O-Ациламидоксимы и 1,2,4-оксадиазолы, содержащие фрагмент бицикло[2.2.1]гептанона-2, в качестве ингибиторов репродукции филогенетически различных вирусов гриппа А: штаммы A/Puerto Rico/8/34 (H1N1), A/Anhui/1/2013 (H7N9) Российский патент 2023 года по МПК C07C251/66 C07D271/06 C07D413/04 A61K31/15 A61K31/4245 A61P31/16 

Изобретение относится к химии и медицине, а именно к лекарственным средствам, конкретно, к новым соединениям общей формулы I и II:

где R - а) изо-Pr, b) Ph, с) 4-FC₆H₄, d) 3-FC₆H₄, е) 2-FC₆H₄, f) 4-ClC₆H₄, g) 4-BrC₆H₄, h) 3-FC₆H₄CH₂-, i) 4-ClC₆H₄CH₂-, j) 4-BrC₆H₄CH₂-, k) 2-Py, 1) 3-Py, m) 4-Py,

у которых выявлена биологическая активность, заключающаяся в ингибировании репродукции вируса гриппа.

Грипп представляет собой высоко контагиозное заболевание человека. Ежегодно гриппом на планете переболевает 500 млн. человек, около 2 млн. умирает [Viasus D., Oteo Revuelta J.A., Martmez-Montauti J., Carratala J. Influenza A(H1N1)pdm09-related pneumonia and other complications // Enferm. Infecc. Microbiol. Clin. Elsevier, - 2012. - Vol.30, P. 43-48]. Вирус гриппа вызывает ежегодные эпидемии, а при появлении нового антигенного варианта вируса - пандемии, охватывающие все регионы земного шара и характеризующиеся высокой заболеваемостью, числом пациентов, нуждающихся в госпитализации и смертностью среди всех возрастных групп населения. Пандемия гриппа A(H1N1)pdm09 характеризовалась широким охватом населения многих стран мира, тяжелым клиническим течением и высокой летальностью [Viasus D., Oteo Revuelta J.A., Martmez-Montauti J., Carratalá J. Influenza A(H1N1)pdm09-related pneumonia and other complications // Enferm. Infecc. Microbiol. Clin. Elsevier, - 2012. - Vol.30, P. 43-48]. Неблагоприятные исходы чаще всего наблюдались не только у лиц с сопутствующими хроническими заболеваниями [Vousden N., Knight М. Lessons learned from the A (H1N1) influenza pandemic // Best Pract. Res. Clin. Obstet. Gynaecol. - 2021. - Vol.76, P. 41-52], но и у молодых людей без существенной предшествующей патологии, в том числе у беременных женщин [Karlsson Е.А., Marcelin G., Webby R.J., Schultz-Cherry S. Review on the impact of pregnancy and obesity on influenza virus infection // Influenza Other Respi. Viruses - 2012. - Vol.6, P. 449-460]. В последние годы отмечены также случаи инфицирования человека вирусами гриппа птичьего происхождения подтипов H5N1, H7N7 и H7N9 [Philippon D.A.M., Wu P., Cowling B.J., Lau E.H.Y. Avian Influenza Human Infections at the Human-Animal Interface // J. Infect. Dis. - 2020. - Vol.222, P. 528-537].

Противовирусные средства для лечения гриппа представляют собой крайне ограниченную группу лекарственных препаратов. Недостатком этих препаратов является то, что вирус способен быстро вырабатывать к ним устойчивость. Создание противовирусных препаратов - это ближайшая перспектива развития медицинской науки в области создания средств лечения и профилактики вирусных инфекций [Еропкин М.Ю., Зарубаев В.В. Современное состояние разработок новых антивирусных препаратов против гриппа и ОРВИ // Фармацевтический бюллетень - 2012. №1. - С 68]. Благодаря особенностям организации генома (отсутствие механизма коррекции ошибок репликации) и короткому жизненному циклу, вирус гриппа обладает высокой скоростью мутаций. Как результат, антигенная структура вируса в высокой степени подвержена изменениям в результате селективного давления иммунной системы организма-хозяина. Кроме того, применение химиопрепаратов воспринимается вирусом как фактор селекции, в результате чего также происходит формирование устойчивых штаммов. Эти два процесса приводят к появлению вариантов вирусов, способных как избегать активности нейтрализующих антител, и тем самым ускользать от иммунного ответа организма, так и преодолевать действие химиопрепаратов, исходно направленных на определенный этап репродукции вируса [Ison M.G. Antivirals and resistance: Influenza virus // Curr. Opin. Virol. Elsevier B.V., -2011. - Vol.1, P. 563-573].

Ингибировать репродукцию вируса гриппа можно на разных стадиях его жизненного цикла, на этом основана классификация противовирусных средств по механизму действия. Известны ингибиторы нейраминидазы - зарегистрированные в России: Озельтамивир (Тамифлю) и Занамивир (Реленза), а также используемые в США: Перамивир (Рапиакта) и Ланинамивир (Инавир), которые действуют на этапе почкования вновь синтезированных вирионов гриппа из оболочки клетки, блокируя отщепление частиц вирусного потомства от поверхности клеток [Ison M.G. Clinical use of approved influenza antivirals: therapy and prophylaxis // Influenza Other Respi. Viruses - 2013. - Vol.7, P. 7-13]. Практика применения ингибиторов нейраминидазы в лечении гриппа показала, что высокая эффективность этой группы препаратов ограничена ранней стадией инфекции. Известен также блокатор вирусного полимеразного комплекса балоксавира марбоксил (Ксофлюза), ингибирующий эндонуклеазную активность вирусной полимеразы. Как и ингибиторы нейраминидазы, максимальную эффективность он проявляет в первые 48 часов заболевания [Ison M.G., Portsmouth S., Yoshida Y., Shishido Т., Mitchener M., Tsuchiya K., Uehara Т., Hayden F.G. Early treatment with baloxavir marboxil in high-risk adolescent and adult outpatients with uncomplicated influenza (CAPSTONE-2): a randomised, placebo-controlled, phase 3 trial // Lancet Infect. Dis. Elsevier Ltd, - 2020. - Vol.20, P. 1204-1214]. Несмотря на короткий период его клинического применения (2018-2022 гг.), уже описаны случаи выделения балоксавир-резистентных штаммов вируса гриппа у пациентов на фоне лечения препаратом [Ince W.L., Smith F.B., O'Rear J.J., Thomson M. Treatment-Emergent Influenza Virus Polymerase Acidic Substitutions Independent of Those at 138 Associated With Reduced Baloxavir Susceptibility and Virus Rebound in Trials of Baloxavir Marboxil // J. Infect. Dis. - 2020. - Vol.222, P. 957-961]. Известен препарат Арбидол (умифеновир), применяющийся для лечения гриппа и блокирующий фузогенную активность вирусного гемагглютинина [Boriskin Y., Leneva I., Pecheur E.-I., Polyak S. Arbidol: A Broad-Spectrum Antiviral Compound that Blocks Viral Fusion // Curr. Med. Chem. - 2008. - Vol.15, P. 997-1005; Kadam R.U., Wilson I.A. Structural basis of influenza virus fusion inhibition by the antiviral drug Arbidol // Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. - 2017. - Vol.114, P. 206-214]. При широком спектре противовирусной активности его эффективность является невысокой [Зарубаев В.В., Гаршинина А.В., Калинина Н.А., Штро А.А., С.В. Б., Небольсин В.Е., Киселев О.И. Протективная активность препарата Ингавирин при экспериментальной летальной гриппозной инфекции, вызванной пандемическим вирусом A(HlNl)v, у белых мышей // Антибиотики и Химиотерапия - 2010. - Vol.55, Р. 24-31]. Известны противовирусные препараты прямого действия на репликацию вирусов гриппа, например, препарат Ремантадин (α-метил-1-адамантилметиламина гидрохлорид) и Амантадин (1-аминоадамантан) [Davies W.L., Grunert R.R., Haff R.F., McGahen J.W., Neumayer E.M., Paulshock M., Watts J.C., Wood T.R., Hermann E.C., Hoffmann C.E. Antiviral Activity of 1-Adamantanamine (Amantadine) // Science (80-.). - 1964. - Vol.144, P. 862-863]. Данные соединения блокируют белок М2 вируса гриппа, препятствуя тем самым процессу расщепления гемагглютинина и слияния мембран вируса и. лизосомальной вакуоли [Scholtissek С., Quack G., Klenk H.D., Webster R.G. How to overcome resistance of influenza A viruses against adamantane derivatives // Antiviral Res. - 1998. - Vol.37, P. 83-95]. Механизм действия этих препаратов изучен достаточно полно [Cady S.D., Schmidt-Rohr К., Wang J., Soto C.S., DeGrado W.F., Hong M. Structure of the amantadine binding site of influenza M2 proton channels in lipid bilayers // Nature Nature Publishing Group, - 2010. - Vol.463, P. 689-692]. Белок M2 в виде тетрамера является ионным каналом, функционирующим в качестве протонного насоса. Известно, что данные препараты необратимо ингибируют М2-белок, и тем самым останавливают поток протонов через мембраны вирионов, что необходимо для снижения рН, расщепления гемагглютинина и реализации его функции как фактора слияния вирусной и клеточной мембран. Ремантадин блокирует активность ионных каналов и нарушает тем самым процесс «раздевания» вируса. Стоит отметить, что с середины 90-х гг., отмечен рост доли ремантадин -устойчивых вирусов, и на сегодняшний день, практически все изоляты вируса гриппа устойчивы к препаратам адамантанового ряда - амантадину и ремантадину. То же было отмечено в пределах подтипа сезонного гриппа A(H1N1), когда за полтора года (с ноября 2007 по март 2009 г.) уровень устойчивости к осельтамивиру вырос с 0 до 100% во всех регионах земного шара. Таким образом, разработка новых противовирусных агентов является одной из важнейших задач медицинской химии.

Каркасные соединения остаются привлекательными в качестве основы для дизайна противовирусных препаратов. Так, известно средство на основе дейтифорина (2-(1'-аминоэтил)бицикло[2.2.1]гептана, являющееся одним из наиболее интересных препаратов на основе природных бициклических каркасных соединений - борнанов [Патент RU 2448692 С2, оп. 27.04.2012]. Известны средства, синтезированные на основе природного пинанового остова, являющиеся ингибиторами вируса гриппа [Zhao X., Li С., Zeng S., Hu W. Discovery of highly potent agents against influenza A virus // Eur. J. Med. Chem. Elsevier Masson SAS, - 2011. - Vol.46, P. 52-57], превосходящими вирусингибирующее действие препарата сравнения - амантадина в 240 раз при тестировании на амантадин-чувствительном штамме вируса. Однако авторы работы не приводят данные по токсичности исследуемых соединений, в связи с чем, нельзя говорить о высоком химиотерапевтическом индексе и фармакологических перспективах синтезированных веществ. Наиболее близким к заявляемым соединениям - прототипом, является дейтифорин, представляющий собой фармацевтические соли (2-(1'-аминоэтил)бицикло[2.2.1]гептана общей формулы III

Недостатком известного соединения является невысокая противовирусная активность (СС₅₀=956 мкМ, IC₅₀(A/PR/8/34(H1N1))=142 мкМ, SI(A/PR/8/34(H1N1))=7, где СС₅₀ - 50% цитотоксическая концентрация, IC₅₀ - 50% ингибирующая концентрация, SI - индекс селективности, представляющий собой отношение СС₅₀ к IC₅₀). Задачей изобретения является выявление новых эффективных ингибиторов репродукции вируса гриппа, которые могут быть синтезированы из доступных реагентов.

