ИНГИБИТОРЫ РЕЦЕПТОРОВ ERBB Российский патент 2023 года по МПК C07D409/12 C07D401/14 C07D403/14 C07D471/04 A61K31/517 A61P35/00 A61P35/04 

Область техники

Настоящее изобретение относится к соединениям, которые ингибируют рецепторы ErbB (например HER2). Настоящее изобретение также относится к фармацевтической композиции, содержащей одно или более из этих соединений в качестве активного ингредиента, и к применению этих соединений в изготовлении лекарственных средств для лечения заболеваний, ассоциированных с рецепторами ErbB (например HER2).

Предшествующий уровень техники

Семейство тирозинкиназных рецепторов ErbB состоит из четырех близкородственных рецепторов: EGFR (ErbB1 или HER1), ErbB2 (HER2), ErbB3 (HER3) и ErbB4 (HER4) (Reviewed in Riese and Stern, Bioessays (1998) 20:41-48; Olayioye et al, EMBO Journal (2000) 19:3159-3167; и Schlessinger, Cell (2002) 110:669-672). Эти рецепторы действуют для передачи сигналов с наружной поверхности клетки внутрь клетки путем активации вторичных посредников-эффекторов посредством фосфорилирования по их тирозиновым остаткам для фосфорилирования. Ряд клеточных процессов модулируется этими сигналами, в том числе пролиферация, усвоение углеводов, синтез белка, ангиогенез, рост клетки и выживание клетки. Дерегуляция передачи сигналов семейства ErbB модулирует пролиферацию, инвазию, метастазы, ангиогенез и выживание опухолевой клетки и может быть ассоциирована с множеством видов рака человека, включая рак легких, рак в области головы и шеи и рак молочной железы. Подробные обзоры по передаче сигналов рецептора ErbB и его вовлечению в онкогенез предложены в New England Journal of Medicine, 2008, Vol. 358:1160-74 и Biochemical and Biophysical Research Communications, 2004, Vol. 319: 1-11.

Несколько исследователей продемонстрировали роль EGFR и ErbB2 в развитии рака (обзор в Salomon, et al., Crit. Rev. Oncol. Hematol. (1995) 19:183-232; Klapper, et al, Adv. Cancer Res. (2000) 77:25-79; и Hynes and Stern, Biochim. Biophys. Acta (1994) 1198:165-184). Плоскоклеточные карциномы головы, шеи и легких экспрессируют высокие уровни EGFR. Также, конститутивно активный EGFR был обнаружен при глиомах, раке молочной железы и раке легких. Сверхэкспрессия ErbB2 обнаружена в приблизительно 30% всех случаев рака молочной железы и вовлечена в различные другие типы рака, такого как рак яичников, толстой кишки, мочевого пузыря, желудка, пищевода, легких, матки и простаты. Сверхэкспрессия ErbB2 также коррелировала с неблагоприятным прогнозом при раке у человека, включая метастазы и ранний рецидив.

Несколько ингибиторов пути передачи сигналов EGFR и ErbB2 продемонстрировали клиническую эффективность в лечении рака. Гефитиниб (IRESSA), эрлотиниб (TARCEVA), лапатиниб (TYKERB, TYVERB), панитумумаб (VECTIBIX), цетуксимаб (ERBITUX), осимертиниб (TAGRISSO, AZD9291) и афатиниб (GIOTRIF) являются клинически доступными ингибиторами EGFR. Клинически доступные противораковые лекарственные средства, нацеленные на HER2, включают трастузумаб (также известный как герцептин), трастузумаб эмантазин (T-DM1), пертузумаб (Perjeta), лапатиниб (Tyverb) и нератиниб (Nerlynx). Хотя две трети пациентов с раком молочной железы проявляют хороший ответ на трастузумаб герцептин, некоторые пациенты с HER2-положительным раком молочной железы не отвечают на это лекарственное средство.

Соответственно, остается необходимость разработки новых ингибиторов ErbB (особенно HER2).

Краткое изложение сущности изобретения

В одном аспекте в настоящем изобретении предложено соединение, представленное формулой (I):

или его фармацевтически приемлемые соль, сложный эфир, гидрат, сольват или стереоизомер.

В другом аспекте в настоящем изобретении предложена фармацевтическая композиция, содержащая одно или более соединений формулы (I), их фармацевтически приемлемых солей, сложных эфиров, гидратов, сольватов или стереоизомеров и фармацевтически приемлемый разбавитель, эксципиент или носитель.

В еще одном аспекте в настоящем изобретении предложено соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, сложный эфир, гидрат, сольват или стереоизомер или фармацевтическая композиция одного или более из вышеописанного для применения в качестве лекарственного средства для ингибирования ErbB (например HER2).

В другом аспекте в настоящем изобретении предложен способ ингибирования ErbB (например HER2) путем использования одного или более соединений формулы (I), их фармацевтически приемлемых солей, сложных эфиров, гидратов, сольватов или стереоизомеров или фармацевтической композиции одного или более из вышеописанного.

В другом аспекте в настоящем изобретении предложен способ лечения заболеваний, ассоциированных с HER2, у субъекта, включающий введение указанному субъекту эффективного количества одного или более соединений формулы (I), их фармацевтически приемлемых солей, сложных эфиров, гидратов, сольватов или стереоизомеров или фармацевтической композиции одного или более из вышеописанного.

В еще одном аспекте в настоящем изобретении предложено соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, сложный эфир, гидрат, сольват или стереоизомер в комбинации с вторым терапевтическим агентом, предпочтительно противоопухолевым агентом, таким как химиотерапевтическое средство (капецитабин, доцетаксел, винорелбин) или антитело, направленное на HER2 (трастузумаб (герцептин), трастузумаб эмантазин (T-DM1), пертузумаб (Perjeta)).

В другом аспекте в настоящем изобретении предложено применение соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, сложного эфира, гидрата, сольвата или стереоизомера в изготовлении лекарственного средства для лечения у субъекта заболеваний, ассоциированных с ErbB (например HER2).

Подробное описание изобретения

Соединения

В одном аспекте в настоящем изобретении предложено соединение формулы (I):

или его фармацевтически приемлемые соль, сложный эфир, гидрат, сольват или стереоизомер,

где

R₁ представляет собой водород;

R₂ представляет собой водород, галоген, гидроксил, С_1-12алкил, С_1-12алкокси, С_1-12алкил-ОН или С_1-12галогеналкил;

G представляет собой N или C-CN;

W представляет собой О, С(=O), S, SO или SO₂;

Y представляет собой связь или С_1-12алкилен,

R₃ представляет собой 3-10-членный насыщенный или ненасыщенный карбоциклил или 3-10-членный насыщенный или ненасыщенный гетероциклил, который может быть возможно замещен одним или несколькими независимыми заместителями галоген, гидроксил, амино, С_1-12алкил, С_1-12алкокси, С_1-12алкил-ОН, С_1-12галогеналкил, замещенный С_1-12алкил;

i равен 0, 1, 2 или 3, и

каждый R₄ независимо представляет собой галоген, амино, гидроксил, С_1-12алкил, С_1-12алкокси, С_1-12алкил-ОН или С_1-12галогеналкил;

j равен 0, 1, 2 или 3, и

каждый R₅ независимо представляет собой галоген, амино, гидроксил, С_1-12алкил, С_1-12алкокси, С_1-12алкил-ОН, С_1-12галогеналкил или OR₆, где R₆ представляет собой 3-10-членный насыщенный или ненасыщенный карбоциклил или 3-10-членный насыщенный или ненасыщенный гетероциклил, возможно замещенный одним или несколькими независимыми заместителями гидроксил, галоген, циано, С_1-12алкил или С_1-12галогеналкил;

А представляет собой О, С(=O), S, SO или SO₂;

Е представляет собой

X₁, X₂, X₃ и Х₄ каждый независимо представляет собой N или CR₈;

Х₅ и Х₆ каждый независимо представляет собой N или CR₈, и Х₇ представляет собой О, S, NR₉ или CR₁₀R₁₁, где по меньшей мере один из X₅ и X₆ представляет собой N; R₈, R₉, R₁₀ и R₁₁ каждый независимо представляет собой водород, галоген, С_1-12алкил, циано, амино, гидроксил, С_1-12алкокси, С_1-12алкил-ОН или С_1-12галогеналкил;

р равен 0, 1, 2 или 3, и

каждый R₇ независимо представляет собой галоген, амино, гидроксил, С_1-12алкил, С_1-12алкокси, С_1-12алкил-ОН или С_1-12галогеналкил.

В некоторых воплощениях R₂ в формуле (I) представляет собой галоген, гидроксил, С_1-12алкил или С_1-12алкокси.

В некоторых воплощениях i равен 0. В некоторых воплощениях i равен 1, и R₄ в формуле (I) представляет собой галоген.

В некоторых воплощениях j равен 1 или 2, каждый R₅ независимо представляет собой амино, С_1-12алкокси или OR₆; где R₆ представляет собой 3-10-членный насыщенный или ненасыщенный карбоциклил или 3-10-членный насыщенный или ненасыщенный гетероциклил, возможно замещенный одним или несколькими независимыми заместителями гидроксил, галоген, циано, С_1-12алкил или С_1-12галогеналкил.

В некоторых воплощениях R₅ в формуле (I) независимо представляет собой галоген, амино, гидроксил, С_1-12алкил, С_1-12алкокси, С_1-12алкил-ОН, С_1-12галогеналкил или OR₆, который замещен одним или несколькими заместителями дейтерий.

В некоторых воплощениях W в формуле (I) представляет собой О.

В некоторых воплощениях А в формуле (I) представляет собой О.

В некоторых воплощениях R₃ в формуле (I) представляет собой 3-10-членный насыщенный или ненасыщенный гетероциклил, который замещен одним или несколькими заместителями дейтерий.

В некоторых воплощениях R₃ в формуле (I) представляет собой 3-10-членный насыщенный гетероциклил, который может быть возможно замещен одним или несколькими независимыми заместителями галоген, гидроксил, амино, С_1-12алкил, С_1-12алкокси, С_1-12алкил-ОН, С_1-12галогеналкил, С_1-12алкил.

В некоторых воплощениях R₃ в формуле (I) представляет собой 3-10-членный насыщенный гетероциклил, замещенный одним или несколькими заместителями дейтерий-замещенный С_1-12алкил.

В некоторых воплощениях R₃ в формуле (I) представляет собой 5-10-членный насыщенный гетероциклил, содержащий один или два атома N, который может быть возможно замещен одним или несколькими независимыми заместителями галоген, дейтерий, гидроксил, амино, С_1-12алкил, С_1-12алкокси, С_1-12алкил-ОН, С_1-12галогеналкил или дейтерий-замещенный С_1-12алкил. В некоторых воплощениях R₃ в формуле (I) содержит по меньшей мере один заместитель галоген, причем предпочтительно указанный галоген представляет собой F. В некоторых воплощениях R₃ в формуле (I) содержит два, три или более заместителей галоген, причем предпочтительно указанный галоген представляет собой F.

В некоторых воплощениях R₃ в формуле (I) представляет собой или который может быть возможно замещен одним или несколькими независимыми заместителями галоген, дейтерий, гидроксил, амино, С_1-12алкил, С_1-12алкокси, С_1-12алкил-ОН, С_1-12галогеналкил или дейтерий-замещенный С_1-12алкил.

В некоторых воплощениях R₃ в формуле (I) представляет собой , или который может быть возможно замещен одним или несколькими независимыми заместителями галоген, дейтерий, гидроксил, амино, С_1-12алкил, С_1-12алкокси, С_1-12алкил-ОН, С_1-12галогеналкил или дейтерий-замещенный С_1-12алкил.

В некоторых воплощениях Y в формуле (I) представляет собой связь или С_1-3алкилен.

В некоторых воплощениях Е в формуле (I) представляет собой

где

X₂ и X₃ каждый независимо представляет собой N или CR₈;

Х₆ представляет собой N или CR₈, и Х₇ представляет собой О, S, NR₉ или CR₁₀R₁₁;

р равен 0, 1, 2 или 3, и

каждый R₇ независимо представляет собой галоген, амино, гидроксил, С_1-12алкил, С_1-12алкокси, С_1-12алкил-ОН или С_1-12галогеналкил;

R₈, R₉, R₁₀ и R₁₁ каждый независимо представляет собой водород, галоген, С_1-12алкил, циано, амино, гидроксил, С_1-12алкокси, С_1-12алкил-ОН или С_1-12галогеналкил.

В некоторых воплощениях Е в формуле (I) представляет собой , где X₂ представляет собой N или CR₈.

В некоторых воплощениях соединения по настоящему изобретению представлены формулой (Ia):

или его фармацевтически приемлемые соль, сложный эфир, гидрат, сольват или стереоизомер,

где

R₂ представляет собой водород, галоген, гидроксил, С_1-12алкил, С_1-12алкокси, С_1-12алкил-ОН или С_1-12галогеналкил;

R₁₂, R₁₃, R₁₄ и R₁₅ каждый независимо представляет собой водород, галоген, дейтерий, гидроксил, амино, С_1-12алкил, С_1-12алкокси, С_1-12алкил-ОН, С_1-12галогеналкил, дейтерий-замещенный С_1-12алкил;

R₁₆ и R₁₇ каждый независимо представляет собой водород, галоген, амино, гидроксил, С_1-12алкил, С_1-12алкокси, С_1-12алкил-ОН, С_1-12галогеналкил или OR₆; где R₆ представляет собой 3-10-членный насыщенный или ненасыщенный карбоциклил или 3-10-членный насыщенный или ненасыщенный гетероциклил, возможно замещенный одним или несколькими независимыми заместителями гидроксил, галоген, циано, С_1-12алкил или C_1-12галогеналкил;

где Е представляет собой

где

X₂ и X₃ каждый независимо представляет собой N или CR₈;

Х₆ каждый независимо представляет собой N или CR₈, и Х₇ представляет собой О, S, NR₉ или CR₁₀R₁₁;

р равен 0, 1, 2 или 3, и

каждый R₇ независимо представляет собой галоген, амино, гидроксил, С_1-12алкил, С_1-12алкокси, С_1-12алкил-ОН или С_1-12галогеналкил;

R₈, R₉, R₁₀ и R₁₁ каждый независимо представляет собой водород, галоген, С_1-12алкил, циано, амино, гидроксил, С_1-12алкокси, С_1-12алкил-ОН или С_1-12галогеналкил.

В некоторых воплощениях R₂ в формуле (Ia) представляет собой галоген, гидроксил, С_1-12алкил или С_1-12алкокси.

В некоторых воплощениях R₁₂, R₁₃, R₁₄ и R₁₅ в формуле (Ia) каждый независимо представляет собой водород, галоген, дейтерий, гидроксил, амино, С_1-12алкил или С_1-12алкокси.

В некоторых воплощениях по меньшей мере один из R₁₃ и R₁₄ в формуле (Ia) представляет собой галоген. В некоторых воплощениях оба из R₁₃ и R₁₄ в формуле (Ia) представляют собой галоген. В некоторых воплощениях по меньшей мере один из R₁₃ и R₁₄ в формуле (Ia) представляет собой F. В некоторых воплощениях оба из R₁₃ и R₁₄ в формуле (Ia) представляют собой F. В некоторых воплощениях R₁₅ в формуле (Ia) представляет собой водород. В некоторых воплощениях R₁₅ в формуле (Ia) представляет собой галоген.

В некоторых воплощениях R₁₆ и R₁₇ в формуле (Ia) каждый независимо представляет собой водород, галоген, амино, С_1-12алкокси или OR₆, который может быть возможно замещен одним или несколькими независимыми заместителями дейтерий; где R₆ представляет собой 3-10-членный насыщенный или ненасыщенный карбоциклил или 3-10-членный насыщенный или ненасыщенный гетероциклил, возможно замещенный одним или несколькими независимыми заместителями гидроксил, галоген, циано, С_1-12алкил или С₁-₁₂ галогеналкил. В некоторых воплощениях R₁₆ и R₁₇ в формуле (Ia) каждый независимо представляет собой водород, амино или С_1-12алкокси.

В некоторых воплощениях Е в формуле (Ia) содержит по меньшей мере два или три атома N.

В некоторых воплощениях Е в формуле (Ia) представляет собой , где Х₂ представляет собой CR₈, и R₈ представляет собой водород, галоген, С_1-12алкил, циано, амино, гидроксил или С_1-12алкокси.

В некоторых воплощениях Е в формуле (Ia) представляет собой , где X₂ представляет собой CR₈, и R₈ представляет собой водород, галоген, С_1-12алкил, циано, амино, гидроксил или С_1-12алкокси. В некоторых воплощениях Е в формуле (Ia) представляет собой , где Х₂ и X₃ каждый независимо представляет собой CR₈, и R₈ представляет собой водород, галоген, С_1-12алкил, циано, амино, гидроксил или С_1-12алкокси.

Иллюстративные соединения 1-56 формулы (I) представлены ниже в Таблице 1.

Следует иметь в виду, что некоторые признаки настоящего изобретения, которые для ясности описаны в контексте отдельных воплощений, могут быть предусмотрены также в комбинации в одном воплощении. И наоборот, различные признаки настоящего изобретения, которые для краткости описаны в контексте одного воплощения, могут быть предусмотрены также отдельно или в любой подходящей подкомбинации.

В разных местах настоящего описания изобретения описаны линкерные заместители. В тех случаях, когда структура ясно требует наличия линкерной группы, должно быть понятно, что переменные Маркуша, перечисленные для этой группы, представляют собой линкерные группы. Например, если структура требует наличия линкерной группы, и в определении группы Маркуша для этой переменной указан "алкил", то понятно, что этот "алкил" представляет собой линкерную алкиленовую группу.

Термин "замещенный", как он использован здесь, когда он относится к химической группе, означает, что химическая группа имеет один или более атомов водорода, которые удалены и замещены заместителями. Термин "заместитель", как он использован здесь, имеет обычное значение, известное в данной области техники, и относится к химической группировке, которая ковалентно присоединена к родительской группе или, если подходит, конденсирована с родительской группой. Термин "возможно замещенный" или "возможно … замещен", как он использован здесь, означает, что химическая группа может не иметь заместителей (т.е. является незамещенной) или может иметь один или более заместителей (т.е. является замещенной). Следует понимать, что замещение по данному атому ограничено валентностью.

Термин "C_i-j", как он использован здесь, указывает диапазон количества атомов углерода, где i и j означают целые числа, и диапазон количества атомов углерода включает в себя конечные точки (т.е. i и j) и каждое целое число между ними, и где i ∈ {1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10}, j больше чем, j ∈ {2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39 или 40}. Например, C_1-6 указывает диапазон от одного до шести атомов углерода, включая один атом углерода, два атома углерода, три атома углерода, четыре атома углерода, пять атомов углерода и шесть атомов углерода.

Термин "алкил", как он использован здесь, как часть другого термина или используемый независимо, относится к насыщенной или ненасыщенной углеводородной цепи, при этом последняя может быть дополнительно подразделена на углеводородную цепь, имеющую по меньшей мере одну двойную или тройную связь (алкенил или алкинил). Углеводородная цепь, упомянутая выше, может представлять собой прямую цепь или разветвленную цепь. Термин "C_i-jалкил" относится к алкилу, имеющему от i до j атомов углерода. В некоторых воплощениях алкильная группа содержит 1-12, 1-8, 1-6, 1-4, 1-3 или 1-2 атомов углерода. Примеры насыщенной алкильной группы включают, без ограничения, метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, трет-бутил, изобутил, втор-бутил; высшие гомологи, такие как 2-метил-1-бутил, н-пентил, 3-пентил, н-гексил, 1,2,2-триметилпропил и т.п. Примеры ненасыщенных алкильных групп включают, без ограничения, этенил, н-пропенил, изопропенил, н-бутенил, втор-бутенил, этинил, пропин-1-ил, пропин-2-ил и т.п.

Термины "галогено" и "галоген", как они использованы здесь, относятся к атому, выбранному из атомов фтора, хлора, брома и йода.

Термин "циано", как он использован здесь, относится к группе формулы -CN.

Термин "гидроксил", как он использован здесь, относится к группе формулы -ОН.

Термин "алкокси", как он использован здесь, как часть другого термина или используемый независимо, относится к группе формулы -О-алкил. Термин "C_i-jалкокси" означает, что алкильная группировка данной группы алкокси имеет от i до j атомов углерода. В некоторых воплощениях алкильная группировка имеет 1-12, 1-10, 1-8, 1-6, 1-5, 1-4, 1-3 или 1-2 атома углерода. Примеры групп алкокси включают, без ограничения, метокси, этокси, пропокси (например н-пропокси и изопропокси), трет-бутокси и т.п.

Термин "C_i-jалкил-ОН", как он использован здесь, относится к группе формулы "-С_1-12алкил-ОН", где алкильная группировка данной группы имеет от i до j атомов углерода, и гидроксильная группа может быть присоединена к любому атому углерода в алкильной группировке. В некоторых воплощениях алкильная группировка имеет 1-12, 1-10, 1-8, 1-6, 1-5, 1-4, 1-3 или 1-2 атома углерода.

Термин "C_i-jгалогеналкил", как он использован здесь, относится к галоген-замещенной (замещенной одним или несколькими заместителями галоген) C_i-jалкильной группе.

Термин "карбоциклил", как он использован здесь, как часть другого термина или используемый независимо, относится к любому кольцу, в котором все кольцевые атомы представляют собой атомы углерода, и которое содержит по меньшей мере три образующих кольцо атома углерода. В некоторых воплощениях карбоциклил может содержать 3-12 образующих кольцо атомов углерода, 3-10 образующих кольцо атомов углерода, 3-9 образующих кольцо атомов углерода или 4-8 образующих кольцо атомов углерода. Карбоциклильные группы могут быть насыщенными или частично ненасыщенными. В некоторых воплощениях карбоциклильная группа может представлять собой насыщенную циклическую алкильную группу. В некоторых воплощениях карбоциклильная группа может представлять собой ненасыщенную циклическую алкильную группу, которая содержит по меньшей мере одну двойную связь в ее кольцевой системе. В некоторых воплощениях ненасыщенная карбоциклильная группа может содержать одно или более ароматических колец.

Карбоциклильные группы могут включать в себя моно- или полициклическое(ие) кольцо(а) (например, имеющее 2, 3 или 4 конденсированных, мостиковых или спироколец). Примеры моноциклических карбоциклильных групп включают, без ограничения, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил, циклопентенил, циклогексенил, циклогексадиенил, циклогептатриенил и т.п. Термин "спирокольца", как он использован здесь, относится к кольцевым системам, имеющим два кольца, соединенные через один единственный общий атом; термин "конденсированные кольца" относится к кольцевым системам, имеющим два кольца, имеющие два общих соседних атома; и термин "мостиковые кольца" относится к кольцевым системам с двумя кольцами, имеющими три или более общих атомов. Примеры спирокарбоциклила включают, без ограничения, спиро[5.5]ундекан, спиропентадиен, спиро[3.6]декан и т.п. Примеры конденсированного карбоциклила включают, без ограничения, нафталин, бензопирен, антрацен, аценафтен, флуорен, нен и т.п. Примеры мостикового карбоциклила включают, без ограничения, бицикло[1,1,1]пентенил, бицикло[2,2,1]гептенил, бицикло[2.2.1]гептан, бицикло[2.2.2]октан, бицикло[3.3.1]нонан, бицикло[3.3.3]ундекан и т.п.

Термин "гетероциклил", как он использован здесь, относится к карбоциклильной группе, где один или более (например, 1, 2 или 3) кольцевых атомов заменены гетероатомами, которые включают, без ограничения, атомы кислорода, серы, азота, фосфора и т.п. В некоторых воплощениях гетероциклил представляет собой насыщенный гетероциклил. В некоторых воплощениях гетероциклил представляет собой ненасыщенный гетероциклил, имеющий одну или более двойных связей в его кольцевой системе. В некоторых воплощениях ненасыщенная гетероциклильная группа может содержать одно или более ароматических колец.

Гетероциклильные группы могут включать в себя моно- или полициклическое(ие) кольцо(а) (например, имеющие 2, 3 или 4 конденсированных, мостиковых или спироколец). Иллюстративные моноциклические гетероциклильные группы включают, без ограничения, пиперидил, пирролидил, тетрагидрофуран, пиперидил, пиперазинил, морфолинил и т.п. Примеры спирогетероциклила включают, без ограничения, спиропираны, спирооксазины и т.п. Примеры конденсированного гетероциклила включают, без ограничения, группы хинолина, изохинолина, хинолизина, хиназолина, птеридина, хромена, изохромена, индола, изоиндола, индолизина, индазола, пурина, бензофурана, изобензофурана, бензимидазола, бензотиенила, карбазола, феназина, фенотиазина, фенантридина и т.п. Примеры мостикового гетероциклила включают, без ограничения, морфан, гексаметилентетрамин, 8-аза-бицикло[3.2.1]октан, 1-аза-бицикло[2.2.2]октан, 1,4-диазабицикло[2.2.2]октан (DABCO) и т.п.

Термин "i-j-членный", как он использован здесь, относится к карбоциклильным или гетероциклильным группам, имеющим от i до j образующих кольцо атомов. Например, "3-8-членный карбоциклил" относится к карбоциклильным группам, имеющим от 3 до 10 (например, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10) образующих кольцо членов; "3-10-членный гетероциклил" относится к гетероциклилу, имеющему от 3 до 10 (например, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10) образующих кольцо членов. В некоторых воплощениях карбоциклильные или гетероциклильные группы являются 3-10-членными, 3-8-членными, 3-6-членными или 4-6-членными. Например, пиперидинил является примером 6-членного гетероциклила, пиразолил является примером 5-членного гетероциклила, пиридил является примером 6-членного гетероциклила, и 1,2,3,4-тетрагидро-нафталин является примером 10-членного карбоциклила.

Термин "ароматическая группа" или "ароматическое кольцо", как он использован здесь, относится к моно- или полициклической кар боцикл иль ной или гетероциклильной группировке, имеющей чередующиеся двойные и одинарные связи между образующими кольцо атомами по меньшей мере в одном кольце. В некоторых воплощениях ароматические кольца имеют от 5 до 12, от 5 до 10, от 5 до 8, от 6 до 12, от 6 до 10 или от 6 до 8 образующих кольцо атомов (т.е. 5-12, 5-10, 5-8, 6-12, 6-10 или 6-8-членные). Примеры карбоциклических ароматических групп включают, без ограничения, фенил, нафтил, тетрагидронафтил, инданил, инденил и т.п. В некоторых воплощениях гетероциклическая ароматическая группа является 5-членной или 6-членной. Иллюстративными 5-членными гетероциклическими ароматическими группами являются тиенил, фурил, пирролил, имидазолил, тиазолил, оксазолил, пиразолил, изотиазолил, изоксазолил, 1,2,3-триазолил, 1,2,4-триазолил, 1,3,4-триазолил, тетразолил, 1,2,3-тиадиазолил, 1,2,4-тиадиазолил, 1,3,4-тиадиазолил, 1,2,3-оксадиазолил, 1,2,4-оксадиазолил, 1,3,4-оксадиазолил и т.п. Иллюстративными 6-членными гетероциклическими ароматическими группами являются пиридил, пиразинил, пиримидинил, триазинил и пиридазинил.

"Соединение" по настоящему изобретению охватывает все стереоизомеры, геометрические изомеры и таутомеры изображенных структур, если конкретно не указано иное.

Термин "стереоизомер" относится к любым различным стереоизомерным конфигурациям (например, энантиомерам, диастереомерам и рацематам) асимметрических соединений (например, соединений, имеющих один или более асимметрически замещенных атомов углерода, т.е. "асимметрических центров"). Соединения по настоящему изобретению, которые содержат асимметрические центры, могут быть выделены в оптически активной (энантиомеры или диастереомеры) или оптически неактивной (рацемической) форме. Термин "энантиомер" охватывает пары стереоизомеров, зеркальные отображения которых не накладываются друг на друга. Смесь 1:1 пары энантиомеров представляет собой "рацемическую смесь". Термины "диастереомеры" или "диастереоизомеры" охватывают стереоизомеры, которые имеют по меньшей мере два асимметрических атома, но которые не являются зеркальными отображениями друг друга. Некоторые соединения, содержащие один или более асимметрических центров, могут приводить к энантиомерам, диастереомерам или другим стереоизомерным формам, которые могут быть определены в терминах абсолютной конфигурации как (R)- или (S)- по каждому асимметрическому центру согласно R-S системе Кана-Ингольда-Прелога. Разделенные соединения, абсолютная конфигурация которых неизвестна, могут быть обозначены с использованием термина "или" по асимметрическому центру. В данной области техники известны способы получения оптически активных форм из рацемических смесей, такие как разделение методом ВЭЖХ или стереоселективный синтез.

