Настоящее изобретение относится к применению экстракта родиолы и экстракта астрагала для лечения нейродегенеративных заболеваний и более предпочтительно таких болезней, как болезнь Альцгеймера или болезнь Паркинсона.
Под "дегенеративными заболеваниями" понимают совокупность патологий, которые постепенно эволюционируют к развитию недостаточностей и поражений у пациента. Имея в общем случае генетическое происхождение, дегенеративные заболевания также могут быть вызваны массированным воздействием биологически активных и токсичных веществ.
Под "нейродегенеративным заболеванием" понимают заболевание, которое прогрессирующим образом поражает функционирование нервной системы. В общем случае функционирование нервных клеток и особенно нейронов оказывается ухудшенным. Более или менее быстрое их изменение часто является необратимым.
Более предпочтительно под нейродегенеративными заболеваниями понимают следующие заболевания: болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, болезнь Гентингтона, боковой амиотрофический склероз, деменцию с тельцами Леви, болезнь Пика, прогрессирующий супрануклеарный паралич, рассеянные склерозы, прионовые заболевания человека или животных, такие как, например, бычья губчатая энцефалопатия, и миопатия.
В силу увеличения ожидаемой продолжительности жизни диагностирование нейродегенеративных заболеваний, таких как болезнь Альцгеймера или Паркинсона, показывает постоянный рост.
Редко проявляясь до 65 лет, болезнь Альцгеймера представляет собой заболевание, которое характеризуется прогрессирующей дегенерацией нейронов, ведущей постепенно к утрате интеллектуальных функций: в первое время речь идет, в частности, о расстройстве памяти, расстройстве исполнительных функций и о проблемах с ориентацией во времени и пространстве. Прогрессирующее развитие болезни у пациента ведет к необратимому формированию деменции.
Редко проявляясь до 45 лет, болезнь Паркинсона затрагивает около 1% людей старше 65 лет. Это заболевание с таким же прогрессирующим и необратимым развитием, как и в случае болезни Альцгеймера, характеризуется разрушением особой популяции нейронов. Оно вызывает появление симптомов, называемых "моторными", таких как медлительность при совершении и координации движений, излишняя ригидность мышц и тремор, и "немоторных" симптомов, таких как когнитивные расстройства, расстройства сна, потеря равновесия и/или пониженное давление.
Никакое из лекарственных средств, назначаемых в настоящее время в случае двух этих заболеваний, не позволяет излечивать или останавливать их развитие. Они в основном нацелены на задерживание развития заболеваний и направлены на попытки лечить симптомы.
Работа авторов настоящего изобретения позволила выявить, что новая комбинация активного вещества позволяет лечить нейродегенеративные заболевания, предпочтительно такие заболевания, как болезнь Альцгеймера или болезнь Паркинсона.
Таким образом, настоящее изобретение относится к продукту, содержащему экстракт родиолы и экстракт астрагала в качестве компонентов комбинации, для одновременного, раздельного или разнесенного во времени применения при лечении нейродегенеративного заболевания.
Оно относится также к комбинации экстракта родиолы и экстракта астрагала для применения при лечении нейродегенеративного заболевания.
Под "экстрактом родиолы" понимают один экстракт или смесь экстрактов родиолы.
Под "экстрактом астрагала" понимают один экстракт или смесь экстрактов астрагала.
Как показано в примере 2, комбинация экстракта родиолы и экстракта астрагала обладает синергическим терапевтическим действием в рамках модели нейродегенеративного заболевания.
В то же время, как показано в примере 3, комбинация экстракта родиолы и экстракта астрагала обладает также профилактическим защитным эффектом в рамках такой же модели нейродегенеративного заболевания.
Более предпочтительно нейродегенеративное заболевание выбирают из группы, которую составляют болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, болезнь Гентингтона, боковой амиотрофический склероз, прионовые заболевания, такие как, например, бычья губчатая энцефалопатия, деменция с тельцами Леви, болезнь Пика и миопатия.
Предпочтительно речь идет о заболевании, выбранном из группы, которую составляют болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, болезнь Гентингтона, боковой амиотрофический склероз, бычья губчатая энцефалопатия и миопатия и более предпочтительно болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, болезнь Гентингтона и миопатия.
Более предпочтительно речь идет о заболевании, выбранном из группы, которую составляют болезнь Альцгеймера и болезнь Паркинсона.
Действительно, авторами настоящего изобретения было показано, что комбинация экстрактов родиолы и астрагала позволяет не только сохранять длину аксонов в модели нейродегенеративного заболевания, в частности в случае болезни Альцгеймера, но также достигать их удлинения. Этот результат является неожиданным, поскольку экстракт родиолы или астрагала по отдельности не позволяет увеличивать длину аксонов в модели нейродегенеративного заболевания и возможно даже уменьшает ее.
Применение продукта может осуществляться одновременно, раздельно или разнесенно во времени.
В качестве примера продукт может быть введен в виде одной дозы (таблетка, желатиновая капсула и т.д.), содержащей экстракт родиолы и экстракт астрагала, или в виде двух разных доз, причем первая доза содержит экстракт родиолы, а вторая доза содержит экстракт астрагала. Во втором случае две дозы могут быть введены одновременно, раздельно или разнесенно во времени.
Компоненты комбинации, а именно экстракт родиолы и экстракт астрагала, предпочтительно применяют одновременно.
Продукт, содержащий экстракт родиолы и экстракт астрагала в качестве компонентов комбинации, может быть применен для профилактики и/или лечения.
Как показано в примерах 2 и 3, компоненты комбинации по настоящему изобретению показали профилактическое и терапевтическое действие в рамках модели нейродегенеративного заболевания и более предпочтительно в рамках модели болезни Альцгеймера.
Продукт, содержащий экстракт родиолы и экстракт астрагала в качестве компонентов комбинации, предпочтительно применяют для лечения нейронов, в частности, в рамках болезни Альцгеймера.
Более предпочтительно лечение нейронов осуществляют за счет удлинения аксонов указанных нейронов.
В продукте, содержащем экстракт родиолы и экстракт астрагала в качестве компонентов комбинации, массовое отношение в расчете на сухое вещество экстракта астрагала к экстракту родиолы предпочтительно составляет от 0,5 до 1,5.
Следует отметить, что в рамках настоящей заявки, если не оговорено иное, указанные диапазоны значений включают граничные значения.
Массовое отношение в расчете на сухое вещество экстракта астрагала к экстракту родиолы предпочтительно составляет от 0,8 до 1,2 и предпочтительно около 1.
Экстракт родиолы предпочтительно представляет собой экстракт Rhodiola rosea.
Продукт, содержащий экстракт родиолы и экстракт астрагала в качестве компонентов комбинации, предпочтительно содержит дозу по меньшей мере 50 мг/сутки экстракта родиолы, причем этот экстракт представляет собой экстракт Rhodiola rosea.
