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и C_2-50 алкинил необязательно прерываются одной или более группами, выбранными из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -O-, -С(O)-, -C(O)N(R^y3)-, -S(O)₂N(R^y3)-, -S(O)N(R^y3)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^y3)S(O)₂N(R^y3a)-, -S-, -N(R^y3)-, -OC(OR^y3)(R^y3a)-, -N(R^y3)C(O)N(R^y3a)-, и ОС(O)N(R^y3)-;

-R^y1 и R^y1a независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из Н, -Т, С_1-50 алкила, C_2-50 алкенила и C_2-50 алкинила; где -Т, С_1-50 алкил, C_2-50 алкенил и C_2-50 алкинил необязательно замещены одним или более -R^y2, которые являются одинаковыми или различными, и где С_1-50 алкил, C_2-50 алкенил и C_2-50 алкинил необязательно прерываются одной или более группами, выбранными из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -O-, -С(O)-, -С(O)N(R^y4)-, -S(O)₂N(R^y4)-, -S(O)N(R^y4)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^y4)S(O)₂N(R^y4a)-, -S-, -N(R^y4)-, -OC(OR^y4)(R^y4a)-, -N(R^y4)C(O)N(R^y4a)-, и ОС(O)N(R^y4)-;

каждый Т независимо выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила, С_3-10 циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, 8-11-членного гетеробициклила, 8-30-членного карбополициклила, и 8-30-членного гетерополициклила; где каждый Т независимо необязательно замещен одним или более -R^y2, которые являются одинаковыми или различными;

каждый -R^y2 независимо выбран из группы, состоящей из галогена, -CN, оксо (=O), -COOR^y5, -OR^y5, -C(O)R^y5, -C(O)N(R^y5R^y5a), -S(O)₂N(R^y5R^y5a), -S(O)N(R^y5R^y5a), -S(O)₂R^y5, -S(O)R^y5, -N(R^y5)S(O)₂N(R^y5aR^y5b), -SR^y5, -N(R^y5R^y5a), -NO₂, -ОС(O)R^y5, -N(R^y5)C(O)R^y5a, -N(R^y5)S(O)₂R^y5a, -N(R^y5)S(O)R^y5a, -N(R^y5)C(O)OR^y5a, -N(R^y5)C(O)N(R^y5aR^y5b), -ОС(O)N(R^y5R^y5a), и C_1-6 алкила; где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или более галогенами, которые являются одинаковыми или различными; и

каждый -R^y3, -R^y3a, -R^y4, -R^y4a, -R^y5, -R^y5a и R^y5b независимо выбран из группы, состоящей из - Н, и С_1-6 алкила, где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или более галогенами, которые являются одинаковыми или различными.

Когда -L²- отлична от простой химической связи, -L²- даже более предпочтительно выбрана из -Т-, -С(O)O-, -O-, -С(O)-, -С(O)N(R^y1)-, -S(O)₂N(R^y1)-, -S(O)N(R^y1)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^y1)S(O)₂N(R^y1a)-, -S-, -N(R^y1)-, -OC(OR^y1)(R^y1a)-, -N(R^y1)C(O)N(R^y1a)-, -OC(O)N(R^y1)-, C_1-50 алкила, C_2-50 алкенила и C_2-50 алкинила; где -Т-, С_1-20 алкил, C_2-20 алкенил, и C_2-20 алкинил необязательно замещены одним или более -R^y2, которые являются одинаковыми или различными, и где С_1-20 алкил, С_2-20 алкенил и C_2-20 алкинил необязательно прерываются одной или более группами, выбранными из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -O-, -С(O)-, -С(О)N(R^y3)-, -S(O)₂N(R^y3)-, -S(O)N(R^y3)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^y3)S(O)₂N(R^y3a)-, -S-, -N(R^y3)-, -OC(OR^y3)(R^y3a)-, -N(R^y3)C(O)N(R^y3a)-, и OC(O)N(R^y3)-;

-R^y1 и R^y1a независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из Н, -Т, С_1-10 алкила, C_2-10 алкенила и C_2-10 алкинила; где -Т, С_1-10 алкил, C_2-10 алкенил и C_2-10 алкинил необязательно замещены одним или более -R^y2, которые являются одинаковыми или различными, и где С_1-10 алкил, С_2-10 алкенил и С_2-10 алкинил необязательно прерываются одной или более группами, выбранными из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -O-, -С(O)-, -С(O)N(R^y4)-, -S(O)₂N(R^y4)-, -S(O)N(R^y4)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^y4)S(O)₂N(R^y4a)-, -S-, -N(R^y4)-, -OC(OR^y4)(R^y4a)-, -N(R^y4)C(O)N(R^y4a)-, и OC(O)N(R^y4)-;

каждый Т независимо выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила, С_3-10 циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, 8-11-членного гетеробициклила, 8-30-членного карбополициклила, и 8-30-членного гетерополициклила; где каждый Т независимо необязательно замещен одним или более -R^y2, которые являются одинаковыми или различными;

-R^y2 выбран из группы, состоящей из галогена, -CN, оксо (=O), -COOR^y5, -OR^y5, -С(O)R^y5, -C(O)N(R^y5R^y5a), -S(O)₂N(R^y5R^y5a), -S(O)N(R^y5R^y5a), -S(O)₂R^y5, -S(O)R^y5, -N(R^y5)S(O)₂N(R^y5aR^y5b), -SR^y5, N(R^y5R^y5a), -NO₂, -OC(O)R^y5, -N(R^y5)C(O)R^y5a, -N(R^y5)S(O)₂R^y5a, -N(R^y5)S(O)R^y5a, -N(R^y5)C(O)OR^y5a, -N(R^y5)C(O)N(R^y5aR^y5b), -OC(O)N(R^y5R^y5a), и C_1-6 алкила; где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или более галогенами, которые являются одинаковыми или различными; и

каждый -R^y3, -R^y3a, -R^y4, -R^y4a, -R^y5, -R^y5a и R^y5b независимо от каждого другого выбран из группы, состоящей из Н, и C_1-6 алкила; где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или более галогенами, которые являются одинаковыми или различными.

Когда -L²- отлична от простой химической связи, -L²- даже более предпочтительно выбрана из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -O-, -С(O)-, -С(О)N(R^y1)-, -S(O)₂N(R^y1)-, -S(O)N(R^y1)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^y1)S(O)₂N(R^y1a)-, -S-, -N(R^y1)-, -ОС(OR^y1)(R^y1a)-, -N(R^y1)C(O)N(R^y1a)-, -OC(O)N(R^y1)-, C_1-50 алкила, C_2-50 алкенила и C_2-50 алкинила; где -Т-, С_1-50 алкил, C_2-50 алкенил и C_2-50 алкинил необязательно замещены одним или более -R^y2, которые являются одинаковыми или различными, и где С_1-50 алкил, C_2-50 алкенил и C_2-50 алкинил необязательно прерываются одной или более группами, выбранными из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -O-, -С(O)-, -С(O)N(R^y3)-, -S(O)₂N(R^y3)-, -S(О)N(R^y3)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^y3)S(O)₂N(R^y3a)-, -S-, -N(R^y3)-, -ОС(OR^y3)(R^y3a)-, -N(R^y3)C(O)N(R^y3a)-, и OC(O)N(R^y3)-;

-R^y1 и R^y1a независимо выбраны из группы, состоящей из Н, -Т, C_1-10 алкила, C_2-10 алкенила и C_2-10 алкинила;

каждый Т независимо выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила, С_3-10 циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, 8-11-членного гетеробициклила, 8-30-членного карбополициклила, и 8-30-членного гетерополициклила;

каждый -R^y2 независимо выбран из группы, состоящей из галогена и C_1-6 алкила; и

каждый -R^y3, -R^y3a, -R^y4, -R^y4a, -R^y5, -R^y5a и R^y5b независимо от каждого другого выбран из группы, состоящей из Н, и C_1-6 алкила; где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или более галогенами, которые являются одинаковыми или различными.

Даже более предпочтительно, -L²- представляет собой C_1-20 алкильную цепь, которая необязательно прерывается одной или более группами, независимо выбранными из -O-, -Т- и -C(O)N(R^y1)-; и где С_1-20 алкильная цепь необязательно замещена одной или более группами, независимо выбранными из -ОН, -Т и C(O)N(R^y6R^y6a); где -R^y1, -R^y6, -R^y6a независимо выбраны из группы, состоящей из Н и С_1-4 алкила, и где Т выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила, С_3-10 циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, 8-11-членного гетеробициклила, 8-30-членного карбополициклила, и 8-30-членного гетерополициклила.

Предпочтительно, -L²- имеет молекулярную массу в интервале от 14 г/моль до 750 г/моль.

Предпочтительно, -L²- содержит составляющую, выбранную из

где

пунктирная линия обозначает присоединение к остальной части -L²-, -L¹-, -Z и/или -Z', соответственно; и

-R и R^a независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из Н, метила, этила, пропила, бутила, пентила и гексила.

В одном предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения- L²-имеет длину цепи от 1 до 20 атомов.

Как применяется в настоящей заявке термин "длина цепи" в отношении составляющей -L²- относится к числу атомов -L²-, присутствующих в самом коротком соединении между -L¹- и Z.

Предпочтительно, -L²- имеет формулу (i)

где

пунктирная линия, отмеченная звездочкой, означает присоединение к -L¹-;

неотмеченная пунктирная линия обозначает присоединение к -Z или Z';

n выбран из группы, состоящей из 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 и 18; и

где составляющая формулы (i) необязательно дополнительно замещена.

Предпочтительно, n формулы (i) выбран из группы, состоящей из 3, 4, 5, 6, 7, 8, и 9. Даже более предпочтительно n формулы (i) равно 4, 5, 6, или 7. В одном варианте выполнения настоящего изобретения n формулы (i) равно 4. В другом варианте выполнения настоящего изобретения n формулы (i) равно 5. В другом варианте выполнения настоящего изобретения n формулы (i) равно 6.

В одном предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения составляющая -L¹-L²- выбрана из группы, состоящей из

и

где

неотмеченная пунктирная линия обозначает присоединение к атому азота составляющей D, которая представляет собой РТН составляющую, путем образования амидной связи; и

пунктирная линия, отмеченная звездочкой, означает присоединение к -Z или -Z'.

В одном предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения составляющая -L¹-L²- выбрана из группы, состоящей из

и

где

неотмеченная пунктирная линия обозначает присоединение к атому азота составляющей D, которая представляет собой PTH составляющую, путем образования амидной связи; и

пунктирная линия, отмеченная звездочкой, означает присоединение к -Z или -Z'.

В предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения составляющая -L¹-L²- имеет формулу (IIca-ii).

В другом предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения составляющая -L¹-L²- имеет формулу (IIcb-iii).

Предпочтительно, пролекарство РТН согласно настоящему изобретению имеет формулу (Ia) с х=1.

Носитель -Z содержит C_8-24 алкил или полимер. Предпочтительно, -Z содержит полимер, предпочтительно полимер, выбранный из группы, состоящей из 2-метакрилоил-оксиэтила фосфоилхолинов, поли(акриловых кислот), поли(акрилатов), поли(акриламидов), поли(алкилокси) полимеров, поли(амидов), поли(амидоаминов), поли(аминокислот), поли(ангидридов), поли(аспартамидов), поли(масляных кислот), поли(гликолевых кислот), полибутилентерефталатов, поли(капролактонов), поли(карбонатов), поли(цианоакрилатов), поли(диметилакриламидов), поли(сложных эфиров), поли(этиленов), поли(этиленгликолей), поли(этиленоксидов), поли(этилфосфатов), поли(этилоксазолинов), поли(гликолевых кислот), поли(гидроксиэтилакрилатов), поли(гидроксиэтил-оксазолинов), поли(гидроксиметакрилатов), поли(гидроксипропилметакриламидов), поли(гидроксипропил метакрилатов), поли(гидроксипропилоксазолинов), поли(иминокарбонатов), поли(молочных кислот), поли(сополимеров молочных и гликолевых кислот), поли(метакриламидов), поли(метакрилатов), поли(метилоксазолинов), поли(органофосфазенов), поли(ортосложных эфиров), поли(оксазолинов), поли(пропиленгликолей), поли(силоксанов), поли(уретанов), поли(виниловых спиртов), поли(виниламинов), поли(винилметиловых простых эфиров), поли(винилпирролидонов), силиконов, целлюлоз, карбометилцеллюлоз, гидроксипропил метилцеллюлоз, хитинов, хитозанов, декстранов, декстринов, желатинов, гиалуроновых кислот и производных, функционализированных гиалуроновых кислот, маннанов, пектинов, рамногалактуронанов, крахмалов, гидроксиалкил крахмалов, гидроксиэтил крахмалов и других полимеров на основе углеводов, ксиланов и их сополимеров.

Предпочтительно, -Z имеет молекулярную массу в интервале от 5 до 200 кДа. Даже более предпочтительно, -Z имеет молекулярную массу в интервале от 8 до 100 кДа, даже более предпочтительно в интервале от 10 до 80 кДа, даже более предпочтительно от 12 до 60, даже более предпочтительно от 15 до 40, и наиболее предпочтительно -Z имеет молекулярную массу около 20 кДа. В другом в равной степени предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения -Z имеет молекулярную массу около 40 кДа.

В одном варианте выполнения настоящего изобретения такой растворимый в воде носитель -Z содержит белок. Предпочтительные белки выбирают из группы, состоящей из карбоксил-концевого полипептида хорионического гонадотропина, как описано в US 2012/0035101 А1, которые включены в настоящую заявку посредством ссылки; альбумина; XTEN, как описано в WO 2011123813 А2, которая включена в настоящую заявку посредством ссылки; последовательностей пролиновых/аланиновых случайных спиралей, как описано в WO 2011/144756 А1, который включен в настоящую заявку посредством ссылки; последовательностей пролина/аланина/серина, как описано в WO 2008/155134 А1 и WO 2013/024049 А1, которые включены в настоящую заявку посредством ссылками; с Fc слитых белков.

В одном варианте выполнения настоящего изобретения -Z представляет собой полисаркозин.

В другом предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения -Z содержит поли(N-метилглицин).

В особенно предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения -Z содержит составляющую белка со структурой случайной спирали.

В одном предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения -Z содержит одну составляющую белка со структурой случайной спирали.

В другом предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения -Z содержит две составляющие белка со структурой случайной спирали.

В другом предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения -Z содержит три составляющие белка со структурой случайной спирали.

В другом предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения -Z содержит четыре составляющие белка со структурой случайной спирали.

В другом предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения -Z содержит пять составляющих белка со структурой случайной спирали.

В другом предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения -Z содержит шесть составляющих белка со структурой случайной спирали.

В другом предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения -Z содержит семь составляющих белка со структурой случайной спирали.

В другом предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения -Z содержит восемь составляющих белка со структурой случайной спирали.

Предпочтительно составляющая белка со структурой случайной спирали содержит по меньшей мере 25 аминокислотных остатков и самое большее 2000 аминокислот. Даже более предпочтительно составляющая белка со структурой случайной спирали содержит по меньшей мере 30 аминокислотных остатков и самое большее 1500 аминокислотных остатков. Даже более предпочтительно составляющая белка со структурой случайной спирали содержит по меньшей мере 50 аминокислотных остатков и самое большее 500 аминокислотных остатков.

В предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения, -Z содержит составляющую белка со структурой случайной спирали, где по меньшей мере 80%, предпочтительно по меньшей мере 85%, даже более предпочтительно по меньшей мере 90%, даже более предпочтительно по меньшей мере 95%, даже более предпочтительно по меньшей мере 98% и наиболее предпочтительно по меньшей мере 99% от общего числа аминокислот, образующих указанную составляющую белка со структурой случайной спирали, выбраны из аланина и пролина. Даже более предпочтительно, по меньшей мере 10%, но менее 75%, предпочтительно менее 65%, от общего числа аминокислотных остатков составляющей белка со структурой случайной спирали представляют собой пролиновые остатки. Предпочтительно, составляющая белка со структурой случайной спирали является такой, как описано в WO 2011/144756 А1, которая включена в настоящую заявку в полном объеме посредством ссылки. Даже более предпочтительно Z содержит по меньшей мере одну составляющую, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 51 и SEQ ID NO: 61, как раскрывается в WO 2011/144756, которая включена в настоящую заявку посредством ссылки. Составляющая, содержащая такой белок со структурой случайной спирали, содержащая аланин и пролин, которые упоминаются как "РА" или "РА составляющая".

Соответственно, -Z содержит РА составляющую.

В равной мере предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения, -Z содержит составляющая белка со структурой случайной спирали, в которой по меньшей мере 80%, предпочтительно по меньшей мере 85%, даже более предпочтительно по меньшей мере 90%, даже более предпочтительно по меньшей мере 95%, даже более предпочтительно по меньшей мере 98% и наиболее предпочтительно по меньшей мере 99% от общего числа аминокислот, образующих указанную составляющую белка со структурой случайной спирали, выбраны из аланина, серина и пролина. Даже более предпочтительно, по меньшей мере 4%, но менее 40% от общего числа аминокислотных остатков составляющей белка со структурой случайной спирали представляют собой пролиновые остатки.

Предпочтительно, составляющая белка со структурой случайной спирали описана в WO 2008/155134 А1, которая включена в настоящую заявку в полном объеме посредством ссылки. Даже более предпочтительно Z содержит по меньшей мере одну составляющую, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 26, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 36, SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 42, SEQ ID NO: 44, SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 50, SEQ ID NO: 52, SEQ ID NO: 54 и SEQ ID NO: 56, как описано в WO 2008/155134 А1, которая включена в настоящую заявку посредством ссылки. Составляющая, содержащая белок со структурой случайной спирали, содержащий аланин, серин и пролин, упоминаются как "PAS" или "PAS составляющая".

Соответственно, -Z содержит PAS составляющую.

В равной мере предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения, -Z содержит составляющую белка со структурой случайной спирали, в которой по меньшей мере 80%, предпочтительно по меньшей мере 85%, даже более предпочтительно по меньшей мере 90%, даже более предпочтительно по меньшей мере 95%, даже более предпочтительно по меньшей мере 98% и наиболее предпочтительно по меньшей мере 99% от общего числа аминокислот, образующих указанную составляющую белка со структурой обратной спирали, выбраны аланина, глицина и пролина. Составляющая, содержащая белок со структурой случайной спирали, содержащий аланин, глицин и пролин, упоминается как "PAG" или "PAG составляющая".

Соответственно, -Z содержит PAG составляющую.

В равной мере предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения, -Z содержит составляющая белка со структурой случайной спирали, в которой по меньшей мере 80%, предпочтительно по меньшей мере 85%, даже более предпочтительно по меньшей мере 90%, даже более предпочтительно по меньшей мере 95%, даже более предпочтительно по меньшей мере 98% и наиболее предпочтительно по меньшей мере 99% от общего числа аминокислот, образующих указанную составляющую белка со структурой обратной спирали, выбирают из пролина и глицина. Составляющая, содержащая белок со структурой случайной спирали, содержащий пролин и глицин, упоминается как "PG" или "PG составляющая".

Предпочтительно, такая PG составляющая содержит составляющую формулы (а-0)

где

р выбран из группы, состоящей из 0, 1, 2, 3, 4 и 5;

q выбран из группы, состоящей из 0, 1, 2, 3, 4 и 5;

r представляет собой целое число в интервале и включительно от 10 до 1000;

при условии, что по меньшей мере один из р и q равен по меньшей мере 1;

Предпочтительно, р формулы (a-0) выбран из группы, состоящей из 1, 2 и 3.

Предпочтительно, q формулы (a-0) выбран из 0, 1 и 2.

Даже более предпочтительно PG составляющая содержит последовательность SEQ ID: NO 122: GGPGGPGPGGPGGPGPGGPG

Даже более предпочтительно, PG составляющая содержит последовательность SEQ ID: NO 97 формулы (а-0-а)

где

v представляет собой целое число в интервале и включительно от 1 до 50.

Соответственно, -Z содержит PG составляющую.

В равной мере предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения, -Z содержит составляющая белка со структурой случайной спирали, в которой по меньшей мере 80%, предпочтительно по меньшей мере 85%, даже более предпочтительно по меньшей мере 90%, даже более предпочтительно по меньшей мере 95%, даже более предпочтительно по меньшей мере 98% и наиболее предпочтительно по меньшей мере 99% от общего числа аминокислот, образующих указанный белок со структурой обратной спирали, выбраны из аланина, глицина, серина, треонина, глутамата и пролина. Предпочтительно, составляющая белка со структурой случайной спирали является такой, как описано в WO 2010/091122 А1, который включен в настоящую заявку посредством ссылки. Даже более предпочтительно -Z содержит по меньшей мере одну составляющую, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 182, SEQ ID NO: 183, SEQ ID NO: 184; SEQ ID NO: 185, SEQ ID NO: 186, SEQ ID NO: 187, SEQ ID NO: 188, SEQ ID NO: 189, SEQ ID NO: 190, SEQ ID NO: 191, SEQ ID NO: 192, SEQ ID NO: 193, SEQ ID NO: 194, SEQ ID NO: 195, SEQ ID NO: 196, SEQ ID NO: 197, SEQ ID NO: 198, SEQ ID NO: 199, SEQ ID NO: 200, SEQ ID NO: 201, SEQ ID NO: 202, SEQ ID NO: 203, SEQ ID NO: 204, SEQ ID NO: 205, SEQ ID NO: 206, SEQ ID NO: 207, SEQ ID NO: 208, SEQ ID NO: 209, SEQ ID NO: 210, SEQ ID NO: 211, SEQ ID NO: 212, SEQ ID NO: 213, SEQ ID NO: 214, SEQ ID NO: 215, SEQ ID NO: 216, SEQ ID NO: 217, SEQ ID NO: 218, SEQ ID NO: 219, SEQ ID NO: 220, SEQ ID NO: 221, SEQ ID NO: 759, SEQ ID NO: 760, SEQ ID NO: 761, SEQ ID NO: 762, SEQ ID NO: 763, SEQ ID NO: 764, SEQ ID NO: 765, SEQ ID NO: 766, SEQ ID NO: 767, SEQ ID NO: 768, SEQ ID NO: 769, SEQ ID NO: 770, SEQ ID NO: 771, SEQ ID NO: 772, SEQ ID NO: 773, SEQ ID NO: 774, SEQ ID NO: 775, SEQ ID NO: 776, SEQ ID NO: 777, SEQ ID NO: 778, SEQ ID NO: 779, SEQ ID NO: 1715, SEQ ID NO: 1716, SEQ ID NO: 1718, SEQ ID NO: 1719, SEQ ID NO: 1720, SEQ ID NO: 1721 и SEQ ID NO: 1722, как описано в WO 2010/091122 A1, которая включена в настоящую заявку посредством ссылки. Составляющая, содержащая белок со структурой случайной спирали, содержащий аланин, глицин, серин, треонин, глутамат и пролин, упоминается как "XTEN" или "XTEN составляющая" наряду с ее обозначением в WO 2010/091122 А1.

Соответственно, -Z содержит XTEN составляющую.

В другом предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения, Z содержит производное жирной кислоты. Предпочтительными производными жирной кислоты являются описанные в WO 2005/027978 А2 и WO 2014/060512 А1, которые включены в настоящую заявку посредством ссылки.

В другом предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения Z представляет собой полимер на основе гиалуроновой кислоты.

В одном варианте выполнения настоящего изобретения Z представляет собой носитель, как раскрывается в WO 2012/02047 А1, который включен в настоящую заявку посредством ссылки.

В другом варианте выполнения настоящего изобретения Z представляет собой носитель, как раскрывается в WO 2013/024048 А1, который включен в настоящую заявку посредством ссылки.

В другом предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения -Z представляет собой полимер на основе ПЭГ, такой как линейный, разветвленный или полимер на основе ПЭГ с множеством ветвей.

В одном варианте выполнения настоящего изобретения -Z представляет собой линейный полимер на основе ПЭГ.

В другом варианте выполнения настоящего изобретения -Z представляет собой полимер на основе ПЭГ с множеством ветвей. Предпочтительно, -Z представляет собой полимер на основе ПЭГ с множеством ветвей, имеющий по меньшей мере 4 ветви на основе ПЭГ.