"Геометрические изомеры" или "цис- и транс-изомеры" относятся к соединениям с одинаковой формулой, но их функциональные группы повернуты в разном направлении в трехмерном пространстве. Термин "таутомеры" охватывает прототропные таутомеры, которые представляют собой изомерные состояния протонирования соединений, имеющих одинаковую формулу и суммарный заряд. Примеры прототропных таутомеров включают, без ограничения, кетон-енольные пары, амид-имидные кислотные пары, пары лактам-лактим, пары енамин-имин и кольцеобразные формы, где протон может занимать два или более положений гетероциклической системы, например 1Н- и 3Н-имидазол, 1Н-, 2Н- и 4Н-1,2,4-триазол, 1Н- и 2Н-изоиндол и 1H- и 2Н-пиразол. Таутомеры могут находиться в равновесии или могут быть стерически заблокированы в одну форму в результате соответствующего замещения. Соединения по настоящему изобретению, идентифицированные по названию или структуре как одна конкретная таутомерная форма, включают в себя другие таутомерные формы, если конкретно не указано иное.

"Соединение" по настоящему изобретению также охватывает все изотопы атомов в соединениях. Изотопы атома включают атомы, имеющие тот же атомный номер, но другие массовые числа. Например, подразумевается, что водород, углерод, азот, кислород, фосфор, сера, фтор, хлор, бром или йод в "соединении" по настоящему изобретению также включают их изотопы, такие как, без ограничения, ¹H, ²Н, ³Н, ¹¹C, ¹²С, ¹³С, ¹⁴С, ¹⁴N, ¹⁵N, ¹⁶О, ¹⁷O, ¹⁸O, ³¹Р, ³²Р, ³²S, ³³S, ³⁴S, ³⁶S, ¹⁷F, ¹⁹F, ³⁵Cl, ³⁷Cl, ⁷⁹Br, ⁸¹Br, ¹²⁷I и ¹³¹I. В некоторых воплощениях водород включает протий, дейтерий и тритий. В некоторых воплощениях термин "замещенный дейтерием" или "дейтерий-замещенный" использован для замены другой изоформы водорода (например протия) в химической группе дейтерием. В некоторых воплощениях углерод включает ¹²С и ¹³С.

Также следует понимать, что "соединение" по настоящему изобретению может существовать в сольватированных, а также в несольватированных формах, таких как, например, гидратированные формы, твердотельные формы, и настоящее изобретение охватывает все такие сольватированные и несольватированные формы.

Также следует понимать, что "соединение" по настоящему изобретению может существовать в формах фармацевтически приемлемых солей или сложных эфиров.

Термин "фармацевтически приемлемый", как он использован здесь, относится к тем соединениям, веществам, композициям и/или лекарственным формам, которые в рамках обоснованного медицинского суждения являются подходящими для применения в контакте с тканями человеческих существ и животных без излишних токсичности, раздражения, аллергической реакции или другой проблемы или осложнения, соизмеримых с разумным соотношением польза/риск. В некоторых воплощениях соединения, вещества, композиции и/или лекарственные формы, которые являются фармацевтически приемлемыми, относятся к таким, которые разрешены для применения регулирующим органом (таким как Управление по контролю качества пищевых продуктов и лекарственных средств США (U.S. Food и Drug Administration), Управление по контролю качества пищевых продуктов и лекарственных средств Китая (China Food и Drug Administration) или Европейское агентство по лекарственным средствам (European Medicines Agency)) или перечислены в общепризнанных фармакопеях (таких как Фармакопея США, Фармакопея Китая или Европейская Фармакопея) для применения у животных и, более конкретно, у людей.

"Фармацевтически приемлемые соли", как используют здесь, относятся к производным соединений по настоящему изобретению, где родительское соединение модифицировано путем превращения имеющейся кислотной группировки (например, карбоксильной и т.п.) или основной группировки (например, амин, щелочь и т.п.) в ее солевую форму. Во многих случаях соединения по настоящему изобретению способны образовывать соли с кислотами и/или основаниями благодаря присутствию амино и/или карбоксильных групп, или групп, подобных им. И "фармацевтически приемлемые соли" включают соли присоединения кислоты и/или соли присоединения основания, которые сохраняют биологическую эффективность и свойства родительского соединения, и которые обычно не являются биологически или иным образом нежелательными. Подходящие фармацевтически приемлемые соли соединения по настоящему изобретению включают, например, соль присоединения кислоты, которая может быть производной от, например, неорганической кислоты (например, соляной, бромистоводородной, серной, азотной, фосфорной кислоты и т.п.) или органической кислоты (например, муравьиной, уксусной, пропионовой, гликолевой, щавелевой, малеиновой, яблочной, янтарной, фумаровой, винной, тримезиновой, лимонной, молочной, фенилуксусной, бензойной, миндальной, метансульфоновой, нападисиловой (нафталин-1,5-дисульфоновой), этансульфоновой, толуолсульфоновой, трифторуксусной, салициловой, сульфосалициловой кислот и т.п.). В некоторых воплощениях фармацевтически приемлемая соль соединения по настоящему изобретению представляет собой соль муравьиной кислоты. В некоторых воплощениях фармацевтически приемлемая соль соединения по настоящему изобретению представляет собой TFA соль.

Подходящие фармацевтически приемлемые соли соединения по настоящему изобретению также включают, например, соль присоединения основания, которая может быть производной, например, от неорганических оснований (например, натриевая, калиевая, аммониевая соли и соли гидроксид, карбонат, бикарбонат металлов из групп I-XII Периодической таблицы, таких как кальций, магний, железо, серебро, цинк, медь и т.п.) или органических оснований (например, первичных, вторичных и третичных аминов, замещенных аминов, в том числе встречающихся в природе замещенных аминов, циклических аминов, основных ионообменных смол и т.п.). Некоторые органические амины включают, без ограничения, изопропиламин, бензатин, холинат, диэтаноламин, диэтиламин, лизин, меглумин, пиперазин и трометамин. Специалисту в данной области техники будет понятно, что дополнительные кислоты или основания для образования солей присоединения кислоты/основания, отличные от тех, которые представлены в примерах, также возможны. Списки дополнительных подходящих солей можно найти, например, в "Remington's Pharmaceutical Sciences," 20th ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., (1985); и в "Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use" by Stahl and Wermuth (Wiley-VCH, Weinheim, Germany, 2002).

"Фармацевтически приемлемые сложные эфиры", как используют здесь, относятся к сложным эфирам, которые гидролизуются in vivo и включают те из них, которые легко разлагаются в организме человека с образованием родительского соединения или его соли. Такие сложные эфиры могут действовать как пролекарства, как определено в данном описании. Сложные эфиры могут быть образованы с аминной, гидроксильной или карбоксильной боковой цепью на соединениях, описанных здесь. Например, если раскрытое соединение содержит спиртовую функциональную группу, то сложный эфир может быть образован в результате замещения атома водорода спиртовой группы кислотной группой, такой как, без ограничения, группы карбоновых кислот, фосфорных кислот, фосфоновых кислот, сульфиновых кислот, сульфоновых кислот и бороновых кислот. Методики и конкретные группы для получения таких сложных эфиров известны специалистам в данной области техники и легко могут быть найдены в источниках информации, таких как Greene and Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd Ed., John Wiley & Sons, New York, N.Y., 1999, который во всей его полноте включен в данное описание изобретения посредством ссылки.

Настоящее изобретение также охватывает активные промежуточные соединения, активные метаболиты и пролекарства соединений по настоящему изобретению. "Активное промежуточное соединение", как используют здесь, относится к промежуточному в процессе синтеза соединению, которое проявляет такую же или по существу такую же биологическую активность, как и конечное синтезированное соединение.

"Активный метаболит", как используют здесь, относится к разложившемуся или конечному продукту соединения по настоящему изобретению или его соли или пролекарства, образовавшемуся в результате метаболизма или биотрансформации в организме животного или человека, который проявляет такую же или по существу такую же биологическую активность, как и конкретно указанное соединение. Такие метаболиты могут образовываться в результате, например, окисления, восстановления, гидролиза, амидирования, деамидирования, этерификации, деэтерификации, ферментативного расщепления и т.п. введенного соединения или соли или пролекарства.

"Пролекарства", как используют здесь, относятся к любым соединениям или конъюгатам, которые высвобождают активное родительское лекарственное средство после введения субъекту-животному или человеку. Пролекарства могут быть получены путем модифицирования функциональных групп, присутствующих в соединениях, таким образом, чтобы модификации расщеплялись либо при рутинной манипуляции, либо in vivo до родительских соединений. Пролекарства включают соединения, где гидроксильная, амино, сульфгидрильная или карбоксильная группа связана с любой группой, которая при введении субъекту-млекопитающему, отщепляется с образованием свободной гидроксильной, амино, сульфгидрильной или карбоксильной группы, соответственно. Примеры пролекарств включают, без ограничения, ацетатные, формиатные и бензоатные производные функциональных спиртовых и аминогрупп в соединениях по настоящему изобретению. Получение и применение пролекарств обсуждается в Т. Higuchi and V. Stella, "Pro-drugs as Novel Delivery Systems," Vol. 14, A.C.S. Symposium Series, и в Bioreversible Carriers in Drug Design, ed. Edward B. Roche, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987, которые оба во всей их полноте включены в данное описание посредством ссылки.

Если конкретно не указано иное, "ErbB дикого типа" относится к нормальным членам семейства ErbB, существующим в естественном окружении, которые обеспечивают нормальную функцию ErbB. В одном аспекте в настоящем изобретении предложены соединения-ингибиторы киназы семейства ErbB (например, EGFR, HER2, Her3 и/или Her4). В некоторых воплощениях соединения по настоящему изобретению могут ингибировать более одной киназы семейства ErbB. В некоторых других воплощениях соединения по настоящему изобретению селективно ингибируют ErbB2 (то есть HER2), в то же время не ингибируя другие киназы семейства ErbB (например, EGFR).

В некоторых воплощениях соединения по настоящему изобретению могут ингибировать как дикий тип (WT), так и мутантные формы киназы семейства ErbB. Термин "мутации", как он использован здесь, относится к любым мутациям белка ErbB; "мутант" или "мутантная форма" относится к белку, который содержит указанную мутацию. Иллюстративные мутации ErbB включают, без ограничения, L858R, Т790М, G719S, G719X, delE746-A750, A763_Y764insFQEA, V769_D770insASV, H773_V774insNPH и т.п. в EGFR, и Exon 20 insYVMA в HER2. В некоторых воплощениях соединения по настоящему изобретению могут ингибировать как HER2 дикого типа (WT), так и мутантные формы HER2 (например, Exon 20 insYVMA).

В некоторых воплощениях соединения по настоящему изобретению ингибируют фосфорилирование WT HER2 при значении IC50 0,1-200 нМ, предпочтительно 0,1-150 нМ, 0,1-130 нМ, 0,1-120 нМ, 0,1-100 нМ, 0,1-50 нМ, 0,1-40 нМ, 0,1-30 нМ, 0,1-25 нМ, 0,1-20 нМ, 0,1-10 нМ, 0,5-200 нМ, 0,5-150 нМ, 0,5-130 нМ, 0,5-120 нМ, 0,5-100 нМ, 0,5-50 нМ, 0,5-40 нМ, 0,5-30 нМ, 0,5-25 нМ, 0,5-20 нМ, 0,5-10 нМ, 1-200 нМ, 1-150 нМ, 1-130 нМ, 1-120 нМ, 1-100 нМ, 1-50 нМ, 1-40 нМ, 1-30 нМ, 1-25 нМ, 1-20 нМ, 1-10 нМ, 2-200 нМ, 2-150 нМ, 2-130 нМ, 2-120 нМ, 2-100 нМ, 2-50 нМ, 2-40 нМ, 2-30 нМ, 2-25 нМ, 2-20 нМ или 2-10 нМ, более предпочтительно 0,1-150 нМ, 0,1-130 нМ, 1-150 нМ, 1-130 нМ, 2-130 нМ или 2-150 нМ.

Эффект ингибирования пролиферации может быть представлен показателем "50%-ной ингибирующей рост концентрации" (GI₅₀), которая относится к концентрации соединения, где наблюдается 50% от его максимального эффекта ингибирования пролиферации. Значение GI₅₀ может быть измерено способами, известными в данной области техники, например, MTS, Casein и любыми другими способами. В некоторых воплощениях соединения по настоящему изобретению ингибируют пролиферацию клеток, несущих WT HER2 и/или мутантный HER2, при значении GI₅₀ 0,1-200 нМ, предпочтительно 0,1-150 нМ, 0,1-130 нМ, 0,1-120 нМ, 0,1-100 нМ, 0,1-50 нМ, 0,1-40 нМ, 0,1-30 нМ, 0,1-20 нМ, 0,1-10 нМ, 1-200 нМ, 1-150 нМ, 1-130 нМ, 1-120 нМ, 1-100 нМ, 1-50 нМ, 1-40 нМ, 1-30 нМ, 1-20 нМ, 1-10 нМ, 2-200 нМ, 2-150 нМ, 2-130 нМ, 2-120 нМ, 2-100 нМ, 2-50 нМ, 2-40 нМ, 2-30 нМ, 2-25 нМ, 2-20 нМ или 2-10 нМ, 4-200 нМ, 4-150 нМ, 4-130 нМ, 4-120 нМ, 4-50 нМ, 4-40 нМ, 4-30 нМ, 4-20 нМ, 4-10 нМ, более предпочтительно 0,1-150 нМ, 0,1-130 нМ, 1-150 нМ, 1-130 нМ, 2-150 нМ, 2-130 нМ, 4-150 нМ или 4-130 нМ, как измерено посредством MTS.

Термин "селективно ингибирует" HER2, как он использован здесь, означает, что предложенное соединение является по меньшей мере в 1000 раз более сильнодействующим, по меньшей мере в 500 раз, по меньшей мере в 200 раз, по меньшей мере в 100 раз, по меньшей мере в 50 раз, по меньшей мере в 45 раз, по меньшей мере в 40 раз, по меньшей мере в 35 раз, по меньшей мере в 30 раз, по меньшей мере в 25 раз, по меньшей мере в 20 раз, по меньшей мере в 15 раз или по меньшей мере в 10 раз более сильнодействующим в качестве ингибитора WT (и/или мутантной формы) HER2 по сравнению с другим типом киназы ErbB (например, EGFR). В некоторых воплощениях "селективно ингибирует" HER2 означает, что предложенное соединение вплоть до 1500 раз более сильнодействующее, вплоть до 1200 раз, вплоть до 1000 раз, вплоть до 800 раз, вплоть до 600 раз, вплоть до 400 раз, вплоть до 200 раз, вплоть до 100 раз, вплоть до 50 раз более сильнодействующее в качестве ингибитора HER2 (WT и/или мутантной формы) по сравнению с другим типом киназы ErbB (например, EGFR).

В некоторых воплощениях термин "не ингибирует" другой тип киназы ErbB (например, EGFR) означает, что предложенное соединение ингибирует другой тип киназы ErbB (например, WT EGFR) при значении IC₅₀ по меньшей мере 500 нМ. В некоторых воплощениях такое соединение ингибирует другой тип киназы ErbB при значении IC₅₀ по меньшей мере 10 мкМ, по меньшей мере 9 мкМ, по меньшей мере 8 мкМ, по меньшей мере 7 мкМ, по меньшей мере 6 мкМ, по меньшей мере 5 мкМ, по меньшей мере 3 мкМ, по меньшей мере 2 мкМ или по меньшей мере 1 мкМ.

В некоторых воплощениях IC₅₀ и/или GI₅₀ соединений относительно WT-EGFR по меньшей мере в 5 раз, в 10 раз, в 20 раз, в 50 раз, в 100 раз, в 200 раз, в 500 раз, в 1000 раз, предпочтительно в 50 раз, в 100 раз, в 200 раз, в 500 раз или в 1000 раз выше чем IC₅₀ и/или GI₅₀ соединений относительно WT HER2.

Соединения или их фармацевтически приемлемые соль, сложный эфир, гидрат, сольват или стереоизомер, при сравнении с другими клинически доступными ингибиторами ErbB, проявляют определенные улучшенные свойства, например более высокая проницаемость через гематоэнцефалический барьер ВВВ (тем самым делая их потенциально полезными для лечения видов рака, которые метастазировали в центральную нервную систему (CNS), в частности метастазы в головной мозг и лептоменингеальные метастазы); демонстрируют лучшую селективность против определенного типа ErbB (например HER2), в то же время сохраняя эквивалентную или повышенную ингибиторную активность по сравнению с имеющимися лекарственными средствами в отношении указанного определенного типа ErbB. Таким образом, такие соединения или их фармацевтически приемлемые соль, сложный эфир, гидрат, сольват или стереоизомер могут быть особенно полезны в лечении болезненных состояний, в которые эти HER2 вовлечены, например, в лечении рака, особенно рака с метастазами в CNS (в частности, в головной мозг и лептоменингеальные метастазы).

Способ синтеза

Синтез соединений, предложенных в данном документе, включая их соли, сложные эфиры, гидраты или сольваты или стереоизомеры, проиллюстрирован на схемах синтеза в примерах. Соединения, предложенные в данном документе, могут быть получены с использованием любых известных методов органического синтеза и могут быть синтезированы в соответствии с любыми из многочисленных возможных путей синтеза, и поэтому эти схемы являются только иллюстративными и не исключают другие возможные способы, которые могут быть использованы для получения соединений, предложенных в данном документе. Дополнительно, стадии на Схемах предназначены для лучшего иллюстрирования и могут быть изменены, если это целесообразно. Воплощения соединений в Примерах были синтезированы в целях исследования и потенциального представления регулирующим органам.

Реакции для получения соединений по изобретению могут быть проведены в подходящих растворителях, которые легко может выбрать специалист в области органического синтеза. Подходящие растворители могут быть по существу нереакционноспособными с исходными веществами (реагентами), промежуточными соединениями или продуктами при температурах, при которых проводят реакции, например при температурах в диапазоне от температуры замерзания растворителя до температуры кипения растворителя. Данная реакция может быть проведена в одном растворителе или в смеси растворителей больше одного. В зависимости от конкретной реакционной стадии подходящие растворители для конкретной реакционной стадии могут быть выбраны специалистом.

Получение соединений по настоящему изобретению может включать в себя защиту и снятие защиты с различных химических групп. Необходимость в защите и снятии защиты и выбор соответствующих защитных групп легко может определить специалист в данной области техники. Химию защитных групп можно найти, например, в Т.W. Greene and P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd Ed., Wiley & Sons, Inc., New York (1999), который во всей полноте включен в данное описание посредством ссылки.

Реакции можно контролировать любыми подходящими методами, известными в данной области техники. Например, образование продукта можно контролировать спектроскопическими методами, такими как спектроскопия ядерного магнитного резонанса (например, ¹Н или ¹³С), инфракрасная спектроскопия, спектрофотометрия (например, в УФ-видимом диапазоне), масс-спектрометрия, или хроматографическими методами, такими как высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ), жидкостная хроматография/масс-спектроскопия (ЖХ/МС) или тонкослойная хроматография (ТСХ). Соединения могут быть очищены специалистами в данной области техники различными методами, в том числе методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) ("Preparative LC-MS Purification: Improved Compound Specific Method Optimization" Karl F. Blom, Brian Glass, Richard Sparks, Andrew P. Combs J. Combi. Chem. 2004, 6(6), 874-883, который во всей его полноте включен в данное описание посредством ссылки) и нормально-фазовой хроматографии на диоксиде кремния.

Сокращения, использованные в данном документе, определены следующим образом: "1 х" или "х 1" означают один раз; "2 х" или "х 2" означают дважды; "3 х" или "х 3" означают трижды; "4 х" или "х 4" означают четыре раза; "5 х" или "х 5" означают пять раз; "°С" означает градусы Цельсия; "эк." или "экв." означают эквивалент или эквиваленты; "r" означает грамм или граммы; "мг" означает миллиграмм или миллиграммы; "л" означает литр или литры; "мл" или "мл" означает миллилитр или миллилитры; "мкл" означает микролитр или микролитры; "н." означает нормальный; "М" означает молярный; "ммоль" означает миллимоль или миллимоли; "мин" означает минута или минуты; "ч" означает час или часы; "к.т." или "кт" означают комнатная температура; "атм" означает атмосфера; "фунт/кв.дюйм" означает фунты на квадратный дюйм; "конц." означает концентрированный; "насыщ." означает насыщенный; "МС" или "масс-спек." означает масс-спектрометрия; "ЭРИ" означает масс-спектроскопия с электрораспылительной ионизацией; "ЖХ/МС" означает жидкостная хроматография-масс-спектрометрия; "ЖХВД" означает жидкостная хроматография высокого давления; "ОФ" означает обращенно-фазовая; "ТСХ" или "тех" означает тонкослойная хроматография; "SM" означает исходное вещество; "ЯМР" означает спектроскопия ядерного магнитного резонанса; “¹Н" означает протон; "δ" означает дельта; "s" означает синглет; "d" означает дублет; "t" означает триплет; "q" означает квартет; "m" означает мультиплет; "br" означает уширенный; и "Гц" означает герцы, "α", "β", "R", "S", "Е" и "Z" являются стереохимическими обозначениями, известными специалисту в данной области техники.

Сокращения для химических веществ, использованных в синтезе соединений, предложенных в данном документе, перечислены ниже:

Фармацевтическая композиция

Согласно настоящему изобретению предложена фармацевтическая композиция, содержащая по меньшей мере одно соединение по настоящему изобретению. В некоторых воплощениях фармацевтическая композиция содержит более чем одно соединение по настоящему изобретению. В некоторых воплощениях фармацевтическая композиция содержит одно или более соединений по настоящему изобретению и фармацевтически приемлемый носитель.

Фармацевтически приемлемые носители представляют собой традиционные в данной области медицинские носители, которые могут быть получены способом, общеизвестным в фармацевтической области. В некоторых воплощениях соединения по настоящему изобретению могут быть смешаны с фармацевтически приемлемым носителем для приготовления фармацевтической композиции.

Термин "фармацевтически приемлемый носитель" в данном документе относится к фармацевтически приемлемому веществу, композиции или несущему материалу, таким как жидкий или твердый наполнитель, разбавитель, эксципиент, растворитель или инкапсулирующий материал, задействованный в переносе или транспортировке соединения, предложенного в данном документе, из одного местоположения, жидкости организма, ткани, органа (внутреннего или внешнего) или участка организма в другое местоположение, жидкость организма, ткань, орган или участок организма. Фармацевтически приемлемыми носителями могут быть несущие среды, разбавители, эксципиенты или другие вещества, которые можно применять в контакте с тканями животного без излишней токсичности или неблагоприятных эффектов. Иллюстративные фармацевтически приемлемые носители включают сахара, крахмал, целлюлозы, солод, трагакант, желатин, раствор Рингера, альгиновую кислоту, - изотонический физиологический раствор, буферные агенты и т.п. Фармацевтически приемлемый носитель, который может быть использован в настоящем изобретении, включает общеизвестные в данной области носители, такие как те, которые описаны в "Remington Pharmaceutical Sciences" Mack Pub. Co., New Jersey (1991), который включен в данное описание посредством ссылки.

Некоторые примеры веществ, которые могут служить фармацевтически приемлемыми носителями, включают: (1) сахара, такие как лактоза, глюкоза и сахароза; (2) крахмалы, такие как кукурузный крахмал и картофельный крахмал; (3) целлюлозу и ее производные, такие как натрий-карбоксиметилцеллюлоза, этилцеллюлоза и ацетат целлюлозы; (4) порошкообразный трагакант; (5) солод; (6) желатин; (7) тальк; (8) эксципиенты, такие как масло какао и суппозиторные воски; (9) масла, такие как арахисовое масло, хлопковое масло, подсолнечное масло, кунжутное масло, оливковое масло, кукурузное масло и соевое масло; (10) гликоли, такие как пропиленгликоль; (11) полиолы, такие как глицерин, сорбит, маннит и полиэтиленгликоль; (12) сложные эфиры, такие как этилолеат и этиллаурат; (13) агар; (14) буферные агенты, такие как гидроксид магния и гидроксид алюминия; (15) альгиновую кислоту; (16) апирогенную воду; (17) изотонический физиологический раствор; (18) раствор Рингера; (19) спирт, такой как этиловый спирт и пропиловый спирт; (20) фосфатные фуферные растворы; и (21) другие нетоксичные совместимые вещества, используемые в фармацевтических препаратах, такие как ацетон.

Фармацевтические композиции могут содержать фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества, если это необходимо для приближения к физиологическим условиям, такие как регулирующие рН и буферные агенты, агенты, регулирующие токсичность, и т.п., например ацетат натрия, хлорид натрия, хлорид калия, хлорид кальция, лактат натрия и т.п.

Форма фармацевтической композиции зависит от ряда критериев, включающих, без ограничения, путь введения, степень заболевания или дозу, которую нужно вводить.

Фармацевтические композиции могут быть приготовлены для перорального, назального, ректального, подкожного, внутривенного или внутримышечного введения. В соответствии с желаемым путем введения фармацевтические композиции могут быть приготовлены в форме таблеток, капсул, пилюль, драже, порошка, гранул, саше, облаток, лепешек, суспензий, эмульсий, растворов, сиропов, аэрозолей (в виде твердого вещества или жидкой среды), спрея, мази, пасты, крема, лосьона, геля, пластыря, ингалятора или суппозитория.

Фармацевтические композиции, обеспечивающие быстрое, длительное или отсроченное высвобождение активного ингредиента после введения пациенту, могут быть приготовлены с использованием методик, известных в данной области техники. В некоторых воплощениях фармацевтическая композиция приготовлена в форме длительного высвобождения. Использованный в данном документе термин "форма длительного высвобождения" относится к высвобождению активного агента из фармацевтической композиции таким образом, чтобы он был доступным для биологического всасывания у субъекта, главным образом в желудочно-кишечном тракте субъекта, в течение пролонгированного периода времени (замедленное высвобождение) или в определенном местоположении (контролируемое высвобождение). В некоторых воплощениях пролонгированный период времени может составлять примерно от 1 часа до 24 часов, от 2 часов до 12 часов, от 3 часов до 8 часов, от 4 часов до 6 часов, от 1 до 2 суток или больше. В некоторых воплощениях пролонгированный период времени составляет по меньшей мере примерно 4 часа, по меньшей мере примерно 8 часов, по меньшей мере примерно 12 часов или по меньшей мере примерно 24 часа. Фармацевтическая композиция может быть приготовлена в форме таблетки. Например, скорость высвобождения активного агента может контролироваться не только растворением активного агента в желудочно-кишечном тракте и последующей диффузией из таблетки или пилюли независимо от рН, но может также зависеть от физических процессов разрыхления и эрозии таблетки. В некоторых воплощениях для длительного высвобождения могут быть использованы полимерные материалы, которые описаны в "Medical Applications of Controlled Release," Langer and Wise (eds.), CRC Pres., Boca Raton, Florida (1974); "Controlled Drug Bioavailability," Drug Product Design and Performance, Smolen and Ball (eds.), Wiley, New York (1984); Ranger and Peppas, 1983, J Macromol. Sci. Rev. Macromol Chem. 23:61; см. также Levy et al., 1985, Science 228:190; During et al., 1989, Ann. Neurol. 25:351; Howard et al., 1989, J. Neurosurg. 71:105. Вышеуказанные источники информации во всей их полноте включены в данное описание посредством ссылки.

В некоторых воплощениях фармацевтические композиции содержат от примерно 0,0001 мг до примерно 5000 мг соединений по настоящему изобретению (например, от примерно 0,0001 мг до примерно 10 мг, от примерно 0,001 мг до примерно 10 мг, от примерно 0,01 мг до примерно 10 мг, от примерно 0,1 мг до примерно 10 мг, от примерно 1 мг до примерно 10 мг, от примерно 5 мг до примерно 10 мг, от примерно 5 мг до примерно 20 мг, от примерно 5 мг до примерно 30 мг, от примерно 5 мг до примерно 40 мг, от примерно 5 мг до примерно 50 мг, от примерно 10 мг до примерно 100 мг, от примерно 20 мг до примерно 100 мг, от примерно 30 мг до примерно 100 мг, от примерно 40 мг до примерно 100 мг, от примерно 50 мг до примерно 100 мг, от примерно 50 мг до примерно 200 мг, от примерно 50 мг до примерно 300 мг, от примерно 50 мг до примерно 400 мг, от примерно 50 мг до примерно 500 мг, от примерно 100 мг до примерно 200 мг, от примерно 100 мг до примерно 300 мг, от примерно 100 мг до примерно 400 мг, от примерно 100 мг до примерно 500 мг, от примерно 200 мг до примерно 500 мг, от примерно 300 мг до примерно 500 мг, от примерно 400 мг до примерно 500 мг, от примерно 500 мг до примерно 1000 мг, от примерно 600 мг до примерно 1000 мг, от примерно 700 мг до примерно 1000 мг, от примерно 800 мг до примерно 1000 мг, от примерно 900 мг до примерно 1000 мг, от примерно 1000 мг до примерно 2000 мг, от примерно 2000 мг до примерно 3000 мг, от примерно 3000 мг до примерно 4000 мг или от примерно 4000 мг до примерно 5000 мг). Подходящие дозировки на субъекта в сутки могут составлять от примерно 5 мг до примерно 500 мг, предпочтительно от примерно 5 мг до примерно 50 мг, от примерно 50 мг до примерно 100 мг или от примерно 50 мг до примерно 500 мг.

