НОВЫЕ ИНГИБИТОРЫ BRAF И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ КОЖНЫХ РЕАКЦИЙ Российский патент 2022 года по МПК C07D473/00 A61K31/52 A61P17/00 A61P17/10 

Ссылка на родственные заявки

Согласно настоящей заявке испрашивается приоритет по заявке на выдачу патента США №62/538675, поданной 29 июля 2017 года, полное содержание которой тем самым включено в настоящий документ посредством ссылки в полном объеме.

Область техники

Настоящее изобретение относится к ингибиторам серин/треонин-протеинкиназы В-Raf (далее в настоящем документе «В-Raf» или «BRaf»), композициям и их применениям.

Предшествующий уровень техники

Аномальная активация рецептора эпидермального фактора роста (EGFR) вовлечена в различные заболевания, в частности, в некоторые виды злокачественных опухолей, такие как рак легкого, колоректальный рак, рак головы и шеи и рак поджелудочной железы. Антагонисты EGFR, такие как моноклональные антитела (например, цетуксимаб, панитумумаб) и низкомолекулярные ингибиторы тирозинкиназы (например, гефитиниб, эрлотиниб, лапатиниб), используют для лечения многих опосредованных EGFR злокачественных опухолей. Хотя эти антагонисты EGFR применимы при лечении злокачественной опухоли, они также связаны с серьезными побочными эффектами. Одним из таких побочных эффектов антагонистов EGFR являются кожные реакции. Кожные побочные реакции на ингибиторы EGFR включают угревую (папуло-пустулярную) сыпь, аномальный рост волос на волосистой части головы, на лице и/или рост ресниц, паронихию с пиококковыми гранулемами или без таковых и телеангиэктазию.

Различные киназы, такие как фосфатидилинозитол-3-киназы (PI 3-киназы), митоген-активируемые протеинкиназы (MAPK) и киназы, вышележащие по отношению к MAPK, такие как MEK и MKK, действуют как нижележащие эффекторы EGFR и многих других рецепторных тирозинкиназ и вовлечены в клеточные функции, такие как рост клеток, пролиферация, дифференцировка, подвижность, выживание и внутриклеточная миграция. Терапевтические средства, которые нацелены на эти пути, также используют при лечении ряда пролиферативных заболеваний, таких как меланома, рак легкого, колоректальный рак, рак головного мозга, множественная миелома, рак поджелудочной железы и нейрофиброматоз. Иллюстративные терапевтические средства, которые нацелены на эти пути, включают ингибиторы киназы, такие как траметиниб и кобиметиниб. Однако ингибиторы этих киназ также связаны с неблагоприятными побочными эффектами. Например, сообщалось о кожных побочных эффектах, вызванных ингибиторами MEK, и они включают угревую (папуло-пустулярную) сыпь, аномальный рост волос на волосистой части головы, на лице и/или рост ресниц, паронихию с пиококковыми гранулемами или без таковых и телеангиэктазию.

BRaf представляет собой протеинкиназу, участвующую в регуляции сигнального пути митоген-активируемой протеинкиназы (MAPK). Мутации в BRaf могут индуцировать конститутивную передачу сигнала через путь MAPK, что может привести к неконтролируемой пролиферации клеток. Было установлено, что использование ингибиторов BRaf связано с ингибированием передачи сигнала MAPK, что можно определить по снижению уровней фосфорилированного ERK, который является нижележащим эффектором BRaf. Тем не менее, было обнаружено, что ингибиторы BRaf могут парадоксальным образом индуцировать противоположный эффект активации передачи сигнала MAPK в клетках BRaf дикого типа (что определяется повышенными уровнями фосфорилированного ERK). Основные механизмы парадоксальной активации MAPK объясняли димеризацией BRaf и c-Raf дикого типа и трансактивацией неингибированного белка Raf, что приводит к последующей активации пути MAPK.

Несмотря на лежащий(ие) в основе механизм(ы), вызывающий(ие) кожные побочные реакции, эти побочные реакции являются серьезным недостатком лечения ингибиторами EGFR, PI3K и/или MEK и могут привести к прекращению лечения и/или плохому соблюдению пациентом режима лечения.

Carnahan J. et al. (Mol. Cancer Ther. 9(8) August 2010) обнаружили, что селективные и мощные ингибиторы Raf могут парадоксальным образом стимулировать нормальную пролиферацию клеток. Ряд перорально биодоступных ингибиторов киназы, раскрытых в Smith A.L. et al., J. Med. Chem. 2009, 52, 6189-6192, демонстрировали сильную биохимическую активность. Например, соединение 1 серии (С-1) показало значительную активность (^WTB-Raf Ki=1 нмоль/л, V600EB-Raf Ki=1 нмоль/л и C-Raf Ki=0,3 нмоль/л).

Carnahan et el. обнаружили, что в клетках с B-Raf дикого типа и мутировавшим K-ras воздействие ингибиторов Raf приводит к дозозависимой и устойчивой парадоксальной активации передачи сигнала митоген-активируемой протеинкиназы (MAPK). Ингибирование Raf приводило к вступлению в клеточный цикл и усилению пролиферации.

N. Shelach показал в находящейся на рассмотрении заявке на выдачу патента № PCT/IL 2017/050301 под названием «Применение ингибиторов BRaf для лечения кожных реакций», что эту парадоксальную активацию MAPK можно использовать для лечения кожных побочных реакций, вызванных лечением ингибиторами EGFR или PI3K.

В данной области техники сохраняется потребность в разработке новых терапевтических соединений, композиций и способов лечения для облегчения вышеупомянутых кожных побочных реакций, связанных с введением ингибиторов EGFR, ингибиторов PI3K, ингибиторов MEK или их комбинаций.

Сущность изобретения

Настоящее изобретение относится к ингибиторам BRaf формул (I), (II) и (III), раскрытых в настоящем документе. Настоящее изобретение также относится к композициям, включающим соединения формул (I), (II) и (III), а также к способам лечения дерматологических побочных реакций, индуцированных химиотерапевтическими средствами, такими как ингибиторы EGFR, ингибиторы PI3K, ингибиторы MEK или их комбинации, с использованием соединений и композиций в соответствии с настоящим раскрытием.

Краткое описание чертежей

На Фиг. 1А - 1D показано фосфорилирование ERK, индуцированное в клетках HEKa соединениями LUT014, LUT015 и LUT017. На Фиг. 1А показаны фосфо-ERK (верхняя панель) и суммарная ERK (нижняя панель) при обработке 0,3 мкМ тестируемых соединений. На Фиг. 1В показан денситометрический анализ блотов, представленных на Фиг. 1А на основании вычисления отношения фосфо-ERK/суммарная ERK. На Фиг. 1С показаны фосфо-ERK (верхняя панель) и суммарная ERK (нижняя панель) при обработке с помощью 1 мкМ тестируемых соединений. На Фиг. 1D показан денситометрический анализ блотов на Фиг. 1С на основании вычисления отношения фосфо-ERK/суммарная ERK.

На Фиг. 2А - 2D показано фосфорилирование ERK, индуцированное в клетках HEKa соединениями LUT012, LUT016 и С-1. На Фиг. 2А показаны фосфо-ERK (верхняя панель) и суммарная ERK (нижняя панель) при обработке с помощью 0,3 мкМ тестируемых соединений. На Фиг. 2В показан денситометрический анализ блотов, представленных на Фиг. 2А на основании вычисления отношения фосфо-ERK/суммарная ERK. На Фиг. 2С показаны фосфо-ERK (верхняя панель) и суммарная ERK (нижняя панель) при обработке с помощью 1 мкМ тестируемых соединений. На Фиг. 2D показан денситометрический анализ блотов, представленных на Фиг. 2С на основании вычисления отношения фосфо-ERK/суммарная ERK.

На Фиг. 3А - 3D показано фосфорилирование ERK, индуцированное в клетках HEKa соединениями LUT012, LUT013, LUT014, LUT015, LUT016, LUT017, LUT020 и С-1. На Фиг. 3А показаны фосфо-ERK (верхняя панель) и суммарная ERK (нижняя панель) при обработке с помощью 0,3 мкМ тестируемых соединений. На Фиг. 3В показаны фосфо-ERK (верхняя панель) и суммарная ERK (нижняя панель) при обработке с помощью 1 мкМ тестируемых соединений. На Фиг. 3С показан денситометрический анализ блотов, представленных на Фиг. 3А на основании вычисления отношения фосфо-EPK/суммарная ERK. На Фиг. 3D показан денситометрический анализ блотов, представленных на Фиг. 3В на основании вычисления отношения фосфо-ЕРХ/суммарная ERK.

На Фиг. 4А и 4В показано фосфорилирование ERK, индуцированное в клетках HEKa соединениями LUT014, LUT017 и С-1. На Фиг. 4А показаны фосфо-ERK (верхняя панель) и суммарная ERK (нижняя панель) при обработке с помощью 0,003 мкМ, 0,03 мкМ и 0,3 мкМ тестируемых соединений. На Фиг. 4В показан денситометрический анализ блотов, представленных на Фиг. 4А на основании вычисления отношения фосфо-ERK/суммарная ERK.

На Фиг. 5А - 5J показаны эффекты соединений С-1 (Фиг. 5A), LUT-012 (Фиг. 5В), LUT-014 (Фиг. 5С), вемурафениба (Фиг. 5D), LUT-013 (Фиг. 5Е), LUT-015 (Фиг. 5F), LUT-016 (Фиг. 5G), LUT-019 (Фиг. 5Н), LUT-017 (Фиг. 51) и LUT-020 (Фиг. 5J) в отношении пролиферации клеток MIA РаСа.

На Фиг. 6 представлена блок-схема улучшенного процесса синтеза в увеличенном масштабе для получения LUT014 (C17071479-F).

На Фиг. 7А - 7С показан эффект LU014 в отношении фосфо-ERK после введения EGFR (in vitro результаты). На Фиг. 7А показана фосфо-ERK, а на Фиг. 7В показана суммарная ERK при обработке тестируемыми соединениями. На Фиг. 7С показан денситометрический анализ блотов, представленных на Фиг. 7А и 7В на основании вычисления отношения фосфо-ERK/суммарная ERK.

Подробное раскрытие настоящего изобретения

В настоящем документе представлены соединения формул (I), (II) и (III) и содержащие их композиции. Также представлены способы лечения кожных побочных реакций с использованием соединений и композиций в соответствии с настоящим раскрытием.

Соединения

Согласно одному варианту в настоящем документе представлено соединение формулы (I):

в которой R выбран из группы, состоящей из 3-этинилфенила, 3-хлор-4-фторфенила, 2-фтор-4-йодфенила, 4-хлор-3-(трифторметил)фенила, 3-(1,1-диметилэтил)-1-метил-1Н-пиразол-5-ила, 3-(трифторметокси)фенила, 3,5-дигидроксифенила или фенил-3-сульфонамида, или его фармацевтически приемлемая соль или сольват.

Согласно другому варианту в настоящем документе представлено соединение формулы (II):

В которой R представляет собой NHR¹, при этом R¹ представляет собой 2-фтор-4-йодфенил, или его фармацевтически приемлемая соль или сольват.

Согласно другому варианту в настоящем документе представлено соединение формулы (III):

в которой R представляет собой NHR¹, при этом R¹ представляет собой 3-этинилфенил, 3-хлор-4-фторфенил, 2-фтор-4-йодфенил или 4-хлор-3-(трифторметил)фенил, или его фармацевтически приемлемая соль или сольват.

Согласно одному варианту соединения в соответствии с настоящим раскрытием ингибируют активность BRaf. Согласно одному варианту соединения в соответствии с настоящим раскрытием могут характеризоваться IC₅₀ по отношению к BRaf от приблизительно 0,5×10^-8 М до приблизительно 5×10^-8 М, от приблизительно 1×10^-8 М до приблизительно 5×10^-8 М, от приблизительно 1×10^-8 М до приблизительно 3,5×10^-8 М или от приблизительно 1×10^-8 М до приблизительно 3×10^-8 М.

Согласно одному варианту соединения в соответствии с настоящим раскрытием усиливают активность митоген-активируемых протеинкиназ (MAPK).

Согласно одному варианту соединения в соответствии с настоящим раскрытием усиливают активность MAPK и одновременно ингибируют активность BRaf.

Согласно одному варианту активность MAPK определяют путем измерения фосфорилирования регулируемой внеклеточными сигналами киназы (ERK) и вычисления отношения фосфо-ERK к суммарной ERK.

Согласно одному варианту соединения в соответствии с настоящим раскрытием повышают отношение фосфо-ERK к суммарной ERK по меньшей мере в приблизительно 1,025 раза, 1,05 раза, 1,10 раза, 1,15 раза, 1,20 раза, 1,25 раза, 1,30 раза, 1,35 раза, 1,40 раза, 1,45 раза, 1,5 раза, 1,6 раза, 1,7 раза, 1,8 раза, 2 раза, 2,25 раза, 2,5 раза, 2,75 раза, 3 раза, 3,25 раза, 3,5 раза, 3,75 раза, 4 раза, 4,25 раза, 4,5 раза, 4,75 раза, 5 раз, 5,25 раза, 5,50 раза, 5,75 раза, 6 раз, 6,25 раза, 6,50 раза, 6,75 раза, 7 раз, 7,25 раза, 7,5 раза, 8 раз, 8,5 раза, 9 раз, 9,5 раза, 10 раз, 15 раз, 20 раз, 25 раз, 30 раз, 40 раз, 50 раз, 75 раз, 100 раз, 150 раз или в приблизительно 200 раз, включая значения и диапазоны между ними, по сравнению с необработанными или обработанными контролем клетками.

Согласно одному варианту соединения в соответствии с настоящим раскрытием повышают отношение фосфо-ERK к суммарной ERK в от приблизительно 1,5 раза до приблизительно 50 раз, от приблизительно 1,5 раза до приблизительно 25 раз, от 1,5 раза до приблизительно 20 раз, от приблизительно 1,5 раза до приблизительно 15 раз, от приблизительно 2,5 раза до приблизительно 15 раз, от приблизительно 2,5 раза до приблизительно 10 раз, от приблизительно 3 раз до приблизительно 20 раз, от приблизительно 3 раз до приблизительно 15 раз, от приблизительно 4 раз до приблизительно 20 раз, от приблизительно 4 раз до приблизительно 15 раз, от приблизительно 4 раз до приблизительно 10 раз, от приблизительно 5 раз до приблизительно 20 раз, от приблизительно 5 раз до приблизительно 15 раз, включая значения и диапазоны между ними, по сравнению с необработанными или обработанными контролем клетками.

Согласно одному варианту соединения в соответствии с настоящим раскрытием повышают содержание фосфо-ERK относительно суммарной ERK по меньшей мере на приблизительно 2,5%, 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 100%, 125%, 150%, 175%, 200%, 225%, 250%, 275%, 300%, 325%, 350%, 375% 400%, 425%, 450%, 475%, 500%, 550%, 600%, 650%, 700%, 750%, 800%, 850%, 900%, 950%, 1000%, 1100%, 1200%, 1300%, 1400%, 1500%, 1600%, 1700%, 1800%, 1900%, 2000%, 2250%, 2500%, 2750%, 3000%, 3250%, 3500%, 4000%, 4500%, 4750%, 5000%, 5500%, 6000%, 6500%, 7000%, 7500%, 8000%, 9000% или 10000%, включая значения и диапазоны между ними, по сравнению с необработанными или обработанными контролем клетками.

Согласно одному варианту соединения в соответствии с настоящим раскрытием не демонстрируют фототоксичность или демонстрируют пониженную фототоксичность. Уровень фототоксичности может быть определен путем измерения фактора фотораздражения (PIF) или среднего фотоэффекта (МРЕ).

Согласно одному варианту PIF может быть вычислен с использованием следующей формулы: PIF=IC₅₀(-Irr)/IC₅₀(+Irr), при этом PIF>5 указывает на фототоксичность; 2<PIF<5 указывает на вероятную фототоксичность; PIF<2 указывает на отсутствие фототоксичности. Согласно одному варианту соединения в соответствии с настоящим раскрытием характеризуются PIF менее 5. Согласно другому варианту соединения в соответствии с настоящим раскрытием характеризуются PIF менее 2.

Согласно одному варианту МРЕ может быть вычислен путем сравнения полных кривых концентрация-ответ. МРЕ представляет собой средневзвешенное значение разницы в ответе на эквивалентные дозы, нормализованные по сдвигу в IC₅₀. МРЕ>0,15 указывает на фототоксичность; 0,1<МРЕ<0,15 указывает на вероятную фототоксичность; МРЕ<0,1 указывает на отсутствие фототоксичности. Согласно одному варианту соединения в соответствии с настоящим раскрытием характеризуются МРЕ менее 0,15. Согласно другому варианту соединения в соответствии с настоящим раскрытием характеризуются МРЕ менее 0,1.

