Способ лечения катарального мастита у коров Российский патент 2022 года по МПК A61K31/381 A61K31/424 A61K35/66 A61P15/14 

Изобретение относится к области ветеринарии и может быть использовано для лечения мастита у коров.

Мастит - воспаление молочной железы, которое возникает в ответ на влияние неблагоприятных эндогенных и экзогенных факторов. Из внешних факторов наиболее распространены механические, возникающие из-за нарушений технологии и правил машинного доения. Воспалительный процесс в молочной железе также может возникнуть в результате физического или химического воздействия. Эндогенные факторы включают в себя особенности физиологического состояния животного, его молочной железы, состояние общих неспецифических и локальных механизмов защиты вымени.

При нарушениях технологии доения мастит у коров чаще всего начинается в виде асептического воспаления. В последующем, на фоне возникших повреждений, развивается септический процесс с участием микрофлоры. Формирование патологической реакции в молочной железе у коров, переходящей в клинически выраженное воспаление или протекающей скрыто на протяжении лактации, вызывает атрофию долей вымени, что отражается на продуктивности животных [Слободяник В.И, Климов Н.Т, Ческидова Л.В, Зверев Е.В. Иммунологические аспекты борьбы с маститом коров. Воронеж: Изд-во «Истоки», 2012. 222 с.].

Возникновение и характер течения мастита зависит от первоначального этиологического фактора, своевременности и эффективности лечения. В качестве этиотропной терапии часто применяют химиотерапевтические препараты с антимикробной активностью. В связи с резистентностью к антибиотикам основных возбудителей мастита (Staphylococcus sp., Streptococcus sp., E.coli и др.) лечение противомикробными препаратами может оказаться неэффективным, что требует поиска новых подходов к применению уже имеющихся лекарственных средств.

В частности, протеиназы способны лизировать продукты воспалительной реакции и распада поврежденных клеток, разжижать вязкие экссудаты и расщеплять некротизированные ткани, что облегчает проникновение антибактериальных компонентов в очаг поражения в молочной железе и способствует быстрому восстановлению функционирования вымени [Попова Е.А., Крейер В.Г., Комаревцев С.К., Шабунин С.В., Осмоловский А.А. Свойства внеклеточной протеиназы микромицета Aspergillus ustus 1, обладающей высокой активностью при гидролизе фибриллярных белков // Прикладная биохимия и микробиология. 2021. Т. 57. №2. С. 138-144].

Наиболее эффективными являются ферменты, синтезируемые микроорганизмами, в том числе, микромицетами. В последнее время ведется активный поиск аспергиллов, продуцирующих высокоспецифичные фибринолитические ферменты, которые можно использовать на практике. К новым продуцентам относится протеиназа - активатор протеина С плазмы крови, выделенная из культуральной жидкости A. ochraceus ВКМ F4104D, и обладающая высокой биологической активностью и противовоспалительным действием и ряд других ферментов [Осмоловский А.А., Крайер В.Г., Баранова Н.А., Кураков А.В., Егоров Н.С. Свойства внеклеточной протеиназы - активатора протеина С плазмы крови, образуемой микромицетом Aspergillus ochraceus // Прикладная биохимия и микробиология. 2015. Том 51. №1. С. 86-92].

Известен способ лечения мастита у коров с использованием препарата «Мастизим» («Белэкотехника», Республика Беларусь; регистрационный номер №5457-10-16 БПХ-Ф от 01.08.16), который представляет собой суспензию для интрацистернального введения (8,0 г) и содержит в составе в качестве действующих компонентов витамины А и Е, а также протеолитические ферменты химотрипсин, трипсин и папаин. При мастите препарат вводят 4-6 раз с интервалом 12 часов.

Недостатком данного способа лечения является то, что «Мастизим» содержит только ферменты и витамины, в результате чего при развитии гнойного и гнойно-катарального мастита, необходимо дополнительное введение в схему лечения антимикробных препаратов широкого спектра действия. При этом «Мастизим» вводят интрацистернально 2-4 раза с интервалом 12 часов, а затем - антибактериальные средства, что увеличивает срок лечения на 1-2 дня.

Известен способ лечения мастита у коров с использованием препарата Амоксигард^® («Нита-Фарм», Россия; регистрационное удостоверение 3-7.14-3325 № ПВИ-3-7.14/03044), который представляет собой суспензию для инъекций и содержит в составе в качестве действующих компонентов амоксициллин и клавулановую кислоту. Препарат вводят внутримышечно в дозе 1 мл/20 кг живой массы в течение 3-5 дней с интервалом 24 часа.

Недостатком данного способа лечения является то, что Амоксигард^® содержит только антимикробные компоненты, что снижает эффективность лечения. Молоко дойных коров разрешается использовать в пищевых целях через 108 часов после последнего применения препарата, а убой скота на мясо - через 42 дня. В связи с тем, что в рекомендуемой терапевтической дозе требуется внутримышечное введение больших объемов Амоксигарда^® (приблизительно 25 мл на животное), необходимо инъецирование, препарата в несколько разных мест.

