СУХИЕ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ СОСТАВЫ КОНЪЮГАТА CNP Российский патент 2024 года по МПК A61K9/14 A61K38/22 A61K47/12 A61K47/18 A61K47/26 A61K47/60 A61P19/08 

Настоящее изобретение относится к сухим фармацевтическим составам, содержащим конъюгат CNP, буферный агент и агент-наполнитель.

Ахондроплазия (АСН) представляет собой генетическое нарушение, которое возникает из-за аутосомно-доминантной мутации в гене рецептора фактора роста фибробластов 3 (FGFR3), которая вызывает аномалию образования хряща и приводит к карликовости. Натрийуретический пептид С-типа (CNP) представляет собой гормон, который связывает и активирует пептидный рецептор В (NPR-B), что приводит к ингибированию передачи сигналов FGFR3 ниже по ходу сигнала. Это, в свою очередь, запускает эндохондральный рост и разрастание скелета, что наблюдается у мышей и людей со сверхэкспрессией CNP. Избыточная продукция CNP в хряще или непрерывная доставка CNP посредством внутривенной (iv) инфузии нормализует карликовость ахондроплазических мышей, что позволяет предположить, что введение CNP на супрафизиологических уровнях является стратегией лечения АСН.

Препро-CNP человека, который содержит 126 аминокислот, дополнительно расщепляется фурином с образованием CNP-53. CNP-53 обладает биологической активностью, но обычно по неизвестному механизму превращается в биологически активные 22 аминокислоты в циркулирующей форме, то есть CNP-22. Биологическая активность CNP строго регулируется, и его выведение из плазмы происходит очень быстро. Следовательно, учитывая короткий период полувыведения CNP in vivo (2 мин после внутривенного введения), его использование в качестве терапевтического агента является проблематичным в педиатрической популяции, поскольку для этого потребуется непрерывная инфузия.

Были изучены различные подходы к увеличению периода полувыведения CNP in vivo. Например, Lorget et al. (Am. J. Hum. Genet. 91, 1108-1114, 2012) раскрывает рекомбинантный CNP-39 (также известный как BMN111), состоящий из 37 С-концевых аминокислот человеческого CNP-53 плюс глицин и пролин, добавленные на N-конце пептида, что имитирует фармакологическую активность CNP человека. Хотя BMN111 более устойчив к расщеплению NEP, его период полувыведения составляет всего 20 минут, и, таким образом, ежедневное дозирование связано с короткой продолжительностью воздействия эффективных уровней лекарственного средства.

Расширение возможностей увеличения периода полувыведения CNP in vivo на основе конъюгации с водорастворимыми фрагментами-носителями, такими как ПЭГ, через обратимые пролекарственные линкеры было исследовано в WO 2016/110577 A1, WO 2017/118693 A1, WO 2017/118698 A1, WO 2017/118700 A1, WO 2017/118703 A1, WO 2017/118704 A1 и WO 2017/118707 A1. Однако никакой информации о составах, которые позволяют стабильно хранить эти обратимые конъюгаты, не предоставлено.

Фармацевтические составы таких конъюгированных CNP, где полимер присоединен к CNP через обратимую связь, должны обеспечивать достаточную стабильность конъюгата CNP во избежание преждевременного высвобождения CNP во время хранения. В случае, если обратимая связь между полимером и CNP разрушается во время хранения, концентрация легкодоступного лекарственного средства увеличивается, и это может привести к риску передозировки при введении, что может привести к гипотензии.

Кроме того, любое лекарственное средство, высвобождающееся во время хранения, подвергается быстрому почечному выведению при введению пациенту, и, следовательно, время, в течение которого композиция длительного действия обеспечивает терапевтически релевантные количества лекарственного средства, сокращается. Это создает риск неудовлетворенных медицинских потребностей.

Кроме того, известно, что CNP или его варианты, конъюгаты или производные могут подвергаться реакциям разложения во время хранения, что может привести к образованию повреждений пептидов в соответствующем составе, таких как:

• продукты разложения в результате окисления остатков метионина (Met/M) до сульфоксида метионина и сульфона метионина,

• продукты разложения, возникающие в результате изомеризации аспарагиновой кислоты или остатков аспартата (Asp/D), до изоаспарагиновой кислоты или изоаспартата, например, через промежуточное соединение сукцинимида,

• продукты разложения, возникающие в результате деамидирования остатков аспарагина (Asn/N) до аспарагиновой кислоты или аспартата и/или до изоаспарагиновой кислоты или изоаспартата, например, через промежуточное соединение сукцинимида,

• продукты разложения, возникающие в результате деамидирования остатков глутамина (GWQ) до глутаминовой кислоты или изоглютаминовой кислоты, например, через промежуточное соединение глутаримида,

• продукты разложения, возникающие в результате изомеризации глутаминовой кислоты или остатков глутамата (Glu/Е), в изоглутаминовую кислоту или изоглютамат через промежуточное соединение глутаримида, и

• агрегаты в результате агрегации пептида.

Поскольку вышеупомянутые продукты разложения или олигомеры, которые могут образовываться во время хранения, могут ухудшать биоактивность фрагмента CNP, поэтому желательно минимизировать их образование. Более того, обратимая связь между фрагментом CNP и полимерной частью затрудняет хранение фармацевтического состава, содержащего конъюгат CNP.

Поэтому важно найти подходящие составы, конъюгата CNP, содержащие CNP, ковалентно связанные через обратимый линкер с полимерным фрагментом, где пептид будет демонстрировать приемлемый профиль примесей и ограниченное преждевременное высвобождение CNP даже после длительного хранения.

Таким образом, задача согласно настоящему изобретению состоит в том, чтобы по меньшей мере частично преодолеть недостатки, описанные выше.

Эта задача решается с помощью сухого фармацевтического состава, где сухой фармацевтический состав содержит конъюгат CNP, буферный агент и агент-наполнитель, и где конъюгат CNP содержит фрагмент CNP, который ковалентно и обратимо конъюгирован с полимерным фрагментом.

Неожиданно было обнаружено, что сухой фармацевтический состав согласно настоящему изобретению допускает стабильное длительное хранение.

Термины в контексте настоящего изобретения имеют следующие значения.

Как применяется в настоящей заявке термин "около" в комбинации с числовым значением применяется для указания на диапазон в интервале и включая числовое значение плюс и минус не более 10% от указанного числового значения, более предпочтительно не более 8% от указанного значения, даже более предпочтительно не более 5% от указанного значения и наиболее предпочтительно не более 2% от указанного значения. Например, фраза "около 200" применяется для обозначения диапазона в интервале и включая 200 +/- 10%, т.е. в интервале и включая 180 - 220; предпочтительно 200 +/- 8%, т.е. в интервале и включая 184 - 216; даже более предпочтительно в интервале и включая 200 +/- 5%, т.е. в интервале и включая 190 - 210; и наиболее предпочтительно 200 +/- 2%, т.е. в интервале и включая 196 - 204. Понятно, что процент, приведенный как "около 20%" не означает "20% +/- 10%", т.е. в интервале и включая 10 - 30%, но "около 20%" означает в интервале и включая 18 - 22%, т.е. плюс и минус 10% от числового значения, которое равно 20.

Как используется в настоящем документе, термин «противомикробный» относится к химическому веществу, такому как химическое вещество, которое убивает или подавляет рост микроорганизмов, таких как бактерии, грибы, дрожжи, простейшие, плесень и/или уничтожает вирусы.

Как применяется в настоящем документе, термин «антиадсорбционные агенты» относится в основном к ионным или неионным поверхностно-активным веществам, белкам или растворимым полимерам, используемым для покрытия или конкурентной адсорбции на внутренней поверхности контейнера, содержащего состав. Выбранная концентрация и тип наполнителя зависят от эффекта, которого следует избегать, но обычно монослой поверхностно-активного вещества образуется на границе раздела чуть выше критической концентрации мицеллообразования (CMC).

Как используется в настоящем документе, термин «агент-наполнитель» относится к химическому соединению, которое придает структуру сухому или лиофилизированному составу. Агент-наполнители добавляют в состав для увеличения общей массы сухого или лиофилизированного состава. В дополнение к обеспечению фармацевтически приемлемого состава агенты-наполнители могут также изменять температуру коллапса, чтобы изменить условия процесса лиофилизации и дополнительно повысить стабильность пептида при длительном хранении. Следовательно, во время сушки смеси, содержащей агент-наполнитель, агент-наполнитель может служить лиопротектором. После восстановления сухой фармацевтический состав в восстановленный фармацевтической состав агент-наполнитель может служить в качестве агента, регулирующего изотоничность.

Как применяется в настоящем документе, термин «буфер» или «буферный агент» относится к химическому соединению, которое поддерживает рН в желаемом диапазоне. К физиологически приемлемым буферам относятся, например, фосфат натрия, сукцинат, гистидин, бикарбонат, цитрат, ацетат, сульфат, нитрат, хлорид и пируват. Также можно использовать антациды, такие как Mg(OH)₂ или ZnCO₃.

Как применяется в настоящем документе, термин «CNP» относится ко всем полипептидам CNP согласно определенному варианту осуществления из видов млекопитающих, таких как виды человека и млекопитающих, в частности из видов человека и мыши, а также их вариантов, аналогов, ортологов, гомологов и производных и их фрагментов, которые регулируют рост, пролиферацию и дифференцировку хондроцитов хрящевой пластинки роста. Термин "CNP" также включает все варианты, аналоги, ортологи, гомологи и производные CNP и их фрагменты, как описано в WO 2009/067639 А2 и WO 2010/135541 А2, которые включены в настоящую заявку посредством ссылки.

Как применяется в настоящей заявке, термин "вариант полипептида CNP" относится к полипептиду из того же самого вида, который отличается от ссылочного полипептида CNP. В общем, различия ограничены таким образом, что аминокислотные последовательности ссылочного полипептида и варианта в общем очень подобны и, во многих областях, идентичны. Предпочтительно, варианты полипептида CNP на по меньшей мере 70%, 80%, 90%, или 95% идентичны ссылочному полипептиду CNP. Под полипептидном, имеющим аминокислотную последовательность на по меньшей мере, например, 95% "идентичную" рассматриваемой аминокислотной последовательности понимается, что аминокислотная последовательность данного полипептида идентична рассматриваемой последовательности, за исключением того, что данная полипептидная последовательность может включать вплоть до пяти аминокислотных изменений на каждые 100 аминокислот рассматриваемой аминокислотной последовательности. Эти замены в ссылочной последовательности могут происходить при амино (N-терминальное) или карбокси концевых (С-терминальное) положениях ссылочной аминокислотной последовательности или в любом мести между этими концевыми положениями, распределяясь либо по отдельности среди остатков в ссылочной последовательности, либо в виде одной или более соприкасающихся групп в ссылочной последовательности. Рассматриваемая последовательность может быть либо полностью аминокислотной последовательностью ссылочной последовательности, либо любым фрагментом, уточненным как описано в настоящей заявке. Такие варианты полипептида CNP могут быть вариантами, встречающимися в природе, как например встречающиеся в природе аллельные варианты, кодируемые одной из нескольких альтернативных форм CNP, занимающих данный локус на хромосоме или организме, или изоформы, кодируемые встречающимися в природе вариантами сплайсинга, происходящими из одного первичного транскрипта. Альтернативно вариант полипептида CNP может быть вариантом, который, как известно, не встречается в природе, и который может быть получен методиками мутагенеза, известными в данной области техники. В данной области известно, что одна или более аминокислот могут быть удалены с N-конца и/или С-конца биоактивного пептида или белка без существенной потери биологической функции. Такие N- и/или С-концевые делеции также охватываются термином вариант полипептида CNP.

Специалистам в данной области техники также известно, что некоторые аминокислотные последовательности полипептидов CNP могут быть изменены без значительного влияния структуры или функции пептида. Такие мутанты включают делеции, вставки, инверсии, повторы и замены, выбранные в соответствии с общими правилами, известными в данной области техники, чтобы иметь небольшой эффект на активность. Например, указания относительно того, как сделать фенотипически молчащие аминокислота замены, приведены в Bowie et al. (1990), Science 247:1306-1310, который полностью включен в настоящее описание посредством ссылки, где авторы указывают, что существуют два основных подхода к изучению толерантности аминокислотной последовательности к изменению.

Как применяется в настоящей заявке, термин "аналог CNP" относится к CNP различных и не связанных между собой организмов, которые выполняют одни и те же функции в каждом организме, но которые не происходят из родовой структуры, которую имели предки организмов. Вместо этого аналогичные CNP возникали отдельно, а затем эволюционировали для выполнения одних и тех же или подобных функций. Другими словами, аналогичные полипептиды CNP представляют собой полипептиды с совершенно различными аминокислотными последовательностями, но которые имеют одну и ту же биологическую активность, а именно регулируют рост, пролиферацию и дифференциацию хондроцитов пластины роста хрящ.

Как применяется в настоящей заявке термин "отртолог CNP" относится к CNP двух различных видов, последовательности которых связаны друг с другом через общий гомологичный CNP в родоначальном виде, но которые в ходе эволюции стали отличными друг от друга.

Как применяется в настоящей заявке, термин "гомолог CNP" относится к CNP различных организмов, которые осуществляют одну и ту же функцию в каждом организме и которые происходят из родоначальной структуры, которую в общем имели предки организмов. Другими словами, гомологичные CNP полипептиды представляют собой полипептиды с совершенно подобными аминокислотными последовательностями, которые имеют одну и ту же биологическую активность, а именно регулируют рост, пролиферацию и дифференциацию хондроцитов пластины роста хряща. Предпочтительно, гомологи полипептида CNP могут определяться как полипептиды, имеющие идентичность по меньшей мере 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% или 95% со ссылочным полипептидом CNP.

Таким образом, полипептидом CNP в соответствии с настоящим изобретением может быть, например: (i) полипептид, в котором по меньшей мере один из аминокислотных остатков имеет в качестве заместителя консервативный или неконсервированный аминокислотный остаток, предпочтительно консервативный аминокислотный остаток, и такой замещенный аминокислотный остаток может или не может быть кодирован генетическим кодом; и/или (ii) полипептид, в котором по меньшей мере один из аминокислотных остатков включает группу заместителя; и/или (iii) полипептид, где полипептид CNP слит с другим соединением, как например соединение для увеличения периода полувыведения полипептида (например, полиэтилэтенгликоль); и/или (iv) полипептид, в котором дополнительные аминокислоты слиты с полипептидом CNP, как например, пептидная или лидерная или секреторная последовательность области слияния IgG Fc или последовательность, которая используется для очистки вышеуказанной формы полипептида, или последовательность белка-предшественника.

Как применяется в настоящей заявке, термин "фрагмент полипептида CNP" относится к любому пептиду, содержащему последовательный промежуток части аминокислотной последовательности CNP полипептида.

Более конкретно, фрагмент полипептида CNP содержит по меньшей мере 6, как например по меньшей мере 8, по меньшей мере 10 или по меньшей мере 17 последовательных аминокислот CNP полипептида. Фрагмент полипептида CNP может быть дополнительно описан как подвид CNP полипептидов, содержащих по меньшей мере 6 аминокислот, где "по меньшей мере 6" определяется как целое число между 6 и целым числом, обозначающим С-концевую аминокислоту CNP полипептида. Также включены виды фрагментов полипептида CNP из по меньшей мере 6 аминокислот в длину, как описано выше, которые дополнительно уточнены с точки зрения их N-концевых и С- концевых положений. Также термином "фрагмент полипептида CNP" охватываются в качестве отдельных видов все фрагменты полипептида CNP из по меньшей мере 6 аминокислот в длину, как описано выше, которые могут быть в частности уточнены их N-концевым и С-концевым положением. То есть, каждая комбинация N-концевого и С-концевого положения, которые фрагмент из по меньшей мере 6 последовательных аминокислотных остатков в длину может занимать, на любой данной аминокислотной последовательности CNP полипептида.

Поскольку термин CNP включает вышеописанные варианты, аналоги, ортологи, гомологи, производные и фрагменты CNP, все ссылки на конкретные положения в ссылочной последовательности также включают эквивалентные положения в вариантах, аналогах, ортологах, гомологах, производных и фрагментах CNP, даже если специально не указано.

CNP-22 (SEQ ID NO: 1) природного происхождения имеет следующую последовательность:

GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

где цистеины в положении 6 и 22 соединены дисульфидным мостиком.

Согласно определенным вариантам осуществления термин "CNP" также относится к следующим пептидным последовательностям:

SEQ ID NO: 2 (CNP-53):

DLRVDTKSRAAWARLLQEHPNARKYKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 3 (G-CNP-53):

GDLRVDTKSRAAWARLLQEHPNARKYKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 4 (M-CNP-53):

MDLRVDTKSRAAWARLLQEHPNARKYKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 5 (P-CNP-53):

PDLRVDTKSRAAWARLLQEHPNARKYKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 6 (CNP-53 M48N):

DLRVDTKSRAAWARLLQEHPNARKYKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSNSGLGC,

SEQ ID NO: 7 (CNP-53 Δ15-31):

DLRVDTKSRAAWARGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 8 (CNP-52):

LRVDTKSRAAWARLLQEHPNARKYKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO:9 (CNP-51):

RVDTKSRAAWARLLQEHPNARKYKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO:10 (CNP-50):

VDTKSRAAWARLLQEHPNARKYKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 11 (CNP-49):

DTKSRAAWARLLQEHPNARKYKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO:12 (CNP-48):

TKSRAAWARLLQEHPNARKYKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO:13 (CNP-47):

KSRAAWARLLQEHPNARKYKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO:14 (CNP-46):

SRAAWARLLQEHPNARKYKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO:15 (CNP-45):

RAAWARLLQEHPNARKYKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO:16 (CNP-44):

AAWARLLQEHPNARKYKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 17 (CNP-44 Δ14-22):

AAWARLLQEHPNAGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 18 (CNP-44 Δ15-22):

AAWARLLQEHPNARGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO:19 (CNP-43):

AWARLLQEHPNARKYKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 20 (CNP-42):

WARLLQEHPNARKYKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 21 (CNP-41):

ARLLQEHPNARKYKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 22 (CNP-40):

RLLQEHPNARKYKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 23 (CNP-39):

LLQEHPNARKYKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 24 (CNP-38):

LQEHPNARKYKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

где цистеины в положении 22 и 38 соединены дисульфидным мостиком,

SEQ ID NO: 25 (CNP-37):

QEHPNARKYKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 26 (CNP-37 Q1pQ, где pQ = пироглютамат):

pQEHPNARKYKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 27 (G-CNP-37):

GQEHPNARKYKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 28 (P-CNP-37):

PQEHPNARKYKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 29 (M-CNP-37):

MQEHPNARKYKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 30 (PG-CNP-37):

PGQEHPNARKYKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 31 (MG-CNP-37):

MGQEHPNARKYKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 32 (CNP-37 M32N):

QEHPNARKYKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSNSGLGC,

SEQ ID NO: 33 (G-CNP-37 M32N):

GQEHPNARKYKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSNSGLGC,

SEQ ID NO: 34 (G-CNP-37 K14Q):

GQEHPNARKYKGANQKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 35 (G-CNP-37 K14P):

GQEHPNARKYKGANPKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 36 (G-CNP-37 K14Q, Δ15):

GQEHPNARKYKGANQGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 37 (G-CNP-37 K14Q, K15Q):

GQEHPNARKYKGANQQGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 38 (CNP-36):

EHPNARKYKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 39 (CNP-35):

HPNARKYKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 40 (CNP-34):

PNARKYKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 41 (CNP-33):

NARKYKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 42 (CNP-32):

ARKYKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 43 (CNP-31):

RKYKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 44 (CNP-30):

KYKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 45 (CNP-29):

YKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 46 (CNP-28):

KGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 47 (GHKSEVAHRF-CNP-28):

GHKSEVAHRFKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 48 (CNP-27):

GANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 49 (CNP-27 K4Q, K5Q):

GANQQGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 50 (CNP-27 K4R, K5R):

GANRRGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 51 (CNP-27 K4P, K5R):

GANPRGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 52 (CNP-27 K4S, K5S):

GANSSGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 53 (CNP-27 K4P, K5R):

GANGANPRGLSRGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 54 (CNP-27 K4R, K5R, K9R):

GANRRGLSRGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 55 (CNP-27 K4R, K5R, K9R, M22N):

GANRRGLSRGCFGLKLDRIGSNSGLGC,

SEQ ID NO: 56 (P-CNP-27 K4R, K5R, K9R):

PGANRRGLSRGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 57 (M-CNP-27 K4R, K5R, K9R):

MGANRRGLSRGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 58 (HSA фрагмент-CNP-27):

GHKSEVAHRFKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLG,

SEQ ID NO: 59 (HSA фрагмент-CNP-27 M22N):

GHKSEVAHRFKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSNSGLGC,

SEQ ID NO: 60 (M-HSA фрагмент-CNP-27):

MGHKSEVAHRFKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 61 (P-HSA фрагмент-CNP-27):

PGHKSEVAHRFKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 62 (CNP-26):

ANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 63 (CNP-25):

NKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 64 (CNP-24):

KKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 65 (CNP-23):

KGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 66 (R-CNP-22):

RGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 67 (ER-CNP-22):

ERGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 68 (R-CNP-22 K4R):

RGLSRGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 69 (ER-CNP-22 4KR):

ERGLSRGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 70 (RR-CNP-22):

RRGLSRGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 71 (HRGP фрагмент-CNP-22):

GHHSHEQHPHGANQQGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 72 (HRGP фрагмент-CNP-22):

GAHHPHEHDTHGANQQGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 73 (HRGP фрагмент-CNP-22):

GHHSHEQHPHGANPRGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 74 (IgG₁(F_c) фрагмент-CNP-22):

GQPREPQVYTLPPSGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 75 (HSA фрагмент-CNP-22):

GQHKDDNPNLPRGANPRGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 76 (HSA фрагмент-CNP-22):

GERAFKAWAVARLSQGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 77 (остеокрин NPR С фрагмент ингибитора -CNP22):

FGIPMDRIGRNPRGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 78 (FGF2 гепарин-связывающий домен фрагмент -CNP22):

GKRTGQYKLGSKTGPGPKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 79 (IgG₁(F_c)фрагмент-CNP-22 K4R):

GQPREPQVYTGANQQGLSRGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 80 (HSA фрагмент-CNP-22 K4R):

GVPQVSTSTGANQQGLSRGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 81 (фибронектиновый фрагмент -CNP-22 K4R):

GQPSSSSQSTGANQQGLSRGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 82 (фибронектиновый фрагмент -CNP-22 K4R):

GQTHSSGTQSGANQQGLSRGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 83 (фибронектиновый фрагмент -CNP-22 K4R):

GSTGQWHSESGANQQGLSRGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 84 (фрагмент цинкового пальца -CNP-22 K4R):

GSSSSSSSSSGANQQGLSRGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 85 (CNP-21):

LSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 86 (CNP-20):

SKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 87 (CNP-19):

KGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 88 (CNP-18):

GCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 89 (CNP-17):

CFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 90 (BNP фрагмент-CNP-17-BNP фрагмент):

SPKMVQGSGCFGLKLDRIGSMSGLGCKVLRRH,

SEQ ID NO: 91 (CNP-38 L1G):

GQEHPNARKYKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 92 (Ac-CNP-37, где Ас = ацетил):

Ac-QEHPNARKYKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

SEQ ID NO: 93:

QEHPNARX₁YX₂GANX₃X₄GLSX₅GCFGLX₆LDRIGSMSGLGC,

где X₁, Х₂, Х₃, X₄, X₅ и Х₆ независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из K; R, P, S и Q, при условии, что по меньшей мере один из X₁, X₂, Х₃, X₄, X₅ и Х₆ выбран из группы, состоящей из R, P, S и О, согласно определенным вариантам осуществления X₁, X₂, Х₃, X₄, X₅ и Х₆ выбраны из группы, состоящей из K и R, при условии, что по меньшей мере один из X₁, X₂, Х₃, X₄, Х₅ и Х₆ представляет собой R,

SEQ ID NO: 94:

QEHPNARKYKGANX₁X₂GLSX₃GCFGLX₄LDRIGSMSGLGC,

где X₁, X₂, Х₃ и X₄ независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из K, R, P, S и Q, при условии, что по меньшей мере один из X₁, X₂, Х₃ и X₄ выбран из группы, состоящей из R, P, S и Q, согласно определенным вариантам осуществления X₁, X₂, Х₃ и X₄ выбраны из K и R, при условии, что по меньшей мере один из X₁, Х₂, Х₃ и X₄ представляет собой R,

SEQ ID NO: 95:

QEHPNARKYKGANX₁X₂GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC,

где X₁X₂ выбраны из группы, состоящей из KR, RK, KP, PK, SS, RS, SR, QK, QR, KQ, RQ, RR и QQ.

Понятно, что эквиваленты цистеинов в положениях 22 и 38 последовательности SEQ ID NO: 24 также соединены через дисульфидный мостик в SEQ ID NO: 2-95.

Термин "CNP" также включает поли(аминокислотные) конъюгаты, которые имеют последовательность, как описано выше, но имеющие основную цепь, содержит как амидные, так и неамидные связи, как например сложноэфирные связи, как например депсипептиды. Депсипептиды представляют собой цепи аминокислотных остатков, в которых основная цепь содержит как амидные (пептидные), так и сложноэфирные связи. Соответственно, термин "боковая цепь", как применяется в настоящей заявке, относится либо к фрагменту, присоединенному к альфа-атому углерода аминокислотного фрагмента, если аминокислотный фрагмент соединен через аминные связи, как например в полипептидах, либо к любому фрагменту, содержащему атом углерода, присоединенной к основной цепи поли(амино кислотного) конъюгата, как например в случае депсипептидов. Предпочтительно, термин "CNP" относится к полипептидам, имеющим основную цепь, образованную через амидные (пептидные) связи.

Термин "CNP" также включает поли(аминокислотные) конъюгаты, которые имеют последовательность, как описано выше, но имеющие основную цепь, содержит как амидные, так и неамидные связи, как например сложноэфирные связи, как например депсипептиды. Депсипептиды представляют собой цепи аминокислотных остатков, в которых основная цепь содержит как амидные (пептидные), так и сложноэфирные связи. Соответственно, термин "боковая цепь", как применяется в настоящей заявке, относится либо к фрагменту, присоединенному к альфа-атому углерода аминокислотного фрагмента, если аминокислотный фрагмент соединен через аминные связи, как например в полипептидах, либо к любому фрагменту, содержащему атом углерода, присоединенный к основной цепи поли(аминокислотного) конъюгата, как например в случае депсипептидов. Предпочтительно, термин "CNP" относится к полипептидам, имеющим основную цепь, образованную через амидные (пептидные) связи.

Как применяется в настоящем документе, термин «кольцевой фрагмент» относится к участку последовательных аминокислотных остатков CNP лекарственного средства или фрагмента, который расположен между двумя остатками цистеина, которые образуют внутримолекулярный дисульфидный мостик, или между гомологичными аминокислотными остатками, которые связаны через химический линкер. Предпочтительно, кольцевой фрагмент расположен между двумя остатками цистеина, которые образуют внутримолекулярный дисульфидный мостик. Эти два цистеины соответствуют цистеинам в положении 22 и положению 38 в последовательности CNP-38 (SEQ ID NO: 24). Соответственно, аминокислоты от 23 до 37 находятся в указанном кольцевом фрагменте, если CNP лекарственное средство или фрагмент имеет последовательность CNP-38.

Независимо от длины CNP фрагмента, последовательностью кольцевого фрагмента CNP дикого типа является FGLKLDRIGSMSGLG (SEQ ID NO: 96).

Так как термин CNP включает вышеописанные варианты, аналоги, ортологи, гомологи, производные и фрагменты CNP, термин "кольцевой фрагмент" также включает соответствующие варианты, аналоги, ортологи, гомологи, производные и фрагменты последовательности SEQ ID NO: 96. Соответственно, все ссылки на конкретное положение в ссылочной последовательности также включают эквивалентные положения в вариантах, аналогах, ортологах, гомолагах, производных и фрагментах CNP, даже если специально не указано.

Как применяется в настоящем документе. Термин «криопротектор» относится к химическому соединению, которое добавляют в состав для защиты лекарственного средства или конъюгата лекарственного средства во время стадий замораживания.

Как применяется в настоящем документе, термин "C_1-4 алкил" сам по себе или в комбинации означает неразветвленный или разветвленный алкильный фрагмент, имеющий от 1 до 4 атомов углерода. Если присутствует на конце молекулы, примерами неразветвленного или разветвленного C_1-4 алкила являются метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор.-бутил и трет.-бутил. Когда два фрагмента молекулы связаны C_1-4 алкилом, примерами таких C_1-4 алкильных

Групп являются -СН₂-, -СН₂-СН₂-, -СН(СН₃)-, -СН₂-СН₂-СН₂-, -CH(С₂Н₅)-, -С(СН₃)₂-. Каждый водород C_1-4 алкильного углерода может необязательно быть замещен заместителем, как определено выше. Необязательно, C_1-4 алкил может быть прерван одним или более фрагментами, как определено далее.

Как применяется в настоящем документе, термин "C_1-6 алкил" сам по себе или в комбинации означает неразветвленный или разветвленный алкильный фрагмент, имеющий от 1 до 4 атомов углерода. Если присутствует на конце молекулы, примерами неразветвленных или разветвленных C_1-6 алкильных групп являются метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, н-пентил, 2-метилбутил, 2,2-диметилпропил, н-гексил, 2-метилпентил, 3-метилпентил, 2,2-диметилбутил, 2,3-диметилпропил. Когда два фрагменты молекулы связаны C_1-6 алкильной группой, примерами таких C_1-6 алкильных групп являются -СН₂-, -СН₂-СН₂-, -СН(СН₃)-, -СН₂-СН₂-СН₂-, -СН(С₂Н₅)- и С(СН₃)₂-. Каждый атом водорода при C_1-6 атоме углерода может необязательно быть замещен заместителем, как определено выше. Необязательно, C_1-6 алкил может быть прерван одним или более фрагментами, как определено далее.

Соответственно, "C_1-10 алкил", "C_1-20 алкил" или "C_1-50 алкил" означает алкильную цепь, имеющую от 1 до 10, от 1 до 20 или от 1 до 50 атомов углерода, соответственно, где каждый атом водорода при C_1-10, C_1-20 или C_1-50 атоме углерода может необязательно быть замещен заместителем, как определено выше. Необязательно, C_1-10 или C_1-50 алкил может быть прерван одним или более фрагментами, как определено далее.

Как применяется в настоящей заявке, термин "C_2-6 алкенил" сам по себе или в комбинации означает неразветвленный или разветвленный углеводородный фрагмент, содержащий по меньшей мере одну двойную связь углерод-углерод, имеющий от 2 до 6 атомов углерода. Если присутствует на конце молекулы, примерами являются СН-СН₂, -СН-СН-СН₃, -СН₂-СН-СН₂, -СН-СНСН₂-СН₃ и -СН-СН-СН-СН₂. Когда два фрагмента молекулы связаны С_2-6 алкенильной группой, тогда примером такого С_2-6 алкенила является -СН-СН-. Каждый атом водорода С_2-6 алкенильного фрагмента может необязательно быть замещен заместителем, как определено выше. Необязательно, С_2-6 алкенил может быть прерван одним или более фрагментами, как определено далее.

Соответственно, термин "С_2-10 алкенил", "С_2-20 алкенил" или "С_2-50 алкенил" сам по себе или в комбинации означает неразветвленный или разветвленный углеводородный фрагмент, содержащий по меньшей мере одну двойную связь углерод-углерод, имеющий от 2 до 10, от 2 до 20 или от 2 до 50 атомов углерода. Каждый атом водорода С_2-10 алкенильной, С_2-20 алкенильной или С_2-50 алкенильной группы может необязательно быть замещен заместителем, как определено выше. Необязательно, С_2-10 алкенил, С_2-20 алкенил или C_2-50 алкенил может быть прерван одним или более фрагментами, как определено далее.

Как применяется в настоящей заявке, термин "С_2-6 алкинил" сам по себе или в комбинации означает неразветвленный или разветвленный углеводородный фрагмент, содержащий по меньшей мере одну тройную связь углерод-углерод, имеющий от 2 до 6 атомов углерода. Если присутствует на конце молекулы, примерами являются -С≡СН, -СН₂-С≡СН, СН₂-СН₂-С≡СН и СН₂-С≡С-СН₃. Когда два фрагмента молекулы связаны алкинильной группой, тогда примером является -С≡С-. Каждый атом водорода С_2-6 алкинильной группы может необязательно быть замещен заместителем, как определено выше. Необязательно, могут присутствовать одна или более двойных связей. Необязательно, С_2-6 алкинил может быть прерван одним или более фрагментами, как определено далее.

Соответственно, как применяется в настоящей заявке, термин "С_2-10 алкинил", "С_2-20 алкинил" и "С_2-50 алкинил" сам по себе или в комбинации означает неразветвленный или разветвленный углеводородный фрагмент, содержащий по меньшей мере одну тройную связь углерод-углерод, имеющий от 2 до 10, от 2 до 20 или от 2 до 50 атомов углерода, соответственно. Каждый атом водорода С_2-10 алкинильной, C_2-20 алкинильной или C_2-50 алкинильной группы может необязательно быть замещен заместителем, как определено выше. Необязательно, могут присутствовать одна или более двойных связей. Необязательно, С_2-10 алкинил, С_2-20 алкинил или C_2-50 алкинил может быть прерван одним или более фрагментом, как определено далее.

Как упомянуто выше, C_1-4 алкил, C_1-6 алкил, C_1-10 алкил, C_1-20 алкил, С_1-50 алкил, С_2-6 алкенил, С_2-10 алкенил, С_2-20 алкенил, С_2-50 алкенил, C_2-6 алкинил, С_2-10 алкинил, С_2-20 алкенил или С_2-50 алкинил может необязательно быть прерван одним или более фрагментами, которые предпочтительно выбирают из группы, состоящей из

пунктирные линии обозначают присоединение к оставшейся части фрагмента или реагента, и

-R и R^a независимо друг от друга выбирают из группы, состоящей из -Н, метила, этила, пропила, бутила, пентила и гексила.

Как применяется в настоящей заявке, термин "С_3-10 циклоалкил" означает циклическую алкильную цепь, имеющую от 3 до 10 атомов углерода, которая может быть насыщенной или ненасыщенной, например, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогексенил, циклогептил, циклооктил, циклононил или циклодецил. Каждый атом водорода С_3-10 циклоалкильного углерода может быть замещен заместителем, как определено выше. Термин "С_3-10 циклоалкил" также включает мостиковые бициклы, такие как норборнан или норборнен.

Термин "8-30-членный карбополициклил" или "8-30-членный карбополицикл" означает циклический фрагмент из двух или более колец с 8 - 30 кольцевыми атомами, где два соседних кольца разделяют по мере один кольцевой атом, и которая может содержать до максимального числа двойных связей (ароматическое или неароматическое кольцо, которое является полностью насыщенным, частично ненасыщенным или ненасыщенным). Предпочтительно 8-30-членный карбополициклил означает циклический фрагмент из двух, трех, четырех или пяти колец, более предпочтительно двух, трех или четырех колец.

Как применяется в настоящей заявке, термин "3-10-членный гетероциклил" или "3-10-членный гетероцикл" означает кольцо с 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10 кольцевыми атомами, которое может содержать до максимального числа двойных связей (ароматическое или неароматическое кольцо, которое является полностью насыщенным, частично ненасыщенным или ненасыщенным), где по меньшей мере от одного кольцевого атома до четырех кольцевых атомов замещены гетероатомом, выбранным из группы, состоящей из серы (включая -S(O)-, -S(O)₂-), кислорода и азота (включая -N(O)-), и где кольцо связано с остатком молекулы через атом углерода или азота. Примеры 3-10-членных гетероциклов включают, но без ограничения к этому, азиридин, оксиран, тиран, азирин, оксирен, тиирен, азетидин, оксетан, тиетан, фуран, тиофен, пиррол, пирролин, имидазол, имидазолин, пиразол, пиразолин, оксазол, оксазолин, изоксазол, изоксазолин, тиазол, тиазолин, изотиазол, изотиазолин, тиадиазол, тиадиазолин, тетрагидрофуран, тетрагидротиофен, пирролидин, имидазолидин, пиразолидин, оксазолидин, изоксазолидин, тиазолидин, изотиазолидин, тиадиазолидин, сульфолан, пиран, дигидропиран, тетрагидропиран, имидазолидин, пиридин, пиридазин, пиразин, пиримидин, пиперазин, пиперидин, морфолин, тетразол, триазол, триазолидин, тетразолидин, диазепан, азепин или гомопиперазин. Каждый атом водорода 3-10-членного гетероциклила или 3-10-членной гетероциклической группы может быть замещен заместителем, как определено далее.

Как применяется в настоящей заявке, термин "8-11-членный гетеробициклил" или "8-11-членный гетеробицикл" означает гетероциклический фрагмент из двух колец с 8 - 11 кольцевыми атомами, где по меньшей мере один кольцевой атом разделен между двумя кольцами, и который содержит до максимального числа двойных связей (ароматическое или неароматическое кольцо, которое является полностью насыщенным, частично ненасыщенным или ненасыщенным), где по меньшей мере от одного кольцевого атома до шести кольцевых атомов замещены гетеро атомом, выбранным из группы, состоящей из серы (включая -S(O)-, -S(O)₂-), кислорода и азота (включая =N(O)-), и где кольцо связано с остатком молекулы через атом углерода или азота. Примерами 8-11-членного гетеробицикла являются индол, индолин, бензофуран, бензотиофен, бензоксазол, бензизоксазол, бензотиазол, бензизотиазол, бензимидазол, бензимидазолин, хинолин, хиназолин, дигидрохиназолин, хинолин, дигидрохинолин, тетрагидрохинолин, декагидрохинолин, изохинолин, декагидроизохинолин, тетрагидроизохинолин, дигидроизохинолин, бензазепин, пурин или птеридин. Термин 8-11-членный гетеробицикл также включает спиро-структуры из двух циклов, такие как 1,4-диокса-8-азаспиро[4.5]декан или мостиковые гетероциклы, такие как 8-аза-бицикло[3.2.1]октан. Каждый атом водорода 8-11-членного гетеробициклила или 8-11-членного гетеробицикла может быть замещен заместителем, как определено далее.

Подобным образом, термин "8-30-членный гетерополициклил" или "8-30-членный гетерополицикл" означает гетероциклический фрагмент из более чем двух колец с 8 - 30 кольцевыми атомами, предпочтительно тремя, четырьмя или пятью кольцами, где два соседних кольца разделяют по мере один кольцевой атом, и который может содержать до максимального числа двойных связей (ароматическое или неароматическое кольцо, которое является полностью насыщенным, частично ненасыщенным или ненасыщенным), где по меньшей мере от одного кольцевого атома до 10 кольцевых атомов замещены гетероатомом, выбранным из группы, состоящей из серы (включая -S(O)-, -S(O)₂-), кислорода и азота (включая =N(O)-), и где кольцо связано с остатком молекулы через атом углерода или азота.

Понятно, что фраза "пара R^x/R^y, соединяется вместе с атомом, к которому они присоединены, с образованием С_3-10 циклоалкила или 3-10-членного гетероциклила" в отношении фрагмента структуры

означает, что Rx и Ry образуют следующую структуру:

где R представляет собой С_3-10 циклоалкил или 3-10-членный гетероциклил.

Также понятно, что фраза "пара R^x/R^y соединяется вместе с атомом, к которому они присоединены, с образованием кольца А" в отношении фрагмента структуры

означает, что R^x и R^y образуют следующую структуру:

Как применяется в настоящем документе. Термин «сукой фармацевтический состав» означает, что фармацевтический состав предоставляется в сухой форме. Подходящими методами сушки являются распылительная сушка и лиофилизация, то есть сублимационная сушка. Такие сухие фармацевтические составы, содержащие коньюгат CNP, имеют остаточное содержание воды максимум 10%, согласно определенному варианту осуществления менее 5% и согласно определенному варианту осуществления менее 2%, как определено с помощью метода Карла Фишера. Согласно определенному варианту осуществления сухой фармацевтический состав согласно настоящему изобретению высушен посредством лиофилизации.

Термин "лекарственное средство", как применяется в настоящей заявке, относится к веществу, применяемому для лечения, облегчения, профилактики или диагностике заболевания или, в противном случае, для улучшения физического или умственного здоровья. Если лекарственное средство, такое как CNP, конъюгировано с другим фрагментом, фрагмент полученного продукта, которая происходит из лекарственного средства, обозначается как "лекарственный фрагмент".

Как применяется в настоящей заявке, термин "эксципиент" относится к разбавителю, вспомогательному средству или носителю, совместно с которым вводится терапевтическое средство, как например лекарственное средство или пролекарство. Такой фармацевтический эксципиент может представлять собой стерильную жидкость, такую как вода и масла, включая жидкости нефтяного, животного, растительного или синтетического происхождения, включая, но без ограничения к этому, арахисовое масло, соевое масло, минеральное масло, сезамовое масло и тому подобное. Вода является предпочтительным эксципиентом, когда фармацевтический состав вводится перорально. Соляной раствор и водный раствор декстрозы являются предпочтительными наполнителями, когда фармацевтический состав вводится внутривенно. Соляные растворы и водные растворы декстрозы и глицерина предпочтительно применяются в качестве жидких эксципиентов для инъецируемых растворов. Подходящие фармацевтические эксципиенты включают крахмал, глюкозу, лактозу, сахарозу, маннит, трегалозу, желатин, солод, рис, муку, мел, силикагель, стеарат натрия, глицерин моностеарат, тальк, хлорид натрия, сухое молоко, глицерин, пропиленгликоль, воду, этанол и тому подобное. Состав при желании может содержать также небольшие количества увлажняющих или эмульгирующих средств, рН-буферных средств, таких как, например, ацетат, сукцинат, трис, карбонат, фосфат, HEPES (4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинэтансульфо кислота, MES (2-(N-морфолин)этансульфокислота) или может содержать детергенты, такие как Tween, полоксамеры, полоксамины, CHAPS, Igepal, или аминокислоты, такие как, например, глицин, лизин или гистидин. Такие фармацевтические составы могут иметь форму растворов, суспензий, эмульсий, таблеток, пилюль, капсул, порошков, препаратов с замедленным высвобождением и тому подобное. Фармацевтический состав может иметь вид суппозитория, с традиционными связующими средствами и эксципиентами, такими как триглицериды. Препарат для перорального введения может содержать стандартные эксципиенты, такие как фармацевтические марки маннита, лактозы, крахмала, стеарата магния, сахарина натрия, целлюлозы, карбоната магния и т.д. Такие составы содержат терапевтически эффективное количество лекарственного средства или биологически активного фрагмента, вместе с подходящим количеством эксципиента, так чтобы получилась форма, подходящая для введения пациенту. Состав должна соответствовать способу введения.

Как применяется в настоящем документе, Термин «состав» или «фармацевтический состав» относится к составу, содержащему один или несколько конъюгатов CNP и один или несколько эксципиентов, а также любой продукт, который является прямым или косвенным результатом комбинации, комплексообразования или агрегации любых двух или более из ингредиентов композиции, или диссоциации одного или нескольких ингредиентов, или других типов реакций или взаимодействий одного или нескольких ингредиентов. Соответственно, фармацевтические составы согласно настоящему изобретению охватывают любой состав или композицию, полученную путем смешивания одного или нескольких конъюгатов CNP и фармацевтически приемлемого эксципиента, такого как буферный агент и агент-наполнитель.

Как применяется в настоящей заявке, термин "свободная форма" лекарственного средства означает лекарственное средство в его немодифицированной, фармакологически активной форме, например, после высвобождения из конъюгата.