В случае взрослого человека доза экстракта Rhodiola rosea предпочтительно может находиться в интервале от 50 до 500 мг/сутки, более предпочтительно от 100 до 250 мг/сутки и еще более предпочтительно может составлять около 150 мг/сутки.
В более общем порядке, в случае животного продукт, содержащий экстракт родиолы и экстракт астрагала в качестве компонентов комбинации, может содержать дозу сухого экстракта Rhodiola rosea по меньшей мере 0,5 мг/кг/день, доза предпочтительно находится в интервале от 1 до 10 мг/кг/день, например, приблизительно от 1,5 от 2 мг/кг/день.
Эти дозы предпочтительно означают дозы сухих экстрактов.
Экстракцию предпочтительно осуществляют исходя из порошка корней Rhodiola rosea.
Rhodiola rosea, которую называют также золотой корень или арктический корень, представляет собой многолетнее растение из семейства толстянковых, которое растет в основном в холодных районах мира, таких как холодные районы Азии, Сибири, Северной Америки и гористые районы Европы (Альпы, Пиренеи, Карпаты, Скандинавия, Исландия, Великобритания и Ирландия). Это растение применяют, в частности в традиционной китайской медицине, для противодействия стрессу и нарушениям самочувствия. Rhodiola rosea происходит из Азии, в частности из Китая.
Экстракт корней Rhodiola rosea предпочтительно представляет собой водно-спиртовой экстракт. Как правило, экстрагирующий сольвент экстракта представляет собой смесь "вода-этанол", при этом смесь "вода-этанол" содержит воду в количестве по меньшей мере 50 об.%, предпочтительно по меньшей мере 60 об.%, например 70 об.%.
Массовое соотношение смеси "вода-этанол" и порошка корней Rhodiola rosea предпочтительно находится в интервале от 16:1 до 4:1, предпочтительно от 12:1 до 6:1 и приблизительно от 10:1 до 8:1.
Экстракция родиолы может быть осуществлена традиционными способами (фильтрация, настаивание, приготовление отвара, вымачивание), хорошо известными специалистам в данной области техники. Экстракцию порошка предпочтительно повторяют несколько раз. Экстракцию предпочтительно осуществляют при нагревании и предпочтительно при умеренной температуре (от 40 до 100°C). После экстракции экстракт предпочтительно сушат.
Экстракт Rhodiola rosea предпочтительно содержит розавин в количестве по меньшей мере 1,5 масс.% от общей массы сухого экстракта Rhodiola rosea.
Под розавином (или "rosavin" по-английски) понимают гликозид коричного спирта, экстрагируемый из родиолы и более предпочтительно из Rhodiola rosea.
Экстракт Rhodiola rosea предпочтительно содержит розавин в количестве по меньшей мере 2 масс.%, более предпочтительно по меньшей мере 2,5 масс.% и еще более предпочтительно по меньшей мере 3 масс.% от общей массы сухого экстракта Rhodiola rosea.
Экстракт Rhodiola rosea предпочтительно содержит также салидрозид в количестве по меньшей мере 0,25 масс.% от общей массы сухого экстракта Rhodiola rosea.
Под салидрозидом (называемым также "родиолозидом") понимают гликозид фенилпропаноид, экстрагируемый из родиолы и более предпочтительно из Rhodiola rosea.
Экстракт Rhodiola rosea предпочтительно содержит салидрозид в количестве по меньшей мере 0,5 масс.%, более предпочтительно по меньшей мере 0,75 масс.% и еще более предпочтительно по меньшей мере 1 масс.% от общей массы сухого экстракта Rhodiola rosea.
Более предпочтительно экстракт Rhodiola rosea содержит по меньшей мере 1,5 масс.% розавина и по меньшей мере 0,25 масс.% салидрозида, предпочтительно по меньшей мере 2 масс.% розавина и по меньшей мере 0,5 масс.% салидрозида, более предпочтительно по меньшей мере 2,5 масс.% розавина и по меньшей мере 0,75 масс.% салидрозида и еще более предпочтительно по меньшей мере 3 масс.% розавина и по меньшей мере 1 масс.% салидрозида от общей массы сухого экстракта Rhodiola rosea.
Экстракт родиолы и более предпочтительно сухой экстракт Rhodiola rosea предпочтительно может содержать также розарин и/или розин.
Как было указано ранее, экстракт родиолы применяют в комбинации с экстрактом астрагала.
Экстракт астрагала предпочтительно представляет собой экстракт Astragalus membranaceus.
Продукт, содержащий экстракт родиолы и экстракт астрагала в качестве компонентов комбинации, предпочтительно содержит дозу по меньшей мере 50 мг/сутки экстракта астрагала, причем этот экстракт представляет собой экстракт Astragalus membranaceus.
В случае взрослого человека доза экстракта Astragalus membranaceus предпочтительно может находиться в интервале от 50 до 500 мг/сутки, более предпочтительно от 100 до 250 мг/сутки и еще более предпочтительно может составлять около 150 мг/сутки.
В более общем порядке, в случае животного Продукт, содержащий экстракт родиолы и экстракт астрагала в качестве компонентов комбинации, может содержать дозу сухого экстракта Astragalus membranaceus по меньшей мере 0,5 мг/кг/день, доза предпочтительно находится в интервале от 1 до 3 мг/кг/день, например, приблизительно от 1,5 от 2 мг/кг/день.
Эти дозы предпочтительно означают дозы сухих экстрактов.
Предпочтительно экстракцию осуществляют исходя из порошка корней Astragalus membranaceus.
Astragalus membranaceus, называемый также Astragalus penduliflorus или Astragalus propinquus, представляет собой растение из семейства бобовых, которое растет в Азии, более предпочтительно на севере Китая в провинции Юннань и Сихуань. Это растение применяют, в частности в традиционной китайской медицине, для стимулирования иммунной системы и противодействия инфекциям. Astragalus membranaceus происходит из Азии, в частности из Китая.
Экстракт Astragalus membranaceus предпочтительно содержит астрагалозиды в количестве по меньшей мере 0,2 масс.% от общей массы сухого экстракта Astragalus membranaceus.
Под астрагалозидами (иногда называемыми "астрангалозид") понимают тритерпеновые олигогликозиды, экстрагируемые из астрагала и более предпочтительно из Astragalus membranaceus.
Экстракт Astragalus membranaceus предпочтительно содержит астрагалозиды в количестве по меньшей мере 0,4 масс.%, более предпочтительно по меньшей мере 0,6 масс.% и еще более предпочтительно по меньшей мере 0,8 масс.% от общей массы сухого экстракта Astragalus membranaceus.
Экстракт предпочтительно содержит смесь астрагалозидов, то есть по меньшей мере два астрагалозида, выбранных из астрагалозидов I, II, III, IV, V, VI и VII.