В некоторых воплощениях фармацевтические композиции могут быть приготовлены в стандартных лекарственных формах, каждая из которых содержит от примерно 0,0001 мг до примерно 10 мг, от примерно 0.001 мг до примерно 10 мг, от примерно 0,01 мг до примерно 10 мг, от примерно 0,1 мг до примерно 10 мг, от примерно 1 мг до примерно 10 мг, от примерно 5 мг до примерно 10 мг, от примерно 5 мг до примерно 20 мг, от примерно 5 мг до примерно 30 мг, от примерно 5 мг до примерно 40 мг, от примерно 5 мг до примерно 50 мг, от примерно 10 мг до примерно 100 мг, от примерно 20 мг до примерно 100 мг, от примерно 30 мг до примерно 100 мг, от примерно 40 мг до примерно 100 мг, от примерно 50 мг до примерно 100 мг, от примерно 50 мг до примерно 200 мг, от примерно 50 мг до примерно 300 мг, от примерно 50 мг до примерно 400 мг, от примерно 50 мг до примерно 500 мг, от примерно 100 мг до примерно 200 мг, от примерно 100 мг до примерно 300 мг, от примерно 100 мг до примерно 400 мг, от примерно 100 мг до примерно 500 мг, от примерно 200 мг до примерно 500 мг, от примерно 300 мг до примерно 500 мг, от примерно 400 мг до примерно 500 мг, от примерно 500 мг до примерно 1000 мг, от примерно 600 мг до примерно 1000 мг, от примерно 700 мг до примерно 1000 мг, от примерно 800 мг до примерно 1000 мг, от примерно 900 мг до примерно 1000 мг, от примерно 1000 мг до примерно 2000 мг, от примерно 2000 мг до примерно 3000 мг, от примерно 3000 мг до примерно 4000 мг или от примерно 4000 мг до примерно 5000 мг соединения по настоящему изобретению.

Термин "стандартные лекарственные формы" относится к физически дискретным единицам, подходящим в качестве однократных дозировок для субъектов-людей и других млекопитающих, причем каждая единица содержит предопределенное количество активного вещества, рассчитанного на получение желаемого терапевтического эффекта, совместно с подходящим фармацевтическим носителем. В некоторых воплощениях фармацевтические композиции содержат одно или более соединений по настоящему изобретению в качестве первого активного ингредиента и дополнительно содержат второй активный ингредиент. Вторым активным ингредиентом может быть любой противораковый агент, известный в данной области техники, например, химиотерапевтические лекарственные средства, ингибиторы трансдукции клеточных сигналов, алкилирующие агенты, ингибиторы топоизомеразы, иммунотерапевтические агенты, ингибиторы митоза, антигормональные агенты, химиотерапевтические средства, ингибиторы EGFR, ингибиторы CTLA-4, ингибиторы MEK, ингибиторы PD-L1; агонисты ОХ40 и т.п. Репрезентативные примеры противораковых агентов для лечения рака и опухолей могут включать, без ограничения, трастузумаб, трастузумаб эмантазин, пертузумаб, ONT380, нератиниб, лапатиниб, сорафениб, сунитиниб, дазатиниб, вориностат, темсиролимус, эверолимус, пазопаниб, трастузумаб, адо-трастузумаб эмтанзин, пертузумаб, бевацизумаб, цетуксимаб, ранибизумаб, пегаптаниб, панитумумаб, тремелимумаб, пембролизумаб, ниволумаб, ипилимумаб, атезолизумаб, авелумаб, дуравалумаб, кризотиниб, руксолитиниб, капецитабин, доцетаксел, винорелбин, паклитаксел, винкристин, винбластин, цисплатин, карбоплатин, гемцитабин, тамоксифен, ралоксифен, циклофосфамид, хлорамбуцил, кармустин, метотрексат, фторурацил, актиномицин, доксорубицин, эпирубицин, антрациклин, блеомицин, митомицин-С, иринотекан, топотекан, тенипозид, интерлейкин, интерферон и т.п. В некоторых воплощениях второй активный агент представляет собой один или более из химиотерапевтических агентов (капецитабин, доцетаксел, винорелбин) или HER2-направленного антитела (трастузумаб, трастузумаб эмантазин, пертузумаб).

Способ лечения

Согласно настоящему изобретению предложен способ лечения заболеваний, ассоциированных с ErbB (включая, например, HER2), включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества одного или более соединений, их фармацевтически приемлемых солей, сложных эфиров, гидратов, сольватов или стереоизомеров или фармацевтической композиции по настоящему изобретению.

Термин "заболевания, ассоциированные с ErbB", как он использован здесь, относится к заболеваниям, начало или развитие которых или и то, и другое связано с изменениями генома, экспрессией, сверхэкспрессией или активностью ErbB. Примеры включают, без ограничения, ассоциированные с иммунитетом заболевания, пролиферативные расстройства, рак и другие заболевания.

Термин "заболевание, ассоциированное с HER2", как он использован здесь, относится к заболеванию или расстройству, начало или развитие которых или и то, и другое связано с изменениями генома, экспрессией, сверхэкспрессией или активностью HER2. Примеры включают, без ограничения, ассоциированные с иммунитетом заболевания, пролиферативные расстройства, рак и другие заболевания.

В некоторых воплощениях заболевание, ассоциированное с ErbB, представляет собой рак, предпочтительно ErbB-экспрессирующий рак или ErbB-сверхэкспрессирующий рак. "ErbB-экспрессирующий рак" представляет собой рак, который включает раковые клетки или опухолевые клетки, имеющие белок ErbB, такой как HER2, присутствующий на их клеточной поверхности. "ErbB-сверхэкспрессирующий рак" представляет собой рак, при котором имеются значительно более высокие уровни белка ErbB, такого как HER2, на клеточной поверхности раковой или опухолевой клетки, по сравнению с нераковой клеткой того же самого типа ткани. Такая сверхэкспрессия может быть вызвана амплификацией гена или повышенной транскрипцией или трансляцией. Экспрессия или сверхэкспрессия рецептора ErbB может быть определена в диагностическом или прогностическом анализе путем оценки повышенных уровней белка ErbB, присутствующего на поверхности клетки (например, путем иммуногистохимического анализа; IHC). Альтернативно или дополнительно, анализ может представлять собой измерение уровней ErbB-кодирующей нуклеиновой кислоты в клетке, например по флуоресценции in situ гибридизации (FISH; см. WO98/45479, опубликованную в октябре 1998 г.), саузерн-блоттинг или методики полимеразной цепной реакции (PCR), такие как количественная PCR в режиме реального времени (RT-PCR). Methods 132: 73-80 (1990)). Помимо перечисленных выше анализов, практикующему специалисту доступны различные in vivo анализы. Например, можно подвергать клетки в организме пациента воздействию антителом, которое возможно мечено детектируемой меткой, например, радиоактивным изотопом, и связывание этого антитела с клетками может быть оценено у пациента, например путем внешнего сканирования на радиоактивность или путем анализа биопсии, взятой у пациента перед воздействием антителом.

В частности, раковые заболевания включают, без ограничения, лейкоз, глиобластому, меланому, хондросаркому, холангиокарциному, остеосаркому, лимфому, рак легкого, аденому, миелому, печеночноклеточную карциному, адренокортикальную карциному, рак поджелудочной железы, рак молочной железы, рак мочевого пузыря, рак предстательной железы, рак печени, рак желудка, рак ободочной кишки, колоректальный рак, рак яичника, рак шейки матки, рак головного мозга, рак пищевода, рак кости, рак яичка, рак кожи, рак почки, мезотелиому, нейробластому, рак щитовидной железы, рак в области головы и шеи, рак пищевода, рак глаза, рак предстательной железы, назофарингеальный рак или рак ротовой полости. В некоторых воплощениях раковые заболевания представляют собой рак легкого, рак молочной железы, рак яичника, рак мочевого пузыря или глиобластому. В некоторых воплощениях рак представляет собой рак молочной железы, рак желудка, колоректальный рак, рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, рак мочевого пузыря, рак яичника или рак легкого (например, немелкоклеточный рак легкого, мелкоклеточный рак легкого, аденокарциному, плоскоклеточный рак легкого и крупноклеточный рак легкого). В некоторых воплощениях заболевания, ассоциированные с ErbB (например HER2), представляют собой рак, который метастазировал в центральную нервную систему (CNS), в особенности рак с метастазами в головной мозг и лептоменингеальными метастазами.

Термины "лечение" и "лечить", как они использованы здесь, относятся к реверсированию, ослаблению, задержке начала или торможению прогрессирования заболевания или расстройства или одного или более его симптомов, как описано в данном документе. В некоторых воплощениях лечение может быть осуществлено после проявления одного или более симптомов. В других воплощениях лечение может быть осуществлено в отсутствие симптомов. Например, лечение может быть осуществлено в отношении восприимчивого индивидуума до появления симптомов (например, с учетом симптомов в анамнезе и/или с учетом генетических или других факторов восприимчивости). Лечение также может быть продолжено после устранения симптомов, например с целью предупреждения или задержки их рецидива.

Терапевтически эффективное количество соединения, как предложено здесь, будет зависеть от различных факторов, известных в данной области, таких как, например, масса тела, возраст, прошлый медицинский анамнез, принимаемые в настоящее время лекарства, состояние здоровья субъекта и потенциальный риск перекрестной реакции, аллергий, чувствительности и неблагоприятных побочных эффектов, а также путь введения и степень развития заболевания. Дозировки могут быть пропорционально снижены или увеличены специалистом в данной области (например врачом или ветеринаром), как продиктовано этими или другими обстоятельствами или требованиями.

Как используют здесь, термины "субъект" и "индивидуум" использованы взаимозаменяемо и относятся к теплокровному животному, включая человека или любого животного, не являющегося человеком (например, мышь, крысу, кролика, собаку, кошку, крупный рогатый скот, свинью, овцу, лошадь или приматов). Человек включает пре- и постнатальные формы развития. В некоторых воплощениях субъект представляет собой человеческое существо. Субъект может представлять собой тех, кто подвержен развитию заболевания, ассоциированного с ErbB (предпочтительно HER2), но может проявлять или может не проявлять симптомы этого заболевания.

В некоторых воплощениях предложенные в данном документе одно или более соединений, их фармацевтически приемлемых солей, сложных эфиров, гидратов, сольватов или стереоизомеров или фармацевтическую композицию вводят парентеральным путем или непарентеральным путем. В некоторых воплощениях одно или более соединений, их фармацевтически приемлемых солей, сложных эфиров, гидратов, сольватов или стереоизомеров или фармацевтическую композицию вводят перорально, энтерально, трансбуккально, назально, интраназально, транс мукозально, эпидермально, трансдермально, дермально, офтальмически, пульмонарно, сублингвально, ректально, вагинально, местно, подкожно, внутривенно, внутримышечно, внутриартериально, интратекально, интракапсулярно, интраорбитально, интракардиально, интрадермально, интаперитонеально, транстрахеально, субкутикулярно, интраартикулярно, субкапсулярно, субарахноидально, интраспинально или интрастернально.

Соединения, предложенные в данном документе, можно вводить в чистой форме, в комбинации с другими активными ингредиентами или в форме фармацевтической композиции по настоящему изобретению. В некоторых воплощениях соединения, предложенные в данном документе, можно вводить нуждающемуся субъекту одновременно или последовательно в комбинации с одним или более противораковым(и) агентом(ами), известным(и) в данной области техники. В некоторых воплощениях введение проводят один раз в сутки, дважды в сутки, три раза в сутки или один раз каждые двое суток, один раз каждые трое суток, один раз каждые четверо суток, один раз каждые пять суток, один раз каждые шесть суток, один раз в неделю.

В некоторых воплощениях предложенные в данном документе одно или более соединений, их фармацевтически приемлемых солей, сложных эфиров, гидратов, сольватов или стереоизомеров или фармацевтическую композицию вводят перорально. Для перорального введения подходит любая доза, которая обеспечивает достижение желаемой цели. В некоторых воплощениях подходящие суточные дозировки составляют от примерно 0,001-5000 мг, предпочтительно от 0,1 мг до 5 г, более предпочтительно от 5 мг до 1 г, более предпочтительно от 10 мг до 500 мг, и введение проводят один раз в сутки, дважды в сутки, три раза в сутки, каждый день или 3-5 суток в неделю. В некоторых воплощениях доза предложенных в данном документе одного или более соединений, их фармацевтически приемлемых солей, сложных эфиров, гидратов, сольватов или стереоизомеров или фармацевтической композиции находится в диапазоне от примерно 0,0001 мг, предпочтительно 0,001 мг, 0,01 мг, 0,1 мг, 1 мг, 10 мг, 50 мг, 100 мг, 200 мг, 250 мг, 500 мг, 750 мг, 1000 мг, 2000 мг, 3000 мг, 4000 мг или вплоть до примерно 5000 мг в сутки. В некоторых воплощениях одно или более соединений, их фармацевтически приемлемые соли, сложные эфиры, гидраты, сольваты или стереоизомеры или фармацевтическая композиция, предложенные здесь, после введения субъекту могут пересекать гематоэнцефалический барьер (ВВВ) субъекта.

Применение соединений

В некоторых воплощениях настоящего изобретения предложено применение соединений, их фармацевтически приемлемых солей, сложных эфиров, гидратов, сольватов или стереоизомеров или фармацевтической композиции по настоящему изобретению в изготовлении лекарственных средств для лечения заболеваний, ассоциированных с ErbB (например HER2).

Соединения и их фармацевтические композиции по настоящему изобретению могут быть использованы в ингибировании ErbB (экспрессии или активности), особенно в ингибировании HER2 (экспрессии или активности), как in vivo, так и in vitro. В некоторых воплощениях соединения и их фармацевтические композиции по настоящему изобретению могут быть использованы в ингибировании ErbB (экспрессии или активности), особенно в ингибировании HER2 (экспрессии или активности), в недиагностических, нетерапевтических способах (например, для целей исследования).

Соединения и их фармацевтические композиции по настоящему изобретению могут быть использованы в предупреждении или лечении начала или развития любого из заболеваний, ассоциированных с ErbB (например HER2), у теплокровных животных, особенно у человека.

В такой ситуации согласно настоящему изобретению предложен также способ скрининга пациента, подходящего для лечения соединениями или фармацевтической композицией по настоящему изобретению, одними или в комбинации с другими ингредиентами (например, со вторым активным ингредиентом, например противораковым агентом). Способ включает секвенирование образцов опухолей, взятых у пациентов, и детектирование накопления ErbB (например HER2) у пациента.

ПРИМЕРЫ

Нижеследующие примеры дополнительно поясняют общие способы по настоящему изобретению. Соединения по настоящему изобретению могут быть получены способами, известными в данной области техники. Нижеследующие примеры подробно иллюстрируют способы получения предпочтительных соединений по настоящему изобретению. Однако они не предназначены ограничивать способы получения соединений по настоящему изобретению.

ПРИМЕРЫ СИНТЕЗА

Структуры соединений в нижеследующих примерах были охарактеризованы спектроскопией ядерного магнитного резонанса (ЯМР) и/или масс-спектрометрией (МС). ЯМР сдвиг (δ) приведен в единицах 10"6 (м.д. (миллионные доли)). ¹H-ЯМР спектры регистрировали в диметилсульфоксиде-d₆ (DMSO-d₆), или CDCl₃, или CD₃OD, или D₂O (от AldRich или Cambridge Isotope Lab., Inc.) на спектрометрах Bruker AVANCE NMR (400 МГц) с использованием ICON-NMR (управляемых программой TopSpin), или на спектрометрах Varian 400MR NMR или Varian VNMR400 NMR (400 МГц) (управляемых программой VnmrJ) с тетраметилспланом в качестве внутреннего стандарта.

МС измерение проводили с использованием масс-спектрометра Shimadzu 2010, или Agilent 6110A MSD, или 1969A TOF с использованием методов электрораспылительной ионизации, химической ионизации и ионизации электронным ударом исходя из предела измерения приборов.

Измерения методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) проводили на системах серии Shimadzu LC-20A или Shimadzu LC-2010HT, или серии Agilent 1200 LC или Agilent 1100 с использованием колонки Ultimate ХВ-С18 (3,0×50 мм, 3 мкм, или 3,0×150 мм, 3 мкм), или колонки Xbridge shieldRP18 (5 мкм, 50 мм × 2,1 мм), или колонки Xtimate С18 (3 мкм, 2,1 × 30 мм), или колонки MERCK RP18 2,5-2 мм, или колонки Agilent Zorbax Eclipse Plus CI8 (4,6 мм × 150 мм, 5 мкм) и т.д.

Тонкослойную хроматографию проводили с использованием силикагелевых пластин Yantai Huanghai HSGF254 или Anhui Liang Chen Gui Yuans. Силикагелевые пластины, использованные для тонкослойной хроматографии (ТСХ), были 0,15 мм-0,2 мм. Силикагелевые пластины, использованные для разделения и очистки продуктов методом ТСХ, были 0,4 мм-0,5 мм.

Для очистки на хроматографических колонках использовали колонку с силикагелем в качестве носителя (100-200, 200-300 или 300-400 меш, компании Yantai Huanghai со. или Anhui Liang Chen Gui Yuan со., etc.), или флэш-колонку (флэш-колонка с диоксидом кремния-CS 40-60 мкм, или обращенно-фазовую С18 колонку 20-35 мкм компании Agela Technologies, etc.), или флэш-колонку с диоксидом кремния-CS (40-60 мкм), или С18 колонку (20-40 мкм) компании Agela Technologies в комби-флэш-системе Teledyne ISCO или флэш-системе Biotage. Размеры колонок подбирали исходя из количества соединений.

Известные исходные вещества по настоящему изобретению могут быть синтезированы с использованием способов, известных в данной области техники или согласно им, или они могут быть приобретены у Alfa Aesar, Langcaster, TCI, AldRich, Bepharm и Scochem (или PharmaBlock, Bide, Amatek, Stru Chem, Firster Pharmaceutical, Titan (Adamas) и т.д.).

Если конкретно не указано иное, реакции в примерах все проводили в атмосфере аргона или азота. В атмосфере аргона или азота означает, что реакционная колба соединена с аргоновым или азотным баллоном объемом примерно 1 л. Гидрирование обычно проводили под давлением. Если конкретно не указано иное, реакционной температурой в примерах была температура окружающей среды, которая составляла примерно 20°С-30°С.

Протекание реакций, описанных в примерах, отслеживали методом ТСХ. Использованные для реакций системы элюентов включают систему дихлорметан-метанол и систему петролейный эфир-этилацетат. Объемные соотношения растворителей подбирали исходя из различной полярности соединений.

Система элюирования для колоночной хроматографии, использованной для очистки соединений, и система элюентов для ТСХ включают систему дихлорметан-метанол и систему петролейный эфир-этилацетат. Объемные соотношения растворителей подбирали исходя из различной полярности соединений. Небольшое количество щелочного или кислотного агента (0,1%-1%), такого как муравьиная кислота, или уксусная кислота, или TFA, или аммиак, может быть добавлено для корректировки.

Пример 1

N-(4-([1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридин-7-илокси)-3-метилфенил)-5-((3,3-дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)окси)хиназолин-4-амин

Методика получения соединения 1b:

К раствору 4-метокси-пиридин-2-иламина (5,0 г, 40,3 ммоль) в этаноле (150 мл) добавляли диметоксиметил-диметил-амин (4,8 г, 40,3 ммоль). Затем эту смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 10 ч. Смесь концентрировали с получением неочищенного продукта (7,8 г), который не очищали и использовали непосредственно на следующей стадии. ЖХ-МС: Rt=0,898 мин при 0-60АВ_220 & 254 1cm хроматографии (Xtimate C18, 2,1*30 мм, 3 мкм), МС (ЭРИ) m/z=179,9 [М+Н⁺].

Методика получения соединения 1с:

К раствору 1b (7,8 г неочищенного) в метаноле добавляли гидроксиламин-орто-сульфоновую кислоту (5,42 г, 47,9 ммоль), пиридин (7 г, 88,5 ммоль) и этот свежеприготовленный раствор перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 10 ч. Раствор концентрировали и остаток очищали на силикагеле (CH₂Cl₂:МеОН от 100:1 до 50:1) с получением продукта 1с (4,0 г, выход 61,5%) в виде белого твердого вещества. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) 3 8.76 (d, J=7,6 Гц, 1Н), 8.32 (s, 1H), 7.22 (d, J=2,4 Гц, 1H), 6.84 (dd, J=7,6 Гц, 1H), 3.89 (s, 3H).

Методика получения соединения 1d:

Смесь соединения 1c (900 мг, 6,03 ммоль) и гидрохлорида пиридина (6 г, 51,9 ммоль) в колбе перемешивали при 160°С в течение 4 ч. Смесь охлаждали до 25°С и раствор нейтрализовали раствором гидроксида натрия (1 М) до достижения рН 5-7. Полученную смесь фильтровали с получением продукта в виде белого твердого вещества. Фильтрат экстрагировали EtOAc (200 мл × 5), органическую фазу объединяли, сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением продукта в виде белого твердого вещества (700 мг, выход 85,9%). ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-A) 5 10.87 (s, 1H), 8.70 (dd, J=7,4 Гц, 1H), 8.24 (s, 1H), 6.89 (dd, J=2,8 Гц, 1H), 6.75-72 (m, 1H).

Методика получения соединения 1е:

К перемешиваемому раствору 1d (1,0 г, 7,4 ммоль) и 1-фтор-2-метил-4-нитробензола (1,4 г, 8,9 ммоль) в DMF (10 мл) добавляли Cs₂CO₃ (4,8 г, 14,8 ммоль), смесь нагревали до 100°С в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и осадок растворяли в EtOAc (50 мл). Раствор промывали водой и рассолом. Органический слой концентрировали и остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (элюировали от 5% до 20% этилацетата в петролейном эфире) с получением соединения 1е (1,5 г, выход 75,0%) в виде белого твердого вещества.

Методика получения соединения 1f:

Раствор 1е (1,5 г, 5,6 ммоль) и 10% Pd /С (150 мг) в метаноле (15 мл) нагревали при 45°С в течение 3 часов в атмосфере водорода (40 фунт/кв.дюйм). Горячий раствор фильтровали через целит и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением соединения 1f (1,2 г, неочищенного) в виде бледно-серого твердого вещества, которое использовали непосредственно на следующей стадии.

Методика получения соединения 1g:

Перемешиваемый раствор соединения 1g1 (100 г, 734,5 ммоль) в концентрированной H₂SO₄ (700 мл) перемешивали при 65°С в течение 3 часов. Затем эту смесь вливали в лед и доводили до рН 9 с помощью 20%-ного водного раствора NaOH. Смесь экстрагировали EtOAc (1000 мл × 3), органические слои объединяли и промывали рассолом, сушили над Na₂SO₄ и затем концентрировали в вакууме с получением соединения 1g2 (100 г, выход 88%) в виде желтого твердого вещества. ¹Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 7.52 (d, J=12,4 Гц, 2Н), 7.10-7.04 (m, 1Н), 6.50 (d, J=8,0 Гц, 2Н), 6.33-6.28 (m, 1Н), 6.16 (s, 2Н). Раствор соединения 1g2 (30 г, 19,5 ммоль) в CH(OEt)₃ (300 мл) перемешивали при 140°С в течение 72 часов. Затем полученную смесь концентрировали с получением неочищенного остатка, который перекристаллизовывали из смеси этилацетат/РЕ 1:2 (об/об) с получением соединения 1g3 (28 г, выход: 87,8%) в виде белого твердого вещества. ¹Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 12.28 (s, 1H), 8.08 (s, 1Н), 7.81-7.75 (m, 1H), 7.48 (d, J=8,0 Гц, 1Н), 7.29-7.24 (m, 1Н). Раствор соединения 1g3 (20 г, 12,2 ммоль) в SOCl₂ (400 мл) и безводном DMF (5 мл) перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 24 ч. Затем смесь концентрировали с получением соединения 1g (24 г, выход: 99%) в виде желтого твердого вещества, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 9.23 (s, 1H), 8.49 (d, J=8,4, 1Н), 8.15-8.21 (m, 1Н), 7.62-7.66 (m, 1Н).

Методика получения соединения 1h:

Смесь соединения 1g (3 г, 6,48 ммоль) и соединения 1f (3,95 г, 16,48 ммоль) в безводном CH₃CN (30 мл) перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 2 ч. Твердое вещество осаждалось из смеси. Смесь охлаждали до комнатной температуры (25-30°С) и смесь фильтровали с получением целевого соединения 1h (5 г, выход 78,1%) в виде желтого твердого вещества. ЖХ-МС: R_t=2,144 мин в 0-60АВ_4 мин хроматографии (Welch Xtimate C18, 2,1*30 мм, 3 мкм), МС (ЭРИ) m/z=387,0 [М+Н]⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 9.13-9.10 (m, 2Н), 8.84 (s, 1H), 8.20-8.15 (m, 1Н), 7.78-7.77 (m, 2Н), 7.73-7.68 (m, 2Н), 7.50 (dd, J₁=2,4 Гц, J₂=7,6 Гц, 1H), 7.40 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7.26 (d, J=2,0 Гц, 1H), 2.32 (s, 3Н).

Методика получения соединения 1i:

К раствору соединения 1i1 (130 г, 0,948 моль) на охлаждающей солевой бане со льдом добавляли 98% НСООН (200 мл, 4,47 моль). Полученную смесь нагревали до 25°С и добавляли 40% НСНО (137 мл, 1,896 моль). Большое количество газа выделялось во время нагревания до 40°С. По завершении процесса раствор доводили до рН приблизительно 9-10 посредством добавления концентрированного NaOH и экстрагировали EtOAc (1,5 л × 3), промывали водой и рассолом (1,6 л). Органический слой сушили над NaSO₄ и концентрировали с получением соединения 1i (116,8 г, неочищенного) в виде белого твердого вещества.

Методика получения соединений Соединение 1 и Соединение 1':

Раствор соединения 1h (100 мг, 0,259 ммоль), соединения li (118 мг, 0,778 ммоль), t-BuOK (146 мг, 1,3 ммоль) в DMF (2 мл) перемешивали в течение 16 часов при 100°С. Смесь очищали посредством обращенно-фазовой ВЭЖХ (колонка: Sunflre С8 30*100 мм*5 мкм, градиент: 0-20% В (А вода/0,05%) HCl, В - ацетонитрил), скорость потока: 30 мл/мин) с получением lj, которое разделяли посредством СФХ (сверхкритическая флюидная хроматография) разделения с получением энантиомеров Соединения 1' (28,6 мг) и Соединения 1 (26,0 мг).

Соединение 1: ЖХ-МС: R_t=1,931 мин в 0-60АВ_4 мин хроматографии (Welch Xtimate С18, 2,1*30 мм, 3 мкм), МС (ЭРИ) m/z=518,4 [М+Н]+. 'Н ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 8.74 (d, J=7,6 Гц, 1Н), 8.53 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.85 (m, 2H), 7.78 (t, J=8,4 Гц, 1H), 7.45 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7.32 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7.18 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7.07 (dd, J₁=2,4 Гц, J₂=8,4 Гц, 1H), 6.81 (d, J=2,4 Гц, 1H), 5.17-5.08 (m, 1H), 3.27 (m, 1H), 2.98-2.95 (m, 1H), 2.68-2.58 (m, 1H), 2.48-2.41 (m, 2H), 2.41 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 2.10-2.03 (m, 1H).

Пример 2

N-(4-([1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридин-7-илокси)-3-метилфенил)-5-(((1R,3r,58)-8-(2,2-дифторэтил)-8-азабииикло[3.2.1]октан-3-ил)окси)хиназолин-4-амин

Методика получения Соединения 2:

К раствору соединения 1h (100 мг, 0,26 ммоль) в THF (3 мл) и DMF (3 мл) добавляли соединение 2а (99 мг, 0,52 ммоль), t-BuOK (88 мг, 0,78 ммоль). По окончании добавления смесь перемешивали при 90°С в течение 5 суток. Смесь фильтровали, концентрировали, очищали посредством ВЭЖХ (колонка: ASB 150*25 мм*5 мкм, градиент: 5-30% В (HCl, В - ацетонитрил), скорость потока: 30 мл/мин) с получением Соединения 2 (10 мг, 6,9%).

Соединение 2: ЖХ-МС: R_t=1,865 мин в 10-80АВ 4 мин хроматографии (Xtimate С18, 2,1*30 мм, 3 мкм), МС (ЭРИ) m/z=558,1 [М+Н]⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 9.07 (d, J=7,6 Гц, 1Н), 9.01 (d, J=6,4 Гц, 1H), 8.79 (s, 1Н), 8.09 (t, J=8,4 Гц, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.76-7.69 (m, 1H), 7.51-7.40 (m, 3Н), 7.37 (d, J=8,0 Гц, 1Н), 7.19 (s, 1H), 6.55 (tt, J₁=53,6 Гц, J₂=3,2 Гц, 1H), 5.29 (s, 1H), 4.25 (s, 2Н), 3.73-3.60 (m, 2Н), 2.90-2.86 (m, 2Н), 2.70-2.67 (m, 2Н), 2.41 (s, 2Н), 2.32-2.28 (m, 5Н).

