Способ получения инъекционной фармацевтической композиции для животных на основе метилурацила (диоксометилтетрагидропиримидина) Российский патент 2023 года по МПК A61K31/194 A61K31/505 A61K31/7072 A61K47/22 A61K9/08 A61P1/16 

Изобретение относится к области фармацевтики и может быть использовано при комплексном лечении заболеваний различного генеза в ветеринарной медицине для стимуляции метаболизма.

Известен препарат Метилурацил мазь для местного и наружного прим. 10%: 25 г, 30 г или 50 г банки или тубы (рег. №: ЛП-005176 от 19.11.18 - https://www.vidal.ru/drugs/methyluracil_ointment_10_31114)

Иммуностимулирующее средство. Способствует нормализации обмена нуклеиновых кислот, ускоряет процессы клеточной регенерации в ранах, ускоряет рост и грануляционное созревание ткани и эпителизацию (в т.ч. в быстропролиферирующих клетках слизистой оболочки ЖКТ), стимулирует эритро- и лейкопоэз, клеточные и гуморальные факторы иммунитета. Обладает анаболической активностью, противовоспалительным действием. При наружном применении оказывает также фотопротекторное действие.

Применение метилурацила наружно не оказывает необходимого терапевтического эффекта на весь организм животного из-за строго наружного применения. Недостатком препарата является невозможность изготовления инъекционного препарата из-за его очень низкой растворимости в воде. Использование мази приводит только к наружному результату.

Известно применение метилурацила в таблетированной форме - Метилурацил-RENEWAL (ЛС-002574 от 25.02.11 https://www.eapteka.ru/goods/id229428/?utm_referrer=https%3a%2f%2fwww.google.com%2f). Обладает анаболической активностью. Оказывает гемопоэтическое, лейкопоэтическое, иммуностимулирующее, противовоспалительное действие. Нормализуя нуклеиновый обмен, ускоряет процессы регенерации в ранах, ускоряя рост и грануляционное созревание ткани и эпителизацию (в том числе в быстропролиферирующих клетках слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта), стимулирует эритро- и лейкопоэз, клеточные и гуморальные факторыиммунитета.

Применение таблетированной формы препаратав ветеринарии затруднительно из-за крупных размеров таблеток и трудности введения животному, поэтомунужный терапевтический эффект не достигается из-за низкой биодоступности действующего вещества. Так как препарат не растворяется в воде. Это является основным недостатком препарата.

Известен препарат, выбранный в качестве прототипа Метилурацил (3аявка на изобретение №2016143952 А от 08.11.2016, МПК C07D 239/00, Древко Я.Б., Волков А.А., Староверов С.А., Козлов С.В., опубликов. 08.05.2018).

Известный метилурацил незначительно растворим в воде (степень растворимости 0,9%), и органических растворителях, что и обуславливает отсутствие инъекционных препаратов на его основе.

Увеличение биодоступности достигается за счет использования его в композиции с 2-пирролидоном и ПАВ. Причем в качестве ПАВ применяются: ТВИН-80, или кремофор А-25, или кремофор EL-20, которые при внутривенном введении обладают аллергизирующим действием.

Кроме того, препарат обладает низкой стабильностью, что приводит к выпадению нерастворимого осадка.

Стимуляторы метаболизма предназначены для нормализации функций организма, ускорения регенерации и восстановления органов и тканей. Метилурацил способствует нормализации обмена нуклеиновых кислот, ускоряет процессы клеточной регенерации в ранах, ускоряет рост и грануляционное созревание ткани и эпителизацию (в том числе в быстропролиферирующих клетках слизистой оболочки ЖКТ), стимулирует эритро- и лейкопоэз, клеточные и гуморальные факторы иммунитета. Обладает анаболической активностью, По химическому строению метилурацил относят к соединениям пиримидинового ряда. Препараты на основе метилурацила стимулируют метаболизм, клеточный и гуморальный иммунитет, эритро- и лейкопоэз, ускоряет процессы регенерации ткани, нормализует процессы нуклеинового обмена в организме. Кроме того, метилурацил оказывает противовоспалительное действие, поскольку обладает способностью ингибировать протеолитические ферменты. Данный препарат эффективен при алиментарной и токсической аллергии, агранулоцитарной анемии, хроническом бензольном отравлении, лейкопении, злокачественных новообразованиях, при радиотерапии и других состояниях, сопровождающихся лейкопенией, тромбоцитопенией. Назначают метилурацил также при лечении ожогов и переломах костей. Метилурацил эффективен при лечении язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки, хроническом гастрите, гепатите. Метилурацил положительно влияет на организм животных, стимулируя регенераторные процессы в органах и тканях на молекулярном, субклеточном, клеточном, тканевом и органном уровнях усилением лейко- и эритропоэза, противовоспалительным действием, улучшением фагоцитоза, снижением болевых ощущений, адаптогенным действием, способностью вступать в синергизм с антибиотиками и усиливать их действие.