Технический результат: повышение эффективности подавления репродукции вируса гриппа и расширение ассортимента ингибиторов репродукции вируса гриппа для преодоления лекарственной устойчивости современных вирусных штаммов.

Поставленная задача решается применением известных соединений, представляющих собой производные (+)-кетопиновой кислоты: О-ациламидоксимы общей формулы I и 1,2,4-оксадиазолы общей формулы II. Заявляемые соединения получают следующим образом (фиг.1), в качестве исходных соединений для синтеза целевых О-ациламидоксимов и 1,2,4-оксадиазолов используют (+)-кетопиновую кислоту ((1S,4R)-7,7-диметил-2-оксобицикло[2.2.1]гептан-1-карбоновую кислоту) и амидоксимы различного строения. Способ получения (+)-кетопиновой кислоты из коммерчески доступной (1S)-(+)-камфор-10-сульфоновой кислоты в литературе описан [Huynh U., McDonald S.L., Lim D., Uddin M.N., Wengryniuk S.E., Dey S., Coltart D.M. Formation, Alkylation, and Hydrolysis of Chiral Nonracemic N-Amino Cyclic Carbamate Hydrazones: An Approach to the Enantioselective α-Alkylation of Ketones // J. Org. Chem. - 2018. - Vol.83, P. 12951-12964]. В результате взаимодействия нитрилов различного строения с гидроксиламином получают ряд амидоксимов, согласно литературной методике [Gangloff A.R., Litvak J., Shelton E.J., Sperandio D., Wang V.R., Rice K.D. Synthesis of 3,5-disubstituted-1,2,4-oxadiazoles using tetrabutylammonium fluoride as a mild and efficient catalyst // Tetrahedron Lett. - 2001. - Vol.42, P. 1441-1443]. Активация карбоксильной группы (+)-кетопиновой кислоты карбонилдиимидазолом (CDI) и последующее взаимодействие с амидоксимами в хлористом метилене приводит к образованию О-ациламидоксимов Ia-m с выходами 40-90%. Целевые соединения Ia-m очищают колоночной хроматографией, все полученные О-ациламидоксимы ранее в литературе не были описаны. Целевые 1,2,4-оксадиазолы IIa-m получают циклизацией О-ациламидоксимов Ia-m в присутствии фторида тетрабутиламмония при кипячении в ТГФ, согласно известной методике [Gangloff A.R., Litvak J., Shelton E.J., Sperandio D., Wang V.R., Rice K.D. Synthesis of 3,5-disubstituted-1,2,4-oxadiazoles using tetrabutylammonium fluoride as a mild and efficient catalyst // Tetrahedron Lett. - 2001. - Vol.42, P. 1441-1443] с выходами 35-80%. Соединения IIa-m также очищают колоночной хроматографией.

Исследования фармакологической активности соединений формул Ia-m и IIa-m, проведенные в отношении штаммов вируса гриппа A (A/Puerto Rico/8/34 (H1N1) и A/Anhui/1/2013 (H7N9)), показали, что исследуемые соединения по большей части обладают низкой цитотоксичностью в отношении клеток MDCK, а также многие из соединений обладают низкими концентрациями полумаксимального ингибирования репродукции данных вирусов. Вследствие этого индексы селективности 13 исследуемых соединений превышают 20 (для штамма A/Puerto Rico/8/34 (H1N1)). Стоит отметить, что индексы селективности (для штамма A/Anhui/1/2013 (H7N9)) двух соединений превышают 100, что является очень значимым результатом, поскольку вирус птичьего гриппа в настоящее время представляет собой большую опасность для здоровья человека и животных. Полученные количественные показатели ингибирования (Таблица 1) подтверждают высокую степень подавления репликации вируса гриппа в культуре клеток MDCK соединениями Ia-m и IIa-m, сравнимую или превышающую тот же показатель у препаратов сравнения каркасного строения (ремантадин, амантадин и дейтифорин) и осельтамивира.

Изобретение подтверждается следующими примерами:

Пример 1.

Получение N'-({[(1S,4R)-7,7-диметил-2-оксобицикло[2.2.1]гепт-1-ил]карбонил}окси)-2'-метилпропанимидамида (1а)

(+)-Кетопиновую кислоту (300 мг, 1.65 ммоль, 1.0 экв.) и карбонилдиимидазол (320 мг, 1.98 ммоль, 1.2 экв.) растворяют в хлористом метилене (10 мл) и перемешивают при комнатной температуре в течение 3-5 часов в атмосфере воздуха. Затем в раствор добавляют N'-гидроксиизобутиримидамид (202 мг, 1.98 ммоль, 1.2 экв.) и перемешивают при комнатной температуре в течение 8-10 часов в атмосфере воздуха до полной конверсии исходной кислоты (ход реакции контролируют ТСХ, элюент CHCl₃). Затем раствор концентрируют до минимального объема на роторном испарителе и очищают колоночной хроматографией (SiO₂, CHCl₃). В результате получают целевое соединение 1а с выходом 80% в виде белого порошка.

Спектр ¹H ЯМР (500 МГц, CDCl₃, δ): 1.13 (с, 3H, 8-СН₃ или 9-СН₃), 1.14 (с, 3H, 8-СН₃ или 9-СН₃), 1.19 (д, 3H, J=1.5, 3'-СН₃ или 4'-СН₃), 1.21 (д, 3H, J=1.6, 3'-СН₃ или 4'-СН₃), 1.41 (ддд, 1Н, J=4.1, J=9.4, J=13.0, эндо-5-СН₂), 1.78 (ддд, 1H, J=4.9, J=9.4, J=14.3, эндо-6-СН₂), 1.96 (д, 1H, J=18.6, эндо-3-СН₂), 2.01-2.09 (м, 1H, экзо-6-CH₂), 2.11-2.12 (м, 1H, экзо-5-СН₂), 2.44-2.47 (м, 1Н, 4-СН), 2.50-2.56 (м, 1Н, экзо-3-СН₂), 2.59 (секстет, 1Н, J=7.0, 2'-СН). Спектр ¹³С ЯМР (126 МГц, CDCl₃, δ): 19.5 (С-8 или С-9), 20.1 (С-3', С-4'), 20.9 (С-8 или С-9), 26.5 (С-5), 26.8 (С-6), 30.5 (С-2'), 43.7 (С-3), 44.0 (С-4), 49.3 (С-7), 67.4 (С-1), 165.3 (С-1'), 167.1 (С-10), 213.1 (С-2).

Т_пл. 126.1-126.7°С. (CHCl₃, с=1.4). HRMS (ESI⁺): m/z вычислено для C₁₄H₂₂O₃N₂⁺ 266.1625; найдено 266.1622. ИК(см^-1): 3477, 3340, 2971, 1718, 1632, 1321, 1223, 1121,874,509.

Пример 2.

Получение N'-({[(1S,4R)-7,7-диметил-2-оксобицикло[2.2.1]гепт-1-ил]карбонил}окси)-бензимидамида (Ib).

(+)-Кетопиновую кислоту (300 мг, 1.65 ммоль, 1.0 экв.) и карбонилдиимидазол (320 мг, 1.98 ммоль, 1.2 экв.) растворяют в хлористом метилене (10 мл) и перемешивают при комнатной температуре в течение 3-5 часов в атмосфере воздуха. Затем в раствор добавляют N'-гидроксибензимидамид (269 мг, 1.98 ммоль, 1.2 экв.). Реакцию проводят, как описано в примере 1, О-ациламидоксим Ib выделяют с выходом 60% в виде белого порошка.

Спектр ¹H ЯМР (500 МГц, CDCl₃, δ): 1.17 (с, 3H, 8-СН₃ или 9-СН₃), 1.19 (с, 3H, 8-СН₃ или 9-СН₃), 1.44 (ддд, 1Н, J=3.8, J=9.5, J=12.7, эндо-5-CH₂, 1.83 (ддд, 1Н, J=4.9, J=9.4, J=14.2, эндо-6-СН₂), 1.98 (д, 1H, J=18.5, эндо-3-CH₂), 2.06-2.13 (м, 1H, экзо-6-CH₂, 2.13-2.14 (м, 1H, экзо-5-СН₂), 2.49-2.53 (м, 1H, 4-СН), 2.53-2.58 (м, 1H, экзо-3-CH₂), 7.36-7'.46 (м, 3H, 4'-СН, 5'-СН, 6'-СН), 7.69-7.71 (м, 2Н, 3'-СН, 7'-СН). Спектр ¹³С ЯМР (126 МГц, CDCl₃, δ): 19.5 (С-8 или С-9), 20.9 (С-8 или С-9), 26.6 (С-5), 26.9 (С-6), 43.7 (С-3), 44.1 (С-4), 49.4 (С-7), 67.4 (С-1), 126.7 (С-3', С-7'), 128.5 (С-4', С-6'), 130.9 (С-5'), 131.0 (С-2'), 159.2 (С-1'), 166.8 (С-10), 212.8 (С-2).

Т_пл. 143.8-146.1°С. (CHCl₃, с=0.2). HRMS (ESI⁺): m/z вычислено для C₁₇H₂₀O₃N₂⁺ 300.1468; найдено 300.1467. ИК (см^-1): 3477, 3311, 2970, 1730, 1626, 1412, 1321, 1024, 775,511.

Пример 3.

Получение N'-({[(1S,4R)-7,7-диметил-2-оксобицикло[2.2.1]гепт-1-ил]карбоиил}окси)-4'-фторбензол-1'-карбоксимидамида (Ic).

(+)-Кетопиновую кислоту (300 мг, 1.65 ммоль, 1.0 экв.) и карбонилдиимидазол (320 мг, 1.98 ммоль, 1.2 экв.) растворяют в хлористом метилене (10 мл) и перемешивают при комнатной температуре в течение 3-5 часов в атмосфере воздуха. Затем в раствор добавляют 4'-фтор-N'-гидроксибензимидамид (305 мг, 1.98 ммоль, 1.2 экв.). Реакцию проводят, как описано в примере 1, О-ациламидоксим Ic выделяют с выходом 55% в виде белого порошка.

