СМЕСЬ ЭКСТРАКТОВ ПЛОДОВ ZIZIPHUS JUJUBE MILL., ОБЛАДАЮЩАЯ ПРОТИВОЯЗВЕННЫМ, ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНЫМ ДЕЙСТВИЯМИ Российский патент 2023 года по МПК A61K36/725 A61K131/00 A61P1/04 A61P29/00 

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, к средству на основе смеси экстрактов растительного происхождения, а именно - к смеси комплексного экстракта (полиэкстракта) плодов зизифуса обыкновенного Ziziphus jujubeMill., обладающего противоязвенной, противовоспалительной и иммуномодулирующей активностью. Лекарственное средство, согласно изобретению, может быть применено для лечения язвенных процессов в области желудочно-кишечного тракта и заболеваний, сопровождающихся нарушением иммунных процессов в организме.

Применение предполагает использование лекарственного средства на основе смеси экстрактов плодов Ziziphus jujubeMill. в гастроэнтерологии. Плоды Ziziphus jujubeMill обладают различными видами биологической активности, включая иммуномодулирующую, антиоксидантную, противовоспалительную и противоязвенную. Данные виды биологической активности обусловлены наличием биологически активных соединений в плодах, таких как тритерпеновые сапонины, флавоноиды, витамины и полисахариды. Способность данных классов соединений повышать иммунитет организма, ускорять процессы регенерации и обеспечивать противовоспалительное действие послужили основанием для их широкого применения в комплексной терапии воспалительных заболеваний, язвенных заболеваний желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) при вяло текущих регенеративных процессах и ряде других заболеваний. Данные группы соединений мобилизуют иммунную систему организма для ответа на возникающие патологические процессы.

Оптимальный методологический подход при разработке современных лекарственных средств природного происхождения заключается в использовании отдельных видов лекарственного растительного сырья. При этом рецептура разрабатывается с учетом представлений об этиологии и патогенезе заболевания, а также химических и фармакологических данных о компонентах препарата, состоянии сырьевой базы и ряда других факторов.

Опыт применения многокомпонентных растительных лекарственных средств в народной и традиционной медицине разных стран мира показывает, что выделенное в чистом виде из растения одно биологически активное вещество или несколько очищенных фракций часто действуют иначе, чем галеновые препараты, которые содержат практически все группы биологически активных веществ, входящих в состав данного растения, причем в более или менее натуральных соотношениях.

Исходя из этого в настоящее время при разработке лекарственных препаратов растительного происхождения наблюдается возврат к использованию лекарственных растений в целом и комплексных препаратов из них.

Наиболее популярными во всем мире традиционными многокомпонентными лекарственными средствами растительного происхождения являются сборы, настойки, экстракты, при этом последние наиболее удобны и хорошо стандартизированы.

Современные данные о лекарственных растениях, такие как химический состав, виды фармакологического действия, применение в медицинской практике и др. позволяют оценить эти растения с точки зрения целесообразности их использования, как самостоятельных источников получения лекарственных средств, так и в качестве ингредиентов для создания на их основе комплексного фитохимического препарата с преимущественно противовоспалительной, противоязвенной и иммуномодулирующей активностью. Одним из таких растений является Zízíphus jujúba Mill.

Результаты исследований отечественных и зарубежных ученых показывают потенциал использования как комплекса биологически активных веществ из плодов Zízíphus jujúba Mill., так отдельных его компонентов в создании на их основе лекарственных средств. По литературным данным в плодах зизифуса содержатся различные компоненты, в числе которых тритерпеновые сапонины, флавоноиды, витамины, аминокислоты, сапонины, фенольные кислоты, минеральные компоненты и полисахариды. Обладая комплексом биологически активных веществ, фармакологический эффект плодов зизифуса обыкновенного характеризуется противовоспалительной, противоязвенной и иммуномодулирующей активностью.