Композиции

Согласно одному варианту в настоящем документе представлены фармацевтические композиции, включающие соединение формулы (I):

в которой R выбран из группы, состоящей из п-хлорфенила, 3-этинилфенила, 3-хлор-4-фторфенила, 2-фтор-4-йодфенила, 4-хлор-3-(трифторметил)фенила, 3-(1,1-диметилэтил)-1-метил-1Н-пиразол-5-ила, 3-(трифторметокси)фенила, 3,5-дигидроксифенила, фенил-3-сульфонамида или 3-(трифторметил)фенила, или его фармацевтически приемлемые соль или сольват, или их комбинацию и фармацевтически приемлемые носитель или эксципиент.

Согласно одному варианту в настоящем документе представлены фармацевтические композиции, включающие соединение формулы (II) или (III), или его фармацевтически приемлемые соль или сольват и фармацевтически приемлемые носитель или эксципиент.

Согласно другому варианту в настоящем документе представлены фармацевтические композиции, включающие соединение формул (I), (II) или (III), или его фармацевтически приемлемые соль или сольват, или их комбинацию и фармацевтически приемлемые носитель или эксципиент.

Согласно одному варианту фармацевтическая композиция может включать от приблизительно 1 мас. % до приблизительно 5 мас. % соединения формул (I), (II) или (III) или его фармацевтически приемлемых соли или сольвата, или их комбинации от общей массы композиции. Например, фармацевтическая композиция может включать приблизительно 1%, 1,1%, 1,2%, 1,3%, 1,4%, 1,5%, 1,6%, 1,7%, 1,8%, 1,9%, 2,0%, 2,1%, 2,2%, 2,3%, 2,4%, 2,5%, 2,6%, 2,7%, 2,8%, 2,9%, 3,0%, 3,1%, 3,2%, 3,3%, 3,4%, 3,5%, 3,6%, 3,7%, 3,8%, 3,9%, 4%, 4,1%, 4,2%, 4,3%, 4,4%, 4,5%, 4,6%, 4,7%, 4,8%, 4,9% или 5 мас. %, включая значения и диапазоны между ними, любого из соединений, раскрытых в настоящем документе. Согласно некоторым вариантам фармацевтическая композиция может включать от приблизительно 1% до приблизительно 3%, от приблизительно 1% до приблизительно 4%, от приблизительно 1,5% до приблизительно 5%, от приблизительно 1,5% до приблизительно 4,5%, от приблизительно 1,5% до 3,5%, от приблизительно 1,5% до приблизительно 3%, от приблизительно 2% до приблизительно 5%, от приблизительно 2% до приблизительно 4,5%, от приблизительно 2% до приблизительно 4%, от приблизительно 2,5% до приблизительно 5%, от приблизительно 2,5% до приблизительно 4,5%, от приблизительно 2,5% до приблизительно 4%, от приблизительно 3% до приблизительно 5%, от приблизительно 3,5% до приблизительно 5 мас. %, включая значения и диапазоны между ними, любого из соединений, раскрытых в настоящем документе.

Согласно одному варианту фармацевтическая композиция может включать от приблизительно 5 мас. % до приблизительно 10 мас. % соединения формул (I), (II) или (III) или его фармацевтически приемлемых соли или сольвата, или их комбинации от общей массы композиции. Например, фармацевтическая композиция может включать приблизительно 5%, 5,1%, 5,2%, 5,3%, 5,4%, 5,5%, 5,6%, 5,7%, 5,8%, 5,9%, 6%, 6,1%, 6,2%, 6,3%, 6,4%, 6,5%, 6,6%, 6,7%, 6,8%, 6,9%, 7%, 7,1%, 7,2%, 7,3%, 7,4%, 7,5%, 7,6%, 7,7%, 7,8%, 7,9%, 8%, 8,1%, 8,2%, 8,3%, 8,4%, 8,5%, 8,6%, 8,7%, 8,8%, 8,9%, 9%, 9,1%, 9,2%, 9,3%, 9,4%, 9,5%, 9,6%, 9,7%, 9,8%, 9,9% или 10 мас. %, включая значения и диапазоны между ними, любого из соединений, раскрытых в настоящем документе. Согласно некоторым вариантам фармацевтическая композиция может включать от приблизительно 5% до приблизительно 9%, от приблизительно 5% до приблизительно 8,5%, от приблизительно 5% до приблизительно 8%, от приблизительно 5% до приблизительно 7,5%, от приблизительно 5% до приблизительно 7%, от приблизительно 6% до приблизительно 10%, от приблизительно 6% до приблизительно 9%, от приблизительно 6% до приблизительно 8,5%, от приблизительно 6% до приблизительно 8%, от приблизительно 7% до приблизительно 10%, от приблизительно 7% до приблизительно 9,5%, от приблизительно 7% до приблизительно 8,5%, от приблизительно 7,5% до приблизительно 10%, от приблизительно 8% до приблизительно 10 мас. %, включая значения и диапазоны между ними, любого из соединений, раскрытых в настоящем документе.

Согласно некоторым другим вариантам фармацевтическая композиция может включать от приблизительно 1% до приблизительно 10%, от приблизительно 1% до приблизительно 8%, от приблизительно 1% до приблизительно 7%, от приблизительно 2% до приблизительно 8%, от приблизительно 2% до приблизительно 7%, от приблизительно 2% до приблизительно 6%, от приблизительно 2,5% до приблизительно 7,5%, от приблизительно 2,5% до приблизительно 5,5%, от приблизительно 3% до приблизительно 8%, от приблизительно 3% до приблизительно 7%, от приблизительно 4% до приблизительно 8%, от приблизительно 4% до приблизительно 7%, от приблизительно 4,5% до приблизительно 7,5%, от приблизительно 4,5% до приблизительно 7% или от приблизительно 4,5% до приблизительно 6,5 мас. %, включая значения и диапазоны между ними, любого из соединений, раскрытых в настоящем документе.

Согласно одному варианту фармацевтическую композицию, включающую любое из соединений, раскрытых в настоящем документе, составляют для системного введения. Системное введение может осуществляться энтеральным или парентеральным путем введения. Согласно одному варианту системное введение является пероральным введением, и фармацевтическую композицию составляют для перорального введения (пероральная фармацевтическая композиция).

Согласно одному варианту в настоящем документе представлена пероральная фармацевтическая композиция, включающая соединение формул (I), (II) или (III) или его фармацевтически приемлемые соль или сольват, или их комбинацию и фармацевтически приемлемые носитель или эксципиент. Пероральные фармацевтические композиции в соответствии с настоящим раскрытием могут иметь форму твердой лекарственной формы или жидкой лекарственной формы и могут включать любое из раскрытых соединений в любом из количеств, описываемых в настоящем документе.

Согласно одному варианту фармацевтическую композицию, включающую любое из соединений, раскрытых в настоящем документе, составляют для местного введения. Местное введение предусматривает локальное нанесение композиции на кожу, ногти, глаза, ресницы, веки и/или волосы субъекта.

Согласно одному варианту в настоящем документе представлена фармацевтическая композиция для местного применения, включающая соединение формул (I), (II) или (III) или его фармацевтически приемлемые соль или сольват, или их комбинацию и фармацевтически приемлемые носитель или эксципиент. Композиции для местного введения (композиции для местного применения) могут иметь форму геля, гидрогеля, мази, крема, пенки, аэрозоля, лосьона, жидкости или кожного пластыря и могут включать любое из раскрытых соединений в любом из количеств, описываемых в настоящем документе.

Согласно одному варианту пероральная или фармацевтическая композиция для местного применения включает соединение формулы:

в любом из количеств, раскрытых в настоящем документе, и фармацевтически приемлемые носитель или эксципиент.

Согласно одному варианту в настоящем документе представлена фармацевтическая композиция для местного применения, включающая LUT014 в любом из количеств в мас. %, раскрытых в настоящем документе, и фармацевтически приемлемые носитель или эксципиент. Композиция для местного применения, включающая LUT014, может быть составлена в лекарственной форме, выбранной из мази, крема, геля, гидрогеля, пенки, аэрозоля, лосьона, жидкости и кожного пластыря.

Согласно одному варианту в настоящем документе представлена пероральная фармацевтическая композиция, включающая LUT014 в любом из количеств в мас. %, раскрытых в настоящем документе, и фармацевтически приемлемые носитель или эксципиент. Пероральная фармацевтическая композиция, включающая LUT014, может иметь форму твердой лекарственной формы или жидкой лекарственной формы.

Твердые лекарственные формы для перорального введения включают капсулы, таблетки, порошки и гранулы. В таких твердых лекарственных формах активное соединение смешивают по меньшей мере с одним инертным эксципиентом (или носителем), такими как цитрат натрия или гидрофосфат кальция, или с (а) наполнителями или добавками, например, крахмалами, лактозой, сахарозой, маннитом и кремниевой кислотой; (b) связующими средствами, например, карбокиметилцеллюлозой, альгинатами, желатином, поливинилпирролидоном, сахарозой и акациевой камедью; (с) увлажняющими средствами, например, глицерином; (d) разрыхлителями, например, агар-агаром, карбонатом кальция, картофельным или тапиоковым крахмалом, альгиновой кислотой, некоторыми комплексными силикатами и карбонатом натрия; (а) замедлителями растворения, например, парафином; (f) ускорителями впитывания, например, соединениями четвертичного аммония; (g) смачивающими средствами, например, цетиловым спиртом и моностеаратом глицерина; (h) абсорбентами, например, каолином и бентонитом; и (i) смазывающими средствами, например, тальком, стеаратом кальция, стеаратом магния, твердыми полиэтиленгликолями, лаурилсульфатом натрия, или их смесями. В случае капсул и таблеток лекарственные формы также могут включать регуляторы кислотности.

Иллюстративная капсульная лекарственная форма может включать мягкие или твердые заполненные желатиновые капсулы, включающие одно или несколько соединений в соответствии с настоящим раскрытием и эксципиенты, такие как лактоза или молочный сахар, высокомолекулярные полиэтиленгликоли, и т.п.

Жидкие лекарственные формы для перорального введения включают фармацевтически приемлемые эмульсии, растворы, суспензии, сиропы и эликсиры. В дополнение к активным соединениям жидкая лекарственная форма может включать инертные разбавители, традиционно используемые в уровне техники, такие как вода или другие растворители, солюбилизирующие средства и эмульгаторы, как например, этиловый спирт, изопропиловый спирт, этилкарбонат, этилацетат, бензиловый спирт, бензилбензоат, пропиленгликоль, 1,3-бутиленгликоль, диметилформамид, масла, в частности, хлопковое масло, масло земляного ореха, масло из зародышей кукурузы, оливковое масло, касторовое масло и масло кунжутного семени, глицерин, тетрагидрофурфуриловый спирт, полиэтиленгликоли и сложные эфиры жирных кислот и сорбитана, или смеси этих веществ и т.п.

Помимо таких инертных разбавителей жидкие лекарственные формы также могут включать эксципиенты, такие как смачивающие средства, эмульгирующие и суспендирующие средства, подсластители, ароматизаторы и отдушки. Суспензии в дополнение к активному соединению могут включать суспендирующие средства, как например, этоксилированные изостеариловые спирты, полиоксиэтиленсорбит и сложные эфиры сорбитана, микрокристалличческая целлюлоза, метагидроксид алюминия, бентонит, агар-агар и трагакант или смеси этих веществ, и т.п.

Иллюстративная жидкая лекарственная форма для перорального введения может включать сироп, включающий одно или несколько соединений в соответствии с настоящим раскрытием и эксципиенты, такие как глицерин, пропиленгликоль и сахароза.

Композиции для местного применения, применимые в настоящем раскрытии, могут быть составлены в виде раствора. Такие композиции могут включать мягчающее средство, предпочтительно, включающее от приблизительно 1% до приблизительно 50% смягчающего средства (средств). Используемый в настоящем документе термин «смягчающее средство» относится к материалам, используемым для предупреждения или смягчения сухости, а также для защиты кожи. Ряд подходящих смягчающих средств известен и может быть использован в соответствии с настоящим раскрытием. Например, в Sagarin, Cosmetics, Science and Technology, 2nd Edition, Vol. 1, pp. 32-43 (1972), и The International Cosmetic Ingredient Dictionary and Handbook, eds. Wenninger and McEwen, pp. 1656-61, 1626, and 1654-55 (The Cosmetic, Toiletry, and Fragrance Assoc., Washington, D.C., 7th Edition, 1997) (далее в настоящем документе «ICI Handbook») содержатся многочисленные примеры подходящих материалов.

Из такого раствора может быть изготовлен лосьон. Лосьоны, как правило, включают от приблизительно 1% до приблизительно 20% (например, от приблизительно 5% до приблизительно 10%) смягчающего(их) средства (средств) и от приблизительно 50% до приблизительно 90% (например, от приблизительно 60% до приблизительно 80%) воды.

Другим типом продукта, который может быть получен из раствора, является крем. Крем, как правило, включает от приблизительно 5% до приблизительно 50% (например, от приблизительно 10% до приблизительно 20%) смягчающего(их) средства (средств) и от приблизительно 45% до приблизительно 85% (например, от приблизительно 50% до приблизительно 75%) воды.

Еще одним типом продукта, который может быть получен из раствора, является мазь. Мазь может включать простую основу из животных или растительных масел или полутвердых углеводородов. Мазь может включать от приблизительно 2% до приблизительно 10% смягчающего(их) средства (средств) плюс от приблизительно 0,1% до приблизительно 2% загустителя(ей). Более полное раскрытие применимых загустителей или средств повышающих вязкость можно найти в Sagarin, Cosmetics, Science and Technology, 2nd Edition, Vol. 1, pp. 72-73 (1972), и The ICI Handbook pp. 1693-1697.

Композиции для местного применения, применимые в настоящем раскрытии, могут быть получены в виде эмульсий. Если носитель для композиции для местного применения представляет собой эмульсию, то от приблизительно 1% до приблизительно 10% (например, от приблизительно 2% до приблизительно 5%) носителя содержит эмульгатор(ы). Эмульгаторы могут быть неионными, анионными или катионными. Подходящие эмульгаторы раскрыты, например, в McCutcheon's Detergents and Emulsifiers, North American Edition, pp. 317-324 (1986), и The ICI Handbook, pp. 1673-1686.

Лосьоны и крема могут быть получены в виде эмульсий, такие лосьоны могут включать от 0,5% до приблизительно 5% эмульгатора(ов). Крема могут включать % до приблизительно 20% (например, от приблизительно 5% до приблизительно 10%) смягчающего(их) средства (средств); от приблизительно 20% до приблизительно 80% (например, от 30% до приблизительно 70%) воды и от приблизительно 1% до приблизительно 10% (например, от приблизительно 2% до приблизительно 5%) эмульгатора(ов).

Композиции для местного применения в соответствии с настоящим раскрытием также могут быть получены в виде геля (например, водного, спиртового, спиртового/водного или масляного геля с использованием подходящего желирующего(их) средства (средств)). Подходящие желирующие средства для водных гелей включают без ограничения натуральные смолы, акриловую кислоту, акрилатные полимеры и сополимеры, а также производные целлюлозы (например, гидроксиметилцеллюлозу и гидроксипропилцеллюлозу). Подходящие желирующие средства для масел включают без ограничения гидрогенизированные сополимеры бутилена, этилена и стирола, а также гидрогенизированный сополимер этилена, пропилена и стирола. Гелевые композиции могут включать от приблизительно 0,1% до 5 мас. % таких желирующих средств.

В дополнение к упомянутым выше носителям и эксципиентам в композиции для местного применения могут быть включены другие смягчающие средства и поверхностно-активные средства, в том числе глицерин триолеат, ацетилированный дистеарат сахарозы, сорбитан триолеат, полиоксиэтилен (1) моностеарат, глицерин моноолеат, дистеарат сахарозы, полиэтиленгликоль (50) моностеарат, октилфеноксиполи(этиленокси)этанол, декаглицерин пента-изостеарат, сорбитан секвиолеат, гидроксилированный ланолин, ланолин, триглицерил диизостеарат, полиоксиэтилена (2) олеиловый эфир, стеароил-2-лактилат кальция, метилгликозид секвистеарат, сорбитан монопальмитат, сополимер метоксиполиэтиленгликоля-22 и додецилгликоля (Elfacos Е200), сополимер полиэтиленгликоля-45 и додецилгликоля (Elfacos ST9), полиэтиленгликоль 400 дистеарат, а также полученные из ланолина стероловые экстракты, гликольстеарат и глицерин стеарат; спирты, такие как цетиловый спирт и ланолиновый спирт; миристаты, такие как изопропилмиристат; цетил пальмитат; холестерин; стеариновая кислота; пропиленгликоль; глицерин, сорбит и т.п.