Спектр ¹H ЯМР (500 МГц, CDCl₃, δ): 1.17 (с, 3H, 8-СН₃ или 9-СН₃), 1.18 (с, 3H, 8-СН₃ или 9-СН₃), 1.45 (ддд, 1Н, J=4.0, J=9.4, J=12.9, эндо-5-СН₂), 1.83 (ддд, 1H, J=4.9, J=9.3, J=14.2, эндо-6-СН₂), 2.00 (д, 1H, J=18.5, эндо-3-СН₂), 2.06-2.13 (м, 1H, экзо-6-СН₂), 2.15-2.17 (м, 1H, экзо-5-CH₂), 2.49-2.53 (м, 1Н, 4-СН), 2.55-2.60 (м, 1Н, экзо-3-СН₂), 7.06-7.10 (м, 2Н, 3'-СН, 5'-СН), 7.69-7.72 (м, 2Н, 2'-СН, 6'-СН). Спектр ¹³С ЯМР (126 МГц, CDCl₃, δ): 19.5 (С-8 или С-9), 20.8 (С-8 или С-9), 26.6 (С-5), 26.8 (С-6), 43.6 (С-3), 44.0 (С-4), 49.4 (С-7), 67.4 (С-1), 115.5 (С-2' или С-6'), 115.7 (С-2' или С-6'), 126.9 (С-1', J^F=3.1), 128.75 (С-3' или С-5'), 128.82 (С-3' или С-5'), 158.4 (С-11), 164.3 (С-4', J^F=251.4), 166.9 (С-10), 212.9 (С-2).

Т_пл. 115.1-121.8°С. (CHCl₃, с=0.4). HRMS (ESI⁺): m/z вычислено для C₁₇H₁₉FO₃N₂⁺ 318.1374; найдено 318.1379. ИК(см^-1): 3489, 3377, 2970, 1722, 1630, 1516, 1410,1313,1227,1099,856.

Пример 4.

Получение N'-({[(1S,4R)-7,7-диметил-2-оксобицикло[2.2.1]гепт-1-ил]карбонил}окси)-3'-фторбензол-1'-карбоксимидамида (Id).

(+)-Кетопиновую кислоту (300 мг, 1.65 ммоль, 1.0 экв.) и карбонилдиимидазол (320 мг, 1.98 ммоль, 1.2 экв.) растворяют в хлористом метилене (10 мл) и перемешивают при комнатной температуре в течение 3-5 часов в атмосфере воздуха. Затем в раствор добавляют 3'-фтор-N'-гидроксибензимидамид (305 мг, 1.98 ммоль, 1.2 экв.). Реакцию проводят, как описано в примере 1, О-ациламидоксим Id выделяют с выходом 75% в виде белого порошка.

Спектр 'Н ЯМР (500 МГц, CDCl₃, δ): 1.17 (с, 3H, 8-СН₃ или 9-СН₃), 1.18 (с, 3H, 8-СН₃ или 9-СН₃), 1.45 (ддд, 1H, J=4.0, J=9.4, J=12.9, эндо-5-CH₂), 1.83 (ддд, 1H, J=4.9, J=9.3, J=14.2, эндо-6-CH₂), 1.99 (д, 1Н, J=18.6, эндо-3-CH₂, 2.06-2.13 (м, 1H, экзо-6-CH₂), 2.15-2.16 (м, 1H, экзо-5-CH₂), 2.49-2.53 (м, 1Н, 4-СН), 2.54-2.60 (м, 1Н, экзо-3-СН₂), 7.13-7.17 (м, 1H, 4'-СН), 7.34-7.39 (м, 1H, 6'-СН), 7.42-7.45 (м, 1H, 5'-СН), 7.47.7.49 (м, 1H, 2'-СН). Спектр ¹³С ЯМР (126 МГц, CDCl₃, δ): 19.5 (С-8 или С-9), 20.8 (С-8 или С-9), 26.6 (С-5), 26.9 (С-6), 43.7 (С-3), 44.0 (С-4), 49.4 (С-7), 67.4 (С-1), 114.1 (С-2', J^F=23.6), 118.0 (С-4', J^F=21.0), 122.3 (С-6', J^F=3.0), 130.3 (С-5', J^F=8.4), 133.0 (С-1', J^F=8.4), 158.2 (С-11), 162.5 (С-3', J^F=247.1), 166.8 (С-10), 212.9 (С-2).

Т_пл. 140.4-141.6°С. (CHCl₃, с=1.9). HRMS (ESI⁺): m/z вычислено для C¹⁷H₁₉FO₃N₂⁺ 318.1374; найдено 318.1371. ИК (см^-1): 3475, 3307, 2972, 1730, 1628, 1570, 1400, 1319, 1225, 1119, 1021,933,795.

Пример 5.

Получение N'-({[(1S,4R)-7,7-диметил-2-оксобицикло[2.2.1]гепт-1-ил]карбонил}окси)-2'-фторбензол-1'-карбоксимидамида (Ie).

(+)-Кетопиновую кислоту (300 мг, 1.65 ммоль, 1.0 экв.) и карбонилдиимидазол (320 мг, 1.98 ммоль, 1.2 экв.) растворяют в хлористом метилене (10 мл) и перемешивают при комнатной температуре в течение 3-5 часов в атмосфере воздуха. Затем в раствор добавляют 2'-фтор-N'-гидроксибензимидамид (305 мг, 1.98 ммоль, 1.2 экв.). Реакцию проводят, как описано в примере 1, О-ациламидоксим Ie выделяют с выходом 90% в виде белого порошка.

Спектр ¹H ЯМР (500 МГц, CDCl₃, δ): 1.17 (с, 3H, 8-СН₃ или 9-СН₃), 1.19 (с, 3H, 8-СН₃ или 9-СН₃), 1.45 (ддд, 1Н, J=4.0, J=9.4, J=13.0, эндо-5-СН₂), 1.84 (ддд, 1H, J=4.9, J=9.4, J=14.2, эндо-6-CH₂), 2.00 (д, 1H, J=18.5, эндо-3-СН₂), 2.05-2.13 (м, 1Н, экзо-6-CH₂, 2.15-2.16 (м, 1H, экзо-5-СН₂), 2.50-2.53 (м, 1Н, 4-СН), 2.55-2.60 (м, 1Н, экзо-3-СН₂), 7.09-7.13 (дд, 1H, J=0.9, J=8.4, 3'-СН), 7.15-7.18 (м, 1Н, 5'-СН), 7.39-7.44 (м, 1H, 4'-СН), 7.83-7.87 (м, 1H, 6'-СН). Спектр ¹³С ЯМР (126 МГц, CDCl₃, δ): 19.6 (С-8 или С-9), 20.9 (С-8 или С-9), 26.6 (С-5), 26.9 (С-6), 43.7 (С-3), 44.0 (С-4), 49.5 (С-7), 67.4 (С-1), 116.2 (С-3', J^F=22.4), 118.2 (С-1', J^F=10.6), 124.4 (С-5', J^F=3.3), 130.4 (С-6', J^F=2.2), 132.5 (С-4', J^F=9.1), 156.2 (С-11), 160.4 (С-2', J^F=250.7), 166.8 (С-10), 212.7 (С-2).

Т_пл. 143.4-144.0°С. (CHCl₃, с=1.9). HRMS (ESI⁺): m/z вычислено для C₁₇H₁₉FO₃N₂⁺ 318.1374; найдено 318.1377. ИК(см^-1): 3454, 3323, 2964, 1736, 1628, 1454, 1412, 1317, 1225, 1097, 1020, 912, 768, 507.

Пример 6.

Получение N'-({[(1S,4R)-7,7-диметил-2-оксобицикло[2.2.1]гепт-1-ил]карбонил}окси)-4'-хлорбензол-1'-карбоксимидамида (If).

(+)-Кетопиновую кислоту (300 мг, 1.65 ммоль, 1.0 экв.) и карбонилдиимидазол (320 мг, 1.98 ммоль, 1.2 экв.) растворяют в хлористом метилене (10 мл) и перемешивают при комнатной температуре в течение 3-5 часов в атмосфере воздуха. Затем в раствор добавляют 4'-хлор-N'-гидроксибензимидамид (338 мг, 1.98 ммоль, 1.2 экв.). Реакцию проводят, как описано в примере 1, О-ациламидоксим If выделяют с выходом 70% в виде белого порошка.

Спектр ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃, δ): 1.17 (с, 3H, 8-СН₃ или 9-СН₃), 1.18 (с, 3H, 8-СН₃ или 9-СН₃), 1.45 (ддд, 1H, J=4.0, J=9.4, J=12.8, эндо-5-CH₂), 1.83 (ддд, 1H, J=4.9, J=9.4, J=14.2, эндо-6-CH₂, 1.99 (д, 1H, J=18.5, эндо-6-CH₂), 2.05-2.12 (м, 1H, экзо-6-СН₂), 2.14-2.17 (м, 1H, экзо-5-CH₂, 2.48-2.52 (м, 1Н, 4-СН), 2.53-2.60 (м, 1Н, экзо-3-CH₂, 7.35-7.38 (м, 2Н, 3'-СН, 5'-СН), 7.63-7.66 (м, 2Н, 2'-СН, 6'-СН). Спектр ¹³С ЯМР (101МГц, CDCl₃, δ): 19.5 (С-8 или С-9), 20.9 (С-8 или С-9), 26.6 (С-5), 26.9 (С-6), 43.7 (С-3), 44.1 (С-4), 49.5 (С-7), 67.4 (С-1), 128.1 (С-2', С-6'), 128.8 (С-3', С-5'), 129.3 (С-1'), 137.1 (С-4'), 158.4 (С-11), 166.9 (С-10), 212.9 (С-2).

Т_пл. 139.7-139.9°С. (CHCl₃, с=13). HRMS (ESI⁺): m/z вычислено для C₁₇H₁₉³⁵ClO₃N₂⁺ 334.1079; найдено 334.1077. ИК (см^-1): 3469, 3313, 2947, 1730, 1626, 1412, 1319, 1230, 1088, 1013,849,509.

Пример 7.

Получение N'-({[(15,4Л)-7,7-диметил-2-оксобицикло[2.2.1]гепт-1-ил]карбонил}окси)-4'-бромбензол-1'-карбоксимидамида (Ig).

(+)-Кетопиновую кислоту (300 мг, 1.65 ммоль, 1.0 экв.) и карбонилдиимидазол (320 мг, 1.98 ммоль, 1.2 экв.) растворяют в хлористом метилене (10 мл) и перемешивают при комнатной температуре в течение 3-5 часов в атмосфере воздуха. Затем в раствор добавляют 4'-бром-N'-гидроксибензимидамид (426 мг, 1.98 ммоль, 1.2 экв.). Реакцию проводят, как описано в примере 1, О-ациламидоксим Ig выделяют с выходом 60% в виде белого порошка.