Экстракт предпочтительно содержит смесь 7 астрагалозидов, указанных ранее.
Экстракт Astragalus membranaceus предпочтительно содержит полисахариды в количестве по меньшей мере 10 масс.% от общей массы сухого экстракта Astragalus membranaceus.
Экстракт Astragalus membranaceus предпочтительно содержит полисахариды в количестве по меньшей мере 12 масс.%, более предпочтительно по меньшей мере 14 масс.% и еще более предпочтительно по меньшей мере 16 масс.% от общей массы сухого экстракта Astragalus membranaceus.
Более предпочтительно экстракт Astragalus membranaceus содержит по меньшей мере 0,2 масс.% астрагалозидов и по меньшей мере 10 масс.% полисахаридов, предпочтительно по меньшей мере 0,4 масс.% астрагалозидов и по меньшей мере 12 масс.% полисахаридов, более предпочтительно по меньшей мере 0,6 масс.% астрагалозидов и по меньшей мере 14 масс.% полисахаридов и еще более предпочтительно по меньшей мере 0,8 масс.% астрагалозидов и по меньшей мере 16 масс.% полисахаридов от общей массы сухого экстракта Astragalus membranaceus.
Экстракт Astragalus membranaceus предпочтительно получают исходя из двух экстрактов из корней Astragalus membranaceus: первого водно-спиртового экстракта и второго водного экстракта.
Как правило, экстрагирующий сольвент для первого экстракта представляет собой смесь "вода-этанол". Смесь "вода-этанол" предпочтительно содержит этанол в количестве по меньшей мере 50 об.%, предпочтительно по меньшей мере 75 об.%, например 85 об.%.
Массовое соотношение смеси "вода-этанол" и порошка корней Astragalus membranaceus предпочтительно находится в интервале от 200:1 до 50:1, предпочтительно от 150:1 до 100:1 и составляет около 125:1.
Экстракцию второго экстракта осуществляют растворителем, представляющим собой воду.
Массовое соотношение воды и порошка корней Astragalus membranaceus, как правило, находится в интервале от 10:1 до 2:1, предпочтительно от 7:1 до 3:1 и составляет около 5:1.
Экстракция астрагала может быть осуществлена традиционными способами (фильтрация, настаивание, приготовление отвара, вымачивание), хорошо известными специалистам в данной области техники. Экстракцию порошка предпочтительно повторяют несколько раз. Экстракцию предпочтительно осуществляют при нагревании и предпочтительно при умеренной температуре (от 40 до 100°C). После экстракции экстракт предпочтительно сушат.
Согласно предпочтительному варианту осуществления настоящего изобретения продукт, содержащий экстракт родиолы и экстракт астрагала в качестве компонентов комбинации, содержит также ингредиент, выбранный из группы, которую составляют токоферол, селен, кремний, цинк, магний, полифенолы, отличающиеся от полифенолов, происходящих из экстрактов родиолы и астрагала, или их смеси.
Токоферол предпочтительно вводят в продукт в количестве от 0,05 до 2 масс.% от общей массы продукта.
Селен предпочтительно вводят в продукт в количестве от 0,0001 до 0,005 масс.% от общей массы Продукта, например, в форме дрожжей с селеном.
Кремний предпочтительно вводят в продукт в количестве от 6 до 10 масс.% от общей массы продукта, например, в форме природных диатомитов (непрокаленных), диоксида кремния, одного или нескольких силикатов и/или ортокремниевой кислоты (тривиальные названия: органический кремний, биогенный кремний).
Цинк предпочтительно вводят в продукт в количестве от 0,01 до 0,5 масс.% от общей массы продукта, например, в форме одной или нескольких солей цинка, таких как цитрат, сульфат и/или диглицинат цинка.
Магний предпочтительно вводят в продукт в количестве от 5 до 50 масс.% от общей массы продукта, например, в форме одной или нескольких солей магния, таких как глицерофосфат магния и/или цитрат магния.
Полифенолы могут содержаться в продукте за счет введения растительного экстракта, такого как экстракт Vitis vinifera (красный виноград) и/или Polygonum cuspidatum (японский горец). Полифенолы предпочтительно вводят в продукт в количестве от 1 до 10 масс.% от общей массы продукта.
Полифенол предпочтительно представляет собой резвератрол (природный или синтетический). Резвератрол предпочтительно вводят в продукт в количестве от 0,1 до 3 масс.% от общей массы продукта.
В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения продукт, содержащий экстракт родиолы и экстракт астрагала в качестве компонентов комбинации, содержит совокупность ингредиентов, указанных ранее.
В этом предпочтительном варианте осуществления продукт, содержащий экстракт родиолы и экстракт астрагала в качестве компонентов комбинации, может при этом содержать экстракт родиолы в количестве по меньшей мере 3,5 масс.%, предпочтительно по меньшей мере 4 масс.% и более предпочтительно по меньшей мере 4,5 масс.% от общей массы продукта.
Он может содержать также экстракт астрагала в количестве по меньшей мере 3,5 масс.%, предпочтительно по меньшей мере 4 масс.% и более предпочтительно по меньшей мере 4,5 масс.% от общей массы продукта.
Экстракты предпочтительно представляют собой сухие экстракты.
Экстракты родиолы и астрагала предпочтительно представляют собой экстракты, описанные ранее.
Согласно особенно предпочтительному варианту осуществления продукт по настоящему изобретению содержит:
- экстракт Rhodiola rosea, содержащий по меньшей мере 1,5 масс.% розавина и по меньшей мере 0,25 масс.% салидрозида, предпочтительно по меньшей мере 2 масс.% розавина и по меньшей мере 0,5 масс.% салидрозида, более предпочтительно по меньшей мере 2,5 масс.% розавина и по меньшей мере 0,75 масс.% салидрозида и еще более предпочтительно по меньшей мере 3 масс.% розавина и по меньшей мере 1 масс.% салидрозида от общей массы сухого экстракта Rhodiola rosea;
- экстракт Astragalus membranaceus, содержащий по меньшей мере 0,2 масс.% астрагалозидов и по меньшей мере 10 масс.% полисахаридов, предпочтительно по меньшей мере 0,4 масс.% астрагалозидов и по меньшей мере 12 масс.% полисахаридов, более предпочтительно по меньшей мере 0,6 масс.% астрагалозидов и по меньшей мере 14 масс.% полисахаридов и еще более предпочтительно по меньшей мере 0,8 масс.% астрагалозидов и по меньшей мере 16 масс.% полисахаридов от общей массы сухого экстракта Astragalus membranaceus.
Согласно этому особенно предпочтительному варианту осуществления продукт, содержащий экстракты Rhodiola rosea и Astragalus membranaceus, а также указанные экстракты соответствуют описанному ранее, включая варианты осуществления и, в частности, соотношения, дозы и массовые процентные доли, описанные ранее.
