Способ активации функции яичников при сниженном овариальном резерве Российский патент 2021 года по МПК A61K35/19 A61P15/08 

Настоящее изобретение применимо в медицинской сфере деятельности, в частности, в области репродуктологии.

Из уровня техники известен способ стимуляции фолликулогенеза (патент RU №2629871), предусматривающий двукратную подкожную инъекцию препарата, содержащего суспензию химерного белка с водонерастворимой ферментативно неактивной хлорамфениколацетилтрансферазой без 10 С-терминальных аминокислот, аминокислотным спейсером (Sp)_n, где n=1, 2, 4, 8, и соматостатином-14 с последовательностью аминокислот AGCFWKTFTSC в рафинированном растительном масле с добавлением апирогенной воды для инъекций, из расчета 25-50 мкг указанного химерного белка на 1 кг живой массы тела с межинъекционным интервалом 14 суток, или из расчета 100-250 мг указанного химерного белка на 100 мл рафинированного растительного масла, включающего 5,0-10,0 мас. % апирогенной воды для инъекций. Введение химерного белка и соматостатина-14 способствует увеличению активности половых гормонов (тестостерон, прогестерон, эстрадиол) в сыворотке крови и индукции комплексных перестроек адаптивного генеза, выражающихся в структурных преобразованиях органов репродуктивной системы, и направленных на стимуляцию воспроизводительного потенциала.

Также из уровня техники известно (патент RU №2418604) о применении соматостатина (гормон-антагонист соматотропина) или одного из его аналогов-агонистов для приготовления лекарственного средства, которое предназначено для ингибирования роста покоящихся фолликулов в ткани яичника.

Кроме того, известен способ активации in vitro овариальных фолликулов и ооцитов, включающий в себя применение ингибиторов PTEN (патент RU №2492866), где ингибитор PTEN выбирают из группы, включающей Биспероксо(бипиридин)оксованадат, Биспероксо(1,10-фенантролин)оксованадат, Биспероксо(пиколинато)оксованадат, Биспероксо(5-гидроксипиридин-2-карбоксил)оксованадат, Ди-(пиколинат)оксованадат, Ди-(3-гидроксипиколинат)оксованадат, Биспероксо(фенилбигуанид)оксованадат, Ди-(фенилбигуанид)оксованадат и Биспероксо(изохинолинкарбоновой кислоты)оксованадат. Способ может включать в себя инкубацию фолликулов и/или ооцитов в физиологически приемлемой среде, содержащей один или более ингибиторов PTEN. Среда может дополнительно содержать гонадотропин, такой как ФСГ и/или CG.

Недостатками известных способов являются: незначительное противовоспалительное, противоотечное, обезболивающее и стимулирующее регенерацию ряда тканей действие, а также отсутствие возможности применения у пациентов, физиологически обладающих низким овариальным резервом, связанным с возрастными изменениями или преждевременной яичниковой недостаточностью.

Поставленная при создании изобретения задача заключается в разработке эффективного и безопасного способа стимулирования функции яичников у пациенток с низким овариальным резервом, включающих женщин с «бедным ответом» в программах ЭКО, а также при преждевременной яичниковой недостаточности.

Технический результат заключается в возможности получения собственной яйцеклетки в программах вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ) и/или наступление спонтанной беременности у пациенток с низким и крайне низким овариальным резервом, а также в возможности обходиться без использования донорских ооцитов.

Сущность изобретения заключается в трансвагинальном интраовариальном введении обогащенной тромбоцитами плазмы в яичниковую ткань.

Необходимо отметить, что в отличии от полости матки, которая сообщается с внешней средой через шейку матки и влагалище, яичники располагаются в брюшной полости, и не имеют контакта с внешней средой. Поэтому особенно важным, для решения поставленной задачи и достижения технического результата, является центральное введение плазмы в мозговое вещество яичника на расстоянии не менее 5 мм от магистральных сосудов (сосуды собственной связки яичника и сосуды воронко-тазовой связки). Для этого иглу вводят максимально дистально в безопасную зону яичника и фракционно, по 0,5 мл в каждую точку введения, осуществляют инъекцию плазмы в яичник, в условиях пошаговой тракции иглы в проксимальном направлении. Таким образом, в четырех местах введения проводят инъекцию не менее 0.5 мл в каждую точку объемом не менее 2,0 мл плазмы на каждый яичник.