Спектр ¹Н ЯМР (500 МГц, CDCl₃, δ): 1.166 (с, 3H, 8-СН₃ или 9-СН₃), 1.174 (с, 3H, 8-СН₃ или 9-СН₃), 1.45 (ддд, 1H, J=4.1, J=9.4, J=13.0, эндо-5-СН₂), 1.82 (ддд, 1H, J=4.9, J=9.4, J=14.2, эндо-6-СН₂), 1.99 (д, 1Н, J=18.5, эндо-3-СН₂), 2.05-2.12 (м, 1H, экзо-6-CH₂, 2.14-2.16 (м, 1H, экзо-5-CH₂), 2.48-2.52 (м, 1H, 4-СН), 2.53-2.59 (м, 1H, экзо-3-CH₂), 7.51-7.53 (м, 2Н, 3'-СН, 5'-СН), 7.56-7.59 (м, 2Н, 2'-СН, 6'-СН). Спектр ¹³С ЯМР (126 МГц, CDCl₃, δ): 19.5 (С-8 или С-9), 20.9 (С-8 или С-9), 26.6 (С-5), 26.9 (С-6), 43.7 (С-3), 44.0 (С-4), 49.4 (С-7), 67.4 (С-1), 125.4 (С-4'), 128.3 (С-2', С-6'), 129.8 (С-10, 131.8 (С-3', С-5'), 158.4 (С-11), 166.9 (С-10), 212.9 (С-2).

Т_пл. 150.6-151.0°С. (CHCl₃, с=1.0). HRMS (ESI⁺): m/z вычислено для C₁₇H₁₉⁷⁹BrO₃N₂⁺ 378.0574; найдено 378.0572. ИК (см^-1): 3425, 3319, 2958, 1732, 1630, 1414, 1317, 1225, 1117, 1009, 837, 530.

Пример 8.

Получение N'-({[(1S,4R)-7,7-диметил-2-оксобицикло[2.2.1]гепт-1-ил]карбонил} окси)-2''-(3'-фторфенил)этанимидамида (Ih).

(+)-Кетопиновую кислоту (300 мг, 1.65 ммоль, 1.0 экв.) и карбонилдиимидазол (320 мг, 1.98 ммоль, 1.2 экв.) растворяют в хлористом метилене (10 мл) и перемешивают при комнатной температуре в течение 3-5 часов в атмосфере воздуха. Затем в раствор добавляют 2''-(3'-фторфенил)-N''-гидроксиацетимидамид (333 мг, 1.98 ммоль, 1.2 экв.). Реакцию проводят, как описано в примере 1, О-ациламидоксим Ih выделяют с выходом 40% в виде белого порошка.

Спектр ¹Н ЯМР (500 МГц, CDCl₃, δ): 1.15 (с, 6Н, 8-СН₃, 9-СН₃), 1.42 (ддд, 1H, J=4.0,.J=9.3, J=12.9, эндо-5-CH₂), 1.78 (ддд, 1H, J=5.0, J=9.4, J=14.2, эндо-6-CH₂), 1.96 (д, 1Н, J=18.6, эндо-3-CH₂, 2.03-2.11 (м, 1H, экзо-6-CH₂, 2.12-2.14 (м, 1H, экзо-5-CH₂), 2.46-2.55 (м, 2Н, 4-СН, экзо-3-СН₂), 3.53-3.60 (м, 2Н, 2''-СН₂), 6.94-6.98 (м, 1Н, 6'-СН), 7.02-7.05 (м, 1H, 4'-СН), 7.09-7.10 (м, 1H, 2'-СН), 7.27-7.31 (м, 1Н, 5'-СН). Спектр ¹³С ЯМР (126 МГц, CDCl₃, δ): 19.5 (С-8 или С-9), 20.9 (С-8 или С-9), 26.6 (С-5), 26.8 (С-6), 36.8 (С-2''), 43.7 (С-3), 44.1 (С-4), 49.4 (С-7), 67.4 (С-1), 114.4 (С-2', J=21.0), 115.8 (С-4', J=21.8), 124.5 (С-6', J=2.8), 130.4 (С-5', J=8.3), 137.2 (С-1', J=7.4), 159.3 (С-1''), 162.9 (С-3', J=246.9), 167.0 (С-10), 212.8 (С-2).

Т_пл. 162.2-162.4°С. (CHCl₃, с=0.2). HRMS (ESI⁺): m/z вычислено для C₁₈H₂₁FO₃N₂⁺ 332.1531; найдено 332.1535. ИК(см^-1): 3458, 3325, 2966, 1718, 1630, 1487, 1315, 1227, 1101,876, 766, 544.

Пример 9.

Получение N'-({[(1S,4R)-7,7-диметил-2-оксобицикло[2.2.1]гепт-1-ил]карбонил}окси)-2''-(4'-хлорфенил)этанимидамида (Ii).

(+)-Кетопиновую кислоту (300 мг, 1.65 ммоль, 1.0 экв.) и карбонилдиимидазол (320 мг, 1.98 ммоль, 1.2 экв.) растворяют в хлористом метилене (10 мл) и перемешивают при комнатной температуре в течение 3-5 часов в атмосфере воздуха. Затем в раствор добавляют 2''-(4'-хлорфенил)-N''-гидроксиацетимидамид (333 мг, 1.98 ммоль, 1.2 экв.). Реакцию проводят, как описано в примере 1, О-ациламидоксим Ii выделяют с выходом 75% в виде белого порошка.

Спектр ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃, δ): 1.15 (с, 6Н, 8-СН₃, 9-СН₃), 1.42 (ддд, 1H, J=4.0, J=9.3, J=12.7, эндо-5-СН₂), 1.78 (ддд, 1H, J=5.0, J=9.4, J=14.2, эндо-6-СН₂), 1.95 (д, 1H, J=18.6, эндо-3-СН₂), 2.02-2.10 (м, 1H, экзо-6-CH₂, 2.12-2.14 (м, 1H, экзо-5-CH₂, 2.45-2.55 (м, 2Н, 4-СН, экзо-3-CH₂, 3.54 (с, 2Н, 2''-СН₂), 7.24-7.28 (м, 4Н, 2'-СН, 3'-СН, 5'-СН, 6'-СН). Спектр ¹³С ЯМР (101 МГц, CDCl₃, δ): 19.5 (С-8 или С-9), 20.9 (С-8 или С-9), 26.6 (С-5), 26.8 (С-6), 36.4 (С-2''), 43.7 (С-3), 44.1 (С-4), 49.4 (С-7), 67.4 (С-1), 129.0 (С-3', С-5'), 130.2 (С-2', С-6'), 133.3 (С-4'), 133.6 (С-1'), 159.5 (С-1''), 167.0 (С-10), 212.8 (С-2).

Т_пл. 112.3-115.9°С. (CHCl₃, с=1.0). HRMS (ESI⁺): m/z вычислено для C₁₈H₂₁³⁵ClO₃N₂⁺ 348.1235; найдено 348.1232. ИК (см^-1): 3435, 3321, 2970, 1730, 1635, 1491, 1392, 1317, 1223, 1092, 1016, 802.

Пример 10.

Получение N'-({[(1S,4R)-7,7-диметил-2-оксобицикло [2.2.1] гепт-1-ил]карбонил}окси)-2''-(4'-бромфенил)этанимидамида (Ij).

(+)-Кетопиновую кислоту (300 мг, 1.65 ммоль, 1.0 экв.) и карбонилдиимидазол (320 мг, 1.98 ммоль, 1.2 экв.) растворяют в хлористом метилене (10 мл) и перемешивают при комнатной температуре в течение 3-5 часов в атмосфере воздуха. Затем в раствор добавляют 2''-(4'-бромфенил)-N''-гидроксиацетимидамид (453 мг, 1.98 ммоль, 1.2 экв.). Реакцию проводят, как описано в примере 1, О-ациламидоксим Ij выделяют с выходом 80% в виде белого порошка.

Спектр ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃, δ): 1.15 (с, 6Н, 8-СН₃, 9-СН₃), 1.42 (ддд, 1H, J=3.9, J=9.3, J=12.7, эндо-5-CH₂), 1.78 (ддд, IH, J=4.9, J=93, J=14.2, эндо-6-СН₂), 1.95 (д, 1H, J=18.6, эндо-3-CH₂, 2.02-2.10 (м, 1H, экзо-6-CH₂), 2.12-2.14 (м, 1H, экзо-5-СН₂), 2.45-2.56 (м, 2Н, 4-СН, экзо-3-СН₂), 3.53 (с, 2Н, 2''-СН₂), 7.18-7.20 (м, 2Н, 3'-СН, 5'-СН), 7.43-7.45 (м, 2Н, 2'-СН, 6'-СН). Спектр ¹³С ЯМР (101 МГц, CDCl₃, δ): 19.5 (С-8 или С-9), 20.9 (С-8 или С-9), 26.6 (С-5), 26.8 (С-6), 36.5 (С-2''), 43.7 (С-3), 44.1 (С-4), 49.4 (С-7), 67.4 (С-1), 121.4 (С-4'), 130.5 (С-2', С-6'), 131.9 (С-3', С-5'), 133.8 (С-1'), 159.4 (С-1''), 167.0 (С-10), 212.8 (С-2).

Т_пл. 132.8-135.0°С. (CHCl₃, с=1.3). HRMS (ESI⁺): m/z вычислено для C₁₈H₂₁⁷⁹BrO₃N₂⁺ 392.0730; найдено 392.0725. ИК (см^-1): 3475, 3306, 3165, 2968, 1730, 1641, 1487, 1414, 1315, 1221, 1095, 1013, 800, 500.

Пример 11.

Получение N'-({[(1S',4R)-7,7-диметил-2-оксобицикло[2.2.1]гепт-1-ил]карбонил}окси)-пиридин-2'-карбоксимидамида (Ik).

(+)-Кетопиновую кислоту (300 мг, 1.65 ммоль, 1.0 экв.) и карбонилдиимидазол (320 мг, 1.98 ммоль, 1.2 экв.) растворяют в хлористом метилене (10 мл) и перемешивают при комнатной температуре в течение 3-5 часов в атмосфере воздуха. Затем в раствор добавляют N-гидроксипиридин-2'-карбоксимидамид (271 мг, 1.98 ммоль, 1.2 экв.). Реакцию проводят, как описано в примере 1, О-ациламидоксим Ik выделяют с выходом 70% в виде белого порошка.