Предпочтительно, такой полимер на основе ПЭГ с множеством ветвей -Z соединен с множеством составляющих- L²-L¹-D, где каждая составляющая -L²-L¹-D предпочтительно соединена с концом ветви, предпочтительно с концом ветви. Предпочтительно такой полимер на основе ПЭГ с множеством ветвей -Z соединен с 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 или 16 составляющими -L²-L¹-D. Даже более предпочтительно такой полимер на основе ПЭГ с множеством ветвей -Z соединен с 2, 3, 4, 6 или 8 составляющими -L²-L¹-D. Даже более предпочтительно такой полимер на основе ПЭГ с множеством ветвей -Z соединен с 2, 4 или 6 составляющими -L²-L¹-D, даже более предпочтительно такой полимер на основе ПЭГ с множеством ветвей -Z соединен с 4 или 6 составляющими -L²-L¹-D, и наиболее предпочтительно такой полимер на основе ПЭГ с множеством ветвей -Z соединена с 4 составляющими -L²-L¹-D.

Предпочтительно таким полимером Z на основе ПЭГ с множеством ветвей является ПЭГ производное с множеством ветвей, как например подробно описано для продуктов, перечисленных в JenKem Technology, USA (доступно по ссылке http://www.jenkemusa.com/Pages/ПЭГПродукт.aspx на 18 декабря 2014), как например ПЭГ производная с 4-мя ветвями, в частности ПЭГ производная с 4-мя ветвями, содержащая ядро из пентаэритрита, ПЭГ производная с восемью ветвями, содержащая ядро из гексаглицерина, и ПЭГ производная с восемью ветвями, содержащая ядро из трипентаэритрита. Более предпочтительно, растворимый в воде носителем -Z на основе ПЭГ содержит составляющую, выбранную из:

ПЭГ-амин с 4-мя ветвями, содержащий ядро из пентаэритрита:

с n в интервале от 20 до 500;

ПЭГ-амин с восемью ветвями, содержащий ядро из гексаглицерина:

с n в интервале от 20 до 500; и

R = структура ядра из гексаглицерина или трипентаэритрита; и

ПЭГ-амин с шестью ветвями, содержащий ядро из сорбита или дипентаэритрита:

с n в интервале от 20 до 500; и

R = содержащий ядро из сорбита или дипентаэритрита;

и где пунктирные линии обозначают присоединение к остальной части РТН пролекарства.

В предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения -Z представляет собой разветвленный полимер на основе ПЭГ. В одном варианте выполнения настоящего изобретения -Z представляет собой разветвленный полимер на основе ПЭГ, имеющий одну, две, три, четыре, пять или шесть точек разветвления. Предпочтительно, -Z представляет собой разветвленный полимер на основе ПЭГ, имеющий одну, две или три точки разветвления. В одном варианте выполнения настоящего изобретения -Z представляет собой разветвленный полимер на основе ПЭГ, имеющий одну точку разветвления. В другом варианте выполнения настоящего изобретения -Z представляет собой разветвленный полимер на основе ПЭГ, имеющий две точки разветвления. В другом варианте выполнения настоящего изобретения -Z представляет собой разветвленный полимер на основе ПЭГ, имеющий три точки разветвления.

Точку разветвления предпочтительно выбирают из группы, состоящей из -N<, -СН< и >С<.

Предпочтительно, такая разветвленная составляющая -Z имеет молекулярную массу, равную по меньшей мере 10 кДа.

В одном варианте выполнения настоящего изобретения такая разветвленная составляющая -Z имеет молекулярную массу в интервале и включая 10 кДа - 500 кДа, более предпочтительно в интервале и включая 10 кДа - 250 кДа, даже более предпочтительно в интервале и включая 10 кДа - 150 кДа, даже более предпочтительно в интервале и включая 12 кДа - 100 кДа и наиболее предпочтительно в интервале и включая 15 кДа - 80 кДа.

Предпочтительно, такая разветвленная составляющая -Z имеет молекулярную массу в интервале и включая 10 кДа - 80 кДа. В одном варианте выполнения настоящего изобретения молекулярная масса равна около 10 кДа. В другом варианте выполнения настоящего изобретения молекулярная масса такой разветвленной составляющей -Z равна около 20 кДа. В другом варианте выполнения настоящего изобретения молекулярная масса такой разветвленной составляющей -Z равна около 30 кДа. В другом варианте выполнения настоящего изобретения молекулярная масса такой разветвленной составляющей -Z равна около 40 кДа. В другом варианте выполнения настоящего изобретения молекулярная масса такой разветвленной составляющей -Z равна около 50 кДа. В другом варианте выполнения настоящего изобретения молекулярная масса такой разветвленной составляющей -Z равна около 60 кДа. В другом варианте выполнения настоящего изобретения молекулярная масса такой разветвленной составляющей -Z равна около 70 кДа. В другом варианте выполнения настоящего изобретения молекулярная масса такой разветвленной составляющей -Z равна около 80 кДа. Наиболее предпочтительно, такая разветвленная составляющая -Z имеет молекулярную массу, равную около 40 кДа.

Предпочтительно, -Z или Z' содержит составляющую

В равно предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения- Z содержит амидную связь.

Предпочтительно -Z содержит составляющую формулы (а)

где

пунктирная линия показывает присоединение к -L²- или к оставшейся части -Z;

BP^a представляет собой точку разветвления, выбранную из группы, состоящей из -N<, -CR< и >С<;

-R выбирают из группы, состоящей из -Н и C_1-6 алкила;

а равно 0, если BP^a представляет собой -N< или CR<, и n равно 1, если BP^a представляет собой >С<;

-S^a-, -S^a'-, -S^a''- и S^a''' - независимо друг от друга представляют собой химическую связь или выбирают из группы, состоящей из С_1-50 алкила, C_2-50 алкенила и C_2-50 алкинила; где С_1-50 алкил, C_2-50 алкенил и C_2-50 алкинил необязательно замещены одним или более заместителями -R¹, которые являются одинаковыми или различными, и где С_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно прерваны одной или более группами, выбранными из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -O-, -С(O)-, -C(O)N(R²)-, -S(O)₂N(R²)-, -S(O)N(R²)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R²)S(O)₂N(R^2a)-, -S-, -N(R²)-, -OC(OR²)(R^2a)-, -N(R²)C(O)N(R^2a)- и -OC(O)N(R²)-;

каждый -Т- независимо выбирают из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила, С_3-10 циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, 8-11-членного гетеробициклила, 8-30-членного карбополициклила и 8-30-членного гетерополициклила; где каждый -Т- независимо необязательно замещен одним или более заместителями -R¹, которые являются одинаковыми или различными;

каждый -R¹ независимо выбирают из группы, состоящей из галогена, -CN, оксо (=O), -COOR³, -OR³, -C(O)R³, -С(O)N(R³R^3a), -S(O)₂N(R³R^3a), -S(O)N(R³R^3a), -S(O)₂R³, -S(O)R³, -N(R³)S(O)₂N(R^3aR^3b), -SR³, -N(R³R^3a), -NO₂, -OC(O)R³, -N(R³)C(O)R^3a, -N(R³)S(O)₂R^3a, -N(R³)S(O)R^3a, -N(R³)C(O)OR^3a, -N(R³)C(O)N(R^3aR^3b), -OC(O)N(R³R^3a) и С_1-6 алкила; где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или более заместителями галоген, которые являются одинаковыми или различными;

каждый -R², -R^2a, -R³, -R^3a и R^3b независимо выбирают из группы, состоящей из -Н и C_1-6 алкила, где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или более заместителями галоген, которые являются одинаковыми или различными; и

-P^a', -P^a'' и P^a''' независимо представляют собой полимерную составляющую.

В одном варианте выполнения настоящего изобретения BP^a формулы (а) представляет собой -N<.

В другом варианте выполнения настоящего изобретения BP^a формулы (а) представляет собой >С<.

В предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения BP^a формулы (а) представляет собой -CR<. Предпочтительно, -R представляет собой -Н. Соответственно, а формулы (а) равно 0.

В одном варианте выполнения настоящего изобретения -S^a- формулы (а) представляет собой химическую вязь.

В другом варианте выполнения настоящего изобретения -S^a- формулы (а) выбрана из группы, состоящей из С_1-10 алкила, С_2-10 алкенила и С_2-10 алкинила, где С_1-10 алкил, С_2-10 алкенил и C_2-10 алкинил необязательно прерываются одной или более химическими группами, выбранными из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -O-, -С(O)-, -C(O)N(R⁴)-, -S(O)₂N(R⁴)-, -S(O)N(R⁴)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R⁴)S(O)₂N(R^4a)-, -S-, -N(R⁴)-, -OC(OR⁴)(R^4a)-, -N(R⁴)C(O)N(R^4a)-, и OC(O)N(R⁴)-; где -Т- представляет собой 3-10-членный гетероциклил; и R⁴ и R^4a независимо выбраны из группы, состоящей из Н, метила, этила, пропила и бутила.

Предпочтительно -S^a- формулы (а) выбран из группы, состоящей из C_1-10 алкила, который прерывается одной или более химическими группами, выбранными из группы, состоящей из -Т-, -C(O)N(R⁴)- и O-.

В одном варианте выполнения настоящего изобретения -S^a'- формулы (а) представляет собой химическую вязь.

В другом варианте выполнения настоящего изобретения -S^a'- формулы (а) выбрана из группы, состоящей из С_1-10 алкила, С_2-10 алкенила и С_2-10 алкинила, где С_1-10 алкил, С_2-10 алкенил и С_2-10 алкинил необязательно прерываются одной или более химическими группами, выбранными из группы, состоящей из -С(O)O-, -O-, -С(O)-, -C(O)N(R⁴)-, -S(O)₂N(R⁴)-, -S(O)N(R⁴)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R⁴)S(O)₂N(R^4a)-, -S-, -N(R⁴)-, -OC(OR⁴)(R^4a)-, -N(R⁴)C(O)N(R^4a)-, и OC(O)N(R⁴)-; где -R⁴ и R^4a независимо выбраны из группы, состоящей из Н, метила, этила, пропила и бутила. Предпочтительно -S^a'- формулы (а) выбран из группы, состоящей из метила, этила, пропила, бутила, которые необязательно прерываются одной или более химическими группами, выбранными из группы, состоящей из -O-, -С(O)- и C(O)N(R⁴)-.

В одном варианте выполнения настоящего изобретения -S^a''- формулы (а) представляет собой химическую вязь.

В другом варианте выполнения настоящего изобретения -S^a''- формулы (а) выбран из группы, состоящей из С_1-10 алкила, С_2-10 алкенила и С_2-10 алкинила, где С_1-10 алкил, С_2-10 алкенил и С_2-10 алкинил необязательно прерываются одной или более химическими группами, выбранными из группы, состоящей из -С(O)O-, -O-, -С(O)-, -C(O)N(R⁴)-, -S(O)₂N(R⁴)-, -S(O)N(R⁴)-,-S(O)₂-, -S(O)-, -N(R⁴)S(O)₂N(R^4a)-, -S-, -N(R⁴)-, -OC(OR⁴)(R^4a)-, -N(R⁴)C(O)N(R^4a)-, и OC(O)N(R⁴)-; где -R⁴ и R^4a независимо выбраны из группы, состоящей из Н, метила, этила, пропила и бутила. Предпочтительно -S^a''- формулы (а) выбран из группы, состоящей из метила, этила, пропила, бутила, которые необязательно прерываются одной или более химическими группами, выбранными из группы, состоящей из -O-, -С(O)- и C(O)N(R⁴)-.

В одном варианте выполнения настоящего изобретения -S^a'''- формулы (а) представляет собой химическую вязь.

В другом варианте выполнения настоящего изобретения -S^a'''- формулы (а) выбран из группы, состоящей из С_1-10 алкила, С_2-10 алкенила и C_2-10 алкинила, где C_1-10 алкил, С_2-10 алкенил и С_2-10 алкинил необязательно прерываются одной или более химическими группами, выбранными из группы, состоящей из -С(O)O-, -O-, -С(O)-, -C(O)N(R⁴)-, -S(O)₂N(R⁴)-, -S(O)N(R⁴)-,-S(O)₂-, -S(O)-, -N(R⁴)S(O)₂N(R^4a)-, -S-, -N(R⁴)-, -OC(OR⁴)(R^4a)-, -N(R⁴)C(O)N(R^4a)-, и OC(O)N(R⁴)-; где -R⁴ и R^4a независимо выбраны из группы, состоящей из Н, метила, этила, пропила и бутила. Предпочтительно -S^a'''- формулы (а) выбран из группы, состоящей из метила, этила, пропила, бутила, которые необязательно прерываются одной или более химическими группами, выбранными из группы, состоящей из -O-, -С(O)- и C(O)N(R⁴)-.

Предпочтительно, -P^a', -P^a'' и P^a''' формулы (а) независимо содержат полимер, выбранный из группы, состоящей из 2-метакрилоил-оксиэтилфосфоилхолинов, поли(акриловых кислот), поли(акрилатов), поли(акриламидов), поли(алкилокси) полимеров, поли(амидов), поли(амидоаминов), поли(аминокислот), поли(ангидридов), поли(аспартамидов), поли(масляных кислот), поли(гликолевых кислот), полибутилентерефталатов, поли(капролактонов), поли(карбонатов), поли(цианоакрилатов), поли(диметилакриламидов), поли(сложных эфиров), поли(этиленов), поли(этиленгликолей), поли(этиленоксидов), поли(этилфосфатов), поли(этилоксазолинов), поли(гликолевых кислот), поли(гидроксиэтилакрилатов), поли(гидроксиэтил-оксазолинов), поли(гидроксиметакрилатов), поли(гидроксипропилметакриламидов), поли(гидроксипропил метакрилатов), поли(гидроксипропилоксазолинов), поли(иминокарбонатов), поли(молочных кислот), поли(сополимеров молочных и гликолевых кислот), поли(метакриламидов), поли(метакрилатов), поли(метилоксазолинов), поли(органофосфазенов), поли(ортосложных эфиров), поли(оксазолинов), поли(пропиленгликолей), поли(силоксанов), поли(уретанов), поли(виниловых спиртов), поли(виниламинов), поли(винилметиловых простых эфиров), поли(винилпирролидонов), силиконов, целлюлоз, карбометил целлюлоз, гидроксипропил метилцеллюлоз, хитинов, хитозанов, декстранов, декстринов, желатинов, гиалуроновых кислот и производных, функционализированных гиалуроновых кислот, маннанов, пектинов, рамногалактуронанов, крахмалов, гидроксиалкил крахмалов, гидроксиэтил крахмалов и других полимеров на основе углеводов, ксиланов и их сополимеров.

Более предпочтительно, -Р^а', -Р^а'' и Р^а''' формулы (а) независимо содержат составляющую на основе ПЭГ. Даже более предпочтительно, -Р^а', -Р^а'' и Р^а''' формулы (а) независимо содержат составляющую на основе ПЭГ, содержащую по меньшей мере 20% ПЭГ, даже более предпочтительно по меньшей мере 30%, даже более предпочтительно по меньшей мере 40% ПЭГ, даже более предпочтительно по меньшей мере 50% ПЭГ, даже более предпочтительно по меньшей мере 60% ПЭГ, даже более предпочтительно по меньшей мере 70% ПЭГ, даже более предпочтительно по меньшей мере 80% ПЭГ и наиболее предпочтительно по меньшей мере 90% ПЭГ.

Предпочтительно, -Р^а', -Р^а'' и Р^а''' формулы (а) независимо имеют молекулярную массу в интервале и включая 5 кДа - 50 кДа, более предпочтительно имеют молекулярную массу в интервале и включая 5 кДа - 40 кДа, даже более предпочтительно в интервале и включая 7.5 кДа - 35 кДа, даже более предпочтительно в интервале от и 7.5-30 кДа, даже более предпочтительно в интервале и включая 10-30 кДа.

В одном варианте выполнения настоящего изобретения -Р^а', -Р^а'' и Р^а''' формулы (а) имеют молекулярную массу, равную около 5 кДа.

В другом варианте выполнения настоящего изобретения -Р^а', -Р^а'' и Р^а''' формулы (а) имеют молекулярную массу, равную около 7.5 кДа.

В другом варианте выполнения настоящего изобретения -Р^а', -Р^а'' и Р^а''' формулы (а) имеют молекулярную массу, равную около 10 кДа.

В другом варианте выполнения настоящего изобретения -Р^а', -Р^а'' и Р^а''' формулы (а) имеют молекулярную массу, равную около 12.5 кДа.

В другом варианте выполнения настоящего изобретения -Р^а', -Р^а'' и Р^а''' формулы (а) имеют молекулярную массу, равную около 15 кДа.

В другом варианте выполнения настоящего изобретения -Р^а', -Р^а'' и Р^а''' формулы (а) имеют молекулярную массу, равную около 20 кДа.

В одном варианте выполнения настоящего изобретения -Z содержит одну составляющую формулы (а).

В другом варианте выполнения настоящего изобретения -Z содержит две составляющие формулы (а).

В другом варианте выполнения настоящего изобретения -Z содержит три составляющие формулы (а).

Предпочтительно, -Z представляет собой составляющую формулы (а).

Более предпочтительно, -Z содержит составляющую формулы (b)

где

пунктирная линия показывает присоединение к -L²- или к оставшейся части -Z; и

m и р независимо друг от друга представляют собой целое число в интервале и включительно от 150 до 1000; предпочтительно целое число в интервале и включительно от 150 до 500; более предпочтительно целое число в интервале и включительно от 200 до 500; и наиболее предпочтительно целое число в интервале и включительно от 400 до 500.

Предпочтительно, m и р формулы (b) представляют собой одно и то же целое число.

Наиболее предпочтительно m и р формулы (b) равны около 450.

Предпочтительно, -Z представляет собой составляющую формулы (b).

Носитель -Z' представляет собой не растворимый в воде полимер, даже более предпочтительно гидрогель. Предпочтительно, такой гидрогель содержит полимер, выбранный из группы, состоящей из 2-метакрилоил-оксиэтил фосфоилхолинов, поли(акриловых кислот), поли(акрилатов), поли(акриламидов), поли(алкилокси) полимеров, поли(амидов), поли(амидоаминов), поли(аминокислот), поли(ангидридов), поли(аспартамидов), поли(масляных кислот), поли(гликолевых кислот), полибутилентерефталатов, поли(капролактонов), поли(карбонатов), поли(цианоакрилатов), поли(диметилакриламидов), поли(сложных эфиров), поли(этиленов), поли(этиленгликолей), поли(этиленоксидов), поли(этилфосфатов), поли(этилоксазолинов), поли(гликолевых кислот), поли(гидроксиэтилакрилатов), поли(гидроксиэтил-оксазолинов), поли(гидроксиметакрилатов), поли(гидроксипропилметакриламидов), поли(гидроксипропил метакрилатов), поли(гидроксипропилоксазолинов), поли(иминокарбонатов), поли(молочных кислот), поли(сополимеров молочных и гликолевых кислот), поли(метакриламидов), поли(метакрилатов), поли(метилоксазолинов), поли(органофосфазенов), поли(ортосложных эфиров), поли(оксазолинов), поли(пропиленгликолей), поли(силоксанов), поли(уретанов), поли(виниловых спиртов), поли(виниламинов), поли(винилметиловых простых эфиров), поли(винилпирролидонов), силиконов, целлюлоз, карбометил целлюлоз, гидроксипропил метилцеллюлоз, хитинов, хитозанов, декстранов, декстринов, желатинов, гиалуроновых кислот и производных, функционализированных гиалуроновых кислот, маннанов, пектинов, рамногалактуронанов, крахмалов, гидроксиалкил крахмалов, гидроксиэтил крахмалов и других полимеров на основе углеводов, ксиланов и их сополимеров.

Если носитель -Z' представляет собой гидрогель, это предпочтительно гидрогель, содержащий ПЭГ или гиалуроновую кислоту. Наиболее предпочтительно такой гидрогель содержит ПЭГ.

Даже более предпочтительно, носитель -Z' представляет собой гидрогель, как раскрывается в WO 2006/003014 А2, WO 2011/012715 А1 или WO 2014/056926 А1, которые включены в настоящую заявку посредством ссылки в полном объеме.

В другом варианте выполнения настоящего изобретения -Z' представляет собой полимерную сеть, образованную посредством физической агрегации полимерных цепей, причем физическая агрегация предпочтительно вызвана водородными связями, кристаллизацией, спирализацией или комплексообразованием. В одном варианте выполнения настоящего изобретения такая полимерная сеть представляет собой термогелевый полимер.

Предпочтительно, общая масса РТН пролекарства согласно настоящему изобретению составляет по меньшей мере 10 кДа, как например по меньшей мере 12 кДа, как например по меньшей мере 15 кДа, как например по меньшей мере 20 кДа или как например по меньшей мере 30 кДа. Предпочтительно общая масса РТН пролекарства согласно настоящему изобретению составляет самое большее 250 кДа, как например самое большее 200 кДа, 180 кДа, 150 кДа или 100 кДа.

В предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения пролекарство РТН согласно настоящему изобретению имеет формулу (IIe-i):

где

неотмеченная пунктирная линия обозначает присоединение к атому азота составляющей D, которая представляет собой РТН составляющую, путем образования амидной связи; и

пунктирная линия, отмеченная звездочкой, означает присоединение к составляющей

где

m и р независимо друг от друга представляют собой целое число в интервале и включительно от 400 до 500.

Предпочтительно, -D присоединена к РТН пролекарству формулы (IIe-i) через N-концевую аминовую функциональную группу составляющей РТН.

В другом предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения пролекарство РТН согласно настоящему изобретению имеет формулу (IIf-i):

где

неотмеченная пунктирная линия обозначает присоединение к атому азота составляющей D, которая представляет собой PTH составляющую, путем образования амидной связи; и

пунктирная линия, отмеченная звездочкой, означает присоединение к составляющей

где

m и р независимо друг от друга представляют собой целое число в интервале и включительно от 400 до 500.

Предпочтительно, -D присоединена к РТН пролекарству формулы (IIf-i) через N-концевую аминовую функциональную группу составляющей РТН.

В предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения остаточная активность РТН пролекарства согласно настоящему изобретению составляет менее 10%, более предпочтительно менее 1%, даже более предпочтительно менее 0.1%), даже более предпочтительно менее 0.01%, даже более предпочтительно менее 0.001% и наиболее предпочтительно менее 0.0001%.

Как применяется в настоящей заявке термин "остаточная активность" относится к активности, проявляемой пролекарством РТН согласно настоящему изобретению, где РТН составляющая связана с носителем, относительно активности, проявляемой соответствующим свободным РТН. В этом контексте термин «активность» относится к связыванию с активацией рецептора РТН/PTHrP1, приводящий к активации аденилатциклазы с образованием сАМР, фосфолипазы С с образованием внутриклеточного кальция или остеобластной экспрессии RANKL (которая связывается с RANK (активатор рецептора ядерного фактора kB) на остеокластах. Понятно, что измерение остаточной активности РТН пролекарства согласно настоящему изобретению требует времени, в ходе которого определенное количество РТН будет высвобождено из пролекарства РТН согласно настоящему изобретению, и что такой высвобожденный РТН исказит результаты, измеренные для пролекарства РТН. Таким образом, на практике принято проводить испытание остаточной активности пролекарства с конъюгатом, в котором лекарственная составляющая, в данном случае РТН, является необратимой, т.е. стабильно связанной с носителем, который насколько это возможно, напоминает структуру пролекарства РТН, для которого должна быть измерена остаточная активность.

Подходящим анализом для измерения активности РТН и остаточной активности пролекарства РТН согласно настоящему изобретению, предпочтительно в форме стабильного аналога, является, например, измерение продукции сАМР из клеток НЕК293, сверхэкспрессирующих рецептор PTH/PTHrPl (Hohenstein et al., Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, September 2014, 98: 345-350) или анализ на основе клеток для обнаружения высвобождения циклической AMP, обнаруживаемой с помощью гомогенной флуоресценции с временным разрешением (HTRF) или ELISA, что был подтверждено согласно ICHQ2(R1) (http://www.criver.com/files/pdfs/bps/bpr_invitro_bioassays.aspx).

Неожиданно было обнаружено, что использование N-концевого присоединения L¹ и использование носителя на основе разветвленного ПЭГ для Z, то есть 2×20 кДа ПЭГ, приводит к особенно низкой остаточной активности. Желательна уменьшенная остаточная активность, так как она уменьшает побочные эффекты.

Неожиданно было обнаружено, что пролекарства РТН согласно настоящему изобретению способны достигать стабильного профиля РТН в плазме, который обеспечивает физиологический уровень кальция в сыворотке и моче или даже уменьшенные уровни кальция в моче.

Предпочтительно, после подкожного введения фармакокинетический профиль пролекарства РТН согласно настоящему изобретению проявляет соотношение пика и минимума менее 4 в пределах одного интервала инъекции.