Как применяется в настоящей заявке, термин "функциональная группа" означает группу атомов, которая может реагировать с другими группами атомов. Функциональные группы включают, но без ограничения к этому, следующие группы: карбоновая кислота (-(С=O)ОН), первичный и вторичный амин (-NH₂, -NH-), малеимид, тиол (-SH), сульфоновая кислота (-(O=S=O)OH), карбонат, карбамат (-O(C=O)N<), гидроксил (-ОН), альдегид (-(С=O)Н), кетон (-(С=O)-), гидразин (>N-N<), изоцианат, изотиоцианат, фосфорная кислота (-O(Р=O)ОНОН), фосфоновая кислота (O(Р=O)ОНН), галоацетил, алкилгалогенид, акрилоил, арилфторид, гидроксиламин, дисульфид, сульфонамиды, серная кислота, винилсульфон, винилкетон, диазоалкан, оксиран и азиридин.

Как применяется в настоящей заявке, "галоген" означает фтор, хлор, бром или иод. В общем предпочтительно, что галогеном является фтор или хлор.

Как применяется в настоящем документе, термин «прерванный» означает, что фрагмент вставлен между двумя атомами углерода или - если вставка находится на одном из концов фрагмента - между углеродом или гетероатомом и атомом водорода, согласно определенным вариантам осуществления между атомом углерода и атомом водорода.

Как применяется в настоящем документе, термин «агент, регулирующий изотоничность» относится к соединению, которое сводит к минимуму боль, раздражение и повреждение тканей, которые могут возникнуть в результате повреждения клеток из-за разницы осмотического давления между вводимым раствором и плазмой.

Как применяется в настоящем документе, термин «лиофилизированный состав» означает, что состав, содержащий конъюгат CNP, был сначала заморожен, а затем подвергнут удалению воды с помощью пониженного давления. Эта терминология не исключает дополнительных стадий сушки, которые происходят в производственном процессе перед заполнением препаративной формы в конечный контейнер.

Как применяется в настоящем документе, термины «лиофилизация» или «сублимационная сушка» являются взаимозаменяемыми и относятся к процессу дегидратации, характеризующемуся замораживанием состава и последующим снижением окружающего давления и, необязательно, добавлением тепла, чтобы замороженная вода в составе сублимировалась непосредственно из фазы твердого вещества в газ. Обычно сублимированную воду собирают десублимацией.

Как применяется в настоящем документе, термин «лиопротектор» представляет собой молекулу, которая в сочетании с представляющим интерес активным ингредиентом значительно предотвращает или снижает химическую и/или физическую нестабильность активного ингредиента при сушке в целом и особенно во время лиофилизации и последующего хранения. Примеры лиопротекторов включают сахара, такие как сахароза или трегалоза, аминокислоты, такие как глутамат натрия или гистидин, или аргинин, метиламины, такие как бетаин, лиотропные соли, такие как сульфат магния, полиолы, такие как трехатомные или высшие сахарные спирты, например, глицерин, эритрит, глицерол, арабит, ксилит, сорбит и маннит, этиленгликоль, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, плюроники, гидроксиалкиловые крахмалы, например, гидроксиэтилкрахмал (HES) и их комбинации. Лиопротектор может также служить агентом-наполнителем в сухом фармацевтическом составе и агентом, регулирующим изотоничность, в восстановленном фармацевтическом составе.

Как применяется в настоящей заявке, термин "фрагмент" означает часть молекулы, в которой отсутствует один или более атомов по сравнению с соответствующим реагентов. Если, например, реагент формулы "Н-Х-Н" реагирует с другим реагентом и становится частью продукта реакции, соответствующая составляющая продукта реакции имеет структуру "Н-Х-" или "-Х-", где каждый "-" обозначает присоединение к другой составляющей. Соответственно, лекарственный фрагмент, такой как фрагмент CNP, высвобождается из конъюгата в качестве лекарственного средства, такого как CNP.

Понятно, что если обеспечивается последовательность или химическая структура группы атомов, где группа атомов присоединяется к двум фрагментам или прерывает составляющую, указанная последовательность или структура может быть присоединена к двум фрагментам в любой ориентации, если иного не указано. Например, составляющая "-C(O)N(R¹)-" может быть присоединена к двум фрагментам или прерывать фрагмент либо как "-C(O)N(R¹)-", либо как "-N(R¹)C(O)-". Подобным образом, фрагмент:

может быть присоединена к двум фрагментам или может прерывать фрагмент либо как

В случае, если фрагмент CNP содержит содержат одну или более кислотных или основных групп, настоящее изобретение также включает их соответствующие фармацевтически или токсикологически приемлемые соли, в частности их фармацевтически применимые соли. Таким образом, конюгаты CNP, содержащие кислотные группы, могут присутствовать и использоваться, в виде солей щелочных металлов, солей щелочноземельных металлов или солей аммония. Более точные примеры таких солей включают соли натрия, соли калия, соли кальция, соли магния или соли с аммиаком или органическими аминами, как например, этиламин, этаноламин, триэтаноламин, аминокислоты и другие соли или амины, известные специалистам в данной области техники. Фрагменты CNP, содержащие одну или более основных групп, т.е. групп, которые могут быть протонированы, могут присутствовать и использоваться согласно настоящему изобретению в форме их аддитивных солей с неорганическими или органическими кислотами. Примеры подходящих кислот включают хлорид водорода, бромид водорода, фосфорную кислоту, серную кислоту, азотную кислоту, метансульфокислоту, п-толуолсульфокислоту, нафталинсульфокислоту, щавелевую кислоту, уксусную кислоту, винную кислоту, молочную кислоту, салициловую кислоту, бензойную кислоту, муравьиную кислоту, пропионовую кислоту, пивалоиловую кислоту, диэтилуксусную кислоту, малоновую кислоту, янтарную кислоту, пимелиновую кислоту, фумаровую кислоту, малеиновую кислоту, яблочную кислоту, сульфаминовую кислоту, фенилпропионовую кислоту, глюконовую кислоту, аскорбиновую кислоту, изо никотиновую кислоту, лимонную кислоту, адипиновую кислоту и другие кислоты, известные специалистам в данной области техники. Специалистам в данной области техники известно превращение основной группы в катион, такие как алкилирование аминной группы с получением положительно заряженной аммониевой группы и соответствующего противоиона соли. Если фрагменты CNP одновременно содержат кислотные и основные группы, настоящее изобретение также включает, помимо упомянутых солевых форм, внутренние соли или бетаины (цвиттерионы). Соответствующие соли могут быть получены обычными методами, которые известны специалисту в данной области, например, контактированием этих пролекарств с органической или неорганической кислотой или основанием в растворителе или диспергаторе, или путем анионного или катионного обмена с другими солями. Составы согласно настоящему изобретению также включают все соли конъюгата CNP, которые из-за низкой физиологической совместимости не подходят непосредственно для использования в фармацевтических препаратах, но могут использоваться, например, в качестве промежуточных продуктов для химических реакций или для получения фармацевтически приемлемых солей.

Как применяется в настоящем документе, термин «антиоксидант» или «агент для защиты от окисления» относится к соединению, которое подавляет окисление других соединений, таких как пептиды.

Как применяется в настоящем документе, термин "рН-регулирующий агент" относится к химическому соединению, которое используется для регулирования рН приготовленного раствора перед наполнением и лиофилизацией.

Как применяется в настоящем документе, термин «фармацевтически приемлемый» означает вещество, которое не причиняет вреда при введении пациенту и, конечно, означает одобренное регулирующим органом, таким как ЕМА (Европа) и/или FDA (США) и/или любое другое национальное регулирующее агентство, для использования у животных, предпочтительно для людей.

Как применяется в настоящем документе, термин «физиологические условия» относятся к водному буферу при рН 7,4 и 37°С.

Термин «полипептид», как он использован в настоящем документе, относится к цепи из по меньшей мере 2 и до, и включающей, 50 аминокислотных мономерных фрагментов, связанных пептидными (амидными) связями. Только для лекарственных средств CNP и фрагментов CNP также последовательности, содержащие более 50 аминокислот, для упрощения будут называться «полипептидами».

Как применяется в настоящем документе, термин «консервант» относится к химическому веществу, которое обладает антимикробным действием и предотвращает химическое разложение.

Как применяется в настоящем документе, термин «белок» относится к цепи из более 50 аминокислотных мономерных фрагментов, связанных пептидными связями, в которой обычно не более 12000 аминокислотных мономеров связаны пептидными связями, например, не более 10000 аминокислотных мономерных фрагментов, не более 8000 аминокислотных мономерных фрагментов, не более 5000 аминокислотных мономерных фрагментов или не более 2000 аминокислотных мономерных фрагментов.

Как применяется в настоящей заявке, термин «полимер» означает молекулу, содержащую повторяющиеся структурные единицы, т.е. мономеры, связанные химическими связями линейным, кольцевым, разветвленным, сшитым или дендримерным образом или их комбинацией, которая может быть синтетического или биологического происхождения или комбинацией обоих. Понятно, что полимер может также содержать одну или более других химических групп и/или составляющих, таких как, например, одна или более функциональные группы. Предпочтительно, растворимый полимер имеет молекулярную массу, равную по меньшей мере 0.5 кДа, например, молекулярную массу, равную по меньшей мере 1 кДа, молекулярную массу, равную по меньшей мере 2 кДа, молекулярную массу, равную по меньшей мере 3 кДа, или молекулярную массу, равную по меньшей мере 5 кДа. Если полимер является растворимым, он предпочтительно имеет молекулярную массу, равную самое большее 1000 кДа, как например самое большее 750 кДа, как например самое большее 500 кДа, как например самое большее 300 кДа, как например самое большее 200 кДа, как например самое большее 100 кДа.

Понятно, что белок или полипептид также представляет собой полимер, в котором аминокислоты являются повторяющимися структурными единицами, даже если боковые цепи каждой аминокислоты могут быть разными.

Как применяется в настоящем документе, термин "полимерный" или "полимерный фрагмент" означает реагент или фрагмент, содержащий один или несколько полимеров или полимерных фрагментов. Полимерный реагент или фрагмент может необязательно также содержать один или несколько других фрагментов, которые согласно определенным вариантам осуществления выбраны из группы, состоящей из:

• C_1-50 алкила, C_2-50 алкенила, С_2-50 алкинила, С_3-10 циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, 8-11-членного гетеробициклила, фенила, нафтила, инденила, инданила и тетралинила; и

• связей, выбранных из группы, содержащей

где

пунктирные линии обозначают присоединение к оставшейся части составляющей или реагента, и

-R и R^a независимо друг от друга выбирают из группы, состоящей из -Н, метила, этила, пропила, бутила, пентила и гексила.

Специалист в данной области понимает, что продукты полимеризации, полученные из реакции полимеризации, не все имеют одинаковую молекулярную массу, а скорее имеют молекулярно-массовое распределение. Следовательно, диапазоны молекулярных масс, молекулярные массы, диапазоны количества мономеров в полимере и количества мономеров в полимере, как применяется в настоящей заявке, относятся к среднечисловой молекулярной массе и среднему числу мономеров, т.е. к среднему арифметическому молекулярной массы полимера или полимерного фрагмента и среднему арифметическому числа мономеров полимера или полимерного фрагмента.

Соответственно, в полимерном фрагменте, содержащем "х" мономерных единиц, любое целое число, приведенное для "х", поэтому соответствует арифметическому среднему числу мономеров. Любой диапазон целых чисел, приведенный для "х", обеспечивает диапазон целых чисел, в котором лежит арифметическое среднее число мономеров. Целое число для "х", приведенное как "около х", означает, что арифметические средние числа мономеров лежат в диапазоне целых чисел х +/- 10%, предпочтительно х +/- 8%, согласно определенным вариантам осуществления лежат в диапазоне целых чисел х +/- 5% и согласно определенным вариантам осуществления лежат в диапазоне целых чисел х +/- 2%.

Как применяется в настоящем документе, термин "на основе ПЭГ " в отношении фрагмента или реагента означает, что указанный фрагмент или реагент содержит ПЭГ. Согласно определенным вариантам осуществления ф или реагент на основе ПЭГ содержит по меньшей мере 10% (мас./мас.) ПЭГ, как например по меньшей мере 20% (мас./мас.) ПЭГ, как например по меньшей мере 30% (мас./мас.) ПЭГ, как например по меньшей мере 40% (мас./мас.) ПЭГ, как например по меньшей мере 50% (мас./мас), как например по меньшей мере 60% (мас./мас.) ПЭГ, как например по меньшей мере 70% (мас./мас.) ПЭГ, как например по меньшей мере 80% (мас./мас.) ПЭГ, как например по меньшей мере 90% (мас./мас.) ПЭГ, как например по меньшей мере 95% (мас./мас.) ПЭГ. Оставшийся массовый процент фрагмента или реагента на основе ПЭГ представляет собой другие фрагменты, выбранные из следующих фрагментов и связей:

• C_1-50 алкила, C_2-50 алкенила, С_2-50 алкинила, С_3-10 циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, 8-11-членного гетеробициклила, фенила, нафтила, инденила, инданила и тетралинила; и

• связей, выбранных из группы, содержащей

где

пунктирные линии обозначают присоединение к оставшейся части составляющей или реагента, и

-R и R^a независимо друг от друга выбирают из группы, состоящей из -Н, метила, этила, пропила, бутила, пентила и гексила.

Как применяется в настоящей заявке, термин "на основе ПЭГ, содержащий по меньшей мере Х% ПЭГ" в отношении фрагмента или реагента означает, что указанная фрагмент или реагент содержит по меньшей мере Х% (мас./мас.) единиц этилен гликоля (-CH₂CH₂O-), где единицы этилен гликоля могут быть расположены блочным, чередующимся образом или могут быть расположены случайным образом в составляющей или реагента, и предпочтительно все единицы этиленгликоля указанной составляющей или реагента присутствуют в одном блоке; оставшиеся массовые проценты фрагмента или реагента на основе ПЭГ составляют другие фрагменты, предпочтительно выбранные из следующих составляющих и связей:

• C_1-50 алкила, C_2-50 алкенила, С_2-50 алкинила, С_3-10 циклоалкила, 3-10-членного гетероциклила, 8-11-членного гетеробициклила, фенила, нафтила, инденила, инданила и тетралинила; и

• связей, выбранных из группы, содержащей

где

пунктирные линии обозначают присоединение к оставшейся части составляющей или реагента, и

- R и R^a независимо друг от друга выбирают из группы, состоящей из -Н, метила, этила, пропила, бутила, пентила и гексила.

Термин "на основе гиалуроновой кислоты, содержащая по меньшей мере Х% гиалуроновая кислота" применяется соответствующим образом.

Специалистам в данной области техники также известно, что конъюгаты согласно настоящему изобретению являются пролекарствами. Как используется в настоящем документе, термин «пролекарство» относится к фрагменту лекарственного средства, такому как фрагмент CNP, обратимо и ковалентно конъюгированному с полимерным фрагментом, таким как -Z, через обратимый линкерный фрагмент. Пролекарство высвобождает обратимо и ковалентно связанный фрагмент лекарственного средства в форме соответствующего лекарственного средства. Другими словами, пролекарство представляет собой конъюгат, содержащий фрагмент лекарственного средства, такой как фрагмент CNP, который ковалентно и обратимо конъюгирован с полимерным фрагментом через обратимый линкерный фрагмент, при этом ковалентное и обратимое конъюгирование полимерного фрагмента с обратимым линкерным фрагментом обеспечивается либо напрямую, либо через спейсер. Такие пролекарства или конъюгаты высвобождают ранее конъюгированный фрагмент лекарственного средства в форме свободного лекарственного средства.

Как применяется в настоящей заявке, термин "случайная спираль" относится к пептиду или белку, принимающему / имеющему / образующему, согласно определенным вариантам осуществления имеющему конформацию, которая по существу не имеет определенной вторичной и третичной структуры, как определено с помощью спектроскопии кругового дихроизма, проводимой в водном буфере при температуре окружающей среды, и рН 7,4. согласно определенным вариантам осуществления, температура окружающей среды составляет около 20°С, т.е. между 18°С и 22°С, наиболее высокой температурой окружающей среды является 20°С.

Как применяется в настоящем документе, термин "обратимая связь" означает связь, которая является расщепляемой, в отсутствии ферментов при физиологических условиях (водный буфер при рН 7.4, 37°С) с периодом полувыведения в интервале от одного часа до шести месяцев, предпочтительно от одного часа до четырех месяцев, даже более предпочтительно от одного часа до трех месяцев, даже более предпочтительно от одного часа до двух месяцев, даже более предпочтительно от одного часа до одного месяца. Соответственно, стабильная связь представляет собой связь, имеющую период полувыведения при физиологических условиях (водный буфер при рН 7.4, 37°С), равный более чем шести месяцам.

Как применяется в настоящем документе, термин «реагент» означает химическое соединение, которое содержит по меньшей мере одну функциональную группу для реакции с функциональной группой другого химического соединения или лекарственного средства. Понятно, что лекарственное средство, содержащее функциональную группу (такую как первичный или вторичный амин или гидроксильная функциональная группа), также представляет собой реагент.

Как применяется в настоящем документе, термин "обратимый линкерный фрагмент" представляет собой фрагмент, который ковалентно конъюгирован с фрагментом лекарственного средства, такой как фрагмент CNP, через обратимую связь и также ковалентно конъюгирован с полимерным фрагментом, таким как -Z, где ковалентная конъюгация с указанным полимерным фрагментом является либо прямой, либо через спейсерный фрагмент, такой как -L²-. Согласно определенным вариантам осуществления связью между -Z и -L²- является стабильная связь.

Как применяется в настоящем документе, термин «восстановление» означает добавление жидкости к сухому фармацевтическому составу, чтобы вернуть исходную форму состава, такую как раствор.

Как применяется в настоящем документе, термин «восстановленный состав» относится к составу, полученному после восстановления сухого фармацевтического состава путем добавления раствора для восстановления.

Как применяется в настоящем документе, термин «раствор для восстановления» относится к жидкости, используемой для восстановления сухого фармацевтического состава перед введением пациенту, нуждающемуся в этом.

Как применяется в настоящем документе, термин "спейсер" или "спейсерный фрагмент" относится к фрагменту, подходящему для соединения двух фрагментов. Подходящие спейсеры могут быть выбраны из группы, состоящей из C_1-50 алкила, С_2-50 алкенила или С_2-50 алкинила, где C_1-50 алкил, С_2-50 алкенил или С_2-50 алкинил необязательно прерывается одной или более группами, выбранными из -NH-, -N(C_1-4 алкила)-, -О-, -S-, -С(О)-, -C(O)NH-, -C(O)N(C_1-4 алкила)-, -О-С(О)-, -S(O)-, -S(O)₂-, 4-7-ти членного гетероциклила, фенила и нафтила.

Как применяется в настоящем документе, термин «замещенный» означает, что один или несколько атомов Н молекулы или фрагмента заменены другим атомом или группой атомов, которые упоминаются как «заместитель».

Согласно определенным вариантам осуществления такой один или несколько заместителей независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из галогена, -CN, -COOR^x1, -OR^x1, -C(O)R^x1, -C(O)N(R^x1R^x1a), -S(O)₂N(R^x1R^x1a), -S(O)N(R^x1R^x1a), -S(O)₂R^x1, -S(O)R^x1, -N(R^x1)S(O)₂N(R^x1aR^x1b), -SR^x1, -N(R^x1R^x1a), -NO₂, -OC(O)R^x1, -N(R^x1)C(O)R^x1a, -N(R^x1)S(O)₂R^x1a, -N(R^x1)S(O)R^x1a, -N(R^x1)C(O)OR^x1a, -N(R^x1)C(O)N(R^x1aR^x1b), -OC(O)N(R^x1R^x1a), -T⁰, C_1-50 алкила, C_2-50 алкенила и C_2-50 алкинила, где -T⁰, С_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно замещены одним или несколькими -R^x2, которые являются одинаковыми или различными, и где С_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно прерываются одной или несколькими группами, выбранными из группы, состоящей из -Т⁰-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^x3)-, -S(O)₂N(R^x3)-, -S(O)N(R^x3)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^x3)S(O)₂N(R^x3a)-, -S-, -N(R^x3)-, -OC(OR^x3)(R^x3a)-, -N(R^x3)C(O)N(R^x3a)- и -OC(O)N(R^x3)-,

-R^x1, -R^x1a, -R^x1b независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из -Н, -Т⁰, С_1-50 алкила, С_2-50 алкенила и С_2-50 алкинила, где -Т⁰, С_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно замещены одним или несколькими -R^x2, которые являются одинаковыми или различными, и где С_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно прерываются одной или несколькими группами, выбранными из группы, состоящей из -Т⁰-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^x3)-, -S(O)₂N(R^x3)-, -S(O)N(R^x3)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^x3)S(O)₂N(R^x3a)-, -S-, -N(R^x3)-, -OC(OR^x3)(R^x3a)-, -N(R^x3)C(O)N(R^x3a)- и -OC(O)N(R^x3)-,

каждый T⁰ независимо выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила С_3-10 циклоалкила, 3-10-ти членного гетероциклила и 8-11-ти членного гетеробициклила, где каждый Т⁰ независимо необязательно замещен одним или несколькими - R^x2, которые являются одинаковыми или различными,

каждый -R^x2 независимо выбран из группы, состоящей из галогена, -CN, оксо (=О), -COOR^x4, -OR^x4, -C(O)R^x4, -C(O)N(R^x4R^x4a), -S(O)₂N(R^x4R^x4a), -S(O)N(R^x4R^x4a), -S(O)₂R^x4, -S(O)R^x4, -N(R^x4)S(O)₂N(R^x4aR^x4b), -SR^x4, -N(R^x4R^x4a), -NO₂, -OC(O)R^x4, -N(R^x4)C(O)R^x4a, -N(R^x4)S(O)₂R^x4a, -N(R^x4)S(O)R^x4a, -N(R^x4)C(O)OR^x4a, -N(R^x4)C(O)N(R^x4aR^x4b), -OC(O)N(R^x4R^x4a) и С_1-6 алкила, где С_1-6 алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, которые являются одинаковыми или различными,

каждый -R^x3, -R^x3a, -R^x4, -R^x4a, -R^x4b независимо выбран из группы, состоящей из -Н и С_1-6 алкила, где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, которые являются одинаковыми или различными.

Согласно определенным вариантам осуществления один или несколько заместителей независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из галогена, -CN, -COOR^x1, -OR^x1, -C(O)R^x1, -C(O)N(R^x1R^x1a), -S(O)₂N(R^x1R^x1a), -S(O)N(R^x1R^x1a), -S(O)₂R^x1, -S(O)R^x1, -N(R^x1)S(O)₂N(R^x1aR^x1b), -SR^x1, -N(R^x1R^x1a), -NO₂, -OC(O)R^x1, -N(R^x1)C(O)R^x1a, -N(R^x1)S(O)₂R^x1a, -N(R^x1)S(O)R^x1a, -N(R^x1)C(O)OR^x1a, -N(R^x1)C(O)N(R^x1aR^x1b), -OC(O)N(R^x1R^x1a), -T⁰, С_1-10 алкила, С_2-10 алкенила и С_2-10 алкинила, где -Т⁰, С_1-10 алкил, С_2-10 алкенил и С_2-10 алкинил необязательно замещены одним или несколькими -R^x2, которые являются одинаковыми или различными, и где С_1-10 алкил, С_2-10 алкенил и С_2-10 алкинил необязательно прерываются одной или несколькими группами, выбранными из группы, состоящей из -Т⁰-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^x3)-, -S(O)₂N(R^x3)-, -S(O)N(R^x3)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^x3)S(O)₂N(R^x3a)-, -S-, -N(R^x3)-, -OC(OR^x3)(R^x3a)-, -N(R^x3)C(O)N(R^x3a)- и -OC(O)N(R^x3)-,

каждый -R^x1, -R^x1a, -R^x1b, -R^x3, -R^x3a независимо выбран из группы, состоящей из -Н, галоген, C_1-6 алкила, С_2-6 алкенила и C_2-6 алкинила,

каждый Т⁰ независимо выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила С_3-10 циклоалкила, 3-10-ти членного гетероциклила и 8-11-ти членного гетеробициклила, где каждый Т⁰ независимо необязательно замещен одним или несколькими -R^x2, которые являются одинаковыми или различными,

каждый -R^x2 независимо выбран из группы, состоящей из галогена, -CN, оксо (=O), -COOR^x4, -OR^x4, -C(O)R^x4, -C(O)N(R^x4R^x4a), -S(O)₂N(R^x4R^x4a), -S(O)₂N(R^x4R^x4a), -S(O)₂R^x4, -S(O)R^x4, -N(R^x4)S(O)₂N(R^x4aR^x4b), -SR^x4, -N(R^x4R^x4a), -NO₂, -OC(O)R^x4, -N(R^x4)C(O)R^x4a, -N(R^x4)S(O)₂R^x4a, -N(R^x4)S(O)R^x4a, -N(R^x4)C(O)OR^x4a, -N(R^x4)C(O)N(R^x4aR^x4b), -OC(O)N(R^x4R^x4a) и C_1-6 алкила, где С_1-6 алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, которые являются одинаковыми или различными,

каждый -R^x4, -R^x4a, -R^x4b независимо выбран из группы, состоящей из -Н, галогена, С_1-6 алкила, С_2-6 алкенила и С_2-6 алкинила.

Согласно определенным вариантам осуществления один или несколько заместителей независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из галогена, -CN, -COOR^x1, -OR^x1, -C(O)R^x1, -C(O)N(R^x1R^x1a), -S(O)₂N(R^x1R^x1a), -S(O)N(R^x1R^x1a), -S(O)₂R^x1, -S(O)R^x1, -N(R^x1)S(O)₂N(R^x1aR^x1b), -SR^x1, -N(R^x1R^x1a), -NO₂, -OC(O)R^x1, -N(R^x1)C(O)R^x1a, -N(R^x1)S(O)₂R^x1a, -N(R^x1)S(O)R^x1a, -N(R^x1)C(O)OR^x1a, -N(R^x1)C(O)N(R^x1aR^x1b), -OC(O)N(R^x1R^x1a), -T⁰, C_1-6 алкила, C_2-6 алкенила и C_2-6 алкинила, где -T⁰, С_1-6 алкил, С_2-6 алкенил и С_2-6 алкинил необязательно замещены одним или несколькими -R^x2, которые являются одинаковыми или различными, и где C_1-6 алкил, С_2-6 алкенил и С_2-6 алкинил необязательно прерываются одной или несколькими группами, выбранными из группы, состоящей из -Т⁰-, -С(O)O, -О-, -С(О)-,

-C(O)N(R^x3)-, -S(O)₂N(R^x3)-, -S(O)N(R^x3)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^x3)S(O)₂N(R^x3a)-, -S-, -N(R^x3)-, -OC(OR^x3)(R^x3a)-, -N(R^x3)C(O)N(R^x3a)- и -OC(O)N(R^x3)-,

каждый -R^x1, -R^x1a, -R^x1b, -R^x2, -R^x3, -R^x3a независимо выбран из группы, состоящей из -Н, галогена, C_1-6 алкила, С_2-6 алкенила и C_2-6 алкинила,

каждый Т⁰ независимо выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила С_3-10 циклоалкила, 3-10-ти членного гетероциклила и 8-11-ти членного гетеробициклила, где каждый Т⁰ независимо необязательно замещен одним или несколькими -R^x2, которые являются одинаковыми или различными.

Согласно определенным вариантам осуществления максимум 6 -Н атомов необязательно замещенной молекулы независимо замещены заместителем, например, 5 -Н атомов независимо замещены заместителем, 4 -Н атома независимо замещены заместителем, 3 -Н атома независимо замещены заместителем, 2 -Н атома независимо замещены заместителем, или 1 -Н атом замещен заместителем.

Как применяется в настоящем документе, термины «стабильный» и «стабильность» применительно к фармацевтическому составу означают, что по истечении срока хранения, например, через один месяц, два месяца, четыре месяца, шесть месяцев, восемь месяцев, двенадцать месяцев, восемнадцать месяцев, двадцать четыре месяца, тридцать шесть месяцев, сорок восемь месяцев, шестьдесят месяцев, в частности, после указанного времени хранения фармацевтический состав содержит менее 5% лекарственного средства в его свободной форме и менее 20%, например менее 10% или, как например, менее 5% примесей, таких как примеси, возникшие в результате изомеризации аспарагиновой кислоты или аспартата, окисления метионина и агрегации пептида. Примеси могут быть количественно определены с помощью RP-HPLC или SEC на основании их соответствующей площади пика относительно общей площади пиков всех связанных с конъюгатом CNP пиков на хроматограммах, и примеси в фрагменте CNP конъюгата CNP могут быть определены протеолитическим гидролизом и количественно определены на основе их соответствующей площади пика относительно площади пика соответствующего немодифицированного протеолитического пептида.

Как применяется в настоящем документе, термин «стабилизатор» относится к соединениям, используемым для стабилизации конъюгата лекарственного средства. Стабилизация может быть достигнута посредством усиления пептид-стабилизирующих сил или путем прямого связывания эксципиентов с конъюгатом лекарственного средства.

Как применяется в настоящем документе, термин «поверхностно-активное вещество» относится к смачивающим агентам, которые снижают поверхностное натяжение жидкости.

Как применяется в настоящем документе, термин «герметизация контейнера» означает, что контейнер представляет собой закрытый таким образом, что он является воздухонепроницаемым, не допускающим газообмена между внешней и внутренней частью и сохраняющим содержимое стерильным.

Как применяется в настоящем документе, термин «терапевтически эффективное количество» означает количество, достаточное для лечения, облегчения или частичной остановки клинических проявлений данного заболевания и его осложнений. Эффективное количество для каждой цели будет зависеть от тяжести заболевания или травмы, а также от веса и общего состояния пациента. Следует понимать, что определение подходящей дозировки может быть достигнуто с использованием рутинных экспериментов, путем построения матрицы значений и тестирования различных точек в матрице, что находится в пределах обычных навыков квалифицированного врача. В контексте настоящего изобретения терапевтически эффективное количество относится к дозам, которые направлены на достижение терапевтического эффекта в течение длительного периода времени, то есть по меньшей мере в течение одного дня, как например в течение двух дней, как например в течение трех дней, как например в течение четырех дней, как например в течение пяти дней, как например в течение шести дней, как например в течение одной недели или как например в течение двух недель.

Как применяется в настоящем документе, термин «бесследный линкер» означает обратимый линкер, который при расщеплении высвобождает лекарственное средство в его свободной форме.

Как применяется в настоящем документе, термин «стандартная доза» означает количество лекарственного средства, вводимое пациенту при однократной дозе.

Как применяется в настоящем документе, термин «растворимый в воде» применительно к полимерному фрагменту означает, что, когда такой полимерный фрагмент является частью конъюгата CNP, по меньшей мере 1 г конъюгата CNP, содержащего такой растворимый в воде полимерный фрагмент, может быть растворен в одном литре воды при 20°С с образованием однородного раствора.

В общем, термин "содержит" или "содержащий" также охватывает "состоит из" или "состоящий из".

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент CNP конъюгата CNP имеет последовательность SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 19, SEQ ID N0:20, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 25 или SEQ ID NO: 30. Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент CNP имеет последовательность SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 24 или SEQ ID NO: 25. Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент CNP имеет последовательность SEQ ID NO: 20. Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент CNP имеет последовательность SEQ ID NO: 21. Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент CNP имеет последовательность SEQ ID NO: 22. Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент CNP имеет последовательность SEQ ID NO: 23. Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент CNP имеет последовательность SEQ ID NO: 24. Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент CNP имеет последовательность SEQ ID NO: 25.

Согласно определенным вариантам осуществления полимерный фрагмент определяется как переменная -Z, которая описана более подробно в других частях настоящего документа.

Сухой фармацевтический состав согласно настоящему изобретению содержит буферный агент. Примерные буферные агенты могут быть выбраны из группы, состоящей из янтарной кислоты, лимонной кислоты, молочной кислоты, уксусной кислоты, глутаминовой кислоты, фумаровой кислоты, аспарагиновой кислоты, глутаровой кислоты, фосфорной кислоты, гистидина, глюконовой кислоты, винной кислоты, яблочной кислоты и их смесей. Специалисту в данной области техники ясно, что соответствующие конъюгированные основания или соли буферных агентов, как например сукцинат, цитрат, лактат, ацетат, глутамат, фумарат, аспартат, глутарат, фосфат, глюконат, тартрат, малат и их смеси, соответственно, также могут быть включены.

Согласно определенным вариантам осуществления буферным агентом является янтарная кислота. Согласно определенным вариантам осуществления буферным агентом является лимонная кислота. Согласно определенным вариантам осуществления буферным агентом является молочная кислота. Согласно определенным вариантам осуществления буферным агентом является уксусная кислота. Согласно определенным вариантам осуществления буферным агентом является глутаминовая кислота. Согласно определенным вариантам осуществления буферным агентом является фумаровая кислота. Согласно определенным вариантам осуществления буферным агентом является аспарагиновая кислота. Согласно определенным вариантам осуществления буферным агентом является глутаровая кислота. Согласно определенным вариантам осуществления буферным агентом является фосфорная кислота. Согласно определенным вариантам осуществления буферным агентом является гистидин. Согласно определенным вариантам осуществления буферным агентом является глюконовая кислота. Согласно определенным вариантам осуществления буферным агентом является винная кислота. Согласно определенным вариантам осуществления буферным агентом является яблочная кислота.

Согласно определенным вариантам осуществления буферный агент имеет концентрацию от около 0.2% до около 3.2% (мас./мас). Согласно определенным вариантам осуществления буферный агент имеет концентрацию от около 0.6% (мас./мас.) до около 1.6% (мас./мас). Согласно определенным вариантам осуществления буферный агент имеет концентрацию от около 0.9% до около 1.0% (мас./мас). Согласно определенным вариантам осуществления буферный агент имеет концентрацию около 1.0% (мас./мас).

Сухой фармацевтический состав согласно настоящему изобретению содержит агент-наполнитель.

Агент-наполнитель может быть выбран из группы, состоящей из трегалозы, маннита, сахарозы, рафинозы, желатина, лактозы, двухосновного фосфата кальция, сорбита, ксилита, глицина, гистидина, гидроксиэтилкрахмала, декстрозы, декстрана, Ficoll^®, пропиленгликоля и их смесей.

Согласно определенным вариантам осуществления агент-наполнитель может быть выбран из группы, состоящей из трегалозы, маннита, сахарозы, раффинозы, желатина, лактозы, двухосновного фосфата кальция, сорбита, ксилита, глицина, гистидина, гидроксиэтилкрахмала, декстрозы, декстрана, пропиленгликоля и их смесей.

Согласно определенным вариантам осуществления агент-наполнитель выбран из группы, состоящей из трегалозы, сахарозы и глицина.

Согласно определенным вариантам осуществления агент-наполнитель представляет собой невосстанавливающий сахар такой как трегалоза или сахароза.

Согласно определенным вариантам осуществления агентом-наполнителем является трегалоза. Согласно определенным вариантам осуществления агентом-наполнителем является маннит. Согласно определенным вариантам осуществления агентом-наполнителем является сахароза. Согласно определенным вариантам осуществления агентом-наполнителем является раффиноза. Согласно определенным вариантам осуществления агентом-наполнителем является желатин. Согласно определенным вариантам осуществления агентом-наполнителем является лактоза. Согласно определенным вариантам осуществления агентом-наполнителем является двухосновный фосфат кальция. Согласно определенным вариантам осуществления агентом-наполнителем является сорбит. Согласно определенным вариантам осуществления агентом-наполнителем является ксилит. Согласно определенным вариантам осуществления агентом-наполнителем является глицин. Согласно определенным вариантам осуществления агентом-наполнителем является гистидин. Согласно определенным вариантам осуществления агентом-наполнителем является гидроксиэтилкрахмал. Согласно определенным вариантам осуществления агентом-наполнителем является декстроза. Согласно определенным вариантам осуществления агентом-наполнителем является декстран. Согласно определенным вариантам осуществления агентом-наполнителем является Ficoll^®. Согласно определенным вариантам осуществления агентом-наполнителем является пропиленгликоль.

Как определено в настоящем документе, термин «трегалоза» предназначен для охвата всех состояний солей и гидратации трегалозы, таких как трегалоза безводная или дигидрат трегалозы. Согласно определенным вариантам осуществления термин «трегалоза» относится к безводной трегалозе. Согласно определенным вариантам осуществления термин «трегалоза» относится к дигидрат трегалозы.

Согласно определенным вариантам осуществления состав может содержать множество агентов-наполнителей.

Согласно определенным вариантам осуществления восстанавливающих Сахаров следует избегать, так как они могут вступать в реакцию с фрагментом CNP. Соответственно, согласно определенным вариантам осуществления фармацевтический состав не содержит восстанавливающий сахар.

Согласно определенным вариантам осуществления агент-наполнитель имеет концентрацию в интервале от около 52.6% до около 98.4% (мас./мас). Согласно определенным вариантам осуществления агент-наполнитель имеет концентрацию в интервале от около 62.4% до около 70.4% (мас./мас). Согласно определенным вариантам осуществления агент-наполнитель имеет концентрацию в интервале от около 85.7% до около 91.6% (мас./мас). Согласно определенным вариантам осуществления агент-наполнитель имеет концентрацию около 65.2% (мас./мас).

Сухой фармацевтический состав согласно настоящему изобретению содержит рН-регулирующий агент. Согласно определенным вариантам осуществления рН-регулирующий агент представляет собой кислоту или ее кислотную соль. Кислота может быть выбраны из группы, состоящей из соляной кислоты, фосфорной кислоты, угольной кислоты, азотной кислоты и их смесей.

Согласно определенным вариантам осуществления рН-регулирующим агентом является соляная кислота. Согласно определенным вариантам осуществления рН-регулирующим агентом является фосфорная кислота. Согласно определенным вариантам осуществления рН-регулирующим агентом является угольная кислота. Согласно определенным вариантам осуществления рН-регулирующим агентом является азотная кислота.

Согласно определенным вариантам осуществления рН-регулирующим агентом является основание или его основная соль. Основание может быть выбрано из группы, состоящей из Трис (трис(гидроксиметил)аминометана), гидроксида натрия, гидроксида калия, лизина и их смесей.

Согласно определенным вариантам осуществления рН-регулирующим агентом является Трис.Согласно определенным вариантам осуществления рН-регулирующим агентом является гидроксид натрия. Согласно определенным вариантам осуществления рН-регулирующим агентом является гидроксид калия. Согласно определенным вариантам осуществления рН-регулирующим агентом является лизин.

Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав согласно настоящему изобретению содержит смесь одного или нескольких кислотных и основных рН-регулирующих агентов.

Согласно определенным вариантам осуществления рН-регулирующий агент или смесь рН-регулирующих агентов имеет концентрацию от около 0.1% до около 5.6% (мас./мас). Согласно определенным вариантам осуществления рН-регулирующий агент или смесь рН-регулирующих агентов имеет концентрацию от около 0.2% (мас./мас.) до около 2.8% (мас./мас). Согласно определенным вариантам осуществления рН-регулирующий агент или смесь рН-регулирующих агентов имеет концентрацию от около 0.5% до около 1.4% (мас./мас). Согласно определенным вариантам осуществления

рН-регулирующий агент или смесь рН-регулирующих агентов имеет концентрацию около 1.2% (мас./мас). Понятно, что в случае смеси рН-регулирующих агентов указанные концентрации относятся к общей концентрации всех рН-регулирующих агентов.

Сухой фармацевтический состав согласно настоящему изобретению содержит конъюгат CNP.

Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат CNP имеет концентрацию от около 23.8% до около 38.7% (мас./мас). Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат CNP имеет концентрацию от около 5.8% (мас./мас.) до около 12.4% (мас./мас). Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат CNP имеет концентрацию от около 1.4% до около 3.7% (мас./мас).

Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат CNP имеет формулу (Ia) или (Ib)

где

- D представляет собой фрагмент CNP,

- L¹ - представляет собой обратимый линкерный фрагмент,

- L² - представляет собой простую химическую связь или спейсерный фрагмент,

- Z представляет собой полимерный фрагмент,

х представляет собой целое число, выбранное из группы, состоящей из 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 и 16, и

у представляет собой целое число, выбранное из группы, состоящей из 1, 2, 3, 4 и 5.

- D формулы (Ia) или (Ib) ковалентно и обратимо конъюгирован с -L¹-.

Согласно определенным вариантам осуществления х формулы (Ia) представляет собой целое число, выбранное из группы, состоящей из 1, 2, 3, 4, 6 и 8. Согласно определенным вариантам осуществления х формулы (Ia) представляет собой целое число, выбранное из группы, состоящей из 1, 2, 4 и 6. Согласно определенным вариантам осуществления х формулы (Ia) представляет собой целое число, выбранное из группы, состоящей из 1, 4 и 6 и согласно определенным вариантам осуществления х формулы (Ia) представляет собой 1.

Согласно определенным вариантам осуществления у формулы (Ib) представляет собой целое число, выбранное из группы, состоящей из 2, 3, 4 и 5. Согласно определенным вариантам осуществления у формулы (Ib) представляет собой целое число, выбранное из группы, состоящей из 2, 3 и 4. Согласно определенным вариантам осуществления у формулы (Ib) представляет собой целое число, выбранное из группы, состоящей из 2 и 3. Согласно определенным вариантам осуществления у формулы (Ib) представляет собой целое число, выбранное из группы, состоящей из 1, 2 и 3. Согласно определенным вариантам осуществления у формулы (Ib) представляет собой 1. Согласно определенным вариантам осуществления у формулы (Ib) представляет собой 2.

Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат CNP имеет формулу (Ia), где х=1.

Согласно определенным вариантам осуществления -D формулы (Ia) или (Ib) имеет последовательность SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 25 или SEQ ID NO: 30. Согласно определенным вариантам осуществления -D формулы (Ia) или (Ib) имеет последовательность SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 24 или SEQ ID NO: 25.

Согласно определенным вариантам осуществления -D формулы (Ia) или (Ib) имеет последовательность SEQ ID NO: 20. Согласно определенным вариантам осуществления -D формулы (Ia) или (Ib) имеет последовательность SEQ ID NO: 21. Согласно определенным вариантам осуществления -D формулы (Ia) или (Ib) имеет последовательность SEQ ID NO: 22. Согласно определенным вариантам осуществления -D формулы (Ia) или (Ib) имеет последовательность SEQ ID NO: 23. Согласно определенным вариантам осуществления -D формулы (Ia) или (Ib) имеет последовательность SEQ ID NO: 24. Согласно определенным вариантам осуществления -D формулы (Ia) или (Ib) имеет последовательность SEQ ID NO: 25.

Фрагмент -L¹- формулы (Ia) или (Ib) либо конъюгирован с функциональной группой боковой цепи аминокислотного остатка -D, либо с N-концевой аминной функциональной группой, либо с С-концевой карбоксильной функциональной группой -D, либо с атомом азота в основной полипептидной цепи -D. Присоединение к N-концу или С-концу может быть прямым через соответствующую аминную или карбоксильную функциональную группу, соответственно, или непрямое, где спейсерный фрагмент сначала конъюгирован с аминной или карбоксильной функциональной группой, с которой фрагмент -L¹-конъюгирован.