В настоящий момент на основе плодов зизифуса известен сбор «Зизифус-Унаби», состоящий из плодов и листьев, взятых в соотношении 70 мас. % плодов Zízíphus jujúba Mill. 30 мас. % листьев Zízíphus jujúba Mill. Сбор получают путем простого механического смешивания предварительно высушенных и измельченных плодов и листьев зизифуса обыкновенного. Основным недостатком сбора являются необходимость его использования в виде настоя, что требует предварительного приготовления препарата, а также незначительный срок хранения, не превышающий семь дней, что ограничивает возможность его применения. В дополнении, продукт обладает выраженным диуретическим эффектом, что также ограничивает возможность его применения для лечения лежачих больных и иных лиц, не способных к самообслуживанию.

В результате проведенного патентно-информационного исследования были отобраны следующие патенты.

Известен способ приготовления цукатов и ззизифуса (РФ №2704827), предусматривающий промывку плодов зизифуса, высушивание, разрезание плодов вдоль на 4 части. Приготовление фруктозоглюкозного сиропа с корицей молотой, содержание сухих веществ в сиропе 65-70%. Заливка плодов зизифуса сиропом, доведение до кипения, прогревание в течение 25-30 минут, выдержка в течение 6 часов при температуре 25-30°С. Доведение до кипения и варку на медленном огне в течение 20-30 минут. Удаление излишков сиропа со сваренных плодов зизифуса, подсушивание готовых цукатов при температуре 15-25°С. Изобретение обеспечивает получение продукта, обладающего высокими потребительскими свойствами.

Известна композиция травяного фиточая (РФ №2700629), обладающая повышенной биологической и пищевой ценностью и включающая листья мяты перечной (MenthapiperitaL.), малины обыкновенной (RubusidaeusL.), смородины черной (RibesnigrumL.), подорожника большого (PlantagomajorL.), земляники лесной (FragariavescaL.), облепихи (HippophaeL.), вишни (Prunussubgen Cerasus(Mill.) A.Gray), крапивы двудомной (UrticadioicaL.), березы обыкновенной (BetulaalbaL.); траву зверобоя продырявленного (HypericumperforatumL.), душицы обыкновенной (OrigcmumvulgareL.), шалфея лекарственного (SalviaofficinalisL.), тысячелистника обыкновенного (AchilleamillefoliumL.), девясила высокого (InulaheleniumL.), мать-и-мачехи обыкновенной (TussilagofarfaraL.), мелиссы лекарственной (MelissaofficinalisL.), тимьяна обыкновенного (Thymusvulgarish.); полыни эстрагонной (ArtemisiadracunculusL.); цветки липы европейской (TiliaeuropaeaL.), календулы лекарственной (CalendulaofficinalisL.); плоды малины обыкновенной (RubusidaeusL.), земляники лесной (FragariavescaL.), яблони (MalusP. Mill.), шиповника (RosaL.), лимонника китайского (Schisandrachinensis (Turcz.) Baill.), арони и черноплодной (Aroniamelanocarpa (Michx.) Elliott); корни и корневища валерианы лекарственной (ValerianaofficinalisL.), и одуванчика лекарственного (Taraxacumofficinalis (L.) WebbexF.H.Wigg.), отличающаяся тем, что дополнительно включает траву вербены лекарственной (Verbenaofficinalis), девясила британского (Inulabritannica), зизифоры (Ziziphora), и ссопа узколистного (Hyssopusangustifolius), котовника (Nepeta), лабазника обыкновенного (Filipendulavulgaris), лапчатки кустарниковой (Pentaphylloidesfruticosa), первоцвета (Primula), полыни горькой (Artemisiaabsinthium), репешка аптечного (Agrimoniaeupatoria), росторопши пятнистой (Silybummarianum), листья буквицы лекарственной (Betonicaofficinalis), боярышника (Crataegus), гинкго двулопастного (Ginkgobiloba), ежевики сизой (Rubuscaesius), иван-чая узколистного (Chamerionangustifolium), лимонника китайского (Schisandrachinensis), манжетки обыкновенной (Alchemillavulgaris), мяты длиннолистной (Menthalongifolia), черники кавказской (Vacciniumarctostaphylos), черники обыкновенной (Vaccininummyrtillus), шиповника (Rosa); почек березы (Betula), сосны (Pinus), цветков боярышника (Crataegus), гибискуса ярко-красного (Hibiscuscoccineus), одуванчика лекарственного (Taraxacumofficinale), кладохеты чистейшей (Cladochaetacandidissima), коровяка (Verbascum), ромашки аптечной (Matricariachamomilla), сухоцвета однолетнего (Xeranthemumannuum), соцветий альбиции ленкоранской (Albiziajulibrissin), клевера лугового (Trifoliumpratense), липы (Tilia), плоды айвы продолговатой (Cydoniaoblonga), айвочки японской (Chaenomelesjaponica), барбариса обыкновенного (Berberisvulgaris), боярышника (Crataegus), зизифуса настоящего (унаби) (Ziziphus jujube), облепихи крушиновидной (Hippophaerhamnosidaes), калины обыкновенной (Viburnumopulus), можжевельника (Juniperus), рябины обыкновенной (Sorbusaucuparia), черники кавказской (Vacciniumarctostaphylos), черники обыкновенной (Vacciniummyrtillus), семена аниса обыкновенного (Pimpinellaanisum), кориандра посевного (Coriandrumsativum), моркови дикой (Daucuscarota), фенхеля обыкновенного (Foeniculumvulgare), корневища и корни валерианы лекарственной (Valerianaofficinalis), солодки голой (Glycyrrhizaglabra), при следующем соотношении исходных компонентов, мас. %:

- трава, листья вышеперечисленных растений - 70-90;

- почки, цветки, соцветия вышеперечисленных растений - 5-20;

- плоды, семена, корни и корневища вышеперечисленных растений - 5-10.

Известна фармацевтическая композиция для лечения бессонницы, содержащая корень горца многоцветкового и/или его экстракты, семяни зифуса колючего и/или его экстракты, плод шелковицы и/или его экстракты, ганодерму и/или его экстракты, луковицу лилии и/или ее экстракты, корневище анемаррены и/или его экстракты, корень шалфея многокорневищного и/или его экстракты, цветок хризантемы и/или его экстракты, порию и/или ее экстракты и цветок альбиции и/или его экстракты. Фармацевтическая композиция, содержащая экстракты, полученные с использованием растворителей, таких как вода очищенная, спирт этиловый различной концентрации, сверхкритический диоксид углерода или любая их смесь. Заявленное изобретение обеспечивает седативный и снотворный эффекты, способствует стимуляции памяти (РФ №2548756).

Задачей настоящего изобретения является создание нового отечественного препарата в виде комплексного экстракта (полиэкстракта) плодов зизифуса обыкновенного Zízíphus jujúbaMill. для расширения номенклатуры лекарственных средств для лечения язвенных заболеваний ЖКТ.

Техническим результатом предлагаемого изобретения является получение комплексного экстракта (полиэкстракта) плодов зизифуса, с содержанием сквалена, флавоноидов, тритерпеновых сапонинов и полисахаридов, обладающего противоязвенной, противовоспалительной и иммуномодулирующей активностью.

Поставленная задача решается за счет использования смеси экстрактов плодов Ziziphus jujubeMill, включающей докритический CO₂-экстракт плодов зизифуса обыкновенного, стандартизированного по сквалену, спиртовой экстракт плодов зизифуса обыкновенного, стандартизированного по сумме флавоноидов, густой экстракт плодов зизифуса обыкновенного, стандартизированного по сумме тритерпеновых сапонинови сухой экстракт плодов зизифуса обыкновенного, стандартизированного по сумме полисахаридов, в соотношении 6:27:27:40, обладающего противоязвенным, противовоспалительным и иммуномодулирующим действием.

