СРЕДСТВО, ПОВЫШАЮЩЕЕ КОНЦЕНТРАЦИЮ ФЕРРИТИНА В СЫВОРОТКЕ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА Российский патент 2023 года по МПК A61J7/00 A61K31/205 A61P7/00 

Изобретение относится к медицине и фармацевтике и касается средства, повышающего уровень концентрации ферритина в сыворотке крови человека.

Ферритин (Фе) - это железосодержащий α₂Н-глобулин, молекулярная масса которого составляет около 450 кД. Он представляет растворимый в воде комплекс гидроксифосфата железа с белком апоферритином. Наибольшее его количество находится в клетках печени, селезенки, костного мозга и ретикулоцитах, где наиболее интенсивно проходят процессы синтеза, созревания и деградации эритроцитов. Фе активно участвует в метаболизме и перераспределении железа в организме. Способность синтезировать Фе появилась у клеток на ранних этапах эволюции. Характерные аналоги ферритина найдены у грибов, бактерий, растений [см. Ragland М, Briat JF, Gagnon J. Evidence for conservation of ferritin sequences among plants and animals and for a transit peptide in soybean. The Journal of biological chemistry. 1990; 265, 30: 18339-18344.; Theil E.C. Ferritin: Structure, gene regulation, and cellular function in animals, plants, and microorganisms. Ann Rev Biochem. 1987; 56: 289-315]. У позвоночных защита от токсического эффекта железа и активных форм кислорода осуществляется двумя железосвязьшающими белками: внеклеточными трансферринами и внутриклеточными ферритинами. Оба сохраняют железо в безопасной окисленной форме Фе (III), которая не катализирует продукцию свободных радикалов. Фе содержит 15-20% общего количества железа в организме. Концентрация ферритина при рождении повышенная - до 600 нг/мл, в течение нескольких месяцев она снижается примерно до 30 нг/мл, после чего начинает медленно возрастать и к 24-25 годам принимает значения, сохраняющиеся до старости. В норме для взрослых концентрация ферритина в сыворотке составляет 20-350 нг/мл [см. Трубников Г.А.. - Иммунохимические маркеры воспаления и опухолей в клинической пульмонологии // Астрахань: Астраханская медицинская академия. - 2000. - 209 с.]. У женщин в постменопаузе (обычно 48-50 лет) достигает средних величин, характерных для мужчин [см. Сухарев А.Е. - Тканевые и сывороточные острофазовые белки в клинической оценке неспецифических заболеваний и рака легких // Автореф. дис… док. мед. наук. - 1991. - 28 с.]. Падение концентрации ниже 10 нг/мл свидетельствует о развитии железодефицитной анемии, в то время как при избыточном накоплении железа концентрация ферритина может возрастать до нескольких тысяч нг/мл [см. Complementary Feeding And The Control Of Iron Deficiency Anemia In The Newly Independent States Presentation By WHO At A WHO/Unicef Consultation Geneva, Switzerland 4 February (http://www.cdc.gov/mmwr/distrnds.html)]. Различают тканевой и сывороточный Фе [см. Caskey Y., Iones С., Muller Y.E. et. al. Human Ferritin gene in assigned to chromosome 19 //Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - Vol.80. - Р .482-486]. Тканевой Фе синтезируется клетками различных органов, сывороточный Фе секретируется клетками печени и ретикулоэндотелиальной системы. В целом роль сывороточного Фе остается неясной.