Фрагмент -L¹- формулы (Ia) или (Ib) представляет собой обратимый линкер, из которого лекарственное средство, т.е. D-H высвобождается в его свободной форме, т.е. -L¹- представляет собой бесследный линкер. Подходящие обратимые линкеры известны в данной области техники, как например, фрагменты обратимых линкеров, раскрытые в WO 2005/099768 А2, WO 2006/136586 А2, WO 2011/089216 А1 и WO 2013/024053 А1, которые включены в настоящую заявку посредством ссылки.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- представляет собой обратимый линкер, как описано в WO 2011/012722 A1, WO 2011/089214 A1, WO 2011/089215 A1, WO 2013/024052 А1 и WO 2013/160340 А1, которые включены в настоящую заявку посредством ссылки.

Фрагмент -L¹- может быть соединен с -D через любой тип связи, при условии, что она является обратимой. Предпочтительно, -L¹- соединен с -D через связь, выбранную из группы, состоящей из амида, сложного эфира, карбамата, ацеталя, аминаля, имина, оксима, гидразона, дисульфида и ацилгуанидина. Даже более предпочтительно -L¹- соединен с -D через связь, выбранную из группы, состоящей из амида, сложного эфира, карбамата и ацилгуанидина. Понятно, что эти связи сами по себе не могут быть обратимыми, но что соседние группы, содержащиеся в L¹, могут сделать связь обратимой.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹- соединен с -D через амидную связь.

Фрагмент -L¹- раскрывается в WO 2009/095479 А2. Соответственно, в одном предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения составляющая -L¹- имеет формулу (II):

где пунктирная линия обозначает присоединение к атому азота фрагмента -D, который представляет собой фрагмент CNP посредством образования амидной связи,

Х- представляет собой -C(R⁴R^4a)-; -N(R⁴)-; -О-; -C(R⁴R^4a)-C(R⁵R^5a)-; -C(R⁵R^5a)-C(R⁴R^4a)-; -C(R⁴R^4a)-N(R⁶)-; -N(R⁶)-C(R⁴R^4a)-; -C(R⁴R^4a)-O-; -O-C(R⁴R^4a)-; или -C(R⁷R^7a)-;

X¹ представляет собой С; или S(O);

-X²- представляет собой -C(R⁸R^8a)-; или -C(R⁸R^8a)-C(R⁹R^9a)-;

=Х³ представляет собой =O;=S; или =N-CN;

-R¹, -R^1a, -R², -R^2a, -R⁴, -R^4a, -R⁵, -R^5a, -R⁶, -R⁸, -R^8a, -R⁹, -R^9a независимо выбирают из группы, состоящей из -Н; и C_1-6 алкила;

-R³, -R^3a независимо выбирают из группы, состоящей из -Н; и C_1-6 алкила, при условии, что в случае, если один из -R³, -R^3a или оба отличны от водорода, они соединены с N, к которому они присоединены через SP³-гибридизованный атом углерода;

-R⁷ представляет собой -N(R¹⁰R^10a); или -NR¹⁰-(C=O)-R¹¹;

-R^7a, -R¹⁰, -R^10a, -R¹¹ независимо друг от друга представляют собой -Н; или С_1-6 алкил;

необязательно, одна или более из пар -R^1a/-R^4a, -R^1a/-R^5a, -R^1a/-R^7a, -R^4a/-R^5a, -R^8a/-R^9a образуют химическую связь;

необязательно, одна или более из пар -R¹-R^1a, -R²/-R^2a, -R⁴/-R^4a, -R⁵/-R^5a, -R⁸/-R^8a,-R⁹/-R^9a соединяются вместе с атомом, к которому они присоединены, с образованием С_3-10 циклоалкила; или 3-10-членного гетероциклила,

необязательно, одна или более из пар -R¹-R⁴, -R¹-R⁵, -R¹-R⁶, -R¹-R^7a, -R⁴-R⁵, -R⁴/-R⁶, -R⁸/-R⁹, -R²/-R³ соединяются вместе с атомами, к которым они присоединены, с образованием кольца А;

необязательно, R³/R^3a соединяются вместе с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием 3-10-членного гетероцикла,

А выбирают из группы, состоящей из фенила; нафтила; инденила; инданила; тетралинила; С_3-10 циклоалкила; 3-10-членного гетероциклила; и 8-11-членного гетеробициклила, и

где -L¹- замещен -L²-Z, и где -L¹- необязательно дополнительно замещена, при условии, что водород, отмеченный звездочкой в формуле (II), не замещен -L²-Z или заместителем,

где

-L²- представляет собой одинарную химическую связь или спейсер, и

-Z представляет собой растворимый в воде полимерный фрагмент,

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- формулы (II) замещен одним фрагментом -L²-Z.

В одном варианте выполнения настоящего изобретения -L¹- формулы (II) дополнительно не замещена.

Понятно, что если -R³/-R^3a формулы (II) соединяются вместе с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием 3-10-членного гетероцикла, только такие 3-10-членные гетероциклы могут быть образованы, в которых атомы, непосредственно соединенные с атомом азота, представляют собой SP³-гибридизованные атомы углерода. Другими словами, такой 3-10-членный гетероцикл, образованный -R³/-R^3a вместе с атомом азота, с которыми они соединены, имеет следующую структуру:

где

пунктирная линия обозначает присоединение к остатку -L¹-;

кольцо содержит от 3 до 10 атомов, включая по меньшей мере один атом азота; и

R^# и R^## представляют собой SP³-гибридизованный атом углерода.

Также понятно, что 3-10-членный гетероцикл может быть дополнительно замещен.

Примерными вариантами выполнения подходящих 3-10-членных гетероциклов, образованных -R³/-R^3a формулы (II) вместе с атомом азота, к которому они присоединены, являются следующие:

где

пунктирная линия обозначает присоединение к остатку молекулы; и

-R выбирают из группы, состоящей из -Н и С_1-6 алкила.

-L¹- формулы (II) может необязательно быть дополнительно замещенной. В общем, любой заместитель может применяться, до тех пор, пока принцип расщепления не затронут, т.е. водород, помеченный звездочкой в формуле (II), не заменен, а азот фрагмента

формулы (II) остается частью первичного, вторичного или третичного амина, т.е. -R³ и R^3a независимо друг от друга представляют собой -Н или соединены с -N< через SP³-гибридизованный атом углерода.

Согласно определенным вариантам осуществления -R¹ или -R^1a формулы (II) замещен -L²-Z. Согласно определенным вариантам осуществления -R² или -R^2a формулы (II) замещен -L²-Z. Согласно определенным вариантам осуществления -R³ или -R^3a формулы (II) замещен -L²-Z. Согласно определенным вариантам осуществления -R⁴ формулы (II) замещен -L²-Z. Согласно определенным вариантам осуществления -R⁵ или -R^5a формулы (II) замещен -L²-Z. Согласно определенным вариантам осуществления -R⁶ формулы (II) замещен -L²-Z. Согласно определенным вариантам осуществления -R⁷ или -R^7a формулы (II) замещен -L²-Z. Согласно определенным вариантам осуществления -R⁸ или -R^8a формулы (II) замещен -L²-Z. Согласно определенным вариантам осуществления -R⁹ или -R^9a формулы (II) замещен -L²-Z.

Согласно определенным вариантам осуществления -R⁴ формулы (II) замещен -L²-Z.

Согласно определенным вариантам осуществления -Х- формулы (II) представляет собой -C(R⁴R^4a)- или -N(R⁴)-.

Согласно определенным вариантам осуществления -Х- формулы (II) представляет собой -C(R⁴R^4a)-.

Согласно определенным вариантам осуществления X¹ формулы (II) представляет собой С.

Согласно определенным вариантам осуществления =Х³ формулы (II) представляет собой =O.

Согласно определенным вариантам осуществления -X²- формулы (II) представляет собой -C(R⁸R^8a)-.

Согласно определенным вариантам осуществления -R⁸ и -R^8a формулы (II) независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила и этила. Согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере один из -R⁸ и -R^8a формулы (II) представляет собой -Н. Согласно определенным вариантам осуществления оба -R⁸ и -R^8a формулы (II) представляют собой -Н.

Согласно определенным вариантам осуществления -R¹ и –R^1a формулы (II) независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила и этила. Согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере один из -R¹ и –R^1a формулы (II) представляет собой -Н. Согласно определенным вариантам осуществления оба -R¹ и –R^1a формулы (II) представляют собой -Н.

Согласно определенным вариантам осуществления -R² и -R^2a формулы (II) независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила и этила. Согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере один из -R² и -R^2a формулы (II) представляет собой -Н. Согласно определенным вариантам осуществления оба -R² и -R^2a формулы (II) представляют собой Н.

Согласно определенным вариантам осуществления -R³ и -R^3a формулы (II) независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила, этила, пропила и бутила. Согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере один из -R³ и -R^3a формулы (II) представляет собой метил. Согласно определенным вариантам осуществления -R³ и -R^3a формулы (II) оба представляют собой -Н. Согласно определенным вариантам осуществления -R³ и -R^3a формулы (II) оба представляют собой метил. Согласно определенным вариантам осуществления -R³ формулы (II) представляет собой Н, и -R^3a формулы (II) представляет собой метил.

Согласно определенным вариантам осуществления -R⁴ и -R^4a формулы (II) независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила и этила. Согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере один из -R⁴ и -R^4a формулы (II) представляет собой -Н. Согласно определенным вариантам осуществления оба -R⁴ и -R^4a формулы (II) представляют собой -Н.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹- имеет формулу (IIa):

где пунктирная линия показывает присоединение к азоту -D, который представляет собой фрагмент CNP посредством образования амидной связи,

-R¹, -R^1a, -R², -R^2a, -R³, -R^3a, -R⁴, -R^4a и -X² - имеют значения как определено для формулы (II), и

где -L¹ - замещен -L²-Z, и где -L¹- необязательно дополнительно замещен, при условии, что водород, отмеченный звездочкой в формуле (IIa), не замещен -L²-Z или заместителем.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- формулы (IIa) замещен одним фрагментом -L²-Z.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹- формулы (IIa) дополнительно не замещен.

Согласно определенным вариантам осуществления -R¹ и -R^1a формулы (IIa) независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила и этила. Согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере один из -R¹ и -R^1a формулы (IIa) представляет собой -Н. Согласно определенным вариантам осуществления оба -R¹ и -R^1a формулы (IIa) представляют собой -Н.

Согласно определенным вариантам осуществления -R⁴ и -R^4a формулы (IIa) независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила и этила. Согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере один из -R⁴ и -R^4a формулы (IIa) представляет собой -Н. Согласно определенным вариантам осуществления оба -R⁴ и -R^4a формулы (IIa) представляют собой -Н.

Согласно определенным вариантам осуществления -X² - формулы (IIa) представляет собой -C(R⁸R^8a)-.

Согласно определенным вариантам осуществления -R⁸ и -R^8a формулы (IIa) независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила и этила. Согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере один из -R⁸ и -R^8a формулы (IIa) представляет собой -Н. Согласно определенным вариантам осуществления оба -R⁸ и -R^8a формулы (IIa) представляют собой -Н.

Согласно определенным вариантам осуществления -R² и -R^2a формулы (IIa) независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила и этила. Согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере один из -R² и -R^2a формулы (IIa) представляет собой -Н. Согласно определенным вариантам осуществления оба -R² и -R^2a формулы (IIa) представляют собой Н.

Согласно определенным вариантам осуществления -R³ и -R^3a формулы (IIa) независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила, этила, пропила и бутила. Согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере один из -R³ и -R^3a формулы (IIa) представляет собой метил. Согласно определенным вариантам осуществления -R³ и -R^3a формулы (IIa) оба представляют собой -Н. Согласно определенным вариантам осуществления -R³ и -R^3a формулы (IIa) оба представляют собой метил. Согласно определенным вариантам осуществления -R³ формулы (IIa) представляет собой -Н и -R^3a формулы (IIa) представляет собой метил.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹- имеет формулу (IIb):

где пунктирная линия показывает присоединение к азоту -D, который представляет собой фрагмент CNP посредством образования амидной связи,

-R², -R^2a, -R³, -R^3a и -X²- имеют значения как определено для формулы (II), и

где -L¹- замещен -L²-Z, и где -L¹- необязательно дополнительно замещен, при условии, что водород, отмеченный звездочкой в формуле (IIb) не замещен -L²-Z или заместителем.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- формулы (IIb) замещен одним фрагментом -L²-Z.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹- формулы (IIb) дополнительно не замещен.

Согласно определенным вариантам осуществления -X² - формулы (IIb) представляет собой -C(R⁸R^8a)-.

Согласно определенным вариантам осуществления -R⁸ и -R^8a формулы (IIb) независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила и этила. Согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере один из -R⁸ и -R^8a формулы (IIb) представляет собой -Н. Согласно определенным вариантам осуществления оба -R⁸ и -R^8a формулы (IIb) представляют собой -Н.

Согласно определенным вариантам осуществления -R² и -R^2a формулы (IIb) независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила и этила. Согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере один из -R² и -R^2a формулы (IIb) представляет собой -Н. Согласно определенным вариантам осуществления оба -R² и -R^2a формулы (IIb) представляют собой Н.

Согласно определенным вариантам осуществления -R³ и -R^3a формулы (IIb) независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила, этила, пропила и бутила. Согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере один из -R³ и -R^3a формулы (IIb) представляет собой метил. Согласно определенным вариантам осуществления -R³ и -R^3a формулы (IIb) оба представляют собой -Н. Согласно определенным вариантам осуществления -R³ и -R^3a формулы (IIb) оба представляют собой метил. Согласно определенным вариантам осуществления -R³ формулы (IIb) представляет собой -Н и -R^3a формулы (IIb) представляет собой метил.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹- имеет формулу (IIb'):

где

где пунктирная линия показывает присоединение к азоту -D, который представляет собой фрагмент CNP посредством образования амидной связи, отмеченная звездочкой пунктирная линия показывает присоединение к -L²-,

-R², -R^2a, -R³, -R^3a и -X²- имеют значения как определено для формулы (II), и

где -L¹- необязательно дополнительно замещен, при условии, что водород, отмеченный звездочкой в формуле (IIb') не замещен заместителем.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹- формулы (IIb') дополнительно не замещен.

Согласно определенным вариантам осуществления -X²- формулы (IIb') представляет собой -C(R⁸R^8a)-.

Согласно определенным вариантам осуществления -R⁸ и -R^8a формулы (IIb') независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила и этила. Согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере один из -R⁸ и -R^8a формулы (IIb') представляет собой -Н. Согласно определенным вариантам осуществления оба -R⁸ и -R^8a формулы (IIb') представляют собой -Н.

Согласно определенным вариантам осуществления -R² и -R^2a формулы (IIb') независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила и этила. Согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере один из -R² и -R^2a формулы (IIb') представляет собой -Н. Согласно определенным вариантам осуществления оба -R² и -R^2a формулы (IIb') представляют собой Н.

Согласно определенным вариантам осуществления -R³ и -R^3a формулы (IIb') независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила, этила, пропила и бутила. Согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере один из -R³ и -R^3a формулы (IIb') представляет собой метил. Согласно определенным вариантам осуществления -R³ и -R^3a формулы (IIb') оба представляют собой -Н. Согласно определенным вариантам осуществления -R³ и -R^3a формулы (IIb') оба представляют собой метил. Согласно определенным вариантам осуществления -R³ формулы (IIb') представляет собой -Н и -R^3a формулы (IIb') представляет собой метил.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹- имеет формулу (IIc):

где пунктирная линия показывает присоединение к азоту -D, который представляет собой фрагмент CNP посредством образования амидной связи, и

где -L¹- замещен -L²-Z, и где -L¹- необязательно дополнительно замещен, при условии, что водород, отмеченный звездочкой в формуле (IIc) не замещен -L²-Z или заместителем.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- формулы (IIc) замещен одним фрагментом -L²-Z.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹- формулы (IIc) дополнительно не замещен.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹- имеет формулу (IIc-а):

где пунктирная линия показывает присоединение к азоту -D, который представляет собой фрагмент CNP посредством образования амидной связи, и

где -L¹- замещен -L²-Z, и где -L¹- необязательно дополнительно замещен, при условии, что водород, отмеченный звездочкой в формуле (IIc-а) не замещен -L²-Z или заместителем.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- формулы (IIc-а) замещен одним фрагментом -L²-Z.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹- формулы (IIc-а) дополнительно не замещен.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹- имеет формулу (IIc-b):

где пунктирная линия показывает присоединение к азоту -D, который представляет собой фрагмент CNP посредством образования амидной связи, и

где -L¹- замещен -L²-Z, и где -L¹- необязательно дополнительно замещен, при условии, что водород, отмеченный звездочкой в формуле (IIc-b) не замещен –L²-Z или заместителем.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- формулы (IIc-b) замещен одним фрагментом -L²-Z.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹- формулы (IIc-b) дополнительно не замещен.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹- выбран из группы, состоящей из формулы

(IIc-i), (IIc-ii), (IIc-iii), (IIc-iv) и (IIc-v):

и

где

неотмеченная пунктирная линия показывает присоединение к атому азота -D, который представляет собой фрагмент CNP посредством образования амидной связи, и

отмеченная звездочкой пунктирная линия показывает присоединение к -L²-Z, и

-L¹- необязательно дополнительно замещен, при условии, что водород, отмеченный звездочкой в формуле (IIc-i), (IIc-ii), (IIc-iii), (IIc-iv) и (IIc-v) не замещен заместителем.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹- формулы (IIc-i), (IIc-ii), (IIc-iii), (IIc-iv) и (IIc-v) дополнительно не замещен.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹- имеет формулу (IIc-ii):

где

неотмеченная пунктирная линия показывает присоединение к атому азота -D, который представляет собой фрагмент CNP посредством образования амидной связи, и

отмеченная звездочкой пунктирная линия показывает присоединение к -L²-Z. Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- формулы (IIc-ii) замещен одним фрагментом -L²-Z.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L1- выбран из группы, состоящей из формулы

(IIc-i'), (IIc-ii'), (IIc-iii'), (IIc-iv') и (IIc-v'):

и

где

неотмеченная пунктирная линия показывает присоединение к атому азота -D, который представляет собой фрагмент CNP посредством образования амидной связи, отмеченная звездочкой пунктирная линия показывает присоединение к -L²-Z, и -L¹- необязательно дополнительно замещен, при условии, что водород, отмеченный звездочкой в формуле (IIc-i'), (IIc-ii'), (IIc-iii'), (IIc-iv') и (IIc-v'), не замещен заместителем.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹- формулы (IIc- i'), (IIc-ii'), (IIc-iii'), (IIc-iv') и (IIc-v') дополнительно не замещен.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹- имеет формулу (IIc-ii'):

где

неотмеченная пунктирная линия показывает присоединение к атому азота -D, который представляет собой фрагмент CNP посредством образования амидной связи, и

отмеченная звездочкой пунктирная линия показывает присоединение к -L²-Z. Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- формулы (IIc-ii') замещен одним фрагментом -L²-Z.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹- выбран из группы, состоящей из формулы (IIc-i''), (IIc-ii''), (IIc-iii'') и (IIc-iv''):

и

где

неотмеченная пунктирная линия показывает присоединение к атому азота -D, который представляет собой фрагмент CNP посредством образования амидной связи, отмеченная звездочкой пунктирная линия показывает присоединение к -L²-Z, и -L¹- необязательно дополнительно замещен, при условии, что водород, отмеченный звездочкой в формуле (IIc-i''), (IIc-ii''), (IIc-iii'') и (IIc-iv'') не замещен заместителем.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹- формулы (IIc-i''), (IIc-ii''), (IIc-iii'') и (IIc-iv'') дополнительно не замещен.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹- имеет формулу (IIc-ii''):

где

неотмеченная пунктирная линия показывает присоединение к атому азота -D, который представляет собой фрагмент CNP посредством образования амидной связи, и

отмеченная звездочкой пунктирная линия показывает присоединение к -L²-Z. Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- формулы (IIc-ii'') замещен одним фрагментом -L² -Z.

Необязательные дополнительные заместители -L¹- формулы (II), (IIa), (IIb), (IIb'), (IIc), (IIc-а), (IIc-b), (IIc-i), (IIc-ii), (IIc-iii), (IIc-iv), (IIc-v), (IIc-i'), (IIc-ii'), (IIc-iii'), (IIc-iv'), (IIc-v'), (IIc-i''), (IIc-ii''), (IIc-iii'') и (IIc-iv'') согласно определенным вариантам осуществления имеют значения, как описано выше.

Другой фрагмент -L¹- раскрыт в WO2016/020373 A1. Соответственно, согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹- имеет формулу (III):

где

пунктирная линия показывает присоединение первичного или вторичного амина или гидроксила -D, который представляет собой фрагмент CNP, посредством образования амидной или сложноэфирной связи, соответственно, -R¹, -R^1a, -R², -R^2a, -R³ и -R^3a независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из -Н, -C(R⁸R^8aR^8b), -C(=O)R⁸, C≡N, -C(=NR⁸)R^8a, -CR⁸(=CR^8aR^8b), -C=CR⁸ и -T,

-R⁴, -R⁵ и -R^5a независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из -Н, -C(R⁹R^9aR^9b) и -Т,

a1 и а2 независимо друг от друга представляют собой 0 или 1,

каждый -R⁶, -R^6a, -R⁷, -R^7a, -R⁸, -R^8a, -R^8b, -R⁹, -R^9a, -R^9b независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из -Н, галогена, -CN, -COOR¹⁰, -OR¹⁰, -C(O)R¹⁰, -C(O)N(R¹⁰R^10a), -S(O)₂N(R¹⁰R^10a), -S(O)N(R¹⁰R^10a), -S(O)₂R¹⁰, -S(O)R¹⁰, -N(R¹⁰)S(O)₂N(R^10aR^10b), -SR¹⁰, -N(R¹⁰R^10a), -NO₂, -OC(O)R¹⁰, -N(R¹⁰)C(O)R^10a, -N(R¹⁰)S(O)₂R^10a, -N(R¹⁰)S(O)R^10a, -N(R¹⁰)C(O)OR^10a, -N(R¹⁰)C(O)N(R^10aR^10b), -OC(O)N(R¹⁰R^10a), -T, C_1-20 алкила, C_2-20 алкенила и C_2-20 алкинила, где -T, C_1-20 алкил, С_2-20 алкенил и С_2-20 алкинил необязательно замещены одним или несколькими -R¹¹, которые являются одинаковыми или различными, и где C_1-20 алкил, С_2-20 алкенил и С_2-20 алкинил необязательно прерываются одной или несколькими группами, выбранными из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R¹²)-, -S(O)₂N(R¹²)-, -S(O)N(R¹²)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R¹²)S(O)₂N(R^12a)-, -S-, -N(R¹²)-, -OC(OR¹²)(R^12a)-, -N(R¹²)C(O)N(R^12a)- и -OC (O)N(R¹²)-,

каждый -R¹⁰, -R^10a, -R^10b независимо выбран из группы, состоящей из -Н, -Т, C_1-20 алкила, С_2-20 алкенила и С_2-20 алкинила, где -Т, С_1-20 алкил, С_2-20 алкенил и С_2-20 алкинил необязательно замещены одним или несколькими -R¹¹, которые являются одинаковыми или различными, и где C_1-20 алкил, С_2-20 алкенил и С_2-20 алкинил необязательно прерываются одной или несколькими группами, выбранными из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R¹²)-, -S(O)₂N(R¹²)-, -S(O)N(R¹²)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R¹²)S(O)₂N(R^12a)-, -S-, -N(R¹²)-, -OC(OR¹²)(R^12a)-, -N(R¹²)C(O)N(R^12a)- и -OC(O)N(R¹²)-,

каждый T независимо друг от друга выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила С_3-10 циклоалкила, 3-10-ти членного гетероциклила и 8-11-ти членного гетеробициклила, где каждый Т независимо необязательно замещен одним или несколькими -R¹¹, которые являются одинаковыми или различными,

каждый -R¹¹ независимо друг от друга выбран из галогена, -CN, оксо (=O), -COOR¹³, -OR¹³, -C (O)R¹³, -C (O)N(R¹³R^13a), -S(O)₂N(R¹³R^13a), -S(O)N(R¹³R^13a), -S(O)₂R¹³, -S(O)R¹³, -N(R¹³)S(O)₂N(R^13aR^13b), -SR¹³, -N(R¹³R^13a), -NO₂, -OC(O)R¹³, -N(R¹³)C(O)R^13a, -N(R¹³)S(O)₂R^13a, -N(R¹³)S(O)R^13a, -N(R¹³)C(O)OR^13a, -N(R¹³)C(O)N(R^13aR^13b), -OC(O)N(R¹³R^13a) и C_1-6 алкила, где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, которые являются одинаковыми или различными,

каждый -R¹², -R^12a, -R¹³, -R^13a, -R^13b независимо выбран из группы, состоящей из -Н и C_1-6 алкила, где С_1-6 алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, которые являются одинаковыми или различными,

необязательно, одна или несколько пар -R¹/-R^1a, -R²/-R^2a, -R³/-R^3a, -R⁶/-R^6a, -R⁷/-R^7a соединены вместе с атомом, к которому они присоединены, с образованием С_3-10 циклоалкила или 3-10-ти членного гетероциклила, необязательно, одна или несколько пар -R¹/-R², -R¹/-R³, -R¹/-R⁴, -R¹/-R⁵, -R¹/-R⁶, -R¹/-R⁷, -R²/-R³, -R²/-R⁴, -R²/-R⁵, -R²/-R⁶, -R²/-R⁷, -R³/-R⁴, -R³/-R⁵, -R³/-R⁶, -R³/-R⁷, -R⁴/-R⁵, -R⁴/-R⁶, -R⁴/-R⁷, -R⁵/-R⁶, -R⁵/-R⁷, -R⁶/- соединены вместе с атомами, к которым они присоединены, с образованием кольца А,

А выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила, С_3-10 циклоалкила, 3-10-ти членного гетероциклила, и 8-11-ти членного гетеробициклла,

где -L¹ - замещен -L²-Z, и где -L¹- необязательно дополнительно замещен,

где

-L²- представляет собой простую химическую связь или спейсер, и

-Z представляет собой растворимый в воде полимерный фрагмент.

Необязательные дополнительные заместители -L¹- формулы (III) согласно определенным вариантам осуществления имеют значения, как описано выше.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- формулы (III) замещен одним фрагментом -L²-Z.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- формулы (III) дополнительно не замещен.

Дополнительные варианты осуществления для -L¹- раскрыты в ЕР1536334 В1, WO2009/009712 A1, WO2008/034122 A1, WO2009/143412 A2, WO2011/082368 А2 и US8618124 B2, которые включены в настоящий документ посредством ссылки во всей своей полноте.

Дополнительные варианты осуществления для -L¹- раскрыты в US8946405 B2 и US8754190 B2, которые включены в настоящий документ посредством ссылки во всей своей полноте. Соответственно, фрагмент -L¹- имеет формулу (IV):

где

пунктирная линия показывает присоединение к -D, который представляет собой фрагмент CNP, и где присоединение происходит через функциональную группу -D, выбранную из группы, состоящей из -ОН, -SH и -NH₂,

m представляет собой 0 или 1,

по меньшей мере один или оба ил -R¹ и -R² представляет собой/независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из -CN, -NO₂, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероарила, необязательно

замещенного алкенила, необязательно замещенного алкинила, -C(O)R³, -S(O)R³, -S(O)₂R³ и -SR⁴,

один и только один из -R¹ и -R² выбран из группы, состоящей из -Н, необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного арилалкила и необязательно замещенного гетероарилалкила,

-R³ выбран из группы, состоящей из -Н, необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного арилалкила, необязательно замещенного гетероарила, необязательно замещенного гетероарилалкила, -OR⁹ и -N(R⁹)₂,

-R⁴ выбран из группы, состоящей из необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного арилалкила, необязательно замещенного гетероарила и необязательно замещенного гетероарилалкила,

каждый -R⁵ независимо выбран из группы, состоящей из -Н, необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного алкенилалкила, необязательно замещенного алкинилалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного арилалкила, необязательно замещенного гетероарила и необязательно замещенного гетероарилалкила,

-R⁹ выбран из группы, состоящей из -Н и необязательно замещенного алкила,

-Y- отсутствует, и -Х- представляет собой -О- или -S-, или

-Y- представляет собой -N(Q)CH₂-, и -Х- представляет собой -О-,

Q выбран из группы, состоящей из необязательно замещенного

алкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного арилалкила, необязательно замещенного гетероарила и необязательно замещенного гетероарилалкила,

необязательно, -R¹ и -R² могут быть соединены с образованием 3-8-ми членного кольца, и

необязательно, оба -R⁹ вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют гетероциклильное кольцо,

где -L¹- замещен -L²-Z, и где -L¹- необязательно дополнительно замещен, где

-L²- представляет собой простую химическую связь или спейсер, и

-Z представляет собой растворимый в воде полимерный фрагмент.

Необязательные дополнительные заместители -L¹- формулы (IV) согласно определенным вариантам осуществления имеют значения, как описано выше.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- формулы (IV) замещен одним фрагментом -L²-Z.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- формулы (IV) дополнительно не замещен.

Только в контексте формулы (IV) применяемые термины имеют следующие значения:

Термин "алкил", как применяется в настоящей заявке, включает линейные, разветвленные или циклические насыщенные углеводородные группы, имеющие от 1 до 8 атомов углерода, или в некоторых вариантах выполнения настоящего изобретения от 1 до 6 или от 1 до 4 атомов углерода.

Термин "алкокси" включает алкильные группы, связанные с кислородом, включая метокси, этокси, изопропокси, циклопропокси, циклобутокси и подобное.

Термин "алкенил" включает неароматические ненасыщенные углеводороды с двойными связями углерод-углерод.

Термин "алкинил" включает неароматические ненасыщенные углеводороды с тройными связями углерод-углерод.

Термин "арил" включает ароматические углеводородные группы, имеющие от 6 до 18 атомов углерода, предпочтительно от 6 до 10 атомов углерода, включая группы, такие как фенил, нафтил и антраценил. Термин "гетероарил" включает ароматические кольца, содержащие от 3 до 15 атомов углерода, содержащие по меньшей мере один N, О или S атом, предпочтительно от 3 до 7 атомов углерода, содержащие по меньшей мере один N, О или S атом, включая группы, такие как пирролил, пиридил, пиримидинил, имидазолил, оксазолил, изооксазолил, тиазолил, изотиазолил, хинолил, индолил, инденил и подобное.

Согласно определенным вариантам осуществления алкенильные, алкинильные, арильные или гетероарильные фрагменты могут быть соединены с оставшейся частью молекулы через алкиленовую связь. При этих обстоятельствах заместитель будет называться алкенилалкил, алкинилалкил, арилалкил или гетероарилалкил, что указывает на то, что алкиленовая составляющая находится между алкенилом, алкинилом, арилом или гетероарилом и молекулой, с которой связан алкенил, алкинил, арил или гетероарил.

Термин "галоген" включает бром, фтор, хлор и иод.

Термин "гетероциклическое кольцо" относится к 4-8-членному ароматическому или не ароматическому кольцу, содержащему от 3 до 7 атомов углерода и по меньшей мере один N, О, или S атом. Примерами являются пиперидинил, пиперазинил, тетрагидропиранил, пирролидин и тетрагидрофуранил, а также примерные группы, приведенные для термина "гетероарил".

Когда кольцевая система необязательно замещена, подходящие заместители выбирают из группы, состоящей из алкила, алкенила, алкинила или дополнительного кольца, где каждый необязательно дополнительно замещен. Необязательные заместители в любой группе, включая вышеуказанные, включают гало, нитро, циано, OR, -SR, -NR₂, -OCOR, -NRCOR, -COOR, -CONR₂, -SOR, -SO₂R, -SONR₂, -SO₂NR₂, где каждый R независимо представляет собой алкил, алкенил, алкинил, арил или гетероарил, или две R группы, взятые вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют кольцо.

Дополнительный вариант осуществления для -L¹- раскрыт в WO2013/036857 A1, которая включена в настоящий документ посредством ссылки во всей своей полноте. Соответственно, согласно определенным вариантам осуществления moiety -L¹- имеет формулу (V):

пунктирная линия показывает присоединение к -D, который представляет собой фрагмент CNP, и где присоединение происходит через аминную функциональную группу -D,

-R¹ выбран из группы, состоящей из необязательно замещенный С₁-С₆ линейного, разветвленного или циклического алкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероарила, алкокси, и -NR⁵₂,

-R² выбран из группы, состоящей из -Н, необязательно замещенного C₁-C₆

алкила, необязательно замещенного арила и необязательно замещенного гетероарил,

-R³ выбран из группы, состоящей из -Н, необязательно замещенного С₁-С₆ алкила, необязательно замещенного арила и необязательно замещенного гетероарил,

-R⁴ выбран из группы, состоящей из -Н, необязательно замещенного С₁-С₆ алкила, необязательно замещенного арила и необязательно замещенного гетероарила,

каждый -R⁵ независимо друг от друга выбран из группы, состоящей из -Н, необязательно замещенного C₁-С₆ алкила, необязательно замещенного арила и необязательно замещенного гетероарила, или два -R⁵ вместе могут представлять собой циклоалкил или циклогетероалкил,

где -L¹- замещен -L²-Z, и где -L¹- необязательно дополнительно замещен, где

-L²- представляет собой простую химическую связь или спейсер, и

-Z представляет собой растворимый в воде полимерный фрагмент.

Необязательные дополнительные заместители -L¹- формулы (V) согласно определенным вариантам осуществления имеют значения, как описано выше.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- формулы (V) замещен одним фрагментом -L²-Z.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- формулы (V) дополнительно не замещен.

Только в контексте формулы (V) применяемые термины имеют следующие значения:

"Алкил", "алкенил" и "алкинил" включают линейные, разветвленные или циклические углеводородные группы, имеющие от 1 до 8 атомов углерода или 1-6 атомов углерода или 1-4 атомов углерода, где алкилом является насыщенный углеводород, алкенил включает одну или более двойных связей углерод-углерод, и алкинил включает одну или более тройных связей углерод-углерод. Если иного не указано, они содержат 1-6 атомов углерода.

"Арил" включает ароматические углеводородные группы, имеющие от 6 до 18 атомов углерода, предпочтительно 6-10 атомов углерода, включая группы, такие как фенил, нафтил и антрацен. "Гетероарил" включает ароматические кольца, содержащие 3-15 атомов углерода, содержащие по меньшей мере один N, О или S атом, предпочтительно 3-7 атомов углерода, содержащие по меньшей мере один N, О или S атом, включая группы, такие как пирролил, пиридил, пиримидинил, имидазолил, оксазолил, изооксазолил, тиазолил, изотиазолил, хинолил, индолил, инденил и подобное.

Термин "замещенный" означает алкильную, алкенильную, алкинильную, арильную или гетероарильную группу, включающую одну или более групп заместителей вместо одного или более атомов водорода. Заместители могут в общем быть выбраны из галогена, включая F, Cl, Br и I; низшего алкила, включая линейный, разветвленный и циклический; низшего галоалкила, включая фторалкил, хлоралкил, бромалкил и иодалкил; ОН; низшего алкокси, включая линейные, разветвленные и циклические; SH; низшего алкилтио, включая линейный, разветвленный и циклический; амино, алкиламино, диалкиламино, силила, включая алкилсилил, алкоксисилил и арилсилил; нитро; циано; карбонила; карбоновой кислоты, сложного эфира карбоновой кислоты, карбоксильного амида, аминокарбонила; аминоацила; карбамата; мочевины; тиокарбамата; тиомочевины; кетона; сульфона; сульфонамида; арила, включая фенил, нафтил и антраценил; гетероарила, включая 5-ти членные гетероарилы, включая пиррол, имидазол, фуран, тиофен, оксазол, тиазол, изоксазол, изотиазол, тиадиазол, триазол, оксадиазол и тетразол, 6-ти членные гетероарилы, включая пиридин, пиримидин, пиразин, и конденсированные гетероарилы, включая бензофуран, бензотиофен, бензоксазол, бензимидазол, индол, бензотиазол, бензизоксазол и бензизотиазол.

Другой вариант осуществления для -L¹- раскрыт в US7585837 B2, которая включена в настоящий документ посредством ссылки во всей своей полноте. Соответственно, согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹-имеет формулу (VI):

где

пунктирная линия показывает присоединение к -D, который представляет собой фрагмент CNP, и где присоединение происходит через аминную функциональную группу -D,

R¹ и R² независимо выбраны из группы, состоящей из водорода, алкила, алкокси, алкоксиалкила, арила, алкарила, агалкила, галогена, нитро, -SO₃H, -SO₂NHR⁵, амино, аммония, карбоксила, РО₃Н₂ и ОРО₃Н₂,

R³, R⁴ и R⁵ независимо выбраны из группы, состоящей из водорода, алкила и арила,

где -L¹- замещен -L²-Z, и где -L¹- необязательно дополнительно замещен, где

-L²- представляет собой простую химическую связь или спейсер, и

-Z представляет собой растворимый в воде полимерный фрагмент.

Подходящими заместителями для формулы (VI) являются фрагменты алкил (как например C_1-6 алкил), алкенил (как например С_2-6 алкенил), алкинил (как например С_2-6 алкинил), арил (как например фенил), гетероалкил, гетероалкенил, гетероалкинил, гетероарил (как например ароматический 4-7 членный гетероцикл) или галоген.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- формулы (VI) замещен одним фрагментом -L²-Z.

Необязательные дополнительные заместители -L¹- формулы (VI) согласно определенным вариантам осуществления имеют значения, как описано выше.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- формулы (VI) дополнительно не замещен.

Только в контексте формулы (VI) применяемые термины имеют следующие значения:

Термины "алкил", "алкокси", "алкоксиалкил", "арил", "алкарил" и "аралкил" означают алкильные радикалы, содержащие 1-8, предпочтительно 1-4 атомов углерода, например, метил, этил, пропил, изопропил и бутил, и арильные радикалы, содержащие 6-10 атомов углерода, например, фенил и нафтил. Термин "галоген" включает бром, фтор, хлор и иод.

Дополнительный вариант осуществления для -L¹- раскрыт в WO2002/089789 A1, которая включена в настоящий документ посредством ссылки во всей своей полноте. Соответственно, фрагмент -L¹- имеет формулу (VII):

где

пунктирная линия показывает присоединение к -D, который представляет собой фрагмент CNP, и где присоединение происходит через аминную функциональную группу -D,

L₁ представляет собой бифункциональную связывающую группу, Y¹ и Y² независимо представляют собой О, S или NR⁷,

R², R³, R⁴, R⁵, R⁶ и R⁷ независимо выбирают из группы, состоящей из водорода, С_1-6 алкилов, С_3-12 разветвленных алкилов, С_3-8 циклоалкилов, C_1-6 замещенных алкилов, С_3-8 замещенных циклоалкилов, арилов, замещенных арилов, аралкилов, С_1-6 гетероалкилов, замещенных C_1-6 гетероалкилов, C_1-6 алкокси, фенокси и C_1-6 гетероалкокси,

Ar представляет собой составляющую, которая при включении в формулу (VII), образует мультизамещенный ароматический углеводород или мульти-замещенную гетероциклическую группу,

X представляет собой химическую связь или составляющую, которая активно переносится в клетку-мишень, гидрофобную составляющую или их комбинацию,

где -L¹- замещен -L²-Z, и где -L¹- необязательно дополнительно замещен, где

-L²- представляет собой простую химическую связь или спейсер, и

-Z представляет собой растворимый в воде полимерный фрагмент.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- формулы (VII) замещен одним фрагментом -L²-Z.

Необязательные дополнительные заместители -L¹- формулы (VII) согласно определенным вариантам осуществления имеют значения, как описано выше.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- формулы (VII) дополнительно не замещен.

Только в контексте формулы (VII) применяемые термины имеют следующие значения:

Термин "алкил", как следует понимать, включает, например, неразветвленные, разветвленные, замещенные C_1-12 алкилы, включая алкокси, С_3-8 циклоалкилы или замещенные циклоалкилы, и т.д.

Термин "замещение", как следует понимать, включает добавление или замещение одного или более атомов, содержащихся в функциональной группе, или соединения с одним или более отличными атомами.

Замещенные алкилы включают карбоксиалкилы, аминоалкилы, диалкиламины, гидроксиалкилы и меркаптоалкилы; замещенные циклоалкилы включают составляющие, как например 4-хлорциклогексил; арилы включают составляющие, как например нафтил; замещенные арилы включают составляющие, как например 3-бром-фенил; аралкилы включают составляющие, как например толуил; гетероалкилы включают составляющие, как например этилтиофен; замещенный гетероалкилы включают составляющие, как например 3-метокситиофен; алкокси включает составляющие, как например метокси; и фенокси включает составляющие, как например 3-нитрофенокси. Гало-, как необходимо понимать, включает фтор, хлор, иод и бром.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- содержит подструктуру формулы (VIII)

где

отмеченная звездочкой пунктирная линия показывает присоединение к азоту фрагмента -D, который представляет собой фрагмент CNP, посредством образования амидной связи, неотмеченная пунктирная линия показывает присоединение к оставшейся части -L¹-, и

где -L¹ - замещен -L²-Z, и где -L¹- необязательно дополнительно замещен, где

-L²- представляет собой простую химическую связь или спейсер, и

-Z представляет собой растворимый в воде полимерный фрагмент.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- формулы (VIII) замещен одним фрагментом -L²-Z.

Необязательные дополнительные заместители -L¹- формулы (VIII) имеют значения, как описано выше.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- формулы (VIII) дополнительно не замещен.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- содержит подструктуру формулы (IX):

где

отмеченная звездочкой пунктирная линия показывает присоединение к азоту фрагмента -D, который представляет собой фрагмент CNP, посредством образования карбаматной связи,

неотмеченная пунктирная линия показывает присоединение к оставшейся части -L¹-, и

где -L¹- замещен -L²-Z, и где -L¹- необязательно дополнительно замещен, где

-L²- представляет собой простую химическую связь или спейсер, и -Z представляет собой растворимый в воде полимерный фрагмент.

Необязательные дополнительные заместители -L¹- формулы (IX) имеют значения, как определено выше.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- формулы (IX) замещен одним фрагментом -L²-Z.

Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- формулы (IX) дополнительно не замещен.

Фрагмент -D может быть соединен с -L¹- через любую функциональную группу D-H и соединен с -L¹- через любую аминнную функциональную группу D-H. Это может быть N-концевая аминная функциональная группа или аминная функциональная группа в боковой цепи лизина, т.е. посредством лизинов в положении 9, 11, 15, 16, 20 и 26, если CNP имеет последовательность SEQ ID NO:24.

Присоединение -L¹- к кольцу фрагмента CNP значительно снижает сродство конъюгата CNP к NPR-B по сравнению с присоединением к N-концу или к некольцевой части CNP, где сниженное сродство к NPR-B, в свою очередь, снижает риск сердечно-сосудистых побочных эффектов, например, гипотонии.

Соответственно, согласно определенным вариантам осуществления -L¹-конъюгирован с боковой цепью аминокислотного остатка указанного кольцевого фрагмента -D или с основной цепью указанного кольцевого фрагмента -D. Согласно определенным вариантам осуществления -L¹- ковалентно и обратимо конъюгирован с боковой цепью аминокислотного остатка указанного кольцевого фрагмента -D. Если -D представляет собой фрагмент CNP с последовательностью SEQ ID NO:24, -L¹- согласно определенным вариантам осуществления конъюгирован с аминной функциональной группой, обеспеченной лизином в положении 26 соответствующего лекарственного средства D-H.

Фрагмент -L²- представляет собой химическую связь или спейсерный фрагмент.

Согласно определенным вариантам осуществления -L²- представляет собой химическую связь.