Как применяется в настоящей заявке термин «интервал инъекции» относится к времени между двумя последовательными введениями фармацевтической композиции согласно настоящему изобретению.

Как применяется в настоящей заявке термин "соотношение пика и минимума" относится к соотношению между самой высокой концентрацией в плазме и самой низкой концентрацией РТН в плазме, высвобождаемой из пролекарства РТН согласно настоящему изобретению в течение периода времени между двумя последовательными введениями отличному от человека примату, предпочтительно яванской макаке.

Период времени между двумя последовательными подкожными введениями, то есть интервал введения, предпочтительно составляет по меньшей мере 24 часа, как например 24 часа, 36 часов, 48 часов, 60 часов, 72 часа, каждые 84 часа, 96 часов, 108 часов, 120 часов, 132 часа, 144 часа, 156 часов, одна неделя, две недели, три недели или четыре недели.

В одном варианте выполнения настоящего изобретения период времени между двумя последовательными подкожными введениями составляет 24 часа.

В другом варианте выполнения настоящего изобретения период времени между двумя последовательными подкожными введениями составляет 48 часов.

В другом варианте выполнения настоящего изобретения период времени между двумя последовательными подкожными введениями составляет 72 часа.

В другом варианте выполнения настоящего изобретения период времени между двумя последовательными подкожными введениями составляет 96 часов.

В другом варианте выполнения настоящего изобретения период времени между двумя последовательными подкожными введениями составляет 120 часов.

В другом варианте выполнения настоящего изобретения период времени между двумя последовательными подкожными введениями составляет 144 часа.

В другом варианте выполнения настоящего изобретения период времени между двумя последовательными подкожными введениями составляет одну неделю.

Соотношение пика и минимума, измеренное для каждого интервала введения, составляет менее 4, предпочтительно менее 3.8, более предпочтительно менее 3.6, даже более предпочтительно менее 3.4, даже более предпочтительно менее 3.2, даже более предпочтительно менее 3, даже более предпочтительно менее 2.8, даже более предпочтительно менее 2.6, даже более предпочтительно менее 2.4, даже более предпочтительно менее 2.2 и наиболее предпочтительно менее 2.

Другим объектом настоящего изобретения является фармацевтическая композиция, содержащая по меньшей мере одно пролекарство РТН согласно настоящему изобретению и по меньшей мере один эксципиент.

Предпочтительно, фармацевтическая композиция, содержащая по меньшей мере одно пролекарство РТН согласно настоящему изобретению, имеет значение рН в интервале от и включая от рН 3 до рН 8. Более предпочтительно, фармацевтическая композиция имеет значение рН в интервале от и включая от рН 4 до рН 6. Наиболее предпочтительно, фармацевтическая композиция имеет значение рН в интервале от и включая от рН 4 до рН 5.

В одном варианте выполнения настоящего изобретения фармацевтическая композиция, содержащая по меньшей мере одно пролекарство РТН согласно настоящему изобретению и по меньшей мере один эксципиент, представляет собой жидкую композицию или композицию в форме суспензии. Понятно, что фармацевтическая композиция представляет собой композицию в форме суспензии, если пролекарство РТН согласно настоящему изобретению содержит нерастворимый в воде носитель -Z'.

В другом варианте выполнения настоящего изобретения фармацевтическая композиция, содержащая по меньшей мере одно пролекарство РТН согласно настоящему изобретению и по меньшей мере один эксципиент, представляет собой сухую композицию.

Такая жидкая фармацевтическая композиция, фармацевтическая композиция в виде суспензии или сухая фармацевтическая композиция содержит по меньшей мере один эксципиент. Эксципиенты, применяемые в парентеральных композициях, могут быть разделены на категории следующим образом, например, буферные средства, модификаторы изотоничности, консерванты, стабилизаторы, антиадсорбционные средства, средства защиты от окисления, загустители/вещества, увеличивающие вязкость, или другие вспомогательные средства. Однако, в некоторых случаях, один эксципиент может иметь двойные или тройные функции. Предпочтительно, по меньшей мере один эксципиент, содержащийся в фармацевтической композиции согласно настоящему изобретению выбирают из группы, состоящей из следующего:

(i) Буферные средства: физиологически допустимые буферы для поддержания значения рН в желаемом диапазоне, такие как фосфат натрия, бикарбонат, сукцинат, гистидин, цитрат и ацетат, сульфат, нитрат, хлорид, пируват; нейтролизаторы кислот, такие как Mg(OH)₂ или ZnCO₃ также могут применяться;

(ii) Модификаторы изотоничности: чтобы минимизировать боль, которая может стать результатом повреждения клеток в ходе разности осмотического давления при инъекции веществ замедленного всасывания; глицерин и хлорид натрия являются примерами; эффективные концентрации могут быть определены осмометрией, применяя допускаемую осмотическую концентрацию раствора, равную 285-315 мОсмоль/кг для сыворотки;

(iii) Консерванты и/или противомикробные средства: мультидозные парентеральные композиции требуют добавления консервантов при достаточной концентрации, чтобы минимизировать риск заражения пациента при инъекции, и соответствующие регулирующие требования должны быть установлены; типичные консерванты включают м-крезол, фенол, метилпарабен, этилпарабен, пропилпарабен, бутилпарабен, хлорбутанол, бензиловый спирт, фенилртути нитрат, тимерозол, сорбиновую кислоту, сорбат калия, бензойную кислоту, хлоркрезол, и бензалкония хлорид;

(iv) Стабилизаторы: Стабилизация достигается за счет усиления стабилизирующих белок сил, дестабилизации денатурированного состояния или прямого связывания эксципиентов с белком; стабилизаторами могут быть аминокислоты, такие как аланин, аргинин, аспарагиновая кислота, глицин, гистидин, лизин, пролин, сахара, такие как глюкоза, сахароза, трегалоза, полиолы, такие как глицерин, маннит, сорбит, соли, такие как фосфат калия, сульфат натрия, хелатирующие средства, такие как EDTA, гексафосфат, лиганды, такие как ионы двухвалентного металла (цинк, кальций и т.д.), другие соли или органические молекулы, такие как фенольные производные; кроме того, могут быть использованы олигомеры или полимеры, такие как циклодекстрины, декстран, дендримеры, ПЭГ или ПВП или протамин или HSA;

(v) Антиадсорбционные средства: В основном ионные или неионные поверхностно-активные вещества или другие белки или растворимые полимеры применяются для покрытия или конкурентным образом адсорбируются на внутренней поверхности контейнера композиции. Например, полоксамер (Pluronic F-68), ПЭГ додециловый простой эфир (Brij 35), полисорбат 20 и 80, декстран, полиэтиленгликоль, ПЭГ-полигистидин, BSA и HSA и желатины; выбранная концентрация и тип эксципиента зависит от эффекта, которого следует избегать, но обычно монослой поверхностно-активного вещества образуется на границе раздела фаз чуть выше значения CMC;

(vi) Средства защиты от окисления: антиоксиданты, такие как аскорбиновая кислота, эктоин, метионин, глутатион, монотиоглицерин, морин, полиэтиленимин (PEI), пропилгаллат и витамин Е; хелатирующие агенты, такие как лимонная кислота, EDTA, гексафосфат и тиогликолевая кислота, также могут применяться;

(vii) Загустители или вещества, увеличивающие вязкость: в случае суспензии замедляют осаждение частиц во флаконе и шприце и используются для облегчения смешивания и ресуспендирования частиц и для облегчения введения суспензии (т.е. с малой силой на шприцевом поршне); подходящими загустителями или усилителями вязкости являются, например, карбомерные загустители, такие как Carbopol 940, Carbopol Ultrez 10, производные целлюлозы, такие как гидроксипропилметилцеллюлоза (гипромеллоза, НРМС) или диэтиламиноэтилцеллюлоза (DEAE или DEAE-С), коллоидный силикат магния (Veegum) или силикат натрия, гидроксиапатитный гель, трикальцийфосфатный гель, ксантаны, каррагинаны, такие как камедь Satia UTC 30, алифатические поли(гидроксикислоты), как например поли(D, L- или L-молочная кислота) (PLA) и поли(гликолевая кислота) (PGA) и их сополимеры (PLGA), терполимеры D, L-лактида, гликолида и капролактона, полоксамеры, гидрофильные поли(оксиэтиленовые) блоки и гидрофобные поли(оксипропиленовые) блоки для создания триблока поли(оксиэтилен)-поли(оксипропилен)-поли(оксиэтилен) (например, Pluronic®), сополимер простого полиэфира и сложного полиэфира, как например сополимер терефталат полиэтиленгликоля/терефталат полибутилена, сахарозы ацетат изобутират (SAIB), декстран или его производные, комбинации декстранов и ПЭГ, полидиметилсилоксан, коллаген, хитозан, поливиниловый спирт (PVA) и производные, полиалкилимиды, поли(акриламид-со-диаллилдиметиламмоний (DADMA)), поливинилпирролидон (ПВП), глюкозаминогликаны (GAG), такие как дерматан сульфат, хондроитин сульфат, кератан сульфат, гепарин, гепаран сульфат, гиалуронан, ABA триблок- или АВ блок-сополимеры, состоящие из гидрофобных А-блоков, как например, полилактид (PLA) или поли(лактид-со-гликолид) (PLGA) и гидрофильные В-блоки, как например полиэтилтенгликоль (ПЭГ) или поливинилпирролидон; такие блок-сополимеры, как и вышеупомянутые полоксамеры, могут проявлять обратимое термическое гелеобразование (состояние жидкости при комнатной температуре для облегчения введения и состояние геля выше температуры перехода золь-гель при температуре тела после инъекции);

(viii) Лиофилизирующий или диффундирующий агент: модифицирует проницаемость соединительной ткани посредством гидролиза компонентов внеклеточного матрикса во интерстициальном пространстве, таких как, но без ограничения к этому, гиалуроновая кислота, полисахарид, обнаруженные в межклеточном пространстве соединительной ткани; лиофилизирующий агент, такой как, но без ограничения к этому, гиалуронидаза, временно снижает вязкость внеклеточной матрицы и способствует диффузии инъецированных лекарственных средств; и

(ix) Другие вспомогательные средства: такие как смачивающие средства, модификаторы вязкости, антибиотики, гиалуронидаза; кислоты и основания, такие как соляная кислота и гидроксид натрия являются вспомогательными средствами, необходимыми для установления значения рН в ходе получения.

Фармацевтическая композиция, содержащая по меньшей мере одно пролекарство РТН, может вводиться пациенту различными способами введения, такими как местное, энтеральное или парентеральное введение, а также методами внешнего применения, инъекции или инфузии, включая внутрисуставные, периартикулярные, внутрикожные, подкожные, внутримышечные, внутривенные, внутрикостные, внутрибрюшинные, интратекальные, внутрикапсульные, внутриглазничные, интравитреальные, интратимпанальные, внутрипузырные, внутрисердечные, транстрахеальные, субкутикулярные, подкапсулярные, субарахноидальные, интраспинальные, внутрижелудочковые, интрастернальные инъекции или инфузии, интраназального, перорального, транспульмонального и трансдермального введения, непосредственной доставки в мозг через имплантированное устройство, позволяющее доставку изобретения или тому подобного в ткань головного мозга или мозговые текучие среды (например, резервуар Оммайя), прямой интрацеребровентрикулярной инъекции или инфузии, инъекции или инфузии в мозг или области, связанные с мозгом, инъекции в супрахориоидальное пространство, ретро-орбитальной инъекции или глазной инсталляции. Предпочтительно фармацевтическая композиция, содержащая по меньшей мере одно пролекарство РТН, вводится посредством подкожной инъекции.

Подкожная инъекция предпочтительно осуществляется с помощью шприца и иглы или с помощью шприца-ручки, даже более предпочтительно с помощью шприца-ручки.

Другим объектом настоящего изобретения является применение РТН пролекарства или его фармацевтически приемлемой соли или фармацевтической композиции, содержащей по меньшей мере одно РТН пролекарство согласно настоящему изобретению в качестве лекарственного средства.

Другим объектом настоящего изобретения является РТН пролекарство или его фармацевтически приемлемая соль или фармацевтическая композиция, содержащая по меньшей мере одно РТН пролекарство согласно настоящему изобретению для применения при лечении заболевания, которое можно лечить с помощью РТН.

Предпочтительно, указанное заболевание выбрано из группы, состоящей из гипопаратиреоидизма, гиперфосфатаземии, остеопороза, заживления трещин, размягчения костей, размягчения костей и остеопороза у пациентов с гипофосфатазией, стероид-индуцированного остеопороза, мужского остеопороза, артрита, остеоартрита, синдрома ломких костей, фиброзной дисплазии, ревматоидного артрита, болезни Паджета, гуморальной гиперкальцемии, связанной со злокачественным новообразованием, остеопении, заболевания пародонта, перелома костей, алопеции, вызванной химиотерапией алопеции и тромбоцитопении. Наиболее предпочтительно указанным заболеванием является гипопаратиреоидизм.

В одном варианте выполнения настоящего изобретения пациентом, подвергающимся способу лечения согласно настоящему изобретению, является млекопитающий пациент, предпочтительно человек.

Другим объектом настоящего изобретения является применение РТН пролекарства или его фармацевтически приемлемой соли или фармацевтической композиции, содержащей по меньшей мере одно РТН пролекарство согласно настоящему изобретению для получения лекарственного средства для лечения заболевания, которое можно лечить с помощью РТН.

Предпочтительно, указанное зпболевание выбрано из группы, состоящей из гипопаратиреоидизма, гиперфосфатаземии, остеопороза, заживления трещин, размягчения костей, размягчения костей и остеопороза у пациентов с гипофосфатазией, стероид-индуцированного остеопороза, мужского остеопороза, артрита, остеоартрита, синдрома ломких костей, фиброзной дисплазии, ревматоидного артрита, болезни Паджета, гуморальной гиперкальцемии, связанной со злокачественным новообразованием, остеопении, заболевания пародонта, перелома костей, алопеции, вызванной химиотерапией алопеции и тромбоцитопении. Наиболее предпочтительно указанным заболеванием является гипопаратиреоидизм.

В одном варианте выполнения настоящего изобретения заболевание, подлежащее лечению с помощью РТН пролекарства или его фармацевтически приемлемой соли или фармацевтической композиции, содержащей по меньшей мере одно РТН пролекарство согласно настоящему изобретению, возникает у млекопитающего пациента, предпочтительно у пациента человека.

Другим объектом настоящего изобретения является способ лечения, контроля, замедления или профилактики у пациента млекопитающего, предпочтительно человека, нуждающегося в лечении одного или более заболеваний, которые можно лечить с помощью РТН, включающий стадию введения указанному пациенту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества РТН пролекарства или его фармацевтически приемлемой соли или фармацевтической композиции, содержащей РТН пролекарство согласно настоящему изобретению.

Предпочтительно, одно или более заболеваний, которые можно лечить с помощью РТН, выбрано из группы, состоящей из гипопаратиреоидизма, гиперфосфатаземии, остеопороза, заживления трещин, размягчения костей, размягчения костей и остеопороза у пациентов с гипофосфатазией, стероид-индуцированного остеопороза, мужского остеопороза, артрита, остеоартрита, синдрома ломких костей, фиброзной дисплазии, ревматоидного артрита, болезни Паджета, гуморальной гиперкальцемии, связанной со злокачественным новообразованием, остеопении, заболевания пародонта, перелома костей, алопеции, вызванной химиотерапией алопеции и тромбоцитопении. Наиболее предпочтительно указанным заболеванием является гипопаратиреоидизм.

Другим объектом настоящего изобретения является способ введения РТН пролекарства, его фармацевтически приемлемой соли или фармацевтической композиции согласно настоящему изобретению, где способ включает стадию введения РТН пролекарства, его фармацевтически приемлемой соли или фармацевтической композиции согласно настоящему изобретению посредством местного, энтерального или парентерального введения и способами внешнего применения, инъекции или инфузии, включая внутрисуставные, периартикулярные, внутрикожные, подкожные, внутримышечные, внутривенные, внутрикостные, внутрибрюшинные, интратекальные, внутрикапсульные, внутриглазничные, интравитреальные, интратимпанальные, внутрипузырные, внутрисердечные, транстрахеальные, субкутикулярные, подкапсулярные, субарахноидальные, интраспинальные, внутрижелудочковые, интрастернальные инъекции или инфузии, интраназального, перорального, транспульмонального и трансдермального введения, непосредственной доставки в мозг через имплантированное устройство, позволяющее доставку изобретения или тому подобного в ткань головного мозга или мозговые жидкости (например, резервуар Оммайя), прямой интрацеребровентрикулярной инъекции или инфузии, инъекции или инфузии в мозг или области, связанные с мозгом, инъекции в супрахориоидальное пространство, ретро-орбитальной инъекции или глазной инсталляции, предпочтительно посредством подкожной инъекции.

В предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения, настоящее изобретение относится к РТН пролекарству или его фармацевтически приемлемой соли или фармацевтической композиции согласно настоящему изобретению, для применения в лечении гипопаратиреоидизм посредством подкожной инъекции.

Примеры

Вещества и Способы

РТН(1-34) с защищенной боковой цепью (SEQ ID NO:51) на TCP смоле, имеющей защитную Вое группу на N-конце и боковой цепью Lys26 с защитной ivDde группой (синтезирован согласно Fmoc-стратегии) получили у CASLO ApS, Kongens Lyngby, Denmark and Peptide Specialty Laboratories GmbH, Heidelberg, Germany.

PTH(1-34) с защищенной боковой цепью на TCP смоле, имеющей защитную Fmoc группу на N-конце (синтезирован согласно Fmoc-стратегии) получили у CASLO ApS, Kongens Lyngby, Denmark and Peptide Specialty Laboratories GmbH, Heidelberg, Germany.

ПЭГ 2×20 кДа - малеимид, Sunbright GL2-400MA и ПЭГ 2×10 кДа - малеимид, Sunbright GL2-200MA приобрели у NOF Europe N.V., Grobbendonk, Belgium. S-Тритил-6-меркаптогексановую кислоту приобрели у Polypeptide, Strasbourg, France. HATU получили у Merck Biosciences GmbH, Schwalbach/Ts, Germany. Fmoc-N-Me-Asp(OBn)-OH получили у Peptide International Inc., Louisville, KY, USA. Fmoc-Aib-OH приобрели у Iris Biotech GmbH, Marktredwitz, Germany. Bee другие химические вещества и реагенты приобрели у Sigma Aldrich GmbH, Taufkirchen, Germany, если другой производитель не указан.

Соединение 11а (примеры 11-15) синтезировали согласно методике, описанной в примере WO 29095479 A2, пример 1.

Шприцы, оборудованные полиэтиленовой фриттой (MultiSynTech GmbH, Witten, Germany) применяли в качестве реакционных сосудов или на стадии промывки пептидных смол.

Общая методика удаления ivDde защитной группы у РТН с защищенной боковой цепью на смоле: смола предварительно разбухла в DMF в течение 30 мин, и растворитель удалили. Группу ivDde удаляли путем инкубации смолы с DMF/гидразин гидратом 4/1 (об./об., 2,5 мл/г смолы) в течение 8×15 мин. Для каждого этапа использовали свежий раствор DMF/гидразин гидрата. Наконец, смолу промыли DMF (10 х), DCM (10 х) и высушили в вакууме.

Общая методика удаления защитной группы Fmoc у защищенного РТН на смоле: смола предварительно набухала в ДМФ в течение 30 мин и растворитель удаляли. Группу Fmoc удаляли путем инкубации смолы с ОМР/пиперидином/DBU 96/2/2 (об./об./об., 2,5 мл/г смолы) в течение 3×10 мин. Для каждой стадии использовали свежий раствор ОМР/пиперидин/DBU. Наконец, смолу промывали DMF (10 х), DCM (10 х) и высушили в вакууме.

Очистка посредством ОФ-ВЭЖХ:

Для препаративной ОФ-ВЭЖХ применяли управляющее устройство Waters 600 и детектор 2487 Dual Absorbance, оборудованные следующими колонками: Waters XBridge™ ВЕН300 Prep C18 5 мкм, 150×10 мм, скорость потока 6 мл/мин, или Waters XBridge™ ВЕН300 Prep С18 10 мкм, 150×30 мм, скорость потока 40 мл/мин. Применяли линейные градиенты системы растворителей А (вода, содержащая 0.1% TFA об./об. или 0.01% конц. HCl об./об.) и системы растворителей В (ацетонитрил, содержащий 0.1% TFA об./об. или 0.01% конц. HCl об./об.). ВЭЖХ-фракции, содержащие продукт, объединяли и лиофилизировали, если иного не указано.

Флэш-хроматография

Очистки посредством флэш-хроматографии осуществляли на системе Isolera One от Biotage АВ, Sweden, применяя картриджи с силикагелем Biotage KP-Sil и н-гептан и этилацетат в качестве элюентов. Продукты обнаруживали при 254 нм.

Ионообменная хроматография:

Ионообменную хроматографию (IEX) осуществили с использованием системы AERTAbasic Amersham Bioscience AEKTAbasic, оборудованной катионообменной колонкой MacroCap SP (Amersham Bioscience/GE Healthcare). В качестве подвижных фаз использовали 17 мМ уксусную кислоту с рН 4,5 (растворитель А) и 17 мМ уксусной кислоты, 1 М NaCl, рН 4,5 (растворитель В).

Эксклюзионная хроматография размеров:

Эксклюзионную хроматографию размеров (SEC) проводили с использованием системы Amersham Bioscience AEKTAbasic, оснащенной обессоливающей колонкой HiPrep 26/10 (Amersham Bioscience/GE Healthcare). 0.1% (об./об.) уксусную кислоту применяли в качестве подвижной фазы.

Для исследований кинетики высвобождения in vitro соединения 31, буфер с рН 7.40 (100 мМ фосфат, 10 мМ L-метионин, 3 мМ EDTA, 0.05% Tween-20) применяли вместо 0.1% АсОН в качестве подвижной фазы.

Аналитические методы

Аналитическую сверхвысокоэффективную LC (UPLC)-MS проводили на системе Waters Acquity, оборудованной колонкой Waters ВЕН300 С18 (размер частиц 2,1×50 мм, размер частиц 1,7 мкм, поток: 0,25 мл/мин, растворитель А: вода, содержащая 0,04% TFA (об./об.), Растворитель В: ацетонитрил, содержащий 0,05% TFA (об./об.)), соединенной с масс-спектрометром LTQ Orbitrap Discovery от Thermo Scientific или соединенной с Waters Microsass ZQ.

Количественные измерения сывороточного кальция (sCa), мочевого кальция и сывороточного фосфора (sP) выполнялись на модульном биохимическом устройстве Roche-Hitachi Р800.

Количественное определение общих концентраций PTH(1-34) в плазме:

Общие концентрации РТН(1-34) в плазме определили посредством количественной оценки сигнатурного пептида, близкого к N-концу (последовательность: IQLMHNLGK), и С-концевого сигнатурного пептида (последовательность: LQDVHNF) после осаждения белка в плазме, с последующим секвенциальным расщеплением с применением эндопротеиназны Lys-C (происхождение: Lysobacter enzymogenes) и эндопротеиназны Glu-C (происхождение: Staphylococcus aureus V8) супернатанта. Затем, анализ посредством обращеннофазовой жидкостной хроматографии и обнаружение посредством масс-спектрометрии (RP-HPLC-MS) осуществили.

Калибровочные стандарты PTH(1-34) конъюгата в пустой плазме готовили следующим образом: Композицию PTH(1-34) конъюгат предварительно разбавили композицией буфера до водных стандартных растворов в интервале от 5 до 300 мкг/мл PTH(1-34) экв. (диапазон концентрации 1) и от 0.5 мкг/мл до 100 мкг/мл PTH(1-34) экв (диапазон концентрации 2), соответственно. Каждый водный стандартный раствор затем разбавили 1:100 оттаявшей гепариновой плазмой с получением диапазонов концентрации соединения от 50 до 3000 нг/мл PTH(1-34) экв (разбавление плазмой крыс в диапазоне концентрации 1) и от 5 до 1000 нг/мл РТН(1-34) экв (разбавление плазмой макак в диапазон концентрации 2).

Эти растворы применяли для получения калибровочной кривой. Калибровочные кривые получили 1/х² для обоих сигнатурных пептидов. Для контроля качества, получили три образца, независимо от калибровочных стандартных растворов, получали соответственно. Концентрации на нижнем конце (3-5-кратная концентрация соответствующей LLOQ), средний диапазон (0,05-0,1-кратная концентрация соответствующей ULOQ) и на верхнем конце (0,5-0,8-кратная концентрация соответствующего ULOQ).