Способы

В настоящем документе представлены способы лечения, предупреждения и/или облегчения дерматологических состояний.

Согласно одному варианту дерматологическое состояние представляет собой дерматологические или кожные побочные реакции, индуцированные химиотерапевтическими средствами, такими как ингибиторы EGFR, ингибиторы PI3K, ингибиторы MEK или их комбинации.

Согласно одному варианту в настоящем документе представлен способ лечения, облегчения и/или предупреждения кожной побочной реакции на ингибиторы EGFR, ингибиторы PI3K, ингибиторы MEK или их комбинации у субъекта при необходимости, предусматривающий введение терапевтически эффективного количества композиции, включающей соединение формулы (I):

в которой R выбран из группы, состоящей из п-хлорфенила, 3-этинилфенила, 3-хлор-4-фторфенила, 2-фтор-4-йодфенила, 4-хлор-3-(трифторметил)фенила, 3-(1,1-диметилэтил)-1-метил-1Н-пиразол-5-ила, 3-(трифторметокси)фенила, 3,5-дигидроксифенила, фенил-3-сульфонамида или 3-(трифторметил)фенила, или его фармацевтически приемлемые соль или сольват;

соединение формулы (II):

в которой R представляет собой NHR¹, при этом R¹ представляет собой 2-фтор-4-йодфенил, или его фармацевтически приемлемые соль или сольват;

соединение формулы (III):

в которой R представляет собой NHR¹, при этом R¹ представляет собой 3-этинилфенил, 3-хлор-4-фторфенил, 2-фтор-4-йодфенил или 4-хлор-3-(трифторметил)фенил, или его фармацевтически приемлемые соль или сольват;

или их комбинацию и фармацевтически приемлемые носитель или эксципиент.

Согласно одному варианту способы лечения, облегчения и/или предупреждения кожной побочной реакции на ингибиторы EGFR, ингибиторы PI3K, ингибиторы MEK или их комбинации у субъекта при необходимости этого предусматривают введение терапевтически эффективного количества композиции, включающей соединение формулы (I), в которой R выбран из группы, состоящей из п-хлорфенила, 3-этинилфенила, 3-хлор-4-фторфенила, 2-фтор-4-йодфенила, 4-хлор-3-(трифторметил)фенила, 3-(1,1-диметилэтил)-1-метил-1Н-пиразол-5-ила, 3-(трифторметокси)фенила, 3,5-дигидроксифенила, фенил-3-сульфонамида или 3-(трифторметил)фенила, или его фармацевтически приемлемые соль или сольват, или их комбинацию и фармацевтически приемлемые носитель или эксципиент.

Согласно одному варианту способы лечения, облегчения и/или предупреждения кожной побочной реакции на ингибиторы EGFR, ингибиторы PI3K, ингибиторы MEK или их комбинации у субъекта при необходимости этого предусматривают введение терапевтически эффективного количества композиции, включающей соединение формулы (II), в которой R представляет собой NHR¹, при этом R¹ представляет собой 2-фтор-4-йодфенил, или его фармацевтически приемлемые соль или сольват и фармацевтически приемлемые носитель или эксципиент.

Согласно одному варианту способы лечения, облегчения и/или предупреждения кожной побочной реакции на ингибиторы EGFR, ингибиторы PI3K, ингибиторы MEK или их комбинации у субъекта при необходимости этого предусматривают введение терапевтически эффективного количества композиции, включающей соединение формулы (III), в которой R представляет собой NHR¹, при этом R¹ представляет собой 3-этинилфенил, 3-хлор-4-фторфенил, 2-фтор-4-йодфенил или 4-хлор-3-(трифторметил)фенил, или его фармацевтически приемлемые соль или сольват, или их комбинацию и фармацевтически приемлемые носитель или эксципиент.

Согласно одному варианту способы лечения, облегчения и/или предупреждения кожной побочной реакции на ингибиторы EGFR, ингибиторы PI3K, ингибиторы MEK или их комбинации у субъекта при необходимости этого предусматривают введение терапевтически эффективного количества композиции, включающей комбинацию любого из соединений, раскрытых в настоящем документе, и фармацевтически приемлемые носитель или эксципиент.

Согласно одному варианту способы лечения, облегчения и/или предупреждения кожной побочной реакции на ингибиторы EGFR, ингибиторы PI3K, ингибиторы MEK или их комбинации у субъекта при необходимости этого предусматривают введение терапевтически эффективного количества композиции, включающей соединение формулы

в любом из количеств в мас. %, раскрытых в настоящем документе, и фармацевтически приемлемые носитель или эксципиент.

Дерматологические или кожные побочные реакции, индуцированные химиотерапевтическими средствами, такими как ингибиторы EGFR, ингибиторы PI3K, ингибиторы MEK или их комбинации, включают угревую сыпь, папуло-пустулезную сыпь, аномальный рост волос на волосистой части головы, аномальный рост волос на лице, аномальный рост волос, аномальный рост ресниц, ксероз, прурит, паронихию с пиококковыми гранулемами или без таковых и телеангиоэктазию. Способы, описываемые в настоящем документе, лечат, облегчают и/или предупреждают одну или несколько из данных побочных реакций.

Согласно одному варианту кожная побочная реакция на ингибиторы EGFR, ингибиторы PI3K, ингибиторы MEK или их комбинации, которую лечат, облегчают и/или предупреждают соединениями/композициями в соответствии с настоящим раскрытием, представляет собой угревую сыпь.

Согласно одному варианту субъект является млекопитающим, таким как человек, собака и/или кошка.

Согласно одному варианту субъект получает ингибитор EGFR, ингибитор PI3K, ингибитор MEK или их комбинацию во время введения соединений/композиций в соответствии с настоящим раскрытием. Согласно другому варианту соединения/композиции в соответствии с настоящим раскрытием вводят субъекту до или после введения ингибитора EGFR, ингибитора PI3K, ингибитора MEK или их комбинации.

Согласно некоторым вариантам способы, раскрываемые в настоящем документе, предусматривают системное или местное введение терапевтически эффективного количества соединений/композиций в соответствии с настоящим раскрытием.

Способы, предусматривающие местное введение, предусматривают локальное введение или нанесение любой из композиций, раскрытых в настоящем документе, на кожу, ногти, глаза, ресницы, веки и/или волосы субъекта. Согласно некоторым вариантам местное введение включает местное введение композиции, составленной в лекарственной форме, выбранной из геля, гидрогеля, мази, крема, аэрозоля, кожного пластыря, пенки, лосьона и жидкости.

Системное введение включает энтеральное введение или парентеральное введение. Согласно некоторым вариантам способов, раскрытых в настоящем документе, системное введение включает пероральное введение. Согласно некоторым вариантам способов, раскрытых в настоящем документе, пероральное введение включает введение пероральной лекарственной формы, выбранной из таблетки, капсулы, жидкости, суспензии и порошка.

Согласно одному варианту способы, раскрываемые в настоящем документе, предусматривают системное или местное введение от приблизительно 0,1 мг/сутки до приблизительно 1 мг/сутки одного или нескольких соединений в соответствии с настоящим раскрытием. Согласно некоторым вариантам способы, раскрываемые в настоящем документе, предусматривают системное или местное введение приблизительно 0,1 мг/сутки, приблизительно 0,2 мг/сутки, приблизительно 0,3 мг/сутки, приблизительно 0,4 мг/сутки, приблизительно 0,5 мг/сутки, приблизительно 0,6 мг/сутки, приблизительно 0,7 мг/сутки, приблизительно 0,8 мг/сутки, приблизительно 0,9 мг/сутки или приблизительно 1 мг/сутки, включая значения и диапазоны между ними, одного или нескольких соединений в соответствии с настоящим раскрытием. Согласно некоторым вариантам способы, раскрываемые в настоящем документе, предусматривают системное или местное введение от приблизительно 0,1 мг/сутки до приблизительно 0,5 мг/сутки, от приблизительно 0,2 мг/сутки до приблизительно 0,8 мг/сутки, от приблизительно 0,2 мг/сутки до приблизительно 0,5 мг/сутки или от приблизительно 0,5 мг/сутки до приблизительно 1 мг/сутки, включая значения и диапазоны между ними, одного или нескольких соединений в соответствии с настоящим раскрытием.

Согласно одному варианту способы, раскрываемые в настоящем документе, предусматривают системное или местное введение от приблизительно 1 мг/сутки до приблизительно 5 мг/сутки одного или нескольких соединений в соответствии с настоящим раскрытием. Согласно некоторым вариантам способы, раскрываемые в настоящем документе, предусматривают системное или местное введение приблизительно 1 мг/сутки, 1,5 мг/сутки, 2 мг/сутки, 2,5 мг/сутки, 3 мг/сутки, 3,5 мг/сутки, 4 мг/сутки, 4,5 мг/сутки или 5 мг/сутки, включая значения и диапазоны между ними, одного или нескольких соединений в соответствии с настоящим раскрытием.

Согласно одному варианту способы, раскрываемые в настоящем документе, предусматривают системное или местное введение от приблизительно 5 мг/сутки до приблизительно 10 мг/сутки одного или нескольких соединений в соответствии с настоящим раскрытием. Согласно некоторым вариантам способы, раскрываемые в настоящем документе, предусматривают системное или местное введение приблизительно 5 мг/сутки, приблизительно 5,5 мг/сутки, приблизительно 6 мг/сутки, приблизительно 6,5 мг/сутки, приблизительно 7 мг/сутки, приблизительно 7,5 мг/сутки, приблизительно 8 мг/сутки, приблизительно 8,5 мг/сутки, приблизительно 9 мг/сутки, приблизительно 9,5 мг/сутки или приблизительно 10 мг/сутки, включая значения и диапазоны между ними, одного или нескольких соединений в соответствии с настоящим раскрытием.

Согласно некоторым вариантам способы, раскрываемые в настоящем документе, предусматривают системное или местное введение от приблизительно 1 мг/сутки до приблизительно 10 мг/сутки, от приблизительно 1 мг/сутки до приблизительно 8 мг/сутки, от приблизительно 2 мг/сутки до приблизительно 8 мг/сутки, от приблизительно 2,5 мг/сутки до приблизительно 7,5 мг/сутки, от приблизительно 3 мг/сутки до приблизительно 8 мг/сутки, от приблизительно 3 мг/сутки до приблизительно 6 мг/сутки или от приблизительно 4 мг/сутки до приблизительно 8 мг/сутки, включая значения и диапазоны между ними, одного или нескольких соединений в соответствии с настоящим раскрытием.

Согласно одному варианту количество вводимого соединения зависит от природы соединения, способа введения и/или тяжести кожной реакции. Терапевтически эффективное количество, которое необходимо ввести больному, может быть определено клиническими исследованиями по подбору оптимальной дозировки, известными в уровне техники.

Согласно некоторым вариантам способов, раскрытых в настоящем документе, ингибитор EGFR выбран из Iressa (гефитиниба), Tarceva (эрлотиниба), Tykerb (лапатиниба), Erbitux (цетуксимаба), Vectibix (панитумумаба), Caprelsa (вандетаниба), Portrazza (нецитумумаба), Tagrisso (осимертиниба) и их комбинаций.

Согласно некоторым вариантам способов, раскрытых в настоящем документе, ингибитор PI3K выбран из GDC-0980 (апитолизиба), GDC-0941 (пиктилизиба), BAY 80-6946 (копанлизиба), BKM120 (пупарлизиба), NVP-BEZ235 (дактолизиба), IPI 145 (дувелизиба), иделализиба (GS-1101 или CAL-101), вортманнина, LY294002 и их комбинаций.

Согласно некоторым вариантам способов, раскрытых в настоящем документе, ингибитор MEK выбран из траметиниба (GSK1120212), кобиметиниба (XL518), биниметиниба (MEK162), селуметиниба, PD-325901, CI-1040, PD035901, UO126, TAK-733 и их комбинаций.

Согласно одному варианту способы, раскрываемые в настоящем документе, снижают тяжесть кожных побочных реакций.

Наиболее часто используемой системой для оценки степени тяжести кожных побочных реакций является версия 4.0 Общей терминологии критериев нежелательных явлений (СТСАЕ) Национального института рака, которая распознает 4 степени, показанные в приведенной ниже Таблице 1.

Согласно одному варианту способы, раскрываемые в настоящем документе, снижают тяжесть кожных побочных реакций от степени 4 до степени 3, 2, 1 или 0, как определено с помощью версии 4.0 Общей терминологии критериев нежелательных явлений (NCI-CTCAE) Национального института рака.

Согласно одному варианту способы, раскрываемые в настоящем документе, снижают тяжесть кожных побочных реакций от степени 3 до степени 2, 1 или 0, как определено с помощью версии 4.0 NCI-CTCAE.

Согласно одному варианту способы, раскрываемые в настоящем документе, снижают тяжесть кожных побочных реакций от степени 2 до степени 1 или 0, как определено с помощью версии 4.0 NCI-CTCAE.

Согласно одному варианту способы, раскрываемые в настоящем документе, снижают тяжесть кожных побочных реакций от степени 1 до степени 0, как определено с помощью версии 4.0 NCI-CTCAE.

Согласно одному варианту способы, раскрываемые в настоящем документе, предупреждают, частично или полностью, развитие кожных побочных реакций.

Согласно одному варианту способы, раскрываемые в настоящем документе, предупреждают, частично или полностью, развитие кожных побочных реакций степени 4, степени 3, степени 2 или степени 1, как определено с помощью версии 4.0 NCI-CTCAE.

Согласно одному варианту способы, раскрываемые в настоящем документе, предупреждают обострение кожной побочной реакции. Например, согласно одному варианту способы, раскрываемые в настоящем документе, предупреждают обострение кожной побочной реакции от степени 0 до степени 1, 2, 3 или 4, как определено с помощью версии 4.0 NCI-CTCAE. Согласно другому варианту способы, раскрываемые в настоящем документе, предупреждают обострение кожной побочной реакции от степени 1 до степени 2, 3 или 4, как определено с помощью версии 4.0 NCI-CTCAE. Согласно другому варианту способы, раскрываемые в настоящем документе, предупреждают обострение кожной побочной реакции от степени 2 до степени 3 или 4, как определено с помощью версии 4.0 NCI-CTCAE. Согласно другому варианту способы, раскрываемые в настоящем документе, предупреждают обострение кожной побочной реакции от степени 3 до степени 4, как определено с помощью версии 4.0 NCI-CTCAE.

Другой системой, которая может быть использована для оценки степени тяжести кожных побочных реакций, является шкала оценки степени по Lacouture, показанная в приведенной ниже Таблице 2.

Согласно одному варианту способы, раскрываемые в настоящем документе, снижают тяжесть кожных побочных реакций от степени 4 до степени 3В, 3А, 2В, 2А, 1В или 1А, как определено с помощью шкалы оценки степени по Lacouture.

Согласно одному варианту способы, раскрываемые в настоящем документе, снижают тяжесть кожных побочных реакций от степени 3В до степени 3А, 2В, 2А, 1В или 1А, как определено с помощью шкалы оценки степени по Lacouture.

Согласно одному варианту способы, раскрываемые в настоящем документе, снижают тяжесть кожных побочных реакций от степени 3А до степени 2В, 2А, 1В или 1А, как определено с помощью шкалы оценки степени по Lacouture.

Согласно одному варианту способы, раскрываемые в настоящем документе, снижают тяжесть кожных побочных реакций от степени 2В до степени 2А, 1В или 1А, как определено с помощью шкалы оценки степени по Lacouture.

Согласно одному варианту способы, раскрываемые в настоящем документе, снижают тяжесть кожных побочных реакций от степени 2А до степени 1В или 1А, как определено с помощью шкалы оценки степени по Lacouture.

Согласно одному варианту способы, раскрываемые в настоящем документе, снижают тяжесть кожных побочных реакций от степени 1В до степени 1А, как определено с помощью шкалы оценки степени по Lacouture.

Согласно одному варианту способы, раскрываемые в настоящем документе, предупреждают, частично или полностью, развитие кожных побочных реакций степени 4, степени 3В, степени 3А, степени 2В, степени 2А, степени 1В или степени 1А, как определено с помощью шкалы оценки степени по Lacouture.