Согласно определенным вариантам осуществления -L²- представляет собой спейсерный фрагмент.

Фрагмент -L²- может быть присоединен к -L¹- посредством замещения любого присутствующего -Н, кроме случаев, когда это явно исключено.

Когда -L²- отличен от простой химической связи, -L²- выбран из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^y1)-, -S(O)₂N(R^y1)-, -S(O)N(R^y1)-, -S(O)₂-,

-S(O)-, -N(R^y1)S(C-)₂N(R^y1a)-, -S-, -N(R^y1)-, -OC(OR^y1)(R^y1a)-, -N(R^y1)C(O)N(R^y1a)-, -OC(O)N(R^y1)-, С_1-50 алкила, C_2-50 алкенила и C_2-50 алкинила, где -Т-, С_1-50 алкил, C_2-50 алкенил и C_2-50 алкинил необязательно замещены одним или несколькими -R^y2, которые являются одинаковыми или различными, и где С1.50 алкил, C_2-50 алкенил и C_2-50 алкинил необязательно прерываются одной или несколькими группами, выбранными из группы, состоящей из -Т-, -С(O)0-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^y3)-, -S(O)₂N(R^y3)-, -S(O)N(R^y3)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^y3)S(C-)₂N(R^y3a)-, -S-, -N(R^y3)-, -OC(OR^y3)(R^y3a)-, -N(R^y3)C(O)N(R^y3a)- и -OC(O)N(R^y3)-,

-R^y1 и -R^y1a независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из -Н, -Т, C_1-50 алкила, C_2-50 алкенила и C_2-50 алкинила, где -Т, С_1-50 алкил, C_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно замещены одним или несколькими -R^y2, которые являются одинаковыми или различными и где С_1-50 алкил, C_2-50 алкенил и C_2-50 алкинил необязательно прерываются одной или несколькими группами, выбранными из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^y4)-, -S(O)₂N(R^y4)-, -S(O)N(R^y4)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^y4)S(O)₂N(R^y4a)-, -S-, -N(R^y4)-, -OC(OR^y4)(R^y4a)-, -N(R^y4)C(O)N(R^y4a)- и -OC(O)N(R^y4)-,

каждый T независимо выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила С_3-10 циклоалкила, 3-10-ти членного гетероциклила, 8-11-ти членного гетеробициклила, 8-30-ти членного карбополициклила и 8-30-ти членного гетеро полицикл ила, где каждый Т независимо необязательно замещен одним или несколькими -R^y2, которые являются одинаковыми или различными, каждый -R^y2 независимо выбран из группы, состоящей из галогена, -CN, оксо (О), -COOR^y5, -OR^y5, -C(O)R^y5, -C(O)N(R^y5R^y5a), -S(O)₂N(R^y5R^y5a), -S(O)N(R^y5R^y5a), -S(O)₂R^y5, -S(O)R^y5, -N(R^y5)S(O)₂N(R^y5aR^y5b), -SR^y5, -N(R^y5R^y5a), -NO₂, -OC(O)R^y5, -N(R^y5)C(O)R^y5a, -N(R^y5)S(O)₂R^y5a, -N(R^y5)S(O)R^y5a, -N(R^y5)C(O)OR^y5a, -N(R^y5)C(O)N(R^y5aR^y5b), -OC(O)N(R^y5R^y5a) и С_1-6 алкила, где С_1-6 алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, которые являются одинаковыми или различными, и каждый -R^y3, -R^y3a, -R^y4, -R^y4a, -R^y5, -R^y5a и -R^y5b независимо выбран из группы, состоящей из -Н и С_1-6 алкил, где С_1-6 алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, которые являются одинаковыми или различными.

Когда -L²- отличен от простой химической связи, -L²- выбран из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^y1)-, -S(O)₂N(R^y1)-, -S(O)N(R^y1)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^y1)S(O)₂N(R^y1a)-, -S-, -N(R^y1)-, -OC(OR^y1)(R^y1a)-, -N(R^y1)C(O)N(R^y1a)-, -OC(O)N(R^y1)-, С_2-20 алкила, C_2-20 алкенила и C_2-20 алкинила, где -Т-, C_1-20 алкил, С_2-20 алкенил и С_2-20 алкинил необязательно замещены одним или несколькими -R^y2, которые являются одинаковыми или различными, и где C_1-20 алкил, С_2-20 алкенил и С_2-20 алкинил необязательно прерываются одной или несколькими группами, выбранными из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^y3)-, -S(O)₂N(R^y3)-, -S(O)N(R^y3)-, -S(O)₂-, -S(O)-,-N(R^y3)S(O)₂N(R^y3a)-, -S-, -N(R^y3)-, -OC(OR^y3)(R^y3a)-, -N(R^y3)C(O)N(R^y3a)- и -OC(O)N(R^y3)-,

-R^y1 и -R^y1a независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из -Н, -Т, С_1-10 алкила, С_2-10 алкенила и С_2-10 алкинила, где -Т, С_1-10 алкил, С_2-10 алкенил и С_2-10 алкинил необязательно замещены одним или несколькими -R^y2, которые являются одинаковыми или различными и где С_1-0 алкил, С_2-10 алкенил и С_2-10 алкинил необязательно прерываются одной или несколькими группами, выбранными из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^y4)-, -S(O)₂N(R^y4)-, -S(O)N(R^y4)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^y4)S(O)₂N(R^y4a)-, -S-, -N(R^y4)-, -OC(OR^y4)(R^y4a)-, -N(R^y4)C(O)N(R^y4a)- и -OC(O)N(R^y4)-,

каждый T независимо выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила С_3-10 циклоалкила, 3-10-ти членного гетероциклила, 8-11-ти членного гетеробициклила, 8-30-ти членного карбополициклила и 8-30-ти членного гетерополициклила, где каждый Т независимо необязательно замещен одним или несколькими -R^y2, которые являются одинаковыми или различными,

-R^y2 выбран из группы, состоящей из галогена, -CN, оксо (=О), -COOR^y5, -OR^y5, -C(O)R^y5, -C(O)N(R^y5R^y5a), -S(O)₂N(R^y5R^y5a), -S(O)N(R^y5R^y5a), -S(O)₂R^y5, -S(O)R^y5, -N(R^y5)S(O)₂N(R^y5aR^y5b), -SR^y5, -N(R^y5R^y5a), -NO₂, -OC(O)R^y5, -N(R^y5)C(O)R^y5a, -N(R^y5)S(O)₂R^y5a, -N(R^y5)S(O)R^y5a, -N(R^y5)C(O)OR^y5a, -N(R^y5)C(O)N(R^y5aR^y5b), -OC(O)N(R^y5R^y5a) и С_1-6 алкила, где С_1-6 алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, которые являются одинаковыми или различными, и

каждый -R^y3, -R^y3a, -R^y4, -R^y4a, -R^y5, -R^y5a и -R^y5b независимо друг от друга выбран из группы, состоящей из -Н и C_1-6 алкила, где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, которые являются одинаковыми или различными.

Когда -L²- отличен от простой химической связи, -L²- выбран из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^y1)-, -S(O)₂N(R^y1)-, -S(O)N(R^y1)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^y1)S(O)₂N(R^y1a)-, -S-, -N(R^y1)-, -OC(OR^y1)(R^y1a)-, -N(R^y1)C(O)N(R^y1a)-, -OC(O)N(R^y1)-, C_1-50 алкила, C_2-50 алкенила и C_2-50 алкинила, где -T-, C_1-50 алкил, C_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно замещены одним или несколькими -R^y2, которые являются одинаковыми или различными, и где C_1-50 алкил, C_2-50 алкенил и C_2-50 алкинил необязательно прерываются одной или несколькими группами, выбранными из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R^y3)-, -S(O)₂N(R^y3)-, -S(O)N(R^y3)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R^y3)S(O)₂N(R^y3a)-, -S-, -N(R^y3)-, -OC(OR^y3)(R^y3a)-, -N(R^y3)C(O)N(R^y3a)- и -OC(O)N(R^y3)-,

-R^y1 и -R^y1a независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, -Т, С_1-10 алкила, С_2-10 алкенила и С_2-10 алкинила,

каждый Т независимо выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила С_3-10 циклоалкила, 3-10-ти членного гетероциклила, 8-11-ти членного гетеробициклила, 8-30-ти членного карбополициклила и 8-30-ти членного гетерополициклила,

каждый -R^y2 независимо выбран из группы, состоящей из галогена и C_1-6 алкила, и

каждый -R^y3, -R^y3a, -R^y4, -R^y4a, -R^y5, -R^y5a и -R^y5b независимо друг от друга выбран из группы, состоящей из -Н и C_1-6 алкила, где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, которые являются одинаковыми или различными.

Согласно определенным вариантам осуществления -L - представляет собой С_1-20 алкильную цепь, которая необязательно прерывается одной или несколькими группами, независимо выбранными из -О-, -Т- и -C(O)N(R^y1)-, и где С 1.20 алкильная цепь, необязательно замещена одной или несколькими группами, независимо выбранными из -ОН, -Т и -C(C-)N(R^y6R^y6a), где -R^y1, -R^y6, -R^y6a независимо выбраны из группы, состоящей из Н и С_1-4 алкила, и где Т выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила С_3-10 циклоалкила, 3-10-ти членного гетероциклила, 8-11-ти членного гетеробициклила, 8-30-ти членного карбополициклила и 8-30-ти членного гетерополициклила.

Согласно определенным вариантам осуществления -L²- имеет молекулярную массу в интервале от 14 г/моль до 750 г/моль.

Согласно определенным вариантам осуществления -L - имеет длину цепи от 1 до 20 атомов.

Как применяется в настоящем документе, термин "длина цепи" в отношении фрагмента -L²- относится к числу атомов -L²-, присутствующих в самом коротком соединении между -L¹- и -Z.

Согласно определенным вариантам осуществления -L²- имеет формулу (i):

где

отмеченная звездочкой пунктирная линия показывает присоединение к -L¹-,

неотмеченная пунктирная линия показывает присоединение к -Z,

-R¹ выбран из группы, состоящей из -Н, С_1-6 алкила, С_2-6 алкенила и С_2-6 алкинила,

n выбран из группы, состоящей из 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 и 18, и

где фрагмент формулы (i) необязательно дополнительно замещен.

Согласно определенным вариантам осуществления -R¹ формулы (i) выбран из группы, состоящей из -Н, метила, этила, пропила и бутила. Согласно определенным вариантам осуществления -R¹ формулы (i) выбран из группы, состоящей из -Н, метила, этила и пропила. Согласно определенным вариантам осуществления -R¹ формулы (i) выбран из группы, состоящей из -Н и метила. Согласно определенным вариантам осуществления -R¹ формулы (i) представляет собой метил.

Согласно определенным вариантам осуществления n формулы (i) выбран из группы, состоящей из 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 и 10. Согласно определенным вариантам осуществления n формулы (i) выбран из группы, состоящей из 0, 1, 2, 3, 4 и 5. Согласно определенным вариантам осуществления n формулы (i) выбран из группы, состоящей из 0, 1, 2 и 3. Согласно определенным вариантам осуществления n формулы (i) выбран из группы, состоящей из 0 и 1. Согласно определенным вариантам осуществления n формулы (i) представляет собой 0.

Согласно определенным вариантам осуществления -L²- представляет собой фрагмент, выбранный из группы, состоящей из

где

отмеченная звездочкой пунктирная линия показывает присоединение к -L¹-,

неотмеченная пунктирная линия показывает присоединение к -Z и

где фрагменты (ii), (iii), (iv), (v), (vi), (vii), (viii), (ix), (x), (xi), (xii), (xiii), (xiv), (xv), (xvi) и (xvii) необязательно дополнительно замещены.

Согласно определенным вариантам осуществления -L²- выбран из группы, состоящей из

где

отмеченная звездочкой пунктирная линия показывает присоединение к -L¹-, и

неотмеченная пунктирная линия показывает присоединение к -Z.

Согласно определенным вариантам осуществления -L²- выбран из группы, состоящей из

где

т 1

отмеченная звездочкой пунктирная линия показывает присоединение к -L¹-, и

неотмеченная пунктирная линия показывает присоединение к -Z.

Согласно определенным вариантам осуществления -L²- имеет формулу (xvi):

где

отмеченная звездочкой пунктирная линия показывает присоединение к -L¹-, и

неотмеченная пунктирная линия показывает присоединение к -Z.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹-L²- выбран из группы, состоящей из

*

и

где

неотмеченная пунктирная линия показывает присоединение к атому азота -D, который представляет собой фрагмент CNP посредством образования амидной связи, и

отмеченная звездочкой пунктирная линия показывает присоединение к -Z.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹-L²- имеет формулу (IId-ii):

где

неотмеченная пунктирная линия показывает присоединение к атому азота -D, который представляет собой фрагмент CNP посредством образования амидной связи, и

отмеченная звездочкой пунктирная линия показывает присоединение к -Z.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹-L²- имеет формулу (IId-ii'):

где

неотмеченная пунктирная линия показывает присоединение к атому азота -D, который представляет собой фрагмент CNP посредством образования амидной связи, и

отмеченная звездочкой пунктирная линия показывает присоединение к -Z.

1 2

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹-L²- выбран из группы, состоящей из

и

где

неотмеченная пунктирная линия показывает присоединение к атому азота -D, который представляет собой фрагмент CNP посредством образования амидной связи, и

отмеченная звездочкой пунктирная линия показывает присоединение к -Z.

1 2

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹-L²- имеет формулу (IId-iia):

где

неотмеченная пунктирная линия показывает присоединение к атому азота -D, который представляет собой фрагмент CNP посредством образования амидной связи, и

отмеченная звездочкой пунктирная линия показывает присоединение к -Z.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹-L²- имеет формулу (IId-iia'):

где

неотмеченная пунктирная линия показывает присоединение к атому азота -D, который представляет собой фрагмент CNP посредством образования амидной связи, и

отмеченная звездочкой пунктирная линия показывает присоединение к -Z.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹-L²- выбран из группы, состоящей из

и

где

неотмеченная пунктирная линия показывает присоединение к атому азота -D, который представляет собой фрагмент CNP посредством образования амидной связи, и

отмеченная звездочкой пунктирная линия показывает присоединение к -Z.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹-L²- имеет формулу (IId-iib):

где

неотмеченная пунктирная линия показывает присоединение к атому азота -D, который представляет собой фрагмент CNP посредством образования амидной связи, и

отмеченная звездочкой пунктирная линия показывает присоединение к -Z.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -L¹-L²- имеет формулу (IId-iib'):

где

неотмеченная пунктирная линия показывает присоединение к атому азота -D, который представляет собой фрагмент CNP посредством образования амидной связи, и

отмеченная звездочкой пунктирная линия показывает присоединение к -Z.

Согласно определенным вариантам осуществления -Z формулы (Ia) или (Ib) имеет молекулярную массу в интервале от 5 до 200 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления -Z формулы (Ia) или (Ib) имеет молекулярную массу в интервале от 8 до 100 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления -Z формулы (Ia) или (Ib) имеет молекулярную массу в интервале от 10 до 80 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления -Z формулы (Ia) или (Ib) имеет молекулярную массу в интервале от 12 до 60 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления -Z формулы (Ia) или (Ib) имеет молекулярную массу в интервале от 15 до 40 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления -Z формулы (Ia) или (Ib) имеет молекулярную массу около 20 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления -Z формулы (Ia) или (Ib) имеет молекулярную массу около 40 кДа.

Полимерный фрагмент -Z формулы (Ia) или (Ib) содержит полимер. Согласно определенным вариантам осуществления -Z формулы (Ia) или (Ib) содержит а полимер, выбранный из группы, состоящей из 2-метакрилоил-оксиэтила фосфоилхолинов, поли(акриловых кислот), поли(акрилатов), поли(акриламидов), поли(алкилокси) полимеров, поли(амидов), поли(амидоаминов), поли(аминокислот), поли(ангидридов), поли(аспартамидов), поли(масляных кислот), по ли(глико левых кислот), полибутиле нтерефталатов, поли(капролактонов), поли(карбонатов), поли(цианоакрилатов), поли(диметилакриламидов), поли(сложных эфиров), поли(этиленов), поли(этиленгликолей), поли(этиленоксидов), поли(этилфосфатов), поли(этилоксазолинов), поли(гликолевых кислот), поли(гидроксиэтилакрилатов), поли(гидроксиэтил-оксазолинов), поли(гидроксиметакрилатов), поли(гидроксипропилметакриламидов), поли(гидроксипропил метакрилатов), поли(гидроксипропилоксазолинов), поли(иминокарбонатов), поли(молочных кислот), поли(сополимеров молочных и гликолевых кислот), поли(метакриламидов), поли(метакрилатов), поли(метилоксазолинов), поли(органофосфазенов), поли(ортосложных эфиров), поли(оксазолинов), поли(пропиленгликолей), поли(силоксанов), поли(уретанов), поли(виниловых спиртов), поли(виниламинов), поли(винилметиловых простых эфиров), поли(винилпирролидонов), силиконов, целлюлоз, карбометилцеллюлоз, гидроксипропил метилцеллюлоз, хитинов, хитозанов, декстранов, декстринов, желатинов, гиалуроновых кислот и производных, функционализированных гиалуроновых кислот, маннанов, пектинов, рамногалактуронанов, крахмалов, гидроксиалкил крахмалов, гидроксиэтил крахмалов и других полимеров на основе углеводов, ксиланов и их сополимеров.

Согласно определенным вариантам осуществления -Z формулы (Ia) или (Ib) содержит белок. Предпочтительные белки выбирают из группы, состоящей из карбоксил-терминального пептида хорионического гонадотропина, как описано в US 2012/0035101 А1, которые включены в настоящую заявку посредством ссылки, альбумина, XTEN, как описано в WO 2011123813 А2, которая включена в настоящую заявку посредством ссылки, последовательностей пролиновых/аланиновых случайных спиралей, как описано в WO 2011/144756 А1, который включен в настоящую заявку посредством ссылки, последовательностей пролина/аланина/серина, как описано в WO 2008/155134 А1 и WO 2013/024049 А1, которые включены в настоящую заявку посредством ссылками, с Fc слитых белков.

Согласно определенным вариантам осуществления -Z формулы (Ia) или (Ib) представляет собой полисаркозин. Согласно определенным вариантам осуществления -Z формулы (Ia) или (Ib) содержит поли(N-метилглицин). Согласно определенным вариантам осуществления -Z формулы (Ia) или (Ib) содержит а белковый фрагмент случайной спирали. Согласно определенным вариантам осуществления -Z формулы (Ia) или (Ib) содержит один белковый фрагмент случайной спирали. Согласно определенным вариантам осуществления -Z формулы (Ia) или (Ib) содержит два белковых фрагмента случайной спирали. Согласно определенным вариантам осуществления -Z формулы (Ia) или (Ib) содержит три белковых фрагмента случайной спирали. Согласно определенным вариантам осуществления -Z формулы (Ia) или (Ib) содержит четыре белковых фрагмента случайной спирали. Согласно определенным вариантам осуществления -Z формулы (Ia) или (Ib) содержит пять белковых фрагментов случайной спирали. Согласно определенным вариантам осуществления -Z формулы (Ia) или (Ib) содержит шесть белковых фрагментов случайной спирали. Согласно определенным вариантам осуществления -Z формулы (Ia) или (Ib) содержит семь белковых фрагментов случайной спирали. Согласно определенным вариантам осуществления -Z формулы (Ia) или (Ib) содержит восемь белковых фрагментов случайной спирали.

Согласно определенным вариантам осуществления такой белковый фрагмент случайной спирали содержит по меньшей мере 25 аминокислотных остатков и самое большее 2000 аминокислот. Согласно определенным вариантам осуществления такой белковый фрагмент случайной спирали содержит по меньшей мере 30 аминокислотных остатков и самое большее 1500 аминокислотных остатков. Согласно определенным вариантам осуществления такой белковый фрагмент случайной спирали содержит по меньшей мере 50 аминокислотных остатков и самое большее 500 аминокислотных остатков.

Согласно определенным вариантам осуществления -Z формулы (Ia) или (Ib) содержит белковый фрагмент случайной спирали, в котором по меньшей мере 80%, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 85%, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 90%, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 95%, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 98% и согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 99% общего числа аминокислот, образующих белковый фрагмент случайной спирали, выбраны из аланина и пролина. Согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 10%, но менее 75%, согласно определенным вариантам осуществления менее 65% общего числа аминокислотных остатков такого белкового фрагмента случайной спирали представляют собой остатки пролина. Согласно определенным вариантам осуществления такой белковый фрагмент случайной спирали является таким, как описано в WO 2011/144756 А1, которая включена в настоящий документ посредством ссылки во всей своей полноте. Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит по меньшей мере один фрагмент, выбранный из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:6, SEQ ID NO:7, SEQ ID NO:8, SEQ ID NO:9, SEQ ID NO:10, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO:51 и SEQ ID NO:61, как раскрыто в WO 2011/144756 которая включена в настоящий документ посредством ссылки. Фрагмент, такой белок случайной спирали, содержащий аланин и пролин, будет упоминаться как "РА" или "фрагмент РА".

Соответственно, -Z формулы (Ia) или (Ib) содержит фрагмент РА.

Согласно определенным вариантам осуществления -Z формулы (Ia) или (Ib) содержит белковый фрагмент случайной спирали, в котором по меньшей мере 80%, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 85%, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 90%, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 95%, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 98% и согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 99% общего числа аминокислот, образующих указанный белковый фрагмент случайной спирали выбраны из аланина, серина и пролина. Согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 4%, но менее 40% общего числа аминокислотных остатков такого белкового фрагмента случайной спирали представляют собой остатки пролина. Согласно определенным вариантам осуществления такой белковый фрагмент случайной спирали является таким, как описано в WO 2008/155134 А1, которая включена в настоящий документ посредством ссылки во всей своей полноте. Согласно определенным вариантам осуществления -Z формулы (Ia) или (Ib) содержит по меньшей мере один фрагмент, выбранный из группы, состоящей из SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:6, SEQ ID NO:8, SEQ ID NO:10, SEQ ID NO:12, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO:20, SEQ ID NO:22, SEQ ID NO:24, SEQ ID NO:26, SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:30, SEQ ID NO:32, SEQ ID NO:34, SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:40, SEQ ID NO:42, SEQ ID NO:44, SEQ ID NO:46, SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:52, SEQ ID NO:54 и SEQ ID NO:56, как раскрыто в WO 2008/155134 A1, которые включены в настоящий документ посредством ссылки. Фрагмент, содержащий белковый фрагмент случайной спирали, содержащий аланин, серии и пролин, будет упоминаться как "PAS" или "фрагмент PAS".

Соответственно, -Z формулы (Ia) или (Ib) содержит фрагмент PAS.

Согласно определенным вариантам осуществления -Z формулы (Ia) или (Ib) содержит белковый фрагмент случайной спирали, в котором по меньшей мере 80%, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 85%, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 90%, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 95%, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 98% и согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 99% общего числа аминокислот, образующих указанный белковый фрагмент случайной спирали, выбраны из аланина, глицина и пролина. Фрагмент, содержащий белковый фрагмент случайной спирали, содержащий аланин, глицин и пролин, будет упоминаться как "PAG" или "фрагмент PAG ".

Соответственно, -Z формулы (Ia) или (Ib) содержит фрагмент PAG.

Согласно определенным вариантам осуществления -Z формулы (Ia) или (Ib) содержит а белковый фрагмент случайной спирали, в котором по меньшей мере 80%, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 85%, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 90%, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 95%, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 98% и согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 99% общего числа аминокислот, образующих указанный белковый фрагмент случайной спирали, выбраны из пролина и глицина. Фрагмент, содержащий такой белковый фрагмент случайной спирали, содержащий пролин и глицин, будет упоминаться как "PG" или "фрагмент PG".

Согласно определенным вариантам осуществления такой фрагмент PG содержит фрагмент формулы (а-0)

[(Gly)_p-Pro-(Gly)_q]_r(a-0),

где

р выбран из группы, состоящей из 0, 1, 2, 3, 4 и 5,

q выбран из группы, состоящей из 0, 1, 2, 3, 4 и 5,

г представляет собой целое число в интервале и включая 10 - 1000,

при условии, что по меньшей мере один из р и q представляет собой по меньшей мере 1,

Согласно определенным вариантам осуществления р формулы (а-0) выбран из группы, состоящей из 1, 2 и 3.

Согласно определенным вариантам осуществления q формулы (а-0) выбран из 0, 1 и 2.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент PG содержит последовательность SEQ ID NO:97: GGPGGPGPGGPGGPGPGGPG

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент PG содержит последовательность формулы (а-0-а)

(GGPGGPGPGGPGGPGPGGPG)_v (a-0-a),

где

v представляет собой целое число в интервале и включая 1 to 50.

Понятно, что последовательность формулы (а-0-а) содержит v повторов последовательности SEQ ID NO:97.

Соответственно, -Z формулы (Ia) или (Ib) содержит фрагмент PG.

Согласно определенным вариантам осуществления -Z формулы (Ia) или (Ib) содержит а белковый фрагмент случайной спирали, в котором по меньшей мере 80%, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 85%, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 90%, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 95%, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 98% и согласно определенным вариантам осуществления 99% общего числа аминокислот, образующих указанный белковый фрагмент случайной спирали, выбраны из аланина, глицина, серина, треонина, глутамата и пролин. Согласно определенным вариантам осуществления такой белковый фрагмент случайной спирали является таким, как описано в WO 2010/091122 А1 которая включена в настоящий документ посредством ссылки. Согласно определенным вариантам осуществления -Z формулы (Ia) или (Ib) содержит по меньшей мере один фрагмент, выбранный из группы, состоящей из SEQ ID NO: 182, SEQ ID NO:183, SEQ ID NO:184, SEQ ID NO:185, SEQ ID NO:186, SEQ ID NO:187, SEQ ID NO: 188, SEQ ID NO: 189, SEQ ID NO:190, SEQ ID NO: 191, SEQ ID NO: 192, SEQ ID NO: 193, SEQ ID NO: 194, SEQ ID NO: 195, SEQ ID NO: 196, SEQ ID NO: 197, SEQ ID NO: 198, SEQ ID NO: 199, SEQ ID NO:200, SEQ ID NO:201, SEQ ID NO:202, SEQ ID NO:203, SEQ ID NO:204, SEQ ID NO:205, SEQ ID NO:206, SEQ ID NO:207, SEQ ID NO:208, SEQ ID NO:209, SEQ ID NO:210, SEQ ID NO:211, SEQ ID NO:212, SEQ ID NO:213, SEQ ID NO:214, SEQ ID NO:215, SEQ ID NO:216, SEQ ID NO:217, SEQ ID NO:218, SEQ ID NO:219, SEQ ID NO:220, SEQ ID NO:221, SEQ ID NO:759, SEQ ID NO:760, SEQ ID NO:761, SEQ ID NO:762, SEQ ID NO:763, SEQ ID NO:764, SEQ ID NO:765, SEQ ID NO:766, SEQ ID NO:767, SEQ ID NO:768, SEQ ID NO:769, SEQ ID NO:770, SEQ ID NO:771, SEQ ID NO:772, SEQ ID NO:773, SEQ ID NO:774, SEQ ID NO:775, SEQ ID NO:776, SEQ ID NO:777, SEQ ID NO:778, SEQ ID NO:779, SEQ ID NO: 1715, SEQ ID NO: 1716, SEQ ID NO: 1718, SEQ ID NO: 1719, SEQ ID NO:1720, SEQ ID NO: 1721 и SEQ ID NO: 1722, как раскрыто в WO 2010/091122 A1, которые включены в настоящий документ посредством ссылки. Фрагмент, содержащий такой белковый фрагмент случайной спирали, содержащий аланин, глицин, серии, треонин, глутамат и пролин, будет упоминаться как "XTEN" или "фрагмент XTEN", аналогично его обозначению в WO 2010/091122 А1.

Соответственно, -Z формулы (Ia) или (Ib) содержит фрагмент XTEN.

Согласно определенным вариантам осуществления -Z формулы (Ia) или (Ib) представляет собой полимер на основе гиалуроновой кислоты.

Согласно определенным вариантам осуществления -Z формулы (Ia) или (Ib) представляет собой полимерный фрагмент, как раскрыто в WO 2013/024047 А1, которая включена в настоящий документ посредством ссылки.

Согласно определенным вариантам осуществления -Z формулы (Ia) или (Ib) представляет собой полимерный фрагмент, как раскрыто в WO 2013/024048 А1, которая включена в настоящий документ посредством ссылки.

Согласно определенным вариантам осуществления -Z формулы (Ia) или (Ib) представляет собой полимер на основе ПЭГ. Согласно определенным вариантам осуществления -Z представляет собой разветвленный или с множеством плечей полимер на основе ПЭГ.

Согласно определенным вариантам осуществления -Z формулы (Ia) или (Ib) представляет собой разветвленный полимер. Согласно определенным вариантам осуществления -Z формулы (Ia) или (Ib) представляет собой разветвленный полимер, имеющий одну, две, три, четыре, пять или шесть точек разветвления. Согласно определенным вариантам осуществления -Z формулы (Ia) или (Ib) представляет собой разветвленный полимер, имеющий одну, две или три точки разветвления. Согласно определенным вариантам осуществления -Z формулы (Ia) или (Ib) представляет собой разветвленный полимер, имеющий одну точку разветвления. Согласно определенным вариантам осуществления -Z формулы (Ia) или (Ib) представляет собой разветвленный полимер, имеющий две точки разветвления. Согласно определенным вариантам осуществления -Z формулы (Ia) или (Ib) представляет собой разветвленный полимер, имеющий три точек разветвления.

Согласно определенным вариантам осуществления точка разветвления выбрана из группы, состоящей из -N<, -СН< и >С<.

Согласно определенным вариантам осуществления такой разветвленный фрагмент -Z формулы (Ia) или (Ib) основан на ПЭГ.

Согласно определенным вариантам осуществления такой разветвленный фрагмент -Z формулы (Ia) или (Ib) имеет молекулярную массу в интервале и включая 5 кДа - 500 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления такой разветвленный фрагмент -Z формулы (Ia) или (Ib) имеет молекулярную массу в интервале и включая 10 кДа - 250 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления такой разветвленный фрагмент -Z формулы (Ia) или (Ib) имеет молекулярную массу в интервале и включая 10 кДа - 150 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления такой разветвленный фрагмент -Z формулы (Ia) или (Ib) имеет молекулярную массу в интервале и включая 12 кДа -100 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления такой разветвленный фрагмент -Z формулы (Ia) или (Ib) имеет молекулярную массу в интервале и включая 15 кДа - 80 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления такой разветвленный фрагмент -Z формулы (Ia) или (Ib) имеет молекулярную массу в интервале и включая 10 кДа - 80 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления молекулярная масса составляет около 10 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления молекулярная масса такого разветвленного фрагмента -Z формулы (Ia) или (Ib) представляет собой около 20 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления молекулярная масса такого разветвленного фрагмента -Z формулы (Ia) или (Ib) представляет собой около 30 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления молекулярная масса такого разветвленного фрагмента -Z формулы (Ia) или (Ib) представляет собой около 40 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления молекулярная масса такого разветвленного фрагмента -Z формулы (Ia) или (Ib) представляет собой около 50 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления молекулярная масса такого разветвленного фрагмента -Z формулы (Ia) или (Ib) представляет собой около 60 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления молекулярная масса такого разветвленного фрагмента -Z формулы (Ia) или (Ib) представляет собой около 70 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления молекулярная масса такого разветвленного фрагмента -Z формулы (Ia) или (Ib) представляет собой около 80 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления такой разветвленный фрагмент -Z формулы (Ia) или (Ib) имеет молекулярную массу около 40 кДа.

Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит фрагмент

Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит амидную связь.

Согласно определенным вариантам осуществления -Z формулы (Ia) или (Ib) содержит фрагмент формулы (а)

где

пунктирная линия показывает присоединение к -L²- или к оставшейся части -Z,

ВР^а представляет собой точку разветвления, выбранную из группы, состоящей из -N<, -CR< и >С<,

-R выбран из группы, состоящей из -Н и С_1-6 алкила,

а представляет сбой 0, если ВР^а представляет собой -N< или -CR< и n представляет сбой 1, если ВР^а представляет собой >С<,

-S^a-, -S^a'-, -S^a''- и -S^a'''- независимо друг от друга представляют собой химическую связь или выбраны из группы, состоящей из С_1-50 алкила, C_2-50 алкенила и C_2-50 алкинила, где С_1-50 алкил, C_2-50 алкенил и C_2-50 алкинил необязательно замещены одним или несколькими -R¹, которые являются одинаковыми или различными, и где С_1-50 алкил, C_2-50 алкенил и C_2-50 алкинил необязательно прерываются одной или несколькими группами, выбранными из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R²)-, -S(O)₂N(R²)-, -S(O)N(R²)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R²)S(O)₂N(R^2a)-, -S-, -N(R²)-, -OC(OR²)(R^2a)-, -N(R²)C(O)N(R^2a)- и -OC(O)N(R²)-,

каждый -T- независимо выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила С_3-10 циклоалкила, 3-10-ти членного гетероциклила, 8-11-ти членного гетеробициклила, 8-30-ти членного карбополициклила и 8-30-ти членного гетерополициклила, где каждый -Т- независимо необязательно замещен одним или несколькими -R¹, которые являются одинаковыми или различными,

каждый -R¹ независимо выбран из группы, состоящей из галогена, -CN, оксо (=O), -COOR³, -OR³, -C(O)R³, -C(O)N(R³R^3a), -S(O)₂N(R³R^3a), -S(O)N(R³R^3a), -S(O)₂R³, -S(O)R³, -N(R³)S(O)₂N(R^3aR^3b), -SR³, -N(R³R^3a), -NO₂, -OC(O)R³, -N(R³)C(O)R^3a, -N(R³)S(O)₂R^3a, -N(R³)S(O)R^3a, -N(R³)C(O)OR^3a, -N(R³)C(O)N(R^3aR^3b), -OC(O)N(R³R^3a) и С_1-6 алкила, где С_1-6 алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, которые являются одинаковыми или различными,

каждый -R², -R^2a, -R³, -R^3a и -R^3b независимо выбран из группы, состоящей из -Н и C_1-6 алкила, где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, которые являются одинаковыми или различными, и

-Р^а', -Р^а'' и -Р^а''' независимо представляют собой полимерный фрагмент.

Необязательно, фрагмент формулы (а) замещен одним или несколькими заместителями.

Согласно определенным вариантам осуществления ВР^а формулы (а) представляет собой -N<.

Согласно определенным вариантам осуществления ВР^а формулы (а) представляет собой -CR<. Согласно определенным вариантам осуществления -R представляет собой -Н.

Соответственно, согласно определенным вариантам осуществления а формулы (а) представляет собой 0.

Согласно определенным вариантам осуществления ВР^а формулы (а) представляет собой >С<.

Согласно определенным вариантам осуществления -S^a- формулы (а) представляет собой химическую связь.

Согласно определенным вариантам осуществления -S^a- формулы (а) выбран из группы, состоящей из С_1-10 алкила, С_2-10 алкенила и С_2-10 алкинила, где С_1-10 алкил, С_2-10 алкенил и С_2-10 алкинил необязательно прерываются одной или несколькими химическими группами, выбранными из группы, состоящей из -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R⁴)-, -S(O)₂N(R⁴)-, -S(O)N(R⁴)-, -S(O)₂, -S(O)-, -N(R⁴)S(O)₂N(R^4a)-, -S-, -N(R⁴)-, -OC(OR⁴)(R^4a)-, -N(R⁴)C(O)N(R^4a)- и -OC(O)N(R⁴)-, где -R⁴ и -R^4a независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила, этила, пропила и бутила. Согласно определенным вариантам осуществления -S^a- формулы (а) выбран из группы, состоящей из метила, этила, пропила, бутила, которые необаятельно прерываются одной или несколькими химическими группами, выбранными из группы, состоящей из -О-, -С(О)- и -C(O)N(R⁴)-.

Согласно определенным вариантам осуществления -S^a'- формулы (а) представляет собой химическую связь.

Согласно определенным вариантам осуществления -S^a'- формулы (а) выбран из группы, состоящей из С_1-10 алкила, С_2-10 алкенила и С_2-10 алкинила, где С_1-10 алкил, С_2-10 алкенил и С_2-10 алкинил необязательно прерываются одной или несколькими химическими группами, выбранными из группы, состоящей из -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R⁴)-, -S(O)₂N(R⁴)-, -S(O)N(R⁴)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R⁴)S(O)₂N(R^4a)-, -S-, -N(R⁴)-, -OC(OR⁴)(R^4a)-, -N(R⁴)C(O)N(R^4a)- и -OC(O)N(R⁴), где -R⁴ и -R^4a независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила, этила, пропила и бутила. Согласно определенным вариантам осуществления -S^a' - формулы (а) выбран из группы, состоящей из метила, этила, пропила, бутила, которые необаятельно прерываются одной или несколькими химическими группами, выбранными из группы, состоящей из -О-, -С(О)- и -C(O)N(R⁴)-.

Согласно определенным вариантам осуществления -S^a''- формулы (а) представляет собой химическую связь.

Согласно определенным вариантам осуществления -S^a''- формулы (а) выбран из группы, состоящей из С_1-10 алкила, С_2-10 алкенила и С_2-10 алкинила, где С_1-10 алкил, С_2-10 алкенил и С_2-10 алкинил необязательно прерываются одной или несколькими химическими группами, выбранными из группы, состоящей из -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R⁴)-, -S(O)₂N(R⁴)-, -S(O)N(R⁴)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R⁴)S(O)₂N(R^4a)-, -S-, -N(R⁴)-, -OC(OR⁴)(R^4a)-, -N(R⁴)C(O)N(R^4a)- и -OC(O)N(R⁴)-, где -R⁴ и -R^4a независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила, этила, пропила и бутила. Согласно определенным вариантам осуществления -S^a''- формулы (а) выбран из группы, состоящей из метила, этила, пропила, бутила, которые необаятельно прерываются одной или несколькими химическими группами, выбранными из группы, состоящей из -О-, -С(О)- и -C(O)N(R⁴)-.

Согласно определенным вариантам осуществления -S^a'''- формулы (а) представляет собой химическую связь.

Согласно определенным вариантам осуществления -S^a'''- формулы (а) выбран из группы, состоящей из С_1-10 алкила, С_2-10 алкенила и С_2-10 алкинила, где С_1-10 алкил, С_2-10 алкенил и С_2-10 алкинил необязательно прерываются одной или несколькими химическими группами, выбранными из группы, состоящей из -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R⁴)-, -S(O)₂N(R⁴)-, -S(O)N(R⁴)-, -S(O)₂, -S(O)-, -N(R⁴)S(O)₂N(R^4a)-, -S-, -N(R⁴)-, -OC(OR⁴)(R^4a)-, -N(R⁴)C(O)N(R^4a)- и -OC(O)N(R⁴)-, где -R⁴ и -R^4a независимо выбраны из группы, состоящей из -Н, метила, этила, пропила и бутила. Согласно определенным вариантам осуществления -S^a'''- формулы (а) выбран из группы, состоящей из метила, этила, пропила, бутила, которые необаятельно прерываются одной или несколькими химическими группами, выбранными из группы, состоящей из -О-, -С(О)- и -C(O)N(R⁴)-.

Согласно определенным вариантам осуществления -Р^а', -Р^а'' и -Р^а''' формулы (а) независимо содержат полимер, выбранный из группы, состоящей из 2-метакрилоил-оксиэтилфосфоилхолинов, поли(акриловых кислот), поли(акрилатов), поли(акриламидов), поли(алкилокси) полимеров, поли(амидов), поли(амидоаминов), поли(аминокислот), поли(ангидридов), поли(аспартамидов), поли(масляных кислот), поли(гликолевых кислот), полибутилентерефталатов, поли(капролактонов), поли(карбонатов), поли(цианоакрилатов), поли(диметилакриламидов), поли(сложных эфиров), поли(этиленов), поли(этиленгликолей), поли(этиленоксидов), поли(этилфосфатов), поли(этилоксазолинов), поли(гликолевых кислот), поли(гидроксиэтилакрилатов), поли(гидроксиэтил-оксазолинов), поли(гидроксиметакрилатов), поли(гидроксипропилметакриламидов), поли(гидроксипропил метакрилатов), поли(гидроксипропилоксазолинов), поли(иминокарбонатов), поли(молочных кислот), поли(сополимеров молочных и гликолевых кислот), поли(метакриламидов), поли(метакрилатов), поли(метилоксазолинов), поли(органофосфазенов), поли(ортосложных эфиров), поли(оксазолинов), поли(пропиленгликолей), поли(силоксанов), поли(уретанов), поли(виниловых спиртов), поли(виниламинов), поли(винилметиловых простых эфиров), поли(винилпирролидонов), силиконов, целлюлоз, карбометил целлюлоз, гидроксипропил метилцеллюлоз, хитинов, хитозанов, декстранов, декстринов, желатинов, гиалуроновых кислот и производных, функционализированных гиалуроновых кислот, маннанов, пектинов, рамногалактуронанов, крахмалов, гидроксиалкил крахмалов, гидроксиэтил крахмалов и других полимеров на основе углеводов, ксиланов и их сополимеров.

Согласно определенным вариантам осуществления -Р^а', -Р^а'' и -Р^а''' формулы (а) независимо имеют молекулярную массу в интервале и включая 5 кДа - 50 кДа, согласно определенным вариантам осуществления в интервале и включая 5 кДа - 40 кДа, согласно определенным вариантам осуществления в интервале и включая 7.5 кДа - 35 кДа, согласно определенным вариантам осуществления в интервале и включая 7.5 - 30 кДа, согласно определенным вариантам осуществления в интервале и включая 10 - 30 кДа.

Согласно определенным вариантам осуществления -Р^а', -Р^а'' и -Р^а''' формулы (а) имеют молекулярную массу приблизительно 5 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления -Р^а', -Р^а'' и -Р^а''' формулы (а) имеют молекулярную массу приблизительно 7.5 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления -Р^а', -Р^а'' и -Р^а''' формулы (а) имеют молекулярную массу приблизительно 10 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления -Р^а', -Р^а'' и -Р^а''' формулы (а) имеют молекулярную массу приблизительно 12.5 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления -Р^а', -Р^а'' и -Р^а''' формулы (а) имеют молекулярную массу приблизительно 15 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления -Р^а', -Р^а'' и -Р^а''' формулы (а) имеют молекулярную массу приблизительно 20 кДа.

Согласно определенным вариантам осуществления -Р^а', -Р^а'' и -Р^а''' формулы (а) независимо содержат фрагмент на основе ПЭГ. Согласно определенным вариантам осуществления -Р^а', -Р^а'' и -Р^а''' формулы (а) независимо содержат фрагмент на основе ПЭГ, содержащий по меньшей мере 20% ПЭГ, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 30% ПЭГ, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 40% ПЭГ, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 50% ПЭГ, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 60% ПЭГ, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 70% ПЭГ, согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 80% ПЭГ и согласно определенным вариантам осуществления по меньшей мере 90% ПЭГ.

Согласно определенным вариантам осуществления -Р^а', -Р^а'' и -Р^а''' формулы (а) независимо содержат белковый фрагмент, согласно определенным вариантам осуществления белковый фрагмент случайной спирали, и согласно определенным вариантам осуществления белковый фрагмент случайной спирали выбран из группы, состоящей из фрагментов PA, PAS, PAG, PG и XTEN.