Объемы для получения образца могут быть изменены в зависимости от целевого ответа сигнала после получения образца. Процедура обработки осаждения белка описана здесь для анализа образцов плазмы, которые встречаются у видов обезьян. Осаждение белка проводили путем добавления 200 мкл предварительно охлажденного (5-10°C) метанол до 100 мкл образца плазмы. 180 мкл супернатанта переносили на новый луночный планшет и выпаривали досуха (под мягким потоком азота при 45°C). Для растворения остатка использовали 50 мкл восстанавливающего растворителя (50 мМ Трис 0,5 мМ CaCl₂ буфер, довели до рН 8,0). Протеолитическое расщепление осуществили следующим образом:

20 мкг Lys-C (порядковый номер 125-05061, Wako Chemicals GmbH, Neuss, Germany) растворили в 80 мкл 10 мМ уксусной кислоты. 3 мкл раствора Lys-C добавили в каждый лунку, и образцы инкубировали в течение 15 часов 37°C. Затем 10 мкг Glu-C (порядковый номер V1651, Promega GmbH, Mannheim, Germany) растворили в 25 мкл воды, добавили в каждую лунку, и инкубацию продолжали в течение 1.5 часов при 37°C. После инкубирования образцы подкислили с помощь 2 мкл воды/муравьиной кислоты 4:6 (об./об.) и 10 мкл ввели в UPLC-MS систему.

Анализ LC-MS проводили с использованием Agilent 1290 UPLC, соединенного с масс-спектрометром Agilent 6460 TripleQuad с помощью зонда ESI. Хроматографию осуществляли на аналитической колонке Waters Acquity ВЕН300 C18 (размер частиц 1,7 мкм, размеры применяемой колонки составляли 50×2,1 мм для анализа образцов, происходящих из видов крыс, или 100×2,1 мм для анализа образцов, происходящих из видов обезьян) с предварительным фильтром при скорости потока 0,30 мл/мин (Т=60°C). В качестве подвижной фазы А использовали воду (марка UPLC), содержащую 0,1% муравьиную кислоту (об./об.), и в качестве подвижной фазы В применяли ацетонитрил (марка UPLC) с 0.1% муравьиной кислотой.

Градиентная система для анализа образцов, происходящих из плазмы крысы, включала линейное увеличение от 0,1% В до 40% В в течение 7 минут. Градиентная система для анализа образцов, происходящих из плазмы обезьян, включала линейное увеличение от 8,0% В до 11,0% В в течение 6 минут, с последующим линейным увеличением до 26% В в течение 4 минут. Массовый анализ осуществляли в режиме множественного мониторинга реакции (MRM), контролируя переходы m/z от 437,2 до 131,0 и m/z от 352,3 до 463,0.

Альтенативно, количественное определение общих концентраций PTH(1-34) в плазме осуществили согласно следующей методике:

Общие концентрации PTH(1-34) в плазме определили посредством количественной оценки сигнатурного пептида, близкого к N-концу (последовательность: IQLMHNLGK), и С-концевого сигнатурного пептида (последовательность: LQDVHNF) после осаждения белка в плазме, с последующим секвенциальным расщеплением с применением Эндопротеиназны Lys-C (происхождение: Lysobacter enzymogenes) и Эндопротеиназны Glu-C (происхождение: Staphylococcus aureus V8) супернатанта. Затем, анализ посредством обращеннофазовой жидкостной хроматографии и обнаружение посредством масс-спектрометрии (RP-HPLC-MS) осуществили.

Стандарты для калибровки конъюгата РТН (1-34) в пустой гепаринизированной плазме были получены в диапазоне концентраций от 50 до 3000 нг/мл РТН (1-34) экв (разведение плазмой крысы) и от 1 до 1000 нг/мл РТН (1-34) экв (разведение плазмой обезьяны).

Эти растворы были использованы для генерации калибровочной кривой. Для контроля качества были подготовлены три образца независимо от калибровочных стандартных растворов, соответственно. Концентрации на нижнем конце (3-5-кратная концентрация соответствующего LLOQ), средний диапазон (0,05-0,1-кратная концентрация соответствующего ULOQ) и верхний конец (0,5-0,8-кратная концентрация соответствующего ULOQ).

Объемы для получения образца могут быть изменены в зависимости от целевого ответа сигнала после получения образца. Процедура обработки осаждения белка описана здесь для анализа образцов плазмы, которые встречаются у видов обезьян. Осаждение белка проводили путем добавления 200 мкл предварительно охлажденного (5-10°C) метанол до 50 мкл образца плазмы. 60 мкл супернатанта переносили на новый луночный планшет и выпаривали досуха (под мягким потоком азота при 45°C). Для растворения остатка использовали 60 мкл восстанавливающего растворителя (50 мМ Трис 0,5 мМ CaCl₂ буфер, довели до рН 8,0). Протеолитическое расщепление осуществили следующим образом:

20 мкг Lys-C (порядковый номер 125-05061, Wako Chemicals GmbH, Neuss, Germany) растворили в 80 мкл 10 мМ уксусной кислоты. 3 мкл раствора Lys-C добавили в каждый лунку, и образцы инкубировали в течение 15 часов 37°C. Затем 10 мкг Glu-C (порядковый номер V1651, Promega GmbH, Mannheim, Germany) растворили в 25 мкл воды, добавили в каждую лунку, и инкубацию продолжали в течение 1.5 часов при 37°C. После инкубирования образцы подкислили с помощь 2 мкл воды/муравьиной кислоты 4:6 (об./об.) и 10 мкл ввели в UPLC-MS систему.

Хроматографию осуществляли на аналитической колонке Waters Acquity ВЕН300 С18 (размер частиц 1,7 мкм, размеры применяемой колонки составляли 50×2,1 мм). В качестве подвижной фазы А использовали воду (марка UPLC), содержащую 0,1% муравьиную кислоту (об./об.), и в качестве подвижной фазы В применяли ацетонитрил (марка UPLC) с 0.1% муравьиной кислотой.

Количественное определение концентраций ПЭГ в плазме:

Концентрации общего ПЭГ в плазме определили посредством количественной оценки полимерной части конъюгатов РТН(1-34) после осаждения белка в плазме и ферментативного расщепления супернатанта. Анализ посредством эксклюзионной хроматографии по размеру и обнаружение посредством масс-спектрометрии (SEC-MS) последовали.

Калибровочные стандарты конъюгата PTH(1-34) в пустой гепаринизированной плазме макак были получены в диапазоне концентраций от 50 до 1200 нг/мл эквивалентов ПЭГ.

Эти решения были использованы для генерации квадратичной калибровочной кривой. Калибровочные кривые были увеличены 1/х. Для контроля качества были подготовлены три образца независимо от калибровочных стандартных растворов, соответственно. Концентрации на нижнем конце (2-4-кратная концентрация LLOQ), средний диапазон (0,1-0,2-кратная концентрация ULOQ) и верхний конец (0,8-кратная концентрация ULOQ). Осаждение белка проводили путем добавления 200 мкл предварительно охлажденного (5-10°C) метанола до 100 мкл образца плазмы. 180 мкл супернатанта переносили в новый луночный планшет и выпаривали досуха (под мягким потоком азота при 45°C). Для растворения остатка использовали 50 мкл восстанавливающего растворителя (50 мМ Tris 0.5 мМ CaCl₂ буфер, довели до рН 8.0). Протеолитическое расщепление осуществляли следующим образом: 20 мкг Lys-C (порядковый номер 125-05061, Wako Chemicals GmbH, Neuss, Germany) растворили в 80 мкл 10 мМ уксусной кислоты. 3 мкл раствора Lys-C добавили в каждый лунку, и образцы инкубировали в течение 15 часов 37°C. Затем 10 мкг Glu-C (порядковый номер V1651, Promega GmbH, Mannheim, Germany) растворили в 25 мкл воды, добавили в каждую лунку, и инкубацию продолжали в течение 1.5 часов при 37°C. После инкубирования образцы подкислили с помощь 2 мкл воды/муравьиной кислоты 4:6 (об./об.) и 10 мкл ввели в UPLC-MS систему.

Анализ LC-MS проводили с использованием Agilent 1290 UPLC, соединенного с масс-спектрометром Agilent 6460 TripleQuad с помощью зонда ESI. Получение отдельного ионного предшественника полимера было достигнуто путем применения высоковольтной фрагментация в источнике ионов (200-300 В) на MS-поверхности раздела. Хроматографию осуществляли на аналитической колонке TOSOH TSK Gel SuperAW3000 (размер частиц 4,0 мкм, размеры колонки 150×6.0 мм) при скорости потока 0,50 мл/мин (Т=60°C). В качестве подвижной фазы А использовали воду (марка UPLC), содержащую 0,1% муравьиную кислоту (об./об.), и в качестве подвижной фазы В применяли ацетонитрил (марка UPLC) с 0.1% муравьиной кислотой. Хроматографическая установка для анализа образцов включает изократное элюирование с 50% В в течение 8 минут.

Анализ масс осуществили в режиме мониторинга отдельной реакции (SRM), контролируя переход m/z от 133.1 до 45.1.

Из-за обратимого характера присоединения -L¹- к -D измерения рецепторной активности РТН проводились с использованием стабильных аналогов пролекарств РТН согласно настоящему изобретению, т.е. они были получены с использованием аналогичных структур пролекарствам РТН согласно настоящему изобретению, которые вместо обратимого присоединения -Z к -D имеют стабильное присоединение.

Это было необходимо, потому что пролекарства РТН согласно настоящему изобретению, могло бы высвободить РТН в ходе эксперимента, и указанное высвобождение РТН повлияло бы на результат.

Пример 1

Синтез линкерного реагента 1f

Линкерный реагент 1f синтезировали согласно следующей схеме:

В раствор N-метил-N-Вос-этилендиамина (2 г, 11.48 ммоль) и NaCNBH₃ (819 мг, 12.63 ммоль) в МеОН (20 мл) добавили 2,4,6-триметоксибензальдегид (2.08 г, 10.61 ммоль) частями. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 90 мин, подкислили 3 М HCl (4 мл) и перемешивали еще 15 мин. Реакционную смесь добавили в насыщенный NaHCO₃ (200 мл) и экстрагировали 5 х с помощью DCM. Объединенные органические фазы высушили над Na₂SO₄, и растворители выпарили в вакууме. Полученный N-метил-N-Boc-N'-Tmob-этилендиамин 1а высушили под высоким вакуумом и применяли на следующей стадии без дальнейшей стадии.

Выход: 3.76 г (11.48 ммоль, 89% чистота, 1а: дважды Tmob защищенный продукт = 8:1)

MS: m/z 355.22=[М+Н]⁺, (вычисленная моноизотопная масса = 354.21).

К раствору 1а (2 г, 5.65 ммоль) в CH₂Cl₂ (24 мл) COMU (4.84 г, 11.3 ммоль), N-Fmoc-N-Me-Asp(OBn)-OH (2.08 г, 4.52 ммоль) и 2,4,6-коллидин (2.65 мл, 20.34 ммоль) добавили. Реакционную смесь перемешивали в течение 3 ч при комнатной температуре, разбавили с помощью CH₂Cl₂ (250 мл) и промыли 3 х с помощью 0.1 М H₂SO₄ (100 мл) и 3 х с помощью соляного раствора (100 мл). Водные фазы повторно экстрагировали с помощью CH₂Cl₂ (100 мл). Объединенные органические фазы высушили над Na₂SO₄, отфильтровали, и остаток концентрировали до объема 24 мл. Соединение 1b очистили, применяя флэш-хроматографию.

Выход: 5.31 г (148%, 6.66 ммоль)

MS: m/z 796.38=[М+Н]⁺, (вычисленная моноизотопная масса = 795.37).

К раствору 1b (5.31 г, макс. 4.52 ммоль, обозначается как N-Fmoc-N-Me-Asp(OBn)-OH) в THF (60 мл) DBU (1.8 мл, 3% об./об.) добавили. Раствор перемешивали в течение 12 мин при комнатной температуре, разбавили с помощью DCM (400 мл) и промыли 3 х с помощью 0.1 М H₂SO₄ (150 мл) и 3 х с помощью соляного раствора (150 мл). Водные фазы повторно экстрагировали с помощью DCM (100 мл). Объединенные органические фазы высушили над Na₂SO₄ и отфильтровали. Соединение 1с выделили при выпаривании растворителя и применяли на следующей стадии без дальнейшей очистки.

MS: m/z 574.31=[М+Н]⁺, (вычисленная моноизотопная масса = 573.30).

Соединение 1с (5.31 г, 4.52 ммоль, неочищенное) растворили в ацетонитриле (26 мл) и COMU (3.87 г, 9.04 ммоль), 6-тритилмеркаптокапроновую кислоту (2.12 г, 5.42 ммоль) и 2,4,6-коллидин (2.35 мл, 18.08 ммоль) добавили. Реакционную смесь перемешивали в течение 4 ч при комнатной температуре, разбавили с помощью DCM (400 мл) и промыли 3 х с помощью 0.1 М H₂SO₄ (100 мл) и 3 х с помощью соляного раствора (100 мл). Водные фазы повторно экстрагировали с помощью DCM (100 мл). Объединенные органические фазы высушили над Na₂SO₄, отфильтровали и 1d выделили при выпаривании растворителя. Продукт 1d очистили, применяя флэш-хроматографию.

Выход: 2.63 г (62%, 94% чистота)

MS: m/z 856.41=[М+Н]⁺, (вычисленная моноизотопная масса = 855.41).

К раствору 1d (2.63 г, 2.78 ммоль) в i-PrOH (33 мл) и H₂O (11 мл) добавили LiOH (267 мг, 11.12 ммоль), и реакционную смесь перемешивали в течение 70 мин при комнатной температуре. Смесь разбавили с помощью DCM (200 мл) и промыли 3 х с помощью 0.1 М H₂SO₄ (50 мл) и 3 х с помощью соляного раствора (50 мл). Водные фазы повторно экстрагировали с помощью DCM (100 мл). Объединенные органические фазы высушили над Na₂SO₄, отфильтровали, и соединение 1е выделили при выпаривании растворителя. Соединение 1е очистили, применяя флэш-хроматографию.

Выход: 2.1 г (88%)

MS: m/z 878.4=[M+Na]⁺, (вычисленная моноизотопная масса = 837.40).

К раствору 1е (170 мг, 0.198 ммоль) в безводном DCM (4 мл) добавили DCC (123 мг, 0.59 ммоль) и каталитическое количество DMAP. Через 5 мин N-гидрокси-сукцинимид (114 мг, 0.99 ммоль) добавили, и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь отфильтровали, растворитель удалили в вакууме, и остаток растворили в 90% ацетонитриле плюс 0.1% TFA (3.4 мл). Неочищенную смесь очистили посредством ОФ-ВЭЖХ. Фракции продукта нейтрализовали с помощью 0.5 М рН 7.4 фосфатного буфера и концентрировали. Оставшуюся водную фазу экстрагировали с помощью DCM, и 1f выделили при выпаривании растворителя.

Выход: 154 мг (81%)

MS: m/z 953.4=[М+Н]⁺, (вычисленная моноизотопная масса = 952.43).

Пример 2

Синтез линкерного реагента 2g

4-метокситрифенилметил хлорид (3.00 г, 9.71 ммоль) растворили в DCM (20 мл) и добавили по каплям при перемешивании в раствор этилендиамин 2а (6.5 мл, 97.3 ммоль) в DCM (20 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре, после чего его разбавили диэтиловым простым эфиром (300 мл), промыли 3 х соляным раствором/0.1 М NaOH 30/1 (об./об.) и один раз соляным раствором. Органическую фазу высушили над Na₂SO₄, и соединение 2b выделили при выпаривании растворителя.

Выход: 3.18 г (98%)

Mmt-защищенное промежуточное соединение 2b (3.18 г, 9.56 ммоль) растворили в DCM (30 мл). 6-(Тритилтио)-гексановую кислоту (4.48 г, 11.5 ммоль), РуВОР (5.67 г, 10.9 ммоль) и DIPEA (5.0 мл, 28.6 ммоль) добавили, и смесь перемешивали в течение 30 минут при комнатной температуре. Раствор разбавили простым диэтиловым эфиром (250 мл), промыли 3 х соляным раствором/0.1 М NaOH 30/1 (об./об.) и один раз соляным раствором. Органическую фазу высушили над Na₂SO₄, и растворитель удалили в вакууме. 2с очистили, применяя флэш-хроматографию.

Выход: 5.69 г (85%)

MS: m/z 705.4=[М+Н]⁺, (вычисленная моноизотопная масса = 704.34).

Соединение 2с (3.19 г, 4.53 ммоль) растворили в безводном THF (50 мл), 1 М ВН₃⋅THF раствор в THF (8.5 мл, 8.5 ммоль) добавили, и смесь перемешивали в течение 16 ч при комнатной температуре. Еще 1 М BH₃⋅THF раствор в THF (14 мл, 14.0 ммоль) добавили, и смесь перемешивали в течение еще 16 ч при комнатной температуре. Метанол (8.5 мл) и N,N'-диметил-этилендиамин (3.00 мл, 27.9 ммоль) добавили, и смесь нагревали с обратным холодильников в течение 3 ч. Смеси позволили охладиться, и этилацетат (300 мл) добавили. Раствор промыли 2 х водным Na₂CO₃ и 2 х водным NaHCO₃. Органическую фазу высушили над Na₂SO₄, и растворитель удалили в вакууме с получением соединения 2d.

Выход: 3.22 г (103%)

MS: m/z 691.4=[М+Н]⁺, (вычисленная моноизотопная масса = 690.36).

Ди-трет-бутил дикарбонат (2.32 г, 10.6 ммоль) и DIPEA (3.09 мл, 17.7 ммоль) растворили в DCM (5 мл) и добавили в раствор 2d (2.45 г, 3.55 ммоль) в DCM (5 мл). Смесь перемешивали в течение 30 минут при комнатной температуре. Раствор концентрировали в вакууме и очистили с применением флэш-хроматографии с получением продукта 2е.

Выход: 2.09 г (74%)

MS: m/z 791.4=[М+Н]⁺, (вычисленная моноизотопная масса = 790.42).

Соединение 2е (5.01 г, 6.34 ммоль) растворили в ацетонитриле (80 мл). 0.4 М водную HCl (80 мл), а затем ацетонитрил (20 мл) добавили, и смесь перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре. Значение рН довели до рН 5.5 посредством добавления водного 5 М NaOH. Органический растворитель удалили в вакууме, и оставшийся водный раствор экстрагировали 4 х с помощью DCM. Объединенные органические фазы высушили над Na₂SO₄, и растворитель удалили в вакууме с получением продукта 2f.

Выход: 4.77 г (95%)

MS: m/z 519.3=[М+Н]⁺, (вычисленная моноизотопная масса = 518.30).

Соединение 2f (5.27 г, 6.65 ммоль) растворили в DCM (30 мл) и добавили в раствор п-нитрофенил флорформиата (2.01 г, 9.98 ммоль) в DCM (25 мл). 2,4,6-триметилпиридин (4.38 мл, 33.3 ммоль) добавили, и раствор перемешивали в течение 45 минут при комнатной температуре. Раствор концентрировали в вакууме и очистили с применением флэш-хроматографии с получением продукта 2g.

Выход: 4.04 г (89%)

MS: m/z 706.32=[M+Na]⁺, (вычисленная моноизотопная масса = 683.30).

Пример 3

Синтез перманентного конъюгата S1 PTH(1-34) 3

PTH(1-34) с защищенной боковой цепью на TCP смоле, имеющей защитную Fmoc группу на N-конце подвергли удалению Fmoc защитной группы согласно методике, приведенной в части Вещества и способы. Раствор 6-тритилмеркаптогексановой кислоты (62.5 мг, 160 мкмоль), РуВОР (80.1 мг, 154 мкмоль) и DIPEA (53 мкл, 306 мкмоль) в DMF (2 мл) добавили к 0.21 г (51 мкмоль) смолы. Суспензию встряхивали в течение 80 минут при комнатной температуре. Смолу промыли 10 х с DMF, 10 х с DCM и высушили в вакууме. Отщепление пептида от смолы и удаление защитных групп достигали посредством добавления 10 мл расщепляющего коктейля 100/3/3/2/1 (об./мас./об./об./об.) TFA/DTT/TES/вода/тиоанизол и встряхивания суспензии в течение 1 ч при комнатной температуре. Неочищенное соединение 3 осадили в предварительно охлажденном простом диэтиловом эфире (-18°C). Осадок растворили в ACN/вода и очистили посредством ОФ-ВЭЖХ. Фракции продукта лиофилизировали.

Выход: 36 мг (14%), 3*8 TFA

MS: m/z 1062.31=[M+4H]⁴⁺, (вычисленная моноизотопная масса для [М+4Н]⁴⁺=1062.30).

Пример 4

Синтез перманентного конъюгата K26 PTH(1-34) 4

PTH(1-34) с защищенной боковой цепью на TCP смоле, имеющей защитную Boc группу на N-конце и боковой цепью Lys26 с защитной ivDde группой подвергли удалению ivDde защитной группы согласно методике, приведенной в части Вещества и способы. Раствор 6-тритилмеркаптогексановой кислоты (107 мг, 273 мкмоль), РуВОР (141 мг, 273 мкмоль) и DIPEA (95 мкл, 545 мкмоль) в DMF (3 мл) добавили к 0.80 г (90.9 мкмоль) смолы. Суспензию встряхивали в течение 1 ч при комнатной температуре. Смолу промыли 10 х с DMF, 10 х с DCM и высушили в вакууме. Отщепление пептида от смолы и удаление защитных групп достигали посредством добавления 6 мл расщепляющего коктейля 100/3/3/2/1 (об./мас./об./об./об.) TFA/DTT/TES/вода/тиоанизол и встряхивания суспензии в течение 1 ч при комнатной температуре. Неочищенное соединение 4 осадили в предварительно охлажденном простом диэтиловом эфире (-18°C). Осадок растворили в ACN/вода и очистили посредством ОФ-ВЭЖХ. Фракции продукта лиофилизировали.

Выход: 40 мг (8%), 4*8 TFA

MS: m/z 1062.30=[М+4Н]⁴⁺, (вычисленная моноизотопная масса для [М+4Н]⁴⁺=1062.30).

Пример 5

Синтез временного конъюгата S1 PTH(1-34)

PTH(1-34) с защищенной боковой цепью на TCP смоле, имеющей защитную Fmoc группу на N-конце подвергли удалению Fmoc защитной группы согласно методике, приведенной в части Вещества и способы. Раствор Fmoc-Aib-OH (79 мг, 244 мкмоль), РуВОР (127 мг, 244 мкмоль) и DIPEA (64 мкл, 365 мкмоль) в DMF (1.5 мл) добавили к 0.60 г (61 мкмоль) смолы. Суспензию встряхивали в течение 16 ч при комнатной температуре. Смолу промыли 10 х с DMF и подвергли удалению Fmoc защитной группы, как описано выше. Раствор соединения 2g (167 мг, 244 мкмоль) и DIPEA (64 мкл, 365 мкмоль) в DMF (1.5 мл) добавили к смоле. Суспензию встряхивали в течение 24 ч при комнатной температуре. Смолу промыли 10 х с DMF, 10 х с DCM и высушили в вакууме. Отщепление пептида от смолы и удаление защитных групп достигали посредством добавления 7 мл расщепляющего коктейля 100/3/3/2/1 (об./мас./об./об./об.) TFA/DTT/TES/вода/тиоанизол и встряхивания суспензии в течение 1 ч при комнатной температуре. Неочищенное соединение 5 осадили в предварительно охлажденном простом диэтиловом эфире (-18°C). Осадок растворили в ACN/вода и очистили посредством ОФ-ВЭЖХ. Фракции продукта лиофилизировали.

Выход: 78 мг (24%), 5*9 TFA

MS: m/z 1101.59=[М+4Н]⁴⁺, (вычисленная моноизотопная масса для [М+4Н]⁴⁺=1101.57).