Метилурацил эффективен в гастроэнтерологии при терапии разных форм язв практически всех отделов ЖКТ, чтопозволяет применять его в течение длительного времени для стимуляции лейкопоэза, эитропоэза и синтеза гемоглобина. (Ноздрин В.И. Морфометрическая характеристика эпидермиса крыс в условиях длительного воздействия 6-метилурацила/ В.И. Ноздрин, Т.А. Белоусова, А.Н. Яцковский // Морфология. - 2000 - Т. 117, №3 - С. 90-91.)

Комбинированное использование метилурацила и антибиотиков дает хороший результат при терапии кожного лейшманиоза. Прекращались воспалительные процессы, более быстро происходило рубцевание кожи без заметных рубцовых проявлений. Наличие фотозащитного эффекта делает перспективным применение данного вещества для профилактики фотодерматозов. Для хирургического использования метилурацил применяется для лечения ожогов различной степени и генеза, а также ран.

Технической задачей является получение метилурацила (2,4-диоксо-6-метил-1,2,3,4-тетрагидропиримидин), полностью растворимого в воде, что позволяет применять его в качестве инъекционной формы, в том числе и при внутривенном введении из-за отсутствия в композиции кремофор А-25, или кремофор EL-20, вызывающих аллергические реакции путем применения композиции метилурацила с метилпирролидоном. Заявляемая инъекционная форма метилурацила обеспечивает терапевтическую активность и биодоступность фармацевтической композиции на основе диоксометилтетрагидропиримидина и может быть рекомендована к применению в ветеринарной медицине

Техническая задача решается тем, что в известном способе получения метилурацила характеризующимся в том, что для получения 100 мл композиции берут препарат метилурацил и составляющие компоненты в виде 2-пирролидона, поверхностно активных веществ ТВИН 80, Кремофор А25, Кремофор EL, поливинилпирролидон, а также воду, смесь компонентов перемешивают при температуре 50°С до полного растворения всех компонентов, причемчерез 15 минут после растворения добавляется дистиллированная вода до 100 мл, в качестве компонентов используют метилпирролидон как органический растворитель и янтарную кислоту для нормализации рН, в следующем соотношении компонентов, мас.%

Метилурацил 0,5-2,05 Метилпирролидон 9,0-70,0 Янтарная кислота 0,4-2,0 Дистиллированная вода остальное.

Заявляемый препарат использовался для лечения острого токсического гепатита мышей.

Метилурацил эффективен при лечении экспериментального гепатита. При проведении эксперимента было сформировано 4 группы экспериментальных животных (белые нелинейные мыши) по 10 голов в каждой (таблица 1). Для моделирования экспериментального поражения печени был использован четыреххлористый углерод как эффективный токсикологический агент, который, в зависимости от дозы, продолжительности воздействия, или времени наблюдения, вызывает множество эффектов, которые в целом являются токсичными и обозначаются общим термином CCl4. При низких дозах четыреххлористого углерода преобладают переходные эффекты, такие как потеря ионов кальция клетками (Са2 + секвестр), нарушение липидного гомеостаза, выделение цитокинов и апоптоз, с последующей регенерацией.

Для провокации острого токсического гепатита в группах экспериментальных животных объем четыреххлористого углерода вводили в 1/16 от летальной дозы. При этом мышам в 1-3 группах внутрибрюшинно вводили 50%-ный раствор четыреххлористого углерода на оливковом масле в объеме 1,22 мл/кг живой массы. Эксперимент проводили в течение 14 дней. Лечение животных 1-й группы не проводили (положительный контроль). Второй группе животных проводили терапию гепатита с использованием заявляемой фармкомпозиции в дозе 100 мг/кг. Препарат вводили ежедневно со второго по тринадцатый день. Третьей группе животных проводили терапию гепатита препаратом прототипом раствором на основе метилурацила, уравновешенным по концентрации метилурацила с заявляемой фармкомпозицией, применяемой во второй группе. Препарат вводили со второго дня ежедневно до конца эксперимента. Четвертой группе фоновой инъекции с четыреххлористым углеродом и препаратом не проводились (отрицательный контроль, условно здоровые животные).