Согласно определенным вариантам осуществления -Р^а', -Р^а'' и -Р^а''' формулы (а) представляют собой содержат РА. Согласно определенным вариантам осуществления -Р^а', -Р^а'' и -Р^а''' формулы (а) представляют собой содержат PAS. Согласно определенным вариантам осуществления --Р^а', -Р^а'' и -Р^а''' формулы (а) представляют собой содержат PAG. Согласно определенным вариантам осуществления -Р^а', -Р^а'' и -Р^а''' формулы (а) представляют собой содержат PG. Согласно определенным вариантам осуществления -Р^а', -Р^а'' и -Р^а''' формулы (а) представляют собой содержат XTEN.

Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит один фрагмент формулы (а). Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит два фрагмента формулы (а). Согласно другому варианту осуществления -Z содержит три фрагмента формулы (а). Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит четыре фрагмента формулы (а). Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит пять фрагментов формулы (а). Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит шесть фрагментов формулы (а).

Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит фрагмент формулы (b):

где

пунктирная линия показывает присоединение к -L²- или к оставшейся части -Z,

b1 выбран из группы, состоящей из 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 и 8,

b2 выбран из группы, состоящей из 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 и 8,

b3 представляет собой целое число в интервале и включая 150-1000, согласно определенным вариантам осуществления в интервале и включая 150-500, и согласно определенным вариантам осуществления в интервале и включая 200-460, и

b4 представляет собой целое число в интервале и включая 150-1000, согласно определенным вариантам осуществления в интервале и включая 150-500, и согласно определенным вариантам осуществления в интервале и включая 200-460.

Необязательно, фрагмент формулы (b) замещен одним или несколькими заместителями.

Согласно определенным вариантам осуществления b3 и b4 формулы (b) представляют собой одно и то же целое число.

Согласно определенным вариантам осуществления b3 и b4 формулы (b) оба представляют собой целое число в интервале 200-250 и согласно определенным вариантам осуществления b3 и b4 формулы (b) представляют собой около 225. Согласно определенным вариантам осуществления b3 и b4 формулы (b) оба представляют собой целое число в интервале 400-500 и согласно определенным вариантам осуществления b3 и b4 формулы (b) представляют собой около 450.

Согласно определенным вариантам осуществления b1 формулы (b) выбран из группы, состоящей из 0, 1, 2, 3 и 4. Согласно определенным вариантам осуществления b1 формулы (b) выбран из группы, состоящей из 1, 2 и 3. Согласно определенным вариантам осуществления b1 формулы (b) представляет собой 2.

Согласно определенным вариантам осуществления b2 формулы (b) выбран из группы, состоящей из 1, 2, 3, 4 и 5. Согласно определенным вариантам осуществления b2 формулы (b) выбран из группы, состоящей из 2, 3 и 4. Согласно определенным вариантам осуществления b2 формулы (b) представляет собой 3.

Согласно определенным вариантам осуществления b1 формулы (b) представляет собой 2, b2 формулы (b) представляет собой 3, и b3 и b4 оба представляют собой около 450. Согласно определенным вариантам осуществления b1 формулы (b) представляет собой 2, b2 формулы (b) представляет собой 3, и b3 и b4 оба представляют собой около 225.

Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит один фрагмент формулы (b). Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит два фрагмента формулы (b). Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит три фрагмента формулы (b). Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит четыре фрагмента формулы (b). Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит пять фрагментов формулы (b). Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит шесть фрагментов формулы (b).

Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит фрагмент формулы (с):

где

пунктирная линия показывает присоединение к -L²- или к оставшейся части -Z,

c1 и с2 независимо представляют собой целое число в интервале и включая 150-500, согласно определенным вариантам осуществления в интервале и включая 200-460.

Необязательно, фрагмент формулы (с) замещен одним или несколькими заместителями.

Согласно определенным вариантам осуществления оба c1 и с2 формулы (с) представляют собой одно и то же целое число.

Согласно определенным вариантам осуществления c1 и с2 формулы (с) находятся в интервале и включают 200-250 и согласно определенным вариантам осуществления представляют собой около 225. Согласно определенным вариантам осуществления c1 и с2 формулы (с) находятся в интервале и включают 400-500 и согласно определенным вариантам осуществления c1 и с2 формулы (с) представляют собой около 450.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -Z представляет собой разветвленный полимер на основе ПЭГ, содержащий по меньшей мере 10% ПЭГ, имеет одну точку разветвления и два плеча полимера на основе ПЭГ и имеет молекулярную массу около 40 кДа. Соответственно, каждое из двух плечей полимера на основе ПЭГ имеет молекулярную массу около 20 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления точка разветвления представляет собой -СН<.

Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит один фрагмент формулы (с). Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит два фрагмента формулы (с). Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит три фрагмента формулы (с). Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит четыре фрагмента формулы (с). Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит пять фрагментов формулы (с). Согласно определенным вариантам осуществления -Z содержит шесть фрагментов формулы (с).

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -Z имеет формулу (d)

где

пунктирная линия показывает присоединение к -L -,

-Z^b- выбран из группы, состоящей из С_1-50 алкила, С_2-50 алкенила и C_2-50 алкинила, где С_2-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно замещены одним или несколькими -R¹, которые являются одинаковыми или различными, и где C_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно прерываются одной или несколькими группами, выбранными из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R²)-, -S(O)₂N(R²)-, -S(O)N(R²)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R²)S(O)₂N(R^2a)-, -S-, -N(R²)-, -OC(OR²)(R^2a)-, -N(R²)C(O)N(R^2a)- и -OC(O)N(R²)-,

каждый -T- независимо выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила C_3-10 циклоалкила, 3-10-ти членного гетероциклила, 8-11-ти членного гетеробициклила, 8-30-ти членного карбополициклила и 8-30-ти членного гетерополициклила, где каждый -Т- независимо необязательно замещен одним или несколькими -R¹, которые являются одинаковыми или различными,

каждый -R¹ независимо выбран из группы, состоящей из галогена, -CN, оксо (=O), -COOR³, -OR³, -C(O)R³, -C(O)N(R³R^3a), -S(O)²N(R³R^3a), -S(O)N(R³R^3a), -S(O)₂R³, -S(O)R³, -N(R³)S(O)₂N(R^3aR^3b), -SR³, -N(R³R^3a), -NO₂, -OC(O)R³, -N(R³)C(O)R^3a, -N(R³)S(O)₂R^3a, -N(R³)S(O)R^3a, -N(R³)C(O)OR^3a, -N(R³)C(O)N(R^3aR^3b), -OC(O)N(R³R^3a) и С_1-6 алкила, где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, которые являются одинаковыми или различными,

каждый -R², -R^2a, -R³, -R^3a и -R^3b независимо выбран из группы, состоящей из -Н и C_1-6 алкила, где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, которые являются одинаковыми или различными,

и

-Z^a представляет собой

где

ВР^а, -S^a-, -S^a'-, -S^a''-, -S^a'''-, -P^a', -P^a'', -P^a''' и а имеют значения, как определено для формулы (а).

Необязательно, фрагмент формулы (d) замещен одним или несколькими заместителями.

Согласно определенным вариантам осуществления ВР^а, -S^a-, -S^a'-, -S^a''-, -S^a'''-, -P^a', -P^a'', -P^a''' формулы (d) имеют значения, как определено для формулы выше (а).

Согласно определенным вариантам осуществления -Z^a формулы (d) имеет формулу (b). Согласно определенным вариантам осуществления b1, b2, b3 и b4 имеют значения, как описано для формулы (b).

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -Z формулы (Ia) или (Ib) имеет формулу (е):

где

пунктирная линия показывает присоединение к -L²-,

е выбран из группы, состоящей из 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 и 15, и

-Z^a представляет собой

где

b1, b2, b3 и b4 имеют значения, как определено для формулы (b).

Необязательно, фрагмент формулы (е) замещен одним или несколькими заместителями.

Согласно определенным вариантам осуществления b1, b2, b3 и b4 формулы (е) имеют значения, как определено для формулы выше (b).

Согласно определенным вариантам осуществления е формулы (е) представляет собой 1. Согласно определенным вариантам осуществления е формулы (е) представляет собой 2. Согласно определенным вариантам осуществления е формулы (е) представляет собой 3. Согласно определенным вариантам осуществления е формулы (е) представляет собой 4. Согласно определенным вариантам осуществления е формулы (е) представляет собой 5. Согласно определенным вариантам осуществления е формулы (е) представляет собой 6. Согласно определенным вариантам осуществления е формулы (е) представляет собой 7. Согласно определенным вариантам осуществления е формулы (е) представляет собой 8. Согласно определенным вариантам осуществления е формулы (е) представляет собой 9. Согласно определенным вариантам осуществления е формулы (е) представляет собой 10. Согласно определенным вариантам осуществления е формулы (е) представляет собой 11. Согласно определенным вариантам осуществления е формулы (е) представляет собой 12. Согласно определенным вариантам осуществления е формулы (е) представляет собой 13. Согласно определенным вариантам осуществления е формулы (е) представляет собой 14. Согласно определенным вариантам осуществления е формулы (е) представляет собой 15.

Согласно определенным вариантам осуществления е формулы (е) выбран из группы, состоящей из 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 и 9. Согласно определенным вариантам осуществления е формулы (е) выбран из 3, 4, 5 и 6. Согласно определенным вариантам осуществления е формулы (е) представляет собой 5.

Согласно определенным вариантам осуществления е формулы (е) представляет собой 5, b1 формулы (е) представляет собой 2, b2 формулы (е) представляет собой 3 и b3 и b4 формулы (е) оба представляют собой около 450.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -Z формулы (Ia) или (Ib) имеет формулу (e-i) или (e-i'):

где

пунктирная линия показывает присоединение к -L²-,

е выбран из группы, состоящей из 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 и 15,

-Z^a представляет собой

где

b1, b2, b3 и b4 имеют значения, как определено для формулы (b).

Согласно определенным вариантам осуществления b1, b2, b3 и b4 формулы (e-i) и (e-i') имеют значения, как определено для формулы выше (b).

Согласно определенным вариантам осуществления е формулы (e-i) и (e-i') имеют значения, как описано для формулы (е).

Согласно определенным вариантам осуществления b1 формулы (e-i) и (e-i') представляет собой 2, b2 формулы (e-i) и (e-i') представляет собой 3 и b3 и b4 формулы (e-i) и (e-i') оба представляют собой около 450.

Согласно определенным вариантам осуществления -Z формулы (Ia) или (Ib) имеет формулу (e-i).

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -Z представляет собой разветвленный полимер на основе ПЭГ, содержащий по меньшей мере 10% ПЭГ, имеет три точки разветвления и четыре плеча полимера на основе ПЭГ и имеет молекулярную массу около 40 кДа. Соответственно, каждое из четырех плечей полимера на основе ПЭГ имеет молекулярную массу около 10 кДа. Согласно определенным вариантам осуществления каждая из трех точек разветвления представляет собой -СН<.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -Z имеет формулу (f)

где

пунктирная линия показывает присоединение к -L²-,

BP^f представляет собой точку разветвления, выбранную из группы, состоящей из -N<, -CR< и >С<,

-R выбран из группы, состоящей из -Н и C_1-6 алкила,

f представляет собой 0, если BP^f представляет собой -N< или -CR< и f представляет собой, если BP^f представляет собой >С<,

-S^f-, -S^f'-, -S^f''- и -Sf^'''- независимо представляют собой либо химическую связь, либо независимо выбраны из группы, состоящей из C_1-50 алкила, С_2-50 алкенила и С_2-50 алкинила, где C_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно замещены одним или несколькими -R¹, которые являются одинаковыми или различными, и где C_1-50 алкил, C_2-50 алкенил и C_2-50 алкинил необязательно прерываются одной или несколькими группами, выбранными из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R²)-, -S(O)₂N(R²)-, -S(O)N(R²)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R²)S(O)₂N(R^2a)-, -S-, -N(R²)-, -OC(OR²)(R^2a)-, -N(R²)C(O)N(R^2a)- и -OC(O)N(R²)-,

каждый -T- независимо выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила C_3-10 циклоалкила, 3-10-ти членного гетероциклила, 8-11-ти членного гетеробициклила, 8-30-ти членного карбополициклила и 8-30-ти членного гетерополициклила, где каждый -Т- независимо необязательно замещен одним или несколькими -R¹, которые являются одинаковыми или различными,

каждый R¹ независимо выбран из группы, состоящей из галогена, -CN, оксо (=O), -COOR³, -OR³, -C(O)R³, -C(O)N(R³R^3a), -S(O)₂N(R³R^3a), -S(O)N(R³R^3a), -S(O)₂R³, -S(O)R³, -N(R³)S(O)₂N(R^3aR^3b), -SR³, -N(R³R^3a), -NO₂, -OC(O)R³, -N(R³)C(O)R^3a, -N(R³)S(O)₂R^3a, -N(R³)S(O)R^3a, -N(R³)C(O)OR^3a, -N(R³)C(O)N(R^3aR^3b), -OC(O)N(R³R^3a) и C_1-6 алкила, где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, которые являются одинаковыми или различными,

каждый -R², -R^2a, -R³, -R^3a и -R^3b независимо выбран из группы, состоящей из -Н и C_1-6 алкила, где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, которые являются одинаковыми или различными,

и

-Z^a', -Z^a'' и -Z^a''' независимо представляют собой

где

ВР^а, -S^a-, -S^a' -, -S^a''-, -S^a'''-, -P^a', -P^a'', -P^a''' и а имеют значения, как определено для формулы (а).

Необязательно, фрагмент формулы (f) замещен одним или несколькими заместителями.

Согласно определенным вариантам осуществления ВР^а, -S^a-, -S^a' -, -S^a''-, -S^a'''-, -P^a', -P^a'', -P^a''' формулы (f) имеют значения, как определено для формулы выше (а).

Согласно определенным вариантам осуществления BP^f формулы (f) представляет собой -CR< и r представляет собой 0. Согласно определенным вариантам осуществления -R представляет собой -Н.

Согласно определенным вариантам осуществления -S - формулы (f) представляет собой химическую связь.

Согласно определенным вариантам осуществления -Z^a', -Z^a'' и -Z^a''' формулы (f) имеют одну и ту же структуру. Согласно определенным вариантам осуществления -Z^a', -Z^a'' и -Z^a''' формулы (f) представляют собой формулы (b).

Согласно определенным вариантам осуществления b1, b2, b3 и b4 имеют значения, как описано для формулы (b).

Согласно определенным вариантам осуществления -S^f- формулы (f) представляет собой химическую связь, ВР^а формулы (f) представляет собой -CR<, где -R представляет собой -Н. Согласно определенным вариантам осуществления -S^f- формулы (f) представляет собой химическую связь, ВР^а формулы (f) представляет собой -CR<, где -R представляет собой -Н и -Z^a', -Z^a'' и -Z^a''' формулы (f) представляют собой формулы (b).

Согласно определенным вариантам осуществления -Z имеет формулу (g)

где

пунктирная линия показывает присоединение к -L²-,

-S^g-, -S^g'- и -S^g''- независимо выбраны из группы, состоящей из C_1-50 алкила, С_2-50 алкенила и С_2-50 алкинила, где C_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно замещены одним или несколькими -R¹, которые являются одинаковыми или различными, и где C_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно прерываются одной или несколькими группами, выбранными из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R²)-, -S(O)₂N(R²)-, -S(O)N(R²)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R²)S(O)₂N(R^2a)-, -S-, -N(R²)-, -OC(OR²)(R^2a)-, -N(R²)C(O)N(R^2a)- и -OC(O)N(R²)-,

каждый -T- независимо выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила С_3-10 циклоалкила, 3-10-ти членного гетероциклила, 8-11-ти членного гетеробициклила, 8-30-ти членного карбополициклила и 8-30-ти членного гетерополициклила, где каждый -Т- независимо необязательно замещен одним или несколькими -R¹, которые являются одинаковыми или различными,

каждый R¹ независимо выбран из группы, состоящей из галогена, -CN, оксо (=O), -COOR³, -OR³, -C(O)R³, -C(O)N(R³R^3a), -S(O)₂N(R³R^3a), -S(O)N(R³R^3a), -S(O)₂R³, -S(O)R³, -N(R₃)S(O)₂N(R^3aR^3b), -SR³, -N(R³R^3a), -NO₂, -OC(O)R³, -N(R₃)C(O)R^3a, -N(R³)S(O)₂R^3a, -N(R³)S(O)R^3a, -N(R³)C(O)OR^3a, -N(R³)C(O)N(R^3aR^3b), -OC(O)N(R³R^3a) и C_1-6 алкила, где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, которые являются одинаковыми или различными,

каждый -R², -R^2a, -R³, -R^3a и -R^3b независимо выбран из группы, состоящей из -Н и C_1-6 алкила, где С_1-6 алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, которые являются одинаковыми или различными,

и

-Z^a и -Z^a' независимо представляют собой

где

ВР^а, -S^a-, -S^a'-, -S^a''-, -S^a'''-, -P^a', -P^a'', -P^a''' и а имеют значения, как определено для формулы (а).

Необязательно, фрагмент формулы (g) замещен одним или несколькими заместителями.

Согласно определенным вариантам осуществления ВР^а, -S^a-, -S^a'-, -S^a''-, -S^a'''-, -P^a', -P^a'', -P^a'' формулы (g) имеют значения, как определено для формулы выше (а).

Согласно определенным вариантам осуществления -S^g- формулы (g) выбран из группы, состоящей из C_1-6 алкила, С_2-6 алкенила и С_2-6 алкинила, которые необязательно замещены одним или несколькими -R¹, которые являются одинаковыми или различными,

где

-R¹ выбран из группы, состоящей из галогена, оксо (=O), -COOR, -OR, -C(O)R³, -C(O)N(R³R^3a), -S(O)₂N(R³R^3a), -S(O)N(R³R^3a), -S(O)₂R³, -S(O)R³, -N(R³)S(O)₂N(R^3aR^3b), -SR³, -N(R³R^3a), -NO₂, -OC(O)R³, -N(R³)C(O)R^3a, -N(R³)S(O)₂R^3a, -N(R³)S(O)R^3a, -N(R³)C(O)OR^3a, -N(R³)C(O)N(R^3aR^3b), -OC(O)N(R³R^3a) и C_1-6 алкила, где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, которые являются одинаковыми или различными, и

-R³, -R^3a и -R^3b независимо выбраны из -Н, метила, этила, пропила и бутила.

Согласно определенным вариантам осуществления -S^g- формулы (g) выбран из С_1-6 алкила.

Согласно определенным вариантам осуществления -S^g'- формулы (g) выбран из группы, состоящей из C_1-6 алкила, С_2-6 алкенила и С_2-6 алкинила, которые необязательно замещены одним или несколькими -R¹, которые являются одинаковыми или различными,

где

-R¹ выбран из группы, состоящей из галогена, оксо (=O), -COOR³, -OR³, -C(O)R³, -C(O)N(R³R^3a), -S(O)₂N(R³R^3a), -S(O)N(R³R^3a), -S(O)₂R³, -S(O)R³, -N(R³)S(O)²N(R^3aR^3b), -SR³, -N(R³R^3a), -NO₂, -OC(O)R³, -N(R³)C(O)R^3a, -N(R³)S(O)₂R^3a, -N(R³)S(O)R^3a, -N(R³)C(O)OR^3a, -N(R³)C(O)N(R^3aR^3b), -OC(O)N(R³R^3a) и C_1-6 алкила, где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, которые являются одинаковыми или различными, и

-R³, -R^3a и -R^3b независимо выбраны из -Н, метила, этила, пропила и бутила.

Согласно определенным вариантам осуществления -S^g'- формулы (g) выбран из C_1-6 алкила.

Согласно определенным вариантам осуществления -S^g''- формулы (g) выбран из группы, состоящей из C_1-6 алкила, С_2-6 алкенила и C_2-6 алкинила, которые необязательно замещены одним или несколькими -R¹, которые являются одинаковыми или различными,

где

-R¹ выбран из группы, состоящей из галогена, оксо (=O), -COOR, -OR, -C(O)R, -C(O)N(R³R^3a), -S(O)₂N(R³R^3a), -S(O)N(R³R^3a), -S(O)₂R³, -S(O)R³, -N(R³)S(O)₂N(R^3aR^3b), -SR³, -N(R³R^3a), -NO₂, -OC(O)R³, -N(R³)C(O)R^3a, -N(R³)S(O)₂R^3a, -N(R³)S(O)R^3a, -N(R³)C(O)OR^3a, -N(R³)C(O)N(R^3aR^3b), -OC(O)N(R³R^3a) и C_1-6 алкила, где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, которые являются одинаковыми или различными, и

-R³, -R^3a и -R^3b независимо выбраны из -Н, метила, этила, пропила и бутила.

Согласно определенным вариантам осуществления -S^g''- формулы (g) выбран из С_1-6 алкила.

Согласно определенным вариантам осуществления -Z^a и -Z^a' формулы (g) имеют одну и ту же структуру. Согласно определенным вариантам осуществления -Z^a и -Z^a' формулы (g) представляют собой формулы (b).

Согласно определенным вариантам осуществления -Z формулы (Ia) или (Ib) имеет формулу (g-i)

где

пунктирная линия показывает присоединение к -L²-,

-S^g-, -S^g'- и -S^g''- независимо выбраны из группы, состоящей из C_1-50 алкила, С_2-50 алкенила и С_2-50 алкинила, где C_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно замещены одним или несколькими -R¹, которые являются одинаковыми или различными, и где C_1-50 алкил, C_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно прерываются одной или несколькими группами, выбранными из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R²)-, -S(O)₂N(R²)-, -S(O)N(R²)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R²)S(O)₂N(R^2a)-, -S-, -N(R²)-, -OC(OR²)(R^2a)-, -N(R²)C(O)N(R^2a)- и -OC(O)N(R²)-,

каждый -T- независимо выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила C_3-10 циклоалкила, 3-10-ти членного гетероциклила, 8-11-ти членного гетеробициклила, 8-30-ти членного карбополициклила и 8-30-ти членного гетерополициклила, где каждый -Т-независимо необязательно замещен одним или несколькими -R¹, которые являются одинаковыми или различными,

каждый R¹ независимо выбран из группы, состоящей из галогена, -CN, оксо (=O), -COOR³, -OR³, -C(O)R³, -C(O)N(R³R^3a), -S(O)₂N(R³R^3a), -S(O)N(R³R^3a), -S(O)₂R³, -S(O)R³, -N(R³)S(O)₂N(R^3aR^3b), -SR³, -N(R³R^3a), -NO₂, -OC(O)R³, -N(R³)C(O)R^3a, -N(R³)S(O)₂R^3a, -N(R³)S(O)R^3a, -N(R³)C(O)OR^3a, -N(R³)C(O)N(R^3aR^3b), -OC(O)N(R³R^3a) и C_1-6 алкила, где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, которые являются одинаковыми или различными,

каждый -R², -R^2a, -R³, -R^3a и -R^3b независимо выбран из группы, состоящей из -Н и C_1-6 алкила, где С_1-6 алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, которые являются одинаковыми или различными,

-Y^a1 и -Y^a1'- представляют собой

и

-Z^a и -Z^a' независимо представляют собой

где

ВР^а, -S^a-, -S^a'-, -S^a''-, -S^a'''-, -P^a', -P^a'', -P^a''' и а имеют значения, как определено для формулы (а).

Необязательно, фрагмент формулы (g-i) замещен одним или несколькими заместителями.

Согласно определенным вариантам осуществления -Y^a1- и -Y^a1'- формулы (g-i) оба представляют собой , где пунктирная линия, отмеченная звездочкой, присоединена к -Z^a или -Z^a', соответственно.

Согласно определенным вариантам осуществления ВР^а, -S^a-, -S^a'-, -S^a''-, -S^a'''-, -P^a', -P^a'' и -P^a''' формулы (g-i) имеют значения, как определено для формулы выше (а).

Согласно определенным вариантам осуществления -S^g-, -S^g'- и -S^g''- формулы (g-i) имеют значения, как определено для формулы (g).

Согласно определенным вариантам осуществления -Z^a и -Z^a' формулы (g-i) имеют одну и ту же структуру. Согласно определенным вариантам осуществления -Z^a и -Z^a' формулы (g-i) представляют собой формулы (b). Согласно определенным вариантам осуществления b1, b2, b3 и b4 имеют значения, как описано для формулы (b).

Согласно определенным вариантам осуществления -Z имеет формулу (h)

где

пунктирная линия показывает присоединение к -L²-, и

каждый -Z^c представляет собой фрагмент

где

каждый c1 представляет собой целое число независимо в интервале от около 200 до 250.

Необязательно, фрагмент формулы (h) замещен одним или несколькими заместителями.

Согласно определенным вариантам осуществления оба c1 формулы (h) являются одинаковыми. Согласно определенным вариантам осуществления оба c1 формулы (h) представляют собой около 225.

Согласно определенным вариантам осуществления -Z формулы (Ia) или (Ib) имеет формулу (h-a):

где

пунктирная линия показывает присоединение к -L²-,

каждый k независимо друг от друга выбран из группы, состоящей из 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 и 12,

-Y^a1- и -Y^a1'- представляют собой

и

каждый -Z^c представляет собой фрагмент

где

каждый c1 представляет собой целое число независимо в интервале от около 200 до 250.

Необязательно, фрагмент формулы (h-a) замещен одним или несколькими заместителями.

Согласно определенным вариантам осуществления каждый k формулы (h-a) независимо выбран из группы, состоящей из 2, 3, 4, 5, 6 и 7. Согласно определенным вариантам осуществления оба k формулы (h-a) являются идентичными.

Согласно определенным вариантам осуществления оба c1 формулы (h-a) являются одинаковыми.

Согласно определенным вариантам осуществления оба c1 формулы (h-a) представляют собой около 225.

Согласно определенным вариантам осуществления -Y^a1- и -Y^a1'- формулы (h-a) оба представляют собой , где пунктирная линия, отмеченная звездочкой, присоединена к -Z^c.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -Z имеет формулу (h-i):

где

пунктирная линия показывает присоединение к -L²-, и

каждый -Z^c представляет собой фрагмент

каждый c1 представляет собой целое число независимо в интервале от 200 до 250.

Необязательно, фрагмент формулы (h-i) замещен одним или несколькими заместителями.

Согласно определенным вариантам осуществления оба c1 формулы (h-i) являются одинаковыми. Согласно определенным вариантам осуществления оба c1 формулы (h-i) представляют собой около 225.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент -Z формулы (Ia) или (Ib) имеет формулу (h-ia):

где

пунктирная линия показывает присоединение к -L²-,

каждый k независимо друг от друга выбран из группы, состоящей из 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 и 12,

Y^a1- и Y^a1'- представляют собой

и

каждый -Z^c представляет собой фрагмент

каждый c1 представляет собой целое число независимо в интервале от 200 до 250.

Согласно определенным вариантам осуществления каждый k формулы (h-ia) независимо выбран из группы, состоящей из 2, 3, 4, 5, 6 и 7. Согласно определенным вариантам осуществления оба k формулы (h-ia) являются идентичными.

Согласно определенным вариантам осуществления оба c1 формулы (h-ia) являются одинаковыми. Согласно определенным вариантам осуществления оба c1 формулы (h-ia) представляют собой около 225.

Согласно определенным вариантам осуществления -Y^a1- и -Y^a1'- формулы (h-ia) оба представляют собой , где пунктирная линия, отмеченная звездочкой, присоединена к -Z^c.

Согласно определенным вариантам осуществления -Z формулы (Ia) или (Ib) содержит фрагмент, выбранный из группы, состоящей из:

где

пунктирная линия показывает присоединение к -L²-,

s1, s2, s3, s4, s5, s6, s7, s8, s9, s10, s11, s12, s13, s14 и s15 независимо друг от друга выбраны из 1,2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10,

-X^d1, -X^d2, -X^d3 и -X^d4 независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из -ОН, -SH и -NR^g1R^g2, предпочтительно -ОН,

-X^e1, -X^e2, -X^e3 и -X^e4 независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из -Н, C_1-6 алкила, С_2-6 алкенила и С_2-6 алкинила,

-R^g1 и -R^g2 независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из -Н, C_1-6 алкила, С_2-6 алкенила и С_2-6 алкинила,

-X^f1, -X^f2, -X^f3, -X^f4, -X^f5, -X^f6, -X^f7, -X^f8, -X^f9, -X^f10, -X^f11, -X^f12, -X^f13 и -X^f14 независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из -Н, C_1-6 алкила, С_2-6 алкенила и C_2-6 алкинила, предпочтительно -Н,

-Y^d1-, -Y^d2-, -Y^d3- и -Y^d4- независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из

-Z^d1, -Z^d2, -Z^d3 и -Z^d4 независимо друг от друга представляют собой белок, согласно определенным вариантам осуществления белок случайной спирали, и согласно определенным вариантам осуществления белок случайной спирали выбран из группы, состоящей из PA, PAS, PAG, PG и XTEN.

Согласно определенным вариантам осуществления -Y^d1- и -Y^d2- формулы (j-iv), (j-v) и (j-vi) и -Y^d1-, -Y^d2-, -Y^d3- и -Y^d4- формулы (j-vii) представляют собой

Согласно определенным вариантам осуществления -Y^d1- и -Y^d2- формулы (j-iv), (j-v) и (j-vi) и -Y^d1-, -Y^d2-, -Y^d3- и -Y^d4- формулы (j-vii) представляют собой

где пунктирная линия, отмеченная звездочкой, ориентирована в направлении -Z^d1, -Z^d2, -Z^d3 и -Z^d4, соответственно, и неотмеченная пунктирная линия ориентирована в направлении -L²-.

Согласно определенным вариантам осуществления -X^f1, -X^f2, -X^f3, -X^f4, -X^f5, -X_f6, -X^f7 и -X^f8 формулы (j-i) представляют собой -Н, -X^d1 и -X^d2 формулы (j-i) представляют собой -ОН, -X^e1 и -X^e2 формулы (j-i) выбраны из группы, состоящей из -Н и метила, и s1, s2, s3 и s4 формулы (j-i) выбраны из группы, состоящей из 2, 3, 4, 5 и 6.

Согласно определенным вариантам осуществления -X^f1, -X^f2, -X^f3, -X^f4, -X^f5, -X_f6, -X^f7 и -X^f8 формулы (j-i) представляют собой -Н, -X^d1 и -X^d2 формулы (j-i) представляют собой -ОН, -X^e1 и -X^e2 формулы (j-i) представляют собой -Н, и s1, s2, s3 и s4 формулы (j-i) представляют собой 4.

Согласно определенным вариантам осуществления -X^f1, -X^f2, -X^f3 и -X^f4 формулы (j-ii) представляют собой -Н, -X^d1, -X^d2, -X^d3 и -X^d2 формулы (j-ii) представляют собой -ОН, -X^e1, -X^e2, -X^e3 и -X^e4 формулы (j-ii) выбраны из группы, состоящей из -Н и метил, s1, s2, s3, s4 и s5 формулы (j-ii) выбраны из группы, состоящей из 1, 2, 3, 4, 5 и 6. Согласно определенным вариантам осуществления -X^f1, -X^f2, -X^f3 и -X^f4 формулы (j-ii) представляют собой -Н, -X^d1, -X^d2, -X^d3 и -X^d2 формулы (j-ii) представляют собой -ОН, -X^e1, -X^e2, -X^e3 и -X^e4 формулы (j-ii) представляют собой -Н, si представляет собой 4 формулы (j-ii) и s2, s3, s4 и s5 формулы (j-ii) представляют собой 1.

Согласно определенным вариантам осуществления -X^f1, -X^f2, -X^f3, -X^f4, -X^f5, -X^f6, -X^f7, -X^f8, -X^f9 и -X^f10 формулы (j-iii) представляют собой -H, -X^d1, -X^d2, -X^d3 и -X^d4 формулы (j-iii) представляют собой -ОН, -X, -X, -X и -X формулы (j-iii) выбраны из группы, состоящей из -Н и метил, и s1, s2 и s3 формулы (j-iii) выбраны из группы, состоящей из 2, 3, 4, 5 и 6. Согласно определенным вариантам осуществления -X^f1, -X^f2, -X^f3, -X^f4, -X^f5, -X^f6, -X^f7, -X^f8, -X^f9 и -X^f10 формулы (j-iii) представляют собой -Н, -X^d1, -X^d2, -X^d3 и -X^d4 формулы (j-iii) представляют собой -ОН, -X^e1, -X^e2, -X^e3 и -X^e4 формулы (j-iii) представляют собой -Н, и s1, s2 и s3 формулы (j-iii) представляют собой 4.

Согласно определенным вариантам осуществления -X^f1, -X^f2, -X^f3, -X^f4, -X^f5 и -X^f6 формулы (j-iv) представляют собой -Н, s1, s2, s3, s4, s5, s6 и s7 формулы (j-iv) выбраны из группы, состоящей из 1, 2, 3, 4, 5, 6 и 7, -Y^d1 - и -Y^d2 - выбраны из группы, состоящей из

Согласно определенным вариантам осуществления -X^f1, -X^f2, -X^f3, -X^f4, -X^f5 и -X^f6 формулы (j-iv) представляют собой -Н, s1 формулы (j-iv) представляет собой 3, s2 формулы (j-iv) представляет собой 5, s3 формулы (j-iv) представляет собой 2, s4 формулы (j-iv) представляет собой 4, s5 формулы (j-iv) представляет собой 5, s6 формулы (j-iv) представляет собой 2 и s7 формулы (j-iv) представляет собой 4, и -Y^d1 - и -Y^d2 - формулы (j-iv) представляют собой

Согласно определенным вариантам осуществления -X^f1, -X^f2, -X^f3, -X^f4, -X^f5 и -X^f6 формулы (j-iv) представляют собой -Н, s1 формулы (j-iv) представляет собой 3, s2 формулы (j-iv) представляет собой 5, s3 формулы (j-iv) представляет собой 2, s4 формулы (j-iv) представляет собой 4, s5 формулы (j-iv) представляет собой 5, s6 формулы (j-iv) представляет собой 2 и s7 формулы (j-iv) представляет собой 4, и -Y^d1 - и -Y^d2 - формулы (j-iv) представляют собой

где пунктирная линия, отмеченная звездочкой, ориентирована в направлении -Z^d1, -Z^d2, -Z^d3 и -Z^d4, соответственно, и неотмеченная пунктирная линия ориентирована в направлении -L2-.

Согласно определенным вариантам осуществления -X^f1, -X^f2, -X^f3 и -X^f4 формулы (j-v) представляют собой -Н, s1, s2, s3, s4 и s5 формулы (j-v) выбраны из группы, состоящей из 1, 2, 3, 4, 5, 6 и 7, -Y^d1- и -Y^d2- формулы (j-v) выбраны из группы, состоящей из

Согласно определенным вариантам осуществления -X^f1, -X^f2, -X^f3 и -X^f4 формулы (j-v) представляют собой -Н, s1 формулы (j-v) представляет собой 3, s2 формулы (j-v) представляет собой 2, s3 формулы (j-v) представляет собой 1, s4 формулы (j-v) представляет собой 2 и s5 формулы (j-v) представляет собой 1, и -Y^d1- и -Y^d2- формулы (j-v) представляют собой

Согласно определенным вариантам осуществления -X^f1, -X^f2, -X^f3 и -X^f4 формулы (j-v) представляют собой -Н, s1 формулы (j-v) представляет собой 3, s2 формулы (j-v) представляет собой 2, s3 формулы (j-v) представляет собой 1, s4 формулы (j-v) представляет собой 2 и s5 формулы (j-v) представляет собой 1, и -Y^d1- и -Y^d2- формулы (j-v) представляют собой

где пунктирная линия, отмеченная звездочкой, ориентирована в направлении -Z^d1, -Z^d2, -Z^d3 и -Z^d4, соответственно, и неотмеченная пунктирная линия ориентирована в направлении -L²-.

Согласно определенным вариантам осуществления -X^f1, -X^f2, -X^f3, -X^f4, -X^f5, -X^f6, -X^f7, -X^f8, -X^f9 и -X^f10 формулы (j-vi) представляют собой -H, s1, s2, s3, s4, s5, s6, s7, s8 и s9 формулы (j-vi) выбраны из группы, состоящей из 1, 2, 3, 4, 5, 6 и 7, -Y^d1- и -Y^d2- формулы (j-vi) выбраны из группы, состоящей из

Согласно определенным вариантам осуществления -X^f1, -X^f2, -X^f3, -X^f4, -X^f5, -X^f6, -X^f7, -X^f8, -X^f9 и -X^f10 формулы (j-vi) представляют собой -H, s1 формулы (j-vi) представляет собой 4, s2 формулы (j-vi) представляет собой 5, s3 формулы (j-vi) представляет собой 2, s4 формулы (j-vi) представляет собой 4, s5 формулы (j-vi) представляет собой 4, s6 формулы (j-vi) представляет собой 5, s7 формулы (j-vi) представляет собой 2, s8 формулы (j-vi) представляет собой 4 и s9 формулы (j-vi) представляет собой 4, и -Y^d1- и -Y^d2- формулы (j-v) представляют собой

Согласно определенным вариантам осуществления -X^f1, -X^f2, -X^f3, -X^f4, -X^f5, -X^f6, -X^f7, -X^f8, -X^f9 и -X^f10 формулы (j-vi) представляют собой -H, s1 формулы (j-vi) представляет собой 4, s2 формулы (j-vi) представляет собой 5, s3 формулы (j-vi) представляет собой 2, s4 формулы (j-vi) представляет собой 4, s5 формулы (j-vi) представляет собой 4, s6 формулы (j-vi) представляет собой 5, s7 формулы (j-vi) представляет собой 2, s8 формулы (j-vi) представляет собой 4 и s9 формулы (j-vi) представляет собой 4, и -Y^d1- и -Y^d2- формулы (j-v) представляют собой

где пунктирная линия, отмеченная звездочкой, ориентирована в направлении -Z^d1, -Z^d2, -Z^d3 и -Z^d4, соответственно, и неотмеченная пунктирная линия ориентирована в направлении -L²-.

Согласно определенным вариантам осуществления -X^f1, -X^f2, -X^f3, -X^f4, -X^f5, -X^f6, -X^f7, -X^f8, -X^f9, -X^f10, -X^f11, -X^f12, -X^f13 и -X^f14 формулы (j-vii) представляют собой -H, s1, s2, s3, s4, s5, s6, s7, s8, s9, s10, s11, s12, s13, s14 и s15 формулы (j-vii) выбраны из группы, состоящей из 1, 2, 3, 4, 5, 6 и 7, -Y^d1-, -Y^d2-, -Y^d3- и -Y^d4-формулы (j-vii) выбраны из группы, состоящей из

Согласно определенным вариантам осуществления - X^f1, -X^f2, -X^f3, -X^f4, -X^f5, -X^f6, -X^f7, -X^f8, -X^f9, -X^f10, -X^f11, -X^f12, -X^f13 и -X^f14 формулы (j-vii) представляют собой -Н, представляют собой -Н, s1 формулы (j-vii) представляет собой 4, s2 формулы (j-vii) представляет собой 4, s3 формулы (j-vii) представляет собой 5, s4 формулы (j-vii) представляет собой 2, s5 формулы (j-vii) представляет собой 4, s6 формулы (j-vii) представляет собой 5, s7 формулы (j-vii) представляет собой 2, s8 формулы (j-vii) представляет собой 4, s9 формулы (j-vii) представляет собой 4, s10 формулы (j-vii) представляет собой 5, s11 формулы (j-vii) представляет собой 2, s12 формулы (j-vii) представляет собой 4, s13 формулы (j-vii) представляет собой 5, s14 формулы (j-vii) представляет собой 2 и s15 формулы (j-vii) представляет собой 4, и -Y^d1-, -Y^d2-, -Y^d3- и -Y^d4- формулы (j-vii) представляют собой

Согласно определенным вариантам осуществления -X^f1, -X^f2, -X^f3, -X^f4, -X^f5, -X^f6, -X^f7, -X^f8, -X^f9, -X^f10, -X^f11, -X^f12, -X^f13 и -X^f14 формулы (j-vii) представляют собой -H, s1 формулы (j-vii) представляет собой 4, s2 формулы (j-vii) представляет собой 4, s3 формулы (j-vii) представляет собой 5, s4 формулы (j-vii) представляет собой 2, s5 формулы (j-vii) представляет собой 4, s6 формулы (j-vii) представляет собой 5, s7 формулы (j-vii) представляет собой 2, s8 формулы (j-vii) представляет собой 4, s9 формулы (j-vii) представляет собой 4, s10 формулы (j-vii) представляет собой 5, s11 формулы (j-vii) представляет собой 2, s12 формулы (j-vii) представляет собой 4, s13 формулы (j-vii) представляет собой 5, s14 формулы (j-vii) представляет собой 2 и s15 формулы (j-vii) представляет собой 4, и -Y^d1-, -Y^d2-, -Y^d3- и -Y^d4- формулы (j-vii) представляют собой

где пунктирная линия, отмеченная звездочкой, ориентирована в направлении -Z^d1, -Z^d2, -Z^d3 и -Z^d4, соответственно, и неотмеченная пунктирная линия ориентирована в направлении -L²-.

Согласно определенным вариантам осуществления -Z^d1, -Z^d2, -Z^d3 и -Z^d4 формулы (j-i), (j-ii), (j-iii), (j-iv), (j-v), (j-vi)и (j-vii) имеют одну и ту же структуру. Согласно определенным вариантам осуществления -Z^d1, -Z^d2, -Z^d3 и -Z^d4 формулы (j-i), (j-ii), (j-iii), (j-iv), (j-v) и (j-vii) представляют собой содержат PA. Согласно определенным вариантам осуществления -Z^d1, -Z^d2, -Z^d3 и -Z^d4 формулы (j-i), (j-ii), (j-iii), (j-iv), (j-v), (j-vi) и (j-vii) представляют собой содержат PAS. Согласно определенным вариантам осуществления -Z^d1, -Z^d2, -Z^d3 и -Z^d4 формулы (j-i), (j-ii), (j-iii), (j-iv), (j-v), (j-vi) и (j-vii) представляют собой содержат PAG. Согласно определенным вариантам осуществления -Z^d1, -Z^d2, -Z^d3 и -Z^d4 формулы (j-i), (j-ii), (j-iii), (j-iv), (j-v), (j-vi) и (j-vii) представляют собой содержат PG. Согласно определенным вариантам осуществления -Z^d1, -Z^d2, -Z^d3 и -Z^d4 формулы (j-i), (j-ii), (j-iii), (j-iv), (j-v), (j-vi) и (j-vii) представляют собой фрагмент XTEN.

Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат CNP имеет формулу

где

неотмеченная пунктирная линия показывает присоединение к атому азота -D, который представляет собой фрагмент CNP посредством образования амидной связи, и

отмеченная звездочкой пунктирная линия показывает присоединение к -Z, имеющему структуру

где

каждый -Z^a представляет собой

где

каждый c1 представляет собой целое число независимо в интервале от 200 до 250.

Согласно определенным вариантам осуществления каждый c1 формулы (IIf) представляет собой около 225.

Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат CNP имеет формулу (IIf-i)

где

неотмеченная пунктирная линия показывает присоединение к атому азота -D, который представляет собой фрагмент CNP посредством образования амидной связи, и

отмеченная звездочкой пунктирная линия показывает присоединение к -Z, имеющему структуру

где

каждый -Z^a представляет собой

где

каждый c1 представляет собой целое число независимо в интервале от 200 до 250.

Согласно определенным вариантам осуществления каждый c1 формулы (IIf-i) представляет собой около 225.

Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат CNP имеет формулу (IIf-ii):

где

неотмеченная пунктирная линия показывает присоединение к атому азота -D, который представляет собой фрагмент CNP посредством образования амидной связи, и

отмеченная звездочкой пунктирная линия показывает присоединение к -Z, имеющему структуру

где

каждый -Z^a представляет собой

где

каждый c1 представляет собой целое число независимо в интервале от 200 до 250.

