4-(2-ЭТОКСИАЦЕТИЛ)-2,6,8,10,12-ПЕНТААЦЕТИЛ-2,4,6,8,10,12-ГЕКСААЗАТЕТРАЦИКЛО[5,5,0, 0,0]ДОДЕКАН В КАЧЕСТВЕ РАНОЗАЖИВЛЯЮЩЕГО СРЕДСТВА ПРИ ПЛОСКОСТНОЙ КОЖНОЙ РАНЕ Российский патент 2025 года по МПК A61K31/55 A61P17/02 

Изобретение относится к фармацевтической химии и фармакологии, а именно к применению 4-(2-этоксиацетил)-2,6,8,10,12-пентаацетил-2,4,6,8,10,12-гексаазатетра-цикло[5,5,0,0^3,11,0^5,9]додекана (I), обладающего ранозаживляющей активностью:

Поиск новых соединений и разработка на их основе лекарственных средств, обладающих регенераторным потенциалом, является одной из важных задач фармакологии. Любое повреждение хирургического или травматического генеза запускает в организме жизненно важный процесс посттравматической регенерации раны, приоритетом которого становится остановка кровотечения, предотвращение проникновения инфекционных агентов, восстановление целостности ткани и ее функции [Torre, J. I. Wound healing, chronic wounds / J. I. Torre, J. A. Chambers [Electronic resourse]. - 2008. - Mode of access: http://emedicine.medscape.com/article/1298452-overview. - Date of access: 05.12.2023].

Длительно незаживающие раневые дефекты формируют стойкий болевой синдром, депрессивные состояния, являются источником инфекции, что актуализирует поиск новых молекул и создание на их основе полипотентных ранозаживляющих средств [Трофические язвы нижних конечностей - обзор проблемы / В.Н. Оболенский [и др.] // РМЖ. - 2010. - №4. - С. 28-55; Блинова Е.В. Регенерация инфицированной кожной раны на фоне топического воздействия солями п-ацетил-6-аминогексановой кислоты / Е.В. Блинова, М.А. Миронов, Д.С. Блинов // Журнал научных статей здоровье и образование в XXI веке. - 2018. - Т. 20, №7. - С. 80-83].

Процесс заживления ран условно разделяют на несколько стадий. В настоящее время многие ученые выделяют 4 перекрывающие друг друга во времени фазы заживления раны: фаза коагуляции (дни 0), воспаления (дни 0-5), пролиферации (дни 3-14) и ремоделирования рубца, протекающего вплоть до 1 года после повреждения и продолжающегося в течение всей жизни на минимальном уровне. Интенсивность репаративной регенерации зависит от большого количества факторов: функциональных возможностей клеток стромы кожи, состояния иммунной системы, микроциркуляторного русла [Винник Ю.С., Салмина А.Б., Дробушевская А.И. с соавт. Особенности патогенеза длительно незаживающих ран / Новости хирургии - 2011. - Том 19, №3 - С. 101-110].

В клинической практике применяется большое количество ранозаживляющих лекарственных средств, главным образом, для местного применения в различных лекарственных формах (растворы, бальзамы, эмульсии, кремы, гели, аппликации) для стимуляции процессов очищения ран, регенерации, эпителизации и рассасывания рубцовой ткани. Системные средства (при путях введения внутрь, подкожно, внутримышечно, внутривенно) могут оказывать существенное влияние на процессы регенерации через органы и системы организма [Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Под ред. Миронова А.Н., Бунатян Н.Д. и др. М., ЗАО «Гриф и К». 2012, Машковский М.Д. Лекарственные средства: 15-е изд. М.: ОО «Издательство Новая Волна». 2008, 1206]. В случае хронических, длительно незаживающих ранах назначают комплексную терапию, включающую системные ранозаживляющие средства и для местного применения, анальгетики, иммуннотропные препараты [Hartmann, A. G. Р. Методическое руководство по лечению ран / A. G. P. Hartmann: под ред. A. G. Р. Hartmann. - М.: Пауль Хартманн, 2000. - 106 с; Носенко М.А. Противовоспалительные цитокины и заживление кожных ран у мышей / М.А. Носенко, С.Г. Амбарян, М.С. Друцкая // Молекулярная биология. - 2019. - Т. 53, №5. - С. 741-754].