Описанный выше способ введения инъекции обусловлен следующими факторами:

- безопасность (травма сосудов при проведении манипуляции может привести к внутрибрюшному кровотечению);

- повышение эффективности (введение плазмы в сосуд снижает ее эффективность);

- введение инъекции в ткань яичника, а не орошение или внутрисосудистое введение;

- дробная инъекция плазмы в четырех стоп-точках яичника, что позволяет равномерно распределить аутоплазму в мозговом веществе яичника, уменьшает вероятность ишемии ткани яичника, в результате предложенного последовательного введения аутоплазмы увеличивается возможность достижения технического результата;

После введения аутоплазмы полость малого таза тщательно осматривается с помощью ультразвукового исследования для исключения наличия появления крови в результате повреждения сосудов.

Краткое описание таблиц и чертежей:

На фиг. 1 представлен сосудистый рисунок яичника в режиме цветового допплеровского картирования.

Таблица №1. Клинико-демографические характеристики пациенток обследованных групп, (n(%)).

Таблица №2. Динамика показателей овариального резерва у пациенток с «бедным» ответом в программах ЭКО.

Таблица №3. Динамика показателей овариального резерва у пациенток с преждевременной яичниковой недостаточностью.

Таблица №4. Клинические результаты интраовариальной аутоплазмотерапии с использованнием плазмы, обогащенной тромбоцитами.

Критерии оценки эффективности предложенного способа:

- динамика содержания фолликулостимулирующего гормона (ФСГ), эстрадиола, антимюллерова гормона;

- восстановление овуляторной функции яичников;

- количество полученных в ходе программ ЭКО ооцитов, наступление беременности.

Полученные данные о динамике физиологических показателей овариального резерва представлены в таблицах №2 и №3, демонстрирующих достоверное снижение ФСГ, повышение значения показателей эстрадиола и антимюллерова гормона в течение 3 месяцев без существенной динамики при контроле в 4-м менструальном цикле.

Особенности гормональной стимуляции суперовуляции и результаты программ ЭКО представлены в таблице №4.

Показанием к применению предложенного способа является:

- преждевременная недостаточность яичников;

бесплодие, сопровождающееся неудачными попытками экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) в анамнезе и бедным овариальным ответом.

Представленные данные демонстрируют тот факт, что интраовариальная инъекция аутоплазмы, обогащенной тромбоцитами, относится к эффективной, неспецифической стимуляции овариогенеза и приводит к улучшению функции яичников, способствуя реактивации процесса фолликулогенеза, восстановлению менструального цикла и улучшению гормонального профиля. Совокупность данных факторов, в свою очередь, приводит к достижению беременности, в отдельных случаях путем естественного зачатия, у женщин с низким овариальным резервом, которые все еще имеют возможность использования своих собственных ооцитов, отказываясь от проведения донорских программ вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ). Наибольшую эффективность заявленный способ показал в группе пациентов с физиологически выраженной преждевременной яичниковой недостаточностью, в сравнении с пациентами старше 40 лет и «бедным» овариальный ответом, что связано с возрастной динамикой качества ооцитов и, как следствие, качеством полученных эмбрионов, а также наличием сочетанных факторов бесплодия у данной категории пациенток.

Эффективность заявленного способа подтверждается следующими экспериментальными данными:

В исследование было включено 60 пациенток с низким овариальным резервом, из них пациенты с «бедным ответом» в программах ЭКО согласно Болонским критериям (Ferraretti АР, La Магса A, Fauser BCet al. ESHRE consensus on the definition of to ovarian stimulation for in vitro fertilization: the Bologna criteria//Hum Reprod2011;26(7):1616-24), (n=30); и пациентки с преждевременной яичниковой недостаточностью (возраст менее 40 лет, аменоррея не менее 4 месяцев, уровень ФСГ более 25 Me/мл), (n=30). Из исследования были исключены пациентки с аутоиммунными заболеваниями, воспалительными заболеваниями органов малого таза, хроническим эндометритом, индексом массы тела более 30 и менее 18,5, гипоталамо-гипофизарными расстройствами и предшествующими хирургическими вмешательствами на органах малого таза. Во всех супружеских парах отсутствовал мужской фактор бесплодия. Пациентки с «бедным овариальным ответом» были старше 40 лет, имели «бедный овариальный ответ» в предшествующих программах ЭКО и сниженный овариальный резерв по данным гормонального и ультразвукового исследования. У всех пациенток в анамнезе как минимум одна неудачная попытка программы ВРТ. Пациентки обеих групп получили лечение в соответствии с предложенным способом активации функции яичников. Клинико-демографические характеристики пациенток обеих групп представлены в таблице №1.