Согласно определенным вариантам осуществления каждый c1 формулы (IIf-ii) представляет собой около 225.

Согласно определенным вариантам осуществления -D формулы (IIf), (IIf-i) и (IIf-ii) представляет собой фрагмент CNP, т.е. конъюгат формулы (IIf), (IIf-i) и (IIf-ii) представляет собой конъюгат CNP. Согласно определенным вариантам осуществления -D формулы (IIf), (IIf-i) и (IIf-ii) представляет собой фрагмент CNP, имеющий последовательность SEQ ID NO:24, SEQ ID NO:25 или SEQ ID NO:30. Согласно определенным вариантам осуществления -D формулы (IIf), (IIf-i) и (IIf-ii) представляет собой фрагмент CNP, имеющий последовательность SEQ ID NO:24. Согласно определенным вариантам осуществления -D формулы (IIf), (IIf-i) и (IIf-ii) представляет собой фрагмент CNP, имеющий последовательность SEQ ID NO:20. Согласно определенным вариантам осуществления -D формулы (IIf), (IIf-i) и (IIf-ii) представляет собой фрагмент CNP, имеющий последовательность SEQ ID NO:21. Согласно определенным вариантам осуществления -D формулы (IIf), (IIf-i) и (IIf-ii) представляет собой фрагмент CNP, имеющий последовательность SEQ ID NO:22. -D формулы (IIf), (IIf-i) и (IIf-ii) представляет собой фрагмент CNP, имеющий последовательность SEQ ID NO:23. Согласно определенным вариантам осуществления -D формулы (IIf), (IIf-i) и (IIf-ii) представляет собой фрагмент CNP, имеющий последовательность SEQ ID NO:30.

Согласно определенным вариантам осуществления -D формулы (IIf), (IIf-i) и (IIf-ii) представляет собой фрагмент CNP, который присоединен к -L¹- через азот N-концевой аминной функциональной группы CNP.

Согласно определенным вариантам осуществления -D формулы (IIf), (IIf-i) и (IIf-ii) представляет собой фрагмент CNP, который присоединен к -L¹- через азот аминной функциональной группы боковой цепи лизина фрагмента CNP.

Согласно определенным вариантам осуществления указанная боковая цепь лизина не является частью кольца, образованного дисульфидным мостиком между цистеиновыми остатками в положениях 22 и 38, если фрагмент CNP имеет последовательность SEQ ID NO:24.

Соответственно, согласно определенным вариантам осуществления фрагмент CNP соединен с -L¹- в конъюгате CNP формулы (IIf), (IIf-i) и (IIf-ii) через аминную функциональную группу на боковой цепи лизина в положении 9, если CNP имеет последовательность SEQ ID NO:24.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент CNP соединен с -L¹- в конъюгате CNP формулы (IIf), (IIf-i) и (IIf-ii) через аминную функциональную группу на боковой цепи лизина в положении 11, если CNP имеет последовательность SEQ ID NO:24.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент CNP соединен с -L¹-в конъюгате CNP формулы (IIf), (IIf-i) и (IIf-ii) через аминную функциональную группу на боковой цепи лизина в положении 15, если CNP имеет последовательность SEQ ID NO:24.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент CNP соединен с -L¹-в конъюгате CNP формулы (IIf), (IIf-i) и (IIf-ii) через аминную функциональную группу на боковой цепи лизина в положении 16, если CNP имеет последовательность SEQ ID NO:24.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент CNP соединен с -L₁-в конъюгате CNP формулы (IIf), (IIf-i) и (IIf-ii) через аминную функциональную группу на боковой цепи лизина в положении 20, если CNP имеет последовательность SEQ ID NO:24.

Согласно определенным вариантам осуществления указанная боковая цепь лизина является частью кольца, образованного дисульфидным мостиком между цистеиновыми остатками в положениях 22 и 38, если фрагмент CNP имеет последовательность SEQ ID NO:24.

Соответственно, согласно определенным вариантам осуществления фрагмент CNP соединен с -L¹- в конъюгате CNP формулы (IIf) через аминную функциональную группу на боковой цепи лизина в положении 26, если CNP имеет последовательность SEQ ID NO:24.

Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат CNP имеет формулу (IIf-i), где c1 представляет собой около 225, фрагмент CNP имеет последовательность SEQ ID NO:24 и присоединен к -L¹- через аминную функциональную группу на боковой цепи лизина в положении 26.

Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат CNP имеет формулу (IIf), где c1 представляет собой около 225, -D представляет собой фрагмент CNP, имеющий последовательность SEQ ID NO:20 и присоединен к -L¹- через аминную функциональную группу на боковой цепи лизина в положении 30.

Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат CNP имеет формулу (IIf-i), где c1 представляет собой около 225, -D представляет собой фрагмент CNP, имеющий последовательность SEQ ID NO:20 и присоединен к -L¹- через аминную функциональную группу на боковой цепи лизина в положении 30.

Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат CNP имеет формулу (IIf-ii), где c1 представляет собой около 225, фрагмент CNP имеет последовательность SEQ ID NO:20 и присоединен к -L¹- через аминную функциональную группу на боковой цепи лизина в положении 30.

Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат CNP имеет формулу (IIf), где c1 представляет собой около 225, -D представляет собой фрагмент CNP, имеющий последовательность SEQ ID NO:21 и присоединен к -L¹- через аминную функциональную группу на боковой цепи лизина в положении 29.

Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат CNP имеет формулу (IIf-i), где c1 представляет собой около 225, фрагмент CNP имеет последовательность SEQ ID NO:21 и присоединен к -L¹- через аминную функциональную группу на боковой цепи лизина в положении 29.

Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат CNP имеет формулу (IIf-ii), где c1 представляет собой около 225, фрагмент CNP имеет последовательность SEQ ID NO:21 и присоединен к -L¹- через аминную функциональную группу на боковой цепи лизина в положении 29.

Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат CNP имеет формулу (IIf), где c1 представляет собой около 225, -D представляет собой фрагмент CNP, имеющий последовательность SEQ ID NO:22 и присоединен к -L¹- через аминную функциональную группу на боковой цепи лизина в положении 28.

Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат CNP имеет формулу (IIf-i), где c1 представляет собой около 225, фрагмент CNP имеет последовательность SEQ ID NO:22 и присоединен к -L¹- через аминную функциональную группу на боковой цепи лизина в положении 28.

Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат CNP имеет формулу (IIf-ii), где c1 представляет собой около 225, фрагмент CNP имеет последовательность SEQ ID NO:22 и присоединен к -L¹- через аминную функциональную группу на боковой цепи лизина в положении 28.

Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат CNP имеет формулу (IIf), где c1 представляет собой около 225, -D представляет собой фрагмент CNP, имеющий последовательность SEQ ID NO:23 и присоединен к -L¹- через аминную функциональную группу на боковой цепи лизина в положении 27.

Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат CNP имеет формулу (IIf-i), где c1 представляет собой около 225, фрагмент CNP имеет последовательность SEQ ID NO:23 и присоединен к -L¹- через аминную функциональную группу на боковой цепи лизина в положении 27.

Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат CNP имеет формулу (IIf-ii), где c1 представляет собой около 225, фрагмент CNP имеет последовательность SEQ ID NO:23 и присоединен к -L¹- через аминную функциональную группу на боковой цепи лизина в положении 27.

Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат CNP имеет формулу (IIf), где c1 представляет собой около 225, -D представляет собой фрагмент CNP, имеющий последовательность SEQ ID NO:30 и присоединен к -L¹- через аминную функциональную группу на боковой цепи лизина в положении 27.

Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат CNP имеет формулу (IIf-i), где c1 представляет собой около 225, фрагмент CNP имеет последовательность SEQ ID NO:30 и присоединен к -L¹- через аминную функциональную группу на боковой цепи лизина в положении 27.

Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат CNP имеет формулу (IIf-ii), где c1 представляет собой около 225, фрагмент CNP имеет последовательность SEQ ID NO:30 и присоединен к -L¹- через аминную функциональную группу на боковой цепи лизина в положении 27.

Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат CNP имеет формулу (IIf-ii), где c1 представляет собой около 225, фрагмент CNP имеет последовательность SEQ ID NO:24 и присоединен к -L¹- через аминную функциональную группу на боковой цепи лизина в положении 26.

Понятно, что положения цистеинов и лизинов, упомянутых выше, варьируются в зависимости от длины фрагмента CNP и что специалист в данной области техники без труда идентифицирует соответствующие цистеины и лизины в более длинных или коротких версиях фрагмента CNP, а также понимает, что, например, некоторые лизины могут не присутствовать в более коротких фрагментах CNP. Кроме того, понятно, что в результате, например, сайт-направленного мутагенеза может быть больше остатков лизина в части, не образующей кольцо, и/или части, образующей кольцо, фрагмента CNP.

Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат CNP имеет формулу (IIf), где c1 представляет собой около 225, -D представляет собой фрагмент CNP, имеющий последовательность SEQ ID NO:24, и присоединен к -L¹- через аминную функциональную группу на боковой цепи лизина в положении 26.

Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат CNP имеет формулу (IIf'):

где

неотмеченная пунктирная линия показывает присоединение к азоту на боковой цепи лизина в положении 26 фрагмента CNP последовательности SEQ ID NO:24 посредством образования амидной связи, и

отмеченная звездочкой пунктирная линия показывает присоединение к -Z, имеющему структуру

где

каждый Z^a представляет собой

где

каждый c1 представляет собой целое число независимо в интервале от 200 до 250.

Согласно определенным вариантам осуществления каждый c1 формулы (IIf') представляет собой около 225.

Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат CNP имеет формулу (IIf-i'):

где

неотмеченная пунктирная линия показывает присоединение к азоту на боковой цепи лизина в положении 26 фрагмента CNP последовательности SEQ ID NO:24 посредством образования амидной связи, и

отмеченная звездочкой пунктирная линия показывает присоединение к -Z, имеющему структуру

где

каждый Z^a представляет собой

где

каждый c1 представляет собой целое число независимо в интервале от 200 до 250.

Согласно определенным вариантам осуществления каждый c1 формулы (IIf-i') представляет собой около 225.

Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат CNP имеет формулу (IIf-ii'):

где

неотмеченная пунктирная линия показывает присоединение к азоту на боковой цепи лизина в положении 26 фрагмента CNP последовательности SEQ ID NO:24 посредством образования амидной связи, и

отмеченная звездочкой пунктирная линия показывает присоединение к -Z, имеющему структуру

где

каждый Z^a представляет собой

где

каждый c1 представляет собой целое число независимо в интервале от 200 до 250.

Согласно определенным вариантам осуществления каждый c1 формулы (IIf-ii') представляет собой около 225.

Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат CNP имеет формулу (IIfa):

где

неотмеченная пунктирная линия показывает присоединение к атому азота -D, который представляет собой фрагмент CNP посредством образования амидной связи, и

отмеченная звездочкой пунктирная линия показывает присоединение к -Z, имеющему структуру

где

к выбран из группы, состоящей из 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 и 12,

каждый -Z^a представляет собой

где

каждый c1 представляет собой целое число независимо в интервале от 200 до 250.

Согласно определенным вариантам осуществления к формулы (IIfa) выбран из группы, состоящей из 2, 3, 4, 5, 6 и 7.

Согласно определенным вариантам осуществления каждый c1 формулы (IIfa) представляет собой около 225.

Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат CNP имеет формулу (IIfa-i):

где

неотмеченная пунктирная линия показывает присоединение к атому азота -D, который представляет собой фрагмент CNP посредством образования амидной связи, и

отмеченная звездочкой пунктирная линия показывает присоединение к -Z, имеющему структуру

где

k выбран из группы, состоящей из 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 и 12,

каждый -Z^a представляет собой

где

каждый c1 представляет собой целое число независимо в интервале от 200 до 250.

Согласно определенным вариантам осуществления к формулы (IIfa-i) выбран из группы, состоящей из 2, 3, 4, 5, 6 и 7.

Согласно определенным вариантам осуществления каждый c1 формулы (IIfa-i) представляет собой около 225.

Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат CNP имеет формулу (IIfa-ii):

где

неотмеченная пунктирная линия показывает присоединение к атому азота -D, который представляет собой фрагмент CNP посредством образования амидной связи, и

отмеченная звездочкой пунктирная линия показывает присоединение к -Z, имеющему структуру

где

к выбран из группы, состоящей из 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 и 12,

каждый -Z^a представляет собой

где

каждый c1 представляет собой целое число независимо в интервале от 200 до 250.

Согласно определенным вариантам осуществления каждый c1 формулы (IIfa-ii) представляет собой около 225.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент CNP конъюгата CNP формулы (IIfa), (IIfa-i) и (IIfa-ii) имеет последовательность SEQ ID NO:25.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент CNP конъюгата CNP формулы (IIfa), (IIfa-i) и (IIfa-ii) имеет последовательность SEQ ID NO:20.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент CNP конъюгата CNP формулы (IIfa), (IIfa-i) и (IIfa-ii) имеет последовательность SEQ ID NO:21.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент CNP конъюгата CNP формулы (IIfa), (IIfa-i) и (IIfa-ii) имеет последовательность SEQ ID NO:22.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент CNP конъюгата CNP формулы (IIfa), (IIfa-i) и (IIfa-ii) имеет последовательность SEQ ID NO:23.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент CNP конъюгата CNP формулы (IIfa), (IIfa-i) и (IIfa-ii) имеет последовательность SEQ ID NO:30.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент CNP конъюгата CNP формулы (IIfa), (IIfa-i) и (IIfa-ii) имеет последовательность SEQ ID NO:24.

Согласно определенным вариантам осуществления фрагмент CNP присоединен к -L¹- в конъюгате CNP формулы (IIfa), (IIfa-i) и (IIfa-ii) через азот N-концевой аминной функциональной группы CNP.

Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат CNP имеет формулу (IIfa'):

где

неотмеченная пунктирная линия показывает присоединение к азоту на боковой цепи лизина в положении 26 фрагмента CNP последовательности SEQ ID NO:24 посредством образования амидной связи, и

отмеченная звездочкой пунктирная линия показывает присоединение к -Z, имеющему структуру

где

к выбран из группы, состоящей из 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 и 12,

каждый Z^a представляет собой

где

каждый c1 представляет собой целое число независимо в интервале от 200 до 250.

Согласно определенным вариантам осуществления к формулы (IIfa') выбран из группы, состоящей из 2, 3, 4, 5, 6 и 7.

Согласно определенным вариантам осуществления каждый c1 формулы (IIfa') представляет собой около 225.

Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат CNP имеет формулу (IIfa-i'):

где

неотмеченная пунктирная линия показывает присоединение к азоту на боковой цепи лизина в положении 26 фрагмента CNP последовательности SEQ ID NO:24 посредством образования амидной связи, и

отмеченная звездочкой пунктирная линия показывает присоединение к -Z, имеющему структуру

где

к выбран из группы, состоящей из 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 и 12, каждый Z^a представляет собой

где

каждый c1 представляет собой целое число независимо в интервале от 200 до 250.

Согласно определенным вариантам осуществления к формулы (IIfa-i') выбран из группы, состоящей из 2, 3, 4, 5, 6 и 7.

Согласно определенным вариантам осуществления каждый c1 формулы (IIfa-i') представляет собой около 225.

Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат CNP имеет формулу (IIfa-ii'):

где

неотмеченная пунктирная линия показывает присоединение к азоту на боковой цепи лизина в положении 26 фрагмента CNP последовательности SEQ ID NO:24 посредством образования амидной связи, и

отмеченная звездочкой пунктирная линия показывает присоединение к -Z, имеющему структуру

где

k выбран из группы, состоящей из 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 и 12,

каждый Z^a представляет собой

где

каждый c1 представляет собой целое число независимо в интервале от 200 до 250.

Согласно определенным вариантам осуществления к формулы (IIfa-ii') выбран из группы, состоящей из 2, 3, 4, 5, 6 и 7.

Согласно определенным вариантам осуществления каждый c1 формулы (IIfa-ii') представляет собой около 225.

Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав согласно настоящему изобретению может содержать один или несколько дополнительных эксципиентов, как например, консервант, стабилизатор, антиадсорбционный агент, криопротектор, агент для защиты от окисления и другие вспомогательные агенты. Подразумевается, что один эксципиент может иметь несколько функций, например, двойную или тройную.

Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав согласно настоящему изобретению может содержать консервант, как например консервант, выбранный из группы, состоящей из: бензойная кислота, фенол, метилпарабен, этилпарабен, пропилпарабен, бутилпарабен, сорбат калия, хлорбутанол, бензиловый спирт, нитрат фенилртути, тимеросал, сорбиновая кислота, сорбат калия, хлоркрезол, бензалкония хлорид, 2-этоксиэтанол, хлоргексидин, хлорбутанол, фениэтиловый спирт, ацетат фенилртути, м-крезол и их смеси.

Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав согласно настоящему изобретению может содержать стабилизатор, как например, стабилизатор, выбранный из группы, состоящей из: аланин, аргинин, аспарагиновая кислота, глицин, гистидин, лизин, пролин, сахара такие как глюкоза, сахароза, трегалоза, полиолы, такие как глицерин, маннит, сорбит, соли, такие как фосфат калия, сульфат натрия, хелатирующие агенты, такие как EDTA, гексафосфат, лиганды, такие как ионы двухвалентных металлов, другие соли или органические молекулы, такие как фенольные производные, олигомеры или полимеры, такие как циклодекстрины, декстран, дендримеры, ПЭГ, PVP, протамин и HSA

Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав согласно настоящему изобретению может содержать антиадсорбционный агент, как например, антиадсорбционный агент, выбранный из группы, состоящей из ионных или неонных поверхностно-активных веществ или других белков или растворимых полимеров, которые используются для покрытия или конкурентной адсорбции на внутренней поверхности состава или контейнера состава, таких как полоксамер (Плюроник F-68), додециловый простой эфир ПЭГ (Brij 35), декстран, полиэтиленгликоль, ПЭГ-полигистидин, BSA, HSA и желатины. Выбранная концентрация и тип эксципиента зависят от эффекта, которого следует избегать, но обычно монослой поверхностно-активного вещества образуется на границе раздела прямо выше CMC.

Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав согласно настоящему изобретению может содержать криопротектор, как например криопротектор, выбранный из группы, состоящей из Сахаров, полиолов, поверхностно-активных веществ, аминокислот, неводных растворителей и пептидов. При сушке замораживанием или распылением криопротекторы могут противодействовать дестабилизирующим эффектам, вызванным разрывом водородных связей и удалением воды. Трегалоза особенно эффективна в снижении агрегации, вызванной влагой, а также улучшает термическую стабильность, потенциально вызванную воздействием воды на гидрофобные группы соединения. Маннит и сахароза также можно использовать либо как единственный лио/криопротектор, либо в комбинации с каждым другим, где известно, что более высокие соотношения маннит: сахароза повышают физическую стабильность соединения в сухом фармацевтическом составе. Маннит также можно сочетать с трегалозой. Трегалоза также может сочетаться с сорбитом или сорбит может использоваться в качестве единственного защитного средства. Также можно использовать крахмал или производные крахмала.

Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав согласно настоящему изобретению может содержать агент для защиты от окисления, как например агент для защиты от окисления, выбранный из группы, состоящей из: метионин, бутилгидрокситолуол, бутилгидроксианизол, токоферол, пропилгаллат, аскорбиновая кислота, бисульфит натрия,

этилендиаминтетрауксусная кислота (EDTA), цистеин, глутатион, монотиоглицерин, поли(этиленимиг), витаин Е, эктоин, морин и их смеси. Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав согласно настоящему изобретению может содержать агент для защиты от окисления, как например агент для защиты от окисления, выбранный из группы, состоящей из: метионин, бутилгидрокситолуол, бутилгидроксианизол, токоферол, пропилгаллат, аскорбиновая кислота, этилендиаминтетрауксусная кислота (EDTA), поли(этиленимиг), витаин Е, эктоин, морин и их смеси.

Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав согласно настоящему изобретению может содержать дополнительные эксципиенты, выбранные из группы, состоящей из смачивающих агентов, модификаторов вязкости и антибиотиков.

Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав согласно настоящему изобретению содержит конъюгат CNP, янтарную кислоту, трегалозу и Трис.

Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав согласно настоящему изобретению содержит на основе общей массы сухого фармацевтического состава:

Конъюгат CNP 1.3 - 45.4% (мас./мас.)

янтарную кислоту 0.2 - 3.2% (мас./мас.)

дигидрат трегалозы 52.6 - 98.4% (мас./мас.)

Трис 0.1 - 5.6% (мас./мас).

Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав согласно настоящему изобретению содержит на основе общей массы сухого фармацевтического состава:

Конъюгат CNP 1.3 - 38.7% (мас./мас.)

янтарную кислоту 0.2 - 3.2% (мас./мас.)

дигидрат трегалозы 52.6 - 98.4% (мас./мас.)

Трис 0.1 - 5.6% (мас./мас).

Из-за больших различий в диапазоне веса пациентов, как например, от 3 до 60 кг, согласно определенному варианту осуществления полезно иметь сухие фармацевтические препараты с разной силой действия, то есть с разными концентрациями конъюгата CNP, такими как высокая, средняя и низкая доза. Таким образом, в одном варианте осуществления сухой фармацевтический состав предоставляется в более чем одной концентрации, как например в двух различных концентрациях, как например в трех различных концентрациях, как например в четырех различных концентрациях, как например в пяти различных концентрациях, как например в шести различных концентрациях, как например в семи различных концентрациях, как например в восьми различных концентрациях, как например в девяти различных концентрациях, как например в десяти различных концентрациях, как например в одиннадцати различных концентрациях, как например в двенадцати различных концентрациях.

Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав содержит на основе общей массы сухого фармацевтического состава:

Конъюгат CNP 23.8 - 38.7% (мас./мас.)

янтарную кислоту 0.2 - 3.1% (мас./мас.)

дигидрат трегалозы 52.6 - 75.9% (мас./мас.)

Трис 0.1 - 5.6% (мас./мас).

Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав содержит на основе общей массы сухого фармацевтического состава:

Конъюгат CNP 5.8 - 12.4% (мас./мас.)

янтарную кислоту 0.3 - 3.2% (мас./мас.)

дигидрат трегалозы 78.8 - 93.8% (мас./мас.)

Трис 0.1 - 5.6% (мас./мас).

Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав содержит на основе общей массы сухого фармацевтического состава:

Конъюгат CNP 1.4 - 3.7% (мас./мас.)

янтарную кислоту 0.3 - 3.2% (мас./мас.)

дигидрат трегалозы 87.5 - 98.2% (мас./мас.)

Трис 0.1 - 5.6% (мас./мас).

Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав содержит на основе общей массы сухого фармацевтического состава:

Конъюгат CNP 28.8 - 33.2% (мас./мас.)

янтарную кислоту 0.6 - 1.6% (мас./мас.)

дигидрат трегалозы 62.4 - 70.4% (мас./мас.)

Трис 0.2 - 2.8% (мас./мас).

Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав содержит на основе общей массы сухого фармацевтического состава:

Конъюгат CNP 7.4 - 8.8% (мас./мас.)

янтарную кислоту 0.8 - 2.0% (мас./мас.)

дигидрат трегалозы 85.7 - 91.6% (мас./мас.)

Трис 0.2 - 3.5% (мас./мас).

Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав содержит на основе общей массы сухого фармацевтического состава:

Конъюгат CNP 2.0 - 2.5% (мас./мас.)

янтарную кислоту 0.8 - 2.1% (мас./мас.)

дигидрат трегалозы 91.7 - 97.0% (мас./мас.)

Трис 0.2 - 3.8% (мас./мас).

Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав содержит на основе общей массы сухого фармацевтического состава:

Конъюгат CNP 32.2 - 34.0% (мас./мас.)

янтарную кислоту 0.9 - 1.0% (мас./мас.)

дигидрат трегалозы 64.5 - 65.5% (мас./мас.)

Трис 0.5 - 1.4% (мас./мас).

Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав содержит на основе общей массы сухого фармацевтического состава:

Конъюгат CNP 8.3 - 8.9% (мас./мас.)

янтарную кислоту 1.2 - 1.3% (мас./мас.)

дигидрат трегалозы 88.6 - 89.1% (мас./мас.)

Трис 0.7 - 1.8% (мас./мас).

Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав содержит на основе общей массы сухого фармацевтического состава:

Конъюгат CNP 2.3 - 2.4% (мас./мас.)

янтарную кислоту 1.3 - 1.4% (мас./мас.)

дигидрат трегалозы 94.4 - 95.6% (мас./мас.)

Трис 0.7 - 1.9% (мас./мас).

Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав содержит, на основе общей массы сухого фармацевтического состава, около 45.4% (мас./мас.) конъюгата CNP, около 0.9% (мас./мас.) янтарной кислоты, около 52.6% (мас./мас.) дигидрат трегалозы и около 1.1% (мас./мас.) Трис.

Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав содержит, на основе общей массы сухого фармацевтического состава, 45.4% (мас./мас.) конъюгата CNP, 0.9% (мас./мас.) янтарной кислоты, 52.6% (мас./мас.) дигидрат трегалозы и 1.1% (мас./мас.) Трис.

Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав содержит, на основе общей массы сухого фармацевтического состава, около 32.6% (мас./мас.) конъюгата CNP, около 1.0% (мас./мас.) янтарной кислоты, около 65.2% (мас./мас.) дигидрат трегалозы и около 1.2% (мас./мас.) Трис.

Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав содержит, на основе общей массы сухого фармацевтического состава, 33% (мас./мас.) конъюгата CNP, 1% (мас./мас.) янтарной кислоты, 65% (мас./мас.) дигидрат трегалозы и 1% (мас./мас.) Трис.

Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав содержит, на основе общей массы сухого фармацевтического состава, 32.6% (мас./мас.) конъюгата CNP, 1.0% (мас./мас.) янтарной кислоты, 65.2% (мас./мас.) дигидрат трегалозы и 1.2% (мас./мас.) Трис.

Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав содержит, на основе общей массы сухого фармацевтического состава, около 8.2% (мас./мас.) конъюгата CNP, около 1.2% (мас./мас.) янтарной кислоты, около 89.1% (мас./мас.) дигидрат трегалозы и около 1.5% (мас./мас.) Трис.

Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав содержит, на основе общей массы сухого фармацевтического состава, 8% (мас./мас.) конъюгата CNP, 1% (мас./мас.) янтарной кислоты, 89% (мас./мас.) дигидрат трегалозы и 2% (мас./мас.) Трис.

Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав содержит, на основе общей массы сухого фармацевтического состава, 8.2% (мас./мас.) конъюгата CNP, 1.2% (мас./мас.) янтарной кислоты, 89.1% (мас./мас.) дигидрат трегалозы и 1.5% (мас./мас.) Трис.

Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав содержит, на основе общей массы сухого фармацевтического состава, около 2.3% (мас./мас.) конъюгата CNP, около 1.3% (мас./мас.) янтарной кислоты, около 94.9% (мас./мас.) дигидрат трегалозы и около 1.6% (мас./мас.) Трис.

Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав содержит, на основе общей массы сухого фармацевтического состава, 2% (мас./мас.) конъюгата CNP, 1% (мас./мас.) янтарной кислоты, 95% (мас./мас.) дигидрат трегалозы и 2% (мас./мас.) Трис.

Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав содержит, на основе общей массы сухого фармацевтического состава, 2.3% (мас./мас.) конъюгата CNP, 1.3% (мас./мас.) янтарной кислоты, 94.9% (мас./мас.) дигидрат трегалозы и 1.6% (мас./мас.) Трис.

Сухой фармацевтический состав согласно настоящему изобретению представляет собой сухой фармацевтический состав, который является стабильным в течение по меньшей мере 6 месяцев, как например в течение по меньшей мере 7 месяцев, как например в течение по меньшей мере 8 месяцев, как например в течение по меньшей мере 9 месяцев, как например в течение по меньшей мере 10 месяцев, как например по меньшей мере 11 месяцев, как например по меньшей мере 12 месяцев. Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав является стабильным в течение по меньшей мере 14 месяцев, как например в течение по меньшей мере 16 месяцев, как например по меньшей мере 18 месяцев, как например по меньшей мере 20 месяцев, как например по меньшей мере 22 месяцев, как например по меньшей мере 24 месяцев, как например по меньшей мере 40 месяцев, как например по меньшей мере 60 месяцев.

Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав согласно настоящему изобретению хранится при температурах в интервале от -80°С до 25°С, как например от -20°С до 25°С, как например от -15°С до 25°С, как например от -10°С до 25°С, как например от -5°С до 5°С, от -5°С до 25°С, как например от 0°С до 5°С, как например от 0°С до 25°С, как например от 2°С до 10°С или как например от 4°С до 8°С.Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав хранится при 2°С. Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав хранится при 5°С.Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав хранится при 6°С. Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав хранится при 8°С. Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав хранится при 10°С. Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав хранится при 16°С. Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав хранится при 20°С. Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав хранится при 25°С.Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав хранится при 30°С. Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав хранится при 40°С.

Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав является стабильным в течение по меньшей мере 12 месяцев при хранении при от 0 до 10°С. Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав является стабильным в течение по меньшей мере 12 месяцев при хранении при от 2 до 10°С. Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав является стабильным в течение по меньшей мере 12 месяцев при хранении при от 4 до 8°С. Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав является стабильным в течение по меньшей мере 12 месяцев при хранении при 5°С.

Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав является стабильным в течение по меньшей мере 24 месяцев при хранении при 5°С. Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав является стабильным в течение по меньшей мере 36 месяцев при хранении при 5°С. Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав является стабильным в течение по меньшей мере 48 месяцев при хранении при 5°С. Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав является стабильным в течение по меньшей мере 60 месяцев при хранении при 5°С.

Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав является стабильным в течение 6 месяцев при хранении при 25°С. Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав является стабильным в течение по меньшей мере 6 месяцев при хранении при 25°С. Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав является стабильным в течение по меньшей мере 12 месяцев при хранении при 25°С.

Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав является стабильным в течение 6 месяцев при хранении при 30°С. Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав является стабильным в течение по меньшей мере 6 месяцев при хранении при 30°С. Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав является стабильным в течение по меньшей мере 12 месяцев при хранении при 30°С.

Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав является стабильным в течение 6 месяцев при хранении при 40°С. Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав является стабильным в течение по меньшей мере 6 месяцев при хранении при 40°С. Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав является стабильным в течение по меньшей мере 12 месяцев при хранении при 40°С.

Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав согласно настоящему изобретению обеспечивают в виде единичной дозы, что означает. Что контейнер, содержащий сухой фармацевтический состав конъюгата CNP, содержит одну терапевтическую дозу.

Предпочтительным способом сушки является лиофилизация, что означает, что фармацевтический состав представляет собой лиофилизированный фармацевтический состав.

Согласно другому аспекту настоящее изобретение относится к способу получения сухого фармацевтического состава согласно настоящему изобретению, где способ включает стадии:

(i) смешивание конъюгата CNP с по меньшей мере одним буферным агентом и агентом-наполнителем,

(ii) регулирование значения рН смеси согласно стадии (i),

(iii) необязательно, фильтрация смеси согласно стадии (ii),

(iv) перенос количеств смеси согласно стадии (ii) или (iii), эквивалентных желаемому числу доз, в контейнер,

(v) сушка смеси,

(vi) герметизация контейнера, и

где порядок стадий (ii) и (iii) необязательно может быть изменен на обратный.

Понятно, что во время стадии сушки (v) смеси агент-наполнитель может стать лиопротектором.

Согласно определенным вариантам осуществления стадии (ii) и (iii) не меняют местами.

Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат CNP на стадии (i) смешивают с буферным агентом и агентам-наполнителем.

Число доз, переносимых в контейнер на стадии (iv), может составлять по меньшей мере одну, как например 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 или 30 или может быть более 30.

Согласно определенным вариантам осуществления способ получения сухого фармацевтического состава согласно настоящему изобретению содержит стадии:

(i) смешивание конъюгата CNP с по меньшей мере янтарной кислотой и дигидратом трегалозы с получением состава, содержащего Конъюгат CNP 0.9 - 82.1 мг/мл

янтарную кислоту 1.3 - 57.6 мМ

дигидрат трегалозы 67 - 111.6 мг/мл,

(ii) регулирование значения рН смеси согласно стадии (i) до значения рН в интервале от рН 4.0 о рН 6.0,

(iii) необязательно, фильтрация смеси согласно стадии (ii),

(iv) перенос количеств смеси согласно стадии (ii) или (iii), эквивалентных желаемому числу доз, в контейнер,

(v) сушка смеси,

(vi) герметизация контейнера, и

где порядок стадий (ii) и (iii) необязательно может быть изменен на обратный.

Согласно определенным вариантам осуществления стадии (ii) и (iii) не меняют местами.

Согласно определенным вариантам осуществления на стадии (ii) значение рН смеси на стадии (i) регулируют с помощью Трис.

Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат CNP на стадии (i) смешивают с янтарной кислотой и дигидратом трегалозы с получением состава, содержащего:

Конъюгат CNP 0.9 - 82.1 мг/мл

янтарную кислоту 1.3 - 57.6 мМ

дигидрат трегалозы 67 - 111.6 мг/мл.

Согласно определенным вариантам осуществления состав на стадии (i) содержит:

Конъюгат CNP 19.8-73.6 мг/мл

янтарную кислоту 1.7 - 50 мМ

дигидрат трегалозы 63 - 100 мг/мл

и где на стадии (ii) значение рН доводят до рН в интервале от рН 4.0 до рН 6.0.

Согласно определенным вариантам осуществления состав на стадии (i) содержит:

Конъюгат CNP 19.8-73.6 мг/мл

янтарную кислоту 1.7 - 50 мМ

дигидрат трегалозы 56 - 100 мг/мл

и где на стадии (ii) значение рН доводят до рН в интервале от рН 4.0 до рН 6.0.

Согласно определенным вариантам осуществления состав на стадии (i) содержит:

Конъюгат CNP 4.2 - 16.5 мг/мл

янтарную кислоту 1.7 - 36.4 мМ

дигидрат трегалозы 67 - 105 мг/мл

и где на стадии (ii) значение рН доводят до рН в интервале от рН 4.0 до рН 6.0.

Согласно определенным вариантам осуществления состав на стадии (i) содержит:

Конъюгат CNP 1.0 - 4.4 мг/мл

янтарную кислоту 1.7-33 мМ

дигидрат трегалозы 67 - 105 мг/мл

и где на стадии (ii) значение рН доводят до рН в интервале от рН 4.0 до рН 6.0.

Согласно определенным вариантам осуществления состав на стадии (i) содержит:

Конъюгат CNP 27.5 - 50.5 мг/мл

янтарную кислоту 5.1- 20.3 мМ

дигидрат трегалозы 67 - 95 мг/мл

и где на стадии (ii) значение рН доводят до рН в интервале от рН 4.0 до рН 6.0.

Согласно определенным вариантам осуществления состав на стадии (i) содержит:

Конъюгат CNP 5.8-10.8 мг/мл

янтарную кислоту 5.1 - 20.3 мМ

дигидрат трегалозы 72 - 105 мг/мл

и где на стадии (ii) значение рН доводят до рН в интервале от рН 4.0 до рН 6.0.

Согласно определенным вариантам осуществления состав на стадии (i) содержит:

Конъюгат CNP 1.5-2.9 мг/мл

янтарную кислоту 5.1- 20.3 мМ

дигидрат трегалозы 73 - 105 мг/мл

и где на стадии (ii) значение рН доводят до рН в интервале от рН 4.0 од рН 6.0.

Согласно определенным вариантам осуществления состав на стадии (i) содержит:

Конъюгат CNP 37.4- 42.9 мг/мл

янтарную кислоту 9.3 - 10.2 мМ

дигидрат трегалозы 71-87 мг/мл

и где на стадии (ii) значение рН доводят до рН в интервале от рН 4.5 до рН 5.5.

Согласно определенным вариантам осуществления состав на стадии (i) содержит:

Конъюгат CNP 7.5 - 9.1 мг/мл

янтарную кислоту 9.3 - 11 мМ

дигидрат трегалозы 75 - 97 мг/мл

и где на стадии (ii) значение рН доводят до рН в интервале от рН 4.5 до рН 5.5.

Согласно определенным вариантам осуществления состав на стадии (i) содержит:

Конъюгат CNP 1.9 - 2.4 мг/мл

янтарную кислоту 9.3 - 11 мМ

дигидрат трегалозы 77 - 97 мг/мл

и где на стадии (ii) значение рН доводят до рН в интервале от рН 4.5 до рН 5.5.

Согласно определенным вариантам осуществления состав на стадии (i) содержит около 60.4 мг/мл конъюгата CNP, около 10 мМ янтарную кислоту, около 70 мг/мл дигидрата трегалозы и на стадии (ii) значение рН доводят до рН 5.

Согласно определенным вариантам осуществления состав на стадии (i) содержит 60.4 мг/мл конъюгата CNP, 10 мМ янтарную кислоту, 70 мг/мл дигидрата трегалозы и на стадии (ii) значение рН доводят до рН 5.

Согласно определенным вариантам осуществления состав на стадии (i) содержит около 39.6 мг/мл конъюгата CNP, около 10 мМ янтарную кислоту, около 79.0 мг/мл дигидрата трегалозы и на стадии (ii) значение рН доводят до рН 5.

Согласно определенным вариантам осуществления состав на стадии (i) содержит 40 мг/мл конъюгата CNP, 10 мМ янтарную кислоту, 79 мг/мл дигидрата трегалозы и на стадии (ii) значение рН доводят до рН 5.

Согласно определенным вариантам осуществления состав на стадии (i) содержит 39.6 мг/мл конъюгата CNP, 10 мМ янтарную кислоту, 79.0 мг/мл дигидрата трегалозы и на стадии (ii) значение рН доводят до рН 5.

Согласно определенным вариантам осуществления состав на стадии (i) содержит около 8.2 мг/мл конъюгата CNP, около 10 мМ янтарную кислоту, около 89.0 мг/мл дигидрата трегалозы и на стадии (ii) значение рН доводят до рН 5.

Согласно определенным вариантам осуществления состав на стадии (i) содержит 8 мг/мл конъюгата CNP, 10 мМ янтарную кислоту, 89 мг/мл дигидрата трегалозы и на стадии (ii) значение рН доводят до рН 5.

Согласно определенным вариантам осуществления состав на стадии (i) содержит 8.2 мг/мл конъюгата CNP, 10 мМ янтарную кислоту, 89.0 мг/мл дигидрата трегалозы и на стадии (ii) значение рН доводят до рН 5.

Согласно определенным вариантам осуществления состав на стадии (i) содержит около 2.2 мг/мл конъюгата CNP, около 10 мМ янтарную кислоту, около 89.5 мг/мл дигидрата трегалозы и на стадии (ii) значение рН доводят до рН 5.

Согласно определенным вариантам осуществления состав на стадии (i) содержит 2 мг/мл конъюгата CNP, 10 мМ янтарную кислоту, 90 мг/мл дигидрата трегалозы и на стадии (ii) значение рН доводят до рН 5.

Согласно определенным вариантам осуществления состав на стадии (i) содержит 2.2 мг/мл конъюгата CNP, 10 мМ янтарную кислоту, 89.5 мг/мл дигидрата трегалозы и на стадии (ii) значение рН доводят до рН 5.

Перед применением сухого фармацевтического состава согласно настоящему изобретению пациентом, нуждающимся в этом, сухой фармацевтический состав восстанавливают. Восстановление сухого фармацевтического состава в восстановленный состав осуществляется путем добавления предварительно определенного количества раствора для восстановления к сухому фармацевтическому составу. Следовательно, согласно дополнительному аспекту настоящее изобретение относится к способу восстановления сухого состава согласно настоящему изобретению, где способ содержит стадию

(а) контакта сухого фармацевтического состава согласно настоящему изобретению с раствором для восстановления.

Согласно другому аспекту настоящее изобретение относится к восстановленному фармацевтическому составу, получаемому способом восстановления сухого фармацевтического состава согласно настоящему изобретению.

Подразумевается, что агент-наполнитель сухого фармацевтического состава согласно настоящему изобретению выполняет свою функцию увеличения объема только в сухом фармацевтическом составе, то есть не в восстановленном фармацевтическом составе, и что после восстановления сухого фармацевтического состава агент-наполнитель выполняет функцию изотонического агента.

Восстановление может производиться в контейнере, в котором предоставлен сухой фармацевтический состав, содержащий конъюгат CNP, таком как пузырек, шприц, как например, двухкамерный шприц, ампула, картридж, как например, двухкамерный картридж, или сухой фармацевтический состав может быть перенесен в другой контейнер и затем восстановлен.

Согласно определенным вариантам осуществления контейнер, в котором происходит восстановление сухого фармацевтического состава, представляет собой пузырек.

Согласно определенным вариантам осуществления контейнер, в котором происходит восстановление сухого фармацевтического состава, представляет собой а шприц. Согласно определенным вариантам осуществления контейнер, в котором происходит восстановление сухого фармацевтического состава, представляет собой двухкамерный шприц. Согласно определенным вариантам осуществления контейнер, в котором происходит восстановление сухого фармацевтического состава, представляет собой картридж. Согласно определенным вариантам осуществления контейнер, в котором происходит восстановление сухого фармацевтического состава, представляет собой двухкамерный картридж.

Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав согласно настоящему изобретению находится в первой камере двухкамерного шприца, а раствор для восстановления находится во второй камере двухкамерного шприца.

Согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав согласно настоящему изобретению находится в первой камере двухкамерного картриджа, а раствор для восстановления находится во второй камере двухкамерного картриджа.

Согласно другому аспекту настоящее изобретение относится к контейнеру, содержащему сухой фармацевтический состав или восстановленный состав согласно настоящему изобретению.

Обнаружено, что время восстановления сухих фармацевтических составов подходит для терапевтических целей. Согласно определенным вариантам осуществления Добавление поверхностно-активного вещества, как, например, полисорбат 20 или полисорбат 80, к составам, содержащим конъюгат CNP, увеличивает время восстановления сухого фармацевтического состава. Соответственно, согласно определенным вариантам осуществления сухой фармацевтический состав согласно настоящему изобретению не содержит поверхностно-активное вещество, как например, полисорбат 20 или полисорбат 80.

Раствор для восстановления представляет собой стерильную жидкость, например, воду или буфер, которые могут содержать дополнительные добавки, например, консерванты и/или противомикробные средства.

Согласно определенным вариантам осуществления раствор для восстановления содержит один или несколько консервантов и/или противомикробных средств и/или антиоксидантов.

Согласно определенным вариантам осуществления раствор для восстановления содержит один или несколько консервантов.

К консервант может быть выбран из группы, состоящей из: м-крезол, бензойная кислота, фенол, метилпарабен, этилпарабен, пропилпарабен, бутилпарабен, сорбат калия, хлорбутанол, бензиловый спирт, нитрат фенилртути, тимеросал, сорбиновая кислота, сорбат калия, хлоркрезол, бензалкония хлорид, 2-этоксиэтанол, хлоргексидин, хлорбутанол, фениэтиловый спирт, ацетат фенилртути и их смесей.

Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является м-крезол. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является бензиловый спирт. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является бензойная кислота. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является фенол. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является метилпарабен. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является этилпарабен. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является пропилпарабен. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является бутилпарабен. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является сорбат калия. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является бензиловый спирт. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является нитрат фенилртути. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является тимеросал. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является сорбиновая кислота. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является сорбат калия. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является хлоркрезол. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является бензалкония хлорид. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является 2-этоксиэтанол. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является хлоргексидин. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является хлорбутанол. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является фениэтиловый спирт. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является ацетат фенилртути.