Скрининг потенциальных ранозаживляющих средств и оценка их специфической активности на этапе доклинических исследований включает использование моделей полнослойных линейных и плоскостных кожных ран, что позволяет эффективно определить регенераторный потенциал лекарственных средств [Фролова Н.Ю., Методические подходы к экспериментальному изучению дерматотропных средств/ Н.Ю. Фролова, Т.И. Мельникова, А.В. Бурякина и др. // Экспериментальная и клиническая фармакология. - 2009. - Т. 72, №5. - С. 56-60; Ефимов Е.А. Посттравматическая регенерация кожи (Экспериментальное исследование). - Москва, «Медицина», 1975. - С. 127-129]. В соответствии с токсико-фармакологическим профилем исследуемого вещества необходимо проведение дополнительных фармакологических исследований, включающих изучение анальгетических, противомикробных свойств и т.д. [Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Под ред. Миронова А.Н., Бунатян Н.Д. и др. М., ЗАО «Гриф и К». 2012].

Поиск новых соединений и разработка на их основе лекарственных средств, обладающих регенераторным потенциалом, является одной из важных задач фармакологии. Задачей, решаемой настоящим изобретением, является расширение арсенала отечественных малотоксичных средств, обладающих ранозаживляющим действием.

Поставленная задача достигается применением 4-(2-этоксиацетил)-2,6,8,10,12-пентаацетил-2,4,6,8,10,12-гексаазатетрацикло[5,5,0,0^3,11,0^5,9]додекана в качестве ранозаживляющего средства.

Впервые выявлена выраженная ранозаживляющая активность 4-(2-этоксиацетил)-2,6,8,10,12-пентаацетил-2,4,6,8,10,12-гексаазатетрацикло[5,5,0,0^3,11,0^5,9]додекана, относящегося к нетоксичным соединениям (LD₅₀ находится за пределами 5000 мг/кг при отсутствии летальности животных).

Прямых аналогов предлагаемого лекарственного средства на основе производного 2,4,6,8,10,12-гексаазатетрацикло[5,5,0,0^3,11,0^5,9]додекана (гексаазаизовюрцитана) с ранозаживляющей активностью не существует. Приоритет оригинальности данной молекулы подтвержден патентом №2808905 РФ «4-(2-этоксиацетил)-2,6,8,10,12-пентаацетил-2,4,6,8,10,12-гексаазатетрацикло[5,5,0,0^3,11,0^5,9]додекан в качестве анальгетического средства и способ его получения»

Соединение представляет собой каркасный полиамид - производное 2,4,6,8,10,12-гексаазатетрацикло[5,5,0,0^3,11,0^5,9]додекана.

Техническим результатом заявленного изобретения является ранозаживляющее действие нового нетоксичного анальгетического средства.

Отсутствие в номенклатуре ранозаживляющих средств с интраназальным введением обусловило выбор метилурацила (таблетированная форма) в качестве препарата сравнения, как одного из наиболее часто применяемых и наиболее близкого по техническому результату к предлагаемому средству. Метилурацил (Methyluracil, действующее вещество - диоксометилтетрагидропиримидин) относится к фармакотерапевтической группе: иммуностимуляторы, другие иммуностимуляторы. Фармакологическое действие: обладает анаболической активностью, оказывает гемопоэтическое, лейкопоэтическое, иммуностимулирующее, противовоспалительное действие. Нормализуя нуклеиновый обмен, ускоряет процессы регенерации в ранах, ускоряя рост и грануляционное созревание ткани и эпителизацию (в том числе в быстропролиферирующих клетках слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта), стимулирует эритро- и лейкопоэз, клеточные и гуморальные факторы иммунитета. [Машковский М.Д. Лекарственные средства: 15-е изд. М.: ОО «Издательство Новая Волна». 2008, 1206]. Однако, в результате продолжительного применения метилурацила (курс 30-40 дней) могут развиться побочные эффекты: аллергические реакции, головная боль, головокружение, изжога. Противопоказаниями к применению являются: гиперчувствительность, лейкоз (лейкемические формы, особенно миелоидные), лимфогранулематоз, гемобластозы, злокачественные новообразования костного мозга, детский возраст - до 3 лет.

Предлагаемое в качестве изобретения ранозаживляющее средство 4-(2-этоксиацетил)-2,6,8,10,12-пентаацетил-2,4,6,8,10,12-гексаазатетрацикло[5,5,0,0^3,11,0^5,9] додекан впервые синтезирован в Институте проблем химико-энергетических технологий (г. Бийск).

