Перекрестная ссылка на родственные заявки
[0001] Настоящая заявка основана и испрашивает преимущество приоритета более ранней заявки на получение патента Японии №2017-173823, поданной 11 сентября 2017 года; полное содержание которой включено в данный документ посредством ссылки.
Область техники, к которой относится изобретение
[0002] Настоящее изобретение относится к капусте, обладающей устойчивостью к ложной мучнистой росе и способу ее селекции. Более конкретно, настоящее изобретение относится к капусте, имеющей ген устойчивости к ложной мучнистой росе, расположенный в непосредственной близости от локусов, представленных в SEQ ID NO. 1 - SEQ ID NO. 7, и способу ее селекции.
Предшествующий уровень техники
[0003] Ложная мучнистая роса у растений Brassicaceae представляет собой болезнь, вызываемую Hyaloperonospora brassicae, которая относится к оомицетам и наносит ущерб многим сельскохозяйственным культурам, таким как виды Brassica oleracea включая капусту, брюссельскую капусту, цветную капусту, брокколи, кольраби, виды Brassica rapa, включая китайскую капусту, репу и комацуну, и виды Brassica napus, включая рапс.
[0004] Симптомы этой болезни в основном обнаруживаются в листьях; образуются пятна от желтых до бледно-коричневых с нечеткими границами и постепенно увеличивающиеся, а листья увядают, что негативно влияет на рост (Фиг. 1). Если соцветия брокколи и цветной капусты или корни репы или редьки японской инфицированы, внутри и снаружи тканей происходит изменение цвета на коричневый или черный, это сильно снижает их коммерческое значение. Болезнь быстро распространяется особенно в очень влажной среде и вызывает тяжелое повреждение, так что обычно используют химическую борьбу фунгицидами.
[0005] Капуста (B. oleracea var. capitata), которая является одной из наиболее важных сельскохозяйственных культур Brassica oleracea, имеет большое множество сортов, и сорта, подходящие для собственной почвы и климата, культивируют во многих странах в мире.
[0006] Однако, хотя капуста даже имеет некоторые линии, которые демонстрируют среднюю устойчивость к ложной мучнистой росе с неизвестным способом наследования и, вероятно, вследствие количественных факторов, но неизвестно наличие сортов, устойчивых к ложной мучнистой росе, имеющих единственный, доминирующий фактор устойчивости. Вследствие этого, в зонах, где часто встречается ложная мучнистая роса, для снижения болезни необходимо осуществлять борьбу с болезнью с помощью фунгицидов, и это требует больших трудовых и финансовых затрат. Вследствие этого, необходима разработка устойчивых селекционных материалов и устойчивых сортов.
[0007] Однако насколько известно авторам изобретения, несмотря на такие высокие требования устойчивые к ложной мучнистой росе сорта капусты не были созданы. Причина этого вероятно состоит в том, что генетические ресурсы капусты не содержат полезного фактора устойчивости к ложной мучнистой росе.
[0008] между тем, для брокколи (B. oleracea var. italica), которая является родственным видом капусты, имеются некоторые сообщения об анализе наследственности факторов устойчивости к ложной мучнистой росе (например, J. Amer Soc Hort Sci (2001), vol. 126, p. 727 (непатентный документ 1), Euphytica (2002), vol. 128, p. 405 (непатентный документ 2) и Euphytica (2003), vol. 131, p. 65 (непатентный документ 3)).
[0009] Однако, эти факторы устойчивости у брокколи не используются при селекции капусты. Причина этого вероятно состоит в том, что морфологические признаки капусты и брокколи совершенно разные. Брокколи можно гибридизировать с капустой, потому что они обе относятся к Brassica oleracea, но брокколи имеет множество признаков, которые не нужны для капусты, так что с брокколи очень трудно обращаться в качестве селекционного материала.[Список Документов Предшествующего уровня техники]
Непатентный документ
[0010] Непатентный документ 1: M. Wang et al., J. Amer Soc Hort Sci (2001), vol. 126, pp. 727-, «Inheritance of True Leaf Stage Downy Mildew Resistance in Broccoli»
Непатентный документ 2: M. W. Farnham et al., Euphytica (2002) vol. 128, pp. 405-, «A single dominant gene for downy mildew resistance in broccoli».
Непатентный документ 3: P.S. Coelho et al., Euphytica (2003) vol. 131, pp. 65-, «Inheritance of downy mildew resistance in mature broccoli plants»
Сущность изобретения
[Проблемы, которые нужно решить с помощью Изобретения]
[0011] Настоящее изобретение предназначено для представления новой капусты, обладающей выраженной устойчивостью к ложной мучнистой росе, и способу селекции капусты.
[Средство решения Проблем]
[0012] Авторы изобретения разработали маркеры, связанные с факторами устойчивости к ложной мучнистой росе, и использовали их в комбинации брокколи и капусты, и им удалось вывести линию капусты, которая имеет фактор устойчивости к ложной мучнистой росе, а также имеет большое коммерческое значение.
