Способ лечения женского бесплодия, заключающийся в повышении овариального резерва путем внутрияичникового введения тромбоцитарной аутоплазмы при лапароскопии Российский патент 2024 года по МПК A61B17/42 A61B17/94 A61K35/16 A61P15/08 

Способ лечения женского бесплодия, заключающийся в повышении овариального резерва путем внутрияичникового введения тромбоцитарной аутоплазмы при лапароскопии относится к медицине, а именно, к акушерству и гинекологии, и предназначено для лечения эндометриоз-ассоциированного бесплодия.

Известно большое количество способов лечения бесплодия, ассоциированного с заболеваниями эндометрия и яичников, является достаточно частой патологией у женщин репродуктивного возраста [1, 2].

В качестве одного из перспективных методов лечения данных состояний в последние годы рассматривается применение тромбоцитарной аутоплазмы (ТАП), которая готовиться из цельной крови пациента и дополнительно обогащается тромбоцитами, за счет чего насыщается факторами роста с высоким противовоспалительным и митогенным потенциалом [3, 4, 5, 6,].

Из уровня техники известен способ повышения эффективности вспомогательных репродуктивных технологий у пациенток с повторными неэффективными попытками имплантации (Патент RU 2669726 С1 опубликовано: 15.10.2018. Бюл. №29 МПК А61В 17/42, A61K 31/565, A61K 31/57, А61Р 15/08), заключающийся внутриматочном введении аутологичной обогащенной тромбоцитами плазмы крови, при подготовки эндометрия пациентки по стандартизованному протоколу заместительной гормональной терапии на фоне мониторинга роста эндометрия, на 10/11 день цикла после ультразвуковой оценки толщины эндометрия проводят внутриматочную перфузию 1,0-1,5 мл аутологичной плазмы крови, обогащенной тромбоцитами, с помощью инсеминационного катетера и при достижении необходимой толщины эндометрия производится перенос жизнеспособных эмбрионов.

Так же известен, способ внутриматочной инфузии аутологичной плазмы женщины для повышения эффективности программ вспомогательных репродуктивных технологий (Патент RU 276215 С1 опубликовано: 16.12.2021 Бюл. №35 МПК A61K 35/60; А61М 25/00; А61Р 15/08), заключающийся в том, что при достижении толщины эндометрия 7 мм и более назначают препарат прогестерона, дважды, при этом в первый и третий день приема препарата прогестерона вводят внутриматочно катетером для инсеминации в полость матки, не достигая маточного дна, приготовленную из цельной венозной крови женщины плазму, обогащенную тромбоцитами в объеме 0,8-1 мл.

Данные методики направлены на ремоделирование и рецептивность эндометрия к будущей имплантации эмбрионов, но не влияют на овариальный резерв.

Наиболее близким к предлагаемому изобретению является способ активации функции яичников при сниженном овариальном резерве (Патент RU 2759168 С1 опубликовано: 09.11.2021. Бюл. №31 МПК A61K 35/19, А61Р 15/08), заключающийся в трансвагинальном интраовариальном введении обогащенной тромбоцитами плазмы в яичниковую ткань при визуальным контроле инъекции при помощи ультразвукового исследования методом цветового доплеровского картирования или же при помощи рентгеноскопического исследования (ангиография).

Недостатками данного способа является:

1. Недостаточная визуализация яичника с целью определения точек инъекции для равномерного распределения тромбоцитарной аутоплазмы в мозговом слое яичника;

2. Высокий риск повреждения сосудов яичника при выполнении манипуляции и развития внутрибрюшного кровотечения в послеоперационном периоде;

3. Отсутствие возможности выполнить гемостаз при кровотечении из места инъекции или при повреждении яичниковых сосудов в момент введения аутоплазмы;

4. Негативное влияние на репродуктивную систему при применении рентгеноскопических методов визуализации (ангиографии).