Согласно одному варианту способы, раскрываемые в настоящем документе, предупреждают обострение кожной побочной реакции от степени 1А до степени 1В, 2А, 2В, 3А, 3В или 4, как определено с помощью шкалы оценки степени по Lacouture. Согласно другому варианту способы, раскрываемые в настоящем документе, предупреждают обострение кожной побочной реакции от степени 1В до степени 2А, 2В, 3А, 3В или 4, как определено с помощью шкалы оценки степени по Lacouture. Согласно одному варианту способы, раскрываемые в настоящем документе, предупреждают обострение кожной побочной реакции от степени 2А до степени 2В, 3А, 3В или 4, как определено с помощью шкалы оценки степени по Lacouture. Согласно одному варианту способы, раскрываемые в настоящем документе, предупреждают обострение кожной побочной реакции от степени 2В до степени 3А, 3В или 4, как определено с помощью шкалы оценки степени по Lacouture. Согласно одному варианту способы, раскрываемые в настоящем документе, предупреждают обострение кожной побочной реакции от степени 3А до степени 3В или 4, как определено с помощью шкалы оценки степени по Lacouture. Согласно одному варианту способы, раскрываемые в настоящем документе, предупреждают обострение кожной побочной реакции от степени 3В до степени 4, как определено с помощью шкалы оценки степени по Lacouture.

Примеры

Следующие примеры иллюстрируют некоторые варианты настоящего изобретения, но никоим образом не ограничивают объем формулы изобретения. Следующие примеры приведены для того, чтобы предоставить специалистам в данной области полное раскрытие и описание того, как осуществить и применить описанное изобретение, и не предназначены для ограничения объема того, что авторы изобретения считают своим изобретением, а также не предназначены для представления того, что приведенные ниже эксперименты являются максимально возможными или единственными проведенными экспериментами. Были предприняты усилия для обеспечения точности в отношении используемых чисел (например, количества, температуры и т.д.), но следует учитывать некоторые экспериментальные ошибки и отклонения. Если не указано иное, части представляют собой массовые части, молекулярная масса представляет собой средневесовую молекулярную массу, температура представлена в градусах Цельсия, а давление является атмосферным или близким к таковому.

Иллюстративные способы синтеза соединений формулы I (LUT012-LUT017 и LUT019-LUT020) раскрываются в примерах 1-9.

Известное соединение С-1 получали согласно процедуре синтеза, подробно описанной у Smith A.L. et al., J. Med. Chem. 2009, 52, 6189-6192.

Пример 1

Синтез соединения формулы I, R = 3-этинилфенил (соединение LUT012)

Получение промежуточного соединения 3В-2

К смеси соединения 3В-1 (2,00 г, 8,98 ммоль, 1,0 экв.) в изопропаноле (20 мл) добавляли соединение 3В-3 (1,26 г, 10,8 ммоль, 1,2 экв.) и трифторуксусную кислоту (1,02 г, 8,98 ммоль, 665 мкл, 1,0 экв.) при 20°С под азотом. Полученную в результате смесь нагревали до 90°С и взбалтывали при 90°С в течение 16 часов. TLC (петролейный эфир : этилацетат = 3:1, R_f-SM=0,43, R_f-DP=0,24) показывала завершение реакции. Реакционную смесь фильтровали и фильтрационный осадок промывали дихлорметаном (10 мл), фильтрационный осадок собирали и сушили в вакууме с получением соединения 3В-2 (2,60 г, 8,57 ммоль, 95,4% выход) в виде желтого твердого вещества, которое использовали для следующей стадии без дополнительной очистки.

¹H ЯМР: ЕТ15201-1-Р1А 400 МГц MeOD.

δ 8,74 (d, J=8,8 Гц, 1Н), 7,93 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,60-7,71 (m, 4H), 7,10 (d, J=7,2 Гц, 1H), 3,73 (s, 1H), 2,61 (s, 3H).

Получение промежуточного соединения 3В

К смеси соединения 3В-2 (2,60 г, 8,57 ммоль, 1,0 экв.) в этаноле (26 мл) добавляли SnCl₂⋅2H₂O (9,67 г, 42,9 ммоль, 5,0 экв.) при 20°С под азотом. Полученную в результате смесь нагревали до 85°С и взбалтывали при 85°С в течение 16 часов. TLC (петролейный эфир : этилацетат = 2:1, R_f-SM=0,43, R_f-DP=0,30) показывала завершение реакции. Реакционную смесь охлаждали до 20°С и выливали в 5 н. водный NaOH (50 мл) и взбалтывали в течение 5 минут, фильтровали и водную фазу экстрагировали дихлорметаном (50 мл, 20 мл). Объединенную органическую фазу сушили с помощью безводного Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением соединения 3В (2,30 г, неочищенного) в виде коричневого твердого вещества, которое использовали для следующей стадии без дополнительной очистки.

1H ЯМР: ЕТ15201-4-Р1А 400 МГц DMSO-_d6.

δ 8,96 (s, 1Н), 8,12 (s, 1H), 7,90-7,93 (m, 2H), 7,64 (d, J=8,0 Гц, 1H), 7,45 (d, J=6,0 Гц, 1H), 7,25-7,31 (m, 2H), 7,04 (d, J=6,0 Гц, 1H), 5,51 (s, 2H), 4,13 (s, 1H), 2,26 (s, 3H).

Получение промежуточного соединения 4B

К смеси соединения 3 (1,00 г, 3,34 ммоль, 1,0 экв.) и соединения 3В (913 мг, 3,34 ммоль, 1,0 экв.) в тетрагидрофуране (10 мл) добавляли LiHMDS (1 М, 16,7 мл, 5,0 экв.) при 0°С под азотом. Полученную в результате смесь взбалтывали при 0°С в течение 1 часа. TLC (петролейный эфир : этилацетат = 2:1, R_f-SM=0,25, R_f-DP=0,40) показывала завершение реакции. Реакционную смесь гасили добавлением по каплям ледяной воды (2 мл) при 0°С, что давало в результате светло-оранжевый раствор, включающий белое твердое вещество в суспензии. Смесь концентрировали с получением желтого твердого вещества, которое суспендировали в этилацетате (50 мл), сушили с помощью Na₂SO₄, фильтровали через пробку из целита с получением желтого раствора и концентрировали в вакууме. Остаток промывали метил-трет-бутиловым эфиром (20 мл), фильтровали с получением фильтрационного осадка и фильтрационный осадок сушили в вакууме с получением соединения 4В (1,10 г, 1,99 ммоль, 59,6% выход) в виде светло-желтого твердого вещества.

¹H ЯМР: ЕТ15201-9-Р1А 400 МГц DMSO-_d6.

δ 11,69 (s, 1H), 9,66 (dd, J=6,0, 1,6 Гц, 1H), 9,28 (s, 1H), 9,12 (s, 1H), 8,97 (s, 1H), 8,42 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,13 (s, 1H), 8,06 (dd, J=2,8, 1,6 Гц, 1H), 7,93-7,96 (m, 2H), 7,60 (d, J=8,8 Гц, 2H), 7,33 (t, J=8,0 Гц, 1H), 7,16 (d, J=6,0 Гц, 1H), 7,08 (d, J=7,6 Гц, 1H), 6,91 (q, J=3,2 Гц, J=0,8 Гц, 1H), 5,89 (d, J=8,8 Гц, 1H), 4,02-4,14 (m, 1H), 3,74-3,79 (m, 1H), 2,36 (s, 4H), 1,99-2,08 (m, 2H), 1,10 (s, 1H).

Получение соединения формулы I, R = 3-этинилфенил (соединение LUT012)

Соединение 4В (1,10 г, 1,99 ммоль, 1,0 экв.) суспендировали в HCl (0,5 М, 35,8 мл, 9,0 экв.) при 20°С под азотом. Смесь нагревали до 100°С и взбалтывали в течение 1 часа. LCMS (ЕТ15201-11-Р1А1) показывала завершение реакции. Горячий раствор фильтровали, промывая кипящей водой (2×20 мл). Полученный в результате раствор охлаждали в ледяной бане и продукт кристаллизовали из раствора в виде желтого твердого вещества. Твердое вещество фильтровали и добавляли в насыщенный водн. Na₂CO₃ (100 мл). Смесь взбалтывали в течение 10 минут, а затем фильтровали, фильтрационный осадок промывали водой (50 мл) и собирали в виде неочищенного продукта. Неочищенный продукт очищали с помощью препаративной TLC (петролейный эфир / этилацетат = 1/1, R_f=0,4) с получением LUT012 (110 мг, 230 мкмоль, 11,6% выход, 98,1% чистота) в виде желтого твердого вещества.

1НЯМР: ЕТ15201-11-Р1А2 400 МГц DMSO-_d6.

δ 13,84 (br. s, 1Н), 11,84 (s, 1H), 9,76 (d, J=7,2 Гц, 1H), 9,25 (s, 1H), 9,06 (s, 1H), 8,73 (s, 1H), 8,41 (d, J=8,4 Гц, 1H), 8,12 (s, 1H), 8,05 (d, J=4,8 Гц, 1H), 7,94 (d, J=6,4 Гц, 2H), 7,61 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,31 (q, J=7,6 Гц, 1H), 7,16 (d, J=5,6 Гц, 1H), 7,08 (d, J=7,6 Гц, 1H), 6,92 (q, J=4,8 Гц, J=3,2 Гц, 1H), 4,14 (s, 1H), 2,37 (s, 3H).

Пример 2

Синтез соединения формулы I, R = 1,1-диметилэтил-1-метил-1Н-пиразол-5-ил (LUT013)

Получение промежуточного соединения 3С-2

Соединение 3В-1 (1,00 г, 4,49 ммоль, 1,0 экв.), 5-трет-бутил-2-метил-пиразол-3-амин (1,38 г, 8,98 ммоль, 2,0 экв.), Pd₂(dba)₃ (82,3 мг, 89,8 мкмоль, 0,02 экв.), DavePhos (70,7 мг, 180 мкмоль, 0,04 экв.) и LiHMDS (1 М, 9,10 мл, 2,0 экв.) помещали в пробирку для микроволнового реактора в диоксане (10 мл). Закрытую пробирку нагревали при 150°С в течение 30 минут микроволнами. TLC (петролейный эфир : этилацетат = 1:1, R_f=0,71), LCMS (ЕТ15300-11-Р1А, продукт RT=0,972), LCMS (ЕТ15300-11-Р1В, продукт RT=0,973) показывала полное расходование исходного материала. Две реакционных смеси объединяли и концентрировали при пониженном давлении при 40°С. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (силикагель 100-200 меш), элюировали с петролейным эфиром : этилацетатом (80:1~0:1) с получением соединения 3С-2 (1,00 г, 2,95 ммоль, 32,8% выход) в виде желтого вещества.

¹Н ЯМР: ЕТ15300-11-Р1А 400 МГц CDCl₃.

δ 8,16 (d, J=6,0 Гц, 1Н), 7,90 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,45 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,01 (d, J=6,0 Гц, 1H), 6,08 (s, 1H), 3,72 (s, 3H), 2,55 (s, 3H), 1,34 (s, 9H).

Получение промежуточного соединения 3С

К смеси соединения 3С-2 (1,00 г, 2,95 ммоль, 1,0 экв.) в этиловом спирте (20 мл) добавляли SnCl₂⋅2H₂O (3,32 г, 14,7 ммоль, 5,0 экв.) одной порцией при 20°С под азотом. А затем реакционную смесь нагревали до 80°С в течение 12 часов. TLC (петролейный эфир:этилацетат=0:1, R_f=0,24) и LCMS (ЕТ15300-12-Р1А, продукт: RT=0,793) показывали завершение реакции. Смесь охлаждали до 40°С и концентрировали при пониженном давлении при 40°С. Остаток выливали в дихлорметан (20 мл). Объединенную органическую фазу промывали 5 н. водным NaOH (10 мл) и взбалтывали в течение 5 минут, смесь фильтровали и концентрировали в вакууме. Водную фазу экстрагировали дихлорметаном (20 мл, 10 мл). Объединенную органическую фазу промывали солевым раствором (15 мл), сушили с помощью безводного Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (силикагель 100-200 меш), элюировали с петролейным эфиром:этилацетатом (50:1~0:1) с получением неочищенного соединения 3С (700 мг, 2,26 ммоль, 76,8% выход) в виде желтого вещества.

¹H ЯМР: ЕТ15300-12-Р1А 400 МГц CDCl₃.

δ 7,95 (d, J=6,0 Гц, 1Н), 7,22 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,13 (d, J=8,8 Гц, 1H), 6,97 (d, J=6,0 Гц, 1H), 6,58 (s, 1H), 4,08 (s, 2H), 3,65 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 1,27 (s, 9H).

Получение промежуточного соединения 4C

К раствору соединения 3С (310 мг, 1,00 ммоль, 1,0 экв.) и соединения 3 (300 мг, 1,00 ммоль, 1,0 экв.) в тетрагидрофуране (4,0 мл) каплями добавляли Li-HMDS (1 М, 5,0 мл, 5,0 экв.) при 0°С на протяжении периода 60 минут под азотом. TLC (петролейный эфир:этилацетат=0:1, R_f =0,34) и LCMS (ЕТ15300-15-Р1А, продукт RT=0,922) показывали завершение реакции. Смесь концентрировали при пониженном давлении при 40°С с получением неочищенного соединения 4С (1,00 г, неочищенного) в виде желтого вещества.

Примечание: избегать контакта с водой.

¹H ЯМР: ЕТ15300-15-Р1А400 МГц MeOD.

δ 9,72 (dd, J=1,6 Гц, J=7,6 Гц, 1H), 9,04 (s, 1H), 8,71 (s, 1H), 8,20 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,98-8,00 (m, 1H), 7,70 (d, J=6,4 Гц, 1H), 7,59 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,19 (d, J=6,0 Гц, 1H), 6,90 (q, J=5,2 Гц, 1H), 6,07 (s, 1H), 5,92 (dd, J=10,8 Гц, J=13,2, 1H), 4,15-4,18 (m, 1H), 3,65 (s, 3H), 2,43 (s, 3H), 2,14-2,17 (m, 2H), 1,84-2,14 (m, 2H), 1,64-1,70 (m, 2H), 1,33 (s, 9H).

Получение соединения формулы I, R=1,1-диметилэтил-1-метил-1Н-пиразол-5-ил (LUT013)

Смесь соединения 4С (250 мг, 425 мкмоль, 1,0 экв.) в HCl/МеОН (4 мл, 4 М) взбалтывали в течение 1 часа при 20°С. TLC (дихлорметан:метанол=10:1, R_f =0,24) и LCMS (ЕТ15300-18-Р1А, продукт RT=2,384) показывали полное расходование исходного материала. Смесь концентрировали при пониженном давлении при 40°С. Значение рН доводили до 9 водным NaHCO₃ и водную фазу выливали в этилацетат (10 мл). Смесь взбалтывали в течение 5 минут. Смесь фильтровали и фильтрационный осадок промывали 10 мл H₂O, сушили в вакууме. Фильтрат экстрагировали этилацетатом (10 мл, 6 мл). Объединенную органическую фазу промывали солевым раствором (20 мл), сушили с помощью безводного Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали с помощью препаративной HPLC (колонка: YMC-Actus Triart С18, 100 * 30 мм * 5 мкм; подвижная фаза: [вода (10 мМ NH₄HCO₃)-ACN]; В%: 40% - 60%, 12 минут) с получением LUT013 (150 мг, 295 мкмоль, 69,6% выход, 99,4% чистота) в виде желтого вещества.

¹Н ЯМР: ЕТ15300-18-Р1А 400 МГц DMSO-d₆.

δ 13,83 (br. s, 1Н), 11,80 (s, 1H), 9,71 (s, 1H), 9,09 (s, 1H), 9,05 (s, 1H), 8,73 (s, 1H), 8,26 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,04 (d, J=2,8 Гц, 1H), 7,80 (d, J=2,0 Гц, 1H), 7,57 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,08 (d, J=6,0 Гц, 1H), 6,89-6,92 (m, 1H), 6,05 (s, 1H), 3,54 (s, 3H), 2,36 (s, 3H), 1,26 (s, 9H).