Пример 3

N-(4-([1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридин-7-илокси)-3-метилфенил)-5-(((3R,4S)-3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)окси)-6-метоксихиназолин-4-амин

Методика получения соединения 3b:

К раствору соединения 3а (5,0 г, 26,44 ммоль) в DMF (50 мл) добавляли NaCN (1,43 г, 29,08 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 20°С в течение 12 часов. Смесь концентрировали с получением осадка. Осадок растворяли в EtOAc (80 мл) и промывали водой (20 мл × 2) и насыщенным рассолом (20 мл × 2). Органические слои сушили над Na₂SO₄, фильтровали и упаривали с получением неочищенного продукта, который очищали посредством флэш-хроматографии на диоксиде кремния (РЕ/EtOAc от 20:1 до 5:1 (об/об)) и концентрировали с получением соединения 3b (2,5 г, выход 48,1%) в виде желтого твердого вещества. ЖХ-МС: R_t=0,845 мин в 10-80АВ_2,0 мин_Е хроматографии (Merck RP-18е 25-2 мм, SN: МКМ9504/198), МС (ЭРИ) m/z=197,1 [М+Н]⁺.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 8.22 (br d, J=8,80 Гц, 1H), 7.24-7.33 (m, 1Н), 4.09 (s, 3H).

Методика получения соединения 3с:

К раствору соединения 3b (2,3 г, 11,73 ммоль) в АсОН (25 мл) и воде (0,3 мл) при 0°С добавляли Fe (3,27 г, 58,63 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 20°С в течение 16 часов. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением осадка. Осадок растворяли в этилацетате (50 мл) и доводили насыщенным NaHCO₃ до рН 8-9. Органическую фазу промывали водой (20 мл), рассолом (20 мл), сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением соединения 3с (2 г, неочищенного) в виде желтого твердого вещества. ЖХ-МС: Rt=0,689 мин в 10-80АВ_2 мин_Е хроматографии (Merck RP-18e 25-2 мм, SN: МКМ9504/198), МС (ЭРИ) m/z=167,1 [М+Н]⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7.06 (t, J=9,00 Гц, 1H), 6.46 (dd, J=9,00, 1.76 Гц, 1H), 4.21 (br s, 2H), 3.71-3.91 (m, 3H).

Методика получения соединения 3d:

Смесь соединения 3с (1 г, 6,02 ммоль) в DMF-DMA (15 мл) перемешивали при 100°С в течение 12 часов. Смесь концентрировали с получением неочищенного соединения 3d (1,5 г, неочищенного) в виде желтого твердого вещества. ЖХ-МС: Rt=0,577 мин в 0-60АВ 2 мин Е хроматографии (Merck RP-18e 25-2 мм, SN: МКМ9504/198), МС (ЭРИ) m/z=222,1 [М+Н]⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, Метанол-А) 3 7.73 (s, 1H), 7.27 (t, J=9,26 Гц, 1H), 6.82 (dd, J=9,04, 1,76 Гц, 1H), 3.72-3.98 (m, 3Н), 3.01-3.14 (m, 6Н).

Методика получения соединения 3е:

Смесь соединения 3d (1,5 г, 6,78 ммоль) и соединения 1f (2,44 г, 10,17 ммоль) в АсОН (20 мл) перемешивали при 50°С в течение 12 ч. Смесь концентрировали в вакууме. Остаток суспендировали в EtOAc (15 мл) и доводили рН до приблизительно 8-9 насыщенным K₂CO₃ (водн.), фильтровали и осадок промывали этилацетатом (5 мл) с получением N-(4-([1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридин-7-илокси)-3-метилфенил)-5-фтор-6-метокси-хиназолин-4-амина (Y02, 2 г, 4,81 ммоль, 90,0 масс. %, выход 70,9%) в виде коричневого твердого вещества. ЖХ-МС: R_t=1,022 мин в 0-60АВ_2min_Е хроматографии (Merck RP-18e 25-2 мм, SN: МКМ9504/198), МС (ЭРИ) m/z=417,2 [М+Н]⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 8.71-8.77 (m, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.27-8.31 (m, 1H), 7.79-7.88 (m, 1H), 7.70-7.77 (m, 2Н), 7.66 (dd, J=9,26, 1,76 Гц, 1H), 7.19 (d, J=8,60 Гц, 1H), 7.05-7.11 (m, 1H), 6.85 (d, J=2,43 Гц, 1H), 4.05 (s, 3Н), 2.25 (s, 3Н).

Методика получения Соединения 3:

Смесь соединения 3е (400 мг, 537,9 мкмоль, 56%-ная чистота) и соединения 3f (214,9 мг, 1,61 ммоль, 3,0 экв.) и t-BuOK (211,3 мг, 1,88 ммоль, 3,5 экв.) в DMF (5 мл) перемешивали при 130°С в течение 16 часов. Смесь доводили до рН 7-8, фильтровали, фильтрат очищали посредством нейтральной преп. ВЭЖХ (колонка: Phenomenex Gemini С18 200*25 мм*10 мкм, градиент: 28-58%В (А: H₂O, В: CH₃CN), скорость потока: 25 мл/мин) с последующим СФХ-разделением с получением цис-изомера Соединения 3 (40 мг, выход 14%) в виде белого твердого вещества.

Соединение 3: ЖХ-МС: R_t=1,906 мин в 0-60АВ_4 мин хроматографии (Xtimate С18, 2,1*30 мм, 3 мкм), МС (ЭРИ) m/z=530,1 [М+Н]⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 8.74 (d, J=7,2 Гц, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.84-7.81 (m, 1Н), 7.76 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7.61 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7.15 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7.06 (dd, J=2,4 Гц и 7,6 Гц, 1H), 6.81 (d, J=2,4 Гц, 1H), 5.20-5.07 (m, 1H), 4.98-4.89 (m, 1H), 4.04 (s, 3Н), 3.25-3.23 (m, 1H), 2.91 (d, J=8,0 Гц, 1Н), 2.28 (s, 3Н), 2.24 (s, 3Н), 2.49-2.15 (m, 3Н).

Пример 4

(R)-N-(4-([1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридин-7-илокси)-3-метилфенил)-5-((4,4-дифтор-1-метилпиперидин-2-ил)метокси)-6-метоксихиназолин-4-амин

К раствору соединения 3е (100 мг, 0,24 ммоль) в THF (6 мл) и DMF (4 мл) добавляли соединение 4а (119 мг, 0,72 ммоль), t-BuOK (94 мг, 0,84 ммоль). По окончании добавления смесь перемешивали при 80°С в течение 24 часов. Ее фильтровали, концентрировали, очищали посредством ВЭЖХ (колонка: Agella Venusil ASB С18 150*21,2 мм*5 мкм, градиент: 10-40% В (HCl, В - ацетонитрил), скорость потока: 25 мл/мин) с получением Соединения 4 (80 мг, выход 59,3%).

Соединение 4: ЖХ-МС: R_t=2,079 мин в 10-80АВ_4 мин хроматографии (Xtimate С18, 2,1*30 мм, 3 мкм), МС (ЭРИ) m/z=562,1 [М+Н]⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, Метанол-d₆) δ 9.08 (d, J=7,6 Гц, 1H), 9.04 (s, 1H), 8.71 (s, 1H), 8.07 (d, J=9,2 Гц, 1Н), 7.91-7.88 (m, 2Н), 7.76 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7.45 (dd, J₁=7,6 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7.36 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7.21 (d, J=2,4 Гц, 1Н), 4.87 (m, 1H), 4.58-4.55 (m, 1H), 4.17 (s, 3Н), 4.09-4.05 (m, 1H), 3.77 (m, 1Н), 3.51-3.48 (m, 1H), 3.26 (s, 3Н), 2.86-2.69 (m, 3Н), 2.47-2.44 (m, 1H), 2.30 (s, 3Н).

Пример 5

N-(4-([1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридин-7-илокси)-3-метилфенил)-5-((4,4-дифтор-1-метилпиперидин-3-ил)окси)-6-метоксихиназолин-4-амин

Синтез выполняли согласно экспериментальной методике, аналогичной для Соединения 3, с получением энантиомера Соединения 5 в виде твердого вещества после СФХ-разделения.

Соединение 5: ЖХ-МС: R_t=2,065 мин при 0-60АВ_4 мин хроматографии (Welch Xtimate С18, 2,1*30 мм, 3 мкм), МС (ЭРИ) m/z=548,3 [М+Н]⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 12.69-12.04 (m, 1H), 10.86-10.49 (m, 1Н), 8.98 (d, J=7,2 Гц, 1Н), 8.81 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.06 (d, J=9,6 Гц, 1H), 7.86 (d, J=8,8 Гц, 1Н), 7.80 (s, 1H), 7.68 (s, 1Н), 7.31 (d, J=6,0 Гц, 1H), 7.06 (dd, J₁=2,8 Гц, J₂=7,6 Гц, 1H), 6.83 (s, 1H), 5.56-4.88 (m, 1H), 4.27-4.23 (m, 6Н), 4.12 (brs, 1H), 3.31 (brs, 3Н), 2.91 (s, 3Н), 2.58 (brs, 1H), 2.23 (s, 3Н).

Пример 6

Энантиомер-1:

(S)-N-(4-([1,2,4]триазоло[1,5-a]пиридин-7-илокси)-3-метилфенил)-5-((3,3-дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)окси)-7-метоксихиназолин-4-амин

и

Энантиомер-2:

(R)-N-(4-([1,2,4]триазоло[1,5-a]пиpидин-7-илокси)-3-метилфенил)-5-((3,3-дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)окси)-7-метоксихиназолин-4-амин

Методика получения соединения 6b:

Смесь соединения 6а (2,5 г, 11,2 ммоль) и CuCN (2,9 г, 22,4 ммоль) в NMP (25 мл) перемешивали при 160°С в течение 5 часов. После охлаждения до комнатной температуры ее фильтровали и концентрировали, неочищенный продукт 6b использовали непосредственно на следующей стадии без дополнительной очистки.

Методика получения соединения 6с:

Газообразный NH₃ закачивали в 100 мл EtOH при 0°С в течение 15 минут и соединение 6b (3 г, неочищенное) растворяли в 30 мл МеОН, смесь перемешивали при 120°С в герметично закрытой пробирке в течение ночи. Раствор концентрировали и остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (РЕ/EtOAc 1/1) с получением соединения 6с (450 мг, выход 24% за две стадии) в виде белого твердого вещества. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 6.38 (s, 2Н), 6.17 (d, J=2 Гц, 1H), 6.13 (dd, J₁=2,0 Гц, J₂=9,2 Гц, 1H), 3.73 (s, 3Н).

Методика получения соединения 6d:

Смесь соединения 6с (2 г, неочищенного) в DMF-DMA (8 мл) перемешивали при 100°С в течение 2 часов, после охлаждения до комнатной температуры смесь фильтровали и осадок промывали этилацетатом с получением соединения 6d (800 мг, неочищенного) в виде желтого твердого вещества, которое использовали непосредственно на следующей стадии.

Методика получения соединения 6е:

Смесь соединения 6d (800 мг, 3,62 ммоль) и соединения 1f (1,303 г, 5,43 ммоль) в АсОН (15 мл) перемешивали при 40-60°С в течение ночи. Концентрировали и доводили рН до приблизительно 8-9 с использованием K₂CO₃ (водн.), фильтровали и осадок промывали этилацетатом с получением соединения 6е (1,6 г, неочищенного) в виде коричневого твердого вещества. ЖХ-МС: R_t=0,702 мин при 5-95АВ_1,5 мин хроматографии (Xtimate С18 2,1*30 мм), МС (ЭРИ) m/z 417,0 [М+Н]⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 8.74 (d, J=7,2 Гц, 1Н), 8.46 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.67 (dd, J₁=2,4 Гц, J₂=8,4 Гц, 1H), 7.18 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7.09-7.00 (m, 3Н), 6.85 (d, J=2,4 Гц, 1Н), 3.98 (s, 3Н), 2.25 (s, 3Н).

Методика получения Соединения 6:

Смесь соединения 6е (1,1 г, 2,64 ммоль), соединения 1i (991 мг, 5,28 ммоль) и е-BuOK (889 мг, 7,92 ммоль) в THF/DMF (15/6 мл) перемешивали при приблизительно 80-100°С в течение ночи под защитой N₂. Смесь концентрировали и остаток очищали посредством обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ (колонка: SYNERGI 250*50 10 мкм, градиент: 40-70% В (А - вода/0,05% NH₄HCO₃, В - ацетонитрил), скорость потока: 80 мл/мин) с получением соединения 6f, и затем это соединение разделяли посредством СФХ с получением 170 мг Соединения 6 и 170 мг Соединения 6'.

Соединение 6 (энантиомер-1): ЖХ-МС: R_t=2,001 мин при 0-60АВ_4 мин хроматографии (Xtimate С18, 2,1*30 мм, 3 мкм), МС (ЭРИ) m/z=548,1 [М+Н]⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 8.89 (d, J=7,6 Гц, 1H), 8.77 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 7.82 (d, J=2,4 Гц, 1Н), 7.77 (dd, J₂=9,2 Гц,.7,2=2,8 Гц, 1Н), 7.31 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7.26 (dd, J₁=13,6 Гц, J₂=2,0 Гц, 2Н), 6.95 (d, J=2,0 Гц, 1H), 6.92 (s, 1H), 5.67-5.59 (m, 1H), 4.28 (brs, 1Н), 4.08 (s, 3Н), 3.91-3.76 (m, 2Н), 3.53-3.47 (m, 1Н), 3.07 (s, 3Н), 2.88 (d, J=13,2 Гц, 1H), 2.43-2.40 (m, 1H), 2.29 (s, 3Н).

Соединение 6' (энантиомер-2): ЖХ-МС: R_t=2,009 мин при 0-60АВ_4 мин хроматографии (Xtimate С18, 2,1*30 мм, 3 мкм), МС (ЭРИ) m/z=548,0 [М+Н]⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 8.89 (d, J=7,2 Гц, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 7.82 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7.77 (dd, J₁=8,4 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7.30 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7.22 (dd, J₁=7,6 Гц, J₂=2,4 Гц, 2Н), 6.96 (d, J=2,4 Гц, 1Н), 6.91 (d, J=2,4 Гц, 1Н), 5.72-5.63 (m, 1Н), 4.26-4.24 (m, 1H), 4.08 (s, 3Н), 3.94-3.76 (m, 2Н), 3.57-3.51 (m, 1H), 3.07 (s, 3Н), 2.87 (d, J=14,4 Гц, 1H), 2.48-2.42 (m, 1H), 2.29 (s, 3Н).

Пример 7

5-((3,3-дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)окси)-N-(3-метил-4-((1-метил-1Н-бензо[d]имидазол-5-ил)окси)фенил)хиназолин-4-амин

Методика получения соединения 7b:

К раствору соединения 7а (5,0 г, 29,76 ммоль) в DMF (50 мл) добавляли NaH (1,3 г, 32,74 ммоль) при 0°С и перемешивали в течение 10 минут. Добавляли MeI (6,34 г, 44,64 ммоль) и перемешивали при 35°С в течение 1,5 часов. ТСХ показала полное израсходование Соединения 1. В раствор добавляли воду (50 мл) и экстрагировали EOAc (100 мл × 3). Объединенный органический слой промывали рассолом (100 мл*3), сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением соединения 7b (6,2 г, 100%) в виде красного твердого вещества. ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7.62 (d, J=2,8 Гц, 1H), 7.18 (dd, J=9,6 Гц, 3,2 Гц, 1Н), 6.82 (d, J=9,6 Гц, 1H), 3.80 (s, 3Н), 3.02 (d, J=5,2 Гц, 3Н).

Методика получения соединения 7с:

К раствору соединения 7b (6,2 г, 34,06 ммоль) в EtOH (147 мл) и THF (27 мл) добавляли Pd/C (1,0 г) и раствор перемешивали в атмосфере баллонного Ш при комнатной температуре в течение 4 часов. Затем раствор фильтровали, концентрировали и очищали посредством колоночной хроматографии (РЕ:EtOAc 3:1 (об/об)) с получением соединения 7с (3,5 г, 69%) в виде твердого вещества. ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 6.60 (d, J=8,4 Гц, 1H), 6.39-6.35 (m, 2Н), 3.74 (s, 3Н), 2.82 (s, 3Н).

Методика получения соединения 7d:

Раствор соединения 7с (3,5 г, 23,03 ммоль) и ацетата формамидина (4,8 г, 46,06 ммоль) в 2-метокси-этаноле (60 мл) перемешивали при 120°С в течение 20 часов. Смесь затем концентрировали и добавляли Н₂О (60 мл), экстрагировали CH₂Cl₂ (150 мл × 3). Объединенный органический слой промывали рассолом (100 мл × 3), сушили над Na₂SO₄, фильтровали, концентрировали с получением соединения 7d (3,6 г, 97%) в виде твердого вещества. ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7.83 (s, 1H), 7.29-7.26 (m, 2Н), 6.97 (dd, J₁=2,4 Гц, J₂=8,8 Гц, 1H), 3.87 (s, 3Н), 3.82 (s, 3Н).

Методика получения соединения 7е:

Раствор соединения 7d (1,0 г, 6,17 ммоль) в 38% HBr (30 мл) и АсОН (30 мл) перемешивали при 110°С в течение 48 часов. Затем смесь концентрировали и нейтрализовали до рН 7 с помощью Na₂CO₃. Смесь экстрагировали EtOAc (100 мл × 3). Объединенный органический слой промывали рассолом (100 мл × 3), сушили над Na₂SO₄, фильтровали, концентрировали с получением соединения 7е (0,2 г, 22%) в виде твердого вещества. ¹Н ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 7.97 (s, 1H), 7.34 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7.03 (d, J=2,4 Гц, 1Н), 6.87 (dd, J₁=2,4 Гц, J₂=8,8 Гц, 1H), 3.84 (s, 3Н).

Методика получения соединения 7g:

К раствору соединения 7е (209,0 мг, 1,35 ммоль) и соединения 7f (200,0 мг, 1,35 ммоль) в DMF (5 мл) добавляли K₂CO₃ (209,0 мг, 1,35 ммоль) и перемешивали при 80°С в течение 20 часов. Затем в эту смесь добавляли воду (10 мл), экстрагировали EtOAc (50 мл × 3) и объединенный органический слой промывали рассолом (50 мл × 3), сушили над Na₂SO₄, фильтровали, концентрировали с получением соединения 7g (0,4 г, неочищенного) в виде желтого твердого вещества. ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 8.15 (d, J=2,0 Гц, 1Н), 7.95 (d, J=2,8 Гц, 1H), 7.93 (d, J=2,8 Гц, 1H), 7.48 (d, J=2,0 Гц, 1H), 7.42 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.07 (dd, J₁=2,4 Гц, J₂=8,8 Гц, 1H), 6.67 (d, J=9,2 Гц, 1H), 3.89 (s, 2H), 2.46 (s, 3H).

Методика получения соединения 7h:

К раствору соединения 7g (400,0 мг, 1,41 ммоль) в МеОН (50 мл) добавляли Pd/C (0,5 г) и перемешивали в атмосфере баллонного H₂ при комнатной температуре в течение 2 часов. Затем смесь фильтровали и концентрировали с получением соединения 7h (340 мг, выход 69%) в виде красного твердого вещества.

¹Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8.09 (s, 1H), 7.46 (d, J=8,8 Гц, 1H), 6.89-6.85 (m, 2Н), 6.65 (d, J=8,4 Гц, 1H), 6.49 (d, J=2,4 Гц, 1H), 6.42 (dd, J₁=2,4 Гц, J₂=8,4 Гц, 1H), 4.88 (s, 2Н), 3.79 (s, 3Н), 1.99 (s, 3Н).

Методика получения соединения 7i:

Раствор соединения 7h (340,0 мг, 1,344 ммоль) и соединения 1g (244,0 мг, 1,344 ммоль) в CH₃CN (40 мл) перемешивали при 80°С в течение 20 часов. Затем смесь концентрировали с получением соединения 7i (530,0 мг, выход 98,0%) в виде желтого твердого вещества. ЖХ-МС: R_t=1,351 мин при 10-80АВ_4 мин хроматографии (Welch Xtimate C18, 2,1*30 мм, 3 мкм), МС (ЭРИ) m/z=400,1 [М+Н]⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 8.49 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.85-7.79 (m, 1H), 7.61 (d, J=8,4 Гц, 2Н), 7.55-7.48 (m, 2Н), 7.35 (dd, J₁=8,0 Гц, J₂=12,8 Гц, 1H), 7.15 (d, J=2,0 Гц, 1H), 7.08 (dd, J₁=2,4 Гц, J₂=8,8 Гц, 1Н), 6.88 (d, J=8,8 Гц, 1H), 3.90 (s, 3Н), 2.30 (s, 3Н).

Методика получения Соединения 7:

Раствор соединения 7i (430,0 мг, 1,08 ммоль), соединения 1i (325,0 мг, 2,16 ммоль) и t-BuOK (362,0 мг, 3,24 ммоль) в DMF (5 мл) и THF (5 мл) перемешивали при 100°С в течение 20 часов. Смесь фильтровали и концентрировали и неочищенное вещество очищали посредством ВЭЖХ (колонка: Phenomenex Gemini С18 200*25 мм*10 мкм, градиент: 10-20% В (А - вода/0,05% TFA, В - ацетонитрил) с последующим СФХ-разделением с получением энантиомера Соединения 7 (140 мг, выход 24%) в виде белого твердого вещества.

Соединение 7: ЖХ-МС: R_t=1,166 мин при 10-80АВ_4 мин хроматографии (Welch Xtimate C18, 2,1*30 мм, 3 мкм), МС (ЭРИ) m/z=531,1 [М+Н]⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 9.37 (s, 1H), 8.83 (s, 1H), 8.10 (t, J=8,4 Гц, 1H), 7.95 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7.77-7.73 (m, 2Н), 7.56 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7.40 (dd, J₂=2,0 Гц, J₂=8,8 Гц, 1H), 7.30 (d, J=2,0 Гц, 1H), 7.10 (d, J=8,8 Гц, 1H), 5.81-5.73 (m, 1Н), 4.32-4.27 (m, 1H), 4.17 (s, 3Н), 4.06-3.95 (m, 1H), 3.81 (d, J=12,8 Гц, 1Н), 3.69-3.62 (m, 1Н), 3.10 (s, 3Н), 2.92-2.88 (m, 1H), 2.51-2.47 (m, 1Н), 2.32 (s, 3Н).

Пример 8

5-((3,3-дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)окси)-N-(4-(имидазо[1,2-a]пиридин-7-илокси)-3-метилфенил)-7-метоксихиназолин-4-амин

Методика получения соединения 8с:

Раствор соединения 8а (12,68 г, 1,0 экв.), соединения 8b (9,0 г, 1,0 экв.) и Cs₂CO₃ (53,26 г, 2,0 экв.) в DMF (135 мл) перемешивали при 80°С в течение 16 часов. Затем смесь вливали в воду, экстрагировали этилацетатом (150 мл × 3), промывали рассолом (150 мл × 3), затем сушили над Na₂SO₄ и фильтровали, концентрировали и неочищенное вещество очищали колоночной хроматографией (РЕ:ЕА 1:1 (об/об)) на силикагеле с получением соединения 8с (10 г, выход 49%) в виде желтого твердого вещества. ¹Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8.28 (d, J=2,4 Гц, 1H), 8.13 (dd, J₁=8,8 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7.87 (d, J=6,0 Гц, 1Н), 7.21 (d, J=8,8 Гц, 1Н), 6.19 (dd, J₁=6,0 Гц, J₂=2,0 Гц, 1H), 6.04(s, 2Н), 5.89 (d, J=2,4 Гц, 1H), 2.27 (s, 3Н).

Методика получения соединения 8d:

Раствор соединения 8с (10,0 г, 1,0 экв.) в 2-хлорацетальдегиде (137,9 г, 43,1 экв.) перемешивали при 80°С в течение 16 часов. Смесь гасили насыщ. водным NaOH (50 мл), концентрировали и очищали посредством колоночной хроматографии на диоксиде кремния (CH₂Cl₂/CH₃OH 10:1 (об/об)) с получением соединения 8d в виде коричневого твердого вещества (9,0 г, выход 91,9%). ЖХ-МС: R_t=0,640 мин при 5-95АВ_4 мин хроматографии (Xtimate С18, 2,1*30 мм, 3 мкм), МС (ЭРИ) m/z=269,9 [М+Н]⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 8.21 (d, J=2,4 Гц, 1Н), 8.17 (d, J=7,6 Гц, 1Н), 8.09 (dd, J₁=8,4 Гц, J₂=2,4 Гц, 1Н), 7.62 (s, 1H), 7.57 (s, 1Н), 7.10 (s, 1H), 7.04 (d, J=8,8 Гц, 1H), 6.75 (dd, J₁=7,6 Гц, J₂=2,4 Гц, 1Н), 2.37 (s, 3Н).

Методика получения соединения 8е:

К раствору соединения 8d (9,0 г, 1,0 экв.) и NH₄Cl (17,88 г, 10,0 экв.) в смеси МеОН/Н₂О 3:1 (об/об) (100 мл) добавляли Fe (9,33 г, 5,0 экв.), смесь перемешивали при 60°С в течение 6 часов. Суспензию фильтровали через набивку целита, фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта 8е, который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Методика получения соединения 8f:

Смесь соединения 6d (203,4 мг, 0,919 ммоль) и соединения 8е (200 мг, 0,836 ммоль) в АсОН (5 мл) перемешивали при 40-60°С в течение 3 суток. АсОН удаляли в вакууме и остаток подщелачивали до рН 8-9 водным Na₂CO₃ и фильтровали. Фильтрат сушили с получением соединения 8f (250 мг, неочищенного) в виде красного масла, которое использовали непосредственно на следующей стадии без дополнительной очистки. ЖХ-МС: R_t=1,901 мин при 0-60АВ_4 мин хроматографии (Xtimate С18, 2,1*30 мм), МС (ЭРИ) m/z=416,0 [М+Н]⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 8.77 (d, J=7,6 Гц, 1H), 8.68 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.88 (d, J=2,0 Гц, 1Н), 7.69 (s, 1H), 7.63 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7.36-7.28 (m, 3Н), 7.08 (s, 1H), 7.04 (s, 1H), 4.06 (s, 3Н), 2.29 (s, 3Н).

Методика получения Соединения 8:

Смесь соединения 8f (250 мг, 0,6 ммоль), соединения 1i (136,4 мг, 0,9 ммоль) и t-BuOK (134,4 мг, 1,2 ммоль) в THF (5 мл) и DMF (2 мл) перемешивали при 80-100°С в течение ночи. Смесь концентрировали и неочищенное вещество очищали обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ (колонка: Sunfire С8 30*100 мм*5 мкм, градиент: 0-20% В (А - вода/0,05% HCl, В - ацетонитрил), скорость потока: 30 мл/мин) с последующим СФХ-разделением с получением энантиомера Соединения 8 (18,2 мг, выход 5,6% за две стадии) в виде желтого твердого вещества.

Соединение 8: ЖХ-МС: R_t=1,81 мин при 0-60АВ_4 мин хроматографии (Xtimate С18 2,1*30 мм), МС (ЭРИ) m/z=547,1 [М+Н]⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 8.79 (d, J=7,2 Гц, 1H), 8.77 (s, 1H), 8.10 (d, J=2,0 Гц, 1H), 7.89-7.79 (m, 3Н), 7.35-7.31 (m, 3Н), 7.02 (d, J=2,4 Гц, 1H), 6.98 (s, 1H), 5.73 (brs, 1Н), 4.29-4.26 (m, 1Н), 4.08 (s, 3Н), 4.01-3.89 (m, 1H), 3.79 (d, J=12,8 Гц, 1Н), 3.63-3.57 (m, 1H), 3.09 (s, 3Н), 2.87 (s, 1Н), 2.49-2.46 (m, 1H), 2.29 (s, 3Н).

Пример 9

5-((3,3-дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)окси)-N-(3-метил-4-(пиразоло[1,5-a]пиридин-6-илокси)фенил)хиназолин-4-амин

Методика получения соединения 9b:

Смесь 2-фтор-1-метил-5-нитробензола (0,301 г, 1,0 экв.), Cs₂CO₃ (1,26 г, 2,0 экв.) и соединения 9а (0,26 г, 1,0 экв.) в DMF (10 мл) перемешивали при 80°С в течение 2 часов. Затем к этой смеси добавляли воду (50 мл) и смесь экстрагировали EtOAc (50 мл × 3). Органическую фазу объединяли и промывали рассолом, сушили над Na₂SO₄, фильтровали, концентрировали с получением неочищенного соединения 9b, которое очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир/этилацетат 5:1) с получением желтого твердого вещества (0,45 г, выход: 86%). ЖХ-МС: R_t=0,866 мин при 5-95АВ_1,5 мин хроматографии (ХМК RP-18e 25-2 мм), МС (ЭРИ) m/z=269,9 [М+Н]⁺. ¹Н ЯМР: (400 МГц, CDCl₃) δ 8.37 (dd, J₁=1,2 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 8.17 (dd, J₁=0,8 Гц, J₂=2,8 Гц, 1Н), 8.02-7.99 (m, 1H), 7.98 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7.61 (dd, J₁=4,8 Гц, J₂=9,6 Гц, 1H), 6.96 (dd, J₁=2,0 Гц, J₂=9,6 Гц, 1Н), 6.82 (d, J=9,2 Гц, 1Н), 6.61 (dd, J₁=0,8 Гц, J₂=2,4 Гц, 1Н), 2.46 (s, 3Н).