В последние годы обнаружены физиологические функции ферритина, не связанные непосредственно с обменом железа. Оказалось, что Н-изоформы ферритина могут играть роль супрессоров в пролиферации клеток крови [см. Смирнова Л.А., Марцев С.П. Ферритин и его клиническое значение // «Медицинские новости» Журнал, Минск. - 1996. - №7. - С. 11-15]. Процессы миелосупрессии (подавления пролиферации миелоидных клеток) коррелируют с активацией синтеза Н-субъединиц на уровне генома [см. Broxmeyer Н.Е., Gentle P., Cooper S. // Blood Cells. - 1984. - V. 10. - P. 397-400; Broxmeyer H.E., Levi S., Arosio P. // Blood. - 1986. - V. 68. - P. 1257-1259; Broxmeyer H.E., Cooper S., Levi S., Arosio P. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 1991. - V. 88. - P. 770-774]. Н-ферритин способен ингибировать пролиферацию миелоидных и лимфоидных клеток, причем активация его синтеза может быть связана с попыткой организма подавить их злокачественный рост [см. Broxmeyer Н.Е., Williams D.E., Geissler K. et al. // Blood. - 1989. - V. 73. - P. 74-79; Coccia E.M. // Blood. - 1995. - V. 86. - Р. 1570-1578]. Установлено, что механизм подавления пролиферации клеток прямо связан с ферроксидазной функцией ферритина, которая приводит к формированию цитотоксических радикалов кислорода. По-видимому, цитотоксический эффект ферритина распространяется на многие типы клеток, но зарегистрирован пока лишь на некоторых из них, в частности на миелоидных клетках, предшественниках гранулоцитов, и моноцитах. Ингибирование осуществляется на уровне S-фазы клеточного цикла [см. Смирнова Л.А., Марцев С.П. Ферритин и его клиническое значение // «Медицинские новости» Журнал, Минск. - 1996. -№7. - С. 11-15]. Известно, что цитотоксический эффект характерен и для туберкулеза легких [см. Сухарев А.Е. - Тканевые и сывороточные острофазовые белки в клинической оценке неспецифических заболеваний и рака легких // Автореф. дис... док. мед. наук. - 1991. - 28 с.; Трубников Г.А. -Иммунохимические маркеры воспаления и опухолей в клинической пульмонологии // Астрахань: Астраханская медицинская академия. - 2000. - 209 с.]. Следовательно, чем сильнее выражен цитотоксический эффект, тем выше концентрация Фе, поскольку Фе обладает цитопротекторными свойствами. Таким образом, можно сделать вывод, что высокая концентрация Фе при патологических воспалительных состояниях говорит о высоком уровне иммунитета. А если концентрация Фе при туберкулезе низкая или незначительно повышена, то можно говорить о низком иммунитете организма больного.

Наиболее близким средством, повышающим уровень концентрации сывороточного Фе (Н-изоформы) в организме человека различными химическими соединениями, не связанными непосредственно с обменом железа является препарат трекрезан, содержащий оксиэтиламмония метилфеноксиацетат, бета-каротин, альфа-токоферол, чеснок и лактозу, модулирующий концентрацию ферритина в сыворотке крови человека (Патент RU №2486895, 2013). При этом лечение трекрезаном проводится в течение первых 4 недель, а затем аналогичным повторным курсом на 4-ом месяце лечения базисными лекарственными средствами. Однако при этом способе лечения повышение уровня Фе в крови происходит недостаточно эффективно. Предлагается в качестве средства повышающего количество ферритина в сыворотке крови человека биологически активная добавка (БАД) трекревит, содержащая оксиэтиламмония метилфеноксиацетат, витамины: А, Д₂, Е, B₁, В₂, В₅, В₉, В₁₂, РР, Н, С, кальций, магний, железо, селен, цинк, фтор, йод.

Трекревит - это биологически активная пищевая добавка (см. http://siultra-r.narod.ru/bad_ser.files/bad.htm), содержащая оксиэтиламмония метилфеноксиацетат, витамины: А, Д₂, Е, В₁, В₂, В₅, В₉, В₁₂, РР, Н, С, кальций, магний, железо, селен, цинк, фтор, йод, дефицит которых, по данным института питания РАМН, испытывает практически каждый житель России.

Согласно постановлению главного санитарного врача РФ №50 от 17.04.2003 г. о необязательности точного количественного состава биологически активных добавок, информация о данной БАД содержит ингредиентный состав в порядке убывания в весовом выражении.

Трекревит особенно эффективен во время болезней и в период выздоровления, при интенсивных физических нагрузках, для растущего организма (детям с 12 лет), для предупреждения преждевременного старения, для лиц, проживающих в экологически неблагоприятных районах и испытывающих недостаток витаминов и минеральных веществ, при несбалансированном рационе.

Технический результат - повышение концентрации ферритина в сыворотке крови человека путем использования в качестве активатора Фе биологически активной добавки (БАД) трекревит. Это позволяет расширить область ее применения и улучшить результат лечения.

Технический результат достигается тем, что применяют биологически активную добавку, содержащую оксиэтиламмония метилфеноксиацетат, витамины: А, Д₂, Е, B₁, В₂, В₅, В₉, B₁₂, РР, Н, С, кальций, магний, железо, селен, цинк, фтор, йод, в качестве средства повышающего концентрацию ферритина в сыворотке крови человека, по 2 таблетки 2 раза в день во время еды, в течение первых 4 недель, а затем аналогичным повторным курсом на 4-ом месяце лечения базисными лекарственными средствами. При этом трекревит больные получают в первый и четвертый месяцы лечения.

Свойство трекревита влиять на функциональную систему поддержания уровня ферритина в сыворотке крови больных туберкулезом легких в литературе не описано.

Эффективное количество трекревита зависит от массы тела, сопутствующих патологий и предпочтительно составляет от 200 до 400 мг в сутки. Курс лечения до 4 недель.

Использование трекревита в предлагаемом способе позволяет повысить уровень Фе в сыворотке крови у больных туберкулезом легких.