При разработке предлагаемого способа была поставлена цель разработать эффективный и безопасный способ стимулирования функции яичников у пациенток с низким овариальным резервом.

Технический результат заключается в увеличении овариального резерва у пациентки с бесплодием, возможностью получения собственных ооцитов, улучшение показателей фолликулостимулирующего и антимюллерова гормонов, повышение частоты наступления спонтанной беременности и снижения риска внутрибрюшного кровотечения.

Технический результат достигается за счет того, что способ лечения женского бесплодия, заключающийся в повышении овариального резерва путем внутрияичникового введения тромбоцитарной аутоплазмы при лапароскопии, включает лапароскопический доступ, определение 3 точек для введения иглы для выполнения инъекции в мозговой слой яичника, введение тромбоцитарной аутоплазмы в точки инъекций общим объемом 3 мл в каждый яичник и контроль гемостаза.

Предложенный способ лечения женского бесплодия, заключающийся в повышении овариального резерва путем внутрияичникового введения тромбоцитарной аутоплазмы при лапароскопии выполняется следующим образом.

Предварительно перед оперативным вмешательством получают кровь из локтевой вены пациентки в объеме 10 мл, помещают в пробирку для центрифугирования, содержащие 20 а.е./мл антикоагулянта (эноксапарин). Центрифугирование осуществляют при 800-900G, на протяжении 10 минут. После центрифугирования из пробирки набирают тромбоцитарную аутоплазму необходимого объема в стерильный шприц.

В асептических условиях под наркозом в параумбиликальной точке вводят иглу Вереша, накладывают карбоксиперитонеум. В этой же точке вводится 10 мм оптический троакар. Вводят лапаропорты под контролем оптики: 5 мм троакар в правой подвздошной области и 5 мм в левой подвздошной области. Визуализируют правый и левый яичники. Определяют три точки введения тромбоцитарной аутоплазмы в 5-7 мм от магистральных сосудов в мозговой слой каждого яичника. Манипулятором фиксируют один из яичников и специальной иглой выполняют инъекции тромбоцитарной аутоплазмы в три точки по 1 мл в каждую. Со вторым яичником повторяют аналогичные манипуляции. Выполняют контроль гемостаза. Общий объем вводимой тромбоцитарной аутоплазмы составляет 3 мл в каждый яичник.

Предлагаемый способ лечения женского бесплодия, заключающийся в повышении овариального резерва путем внутрияичникового введения тромбоцитарной аутоплазмы при лапароскопии положительно влияет на показатели фолликулостимулирующего(ФСГ), антимюллерова гормонов (АМГ) в плазме крови женщин с эндометриоз-ассоциированным бесплодием, способствует увеличению количества антральных фолликулов при У3-исследовании и повышает частоту наступления беременности.

Данные результаты подтверждаются сравнительным исследованием клинической эффективности и безопасности предложенного способа у 82 пациенток с эндометриоидными кистами яичников и бесплодием, которые были рандомизированы в 2 группы:

группа 1 (основная) - 44 пациентки с эндометриоидными кистами и бесплодием, которым производилось внутрияичниковое введение ТАП интраоперационно после энуклеации эндометриоидной кисты;

группа 2 (сравнения) - 38 пациенток с эндометриозом и бесплодием, которым после энуклеации эндометриоидной кисты ТАП не вводилась в яичник.

Длительность наблюдения составила 1 год после лечения. В ходе исследования выполнялось комплексное обследование и лечение пациенток, а также оценка исходов лечения с анализом частоты наступления беременности. Сравнивали частоту наступления беременности в зависимости от подхода к ведению пациенток. В ходе обследования оценивали уровни ФСГ, АМГ, результаты УЗИ органов малого таза.

Исследование концентраций ФСГ, АМГ проводили в 1-ю фазу цикла (до лечения и через 1 месяц после включения в исследование). УЗИ органов малого таза выполняли на 11-12-й день менструального цикла с подсчетом количества антральных фолликулов.