Пример 6

Синтез временного конъюгата S1 PTH(1-34) 6

РТН(1-34) с защищенной боковой цепью на TCP смоле, имеющей защитную Fmoc группу на N-конце подвергли удалению Fmoc защитной группы согласно методике, приведенной в части Вещества и способы. Раствор Fmoc-Ala-OH (32 мг, 102 мкмоль), РуВОР (53 мг, 102 мкмоль) и DIPEA (27 мкл, 152 мкмоль) в DMF (3 мл) добавили к 0.25 г (25 мкмоль) смолы. Суспензию встряхивали в течение 1 ч при комнатной температуре. Смолу промыли 10 х с DMF, 10 х с DCM и высушили в вакууме. Удаление защитной группы Fmoc осуществили, как описано выше. Раствор соединения 2g (69 мг, 102 мкмоль) и DIPEA (27 мкл, 152 мкмоль) в DMF (3 мл) добавили к смоле. Суспензию встряхивали в течение 1.5 ч при комнатной температуре. Смолу промыли 10 х с DMF, 10 х с DCM и высушили в вакууме. Отщепление пептида от смолы и удаление защитных групп достигали посредством добавления 3 мл расщепляющего коктейля 100/3/3/2/1 (об./мас./об./об./об.) TFA/DTT/TES/вода/тиоанизол и встряхивания суспензии в течение 1 ч при комнатной температуре. Неочищенное соединение 6 осадили в предварительно охлажденном простом диэтиловом эфире (-18°C). Осадок растворили в ACN/вода и очистили посредством ОФ-ВЭЖХ. Фракции продукта лиофилизировали.

Выход: 25 мг (18%), 6*9 TFA

MS: m/z 1098.75=[М+4Н]⁴⁺, (вычисленная моноизотопная масса для [М+4Н]⁴⁺=1098.07).

Пример 7

Синтез временного конъюгата S1 PTH(1-34) 7

PTH(1-34) с защищенной боковой цепью на TCP смоле, имеющей защитную Fmoc группу на N-конце подвергли удалению Fmoc защитной группы согласно методике, приведенной в части Вещества и способы. Раствор Fmoc-Ser(Trt)-OH (117 мг, 205 мкмоль), РуВОР (108 мг, 207 мкмоль) и DIPEA (53 мкл, 305 мкмоль) в DMF (2 мл) добавили к 0.50 г (51 мкмоль) смолы. Суспензию встряхивали в течение 1 ч при комнатной температуре. Смолу промыли 10 х с DMF, 10 х с DCM и высушили в вакууме. Удаление защитной группы Fmoc осуществили, как описано выше. Раствор 2g (144 мг, 211 мкмоль) и DIPEA (53 мкл, 305 мкмоль) в DMF (1.8 мл) добавили к смоле. Суспензию встряхивали в течение 7 ч при комнатной температуре. Смолу промыли 10 х с DMF, 10 х с DCM и высушили в вакууме. Отщепление пептида от смолы и удаление защитных групп достигали посредством добавления 6 мл расщепляющего коктейля 100/3/3/2/1 (об./мас./об./об./об.) TFA/DTT/TES/вода/тиоанизол и встряхивания суспензии в течение 1 ч при комнатной температуре. Неочищенное соединение 7 осадили в предварительно охлажденном простом диэтиловом эфире (-18°C). Осадок растворили в ACN/вода и очистили посредством ОФ-ВЭЖХ. Фракции продукта лиофилизировали.

Выход: 54 мг (20%), 7*9 TFA

MS: m/z 1102.08=[M+4H]⁴⁺, (вычисленная моноизотопная масса для [М+4Н]⁴⁺=1102.07).

Пример 8

Синтез временного конъюгата S1 РТН(1-34) 8

РТН(1-34) с защищенной боковой цепью на TCP смоле, имеющей защитную Fmoc группу на N-конце подвергли удалению Fmoc защитной группы согласно методике, приведенной в части Вещества и способы. Раствор Fmoc-Leu-OH (36 мг, 102 мкмоль), РуВОР (53 мг, 102 мкмоль) и DIPEA (27 мкл, 152 мкмоль) в DMF (3 мл) добавили к 0.25 г (25 мкмоль) смолы. Суспензию встряхивали в течение 1 ч при комнатной температуре. Смолу промыли 10 х с DMF, 10 х с DCM и высушили в вакууме. Удаление защитной группы Fmoc осуществили, как описано выше. Раствор соединения 2g (69 мг, 102 мкмоль) и DIPEA (27 мкл, 152 мкмоль) в DMF (3 мл) добавили к смоле. Суспензию встряхивали в течение 1.5 ч при комнатной температуре. Смолу промыли 10 х с DMF, 10 х с DCM и высушили в вакууме. Отщепление пептида от смолы и удаление защитных групп достигали посредством добавления 3 мл расщепляющего коктейля 100/3/3/2/1 (об./мас./об./об./об.) TFA/DTT/TES/вода/тиоанизол и встряхивания суспензии в течение 1 ч при комнатной температуре. Неочищенное соединение 8 осадили в предварительно охлажденном простом диэтиловом эфире (-18°C). Осадок растворили в ACN/вода и очистили посредством ОФ-ВЭЖХ. Фракции продукта лиофилизировали.

Выход: 31 мг (22%), 8*9 TFA

MS: m/z 1109.32=[M+4H]⁴⁺, (вычисленная моноизотопная масса для [М+4Н]⁴⁺=1108.58).

Пример 9

Синтез временного конъюгата S1 PTH(1-34) 9

PTH(1-34) с защищенной боковой цепью на TCP смоле, имеющей защитную Fmoc группу на N-конце подвергли удалению Fmoc защитной группы согласно методике, приведенной в части Вещества и способы. Раствор соединения 1е (182 мг, 213 мкмоль), РуВОР (111 мг, 213 мкмоль) и DIPEA (93 мкл, 532 мкмоль) в DMF (5 мл) добавили к 2.00 г (107 мкмоль) смолы. Суспензию встряхивали в течение 16 ч при комнатной температуре. Смолу промыли 10 х с DMF, 10 х с DCM и высушили в вакууме. Отщепление пептида от смолы и удаление защитных групп достигали посредством добавления 20 мл расщепляющего коктейля 100/3/3/2/1 (об./мас./об./об./об.) TFA/DTT/TES/вода/тиоанизол и встряхивания суспензии в течение 1 ч при комнатной температуре. Неочищенное соединение 9 осадили в предварительно охлажденном простом диэтиловом эфире (-18°C). Осадок растворили в ACN/вода и очистили посредством ОФ-ВЭЖХ. Фракции продукта лиофилизировали.

Выход: 47 мг (8%), 9*9 TFA

MS: m/z 1108.58=[M+4H]⁴⁺, (вычисленная моноизотопная масса для [М+4Н]⁴⁺=1108.57).

Пример 10

Синтез временного конъюгата K26 PTH(1-34) 10

PTH(1-34) с защищенной боковой цепью на TCP смоле, имеющей защитную Boc группу на N-конце и боковой цепью Lys26 с защитной ivDde группой подвергли удалению ivDde защитной группы согласно методике, приведенной в части Вещества и способы. Раствор соединения If (867 мг, 910 мкмоль) и DIPEA (0.24 мл, 1.36 ммоль) в DMF (5 мл) добавили к 1.91 г (227 мкмоль) смолы. Суспензию встряхивали в течение 1 ч при комнатной температуре. Смолу промыли 10 х с DMF, 10 х с DCM и высушили в вакууме. Отщепление пептида от смолы и удаление защитных групп достигали посредством добавления 20 мл расщепляющего коктейля 100/3/3/2/1 (об./мас./об./об./об.) TFA/DTT/TES/вода/тиоанизол и встряхивания суспензии в течение 1 ч при комнатной температуре. Неочищенное соединение 10 осадили в предварительно охлажденном простом диэтиловом эфире (-18°C). Осадок растворили в ACN/вода и очистили посредством ОФ-ВЭЖХ. Фракции продукта лиофилизировали.

Выход: 92 мг (7%), 10*9 TFA

MS: m/z 1108.58=[M+4H]⁴⁺, (вычисленная моноизотопная масса для [М+4Н]⁴⁺=1108.57).

Пример 11

Синтез низкомолекулярного временного конъюгата S1 ПЭГ 11b

0.15 мл 0.5 М NaH₂PO₄ буфера (рН 7.4) добавили к 0.5 мл 20 мг/мл раствора тиола 5 (10 мг, 1.84 мкмоль) в 1/1 (об./об.) ацетонитрила/воды, содержащей 0.1% TFA (об./об.). Раствор инкубировали при комнатной температуре в течение 10 минут, после чего 238 мкл 10 мг/мл раствора малеимида 11а (2.4 мг, 2.21 мкмоль) в 1/1 (об./об.) ацетонитрил/вода, содержащая 0.1% TFA (об./об.), добавили. Раствор инкубировали в течение 20 минут при комнатной температуре. 10 мкл TFA добавили, и смесь очистили посредством ОФ-ВЭЖХ. Фракции продукта лиофилизировали с получением соединения 11b.

Выход: 3.1 мг (26%), 11b*9 TFA

MS: m/z 1097.00=[M+4H]⁴⁺, (вычисленная моноизотопная масса для [М+5Н]⁵⁺=1096.99).

Пример 12

Синтез низкомолекулярного временного конъюгата S1 ПЭГ 12

Конъюгат 12 синтезировали, как описано для 11b посредством применения тиола 6 (10 мг, 1.85 мкмоль) и малеимида 11а (2.4 мг, 2.21 мкмоль).

Выход: 10 мг (83%), 12*9 TFA

MS: m/z 1094.20=[М+4Н]⁴⁺, (вычисленная моноизотопная масса для [М+4Н]⁴⁺=1094.19).

Пример 13

Синтез низкомолекулярного временного конъюгата S1 ПЭГ 13

Конъюгат 13 синтезировали, как описано для 11b посредством применения тиола 7 (10 мг, 1.84 мкмоль) и малеимида 11а (2.4 мг, 2.21 мкмоль).

Выход: 8 мг (67%), 13*9 TFA

MS: m/z 1097.40=[М+5Н]⁵⁺, (вычисленная моноизотопная масса для [М+5Н]⁵⁺=1097.39).

Пример 14

Синтез низкомолекулярного временного конъюгата S1 ПЭГ 14

Конъюгат 14 синтезировали, как описано для 11b посредством применения тиола 8 (10 мг, 1.83 мкмоль) и малеимида 11а (2.4 мг, 2.21 мкмоль).

Выход: 4 мг (33%), 14*9 TFA

MS: m/z 1378.01=[М+4Н]⁴⁺, (вычисленная моноизотопная масса для [М+4Н]⁴⁺=1378.00).

Пример 15

Синтез низкомолекулярного временного коньюгата K26 ПЭГ 15

Конъюгат 15 синтезировали, как описано для 11b посредством применения тиола 10 (5.2 мг, 0.95 мкмоль) и малеимида 11а (1.23 мг, 1.14 мкмоль).

Выход: 2.1 мг (33%), 15*9 TFA

MS: m/z 1102.60=[M+5H]⁵⁺, (вычисленная моноизотопная масса для [М+5Н]⁵⁺=1102.59).

Пример 16

Синтез перманентного конъюгата 2×20 кДа S1 ПЭГ 16

772 мкл раствора, содержащего тиол 3 (19.4 мг/мл, 15 мг, 3.54 мкмоль) и 2.5 мг/мл Boc-L-Met в 1/1 (об./об.) ацетонитрил/вода, содержащая 0.1% TFA (об./об.), добавили к 1.87 мл раствора, содержащего ПЭГ 2×20 кДа - малеимид (Sunbright GL2-400MA, 187 мг, 4.32 мкмоль) и 2.5 мг/мл Boc-L-Met в воде, содержащей 0.1% TFA (об./об.). 0.5 М NaH₂PO₄ буфера (0.66 мл, рН 7.0) добавили, и смесь перемешивали в течение 30 минут при комнатной температуре. 10 мкл 270 мг/мл раствора 2-меркаптоэтанола в воде добавили. Смесь перемешивали в течение 5 минут при комнатной температуре и 0.33 мл 1 М HCl добавили. Конъюгат 16 очистили посредством IEX с последующей ОФ-ВЭЖХ, применяя линейный градиент системы растворителей А (вода, содержащая 0.1% АсОН об./об.) и системы растворителей В (ацетонитрил, содержащий 0.1% АсОН об./об.). Фракции, содержащие раствор, лиофилизировали.

Выход: 97 мг (2.01 мкмоль, 57%) конъюгата 16*8 АсОН

Пример 17

Синтез перманентного конъюгата 2×20 кДа K26 ПЭГ 17

Конъюгат 17 получили как описано для 16 посредством реакции тиола 4 (15 мг, 3.53 мкмоль) и ПЭГ 2×20 кДа - малеимида (Sunbright GL2-400MA, 187 мг, 4.32 мкмоль).

Выход: 80 мг (1.79 мкмоль, 51%) конъюгата 17*8 АсОН

Пример 18

Синтез временного конъюгата 2×20 кДа S1 ПЭГ 18

Конъюгат 18 получили как описано для 16 посредством реакции тиола 5 (37 мг, 8.40 мкмоль) и ПЭГ 2×20 кДа - малеимида (Sunbright GL2-400MA, 445 мг, 9.24 мкмоль). Реакцию погасили посредством добавления 50 мкл TFA без добавления 2-меркаптоэтанола. Конъюгат 18 очистили посредством IEX с последующей SEC для обессоливания. Фракции, содержащие раствор, лиофилизировали.

Выход: 161 мг (3.33 мкмоль, 40%) конъюгата 18*9 АсОН

Пример 19

Синтез временного конъюгата 2×20 кДа S1 ПЭГ 19

Конъюгат 19 получили как описано для 16 посредством реакции тиола 7 (27 мг, 6.14 мкмоль) и ПЭГ 2×20 кДа - малеимида (Sunbright GL2-400MA, 325 мг, 7.50 мкмоль).

Выход: 249 мг (5.16 мкмоль, 84%) конъюгата 19*9 АсОН

Пример 20

Синтез временного конъюгата 2×20 кДа S1 ПЭГ 20

Конъюгат 20 получили как описано для 16 посредством реакции тиола 9 (38 мг, 8.59 мкмоль) и ПЭГ 2×20 кДа - малеимида (Sunbright GL2-400MA, 455 мг, 9.45 мкмоль). Реакцию погасили посредством добавления 50 мкл TFA без добавления 2-меркаптоэтанола. Конъюгат 20 очистили посредством IEX с последующей SEC для обессоливания. Фракции, содержащие раствор, лиофилизировали.

Выход: 194 мг (4.01 мкмоль, 47%) конъюгата 20*9 АсОН

Пример 21

Синтез временного конъюгата 2×20 кДа K26 ПЭГ 21

Конъюгат 21 получили как описано для 16 посредством реакции тиола 10 (34 мг, 7.58 мкмоль) и ПЭГ 2×20 кДа - малеимида (Sunbright GL2-400MA, 401 мг, 9.26 мкмоль).

Выход: 256 мг (5.30 мкмоль, 70%) конъюгат 21*9 АсОН

Пример 22

Кинетика высвобождения in vitro временного низкомолекулярного конъюгата ПЭГ

Конъюгаты 11b, 12, 13, 14, и 15 растворили в рН 7.4 фосфатном буфере (60 мМ NaH₂PO₄, 3 мМ EDTA, 0.01% Tween-20, довели до рН 7.4 посредством NaOH), содержащем 0.05 мг/мл пентафторфенола в качестве внутреннего стандарта при концентрации около 1 мг конъюгата/мл. Растворы отфильтровали стерильно и инкубировали при 37°С. Взяли аликвоты во временных точках и проанализировали посредством ОФ-ВЭЖХ и ESI-MS. Фракцию высвобожденного РТН в момент времени вычислили по соотношению площадей УФ пиков высвобожденного РТН и ПЭГ конъюгата. Построили график % высвобожденного РТН относительно времени инкубации. Программное обеспечение для подбора кривой применяли для вычисления соответствующих периодов полувысвобождения.

Результаты:

Для конъюгата 11b период полувысвобождения 3.2 дня получили.

Для конъюгата 12 период полувысвобождения 8.7 дня получили.

Для конъюгата 13 период полувысвобождения 10.8 дня получили.

Для конъюгата 14 период полувысвобождения 25.3 дня получили.

Для конъюгата 15 период полувысвобождения 6.9 дня получили.

Пример 23

Кинетика высвобождения in vitro временных 2×20 кДа ПЭГ конъюгатов

18, 19, 20, b 21 растворили в рН 7.4 фосфатном буфере (60 мМ NaH₂PO₄, 3 мМ EDTA, 0.01% Tween-20, довели до рН 7.4 посредством NaOH), содержащем 0.08 мг/мл пентафторфенола в качестве внутреннего стандарта при концентрации около 5 мг конъюгата/мл. Растворы отфильтровали стерильно и инкубировали при 37°С. Взяли аликвоты во временных точках и проанализировали посредством ОФ-ВЭЖХ. Фракцию высвобожденного РТН в момент времени вычислили по соотношению площадей УФ пиков высвобожденного РТН и ПЭГ конъюгата. Построили график % высвобожденного РТН относительно времени инкубации. Программное обеспечение для подбора кривой применяли для вычисления соответствующих периодов полувысвобождения.

Результаты:

Для конъюгата 18 период полувысвобождения 2.8 дня получили.

Для конъюгата 19 период полувысвобождения 13.4 дня получили.

Для конъюгата 20 период полувысвобождения 1.3 дня получили.

Для конъюгата 21 период полувысвобождения 7.1 дня получили.

Пример 24

РТН рецепторная активность перманентных 2×20 кДа ПЭГ конъюгатов 16 и 17 в анализе на основе клеток

Остаточную активность РТН перманентно ПЭГилированных конъюгатов 16 и 17 количественно определили посредством измерения продукции сАМР из HEK293 клеток, сверхэкспрессирующих рецептор PTH/PTHrP1 (Hohenstein A, Hebell М, Zikry Н, El Ghazaly М, Mueller F, Rohde, J. Development and validation of a novel cell-based assay for potency determination of human parathyroid hormone (PTH), Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis September 2014, 98: 345-350). PTH(1-34) из NIBSC (National Institute for Biological Standards and Control, UK) применяли в качестве ссылочного стандарта.

Результаты:

Для конъюгата 16 активность рецептора 0.12% была обнаружена относительно ссылочного PTH(1-34).

Для конъюгата 17 активность рецептора 0.11% была обнаружена относительно ссылочного PTH(1-34).

Результаты свидетельствуют о эффективном снижении активности рецептора в перманентных конъюгатах 2×20 кДа ПЭГ 16 и 17. Можно сделать вывод, что аналогичные конъюгаты с временно связанными с с Ser1 или Lys26 РТН (например, 18 и 21) являются подходящими РТН пролекарствами, обеспечивающими низкую остаточную активность рецептора. Прямой анализ временных конъюгатов в клеточном анализе невозможен из-за расщепления линкера в условиях анализа. Высвобожденный РТН повлияет на результат анализа.

Пример 25

Фармакокинетическое исследование перманентных конъюгатов 2×20 кДа ПЭГ 16 и 17 на крысах

Самцы крыс породы Вистар (6 недель, 230-260 г) получали либо одну внутривенное (2 группы, n=3 животных в каждой), либо одну подкожное (2 группы, n=3 животных в каждой) введение 16 или 17 в дозах 29 мкг/крыса PTHeq РТН_экв и 31 мкг/крыса РТН_экв, соответственно. Образцы крови собирали до 168 ч после введения дозы, и получали плазму. Концентрации в плазме PTH(1-34) определили посредством количественной оценки N-концевого сигнатурного пептида (последовательность: IQLMHNLGK) и С-концевого сигнатурного пептида (последовательность: LQDVHNF) после расщепления LysC и GluC, как описано в части Вещества и Способы.

Результаты: Введение доз хорошо переносились без видимых признаков дискомфорта во время введения и после введения. В течение всего исследования не наблюдалось никаких побочных реакций от дозы. После внутривенного введения 16 и 17 t_max для общего РТН (1-34) наблюдалась в момент времени 15 мин (наиболее ранний анализируемый момент времени), с последующим медленным спадом содержания общего РТН (1-34) с периодом полувыведения около 13 ч и 11 ч, соответственно. После подкожной инъекции концентрация общего РТН (1-34) достигла максимума при t_max 24 часа для 16 и 17, с момент медленным спадом содержания общего РТН (1-34) с периодом полувыведения около 1,5 дня для обоих конъюгатов. Биодоступность составляла около 40% и 60% соответственно. Аналогичные кривые PK были получены для N- и С-концевого сигнатурного пептида до 168 ч после введения дозы, что указывает на наличие интактного РТН (1-34) в конъюгате.

Благоприятные длинные PK и стабильность РТН в конъюгатах указывают на пригодность перманентных модельных соединений 2×20 кДа ПЭГ, так как происходит медленное высвобождение пролекарств РТН после подкожной инъекции. Можно сделать вывод, что аналогичные конъюгаты с временно связанным с Ser1 (например, 18) или Lys26 РТН являются подходящими пролекарствами РТН, обеспечивающими длительные уровни высвобождаемого биоактивного РТН.

Пример 26

Фармакокинетическое исследование временного конъюгата 2×20 кДа S1 ПЭГ 19 на яванских макаках

Самцы ранее не подверженных экспериментам яванских макак (2-4 года, 3.7-5.4 кг) получали однократное подкожное введение (n=3 животного) конъюгата 19 при дозе 70 мкг/кг РТН_экв. Образцы крови собирали до 504 ч после введения дозы, и получали плазму. Общие концентрации PTH(1-34) в плазме определили посредством количественной оценки N-концевого сигнатурного пептида (последовательность: IQLMHNLGK) и С-концевого сигнатурного пептида (последовательность: LQDVHNF) после LysC и GluC расщепления, как описано в части Вещества и Способы. Концентрации ПЭГ определяли с применением способа, описанного в части Вещества и Способы.

Результаты: Введение доз хорошо переносилось без видимых признаков дискомфорта во время введения. У одного животного обнаружили видимые признаки дискомфорта через 72 ч после введения дозы, но произошло восстановление через несколько дней. В течение всего исследования не наблюдалось никаких побочных реакций от введения дозы. Общая концентрация РТН (1-34) достигала максимума при t_max 24 ч, с последующим медленным спадом общего содержания РТН (1-34) с периодом полувыведения около 2,5 дня для N-концевого сигнатурного пептида и 0,9 дня для С-концевого сигнатурного пептида. Концентрация ПЭГ достигла максимума при t_max 24 ч, с последующим медленным спадом концентрации ПЭГ с периодом полувыведения 3.5 дня.

Можно сделать заключение, что конъюгат 19 является подходящим пролекарством для пролонгированной доставки РТН.

Пример 27

Фармакокинетическое исследование временного конъюгата 2×20 кДа S1 ПЭГ 18 на яванских макаках

Ранее не подверженные экспериментам яванские макаки (2-3 года, 2.5-4 кг) получали ежедневное подкожное введение (n=2 животных - 1 самец / 1 самка) конъюгата 18 при уровнях дозы 0.2, 0.5, и 1 мкг/кг РТНЭКВ в течение 28 дней. Образцы крови собирали в течение до 28 дней (на дни 1, 13 и 27 образцы собрали перед введением дозы, через 2 ч, 4 ч, 8 ч, 12 ч, и 24 ч после введения дозы) и получили плазму. Концентрации в плазме PTH(1-34) определили посредством количественной оценки N-концевого сигнатурного пептида (последовательность: IQLMHNLGK) и С-концевого сигнатурного пептида (последовательность: LQDVHNF) после LysC и GluC расщепления, как описано в части Вещества и Способы.

Результаты: Введение всех доз было выполнено без происшествий. В течение всего исследования не наблюдалось никаких побочных реакций от введения дозы. Линейность дозы наблюдалась в трех группах. С 1-го дня наблюдали стэкинг-эффект доз по сравнению с 13 днем и 27 днем. Общие концентрации РТН (1-34) определяли посредством N-концевого сигнатурного пептида (последовательность: IQLMHNLGK) в стабильном состоянии (в течение дня 27).

Низкое соотношение пика и минимума общего PTH(1-34) для групп всех доз ниже 3 наблюдали после ежедневного подкожного введения в стабильном состоянии у яванских макак. Поскольку концентрации свободных пептидов в стабильном состоянии коррелируют с общей концентрацией РТН (1-34), соотношение пика и минимума для свободного пептида ниже 4 в яванских макаках.