Спектр ¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃, δ): 1.19 (с, 3H, 8-СН₃ или 9-СН₃), 1.20 (с, 3H, 8-СН₃ или 9-СН₃), 1.45 (ддд, 1H, J=3.7, J=9.1, J=12.0, эндо-5-СН₂), 1.86 (ддд, 1Н, J=4.9, J=9.3, J=14.1, эндо-6-СН₂), 2.00 (д, 1H, J=18.5, эндо-3-СН₂), 2.04-2.12 (м, 1H, экзо-6-СН₂), 2.14-2.17 (м, 1H, экзо-5-CH₂, 2.48-2.63 (м, 2Н, 4-СН, экзо-3-CH₂), 7.35 (дд, 1H, J=1.1, J=4.9, 4'-СН), 7.70 (дд, 1H, J=1.7, J=7.6, 5'-СН), 8.14-8.17 (м, 1H, 3'-СН), 8.55-8.57 (м, 1H, 6'-СН). Спектр ¹³С ЯМР (75 МГц, CDCl₃, δ): 19.6 (С-8 или С-9), 20.9 (С-8 или С-9), 26.6 (С-5), 26.9 (С-6), 43.7 (С-3), 44.1 (С-4), 49.4 (С-7), 67.4 (С-1), 121.3 (С-3'), 125.4 (С-5'), 136.6 (С-4'), 147.4 (С-2'), 148.3 (С-6'), 156.4 (С-11), 166.9 (С-10), 212.3 (С-2).

Т_пл. 100.3-107.1°С. (CHCl₃, с=0.2). HRMS (ESI⁺): m/z вычислено для C₁₆H₁₉O₃N₃⁺ 301.1421; найдено 301.1418. ИК (см^-1): 3448, 3338, 2960, 1730, 1637, 1585, 1475, 1398, 1319, 1213, 1092, 1014, 800.

Пример 12.

Получение N'-({[(1S,4R)-7,7-диметил-2-оксобицикло[2.2.1]гепт-1-ил]карбонил}окси)-пиридин-3'-карбоксимидамида (II).

(+)-Кетопиновую кислоту (300 мг, 1.65 ммоль, 1.0 экв.) и карбонилдиимидазол (320 мг, 1.98 ммоль, 1.2 экв.) растворяют в хлористом метилене (10 мл) и перемешивают при комнатной температуре в течение 3-5 часов в атмосфере воздуха. Затем в раствор добавляют N-гидроксипиридин-3'-карбоксимидамид (271 мг, 1.98 ммоль, 1.2 экв.). Реакцию проводят, как описано в примере 1, О-ациламидоксим Il выделяют с выходом 90% в виде белого порошка.

Спектр ¹H ЯМР (500 МГц, CDCl₃, δ): 1.18 (с, 3H, 8-СН₃ или 9-СН₃), 1.19 (с, 3H, 8-СН₃ или 9-СН₃), 1.46 (ддд, 1H, J=4.0, J=9.3, J=12.9, эндо-5-CH₂, 1.85 (ддд, IH, J=4.9, J=9.3, J=4.2, эндо-6-CH₂, 2.00 (д, IH, J=18.6, эндо-3-CH₂), 2.06-2.14 (м, 1H, экзо-6-CH₂, 2.15-2.17 (м, IH, экзо-5-СН₂), 2.50-2.53 (м, 1Н, 4-СН), 2.55-2.60 (м, 1H, экзо-3-CH₂, 7.32 (дд, 1H, J=0.8, J=8.0, 5'-СН), 8.03-8.06 (м, 1H, 4'-СН), 8.68 (дд, 1Н, J=1.7, J=4.9, 6'-СН), 8.92-8.93 (м, 1H, 2'-СН). Спектр ¹³С ЯМР (126 МГц, CDCl₃, δ): 19.6 (С-8 или С-9), 20.9 (С-8 или С-9), 26.7 (С-5), 27.0 (С-6), 43.7 (С-3), 44.1 (С-4), 49.4 (С-7), 67.5 (С-1), 123.3 (С-6'), 127.2 (С-3'), 134.5 (С-4'), 147.7 (С-2'), 152.0 (С-6'), 157.2 (С-11), 166.8 (С-10), 212.8 (С-2).

Т_пл. 142.0-142.6°С. (CHCl₃, с=0.2). HRMS (ESI⁺): m/z вычислено для C₁₆H₁₉O₃N₃⁺ 301.1421; найдено 301.1424. ИК (см^-1): 3472, 3325, 2926, 1727, 1624, 1397, 1309, 1219, 1094, 1022, 918, 813, 715.

Пример 13.

Получение N'-({[(1S,4R)-7,7-диметил-2-оксобицикло[2.2.1]гепт-1-ил]карбонил}окси)-пиридин-4'-карбоксимидамида (Im).

(+)-Кетопиновую кислоту (300 мг, 1.65 ммоль, 1.0 экв.) и карбонилдиимидазол (320 мг, 1.98 ммоль, 1.2 экв.) растворяют в хлористом метилене (10 мл) и перемешивают при комнатной температуре в течение 3-5 часов в атмосфере воздуха. Затем в раствор добавляют N-гидроксипиридин-4'-карбоксимидамид (271 мг, 1.98 ммоль, 1.2 экв.). Реакцию проводят, как описано в примере 1, О-ациламидоксим Im выделяют с выходом 80% в виде белого порошка.

Спектр ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃, δ): 1.17 (с, 6Н, 8-СН₃, 9-СН₃), 1.45 (ддд, 1Н, J=4.0, J=9.3, J=12.8, эндо-5-CH₂, 1.83 (ддд, 1H, J=4.9, J=9.4, J=14.2, эндо-6-CH₂, 1.99 (д, 1H, J=18.6, эндо-3-CH₂, 2.05-2.14 (м, 1Н, экзо-6-CH₂), 2.14-2.17 (м, 1Н, экзо-5-СН₂), 2.47-2.52 (м, 1H, 4-СН), 2.54-2.60 (м, 1H, экзо-3-СН₂), 7.59 (дд, 2Н, J=1.7, J=4.5, 3'-СН, 5'-СН), 8.66 (дд, 2Н, J=1.6, J=4.4, 2'-СН, 6'-СН). Спектр ¹³С ЯМР (101 МГц, CDCl₃, δ): 19.5 (С-8 или С-9), 20.8 (С-8 или С-9), 26.6 (С-5), 26.9 (С-6), 43.7 (С-3), 44.0 (С-4), 49.5 (С-7), 67.4 (С-1), 120.8 (С-3', С-5'), 138.5 (С-4'), 150.3 (С-2', С-6'), 157.2 (С-11), 166.7 (С-10), 212.8 (С-2).

Т_пл. 144.5-145.6°С. (CHCl₃, с=0.6). HRMS (ESI⁺): m/z вычислено для C₁₆H₁₉O₃N₃⁺ 301.1421; найдено 301.1417. ИК (см^-1): 3387, 3217, 2978, 1724, 1659, 1543, 1450, 1416, 1315, 1205, 1095, 1007, 833, 555.

Пример 14.

Получение (1R,4R)-7,7-диметил-1-(3'-изопропил-1',2',4'-оксадиазол-5'-ил)бицикло[2.2.1]гептан-2-она (IIa).

К раствору О-ациламидоксима Ia (200 мг, 0.75 ммоль, 1.0 экв.) в 5 мл ТГФ добавляют Bu₄NF (0.25 экв.) (в виде раствора Bu₄NF в ТГФ (1 ммоль на 1 мл)) и кипятят с обратным холодильником в течение 30-60 минут в атмосфере воздуха до полной конверсии исходного О-ациламидоксима Ia (ход реакции контролируют ТСХ, элюент CHCl₃). После завершения реакции растворитель удаляют на роторном испарителе, а сырой продукт растворяют в минимальном объеме хлороформа и очищают колоночной хроматографией (SiO₂, CHCl₃). В результате получают целевой 1,2,4-оксадиазол Па с выходом 75% в виде бесцветной аморфной субстанции.

Спектр ¹Н ЯМР (500 МГц, CDCl₃, δ): 1.01 (с, 3H, 8-СН₃ или 9-СН₃), 1.20 (с, 3H, 8-СН₃ или 9-СН₃), 1.31 (д, 3H, J=1.8, 11-СН₃ или 12-СН₃), 1.32 (д, 3H, J=1.8, 11-СН₃ или 12-СН₃), 1.52 (ддд, 1H, J=4.1, J=9.4, J=13.0, эндо-5-СН₂), 2.00 (ддд, 1H, J=4.8, J=9.3,.J=14.1, эндо-6-CH₂), 2.04 (д, 1Н, J=18.6, эндо-3-СН₂), 2.10-2.17 (м, 1Н, экзо-6-CH₂), 2.21-2.23 (м, 1H, экзо-5-CH₂), 2.54-2.58 (м, 1Н, 4-СН), 2.59-2.65 (м, 1H, экзо-3-CH₂, 3.07 (секстет, 1H, J=7.0, 10-СН). Спектр ¹³С ЯМР (126 МГц, CDCl₃, δ): 19.5 (С-8 или С-9), 20.2 (С-11 или С-12), 20.4 (С-11 или С-12), 20.7 (С-8 или С-9), 26.7 (С-5), 26.8 (С-10), 27.2 (С-6), 43.6 (С-3), 44.0 (С-4), 50.4 (С-7), 62.4 (С-1), 174.7 (С-3'), 175.3 (С-5'), 209.9 (С-2).

(CHCl₃, с=0.5). HRMS (ESI⁺): m/z вычислено для C₁₄H₂₀O₂N₂⁺ 248.1569; найдено 248.1516. ИК (см^-1): 3487, 2972, 1757, 1578, 1468, 1391, 1261, 1065, 951, 789.

Пример 15.

Получение (1R,4R)-7,7-диметил-1-(3'-фенил-1',2',4'-оксадиазол-5'-ил)бицикло[2.2.1]гептан-2-она (IIb).

К раствору О-ациламидоксима Ib (200 мг, 0.67 ммоль, 1.0 экв.) в 5 мл ТГФ добавляют Bu₄NF (0.25 экв.) (в виде раствора Bu₄NF в ТГФ (1 ммоль на 1 мл)). Реакцию проводят, как описано в примере 14, 1,2,4-оксадиазол IIb выделяют с выходом 60% в виде бесцветной аморфной субстанции.