Настоящее изобретение относится также к способу лечения нейродегенеративного заболевания, включающему одновременное, раздельное или разнесенное во времени введение экстракта родиолы и экстракта астрагала. Оно относится также к способу профилактики нейродегенеративного заболевания, включающему одновременное, раздельное или разнесенное во времени введение экстракта родиолы и экстракта астрагала.
Экстракт родиолы и экстракт астрагала образуют продукт в виде комбинированного продукта, который может быть введен пациенту в форме одной или нескольких желатиновых капсул, пилюль и/или таблеток.
Особые, преимущественные и предпочтительные характеристики способов по настоящему изобретению представляют собой характеристики, описанные ранее, особенно в том, что касается экстрактов, продукта и доз.
Другие характеристики и преимущества настоящего изобретения указаны в приведенных далее примерах, представленных в качестве пояснения со ссылкой на фигуры:
- на фиг. 1 представлены четыре диаграммы, поясняющие результаты по цитотоксичности экстракта родиолы, экстракта астрагала, комбинации экстрактов ("Mix") и продукта "ADN-Telomeractives" после 48 часов экспозиции. Результаты выражены в виде среднего значения +/- отклонение в трех репликах;
- на фиг. 2 представлены четыре диаграммы, поясняющие терапевтическое действие экстракта родиолы, экстракта астрагала, комбинации экстрактов и продукта "ADN-Telomeractives" на длину аксонов через 48 часов в модели болезни Альцгеймера. Результаты выражены в виде среднего значения +/- отклонение в трех репликах;
- на фиг. 3 представлены три фотографии, поясняющие действие родиолы с концентрацией 250 мкг/мл на дифференцированные (клетки) SH-SY5Y, предварительно подвергнутые действию 10 мкM продукта "Aftin-5" в течение 48 часов. Принято 20-кратное увеличение, ядра окрашены синим цветом, тубулин B3 окрашен зеленым цветом;
- на фиг. 4 представлены три фотографии, поясняющие действие астрагала с концентрацией 250 мкг/мл на дифференцированные (клетки) SH-SY5Y, предварительно подвергнутые действию 10 мкM продукта "Aftin-5" в течение 48 часов. Принято 20-кратное увеличение, ядра окрашены синим цветом, тубулин B3 окрашен зеленым цветом;
- на фиг. 5 представлены три фотографии, поясняющие действие комбинации экстрактов родиолы и астрагала с концентрацией 250 мкг/мл на дифференцированные (клетки) SH-SY5Y, предварительно подвергнутые действию 10 мкM продукта "Aftin-5" в течение 48 часов. Принято 20-кратное увеличение, ядра окрашены синим цветом, тубулин B3 окрашен зеленым цветом;
- на фиг. 6 представлены три фотографии, поясняющие действие продукта "ADN-Telomeractives" с концентрацией 25,00 мкг/мл на дифференцированные (клетки) SH-SY5Y, предварительно подвергнутые действию 10 мкM продукта "Aftin-5" в течение 48 часов. Принято 20-кратное увеличение, ядра окрашены синим цветом, тубулин B3 окрашен зеленым цветом;
- на фиг. 7 представлена диаграмма, поясняющая действие продукта "ADN-Telomeractives" на репарацию повреждений ДНК (8oxoG, Etheno, гликоли, AbaS, CPD-64) в клетках HepG2;
- на фиг. 8 представлена диаграмма, поясняющая действие генотоксичного EMS на репарацию повреждений ДНК (8oxoG, Etheno, гликоли, AbaS, CPD-64) в клетках HepG2;
- на фиг. 9 представлена диаграмма, поясняющая действие предварительной и финишной обработки продуктом "ADN-Telomeractives" на репарацию повреждений ДНК (8oxoG, Etheno, гликоли, AbaS, CPD-64), индуцируемых EMS в клетках HepG2;
- на фиг. 10 представлены три диаграммы, поясняющие действие комбинации экстрактов родиолы и астрагала, не содержащей астрагалозидов (комбинация 1), комбинации экстрактов родиолы и астрагала, не содержащей полисахаридов (комбинация 2), и комбинации экстрактов родиолы и астрагала, описанной в примере 1 (комбинация 4), на длину аксонов через 48 часов в модели болезни Альцгеймера;
- на фиг. 11 представлены две диаграммы, поясняющие действие комбинации экстрактов родиолы и астрагала, не содержащей розавина (комбинация 3), и комбинации экстрактов родиолы и астрагала, описанной в примере 1 (комбинация 4), на длину аксонов через 48 часов в модели болезни Альцгеймера.
ПРИМЕР 1. Получение продуктов для применения по настоящему изобретению
1. Материалы и методики
1.1. Продукты
Были использованы следующие продукты:
- экстракт родиолы, полученный водно-спиртовой экстракцией из измельченных корней Rhodiola rosea, причем экстрагирующий сольвент состоял на 70 об.% из воды и на 30 об.% из этанола, при массовом соотношении сольвента и порошка корней, составлявшем около 8:1. Этот экстракт родиолы содержит розавин в количестве по меньшей мере 3 масс.% и салидрозид в количестве по меньшей мере 1 масс.% от общей массы сухого экстракта родиолы;
- первый экстракт астрагала, полученный водно-спиртовой экстракцией из измельченных корней Astragalus membranaceus, причем экстрагирующий сольвент состоял на 15 об.% из воды и на 85 об.% из этанола, при массовом соотношении сольвента и порошка корней, составлявшем около 125:1;
- второй экстракт астрагала, полученный экстракцией чистой водой из измельченных корней Astragalus membranaceus при массовом соотношении воды и порошка корней, составлявшем около 5:1;
- продукт "ADN-Telomeractives", реализуемый компанией HBN и содержащий комбинацию экстракта родиолы и экстракта астрагала. продукт содержит также токоферол, селен в форме дрожжей, кремний предпочтительно в форме морских диатомитов, цинк, магний, экстракт Vitis vinifera, а также экстракт Polygonum cuspidatum, содержащий 25% резвератрола. Продукт содержит также различные витамины.
Получение комбинированного экстракта астрагала
Два экстракта астрагала, указанные ранее, смешивали так, чтобы получить комбинированный экстракт астрагала, содержащий полисахариды в количестве по меньшей мере 16 масс.% и смесь астрагалозидов I, II, III, IV, V, VI и VII в количестве по меньшей мере 0,8 масс.% от общей массы сухого экстракта астрагала.
Получение комбинации экстрактов родиолы и астрагала
Комбинацию экстракта родиолы и экстракта астрагала для применения по настоящему изобретению получали смешиванием указанного ранее экстракта родиолы с комбинированным экстрактом астрагала в массовом соотношении 1:1.