Пример 28

Фармакодинамические действия на тиреопаратиреоидэктомированных (ТРТх) крысах в ходе 28-дневного исследования с ежедневными подкожными инъекциями конъюгата 18 или PTH(1-84)

Это исследование было проведено для того, чтобы проверить и сравнить влияние ежедневной подкожной инъекции соединения 18 и РТН (1-84), текущего стандарта безопасности, на животной модели заболевания, релевантной для исследования лечения гипопаратиреоидизма (HP). Крысы, подвергшиеся тиропаратиреоидэктомии (ТРТх) тупой диссекцией, не могут вырабатывать гормон паращитовидной железы, РТН, главный регулятор гомеостаза кальция. Следовательно, у крыс ТРТх развивается гипокальциемия и гиперфосфатаземия, характерные для HP. 17-недельным самкам крыс SD ТРТх (n=9/группа) вводили подкожно в течение 28 дней дозу соединения 18 (5 мкг РТН экв/кг/день, 1,2 нмоль/кг/день, в 10 мМ янтарной кислоте, 46 г/л маннита, рН 4,0), РТН (1-84) (70 мкг РТН экв/кг/день, 7,3 нмоль/кг/день, в 10 мМ цитрате, маннит 39,0 г/л, рН 5,0) или среду. Дополнительно, одна группа ложнооперированных крыс (n=9) представляющих собой нормальнофизиологический фоновый контроль, также получала среду. Уровень сывороточного кальция (sCa) и фосфора (sP) у животных измерялся до и после в введения дозы в день 1,6, 12 и 27. Кроме того, измерялись маркеры ремоделирования кости (P1NP и СТх), и качество кости оценивалось посредством ex vivo pQCT.

Результаты: средний sCa у крыс ТРТх, предварительно дозированных на день 1, составлял 8,3 мг/дл по сравнению с 10,9 мг/дл у контрольных ложнооперированных крыс. Значения sP составляли 8,7 мг/дл и 5,9 мг/дл, соответственно. Соединение 18 вводилось ежедневно при 1,2 нмоль/кг, повышая sCa до почти нормальных уровней при снижении sP в течение нескольких дней введения. На день 12 (день 5 в стабильном состоянии с соединением 18) sCa стабилизировался на нормальном уровне (10,7 мг/дл) у этой группы животных (соотношение соединение 18/ложнооперированный контроль = 1,01) в отличие от гипокальцемического уровня (8,1 мг/дл), измеренного у крыс, получающих лечение РТН (1-84) (соотношение РТН (1-84)/ложнооперированный контроль = 0,76). Кроме того, 24-Насовое выведение Са в моче на день 12 было сопоставимо между животными, обработанными соединением 18, и ложнооперированным контролем. Минеральная плотность костной массы (BMD) и содержание минералов в костях (ВМС) были увеличены в ТРТх контролях, как наблюдается у пациентов с HP. Обработка с соединением 18 уменьшала BMD, ВМС и область параллельно с увеличением СТх по сравнению с ложнооперированными и обработанными средой ТРТх животными. Значительное увеличение трабекулярной BMD наблюдалось у животных, которым вводили PTH(1-84) по сравнению с обеими контрольными группами.

Был сделан вывод о том, что соединение 18 при дозе, даже менее 20% от молярного эквивалента протестированной здесь дозы PTH(1-84), способно поддерживать sCa на уровне, сравнимом с уровнем sCa у ложнооперированных контрольных животных (здесь представляет собой нормальный уровень) в течение 24 часов. Напротив, PTH(1-84) в дозе 7,3 нмоль/кг/день не приводило к увеличению sCa по сравнению с уровнями крыс ТРТх, которым инъецировали среду. Тем не менее, минимальное снижение sP наблюдалось у животных, которым вводили дозы РТН (1-84), подтверждая воздействие и реакцию на PTH(1-84) у крыс. После 28-дневного лечения соединением 18 трабекулярная и кортикальная BMD в позвонках находились в нормальном диапазоне, тогда как анаболический эффект наблюдался для PTH(1-84) в отношении трабекулярной и кортикальной костей в позвонках.

Пример 29

Синтез линкерного реагента 29h

В раствор соединения 29а (250 г, 294 ммоль, 1 экв) в дихлорметане (1 л) добавили раствор Na₂CO₃ (187 г, 1.8 моль, 6 экв) в Н₂О (1 л). Реакционный раствор перемешивали при 15-30°С в течение 0.5 часа. TLC (DCM/MeOH=10:1, R_f=0.5) показала, что исходное вещество было полностью израсходовано. Органический слой отделили, и водную фазу экстрагировали дихлорметаном (1 л). Органические слои объединили и промыли соляным раствором (800 мл), затем высушили с помощью безводного Na₂SO₄, отфильтровали и концентрировали в вакууме с получением соединения 29b в виде масла желтого цвета.

Выход: 200 г, 272 ммоль, 93%

Четыре реакции осуществляли параллельно.

В раствор соединения 29b (50 г, 68.1 ммоль, 1 экв) и Fmoc-5-аминовалерьяновой кислоты (25.4 г, 74.9 ммоль, 1.1 экв), DIPEA (61.6 г, 477 ммоль, 83.3 мл, 7 экв) в ацетонитриле (500 мл) добавили по каплям ТЗР 50% [EtOAc] (130 г, 204 ммоль, 122 мл, 3 экв) при 15-30°С в течение 1 часа. После добавления, реакционную смесь перемешивали при 15-30°С в течение 18 часов. TLC (Петролейный эфир/Этилацетат=1:1, R_f=0.5) показала, что исходное вещество было полностью израсходовано. Четыре реакции объединили для исследования. Смесь разбавили водой (3 л), затем довели до рН=3~4 с помощью 0.5 Н раствора HCl. Смесь экстрагировали с помощью EtOAc (3 L), затем водную фазу экстрагировали с помощью EtOAc (2 л). Органические слои объединили и промыли соляным раствором (1 л), затем высушили с помощью безводного Na₂SO₄, отфильтровали и концентрировали в вакууме с получением неочищенного продукта в виде масла желтого цвета. Неочищенный продукт очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле с применением петролейный эфир/этилацетат с получением соединения 29 с в виде твердого вещества желтого цвета.

Выход: 220 г, 199 ммоль, 73%

Четыре реакции осуществляли параллельно.

В раствор соединения 29с (55 г, 52 ммоль, 1 экв) в дихлорметане (275 мл) добавили пиперидин (47.3 г, 555 ммоль, 55 мл, 10.7 экв). Реакционный раствор перемешивали в течение 3 часов при 15-30°С. TLC (Петролейный эфир/Этилацетат=1:1, R_f=0) показала, что исходное вещество было полностью израсходовано. Четыре реакции объединили, и смесь разбавили водой (800 мл) и дихлорметаном (800 л), затем довели до рН=3~4 с помощью 0.5 Н раствора HCl. Органический слой отделили, и водную фазу экстрагировали дихлорметаном (800 мл). Органические слои объединили и промыли соляным раствором (1 л), затем высушили с помощью безводного Na₂SO₄, отфильтровали и концентрировали в вакууме с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле с применением DCM/MeOH с получением соединения 29d в виде твердого вещества белого цвета.

Выход: 140 г, 168 ммоль, 81%

Четыре реакции осуществляли параллельно.

В раствор соединения 29d (30 г, 36 ммоль, 1 экв) в THF (300 мл) добавили (1,3-диоксо-1,3-дигидро-2Н-изоиндолил-2-ил)ацетальдегид (6.8 г, 36 ммоль, 1 экв) и NaBH(ОАс)₃ (15.3 г, 72 ммоль, 2 экв) в виде одной порции. После добавления, реакционную смесь перемешивали при 15-30°С в течение 18 часов. TLC (DCM/MeOH=10:1, R_f=0.4) показала, что исходное вещество было полностью израсходовано. Четыре реакции объединили, и смесь разбавили водой (2 л) и EtOAc (1.5 л). Органический слой отделили, и водную фазу экстрагировали с помощью EtOAc (1 л). Органические слои объединили и промыли соляным раствором (1 л), затем высушили с помощью безводного Na₂SO₄, отфильтровали и концентрировали в вакууме с получением соединения 29е в виде масла желтого цвета.

Выход: 164 г, неочищенное соединение

Три реакции осуществляли параллельно.

В раствор соединения 29е (50 г, 49.7 ммоль, 1 экв) в DCM (150 мл) добавили Et₃N (25.1 г, 248 ммоль, 34.4 мл, 5 экв) и Boc₂O (21.7 г, 99.4 ммоль, 22.8 мл, 2 экв). После добавления, реакционную смесь перемешивали при 15-30°С в течение 12 часов. TLC (Петролейный эфир/Этилацетат=1:1, R_f=0.4) показала, что исходное вещество было полностью израсходовано. Три реакции объединили, и смесь разбавили водой (800 мл), затем довели до рН=3~4 с помощью 0.5 Н раствора HCl. Органический слой отделили, и водную фазу экстрагировали дихлорметаном (800 мл). Органические слои объединили и промыли соляным раствором (800 мл), затем высушили с помощью безводного Na₂SO₄, отфильтровали и концентрировали в вакууме с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле с применением петролейный эфир/этилацетат с получением соединения 29f в виде твердого вещества желтого цвета.

Выход: 80 г, 72.3 ммоль, 48.5%

Три реакции осуществляли параллельно.

В раствор соединения 29f (25 г, 22.6 ммоль, 1 экв) в DCM (125 мл) и EtOH (300 мл) добавили NH₂NH₂.H₂O (28.9 г, 565 ммоль, 28 мл, 98% чистота, 25 экв) в виде одной порции. После добавления, реакционную смесь перемешивали при 15-30°С в течение 18 часов. TLC (Петролейный эфир/Этилацетат=1:1, R_f=0.03) показала, что исходное вещество было полностью израсходовано. Три реакции объединили, и смесь разбавили водой (1 л) и дихлорметаном (800 мл), затем довели до рН=3~4 с помощью 0.5 Н раствора HCl. Органический слой отделили, и водную фазу экстрагировали дихлорметаном (500 мл). Органические слои объединили и промыли соляным раствором (800 мл), затем высушили с помощью безводного Na₂SO₄, отфильтровали и концентрировали в вакууме с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле с применением DCM/MeOH с получением соединения 29g в виде масла желтого цвета.

Выход: 45 г, 46.1 ммоль, 68%

Четыре реакции осуществляли параллельно.

В раствор соединения 29g (11 г, 11.3 ммоль, 1.0 экв) в THF (100 мл) добавили Et₃N (3.4 г, 33.8 ммоль, 4.7 мл, 3.0 экв) и 4-нитрофенилкарохлоридат (2.5 г, 12.4 ммоль, 1.1 экв). После добавления, реакционную смесь перемешивали при 15-30°С в течение 18 часов. TLC (Петролейный эфир/Этилацетат=1:1, R_f=0.4) показала, что исходное вещество было полностью израсходовано. Четыре реакции объединили, и смесь разбавили водой (800 мл) и EtOAc (800 мл), затем довели до рН=3-4 с помощью 0.5 Н раствора HCl. Органический слой отделили, и водную фазу экстрагировали с помощью EtOAc (500 мл). Органические слои объединили и промыли соляным раствором (800 мл), затем высушили с помощью безводного Na2S04, отфильтровали и концентрировали в вакууме с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт очистили посредством колоночной хроматографии на силикагеле с применением петролейный эфир: этилацетат с получением соединения 29h в виде густого масла бледно-желтого цвета.

Выход: 29 г, 25.4 ммоль, 56%

Пример 30

Синтез временного конъюгата S1 РТН(1-34) 30

PTH(1-34) с защищенной боковой цепью на TCP смоле, имеющей защитную Fmoc группу на N-конце подвергли удалению Fmoc защитной группы согласно методике, приведенной в части Вещества и Способы. Раствор Fmoc-Ser(Trt)-OH (997 мг, 1.75 ммоль), РуВОР (911 мг, 1.75 ммоль) и DIPEA (305 мкл, 1.75 ммоль) в DMF (5 мл) добавили к 5.0 г (0.58 ммоль) смолы. Суспензию встряхивали всю ночь при комнатной температуре. Смолу промыли 10 х с помощью DMF, и удаление защитной группы Fmoc осуществили, как описано выше. Раствор соединения 29h (2.66 г, 2.33 ммоль) и DIPEA (611 мкл, 3.50 ммоль) в DMF (5 мл) добавили к смоле. Суспензию встряхивали всю ночь при комнатной температуре. Смолу промыли 10 х с помощью DMF, 10 х с помощью DCM и высушили в вакууме. Отщепление пептида от смолы и удаление защитных групп достигали посредством добавления 30 мл расщепляющего коктейля 100/3/3/2/1 (об./мас./об./об./об.) TFA/EDT/TES/вода/тиоанизол и встряхивания суспензии в течение 1 ч при комнатной температуре. Неочищенное соединение 30 осадили в предварительно охлажденном простом диэтиловом эфире (-18°С). Осадок растворили в ACN/вода и очистили посредством ОФ-ВЭЖХ. Фракции продукта лиофилизировали.

Выход: 168 мг (5%), 30*9 TFA

MS: m/z 1155.92=[М+4Н]⁴⁺, (вычисленная моноизотопная масса для [М+4Н]⁴⁺=1155.85).

Пример 31

Синтез временного конъюгата 4×10 кДа S1 ПЭГ 31

2.3 мл раствора, содержащего соединение 30 (13 мг/мл, 30 мг, 5.31 мкмоль) в 8/2 (об./об.) воде/этаноле, содержащем 0.1% TFA (об./об.), и 10 мМ метионина добавили к 3.4 мл раствора, содержащего ПЭГ 2×10 кДа - малеимид (Sunbright GL2-200MA, 342 мг, 15.9 мкмоль) в том же самом растворителе. 0.5 М NaH₂PO₄ буфер (0.8 мл, рН 7.0) добавили, и смесь перемешивали в течение 30 минут при комнатной температуре. 20 мкл TFA добавили, и смесь хранили при 4°С всю ночь. Конъюгат 31 очистили посредством IEX с последующей ОФ-ВЭЖХ, применяя линейный градиент системы растворителей А (вода, содержащая 0.2% АсОН об./об.) и системы растворителей В (ацетонитрил, содержащий 0.2% АсОН об./об.). Фракции, содержащие раствор, лиофилизировали.

Выход: 161 мг (3.55 мкмоль, 67%) конъюгата 31*9 АсОН

Пример 32

Кинетика высвобождения in vitro временного конъюгата 4×10 кДа ПЭГ 31

Конъюгат 31 (11 мг) растворили в 1 об. % уксусной кислоте в воде (1.8 мл) при 0.5 мг РТНэкв./мл. Буферный обмен на рН 7.4 фосфатный буфер (100 мМ NaH₂PO₄, 10 мМ L-метионин, 3 мМ EDTA, 0.05% Tween-20, довели до рН 7.4 посредством NaOH) осуществили посредством SEC хроматографии. Элюат далее разбавили фосфатным буфером до достижения концентрации 0.1 мг РТНэкв/мл. Полученный раствор стерильно отфильтровали и инкубировали при 37°С. Взяли аликвоты во временных точках и проанализировали посредством ОФ-ВЭЖХ. Фракцию высвобожденного РТН в момент времени вычислили по соотношению площадей УФ пиков высвобожденного РТН и ПЭГ конъюгата. Построили график % высвобожденного РТН относительно времени инкубации. Программное обеспечение для подбора кривой применяли для вычисления соответствующих периодов полувысвобождения.

Результаты:

Для конъюгата 31 период полувысвобождения 14.5 дня получили.

Пример 33

Фармакодинамические действия на яванских макаках в ходе PK/PD исследования однократной дозы с применением соединения 18

Соединение 18 вводилось при 1 мкг/кг самцам яванских макак (N=3) в одном подкожном исследовании PK/PD, оценивающем уровни сыворотного кальция (sCa) и экскреции кальция в моче в течение 96 часов после введения дозы.

Результаты: После введения соединения 18 при 1 мкг/кг яванским макакам, уровни sCa оставались в пределах нормального диапазона в течение 96 часов после введения дозы, и наблюдалась четкая тенденция к снижению уровня кальция в моче в течение первых 24 часов.

Заключение: при дозе, поддерживающей sCa в диапазоне нормокальциемии, наблюдалось одновременное снижение экскреции мочевого Са, и поэтому соединение 18 устраняет ключевую неудовлетворенную медицинскую потребность у пациентов с HP.

Пример 34

Фармакокинетическое исследование временного конъюгата 2×20 кДа S1 ПЭГ 18 на яванских макаках

Ранее не подверженные экспериментам яванские макаки (2-3.5 лет, 2-5 кг) (3-5 самцов / 3-5 самок) получали ежедневное подкожное введение соединения 18 при уровнях дозы 0.2, 0.5 и 1.5 мкг РТН/кг. Образцы крови собрали на; день 1:перед введением дозы, 4 ч, 8 ч, 12 ч, 18 ч, и 24 ч после введения дозы, на день 8: перед введением дозы, на день 14: перед введением дозы, 8 ч, и 12 ч и на день 28: 3 ч, 6 ч, 8 ч, 12 ч, 18 ч, 24 ч, 72 ч, 168 ч, и 336 ч) и получили плазму. Общие концентрации РТН в плазме определили посредством количественной оценки N-концевого сигнатурного пептида (последовательность: IQLMHNLGK) после LysC и GluC расщепления, как представлено в части Вещества и Способы.

Результаты: Системное воздействие, выраженное как C_max и AUC, увеличивалось пропорционально дозе. Системное воздействие общего РТН, выраженное как AUC, накапливается примерно в 3 раза с 1 по 28 день.

Низкое значение соотношения пика и минимума общего РТН для групп всех доз наблюдалось после ежедневного подкожного введения яванским макакам на день 28 (стабильное состояние наблюдалось со дня 8).

Пример 35

Фармакокинетическое исследование временного конъюгата 2×20 кДа S1 ПЭГ 18 на крысах Спрег-Доули

Крысы Спрег-Доули Crl:CD(SD) (начало введения доз с возраста 8 недель) получали ежедневное подкожное введение соединения 18 при уровнях дозы 10, 30 и 60 мкг РТН/кг в течение 28 дней. TK группа, содержащая 9 самцов и 9 самок на группу дозы, была поделена 3 подгруппы с 3 крысами в подгруппе. Образцы крови собирали до 28 дня с 3 крысами на один пол, на один момент времени отбора образца. Образцы собирались на день 1: перед введением, 4 ч, 8 ч, 12 ч, 18 ч и 24 ч после введения дозы, а на день 28: 3 ч, 6 ч, 8 ч, 12 ч, 18 ч, 24 ч и 336 ч, и получали плазму. Общие концентрации РТН в плазме определили посредством количественной оценки N-концевого сигнатурного пептида (последовательность: IQLMHNLGK) после LysC и GluC расщепления, как представлено в части Вещества и Способы.

Результаты: Системное воздействие, выраженное как среднее C_max и AUC, увеличивалось пропорционально дозе. Системное воздействие общего РТН, выраженное как среднее AUC, накапливалось 3-6-ти кратно с 1 по 28 день. Системное воздействие у самки крысы было примерно в 2 раза выше, чем у самцов.

Низкое значение соотношения пика и минимума общего РТН для всех групп по дозе наблюдалось после ежедневного подкожного введения крысам Спрег-Доули на день 28 (стабильное состояние наблюдалось со дня 8).

Аббревиатуры:

ACN ацетонитрил

АсОН уксусная кислота

Aib 2-аминоизомасляная кислота

BMD минеральная плотность костей

Bn бензил

Boc трет-бутилоксикарбонил

COMU (1-циано-2-этокси-2-оксоэтилиденаминоокси)диметиламино-морфолино-карбения гексафторфосфат

сАМР циклический аденозин монофосфат

д день

DBU 1,3-диазабицикло[5.4.0]ундецен

DCC N,N'-дициклогексилкарбодиимид

DCM дихлорметан

DIPEA N,N-диизопропилэтиламин

DMAP диметиламино-пиридин

DMF N,N-диметилформамид

DMSO диметилсульфоксид

DTT дитиотреитол

EDTA этилендиаминтетрауксусная кислота

экв стехиометрический эквивалент

ESI-MS масс-спектрометрия с ионизацией электрораспылением

Et этил

Fmoc 9-флуоренилметилоксикарбонил

Glu-C эндопротеиназа Glu-C

ч час

HATU O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметилуроний гексафторфосфат

HP гипопаратиреоидизм

HPLC высокоэффективная жидкостная хроматография

ivDde 4,4-диметил-2,6-диоксоциклогекс-1 -илиден)-3-метилбутил

LC жидкостная хроматография

LTQ линейная квадрупольная ловушка

Lys-C эндопротеиназа Lys-C

LLOQ нижняя граница количественного показателя

Mal 3-малеимидо пропил

Me метил

МеОН метанол

мин минуты

Mmt монометокситритил

MS масс-спектор / масс-спектрометрия

m/z соотношение массы и заряда

OtBu трет-бутилокси

ПЭГ поли(этиленгликоль)

рН potentia Hydrogenii

PK фармакокинетика

Pr пропил

РТН паратироидный гормон

РуВОР бензотриазол-1-ил-окситрипирролидинофосфония гексафторфосфат

Q-TOF квадрупольный времяпролетный

ОФ-ВЭЖХ обращено-фазовая высокоэффективная жидкостная хроматография

rt комнатная температура

sCa сывороточный кальций

SIM мониторинг избранных ионов

SEC эксклюзионная хроматография размеров

sc подкожно

sP сыворотный фосфат

t_1/2 период полувысвобождения

TCP тритилхлоридполистирол

TES триэтилсилан

TFA трифторуксусная кислота

THF тетрагидрофуран

TK токсикокинетическа

Tmob 2,4,6-триметоксибензил

ТРТх тиропаратиреоидэктомия

Trt трифенилметил, тритил

ULOQ верхний предел количественного показателя

UPLC сверхвысокоэффективная жидкостная хроматография

UV ультрафиолет

ZQ одноквадрупольный

Изобретение относится к пролекарствам РТН, фармацевтическим композициям, содержащим такие пролекарства РТН, и их применению для лечения гипопаратиреоидизма. 7 н. и 15 з.п. ф-лы, 34 пр.