В НИИФиРМ им. Е.Д. Гольдберга Томского НИМЦ в результате экспериментальных исследований выявлена выраженная ранозаживляющая активность данного вещества.

Предлагаемое изобретение может быть использовано в медицине. Идентичной совокупности признаков не обнаружено при исследовании уровня техники по патентной и научно-медицинской литературе [Толстикова Т.Г., Морозова Е.А., Сысолятин С. В., Калашников А.И., Жукова Ю.И., Сурмачев В.Н. Синтез и биологическая активность производных 2,4,6,8,10,12-гексаазатетрацикло[5,5,0,0^3,11,0^5,9]додекана. Химия в интересах устойчивого развития. 2010, 18: 511-516; Sergey V. Sysolyatin, Alexander I. Kalashnikov, Valeriy V. Malykhin, Irina A. Surmacheva, Gennady V. Sakovich. Reductive Debenzelation of 2,4,6,8,10,12 - Hexaazaisowurtzitane / International Journal of Energetic Materials and Chemical Propulsion.2010, 9 (4); патент №2565766 «4-(3,4-дибромтиофенкарбонил)-2,6,8,12-тетраацетил-2,4,6,8,10,12-гексаазатетрацикло[5,5,0,0^3,11,0^5,9]додекан в качестве анальгетического средства и способ его получения» (20.10.2015); патент №2684107 «4-(3,4-дибромтиофенкарбонил)-2,6,8,12-тетраацетил-2,4,6,8,10,12-гексаазатетрацикло [5,5,0,0^3,11,0^5,9]додекан в качестве противосудорожного средства» (04.04.2019); Пат. 2736936 РФ «4,10-ди(этоксиацетил)-2,6,8,12-тетраацетил-2,4,6,8,10,12гексаазатетрацикло[5,5,0,0^3,11,0^5,9]додекан в качестве анальгетического средства и способ его получения» (23.11.2020); Пат. 2769523 РФ «4-(3,4-дибромтиофенилкарбонил)-2,6,8,10,12-пентаацетил-2,4,6,8,10,12 гексаазаизовюрцитан в качестве анальгетического средства и способ его получения» (28.06.2021)].

Возможность осуществления заявляемого изобретения подтверждается примером конкретного выполнения исследования ранозаживляющей активности. Предлагаемое в качестве изобретения ранозаживляющее средство 4-(2-этоксиацетил)-2,6,8,10,12-пентаацетил-2,4,6,8,10,12-гексаазатетрацикло[5,5,0,0^3,11,0^5,9]додекан оказывает ранозаживляющую активность в сравнении с референс препаратом метилурацилом, доказывающего, что новые признаки решают поставленную задачу.

Пример.

Для оценки влияния веществ на процесс заживления ран используют модели раневого повреждения кожи и подкожной жировой клетчатки у мышей и крыс - модели полнослойных линейных и плоскостных кожных ран [Фролова, Н.Ю. Методические подходы к экспериментальному изучению дерматотропных средств / Н.Ю. Фролова, Т.И. Мельникова, А.В. Бурякина и др. // Экспериментальная и клиническая фармакология. -2009. - Т. 72, №5. - С. 56-60]. Исследование на моделях кожных ран позволяет эффективно оценить регенераторный потенциал исследуемых средств, поскольку в этих тканях наиболее наглядно прослеживается динамика и механизм регенераторных процессов [Ефимов Е.А. Посттравматическая регенерация кожи (Экспериментальное исследование). - Москва, «Медицина», 1975. - С. 127-129]. Исходя из токсико-фармакологического профиля потенциального ранозаживляющего средства, в качестве дополнительного фармакологического исследования является целесообразным подтверждение его анальгетических свойств при интраназальном способе введения.

Две серии экспериментов выполнены на половозрелых животных: аутбредных мышах CD1 обоих полов конвенциональных, 1 категории, полученных из отдела экспериментального биомоделирования НИИФиРМ им. Е.Д. Гольдберга Томского НИМЦ. Содержание животных и дизайн экспериментов были одобрены комиссией по биоэтике НИИФиРМ им. Е.Д. Гольдберга (протокол JACUC №192112021) и соответствовали директиве 2010/63/EU Европейского парламента и Совета Европейского союза по охране животных, используемых в научных целях; ГОСТ 33044-2014 «Принципы надлежащей лабораторной практики, 01.08.2015. Первая серия экспериментов выполнялась в весенний период (апрель-май), вторая серия - январь-февраль. Эвтаназию мышей осуществляли методом кранио-цервикальной дислокации. В качестве растворителя для вещества использовали воду очищенную ампульную.