Пример 3

Синтез соединения формулы I, R=3-(трифторметокси)фенил (LUT014), лабораторный процесс

Получение промежуточного соединения 3D-2

К смеси соединения 3В-1 (2,00 г, 8,98 ммоль, 1,0 экв.) и соединения 3D-1 (1,91 г, 10,8 ммоль, 1,2 экв.) в изопропаноле (20 мл) добавляли TFA (1,02 г, 8,98 ммоль, 1,0 экв.) одной порцией при 20°С под азотом. Смесь взбалтывали при 90°С в течение 18 часов. LC-MS (ЕТ15060-21-Р1А1) показывала завершение реакции. Полученную в результате суспензию охлаждали и продукт отфильтровывали, промывая небольшим объемом дихлорметана (10 мл) с получением соединения 3D-2 (3,00 г, 8,26 ммоль, 91,9% выход) в виде желтого вещества, которое использовали непосредственно для следующей стадии.

¹Н ЯМР: ЕТ15060-21-Р1А1 400 МГц DMSO-d₆.

9,68 (s, 1Н), 8,71 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,15 (d, J=6,0 Гц, 1H), 8,03 (s, 1H), 7,91 (dd, J=8,4, 1,2 Гц, 1H), 7,71 (d, J=8,4, Гц, 1H), 7,45 (t, J=8,4 Гц, 1H), 6,98 (d, J=8,0 Гц, 1H), 6,90 (d, J=6,0 Гц, 1H), 2,48 (s, 3H).

Получение промежуточного соединения 3D

К смеси соединения 3D-2 (3,00 г, 8,26 ммоль, 1,0 экв.) в этаноле (30 мл) добавляли SnCl₂⋅H₂O (9,32 г, 41,3 ммоль, 5,0 экв.) одной порцией при 20°С под азотом. Смесь взбалтывали при 85°С в течение 16 часов. LC-MS (ЕТ15060-24-Р1А) показывала завершение реакции. Темный раствор концентрировали, разбавляли с помощью DCM (30 мл), промывали водным NaOH (1,30 моль/л, 40 мл). Смесь взбалтывали в течение 10 минут и фильтровали. Фильтр отделяли и водную фазу экстрагировали с помощью DCM (20 мл). Объединенную органическую фазу промывали солевым раствором (30 мл), сушили с помощью безводного Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением соединения 3D (2,20 г, 6,60 ммоль, 79,9% выход) в виде красного твердого вещества, которое использовали для следующей стадии непосредственно без дополнительной очистки.

¹Н ЯМР: ЕТ15060-24-Р1А1 400 МГц DMSO-d₆.

9,14 (s, 1Н), 8,13 (s, 1H), 7,92-7,99 (m, 2H), 7,66 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,50 (d, J=6,0, Гц, 1H), 7,39 (t, J=8,4, Гц, 1H), 7,29 (s, J=8,4, 1H), 6,88 (d, J=7,6, 1H), 5,53 (d, 2H), 2,28 (s, 3H).

Получение промежуточного соединения 4D

К смеси соединения 3 (850 мг, 2,84 ммоль, 1,0 экв.) и соединения 3D (947 мг, 2,84 ммоль, 1,0 экв.) в тетрагидрофуране (8,50 мл) каплями добавляли LiHMDS (1 М, 14,2 мл, 5,0 экв.) при 0°С под азотом. Смесь взбалтывали при 0°С в течение 1 часа. TLC (петролейный эфир/этилацетат=1/1, R_f=0,48) показывала завершение реакции. Темно-красную реакционную смесь гасили путем добавления каплями воды (1 мл, охлаждение в ледяной бане), что давало в результате светло-оранжевый раствор, включающий белое твердое вещество в суспензии. Смесь концентрировали с получением желтого твердого вещества, которое суспендировали в этилацетате (80 мл), сушили (MgSO₄), фильтровали через пробку из целита с получением желтого раствора и концентрировали в вакууме. Остаток суспендировали в МТВЕ (15 мл) и взбалтывали в течение 12 часов. Смесь фильтровали и фильтрационный осадок сушили в вакууме с получением соединения 4D (1,50 г, 2,45 ммоль, 86,2% выход) в виде желтого вещества.

¹H ЯМР: ET15060-38-p1a1 400 МГц DMSO-d₆.

11,77 (s, 1H), 9,75 (d, J=6,4 Гц, 1H), 9,64 (s, 1H), 9,19 (s, 1H), 9,06 (s, 1H), 8,54 (d, J=8,4 Гц, 1H), 8,20 (s, 1H), 8,13 (dd, J=4,4, 1,6 Гц, 1H), 8,03 (d, J=6,0 Гц, 2H), 7,69 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,49 (t, J=8,0 Гц, 1H), 7,26 (d, J=6,0 Гц, 1H), 6,99 (dd, J=8,0, 4,4 Гц, 2H), 5,97 (d, J=10,0 Гц, 1H), 4,15 (d, J=12,0 Гц, 1H), 3,81-3,88 (m, 1H), 2,40-2,47 (m, 4H), 2,06-2,16 (m, 3H), 1,83-1,86 (m, 1H).

Получение соединения формулы I, R=3-(трифторметокси)фенил (LUT014)

Соединение 4D (1,50 г, 2,45 ммоль, 1,0 экв.) суспендировали в водной HCl (0,5 М, 44,1 мл, 9,0 экв.), нагревали до 100°С и взбалтывали в течение 2 часов. Массу твердого вещества растворяли с получением желтого раствора. LC-MS (ЕТ15060-42-Р1А2) показывала завершение реакции. Горячий раствор фильтровали, промывая кипящей водой (2 × 5,0 мл). Полученный в результате раствор охлаждали в ледяной бане и продукт кристаллизовали из раствора в виде желтого твердого вещества. Значение рН доводили до 9 с помощью Na₂CO₃ (твердого). Смесь взбалтывали в течение 10 минут, фильтровали, фильтрационный осадок промывали водой (5,0 мл) и собирали. Твердое вещество добавляли в дихлорметан:метанол (10:1, 15 мл) и взбалтывали в течение 5 минут. Смесь фильтровали и фильтрационный осадок собирали с получением LUT014 (150 мг, 274 мкмоль, 11,2% выход, 96,7% чистота) в виде желтого твердого вещества.

¹Н ЯМР: ЕТ15060-42-Р1А2 400 МГц DMSO-d₆ .

13,84 (s, 1Н), 11,85 (s, 1H), 9,76 (s, 1H), 9,43 (s, 1H), 9,06 (s, 1H), 8,74 (s, 1H), 8,43 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,12 (s, 1H), 8,05 (dd, J=4,4, 1,6 Гц, 1H), 7,94-7,97 (m, 2H), 7,64 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,43 (t, J=8,4 Гц, 1H), 7,21 (d, J=6,0 Гц, 1H), 6,92 (dd, J=8,0, 4,8 Гц, 2H), 2,38 (s, 3H).

Пример 4

Синтез соединения формулы I, R=3-(трифторметокси)фенил (LUT014 или C17071479-F). с помощью улучшенного процесса в увеличенном масштабе

В примере 3 раскрывается процесс синтеза соединения LUT014 в лабораторном масштабе.

Улучшенный процесс синтеза в увеличенном масштабе для получения LUT014 выполняли в масштабе нескольких килограмм для того, чтобы проверить улучшенный процесс крупномасштабного производства и обеспечить материал для клинических исследований. Улучшенный процесс в увеличенном масштабе раскрывается в этом примере.

Улучшенный процесс синтеза в увеличенном масштабе давал 4015 кг LUT014, очень большое увеличение по сравнению с упомянутым выше процессом в лабораторном масштабе из примера 3, который обеспечивал получение 150 мг. Блок-схема на Фиг. 6 демонстрирует улучшенный процесс в увеличенном масштабе для получения LUT014 (C17071479-F), его стадии, количества, выходы и чистоту промежуточных соединений и продукта LUT014 (C17071479-F).

В этом примере подтверждается улучшенный крупномасштабный синтез соединения LUT014 в килограммовом масштабе в многостадийном процессе с последующей очисткой кристаллизацией с получением очищенного продукта с чистотой 99,3%.

Стадии синтеза улучшенного процесса в увеличенном масштабе для изготовления соединение Формулы I, R=3-(трифторметокси)фенил (LUT014 или C17071479-F)

Стадия 1

Стадия 2

Стадия 3

Стадия 4

Стадия 5

Стадия 6

С помощью данного процесса получали C17071479-F (соединение LUT014) с высокими чистотой (99,3%) и содержанием (99,9%).

Пример 5

Синтез соединения Формулы I, R=3-хлор-4-фторфенил LUT015)

Получение промежуточного соединения 3Е-2

К смеси соединения 3В-1 (2,00 г, 8,98 ммоль, 1,0 экв.) и соединения 3В-2 (1,57 г, 10,8 ммоль, 1,2 экв.) в изопропаноле (20 мл) добавляли TFA (1,02 г, 8,98 ммоль, 1,0 экв.) одной порцией при 20°С под азотом. Смесь взбалтывали при 90°С в течение 18 часов. TLC (петролейный эфир:этилацетат=3:1, R_f=0,43) показывала завершение реакции. Смесь охлаждали и смесь фильтровали. Фильтрационный осадок промывали небольшим объемом дихлорметана (10 мл) с получением соединения 3Е-2 (3,10 г, неочищенного) в виде желтого вещества, которое использовали непосредственно для следующей стадии.

¹Н ЯМР: ЕТ15060-4-Р1А1 400 МГц DMSO-d₆.

10,75 (br. s, 1H), 8,91 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,96 (dd, J=6,4, 3,2 Гц, 1H), 7,95 (d, J=6,4 Гц, 1H), 7,83 (d, J=8,8, Гц, 1H), 7,72-7,76 (m, 1H), 7,49-7,55 (m, 1H), 6,95 (d, J=6,4 Гц, 1H), 2,50 (s, 3H).

Получение промежуточного соединения 3E

К смеси соединения 3Е-2 (3,10 г, 9,34 ммоль, 1,0 экв.) в этаноле (30 мл) добавляли SnCl₂⋅2H₂O (10,5 г, 46,7 ммоль, 5,0 экв.) одной порцией при 20С под азотом. Смесь взбалтывали при 85С в течение 16 часов. LCMS (ЕТ15060-34-Р1А1) показывала завершение реакции. Темный раствор концентрировали, разбавляли дихлорметаном (30 мл), промывали с помощью водного NaOH (1,30 моль/л, 25,0 мл). Смесь взбалтывали в течение 10 минут и фильтровали. Органическую фазу отделяли и водную фазу экстрагировали дихлорметаном (20 мл). Объединенную органическую фазу промывали солевым раствором (15 мл), сушили с помощью безводного Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением соединения 3Е (2,50 г, 8,29 ммоль, 88,7% выход) в виде красного твердого вещества, которое использовали для следующей стадии непосредственно без дополнительной очистки.

¹Н ЯМР: ЕТ15060-34-Р1А1 400 МГц DMSO-d₆ .

9,01 (s, 1Н), 8,26 (dd, J=6,8, 2,4 Гц, 1H), 7,89 (d, J=6,0 Гц, 1H), 7,81-7,87 (m, 1H), 7,61 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,45 (d, J=6,0, Гц, 1H), 7,30 (t, J=8,8 Гц, 1H), 7,27 (d, J=8,4, 1H), 5,50 (s, 2H), 2,32 (s, 3H).

Получение промежуточного соединения 4E

К смеси соединения 3 (2,00 г, 6,68 ммоль, 1,0 экв.) и соединения 3Е (2,02 г, 6,68 ммоль, 1,0 экв.) в тетрагидрофуране (20 мл) каплями добавляли LiHMDS (1 М, 33,4 мл, 5,0 экв.) при 0°С под азотом. Смесь взбалтывали при 0°С в течение 1 часа. TLC (петролейный эфир:этилацетат, R_f=0,43) показывала завершение реакции. Темно-красную реакционную смесь гасили добавлением по каплям воды (2 мл, охлаждение в ледяной бане), что давало в результате светло-оранжевый раствор, включающий белое твердое вещество в суспензии. Смесь концентрировали с получением желтого твердого вещества, которое суспендировали в этилацетате (200 мл), сушили (MgSO₄), фильтровали через пробку из целита с получением желтого раствора и концентрировали в вакууме. Остаток суспендировали в МТВЕ (30,0 мл) и взбалтывали в течение 12 часов. Смесь фильтровали и фильтрационный осадок сушили в вакууме с получением соединения 4Е (2,00 г, 3,44 ммоль, 51,5% выход) в виде желтого твердого вещества.

¹Н ЯМР: ЕТ15060-39-Р1А1 400 МГц DMSO-d₆ .

11,69 (s, 1Н), 9,68 (d, J=1,6 Гц, 1H), 9,66 (s, 1H), 9,12 (s, 1H), 9,11 (s, 1H), 8,44 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,30 (d, J=6,8 Гц, 1H), 8,07 (d, J=2,8 Гц, 1H), 7,93-7,95 (m, 2H), 7,61-7,63 (m, 1H), 7,49 (t, J=8,0 Гц, 1H), 7,37 (t, J=1,2 Гц, 1H), 7,16 (d, J=6,0 Гц, 1H), 6,93 (d, J=4,8 Гц, 1H), 5,91 (d, J=9,2 Гц, 1H), 4,04-4,06 (m, 1H), 3,77 (t, J=12,0 Гц, 1H), 2,34-2,41 (m, 6H), 2,02-2,10 (m, 3H), 1,76-1,79 (m, 1H).

Получение соединения формулы I, R=3-хлор-4-фторфенил (LUT015)

Соединение 4E (2,00 г, 3,44 ммоль, 1,0 экв.) суспендировали в водной HCl (0,5 М, 62,0 мл, 9,0 экв.), нагревали до 100°С и взбалтывали в течение 2 часов. Массу твердого вещества растворяли с получением желтого раствора. LCMS (ЕТ15060-43-Р1А2) показывала завершение реакции. Горячий раствор фильтровали, промывая кипящей водой (2 × 10 мл). Значение рН доводили до 9 с помощью Na₂CO₃ (твердое вещество). Смесь фильтровали и фильтрационный осадок очищали с помощью препаративной TLC (петролейный эфир:этилацетат=0:1, R_f=0,46) с получением LUT015 (170 мг, 332 мкмоль, 9,64% выход, 97,0% чистота) в виде желтого твердого вещества.

¹H ЯМР: ЕТ15060-43-Р1А1 400 МГц DMSO-d₆ .

13,84 (s, 1Н), 11,84 (s, 1H), 9,75 (s, 1H), 9,34 (s, 1H), 9,06 (s, 1H), 8,74 (s, 1H), 8,39 (d, J=8,4 Гц, 1H), 8,28 (dd, J=6,8, 2,8 Гц, 1H), 8,05 (dd, J=4,4, 1,6 Гц, 1H), 7,94 (d, J=6,0 Гц, 1H), 7,85-7,88 (m, 1H), 7,63 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,38 (t, J=9,2 Гц, 1H), 7,18 (d, J=6,0 Гц, 1H), 6,92 (dd, J=8,0, 4,8 Гц, 1H), 2,38 (s, 3H).

Пример 6

Синтез соединения формулы I, R=2-фтор-4-йодфенил (LUT016)

Получение промежуточного соединения 3F-2

К смеси соединения 3В-1 (2,00 г, 8,98 ммоль, 1,0 экв.) в изопропаноле (20 мл) добавляли соединение 3F-3 (2,55 г, 10,8 ммоль, 1,2 экв.) и трифторуксусную кислоту (1,02 г, 8,98 ммоль, 665 мкл, 1,0 экв.) при 20°С под азотом. Полученную в результате смесь нагревали до 90°и взбалтывали при 90°С в течение 16 часов. TLC (петролейный эфир:этилацетат=3:1, R_f-SM=0,43, R_f-DP=0,24) показывала завершение реакции. Реакционную смесь фильтровали и фильтрационный осадок промывали дихлорметаном (10 мл), фильтрационный осадок собирали и сушили в вакууме с получением соединения 3F-2 (2,80 г, 6,62 ммоль, 73,7% выход) в виде светло-желтого твердого вещества, которое использовали для следующей стадии без дополнительной очистки.

¹H ЯМР: ЕТ15201-2-Р1А 400 МГц MeOD.

δ 8,71 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,91-7,95 (m, 2H), 7,84 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,74 (d, J=7,2 Гц, 1H), 7,41 (t, J=8,0 Гц, 1H), 7,18 (d, J=7,2 Гц, 1H), 2,62 (s, 3H).