1. Пролекарство РТН или его фармацевтически приемлемая соль, где пролекарство имеет формулу (Ia) или (Ib)

где -D представляет собой РТН фрагмент, где -D имеет последовательность SEQ ID NO: 51;

-L¹- представляет собой обратимый линкерный фрагмент пролекарства, конъюгированный с N-концевой аминовой функциональной группой фрагмента –D, где -L¹- имеет формулу (II)

где пунктирная линия обозначает присоединение к N-концевой аминовой функциональной группе фрагмента -D;

-Х- представляет собой -C(R⁴R^4a)-, -N(R⁴)-, -O-, -C(R⁴R^4a)-C(R⁵R^5a)-, -C(R⁵R^5a)-C(R⁴R^4a)-, -C(R⁴R^4a)-N(R⁶)-, -N(R⁶)-C(R⁴R^4a)-, -C(R⁴R^4a)-O-, -O-C(R⁴R^4a)- или C(R⁷R^7a)-;

X¹ представляет собой С или S(O);

-X²- представляет собой -C(R⁸R^8a)- или C(R⁸R^8a)-C(R⁹R^9a)-;

=Х³ представляет собой =O, =S или =N-CN;

-R¹, -R^1a, -R², -R^2a, -R⁴, -R^4a, -R⁵, -R^5a, -R⁶, -R⁸, -R^8a, -R⁹, -R^9a независимо выбраны из группы, состоящей из -Н и C_1-6 алкила;

-R³, -R^3a независимо выбраны из группы, состоящей из -Н и C_1-6 алкила, при условии, что в случае, когда один из -R³, -R^3a или оба отличны от -Н, они присоединены к N, к которому они присоединены через sp³-гибридизованный атом углерода;

-R⁷ представляет собой -N(R^10R10a) или NR¹⁰-(C=O)-R¹¹;

-R^7a, -R¹⁰, -R^10a, -R¹¹ независимо друг от друга представляют собой -Н или C_1-6 алкил;

необязательно, одна или более из пар -R^1a/-R^4a, -R^1a/-R^5a, -R^1a/-R^7a, -R^4a/-R^5a, -R^8a/-R^9a образуют химическую связь;

необязательно, одна или более из пар -R¹/-R^1a, -R²/-R^2a, -R⁴/-R^4a, -R⁵/-R^5a, -R⁸/-R^8a, -R⁹/-R^9a соединены вместе с атомом, к которому они присоединены, с образованием С_3-10 циклоалкила или 3-10-ти членного гетероциклила;

необязательно, одна или более из пар -R¹/-R⁴, -R¹/-R⁵, -R¹/-R⁶, -R¹/-R^7a, -R⁴/-R⁵, -R⁴/-R⁶, -R⁸/-R⁹, -R²/-R³ соединены вместе с атомами, к которым они присоединены, с образованием кольца А;

необязательно, R³/R^3a соединены вместе с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием 3-10-ти членного гетероцикла;

А выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила, С_3-10 циклоалкила, 3-10-ти членного гетероциклила и 8-11-ти членного гетеробициклила; и

где -L¹- имеет в качестве заместителя -L²-Z и где -L¹- необязательно дополнительно замещен, при условии, что водород, отмеченный звездочкой в формуле (II), не замещен -L²-Z или заместителем;

где указанные один или более дополнительные необязательные заместители выбраны из группы, состоящей из галогена, -CN, -COOR^x1, -OR^x1, -C(O)R^x1, -C(O)N(R^x1R^x1a), -S(O)₂N(R^x1R^x1a), -S(O)N(R^x1R^x1a), -S(O)₂R^x1, -S(O)R^x1, -N(R^x1)S(O)₂N(R^x1aR^x1b), -SR^x1, -N(R^x1R^x1a), -NO₂, -OC(O)R^x1, -N(R^x1)C(O)R^x1a, -N(R^x1)S(O)₂R^x1a, -N(R^x1)S(O)R^x1a, -N(R^x1)C(O)OR^x1a, -N(R^x1)C(O)N(R^x1aR^x1b), OC(O)N(R^x1R^x1a), -T⁰, C_1-50 алкила, С_2-50 алкенила и С_2-50 алкинила; где -Т⁰, С_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно замещены одним или более -R^x2, которые являются одинаковыми или различными, и где C_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно прерываются одной или более группами, выбранными из группы, состоящей из -Т⁰-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^x3)-, -S(O)₂N(R^x3)-, -S(O)N(R^x3)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^x3)S(O)₂N(R^x3a)-, -S-, -N(R^x3)-, -OC(OR^x3)(R^x3a)-, -N(R^x3)C(O)N(R^x3a)- и -OC(O)N(R^x3)-; -R^x1, -R^x1a, -R^x1b независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из -Н, -Т⁰, С_1-50 алкила, С_2-50 алкенила и С_2-50 алкинила; где -Т⁰, C_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно замещены одним или более заместителями -R^x2, которые являются одинаковыми или различными, и где С_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно прерваны одной или более группами, выбранными из группы, состоящей из -Т⁰-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^x3)-, -S(O)₂N(R^x3)-, -S(O)N(R^x3)-; -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^x3)S(O)₂N(R^x3a)-, -S-, -N(R^x3)-, -OC(OR^x3)(R^x3a)-, -N(R^x3)C(O)N(R^x3a)- и -OC(O)N(R^x3)-;

каждый T⁰ независимо выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила, С_3-10 циклоалкила, 3-10-ти членного гетероциклила и 8-11-ти членного гетеробициклила; где каждый Т⁰ независимо необязательно замещен одним или более заместителями -R^x2, которые являются одинаковыми или различными;

каждый -R^x2 независимо выбран из группы, состоящей из галогена, -CN, оксо (=O), -COOR^x4, -OR^x4, -C(O)R^x4, -C(O)N(R^x4R^x4a), -S(O)₂N(R^x4R^x4a), -S(O)N(R^x4R^x4a), -S(O)₂R^x4, -S(O)R^x4, -N(R^x4)S(O)₂N(R^x4aR^x4b), -SR^x4, -N(R^x4R^x4a), -NO₂, -OC(O)R^x4, -N(R^x4)C(O)R^x4a, -N(R^x4)S(O)₂R^x4a, -N(R^x4)S(O)R^x4a, -N(R^x4)C(O)OR^x4a, -N(R^x4)C(O)N(R^x4aR^x4d), -OC(O)N(R^x4R^x4a) и C_1-6 алкила; где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или более галогенами, которые являются одинаковыми или различными;

каждый -R^x3, -R^x3a, -R^x4, -R^x4a, -R^x4b независимо выбран из группы, состоящей из -Н и C_1-6 алкила; где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или более галогеном, которые являются одинаковыми или различными;

-L²- представляет собой простую химическую связь или спейсерный фрагмент, выбранный из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^y1)-, -S(O)₂N(R^y1)-, -S(O)N(R^y1)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^y1)S(O)₂N(R^y1a)-, -S-, -N(R^y1)-, -OC(OR^y1)(R^y1a)-, -N(R^y1)C(O)N(R^y1a)-, -OC(O)N(R^y1)-, C_1-50 алкила, С_2-50 алкенила и С_2-50 алкинила; где -Т-, C_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно замещены одним или более -R^y2, которые являются одинаковыми или различными, и где C_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно прерываются одной или более группами, выбранными из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^y3)-, -S(O)₂N(R^y3)-, -S(O)N(R^y3)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^y3)S(O)₂N(R^y3a)-, -S-, -N(R^y3)-, -OC(OR^y3)(R^y3a)-, -N(R^y3)C(O)N(R^y3a)- и -OC(O)N(R^y3)-; -R^y1 и -R^y1a независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из Н, -Т, C_1-50 алкила, С_2-50 алкенила и С_2-50 алкинила; где -Т, C_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно замещены одним или более -R^y2, которые являются одинаковыми или различными, и где С_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно прерываются одной или более группами, выбранными из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^y4)-, -S(O)₂N(R^y4)-, -S(O)N(R^y4)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^y4)S(O)₂N(R^y4a)-, -S-, -N(R^y4)-, -OC(OR^y4)(R^y4a)-, -N(R^y4)C(O)N(R^y4a)- и -OC(O)N(R^y4)-;

каждый T независимо выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила, С^3-10 циклоалкила, 3-10-ти членного гетероциклила, 8-11-ти членного гетеробициклила, 8-30-ти членного карбополициклила и 8-30-ти членного гетерополициклила; где каждый Т независимо необязательно замещен одним или более -R^y2, которые являются одинаковыми или различными;

каждый -R^y2 независимо выбран из группы, состоящей из галогена, -CN, оксо (=O), -COOR^y5, -OR^y5, -C(O)R^y5, -C(O)N(R^y5R^y5a), -S(O)₂N(R^y5R^y5a), -S(O)N(R^y5R^y5a), -S(O)₂R^y5, -S(O)R^y5, -N(R^y5)S(O)₂N(R^y5aR^y5b), -SR^y5, -N(R^y5R^y5a), -NO₂, -OC(O)R^y5, -N(R^y5)C(O)R^y5a, -N(R^y5)S(O)₂R^y5a, -N(R^y5)S(O)R^y5a, -N(R^y5)C(O)OR^y5a, -N(R^y5)C(O)N(R^y5aR^y5b), -OC(O)N(R^y5R^y5a) и C_1-6 алкила; где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или более галогенами, которые являются одинаковыми или различными; и каждый -R^y3, -R^y3a, -R^y4, -R^y4a, -R^y5, -R^y5a и R^y5b независимо выбран из группы, состоящей из Н и С_1-6 алкила, где С_1-6 алкил необязательно замещен одним или более галогенами, которые являются одинаковыми или различными;

-Z представляет собой растворимый в воде фрагмент-носитель, причем -Z представляет собой разветвленный полимер;

х представляет собой целое число, выбранное из группы, состоящей из 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 и 16; и

у представляет собой целое число, выбранное из группы, состоящей из 1, 2, 3, 4 и 5.

2. Пролекарство РТН или его фармацевтически приемлемая соль по п. 1, где -Z выбран из группы, состоящей из 2-метакрилоил-оксиэтил фосфоилхолинов, поли(акриловых кислот), поли(акрилатов), поли(акриламидов), поли(алкилокси) полимеров, поли(амидов), поли(амидоаминов), поли(аминокислот), поли(ангидридов), поли(аспартамидов), поли(масляных кислот), поли(гликолевых кислот), полибутилентерефталатов, поли(капролактонов), поли(карбонатов), поли(цианоакрилатов), поли(диметилакриламидов), поли(сложных эфиров), поли(этиленов), поли(этиленгликолей), поли(этиленоксидов), поли(этилфосфатов), поли(этилоксазолинов), поли(гликолевых кислот), поли(гидроксиэтилакрилатов), поли(гидроксиэтил-оксазолинов), поли(гидроксиметакрилатов), поли(гидроксипропилметакриламидов), поли(гидроксипропилметакрилатов), поли(гидроксипропилоксазолинов), поли(иминокарбонатов), поли(молочных кислот), поли(сополимеров молочных и гликолевых кислот), поли(метакриламидов), поли(метакрилатов), поли(метилоксазолинов), поли(органофосфазенов), поли (ортосложных эфиров), поли(оксазолинов), поли(пропиленгликолей), поли(силоксанов), поли(уретанов), поливиниловых спиртов), поли(виниламинов), поли(винилметиловых простых эфиров), поли(винилпирролидонов), силиконов, целлюлоз, карбометилцеллюлоз, гидроксипропилметилцеллюлоз, хитинов, хитозанов, декстранов, декстринов, желатинов, гиалуроновых кислот и производных, функционализированных гиалуроновых кислот, маннанов, пектинов, рамногалактуронанов, крахмалов, гидроксиалкилкрахмалов, гидроксиэтилкрахмалов и других полимеров на основе углеводов, ксиланов и их сополимеров.

3. Пролекарство РТН или его фармацевтически приемлемая соль по п. 1, где -Z имеет формулу (а)

где пунктирная линия показывает присоединение к -L²- или к оставшейся части -Z;

ВР^а представляет собой точку разветвления, выбранную из группы, состоящей из -N<, -CR< и >С<;

-R выбран из группы, состоящей из -Н и С_1-6 алкила;

а равно 0, если ВР^а представляет собой -N< или CR<, и а равно 1, если ВР^а представляет собой >С<;

-S^a-, -S^a'-, -S^a''- и S^a''' - независимо друг от друга представляют собой химическую связь или выбраны из группы, состоящей из C_1-50 алкила, С_2-50 алкенила и C_2-50 алкинила; где С_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно замещены одним или более -R^'1, которые являются одинаковыми или различными, и где С_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и C_2-50 алкинил необязательно прерываются одной или более группами, выбранными из группы, состоящей из -Т'-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R'²)-, -S(O)₂N(R'²)-, -S(O)N(R'²)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R'²)S(O)₂N(R'^2a)-,-S-, -N(R'²)-, -OC(OR'²)(R'^2a)-, -N(R'²)C(O)N(R'^2a)- и OC(O)N(R'²)-;

каждый -T'- независимо выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила, С_3-10 циклоалкила, 3-10-ти членного гетероциклила, 8-11-ти членного гетеробициклила, 8-30-ти членного карбополициклила и 8-30-ти членного гетерополициклила; где каждый -Т'- независимо необязательно замещен одним или более -R'¹, которые являются одинаковыми или различными;

каждый -R'¹ независимо выбран из группы, состоящей из галогена, -CN, оксо (=O), -COOR'³, -OR'³, -C(O)R'³, -C(O)N(R'³R'^3a), -S(O)₂N(R'³R'^3a), -S(O)N(R'³R'^3a), -S(O)₂R'³, -S(O)R'³, -N(R'³)S(O)₂N(R'^3aR'^3b), -SR'³, -N(R'³R'^3a), -NO₂, -OC(O)R'³, -N(R'³)C(O)R'^3a, -N(R'³)S(O)₂R'^3a, -N(R'³)S(O)R'^3a, -N(R'³)C(O)OR'^3a, -N(R'³)C(O)N(R'^3aR'^3b), -OC(O)N(R'³R'^3a) и C_1-6 алкила; где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или более галогенами, которые являются одинаковыми или различными;

каждый -R'², -R'^2a, -R'³, -R'^3a и R'^3b независимо выбран из группы, состоящей из Н и С_1-6 алкила, где С_1-6 алкил необязательно замещен одним или более галогенами, которые являются одинаковыми или различными; и

-Р^а', -Р^а'' и Р^а''' независимо друг от друга представляют собой полимерный фрагмент.

4. Пролекарство РТН или его фармацевтически приемлемая соль по п. 1, где -Z представляет собой фрагмент формулы (b)

где пунктирная линия показывает присоединение к -L²- или к оставшейся части -Z; и

m и р независимо друг от друга представляют собой целое число в интервале и включительно от 150 до 1000.

5. Пролекарство РТН или его фармацевтически приемлемая соль по п. 4, где m и р независимо друг от друга представляют собой целое число в интервале и включительно от 400 до 500.

6. Пролекарство РТН или его фармацевтически приемлемая соль по п. 1, где пролекарство РТН имеет формулу (IIf-i)

где неотмеченная пунктирная линия обозначает присоединение к N-концевой аминовой функциональной группе фрагмента D путем образования амидной связи; и

пунктирная линия, отмеченная звездочкой, означает присоединение к фрагменту

где m и р независимо друг от друга представляют собой целое число в интервале и включительно от 400 до 500.

7. Пролекарство РТН или его фармацевтически приемлемая соль, где пролекарство РТН или его фармацевтически приемлемая соль представляет собой конъюгат D-L, где

-D представляет собой РТН фрагмент, где -D имеет последовательность SEQ ID NO: 51;

-L представляет собой обратимый линкерный фрагмент пролекарства -L¹-, где фрагмент -L¹- конъюгирован с N-концевой аминовой функциональной группой фрагмента -D, где -L¹- имеет формулу (II)

где пунктирная линия обозначает присоединение к N-концевой аминовой функциональной группе фрагмента -D;

-Х- представляет собой -C(R⁴R^4a)-, -N(R⁴)-, -O-, -C(R⁴R^4a)-C(R⁵R^5a)-, -C(R⁵R^5a)-C(R⁴R^4a)-, -C(R⁴R^4a)-N(R⁶)-, -N(R⁶)-C(R⁴R^4a)-, -C(R⁴R^4a)-O-, -O-C(R⁴R^4a)- или C(R⁷R^7a)-;

X¹ представляет собой С или S(O);

-X²- представляет собой -C(R⁸R^8a)- или C(R⁸R^8a)-C(R⁹R^9a)-;

=Х³ представляет собой =O, =S или =N-CN;

-R¹, -R^1a, -R², -R^2a, -R⁴, -R^4a, -R⁵, -R^5a, -R⁶, -R⁸, -R^8a, -R⁹, -R^9a независимо выбраны из группы, состоящей из -Н и С_1-6 алкила;

-R³, -R^3a независимо выбраны из группы, состоящей из -Н и С_1-6 алкила, при условии, что в случае, когда один из -R³, -R^3a или оба отличны от -Н, они присоединены к N, к которому они присоединены через sp³-гибридизованный атом углерода;

-R⁷ представляет собой -N(R¹⁰R^10a) или NR¹⁰-(C=O)-R¹¹;

-R^7a, -R¹⁰, -R^10a, -R¹¹ независимо друг от друга представляют собой -Н или C_1-6 алкил;

необязательно, одна или более из пар -R^1a/-R^4a, -R^1a/-R^5a, -R^1a/-R^7a, -R^4a/-R^5a, -R^8a/-R^9a образуют химическую связь;

необязательно, одна или более из пар -R¹/-R^1a, -R²/-R^2a, -R⁴/-R^4a, -R⁵/-R^5a, -R⁸/-R^8a, -R⁹/-R^9a соединяются вместе с атомом, к которому они присоединены, с образованием С_3-10 циклоалкила или 3-10-ти членного гетероциклила;

необязательно, одна или более из пар -R¹/-R⁴, -R¹/-R⁵, -R¹/-R⁶, -R¹/-R^7a, -R⁴/-R⁵, -R⁴/-R⁶, -R⁸/-R⁹, -R²/-R³ соединяются вместе с атомами, к которым они присоединены, с образованием кольца А;

необязательно, R³/R^3a соединяются вместе с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием 3-10-ти членного гетероцикла;

А выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила, С_3-10 циклоалкила, 3-10-ти членного гетероциклила и 8-11-ти членного гетеробициклила; и

где -L¹- замещена -L²-Z' и необязательно дополнительно замещен; при условии, что водород, отмеченный звездочкой в формуле (II), не замещен -L²-Z' или заместителем;

где указанные один или более дополнительные необязательные заместители независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из галогена, -CN, -COOR^x1, -OR^x1, -C(O)R^x1, -C(O)N(R^x1R^x1a), -S(O)₂N(R^x1R^x1a), -S(O)N(R^x1R^x1a), -S(O)₂R^x1, -S(O)R^x1, -N(R^x1)S(O)₂N(R^x1aR^x1b), -SR^x1, -N(R^x1R^x1a), -NO₂, -OC(O)R^x1, -N(R^x1)C(O)R^x1a, -N(R^x1)S(O)₂R^x1a, -N(R^x1)S(O)R^x1a, -N(R^x1)C(O)OR^x1a, -N(R^x1)C(O)N(R^x1aR^x1b), -OC(O)N(R^x1R^x1a), -T⁰, C_1-50 алкила, C_2-50 алкенила и C_2-50 алкинила; где -T⁰, C_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно замещены одним или более -R^x2, которые являются одинаковыми или различными, и где C_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно прерываются одной или более группами, выбранными из группы, состоящей из -Т⁰-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^x3)-, -S(O)₂N(R^x3)-, -S(O)N(R^x3)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^x3)S(O)₂N(R^x3a)-, -S-, -N(R^x3)-, -OC(OR^x3)(R^x3a)-, -N(R^x3)C(O)N(R^x3a)- и -OC(O)N(R^x3)-;

-R^x1, -R^x1a, -R^x1b независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из -Н, -Т⁰, C_1-50 алкила, C_2-50 алкенила и С_2-50 алкинила; где -Т⁰, С_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно замещены одним или более заместителями -R^x2, которые являются одинаковыми или различными, и где С_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно прерваны одной или более группами, выбранными из группы, состоящей из -Т⁰-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^x3)-, -S(O)₂N(R^x3)-, -S(O)N(R^x3)-; -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^x3)S(O)₂N(R^x3a)-, -S-, -N(R^x3)-, -OC(OR^x3)(R^x3a)-, -N(R^x3)C(O)N(R^x3a)- и -OC(O)N(R^x3)-;

каждый T⁰ независимо выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила, C_3-10 циклоалкила, 3-10-ти членного гетероциклила и 8-11-ти членного гетеробициклила; где каждый Т⁰ независимо необязательно замещен одним или более -R^x2, которые являются одинаковыми или различными;

каждый -R^x2 независимо выбран из группы, состоящей из галогена, -CN, оксо (=O), -COOR^x4, -OR^x4, -C(O)R^x4, -C(O)N(R^x4R^x4a), -S(O)₂N(R^x4R^x4a), -S(O)N(R^x4R^x4a), -S(O)₂R^x4, -S(O)R^x4, -N(R^x4)S(O)₂N(R^x4aR^x4b), -SR^x4, -N(R^x4R^x4a), -NO₂, -OC(O)R^x4, -N(R^x4)C(O)R^x4a, -N(R^x4)S(O)₂R^x4a, -N(R^x4)S(O)R^x4a, -N(R^x4)C(O)OR^x4a, -N(R^x4)C(O)N(R^x4aR^x4b), -OC(O)N(R^x4R^x4a) и C_1-6 алкила; где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или более галогенами, которые являются одинаковыми или различными;

каждый -R^x3, -R^x3a, -R^x4, -R^x4a, -R^x4b независимо выбран из группы, состоящей из -Н и C_1-6 алкила; где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или более галогеном, которые являются одинаковыми или различными;

-L²- представляет собой простую химическую связь или спейсерный фрагмент, выбранный из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -O-, -С(O)-, -C(O)N(R^y1)-, -S(O)₂N(R^y1)-, -S(O)N(R^y1)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^y1)S(O)₂N(R^y1a)-, -S-, -N(R^y1)-, -OC(OR^y1)(R^y1a)-, -N(R^y1)C(O)N(R^y1a)-, -OC(O)N(R^y1)-, C_1-50 алкила, C_2-50 алкенила и C_2-50 алкинила; где -T-, С_1-50 алкил, C_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно замещены одним или более -R^y2, которые являются одинаковыми или различными, и где C_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно прерываются одной или более группами, выбранными из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^y3)-, -S(O)₂N(R^y3)-, -S(O)N(R^y3)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^y3)S(O)₂N(R^y3a)-, -S-, -N(R^y3)-, -OC(OR^y3)(R^y3a)-, -N(R^y3)C(O)N(R^y3a)- и -OC(O)N(R^y3)-;

-R^y1 и -R^y1a независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из Н, -Т, C_1-50 алкила, С_2-50 алкенила и С_2-50 алкинила; где -Т, C_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно замещены одним или более -R^y2, которые являются одинаковыми или различными, и где C_1-50 алкил, C_2-50 алкенил и C_2-50 алкинил необязательно прерываются одной или более группами, выбранными из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^y4)-, -S(O)₂N(R^y4)-, -S(O)N(R^y4)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^y4)S(O)₂N(R^y4a)-, -S-, -N(R^y4)-, -OC(OR^y4)(R^y4a)-, -N(R^y4)C(O)N(R^y4a)- и -OC(O)N(R^y4)-;

каждый T независимо выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила, С_3-10 циклоалкила, 3-10-ти членного гетероциклила, 8-11-ти членного гетеробициклила, 8-30-ти членного карбополициклила, и 8-30-ти членного гетерополициклила; где каждый Т независимо необязательно замещен одним или более -R^y2, которые являются одинаковыми или различными;

каждый -R^y2 независимо выбран из группы, состоящей из галогена, -CN, оксо (=O), -COOR^y5, -OR^y5, -C(O)R^y5, -C(O)N(R^y5R^y5a), -S(O)₂N(R^y5R^y5a), -S(O)N(R^y5R^y5a), -S(O)₂R^y5, -S(O)R^y5, -N(R^y5)S(O)₂N(R^y5aR^y5b), -SR^y5, -N(R^y5R^y5a), -NO₂, -OC(O)R^y5, -N(R^y5)C(O)R^y5a, -N(R^y5)S(O)₂R^y5a, -N(R^y5)S(O)R^y5a, -N(R^y5)C(O)OR^y5a, -N(R^y5)C(O)N(R^y5aR^y5b), -OC(O)N(R^y5R^y5a) и C_1-6 алкила; где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или более галогенами, которые являются одинаковыми или различными; и каждый -R^y3, -R^y3a, -R^y4, -R^y4a, -R^y5, -R^y5a и R^y5b независимо выбран из группы, состоящей из Н и C_1-6 алкила, где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или более галогенами, которые являются одинаковыми или различными; и

-Z' представляет собой растворимый в воде фрагмент-носитель, причем -Z' представляет собой гидрогель.

8. Пролекарство РТН или его фармацевтически приемлемая соль по п. 1 или 7, где фрагмент -L¹- имеет формулу (IIb-i)

где пунктирная линия обозначает присоединение к N-концевой аминовой функциональной группе фрагмента D путем образования амидной связи;

-R¹, -R^1a, -R², -R^2a, -R³, -R^3a, -R⁴ и X²- имеют значения, как определено в п. 1 или 7; и

где -L¹- замещена -L²-Z или -L²-Z', и где -L¹- необязательно дополнительно замещена, при условии, что водород, отмеченный звездочкой в формуле (IIb-i), не замещен -L²-Z или -L²-Z' или заместителем;

где указанные один или более дополнительные необязательные заместители выбраны из группы, состоящей из галогена, -CN, -COOR^x1, -OR^x1, -C(O)R^x1, -C(O)N(R^x1R^x1a), -S(O)₂N(R^x1R^x1a), -S(O)N(R^x1R^x1a), -S(O)₂R^x1, -S(O)R^x1, -N(R^x1)S(O)₂N(R^x1aR^x1b), -SR^x1, -N(R^x1R^x1a), -NO₂, -OC(O)R^x1, -N(R^x1)C(O)R^x1a, -N(R^x1)S(O)₂R^x1a, -N(R^x1)S(O)R^x1a, -N(R^x1)C(O)OR^x1a, -N(R^x1)C(O)N(R^x1aR^x1b), -OC(O)N(R^x1R^x1a), -T⁰, С_1-50 алкила, С_2-50 алкенила и С_2-50 алкинила; где -Т⁰, C_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно замещены одним или более -R^x2, которые являются одинаковыми или различными, и где С_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно прерываются одной или более группами, выбранными из группы, состоящей из -Т⁰-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^x3)-, -S(O)₂N(R^x3)-, -S(O)N(R^x3)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^x3)S(O)₂N(R^x3a)-, -S-, -N(R^x3)-, -OC(OR^x3)(R^x3a)-, -N(R^x3)C(O)N(R^x3a)- и -OC(O)N(R^x3)-;

-R^x1, -R^x1a, -R^x1b независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из -Н, -Т⁰, C_1-50 алкила, С_2-50 алкенила и С_2-50 алкинила; где -Т⁰, С_1-50 алкил, C_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно замещены одним или более заместителями -R^x2, которые являются одинаковыми или различными, и где С_1-50 алкил, C_2-50 алкенил и C_2-50 алкинил необязательно прерваны одной или более группами, выбранными из группы, состоящей из -Т⁰-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^x3)-, -S(O)₂N(R^x3)-, -S(O)N(R^x3)-; -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^x3)S(O)₂N(R^x3a)-, -S-, -N(R^x3)-, -OC(OR^x3)(R^x3a)-, -N(R^x3)C(O)N(R^x3a)- и -OC(O)N(R^x3)-;

каждый T⁰ независимо выбирают из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила, C_3-10 циклоалкила, 3-10-ти членного гетероциклила и 8-11-ти членного гетеробициклила; где каждый Т⁰ независимо необязательно замещен одним или более заместителями -R^x2, которые являются одинаковыми или различными;

каждый -R^x2 независимо выбран из группы, состоящей из галогена, -CN, оксо (=O), -COOR^x4, -OR^x4, -C(O)R^x4, -C(O)N(R^x4R^x4a), -S(O)₂N(R^x4R^x4a), -S(O)N(R^x4R^x4a), -S(O)₂R^x4, -S(O)R^x4, -N(R^x4)S(O)₂N(R^x4aR^x4b), -SR^x4, -N(R^x4R^x4a), -NO₂, -OC(O)R^x4, -N(R^x4)C(O)R^x4a, -N(R^x4)S(O)₂R^x4a, -N(R^x4)S(O)R^x4a, -N(R^x4)C(O)OR^x4a, -N(R^x4)C(O)N(R^x4aR^x4b), -OC(O)N(R^x4R^x4a) и C_1-6 алкила; где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или более заместителями галоген, которые являются одинаковыми или различными;

каждый -R^x3, -R^x3a, -R^x4, -R^x4a, -R^x4b независимо выбран из группы, состоящей из -Н и C_1-6 алкила; где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или более галоген, которые являются одинаковыми или различными;

и где -L²-Z является таким, как определено в п. 1, и -L²-Z' является таким, как определено в п. 7.