Методика получения соединения 9с:

К раствору соединения 9b (0,45 г, 1,0 экв.) и порошка Zn (0,874 г, 8,0 экв.) в МеОН (20 мл) добавляли NH₄Cl (0,715 г, 8,0 экв.) порциями в течение 5 мин. Смесь перемешивали при 30°С в течение 5 часов. Затем эту смесь фильтровали и фильтрат концентрировали с получением неочищенного продукта, который очищали посредством флэш-хроматографии с получением пенистого твердого вещества (0,36 г, выход 90%). ЖХ-МС: R_t=0,656 мин при 5-95АВ_1,5 мин хроматографии (MK RP-18e 25-2 мм), МС (ЭРИ) m/z 239,9 [М+Н]⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7.93 (t, J=1,2 Гц, 1H), 7.84 (d, J=2,4 Гц, 1Н), 7.46 (d, J=9,6 Гц, 1H), 7.02 (dd, J₁=2,4 Гц, J₂=9,6 Гц, 1H), 6.80 (d, J=8,8 Гц, 1H), 6.59 (d, J=2,4 Гц, 1H), 6.52 (dd, J₁=2,8 Гц, J₂=8,8 Гц, 1H), 6.47 (d,J=2,0 Гц, 1H).

Методика получения соединения 9d:

Смесь соединения 9с (0,2 г, 1,0 экв.) и соединения 1g (0,4152 г, 1,0 экв.) в MeCN (10 мл) перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 2 часов. Затем эту смесь концентрировали с получением соединения 9d (0,32 г, выход 99%) в виде желтого твердого вещества. ЖХ-МС: R_t=1,874 мин при 10-80АВ_4 мин хроматографии (Xtimate С18 2,1*30 мм), МС (ЭРИ) m/z=385,9 [М+Н]⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 8.71 (s, 1Н), 8.44 (d, J=19,6 Гц, 1H), 8.14 (t, J=1,2 Гц, 1H), 7.90 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7.79-7.71 (m, 2H), 7.63 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7.56-7.51 (m, 1H), 7.27-7.22 (m, 1H), 7.04 (dd, J₁=9,6 Гц, J₂=2,0 Гц, 1H), 7.67 (d, J=8,8 Гц, 2H), 6.53 (d, J=1,6 Гц, 1H), 2.36 (s, 3H).

Методика получения соединения 9e:

К раствору соединения 9d (270 мг, 1,0 экв.) и В (116 мг, 1,10 экв.) в THF/DMF (20 мл, об/об, 1:1) добавляли t-BuOK (326 мг, 4,1 экв.). Смесь перемешивали при 100°С в течение 12 часов. Затем эту смесь концентрировали с получением неочищенного продукта и проводили предварительную очистку колоночной хроматографией на силикагеле (дихлорметан : МеОН 20:1), затем неочищенное вещество очищали посредством обращенно-фазовой ВЭЖХ с получением 70 мг соединения 9е в виде светлого твердого вещества (100 мг, выход 27,6%). ЖХ-МС: R_t=1,614 мин при 10-80АВ_4 мин хроматографии (Xtimate С18 2,1*30 мм SN: 3U411201583), МС (ЭРИ) m/z=517,3 [М+Н]⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 10.01 (s, 1Н), 8.65 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 8.13 (t, J=1,2 Гц, 1Н), 7.89 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7.71 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7.69-7.60 (m, 3Н), 7.51 (d, J=9,2 Гц, 1Н), 7.04 (dd, J₁=2,4 Гц, J₂=9,6 Гц, 1Н), 6.94 (d, J=8,8 Гц, 1H), 6.52 (d, J=2,0 Гц, 1H), 4.74-4.645 (m, 1H), 3.27-3.20 (m, 1H), 2.60-2.50 (m, 1H), 2.43 (s, 3Н), 2.40-2.33 (m, 2Н), 2.29 (s, 3Н), 2.21-2.13 (m, 1Н).

Методика получения Соединения 9:

Соединение 9е (85 мг) разделяли посредством СФХ с получением Соединения 9 (39 мг) и Соединения 9' (41 мг).

Соединение 9 (энантиомер-1): ЖХ-МС: R_t=1,583 мин при 10-80АВ_4 мин хроматографии (Xtimate С18, 2,1*30 мм, 3 мкм SN: 3U411201579), МС (ЭРИ) m/z=517,1 [М+Н]⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 8.49 (s, 1H), 8.12 (t, J=1,2 Гц, 1H), 7.88 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7.78-7.67 (m, 4Н), 7.42 (d, J=8,0 Гц, 1H), 7.28 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7.28 (d, J=8,0 Гц, 1Н), 7.14 (dd, J₁=2,0 Гц, J₂=9,6 Гц, 1Н), 7.00 (d, J=8,8 Гц, 1H), 6.61 (d, J=2,0 Гц, 1H), 5.15-5.05 (m, 1H), 3.29-3.23 (m, 1H), 2.95 (d, J=12,0 Гц, 1H), 2.68-2.58 (m, 1H), 2.49-2.40 (m, 2Н), 2.40 (s, 3Н), 2.33 (s, 3Н), 2.10-2.02 (m, 1Н).

Пример 10

N⁴-(4-([1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридин-7-илокси)-3-метилфенил)-5-((3,3-дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)окси)хиназолин-4,7-диамин

Методика получения соединения 10b:

К смеси соединения 10а (20 г) в автоклаве добавляли NH₃/EtOH (200 мл). Смесь перемешивали при 100°С в течение ночи. Смесь концентрировали в вакууме и осадок растворяли в этилацетате (200 мл) и промывали водой (100 мл). Органический слой концентрировали с получением серого твердого вещества, которое промывали петролейным эфиром (3*100 мл) и сушили с получением соединения 10b (19,5 г, выход 98%). ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 6.72 (t, J=1,2 Гц, 1H), 6.67 (dd, J₁=8,8 Гц, J₂=1,2 Гц, 1H), 4.63 (s, 2Н).

Методика получения соединения 10с:

Раствор соединения 10b (10,0 г) и DMF-DMA (11,0 г, 2,0 экв.) в толуоле перемешивали при 120°С в течение 2 ч. Смесь концентрировали в вакууме с получением соединения 10с (15,2 г, неочищенного) в виде серого твердого вещества, которое использовали непосредственно на следующей стадии. ЖХ-МС: R_t=0,718 мин при 5-95АВ_1,5 мин хроматографии (Welch Xtimate С18, 2,1*30 мм, 3 мкм), МС (ЭРИ) m/z=271,2 [М+Н]⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7.63 (s, 1H), 6.93-6.91 (m, 2Н), 3.11 (d, J=2,0 Гц, 6Н).

Методика получения соединения 10d:

Смесь соединения 10 с (15,2 г) и соединения 1f (11,1 г, 1,0 экв.) в уксусной кислоте (150 мл) перемешивали при 120°С в течение 2 ч. Четкий желаемый пик МС (466,9) был обнаружен согласно ЖХ-МС. Смесь охлаждали и затем вливали в воду (100 мл). Смесь фильтровали, концентрировали и очищали посредством хроматографии (DCM:MeOH 20:1 (об/об)) с получением соединения 10d (8,0 г, 38%) в виде коричневого твердого вещества. ЖХ-МС: R_t=0,787 мин при 5-95АВ_1,5 мин хроматографии (Welch Xtimate С18, 2,1*30 мм, 3 мкм), МС (ЭРИ) m/z=466,9 [М+Н]⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 9.28 (d, J=11,6 Гц, 1Н), 8.93 (d, J=7,6 Гц, 1H), 8.59 (s, 1Н), 8.38 (s, 1H), 7.85-7.67 (m, 4H), 7.21 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7.02 (dd, J₁=7,6 Гц, J₂=2,8 Гц, 1H), 6.78 (d, J=2,8 Гц, 1H), 2.18 (s, 3H).

Методика получения соединения 10е:

Смесь соединения 10d (4,6 г), соединения 1i (1,5 г, 1,0 экв.) и t-BuOK (2,2 г, 2,0 экв.) в THF (50 мл) и DMF (20 мл) перемешивали при 70°С в течение ночи. Смесь вливали в воду (50 мл) и затем фильтровали. Твердое вещество сушили с получением соединения 10е (4,74 г, выход 80%) в виде серого твердого вещества. ЖХ-МС: R_t=0,737 мин при 5-95АВ_1,5 мин хроматографии (Welch Xtimate С18, 2,1*30 мм, 3 мкм), МС (ЭРИ) m/z=597,9 [М+Н]⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 9.95 (s, 1H), 8.92 (d, J=7,6 Гц, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 7.83 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7.73 (dd, J₁=8,8 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7.64 (s, 2Н), 7.25 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7.02 (dd, J₁=7,6 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 6.82 (d, J=2,4 Гц, 1Н), 5.43-5.35 (m, 1H), 3.27-3.23 (m, 2Н), 2.86-2.82 (m, 1Н), 2.38-2.32 (m, 2Н), 2.29 (s, 3Н), 2.19 (s, 3Н), 1.97-1.89 (m, 1Н).

Методика получения соединения 10f:

Смесь соединения 10е (200 мг), Pd(OAc)₂ (8 мг, 0,1 экв.), dppf (18 мг, 0,1 экв.) и Et₃N (67 мг, 2,0 экв.) в метаноле (10 мл) перемешивали при 70°С в атмосфере монооксида углерода (45 фунт/кв. дюйм) в течение ночи. Смесь затем фильтровали и фильтрат концентрировали с получением соединения 10f (223 мг неочищенного) в виде коричневого масла. ЖХ-МС: R_t=0,730 мин при 5-95АВ_1,5 мин хроматографии (Welch Xtimate C18, 2,1*30 мм, 3 мкм), МС (ЭРИ) m/z=576,1 [М+Н]⁺.

Методика получения соединения 10g:

Раствор соединения 10f (223 мг) и LiOH-H₂O (70 мг, 5,0 экв.) в THF/H₂O (5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали и остаток подкисляли 1 н. раствором HCl. Осадок собирали и сушили с получением соединения 10g (140 мг, неочищенного) в виде серого твердого вещества. ЖХ-МС: R_t=0,643 мин при 5-95АВ_1,5 мин хроматографии (Welch Xtimate С18, 2,1*30 мм, 3 мкм), МС (ЭРИ) m/z=562,1 [М+Н]⁺.

Методика получения Соединения 10:

Раствор соединения 10g (70 мг), DPPA (42 мг, 1,2 экв.) и Et₃N (25 мг, 2,0 экв.) в t-BuOH (3 мл) перемешивали при 80°С в течение ночи. Смесь концентрировали в вакууме и остаток обрабатывали смесью HCl/диоксан (4 М, 1 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин. Смесь концентрировали и остаток очищали посредством преп. ВЭЖХ (колонка: Sunfire С8 30*100 мм*5 мкм, градиент: 15-25% В (А - вода/0,05% HCl, В - ацетонитрил), скорость потока: 30 мл/мин) с последующим СФХ-разделением с получением энантиомера Соединения 10 (7,9 мг, выход 10%). ЖХ-МС: R_t=1,427 мин при 10-80АВ_4 мин хроматографии (Welch Xtimate C18, 2,1*30 мм, 3 мкм), МС (ЭРИ) m/z=533,0 [М+Н]⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 9.06 (d, J=7,6 Гц, 1H), 9.00 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 7.79-7.74 (m, 2Н), 7.42 (d, J=6,8 Гц, 1H), 7.30 (d, J=8,8 Гц, 1H), 6.97 (s, 1Н), 6.49 (d, J=1,2 Гц, 1H), 5.65-5.58 (m, 1H), 4.27 (m, 2Н), 4.06-3.94 (m,1Н), 3.80-3.65 (m, 2Н), 3.09 (s, 3Н), 2.88-2.86 (m, 2Н), 2.44-2.41 (m, 2Н), 2.27 (s, 3Н).

Пример 11

5-(((3S,4R)-3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)окси)-N-(4-(имидазо[1,2-а]пиридин-7-илокси)-3-метилфенил)хиназолин-4-амин

Методика получения соединения 11b:

DMF-DMA (3,93 мл, 29,38 ммоль, 2,0 экв.) добавляли к раствору соединения 11а (2 г, 14,69 ммоль) в толуоле (20 мл). Полученную суспензию перемешивали при 120°С в течение 1,5 часов. ЖХ-МС анализ показал, что реакция полностью завершена. Раствор концентрировали с получением соединения 11b (3,0 г, неочищенного, 93%-ная чистота) в виде желтого твердого вещества. ЖХ-МС: R_t=0,135 мин при 5-95АВ_220&254 хроматографии, МС (ЭРИ) m/z=191,9 [М+Н]⁺.

Методика получения соединения 11с:

К раствору соединения 11b (1,5 г, 93%-ная чистота, 7,30 ммоль, 1,0 экв.) в уксусной кислоте (30 мл) добавляли соединение 8е (2,62 г, 10,94 ммоль, 1,5 экв.), реакционную смесь нагревали до 120°С в течение 2 часов. ЖХ-МС показала, что реакция полностью завершена. Уксусную кислоту удаляли в вакууме и неочищенный продукт растворяли в ацетонитриле (20 мл) и разбавляли водой (50 мл). Раствор подщелачивали раствором карбоната натрия до рН 8. Осадок отфильтровывали и осадок на фильтре промывали этилацетатом, сушили над сульфатом натрия и концентрировали с получением соединения 11с (1,5 г, неочищенного). ЖХ-МС: R_t=0,609 мин при 5-95АВ_1,5 мин хроматографии, МС (ЭРИ) m/z=386,1 [М+Н]⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 2.20 (3Н, s), 6.55 (1H, d, J=2,4 Гц), 6.82 (1H, dd, J₁=7,2 Гц, J₂=2,4 Гц), 7.15 (1Н, d, J=8,4 Гц), 7.40-7.48 (2Н, m), 7.61-7.74 (3Н, m), 7.81-7.89 (2Н, m), 8.56 (1H, d, J=7,6 Гц), 8.58 (1H, s), 9.20 (1Н, br.s)

Методика получения цис-изомера Соединения 11:

К раствору соединения 11 с (300 мг, 1,0 экв.) и соединения цис-11d (207 мг, 2,0 экв.) в THF/DMF (20 мл, об/об 1:1) добавляли t-BuOK (306 мг, 3,5 экв.). Смесь перемешивали при 100°С в течение 72 часов. Затем эту реакционную смесь концентрировали и остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле с использованием DCM/MeOH (10:1) с получением неочищенного вещества, которое дополнительно очищали посредством преп. ВЭЖХ с последующим СФХ-разделением с получением энантиомерно чистого цис-изомера Соединения 11 в виде белого твердого вещества (35 мг, выход 9%). ЖХ-МС: R_t=1,560 мин при 0-60АВ_4 мин хроматографии (Xtimate С18, 2,1*30 мм, 3 мкм SN: 3U411201579), МС (ЭРИ) m/z=499,0 [М+Н]⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, D₂O) δ 8.65 (s, 1Н), 8.63 (d, J=7,6 Гц, 1H), 8.05 (t, J=8,4 Гц, 1H), 7.93 (d, J=2,0 Гц, 1H), 7.73 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7.70 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7.63-7.59 (m, 1H), 7.52 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7.49 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7.34 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7.30 (dd, J=7,6 Гц, 2,4 Гц, 1H), 7.05 (d, J=2,8 Гц, 1H), 5.65-5.53 (m, 1H), 5.44-5.30 (m, 1H), 4.11-4.04 (m, 1H), 3.78-3.74 (m, 1H), 3.71-7.57 (m, 1H), 3.45-3.38 (m, 1H), 3.01 (s, 3H), 2.67-2.64 (m, 1H), 2.49-2.37 (m, 1H), 2.24 (s, 3H).

Пример 12

(S)-N-(4-([1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридин-7-илокси)-3-метилфенил)-5-((1-этил-3,3-дифторпиперидин-4-ил)окси)хиназолин-4-амин

и

(R)-N-(4-([1,2,4]триазоло[1,5-a]пиридин-7-илокси)-3-метилфенил)-5-((1-этил-3,3-дифторпиперидин-4-ил)окси)хиназолин-4-амин

Методика получения соединения 12а:

К раствору соединения 1i1 (0,2 г, 1,46 ммоль) в МеОН (8 мл) добавляли пианоборгидрид натрия (0,092 г, 1,46 ммоль) и ацетальдегид (0,099 мл, 1,75 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 12-23°С в течение 16 часов. Реакционную смесь затем вливали в воду (15 мл), экстрагировали смесью хлороформ/изопропанол (об/об 3/1, 10 мл × 3). Объединенные органические слои сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения 12а (0,22 г) в виде желтого масла. Этот продукт использовали непосредственно на следующей стадии без дополнительной очистки. ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 1.09 (3Н, t, J=7,2 Гц), 1.75-2.04 (4Н, m), 2.75-2.85 (1H, m), 2.45-2.05 (2Н, m), 2.53-2.67 (2.5Н, m), 2.75-2.92 (2Н, m), 3.69-3.85 (2Н, m), 4.02-4.05 (1H, m).

Методика получения соединения 12b:

К раствору соединения 1h (300 мг, 0,776 ммоль) в DMF (10 мл) и THF (4 мл) добавляли трет-бутоксид калия (305 мг, 2,72 ммоль) и соединение 12а (154 мг, 0,931 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 100°С в течение 16 часов. Реакционную смесь затем вливали в воду (30 мл) и экстрагировали этилацетатом (20 мл × 3). Объединенные органические слои промывали рассолом (80 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали с получением остатка, который очищали посредством преп. ВЭЖХ (колонка: YMC-Actus Triart С18 150*30 5 мкм, градиент: 5-35% В (А - вода/0,05% HCl, В - ацетонитрил), скорость потока: 25 мл/мин) и лиофилизировали с получением соединения 12b (ПО мг, неочищенного) в виде желтого твердого вещества. ЖХ-МС: R_t=1,972 мин при 4,0 мин хроматографии, МС (ЭРИ) m/z=532,3 [М+Н]⁺.

Методика получения соединения 12/12': энантиомер-1/-2

Соединение 12b (110 мг) разделяли посредством препаративной хиральной ВЭЖХ на колонке AD (250 мм*30 мм, 5 мкм), подвижная фаза: A: CO₂, В: этанол (0,05% DEA), условия: Base-ETOH, начало В 40% и конец В 40%, Скорость потока (мл/мин) 50. Фракции, содержащие целевое соединение, упаривали до сухого состояния с получением энантиоизомера 1 и энантиоизомера 2, затем снова очищали посредством преп. ВЭЖХ (DuraShell 150*25 мм*5 мкм, 35%-65%В (А - вода/10 мМ NH₄Ac, В - MeCN). Большую часть MeCN удаляли при пониженном давлении, оставшийся растворитель удаляли посредством лиофилизации с получением Соединения 12' (24,6 мг, выход: 5,96%) в виде белого твердого вещества и Соединения 12 (27,6 мг, выход: 6,69%) в виде белого твердого вещества.

Соединение 12' (энантиомер-2): ЖХ-МС: R_t=1,903 мин при 4,0 мин хроматографии, МС (ЭРИ) m/z 532,3 [М+Н]⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 1.14 (3Н, t, J=7,2 Гц), 2.07-2.09 (1H, m), 2.25 (3Н, s), 2.44-2.65 (5Н, m), 3.04 (1H, d, J=12,4 Гц), 3.34-3.39 (1H, m), 5.07-5.16 (1H, m), 6.81 (1Н, d, J=2,4 Гц), 7.06 (1Н, dd, J=7,6, 2,4 Гц), 7.18 (1Н, d, J=8,8 Гц), 7.31 (1Н, d, J=8,0 Гц), 7.45 (1H, d, J=8,0 Гц), 7.76-7.88 (3Н, m), 8.28 (1H, s), 8.54 (1H, s),8.73 (1H, d, J=8,0 Гц).

Соединение 12 (энантиомер-1): ЖХ-МС: R_t=1,905 мин при 4,0 мин хроматографии, МС (ЭРИ) m/z 532,2 [М+Н]⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 1.14 (3Н, t, J=7,2 Гц), 2.04-2.07 (1H, m), 2.25 (3Н, s), 2.40-2.65 (5Н, m), 3.04 (1H, d, J=12,4 Гц), 3.34-3.39 (1H, m), 5.07-5.16 (1H, m), 6.81 (1H, d, J=2,4 Гц), 7.06 (1H, dd, J=10.0, 2,4 Гц), 7.18 (1H, d, J=8,8 Гц), 7.31 (1H, d, J=8,0 Гц), 7.45 (1H, d, J=7,6 Гц), 7.76-7.88 (3Н, m), 8.28 (1H, s), 8.54 (1H, s), 8.73 (1H, d, J=7,6 Гц).

Пример 13

N-(4-(имидазо[1,2-а]пиридин-7-илокси)-3-метилфенил)-5-(хинуклидин-4-илокси)хиназолин-4-амин

Методика получения соединения 13с:

NaH (87 мг, 60 масс. %, 2,17 ммоль) добавляли порциями к соединению 13b (230 мг, 1,81 ммоль) и соединению 13а (300 мг, 1,81 ммоль) в THF (5 мл) при 0°С в течение периода времени 5 минут в атмосфере азота. Полученную смесь перемешивали при 17-27°С в течение 3 часов. Реакционную смесь затем вливали в насыщенный NH₄Cl (75 мл), экстрагировали EtOAc (50 мл × 2), органические слои сушили над Na₂SO₄, фильтровали и упаривали с получением неочищенного продукта, который очищали посредством флэш-хроматографии на диоксиде кремния (РЕ:ЕА 3:1 до 100% метанола). Очищенные фракции упаривали до сухого состояния с получением соединения 13b (320 мг, неочищенного) в виде желтого твердого вещества. ЖХ-МС: R_t=0,579 мин при 1,5 мин хроматографии, МС (ЭРИ) m/z=274,0 [М+Н]⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 1.95-2.01 (6Н, m), 3.08-3.12 (6Н, m), 7.49 (1H, d, J=8,4 Гц), 7.67 (1H, t, J=8,4 Гц), 7.99 (1H, d, J=8,4 Гц).

Методика получения соединения 13d:

Соединение 13 с (320 мг, 1,17 ммоль) и Pd-C (120 мг, 10 масс. %, 0,11 ммоль) в метаноле (30 мл) перемешивали в атмосфере баллонного водорода при 17-24°С в течение 1 часа. Реакционную смесь затем отфильтровывали и фильтрат упаривали до сухого состояния с получением соединения 13d (280 мг, выход 98%) в виде бледно-желтого масла, которое отвердевало при стоянии. ЖХ-МС: R_t=0,279 мин при 1,5 мин хроматографии, МС (ЭРИ) m/z=244,2 [М+Н]⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 1.90-1.94 (6Н, m), 3.02-3.06 (6Н, m), 4.42 (2Н, br.s.), 6.39 (1Н, d, J=8,0 Гц), 6.43 (1H, d, J=8,4 Гц), 7.18 (1H, t, J=8,0 Гц).

Методика получения соединения 13е:

1,1-Диметокси-N,N-диметилметанамин (0,339 мл, 2,53 ммоль) добавляли к соединению 13d (280 мг, 1,15 ммоль) в толуоле (10 мл) при 20°С. Полученную смесь перемешивали при 110°С в течение 90 минут. Реакционную смесь концентрировали с получением неочищенного продукта, который использовали непосредственно на следующей стадии без дополнительной очистки. ЖХ-МС: R_t=0,128 мин при 1,5 мин хроматографии, МС (ЭРИ) m/z=299,1 [М+Н]⁺.

Методика получения Соединения 13:

Соединение 8е (164 мг, 0,68 ммоль) добавляли к соединению 13е (170 мг, 0,57 ммоль) в АсОН (5 мл) при 20°С.Полученную смесь перемешивали при 120°С в течение 90 минут. Реакционную смесь затем концентрировали с получением неочищенного продукта, который очищали посредством препаративной ВЭЖХ (колонка: Waters Xbridge Prep OBD C18 150*30 5 мкм, 25-55% В (A - вода/0,05% аммиак, В - ацетонитрил), скорость потока: 25 мл/мин). Фракции, содержащие целевое соединение, сушили посредством лиофилизации с получением Соединения 13 (95,3 мг, выход 33,9%) в виде белого твердого вещества. ЖХ-МС: t_R=0,578 мин при 1,5 мин хроматографии, МС (ЭРИ) m/z=493,2 [М+Н]⁺. ЖХ-МС: t_R=2,740 мин при 4,0 мин хроматографии, МС (ЭРИ) m/z=493,2 [М+Н]⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 2.01-2.05 (6Н, m), 2.26 (3Н, s), 3.07-3.11 (6Н, m), 6.72-6.76 (2Н, m), 7.08 (1Н, d, J=8,4 Гц), 7.16 (1H, d, J=7,2 Гц), 7.49 (1H, d, J=10,4 Гц), 7.58-7.65 (3Н, m), 7.80 (1H, d, J=2,0 Гц), 8.05 (1H, d, J=7,2 Гц), 8.66 (1H, s), 10.22 (1H, s).

Пример 14

(S)-N-(4-([1,2,4]триазоло[1,5-a]пиридин-7-илокси)-2-фтор-5-метилфенил)-5-((3,3-дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)окси)-7-метоксихиназолин-4-амин

и

(R)-N-(4-([1,2,4]триазоло[1,5-a]пиридин-7-илокси)-2-фтор-5-метилфенил)-5-((3,3-дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)окси)-7-метоксихиназолин-4-амин

К раствору бензилового спирта (10 г, 76 ммоль) в диоксане (150 мл) добавляли NaH (3,3 г, 1,1 экв.) и этот раствор перемешивали при 60°С в течение 2,0 ч. Затем к реакционной смеси добавляли соединение 14а (8,2 г, 76 ммоль) и перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 3,0 часов. Затем реакционный раствор гасили с помощью NH₄Cl, экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои концентрировали и остаток перекристаллизовывали из смеси PE/EtOAc 10/1 (20 мл) с получением продукта (14 г, выход 84,1%) в виде белого твердого вещества. ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 8.20 (d, J=6,0 Гц, 1Н), 7.44-7.37 (m, 5Н), 6.92 (d, J=2,0 Гц, 1H), 6.82 (dd, J=5,6 Гц, 2,4 Гц, 1H), 5.11 (s, 2Н).

Методика получения соединения 14с:

К смеси соединения 14b (12 г, 5,01 ммоль), Pd₂(dba)₃ (550 мг, 0,5 ммоль) и Xphos (525 мг, 1,1 ммоль) в THF (120 мл) добавляли LiHMDS (66,0 мл, 66 ммоль). После нагревания до 65°С в течение 60 мин смесь охлаждали до комнатной температуры. Затем реакционную смесь гасили водным HCl (2,0 мл, 1,0 моль/л) и экстрагировали этилацетатом. Водный раствор доводили до рН>8 водным NaHCO₃, экстрагировали EtOAc (200 мл × 2). Объединенный органический слой концентрировали с получением соединения 14с (10,5 г, выход 88%) в виде белого твердого вещества. ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7.91 (d, J=6,0 Гц, 1Н), 7.41-7.33 (m, 5H), 6.34 (dd, J=6,0 Гц, 2,0 Гц, 1H), 6.05 (d, J=2,4 Гц, 1H), 5.05 (s, 2H), 4.38 (s, 2H).

Методика получения соединения 14d:

К смеси соединения 14 с (10,5 г, 52,5 ммоль) в t-BuOH (50 мл) добавляли Вос₂О (12,6 г, 1,1 экв.), затем раствор перемешивали при 50°С в течение 2,0 ч. По окончании к этому реакционному раствору добавляли EtOH (300 мл). Смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали и концентрировали с получением продукта (16 г, выход 95,2%). ЖХ-МС R_t=0,946 мин при 10-80АВ_2,0 мин хроматографии (Welch Xtimate С18 2,1*30 мм), МС (ЭРИ) m/z=300,9 [М+Н]⁺.

Методика получения соединения 14е:

В раствор соединения 14d (15 г, 50 ммоль) в МеОН (300 мл) добавляли Pd/C (3,0 г). Этот раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 3,0 ч. Реакционный раствор затем фильтровали и фильтрат концентрировали с получением соединения 14е (8,5 г, выход 80,9%) в виде белого твердого вещества без дополнительной очистки.