Получение промежуточного соединения 3F

К смеси соединения 3F-2 (2,80 г, 6,62 ммоль, 1,0 экв.) в этаноле (28 мл) добавляли SnCl₂⋅2H₂O (7,47 г, 33,1 ммоль, 5,0 экв.) при 20°С под азотом. Полученную в результате смесь нагревали до 85°С и взбалтывали при 85° в течение 16 часов. TLC (петролейный эфир:этилацетат=2:1, R_f-SM=0,43, R_f-DP=0,30) показывала завершение реакции. Реакционную смесь охлаждали до 20°С, выливали в 5 н. водный NaOH (20 мл) и взбалтывали в течение 3 минут, фильтровали и фильтрат экстрагировали дихлорметаном (20 мл, 15 мл). Объединенную органическую фазу сушили с помощью безводного Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением соединения 3F (2,20 г, неочищенного) в виде красного твердого вещества, которое использовали для следующей стадии без дополнительной очистки.

¹Н ЯМР: ЕТ15201-6-Р1А 400 МГц DMSO-d₆.

δ 7,74 (d, J=6,4 Гц, 1Н), 7,61 (dd, J=8,0, 2,4 Гц, 1H), 7,44-7,52 (m, 3H), 7,37 (d, J=6,8 Гц, 1H), 7,21 (d, J=6,8 Гц, 1H), 5,47 (s, 2H), 2,25 (s, 3H).

Получение промежуточного соединения 3F

К смеси соединения 3 (1,00 г, 3,34 ммоль, 1,0 экв.) и соединения 3F (1,31 г, 3,34 ммоль, 1,0 экв.) в тетрагидрофуране (10 мл) добавляли LiHMDS (1 М, 16,7 мл, 5,0 экв.) при 0°С под азотом. Полученную в результате смесь взбалтывали при 0°С в течение 1 часа. TLC (петролейный эфир:этилацетат=2:1, R_f-SM=0,25, R_f-DP=0,40) показывала завершение реакции. Реакционную смесь гасили путем добавления по каплям ледяной воды (2 мл) при 0°С, что давало в результате светло-оранжевый раствор, включающий белое твердое вещество в суспензии. Смесь концентрировали с получением желтого твердого вещества, которое суспендировали в этилацетате (50 мл), сушили с помощью Na₂SO₄, фильтровали через пробку из целита с получением желтого раствора и концентрировали в вакууме. Остаток промывали метил-трет-бутиловым эфиром (20 мл), фильтровали с получением фильтрационного осадка и фильтрационный осадок сушили в вакууме с получением соединения 4F (1,10 г, 1,64 ммоль, 49,0% выход) в виде светло-желтого твердого вещества.

¹H ЯМР: ЕТ15201-10-Р1А1 400 МГц DMSO-d₆ .

δ 11,68 (s, 1Н), 9,63-9,67 (m, 1H), 9,08-9,12 (m, 2H), 8,98 (s, 1H), 8,30 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,05-8,06 (m, 1H), 7,79 (d, J=6,0 Гц, 1H), 7,66 (dd, J=8,2, 2,0 Гц, 1H), 7,54-7,60 (m, 2H), 7,44-7,46 (m, 2H), 7,11 (d, J=6,0 Гц, 1H), 6,91 (q, J=4,4 Гц, 1H), 5,89 (d, J=11,2 Гц, 1H), 4,07 (d, J=12,8 Гц, 1H), 3,74-3,80 (m, 1H), 2,36 (s, 3H), 2,05 (t, J=13,6 Гц, 2H), 1,63-1,68 (m, 3H), 1,11 (s, 2H).

Получение соединения формулы I, R=2-фтор-4-йодфенил (LUT016)

Соединение 4F (1,10 г, 1,64 ммоль, 1,0 экв.) суспендировали в HCl (0,5 М, 29 мл, 9,0 экв.) при 20°С под азотом. Смесь нагревали до 100°С и взбалтывали при 100°С в течение 1 часа. LCMS (ЕТ15201-12-Р1А1) показывала завершение реакции. Горячий раствор фильтровали, промывая кипящей водой (2 × 20 мл). Полученный в результате раствор охлаждали в ледяной бане и продукт кристаллизовали из раствора в виде желтого твердого вещества. Твердое вещество фильтровали и добавляли в насыщенный водный NaCO₃ (100 мл). Смесь взбалтывали в течение 10 минут и фильтровали, фильтрационный осадок промывали водой (50 мл) и собирали в виде неочищенного продукта. Неочищенный продукт очищали с помощью препаративной HPLC (колонка: Waters Xbridge 150 * 25 5 мк; подвижная фаза: [вода (10 мМ NH₄HCO₃)-ACN]; В%: 50% - 80%, 11 минут) с получением LUT016 (125 мг, 212 мкмоль, 12,9% выход, 99,6% чистота) в виде желтого твердого вещества.

¹H ЯМР: ЕТ15201-12-Р1А1 400 МГц DMSO-d₆ .

δ 13,81 (s, 1Н), 11,79 (s, 1H), 9,71 (s, 1H), 9,04 (s, 2H), 8,72 (s, 1H), 8,24 (d, J=8,4 Гц, 1H), 8,04 (q, J=2,0 Гц, 1H), 7,78 (d, J=6,0 Гц, 1H), 7,65 (d, J=9,6 Гц, 1H), 7,57 (q, J=8,4 Гц, 2H), 7,44 (t, J=8,4 Гц, 1H), 7,11 (d, J=6,0 Гц, 1H), 6,90 (d, J=4,8 Гц, J=2,8 Гц, 1H), 2,36 (s, 3H).

Пример 7

Синтез соединения формулы I, R=4-хлор-3-(трифторметил)фенил (LUT017)

Получение промежуточного соединения 3G-2

К смеси соединения 3В-1 (2,00 г, 8,98 ммоль, 1,0 экв.) и соединения 3G-1 (2,11 г, 10,8 ммоль, 1,2 экв.) в изопропаноле (20 мл) добавляли TFA (1,02 г, 8,98 ммоль, 1,0 экв.) одной порцией при 20°С под азотом. Смесь взбалтывали при 90°С в течение 18 часов. LCMS (ЕТ15060-19-Р1А1) показывала завершение реакции. Смесь охлаждали до 20°С и фильтровали. Фильтрационный осадок промывали дихлорметаном (10 мл) и собирали как продукт (3,20 г, 8,38 ммоль, 93,3% выход) в виде белого твердого вещества, которое использовали для следующей стадии непосредственно без дополнительной очистки.

¹H ЯМР: ЕТ15060-3-Р1А1 400 МГц DMSO-d₆

10,21 (s, 1Н), 8,81 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,42 (dd, J=2,4 Гц, 1H), 8,28 (d, J=2,0 Гц, 1H), 8,26 (d, J=2,0 Гц, 1H), 8,12 (d, J=6,0 Гц, 1H), 7,79 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,73 (d, J=8,8 Гц, 1H), 6,98 (d, J=6,0 Гц, 1H), 2,50 (s, 3H).

Получение промежуточного соединения 3G

К смеси соединения 3G-2 (3,20 г, 8,38 ммоль, 1,0 экв.) в этаноле (30 мл) добавляли SnCl₂⋅2H₂O (9,46 г, 41,9 ммоль, 5,0 экв.) одной порцией при 20°С под азотом. Смесь взбалтывали при 85°С в течение 16 часов. LCMS (ЕТ15060-22-Р1А) показывала завершение реакции. Темный раствор концентрировали, разбавляли дихлорметаном (50 мл), промывали водным NaOH (1,30 моль/л, 50 мл). Смесь взбалтывали в течение 10 минут и фильтровали. Фильтр отделяли и водную фазу экстрагировали дихлорметаном (20 мл). Объединенную органическую фазу промывали солевым раствором (30 мл), сушили с помощью безводного Na₂SO₄ , фильтровали и концентрировали в вакууме с получением соединения 3G (2,50 г, 7,11 ммоль, 84,8% выход) в виде желтого твердого вещества.

¹Н ЯМР: ET15060-22-p1a1 400 МГц DMSO-d₆ .

9,34 (s, 1Н), 8,58 (d, J=8,8, 1H), 8,37 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,99 (d, J=6,0 Гц, 1H), 7,65-7,70 (m, 1H), 7,57 (d, J=6,0 Гц, 1H), 7,35 (d, J=8,4, 1H), 5,60 (s, 2H), 2,30 (s, 3H).

Получение промежуточного соединения 4G

К смеси соединения 3 (2,00 г, 6,68 ммоль, 1,0 экв.) и соединения 3G (2,35 г, 6,68 ммоль, 1,0 экв.) в тетрагидрофуране (20 мл) добавляли каплями LiHMDS (1 М, 33,4 мл, 5 экв.) при 0°С под азотом. Смесь взбалтывали при 0°С в течение 1 часа. TLC (петролейный эфир:этилацетат=1:1, R_f=0,45) показывала завершение реакции. Темно-красную реакционную смесь гасили путем добавления по каплям ледяной воды (3 мл), что давало в результате светло-оранжевый раствор, включающий белое твердое вещество в суспензии. Смесь концентрировали с получением желтого твердого вещества, которое суспендировали в этилацетате (150 мл), сушили (MgSO₄), фильтровали через пробку из целита с получением желтого раствора и концентрировали в вакууме. Остаток суспендировали в МТВЕ (150 мл) и взбалтывали в течение 12 часов. Смесь фильтровали и фильтрационный осадок сушили в вакууме с получением соединения 4G (1,50 г, 1,47 ммоль, 22,1% выход, 62,0% чистота) в виде красного твердого вещества. (LCMS:ET15060-32-P1A1).

¹Н ЯМР: ЕТ15060-32-Р1А1 400 МГц DMSO-d₆.

11,69 (s, 1H), 9,66 (d, J=2,0 Гц, 1H), 9,64 (s, 1H), 9,10 (s, 1H), 8,96 (s, 1H), 8,50 (d, J=2,4 Гц, 1H), 8,33-8,41 (m, 2H), 8,05 (d, J=2,8 Гц, 1H), 7,96 (d, J=6,0 Гц, 1H), 7,62-7,64 (m, 2H), 7,20-7,22 (m, 1H), 6,94 (d, J=4,8 Гц, 1H), 5,88 (d, J=10,8 Гц, 1H), 4,03-4,06 (m, 1H), 3,73-3,79 (m, 1H), 2,37 (s, 3H), 1,99-2,07 (m, 2H), 1,62-1,80 (m, 3H).

Получение соединения формулы I, R=4-хлор-3-(трифторметил)фенил (LUT017)

Соединение 4G (1,50 г, 2,38 ммоль, 1,0 экв.) суспендировали в водной HCl (0,5 М, 28,5 мл, 6,0 экв.), нагревали до 100°С и взбалтывали в течение 2 часов. Массу твердого вещества растворяли с получением желтого раствора. LCMS (ЕТ15060-36-Р1А2) показывала завершение реакции. Горячий раствор фильтровали, промывая кипящей водой (2 × 10 мл). Значение рН доводили до 9 с помощью Na₂CO₃ (твердое вещество). Смесь фильтровали и фильтрационный осадок очищали с помощью препаративной TLC (петролейный эфир:этилацетат=0:1, R_f=0,65) с получением 0,3 г твердого вещества. Твердое вещество очищали с помощью препаративной HPLC (колонка: YMC-Actus Triart С18 100 * 30 мм * 5 мкм; жидкая фаза: [А-10 мМ NH4HCO₃ в H₂O; B-ACN]B%: 50% - 95%, 12 минут]) с получением LUT017 (150 мг, 269 мкмоль, 11,3% выход, 98,0% чистота) в виде желтого твердого вещества.

¹Н ЯМР: ЕТ15060-36-Р1А1 400 МГц DMSO-d₆ .

13,84 (br. s, 1H), 11,83 (br. s, 1H), 9,73 (s, 1H), 9,60 (s, 1H), 9,06 (s, 1H), 8,74 (s, 1H), 8,52 (d, J=2,4 Гц, 1H), 8,42 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,36 (d, J=2,4 Гц, 1H), 8,05 (dd, J=4,8, 1,2 Гц, 1H), 7,98 (d, J=6,0 Гц, 1H), 7,66 (dd, J=8,8, 2,8 Гц, 1H), 7,23 (d, J=6,0 Гц, 1H), 6,92 (dd, J=7,6, 4,8 Гц, 2H), 2,39 (s, 3H).

Пример 8

Синтез соединения формулы I, R=3,5-дигидроксифенил (LUT019) Получение промежуточного соединения 3Н-2

К смеси соединения 3В-1 (3,00 г, 13,5 ммоль, 1,0 экв.) в изопропаноле (30 мл) добавляли соединение 3Н-3 (2,48 г, 16,2 ммоль, 1,2 экв.) и трифторуксусную кислоту (1,54 г, 13,5 ммоль, 996 мл, 1,0 экв.) при 20°С под азотом. Полученную в результате смесь нагревали до 90°С и взбалтывали при 90°С в течение 16 часов. TLC (петролейный эфир:этилацетат=3:1, R_f-SM=0,43, R_f-DP=0,24) показывала завершение реакции. Реакционную смесь фильтровали и фильтрационный осадок промывали дихлорметаном (10 мл), фильтрационный осадок собирали и сушили в вакууме с получением соединения 3Н-2 (4,50 г, 13,3 ммоль, 98,4% выход) в виде желтого твердого вещества, которое использовали для следующей стадии без дополнительной очистки.

¹Н ЯМР: ЕТ15201-5-Р1А 400 МГц MeOD.

δ 8,75 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,91 (d, J=8,8 Гц, 1Н), 7,62 (d, J=7,2 Гц, 1H), 7,06 (d, J=7,2 Гц, 1H), 6,74 (s, 2H), 6,67 (s, 1H), 3,86 (s, 6H), 2,6 (s, 3H).

Получение промежуточного соединения 3Н

К смеси соединения 3Н-2 (4,50 г, 13,3 ммоль, 1,0 экв.) в этаноле (45 мл) добавляли SnCl₂⋅2H₂O (15,0 г, 66,3 ммоль, 5,0 экв.) при 20°С под азотом. Полученную в результате смесь нагревали до 85°С и взбалтывали при 85°С в течение 16 часов. TLC (петролейный эфир:этилацетат=3:1, R_f-SM=0,43, R_f-DP=0,30) показывала завершение реакции. Реакционную смесь охлаждали до 20°С, выливали в 5 н. водный NaOH (20 мл) и взбалтывали в течение 5 минут, фильтровали и фильтрат экстрагировали дихлорметаном (20 мл, 15 мл). Объединенную органическую фазу сушили с помощью безводного Na₂SO₄ , фильтровали и концентрировали в вакууме с получением соединения 3Н (3,80 г, неочищенного) в виде красного твердого вещества, которое использовали для следующей стадии без дополнительной очистки.

¹H ЯМР: ЕТ15201-7-Р1А 400 МГц DMSO-d₆.

δ 8,77 (s, 1Н), 8,15 (s, 1H), 7,90 (d, J=6,0 Гц, 1H), 7,63 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,41 (d, J=6,4 Гц, 1H), 7,23-7,27 (m, 3H), 6,12 (t, J=2,0 Гц, 1H), 5,48 (s, 2H), 3,74 (s, 6H), 2,26 (s, 3H).

Получение промежуточного соединения 4H

К смеси соединения 3 (2,00 г, 6,68 ммоль, 1,0 экв.) и соединения 3Н (2,07 г, 6,68 ммоль, 1,0 экв.) в тетрагидрофуране (10 мл) добавляли LiHMDS (1 М, 33 мл, 5,0 экв.) при 0°С под азотом. Полученную в результате смесь взбалтывали при 0°С в течение 1 часа. TLC (петролейный эфир:этилацетат=2:1, R_f-SM=0,43, R_f-DP=0,30) показывала завершение реакции. Реакционную смесь гасили путем добавления по каплям ледяной воды (2,0 мл) при 0°С, что давало в результате светло-оранжевый раствор, включающий белое твердое вещество в суспензии. Смесь концентрировали с получением желтого твердого вещества, которое суспендировали в этилацетате (50 мл), сушили с помощью Na₂SO₄ , фильтровали через пробку из целита с получением желтого раствора и концентрировали в вакууме. Остаток промывали метил-трет-бутиловым эфиром (20 мл), фильтровали с получением фильтрационного осадка и фильтрационный осадок сушили в вакууме с получением соединения 4Н (2,30 г, неочищенного) в виде коричневого твердого вещества.

¹Н ЯМР: ЕТ15201-13-Р1А 400 МГц DMSO-d₆ .