Полиэкстракт плодов Ziziphus jujubeMill. представляет собой смесь экстрактов, взятых в соотношении 6:27:27:40 и стандартизированных по действующим веществам:

- докритический СО₂-экстракт плодов Ziziphus jujubeMill, стандартизированного по сквалену;

- спиртовой экстракт плодов Ziziphus jujubeMill., стандартизированного по сумме флавоноидов, в пересчете на рутин;

- густой экстракт плодов Ziziphus jujubeMill., стандартизированного по сумме тритерпеновых сапонинов;

- сухой экстракт плодов Ziziphus jujubeMill., стандартизированного по сумме полисахаридов.

Изобретение иллюстрируется следующим примером:

Способ получения докритического СО₂-экстракта плодов зизифуса обыкновенного, стандартизированного по сквалену, включает следующие стадии:

Плоды зизифуса обыкновенного измельчают до размера частиц 2 мм, подвергают проточной экстракции диоксидом углерода путем многократной циркуляции в режиме 65 МПа 23-28°С. По завершению процесса осуществляют резкий сброс давления в объеме экстрактора, приводящее к разрыву межклеточного пространства компонентов экстрагируемого сырья, что облегчает последующий процесс получения спиртового и сухого экстрактов. СО₂-экстракт центрифугируют, фильтруют и освобождают от остатков СО₂ путем термостатирования в течении 60 мин. при 25°С, стандартизуют по содержанию сквалена в конечном экстракте. Содержание сквалена в полученном СО₂-экстракте - не менее 0,8 масс. %.

Способ получения спиртового экстракта плодов зизифуса обыкновенного, стандартизированного по сумме флавоноидов, включает следующие стадии:

Шрот, образуемый в результате получения докритического СО₂-экстракта плодов зизифуса обыкновенного, подвергают экстракции 70% этиловым спиртом в соотношении сырье : экстрагент 1:10.

Экстракцию проводят при постоянном перемешивании при температуре не более 50°С. Первый контакт фазы - 90 минут. Извлечение сливают, не отжимая сырье. Далее дополнительно проводят две экстракции, заливая в экстрактор 70% этиловый спирт в объеме, равном объему слитого извлечения, и экстрагируют при втором контакте фаз - 90 минут, при третьем контакте фаз - 90 мин. Извлечения объединяют, фильтруют, затем проводят отгонку растворителя и стандартизируют экстракт по сумме флавоноидов в пересчете на рутин. Содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин в полученном экстракте - не менее 0,3 масс. %.

Способ получения густого экстракта плодов зизифуса обыкновенного, стандартизированного по сумме тритерпеновых сапонинов, включает следующие стадии:

Шрот, образуемый в результате получения спиртового экстракта плодов зизифуса обыкновенного, подвергают экстракции 40% этиловым спиртом в соотношении сырье: экстрагент 1:10.

Экстракцию проводят при постоянном перемешивании при температуре не более 50°С. Первый контакт фазы - 90 минут. Извлечение сливают, не отжимая сырье. Далее дополнительно проводят две экстракции, заливая в экстрактор 40% этиловый спирт в объеме, равном объему слитого извлечения, и экстрагируют при втором контакте фаз - 90 минут, при третьем контакте фаз - 90 мин. Извлечения объединяют, фильтруют, затем проводят отгонку растворителя и стандартизируют экстракт по сумме тритерпеновых сапонинов в пересчете на агликон олеаноловой кислоты. Содержание суммы тритерпеновых сапонинов в пересчете на агликон олеаноловой кислоты - не менее 2,0 масс. %

Способ получения сухого экстракта плодов зизифуса обыкновенного, стандартизированного по сумме полисахаридов, включает следующие стадии:

Шрот, образуемый в результате получения густого экстракта плодов зизифуса обыкновенного, заливают очищенной водой в соотношении сырье : экстрагент 1:20. Экстракцию проводят при постоянном перемешивании при температуре не более 50°С. Первый контакт фазы - 90 минут. Извлечение сливают, не отжимая сырье. Далее проводят еще две экстракции, заливая в экстрактор воду в объеме, равном объему слитого извлечения, и экстрагируют при втором контакте фаз 90 минут, при третьем контакте фаз - 90 мин.