Спектр ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃, δ): 1.07 (с, 3H, 8-СН₃ или 9-СН₃), 1.29 (с, 3H, 8-СН₃ или 9-СН₃), 1.57 (ддд, 1H, J=4.5, J=9.3, J=13.0, эндо-5-СН₂), 2.09 (д, 1H, J=18.5, эндо-3-СН₂), 2.06-2.22 (м, 2Н, эндо-6-СН₂, экзо-6-CH₂, 2.25-2.27 (м, 1H, экзо-5-CH₂, 2.62-2.70 (м, 2Н, 4-СН, экзо-3-CH₂, 7.42-7.49 (м, 3H, 3''-СН, 4''-СН, 5'-СН), 8.07-8.09 (м, 2Н, 2''-СН, 6''-СН). Спектр ¹³С ЯМР (101 МГц, CDCl₃, δ): 19.5 (С-8 или С-9), 20.8 (С-8 или С-9), 26.7 (С-5), 27.2 (С-6), 43.6 (С-3), 44.1 (С-4), 50.5 (С-7), 62.5 (С-1), 126.8 (С-1''), 127.4 (С-2'', С-6''), 128.6 (С-3'', С-5''), 130.9 (С-4''), 168.1 (С-3'), 176.0 (С-5'), 209.7 (С-2).

(CHCl₃, с=2.0). HRMS (ESI⁺): m/z вычислено для C₁₇H₁₈O₂N₂⁺ 282.1363; найдено 282.1366. ИК (см^-1): 3487, 2970, 1755, 1568, 1446, 1364, 1288, 1088, 1028, 951, 694.

Пример 16.

Получение (1R,4R)-7,7-диметил-1-[3'-(4''-фторфенил)-1',2',4'-оксадиазол-5'-ил]бицикло[2.2.1]гептан-2-он (IIc).

К раствору О-ациламидоксима Ic (200 мг, 0.63 ммоль, 1.0 экв.) в 5 мл ТГФ добавляют Bu₄NF (0.25 экв.) (в виде раствора Bu₄NF в ТГФ (1 ммоль на 1 мл)). Реакцию проводят, как описано в примере 14, 1,2,4-оксадиазол IIc выделяют с выходом 55% в виде белого порошка.

Спектр ¹H ЯМР (500 МГц, CDCl₃, δ): 1.07 (с, 3H, 8-СН₃ или 9-СН₃), 1.28 (с, 3H, 8-СН₃ или 9-СН₃), 1.57 (ддд, 1H, J=4.1, J=9.2, J=13.0, эндо-5-CH₂, 2.09 (д, 1H, J=18.4, эндо-3-CH₂), 2.06-2.12 (м, 1Н, эндо-6-СН₂), 2.15-2.22 (м, 1Н, экзо-6-CH₂), 2.26-2.28 (м, 1Н, экзо-5-CH₂, 2.62-2.69 (м, 2Н, 4-СН, экзо-3-CH₂), 7.11-7.16 (м, 2Н, 3''-СН, 5''-СН), 8.06-8.10 (м, 2Н, 2''-СН, 6''-СН). Спектр ¹³С ЯМР (126 МГц, CDCl₃, δ): 19.5 (С-8 или С-9), 20.8 (С-8 или С-9), 26.7 (С-5), 27.2 (С-6), 43.6 (С-3), 44.1 (С-4), 50.5 (С-7), 62.5 (С-1), 115.7 (С-2'' или С-6''), 115.9 (С-2'' или С-6''), 123.0 (С-1'', J^F=3.1), 129.5 (С-3'' или С-5''), 129.6 (С-3'' или С-5''), 164.4 (С-4'', J^F=251.3), 167.3 (С-3'), 176.1 (С-5'), 209.7 (С-2).

Т_пл. 65.4-67.7°С. (CHCl₃, с=0.2). HRMS (ESI⁺): m/z вычислено для C₁₇H₁₇FO₂N2⁺ 300.1269; найдено 300.1272. ИК (см^-1): 3439, 2970, 1755, 1576, 1483, 1418, 1356, 1217, 1157, 1086, 1024, 847, 627.

Пример 17.

Получение (1R,4R)-7,7-диметил-1-[3'-(3''-фторфенил)-1',2',4'-оксадиазол-5'-ил]бицикло[2.2.1]гептан-2-она (IId).

К раствору О-ациламидоксима Id (200 мг, 0.63 ммоль, 1.0 экв.) в 5 мл ТГФ добавляют Bu₄NF (0.25 экв.) (в виде раствора Bu₄NF в ТГФ (1 ммоль на 1 мл)). Реакцию проводят, как описано в примере 14, 1,2,4-оксадиазол IId выделяют с выходом 50% в виде белого порошка.

Спектр ¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃, δ): 1.07 (с, 3H, 8-СН₃ или 9-СН₃), 1.29 (с, 3H, 8-СН₃ или 9-СН₃), 1.57-1.62 (м, 1H, эндо-5-CH₂), 2.06-2.29 (м, 4Н, эндо-6-CH₂, эндо-3-CH₂, экзо-6-CH₂, экзо-5-CH₂), 2.61-2.70 (м, 2Н, 4-СН, экзо-3-CH₂, 7.14-7.20 (м, 1H, 4''-СН), 7.39-7.46 (м, 1H, 2''-СН), 7.77-7.80 (м, 1Н, 6''-СН), 7.87-7.90 (м, 1Н, 5''-СН). Спектр ¹³С ЯМР (75 МГц, CDCl₃, δ): 19.5 (С-8 или С-9), 20.8 (С-8 или С-9), 26.7 (С-5), 27.2 (С-6), 43.6 (С-3), 44.2 (С-4), 50.5 (С-7), 62.6 (С-1), 114.6 (С-2'', J^F=23.8), 117.9 (С-4'', J^F=21.2), 123.1 (С-6'', J^F=3.3), 128.8 (С-1'', J^F=8.6), 130.3 (С-5'', J^F=8.1), 162.8 (С-3'', J^F=246.8), 167.3 (С-3', J^F=3.0), 176.3 (С-5'), 209.6 (С-2).

Т_пл. 77.7-78.4°С. (CHCl₃, с=0.4). HRMS (ESI⁺): m/z вычислено для C₁₇H₁₇FO₂N2⁺ 300.1269; найдено 300.1270. ИК (см^-1): 3448, 2968, 1755, 1574, 1485, 1364, 1202, 1068, 860, 847, 783,677.

Пример 18.

Получение (1R,4R)-7,7-диметил-1-[3'-(2''-фторфенил)-1',2',4'-оксадиазол-5'-ил]бицикло[2.2.1]гептан-2-она (IIe).

К раствору О-ациламидоксима Iе (200 мг, 0.63 ммоль, 1.0 экв.) в 5 мл ТГФ добавляют Bu₄NF (0.25 экв.) (в виде раствора Bu₄NF в ТГФ (1 ммоль на 1 мл)). Реакцию проводят, как описано в примере 14, 1,2,4-оксадиазол IIe выделяют с выходом 65% в виде бесцветной аморфной субстанции.

Спектр ¹Н ЯМР (500 МГц, CDCl₃, δ): 1.07 (с, 3H, 8-СН₃ или 9-СН₃), 1.29 (с, 3H, 8-СН₃ или 9-СН₃), 1.58 (ддд, 1H, J=3.8, J=9.0, J=12.7, эндо-5-CH₂, 2.09 (д, IH, J=18.4, эндо-3-CH₂), 2.07-2.14 (м, 1Н, эндо-6-CH₂), 2.15-2.22 (м, 1H, экзо-6-CH₂), 2.27-2.28 (м, 1H, экзо-5-CH₂), 2.63-2.70 (м, 2Н, 4-СН, экзо-3-СН₂), 7.18-7.27 (м, 2Н, 3''-СН, 5''-СН), 7.44-7.49 (м, 1H, 4''-СН), 8.06-8.09 (м, 1Н, 6''-СН). Спектр ¹³С ЯМР (126 МГц, CDCl₃, δ): 19.5 (С-8 или С-9), 20.8 (С-8 или С-9), 26.7 (С-5), 27.2 (С-6), 43.6 (С-3), 44.2 (С-4), 50.5 (С-7), 62.5 (С-1), 115.1 (С-1'', J^F=12.3), 116.5 (С-3'', J^F=21.0), 124.2 (С-5'', J^F=3.6), 130.9 (С-6'', J^F=1.8), 132.5 (С-4'', J^F=8.3), 160.6 (С-2', J^F=257.5), 165.0 (С-3', J^F=5.5), 175.6 (С-5'), 209.6 (С-2).

(CHCl₃, с=0.8). HRMS (ESI⁺): m/z вычислено для C₁₇H₁₇FO₂N₂⁺ 300.1269; найдено 300.1271. ИК (см^-1): 3487, 2970, 1757, 1570, 1487, 1354, 1230, 1078, 951, 754, 665.

Пример 19.

Получение (1R,4R)-7,7-диметил-1-[3'-(4''-хлорфенил)-1',2',4'-оксадиазол-5'-ил]бицикло[2.2.1]гептан-2-она (IIf).

К раствору О-ациламидоксима If (200 мг, 0.60 ммоль, 1.0 экв.) в 5 мл ТГФ добавляют Bu₄NF (0.25 экв.) (в виде раствора Bu₄NF в ТГФ (1 ммоль на 1 мл)). Реакцию проводят, как описано в примере 14, 1,2,4-оксадиазол IIf выделяют с выходом 70% в виде белого порошка.

Спектр ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃, 3): 1.07 (с, 3H, 8-СН₃ или 9-СН₃), 1.28 (с, 3H, 8-СН₃ или 9-СН₃), 1.54-1.61 (м, 1H, эндо-5-CH₂), 2.07-2.23 (м, 3H, эндо-6-СН₂, эндо-3-СН₂, экзо-6-CH₂), 2.26-2.28 (м, 1H, экзо-5-СН₂), 2.61-2.70 (м, 2Н, 4-СН, экзо-3-CH₂), 7.42-7.44 (м, 2Н, 3''-СН, 5''-СН), 8.01-8.03 (м, 2Н, 2''-СН, 6''-СН). Спектр ¹³С ЯМР (101 МГц, CDCl₃, δ): 19.5 (С-8 или С-9), 20.8 (С-8 или С-9), 26.7 (С-5), 27.2 (С-6), 43.6 (С-3), 44.2 (С-4), 50.5 (С-7), 62.6 (С-1), 125.3 (С-1''), 128.8 (С-2'', С-6''), 129.0 (С-3'', С-5''), 137.1 (С-4''), 167.4 (С-3'), 176.3 (С-5'), 209.6 (С-2).

Т_пл. 77.3-78.0°С. (CHCl₃, с=0.9). HRMS (ESI⁺): m/z вычислено для C₁₇H₁₇³⁵ClO₂N₂⁺ 316.0973; найдено 316.0971. ИК(см^-1): 3435, 2972, 1753, 1585, 1564, 1470, 1406, 1358, 1094, 1014, 951, 839, 515.

Пример 20.

Получение (1R,4R)-7,7-диметил-1-[3'-(4''-бромфенил)-1',2',4'-оксадиазол-5'-ил]бицикло[2.2.1]гептан-2-она (IIg).