δ 11,69 (s, 1H), 9,66 (dd, J=6,0, 2,0 Гц, 1Н), 9,11 (d, J=8,0 Гц, 1H), 8,98 (s, 1H), 8,41 (d, J=8,4 Гц, 1H), 8,04-8,07 (m, 1H), 7,94 (d, J=6,0 Гц, 1H), 7,59 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,27 (d, J=2,0 Гц, 2H), 7,13 (d, J=5,6 Гц, 1H), 6,89-6,93 (m, 1H), 6,15 (d, J=2,0 Гц, 1H), 5,89 (dd, J=9,2, 2,0 Гц, 1H), 4,07 (d, J=13,2 Гц, 1H), 3,77 (s, 6H), 2,36 (s, 3H), 1,99-2,08 (m, 2H), 1,63-1,81 (m, 3H), 1,10 (s, 1H).

Получение соединения формулы I, R=3,5-дигидроксифенил (LUT019)

К раствору соединения 4Н (1,20 г, 2,04 ммоль, 1,0 экв.) в дихлорметане (10 мл) добавляли BBr₃ (5,11 г, 20,4 ммоль, 2,0 мл, 10,0 экв.) при 0°С под азотом. Полученную в результате смесь нагревали до 25°С и взбалтывали в течение 16 часов. LCMS (ЕТ15201-18-Р1А2) показывала завершение реакции. Реакционную смесь концентрировали в вакууме и выливали в насыщенный водный NH₄Cl (10 мл), сушили с помощью безводного Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали с помощью препаративной HPLC (колонка: Waters Xbridge 150 * 25 5 мк; подвижная фаза: [вода (0,05% гидроксида аммония объем/объем)-МеОН]; В%: 15% - 50%, 11 минут) с получением продукта LUT019 (20,0 мг, 40,8 мкмоль, 2,00% выход, 97,1% чистота) в виде желтого твердого вещества.

¹Н ЯМР: ЕТ15201-18-Р1А2 400 МГц MeOD.

δ 9,60 (br. s, 1Н), 9,02 (s, 1H), 8,53 (s, 1H), 8,23 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,98 (dd, J=3,2, 1,6 Гц, 1H), 7,74 (d, J=6,0 Гц, 1H), 7,59 (d, J=8,4 Гц, 2H), 7,23 (d, J=7,2 Гц, 1H), 6,90-6,93 (m, 1H), 6,61 (d, J=2,4 Гц, 2H), 6,07 (q, J=2,0 Гц, 1H), 2,43 (s, 3H).

Пример 9

Получение соединения формулы I, R=фенил-3-сульфонамид (LUT020)

Получение промежуточного соединения 3I-2

К смеси соединения 3В-1 (2,00 г, 8,98 ммоль, 1,0 экв.) и соединения 3I-1 (1,86 г, 10,8 ммоль, 1,2 экв.) в изопропаноле (50 мл) добавляли TFA (3,07 г, 26,9 ммоль, 3,0 экв.) одной порцией при 20°С под азотом. Смесь взбалтывали при 90°С в течение 18 часов. LCMS (ЕТ15060-20-Р1А1) показывала завершение реакции. Смесь охлаждали до 20°С и смесь фильтровали. Фильтрационный осадок промывали дихлорметаном (10 мл) и собирали с получением в качестве продукта соединения 3I-2 (3,20 г, 8,93 ммоль, 99,4% выход) в виде белого твердого вещества, которое использовали для следующей стадии непосредственно без дополнительной очистки.

¹Н ЯМР: ЕТ15060-5-Р1А1 400 МГц DMSO-d₆ .

10,19 (s, 1Н), 8,82 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,31 (s, 1H), 8,06 (d, J=6,4 Гц, 1H), 7,79 (d, J=8,8, Гц, 1H), 7,54-7,59 (m, 1H), 7,40 (s, 1H), 6,95 (d, J=6,4 Гц, 1H), 2,50 (s, 3H).

Получение промежуточного соединения 31

К смеси соединения 3I-2 (3,20 г, 8,93 ммоль, 1,0 экв.) в этаноле (32 мл) добавляли SnCl₂⋅2H₂O (10,1 г, 44,7 ммоль, 5,0 экв.) одной порцией при 20°С под азотом. Смесь взбалтывали при 85°С в течение 16 часов. LCMS (ЕТ15060-23-Р1А) показывала завершение реакции. Темный раствор концентрировали, разбавляли дихлорметаном (50 мл), промывали водным NaOH (1,30 моль/л, 20 мл). Смесь взбалтывали в течение 10 минут и фильтровали. Фильтр отделяли и водную фазу концентрировали в вакууме. Твердое вещество растворяли в дихлорметане:метаноле (8:1, 200 мл). Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали в вакууме с получением соединения 31 (2,50 г, 7,61 ммоль, 85,3% выход) в виде красного твердого вещества.

¹Н ЯМР: ЕТ15060-23-Р1А1 400 МГц DMSO-d₆ .

8,98 (s, 1Н), 8,20 (s, 1H), 7,94 (s, J=6,8 Гц, 1H), 7,84 (d, J=6,0 Гц, 1H), 7,66 (dd, J=8,8 Гц, 1H), 7,38 (d, J=6,0, Гц, 1H), 7,26-7,28 (m, 2H), 7,21 (d, J=8,4, 1H), 5,43 (s, 2H), 2,23 (s, 3H).

Получение промежуточного соединения 4I

К смеси соединения 3 (2,00 г, 6,68 ммоль, 1,0 экв.) и соединения 31 (2,19 г, 6,68 ммоль, 1,0 экв.) в тетрагидрофуране (20 мл) каплями добавляли LiHMDS (1 М, 33,4 мл, 5,0 экв.) при 0°С под азотом. Смесь взбалтывали при 0°С в течение 1 часа. TLC (петролейный эфир:этилацетат=0:1, R_f=0,20) показывала завершение реакции. Темно-красную реакционную смесь гасили путем добавления по каплям воды (3 мл, охлаждение в ледяной бане), что давало в результате светло-оранжевый раствор, включающий белое твердое вещество в суспензии. Смесь концентрировали с получением желтого твердого вещества, которое суспендировали в этилацетате (100 мл), сушили (MgSO₄ ), фильтровали через пробку из целита с получением желтого раствора и концентрировали в вакууме. Остаток суспендировали в МТВЕ (30 мл) и взбалтывали в течение 12 часов. Смесь фильтровали и фильтрационный осадок сушили в вакууме с получением соединения 4I (2,20 г, неочищенного) в виде желтого твердого вещества.

¹Н ЯМР: ЕТ15060-40-Р1А1 400 МГц DMSO-d₆ (неочищенное).

Получение соединения формулы I, R=фенил-3-сульфонамид (LUT020)

Соединение 4I (2,00 г, 3,29 ммоль, 1,0 экв.) суспендировали в HCl /EtOAc (4 М, 41,1 мл, 50 экв.) и взбалтывали при 30°С в течение 2 часов. LCMS (ЕТ15060-45-Р1А1) показывала завершение реакции. Раствор фильтровали, промывали этилацетатом (2×10 мл). К твердому веществу добавляли воду (15 мл). Значение рН доводили до 9 с помощью Na₂CO₃ (твердое вещество). Смесь фильтровали и фильтрационный осадок очищали с помощью препаративной TLC (петролейный эфир:этилацетат=0:1, R_f=0,10) с получением 0,19 г твердого вещества. Твердое вещество очищали с помощью препаративной HPLC (колонка: YMC-Actus Triart С18 100 * 30 мм * 5 мкм; жидкая фаза: [А-10 мМ NH₄HCO₃ в H₂O; B-ACN]B%: 25% - 55%, 12 минут] с получением LUT020 (85,0 мг, 159 мкмоль, 4,83% выход, 98,0% чистота) в виде желтого твердого вещества.

¹H ЯМР: ЕТ15060-45-Р1А2 400 МГц DMSO-d₆ .

13,83 (s, 1Н), 11,82 (s, 1H), 9,73 (s, 1H), 9,49 (s, 1H), 9,07 (s, 1H), 8,74 (s, 1H), 8,45-8,47 (m, 2H), 8,16 (d, J=8,8 Гц, 1H), 8,05 (dd, J=4,8, 1,6 Гц, 1H), 7,95 (d, J=6,0 Гц, 1H), 7,63 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,51 (t, J=8,0 Гц, 1H), 7,43 (d, J=8,0 Гц, 1H), 7,33 (s, 2H), 7,19 (d, J=6,0 Гц, 1H), 6,91 (dd, J=8,0, 4,8 Гц, 1H), 2,38 (s, 3H).

Пример 10

BRaf-ингибирующая активность у соединений в соответствии с настоящим раскрытием

В данном анализе BRaf-ингибирующая активность у соединения формулы I, в которой R представляет собой 3-(трифторметокси)фенил, (LUT014) и вемурафениба, известного ингибитора BRAF, включающего мутацию V600E, тестировали на BRaf дикого типа и BRAF, включающем мутацию V600E. Известный ингибитор BRaf и CRaf, GW5074, включали в анализ в качестве контроля. LUT014 и вемурафениб тестировали в режиме 10 доз IC₅₀ с 3-кратным серийным разбавлением, начиная с 10 мкМ. Контрольное соединение GW5074 тестировали в режиме 10 доз IC₅₀ с 3-кратным серийным разбавлением, начиная с 20 мкМ. Реакции выполняли при 10 мкМ АТФ.

Значения IC₅₀, полученные в данном анализе, показаны в приведенной ниже таблице.

Пример 11

Фосфорилирование ERK в первичных человеческих кератиноцитах

Общая процедура

Следует отметить, что не желая быть связанным теорией, автор настоящего изобретения полагает, что кератиноциты, вероятно, являются сайтом кожных побочных эффектов, и ингибирование EGFR и/или его нижележащих эффекторов (МАРК, МЕК, PI3K и т.п.) в кератиноцитах, вероятно, является механизмом, лежащим в основе этого побочного эффекта. В этом эксперименте изучали влияние соединений в соответствии с настоящим раскрытием на фосфорилирование ERK в кератиноцитах человека. Фосфорилирование ERK указывает на ее активацию.

Нормальные клетки кератиноцитов HEKa человека приобретали у компании Gibco Rhenium, всевали в 10-см чашки (300000 клеток/чашка) и инкубировали на протяжении ночи при 37°С, 5% СО₂. На следующее утро среду заменяли голодной средой на 2 часа, а затем клетки обрабатывали еще 2 часа тестируемыми соединениями. После инкубации клетки лизировали с помощью RIPA и экстракты белков анализировали с помощью вестерн-блоттинга на предмет фосфо-ERK и суммарной ERK. Необработанные клетки и обработанные с помощью 0,1% DMSO клетки использовали в качестве отрицательного контроля. Ростовые факторы HKGS использовали в качестве положительного контроля.

Вестерн-блоттинг.7,5 мкг суммарного экстракта загружали в 10% акриламидный гель. После переноса мембраны блокировали с помощью TBST/5% снятого молока, а затем инкубировали с мышиным антителом против фосфо-ERK (1:1000 в TBST 5% BSA, ON при 4°С) и Goat anti-Mouse-HRP (1:10000 в TBST 5% BSA, 1 час, RT). Мембраны подвергали воздействию с использованием SuperSignal West Pico Chemiluminescent Substrate.

Затем HRP инактивировали путем инкубации мембран в течение 1 часа с 0,5% азидом натрия. После промывок и воздействия ECL для гарантии отсутствия сигнала мембраны повторно блокировали в течение 15 минут с помощью TBST/5% снятого молока, а затем инкубировали с антителом кролика против суммарной ERK2 (1:500 в TBST 5% BSA, ON при 4°С), Goat anti-Rabbit-HRP (1: 5000 в TBST 5% BSA, 1 час, RT) и окончательно подвергали воздействию с использованием SuperSignal West Pico Chemiluminescent Substrate. Пленки сканировали и сигнал оценивали количественно с использованием программного обеспечения ImageJ. Результаты вычисляли как фосфо-ERK/суммарная ERK.

Пример 12

Фосфорилирование ERK, индуцированное соединениями в соответствии с настоящим раскрытием LUT014, LUT015, LUT017

Клетки HEKa обрабатывали LUT014, LUT015, LUT017 и вемурафениба при 0,3 мкМ и 1 мкМ, как описывается в примере 11, и выполняли анализ вестерн-блоттинга лизатов клеток HEKa. Ростовые факторы HKGS использовали в качестве положительного контроля. На Фиг. 1А показаны фосфо-ERK (верхняя панель) и суммарная ERK (нижняя панель) при обработке с помощью 0,3 мкМ тестируемых соединений. На Фиг. 1 В показан денситометрический анализ блотов на Фиг. 1А на основании вычисления отношения фосфо-ERK/суммарная ERK. На Фиг. 1С показаны фосфо-ERK (верхняя панель) и суммарная ERK (нижняя панель) при обработке с помощью 1 мкМ тестируемых соединений. На Фиг. 1D показан денситометрический анализ блотов на Фиг. 1С на основании вычисления отношения фосфо-ERK/суммарная ERK.

Пример 13

Фосфорилирование ERK, индуцированное соединениями LUT012, LUT016 и С-1

Клетки HEKa обрабатывали с помощью LUT012, LUT016 и известных соединений вемурафениба и С-1 (старая серия и новая серия) при 0,3 мкМ и 1 мкМ, как описывается в примере 11, и выполняли анализ вестерн-блоттинга лизатов клеток HEKa. Ростовые факторы HKGS использовали в качестве положительного контроля. Соединение С-1 характеризуется следующей структурой:

На Фиг.2А показаны фосфо-ERK (верхняя панель) и суммарная ERK (нижняя панель) при обработке с помощью 0,3 мкМ тестируемых соединений. На Фиг. 2 В показан денситометрический анализ блотов на Фиг. 2А на основании вычисления отношения фосфо-ERK/суммарная ERK. На Фиг. 2С показаны фосфо-ERK (верхняя панель) и суммарная ERK (нижняя панель) при обработке с помощью 1 мкМ тестируемых соединений. На Фиг. 2D показан денситометрический анализ блотов на Фиг. 2С на основании вычисления отношения фосфо-ERK/суммарная ERK.

Пример 14

Фосфорилирование ERK, индуцированное соединениями LUT012, LUT013, LUT014, LUT015, LUT016, LUT017, LUT020 и С-1

Клетки HEKa обрабатывали с помощью вемурафениба, С-1, LUT012, LUT013, LUT014, LUT015, LUT016, LUT017 и LUT020 при 0,3 мкМ и 1 мкМ, как описывается в примере 11, и выполняли анализ вестерн-блоттинга лизатов клеток HEKa. Ростовые факторы HKGS использовали в качестве положительного контроля. На Фиг. 3А показаны фосфо-ERK (верхняя панель) и суммарная ERK (нижняя панель) при обработке с помощью 0,3 мкМ тестируемых соединений. На Фиг. 3В показаны фосфо-ERK (верхняя панель) и суммарная ERK (нижняя панель) при обработке с помощью 1 мкМ тестируемых соединений. На Фиг. 3С показан денситометрический анализ блотов на Фиг. 3А и 3В на основании вычисления отношения фосфо-ERK/суммарная ERK.

Пример 15

Фосфорилирование ERK, индуцированное новыми соединениями LUT014, LUT017 по сравнению с С-1

Клетки HEKa обрабатывали с помощью С-1, LUT014 и LUT017 при концентрации 0,003 мкМ, 0,03 мкМ и 0,3 мкМ, как описывается в примере 11, и выполняли анализ вестерн-блоттинга лизатов клеток HEka. Ростовые факторы HKGS использовали в качестве положительного контроля. На Фиг. 4А показаны фосфо-ERK (верхняя панель) и суммарная ERK (нижняя панель) при обработке 0,003 мкМ, 0,03 мкМ и 0,3 мкМ тестируемых соединений. На Фиг. 4В показан денситометрический анализ блотов на Фиг. 4А на основании вычисления отношения фосфо-ERK/суммарная ERK.

Пример 16

Эффект соединений LUT012, LUT013, LUT014, LUT015, LUT016, LUT017, LUT-019, LUT020, С-1 и вемурафениба в отношении пролиферации клеток MIA РаСа

В данном примере исследовали эффект соединений в отношении пролиферации клеток MIA РаСа2 K-ras. Предполагали, что соединения, которые индуцируют фосфорилирование ERK, также будут индуцировать пролиферацию клеток Mia РаСа.