Методика получения соединения 14f:

В раствор соединения 14е (5,0 г, 28,9 ммоль) и 1,5-дифтор-2-метил-4-нитробензола (6,06 г, 28,9 ммоль) в DMF (100 мл) добавляли K₂CO₃ (5,9 г, 43,4 ммоль) и этот раствор перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали и остаток очищали на колонке с силикагелем (РЕ/EtOAc 1/2) с получением соединения 14f (6,5 г, выход 61,9%) в виде желтого твердого вещества. ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 8.24 (d, J=5,6 Гц, 1Н), 8.06 (d, J=8,0 Гц, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 6.79-6.82 (d, J=11,6 Гц, 1H), 6.57 (m, 1H), 2.30 (s, 3H), 1.50 (s, 9H).

Методика получения соединения 14g:

Раствор соединения 14f (6,5 г, 17,9 ммоль) в DCM (40 мл) добавляли TFA (15 мл) и этот раствор перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 3,0 ч. ТСХ показала израсходование исходного материала. ЖХ-МС показала обнаружение продукта. Смесь концентрировали и остаток промывали водн. NaHCO₃, экстрагировали DCM. Объединенный органический слой концентрировали с получением соединения 14g (4,5 г, 95%) в виде желтого масла, которое использовали непосредственно на следующей стадии.

Методика получения соединения 14h:

Раствор соединения 14g (4,5 г, 13,8 ммоль) в DMF-DMA (20,0 мл) перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 3,0 ч. Смесь концентрировали с получением соединения 14h (6,2 г, неочищенного) в виде желтого масла, которое использовали непосредственно на следующей стадии. ЖХ-МС: R_t=2,579 мин при 0-60АВ_4 мин хроматографии (Welch Xtimate С18 2,1*30 мм), МС (ЭРИ) m/z=319,0 [М+Н]⁺.

Методика получения соединения 14i:

В раствор соединения 14h (6,3 г, 13,8 ммоль) в i-PrOH (50,0 мл) добавляли NH₂OH.HCl (1,3 г, 13,8 ммоль) и этот раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 4,0 ч. Смесь фильтровали с получением соединения 14i (5,5 г, неочищенного) в виде желтого твердого вещества, которое использовали непосредственно на следующей стадии. ЖХ-МС: R_t=0,767 мин при 5-95АВ_1,5 мин хроматографии (Welch Xtimate C18 2,1*30 мм), МС (ЭРИ) m/z=307,0 [М+Н]⁺.

Методика получения соединения 14j:

В раствор соединения 14i (5,0 г, 13,0 ммоль) в THF (50,0 мл) добавляли TFAA (4,5 г, 16,9 ммоль) и этот раствор перемешивали при 50°С в течение ночи. Смесь доводили до рН>8 с помощью NaHCO₃, экстрагировали этилацетатом. Объединенный органический слой концентрировали и остаток очищали на колонке с силикагелем с получением соединения 14j (2,1 г неочищенного) в виде желтого твердого вещества.

Методика получения соединения 14k:

В раствор соединения 14j (3,0 г, 10,4 ммоль) в EtOH (100 мл) и Н₂О (50 мл) добавляли Fe (2,9 г, 52 ммоль) и NH₄Cl (3,2 г, 63 ммоль) и этот раствор перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 3,0 ч. Реакционный раствор фильтровали и фильтрат концентрировали с получением неочищенного продукта, который очищали посредством преп. ВЭЖХ (колонка: AD (250×30 мм, 5 мкм): 5-25% В (А - 45% МеОН NH₃H₂O вода, В - ацетонитрил), скорость потока: 50 мл/мин, УФ-детектор 220 нм) с получением соединения 14k (700 мг, выход 19,7%) в виде белого твердого вещества. ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 8.47 (d, J=7,6 Гц, 1H), 8.21 (s, 1H), 6.85-6.83 (m, 1H), 6.79-6.71 (m, 3Н), 3.71 (s, 2Н), 2.06 (s, 3Н).

Методика получения соединения 14l:

Раствор соединения 14k (400 мг, 1,55 ммоль) в i-PrOH (5,0 мл) добавляли триэтоксиметан (690 мг, 4,65 ммоль). Раствор перемешивали при 100°С в течение 1,0 ч и затем к этому реакционному раствору добавляли 2-амино-6-фтор-4-метокси-бензонитрил (260 мг, 1,55 ммоль) и TFA (0,2 мл) и этот раствор перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 2,0 ч. Реакционный раствор концентрировали и остаток промывали смесью РЕ/EtOAc (об/об 10/1, 3,0 мл) с получением соединения 141 (400 мг, неочищенного) в виде желтого твердого вещества, которое использовали непосредственно на следующей стадии. ЖХ-МС: R_t=0,753 мин при 5-95 АВ_1,5 мин хроматографии (Welch Xtimate С18 2,1*30 мм), МС (ЭРИ) m/z=434,9 [М+Н]⁺.

Методика получения соединения 14m:

К раствору соединения 14l (400 мг, 0,2 ммоль) в DMF (5,0 мл) добавляли t-BuONa (260 мг, 2,76 ммоль) и соединение 1i (280 мг, 1,84 ммоль) и этот раствор перемешивали при 120°С в течение 2,0 ч. Реакционный раствор фильтровали и фильтрат концентрировали. Остаток очищали посредством преп. ВЭЖХ (колонка: YMC-Triat, 10-30% В (A - TFA вода, В - ацетонитрил), скорость потока: 30 мл/мин, УФ-детектор 220 нм) с получением 14m (202 мг, выход 38,7%) в виде белого твердого вещества. ЖХ-МС: R_t=1,004 мин при 0-60АВ_2,0 мин хроматографии (Welch MK RP-18e, 25-2 мм SN: MKM8505/155), МС (ЭРИ) m/z=566,1 [М+Н]⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, МеОН-d₄) δ 9.15 (d, J=10,0 Гц, 1Н), 9.13 (s, 1H), 8.83 (s, 1H), 8.27 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7.51 (dd, J=7,6 Гц, 2,8 Гц, 1H), 7.40-7.33 (m, 3Н), 7.03 (s, 1H), 5.78 (m, 1H), 4.27 (m, 1H), 4.11 (s, 3Н), 4.02-3.91 (m, 1H), 3.83-3.80 (m, 1H), 3.63-3.57 (m, 1H), 3.11 (s, 3Н), 2.83 (m, 1H), 2.52 (m, 1H), 2.30 (s, 3Н).

Методика получения Соединения 14:

Соединение 14m (150 мг, 0,265 ммоль) разделяли посредством СФХ с получением продукта Соединения 14' (55 мг, выход 36,7%) в виде белого твердого вещества и Соединения 14 (54 мг, выход 36%) в виде белого твердого вещества.

Соединение 14' (энантиомер-2):

ЖХ-МС R_t=0,672 мин при 5-95АВ_1,5 мин хроматографии (Welch MK RP-18e, 25-2 мм SN: MKM8505/155), МС (ЭРИ) m/z=566,2 [М+Н]⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, МеОН-d₄) δ 8.78 (d, J=7,2 Гц, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 8.27 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7.15 (d, J=11,2 Гц, 1H), 7.10 (dd, J=7,6 Гц, 2,0 Гц, 1H), 6.99 (s, 1H), 6.94 (s, 1H), 6.90 (s, 1H), 5.21-5.13 (m, 1H), 3.99 (s, 3Н), 3.22-3.17 (m, 1H), 2.96-2.93 (m, 1H), 2.72-2.62 (m, 1H), 2.52-2.46 (m, 2Н), 2.41 (s, 3Н), 2.24 (s, 3Н), 2.17-2.13 (m, 1Н).

Соединение 14 (энантиомер-1):

ЖХ-МС: R_t=0,675 мин при 5-95АВ_1,5 мин хроматографии (Welch MK RP-18e, 25-2 мм SN:MKM8505/155), МС (ЭРИ) m/z=566,2 [М+Н]⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, МеОН-d₄) δ 8.78 (d,J=7,2 Гц, 1H), 8.47 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 8.27 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7.15 (d,J=10,4 Гц, 1H), 7.10 (dd, J=7,6 Гц, 2,0 Гц, 1Н), 6.97 (s, 1H), 6.94 (d, J=2,8 Гц, 1Н), 6.90 (d, J=2,0 Гц, 1H), 5.17-5.09 (m, 1H), 3.99 (s, 3Н), 3.20-3.15 (m, 1H), 2.94-2.91 (m, 1H), 2.69-2.59 (m, 1H), 2.49-2.43 (m, 2Н), 2.40 (s, 3Н), 2.25 (s, 3Н), 2.17-2.13 (m, 1Н).

Пример 15

(±)-(5-(((2S,4S)-2-(дифторметил)пиперидин-4-ил)окси)-N-(4-(имидазо[1,2-a]пиридин-7-илокси)-3-метилфенил)хиназолин-4-амин

и

(±)-(5-(((2R,4S)-2-(дифторметил)пиперидин-4-ил)окси)-N-(4-(имидазо[1,2-а]пиридин-7-илокси)-3-метилфенил) хиназолин-4-амин

Методика получения соединения 15b:

К раствору соединения 15а (0,271 г, 1,44 ммоль) в THF (10 мл) добавляли NaH (0,241 г, 6,02 ммоль, 60% в минеральном масле). Полученную смесь перемешивали при 20-27°С в течение 0,5 часа. Затем к вышеуказанной смеси добавляли 2-фтор-6-нитробензонитрил (0,2 г, 1,20 ммоль). Полученную смесь перемешивали при приблизительно 20-27°С в течение 20 часов. Реакционную смесь затем вливали в воду (40 мл), экстрагировали EtOAc (20 мл × 2). Объединенные органические слои промывали рассолом (40 мл), сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством флэш-хроматографии с получением продукта 15b (0,28 г, выход 78,2%) в виде желтого масла. ЖХ-МС: R_t=0,389 мин при 1,5 мин хроматографии, МС (ЭРИ) m/z=298,0 [М+Н]⁺. Продукт представляет собой смесь цис- и транс-изомера.

Методика получения соединения 15с:

К раствору соединения 15b (0,28 г, 0,94 ммоль) в МеОН (10 мл) добавляли Pd-C (0,1 г, 50% H₂O и 10% Pd). Полученную смесь перемешивали в атмосфере баллонного H₂ при 20-25°С в течение 1 часа. Затем реакционную смесь фильтровали, промывали МеОН (10 мл × 3). Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта 15 с (0,2 г) в виде бесцветного масла, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 1.97-2.13 (0.3Н, m), 2.13-2.24 (1H, m), 2.25-2.28 (1H, m), 2.97-2.98 (1Н, m), 3.24-3.30 (1H, m), 4.34-4.48 (2Н, m), 5.70 (td, J₁=56,4 Гц, J₂=4,8 Гц), 6.24 (0.6Н, t, J=8,0 Гц), 6.32 (1H, d, J=8,0 Гц), 6.79 (0.7Н, t, J=8,8 Гц), 7.18-7.23 (0.6Н, m), 7.47-7.51 (0.3Н, m).

Методика получения соединения 15d:

К раствору соединения 15с (0,05 г, 0,19 ммоль) в толуоле (5 мл) добавляли DMF-DMA (0,075 мл, 0,56 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 110°С в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения 15d (0,06 г) в виде желтого масла, которое использовали непосредственно на следующей стадии без дополнительной очистки. ЖХ-МС: R_t=0,123 мин при 1,5 мин хроматографии, МС (ЭРИ) m/z=323,1 [М+Н]⁺.

Методика получения Соединения 15:

К раствору соединения 15d (0,054 г, 0,17 ммоль) в АсОН (5 мл) добавляли соединение 8е (0,04 г, 0,17 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 110°С в течение 2 часов. ЖХ-МС показала, что реакция полностью завершена. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении с получением остатка. Этот остаток очищали посредством преп. ВЭЖХ (Waters Xbridge Prep OBD C18 150*30 5 мкм, 33%-63% В, A - вода/0,05% гидроксид аммония, В - MeCN). Большую часть MeCN удаляли при пониженном давлении, оставшийся растворитель удаляли посредством лиофилизации с получением изомера-1 Соединения 15 (2,5 мг, выход: 2,9%) в виде белого твердого вещества и изомера-2 Соединения 15' (1,4 мг, выход: 1,6%) в виде желтого твердого вещества.

Соединение 15 (±) изомер-1: ЖХ-МС: R_t=1,654 мин при 4,0 мин хроматографии, МС (ЭРИ) m/z=517,1 [М+Н]⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 1.91-1.99 (2Н, m), 2.22-2.25 (4Н, m), 2.35 (1Н, d, J=12,4 Гц), 3.01-3.05 (2H, m), 3.35 (1H, m), 5.28 (1H, s), 5.78 (1H, t, d, J=56,0, 4,4 Гц), 6.62 (1H, d, J=2,4 Гц), 6.82 (1H, d, J=7,6 Гц), 7.14 (1H, d, J=8,4 Гц), 7.20 (1H, d, J=8,0 Гц), 7.39 (1H, d, J=8,0 Гц),7.43 (1H, s), 7.70-7.79 (4H, m), 8.41 (1H, d, J=7,6 Гц), 8.48 (1H, s).

Соединение 15' (±) изомер-2: ЖХ-МС: R_t=1,691 мин при 4,0 мин хроматографии, МС (ЭРИ) m/z 517,1 [М+Н]⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 2.19-2.39 (5Н, m), 2.72 (1H, d, J=12,4 Гц), 2.37 (1H, t, d, J=14,4 Гц), 3.48 (1H, t, J=13,2 Гц), 3.74 (1H, d, J=12,0 Гц), 4.09-4.14 (1Н, m), 5.36 (1Н, s), 6.33 (1H, t, J=53,6 Гц), 7.04 (1H, d, J=1,6 Гц), 7.35 (2H, d, J=8,4 Гц), 7.50 (1H, d, J=8,0 Гц), 7.71 (1H, d, J=8,4 Гц), 7.83-7.91 (3Н, m), 8.09-8.12 (2H, m), 8.80-8.82 (2H, m).

Пример 16

N-(4-([1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридин-7-илокси)-3-метилфенил)-5-((3,3-дифторпиперидин-4-ил)окси)-7-метоксихиназолин-4-амин

Методика получения соединения 16b:

К раствору соединения 16а (10 г, 72,92 ммоль) в CH₂Cl₂ (200 мл) добавляли Вос₂О (15,92 г, 72,92 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 10°С в течение 12 ч. Смесь концентрировали в вакууме и остаток распределяли между этилацетатом (200 мл) и водой (100 мл). Водный слой экстрагировали EOAc (50 мл × 3). Объединенные органические слои сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на диоксиде кремния (20% EOAc: 80% петролейный эфир, колонка с силикагелем 120 г) с получением соединения 16b (13 г, выход 75,1%) в виде белого твердого вещества. ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 4.03-3.90 (m, 1H), 3.84-3.62 (m, 2Н), 3.61-3.40 (m, 2Н), 2.13 (br. s., 1H), 1.95 (br. s., 1H), 1.86-1.74 (m, 1H), 1.46 (s, 9Н).

Методика получения соединения 16с:

К раствору соединения 16b (569,74 мг, 0,24 ммоль) в THF/DMF (20 мл/8 мл) добавляли t-BuOK (404,21 мг, 0,36 ммоль). Смесь перемешивали при 20°С в течение 20 минут. Затем добавляли соединение 6е (500 мг, 0,12 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 90°С в течение 5 ч и затем концентрировали под вакуумом. По окончании остаток распределяли между этилацетатом (100 мл) и водой (500 мл). Водный слой экстрагировали EtOAc (50 мл × 3). Объединенные органические слои сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на диоксиде кремния (10% МеОН: 90% DCM, колонка с силикагелем 40 г) с получением неочищенного продукта, который разделяли посредством СФХ с получением энантиоизомера-1 соединения 16 с (300 мг, выход 16,43%). ЖХ-МС: R_t=1,028 мин при 10-80АВ_2,0 мин A: Xtimate, 2,1*30 мм, 3 мкм 3U411201577 B: Xbridge Shield 2,1*50 мм, SN: 01193135614705, МС (ЭРИ) m/z=634,4 [М+Н]⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 9.62 (s, 1H), 8.61 (s, 1H), 8.53-8.46 (m, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.79 (d, J=1,8 Гц, 1H), 7.67 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7.07 (d, J=8,8 Гц, 1H), 6.97-6.84 (m, 3Н), 6.51 (s, 1H), 4.74 (dt, J=5,3, 10,6 Гц, 1H), 4.21 (br. s., 1H), 4.00-3.91 (m, 3Н), 3.72 (q, J=7,1 Гц, 1Н), 3.34 (br. s., 1H), 3.12 (br. s., 1Н), 2.41 (d, J=12,8 Гц, 1Н), 2.27-2.20 (m, 3Н), 2.09 (d, J=5,3 Гц, 1Н), 1.57-1.32 (m, 9Н).

Методика получения Соединения 16:

К раствору соединения 16 с (300 мг, 0,47 ммоль) в EtOAc (10 мл) добавляли HCl/EOAc (3 мл). Смесь перемешивали при 10°С в течение 1 ч. Реакционную смесь концентрировали в вакууме и остаток очищали посредством преп. ВЭЖХ с получением Соединения 16 (217,0 мг, выход 85,9%) в виде белого твердого вещества в форме HCl соли. ЖХ-МС: R_t=0,746 мин при 10-80АВ_2,0 мин_220&254 хроматографии (Xtimate ODS 2,1*30 мм, 3 мкм), МС (ЭРИ) m/z=534,3 [М+Н]⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 9.06 (d, J=7,5 Гц, 1Н), 8.99 (s, 1Н), 8.77 (s, 1H), 7.89-7.76 (m, 2Н), 7.42 (dd, J=2,4, 7,7 Гц, 1Н), 7.34 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7.29 (d, J=1,3 Гц, 1H), 7.16 (d, J=2,6 Гц, 1H), 6.97 (d, J=1,8 Гц, 1H), 5.78-5.63 (m, 1H), 4.16-4.03 (m, 4Н), 3.90-3.75 (m, 1H), 3.66 (d, J=12,8 Гц, 1H), 3.56-3.44 (m, 1H), 2.85 (d, J=14,1 Гц, 1Н), 2.47-2.32 (m, 1H), 2.29 (s, 3Н).

Пример 17

(S)-N-(4-([1,2,4]триазоло[1,5-a]пиридин-7-илокси)-3-метилфенил)-5-((3,3-дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)окси)-7-фторхиназолин-4-амин

и

(R)-N-(4-([1,2,4]триазоло[1,5-a]пиридин-7-илокси)-3-метилфенил)-5-((3,3-дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)окси)-7-фторхиназолин-4-амин

Методика получения соединения 17b:

Раствор соединения 17а (5 г, 31,8 ммоль) в ацетонитриле (128 мл) и аммиаке (64 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 3 суток, отслеживая с помощью ТСХ (R_t=0,7, петролейный эфир : этилацетат 2:1). Смесь разбавляли дихлорметаном, промывали водой. Органические слои сушили и концентрировали с получением неочищенного продукта, который очищали посредством хроматографии на силикагеле, элюировали смесью петролейный эфир : этилацетат от 10:1 до 2:1 (об/об) с получением соединения 17b (1,5 г, выход: 30%). ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 6.28-6.23 (m, 2Н), 4.70 (br, 2Н).

Методика получения соединения 17с:

Раствор соединения 17b (500 мг, 3,24 ммоль) и DMF-DMA (580 мг, 4,86 ммоль) в толуоле (20 мл) перемешивали при 120°С в течение 2 ч, отслеживая с помощью ТСХ (R_f=0,5, петролейный эфир : этилацетат 2:1). Растворитель удаляли в вакууме с получением соединения 17с (690 мг, неочищенного), которое использовали непосредственно на следующей стадии.

Методика получения соединения 17d:

Раствор соединения 17с (690 мг, 3,24 ммоль) и соединения 1f (780 мг, 3,24 ммоль) в уксусной кислоте (15 мл) перемешивали при 120°С в течение 2 ч. Растворитель удаляли в вакууме и остаток разбавляли раствором NaHCO₃ до достижения рН 7-8. Затем эту смесь фильтровали и осадок на фильтре сушили в вакууме с получением соединения 17d (720 мг, выход 55%).

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 9.25 (br, 1H), 8.93 (d, J=7,6 Гц, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 7.70-7.65 (m, 3Н), 7.57 (d, J=9,6 Гц, 1H), 7.20 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7.02 (dd, J₁=2,4 Гц, J₂=7,2 Гц, 1H), 6.78 (d, J=2,8 Гц, 1H), 2.18 (s, 3Н).

Методика получения Соединения 17:

Раствор соединения 17d (720 мг, 1,78 ммоль), соединения 1i (335 мг, 1,78 ммоль) и трет-бутоксида калия (700 мг, 6,23 ммоль) в DMF-THF (40 мл, 2:5) перемешивали при 100°С в течение ночи, отслеживая по ЖХ-МС. Раствор фильтровали и фильтрат сушили и концентрировали с получением неочищенного продукта 17е (900 мг). 300 мг неочищенного продукта очищали посредством преп. ВЭЖХ (колонка: Waters Xbridge C18 150*20 мм*5 мкм, градиент: 34-54% В (А - вода/0,05% аммиак, В - ацетонитрил), скорость потока: 25 мл/мин) и СФХ (колонка: OD (250 мм*50 мм, 5 мкм), условия: 40% EtOH в NH₃⋅H₂O, 50 мл/мин) с получением Соединения 17 (64,9 мг) и Соединения 17' (12,2 мг).

Соединение 17 (энантиомер-1): ЖХ-МС: R_t=1,487 мин при 4 мин хроматографии, МС (ЭРИ) m/z=536,3 [М+Н]⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, Метанол-d₆) δ 8.78-8.73 (m, 2Н), 8.31 (s, 1H), 7.82-7.77 (m, 2Н), 7.52 (dd, J₁=2,4 Гц, J₂=10,8 Гц, 1Н), 7.23-7.10 (m, 3Н), 6.80 (d, J=2,4 Гц, 1H), 5.45 (br, 1H), 3.81 (br, 1H), 3.39-3.31 (m, 2Н), 3.04-3.01 (m, 1H), 2.77-2.69 (m, 4Н), 2.32-2.21 (m, 4Н).

Соединение 17' (энантиомер-2): ЖХ-МС R_t=1,421 мин при 4 мин хроматографии, МС (ЭРИ) m/z 536,1 [М+Н]⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 8.79-8.76 (m, 2Н), 8.33 (s, 1H), 7.82-7.56 (m, 3Н), 7.27-7.22 (m, 2Н), 7.10 (dd, J₁=2,4 Гц, J₂=7,2 Гц, 1H), 6.81 (d, J=2,4 Гц, 1H), 75.56-5.49 (m, 1Н), 3.94 (br, 1H), 3.54-3.43 (m, 2Н), 3.22-3.15 (m, 1H), 2.86-2.74 (m, 4Н), 2.34-2.28 (m, 4Н).

Пример 18

N-(4-([1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридин-7-илокси)-3-метилфенил)-5-((3,3-дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)окси)-7-((тетрагидрофуран-3-ил)окси)хиназолин-4-амин

Методика получения Соединения 18:

Раствор соединения 17е (70 мг, 0,2 ммоль), тетрагидрофуран-3-ола (35 мг, 0,4 ммоль) и трет-бутоксида калия (68 мг, 0,6 ммоль) в DMF-THF (5 мл, 2:5) перемешивали при 100°С в течение ночи, отслеживая по ЖХ-МС.Раствор очищали посредством преп. ВЭЖХ (колонка: Phenomenex Gemini С18 200*25 мм*10 мкм, градиент: 37-67% В (А - вода, В - ацетонитрил), скорость потока: 25 мл/мин) с последующим СФХ-разделением с получением Соединения 18 (7,2 мг, выход 9,1%).

ЖХ-МС: R_t=1,540 мин при 4 мин хроматографии, МС (ЭРИ) m/z=604,1 [М+Н]⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 8.72 (d, J=7,6 Гц, 1Н), 8.44 (s, 1Н), 8.27 (s, 1Н), 7.79-7.77 (m, 2Н), 7.14 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7.04 (d, J=9,6 Гц, 1Н), 6.88 (d, J=2,0 Гц, 1H), 6.79 (dd, J₁=2,4 Гц, J₂=7,2 Гц, 1H), 5.15-5.05 (m, 2Н), 4.06-3.90 (m, 4Н), 3.27 (brs, 1Н), 2.95-2.92 (m, 1H), 2.47-2.35 (m, 7Н), 2.22-2.18 (m, 4Н), 2.06-2.06 (m, 1Н).

Пример 19

N-(4-([1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридин-7-илокси)-3-метилфенил)-5-(((2S,4S)-5,5-дифтор-1,2-диметилпиперидин-4-ил)окси)хиназолин-4 амин

и

N-(4-([1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридин-7-илокси)-3-метилфенил)-5-(((2R,4R)-5,5-дифтор-1,2-диметилпиперидин-4-ил)окси)хиназолин-4 амин

Методика получения соединения 19b:

К раствору соединения 19а (30 г) в МеОН (400 мл) добавляли этил-(Е)-бут-2-еноат (31,96 г, 0,28 моль). Полученную смесь перемешивали при 75°С в течение 48 часов. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения 19b (62 г неочищенного) в виде желтого масла. Неочищенный продукт использовали непосредственно на следующей стадии без дополнительной очистки.

Методика получения соединения 19d:

К раствору соединения 19b (30 г, 0,136 моль) в МеОН (300 мл) добавляли соединение 19 с (16,2 г, 0,136 моль) и (CH₂O)_n (4,9 г, 0,163 моль). Смесь перемешивали при 15-20°С в течение 18 часов под защитой N₂. Реакционную смесь фильтровали и концентрировали в вакууме с получением остатка. Этот остаток очищали посредством флэш-хроматографии на диоксиде кремния, РЕ/ЕА от 1/0 до 9/1 до 4/1. Очищенные фракции упаривали до сухого состояния с получением соединения 19d (25,6 г, выход 55,7%) в виде желтого масла.

Методика получения соединения 19f:

К суспензии порошка цинка (9,89 г, 151,3 ммоль) в безводном THF (200 мл) добавляли TMSCl (16,44 г, 151,3 ммоль) при 12-20°С в атмосфере N₂. Через 10 минут добавляли по каплям соединение 19е (16,89 г, 83,22 ммоль) и поддерживали температуру при 12-20°С.Смесь перемешивали еще 10 минут. Затем к вышеуказанной смеси добавляли раствор соединения 19d (25,6 г, 75,65 ммоль) в THF (100 мл) и перемешивали при 12-20°С в течение 18 часов. По окончании процесса добавляли 5% водный NaHCO₃ (500 мл) для остановки реакции. Затем смесь фильтровали и фильтрат экстрагировали EOAc (200 мл × 2). Объединенные слои промывали рассолом (600 мл), сушили над Na₂SO₄, концентрировали при пониженном давлении с получением остатка. Этот остаток очищали посредством флэш-хроматографии с использованием смеси петролейный эфир : этилацетат (0/1~97:3~95:5) с получением соединения 19f (11,0 г, выход 42,3%) в виде бесцветного масла. ЖХ-МС: R_t=0,905 мин при 1,5 мин хроматографии, МС (ЭРИ) m/z=344,1 [М+Н]⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 1.04 (3Н, d, J=6,8 Гц), 1.30 (3Н, t, J=6,8 Гц), 2.04-2.24 (1H, m), 2.48-2.54 (1H, m), 3.11 (2Н, t, J=13,2 Гц), 3.28-3.30 (1Н, m), 3.61 (3Н, s), 3.70 (2Н, dd, J=14,0, 34,4 Гц), 4.22-4.27 (2Н, m), 7.24-7.29 (5Н, m).

Методика получения соединения 19g:

К раствору LDA (70,5 мл, 2М в н-гептане и THF) в THF (100 мл) добавляли соединение 19f (32,4 г, 4,08 ммоль) в THF (100 мл) в атмосфере N₂ при -65°С. Охлаждающую баню удаляли и реакционную смесь медленно нагревали до 15-23°С и перемешивали в течение еще 20 часов. Реакционную смесь вливали в NH₄Cl (500 мл) и экстрагировали этилацетатом (200 мл × 3). Объединенные органические слои промывали рассолом (600 мл) и сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением соединения 19g (31,0 г неочищенного) в виде коричневого масла. ЖХ-МС: R_t=0,866 мин при 1,5 мин хроматографии, МС (ЭРИ) m/z=298,0 [М+Н]⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 1.21-1.28 (3Н, m), 3.06-3.10 (1Н, m), 3.21-3.33 (2H, m), 3.69-3.84 (6H, m), 7.28-7.36 (5H, m).