К раствору О-ациламидоксима Ig (200 мг, 0.53 ммоль, 1.0 экв.) в 5 мл ТГФ добавляют Bu₄NF (0.25 экв.) (в виде раствора Bu₄NF в ТГФ (1 ммоль на 1 мл)). Реакцию проводят, как описано в примере 14, 1,2,4-оксадиазол IIg выделяют с выходом 35% в виде белого порошка.

Спектр ¹H ЯМР (500 МГц, CDCl₃, δ): 1.06 (с, 3H, 8-СН₃ или 9-СН₃), 1.27 (с, 3H, 8-СН₃ или 9-СН₃), 1.54-1.63 (м, 1H, эндо-5-СН₂), 2.07-2.27 (м, 4Н, эндо-6-СН₂, эндо-3-СН₂, экзо-6-CH₂, экзо-5-CH₂), 2.62-2.68 (м, 2Н, 4-СН, экзо-3-CH₂), 7.58-7.59 (м, 2Н, 3''-СН, 5''-СН), 7.94-7.96 (м, 2Н, 2''-СН, 6''-СН). Спектр ¹³С ЯМР (126 МГц, CDCl₃, δ): 19.5 (С-8 или С-9), 20.8 (С-8 или С-9), 26.7 (С-5), 27.2 (С-6), 43.6 (С-3), 44.1 (С-4), 50.5 (С-7), 62.6 (С-1), 125.5 (С-1''), 125.7 (С-4''), 128.9 (С-2'', С-6''), 131.9 (С-3', С-5'), 167.4 (С-3'), 176.3 (С-5'), 209.2 (С-2).

Т_пл. 89.0-90.3°С. (CHCl₃, с=1.1). HRMS (ESI⁺): m/z вычислено для C₁₇H₁₇⁷⁹BrO₂N₂⁺ 360.0468; найдено 360.0464. ИК (см^-1): 3483, 2960, 1753, 1581, 1562, 1468, 1402, 1356, 1134, 1088, 1013, 951, 897, 835, 783, 630, 525.

Пример 21.

Получение (1R,4R)-7,7-диметил-1-[3'-(3''-фторбензил)-1',2',4'-оксадиазол-5'-ил]бицикло[2.2.1]гептан-2-она (IIh).

К раствору О-ациламидоксима Ih (200 мг, 0.60 ммоль, 1.0 экв.) в 5 мл ТГФ добавляют Bu₄NF (0.25 экв.) (в виде раствора Bu₄NF в ТГФ (1 ммоль на 1 мл)). Реакцию проводят, как описано в примере 14, 1,2,4-оксадиазол IIh выделяют с выходом 50% в виде бесцветной аморфной субстанции.

Спектр ¹Н ЯМР (500 МГц, CDCl₃, δ): 1.00 (с, 3H, 8-СН₃ или 9-СН₃), 1.19 (с, 3H, 8-СН₃ или 9-СН₃), 1.51-1.56 (м, 1H, эндо-5-СН₂), 1.98-2.04 (м, 1Н, эндо-6-СН₂), 2.06 (д, 1H, J=18.5, эндо-3-СН₂), 2.11-2.17 (м, 1H, экзо-6-СН₂), 2.23-2.24 (м, 1H, экзо-5-СН₂), 2.53-2.65 (м, 2Н, 4-СН, экзо-3-СН₂), 4.08 (с, 2Н, 10-СН₂), 6.91-6.94 (м, 1Н, 2''-СН), 7.02-7.04 (м, 1H, 4''-СН), 7.07-7.08 (м, 1H, 6''-СН), 7.24-7.28 (м, 1H, 5''-СН). Спектр ¹³С ЯМР (126 МГц, CDCl₃, δ): 19.5 (С-8 или С-9), 20.7 (С-8 или С-9), 26.6 (С-5), 27.1 (С-6), 31.9 (С-10), 43.6 (С-3), 44.1 (С-4), 50.5 (С-7), 62.4 (С-1), 113.9 (С-2'', J=21.0), 115.9 (С-4'', J=21.8), 124.5 (С-6'', J=2.1), 129.9 (С-5'', J=8.3), 137.6 (С-1'', J=7.7), 162.7 (С-3', J=246.1), 168.6 (С-3'), 176.2 (С-5'), 209.6 (С-2).

(CHCl₃, с=0.8). HRMS (ESI⁺): m/z вычислено для C₁₈H₁₉FO₂N₂⁺ 314.1425; найдено 314.1421. ИК (см^-1): 2970, 1757, 1574, 1489, 1367, 1248, 1140, 1047, 951, 775,683.

Пример 22.

Получение (1R,4R)-7,7-диметил-1-[3'-(4''-хлорбензил)-1',2',4'-оксадиазол-5'-ил]бицикло[2.2.1]гептаи-2-она (IIi).

К раствору О-ациламидоксима Ii (200 мг, 0.57 ммоль, 1.0 экв.) в 5 мл ТГФ добавляют Bu₄NF (0.25 экв.) (в виде раствора Bu₄NF в ТГФ (1 ммоль на 1 мл)). Реакцию проводят, как описано в примере 14, 1,2,4-оксадиазол IIi выделяют с выходом 50% в виде белого порошка.

Спектр ¹Н ЯМР (500 МГц, CDCl₃, δ): 0.99 (с, 3H, 8-СН₃ или 9-СН₃), 1.18 (с, 3H, 8-СН₃ или 9-СН₃), 1.53 (ддд, 1Н, J=4.0, J=9.4, J=13.0, эндо-5-CH₂, 2.00 (ддд, 1Н, J=4.9, J=9.3, J=14.1, эндо-6-CH₂, 2.05 (д, 1H, J=18.3, эндо-3-СН₂), 2.10-2.17 (м, 1Н, экзо-6-СН₂), 2.22-2.24 (м, 1Н, экзо-5-CH₂), 2.52-2.58 (м, 1H, 4-СН), 2.60-2.65 (м, 1H, экзо-3-СH₂), 4.05 (с, 2Н, 10-СН₂), 7.23-7.27 (м, 4Н, 2''-СН, 3''-СН, 5''-СН, 6''-СН). Спектр ¹³С ЯМР (126 МГц, CDCl₃, δ): 19.5 (С-8 или С-9), 20.7 (С-8 или С-9), 26.6 (С-5), 27.1 (С-6), 31.6 (С-10), 43.6 (С-3), 44.0 (С-4), 50.5 (С-7), 62.4 (С-1), 128.6 (С-3'', С-5''), 130.2 (С-2'', С-6''), 132.8 (С-1''), 133.8 (С-4''), 168.8 (С-3'), 176.2 (С-5'), 209.6 (С-2).

Т_пл. 88.3-89.7°С. (CHCl₃, с=0.6). HRMS (ESI⁺): m/z вычислено для C₁₈H₁₉³⁵ClO₂N₂⁺ 330.1130; найдено 330.1129. ИК (см^-1): 3442, 2970, 1755, 1572, 1493, 1414, 1362, 1288, 1092, 1014, 951, 856, 773, 505.

Пример 23.

Получение (1R,4R)-7,7-диметил-1-[3'-(4''-бромбензил)-1',2',4'-оксадиазол-5'-ил]бицикло[2.2.1]гептан-2-она (IIj).

К раствору О-ациламидоксима Ij (200 мг, 0.51 ммоль, 1.0 экв.) в 5 мл ТГФ добавляют Bu₄NF (0.25 экв.) (в виде раствора Bu₄NF в ТГФ (1 ммоль на 1 мл)). Реакцию проводят, как описано в примере 14, 1,2,4-оксадиазол IIj выделяют с выходом 65% в виде белого порошка.

Спектр ¹Н ЯМР (500 МГц, CDCl₃, δ): 0.99 (с, 3H, 8-СН₃ или 9-СН₃), 1.18 (с, 3H, 8-СН₃ или 9-СН₃), 1.53 (ддд, 1Н, J=4.2, J=9.4, J=13.1, эндо-5-СН₂), 2.00 (ддд, 1Н, J=4.9, J=9.4, J=14.1, эндо-6-СН₂), 2.06 (д, 1H, J=18.6, эндо-3-СН₂), 2.10-2.18 (м, 1H, экзо-6-CH₂), 2.22-2.24 (м, 1H, экзо-5-СН₂), 2.52-2.58 (м, 1Н, 4-СН), 2.60-2.65 (м, 1Н, экзо-3-CH₂), 4.03 (с, 2Н, 10-СН₂), 7.18-7.19 (м, 2Н, 3''-СН, 5''-СН), 7.41-7.42 (м, 2Н, 2''-СН, 6''-СН). Спектр ¹³С ЯМР (126 МГц, CDCl₃, δ): 19.5 (С-8 или С-9), 20.7 (С-8 или С-9), 26.7 (С-5), 27.1 (С-6), 31.7 (С-10), 43.6 (С-3), 44.1 (С-4), 50.5 (С-7), 62.4 (С-1), 120.9 (С-4''), 130.6 (С-3'', С-5''), 131.6 (С-2'', С-6''), 134.3 (С-1''), 168.7 (С-3'), 176.2 (С-5'), 209.6 (С-2).

Т_пл. 110.1-113.5°С. (CHCl₃, с=0.9). HRMS (ESI⁺): m/z вычислено для C₁₈H₁₉⁷⁹BrO₂N₂⁺ 374.0624; найдено 374.0619. ИК(см⁴): 3485, 2970, 1757, 1572, 1489, 1416, 1360, 1097, 1068, 1011,951,771,679, 498.

Пример 24.

Получение (1R,4R)-7,7-диметил-1-[3'-(пиридин-2''-ил)-1',2',4'-оксадиазол-5'-ил]бицикло[2.2.1]гептан-2-она (IIk).

К раствору О-ациламидоксима Ik (200 мг, 0.66 ммоль, 1.0 экв.) в 5 мл ТГФ добавляют Bu₄NF (0.25 экв.) (в виде раствора Bu₄NF в ТГФ (1 ммоль на 1 мл)). Реакцию проводят, как описано в примере 14, 1,2,4-оксадиазол IIk выделяют с выходом 65% в виде белого порошка.

Спектр ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃, δ): 1.06 (с, 3H, 8-СН₃ или 9-СН₃), 1.28 (с, 3H, 8-СН₃ или 9-СН₃), 1.55-1.60 (м, 1H, эндо-5-CH₂), 2.10 (д, 1H, J=18.6, эндо-3-CH₂, 2.11-2.28 (м, 3H, эндо-6-CH₂, экзо-6-CH₂, экзо-5-CH₂), 2.64-2.80 (м, 2Н, 4-СН, экзо-3-CH₂), 7.39 (дд, 1H, J=1.0, J=7.6, 4''-СН), 7.73 (дд, 1H, J=1.7, J=7.7, 5''-СН), 8.14-8.17 (м, 1Н, 3''-СН), 8.78-8.79 (м, 1H, 6''-СН). Спектр ¹³С ЯМР (101 МГц, CDCl₃, δ): 19.6 (С-8 или С-9), 20.9 (С-8 или С-9), 26.7 (С-5), 27.3 (С-6), 43.6 (С-3), 44.2 (С-4), 50.7 (С-7), 62.7 (С-1), 123.3 (С-3''), 125.3 (С-5''), 136.8 (С-4''), 146.4 (С-2''), 150.3 (С-6''), 167.9 (С-3'), 177.0 (С-5'), 209.5 (С-2).