Клетки высевали в голодную среду при 5000 клеток/лунка в 96-луночный планшет на 24 часа при 37°С, 5% СО_2. Тестируемые соединения добавляли при разных концентрациях, варьирующих от 0,002 мкМ до 10 мкМ. Контролями служили необработанные клетки и среда-носитель из 0,1% DMSO. Клетки инкубировали при 37°С, 5% СО₂, в течение 72 часов, а затем пролиферацию тестировали с использованием набора для пролиферации ATPlite (Perkin-Elme). Каждый результат представляет среднее значение 6 лунок. Результаты представлены в виде процента избыточной пролиферации по сравнению с контролем DMSO. См. Фиг. 5.

Концентрацию соединений, которая обеспечивает самую высокую пролиферацию, сравнивали с DMSO. DMSO вычисляли как 100%. Через 72 часа % пролиферации по сравнению с контролем DMSO, индуцированной С-1, составлял 30%, индуцированной LUT013 - 173%, индуцированной LUT014 - 116%, индуцированной LUT015 - 29%, индуцированной LUT016 - 110%, индуцированной LUT017 - 174%, индуцированной LUT012 - 20%, индуцированной LUT019 - 7%, и индуцированной LUT020 - 12%. Вемурафениб демонстрировал 12% пролиферации по сравнению с DMSO.

Пример 17

Исследование с анализом селективности в отношении киназы соединения I, R=3-(трифторметокси)фенил (LUT014)

Получение соединения и контроли анализа

Все соединения получали с 50-кратной конечной концентрацией анализа в 100% DMSO. Этот рабочий исходный раствор соединения добавляли в аналитическую лунку, как первый компонент в реакции, а затем оставшиеся компоненты. В стандартном сервисе KinaseProfiler™ нет стадии предварительной инкубации соединения и киназы до начала реакции. Лунки положительного контроля содержали все компоненты реакции, кроме представляющего интерес соединения; однако DMSO (в конечной концентрации 2%) включали в эти лунки для контроля эффектов растворителя. Пустые лунки содержали все компоненты реакции, при этом эталонный ингибитор заменял представляющее интерес соединение. Это устраняет киназную активность и устанавливает базовую линию (остается 0% киназной активности). Результаты представлены в таблице 4.

Пример 18

Скрининг соединений на предмет фототоксичности

Известно, что некоторые ингибиторы BRAF проявляют фототоксичность. Поэтому, соединения в соответствии с настоящим раскрытием подвергали скринингу на предмет фототоксичности с использованием анализа связывания нейтрального красного 3Т3.

Вкратце, фибробласты мышей BALB/c-3Т3 (изначально полученные из АТСС) высевали в 96-луночные планшеты при 12000 клеток на лунку и выращивали в течение 24 часов. Тестируемые соединения и положительный контроль (хлорпромазин) растворяли и серийно разбавляли в DMSO. Отрицательный контроль (гистидин) растворяли и разбавляли в HBSS. Затем осуществляли разбавление всех тестируемых изделий в HBSS при конечных тестовых концентрациях. В начале анализа ростовую среду удаляли из планшетов и заменяли разбавлением тестируемого средства. Использовали шесть повторений для каждой концентрации. Клетки инкубировали в темноте с тестируемым изделием в течение 1 часа, подвергали воздействию света UVA (2,5 Дж/см² в течение 18 минут) и инкубировали в течение 24 часов в темноте. Параллельный неподвергаемый излучению планшет обрабатывали аналогичным образом, за исключением того, что его хранили в темноте, а не освещали.

Для окрашивания нейтральным красным среду удаляли и добавляли свежую среду, включающую 25 мкг/мл нейтрального красного (Sigma). После трех часов инкубации клетки промывали с помощью PBS и клеточный краситель растворяли 1% уксусной кислотой в 50% этаноле. Измеряли клеточный нейтральный красный по его поглощаемости при 540 нм.

Анализ данных. IC₅₀ (концентрацию, вызывающую снижение жизнеспособности на 50%) вычисляли для каждого условия с помощью линейной интерполяции.

Вычисляли фактор фотораздражения (PIF): PIF=IC₅₀(-Irr)/IC₅₀(+Irr).

PIF>5 указывает на фототоксичность; 2<PIF<5 указывает на возможную фототоксичность; PIF<2 указывает на отсутствие фототоксичности.

Кроме того, средний фотоэффект (МРЕ) вычисляли путем сравнения полных кривых концентрация-ответ. МРЕ представляет собой средневзвешенное значение разницы в ответе эквивалентных доз, нормализованных по сдвигу в IC₅₀.

МРЕ>0,15 указывает на фототоксичность; 0,1<МРЕ<0,15 указывает на возможную фототоксичность; МРЕ<0,1 указывает на отсутствие фототоксичности.

С-15 и С-19 демонстрировали фототоксичность. С-1 и LUT-104 не демонстрировали фототоксичность.

Пример 19

In vitro эффект LUT014 в отношении фосфо-ERK после введения ингибиторов

EGFR

Клетки HEKa обрабатывали с помощью LUT014 и ингибиторов EGFR, эрлотиниба и цетуксимаба, как описывается в примере 11. HKGS использовали в качестве положительного контроля. Измеряли эффект LUT014 и ингибиторов EGFR в отношении фосфо-ERK с помощью вестерн-блоттинга, как описывается в примере 11.

На Фиг. 7А - 7С и в таблице 6 показаны результаты эффекта LUT014 в отношении фосфо-ERK после введения ингибиторов EGFR.

LUT014 повышал фосфо-ERK на 200-800% по сравнению с обработанными DMSO клетками. Эрлотиниб снижал фосфо-ERK по сравнению с обработанными HKGS клетками. LUT014 повышал фосфо-ERK при добавлении к клеткам, обработанным эрлотинибом. LUT014 повышал фосфо-ERK при добавлении к клеткам, обработанным цетуксимабом.

Пример 20

Исследования проницаемости с использованием композиции для местного применения, включающей LUT014

Эксперимент по проницаемости и проникновению ex vivo композиции для местного применения, содержащей LUT-014, проводили с использованием непрерывного потока MedFlux-HT™ через диффузионные ячейки. Образец кожи помещали между донорным и рецепторным отделениями диффузионной ячейки. Диффузию композиции для местного применения измеряли с использованием цитратного/фосфатного буфера (рН 4,0) с 0,01% Brij в качестве раствора рецептора. Образец проникшего в кожу LUT014 экстрагировали с использованием ацетонитрила/воды 90/10 в качестве экстракционного растворителя.

Максимальное накопленное содержание LUT014, наблюдаемое в растворе рецептора через 24 часа, составляло менее 2 нг/мл.

Пример 21

Проводили исследования токсичности для соединений в соответствии с настоящим изобретением с использованием LUT014 в качестве иллюстративного соединения. Результаты кратко описаны ниже.

Пероральное введение LUT014 в течение 7 суток крысе Wistar при уровнях дозы 250, 500 и 1000 мг/кг/сутки не приводило к смертности.

Кожное введение LUT014 хорошо переносилось карликовыми свиньями при уровнях 5 мг/кг/сутки в течение до 6 суток.

Результаты теста Эймса in vitro показали, что LUT014 не является мутагенным в анализе обратной мутации Salmonella typhimurium и в анализе обратной мутации Escherichia coli.

Поскольку LUT014 индуцировал IVIS≤3, не требуется никакой классификации для раздражения глаз или серьезного повреждения глаз, как это наблюдалось в исследовании ВСОР.

LUT014 классифицируется как нефототоксичный (3Т3 NRU).

Пример 22

Разрабатывали многоцентровое двухфазное исследование 1/2 фазы.

Основная цель

Оценить безопасность и фармакокинетические параметры LUT014 у больных колоректальным раком, которые получают ингибиторы EGFR. Вторичные цели

Оценить эффективность LUT014 при лечении угревых поражений 1 и 2 степени, возникающих у больных колоректальным раком, получающих ингибиторы EGFR. Популяция больных

Больные колоректальным раком, получающие ингибиторы EGFR, у которых развились угревые поражения. Методология

Это многоцентровое открытое исследование с увеличением дозы, в котором определят максимальную переносимую дозу (MTD), установят фармакокинетические параметры LUT014 и оценят эффективность LUT014 при лечении больных, которые получают терапию ингибитором EGFR и у которых развились угревые поражения.

Включение в исследование изначально будет происходить в когортах из трех субъектов по традиционной схеме 3+3 с повышающейся дозой. Больные, которые получают ингибиторы EGFR и у которых развились угревые поражения 1 или 2 степени, будут получать лечение с помощью LUT014 в течение 4 недель. Гель LUT014 будут наносить каждое утро после купания или принятия душа. Нанесение будут осуществлять на лицо и верх передней и задней части грудной клетки. Наносить будут тонкий слой геля.

В исходной когорте LUT014, если ограничивающая дозу токсичность (DLT) не возникает у начальных 3 больных или у 1 из 6 больных, если эта когорта начинает насчитывать 6 больных в течение 4 недель терапии, подключается вторая когорта. Для этого второго режима введения дозы больные снова должны наносить LUT014 на лицо, а также верх передней и задней части грудной клетки ежедневно после купания в течение 4 недель. Если DLT не наблюдают у начальных 3 больных, получающих лечение в данной когорте, или у 1 из 6 больных, если эта вторая когорта начинает насчитывать 6 больных, лечение будет получать третья когорта из 3 больных или 6 больных, если эта третья когорта начинает насчитывать 6 больных. Эти больные также должны ежедневно наносить LUT014 на свое лицо, переднюю и заднюю части грудной клетки после купания в течение 4 недель.

Для каждой когорты введения дозы, если ни один из субъектов не испытывает DLT на основании версии 4.0 Общей терминологии критериев нежелательных явлений (СТСАЕ) Национального института рака, которая распознает 3 или больше степеней токсичности, последующая группа из трех субъектов будет получать следующий режим введения более высокой дозы LUT014. Однако, если один из трех начальных субъектов испытывает DLT, когорта субъектов в этом режиме введения дозы будет расширена до шести субъектов. Если по меньшей мере двое из шести субъектов испытывают DLT, это будет считаться непереносимой дозой.

MTD определяют как самую высокую концентрацию вводимой дозы LUT014, при которой менее двоих (из когорты до шести) субъектов испытывают DLT.

Определение DLT потребует того, что проявится токсичность 3 степени или выше и, возможно, будет определена независимым комитетом по оценке безопасности вероятно или определенно как связанная с исследуемым лекарственным средством.

После завершения фазы повышения дозы исследования до 60 больных будут включены в исследование и рандомизированы либо для получения LUT014 при MTD или меньшей дозе, выбранной спонсором, либо для получения лечения с применением идентичной по внешнему виду среды-носителя. LUT014 или среда-носитель будут наноситься им на кожу на все участки с признаками угревых поражений. Больные будут получать лечение в течение 4 недель.

Изобретение относится к области органической химии, а именно к гетероциклическому соединению формулы (I), где R выбран из группы, состоящей из 3-хлор-4-фторфенила, 2-фтор-4-йодфенила, 4-хлор3-(трифторметил)фенила, 3-(1,1-диметилэтил)-1-метил-1Н-пиразол-5-ила, 3-(трифторметокси)фенила. Также изобретение относится к фармацевтической композиции на основе соединения формулы (I) и способу лечения, облегчения и/или предупреждения кожной побочной реакции на ингибиторы EGFR, ингибиторы PI3K, ингибиторы МЕК или их комбинации. Технический результат направлен на облегчение кожных побочных реакций, связанных с введением ингибиторов EGFR, ингибиторов PI3K, ингибиторов МЕК или их комбинаций, ингибитором BRaf, имеющим формулу (I). 3 н. и 21 з.п. ф-лы, 28 ил., 7 табл., 22 пр.

(I)

1. Соединение формулы (I)

,

где R выбран из группы, состоящей из 3-хлор-4-фторфенила, 2-фтор-4-йодфенила, 4-хлор3-(трифторметил)фенила, 3-(1,1-диметилэтил)-1-метил-1Н-пиразол-5-ила, 3-(трифторметокси)фенила.

2. Соединение формулы (I) по п. 1, где R представляет собой 3(трифторметокси)фенил.

3. Соединение формулы (I) по п. 1, причем соединение ингибирует активность BRaf.

4. Соединение формулы (I) по п. 1, причем соединение характеризуется фактором фотораздражения (PIF), составляющим менее 5.

5. Соединение формулы (I) по п. 1, при этом соединение характеризуется средним фотоэффектом (МРЕ), составляющим менее 0,15.

6. Фармацевтическая композиция, включающая: соединение формулы (I)

,

в которой R выбран из группы, состоящей из 3-хлор-4-фторфенила, 2-фтор-4-йодфенила, 4-хлор-3-(трифторметил)фенила, 3-(1,1-диметилэтил)-1-метил-1-Н-пиразол-5-ила, 3-(трифторметокси)фенила; и фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент, причем достаточное количество композиции повышает активность Митоген-Активированной Протеинкиназы по меньшей мере в 2 раза по сравнению с активностью Митоген-Активированной Протеинкиназы композиции, содержащей соединение формулы (I), где R представляет собой п=хлорфенил.

7. Фармацевтическая композиция по п. 6, причем R представляет собой 3-(трифторметокси)фенил.

8. Фармацевтическая композиция по п. 6, причем композиция составлена для системного введения.

9. Фармацевтическая композиция по п. 6, причем композиция составлена для местного введения.

10. Фармацевтическая композиция по п. 6, причем композиция вводится перорально в форме таблетки, капсулы, жидкости, суспензии или порошка.

11. Фармацевтическая композиция по п. 6, причем композиция находится в форме геля, гидрогеля, мази, крема, пенки, аэрозоля, лосьона, жидкости или кожного пластыря.

12. Фармацевтическая композиция по п. 6, причем соединение присутствует в концентрации от 1 мас. % до 5 мас. % от общей массы композиции.

13. Фармацевтическая композиция по п. 6, при этом соединение присутствует в концентрации от 5 мас. % до 10 мас. % от общей массы композиции.

14. Способ лечения, облегчения и/или предупреждения кожной побочной реакции на ингибиторы EGFR, ингибиторы PI3K, ингибиторы МЕК или их комбинации у субъекта при необходимости, включающий введение фармацевтической композиции по п. 6, содержащей терапевтически эффективное количество соединения формулы (I), причем достаточное количество фармацевтической композиции повышает активность Митоген-Активированной Протеинкиназы по меньшей мере в 2 раза по сравнению с активностью митоген-активированной протеинкиназы композиции, содержащей соединение формулы (I), где R представляет собой п=хлорфенил, и причем кожная побочная реакция выбрана из угревой сыпи, папуло-пустулезной сыпи, аномального роста волос на волосистой части головы, аномального роста волос на лице, аномального роста волос, аномального роста ресниц, паронихии с пиококковыми гранулемами или без таковых, телеангиоэктазии и их комбинаций.

15. Способ по п. 14, причем в соединении формулы (I) R представляет собой 3-(трифторметокси)фенил.

16. Способ по п. 14, причем кожная побочная реакция представляет собой угревую сыпь.

17. Способ по п. 14, причем субъекта лечили ингибитором EGFR, ингибитором PI3K, ингибитором МЕК или их комбинацией до введения фармацевтической композиции, содержащей соединение формулы (I).

18. Способ по п. 14, причем ингибитор EGFR выбран из Iressa (гефитиниба), Tarceva (эрлотиниба), Tykerb (лапатиниба), Erbitux (цетуксимаба), Vectibix (панитумумаба), Caprelsa (вандетаниба), Portrazza (нецитумумаба), Tagrisso (осимертиниба) и их комбинаций.

19. Способ по п. 14, причем ингибитор P13K выбран из GDC-0980 (апитолизиба), GDC-941 (пиктилизиба), ВАУ 80-6946 (копанлизиба), ВКМ120 (пупарлизиба), NVPBEZ235 (дактолизиба), IPI 145 (дувелизиба), иделализиба (GS-1101 или CAL-101), вортманнина, LY294002 и их комбинаций.

20. Способ по п. 14, причем ингибитор МЕК выбран из траметиниба (GSK1120212), кобиметиниба (XL518), биниметиниба (МЕК 162), селуметиниба, PD-325901, CI-1040, PD035901, U0126, ТАК-733 и их комбинаций.

21. Способ по п. 14, причем композицию вводят местно.

22. Способ по п. 14, причем композиция, вводимая местным путем, находится в форме геля, гидрогеля, мази, крема, аэрозоля, кожного пластыря, пенки, лосьона или жидкости.

23. Способ по п. 14, причем композицию вводят системно, и системное введение выбрано из энтерального введения и парентерального введения.

24. Способ по п. 14, причем способ снижает тяжесть или предупреждает обострение кожной побочной реакции.