Извлечения объединяют. Добавляют равное количество 96% спирта этилового и перемешивают смесь в течение 1 часа. Отстаивают в холодильной камере при температуре 4-8°С в течение 3 суток, затем центрифугируют, проводят лиофильную сушку и стандартизируют по сумме полисахаридов. Содержание суммы полисахаридов в полученном экстракте - не менее 65 масс. %.

Конечным продуктом является комплексный экстракт (полиэкстракт) плодов Ziziphus jujubeMill. представляющий собой смесь, состоящую из докритического СО₂-экстракта плодов зизифуса обыкновенного, стандартизированного по сквалену, спиртового экстракта плодов зизифуса обыкновенного, стандартизированного по сумме флавоноидов, густого экстракта плодов зизифуса обыкновенного, стандартизированного по сумме тритерпеновых сапонинов и сухого экстракт плодов зизифуса обыкновенного, стандартизированного по сумме полисахаридов, в соотношении 6:27:27:40, обладающего противоязвенной, противовоспалительной и иммуномодулирующей активностью.

В процессе производства настоящих компонентов полиэкстракта возможно добавление фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ (корригентов вкуса, запаха, наполнителей, разрыхлителей, дезинтегрантов, эмульгаторов, стабилизаторов, консервантов).

Данный способ получения смеси экстрактов (полиэкстракта) относится к одному лекарственному растению, что значительно упрощает оптимизацию процесса.

ИССЛЕДОВАНИЕ БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ПОЛИЭКСТРАКТА ПЛОДОВ ZIZIPHUS JUJUBE MILL.

Изучение противовоспалительной активности in vivo

Результаты изучения противовоспалительной активности полиэкстракта плодов зизифуса обыкновенного на модели формалинового отека лап мышей приведены в таблице 2.

В условиях модели формалинового отека лап мышей при введении полиэкстракта плодов Ziziphus Jujuba Mill, в дозе 10 мг/кг выявлен достоверный противовоспалительный эффект. Экстракт уменьшает отек на 16% по сравнению с контрольной группой животных. Полиэкстракт плодов Ziziphus Jujuba Mill, в дозе 100 мг/кг уменьшает отек на 22% по сравнению с контрольной группой животных. Препарат сравнения бутадион уменьшает отек на 38%. Полиэкстракт плодов Ziziphus Jujuba Mill, при трехдневном введении мышам обладает противовоспалительным эффектом, подавляя развитие экссудативной фазы воспаления.

Изучение влияния на течение экссудативной фазы острого воспаления in vivo

Результаты изучения противоязвенной активности полиэкстракта плодов зизифуса обыкновенного на этаноловой модели поражения слизистой желудка приведены в таблице 3.

В условиях этаноловой экспериментальной модели язвы желудка при введении полиэкстракта плодов Ziziphus Jujuba Mill, в дозе 10 мг/кг, выявлен достоверный гастропротективный эффект - уменьшение площади язвенных дефектов на 76%, ТЭ (терапевтический эффект) = 4,2 (р<0,05 по сравнению с контролем). При увеличении дозы экстракта до 100 мг/кг площадь язвенных дефектов сокращается на 96%, ТЭ = 14,3 (р<0,05 по сравнению с контролем), т.е. проявляется выраженный дозозависимый эффект полиэкстракта плодов Ziziphus Jujuba Mill. При введении препарата референта плантаглюцида в дозе 250 мг/кг площадь язвенных дефектов сокращается на 68%, ТЭ = 3,2 (р<0,05 по сравнению с контролем).