Методика получения соединения 19h:

Раствор соединения 19g (30,0 г, 100,9 ммоль) в 3М HCl (400 мл) нагревали до флегмообразования и перемешивали в течение 18 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем доводили рН до 7-8 с помощью твердого NaHCO₃. Водную фазу экстрагировали EtOAc (200 мл × 3). Объединенные органические слои промывали рассолом (700 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали в вакууме с получением соединения 19h (17,6 г неочищенного), которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Методика получения соединения 19i:

К раствору соединения 19h (17,6 г, 0,068 моль) в EtOH (200 мл) добавляли NaBH₄ (3,86 г, 0,102 моль) при 0°С. Полученную смесь перемешивали при 16-25°С в течение 20 часов. Затем добавляли раствор HCl (3 М, 10 мл) для остановки реакции. Реакционную смесь разбавляли Н₂О (200 мл), экстрагировали EtOAc (200 мл × 3). Объединенные органические слои концентрировали в вакууме с получением соединения 19i (16,8 г неочищенного), которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. ЖХ-МС: R_t=0,173 мин при 1,5 мин хроматографии, МС (ЭРИ) m/z=242,0 [М+Н]⁺.

Методика получения соединения 19j:

К раствору соединения 19i (2,0 г, 8,29 ммоль) и Pd/C (250 мг, 50% H₂O и 10% Pd) в МеОН (50 мл) добавляли (СН₂О)n (1,24 г, 41,45 ммоль). Полученную смесь перемешивали в атмосфере водорода при 50 фунт/кв. дюйм и 50°С в течение 18 часов. Реакционную смесь фильтровали, промывали МеОН (20 мл × 3). Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением соединения 19j (1,3 г неочищенного) в виде желтого масла, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Методика получения соединения 19k:

К раствору соединения 1h (1,0 г, 2,59 ммоль) в DMF (20 мл)/ТНF (8 мл) добавляли соединение 19j (1,28 г, 7,77 ммоль) и трет-бутоксид калия (1,02 г, 9,07 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 100°С в течение 16 часов. Реакционную смесь вливали в воду (100 мл) и экстрагировали этилацетатом (100 мл × 3). Объединенные органические слои промывали рассолом (300 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали с получением остатка. Этот остаток очищали посредством преп. ВЭЖХ (колонка: Phenomenex Gemini C18 250*50 мм*10 мкм, 30-60% В (A - вода/0,05% гидроксид аммония, В - ацетонитрил), скорость потока: 90 мл/мин) с получением транс- и цис-смеси 19k (0,7 г неочищенной) в виде светло-красного твердого вещества. ЖХ-МС: R_t=1,960 мин при 4,0 мин хроматографии, МС (ЭРИ) m/z=532,3 [М+Н]⁺.

Методика получения Соединения 19:

Соединение 19k (0,7 г неочищенного) разделяли посредством препаративной хиральной ВЭЖХ на колонке AD (250 мм*30 мм, 5 мкм), подвижная фаза: А: СО₂ В:этанол (0,05% DEA); условия: Base-EtOH, начало В 40% и конец В 40%, скорость потока (мл/мин) 50. Фракции, содержащие целевое соединение, упаривали до сухого состояния с получением четырех изомеров и затем снова очищали посредством преп. ВЭЖХ (Waters Xbridge Prep OBD C18 150*30 5 мкм, 35%-65% В (A - вода/0,05% гидроксид аммония, В - MeCN) с получением транс-энантиомера-1 Соединения 19' (16,3 мг, выход 2,3%) в виде белого твердого вещества и транс-энантиомера-2 Соединения 19 (10,7 мг, выход: 1,5%, транс-, пик 2) в виде белого твердого вещества. Соединение 19' (транс-энантиомер-1): ЖХ-МС: R_t=1,946 мин при 4,0 мин хроматографии, МС (ЭРИ) m/z 532,3 [М+Н]⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 1.19 (3Н, d, J=6,8 Гц), 2.11-2.16 (1H, m), 2.26 (3Н, s), 2.31-2.38 (4Н, m), 2.82 (1H, s), 2.91-2.97 (1H, m), 3.20-3.22 (1H, m), 5.22-5.24 (1H, m), 6.81 (1H, d, J=2,4 Гц), 7.06 (1H, dd, J=4,8, 7,2 Гц), 7.20 (1H, d, J=8,4 Гц), 7.29 (1H, d, J=8,0 Гц), 7.45 (1H, d, J=7,6 Гц), 7.77-7.82 (3Н, m), 8.29 (1H, s), 8.52 (1H, s), 8.74 (1H, d, J=7,6 Гц). Соединение 19 (транс-энантиомер-2): ЖХ-МС: R_t=1,902 мин при 4,0 мин хроматографии, МС (ЭРИ) m/z 532,3 [М+Н]⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 1.18 (3Н, d, J=6,4 Гц), 2.08-2.13 (1H, m), 2.23 (3Н, s), 2.29-2.37 (4Н, m), 2.80 (1H, s), 2.89-2.92 (1Н, m), 3.18-3.20 (1H, m), 5.17-5.24 (1H, m), 6.80 (1H, d, J=2,4 Гц), 7.03 (1H, d, J=7,6 Гц), 7.16 (1H, d, J=8,8 Гц), 7.27 (1H, d, J=8,4 Гц), 7.42 (1H, d, J=8,4 Гц), 7.74-7.79 (3Н, m), 8.27 (1Н, s), 8.49 (1H, s), 8.71 (1H, d, J=7,2 Гц).

Пример 20

N-(4-([1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридин-7-илокси)-3-метилфенил)-5-(((1R,3s,5S)-8-метил-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил)окси)хиназолин-4-амин

Методика получения соединения 20:

К раствору соединения 1h (100 мг, 0,26 ммоль) в DMF (5 мл) добавляли трет-бутоксид калия (58 мг, 0,52 ммоль) при 25°С. Полученную смесь перемешивали при 90°С в течение 5 суток. Реакционную смесь охлаждали до 25°С и фильтровали. Фильтрат очищали посредством препаративной ВЭЖХ (колонка: Phenomenex Gemini C18 250*21,2 мм*5 мкм, 65-95% В (А - вода/0,05% аммиак, В - метанол), скорость потока: 25 мл/мин) с получением Соединения 20 (9,1 мг, выход: 6,93%) в виде белого твердого вещества. ЖХ-МС: R_t=2,842 мин при 4,0 мин хроматографии, МС (ЭРИ) m/z=508,2 [М+Н]⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 1.74 (2Н, d, J=7,6 Гц), 2.03-2.08 (2Н, m), 2.18-2.33 (7Н, m), 2.39 (3Н, s), 3.33-3.43 (2Н, m), 4.80-4.89 (1H, m), 6.88-6.95 (3Н, m), 7.09 (1H, d, J=8,4 Гц), 7.46 (1Н, d, J=8,0 Гц), 7.61-7.65 (2Н, m), 7.77 (1H, s), 8.23 (1H, s), 8.49 (1H, d, J=7,6 Гц), 8.65 (1H, s), 10.13 (1H, br.s.)

Пример 21

5-((5,5-дифтор-1-метилазепан-4-ил)окси)-N-(4-(имидазо[1,2-а]пиридин-7-илокси)-3-метилфенил)хиназолин-4-амин

Методика получения Соединения 21:

Синтез выполняли согласно экспериментальной методике, аналогичной для Соединения 11, с получением Соединения 21 в виде твердого вещества после СФХ-разделения. ЖХ-МС: R_t=1,459 мин при 4,0 мин хроматографии. МС (ЭРИ) m/z=531,3 [М+Н]⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 8.64 (d, J=7,6 Гц, 1Н), 8.53 (s, 1H), 7.95 (s, 1Н), 7.86-7.85 (m, 2Н), 7.83 (t, J=8,4 Гц, 1Н), 7.78-7.75 (m, 1H), 7.71-7.69 (m, 1Н), 7.48 (d, J=8,0 Гц, 1H), 7.25-7.19 (m, 2H), 7.17-7.15 (m, 1H), 6.83 (s, 1H), 5.37-5.27 (m, 1H), 3.36-3.31 (m, 2H), 3.23-3.20 (m, 2H), 2.75 (s, 3H), 2.72-2.59 (m,2H), 2.49-2.40 (m, 2H), 2.26 (s, 3H).

Пример 22

5-((3,3-дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)окси)-N-(4-((6-фтор-[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридин-7-ил)окси)-3-метилфенил)-7-метоксихиназолин-4-амин

Синтез выполняли согласно экспериментальной методике, аналогичной для Соединения 6, с получением Соединения 22 в виде твердого вещества. Неочищенный продукт 22а очищали посредством препаративной СФХ на колонке CHIRALPAK AD-H СФХ5*25 см, 5 мкм Chiral-P(AD-H)006S90ADHSCY-QH001, элюируя изократически с использованием 50% СО₂ в IPA в качестве элюента. Фракции, содержащие целевое соединение, упаривали до сухого состояния с получением Соединения 22 (энантиомер-1): (350 мг, выход 33,3%) в виде не совсем белого вещества. ЖХ-МС: МС (ЭРИ) m/z=566,2 [М+Н]⁺; ВЭЖХ R_t=1,911 мин. ¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 1.22 (d, 1Н), 2.27 (s, 5Н), 2.32-2.65 (m, 6Н), 2.97 (d, 1Н), 3.18-3.34 (m, 1H), 3.95 (s, 3Н), 4.63 (td, 1H), 6.52 (d, 1Н), 6.86 (d, 1H), 6.94 (d, 1H), 7.10 (d, 1Н), 7.78 (dd, 1H), 7.85 (d, 1Н), 8.23 (s, 1H), 8.55-8.67 (m, 2Н), 9.80 (s, 1Н). 19F ЯМР (282 МГц, CDCl₃) δ -154.2, -116.6, -109.7.

Пример 23

5-((3,3-дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)окси)-N-(4-((6-фтор-[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридин-7-ил)окси)-3-метилфенил)-6-метоксихиназолин-4-амин

Синтез выполняли согласно экспериментальной методике, аналогичной для Соединения 3, с получением Соединения 23а в виде твердого вещества. Неочищенный продукт 23а очищали посредством препаративной СФХ на колонке CHIRALPAK IF2*25cm, 5 мкм 86445S90IF0SCJ-RA002 колонка, элюируя изократически с использованием 50% СО₂ EtOH (модифицированного NH₃ 2 мМ) в качестве элюента. Фракции, содержащие целевое соединение, упаривали до сухого состояния с получением Соединения 23 (энантиомер-1): (25,00 мг, выход 25,0%) в виде не совсем белого вещества. Соединение 23 (энантиомер-1): ЖХ-МС: МС (ЭРИ) m/z=566,2 [М+Н]⁺; ВЭЖХ: R_t=1,193 мин. ¹Н ЯМР (CRO-HER2_Р-1-202-011-01, 300 МГц, Метанол-d4) δ 2.04-2.16 (m, 1Н), 2.32 (d, 8Н), 2.48 (dd, 1H), 2.94 (d, 1H), 3.19 (s, 1H), 4.07 (s, 3Н), 4.89-5.06 (m, 1H), 6.86 (d, 1H), 7.23 (d, 1H), 7.63 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.85 (d, 2Н), 8.30 (s, 1H), 8.44 (s, 1H), 9.07 (d, 1Н). ¹⁹F ЯМР (282 МГц, Метанол-d₄) δ -156.2, -118.2, -111.7.

Пример 24

N-(4-([1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридин-7-илокси)-3-метилфенил)-5-((3,3-дифтор-1-(метил-d₃)пиперидин-4-ил)окси)хиназолин-4-амин

Методика получения соединения 24а:

К раствору соединения 1h (0,5 г, 1,29 ммоль) в DMF (20 мл) и THF (8 мл) добавляли соединение 27а (0,307 г, 1,29 ммоль) и t-BuOK (0,508 г, 4,53 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 100°С в течение 16 часов. ЖХ-МС показала, что реакция полностью завершена. Добавляли воду (20 мл) и экстрагировали EtOAc (30 мл × 3), объединенные органические слои промывали рассолом (100 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением неочищенного продукта, который очищали посредством флэш-хроматографии на диоксиде кремния, EtOAc/MeОН от 1/0 до 9/1. Очищенные фракции упаривали до сухого состояния с получением соединения 24а (760 мг, выход 92,2%) в виде желтого масла. ЖХ-МС: R_t=2,794 мин при 4,0 мин хроматографии, МС (ЭРИ) m/z 604,1 [М+Н]⁺. Метод СФХ-анализа: колонка: Chiralcel OD-3 100×4,6 мм I.D., 3 мкм; подвижная фаза: А: СО₂ В: этанол (0,05% DEA); градиент: от 5% до 40% В за 4,5 мин, выдерживание 40% в течение 2,5 мин, затем 5% В за 1 мин; скорость потока: 2,8 мл/мин; температура колонки: 40°С.

Методика получения соединения 24b:

Соединение 24а разделяли посредством препаративной хиральной ВЭЖХ на колонке OD (250 мм*30 мм, 5 мкм), подвижная фаза: А - СО₂, В - этанол (0,05% DEA); условия: Base-EtOH, скорость потока: 50 мл/мин. Фракции, содержащие целевое соединение, упаривали до сухого состояния с получением соединения 24b' (0,340 г, выход 44,7%) (изомер-1) и соединения 24b (0,310 г, выход 40,8%) (изомер-2), оба в виде светло-желтого твердого вещества. Соединение 24b': энантиомер-1 ЖХ-МС: R_t=0,760 мин при 1,5 мин хроматографии, МС (ЭРИ) m/z 626,1 [M+Na]⁺. Соединение 24b: энантиомер-2 ЖХ-МС: R_t=0,762 мин при 1,5 мин хроматографии, МС (ЭРИ) m/z 626,1 [M+Na]⁺.

Методика получения соединения 24с:

К раствору соединения 24b (0,15 г, 0,25 ммоль, энантиомер-2) в DCM (4 мл) добавляли TFA (1 мл, 12,98 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 16-18°С в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении с получением остатка. Этот остаток разбавляли МеОН (3 мл), доводили рН до 8-9 аммиаком, затем очищали посредством преп. ВЭЖХ [Waters Xbridge Prep OBD C18 150*30 5 мкм, 30%-60%B (A - вода/0,05% гидроксид аммония, В - MeCN)] с получением соединения 24с (0,069 г, выход 55,1%) в виде белого твердого вещества. ЖХ-МС: R_t=1,946 мин при 4,0 мин хроматографии, МС (ЭРИ) m/z=504,2 [М+Н]⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 1.77-1.81 (1Н, m), 2.20 (3Н, s), 2.36 (1H, d, J=10,8 Гц), 2.65 (1H, s), 2.74 (1H, t, J=12,4 Гц), 2.88-2.99 (2H, m), 3.29-3.32 (1H, m), 5.30-5.39 (1H, m), 6.81 (1H, d, J=7,6 Гц), 7.02 (1H, d, J=7,6 Гц), 7.24 (1H, d, J=8,8 Гц), 7.40 (2H, dd, J=8,0, 17,6 Гц), 7.76-7.78 (2H, m), 7.87 (1H, s), 8.38 (1H, s), 8.59 (1H, s), 8.92 (1H, d, J=7,6 Гц), 10.15 (1H, s).

Методика получения Соединения 24:

К раствору соединения 24 с (300 мг, 0,596 ммоль) в DMF (5 мл) добавляли CDI₃ (69 мг, 0,894 ммоль) и K₂CO₃ (124 мг, 0,894 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 27-31°С в течение 3 часов. ЖХ-МС показала, что реакция полностью завершена. Реакционную смесь вливали в воду (20 мл), экстрагировали ЕА (20 мл × 3). Объединенные органические слои сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением остатка. Этот остаток очищали посредством ВЭЖХ (Waters Xbridge Prep OBD C18 150*30 5 мкм, 42-42% В, A - вода (0,05% гидроксид аммония), В - MeCN, скорость потока (мл/мин) 25 мл/мин). Большую часть MeCN удаляли при пониженном давлении; оставшийся растворитель удаляли посредством лиофилизации с получением Соединения 24 (25,1 мг, выход 8,1%) в виде белого твердого вещества. ЖХ-МС: R_t=2,026 мин при 4,0 мин хроматографии, МС (ЭРИ) m/z=521,3 [М+Н]⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 2.06-2.10 (1H, m), 2.25 (3Н, s), 2.42-2.48 (2Н, m), 2.64 (1H, dd, J=11,6, 28,8 Гц), 2.96 (1Н, d, J=12,0 Гц), 3.24-3.27 (1H, m), 5.08-5.16 (1H, m), 6.81 (1H, d, J=2,8 Гц), 7.06 (1H, dd, J=2,4, 7,6 Гц), 7.18 (1H, d, J=8,4 Гц), 7.31 (1H, d, J=8,4 Гц), 7.45 (1H, d, J=8,4 Гц),7.76-7.86 (3Н, m), 8.28 (1H, s), 8.53 (1H, d, J=7,6 Гц), 8.73 (1Н, d, J=7,6 Гц).

Пример 25

(±)-N-(4-([1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридин-7-илокси)-3-метилфенил)-5-(((2R,4S)-1-(метил-d₃)-2-(трифторметил)пиперидин-4-ил)окси)хиназолин-4-амин

Методика получения соединения 25b:

К раствору соединения 25а (15,0 г, 1,0 экв.) в метаноле (200 мл) добавляли соляную кислоту (12М, 3 мл) и PtO₂ (1,2 г). Смесь перемешивали при 50°С в атмосфере водорода (50 фунт/кв. дюйм) в течение 3 суток. Твердое вещество растворяли в метаноле (200 мл) и к этой смеси добавляли соляную кислоту (12 М, 3 мл) и PtO₂ (1,2 г), перемешивали при 50°С в атмосфере водорода (50 фунт/кв. дюйм) в течение 20 ч. Смесь фильтровали и концентрировали с получением гидрохлорида соединения 25b (18,2 г, выход 96%) в виде бесцветного твердого вещества. ¹Н ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 1.60-1.86 (2Н, m), 1.91-2.07 (1Н, m), 2.17-2.27 (1H, m), 2.32-2.45 (0.5H, m), 3.10-3.30 (1H, m), 3.46-3.64 (1H, m), 3.90-4.00 (0.5H, m), 4.15-4.40 (1H, m).

Методика получения соединения 25c:

Соединение 25b в виде HCl соли растворяли в метаноле, подщелачивали аммиаком и концентрировали, остаток разбавляли дихлорметаном, фильтровали и фильтрат концентрировали с получением соединения 25b (3,8 г, свободное основание), которое использовали на следующих стадиях. К раствору соединения 25b (300 мг, 1,2 экв.) в THF (10 мл) добавляли NaH (180 мг, 3,0 экв., 60%) при перемешивании. Через 0,5 ч к этой реакционной смеси добавляли 2-фтор-6-нитробензонитрил (250 мг, 1,0 экв.) и перемешивали при 21-29°С в течение 2 суток. ЖХ-МС анализ показал, что реакция почти завершена. Смесь вливали в насыщенный раствор NH₄Cl (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (20 мл × 3). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (от 0 до 50% ЕА в РЕ) с получением соединения 25 с (230 мг, выход 48%) в виде желтого масла. ЖХ-МС: R_t=0,641 мин при 5-95АВ_220&254 хроматографии, МС (ЭРИ) m/z=315,9 [М+Н]⁺.

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 1.79-1.86 (2Н, m), 2.18-2.29 (1H, m), 2.35-2.44 (1H, m), 2.78-2.83 (1H, m), 3.25-3.37 (1H, m), 3.38-3.45 (1H, m), 4.48-4.57 (1Н, m), 7.37 (1H, d, J=8,0 Гц), 7.73 (1H, t, J=8,4 Гц), 7.90 (1Н, d, J=8,4 Гц).

Методика получения соединения 25d:

К смеси соединения 25 с (180 мг, 1,0 экв.) и карбоната калия (118 мг, 1,5 экв.) в DMF (10 мл) добавляли CD₃I (66 мг, 0,8 экв.). Смесь перемешивали при 23-26°С в течение 6 ч. Реакционную смесь вливали в рассол (50 мл) и экстрагировали ЕА (20 мл × 3). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (от 0 до 30% ЕА в РЕ) с получением соединения 25d (140 мг неочищенного) в виде коричневого масла. ЖХ-МС: R_t=0,684 мин при 5-95АВ_220&254 хроматографии, МС (ЭРИ) m/z=333,0 [М+Н]⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 1.94-2.05 (2Н, m), 2.10-2.18 (1H, m), 2.35-2.51 (2Н, m), 2.74-2.85 (1H, m), 3.05-3.15 (1H, m), 4.40-4.53 (1Н, m), 7.35 (1H, d, J=8,4 Гц), 7.72 (1H, t, J=8,4 Гц), 7.89 (1H, d, J=8,4 Гц).

Методика получения соединения 25е:

К раствору соединения 25d (140 мг, 1,0 экв.) в метаноле (10 мл) добавляли Pd/C (50 мг, 10%) в атмосфере аргона. Суспензию перемешивали при 24-30°С в атмосфере водорода (баллонный) в течение 17 ч. ЖХ-МС анализ показал, что реакция полностью завершена. Смесь фильтровали и концентрировали с получением соединения 25е (60 мг, выход 68%) в виде желтого масла. ЖХ-МС: R_t=0,620 мин при 5-95АВ_220&254 хроматографии, МС (ЭРИ) m/z=303,1 [М+Н]⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 1.83-1.93 (2Н, m), 2.08-2.14 (1H, m), 2.31-2.49 (2Н, m), 2.71-2.79 (1H, m), 3.03-3.09 (1H, m), 4.25-4.35 (1H, m), 4.44 (2Н, br. s), 6.25 (1H, d, J=8,4 Гц), 6.34 (1Н, d, J=7,6 Гц), 7.22 (1H, t, J=8,4 Гц).

Методика получения соединения 25f:

К смеси соединения 25е (60 мг, 1,0 экв.) в безводном толуоле (10 мл) добавляли DMF-DMA (54 мкл, 2,0 экв.). Смесь перемешивали при 120°С в течение 1 ч. ЖХ-МС анализ показал, что реакция полностью завершена. Раствор концентрировали с получением соединения 25f (0,2 ммоль неочищенного). ЖХ-МС: R_t=0,222 мин при 5-95АВ_220&254 хроматографии, МС (ЭРИ) m/z=358,1 [М+Н]⁺.

Методика получения Соединения 25:

К смеси соединения 25f (0,20 ммоль, 1,0 экв.) в АсОН (10 мл) добавляли соединение 1f (57 мг, 1,2 экв.). Смесь перемешивали при 120°С в течение 1,5 ч. ЖХ-МС анализ показал, что реакция полностью завершена. Раствор концентрировали. Остаток очищали посредством преп. ВЭЖХ (колонка: DuraShell 150*25 мм*5 мкм, градиент: 50%-80% В (А - вода/0,05% гидроксид аммония, В - ацетонитрил), скорость потока: 25 мл/мин) с получением Соединения 25 (13,1 мг, выход 12%) в виде белого твердого вещества. ЖХ-МС: R_t=2,307 мин при 0-60АВ_4 мин_220&254 хроматографии, МС (ЭРИ) m/z=553,3 [М+Н]⁺. ВЭЖХ: R_t=4,31 мин при 0-60_АВ_1,2 мл. ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 1.90-1.96 (1H, m), 2.01-2.08 (1H, m), 2.25 (3Н, s), 2.35-2.43 (1H, m), 2.49-2.55 (1H, m), 2.62-2.69 (1H, m), 2.79-2.89 (1Н, m), 3.12-3.19 (1H, m), 4.59-4.69 (1H, m), 6.87-6.91 (2Н, m), 6.95 (1H, d, J=8,0 Гц), 7.11 (1H, d, J=8,4 Гц), 7.51 (1H, d, J=7,6 Гц), 7.62-7.74 (3Н, m), 8.23 (1H, s), 8.50 (1H, dd, J₁=7,2 Гц, J₂=1,2 Гц), 8.68 (1H, s), 10.03 (1H, s).

Пример 26

(±)-N-(4-([1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридин-7-илокси)-3-метилфенил)-5-((3,3-дифтор-1-(метил-d₃)пиперидин-4-ил)окси)-6-(метокси-d₃)хиназолин-4-амин

Методика получения соединения 26а:

Смесь соединения 3е (200 мг, 0,48 ммоль) и гидрохлорида пиридина (277,52 мг, 2,40 ммоль) перемешивали при 170°С в течение 2 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры. Значение рН доводили до 8-9 насыщенным NaHCO₃. Смесь энергично перемешивали, фильтровали и осадок промывали этилацетатом (5 мл) с получением соединения 26а (120 мг, выход 62,1%) в виде коричневого твердого вещества. ЖХ-МС: R_t=0,956 мин при 0-60АВ_2 мин_Е хроматографии (Merck RP-18e 25-2 мм, SN: МКМ9504/198), МС (ЭРИ) m/z=403,2 [М+Н]⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 8.73 (br d, J=7,50 Гц, 1H), 8.09-8.39 (m, 2H), 7.69-7.87 (m, 2H), 7.30-7.49 (m, 2H), 7.03-7.25 (m, 2H), 6.87 (s, 1H), 2.24 (s, 3Н).

Методика получения соединения 26b:

К раствору соединения 26а (120 мг, 0,30 ммоль) и K₂CO₃ (49,46 мг, 0,36 ммоль) в DMF (8 мл) добавляли CD₃I (51,88 мг, 0,36 ммоль). Смесь перемешивали при 20°С в течение 12 ч. Смесь фильтровали и концентрировали с получением продукта, который очищали посредством преп. ТСХ (CH₂Cl₂/МеОН 10:1, R_f=0,6) с получением соединения 26b (60 мг, выход 48%) в виде желтого твердого вещества. ЖХ-МС: R_t=1,016 мин при 0-60АВ_2 мин_Е хроматографии (Merck RP-18e 25-2 мм, SN: МКМ9504/198), МС (ЭРИ) m/z=420,2 [М+Н]⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 8.73 (dd, J=7,50, 0,66 Гц, 1Н), 8.44 (s, 1H), 8.28 (s, 1Н), 7.78-7.87 (m, 1H), 7.70-7.76 (m, 2Н), 7.66 (dd, J=9,15, 1,87 Гц, 1H), 7.19 (d, J=8,38 Гц, 1H), 7.07 (dd, J=7,50, 2,43 Гц, 1H), 6.84 (d, J=2,20 Гц, 1H), 2.25 (s, 3Н).

Методика получения Соединения 26:

К раствору соединения 26с (60,6 мг, 0,39 ммоль) в THF (5 мл) и DMF (2 мл) добавляли tBuOK (44,1 мг, 0,39 ммоль). Смесь перемешивали при 20°С в течение 30 мин и затем добавляли соединение 26b (60 мг, 0,13 ммоль). Смесь перемешивали при 90°С в течение 12 ч. Реакционную смесь фильтровали и концентрировали под вакуумом с получением неочищенного продукта, который очищали посредством препаративной ТСХ (CH₂Cl₂/МеОН 10:1, R_f=0,5) с получением Соединения 26 (16,37 мг, выход 22,57%) в виде желтого твердого вещества. ЖХ-МС: R_t=1,034 мин при 0-60АВ_2,0 мин хроматографии (Welch Xtimate С18 2,1*30 мм, 3 мкм), МС (ЭРИ) m/z=554,1 [М+Н]⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 8.73 (d, J=7,72 Гц, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.73-7.84 (m, 3Н), 7.62 (d, J=9,26 Гц, 1H), 7.17 (d, J=8,38 Гц, 1H), 7.06 (dd, J=7,50, 2,65 Гц, 1H), 6.83 (d, J=2,65 Гц, 1Н), 4.90-5.01 (m, 1H), 3.12-3.23 (m, 1H), 2.86-2.97 (m, 1H), 2.38-2.53 (m, 1H), 2.23-2.28 (m, 5Н), 2.03-2.14 (m, 1Н).

Пример 27

(±)N-(4-([1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридин-7-илокси)-3-метилфенил)-5-((3,3-дифтор-1-метилпиперидин-4-ил-4-d)окси)-7-метоксихиназолин-4-амин

Методика получения соединения 27b:

К раствору соединения 27а (1,0 г, 4,22 ммоль) в безводном CH₂Cl₂ (50 мл) медленно добавляли реагент Десс-Мартина (3,58 г, 8,44 ммоль). Смесь перемешивали при 20°С в течение 2 ч и затем гасили насыщенным Na₂SO₃/NaHCO₃ (об/об 3/1, 100 мл), экстрагировали CH₂Cl₂ (50 мл × 2). Объединенные органические слои сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали под вакуумом с получением соединения 27b (700 мг, выход 65,5%) в виде белого твердого вещества. ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 3.94 (br t, J=12,0 Гц, 1H), 3.79 (br t, J=6,1 Гц, 2Н), 3.61-3.52 (m, 1H), 3.11 (br s, 1Н), 2.76 (br t, J=6,0 Гц, 1H), 1.93 (br s, 1H), 1.49 (d, J=14,5 Гц, 9Н).