Согласно определенным вариантам осуществления консервант имеет концентрацию в интервале от 1 до 10 мг/мл. Согласно определенным вариантам осуществления консервант имеет концентрацию в интервале от 1.5 до 3.5 мг/мл. Согласно определенным вариантам осуществления консервант имеет концентрацию в интервале от 2 до 3 мг/мл.

Антиоксидант может быть выбран из группы, состоящей из: метионин, бутилгидрокситолуол, бутилгидроксианизол, токоферол, пропилгаллат, аскорбиновая кислота, этилендиаминтетрауксусная кислота (EDTA), поли(этиленимин), витамин Е и их смесей.

Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является метионин. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является бутилгидрокситолуол. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является бутилгидроксианизол. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является токоферол. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является пропилгаллат. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является этилендиаминтетрауксусная кислота. Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является поли(этиленимин). Согласно определенным вариантам осуществления консервантом является витамин Е.

Как определено в настоящем документе, термин «метионин» охватывает как D-метионин, так и L-метионин и их смеси. Согласно определенному варианту осуществления термин «метионин» относится к L-метионину. Согласно определенному варианту осуществления термин «метионин» относится к D-метионину. Согласно определенному варианту осуществления термин «метионин» относится к смеси D-метионина или L-метионин. Согласно определенному варианту осуществления термин «метионин» относится к гидрохлоридной соли L-метионина.

Как определено в настоящем документе, термин «EDTA» предназначен для охвата всех форм EDTA, которые известны в данной области техники, например, соли EDTA, включая соли металлов EDTA, например, динатриевая соль EDTA, дикалиевая соль EDTA, кальциевая соль EDTA, димагниевая соль EDTA или их смеси. Согласно определенному варианту осуществления EDTA относится к динатриевой соли EDTA. Согласно определенному варианту осуществления термин «EDTA» относится к дикальциевой соли EDTA. Согласно определенному варианту осуществления термин «EDTA» относится к безводному EDTA.

Согласно определенным вариантам осуществления молярное соотношение антиоксиданта и фрагмента CNP составляет от около 0.1:1 до около 100:1. Согласно определенным вариантам осуществления молярное соотношение антиоксиданта и фрагмента CNP составляет от около 0.1:1 до около 70:1. Согласно определенным вариантам осуществления молярное соотношение антиоксиданта и фрагмента CNP составляет от около 0.1:1 до около 15:1. Согласно определенным вариантам осуществления молярное соотношение антиоксиданта и фрагмента CNP составляет от около 1:1 до около 10:1. Согласно определенным вариантам осуществления молярное соотношение антиоксиданта и фрагмента CNP составляет от около 3:1 до около 7:1.

Согласно определенным вариантам осуществления раствор для восстановления не содержит противомикробное средство.

Согласно определенным вариантам осуществления раствор для восстановления содержит противомикробное средство.

Согласно определенным вариантам осуществления раствор для восстановления содержит один или несколько эксципиентов.

Согласно определенным вариантам осуществления раствор для восстановления содержит стерильную воду.

Согласно определенным вариантам осуществления раствор для восстановления представляет собой стерильную воду, содержащую 0.7-1.1% бензилового спирта.

Согласно определенным вариантам осуществления раствор для восстановления представляет собой стерильную воду, содержащую 0.9% бензилового спирта.

Согласно определенным вариантам осуществления раствор для восстановления содержит рН-модифицирующий агент.

Как применяется в настоящем документе, термин "рН-модифицирующий агент" относится к химическому соединению, которое используется для изменения значения рН раствора для восстановления.

Согласно определенным вариантам осуществления рН-модифицирующий агент может представлять собой кислоту или ее кислотную соль. Кислота может быть выбрана из группы, состоящей из: уксусная кислота, лимонная кислота, янтарную кислоту, соляная кислота, фосфорная кислота, угольная кислота, азотная кислота и их смеси.

Согласно определенным вариантам осуществления рН-модифицирующий агент может представлять собой основание или его основную соль. Основание может быть выбрано из группы, состоящей из: Трис (трис(гидроксиметил)аминометан), гидроксид натрия, гидроксид калия, лизин и их смеси.

После восстановления единичная доза состава содержащего конъюгат CNP, имеет объем не более 4 мл, как например от около 0.03 до около 1.1 мл. Согласно определенным вариантам осуществления объем составляет около 0.03 мл. Согласно определенным вариантам осуществления объем составляет около 0.05 мл. Согласно определенным вариантам осуществления объем составляет около 0.1 мл. Согласно определенным вариантам осуществления объем составляет около 0.3 мл. Согласно определенным вариантам осуществления объем составляет около 0.8 мл. Согласно определенным вариантам осуществления объем составляет около 1 мл. Согласно определенным вариантам осуществления объем составляет около 2 мл. Согласно определенным вариантам осуществления объем составляет около 3 мл. Согласно определенным вариантам осуществления объем составляет около 4 мл.

Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат CNP в составе достаточно дозирован для обеспечения терапевтически эффективного количества CNP в течение по меньшей мере трех дней за одно применение, например, в течение по меньшей мере четырех дней, как например в течение по меньшей мере пяти дней, как например в течение по меньшей мере шесть дней.

Согласно определенным вариантам осуществления конъюгат CNP в составе достаточно дозирован для обеспечения терапевтически эффективного количества CNP в течение по меньшей мере одной недели.

Буферный агент поддерживает значение рН восстановленного состава в пределе желаемого диапазона. Согласно определенным вариантам осуществления значение рН восстановленного состава составляет не выше 6, так как при основных условиях обратимая связь внутри CNP-конъюгата может быть нестабильной.

Согласно определенным вариантам осуществления значение рН восстановленного состава составляет от около рН 4 до около рН 6. Согласно определенным вариантам осуществления значение рН восстановленного состава составляет от около рН 4.5 до около рН 5.5. Согласно определенным вариантам осуществления значение рН восстановленного состава составляет около 5. Согласно определенным вариантам осуществления значение рН восстановленного состава составляет 5.

Согласно определенным вариантам осуществления буферный агент имеет концентрацию в интервале от 1.3 до 57.6 мМ в восстановленном составе.

Согласно определенным вариантам осуществления буферный агент имеет концентрацию в интервале от 1.7 до 33 мМ в восстановленном составе. Согласно определенным вариантам осуществления буферный агент имеет концентрацию в интервале от 5.1 до 20.3 мМ в восстановленном составе. Согласно определенным вариантам осуществления буферный агент имеет концентрацию около 10 мМ в восстановленном составе.

Согласно определенным вариантам осуществления восстановленный состав содержит

Конъюгат CNP 0.9 - 82.1 мг/мл

янтарную кислоту 1.3 - 57.6 мМ

дигидрат трегалозы 67 - 111.6 мг/мл,

и имеет значение рН в интервале от рН 4.0 до рН 6.0.

Восстановленные составы могут быть доступны при различных дозах, т.е. концентрациях, конъюгата CNP, как например, высокая средняя и низкая. Таким образом, согласно другому аспекту настоящего изобретения восстановленный состав согласно настоящему изобретению обеспечивается при различных концентрациях конъюгата CNP, как например, в двух различных концентрациях, как например в трех различных концентрациях, как например в четырех различных концентрациях, как например в пяти различных концентрациях, как например в шести различных концентрациях, как например в семи различных концентрациях, как например в восьми различных концентрациях, как например в девяти различных концентрациях, как например в десяти различных концентрациях, как например в одиннадцати различных концентрациях, как например в двенадцати различных концентрациях.

Специалистам в данной области техники известно, что могут быть ошибки округления в концентрациях элементов, содержащихся в восстановленных составах согласно настоящему изобретению, что означает, что, начиная с конкретного сухого состава, состав соответствующего восстановленного состава может изменяться до определенной степени из-за необходимого округления.

Согласно определенным вариантам осуществления восстановленный состав содержит:

Конъюгат CNP 19.8-73.6 мг/мл

янтарную кислоту 1.7 - 50 мМ

дигидрат трегалозы 63 - 100 мг/мл

и имеет значение рН в интервале от рН 4.0 до рН 6.0.

Согласно определенным вариантам осуществления восстановленный состав содержит:

Конъюгат CNP 4.2 - 16.5 мг/мл

янтарную кислоту 1.7 - 36.4 мМ

дигидрат трегалозы 67 - 105 мг/мл

и имеет значение рН в интервале от рН 4.0 до рН 6.0.

Согласно определенным вариантам осуществления восстановленный состав содержит:

Конъюгат CNP 1.0 - 4.4 мг/мл

янтарную кислоту 1.7-33 мМ

дигидрат трегалозы 67 - 105 мг/мл

и имеет значение рН в интервале от рН 4.0 до рН 6.0.

Согласно определенным вариантам осуществления восстановленный состав содержит:

Конъюгат CNP 27.5 - 50.5 мг/мл

янтарную кислоту 5.1- 20.3 мМ

дигидрат трегалозы 67 - 95 мг/мл и имеет значение рН в интервале от рН 4.0 до рН 6.0.

Согласно определенным вариантам осуществления восстановленный состав содержит:

Конъюгат CNP 5.8-10.8 мг/мл

янтарную кислоту 5.1 - 20.3 мМ

дигидрат трегалозы 72 - 105 мг/мл и имеет значение рН в интервале от рН 4.0 до рН 6.0.

Согласно определенным вариантам осуществления восстановленный состав содержит:

Конъюгат CNP 1.5-2.9 мг/мл

янтарную кислоту 5.1- 20.3 мМ

дигидрат трегалозы 73 - 105 мг/мл и имеет значение рН в интервале от рН 4.0 до рН 6.0.

Согласно определенным вариантам осуществления восстановленный состав содержит:

Конъюгат CNP 37.4- 42.9 мг/мл

янтарную кислоту 9.3 - 10.2 мМ

дигидрат трегалозы 71-87 мг/мл

и имеет значение рН в интервале от рН 4.5 до рН 5.5.

Согласно определенным вариантам осуществления восстановленный состав содержит:

Конъюгат CNP 7.5 - 9.1 мг/мл

янтарную кислоту 9.3 - 11 мМ

дигидрат трегалозы 75 - 97 мг/мл и имеет значение рН в интервале от рН 4.5 до рН 5.5.

Согласно определенным вариантам осуществления восстановленный состав содержит:

Конъюгат CNP 1.9 - 2.4 мг/мл

янтарную кислоту 9.3 - 11 мМ

дигидрат трегалозы 77 - 97 мг/мл

и имеет значение рН в интервале от рН 4.5 до рН 5.5.

Согласно определенным вариантам осуществления восстановленный состав содержит около 60.4 мг/мл конъюгата CNP, около 10 мМ янтарную кислоту, около 70 мг/мл дигидрата трегалозы и имеет рН 5.

Согласно определенным вариантам осуществления восстановленный состав содержит 60.4 мг/мл конъюгата CNP, 10 мМ янтарную кислоту, 70 мг/мл дигидрата трегалозы и имеет рН 5.

Согласно определенным вариантам осуществления восстановленный состав содержит около 60.4 мг/мл конъюгата CNP, около 10 мМ янтарную кислоту, около 56 мг/мл дигидрата трегалозы и имеет рН 5.

Согласно определенным вариантам осуществления восстановленный состав содержит 60.4 мг/мл конъюгата CNP, 10 мМ янтарную кислоту, 56 мг/мл дигидрата трегалозы и имеет рН 5.

Согласно определенным вариантам осуществления восстановленный состав содержит около 39.6 мг/мл конъюгата CNP, около 10 мМ янтарную кислоту, около 79.0 мг/мл дигидрата трегалозы и имеет рН 5.

Согласно определенным вариантам осуществления восстановленный состав содержит 40 мг/мл конъюгата CNP, 10 мМ янтарную кислоту, 79 мг/мл дигидрата трегалозы и имеет рН 5.

Согласно определенным вариантам осуществления восстановленный состав содержит 39.6 мг/мл конъюгата CNP, 10 мМ янтарную кислоту, 79.0 мг/мл дигидрата трегалозы и имеет рН 5.

Согласно определенным вариантам осуществления восстановленный состав содержит около 8.2 мг/мл конъюгата CNP, около 10 мМ янтарную кислоту, около 89.0 мг/мл дигидрата трегалозы и имеет рН 5.

Согласно определенным вариантам осуществления восстановленный состав содержит 8 мг/мл конъюгата CNP, около 10 мМ янтарную кислоту, 89 мг/мл дигидрата трегалозы и имеет рН 5.

Согласно определенным вариантам осуществления восстановленный состав содержит 8.2 мг/мл конъюгата CNP, 10 мМ янтарную кислоту, 89.0 мг/мл дигидрата трегалозы и имеет рН 5.

Согласно определенным вариантам осуществления восстановленный состав содержит около 2.2 мг/мл конъюгата CNP, около 10 мМ янтарную кислоту, около 89.5 мг/мл дигидрата трегалозы и имеет рН 5.

Согласно определенным вариантам осуществления восстановленный состав содержит 2 мг/мл конъюгата CNP, 10 мМ янтарную кислоту, 90 мг/мл дигидрата трегалозы и имеет рН 5.

Согласно определенным вариантам осуществления восстановленный состав содержит 2.2 мг/мл конъюгата CNP, 10 мМ янтарную кислоту, 89.5 мг/мл дигидрата трегалозы и имеет рН 5.

Восстановленный состав может быть введен путем инъекции, инфузии, внутрикожно, подкожно, внутримышечно, внутривенно, внутрикостно и внутрибрюшинно.

Согласно определенным вариантам осуществления восстановленный состав, содержащий конъюгат CNP, вводят посредством подкожной инъекции.

Согласно определенным вариантам осуществления восстановленный состав, содержащий конъюгат CNP, вводят посредством подкожной инъекции с помощью шприца, иглы, шприца-ручки или авто инжектора.

Согласно определенным вариантам осуществления восстановленный состав, содержащий конъюгат CNP, вводят посредством подкожной инъекции с помощью шприца.

Согласно определенным вариантам осуществления восстановленный состав, содержащий конъюгат CNP, вводят посредством подкожной инъекции с помощью шприца-ручки.

Согласно определенным вариантам осуществления восстановленный состав, содержащий конъюгат CNP, вводят посредством подкожной инъекции с помощью авто инжектора.

Согласно другому аспекту настоящее изобретение относится к сухому или восстановленному фармацевтическому составу согласно настоящему изобретению для применения в качестве лекарственного средства.

Согласно другому аспекту настоящее изобретение относится к сухому или восстановленному фармацевтическому составу согласно настоящему изобретению для применения при лечении, контроле, отсрочке или профилактике одного или нескольких заболеваний, которые можно лечить, контролировать, отсрочить или предотвратить с помощью CNP.

Согласно определенным вариантам осуществления относится к сухому или восстановленному фармацевтическому составу согласно настоящему изобретению для применения для лечения одного или нескольких заболеваний, которые можно лечить с помощью CNP.

Согласно другому аспекту настоящее изобретение относится к способу лечения, контроля, отсрочки или предотвращения у пациента одного или нескольких заболеваний, которые можно лечить с помощью CNP, причем способ включает введение пациенту терапевтически эффективного количества восстановленного фармацевтического состава согласно настоящему изобретению.

Согласно определенным вариантам осуществления пациент является взрослым. Согласно определенным вариантам осуществления пациентом является педиатрический пациент.

Согласно определенным вариантам осуществления указанное одно или несколько заболеваний, которые можно лечить, контролировать, отсрочить или предотвратить с помощью CNP, выбраны из группы, состоящей из: костные нарушения как например скелетные дисплазии, рак, аутоиммунные заболевания, фиброзирующие заболевания, воспалительные заболевания, заболевания центральной нервной системы как например нейродегенеративные заболевания, инфекционные заболевания, заболевания легких, заболевания сердца и сосудов, нарушения обмена веществ и глазные заболевания.

Согласно определенным вариантам осуществления указанное одно или несколько заболеваний, которые можно лечить, контролировать, отсрочить или предотвратить с помощью CNP, выбраны из группы, состоящей из: ахондроплазия, гипохондроплазия, низкорослость, карликовость, остеохондродисплазии, танатофорная дисплазия, незавершенный остеогенез, ахондрогенез, точечная эпифизарная дисплазия, гомозиготная ахондроплазия, врожденная дисплазия, врожденная летальная гипофосфатазия, перинатальный летальный тип незавершенного остеогенеза, синдромы короткореберной полидактилии, относящийся к плечевому суставу тип точечной эпифизарной дисплазии, мдисплазия по типу Янсена, врожденная спондилоэпифизарная дисплазия, ателостеогенез, диастрофическая дисплазия, врожденное короткое бедро, мезомелическая дисплазия Лангера, мезомелическая дисплазия Нивергельта, синдром Робинова, синдром Рейнхардта, акродизостоз, периферический дизостоз, дисплазия Книста, фиброхондрогенез, синдром Робертса, акромезомелическая дисплазия, микромелия, синдром Моркио, синдром Книста, метатропическая дисплазия, спондилоэпиметафизарная дисплазия, нейрофиброматоз, синдром Легиуса, синдром «леопард», синдром Нунан, наследственный фиброматоз десен, нейрофиброматоз типа 1, синдром Легиуса, кардиофациально-кожный синдром, синдром Костелло, дефицит SHOX, идиопатическая низкорослость, дефицит гормона роста, остеоартрит, клейдокраниальный дизостоз, краниосиностоз (например, синдром Мюнке, синдром Крузона, синдром Аперта, синдром Джексона-Вейсса, синдром Пфейфера или синдром Крузона с черным акантозом), дактилия, брахидактилия, камптодактилия, полидактилия, синдактилия, сегментарная дисплазия, энхондроматоз, фиброзная дисплазия, наследственные множественные экзостозы, гипофосфатемический рахит, синдром Джеффи-Лихтенстайна, синдром Марфана, синдром Олбрайта-Мак-Кьюна-Штернберга, остеопетроз, остеопойкилоз, геморрагический шок, артериальная гипертензия, рестеноз, артериосклероз, острая декомпенсированная сердечная недостаточность, застойная сердечная недостаточность, отек сердца, отек почек, отек печени, острая почечная недостаточность, хроническая почечная недостаточность, глаукома, повышенное внутриглазное давление, множественная миелома, миелопролиферативный синдром, лейкоз, лейкоз плазматических клеток, лимфома, глиобластома, рак предстательной железы, рак мочевого пузыря, рак молочной железы, задержка роста, деформации черепа, ортодонтические дефекты, сдавление шейного отдела спинного мозга, стеноз позвоночного канала, гидроцефалия, потеря слуха из-за хронического отита, сердечно-сосудистые заболевания, неврологические заболевания и ожирение.

Согласно определенным вариантам осуществления указанное одно или несколько заболеваний, которые можно лечить, контролировать, отсрочить или предотвратить с помощью CNP, выбраны из группы, состоящей из: ахондроплазия как например гомозиготная ахондроплазия, гипохондроплазия, низкорослость, карликовость, остеохондродисплазии, танатофорная дисплазия, незавершенный остеогенез, ахондрогенез, точечная эпифизарная дисплазия, врожденная дисплазия, врожденная летальная гипофосфатазия, перинатальный летальный тип незавершенного остеогенеза, синдромы короткореберной полидактилии, относящийся к плечевому суставу тип точечной эпифизарной дисплазии, метафизарная дисплазия по типу Янсена, врожденная спондилоэпифизарная дисплазия, ателостеогенез, диастрофическая дисплазия, врожденное короткое бедро, мезомелическая дисплазия Лангера, мезомелическая дисплазия Нивергельта, синдром Робинова, синдром Рейнхардта, акродизостоз, периферический дизостоз, дисплазия Книста, фиброхондрогенез, синдром Робертса, акромезомелическая дисплазия, микромелия, синдром Моркио, синдром Книста, метатропическая дисплазия, спондилоэпиметафизарная дисплазия, нейрофиброматоз, синдром Легиуса, синдром «леопард», синдром Нунан, наследственный фиброматоз десен, нейрофиброматоз типа 1, синдром Легиуса, кардиофациально-кожный синдром, синдром Костелло, дефицит SHOX, идиопатическая низкорослость, дефицит гормона роста, остеоартрит, клейдокраниальный дизостоз, краниосиностоз (например, синдром Мюнке, синдром Крузона, синдром Аперта, синдром Джексона-Вейсса, синдром Пфейфера, or синдром Крузона с черным акантозом),дактилия, брахидактилия, камптодактилия, полидактилия, синдактилия, сегментарная дисплазия, энхондроматоз, фиброзная дисплазия, наследственные множественные экзостозы, гипофосфатемический рахит, синдром Джеффи-Лихтенстайна, синдром Марфана, синдром Олбрайта-Мак-Кьюна-Штернберга, остеопетроз, остеопойкилоз, геморрагический шок, артериальная гипертензия, рестеноз, артериосклероз, острая декомпенсированная сердечная недостаточность, застойная сердечная недостаточность, отек сердца, отек почек, отек печени, острая почечная недостаточность, хроническая почечная недостаточность, глаукома, повышенное внутриглазное давление, множественная миелома, миелопролиферативный синдром, лейкоз, лейкоз плазматических клеток, лимфома, глиобластома, рак предстательной железы, рак мочевого пузыря, рак молочной железы, задержка роста, деформации черепа, ортодонтические дефекты, сдавление шейного отдела спинного мозга, стеноз позвоночного канала, гидроцефалия, потеря слуха из-за хронического отита, ожирение, нарушения, связанные с аномальной передачей сигналов пути RAS митоген-активируемой протеинкиназой, легочная гипертензия, васкулопатия, эндотелиальная дисфункция, цирроз печени, асцит печени, фиброз печени, гепаторенальный синдром, астма, легочный фиброз, хронические заболевания почек, кардиоренальный синдром, одышка и лизосомальные болезни накопления, как например мукополисахаридоз.

Согласно определенным вариантам осуществления указанное одно или несколько заболеваний, которые можно лечить, контролировать, отсрочить или предотвратить с помощью CNP, представляют собой одно или несколько сердечно-сосудистых заболеваний, выбранных из группы, состоящей из: аритмия, как например, сердечная или синусовая аритмия, фибрилляция предсердий, трепетание предсердий, брадикардия, синдром Бругада, преждевременные сердечные комплексы, сотрясение сердца, блокада сердца, синдром удлиненного интервала QT, парасистолия, синдром предвозбуждения, тахикардия, фибрилляция желудочков, трепетание желудочков, заболевание системы сердечной проводимости, низкий сердечный выброс, кардиомегалия, дилатационная кардиомиопатия, гипертрофия, например, гипертрофия левого желудочка или гипертрофия правого желудочка, кардиомиопатия, например, алкогольная, дилатационная, гипертрофическая, рестриктивная диабетическая или кардиомиопатия Шагаса, аритмогенная дисплазия правого желудочка, эндокардиальный фиброэластоз, эндомиокардиальный фиброз, болезнь накопления гликогена типа IIb, синдром Кернса-Сейра, реперфузионное повреждение миокарда, миокардит, саркогликанофатии, эндокардит, например бактериальный или неинфекционный эндокардит, остановка сердца, внезапная сердечная смерть, остановка сердца вне больницы, сердечно-почечная синдром, пароксизмальная одышка, отек сердца, сердечная недостаточность, например, диастолическая или систолическая сердечная недостаточность, заболевание сердечного клапана, недостаточность аортального клапана, стеноз аортального клапана, пролапс сердечного клапана, недостаточность митрального клапана, стеноз митрального клапана, атрезия легочной артерии, недостаточность легочного клапана, стеноз легочного клапана, атрезия трехстворчатого клапана, недостаточность трехстворчатого клапана, стеноз трехстворчатого клапана, ишемия миокарда, острый коронарный синдром, стенокардия, ишемическая болезнь сердца, синдром Коуниса, инфаркт миокарда, легочно-сердечная недостаточность, дисфункция желудочков, например, дисфункция левого или правого желудочка, обструкция оттока желудочков, стеноз аортального клапана, стеноз клапана легочной артерии, гипертензия, атеросклероз, рестеноз, критическая ишемия конечностей, заболевание периферических артерий, ишемия, например, ишемия-реперфузионное повреждение, или представляют собой химические повреждения, аномальное накопление жидкости в сердце и отек миокарда.

Согласно определенным вариантам осуществления указанное одно или несколько заболеваний, которые можно лечить, контролировать, отсрочить или предотвратить с помощью CNP, выбраны из группы, состоящей из ишемической болезни сердца, как например, инфаркт миокарда, застойная сердечная недостаточность, аритмия и атеросклероз

Согласно определенным вариантам осуществления указанное одно или несколько заболеваний, которые можно лечить, контролировать, отсрочить или предотвратить с помощью CNP, представляет собой одно или несколько заболеваний центральной нервной системы, выбранных из группы, состоящей из: ишемия головного мозга, например, ишемическая гипоксия, инфаркт головного мозга, транзиторная ишемическая атака, вертебробазилярная недостаточность, цереброваскулярные нарушения, инсульт, внутричерепные кровоизлияния, неоваскуляризация роговицы, трансплантация роговицы, реакция трансплантат против хозяина, отторжение трансплантата, глаукома, например, закрытие угла, неоваскуляризация открытоугольная глаукома или глаукома низкого давления, ишемическая оптическая нейропатия, центральная серозная хориоретинопатия, ретинопатия, например, диабетическая или гипертоническая ретинопатия, дегенерация сетчатки, дегенерация желтого пятна, географическая атрофия, отек желтого пятна, болезнь Штаргардта, желточная дистрофия желтого пятна, влажная дегенерация желтого пятна, ретиношизис, отслоение сетчатки, перфорация сетчатки, кровоизлияние в сетчатке, неоваскуляризация сетчатки, окклюзия вены сетчатки, окклюзия артерии сетчатки, ретинопатия недоношенных и пролиферативная витреоретинопатия.

Согласно определенным вариантам осуществления указанное одно или несколько заболеваний выбраны из группы, состоящей из гипофосфатазии, гипохондроплазия, синдрома Мюнке, гипертензии, незавершенного остеогенеза и ахондроплазии.

Согласно определенным вариантам осуществления указанное одно или несколько заболеваний, которые можно лечить с помощью CNP, представляет собой гипофосфатазию. Согласно определенным вариантам осуществления указанное одно или несколько заболеваний, которые можно лечить с помощью CNP, представляет собой гипохондроплазию. Согласно определенным вариантам осуществления указанное одно или несколько заболеваний, которые можно лечить с помощью CNP, представляет собой синдром Мюнке. Согласно определенным вариантам осуществления указанное одно или несколько заболеваний, которые можно лечить с помощью CNP, представляет собой гипертензию. Согласно определенным вариантам осуществления указанное одно или несколько заболеваний, которые можно лечить с помощью CNP, представляет собой незавершенный остеогенез. Согласно определенным вариантам осуществления указанное одно или несколько заболеваний, которые можно лечить с помощью CNP, представляет собой ахондроплазию.

Примеры

Материалы и способы

Все материалы были коммерчески доступны, если не указано иное.

RP-HPLC использовали для определения содержания и чистоты соединения (1) и для обнаружения свободного CNP-38: подвижная фаза А состояла из 0,05% водного TFA и подвижная фаза В состояла из 0,04% TFA в ацетонитриле. Использовали колонку Waters Acquity CSH С18, 130 , 1,7 мкм, 2,1×100 мМ. Скорость потока устанавливали на 0,3 мл/мин, детектирование проводили на длине волны 215 нм, рабочая температура колонки составляла 60°С (±1°С). Образцы разбавляли буфером для состава, содержащим 0,5% Tween®-20. Содержание определяли путем сравнения площади пика с эталонным раствором.

Для определения чистоты соединения (1) использовали SE-HPLC: подвижная фаза состояла из 15 мМ фосфата натрия рН 7,40, 135 мМ хлорида натрия, 0,2% Pluronic F-68 в воде. Использовали колонку GE Superdex 200 Increase 10/300 GL. Скорость потока была установлена 0,75 мл/мин, детектирование проводили на длине волны 215 нм, рабочая температура колонки была комнатной температурой. Образцы разбавляли буфером для состава, содержащим 0,05% Pluronic F-68.

Пептидное картирование соединения (1) использовали для оценки превращения аспартата (28) в изоаспартат (28) и окисления метионина (33) до метиониноксида (33) (Met(O). Расщепление термолизином (1) проводили при рН 7,5 в течение 7 часов при 37°С и соотношении термолизин/CNP-38=1:20 (мас./мас.). Полученную смесь пептидов разделяли с помощью RP-HPLC на Waters Acquity UPLC HSS Т3, 100 1,8 мкм, 2,1×150 мМ колонка с 0,10 об. % водного TFA в качестве подвижной фазы А и 0,09% TFA в ацетонитриле в качестве подвижной фазы В, и детектирование при 210 нм. Скорость потока была установлена на 0,28 мл/мин, рабочая температура колонки 45°С (±1°С). Фрагменты термолизина, содержащие аспартат (28) и метионин (33), были охарактеризованы с помощью LC-MS. При обычном анализе фрагменты сравнивают с эталонной смесью, содержащей эти фрагменты пептидов. Фрагменты количественно определяли на основе их соответствующих площадей пиков относительно площадей пиков соответствующих немодифицированных фрагментов. В условиях расщепления термолизином и последующей RP-HPLC образование изоаспартатного продукта аспартата (28) и окисление метионина (33) можно количественно оценить для (1).

Анализ биоэфективности проводили путем высвобождения CNP-38 in vitro из (1) и последующего анализа биоэффективности высвобожденного CNP-38 в ходе клеточного анализа.

Высвобождение CNP-38 in vitro из (1) и количественная оценка RP-HPLC: (1) инкубировали при рН 10,0 и 15°С в течение 24 часов. Значение рН доводили разбавлением восстановленного состава высвобождающим буфером (0,5 М борная кислота, 10 мМ метионин, 2,383 г/л Pluronic-F68, рН доводили до 10,0 с использованием 4 М водного раствора NaOH) при соотношении 1: 3,5 (об./об.) разведение (например, 50 мкл раствора (1) с концентрацией 3,6 мг CNP-38 экв./мл разводили 175 мкл буфера для высвобождения). После инкубации высвобождение гасили разбавлением 1 : 1 (об./об.) с 5% (об./об.) уксусной кислотой. Количество высвобожденного CNP-38 определяли путем сравнения площади пика с эталонным раствором CNP-38 с известным содержанием.

Определение биоэффективности высвобожденного CNP-38 путем функциональной стимуляции cGMP в клетках HEK293: Линия клеток Hek293, сверхэкспрессирующая NPR-B, была разработана следующим образом: кодирующую область эталонной последовательности NPR-B клонировали в лентивирусный вектор под промотором CMV для конститутивной экспрессии рецептора. Бицистронный элемент, расположенный в векторе для резистентности к пуромицину, использовали в качестве эукариотического селекционного маркера. После трансдукции стабильно растущие пулы клеток подвергали кОТ-ПЦР для подтверждения экспрессии мРНК рецептора по сравнению с родительскими клетками Hek293. Стимуляция рецептора NPR-B с помощью CNP-38 приводит к внутриклеточной продукции второго мессенджера cGMP, который обнаруживали с помощью коммерчески доступного анализа cGMP.

Клетки рутинно культивировали в среде DMEM/Glutamax/HEPES с 10% FBS и 1% раствором пуромицина (370 мкг/мл) при 37°С и 5% СО₂. Для каждого анализа клетки суспендировали в DMEM + 2% BSA и инкубировали 3 часа при 37°С и 5% СО₂. Готовили серию разведений высвобожденной смеси CNP в стимулирующем буфере (DMEM + 2% BSA + 0,1 мМ IBMX + 0,1% Tween®-20) и добавляли к клеткам (дополнительное серийное разведение разведения CNP-38 1: 2). После инкубации в течение 60 мин при 37°С и 5% СО₂ клетки лизировали и определяли уровни cGMP с помощью коммерчески доступного анализа cGMP TR-FRET (Cisbio, набор цГМФ, каталожный №62GM2PEB). Эффективность определяли с использованием четырехпараметрической подгонки логистической кривой в утвержденном программном обеспечении PLA путем анализа параллельных линий по сравнению с эталонным стандартом CNP-38.

RP-HPLC использовали для определения количества расщепленного CNP-38 (дезамидировэнный и аспартимидный варианты). Подвижная фаза А состояла из 0,05% водного TFA, а подвижная фаза В состояла из 0,04% TFA в ацетонитриле. Использовали колонку Waters Acquity HSS ТЗ CIS, 100 1,8 мкм, 2,1×100 мМ. Скорость потока была установлена на 0,5 мл / мин, детектирование проводили на длине волны 215 нм, рабочая температура колонки была установлена на 30°С. Деамидированные варианты и варианты аспартимида определяли количественно относительно площади пика немодифицированного CNP-38.

Пример 1: Синтез соединения (1)

Соединение (1) синтезировали, как описано в WO 2017/118693 для конъюгата 11i.

Пример 2: Тестирование стабильности лиофилизированных составов, содержащих соединение(1)

Было приготовлено восемь различных составов (F1-F8), содержащих соединение (1), как показано в Таблице 1, и 200 мкл каждого состава помещали во флаконы и лиофилизировали. Содержание воды в лиофилизагах было ниже 0,4% во всех составах, как определено титрованием по Карлу-Фишеру. Каждый состав содержал соответствующие количества соединения (1) для получения концентрации 3,6 мг CNP-38/мл после восстановления 200 мкл воды. Составы помещали в инкубатор, в котором поддерживалась температура 25°С или 40°С. Через 3 месяца (Т3М) составы восстанавливали водой и подвергали анализу. Результаты показывают благоприятный профиль чистоты соединения (1) для составов, содержащих трегалозу, по сравнению с композициями, содержащими маннит. Также было замечено, что никакие добавки не требуются для предотвращения окисления метионина.

Пример 3: Тестирование стабильности жидких и лиофилизированных составов, содержащих соединение (1)

Готовили состав (F9) из (1), и 200 мкл состава помещали во флакон и лиофилизировали. Лиофилизированный состав содержал подходящие количества для получения концентрации 3,0 мг CNP-38/мл после восстановления с 200 мкл воды. Лиофилизат и жидкий состав, который использовали для приготовления лиофилизата, помещали в инкубатор, установленный для поддержания 40°С.

Через 21 день (T21D) лиофилизат восстанавливали водой и составы подвергали анализу. Результаты показывают, что лиофилизация защищает (1) от разложения, такого как окисление метионина и образование изоаспартата.

Пример 4: Тестирование стабильности составов, содержащих (1) и поверхностно-активное вещество

Были приготовлены три различных состава (F10-F12) из (1), 1080 мкл были заполнены во флаконы и лиофилизированы. Каждый состав содержал соответствующие количества (1) для получения концентрации 3,5 мг CNP-38/мл после восстановления 1000 мкл воды. Некоторые составы содержат полисорбат 20 (PS 20) или полисорбат 80 (PS 80) в качестве поверхностно-активного вещества. Лиофилизированные составы помещали в инкубатор с поддержанием 40°С/75% относительной влажности. Через 1 месяц (Т1М) и 3 месяца (Т3М) составы восстанавливали 1 мл воды и подвергали анализу.

Составы F11 и F12, содержащие поверхностно-активное вещество, показывают небольшое увеличение окисления метионина (1) в стрессовых условиях и заметное влияние на время восстановления (без встряхивания) после добавления 1 мл воды по сравнению с F10.

Пример 5: Тестирование долгосрочной стабильности лиофилизированных составов, содержащих соединение (1)

Лиофилизированный состав (F13) соединения (1) получали лиофилизацией 1080 мкл во флаконе. Состав содержал соответствующие количества (1), чтобы получить номинальную концентрацию 3,9 мг CNP-38/флакон и 3,6 мг CNP-38/мл после восстановления с 1000 мкл воды. Составы помещали в инкубатор, настроенный для поддержания, соответственно, 5°С, 25°С / 60% RH, 30°С / 65% RH и 40°С / 75% RH. После 3 месяцев (Т3М), 4 месяцев (Т4М), 6 месяцев (Т6М), 9 месяцев (Т9М), 12 месяцев (Т12М), 18 месяцев (Т18М) и 24 месяцев (Т24М) составы были восстановлены с помощью 1000 мкл воды и подвергнут анализу.

Результаты показывают высокую стабильность соединения (1) в лиофилизированном составе F13, как показано в настоящем документе для содержания, чистоты и биоэффективности. Более того, состав показала хорошую стабильность при тестировании соответствующими фармакопейными методами. Лиофилизированный состав характеризовался белой лепешкой, и не было обнаружено никаких изменений внешнего вида лепешки независимо от хранения. Остаточное содержание влаги было очень низким после лиофилизации (0,03%) и лишь незначительно увеличивалось во время исследования. Во время хранения не было значительного изменения времени восстановления. Визуальный осмотр показал, что образцы практически не содержали видимых частиц на протяжении всего исследования для всех образцов и небольшое количество невидимых частиц, то есть ≥25 мкм и 71≥10 мкм, независимо от температуры хранения и времени хранения (определено с помощью проточной микроскопии). Незначительное изменение цвета от В9 до >В8 наблюдалось в течение 12 месяцев хранения при 5°С, тогда как при хранении в течение 6 месяцев при 25°С и 30°С или 3 месяца при 40°С не наблюдалось увеличения цвета (цвет оценивали с помощью спектрального колориметра, и абсолютные значения определения цвета проводили в соответствии с Европейской фармакопеей, 8-е издание, монография 2.2.2). Мутность (измеренная с помощью турбидиметра) лиофилизированных образцов, хранящихся до двенадцати месяцев при 2-8°С, 25°С/60% относительной влажности и 30 "С/относительная влажность 65%, не изменилась. Только минимальное увеличение мутности было измерено для образца, хранившегося в течение трех месяцев при 40°С/относительной влажности 75%. Никаких изменений внешнего вида не наблюдалось при хранении до 12 месяцев при 5°С со значениями <1 NTU (нефелометрическая единица мутности). В течение 6 месяцев при 25°С, 30°С и 40°С также были получены значения <1 NTU. Хранение не повлияло на рН. Наконец, осмоляльность в точке Т0 была в пределах физиологического диапазона, и во время исследования не было обнаружено никаких изменений.

Пример 6: Тестирование стабильности состава с низкой дозой, содержащего соединение(1)

Лиофилизированный состав (F14) из (1) получали лиофилизацией 1060 мкл во флаконе. Состав содержала количества (1) для получения номинальной концентрации 0,80 мг CNP-38/флакон и 0,75 мг CNP-38/мл после восстановления. Составы помещали в инкубатор, установленный для поддержания 5°С, 25°С/60% RH, 30°С/65% RH и 40°С/75% RH. Через 1 месяц (Т1М), 3 месяцев (Т3М), 6 месяцев (Т6М) и 12 месяцев (Т12М) составы восстанавливали с 1,0 мл воды и подвергали анализу.

Результаты показывают высокую стабильность соединения (1) в лиофилизированном составе F14, как показано в настоящем документе, для содержания, чистоты и биоэффективности. Более того, состав показал хорошую стабильность при тестировании соответствующими фармакопейными методами. Лиофилизированный состав характеризовался белой лепешкой, и не было обнаружено никаких изменений внешнего вида лепешки независимо от хранения. Остаточное содержание влаги было очень низким после лиофилизации (<0,31%) и лишь незначительно увеличивалось во время исследования. Во время хранения не было значительного изменения времени восстановления. Визуальный осмотр показал, что раствор для восстановления практически не содержал видимых частиц (оцененных в соответствии с Ph.Eur.2.9.20 и USP <790>) в доступные моменты времени. Более того, для всех образцов наблюдалось и небольшое количество невидимых частиц, т.е. 0≥25 мкм и 5≥10 мкм независимо от температуры хранения и времени хранения (определено с помощью проточной микроскопии). Незначительное увеличение цвета от = WFI до <В9 наблюдалось после 3 месяцев хранения при 30°С и 40°С (определено в соответствии с Ph.Eur. 2.2.2 с использованием шкалы b). Прозрачность не изменилась в течение 3 месяцев хранения и раствор для восстановления оказался = WFI (определено в соответствии с Ph.Eur.2.2.1). Хранение не повлияло на значение рН. Наконец, осмоляльность в точке Т0 была в пределах физиологического диапазона, и в течение 3 месяцев не было обнаружено никаких изменений.

Пример 7: Стабильность CNP-38 при различных значения рН

Предварительное исследование было проведено для оценки стабильности CNP-38 при различных значениях рН. CNP-38 (синтезированный, как описано в WO 2017/118693) инкубировали при около 1 мг/мл раствора в сукцинатном буфере при рН 4.0, 4.5, 5.0, 5.5 и 6.0 при 37°С. Количество расщепленного CNP-38 (сумма дезамидированных и аспартимидных вариантов CNP-38) оценивали через 7 дней с помощью RP-HPLC. Количество расщепленного CNP-38 составляло 2,7% при рН 4,0, 1,6% при рН 4,5, 1,0% при рН 5,0, 2,9% при рН 5,5 и 3,3% при рН 6,0, что указывает на предпочтительный рН 5,0 для составов CNP-38.

Пример 8: Тестирование стабильности состава, содержащего соединение (1), восстановленного водой, содержащей антиоксидант и/или консервант.

Лиофилизированный состав (F13) соединения (1) получали лиофилизацией 1080 мкл во флаконе. Состав содержал соответствующие количества (1), чтобы получить номинальную концентрацию 3,9 мг CNP-38/флакон и 3,6 мг CNP-38/мл после восстановления 1000 мкл воды. Вода содержала антиоксидант и/или консервант (R1-R5, таблица 11). Флаконы, содержащие восстановленные составы, помещали в инкубатор, в котором поддерживали температуру 5°С. Через 4 недели (T4W) образцы были подвергали анализу.

Результаты показывают, что соединение (1) является стабильным после восстановления в испытанных условиях и без влияния присутствия антиоксиданта и/или консерванта (Таблица 12). На значение рН раствора для восстановления не повлияли антиоксидант и/или консервант после восстановления.