Водные растворы экстракта родиолы, комбинированного экстракта астрагала, комбинации экстрактов и продукта "ADN-Telomeractives" готовили свежими в серии из 8 конечных концентраций (0,00125-0,0025-0,0050-0,0125-0,025-0,05-0,125-0,25 мг/мл).
1.2. Клеточная культура и дифференцировка
Клетки SH-SY5Y (ATCC, CRL-2266) культивировали и пересеивали согласно рекомендациям поставщика.
Все испытания осуществляли в трех репликах, используя 96-луночные микропланшеты. После посева клетки SH-SY5Y дифференцировали выдерживанием с ретиноевой кислотой (10 мкM) в течение 4 суток.
1.3. Фиксация клеток и окрашивание
После каждого испытания клетки фиксировали, используя смесь метанола и ацетона, при комнатной температуре в течение 5 минут перед окрашиванием ядер красителем "Hoechst" и иммунологическим окрашиванием тубулина β3 (вторичное антитело, конъюгированное с флуорохромом "Alexa 488").
1.4. Цитотоксичность
Цитотоксичность оценивали, используя окрашивание и подсчет клеточных ядер (число клеток оценивали, используя программу "MetaXpress" (Molecular Devices)).
1.5. Статистический анализ
Статистическое сравнение результатов по сравнению с контролем осуществляли, используя t-критерий. Значение помечали символом "*" при p < 0,05.
2. Результаты по цитотоксичности астрагала, родиолы, комбинации экстрактов и продукта "ADN-Telomeractives" (ADN-T)
Цитотоксичность оценивали на (клетках) SH-SY5Y, дифференцированных в течение 48 часов выдерживанием с экстрактом астрагала, экстрактом родиолы, комбинацией экстрактов и продуктом "ADN-Telomeractives". Ни один из продуктов не показал цитотоксического действия (см. фиг. 1). Астрагал и родиола по сравнению с контрольным образцом индуцировали увеличение живучести. Живучесть (клеток) SHSY-5Y, подвергнутых действию комбинации экстрактов и продукта "ADN-Telomeractives", близка к живучести контрольного образца при любых испытанных дозах.
ПРИМЕР 2. Синергическое действие экстракта родиолы и экстракта астрагала при применении по настоящему изобретению
1. Материалы и методики
Продукты, клеточная культура и дифференцировка, фиксация клеток и окрашивание, цитотоксичность и статистический анализ соответствовали указанным в примере 1.
1.1. Испытание по лечению
Модели нейродегенеративных заболеваний могут быть реализованы на месте в лабораторных условиях при использовании линий дифференцированных клеток нейронов. С химическими индукторами (в представленном случае с продуктом "Aftin-5") модель болезни Альцгеймера может быть реализована с линией клеток нейробластомы человека SH-SY5Y. Свойства по защите нейронов и терапевтические свойства комбинации экстрактов оценивали в связи с нейротоксическим воздействием, подсчитывая нейроны и определяя длину аксонов.
Клетки выдерживали в течение 2 суток только с 10 мкM продукта "Aftin-5". Затем клетки обрабатывали в течение 48 часов водными растворами родиолы, астрагала, комбинацией экстрактов, продуктом "ADN-Telomeractives" или просто водой (контрольный образец) при совместной инкубации с продуктом "Aftin-5" (10 мкM). После фиксации и маркировки разрастание аксонов и число клеток оценивали, используя программу "MetaXpress" (Molecular Devices).
1.2. Получение изображений клеток и анализ изображений
Изображения получали посредством автоматизированного микроскопа "ImageXpress® Micro XLS" (Molecular Devices) с 20-кратно увеличивающим объективом. При этом использовали два дихроичных фильтра одновременно для специфического детектирования с разными использованными датчиками. Для каждой лунки регистрировали четыре поля, которые анализировали индивидуально.
Изображения анализировали, используя программу "MetaXpress" (Molecular Devices).
2. Результаты: терапевтическое действие
Результаты представлены на фиг. 2.
На этой фигуре можно видеть, что родиола и астрагал не излечивают нейродегенеративный фенотип, индуцированный через 48 часов воздействия 10 мкM Продукта "Aftin-5". Напротив, в случае всех испытуемых доз установлено, что длина аксонов меньше длины, выявленной в случае контрольного образца.
В противоположность этому, можно констатировать, что комбинация экстрактов родиолы и астрагала оказала повышенное терапевтическое действие, зависящее от дозы, в отношении индуцированного фенотипа болезни Альцгеймера. Эффект дозы находится в интервале от 12,50 до 250 мкг/мл. При 250 мкг/мл терапевтическое действие значительно отличалось от контрольного образца с увеличением длины аксонов до 119,1%. Эффект дозы в форме буквы U также был замечен в случае продукта "ADN-Telomeractives" с пиком длины аксонов со значением 125,9 при 25,00 мкг/мл. Это значение незначительно отличается от значения контрольного образца, но сравнительно со всей популяцией клеток статистическая разность доказана по t-критерию.
Из этого следует, что родиола и астрагал по отдельности не позволяют увеличить длину аксонов: напротив, она уменьшается по сравнению с контрольным образцом.
В противоположность этому, комбинация экстрактов родиолы и астрагала неожиданным образом позволяет сохранять и даже увеличивать длину аксонов.
Из этого следует, что комбинация экстрактов обладает синергическим терапевтическим эффектом в модели нейродегенеративных заболеваний и более предпочтительно в модели болезни Альцгеймера.
На фиг. 3 представлены три фотографии, поясняющие действие родиолы с концентрацией 250 мкг/мл на дифференцированные (клетки) SH-SY5Y, предварительно подвергнутые действию 10 мкM продукта "Aftin-5" в течение 48 часов. Из этой фигуры следует, что по сравнению с контрольным образцом клетки, подвергнутые действию продукта "Aftin-5", показывают значительное уменьшение длины аксонов. Клетки, подвергнутые совместному действию продукта "Aftin-5" и родиолы, показывают длину аксонов меньшую, чем клетки, подвергнутые действию только одного продукта "Aftin-5".
На фиг. 4 представлены три фотографии, поясняющие действие астрагала с концентрацией 250 мкг/мл на дифференцированные (клетки) SH-SY5Y, предварительно подвергнутые действию 10 мкM продукта "Aftin-5" в течение 48 часов. Как и в случае предыдущей фигуры, из этой фигуры следует, что по сравнению с контрольным образцом клетки, подвергнутые действию продукта "Aftin-5", показывают значительное уменьшение длины аксонов. Клетки, подвергнутые совместному действию продукта "Aftin-5" и астрагала, показывают длину аксонов меньшую, чем клетки, подвергнутые действию только одного продукта "Aftin-5".
