СПОСОБ ПРОГНОЗА ВЕРОЯТНОСТИ НАСТУПЛЕНИЯ САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ БЕРЕМЕННОСТИ У ПЕРВОРОДЯЩИХ ПАЦИЕНТОК ПОЗДНЕГО РЕПРОДУКТИВНОГО ВОЗРАСТА Российский патент 2022 года по МПК G01N33/58 C12Q1/6806 C12Q1/6827 C12Q1/686 

Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству и гинекологии и касается способа прогнозирования вероятности наступления самостоятельной беременности у первородящих женщин позднего репродуктивного возраста.

Тенденция позднего материнства является одной из проблем экономически развитых стран, так как реализация репродуктивной функции отодвигается на второй план [1]. При планировании беременности в позднем репродуктивном возрасте, после 35-37 лет, женщины используют вспомогательные репродуктивные технологии (ВРТ) [2].

По данным Европейского общества репродукции человека и эмбриологии процент пациенток клиник ВРТ в возрасте 35-39 лет составляет приблизительно 36%, в возрасте 40 лет и старше - 17% [3].

По данным Российской Ассоциации репродукции человека за 2018 год общая доля пациенток позднего репродуктивного возраста (старше 35 лет) составляет около 40%, с тенденцией к увеличению данной группы женщин, обращающихся в клиники ВРТ для лечения бесплодия [4].

Так как Уральский регион является йододефицитным, соответственно, эндемическим районом по заболеваниям щитовидной железы [5]. Поэтому болезни щитовидной железы у возрастных пациенток и пациенток оптимального возраста возникают довольно часто, но у пациенток основной группы достоверно чаще, чем в контрольной группе - 34,6% и 16,6% соответственно. (p < 0,05). Это подтверждает, что заболевания щитовидной железы, в том числе гипотиреоз, является одной из причин привычного невынашивания беременности.

Репродуктивная система женщины является наиболее чувствительной к влиянию техногенного загрязнения окружающей среды. Генетические различия в экспрессии и активности ферментов биотрансформации ксенобиотиков связаны с наличием полиморфных аллелей, кодирующих эти ферменты. При наличии функционально ослабленных вариантов генов метаболизма ксенобиотиков увеличивается риск возникновения некоторых частых мультифакториальных заболеваний [6]. Одним из основных генов, отвечающих за эффективность антиоксидантой защиты организма, является SOD2. Полиморфизм SOD2 C47T (rs4880) приводит к замене аминокислоты валин на аминокислоту аланин, изменяет вторичную структуру белка и может влиять на перенос фермента из цитоплазмы в матрикс митохондрий. По данным разных авторов, у носителей Т/С и Т/Т-вариантов активность фермента выше на 33% по сравнению с носителями С/С-варианта [7,8]. Изучена роль полиморфизма SOD2 в развитии ранних репродуктивных потерь: установлено, что носительство аллельного варианта СС ассоциировано с риском неразвивающейся беременности в I триместре [9].

В связи с этим в современных условиях единственным путём успешного планирования беременности является ранняя диагностика и, в случае необходимости, принятие решения о необходимости применения программ ВРТ.

Аналогами предлагаемого изобретения послужили описанные в литературе методы диагностики, которые различаются в зависимости от необходимых критериев и применяемых методов. Запатентованных аналогов не обнаружено.

Недостатком предложенного изобретения является отсутствие детального рассмотрения наличия гипотериоза, так как необходимо учитывать его генез и степень тяжести, по соотношению гормонов щитовидной железы.

Технический результат - разработка способа прогнозирования вероятности наступления самостоятельной беременности у первородящих женщин позднего репродуктивного возраста.

Способ осуществляется следующим образом: у женщин на предгравидарном этапе проводится сбор акушерско-гинекологического анамнеза, выясняется наличие гипотериоза, проводится генетическое обследование на наличие мутаций в гене SOD2 C47T (rs4880).

Для анализа полиморфизма SOD2 C47T (rs4880) у всех обследуемых на основе письменного информированного согласия проводится забор венозной крови в пробирки с EDTA в качестве антикоагулянта. Геномную ДНК выделяют набором реагентов для выделения нуклеиновых кислот из крови (ДНК-Кровь-М) (ООО» ТестГен», Россия). На полученных образцах проводят полимеразную цепную реакцию (ПЦР) в режиме «реального времени» с использованием комплектов реагентов и протокола для определения генетических полиморфизмов SOD2 C47T (rs4880) (ООО» ТестГен», Россия). Регистрация и учет результатов проводился автоматическим программным обеспечением для детектирующего амплификатора ДТ-96 (ООО «НПО ДНК-технология», Россия).

На основании полученных информативных показателей, было разработано решающее правило прогноза, позволяющее вычислить прогностический индекс E по формуле:

где:

– генотип SOD2 C47T CC (индикаторная переменная {0,1});

- генотип SOD2 C47T_T (индикаторная переменная {0,1});

– отягощённый акушерско-гинекологический анамнез (индикаторная переменная {0,1});

- наличие гипотиреоза (индикаторная переменная {0,1});

Если E<0, то прогнозируют высокую вероятность самостоятельного наступления беременности. Если E>0, то прогнозируют низкую вероятность наступления самостоятельной беременности.

Статистическую обработку материала проводили на IBM PC с использованием программ Microsoft Exel 2007 для Windows 7 и IBM SPSS Statistics 22. Полученные результаты обработаны методом вариационной статистики.

Специфичность предложенного метода составила 73%, чувствительность 95%, эффективность 80,7%.

Клинические примеры реализации способа прогноза вероятности наступления самостоятельной беременности у первородящих пациенток позднего репродуктивного возраста.