Определение уровней ФСГ, АМГ в крови проводили на 2-5 день менструального цикла методом иммунохемилюминесцентного анализа с помощью автоматизированной системы Vitros 3600 («Johnson & Johnson», США).

Безопасность проводимого лечения оценивали по наличию и выраженности побочных эффектов и отклонений в лабораторных анализах.

Статистический анализ результатов исследования был выполнен с помощью пакетов программного обеспечения Statsoft. STATISTICA 10 и Microsoft Excel 2016.

Изобретение поясняется таблицами 1-4.

В табл. 1 представлена динамика уровня фолликулостимулирующего гормона у пациенток с эндометриозом и бесплодием. До начала лечения величины этого показателя у пациенток обеих групп достоверно не различались, однако после проведенного лечения наблюдалось значительное уменьшение (р<0,05) уровней ФСГ относительно исходных значений, при этом в группе женщин, которым осуществлялось внутрияичниковое введение ТАП, величина данного параметра была достоверно ниже (р<0,05), чем в группе сравнения.

В табл. 2 приведены уровни антимюллерова гормона у пациенток с эндометриозом и бесплодием. Установлено, что до лечения величины этого показателя у обследуемых женщин были практически на одном уровне, однако после проведенного лечения наблюдалось повышение уровней АМГ относительно исходных значений, при этом в основной группе величина данного параметра была статистически значимо выше (р<0,05), чем в группе сравнения (табл. 2).

Анализ показателей УЗИ показал их сопоставимость до лечения (табл. 3). Однако после проведенного лечения в группе 1, у пациенток, в лечении которых была использована ТАП, количество фолликулов и объем яичника были статистически значимо выше (р<0,05) соответствующих уровней этих показателей в группе 2.

В табл. 4 представлена частота наступления беременности у пациенток с эндометриозом и бесплодием в течение года после интраоперационного введения/отсутствия введения ТАП. В группе женщин, которым осуществлялось внутрияичниковое введение ТАП частота беременности составила 59,1% (26 случаев из 44), значение этого показателя было достоверно выше (р=0,025) соответствующей частоты наступления беременности в группе 2-34,2% (13 случаев из 38).

Анализ безопасности использованных методов лечения показал, что ни у кого из пациенток не отмечалось нежелательных явлений, связанных с применением ТАП, в том числе отклонений от референсных значений уровней лабораторных показателей анализов крови (общего и биохимического) и анализа мочи.

Предлагаемый способ лечения женского бесплодия, заключающийся в повышении овариального резерва путем внутрияичникового введения тромбоцитарной аутоплазмы при лапароскопии имеет ряд отличительных черт:

1) обеспечивает качественную визуализацию яичников и распределение точек введения тромбоцитарной аутоплазмы, что позволяет равномерно выполнить инъекции в мозговой слой яичника, увеличив объем и зону воздействия аутоплазмы на овариальный резерв;

2) снижает риск повреждения магистральных сосудов и внутренних органов;

3) интраоперационный контроль гемостаза после введения аутоплазмы из точек инъекции и возможность остановки кровотечения при необходимости;

4) внутрияичниковое введение тромбоцитарной аутоплазмы нормализует показатели фолликулостимулирующего, антимюллерова гормонов в плазме крови и способствует увеличению количества антральных фолликулов при У3-исследовании, повышая частоту наступления беременности.

Список использованных источников

1. Seckin S, Ramadan Н, Mouanness М, Kohansieh М, Merhi Z. Ovarian response to intraovarian platelet-rich plasma (PRP) administration: hypotheses and potential mechanisms of action. J Assist Reprod Genet. 2022; 39(1):37-61. doi: 10.1007/s10815-021-02385-w.

2. Herlihy NS, Seli E. The use of intraovarian injection of autologous platelet rich plasma (PRP) in patients with poor ovarian response and premature ovarian insufficiency. Curr Opin Obstet Gynecol. 2022; 34(3): 133-137. doi: 10.1097/GCO.0000000000000784.