На фиг. 5 представлены три фотографии, поясняющие действие комбинации экстрактов родиолы и астрагала с концентрацией 250 мкг/мл на дифференцированные (клетки) SH-SY5Y, предварительно подвергнутые действию 10 мкM продукта "Aftin-5" в течение 48 часов. Как и в случае предыдущих фигур, из этой фигуры следует, что по сравнению с контрольным образцом клетки, подвергнутые действию продукта "Aftin-5", показывают значительное уменьшение длины аксонов. Клетки, подвергнутые совместному действию продукта "Aftin-5" и комбинации экстрактов родиолы и астрагала с концентрацией 250 мкг/мл, показывают лучшую живучесть и длину аксонов, значительно большую, чем клетки, подвергнутые действию только одного продукта "Aftin-5".
На фиг. 6 представлены три фотографии, поясняющие действие продукта "ADN-Telomeractives" с концентрацией 25,00 мкг/мл на дифференцированные (клетки) SH-SY5Y, предварительно подвергнутые действию 10 мкM продукта "Aftin-5" в течение 48 часов. Как и в случае предыдущих фигур, из этой фигуры следует, что по сравнению с контрольным образцом клетки, подвергнутые действию продукта "Aftin-5", показывают значительное уменьшение длины аксонов. Клетки, подвергнутые совместному действию продукта "Aftin-5" и продукта "ADN-Telomeractives" с концентрацией 25,00 мкг/мл показывают лучшую живучесть и длину аксонов, значительно большую, чем клетки, подвергнутые действию только одного продукта "Aftin-5".
ПРИМЕР 3. Действие экстракта родиолы и экстракта астрагала по защите нейронов при применении по настоящему изобретению
1. Материалы и методики
Продукты, клеточная культура и дифференцировка, фиксация клеток и окрашивание, цитотоксичность и статистический анализ соответствовали указанным в примере 1.
1.1. Испытание по защите нейронов
Клетки выдерживали в течение 48 часов в водных растворах родиолы, астрагала, комбинации экстрактов и продукта "ADN-Telomeractives" с 30 мкM Продукта "Aftin-5" (фенотипический индуктор болезни Альцгеймера). После фиксации и маркировки разрастание аксонов и число клеток оценивали, используя программу "MetaXpress" (Molecular Devices).
2. Результаты: действие по защите нейронов
Родиола, астрагал, комбинация экстракта и продукта "ADN-Telomeractives" показали значительное защитное действие против фенотипа болезни Альцгеймера, индуцированного продуктом "Aftin-5" (30 мкM). И астрагал, и родиола обладают действием по защите нейронов при дозе 1,25 и 2,50 мкг/мл, что увеличивает длину аксонов до 129,9 и 127,9% соответственно. Смесь экстрактов астрагала и родиолы индуцировала действие по защите нейронов при дозе 1,25 мкг/мл с длиной аксонов, увеличенной до 125,6% по сравнению с контрольным образцом. Продукт "ADN-Telomeractives" индуцировал действие по защите нейронов при дозе 2,50 мкг/мл, причем длина аксонов составила 126,8% по сравнению с контрольным образцом.
ПРИМЕР 4. Действие продукта "ADN-Telomeractives" на системы репарации ДНК
1. Материалы и методики
1.1. Солюбилизация продукта "ADN-Telomeractives" (ADN-T)
После измельчения продукта "ADN-Telomeractives" получали первичный водный раствор с концентрацией 12,5 мг/мл. Раствор перемешивали при 37°C в течение 1 часа. Затем осадок отделяли центрифугированием при 1500 об/мин в течение 5 минут.
1.2. Модель
Модель состоит в исследовании вовлечения систем репарации ДНК в защитное действие продукта "ADN-Telomeractives" по отношению к генотоксичным веществам в варианте in vitro на клетках HepG2 приведением в контакт с генотоксичным агентом EMS (этилметансульфонат).
1.3. План эксперимента
1. Предварительная обработка клеток раствором продукта "ADN-Telomeractives"
День 0: в 9.00 посев клеток в лунки и затем в 15.00 прибавление продукта "ADN-Telomeractives" с дозой 40 мкг/мл.
2. Введение генотоксичного агента EMS
День 2: в 15.00 введение EMS с двумя концентрациями: 0,2 мМ и 1 мМ.
3. Возврат клеток в контакт с продуктом "ADN-Telomeractives"
День 3: в 8.00 прибавение "ADN-Telomeractives" с дозой 40 мкг/мл.
4. Сбор клеток и анализы
День 4: сбор клеток в 8.00.
Контрольное испытание без продукта "ADN-Telomeractives" осуществляли параллельно.
Таблица 1. Перечень условий испытания
1.4. Анализы
Экстракты наносили на блох, зараженных плазмидами, имевшими серии специфических повреждений ДНК:
- 8oxoG (8oxoG);
- этеноаддукты оснований (Etheno);
- тимин- и цитозингликоли (Glycols);
- сайты потери оснований (AbaS);
- фотопродукты (димеры пиримидина и 6-4-фотопродукты) (CPD-64).
Ферменты репарации ДНК, содержащиеся в экстрактах, вырезают повреждения (или фрагмент ДНК, окружающий повреждения) и вводят флуоресцирующий маркер (dCTP-Cy3) при ресинтезе ДНК.
Флуоресцирующий сигнал количественно определяют посредством сканера. Сигнал пропорционален способности по эксцизии/ресинтезу каждого экстракта по отношению к каждому из повреждений.
Это испытание позволяет определять характеристики систем репарации эксцизией оснований (BER) и репарацию эксцизией нуклеотидов (NER).
Концентрация экстрактов составляла 0,2 мг/мл.
Каждый образец испытывали на 2 блохах. Каждая блоха имела 4 поврежденных участка. Затем результаты стандартизовали (программа "NormalizeIt").
Значение по контрольным плазмидам (без повреждений) вычитали из значения общей интенсивности, полученного для каждого повреждения.
Результаты приведены в виде значений интенсивности общей флуоресценции для каждого повреждения +/- среднее квадратичное отклонение.
2. Результаты
Результаты представлены на фиг. 7, 8 и 9.
Из фиг. 7 следует, что в случае испытуемой нецитотоксичной дозы продукт "ADN-Telomeractives" не оказывает никакого действия на системы репарации ДНК, за исключением четкого стимулирующего действия на репарацию гликолей.
Из фиг. 8 следует, что по меньшей мере при наибольшей испытуемой концентрации EMS стимулирует исключительно репарацию эксцизией оснований (BER). Репарация фотопродуктов (CPD-64), осуществляемая репарацией эксцизией нуклеотидов (NER), не ухудшается. Этот результат свидетельствует в пользу формирования посредством EMS небольших повреждений типа алкилирования или окисления, что будет индуцировать активацию ферментов, воздействующих на них.