Статистическая обработка полученных результатов проведена с использованием программного обеспечения Statistica 6.0. Для всех данных рассчитаны среднее значение (X) и стандартное отклонение (m), которые вместе со значением количества вариантов (n) представлены в итоговых таблицах. Межгрупповые различия проверялись с использованием непараметрического критерия Краскела-Уолисса и Вилкоксона-Манна-Уитни (U), для сравнения частот использовали критерий углового преобразования Фишера (ϕ). Различия считали статистически значимыми при Р≤0,05 [Лакин Г.Ф., Биометрия / Г.Ф. Лакин - М: Высшая школа, 1980. - 293 с.].

В патенте РФ №2808905 «4-(2-этоксиацетил)-2,6,8,10,12-пентаацетил-2,4,6,8,10,12-гексаазатетрацикло[5,5,0,0^3,11,0^5,9]додекан в качестве анальгетического средства и способ его получения» представлено отсутствие токсичности и анальгетическая активность при внутрижелудочном пути введения, что обуславливает необходимость исследования острой токсичности при интраназальном пути введения. Проведено дополнительное исследование острой токсичности 4-(2-этоксиацетил)-2,6,8,10,12-пентаацетил-2,4,6,8,10,12-гексаазатетрацикло[5,5,0,0^3,11,0^5,9]додекана при интраназальном пути введения. Соединение вводили однократно в нос с помощью автоматического дозатора в дозе 5000 мг/кг в объеме воды очищенной ампульной 0,02 мл/ мышь. В течение 2 недель наблюдения гибели животных не отмечалось, в процессе ветеринарного мониторинга не выявлено отклонений по показателям прироста массы тела, в состоянии здоровья и поведении (таблица 1,2).

В связи с невозможностью определения LD₅₀ исследуемое соединение I отнесено к 4 классу опасности - «малотоксичные средства» в соответствии с ГОСТ 12.1007-76 «Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности» и «Руководством по проведению доклинических исследований лекарственных средств, 2012» [Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Под ред. Миронова А.Н., Бунатян Н.Д. и др. М., ЗАО «Гриф и К». 2012].

Исследование ранозаживляющего действия 4-(2-этоксиацетил)-2,6,8,10,12-пентаацетил-2,4,6,8,10,12-гексаазатетрацикло[5,5,0,0^3,11,0^5,9]додекана при

внутрижелудочном и интраназальном пути введения в сравнении с метилурацилом проводили в условиях модели плоскостной кожной раны у мышей в двух сериях экспериментов [Фролова Н.Ю., Методические подходы к экспериментальному изучению дерматотропных средств / Н.Ю. Фролова, Т.И. Мельникова, А.В. Бурякина и др. // Экспериментальная и клиническая фармакология. - 2009. - Т. 72, №5. - С. 56-60].

На депилированном участке спины у мышей под эфирным наркозом вырезали лоскут кожи размером 10×10 мм. Для моделирования более длительного заживления раневого процесса применяли регулярное (через сутки) снятие струпа с раны каждого животного. Критериями развития патологического процесса служили следующие показатели: средний диаметр раны, число животных (%) с зажившими ранами (ускорение сроков заживления (УСЗ) = (время полного заживления ран в контроле - время полного заживления ран в опыте) / время полного заживления ран в контроле × 100). На основе этих данных рассчитывали скорость уменьшения диаметра раны в мм/сут. и в %. После полного заживления ран все животные подвергались эвтаназии. Иссеченный раневой дефект исследовали морфометрически: оценивали полноценность эпителизации, толщину кожного дефекта, наличие волосяных фолликул.