Примеры использования предлагаемой БАД трекревит для повышения уровня ферритина в сыворотке крови человека.

Перед началом эксперимента определяют концентрацию Фе в сыворотке крови у 35-ти практически здоровых людей (доноры- добровольцы), в возрасте от 30 до 55 лет (мужчины - 25-40 лет, женщины периода менопаузы -50-55 лет). Средняя концентрация Фе составляет у доноров - 243,43±25,5 нг/мл. Все доноры на день обследования имеют письменное заключение врача о состоянии своего здоровья - «практически здоровые», у женщин методом гинекологического обследования официально устанавливается период менопаузы.

Объектом исследования являются первично больные в возрасте от 35 до 55 лет (средний возраст 42,1±2,1 года) с диагнозом - инфильтративный туберкулез верхней доли правого (левого) легкого. Поскольку именно эта форма туберкулеза легких является наиболее часто встречающейся, для наблюдений выбирают пациентов с данным диагнозом. На рентгенограммах всех больных отмечаются негомогенные затемнения с нечеткими контурами диаметром более 1 см. При поступлении у всех больных определяют концентрация сывороточного Фе (для эксперимента выбирают больных с концентрацией сывороточного Фе ниже общепринятой нормы - до 30 нг/мл) [см. Смирнова Л.А., Марцев С.П. Ферритин и его клиническое значение // Ж. «Медицинские новости», Минск. - 1996. - №7. - С. 11-15], т.е. с ослабленным уровнем иммунитета.

Всего обследовано 32 человека, у которых средняя концентрация Фе (М±m) до лечения составляет 24,4±1,2 нг/мл. Больных подразделяют на следующие группы:

- контрольную (16 человек, средняя концентрация Фе в группе -25,5±1,8 нг/мл), получавшую только базисные средства (Изониазид 0,6 г + рифампицин 0,6 г + этамбутол 2,0 г + пиразинамид 2,0 г на протяжении 6 месяцев лечения в стационаре);

- основную - добровольцы (16 человек, средняя концентрация Фе 24,7±1,9 нг/мл), выразившие желание принимать трекревит в дозе 400 мг/сутки в течение 4-х недель, а затем аналогичным повторным курсом на 4-м месяце лечения во время еды в дополнение к лечению базисными средствами.

Уровень Фе в сыворотке крови определяют методом иммуноферментного анализа (ИФА), с использованием коммерческих наборов производства ЗАО «Вектор-Бест-Юг» г. Ростов-на-Дону.

Полученные результаты обрабатывают статистически с помощью программ "Microsoft Excel" и "Biostat" с использованием параметрического критерия (t-критерия Стьюдента) и непараметрического (U-критерия Манна-Уитни) с учетом малых выборок. Данные представляют в виде средних и стандартных значений ошибки - М и m, соответственно. Для относительных величин рассчитывают 95% процентные доверительные интервалы. Достоверными считают различия при р≤0,05 (см. кн. - Петри А., Сэбин К. Наглядная медицинская статистика / Пер. с англ. под ред. В.П. Леонова; 2-е изд., перераб. и доп. М: ГЭОТАР-Медиа, 2009. 168 с.).

Результаты.

Установлено, что у больных основной группы применение БАД трекревит в дополнение к базисной химиотерапии изониазидом, рифампицином, этамбутолом и пиразинамидом сопровождается достоверным повышением уровня Фе сыворотки крови по сравнению с контролем (таблица 1).

В контрольной группе средняя концентрация Фе значительно ниже, чем в основной группе. При комбинированной схеме лечения, при длительном дополнительном приеме - трекревита, не отмечаются увеличения побочных эффектов базисной терапии ПТП. При этом особое значение приобретает известный факт, что практически все ПТП в той или иной степени токсичны Matejny, В. Hepatotoxicita u chorych s pl'ucnou tuberkulozou liecenych kombinaciou antitubekulotiks pyrazinamidom a bez pyrazinamidu / B. Matejny. Stud. Pneumol. Phfiseol. Cech. - 1986. - Vol. 46, №112. - P. 23-31). По концентрации сывороточного Фе можно судить о состоянии иммунной системы у данной категории больных - чем выше концентрация Фе в начале заболевания, тем выше иммунные силы организма. Одновременно с повышением концентрации Фе в основной группе больных отмечается в дальнейшем ускорение рассасывания инфильтратов, рентгенологически - более раннее рубцевание легочной ткани, повышается аппетит, возрастает масса тела, улучшается функция печени и раньше нормализуется температура тела. Следовательно, комплексное соединение - трекревит, обладающее впервые установленным, новым свойством - модулировать образования ферритина в организме является более эффективным, чем аналог трекрезан. При этом полученные данные можно рассматривать с разных позиций. К примеру - с точки зрения способа лечения больных туберкулезом; или с точки зрения применения трекревита для лечения больных туберкулезом легких; или с точки зрения лабораторного тестирования состояния больных туберкулезом; или с точки зрения состава для комбинированного лечения больных туберкулезом; а также с точки зрения выявленных новых свойств известного соединения.