Т_пл. 141.4-141.6°С. (CHCl₃, с=0.4). HRMS (ESI⁺): m/z вычислено для C₁₆H₁₇O₂N₃⁺ 283.1315; найдено 283.1313. ИК (см^-1): 3460, 2958, 1743, 1585, 1365, 1159, 1022, 951,746,714.

Пример 25.

Получение (1R,4R)-7,7-диметил-1-[3'-(пиридин-3''-ил)-1',2',4'-оксадиазол-5'-ил]бицикло[2.2.1]гептан-2-она (III).

К раствору О-ациламидоксима II (200 мг, 0.66 ммоль, 1.0 экв.) в 5 мл ТГФ добавляют Bu₄NF (0.25 экв.) (в виде раствора Bu₄NF в ТГФ (1 ммоль на 1 мл)). Реакцию проводят, как описано в примере 14, 1,2,4-оксадиазол III выделяют с выходом 60% в виде белого порошка.

Спектр ¹Н ЯМР (500 МГц, CDCl₃, δ): 1.07 (с, 3H, 8-СН₃ или 9-СН₃), 1.28 (с, 3H, 8-СН₃ или 9-СН₃), 1.58 (ддд, IH, J=4.3, J=9.3, J=13.0, эндо-5-СН₂), 2.10 (д, 1Н, J=18.7, эндо-3-СН₂), 2.11 (ддд, 1H, J=4.8, J=9.5, J=14.3, эндо-6-CH₂, 2.16-2.23 (м, 1H, экзо-6-СН₂), 2.27-2.29 (м, 1H, экзо-5-CH₂, 2.62-2.70 (м, 2Н, 4-СН, экзо-3-СН₂), 7.38-7.41 (м, 1H, 5''-СН), 8.34-8.36 (м, 1H, 4''-СН), 8.71-8.72 (дд, 1H, J=1.7, J=4.9, 6''-СН), 9.30-9.32 (м, 1H, 2''-СН). Спектр ¹³С ЯМР (126 МГц, CDCl₃, δ): 19.5 (С-8 или С-9), 20.8 (С-8 или С-9), 26.7 (С-5), 27.2 (С-6), 43.6 (С-3), 44.1 (С-4), 50.6 (С-7), 62.6 (С-1), 123.0 (С-3''), 123.4 (С-5''), 134.7 (С-4''), 148.6 (С-2''), 151.8 (С-6''), 166.2 (С-3'), 176.6 (С-5'), 209.6 (С-2).

Т_пл. 78.6-79.7°С. (CHCl₃, с=0.7). HRMS (ESI⁺): m/z вычислено для C₁₆H₁₇O₂N₃⁺ 283.1315; найдено 283.1317. ИК (см^-1): 3468, 2957, 1751, 1566, 1433, 1354, 1088, 1026, 949, 822,708.

Пример 26.

Получение (1R,4R)-7,7-диметил-1-[3'-(пиридин-4''-ил)-1',2',4'-оксадиазол-5'-ил]бицикло[2.2.1]гептан-2-она (IIm).

К раствору О-ациламидоксима Im (200 мг, 0.66 ммоль, 1.0 экв.) в 5 мл ТГФ добавляют Bu₄NF (0.25 экв.) (в виде раствора Bu₄NF в ТГФ (1 ммоль на 1 мл)). Реакцию проводят, как описано в примере 14, 1,2,4-оксадиазол IIm выделяют с выходом 65% в виде белого порошка.

Спектр ¹Н ЯМР (500 МГц, CDCl₃, δ): 1.08 (с, 3H, 8-СН₃ или 9-СН₃), 1.29 (с, 3H, 8-СН₃ или 9-СН₃), 1.59 (ддд, 1H, J=4.2, J=9.5, J=12.9, эндо-5-CH₂, 2.09 (д, 1Н, J=18.5, эндо-3-CH₂), 2.10-2.14 (м, 1Н, эндо-6-СН₂), 2.17-2.22 (м, 1Н, экзо-6-CH₂, 2.27-2.29 (м, 1H, экзо-5-CH₂, 2.62-2.69 (м, 2Н, 4-СН, экзо-3-СН₂), 7.94-7.95 (м, 2Н, 3''-СН, 5''-СН), 8.74-8.75 (м, 2Н, 2''-СН, 6''-СН). Спектр ¹³С ЯМР (126 МГц, CDCl₃, δ): 19.5 (С-8 или С-9), 20.8 (С-8 или С-9), 26.7 (С-5), 27.3 (С-6), 43.6 (С-3), 44.2 (С-4), 50.6 (С-7), 62.7 (С-1), 121.3 (С-2'', С-6''), 134.2 (С-4''), 150.5 (С-3'', С-5''), 166.7 (С-3'), 177.0 (С-5'), 209.2 (С-2).

Т_пл. 60.8-61.5°С. (CHCl₃, с=0.4). HRMS (ESI⁺): m/z вычислено для C₁₆H₁₇O₂N₃⁺ 283.1315; найдено 283.1315. ИК (см^-1): 3481, 2970, 1757, 1583, 1556, 1472, 1416, 1369, 1311, 1213, 951, 837, 752, 696.

Пример 27.

Изучение цитотоксичности соединений Ia-m, IIa-m.

Цитотоксичность соединений Ia-m, IIa-m была изучена в отношении клеток MDCK. Клетки MDCK сеяли в 96-луночные планшеты (10⁴ клеток на лунку) и инкубировали при 36°С в 5% CO₂ до состояния монослоя. Для оценки цитотоксичности соединений готовили серию их трехкратных разведений в среде MEM от 300 мкг/мл до 4 мкг/мл. Растворенные вещества вносили в лунки планшетов и инкубировали 72 часа при 36°С в атмосфере 5% CO₂. Количество живых клеток оценивали при помощи микротетразолиевого теста (МТТ). Клетки дважды промывали водным раствором хлорида натрия (0.9% NaCl) и добавляли 100 мкл раствора 3-(4,5-диметилтиазолил-2)-2,5-дифенилтетразолийбромида (ICN Biochemicals Inc., Aurora, Ohio) на лунку в концентрации 0.5 мкг/мл. Клетки инкубировали в течение 1 часа при 36°С в атмосфере 5% СО₂, жидкость удаляли и добавляли ДМСО в количестве 100 мкл на лунку. Оптическую плотность в лунках планшетов далее измеряли на многофункциональном спектрофотометре Victor 1420 (Perkin Elmer, Finland) при длине волны 535 нм. По результатам теста определяли 50% цитотоксическую концентрацию (СС₅₀), т.е. концентрацию соединения, вызывающую гибель 50% клеток в культуре. Результаты приведены в таблицах 1,2.

Пример 28.

Изучение противовирусной активности соединений Ia-m, IIa-m в отношении вируса гриппа A/Puerto Rico/8/34 (H1N1) и A/Anhui/1/2013 (H7N9).

Определение противовирусной активности препаратов проводили на клетках MDCK в 96-луночных планшетах для клеточных культур. Соединения в соответствующих концентрациях добавляли к клеткам MDCK в количестве 0.1 мл на лунку. Клетки MDCK дополнительно инфицировали вирусом гриппа A/Puerto Rico/8/34 (H1N1) или A/Anhui/1/2013 (H7N9) (m.o.i. 0.01). Планшеты инкубировали 72 часа при 36°С и 5% CO₂. После этого жизнеспособность клеток оценивали с помощью МТТ-теста, как это было описано в примере 27. Вирусингибирующее действие исследуемых соединений оценивали по способности увеличивать значения оптической плотности по сравнению с контрольными лунками, содержащими только вирус, без препаратов. На основании полученных данных рассчитывали 50% ингибирующую концентрацию IC₅₀, то есть концентрацию препарата, снижающую уровень вирусной репродукции вдвое по сравнению с контролем, и химиотерапевтический индекс или индекс селективности (SI), представляющий собой отношение СС₅₀ к IC₅₀. В процессе исследования ингибирования репродукции вирусов гриппа A/Puerto Rico/8/34 (H1N1) и A/Anhui/1/2013 (H7N9) соединениями Ia-m, IIa-m и препаратами сравнения (ремантадином, осельтамивиром) были получены результаты, приведенные в таблицах 1 и 2 соответственно.

Таким образом, заявляемые соединения Ia-m, IIa-m обладают выраженной противовирусной активностью наряду с низкой цитотоксичностью. Химиотерапевтический индекс соединений Ia-m, Ila-m в отношении обоих штаммов вируса гриппа (H7N9, H1N1) превышает таковой у ремантадина, и сравним с таковым у осельтамивира. Преимуществом перечисленных соединений является их активность в отношении «птичьего» гриппа (A/Anhui/1/2013 (H7N9)) наряду с активностью в отношении вируса гриппа A/Puerto Rico/8/34 (H1N1). В качестве отдельных преимуществ заявляемых соединений можно отметить коммерческую доступность (+)-камфоры и ее производных (в частности (1S)-(+)-камфор-10-сульфоновой кислоты - стартового материала для синтеза целевых соединений Ia-m, IIa-m), хорошие выходы целевых соединений и возможность масштабирования синтеза целевых соединений.

Изобретение относится к области медицины и фармацевтики. Предложено применение О-ациламидоксимов и 3,5-дизамещенных-1,2,4-оксадиазолов общей формулы I и II соответственно, в качестве ингибиторов репродукции вируса гриппа А, такого как штамм A/Anhui/1/2013 (H7N9). Соединения проявляют высокую степень подавления репликации вируса гриппа в культуре клеток MDCK. 1 ил., 2 табл., 28 пр.

I d, g II c, d, i

R = d) 3-FC₆H₄, g) 4-BrC₆H₄, с) 4-FC₆H₄, i) 4-ClC₆H₄CH₂-.

Применение О-ациламидоксимов и 3,5-дизамещенных-1,2,4-оксадиазолов общей формулы I и II соответственно,

I d, g II c, d, i,

R = d) 3-FC₆H₄, g) 4-BrC₆H₄, с) 4-FC₆H₄, i) 4-ClC₆H₄CH₂-,

в качестве ингибиторов репродукции вируса гриппа А, конкретно штамма A/Anhui/1/2013 (H7N9).