В ходе изучения стимулирующих свойств заявляемой фармацевтической композиции на модели острого токсического гепатита выявлено, что смертность лабораторных животных за 14 дней эксперимента составила в первой группе 80%, во второй 10%, в третьей группе - 60% и в четвертой (фоновой) признаков интоксикации и гибели животных не отмечалось (таблица 1).

В течение эксперимента за животными вели наблюдение, учитывали клиническое состояние, активность, потребление корма и воды.

Кровь для биохимических исследований брали по 1 мл в вакуумные пробирки для in vitro диагностики «Improvacuter» (GuangzhouImproveMedicallnstrumentsCo. Ltd, China) с использованием тромбина в качестве активатора сгустка. Для гематологических исследований - в вакуумные пробирки PUTH 3 мл с КЗ ЭДТА 13×75 для in vitro диагностики «Improvacuter» (Guangzhou Improve Medical Instruments Co. Ltd, China). Взятие крови производили из сердца. Предварительно дезинфицировали кожу 70° раствором этилового спирта.

Для получения сыворотки пробы центрифугировали 10 мин при 3000 об/мин.

Исследование крови и сыворотки проводили за 24 часа до начала эксперимента и на 14 сутки после первого внутримышечного введения препарата.

Для изучения системного действия препарата, проводили оценку основных показателей метаболизма в сыворотке крови животных, которые включали определение общего белка сыворотки крови и креатинина, глюкозы, активность основных ферментов, имеющих диагностическое значение при нарушении функциональной активности основного органа метаболизма - печени: аспартат и аланинаминотрансферраза, щелочная фосфатаза, билирубин.

Функциональное состояние почек оценивали, используя комплекс методов определения уровня мочевины и креатинина в сыворотке крови.

Основным составляющим компонентом настоящих исследований была характеристика стимулирующего действия фармакологического вещества при внутримышечном введении, и выявление его положительного влияния на основные физиологические функции организма мышей.

В ходе клинического осмотра животных установлено, что на протяжении всего опыта животные опытных групп по внешнему виду и поведению сильно не отличались от животных контрольной группы.

В ходе исследования физиологических показателей мышей, при внутримышечном введении животным препарата было установлено, что гематологические показатели крови мышей контрольной (положительный контроль) находятся в пределах физиологических границ. Концентрация гемоглобина в крови, мышей которым внутримышечно вводили патентуемый препарат, значительно выше, чем у животных 1, 3, 4 группы. Кроме того, у мышей 2 группы отмечается положительная динамика по данному показателю за 14 дней эксперимента, что указывает на стимулирующее действие метилурацила на кроветворную функцию костного мозга. Также отмечено снижение показателей функциональной активности основного органа метаболизма - печени: аспартат и аланинаминотрансферраза, щелочная фосфатаза, билирубин во второй группе испытуемых животных.

В 3 группе, получавшей препарат прототипа «Метилурацил», значительно ниже, чем во 2 группе.

Разработанная лекарственная форма обладает ярко выраженным стимулирующим свойством и по терапевтической эффективности превосходит известные препараты.

Изобретение относится к области медицины, а именно к инъекционной фармацевтической композиции для лечения острого гепатита для животных. Инъекционная фармацевтическая композиция на основе метилурацила (диоксометилтетрагидропиримидина) содержит метилпирролидон, янтарную кислоту и воду в следующем соотношении компонентов, масс. %: метилурацил 0,5-2,05; метилпирролидон 9,0-70,0; янтарная кислота 0,4-2,0; дистиллированная вода – остальное. Вышеописанная инъекционная фармацевтическая композиция обладает ярко выраженным стимулирующим свойством и терапевтической эффективностью. 1 табл.

Инъекционная фармацевтическая композиция для лечения острого гепатита для животных на основе метилурацила (диоксометилтетрагидропиримидина), характеризующаяся тем, что композиция содержит метилпирролидон, янтарную кислоту и воду в следующем соотношении компонентов, масс. %:

Метилурацил 0,5-2,05 Метилпирролидон 9,0-70,0 Янтарная кислота 0,4-2,0 Дистиллированная вода остальное