Этот результат соответствует ожидаемому.
В порядке заключения, из фиг. 9 следует, что предварительная обработка клеток продуктом "ADN-Telomeractives" полностью устраняет воздействие EMS, используемого в наименьшей концентрации, на системы репарации ДНК.
В противоположность этому, сохраняется индуцирование систем репарации ДНК в случае наибольшей концентрации EMS. Однако это индуцирование меньше, чем в случае только одного EMS, за исключением случая гликольного повреждения. Стимуляция репарации гликольного повреждения напоминает действие продукта "ADN-Telomeractives".
Выводы:
- индивидуально применяемый продукт "DNA-Telomeractives" с нецитотоксичной дозой оказывает значительное действие на стимуляцию репарации гликолей;
- предварительная обработка Продуктом "ADN-Telomeractives" устраняет действие наименьшей дозы EMS и уменьшает действие наибольшей дозы;
- в случае наименьшей дозы EMS продукт "ADN-Telomeractives", применяемый в достаточном количестве, инактивирует EMS относительно его генотоксического действия на ДНК;
- в случае наибольшей дозы EMS продукт "ADN-Telomeractives", применяемый вероятно в ограниченном количестве, не сможет инактивировать весь содержащийся EMS, но уменьшит его воздействие.
ПРИМЕР 5. Действие некоторых активных веществ экстракта родиолы и экстракта астрагала для применения по настоящему изобретению
1. Материалы и методики
1.1. Прерараты
Были использованы следующие продукты:
- первый экстракт астрагала соответственно описанию примера 1 (полученный водно-спиртовой экстракцией из измельченных корней Astragalus membranaceus). Этот экстракт содержит смесь астрагалозидов I, II, III, IV, V, VI и VII в количестве по меньшей мере 4 масс.% от общей массы сухого экстракта астрагала, но не содержит полисахаридов;
- второй экстракт соответственно описанию примера 1 (полученный экстракцией чистой водой из измельченных корней Astragalus membranaceus). Этот экстракт содержит полисахариды в количестве по меньшей мере 20 масс.% от общей массы сухого экстракта астрагала, но не содержит астрагалозидов;
- экстракт родиолы соответственно описанию примера 1 (экстракт 1 родиолы), содержащий по меньшей мере 3 масс.% розавина и по меньшей мере 1 масс.% салидрозида от общей массы сухого экстракта родиолы;
- экстракт родиолы, содержащий салидрозид (экстракт 2 родиолы) в количестве по меньшей мере 3 масс.% от общей массы сухого экстракта родиолы, но не содержащий розавина (поставляется компанией "Gonmisol");
- комбинация экстрактов родиолы и астрагала соответственно описанию примера 1, далее обозначаемая комбинация 4, причем экстракт родиолы содержит по меньшей мере 3 масс.% розавина и по меньшей мере 1 масс.% салидрозида от общей массы сухого экстракта родиолы, а экстракт астрагала содержит по меньшей мере 16 масс.% полисахаридов и по меньшей мере 0,8 масс.% смеси астрагалозидов I, II, III, IV, V, VI и VII от общей массы сухого экстракта астрагала.
Получение комбинации экстрактов
Помимо комбинации 4, получение которой описано в примере 1, были получены три другие комбинации экстрактов:
- комбинация 1: эту комбинацию получали смешиванием второго экстракта астрагала (не содержащего астрагалозидов) и экстракта 1 родиолы в массовом соотношении 4:5;
- комбинация 2: эту комбинацию получали смешиванием первого экстракта астрагала (не содержащего полисахаридов) и экстракта 1 родиолы в массовом соотношении 1:5;
- комбинация 3: эту комбинацию получали смешиванием первого экстракта астрагала, второго экстракта астрагала и экстракта 2 родиолы, не содержащего указанного ранее розавина, в массовом соотношении 3:12:5.
Получение водных растворов исходя из комбинаций экстрактов
Чтобы сравнить действие астрагалозидов, полисахаридов и розавина, для каждой комбинации были приготовлены два свежих водных раствора с концентрациями, указанными в приведенных далее таблицах 2 и 3.
Таблица 2. Концентрации испытуемых водных растворов для испытания A
Таблица 3. Концентрации испытуемых водных растворов для испытания B
1.2. Клеточная культура и дифференцировка
Клетки SH-SY5Y культивировали и пересеивали согласно рекомендациям поставщика.
Все испытания осуществляли в трех репликах, используя 96-луночные микропланшеты. После посева клетки SH-SY5Y дифференцировали выдерживанием со стауроспорином (25 нМ в культуральной среде, дополненной 1% эмбриональной телячьей сыворотки) в течение 3 суток.
1.3. Фиксация клеток и окрашивание
После каждого испытания клетки фиксировали, используя смесь формальдегида и метанола (реализуемую компанией "Sigma-Aldrich" под названием "Formalin 10%"), при комнатной температуре в течение 10 минут с последующей пропиткой в продукте "Tween 20" с концентрацией 0,5% (продукт P2287, реализуемом компанией "Sigma-Aldrich") в течение 30 минут и в завершение с окрашиванием ядер красителем "Hoechst" и косвенной иммуноцитохимической маркировкой тубулина β3 для отличения аксонов (кроличье антитело антитубулина β3 (продукт ab18207, реализуемый компанией "Abcam") и вторичное антитело анти-IgG кролика, конъюгированное с флуорохромом "Alexa 488" (реализуемым компанией "Ozyme")) в течение 1 ч.
1.4. Испытание по лечению
Клетки выдерживали в течение 2 суток только с 10 мкM продукта "Aftin-5". Затем клетки обрабатывали в течение 48 часов водными растворами, описанными в таблице 2, или просто водой (контрольный образец) при совместной инкубации с продуктом "Aftin-5" (10 мкM). После фиксации и маркировки разрастание аксонов оценивали, используя программу "MetaXpress" (Molecular Devices).
1.5. Получение изображений клеток и анализ изображений
Изображения получали посредством автоматизированного микроскопа "ImageXpress® Micro XLS Confocal System" (Molecular Devices) с 20-кратно увеличивающим объективом. При этом использовали два дихроичных фильтра одновременно для специфического детектирования с разными использованными датчиками. Для каждой лунки регистрировали четыре изображения, которые анализировали индивидуально.
Изображения анализировали, используя программу "MetaXpress" (Molecular Devices).
2. Результаты по удлинению аксонов
Результаты, относящиеся к удлинению аксонов, представлены на фиг. 10 для комбинаций 1, 2 и 4 и на фиг. 11 для комбинаций 3 и 4.
2.1. Влияние комбинации астрагалозидов и полисахаридов
Результаты испытаний A и B показывают, что комбинации 1 и 2 позволяют удлинять аксоны по сравнению с контрольным образцом. Действительно, комбинация 1 обеспечивает удлинение аксонов на величину около 16% в случае испытания A и на величину около 26% в случае испытания B, а комбинация 2 обеспечивает удлинение аксонов на величину около 24% в случае испытания A и на величину около 21% в случае испытания B.