Животные в 1 серии экспериментов были распределены на следующие группы по 10 мышей: контрольная, сравнения, 3 опытные группы. Соединение I вводили ежесуточно интраназальном в виде водного раствора с помощью автоматического дозатора в количестве 4 мг (200 мг/кг), 2 мг (100 мг/кг), 1 мг (50 мг/кг) в объеме 0,02 мл/ мышь, начиная с первого дня после нанесения раны и в течение всего периода заживления раневого повреждения до полной эпителизации. В качестве положительного контроля использовали метилурацил в дозе 500 мг/кг внутрижелудочно через атравматичный зонд в объеме 0,2 мл/20 г массы тела мыши и аналогичном режиме введения. Контрольным животным интраназально вводили растворитель (воду очищенную ампульную) в объеме 0,02 мл/мышь в аналогичные сроки введения.

На модели плоскостной кожной раны у мышей отмечалась закономерная динамика процесса раневой регенерации, причем у животных группы контроля полное заживление раневого дефекта наблюдали к 26 суткам после индукции раны в 1 серии (таблица 3, 4).

В ходе эксперимента соединение I при интраназальном пути введения в дозах 50-200 мг/кг (1-4 мг/мышь) оказывало ранозаживляющее действие, причем степень выраженности эффекта и сопоставимости с активностью метилурацила при внутрижелудочном пути введения в дозе 500 мг/кг зависела от применяемой дозы (таблица 3, 4).

Анализ динамики среднего диаметра ран после курсового введения соединения I в количестве 1 мг/мышь позволил выявить на 8, 10, 12, 15 сутки наблюдения статистически значимое снижение размера раны в 1,3; 1,5; 1,4 и 2,0 раза относительно соответствующих значений контроля (таблица 3). В группе применения метилурацила в дозе 500 мг/кг при внутрижелудочном пути введения отмечались похожие сроки динамики заживления раневого дефекта, что составило 10, 12, 15 и 17 сутки эксперимента. При этом выявлено статистически значимое снижение диаметра ран относительно соответствующих значений контроля (таблица 3). Ускорение процессов раневого заживления под действием соединения I в количестве 1 мг/мышь и метилурацила приходилось на фазы пролиферации и начало ремоделирования рубца (таблица 3, 4).

При сравнении скорости заживления (%), динамики изменения среднего диаметра раневого заживления (мм) и числа животных с зажившими ранами (%) в группах мышей, леченных соединением I в количество 2 и 4 мг/мышь, следует отметить одинаковую направленность эффекта и значения показателей до 22 суток наблюдения (таблица 3, 4, 5). Однако полное заживление раневого дефекта на 22 сутки эксперимента отмечалось только у мышей, получавших соединение I в количестве 2 мг/мышь, что оказалось сравнимым группой с метилурацила. У животных, леченных соединением I в количестве 1 и 4 мг/мышь, раны полностью затянулись к 24 суткам против 26 контрольной группы (таблица 5). Выявленные изменения нашли отражение в значении интегрального показателя УСЗ, являющегося основным критерием развития патологического процесса. Ускорение сроков заживления ран при интраназальном введении соединения I в количестве 2 мг/мышь составило 12%, что оказалось аналогичным показателю группы метилурацила (таблица 5). Введение соединения I в количестве 4 и 1 мг/мышь приводило к сокращению сроков заживления на 4%.

Морфометрический анализ кожного регенерата у мышей всех групп, проведенный на 26 сутки, свидетельствует о том, что соединение I в количестве 4 и 1 мг/мышь несколько уступало метилурацилу по значениям показателя восстановления волосяных фолликул в регенерате (таблица 6). У мышей, получавших соединение I в количестве 2 мг/мышь, морфометрические показатели были сравнимы с таковыми группы препарата сравнения.

Таким образом, результаты первой серии экспериментов на модели плоскостной кожной раны позволили установить, что соединение 4-(2-этоксиацетил)-2,6,8,10,12-пентаацетил-2,4,6,8,10,12-гексаазатетрацикло[5,5,0,0^3,11,0^5,9]додекан при интраназальном введении в количестве 2 мг/мышь (100 мг/кг) ускоряет сроки заживления плоскостной кожной раны, что является сравнимым с активностью метилурацила в дозе 500 мг/кг при внутрижелудочном введении. Соединение I в количестве 1 мг/мышь (50 мг/кг) статистически значимо сокращало средний диаметр ран на 8, 10, 12 и 15 сутки, что соответствует этапу пролиферации (фаза регенерации) и началу репарации процесса заживления раны.