Таким образом, комбинированное лечение с приемом биологически активной добавки «Трекревит» в дополнение к базисной химиотерапии больных туберкулезом легких противотуберкулезными средствами позволяет повысить эффективность проводимого лечения и улучшить качество жизни больных. Учитывая хорошую совместимость трекревита с базисными противотуберкулезными препаратами, он может быть включен и в комплексные реабилитационные программы восстановительной медицины для определенной группы больных.

ИСТОЧНИКИ ИНФОРМАЦИИ ПРИНЯТЫЕ ВО ВНИМАНИЕ

1. Ragland М, Briat JF, Gagnon J. Evidence for conservation of ferritin sequences among plants and animals and for a transit peptide in soybean. The Journal of biological chemistry. 1990; 265, 30: 18339-18344.

2. Theil E.C. Ferritin: Structure, gene regulation, and cellular function in animals, plants, and microorganisms. Ann Rev Biochem. 1987; 56: 289-315.

3. Трубников Г.Л. - Иммунохимические маркеры воспаления и опухолей в клинической пульмонологии // Астрахань: Астраханская медицинская академия. - 2000. - 209 с.

4. Сухарев А.Е. - Тканевые и сывороточные острофазовые белки в клинической оценке неспецифических заболеваний и рака легких // Автореф. дис... док. мед. наук. - 1991. -28 с.

5. Complementary Feeding And The Control Of Iron Deficiency Anemia In The Newly Independent States Presentation By WHO At A WHO/Unicef Consultation Geneva, Switzerland 4 February (http://www.cdc.gov/mmwr/distrnds.html)

6. Caskey Y., Iones C, Muller Y.E. et. al. Human Ferritin gene in assigned to chromosome 19 // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - Vol.80. - P. 482-486

7. Смирнова Л.А., Марцев С.П. Ферритин и его клиническое значение // «Медицинские новости» Журнал, Минск. - 1996. - №7. - С. 11-15.

8. Broxmeyer Н.Е., Gentle P., Cooper S. // Blood Cells. - 1984. - V. 10. - P. 397-400.

9. Broxmeyer H.E., Levi S., Arosio P. // Blood. - 1986. - V. 68. - P. 1257-1259.

10. Broxmeyer H.E., Cooper S., Levi S., Arosio P. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 1991. - V .88. - P. 770-774.

11. Broxmeyer H.E., Williams D.E., Geissler K. et al. // Blood. - 1989. - V. 73. - P. 74-79; Coccia E.M.//Blood. - 1995. - V. 86. - P. 1570-1578.

12. Петри А., Сэбин К. Наглядная медицинская статистика / Пер. с англ. под ред. В.П. Леонова; 2-е изд., перераб. и доп. М: ГЭОТАР - Медиа, 2009. 168 с.

13.

14. Matejny, В. Hepatotoxicita u chorych s pl'ucnou tuberkulozou liecenych kombinaciou antitubekulotiks pyrazinamidom a bez pyrazinamidu / B. Matejny. Stud. Pneumol. Phfiseol. Cech.-1986.-Vol. 46, №112. - P. 23-31.

15. Расулов M.M., Кузнецов И.А., Стороженко П.А., Воронков М.Г., и соавт.- Средство, модулирующее концентрацию ферритина в сыворотке крови - Патент RU №2486895 С1, 2013 г.

Изобретение относится к области фармацевтики и медицины, а именно к применению биологически активной добавки, содержащей оксиэтиламмония метилфеноксиацетат, витамины: А, Д₂, E, B₁, B₂, В₅, В₉, В₁₂, РР, Н, С, кальций, магний, железо, селен, цинк, фтор, йод, в качестве средства, повышающего концентрацию ферритина в сыворотке крови, по 2 таблетки 2 раза в день во время еды в течение первых 4 недель, а затем аналогичным повторным курсом на 4-м месяце лечения базисными лекарственными средствами. Изобретение обеспечивает повышение концентрации ферритина в сыворотке крови человека. 1 табл.

Применение биологически активной добавки, содержащей оксиэтиламмония метилфеноксиацетат, витамины: А, Д₂, E, B₁, B₂, В₅, В₉, В₁₂, РР, Н, С, кальций, магний, железо, селен, цинк, фтор, йод, в качестве средства, повышающего концентрацию ферритина в сыворотке крови, по 2 таблетки 2 раза в день во время еды в течение первых 4 недель, а затем аналогичным повторным курсом на 4-м месяце лечения базисными лекарственными средствами.