Тем не менее, удлинение аксонов, полученное в случае комбинации 1 (не содержащей астрагалозидов) или в случае комбинации 2 (не содержащей полисахаридов), меньше по сравнению с удлинением аксонов, полученным в случае комбинации 4. Действительно, комбинация 4 обеспечивает удлинение аксонов на величину около 32% в случае испытания A и даже на величину около 40% в случае испытания B.
Следовательно, комбинация экстрактов, содержащая одновременно астрагалозиды и полисахариды, позволяет получать удлинение аксонов большее, чем в случае комбинации экстрактов, содержащей эти активные вещества по отдельности.
2.2. Влияние розавина
Результаты испытаний A и B показывают, что комбинация 3, не содержащая розавина, обеспечивает удлинение аксонов на величину около 5% в случае испытания A и около 8% в случае испытания B, по сравнению с контрольным образцом.
Тем не менее, удлинение аксонов, полученное в случае комбинации 3, значительно меньше по сравнению с удлинением аксонов, полученным в случае комбинации 4. Действительно, комбинация 4 обеспечивает удлинение аксонов на величину около 32% в случае испытания A и даже около 40% в случае испытания B.
Следовательно, комбинация экстрактов, содержащая розавин, позволяет получать удлинение существенно большее, чем в случае комбинации экстрактов, не содержащих его.
Группа изобретений относится к фармацевтической промышленности, а именно к применению продукта и способу лечения болезней Альцгеймера и/или Паркинсона. Применение продукта, содержащего экстракт родиолы и экстракт астрагала в качестве комбинированных продуктов для применения при лечении болезней Альцгеймера и/или Паркинсона, причем экстракт родиолы представляет собой экстракт корней Rhodiola rosea, а экстракт астрагала представляет собой экстракт корней Astragalus membranaceus, где экстракт Rhodiola rosea содержит по меньшей мере 1,5 масс. % розавина от общей массы сухого экстракта Rhodiola rosea, где экстракт Astragalus membranaceus содержит по меньшей мере 0,2% масс. % астрагалозидов и по меньшей мере 10 масс. % полисахаридов от общей массы сухого экстракта Astragalus membranaceus и где массовое отношение в расчете на сухое вещество экстракта астрагала к экстракту родиолы составляет от 0,5 до 1,5. Способ лечения болезней Альцгеймера и Паркинсона, включающий введение дозы от 50 мг/сутки до 500 мг/сутки экстракта Rhodiola rosea посредством продукта, содержащего экстракт родиолы и экстракт астрагала в качестве комбинированных продуктов, причем экстракт родиолы представляет собой экстракт корней Rhodiola rosea, и указанный экстракт астрагала представляет собой экстракт корней Astragalus membranaceus, где экстракт Rhodiola rosea содержит по меньшей мере 1,5 масс. % розавина от общей массы сухого экстракта Rhodiola rosea, и где экстракт Astragalus membranaceus содержит по меньшей мере 0,2% масс. % астрагалозидов и по меньшей мере 10 масс. % полисахаридов от общей массы сухого экстракта Astragalus membranaceus и где массовое отношение в расчете на сухое вещество экстракта астрагала к экстракту родиолы составляет от 0,5 до 1,5. Вышеописанное применение продукта и способ лечения болезней Альцгеймера и/или Паркинсона позволяет не только сохранять длину аксонов в модели нейродегенеративного заболевания, но также достигать их удлинения. 2 н. и 6 з.п. ф-лы, 11 ил., 3 табл., 5 пр.
1. Применение продукта, содержащего экстракт родиолы и экстракт астрагала в качестве комбинированных продуктов для применения при лечении болезней Альцгеймера и/или Паркинсона, причем экстракт родиолы представляет собой экстракт корней Rhodiola rosea, а экстракт астрагала представляет собой экстракт корней Astragalus membranaceus, где экстракт Rhodiola rosea содержит по меньшей мере 1,5 масс. % розавина от общей массы сухого экстракта Rhodiola rosea, где экстракт Astragalus membranaceus содержит по меньшей мере 0,2% масс. % астрагалозидов и по меньшей мере 10 масс. % полисахаридов от общей массы сухого экстракта Astragalus membranaceus, и где массовое отношение в расчете на сухое вещество экстракта астрагала к экстракту родиолы составляет от 0,5 до 1,5.
2. Применение продукта по п. 1, в котором экстракт Rhodiola rosea содержит по меньшей мере 0,25 масс. % салидрозида от общей массы сухого экстракта Rhodiola rosea.
3. Применение продукта по п. 1 или 2, где указанный продукт дополнительно содержит ингредиент, выбранный из группы, состоящей из токоферола, селена, кремния, цинка, магния, полифенолов, отличающихся от полифенолов, происходящих из экстрактов родиолы и астрагала или их смесей.
4. Способ лечения болезней Альцгеймера и Паркинсона, включающий введение дозы от 50 мг/сутки до 500 мг/сутки экстракта Rhodiola rosea посредством продукта, содержащего экстракт родиолы и экстракт астрагала в качестве комбинированных продуктов, причем экстракт родиолы представляет собой экстракт корней Rhodiola rosea, и указанный экстракт астрагала представляет собой экстракт корней Astragalus membranaceus, где экстракт Rhodiola rosea содержит по меньшей мере 1,5 масс. % розавина от общей массы сухого экстракта Rhodiola rosea и где экстракт Astragalus membranaceus содержит по меньшей мере 0,2% масс. % астрагалозидов и по меньшей мере 10 масс. % полисахаридов от общей массы сухого экстракта Astragalus membranaceus, и где массовое отношение в расчете на сухое вещество экстракта астрагала к экстракту родиолы составляет от 0,5 до 1,5.
5. Способ по п. 4 для лечения нейронов.
6.Способ по п. 4 или 5 , где экстракт Rhodiola rosea содержит по меньшей мере 0,25 масс. % салидрозида от общей массы сухого экстракта Rhodiola rosea.
7. Способ по любому из пп. 4-6, включающий дозу 50 мг/сутки экстракта Astragalus membranaceus.
8. Способ по любому из пп. 4-7, где указанный продукт дополнительно содержит ингредиент, выбранный из группы, состоящей из токоферола, селена, кремния, цинка, магния, полифенолов, отличающихся от полифенолов, происходящих из экстрактов родиолы и астрагала или их смесей.
| US 2008081046 A1, 03.04.2008 | |||
| CN 1981857 A, 20.06.2007 | |||
| US 2008118583 A1, 22.08.2008 | |||
| CN 102940787 A, 27.02.2013. |