Аббревиатуры

BSA - бычий сывороточный альбумин

cGMP - циклический гуанозин-монофосфат

CI - доверительный интервал

DMEM - среда Игла в модификации Дульбекко

FBS - фетальная бычья сыворотка

HEPES - 4-(2-гидрокси)-1-пиперазинэтансульфоновая кислота

IBMX - 3-изобутил-1-метилксантин

Isoasp - изоаспартат

LC-MS - жидкостная хроматография с масс-спектрометрия

Met(O) - метионинсульфоксид

PLA - анализ параллельных линий

PS 20 - Полисорбат 20

PS 80 - Полисорбат 80

RH - относительная влажность

RP-HPLC - обращенно-фазовая высокоэффективная жидкостная хроматография

SE-HPLC - эксклюзионная высокоэффективная жидкостная хроматография

TFA - трифторуксусная кислота

TR-FRET - перенос энергии флуоресценции с временным разрешением

UPLC - сверхэффективная жидкостная хроматография

--->

Перечень последовательностей

<110> Асцендис Фарма Гроус Дизордерс А/С

<120> СУХИЕ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ СОСТАВЫ КОНЪЮГАТА CNP

<130> CPX72170PC

<160> 97

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 22

<212> PRT

<213> Homo sapiens

<220>

<221> дисульфид

<222> (6)..(22)

<400> 1

Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser

1 5 10 15

Met Ser Gly Leu Gly Cys

20

<210> 2

<211> 53

<212> PRT

<213> Homo sapiens

<220>

<221> дисульфид

<222> (37)..(53)

<400> 2

Asp Leu Arg Val Asp Thr Lys Ser Arg Ala Ala Trp Ala Arg Leu Leu

1 5 10 15

Gln Glu His Pro Asn Ala Arg Lys Tyr Lys Gly Ala Asn Lys Lys Gly

20 25 30

Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met

35 40 45

Ser Gly Leu Gly Cys

50

<210> 3

<211> 54

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> G-CNP-53

<220>

<221> дисульфид

<222> (38)..(54)

<400> 3

Gly Asp Leu Arg Val Asp Thr Lys Ser Arg Ala Ala Trp Ala Arg Leu

1 5 10 15

Leu Gln Glu His Pro Asn Ala Arg Lys Tyr Lys Gly Ala Asn Lys Lys

20 25 30

Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser

35 40 45

Met Ser Gly Leu Gly Cys

50

<210> 4

<211> 54

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> M-CNP-53

<220>

<221> дисульфид

<222> (38)..(54)

<400> 4

Met Asp Leu Arg Val Asp Thr Lys Ser Arg Ala Ala Trp Ala Arg Leu

1 5 10 15

Leu Gln Glu His Pro Asn Ala Arg Lys Tyr Lys Gly Ala Asn Lys Lys

20 25 30

Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser

35 40 45

Met Ser Gly Leu Gly Cys

50

<210> 5

<211> 54

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> P-CNP-53

<220>

<221> дисульфид

<222> (38)..(54)

<400> 5

Pro Asp Leu Arg Val Asp Thr Lys Ser Arg Ala Ala Trp Ala Arg Leu

1 5 10 15

Leu Gln Glu His Pro Asn Ala Arg Lys Tyr Lys Gly Ala Asn Lys Lys

20 25 30

Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser

35 40 45

Met Ser Gly Leu Gly Cys

50

<210> 6

<211> 53

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-53 M48N

<220>

<221> дисульфид

<222> (37)..(53)

<400> 6

Asp Leu Arg Val Asp Thr Lys Ser Arg Ala Ala Trp Ala Arg Leu Leu

1 5 10 15

Gln Glu His Pro Asn Ala Arg Lys Tyr Lys Gly Ala Asn Lys Lys Gly

20 25 30

Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Asn

35 40 45

Ser Gly Leu Gly Cys

50

<210> 7

<211> 36

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-53 с делецией аминокислот 15-31

<220>

<221> дисульфид

<222> (20)..(36)

<400> 7

Asp Leu Arg Val Asp Thr Lys Ser Arg Ala Ala Trp Ala Arg Gly Leu

1 5 10 15

Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met Ser

20 25 30

Gly Leu Gly Cys

35

<210> 8

<211> 52

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-52

<220>

<221> дисульфид

<222> (36)..(52)

<400> 8

Leu Arg Val Asp Thr Lys Ser Arg Ala Ala Trp Ala Arg Leu Leu Gln

1 5 10 15

Glu His Pro Asn Ala Arg Lys Tyr Lys Gly Ala Asn Lys Lys Gly Leu

20 25 30

Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met Ser

35 40 45

Gly Leu Gly Cys

50

<210> 9

<211> 51

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-51

<220>

<221> дисульфид

<222> (35)..(51)

<400> 9

Arg Val Asp Thr Lys Ser Arg Ala Ala Trp Ala Arg Leu Leu Gln Glu

1 5 10 15

His Pro Asn Ala Arg Lys Tyr Lys Gly Ala Asn Lys Lys Gly Leu Ser

20 25 30

Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met Ser Gly

35 40 45

Leu Gly Cys

50

<210> 10

<211> 50

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-50

<220>

<221> дисульфид

<222> (34)..(50)

<400> 10

Val Asp Thr Lys Ser Arg Ala Ala Trp Ala Arg Leu Leu Gln Glu His

1 5 10 15

Pro Asn Ala Arg Lys Tyr Lys Gly Ala Asn Lys Lys Gly Leu Ser Lys

20 25 30

Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met Ser Gly Leu

35 40 45

Gly Cys

50

<210> 11

<211> 49

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-49

<220>

<221> дисульфид

<222> (33)..(49)

<400> 11

Asp Thr Lys Ser Arg Ala Ala Trp Ala Arg Leu Leu Gln Glu His Pro

1 5 10 15

Asn Ala Arg Lys Tyr Lys Gly Ala Asn Lys Lys Gly Leu Ser Lys Gly

20 25 30

Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met Ser Gly Leu Gly

35 40 45

Cys

<210> 12

<211> 48

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-48

<220>

<221> дисульфид

<222> (32)..(48)

<400> 12

Thr Lys Ser Arg Ala Ala Trp Ala Arg Leu Leu Gln Glu His Pro Asn

1 5 10 15

Ala Arg Lys Tyr Lys Gly Ala Asn Lys Lys Gly Leu Ser Lys Gly Cys

20 25 30

Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met Ser Gly Leu Gly Cys

35 40 45

<210> 13

<211> 47

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-47

<220>

<221> дисульфид

<222> (31)..(47)

<400> 13

Lys Ser Arg Ala Ala Trp Ala Arg Leu Leu Gln Glu His Pro Asn Ala

1 5 10 15

Arg Lys Tyr Lys Gly Ala Asn Lys Lys Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe

20 25 30

Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met Ser Gly Leu Gly Cys

35 40 45

<210> 14

<211> 46

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-46

<220>

<221> дисульфид

<222> (30)..(46)

<400> 14

Ser Arg Ala Ala Trp Ala Arg Leu Leu Gln Glu His Pro Asn Ala Arg

1 5 10 15

Lys Tyr Lys Gly Ala Asn Lys Lys Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly

20 25 30

Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met Ser Gly Leu Gly Cys

35 40 45

<210> 15

<211> 45

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-45

<220>

<221> дисульфид

<222> (29)..(45)

<400> 15

Arg Ala Ala Trp Ala Arg Leu Leu Gln Glu His Pro Asn Ala Arg Lys

1 5 10 15

Tyr Lys Gly Ala Asn Lys Lys Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu

20 25 30

Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met Ser Gly Leu Gly Cys

35 40 45

<210> 16

<211> 44

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-44

<220>

<221> дисульфид

<222> (28)..(44)

<400> 16

Ala Ala Trp Ala Arg Leu Leu Gln Glu His Pro Asn Ala Arg Lys Tyr

1 5 10 15

Lys Gly Ala Asn Lys Lys Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys

20 25 30

Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met Ser Gly Leu Gly Cys

35 40

<210> 17

<211> 35

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-44 с делецией аминокислот 14-22

<220>

<221> дисульфид

<222> (19)..(35)

<400> 17

Ala Ala Trp Ala Arg Leu Leu Gln Glu His Pro Asn Ala Gly Leu Ser

1 5 10 15

Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met Ser Gly

20 25 30

Leu Gly Cys

35

<210> 18

<211> 36

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-44 с делецией аминокислот 15-22

<220>

<221> дисульфид

<222> (20)..(36)

<400> 18

Ala Ala Trp Ala Arg Leu Leu Gln Glu His Pro Asn Ala Arg Gly Leu

1 5 10 15

Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met Ser

20 25 30

Gly Leu Gly Cys

35

<210> 19

<211> 43

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-43

<220>

<221> дисульфид

<222> (27)..(43)

<400> 19

Ala Trp Ala Arg Leu Leu Gln Glu His Pro Asn Ala Arg Lys Tyr Lys

1 5 10 15

Gly Ala Asn Lys Lys Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu

20 25 30

Asp Arg Ile Gly Ser Met Ser Gly Leu Gly Cys

35 40

<210> 20

<211> 42

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-42

<220>

<221> дисульфид

<222> (26)..(42)

<400> 20

Trp Ala Arg Leu Leu Gln Glu His Pro Asn Ala Arg Lys Tyr Lys Gly

1 5 10 15

Ala Asn Lys Lys Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp

20 25 30

Arg Ile Gly Ser Met Ser Gly Leu Gly Cys

35 40

<210> 21

<211> 41

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-41

<220>

<221> дисульфид

<222> (25)..(41)

<400> 21

Ala Arg Leu Leu Gln Glu His Pro Asn Ala Arg Lys Tyr Lys Gly Ala

1 5 10 15

Asn Lys Lys Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg

20 25 30

Ile Gly Ser Met Ser Gly Leu Gly Cys

35 40

<210> 22

<211> 40

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-40

<220>

<221> дисульфид

<222> (24)..(40)

<400> 22

Arg Leu Leu Gln Glu His Pro Asn Ala Arg Lys Tyr Lys Gly Ala Asn

1 5 10 15

Lys Lys Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile

20 25 30

Gly Ser Met Ser Gly Leu Gly Cys

35 40

<210> 23

<211> 39

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-39

<220>

<221> дисульфид

<222> (23)..(39)

<400> 23

Leu Leu Gln Glu His Pro Asn Ala Arg Lys Tyr Lys Gly Ala Asn Lys

1 5 10 15

Lys Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly

20 25 30

Ser Met Ser Gly Leu Gly Cys

35

<210> 24

<211> 38

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-38

<220>

<221> дисульфид

<222> (22)..(38)

<400> 24

Leu Gln Glu His Pro Asn Ala Arg Lys Tyr Lys Gly Ala Asn Lys Lys

1 5 10 15

Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser

20 25 30

Met Ser Gly Leu Gly Cys

35

<210> 25

<211> 37

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-37

<220>

<221> дисульфид

<222> (21)..(37)

<400> 25

Gln Glu His Pro Asn Ala Arg Lys Tyr Lys Gly Ala Asn Lys Lys Gly

1 5 10 15

Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met

20 25 30

Ser Gly Leu Gly Cys

35

<210> 26

<211> 37

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-37 с Q1pQ (pQ = пироглутамат)

<220>

<221> MISC_признак

<222> (1)..(1)

<223> X = пироглутамат

<220>

<221> дисульфид

<222> (21)..(37)

<400> 26

Xaa Glu His Pro Asn Ala Arg Lys Tyr Lys Gly Ala Asn Lys Lys Gly

1 5 10 15

Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met

20 25 30

Ser Gly Leu Gly Cys

35

<210> 27

<211> 38

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> G-CNP-37

<220>

<221> дисульфид

<222> (22)..(38)

<400> 27

Gly Gln Glu His Pro Asn Ala Arg Lys Tyr Lys Gly Ala Asn Lys Lys

1 5 10 15

Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser

20 25 30

Met Ser Gly Leu Gly Cys

35

<210> 28

<211> 38

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> P-CNP-37

<220>

<221> дисульфид

<222> (22)..(38)

<400> 28

Pro Gln Glu His Pro Asn Ala Arg Lys Tyr Lys Gly Ala Asn Lys Lys

1 5 10 15

Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser

20 25 30

Met Ser Gly Leu Gly Cys

35

<210> 29

<211> 38

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> M-CNP-37

<220>

<221> дисульфид

<222> (22)..(38)

<400> 29

Met Gln Glu His Pro Asn Ala Arg Lys Tyr Lys Gly Ala Asn Lys Lys

1 5 10 15

Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser

20 25 30

Met Ser Gly Leu Gly Cys

35

<210> 30

<211> 39

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> PG-CNP-37

<220>

<221> дисульфид

<222> (23)..(39)

<400> 30

Pro Gly Gln Glu His Pro Asn Ala Arg Lys Tyr Lys Gly Ala Asn Lys

1 5 10 15

Lys Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly

20 25 30

Ser Met Ser Gly Leu Gly Cys

35

<210> 31

<211> 39

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> MG-CNP-37

<220>

<221> дисульфид

<222> (23)..(39)

<400> 31

Met Gly Gln Glu His Pro Asn Ala Arg Lys Tyr Lys Gly Ala Asn Lys

1 5 10 15

Lys Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly

20 25 30

Ser Met Ser Gly Leu Gly Cys

35

<210> 32

<211> 37

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-37 M32N

<220>

<221> дисульфид

<222> (21)..(37)

<400> 32

Gln Glu His Pro Asn Ala Arg Lys Tyr Lys Gly Ala Asn Lys Lys Gly

1 5 10 15

Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Asn

20 25 30

Ser Gly Leu Gly Cys

35

<210> 33

<211> 38

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> G-CNP-37 M32N

<220>

<221> дисульфид

<222> (22)..(38)

<400> 33

Gly Gln Glu His Pro Asn Ala Arg Lys Tyr Lys Gly Ala Asn Lys Lys

1 5 10 15

Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser

20 25 30

Asn Ser Gly Leu Gly Cys

35

<210> 34

<211> 38

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> G-CNP-37 K14Q

<220>

<221> дисульфид

<222> (22)..(38)

<400> 34

Gly Gln Glu His Pro Asn Ala Arg Lys Tyr Lys Gly Ala Asn Gln Lys

1 5 10 15

Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser

20 25 30

Met Ser Gly Leu Gly Cys

35

<210> 35

<211> 38

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> G-CNP-37 K14P

<220>

<221> дисульфид

<222> (22)..(38)

<400> 35

Gly Gln Glu His Pro Asn Ala Arg Lys Tyr Lys Gly Ala Asn Pro Lys

1 5 10 15

Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser

20 25 30

Met Ser Gly Leu Gly Cys

35

<210> 36

<211> 37

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> G-CNP-37 K14Q, делеция аминокислоты 15

<220>

<221> дисульфид

<222> (21)..(37)

<400> 36

Gly Gln Glu His Pro Asn Ala Arg Lys Tyr Lys Gly Ala Asn Gln Gly

1 5 10 15

Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met

20 25 30

Ser Gly Leu Gly Cys

35

<210> 37

<211> 38

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> G-CNP-37 K14Q, K15Q

<220>

<221> дисульфид

<222> (22)..(38)

<400> 37

Gly Gln Glu His Pro Asn Ala Arg Lys Tyr Lys Gly Ala Asn Gln Gln

1 5 10 15

Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser

20 25 30

Met Ser Gly Leu Gly Cys

35

<210> 38

<211> 36

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-36

<220>

<221> дисульфид

<222> (20)..(36)

<400> 38

Glu His Pro Asn Ala Arg Lys Tyr Lys Gly Ala Asn Lys Lys Gly Leu

1 5 10 15

Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met Ser

20 25 30

Gly Leu Gly Cys

35

<210> 39

<211> 35

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-35

<220>

<221> дисульфид

<222> (19)..(35)

<400> 39

His Pro Asn Ala Arg Lys Tyr Lys Gly Ala Asn Lys Lys Gly Leu Ser

1 5 10 15

Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met Ser Gly

20 25 30

Leu Gly Cys

35

<210> 40

<211> 34

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-34

<220>

<221> дисульфид

<222> (18)..(34)

<400> 40

Pro Asn Ala Arg Lys Tyr Lys Gly Ala Asn Lys Lys Gly Leu Ser Lys

1 5 10 15

Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met Ser Gly Leu

20 25 30

Gly Cys

<210> 41

<211> 33

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-33

<220>

<221> дисульфид

<222> (17)..(33)

<400> 41

Asn Ala Arg Lys Tyr Lys Gly Ala Asn Lys Lys Gly Leu Ser Lys Gly

1 5 10 15

Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met Ser Gly Leu Gly

20 25 30

Cys

<210> 42

<211> 32

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-32

<220>

<221> дисульфид

<222> (16)..(32)

<400> 42

Ala Arg Lys Tyr Lys Gly Ala Asn Lys Lys Gly Leu Ser Lys Gly Cys

1 5 10 15

Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met Ser Gly Leu Gly Cys

20 25 30

<210> 43

<211> 31

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-31

<220>

<221> дисульфид

<222> (15)..(31)

<400> 43

Arg Lys Tyr Lys Gly Ala Asn Lys Lys Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe

1 5 10 15

Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met Ser Gly Leu Gly Cys

20 25 30

<210> 44

<211> 30

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-30

<220>

<221> дисульфид

<222> (14)..(30)

<400> 44

Lys Tyr Lys Gly Ala Asn Lys Lys Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly

1 5 10 15

Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met Ser Gly Leu Gly Cys

20 25 30

<210> 45

<211> 29

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-29

<220>

<221> дисульфид

<222> (13)..(29)

<400> 45

Tyr Lys Gly Ala Asn Lys Lys Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu

1 5 10 15

Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met Ser Gly Leu Gly Cys

20 25

<210> 46

<211> 28

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-28

<220>

<221> дисульфид

<222> (12)..(28)

<400> 46

Lys Gly Ala Asn Lys Lys Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys

1 5 10 15

Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met Ser Gly Leu Gly Cys

20 25

<210> 47

<211> 38

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> GHKSEVAHRF-CNP-28

<220>

<221> дисульфид

<222> (22)..(38)

<400> 47

Gly His Lys Ser Glu Val Ala His Arg Phe Lys Gly Ala Asn Lys Lys

1 5 10 15

Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser

20 25 30

Met Ser Gly Leu Gly Cys

35

<210> 48

<211> 27

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-27

<220>

<221> дисульфид

<222> (11)..(27)

<400> 48

Gly Ala Asn Lys Lys Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu

1 5 10 15

Asp Arg Ile Gly Ser Met Ser Gly Leu Gly Cys

20 25

<210> 49

<211> 27

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-27 K4Q, K5Q

<220>

<221> дисульфид

<222> (11)..(27)

<400> 49

Gly Ala Asn Gln Gln Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu

1 5 10 15

Asp Arg Ile Gly Ser Met Ser Gly Leu Gly Cys

20 25

<210> 50

<211> 27

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-27 K4R, K5R

<220>

<221> дисульфид

<222> (11)..(27)

<400> 50

Gly Ala Asn Arg Arg Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu

1 5 10 15

Asp Arg Ile Gly Ser Met Ser Gly Leu Gly Cys

20 25

<210> 51

<211> 27

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-27 K4P, K5R

<220>

<221> дисульфид

<222> (11)..(27)

<400> 51

Gly Ala Asn Pro Arg Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu

1 5 10 15

Asp Arg Ile Gly Ser Met Ser Gly Leu Gly Cys

20 25

<210> 52

<211> 27

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-27 K4S, K5S

<220>

<221> дисульфид

<222> (11)..(27)

<400> 52

Gly Ala Asn Ser Ser Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu

1 5 10 15

Asp Arg Ile Gly Ser Met Ser Gly Leu Gly Cys

20 25

<210> 53

<211> 30

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> GAN-CNP-27 K4P, K5R

<220>

<221> дисульфид

<222> (14)..(30)

<400> 53

Gly Ala Asn Gly Ala Asn Pro Arg Gly Leu Ser Arg Gly Cys Phe Gly

1 5 10 15

Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met Ser Gly Leu Gly Cys

20 25 30

<210> 54

<211> 27

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-27 K4R, K5R, K9R

<220>

<221> дисульфид

<222> (11)..(27)

<400> 54

Gly Ala Asn Arg Arg Gly Leu Ser Arg Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu

1 5 10 15

Asp Arg Ile Gly Ser Met Ser Gly Leu Gly Cys

20 25

<210> 55

<211> 27

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-27 K4R, K5R, K9R, M22N

<220>

<221> дисульфид

<222> (11)..(27)

<400> 55

Gly Ala Asn Arg Arg Gly Leu Ser Arg Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu

1 5 10 15

Asp Arg Ile Gly Ser Asn Ser Gly Leu Gly Cys

20 25

<210> 56

<211> 28

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> P-CNP-27 K4R, K5R, K9R

<220>

<221> дисульфид

<222> (12)..(28)

<400> 56

Pro Gly Ala Asn Arg Arg Gly Leu Ser Arg Gly Cys Phe Gly Leu Lys

1 5 10 15

Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met Ser Gly Leu Gly Cys

20 25

<210> 57

<211> 28

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> M-CNP-27 K4R, K5R, K9R

<220>

<221> дисульфид

<222> (12)..(28)

<400> 57

Met Gly Ala Asn Arg Arg Gly Leu Ser Arg Gly Cys Phe Gly Leu Lys

1 5 10 15

Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met Ser Gly Leu Gly Cys

20 25

<210> 58

<211> 38

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> фрагмент альбумина сыворотки человека - CNP-27

<220>

<221> дисульфид

<222> (22)..(38)

<400> 58

Gly His Lys Ser Glu Val Ala His Arg Phe Lys Gly Ala Asn Lys Lys

1 5 10 15

Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser

20 25 30

Met Ser Gly Leu Gly Cys

35

<210> 59

<211> 38

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> фрагмент альбумина сыворотки человека - CNP-27 M22N

<220>

<221> дисульфид

<222> (22)..(38)

<400> 59

Gly His Lys Ser Glu Val Ala His Arg Phe Lys Gly Ala Asn Lys Lys

1 5 10 15

Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser

20 25 30

Asn Ser Gly Leu Gly Cys

35

<210> 60

<211> 39

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> метионин - фрагмент альбумина сыворотки человека - CNP-27

<220>

<221> дисульфид

<222> (23)..(39)

<400> 60

Met Gly His Lys Ser Glu Val Ala His Arg Phe Lys Gly Ala Asn Lys

1 5 10 15

Lys Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly

20 25 30

Ser Met Ser Gly Leu Gly Cys

35

<210> 61

<211> 39

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> пролин- фрагмент альбумина сыворотки человека - CNP-27

<220>

<221> дисульфид

<222> (23)..(39)

<400> 61

Pro Gly His Lys Ser Glu Val Ala His Arg Phe Lys Gly Ala Asn Lys

1 5 10 15

Lys Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly

20 25 30

Ser Met Ser Gly Leu Gly Cys

35

<210> 62

<211> 26

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-26

<220>

<221> дисульфид

<222> (10)..(26)

<400> 62

Ala Asn Lys Lys Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp

1 5 10 15

Arg Ile Gly Ser Met Ser Gly Leu Gly Cys

20 25

<210> 63

<211> 25

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-25

<220>

<221> дисульфид

<222> (9)..(25)

<400> 63

Asn Lys Lys Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg

1 5 10 15

Ile Gly Ser Met Ser Gly Leu Gly Cys

20 25

<210> 64

<211> 24

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-24

<220>

<221> дисульфид

<222> (8)..(24)

<400> 64

Lys Lys Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile

1 5 10 15

Gly Ser Met Ser Gly Leu Gly Cys

20

<210> 65

<211> 23

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-23

<220>

<221> дисульфид

<222> (7)..(23)

<400> 65

Lys Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly

1 5 10 15

Ser Met Ser Gly Leu Gly Cys

20

<210> 66

<211> 23

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> R-CNP-22

<220>

<221> дисульфид

<222> (7)..(23)

<400> 66

Arg Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly

1 5 10 15

Ser Met Ser Gly Leu Gly Cys

20

<210> 67

<211> 24

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> ER-CNP-22

<220>

<221> дисульфид

<222> (8)..(24)

<400> 67

Glu Arg Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile

1 5 10 15

Gly Ser Met Ser Gly Leu Gly Cys

20

<210> 68

<211> 23

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> R-CNP-22 K4R

<220>

<221> дисульфид

<222> (7)..(23)

<400> 68

Arg Gly Leu Ser Arg Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly

1 5 10 15

Ser Met Ser Gly Leu Gly Cys

20

<210> 69

<211> 24

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> ER-CNP-22 4KR

<220>

<221> дисульфид

<222> (8)..(24)

<400> 69

Glu Arg Gly Leu Ser Arg Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile

1 5 10 15

Gly Ser Met Ser Gly Leu Gly Cys

20

<210> 70

<211> 24

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> RR-CNP-22

<220>

<221> дисульфид

<222> (8)..(24)

<400> 70

Arg Arg Gly Leu Ser Arg Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile

1 5 10 15

Gly Ser Met Ser Gly Leu Gly Cys

20

<210> 71

<211> 37

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> HRGP фрагмент- CNP-22

<220>

<221> дисульфид

<222> (21)..(37)

<400> 71

Gly His His Ser His Glu Gln His Pro His Gly Ala Asn Gln Gln Gly

1 5 10 15

Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met

20 25 30

Ser Gly Leu Gly Cys

35

<210> 72

<211> 38

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> HRGP фрагмент- CNP-22

<220>

<221> дисульфид

<222> (22)..(38)

<400> 72

Gly Ala His His Pro His Glu His Asp Thr His Gly Ala Asn Gln Gln

1 5 10 15

Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser

20 25 30

Met Ser Gly Leu Gly Cys

35

<210> 73

<211> 37

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> HRGP фрагмент- CNP-22

<220>

<221> дисульфид

<222> (21)..(37)

<400> 73

Gly His His Ser His Glu Gln His Pro His Gly Ala Asn Pro Arg Gly

1 5 10 15

Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met

20 25 30

Ser Gly Leu Gly Cys

35

<210> 74

<211> 36

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> IgG1(FC) фрагмент- CNP-22

<220>

<221> дисульфид

<222> (20)..(36)

<400> 74

Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gly Leu

1 5 10 15

Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met Ser

20 25 30

Gly Leu Gly Cys

35

<210> 75

<211> 39

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> альбумин сыворотки человека - CNP-22

<220>

<221> дисульфид

<222> (23)..(39)

<400> 75

Gly Gln His Lys Asp Asp Asn Pro Asn Leu Pro Arg Gly Ala Asn Pro

1 5 10 15

Arg Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly

20 25 30

Ser Met Ser Gly Leu Gly Cys

35

<210> 76

<211> 37

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> альбумин сыворотки человека - CNP-22

<220>

<221> дисульфид

<222> (21)..(37)

<400> 76

Gly Glu Arg Ala Phe Lys Ala Trp Ala Val Ala Arg Leu Ser Gln Gly

1 5 10 15

Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met

20 25 30

Ser Gly Leu Gly Cys

35

<210> 77

<211> 35

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> фрагмент ингибитора остеокрина NPR C - CNP-22

<220>

<221> дисульфид

<222> (19)..(35)

<400> 77

Phe Gly Ile Pro Met Asp Arg Ile Gly Arg Asn Pro Arg Gly Leu Ser

1 5 10 15

Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met Ser Gly

20 25 30

Leu Gly Cys

35

<210> 78

<211> 40

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> FGF2 гепарин-связывающий одменный фрагмент - CNP-22

<220>

<221> дисульфид

<222> (24)..(40)

<400> 78

Gly Lys Arg Thr Gly Gln Tyr Lys Leu Gly Ser Lys Thr Gly Pro Gly

1 5 10 15

Pro Lys Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile

20 25 30

Gly Ser Met Ser Gly Leu Gly Cys

35 40

<210> 79

<211> 37

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> IgG1(FC) фрагмент- CNP-22 K4R

<220>

<221> дисульфид

<222> (21)..(37)

<400> 79

Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Gly Ala Asn Gln Gln Gly

1 5 10 15

Leu Ser Arg Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met

20 25 30

Ser Gly Leu Gly Cys

35

<210> 80

<211> 36

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> фрагмент альбумина сыворотки человека - CNP-22 K4R

<220>

<221> дисульфид

<222> (20)..(36)

<400> 80

Gly Val Pro Gln Val Ser Thr Ser Thr Gly Ala Asn Gln Gln Gly Leu

1 5 10 15

Ser Arg Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met Ser

20 25 30

Gly Leu Gly Cys

35

<210> 81

<211> 37

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> Фрагмент фибронектина - CNP-22

<220>

<221> дисульфид

<222> (21)..(37)

<400> 81

Gly Gln Pro Ser Ser Ser Ser Gln Ser Thr Gly Ala Asn Gln Gln Gly

1 5 10 15

Leu Ser Arg Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met

20 25 30

Ser Gly Leu Gly Cys

35

<210> 82

<211> 37

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> Фрагмент фибронектина - CNP-22 K4R

<220>

<221> дисульфид

<222> (21)..(37)

<400> 82

Gly Gln Thr His Ser Ser Gly Thr Gln Ser Gly Ala Asn Gln Gln Gly

1 5 10 15

Leu Ser Arg Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met

20 25 30

Ser Gly Leu Gly Cys

35

<210> 83

<211> 37

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> Фрагмент фибронектина - CNP-22 K4R

<220>

<221> дисульфид

<222> (21)..(37)

<400> 83

Gly Ser Thr Gly Gln Trp His Ser Glu Ser Gly Ala Asn Gln Gln Gly

1 5 10 15

Leu Ser Arg Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met

20 25 30

Ser Gly Leu Gly Cys

35

<210> 84

<211> 37

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> фрагмент цинкового пальца - CNP-22 K4R

<220>

<221> дисульфид

<222> (21)..(37)

<400> 84

Gly Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Gly Ala Asn Gln Gln Gly

1 5 10 15

Leu Ser Arg Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met

20 25 30

Ser Gly Leu Gly Cys

35

<210> 85

<211> 21

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-21

<220>

<221> дисульфид

<222> (5)..(21)

<400> 85

Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met

1 5 10 15

Ser Gly Leu Gly Cys

20

<210> 86

<211> 20

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-20

<220>

<221> дисульфид

<222> (4)..(20)

<400> 86

Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met Ser

1 5 10 15

Gly Leu Gly Cys

20

<210> 87

<211> 19

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-19

<220>

<221> дисульфид

<222> (3)..(19)

<400> 87

Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met Ser Gly

1 5 10 15

Leu Gly Cys

<210> 88

<211> 18

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-18

<220>

<221> дисульфид

<222> (2)..(18)

<400> 88

Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met Ser Gly Leu

1 5 10 15

Gly Cys

<210> 89

<211> 17

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-17

<220>

<221> дисульфид

<222> (1)..(17)

<400> 89

Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met Ser Gly Leu Gly

1 5 10 15

Cys

<210> 90

<211> 32

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> BNP фрагмент- CNP-17 - BNP- фрагмент

<220>

<221> дисульфид

<222> (10)..(26)

<400> 90

Ser Pro Lys Met Val Gln Gly Ser Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp

1 5 10 15

Arg Ile Gly Ser Met Ser Gly Leu Gly Cys Lys Val Leu Arg Arg His

20 25 30

<210> 91

<211> 38

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-38 L1G

<220>

<221> дисульфид

<222> (22)..(38)

<400> 91

Gly Gln Glu His Pro Asn Ala Arg Lys Tyr Lys Gly Ala Asn Lys Lys

1 5 10 15

Gly Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser

20 25 30

Met Ser Gly Leu Gly Cys

35

<210> 92

<211> 37

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> Ac-CNP-37

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> Ацетилирование

<220>

<221> дисульфид

<222> (21)..(37)

<400> 92

Gln Glu His Pro Asn Ala Arg Lys Tyr Lys Gly Ala Asn Lys Lys Gly

1 5 10 15

Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met

20 25 30

Ser Gly Leu Gly Cys

35

<210> 93

<211> 37

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> CNP-37, Xaa = K или R, при условии, что по меньшей мере один Xaa

представляет собой

R

<220>

<221> MISC_признак

<222> (8)..(8)

<223> Xaa = Lys, Arg, Pro, Ser или Gln, при условии, что по меньшей мере одна

из аминокислот 8, 10, 14, 15, 19 или 25 выбрана из группы, состоящей из

Arg, Pro, Ser и Gln

<220>

<221> MISC_признак

<222> (10)..(10)

<223> Xaa = Lys, Arg, Pro, Ser или Gln, wпри условии, что по меньшей мере одна

из аминокислот 8, 10, 14, 15, 19 или 25 выбрана из группы, состоящей из

Arg, Pro, Ser и Gln

<220>

<221> MISC_признак

<222> (14)..(14)

<223> Xaa = Lys, Arg, Pro, Ser или Gln, при условии, что по меньшей мере одна

из аминокислот 8, 10, 14, 15, 19 или 25 выбрана из группы, состоящей из

Arg, Pro, Ser и Gln

<220>

<221> MISC_признак

<222> (15)..(15)

<223> Xaa = Lys, Arg, Pro, Ser или Gln, при условии, что по меньшей мере одна

из аминокислот 8, 10, 14, 15, 19 или 25 выбрана из группы, состоящей из

Arg, Pro, Ser и Gln

<220>

<221> MISC_признак

<222> (19)..(19)

<223> Xaa = Lys, Arg, Pro, Ser или Gln, при условии, что по меньшей мере одна

из аминокислот 8, 10, 14, 15, 19 или 25 выбрана из группы, состоящей из

Arg, Pro, Ser и Gln

<220>

<221> дисульфид

<222> (21)..(37)

<220>

<221> MISC_признак

<222> (25)..(25)

<223> Xaa = Lys, Arg, Pro, Ser или Gln, при условии, что по меньшей мере одна

из аминокислот 8, 10, 14, 15, 19 или 25 выбрана из группы, состоящей из

Arg, Pro, Ser и Gln

<400> 93

Gln Glu His Pro Asn Ala Arg Xaa Tyr Xaa Gly Ala Asn Xaa Xaa Gly

1 5 10 15

Leu Ser Xaa Gly Cys Phe Gly Leu Xaa Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met

20 25 30

Ser Gly Leu Gly Cys

35

<210> 94

<211> 37

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> мутированный CNP-37

<220>

<221> MISC_признак

<222> (14)..(14)

<223> X выбран из группы, состоящей из Lys, Arg, Pro, Ser и

Gln, при условии, что по меньшей мере одна из аминокислот в положении 14,

15, 19 и 25 выбрана из группы, состоящей из

Arg, Pro, Ser и Gln

<220>

<221> MISC_признак

<222> (15)..(15)

<223> X выбран из группы, состоящей из Lys, Arg, Pro, Ser и

Gln, при условии, что по меньшей мере одна из аминокислот

в положении 14, 15, 19 and 25 выбрана из группы, состоящей из Arg, Pro,

Ser и Gln

<220>

<221> MISC_признак

<222> (19)..(19)

<223> X выбран из группы, состоящей из Lys, Arg, Pro, Ser и

Gln, при условии, что по меньшей мере одна из аминокислот

в положении 14, 15, 19 и 25 выбрана из группы, состоящей из

Arg, Pro, Ser и Gln

<220>

<221> дисульфид

<222> (21)..(37)

<220>

<221> MISC_признак

<222> (25)..(25)

<223> X выбран из группы, состоящей из Lys, Arg, Pro, Ser и

Gln, при условии, что по меньшей мере одна из аминокислот

в положении 14, 15, 19 и 25 выбрана из группы, состоящей из

Arg, Pro, Ser и Gln

<400> 94

Gln Glu His Pro Asn Ala Arg Lys Tyr Lys Gly Ala Asn Xaa Xaa Gly

1 5 10 15

Leu Ser Xaa Gly Cys Phe Gly Leu Xaa Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met

20 25 30

Ser Gly Leu Gly Cys

35

<210> 95

<211> 37

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> мутированныйCNP-37

<220>

<221> MISC_признак

<222> (14)..(15)

<223> Xaa Xaa выбран из группы, состоящей из Lys Arg, Arg

Lys, Lys Pro, Pro Lys, Ser Ser, Arg Ser, Ser Arg, Gln Lys, Gln

Arg, Lys Gln, Arg Gln, Arg Arg и Gln Gln

<220>

<221> дисульфид

<222> (21)..(37)

<400> 95

Gln Glu His Pro Asn Ala Arg Lys Tyr Lys Gly Ala Asn Xaa Xaa Gly

1 5 10 15

Leu Ser Lys Gly Cys Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met

20 25 30

Ser Gly Leu Gly Cys

35

<210> 96

<211> 15

<212> PRT

<213> Homo sapiens

<400> 96

Phe Gly Leu Lys Leu Asp Arg Ile Gly Ser Met Ser Gly Leu Gly

1 5 10 15

<210> 97

<211> 20

<212> PRT

<213> искусственная последовательность

<220>

<223> Искусственная случайная спираль

<400> 97

Gly Gly Pro Gly Gly Pro Gly Pro Gly Gly Pro Gly Gly Pro Gly Pro

1 5 10 15

Gly Gly Pro Gly

20

<---

Группа изобретений относится к области фармацевтики и медицины. 1 объект представляет собой сухой фармацевтический состав, содержащий конъюгат CNP, который содержит фрагмент CNP, который ковалентно и обратимо конъюгирован с полимерным фрагментом и содержит кольцевой фрагмент, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 96, причем кольцевой фрагмент расположен между двумя остатками цистеина, которые образуют дисульфидный мостик, а также дигидрат трегалозы, янтарную кислоту и Трис. 2 объект – способ получения сухого фармацевтического состава. 3 и 4 объекты – способ восстановления сухого фармацевтического состава и восстановленный фармацевтический состав. 5 объект - способ лечения или контроля ахондроплазии у пациента. Технический результат заключается в стабильном длительном хранении сухого фармацевтического состава конъюгата CNP. 5 н. и 12 з.п. ф-лы, 12 табл., 8 пр.

1. Сухой фармацевтический состав, где фармацевтический состав содержит конъюгат CNP, буферный агент, агент-наполнитель и рН-регулирующий агент, и где конъюгат CNP содержит фрагмент CNP, который ковалентно и обратимо конъюгирован с полимерным фрагментом, причем фрагмент CNP содержит кольцевой фрагмент, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 96, причем кольцевой фрагмент расположен между двумя остатками цистеина, которые образуют дисульфидный мостик, причем агентом-наполнителем является дигидрат трегалозы, буферным агентом является янтарная кислота и рН-регулирующим агентом является Трис, и причем состав содержит на основе общей массы сухого фармацевтического состава:

конъюгат CNP - 1,3-45,4% мас./мас.

янтарную кислоту - 0,2-3,2% мас./мас.

дигидрат трегалозы -52,6-98,4% мас./мас.

Трис - 0,1-5,6% мас./мас.;

где конъюгат CNP имеет формулу (Ia):

где

-D представляет собой фрагмент CNP, где -D имеет последовательность SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 25 или SEQ ID NO: 30;

-L¹- представляет собой обратимый линкерный фрагмент, причем -L¹- имеет формулу (IIc):

,

где пунктирная линия показывает присоединение к азоту боковой цепи аминокислотного остатка указанного кольцевого фрагмента -D посредством образования амидной связи;

причем -L¹- замещен -L²-Z, и где -L¹- необязательно дополнительно замещен, при условии, что водород, отмеченный звездочкой в формуле (IIc), не заменен на -L²-Z;

-L²- представляет собой простую химическую связь или спейсерный фрагмент,

х представляет собой целое число, выбранное из группы, состоящей из 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 и 16, и

-Z представляет собой полимерный фрагмент, причем -Z содержит фрагмент формулы (а)

,

где

пунктирная линия показывает присоединение к -L²- или к оставшейся части -Z,

ВР^а представляет собой точку разветвления, выбранную из группы, состоящей из -N<, -CR< и >С<,

-R выбран из группы, состоящей из -Н и C₁-₆ алкила,

а представляет собой 0, если ВР^а представляет собой -N< или -CR< и n представляет собой 1, если ВР^а представляет собой >С<,

-S^a-, -S^a'-, -S^a''- и -S^a'''- независимо друг от друга представляют собой химическую связь или выбраны из группы, состоящей из C_1-50 алкила, C_2-50 алкенила и C_2-50 алкинила, где C_1-50 алкил, C_2-50 алкенил и C_2-50 алкинил необязательно замещены одним или несколькими -R¹, которые являются одинаковыми или различными, и где C_1-50 алкил, С_2-50 алкенил и С_2-50 алкинил необязательно прерываются одной или несколькими группами, выбранными из группы, состоящей из -Т-, -С(O)O-, -О-, -С(О)-, -C(O)N(R²)-, -S(O)₂N(R²)-, -S(O)N(R²)-, -S(O)₂-, -S(O)-, -N(R²)S(O)₂N(R^2a)-, -S-, -N(R²)-, -OC(OR²)(R^2a)-, -N(R²)C(O)N(R^2a)- и -OC(O)N(R²)-,

каждый -T- независимо выбран из группы, состоящей из фенила, нафтила, инденила, инданила, тетралинила, С_3-10 циклоалкила, 3-10-тичленного гетероциклила, 8-11-тичленного гетеробициклила, 8-30-тичленного карбополициклила и 8-30-тичленного гетерополициклила, где каждый -Т- независимо необязательно замещен одним или несколькими -R¹, которые являются одинаковыми или различными,

каждый -R¹ независимо выбран из группы, состоящей из галогена, -CN, оксо (=O), -COOR³, -OR³, -C(O)R³, -C(O)N(R³R^3a), -S(O)₂N(R³R^3a), -S(O)N(R³R^3a), -S(O)₂R³, -S(O)R³, -N(R³)S(O)₂N(R^3aR^3b), -SR³, -N(R³R^3a), -NO₂, -OC(O)R³, -N(R³)C(O)R^3a, -N(R³)S(O)₂R^3a, -N(R³)S(O)R^3a, -N(R³)C(O)OR^3a, -N(R³)C(O)N(R^3aR^3b), -OC(O)N(R³R^3a) и C_1-6 алкила, где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, которые являются одинаковыми или различными,

каждый -R², -R^2a, -R³, -R^3a и -R^3b независимо выбран из группы, состоящей из -Н и C_1-6 алкила, где C_1-6 алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами, которые являются одинаковыми или различными, и

-Р^а', -Р^а'' и -Р^а''' независимо представляют собой полимерный фрагмент, включающий фрагмент на основе ПЭГ.

2. Сухой фармацевтический состав по п. 1, где состав содержит на основе общей массы сухого фармацевтического состава:

конъюгат CNP - 1,3-38,7% мас./мас.

янтарную кислоту - 0,2-3,2% мас./мас.

дигидрат трегалозы - 52,6-98,4% мас./мас.

Трис - 0,1-5,6% мас./мас.

3. Сухой фармацевтический состав по п. 1, где х представляет собой целое число, выбранное из группы, состоящей из 1, 2, 3, 4, 6 и 8.

4. Сухой фармацевтический состав по п. 1, где х представляет собой 1.

5. Сухой фармацевтический состав по п. 1, где -D имеет последовательность SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 24 or SEQ ID NO: 25.

6. Сухой фармацевтический состав по п. 1, где -D имеет последовательность SEQ ID NO: 24.

7. Сухой фармацевтический состав по п. 1, где связь между -Z и -L²- представляет собой стабильную связь.

8. Сухой фармацевтический состав по п. 1, где -L²- представляет собой спейсерный фрагмент.

9. Сухой фармацевтический состав по п. 1, где -L²- имеет молекулярную массу в интервале от 14 г/моль до 750 г/моль.

10. Сухой фармацевтический состав по п. 1, где -L²- имеет длину цепи от 1 до 20 атомов.

11. Сухой фармацевтический состав по п. 1, где -L²- имеет формулу (i):

,

где

отмеченная звездочкой пунктирная линия показывает присоединение к -L¹-,

неотмеченная пунктирная линия показывает присоединение к -Z,

-R¹ выбран из группы, состоящей из -Н, С_1-6 алкила, С_2-6 алкенила и С_2-6 алкинила,

n выбран из группы, состоящей из 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 и 18, и

где фрагмент формулы (i) необязательно дополнительно замещен.

12. Сухой фармацевтический состав по п. 11, где n формулы (i) выбран из группы, состоящей из 3, 4, 5, 6, 7, 8 и 9.

13. Способ получения сухого фармацевтического состава по п. 1, где способ включает стадии

(i) смешивание конъюгата CNP с буферным агентом, представляющим собой янтарную кислоту, и агентом-наполнителем, представляющим собой дигидрат трегалозы,

(ii) регулирование значения рН смеси согласно стадии (i) с рН-регулирующим агентом, представляющим собой Трис,

(iii) фильтрация смеси согласно стадии (ii),

(iv) перенос смеси согласно стадии (iii) в контейнер,

(v) сушка смеси, и

(vi) герметизация контейнера.

14. Способ восстановления сухого фармацевтического состава по п. 1, где способ включает стадию

(а) контакт сухого фармацевтического состава по п. 1 с раствором для восстановления.

15. Способ по п. 14, где раствор для восстановления представляет собой стерильную жидкость.

16. Восстановленный фармацевтический состав, получаемый способом восстановления по п. 14 или 15.

17. Способ лечения или контроля ахондроплазии у пациента, где способ включает введение пациенту терапевтически эффективного количества восстановленного фармацевтического состава по п. 16.