9. Пролекарство РТН или его фармацевтически приемлемая соль по п. 1 или 7, где фрагмент -L¹- имеет формулу (IIb-ii)

где пунктирная линия обозначает присоединение к N-концевой аминовой функциональной группе фрагмента D путем образования амидной связи;

-R², -R^2a, -R³, -R^3a и X²- имеют значения, как определено в п. 1 или 7; и

где -L¹- замещена -L²-Z или -L²-Z', и где -L¹- необязательно дополнительно замещена, при условии, что водород, отмеченный звездочкой в формуле (IIb-ii), не замещен -L²-Z или -L²-Z' или заместителем;

где указанные один или более дополнительные необязательные заместители выбраны из группы, состоящей из галогена, -CN, -COOR^x1, -OR^x1, -C(O)R^x1, -C(O)N(R^x1R^x1a), -S(O)₂N(R^x1R^x1a), -S(O)N(R^x1R^x1a), -S(O)₂R^x1, -S(O)R^x1, -N(R^x1)S(O)₂N(R^x1aR^x1b), -SR^x1, -N(R^x1R^x1a), -NO₂, -OC(O)R^x1, -N(R^x1)C(O)R^x1a, -N(R^x1)S(O)₂R^x1a, -N(R^x1)S(O)R^x1a, -N(R^x1)C(O)OR^x1a, -N(R^x1)C(O)N(R^x1aR^x1b), -OC(O)N(R^x1R^x1a), -T⁰, С_1-50 алкила, С_2-50 алкенила и С_2-50 алкинила; где -Т⁰, С_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно замещены одним или более -R^x2, которые являются одинаковыми или различными, и где C_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно прерываются одной или более группами, выбранными из группы, состоящей из -Т⁰-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^x3)-, -S(O)₂N(R^x3)-, -S(O)N(R^x3)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^x3)S(O)₂N(R^x3a)-, -S-, -N(R^x3)-, -OC(OR^x3)(R^x3a)-, -N(R^x3)C(O)N(R^x3a)- и -OC(O)N(R^x3)-; -R^x1, -R^x1a, -R^x1b независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из -Н, -Т⁰, С_1-50 алкила, С_2-50 алкенила и С_2-50 алкинила; где -Т⁰, С_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно замещены одним или более заместителями -R^x2, которые являются одинаковыми или различными, и где С_1-50 алкил, C_2-50 алкенил и C_2-50 алкинил необязательно прерваны одной или более группами, выбранными из группы, состоящей из -Т⁰-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^x3)-, -S(O)₂N(R^x3)-, -S(O)N(R^x3)-; -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^x3)S(O)₂N(R^x3a)-, -S-, -N(R^x3)-, -OC(OR^x3)(R^x3a)-, -N(R^x3)C(O)N(R^x3a)- и -OC(O)N(R^x3)-;

каждый T⁰ независимо выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила, С_3-10 циклоалкила, 3-10-ти членного гетероциклила и 8-11-ти членного гетеробициклила; где каждый Т⁰ независимо необязательно замещен одним или более заместителями -R^x2, которые являются одинаковыми или различными;

каждый -R^x2 независимо выбран из группы, состоящей из галогена, -CN, оксо (=O), -COOR^x4, -OR^x4, -C(O)R^x4, -C(O)N(R^x4R^x4a), -S(O)₂N(R^x4R^x4a), -S(O)N(R^x4R^x4a), -S(O)₂R^x4, -S(O)R^x4, -N(R^x4)S(O)₂N(R^x4aR^x4b), -SR^x4, -N(R^x4R^x4a), -NO₂, -OC(O)R^x4, -N(R^x4)C(O)R^x4a, -N(R^x4)S(O)₂R^x4a, -N(R^x4)S(O)R^x4a, -N(R^x4)C(O)OR^x4a, -N(R^x4)C(O)N(R^x4aR^x4b), -OC(O)N(R^x4R^x4a) и C_1-6 алкила; где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или более галогеном, которые являются одинаковыми или различными;

каждый -R^x3, -R^x3a, -R^x4, -R^x4a, -R^x4b независимо выбраны из группы, состоящей из -Н и C_1-6 алкила; где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или более галогеном, которые являются одинаковыми или различными;

и где -L²-Z является таким, как определено в п. 1, и -L²-Z' является таким, как определено в п. 7.

10. Пролекарство РТН или его фармацевтически приемлемая соль по п. 1 или 7, где фрагмент -L¹- имеет формулу (IIb-ii')

где пунктирная линия обозначает присоединение к N-концевой аминовой функциональной группе фрагмента D путем образования амидной связи;

пунктирная линия, отмеченная звездочкой, означает присоединение к -L²-;

-R², -R^2a, -R^3a и X²- имеют значения, как определено в п. 1 или 7; и где -L¹- необязательно дополнительно замещена, при условии, что водород, отмеченный звездочкой в формуле (IIb-ii'), не замещен -L²-Z или -L²-Z' или заместителем;

причем указанные один или более дополнительные необязательные заместители выбраны из группы, состоящей из галогена, -CN, -COOR^x1, -OR^x1, -C(O)R^x1, -C(O)N(R^x1R^x1a), -S(O)₂N(R^x1R^x1a), -S(O)N(R^x1R^x1a), -S(O)₂R^x1, -S(O)R^x1, -N(R^x1)S(O)₂N(R^x1aR^x1b), -SR^x1, -N(R^x1R^x1a), -NO₂, -OC(O)R^x1, -N(R^x1)C(O)R^x1a, -N(R^x1)S(O)₂R^x1a, -N(R^x1)S(O)R^x1a, -N(R^x1)C(O)OR^x1a, -N(R^x1)C(O)N(R^x1aR^x1b), -OC(O)N(R^x1R^x1a), -T⁰, С_1-50 алкила, C_2-50 алкенила и C_2-50 алкинила; где -T⁰, C_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно замещены одним или более -R^x2, которые являются одинаковыми или различными, и где С_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно прерываются одной или более группами, выбранными из группы, состоящей из -Т⁰-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^x3)-, -S(O)₂N(R^x3)-, -S(O)N(R^x3)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^x3)S(O)₂N(R^x3a)-, -S-, -N(R^x3)-, -OC(OR^x3)(R^x3a)-, -N(R^x3)C(O)N(R^x3a)- и -OC(O)N(R^x3)-;

-R^x1, -R^x1a, -R^x1b независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из -Н, -Т⁰, С_1-50 алкила, С_2-50 алкенила и С_2-50 алкинила; где -Т⁰, C_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно замещены одним или более -R^x2, которые являются одинаковыми или различными, и где С_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно прерваны одной или более группами, выбранными из группы, состоящей из -Т⁰-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^x3)-, -S(O)₂N(R^x3)-, -S(O)N(R^x3)-; -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^x3)S(O)₂N(R^x3a)-, -S-, -N(R^x3)-, -OC(OR^x3)(R^x3a)-, -N(R^x3)C(O)N(R^x3a)- и -OC(O)N(R^x3)-;

каждый T⁰ независимо выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила, С_3-10 циклоалкила, 3-10-ти членного гетероциклила и 8-11-ти членного гетеробициклила; где каждый Т⁰ независимо необязательно замещен одним или более заместителями -R^x2, которые являются одинаковыми или различными;

каждый -R^x2 независимо выбран из группы, состоящей из галогена, -CN, оксо (=O), -COOR^x4, -OR^x4, -C(O)R^x4, -C(O)N(R^x4R^x4a), -S(O)₂N(R^x4R^x4a), -S(O)N(R^x4R^x4a), -S(O)₂R^x4, -S(O)R^x4, -N(R^x4)S(O)₂N(R^x4aR^x4b), -SR^x4, -N(R^x4R^x4a), -NO₂, -OC(O)R^x4, -N(R^x4)C(O)R^x4a, -N(R^x4)S(O)₂R^x4a, -N(R^x4)S(O)R^x4a, -N(R^x4)C(O)OR^x4a, -N(R^x4)C(O)N(R^x4aR^x4b), -OC(O)N(R^x4R^x4a) и C_1-6 алкила; где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или более галогеном, которые являются одинаковыми или различными;

каждый -R^x3, -R^x3a, -R^x4, -R^x4a, -R^x4b независимо выбран из группы, состоящей из -Н и C_1-6 алкила; где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или более галогеном, которые являются одинаковыми или различными;

и где -L²-Z является таким, как определено в п. 1, и -L²-Z' является таким, как определено в п. 7.

11. Пролекарство РТН или его фармацевтически приемлемая соль по п. 1 или 7, где фрагмент -L¹- имеет формулу (IIb-iii):

где пунктирная линия обозначает присоединение к N-концевой аминовой функциональной группе фрагмента D путем образования амидной связи; и

где -L¹- замещена -L²-Z или L²-Z' и где -L¹- необязательно дополнительно замещена, при условии, что водород, отмеченный звездочкой в формуле (IIb-iii), не замещен -L²-Z или L²-Z' или заместителем;

где указанные один или более дополнительные необязательные заместители выбраны из группы, состоящей из галогена, -CN, -COOR^x1, -OR^x1, -C(O)R^x1, -C(O)N(R^x1R^x1a), -S(O)₂N(R^x1R^x1a), -S(O)N(R^x1R^x1a), -S(O)₂R^x1, -S(O)R^x1, -N(R^x1)S(O)₂N(R^x1aR^x1b), -SR^x1, -N(R^x1R^x1a), -NO₂, -OC(O)R^x1, -N(R^x1)C(O)R^x1a, -N(R^x1)S(O)₂R^x1a, -N(R^x1)S(O)R^x1a, -N(R^x1)C(O)OR^x1a, -N(R^x1)C(O)N(R^x1aR^x1b), -OC(O)N(R^x1R^x1a), -T⁰, С_1-50 алкила, С_2-50 алкенила и С_2-50 алкинила; где -Т⁰, С_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно замещены одним или более -R^x2, которые являются одинаковыми или различными, и где С_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно прерываются одной или более группами, выбранными из группы, состоящей из -Т⁰-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^x3)-, -S(O)₂N(R^x3)-, -S(O)N(R^x3)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^x3)S(O)₂N(R^x3a)-, -S-, -N(R^x3)-, -OC(OR^x3)(R^x3a)-, -N(R^x3)C(O)N(R^x3a)- и -OC(O)N(R^x3)-;

-R^x1, -R^x1a, -R^x1b независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из -Н, -Т⁰, С_1-50 алкила, С_2-50 алкенила и С_2-50 алкинила; где -Т⁰, С_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно замещены одним или более -R^x2, которые являются одинаковыми или различными, и где C_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно прерваны одной или более группами, выбранными из группы, состоящей из -Т⁰-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^x3)-, -S(O)₂N(R^x3)-, -S(O)N(R^x3)-; -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^x3)S(O)₂N(R^x3a)-, -S-, -N(R^x3)-, -OC(OR^x3)(R^x3a)-, -N(R^x3)C(O)N(R^x3a)- и -OC(O)N(R^x3)-;

каждый T⁰ независимо выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила, С_3-10 циклоалкила, 3-10-ти членного гетероциклила и 8-11-ти членного гетеробициклила; где каждый Т⁰ независимо необязательно замещен одним или более заместителями -R^x2, которые являются одинаковыми или различными;

каждый -R^x2 независимо выбран из группы, состоящей из галогена, -CN, оксо (=O), -COOR^x4, -OR^x4, -C(O)R^x4, -C(O)N(R^x4R^x4a), -S(O)₂N(R^x4R^x4a), -S(O)N(R^x4R^x4a), -S(O)₂R^x4, -S(O)R^x4, -N(R^x4)S(O)₂N(R^x4aR^x4b), -SR^x4, -N(R^x4R^x4a), -NO₂, -OC(O)R^x4, -N(R^x4)C(O)R^x4a, -N(R^x4)S(O)₂R^x4a, -N(R^x4)S(O)R^x4a, -N(R^x4)C(O)OR^x4a, -N(R^x4)C(O)N(R^x4aR^x4b), -OC(O)N(R^x4R^x4a) и C_1-6 алкила; где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или более заместителями галоген, которые являются одинаковыми или различными;

каждый -R^x3, -R^x3a, -R^x4, -R^x4a, -R^x4b независимо выбран из группы, состоящей из -Н и C_1-6 алкила; где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или более галогеном, которые являются одинаковыми или различными;

и где -L²-Z является таким, как определено в п. 1, и -L²-Z' является таким, как определено в п. 7.

12. Пролекарство РТН или его фармацевтически приемлемая соль по п. 1 или 7, где фрагмент -L¹- имеет формулу (IIb-iii')

где пунктирная линия обозначает присоединение к N-концевой аминовой функциональной группе фрагмента D путем образования амидной связи; и

пунктирная линия, отмеченная звездочкой, означает присоединение к -L²-;

где -L¹- необязательно дополнительно замещена, при условии, что водород, отмеченный звездочкой в формуле (IIb-iii'), не замещен заместителем;

где указанные один или более дополнительные необязательные заместители выбраны из группы, состоящей из галогена, -CN, -COOR^x1, -OR^x1, -C(O)R^x1, -C(O)N(R^x1R^x1a), -S(O)₂N(R^x1R^x1a), -S(O)N(R^x1R^x1a), -S(O)₂R^x1, -S(O)R^x1, -N(R^x1)S(O)₂N(R^x1aR^x1b), -SR^x1, -N(R^x1R^x1a), -NO₂, -OC(O)R^x1, -N(R^x1)C(O)R^x1a, -N(R^x1)S(O)₂R^x1a, -N(R^x1)S(O)R^x1a, -N(R^x1)C(O)OR^x1a, -N(R^x1)C(O)N(R^x1aR^x1b), -OC(O)N(R^x1R^x1a), -T⁰, С_1-50 алкила, C_2-50 алкенила и C_2-50 алкинила; где -Т⁰, С_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно замещены одним или более -R^x2, которые являются одинаковыми или различными, и где С_1-50 алкил, C_2-50 алкенил и C_2-50 алкинил необязательно прерываются одной или более группами, выбранными из группы, состоящей из -Т⁰-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^x3)-, -S(O)₂N(R^x3)-, -S(O)N(R^x3)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^x3)S(O)₂N(R^x3a)-, -S-, -N(R^x3)-, -OC(OR^x3)(R^x3a)-, -N(R^x3)C(O)N(R^x3a)- и -OC(O)N(R^x3)-;

-R^x1, -R^x1a, -R^x1b независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из -Н, -Т⁰, C_1-50 алкила, С_2-50 алкенила и С_2-50 алкинила; где -Т⁰, С_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно замещены одним или более заместителями -R^x2, которые являются одинаковыми или различными, и где С_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно прерваны одной или более группами, выбранными из группы, состоящей из -Т⁰-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^x3)-, -S(O)₂N(R^x3)-, -S(O)N(R^x3)-; -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^x3)S(O)₂N(R^x3a)-, -S-, -N(R^x3)-, -OC(OR^x3)(R^x3a)-, -N(R^x3)C(O)N(R^x3a)- и -OC(O)N(R^x3)-;

каждый T⁰ независимо выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила, С_3-10 циклоалкила, 3-10-ти членного гетероциклила и 8-11-ти членного гетеробициклила; где каждый Т⁰ независимо необязательно замещен одним или более заместителями -R^x2, которые являются одинаковыми или различными;

каждый -R^x2 независимо выбран из группы, состоящей из галогена, -CN, оксо (=O), -COOR^x4, -OR^x4, -C(O)R^x4, -C(O)N(R^x4R^x4a), -S(O)₂N(R^x4R^x4a), -S(O)N(R^x4R^x4a), -S(O)₂R^x4, -S(O)R^x4, -N(R^x4)S(O)₂N(R^x4aR^x4b), -SR^x4, -N(R^x4R^x4a), -NO₂, -OC(O)R^x4, -N(R^x4)C(O)R^x4a, -N(R^x4)S(O)₂R^x4a, -N(R^x4)S(O)R^x4a, -N(R^x4)C(O)OR^x4a, -N(R^x4)C(O)N(R^x4aR^x4b), -OC(O)N(R^x4R^x4a) и C_1-6 алкила; где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или более заместителями галоген, которые являются одинаковыми или различными;

каждый -R^x3, -R^x3a, -R^x4, -R^x4a, -R^x4b независимо выбран из группы, состоящей из -Н и C_1-6 алкила; где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или более галогеном, которые являются одинаковыми или различными;

и где -L²-Z является таким, как определено в п. 1, и -L²-Z' является таким, как определено в п. 7.

13. Пролекарство РТН или его фармацевтически приемлемая соль по п. 1 или 7, где -L²- имеет формулу (i)

где пунктирная линия, отмеченная звездочкой, означает присоединение к -L¹-;

неотмеченная пунктирная линия обозначает присоединение к -Z или Z';

где Z имеет значения, как определено в п. 1, и Z' имеет значения, как определено в п. 7;

n выбран из группы, состоящей из 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 и 18; и

где фрагмент формулы (i) необязательно дополнительно замещен;

где указанные один или более дополнительные необязательные заместители выбраны из группы, состоящей из галогена, -CN, -COOR^x1, -OR^x1, -C(O)R^x1, -C(O)N(R^x1R^x1a), -S(O)₂N(R^x1R^x1a), -S(O)N(R^x1R^x1a), -S(O)₂R^x1, -S(O)R^x1, -N(R^x1)S(O)₂N(R^x1aR^x1b), -SR^x1, -N(R^x1R^x1a), -NO₂, -OC(O)R^x1, -N(R^x1)C(O)R^x1a, -N(R^x1)S(O)₂R^x1a, -N(R^x1)S(O)R^x1a, -N(R^x1)C(O)OR^x1a, -N(R^x1)C(O)N(R^x1aR^x1b), -OC(O)N(R^x1R^x1a), -T⁰, C_1-50 алкила, C_2-50 алкенила и C_2-50 алкинила; где -T⁰, C_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно замещены одним или более -R^x2, которые являются одинаковыми или различными, и где C_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно прерываются одной или более группами, выбранными из группы, состоящей из -Т⁰-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^x3)-, -S(O)₂N(R^x3)-, -S(O)N(R^x3)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^x3)S(O)₂N(R^x3a)-, -S-, -N(R^x3)-, -OC(OR^x3)(R^x3a)-, -N(R^x3)C(O)N(R^x3a)- и -OC(O)N(R^x3)-;

-R^x1, -R^x1a, -R^x1b независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из -Н, -Т⁰, С_1-50 алкила, С_2-50 алкенила и С_2-50 алкинила; где -Т⁰, С_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно замещены одним или более -R^x2, которые являются одинаковыми или различными, и где C_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно прерваны одной или более группами, выбранными из группы, состоящей из -Т⁰-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^x3)-, -S(O)₂N(R^x3)-, -S(O)N(R^x3)-; -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^x3)S(O)₂N(R^x3a)-, -S-, -N(R^x3)-, -OC(OR^x3)(R^x3a)-, -N(R^x3)C(O)N(R^x3a)- и -OC(O)N(R^x3)-;

каждый T⁰ независимо выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила, С_3-10 циклоалкила, 3-10-ти членного гетероциклила и 8-11-ти членного гетеробициклила; где каждый Т⁰ независимо необязательно замещен одним или более заместителями -R^x2, которые являются одинаковыми или различными;

каждый -R^x2 независимо выбран из группы, состоящей из галогена, -CN, оксо (=O), -COOR^x4, -OR^x4, -C(O)R^x4, -C(O)N(R^x4R^x4a), -S(O)₂N(R^x4R^x4a), -S(O)N(R^x4R^x4a), -S(O)₂R^x4, -S(O)R^x4, -N(R^x4)S(O)₂N(R^x4aR^x4b), -SR^x4, -N(R^x4R^x4a), -NO₂, -OC(O)R^x4, -N(R^x4)C(O)R^x4a, -N(R^x4)S(O)₂R^x4a, -N(R^x4)S(O)R^x4a, -N(R^x4)C(O)OR^x4a, -N(R^x4)C(O)N(R^x4aR^x4b), -OC(O)N(R^x4R^x4a) и C_1-6 алкила; где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или более галогеном, которые являются одинаковыми или различными;

каждый -R^x3, -R^x3a, -R^x4, -R^x4a, -R^x4b независимо выбран из группы, состоящей из -Н и C_1-6 алкила; где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или более галогеном, которые являются одинаковыми или различными.

14. Пролекарство РТН или его фармацевтически приемлемая соль по п. 13, где n равно 6.

15. Пролекарство РТН или его фармацевтически приемлемая соль по п. 1 или 7, где фрагмент -L¹-L²- выбран из группы, состоящей из

где неотмеченная пунктирная линия обозначает присоединение к N-концевой аминовой функциональной группе фрагмента D путем образования амидной связи; и

пунктирная линия, отмеченная звездочкой, означает присоединение к -Z или -Z';

где Z имеет значения, как определено в п. 1, и Z' имеет значения, как определено в п. 7.

16. Фармацевтическая композиция, обладающая активностью РТН, состоящая из по меньшей мере одного пролекарства РТН или его фармацевтически приемлемой соли в терапевтически эффективном количестве по любому из пп. 1-15 и по меньшей мере одного эксципиента.

17. Фармацевтическая композиция по п. 16, где фармацевтическая композиция имеет значение рН в интервале и включая от рН 4 до рН 6.

18. Применение пролекарства РТН или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп. 1-15 или фармацевтической композиции по п. 16 или 17 в качестве лекарственного средства, обладающего активностью РТН.

19. Применение пролекарства РТН или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп. 1-15 или фармацевтической композиции по п. 16 или 17 для лечения гипопаратиреоидизма.

20. Применение по п. 19, где пролекарство РТН или его фармацевтически приемлемую соль или фармацевтическую композицию вводят посредством подкожной инъекции.

21. Применение пролекарства РТН или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп. 1-15 или фармацевтической композиции по п. 16 или 17 для получения лекарственного средства для лечения гипопаратиреоидизма.

22. Способ введения пролекарства РТН или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп. 1-15 или фармацевтической композиции по п. 16 или 17, где способ включает стадию введения РТН пролекарства, его фармацевтически приемлемой соли или фармацевтической композиции посредством местного, энтерального или парентерального введения и способами внешнего применения, инъекции или инфузии, включая внутрисуставные, периартикулярные, внутрикожные, подкожные, внутримышечные, внутривенные, внутрикостные, внутрибрюшинные, интратекальные, внутрикапсульные, внутриглазничные, интравитреальные, интратимпанальные, внутрипузырные, внутрисердечные, транстрахеальные, субкутикулярные, подкапсулярные, субарахноидальные, интраспинальные, внутрижелудочковые, интрастернальные инъекции или инфузии, интраназального, перорального, транспульмонального и трансдермального введения, непосредственной доставки в мозг через имплантированное устройство, позволяющее доставку изобретения или тому подобного в ткань головного мозга или мозговые текучие среды, прямой интрацеребровентрикулярной инъекции или инфузии, инъекции или инфузии в мозг или области, связанные с мозгом, инъекции в супрахориоидальное пространство, ретро-орбитальной инъекции или глазной инстилляции.