Пример № 1. Пациентка Ч. 36 лет, без отягощенного акушерского-гинекологического анамнеза, планирует первую беременность. Имеется субклинический гипотиреоз, медикаментозная компенсация. После проведения генетического консультирования и исследования методом ПЦР в режиме реального времени у пациентки выявлено: наличие генотипа TT по полиморфизму C47T гена SOD2.

E= - 2,31 × 0 - 5,985 × 1 + 10,456 × 0 + 1,94 × 1 - 4,505 = -8,55

E<0, т.е. у пациентки высокая вероятность спонтанного наступления беременности. В течение 2 месяцев у пациентки наступила самостоятельная беременность.

Пример № 2. Пациентка Д. 39 лет. В анамнезе у пациентки прерывание беременности по желанию 10 лет назад, эпизод вторичного бесплодия в течение 3 лет. Гипотиреоза нет. По результатам генетического консультирования и исследования методом ПЦР в режиме реального времени у пациентки выявлено: наличие генотипа CC по полиморфизму C47T гена SOD2.

E= - 2,31 × 1 - 5,985 × 0 + 10,456 × 1 + 1,94 × 0 - 4,505 = 3,641

E>0, т.е. у пациентки низкая вероятность самостоятельного наступления беременности. Пациентке было рекомендовано посещение клиники ВРТ.

Таким образом, предложенный способ позволяет на данных анамнеза и генетического исследования прогнозировать возможность самостоятельного наступления беременности и оптимизировать процесс направления пациенток позднего репродуктивного возраста на ВРТ.

Данный способ может быть использован врачами акушерами-гинекологами, генетиками женских консультаций, перинатальных центров.

Источники информации

1. Ермоленко К.С., Радзинский В.Е., Рапопорт С.И. Современное состояние проблемы реализации фертильной функции женщин позднего репродуктивного возраста. Клиническая медицина. – 2016. ─ №94 (1). – С.10-15.

2. Долгушина Н.В., Коротченко О.Е., Бейк Е.П., Абдурахманова Н.Ф., Ильина Е.О., Кулакова Е.В. Клинико - экономический анализ эффективности преимплантационного генетического скрининга у пациенток позднего репродуктивного возраста. Акушерство и гинекология. ─ 2017. ─ №11. ─ С.56-61.

3. European Society of Human Reproduction and Embryology ─ ESHRE, 2017 file:///C:/Users/MatuzkovaIV/Downloads/FOR_Sept17_LR.pdf

4. Регистр ВРТ. Отчет за 2018 г. Российская Ассоциация Репродукции Человека: [Электронный ресурс]. ─ Режим доступа: http://www.rahr.ru, свободный (дата обращения: 07.07.2021).

5. Мельниченко Г.А., Трошина Е.А., Платонова Н.М. и др. Йододефицитные заболевания щитовидной железы в Российской Федерации: современное состояние и проблемы. Аналитический обзор публикаций и данных официальной государственной статистики (Росстат), Consillium Medium, 2019; 21 (4): ─ С.14-20.

6. Ажибеков С.А., Путилова Н.В., Третьякова Т.Б., Пестряева Л.А. Влияние генов энергетического обмена на метаболизм липидов при беременности, осложненной формированием синдрома задержки роста плода. Российский вестник акушера-гинеколога. 2017; 6: 9-13.

7. Морозова К.В., Луценко Н.Н. Роль полиморфизма генов  антиоксидантной системы в генезе невынашивания беременности. Акушерство, гинекология и репродукция. – 2015. − №2. – С.54-61.

8. Hu, X.-Q.; Zhang, L. Hypoxia and Mitochondrial Dysfunction in Pregnancy Complications. Antioxidants. −  2021. − №10. – С.405. https://doi.org/10.3390/antiox10030405

9. Minhui Lu, Amanda Nancy Sferruzzi-Perri, Placental mitochondrial function in response to gestational exposures, Placenta, Volume 104. – 2021. − Pages 124-137, ISSN 0143-4004, https://doi.org/10.1016/j.placenta.2020.11.012.

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для прогноза вероятности наступления самостоятельной беременности у первородящих пациенток позднего репродуктивного возраста. Учитывают наличие генотипа CC и аллеля T гена SOD2 C47T, отягощённый акушерско-гинекологический анамнез и наличие гипотиреоза. Вычисляют прогностический индекс E по формуле: E = -2,31 × х₁ - 5,985 × х₂ + 10,456 × х₃ + 1,94 × х₄ - 4,505. Если E<0, то прогнозируют высокую вероятность самостоятельного наступления беременности. Если E>0, то прогнозируют низкую вероятность наступления самостоятельной беременности. Способ обеспечивает возможность прогнозирования вероятности наступления самостоятельной беременности у первородящих женщин позднего репродуктивного возраста. 2 пр.

Способ прогноза вероятности наступления самостоятельной беременности у первородящих пациенток позднего репродуктивного возраста, заключающийся в том, что вычисляют прогностический индекс E по формуле:

E = -2,31 × х₁ - 5,985 × х₂ + 10,456 × х₃ + 1,94 × х₄ - 4,505

где:

х₁ – генотип SOD2 C47T CC – индикаторная переменная, 0,1,

х₂ – генотип SOD2 C47T _T – индикаторная переменная, 0,1,

х₃ – отягощённый акушерско-гинекологический анамнез – индикаторная переменная, 0,1,

х₄ – наличие гипотиреоза – индикаторная переменная, 0,1,

константа = -4,505,

если E<0, то прогнозируют высокую вероятность самостоятельного наступления беременности, если E>0, то прогнозируют низкую вероятность наступления самостоятельной беременности.