Известен способ лечения мастита у коров с использованием препарата Мастивекс («S.P. Veterinaria, S.A.», Испания; регистрационное удостоверение 724-3-21.13-1536 № ПВИ-3-4.9/00208), который представляет собой суспензию для интрацистернального введения (10 г) и содержит в составе в качестве действующих компонентов клоксациллин, неомицин, сульфадимидин и химотрипсин. Препарат вводят 3-5-кратно с интервалом 12 часов.

Недостатком данного способа лечения является то, что Мастивекс вводят интрацистеранально в дозе 10,0 г, что за счет большого объема может вызывать раздражение вымени. При этом, молоко дойных коров разрешается использовать в пищевых целях через 96 часов после последнего применения препарата, а убой скота на мясо - через 7 суток.

Наиболее близким техническим решением, принятым за прототип, является способ лечения мастита у коров с использованием препарата Нороклав IMM LC («Norbrook Laboratories Limited», Великобритания; регистрационное удостоверение 826-3-2.16-3054 № ПВИ-3-7.0/03306), который представляет собой суспензию для интрацистернального введения и содержит в составе амоксициллин, клавулановую кислоту, преднизолон и вспомогательные вещества. Препарат вводят трехкратно в дозе 3,0 г с интервалом 12 часов. В пищевых целях молоко разрешается использовать через 60 часов после последнего применения Нороклава IMM LC, а убой животных на мясо - через 7 суток.

Недостатком данного способа лечения является то, что Нороклав IMM LC не содержит компонентов, облегчающих проникновение антибактериальных веществ в пораженные ткани вымени за счет расщепления продуктов воспаления, что снижает эффективность лечения.

Технический результат изобретения - повышение эффективности антимикробной терапии больных маститом коров.

Для достижения технического результата в способе лечения катарального мастита у коров, включающем интрацистернальное введение комплексного антимикробного препарата Нороклав IMM LC в дозе 3 г трехкратно с интервалом 12 часов, согласно изобретению, дополнительно за 12 часов до применения Нороклава IMM LC интрацистернально однократно вводят препарат с протеиназами микромицета Aspergillus ochraceus BKM F-4104D в дозе 5 мл.

Препарат с рабочим названием ПАО-1, разработанный во ФГБНУ «ВНИВИПФиТ», в качестве действующего вещества содержит фермент протеиназу, выделенную из культуральной жидкости микромицета Aspergillus ochraceus ВКМ F-4104D, представляющую собой негликозилированный белок сериновую протеиназу с изоэлектрической точкой 6,0, молекулярной массой около 33 кДа и оптимумом активности при рН 8,0-9,0 и 37°C, обладающую казеинолитической, фибринолитической, фибриногенолитической и активаторной к протеину С активностью [Осмоловский, А.А., Звонарева Е.С., Крейер В.Г., Баранова Н.А., Егоров Н.С. // Биоорганическая химия. 2014. Т. 40, №6, С. 688-694]. Препарат ПАО-1 по внешнему виду представляет собой суспензию, расфасованную в шприц-тюбики для интрацистернального введения.

Терапевтическая эффективность способа подтверждена для катаральной формы мастита примерами.

Пример 1. Изучение эффективности способа лечения катарального мастита у коров.

Исследования выполнены на 21 корове черно-пестрой породы с катаральным маститом. Всем животным интрацистернально вводили противомаститный препарат Нороклав IMM LC («Norbrook Laboratories Limited», Великобритания) трехкратно с интервалом 12 часов. Животным второй группы дополнительно за 12 часов до применения Нороклава IMM LC однократно интрацистернально вводили препарат с протеиназами микромицета Aspergillus ochraceus ВКМ F-4104D (рабочее название ПАО-1). Состояние молочной железы оценивали до лечения, сразу после окончания введения препаратов и через 7 дней.

Эффективность применения антимикробного препарата и ПАО-1 в комплексном лечении больных катаральным маститом коров представлена в таблице 1.

Из представленных в таблице 1 данных следует, что при применении только антимикробного препарата Нороклав IMM LC выздоровело 80,0% животных, при этом излечено 83,3% долей вымени. Наилучший терапевтический эффект получен при совместном применении антимикробного препарата и ПАО-1 - 90,9%, при этом излечено 92,9% долей вымени. Проведенные клинические испытания экспериментального препарата с протеиназами микромицета Aspergillus ochraceus в комплексной терапии мастита у коров показали его высокую лечебную эффективность. Дополнительное применение ПАО-1 повысило терапевтический эффект на 10,9%.

Положительное влияние комплексного способа лечения, включающего применение антимикробного препарата и ПАО-1, подтверждается данными гематологических и биохимических исследований.

Пример 2. Влияние применения антимикробного препарата Нороклав IMM LC и ПАО-1 на гематологические показатели и белковый обмен при лечении больных катаральным маститом коров.