Сочетание ранозаживляющей и анальгетической активности в спектре фармакологической активности лекарственного средства представляется особенно важным для терапии длительно незаживающих ран различного генеза, сопровождающихся болевым синдромом. В качестве дополнительного свойства нового соединения I при интраназальном пути введения в количестве 1-4 мг/мышь было подтверждено выраженное анальгетическое действие, ранее выявленное при внутрижелудочном пути введения (патент РФ №2808905).

Исследование анальгетической активности соединения I проводили в тесте тепловой иммерсии хвоста (tail immersion), основанном на спинальном флексорном рефлексе в ответ на погружение хвоста в горячую воду [Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Под ред. Миронова А.Н., Бунатян Н.Д. и др. М., ЗАО «Гриф и К». 2012; Barrot М. Tests and models of nociception and pain in rodents. Neuroscience. 2012, 211: 39-50]. В условиях этого метода большая площадь теплового раздражения обусловливает быстрое нагревание кожной поверхности. В этой связи не происходит активации терморецепторов, а сразу активируются С-волокна полимодальных ноцицепторов, Ad-волокна полимодальных ноцицепторов, полимодальные ноцицепторы и высокопороговые механорецепторы. Болевое раздражение моделировали погружением хвоста в горячую воду с фиксированной температурой 52°С в устройстве с термостатом. Регистрировали латентный период отдергивания хвоста. Как правило, величина латентного периода реакции в контрольной группе находится в диапазоне от 5 до 30 с (чаще всего от 7 до 12 с). Удлинение времени реакции интерпретируется как обезболивающее действие. Во избежание повреждения тканей не нагревали хвост более 30 с. Критерием анальгетического эффекта считали достоверное увеличение латентного периода реакции после введения вещества. Одним из критериев, характеризующих анальгетическую активность исследуемого соединения I, являлось количество животных с максимальным проявлением обезболивающего эффекта - экспозицией хвоста в течение 30 с в горячей воде.

Животные в эксперименте были распределены на следующие группы: контрольная (n=10), сравнения (n=9), 3 опытные группы по (n=9). Исследуемое соединение I вводили интраназально в виде водного раствора с помощью автоматического дозатора в количестве 4 мг (200 мг/кг), 2 мг (100 мг/кг), 1 мг (50 мг/кг) в объеме 0,02 мл/мышь однократно за 30 мин до начала тестирования. В качестве положительного контроля использовали трамадол (Tramadol) в терапевтической дозе 10 мг/кг внутрижелудочно через атравматичный зонд в объеме 0,2 мл/20 г массы тела мыши и аналогичном режиме введения. Контрольным животным вводили растворитель (воду очищенную ампульную) интраназально в объеме 0,02 мл/мышь в аналогичные сроки введения.

Соединение I при однократном интраназальном введении в количествах 1-4 мг/мышь оказывало выраженное анальгетическое действие, сравнимое с активностью трамадола в дозе 10 мг/кг per os (таблица 7). Обезболивающее действие выражалось в статистически значимом увеличении латентного времени развития болевой реакции в 1,8; 1,8 и 1,4 раза соответственно относительно этого показателя контроля. Угнетение болевой реакции составило 79,7% в группах введения соединения I в количестве 4 и 2 мг/мышь, 31,9% - в группе введения соединения I в количестве 1 мг/мышь против 53,6% в группе введения трамадола.

Полученные результаты исследования экспериментов позволяют установить, что соединение 4-(2-этоксиацетил)-2,6,8,10,12-пентаацетил2,4,6,8,10,12гексаазатетрацикло [5,5,0,0^3,11,0^5,9]додекан при интраназальном введении проявляет ранозаживляющую активность, сочетанную с анальгетической активностью.

Вторая серия экспериментов по изучению ранозаживляющего действия соединения I на модели плоскостной кожной раны у мышей была проведена при внутрижелудочном (доза 50 мг/кг) и интраназальном пути введения (доза 100 мг/кг / количество 2 мг/мышь) в сравнении с метилурацилом. Используемые дозы были выбраны как эффективные по результатам ранее проведенных экспериментов. Все условия проведения этой серии экспериментов были аналогичны 1 серии за исключением времени года. Интенсивность физиологического заживления раны у животных контрольной группы в этой серии экспериментов (январь-февраль) оказалась другой, чем в первой серии экспериментов (апрель-май). Отличие заключалось в скорости заживления и увеличении продолжительности заживления раны (29 против 25 суток) (таблица 3, 4, 8, 9).