3. Pacu I, Zygouropoulos N, Dimitriu M, Rosu G, Ionescu CA. Use of platelet-rich plasma in the treatment of infertility in poor responders in assisted human reproduction procedures. Exp Ther Med. 2021; 22(6): 1412. doi: 10.3892/etm.2021.10848.

4. Hajipour H, Nejabati HR, Latifi Z, Hamdi K, Bahrami-asl Z, Fattahi A, Nouri M. Lymphocytes immunotherapy for preserving pregnancy: mechanisms and challenges. Am J Reprod Immunol. 2018; 80: e12853. doi: 10.1111/aji.l2853.

5. Amable PR, Carias RBV, Teixeira MVT, da Cruz Pacheco I, Do Amaral RJFC, Granjeiro JM, Borojevic R. Platelet-rich plasma preparation for regenerative medicine: optimization and quantification of cytokines and growth factors. Stem Cell Res Ther. 2013; 4(3):67. doi: 10.1186/scrt218.

6. Opneja A, Kapoor S, Stavrou EX. Contribution of platelets, the coagulation and fibrinolytic systems to cutaneous wound healing. Thromb Res. 2019; 179:56-63. doi: 10.1016/j.thromres.2019.05.001.

Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии и репродуктологии. Осуществляют внутрияичниковое введение тромбоцитарной аутоплазмы при лапароскопии. При этом в асептических условиях под наркозом в параумбиликальной точке вводят иглу Вереша, накладывают карбоксиперитонеум. В этой же точке вводится 10-мм оптический троакар, устанавливают лапаропорты под контролем оптики: 5-мм троакар в правой подвздошной области и 5-мм - в левой подвздошной области, визуализируют правый и левый яичники. Определяют три точки введения тромбоцитарной аутоплазмы в 5-7 мм от магистральных сосудов в мозговой слой каждого яичника. Манипулятором фиксируют один из яичников и иглой выполняют инъекции тромбоцитарной аутоплазмы в три точки по 1 мл в каждую. Со вторым яичником повторяют аналогичные манипуляции. Выполняют контроль гемостаза. Общий объем вводимой тромбоцитарной аутоплазмы составляет 3 мл в каждый яичник. Способ обеспечивает качественную визуализацию яичников и распределение точек введения тромбоцитарной аутоплазмы, что позволяет равномерно выполнить инъекции в мозговой слой яичника, увеличив объем и зону воздействия аутоплазмы на овариальный резерв; снижает риск повреждения магистральных сосудов и внутренних органов; позволяет осуществить интраоперационный контроль гемостаза после введения аутоплазмы из точек инъекции и возможность остановки кровотечения при необходимости; нормализует показатели фолликулостимулирующего, антимюллерова гормонов в плазме крови и способствует увеличению количества антральных фолликулов при У3-исследовании, повышая частоту наступления беременности. 4 табл.

Способ лечения женского бесплодия, заключающийся во внутрияичниковом введении тромбоцитарной аутоплазмы при лапароскопии, отличающийся тем, что в асептических условиях под наркозом в параумбиликальной точке вводят иглу Вереша, накладывают карбоксиперитонеум; в этой же точке вводится 10-мм оптический троакар, устанавливают лапаропорты под контролем оптики: 5-мм троакар в правой подвздошной области и 5-мм - в левой подвздошной области, визуализируют правый и левый яичники; определяют три точки введения тромбоцитарной аутоплазмы в 5-7 мм от магистральных сосудов в мозговой слой каждого яичника; манипулятором фиксируют один из яичников и иглой выполняют инъекции тромбоцитарной аутоплазмы в три точки по 1 мл в каждую; со вторым яичником повторяют аналогичные манипуляции; выполняют контроль гемостаза; общий объем вводимой тромбоцитарной аутоплазмы составляет 3 мл в каждый яичник.