Подготовка к применению заявленного способа осуществляется в несколько этапов:

Подготовку обогащенной тромбоцитами аутоплазмы проводят непосредственно перед проведением инфузии. Забор крови у пациента, не менее 40 мл, производят с помощью шприца или иглы - «бабочки», далее кровь перемешивают, медленно покачивая шприцем по траектории, напоминающей цифру восемь, в течение 15 секунд для смешения с антикоагулянтом, затем помещают кровь в специальную пробирку. Для получения аутоплазмы, обогащенной тромбоцитами, в два этапа проводят центрифугирование. На первом этапе центрифугирование проводят с углом наклона ротора 45 градусов, 3400 -3600 об/мин., время 4 мин. На втором этапе центрифугирование проводят при угловом роторе, 3400 - 3600 об/мин., время 4 минуты. После второго этапа центрифугирования извлекают обогащенную тромбоцитами плазму.

Аутоплазму через иглу вводят максимально дистально в безопасную зону каждого яичника, а именно в мозговое вещество яичника на расстоянии не менее 5 мм от магистральных сосудов, и фракционно, по 0,5 мл в каждую точку введения, осуществляют инъекцию плазмы в яичник, в условиях пошаговой тракции иглы в проксимальном направлении («на себя»). Инъекцию аутоплазмы осуществляют в четырех точках яичника, объемом не менее 0,5 мл аутоплазмы в каждую точку Так как средний объем яичника при сниженном овариальном резерве составляет 2,4±0,4 кубических сантиметра, экспериментально было установлено, что оптимальным количеством вводимой плазмы является такое количество, которое не превышает объем яичника, то есть 2 мл. Это позволяет избежать введения избыточного количества плазмы и, в то же время, эффективно использовать максимально возможное ее количество.

Визуальный контроль проведения точечной инъекции возможен при помощи технических средств диагностики, например, при помощи ультразвукового исследования методом цветового доплеровского картирования или же при помощи рентгеноскопического исследования (ангиография).

Изобретение относится к медицине, а именно к репродуктивной гинекологии, и может быть использовано у пациенток с бесплодием и низким овариальным резервом для активации функции яичников. Способ стимулирования функции яичников при сниженном овариальном резерве, включающий введение 2 мл аутоплазмы, обогащенной тромбоцитами в мозговое вещество яичника на расстоянии не менее 5 мм от магистральных сосудов, и фракционно, по 0,5 мл в каждую из четырех точек введения, осуществляют инъекцию плазмы в яичник, в условиях пошаговой тракции иглы, под визуальным контролем с помощью технических средств диагностики. Технический результат заключается в возможности получения собственной яйцеклетки в программах вспомогательных репродуктивных технологий и/или наступления спонтанной беременности у пациенток с низким и крайне низким овариальным резервом, а также в возможности обходиться без использования донорских ооцитов. 1 ил., 4 табл.

Способ стимулирования функции яичников при сниженном овариальном резерве путем использования аутоплазмы, обогащенной тромбоцитами, отличающийся тем, что аутоплазму вводят в мозговое вещество каждого яичника, объемом не менее 2 мл в каждый яичник, при этом инъекцию аутоплазмы осуществляют фракционно, с помощью пошаговой тракции иглы в проксимальном направлении, в четырёх точках яичника, объёмом не менее 0,5 мл аутоплазмы в каждую точку; выбирают зону введения аутоплазмы в яичник, расположенную на расстоянии не менее 5 мм от магистральных сосудов, при этом проводят визуальный контроль инъекции аутоплазмы с помощью технических средств диагностики.