На экспериментальной модели язвы желудка крыс, вызванной введением этанола, выявлено достоверное дозозависимое гастропротективное действие полиэкстракта плодов Ziziphus Jujuba Mill.

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно к смеси экстрактов плодов Ziziphus jujube Mill., обладающей противоязвенной и противовоспалительной активностью. Смесь экстрактов плодов Ziziphus jujube Mill., обладающая противоязвенной и противовоспалительной активностью, содержащая: докритический СО₂ - экстракт плодов зизифуса обыкновенного, стандартизированный по сквалену с содержанием сквалена не менее 0,8 масс. %; спиртовой экстракт плодов зизифуса обыкновенного, стандартизированный по сумме флавоноидов с содержанием суммы флавоноидов в пересчете на рутин не менее 0,3 масс. %; густой экстракт плодов зизифуса обыкновенного, стандартизированный по сумме тритерпеновых сапонинов с содержанием суммы тритерпеновых сапонинов в пересчете на агликон не менее 2,0 масс. %; сухой экстракт плодов зизифуса обыкновенного, стандартизированный по сумме полисахаридов с содержанием суммы полисахаридов не менее 65,0 масс. %; в соотношении экстрактов 6:27:27:40, причем докритический СО₂ экстракт плодов зизифуса обыкновенного получен при 65 МПа 23-28°С; спиртовой экстракт плодов зизифуса обыкновенного получен экстракцией 70% спиртом этиловым шрота плодов зизифуса обыкновенного после стадии СО₂ экстракции, в соотношении сырье : экстрагент 1:10; густой экстракт плодов зизифуса обыкновенного получен экстракцией 40% спиртом этиловым шрота плодов зизифуса обыкновенного после стадии экстракции 70% спиртом этиловым, в соотношении сырье : экстрагент 1:10; сухой экстракт плодов зизифуса обыкновенного получен экстракцией водой очищенной шрота плодов после стадии экстракции 40% спиртом этиловым, в соотношении сырье : экстрагент 1:20 при температуре не более 50°С. Вышеописанная смесь обладает выраженной противоязвенной и противовоспалительной активностью. 3 табл.

Смесь экстрактов плодов Ziziphus jujube Mill., обладающая противоязвенной и противовоспалительной активностью, содержащая:

докритический СО₂ - экстракт плодов зизифуса обыкновенного, стандартизированный по сквалену с содержанием сквалена не менее 0,8 масс. %;

спиртовой экстракт плодов зизифуса обыкновенного, стандартизированный по сумме флавоноидов с содержанием суммы флавоноидов в пересчете на рутин не менее 0,3 масс. %;

густой экстракт плодов зизифуса обыкновенного, стандартизированный по сумме тритерпеновых сапонинов с содержанием суммы тритерпеновых сапонинов в пересчете на агликон не менее 2,0 масс. %;

сухой экстракт плодов зизифуса обыкновенного, стандартизированный по сумме полисахаридов с содержанием суммы полисахаридов не менее 65,0 масс. %;

в соотношении экстрактов 6:27:27:40,

причем докритический СО₂ экстракт плодов зизифуса обыкновенного получен при 65 МПа 23-28°С; спиртовой экстракт плодов зизифуса обыкновенного получен экстракцией 70% спиртом этиловым шрота плодов зизифуса обыкновенного после стадии СО₂ экстракции, в соотношении сырье : экстрагент 1:10; густой экстракт плодов зизифуса обыкновенного получен экстракцией 40% спиртом этиловым шрота плодов зизифуса обыкновенного после стадии экстракции 70% спиртом этиловым, в соотношении сырье : экстрагент 1:10; сухой экстракт плодов зизифуса обыкновенного получен экстракцией водой очищенной шрота плодов после стадии экстракции 40% спиртом этиловым, в соотношении сырье : экстрагент 1:20 при температуре не более 50°С.