Исследования выполнены на 21 корове черно-пестрой породы с катаральным маститом. Всем животным интрацистернально вводили противомаститный препарат Нороклав IMM LC трехкратно с интервалом 12 часов. Животным второй группы (n=11) дополнительно за 12 часов до применения Нороклава IMM LC однократно интрацистернально вводили препарат с протеиназами микромицета Aspergillus ochraceus ВКМ F-4104D (рабочее название ПАО-1). Кровь для исследований брали до и после лечения из хвостовой вены утром до кормления.

Влияние применения антимикробного препарата и ПАО-1 на биохимические показатели крови коров до и после лечения катарального мастита представлены в таблице 2.

В процессе выздоровления коров, подвергшихся терапии с применением антимикробного средства Нороклав IMM LC, установлено достоверное снижение активности АлАТ на 28,7% (р<0,005) и АсАТ - на 17,6% (р<0,05), тенденция уменьшения содержания γ-глобулинов на 10,0% и креатинина - на 9,9%, а также активности ЩФ - на 10,4% и γГТ - на 8,9%.

Более выраженные изменения отмечены в крови животных, которым дополнительно применяли ПАО-1: повышение уровня альбуминов на 15,7% (р<0,05) и α-глобулинов - на 14,0% (р<0,01), при снижении содержания γ-глобулинов на 24,4% (р<0,002), креатинина - на 29,2% (р<0,002), активности ЩФ - на 15,9% (р<0,05), АсАТ - на 27,9% (р<0,002), АлАТ - на 33,2% (р<0,001) и γГТ - на 24,1% (р<0,01). Выявленные изменения свидетельствуют о более интенсивном уменьшении воспалительной реакции в организме коров при выздоровлении, что в результате способствует оптимизации белкового обмена и снижению нагрузки на органы детоксикации (печень, почки).

Пример 3. Влияние применения антимикробного препарата Нороклав IMM LC и ПАО-1 на минеральный и витаминный обмен при лечении больных катаральным маститом коров.

Исследования выполнены на 21 корове черно-пестрой породы с катаральным маститом. Всем животным интрацистернально вводили противомаститный препарат Нороклав IMM LC трехкратно с интервалом 12 часов. Животным второй группы (n=11) дополнительно за 12 часов до применения Нороклава IMM LC однократно интрацистернально вводили препарат с протеиназами микромицета Aspergillus ochraceus BKM F-4104D (рабочее название ПАО-1). Кровь для исследований брали до и после лечения из хвостовой вены утром до кормления.

Влияние применения антимикробного препарата и ПАО-1 на показатели витаминного и минерального обмена коров до и после лечения представлены в таблице 3.

В процессе выздоровления коров, подвергшихся терапии с применением антимикробного средства Нороклав IMM LC, установлено повышение витамина А на 23,7% (р<0,05), витаминов Е и С - на 14,6% и на 11,0% соответственно, а также селена - на 11,7%.

Более выраженные изменения отмечены в крови животных, которым дополнительно применяли ПАО-1: повышение содержания селена - на 32,3% (р<0,002), цинка - на 19,6% (р<0,05), марганца - на 17,7% (р<0,05), меди - на 15,2% (р<0,05), а также витаминов С, А и Е - на 39,2% (р<0,02), на 36,8% (р<0,01) и на 32,8%о (р<0,05) соответственно. Выявленные изменения свидетельствуют о снижении воспалительной реакции в организме коров при выздоровлении и оптимизации показателей витаминно-минерального обмена.

Таким образом, заявленный способ лечения мастита у коров, включающий интрацистернальное введение антимикробного препарата и препарата с протеиназами микромицета Aspergillus ochraceus BKM F-4104D, обладает высокой терапевтической эффективностью. Протеиназы способствуют повышению эффективности этиотропной терапии за счет способности утилизировать продукты воспаления и улучшать трофику тканей. Клиническое выздоровление коров после окончания лечения подтверждается нормализацией биохимических показателей крови. Данный способ может быть широко использован в производственных условиях животноводческих хозяйств при лечении мастита у коров.

Изобретение относится к области ветеринарии и может быть использовано для лечения мастита у коров. Выполняют интрацистернальное введение комплексного антимикробного препарата Нороклав IMM LC в дозе 3 г трехкратно с интервалом 12 часов. При этом дополнительно за 12 часов до применения Нороклава IMM LC интрацистернально однократно вводят препарат с протеиназами микромицета Aspergillus ochraceus ВКМ F-4104D в дозе 5 мл. Изобретение повышает эффективность антимикробной терапии больных маститом коров. 3 табл., 3 пр.

Способ лечения катарального мастита у коров, включающий интрацистернальное введение комплексного антимикробного препарата Нороклав IMM LC в дозе 3 г трехкратно с интервалом 12 часов, отличающийся тем, что дополнительно за 12 часов до применения Нороклава IMM LC интрацистернально однократно вводят препарат с протеиназами микромицета Aspergillus ochraceus ВКМ F-4104D в дозе 5 мл.