Методика получения соединения 27с:

К раствору соединения 27b (700 мг, 2,76 ммоль) в безводном CD₃OD (5 мл) медленно добавляли NaBD₄ (231,07 мг, 5,52 ммоль) при 0°С в атмосфере N₂. Смесь перемешивали при 20°С в течение 1 ч, затем гасили D₂O (10 мл), экстрагировали EtOAc (50 мл × 3). Объединенные органические слои сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали под вакуумом с получением неочищенного соединения 27 с (500 мг, выход 76,1%) в виде белого твердого вещества. ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 3.88-3.62 (m, 2Н), 3.60-3.40 (m, 2Н), 2.24 (br s, 1H), 2.00-1.88 (m, 1Н), 1.86-1.73 (m, 1H), 1.53-1.44 (m, 9H).

Методика получения соединения 27d:

К раствору соединения 27 с (300 мг, 1,26 ммоль) в смеси безводный THF/DMF (10 мл/4 мл) добавляли t-BuOK (212,06 мг, 1,89 ммоль) в атмосфере N₂ при 20°С и перемешивали в течение 30 минут при этой температуре. Добавляли соединение 6е (262,55 мг, 0,63 ммоль) и затем нагревали при 90°С в течение 12 ч. Реакционную смесь разбавляли 30 мл воды, экстрагировали EtOAc (50 мл × 2). Объединенные органические слои промывали рассолом (20 мл), сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (CH₂Cl₂/МеОН от 100/1 до 20/1, R_f=0,4) с получением соединения 27d (320 мг, выход 80%) в виде желтого твердого вещества. ЖХ-МС: R_t=1,254 мин при 0-60АВ_2,0 мин_220&254 хроматографии (Xtimate 3 мкм, С18, 2,1*30 мм S/N3U), МС (ЭРИ) m/z 634,9 [М+Н]⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 9.63 (s, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.49 (d, J=8,4 Гц, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.68 (br d, J=8,6 Гц, 1H), 7.08 (d, J=8,6 Гц, 1H), 6.93 (d, J=1,4 Гц, 1H), 6.91-6.83 (m, 2H), 6.52 (d, J=1,8 Гц, 1H), 4.45 (br s, 1H), 4.25-4.10 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.35 (br s, 1H), 3.13 (br s, 1H), 2.41 (brd, J=10,2 Гц, 1H), 2.25 (s, 3H), 2.14-2.00 (m, 1H), 1.50 (s, 9H).

Методика получения соединения 27e:

Соединение 27d (320 мг, 0,5 ммоль) растворяли в растворе TFA в CH₂Cl₂ (20%, 10 мл) и перемешивали при 20°С в течение 3 ч. Реакционную смесь доводили до рН приблизительно 7-8 с помощью NaHCO₃ (насыщ.), экстрагировали CH₂Cl₂ (30 мл × 2). Объединенные органические слои промывали рассолом (10 мл), сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали под вакуумом с получением соединения 27е (280 мг неочищенного) в виде желтого твердого вещества. ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 9.75 (s, 1Н), 8.51 (s, 1H), 8.43 (d, J=7,4 Гц, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.66 (br d, J=8,6 Гц, 1H), 7.00 (d, J=8,8 Гц, 1H), 6.88-6.76 (m, 3H), 6.52 (d, J=2,2 Гц, 1H), 6.55-6.50 (m, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.42-3.31 (m, 1H), 3.13 (br d, J=13,5 Гц, 1H), 3.02-2.88 (m, 1H), 2.77 (br t, J=12,8 Гц, 1H), 2.43-2.35 (m, 1H), 2.17 (s, 3H), 1.93-1.90 (m, 2H).

Методика получения Соединения 27:

К раствору соединения 27е (140 мг, 0,26 ммоль) в смеси безводный CH₂Cl₂/МеОН (4 мл/4 мл) добавляли (НСНО)_n (23,4 мг, 0,26 ммоль) и затем 5 капель НСООН (1 капля чистой НСООН, разбавленная 1 мл CH₂Cl₂). Смесь перемешивали при 20°С в течение 12 ч и затем добавляли NaCNBH₃ (163,4 мг, 2,6 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 20°С в течение 30 минут и гасили 10 мл насыщ. NH₄Cl, экстрагировали CH₂Cl₂ (50 мл × 3). Объединенные органические слои промывали рассолом (30 мл), сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (CH₂Cl₂/МеОН от 100/1 до 15/1, R_f=0,3) с получением Соединения 27 (40,32 мг, выход 28,3%) в виде желтого твердого вещества. ЖХ-МС: R_t=0,690 мин при 5-95АВ_1,5 мин_220&254 хроматографии (Merck RP-18e 25-2 мм, SN: МКМ9504), МС (ЭРИ) m/z 549,1 [М+Н]⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 8.72 (d, J=7,5 Гц, 1Н), 8.44 (s, 1Н), 8.27 (s, 1Н), 7.87-7.70 (m, 2Н), 7.14 (d, J=8,4 Гц, 1Н), 7.08-6.97 (m, 1Н), 6.92-6.76 (m, 3Н), 3.95 (s, 3Н), 3.31 (br s, 2Н), 3.29-3.19 (m, 1H), 2.94 (br d, J=11,9 Гц, 1H), 2.70-2.54 (m, 1H), 2.52-2.35 (m, 5Н), 2.22 (s, 3Н), 2.12-1.97 (m, 1Н).

Пример 28

(S)-N-(4-([1,2,4]триазоло[1,5-a]пиридин-7-илокси)-3-метилфенил)-5-((3,3-дифтор-1-(метил-d₃)пиперидин-4-ил-4-d)окси)-7-метоксихиназолин-4-амин

и

(R)-N-(4-([1,2,4]триазоло[1,5-a]пиридин-7-илокси)-3-метилфенил)-5-((3,3-дифтор-1-(метил-d₃)пиперидин-4-ил-4-d)окси)-7-метоксихиназолин-4-амин

Методика получения соединения 28а:

К раствору соединения 27е (140 мг, 0,262 ммоль) и K₂CO₃ (145 мг, 0,275 ммоль) в безводном DMF(5 мл) добавляли CD₃I (37,97 мг, 0,262 ммоль) по каплям в атмосфере N₂ при 20°С и перемешивали в течение 2 ч при этой температуре. Реакционную смесь разбавляли 20 мл воды, экстрагировали EOAc (30 мл × 3), промывали рассолом (10 мл), сушили над Na₂SO₄, фильтровали, концентрировали и остаток очищали посредством преп. ВЭЖХ (оборудование: AA/Boston Green ODS 150*30 5 мкм; условия: вода (0,05% HCl)-ACN начало В 5, конец В 30, градиент время (мин) 12 100% В, время выдержки (мин) 2,2, скорость потока (мл/мин) 25)) с получением соединения 28а (48,3 мг, выход 27,9%) в виде желтого твердого вещества в форме HCl соли. ЖХ-МС: R_t=1,204 мин при 0-60АВ_2,0 мин_220&254 хроматографии (Xtimate 3 мкм, С18, 2,1*30 мм S/N3U411201576), МС (ЭРИ) m/z 552,1 [М+Н]⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 8.96 (br d, J=7,1 Гц, 1H), 8.81-8.59 (m, 2H), 7.98-.71 (m, 2H), 7.45-7.24 (m, 3Н), 6.99 (br d, J=17,4 Гц, 2H), 4.28 (br s, 1H), 4.08 (s, 3H), 4.01-3.85 (m, 1H), 3.79 (br d, J=11,9 Гц, 1H), 3.66-3.52 (m, 1H), 2.87 (br d, J=14,8 Гц, 1H), 2.46 (br t, J=12,3 Гц, 1H), 2.29 (s, 3H).

Методика получения Соединения 28:

Соединение 28а (45 мг, 0,068 ммоль) очищали посредством хиральной СФХ (СФХ-метод: оборудование: СФХ-МС-метод: колонка: Chiralcel AD (250 мм*30 мм, 10 мкм); условия: 0,1% NH₃H₂O IPA начало В: 45%, конец В: 45%, скорость потока: 80 мл/мин) и лиофилизировали с получением Соединения 28 (18,9 мг, выход 50,4%) и Соединения 28' (18,1 мг, выход 48,3%) в виде желтого твердого вещества.

Соединение 28 (энантиомер-1): СФХ: R_t=5,868 мин (220 нм) OD-H_EtOH(DEA)_5_40_2,5M (колонка: колонка: ChiralCel OD-H 150×4,6 мм I.D., 5 мкм подвижная фаза: А: CO2 В: этанол (0,05% DEA); градиент: от 5% до 40% В за 5,5 мин и выдерживание 40% в течение 3 мин, затем 5% В за 1,5 мин; скорость потока: 2,5 мл/мин; температура колонки: 40°С). ¹Н ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 9.87 (s, 1H), 8.92 (d, J=7,7 Гц, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.73 (dd, J=2,1, 8,7 Гц, 1H), 7.23 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7.04-6.99 (m, 2Н), 6.88 (d, J=2,0 Гц, 1H), 6.81 (d, J=2,4 Гц, 1H), 3.92 (s, 3Н), 3.26-3.16 (m, 1H), 2.82 (br, J=11,5 Гц, 1H), 2.56 (br s, 1Н), 2.40-2.29 (m, 2Н), 2.18 (s, 3Н), 1.96-1.85 (m, 1Н).

Соединение 28' (энантиомер-2): СФХ: R_t=6,789 мин (220 нм) OD H_EtOH(DEA)_5_40_2,5M (колонка: ChiralCel OD-H 150×4,6 мм I.D., 5 мкм; подвижная фаза: А: СО₂ В: этанол (0,05% DEA); градиент: от 5% до 40% В за 5,5 мин и выдерживание 40% в течение 3 мин, затем 5% В за 1,5 мин; скорость потока: 2,5 мл/мин; температура колонки: 40°С). ¹Н ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 9.87 (s, 1H), 8.92 (d, J=7,5 Гц, 1H), 8.51 (s, 1Н), 8.37 (s, 1H), 7.82 (br s, 1Н), 7.74 (br d, J=8,8 Гц, 1H), 7.23 (br d, J=8,8 Гц, 1H), 7.02 (br s, 2H), 6.89 (s, 1H), 6.81 (d, J=2,0 Гц, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.24 (br d, J=10,8 Гц, 1H), 2.82 (br d, 11,0 Гц, 1H), 2.56 (br s, 1H), 2.41-2.29 (m, 2H), 2.18 (s, 3H), 1.96-1.79 (m, 1H).

БИОЛОГИЧЕСКИЕ ПРИМЕРЫ:

Пример 29: ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ ПРОТИВ EGFR ДИКОГО ТИПА (WT)

Активность ингибирования соединения в отношении EGFR WT может быть оценена с использованием клеток NCI-H838 (АТСС® CRL-5844™), которые экспрессируют белок EGFR дикого типа, в качестве индекса скрининга для определения селективности соединения.

Ингибирование соединением мишени модулирования определяли следующим образом: клетки NCI-H838 распределяли в 96-луночные планшеты (20000 клеток/лунку) со средой DMEM, содержащей 1% FBS, в течение ночи и затем обрабатывали тестируемыми соединениями в ряде концентраций (3 мкМ, 0,3 мкМ, 0,1 мкМ, 0,03 мкМ, 0,01 мкМ, 0,003 мкМ, 0,001 мкМ, 0,0001 мкМ). Планшеты инкубировали в течение 4 ч при 37°С с 5% СО₂ с последующей стимуляцией рекомбинантного hEGF (100 нг/мл в течение 10 мин, RD, Cat#236-EG) и затем уровень фосфорилирования EGFR (Y1068) клеток в каждой лунке определяли с использованием набора MSD Kit (MULTI-SPOT®96 4-Spot НВ Prototype EGFR Triplex ANALYTES: pEGFR(Tyr1068), pEGFR(Tyr1173), общий EGFR (Cat# N45ZB-1). Этот анализ представляет собой электрохемилюминесцентный метод (MESO SCALE DISCOVERY) для определения как фосфорилированного, так и общего EGFR клеток с помощью MSD SECTOR® Imager, и затем соотношение p-EGFR/общий EGFR может быть генерировано компьютером. Процент ингибирования определяли согласно следующей формуле: % ингибирования = 100 × [1 - (соотношение для лунки с образцом - соотношение Мин для лунки с контролем) / (соотношение Макс соотношение Мин для лунки с контролем)]. Значения IC₅₀ затем рассчитывали в виде концентрации соединения, требуемой для 50% ингибирования, на наилучшим образом выровненных кривых с использованием программного обеспечения Prism GraphPad 7.0 или Microsoft Xlfit.

Пример 30: ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ ПРОТИВ HER2 ДИКОГО ТИПА (WT)

Активность соединения в селективном ингибировании амплификации HER2 дикого типа может быть определена с использованием клеточной линии ВТ474 (АТСС® НТВ-20™). Клеточная линия экспрессировала фосфорилированный белок HER2, и его пролиферация зависела от амплифицированного гена, что можно использовать для in vitro анализа PD и анализа антипролиферативной активности.

Ингибирование соединением мишени модулирования определяли следующим образом: клетки ВТ474 распределяли в 96-луночные планшеты (20000 клеток/лунку) со средой DMEM, содержащей 10% FBS, в течение ночи и затем обрабатывали тестируемыми соединениями в ряде концентраций (3 мкМ, 0,3 мкМ, 0,1 мкМ, 0,03 мкМ, 0,01 мкМ, 0,003 мкМ, 0,001 мкМ, 0,0001 мкМ). Планшеты инкубировали в течение 4 ч при 37°С с 5% СО₂ и затем уровень фосфорилирования HER2 (Y1248) клеток в каждой лунке измеряли с использованием набора MSD Kit (Phospho-ErbB2 (Tyr1248) Assay Whole Cell Lysate Kit: Cat# K151CLD-3). Этот анализ представляет собой электрохемилюминесцентный метод (MESO SCALE DISCOVERY) для определения как фосфорилированного, так и общего HER2 клеток с помощью MSD SECTOR® Imager, и затем соотношение p-HER2/общий HER2 может быть генерировано компьютером. Процент ингибирования определяли согласно следующей формуле: % ингибирования = 100 × [1 - (соотношение для лунки с образцом - соотношение Мин для лунки с контролем) / (соотношение Макс - соотношение Мин для лунки с контролем)]. Значения IC₅₀ затем рассчитывали в виде концентрации соединения, требуемой для 50% ингибирования, на наилучшим образом выровненных кривых с использованием программного обеспечения Prism GraphPad 7.0 или Microsoft Xlfit.

Антипролиферативную активность соединений определяли согласно следующей методике: клетки ВТ474 распределяли в 384-луночные планшеты в среде DMEM, содержащей 10% FBS и 1М ОАА, в течение ночи и затем добавляли тестируемые соединения в ряде концентраций (30 мкМ, 10 мкМ, 3 мкМ, 1 мкМ, 0,3 мкМ, 0,1 мкМ, 0,03 мкМ, 0,01 мкМ, 0,001 мкМ) на следующие сутки. Вместе с тем, подготавливали планшет-дубликат для клеток для измерения значения G0 на следующие сутки. Планшеты с соединениями инкубировали в течение 72 часов при 37°С с 5% CO2 и количество жизнеспособных клеток в каждой лунке G0 или планшетов с соединениями измеряли посредством MTS (CellTiter 96® AQueous One Solution Cell Proliferation Assay, Promega) конечной точки. Этот анализ представляет собой колориметрический метод определения количества жизнеспособных клеток в анализе пролиферации. Реагенты для обнаружения (5 мкл) распределяли в каждую лунку и планшеты инкубировали в течение 2 часов при комнатной температуре. Затем измеряли поглощение при 490 нм и 650 нм (референсная длина волны) в каждой лунке с использованием safile II (Tecan). Процент пролиферации вычисляли по следующей формуле: % пролиферации = 100 × (значение G3 для лунки с образцом значение G0) / (значение G3 для DMSO-контроля значение G0). Значения GI₅₀ далее вычисляли как концентрацию соединения, необходимую для 50% пролиферации, на наилучшим образом выровненных кривых с использованием программного обеспечения Genedata Screener®.

Пример 31: АНАЛИЗ ПРОНИЦАЕМОСТИ ГЕМАТОЭНЦЕФАЛИЧЕСКОГО БАРЬЕРА У КРЫС

In vitro анализ связывания в крови, плазме и головном мозге осуществляли с помощью устройства равновесного диализа. В разбавленную кровь (1:1, разбавленную DPBS рН 7,4), плазму с добавкой антикоагулянта EDTA и гомогенат головного мозга (1:3, разбавленного DPBS рН 7,4) вносили по 5 мкМ тестируемого соединения (в трех повторностях) и подвергали диализу против равного объема 150 мкл 100 мМ буфера PBS (рН 7,4) при 37°С в течение соответствующего периода времени установления равновесия в медленно вращающемся планшете. По окончании инкубации отбирали аликвоту 50 мкл со стороны приемной камеры и 5 мкл из камеры для образца. Образец 5 мкл дополнительно разбавляли 45 мкл контроля крови, плазмы или гомогената головного мозга. Парные образцы сопоставляли либо с буфером, либо с контрольным образцом, перемешивали в течение 2 мин, а затем осаждали с использованием 150 мкл охлажденного ацетонитрила с 100 нг/мл толбутамида в качестве внутреннего стандарта. После центрифугирования при 4000 об/мин в течение 20 мин супернатант разбавляли 0,1%-ным водным раствором муравьиной кислоты и анализировали посредством ЖХ/МС/МС (API 4000, Applied Biosystems, Foster City). Несвязанную фракцию (fu) тестируемого соединения рассчитывали по соотношению ответа на буфер к ответу на гомогенат головного мозга/плазмы/крови, а несвязанную фракцию (fu,bl, fu,pl и fu,br) тестируемого соединения в неразведенной крови и ткани рассчитывали по измеренному fu в гомогенате и разбавленной крови с использованием следующего уравнения: fu,bl (fu,br)=(1/D)/[(1/fu-1)+1/D)]. D представляет собой коэффициент разбавления. (D равен 1 для плазмы, 2 для крови и 4 для головного мозга).

Модель кратковременной пероральной абсорбции (SOA) представляет собой модель скрининга in vivo для выявления проникновения соединения в мозг. Шесть самцов крыс линии Wistar, приобретенных в Beijing Vital River, получали пероральную дозу соединения. В предопределенный момент времени после введения дозы из задней мозжечково-мозговой цистерны отбирали спинномозговую жидкость (CSF) и образцы крови (>60 мкл/момент времени/каждый сайт) собирали с помощью пункции сердца в отдельные пробирки с добавкой антикоагулянта EDTA и затем сразу же разбавляли 3-кратным объемом воды для образцов крови, или центрифугировали при 4000 g в течение 10 мин для получения плазмы. Ткань мозга собирали и гомогенизировали в 3-кратном объеме 100 мМ забуференного фосфатом физиологического раствора (рН 7,4). Все образцы хранили при приблизительно -70°С до ЖХ/МС/МС анализа.

Стандарты готовили путем добавления образцов контрольной плазмы, крови, гомогената головного мозга и искусственной CSF. Гомогенизированную ткань мозга вместе с образцами крови/плазмы осаждали посредством добавления 3-кратного объема охлажденного ацетонитрила, содержащего внутренний стандарт, и 10 мкл образцов CSF осаждали 100 мкл охлажденного ацетонитрила, содержащего внутренний стандарт. После 2 мин встряхивания и 5 мин центрифугирования при 14000 об/мин супернатант анализировали посредством ЖХ/МС/МС (API 4000, Applied Biosystems, Foster City). Два набора стандартных кривых анализировали в начале и конце каждой партии анализа образцов крови. Для образцов головного мозга и CSF анализировали одну стандартную кривую вместе с тестируемыми образцами.

Уровни в головном мозге, выраженные в виде соотношения головной мозг/кровь (K_p,brain), измеряли по AUC(головной мозг)/AUC(кровь или плазма) у грызунов после перорального введения. Подобным образом, уровни CSF, выраженные в виде соотношения CSF/кровь (K_p,CSF), определяли по AUC(CSF)/AUC(кровь или плазма). Свободную фракцию тестируемого соединения в биологическом матриксе определяли in vitro анализом связывания в крови и головном мозге.

K_{p,uu brain} и K_{p,uu CSF} рассчитывали по следующим уравнениям:

K_{p,uu brain} = AUC(головной мозг) / AUC(кровь или плазма) × (fu_brain/fu_blood/plasma) и

K_{p,uu CSF} = AUC(CSF) / AUC(кровь или плазма) × (1/fu_blood/plasma).

Как K_{p,uu brain}, так и K_{p,uu CSF} следует считать основными параметрами, измеряемыми и оптимизируемыми при разработке лекарственных средств для CNS (Di L et al., Journal of Medicinal Chemistry [2013], 56: 2-12). K_{p,uu brain}, представляющий собой взаимосвязь между концентрациями несвязанного лекарственного средства в головном мозге и в крови, предсказывает действие лекарства на метастатические опухоли в головном мозге. Лептоменингеальные метастазы (LM) возникают в результате метастатического распространения рака в мягкую и паутинную оболочку мозга, вызывая дисфункцию центральной нервной системы. K_{p,uu CSF} представляет собой распределение лекарственного средства в CSF в сравнении с его распределением в крови, что подразумевает реакцию на лекарственное средство во время лечения лептоменингеальных метастазов. Анализ данных в Таблице 3 для соединений настоящей заявки, а также данных, полученных для нератиниба, демонстрирует превосходящие свойства проницаемости гематоэнцефалического барьера и CSF барьера для соединений по настоящему изобретению по сравнению с нератинибом.

Хотя настоящее изобретение было конкретно продемонстрировано и описано со ссылкой на конкретные воплощения (некоторые из которых являются предпочтительными воплощениями), специалистам в данной области техники будет понятно, что различные изменения в форме и деталях могут быть сделаны без отклонения от замысла и объема настоящего изобретения, раскрытого в данном документе.

Группа изобретений относится к соединению формулы (I)

,

или его фармацевтически приемлемых соли, гидрату, сольвату или стереоизомеру, также относится к фармацевтической композиции для ингибирования HER2, содержащей эффективное количество соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата или стереоизомера, также относится к способу ингибирования HER2, включающему использование соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата или стереоизомера, также относится к способу лечения заболевания, ассоциированного с HER2, у субъекта, включающему введение указанному субъекту эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата или стереоизомера, также относится к фармацевтической комбинации, обладающей ингибирующей активностью в отношении HER2, которая содержит соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват или стереоизомер, также относится к применению соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата или стереоизомера в изготовлении лекарственного средства для лечения заболевания, ассоциированного с HER2, у субъекта. Группа изобретений обеспечивает разработку соединений формулы (I) в качестве ингибиторов HER2. 6 н. и 20 з.п. ф-лы, 3 табл., 31 пр.

1. Соединение формулы (I)

или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват или стереоизомер,

где R₁ представляет собой водород;

R₂ представляет собой галоген или С_1-12алкил;

G представляет собой N;

W представляет собой О;

Y представляет собой связь или С_1-12алкилен,

R₃ представляет собой 6-8-членный насыщенный гетероциклил, где один кольцевой атом заменен гетероатомом, выбранным из азота, который может быть возможно замещен одним или несколькими независимыми заместителями: галоген, дейтерий, С_1-12алкил, С_1-12галогеналкил, или дейтерий-замещенный С_1-12алкил;

i равен 0, 1, 2 или 3 и

каждый R₄ независимо представляет собой галоген или С_1-12алкил;

j равен 0, 1, 2 или 3 и

каждый R₅ независимо представляет собой галоген, амино, С_1-12алкокси или OR₆, который может быть возможно замещен одним или несколькими дейтериями;

R₆ представляет собой 5-членный насыщенный гетероциклил, где один кольцевой атом заменен гетероатомом, выбранным из кислорода;

А представляет собой О;

Е представляет собой

X₁, X₂, Х₃ и Х₄ каждый независимо представляет собой N или CR₈;

Х₅ и Х₆ каждый независимо представляет собой N или CR₈ и Х₇ представляет собой NR₉, где по меньшей мере один из Х₅ и Х₆ представляет собой N; R₈ и R₉ каждый независимо представляет собой водород или С_1-12алкил;

р равен 0, 1, 2 или 3 и

каждый R₇ независимо представляет собой галоген.

2. Соединение по п. 1, где R₃ представляет собой который может быть возможно замещен одним или несколькими независимыми заместителями: галоген, дейтерий, С_1-12алкил, С_1-12галогеналкил, дейтерий-замещенный С_1-12алкил.

3. Соединение по п. 1, где R₃ представляет собой или который может быть возможно замещен одним или несколькими независимыми заместителями: галоген, дейтерий, С_1-12алкил, С_1-12галогеналкил, дейтерий-замещенный С_1-12алкил.

4. Соединение по п. 1, где Y представляет собой связь или C_1-3алкилен.

5. Соединение по п. 1, где Е представляет собой

где Х₂ и Х₃ каждый независимо представляет собой N или CR₈;

Х₆ каждый независимо представляет собой N или CR₈ и Х₇ представляет собой NR₉;

р равен 0, 1, 2 или 3 и

каждый R₇ независимо представляет собой галоген;

R₈ и R₉ каждый независимо представляет собой водород или С_1-12алкил.

6. Соединение по п. 1, где соединение имеет структуру формулы (Ia)

или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват или стереоизомер,

где R₂ представляет собой галоген или С_1-12алкил;

R₁₂, R₁₃ и R₁₄ каждый независимо представляет собой водород, галоген, дейтерий, С_1-12алкил, С_1-12галогеналкил, дейтерий-замещенный С_1-12алкил; R₁₅ представляет собой водород, галоген или С_1-12алкил;

R₁₆ и R₁₇ каждый независимо представляет собой водород, галоген, амино, С_1-12алкокси, или OR₆, который может быть возможно замещен одним или несколькими дейтериями; R₆ представляет собой 5-членный насыщенный гетероциклил, где один кольцевой атом заменен гетероатомом, выбранным из кислорода;

где Е представляет собой

где Х₂ и Х₃ каждый независимо представляет собой N или CR₈;

Х₆ каждый независимо представляет собой N или CR₈ и Х₇ представляет собой NR₉;

р равен 0, 1, 2 или 3 и

каждый R₇ независимо представляет собой галоген;

R₈ и R₉ каждый независимо представляет собой водород или С_1-12алкил.

7. Соединение по п. 6, где R₂ представляет собой С_1-12алкил.

8. Соединение по п. 6, где R₁₂, R₁₃ и R₁₄ каждый независимо представляет собой водород, галоген, дейтерий или С_1-12алкил.

9. Соединение по п. 6, где по меньшей мере один из R₁₃ и R₁₄ представляет собой галоген.

10. Соединение по п. 9, где указанный галоген представляет собой F.

11. Соединение по п. 6, где R₁₆ и R₁₇ каждый независимо представляет собой водород, галоген, амино или С_1-12алкокси.

12. Соединение по п. 11, где R₁₅ представляет собой водород и R₁₆ представляет собой галоген, амино или С_1-12алкокси.

13. Соединение по п. 6, где Е содержит три или два атома N.

14. Соединение по п. 6, где Е представляет собой Х₂ представляет собой CR₈ и R₈ представляет собой водород или С_1-12алкил.

15. Соединение по п. 1, выбранное из группы, состоящей из:

16. Фармацевтическая композиция для ингибирования HER2, содержащая эффективное количество соединения или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата или стереоизомера по любому из пп. 1-15 и фармацевтически приемлемый разбавитель, эксципиент или носитель.

17. Соединение или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват или стереоизомер по любому из пп. 1-15 для применения в качестве лекарственного средства для ингибирования HER2.

18. Способ ингибирования HER2, включающий использование соединения или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата или стереоизомера по любому из пп. 1-15 или фармацевтической композиции по п. 16.

19. Способ лечения заболевания, ассоциированного с HER2, у субъекта, включающий введение указанному субъекту эффективного количества соединения или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата или стереоизомера по любому из пп. 1-15 или фармацевтической композиции по п. 16.

20. Способ по п. 19, где заболевание, ассоциированное с HER2, представляет собой рак, такой как рак молочной железы, рак желудка, колоректальный рак, рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, рак мочевого пузыря, рак яичника, рак легкого, включая немелкоклеточный рак легкого.

21. Способ по п. 20, где заболевание, ассоциированное с HER2, представляет собой рак с метастазами в головной мозг и лептоменингеальными метастазами.

22. Способ по п. 19, где субъект представляет собой теплокровное животное, такое как человек.

23. Способ по любому из пп. 18-22, где HER2 представляет собой мутантный HER2.

24. Способ по любому из пп. 18-23, где указанное соединение или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват или стереоизомер пересекает гематоэнцефалический барьер (ВВВ) субъекта.

25. Фармацевтическая комбинация, обладающая ингибирующей активностью в отношении HER2, которая содержит соединение или его фармацевтически приемлемые соль, гидрат, сольват или стереоизомер по любому из пп. 1-15 и антитело, направленное на HER2, такое как трастузумаб, трастузумаб эмантазин или пертузумаб.

26. Применение соединения или его фармацевтически приемлемых соли, гидрата, сольвата или стереоизомера по любому из пп. 1-15 в изготовлении лекарственного средства для лечения заболевания, ассоциированного с HER2, у субъекта.