Результате 2 серии экспериментов позволили впервые выявить выраженное ранозаживляющее действие соединения I при внутрижелудочном пути введения в эффективной дозе 50 мг/кг, превышающее по отдельным показателям активность метилурацила в дозе 500 мг/кг (таблица 8, 9, 10). Судя по статистически значимому различию среднего диаметра раны с аналогичным показателем контроля, соединение I при введении per os оказывало противовоспалительное действие на 3 и 5 сутки наблюдения (фаза воспаления, начало фазы пролиферации). На 8, 12 сутки (фаза пролиферации), 17 сутки (фаза ремоделирования рубца) соединение I статистически значимо снижало размеры раневого дефекта по сравнению с метилурацилом (таблица 8). Следует отметить, что в группе введения соединение I уже на 15 сутки выявлено 12,5% мышей с зажившими ранами против 0 в сравниваемых группах, на 17 сутки - 37,5% (Р<0,01) против 11,1% группы метилурацила (таблица 10). Аналогичная динамика отмечалась на 19 сутки (75% против 44,4% метилурацила) и 22 сутки (87,5% против 77,8% метилурацила). Полная эпителизация раневого дефекта у мышей сравниваемых групп выявлена на 24 сутки против 29 суток контроля, что выразилось в ускорении срока заживления раны до 17,2% после курсового внутрижелудочного введения соединения I и препарата сравнения (таблица 9, 10).

Сравнение результатов ранозаживляющего действия соединения I при двух путях введения показало преимущественную активность при его внутрижелудочном применении. Несмотря на то, что соединение I при интраназальном пути введения в количестве 2 мг/мышь в условиях изменившейся интенсивности протекания репаративных процессов уступало по своей активности препарату сравнения, полное заживление раневого дефекта у мышей этой группы выявлено на 26 сутки эксперимента (100% против 77,8% контроля). Ускорение сроков заживления раны в этой группе составило 10,3%, что явилось подтверждением этой специфической активности.

Морфометрический анализ кожного регенерата у мышей всех групп, проведенный на 29 сутки, свидетельствует о том, что соединение I в дозе 50 мг/кг при внутрижелудочном пути введения превосходило метилурацил по показателям восстановления волосяных фолликул и среднего эпителия в регенерате (таблица 11).

Активность соединения I при интраназальном пути введения в количестве 2 мг/мышь оказалась сравнимой с действием метилурацила, судя по всем исследуемым показателям, свидетельствующим о степени восстановления кожного регенерата плоскостной кожной раны. Совокупные результаты исследования 4-(2-этоксиацетил)-2,6,8,10,12-пентаацетил-2,4,6,8,10,12-гексаазатетрацикло[5,5,0,0^3,11,0^5,9]додекана в двух сериях экспериментов при интраназальном пути введения в условиях модели плоскостной кожной раны свидетельствуют о его ранозаживляющем действии.

Таким образом, на основании экспериментов на модели плоскостной кожной раны у мышей можно утверждать, что 4-(2-этоксиацетил)-2,6,8,10,12-пентаацетил-2,4,6,8,10,12 гексаазатетрацикло[5,5,0,0^3,11,0^5,9]додекан при внутрижелудочном и интраназальном пути введения оказывает ранозаживляющее действие, сравнимое и/или превышающее активность метилурацила по отдельным показателям, сочетанное с выраженным анальгетическим действием.

Изобретение относится к фармацевтической химии и фармакологии. Предложено применение 4-(2-этоксиацетил)-2,6,8,10,12-пентаацетил-2,4,6,8,10,12-гексаазатетрацикло[5,5,0,0^3,11,0^5,9]додекана (I) в качестве ранозаживляющего средства при плоскостной кожной ране. Изобретение обеспечивает лечение плоскостных кожных ран посредством применения 4-(2-этоксиацетил)-2,6,8,10,12-пентаацетил-2,4,6,8,10,12-гексаазатетрацикло[5,5,0,0^3,11,0^5,9]додекана. 11 табл., 1 пр.

Применение 4-(2-этоксиацетил)-2,6,8,10,12-пентаацетил-2,4,6,8,10,12-гексаазатетрацикло[5,5,0,0^3,11,0^5,9]додекана в качестве ранозаживляющего средства при плоскостной кожной ране.