[0013] Растение Brassica oleracea, полученное путем гибридизации брокколи и капусты авторами изобретения, имело форму диких видов в исходном гибриде и первом поколении обратного скрещивания. После этого авторы изобретения повторили обратное скрещивание для замены области генома, не касающейся ложной мучнистой росы, на генотип капустного типа путем отбора маркеров, связанных с устойчивостью к ложной мучнистой росе и применения общегеномных маркеров, добившись за счет этого успеха в селекции капусты, которая показывает высокую устойчивость к ложной мучнистой росе.
[0014] Более конкретно, авторы изобретения обнаружили линию брокколи, которая имеет устойчивость к ложной мучнистой росе, применимую для большого диапазона сортов, и разработали маркеры, связанные с факторами устойчивости к ложной мучнистой росе, имеющиеся в линии, и доказали, что их использование обеспечивает выведение линии капусты с большим промышленным значением. Использование устойчивой к ложной мучнистой росе капусты или способа селекции устойчивой к ложной мучнистой росе капусты, представленной в настоящем изобретении, обеспечивает придание устойчивости к ложной мучнистой росе капусте, которая была восприимчива к ложной мучнистой росе.
[0015] Настоящее изобретение основано на этих открытиях.
[0016] Более конкретно, в настоящем изобретении представлены следующие изобретения.
[0017] <1> Капуста или ее потомство, имеющие устойчивость к ложной мучнистой росе.
[0018] <2> Устойчивая к ложной мучнистой росе капуста или ее потомство согласно <1>, имеющие ген устойчивости к ложной мучнистой росе, который расположен в непосредственной близости от локуса, представленного любой одной или более из SEQ ID NO. 1 - SEQ ID NO. 7.
[0019] <3> Устойчивая к ложной мучнистой росе капуста или ее потомство согласно <1> или <2>, имеющие ген устойчивости к ложной мучнистой росе, который можно выявить с помощью любого одного или более праймеров, имеющих нуклеотидные последовательности, представленные в SEQ ID NO. 8 - SEQ ID NO. 21.
[0020] <4> Устойчивая к ложной мучнистой росе капуста или ее потомство по любому одному из <1>-<3>, при этом ложная мучнистая роса представляет собой болезнь, вызываемую Hyaloperonospora brassicae.
[0021] <5> Устойчивая к ложной мучнистой росе капуста или ее потомство по любому одному из <1>-<4>, при этом ген устойчивости к ложной мучнистой росе найден в сорте брокколи, указанном в инвентарном номере FERM BP-22343.
[0022] <6> Устойчивая к ложной мучнистой росе капуста или ее потомство по любому одному из <1>-<4>, при этом ген устойчивости к ложной мучнистой росе найден в сорте капусты, указанном в инвентарном номере FERM BP-22344.
[0023] <7> Часть растения капусты или ее потомства по любому одному из <1>-<6>.
<8> Семена капусты или ее потомства по любому одному из <1>-<6>.
[0024] <9> Капуста первого поколения или ее часть, имеющие устойчивость к ложной мучнистой росе, указанные в инвентарном номере FERM BP-22344, или семена капусты.
[0025] <10> Способ селекции устойчивой к ложной мучнистой росе капусты, включающий придание нужной капусте устойчивости к ложной мучнистой росе от растения Brassica oleracea, имеющего устойчивость к ложной мучнистой росе.
[0026] <11> Способ селекции устойчивой к ложной мучнистой росе капусты, включающий придание нужной капусте устойчивости к ложной мучнистой росе от растения Brassica oleracea, имеющего устойчивость к ложной мучнистой росе, причем устойчивость к ложной мучнистой росе подтверждается геном устойчивости к ложной мучнистой росе, расположенным в непосредственной близости от локуса, представленного в любой одной из SEQ ID NO. 1 - SEQ ID NO. 7.
[0027] <12> Способ селекции устойчивой к ложной мучнистой росе капусты согласно <10> или <11>, при этом растением Brassica oleracea, имеющим устойчивость к ложной мучнистой росе, является растение Brassica oleracea, не являющееся капустой.
[0028] <13> Способ селекции по любому одному из <10>-<12>, при этом растением Brassica oleracea, имеющим устойчивость к ложной мучнистой росе, является сорт брокколи, указанный в инвентарном номере FERM BP-22343.
[0029] <14> Способ селекции согласно <10> или <11>, при этом растением Brassica oleracea, имеющим устойчивость к ложной мучнистой росе, является сорт капусты, указанный в инвентарном номере FERM BP-22344.
[0030] <15> Способ селекции по любому одному из <10>-<14>, при этом придание нужной капусте устойчивости к ложной мучнистой росе достигается путем постоянного обратного скрещивания капусты.
[0031] <16> Способ селекции по любому одному из <10>-<15>, включающий анализ наличия гена устойчивости к ложной мучнистой росе с использованием одной или более последовательностей ДНК, представленных в SEQ ID NO. 1 - SEQ ID NO. 7, или одного или более праймеров или пар праймеров, которые могут амплифицировать последовательность ДНК.
[0032] <17> Способ селекции согласно <16>, при этом праймер представлен любой одной или более из SEQ ID NO. 8 - SEQ ID NO. 21.
<18> Способ по любому из пунктов <10>-<15>, включает анализ наличия гена устойчивости к ложной мучнистой росе с использованием любого одного или более праймеров, имеющих нуклеотидные последовательности, представленные в SEQ ID NO. 8 - SEQ ID NO. 21.
[0033] <19> маркер, имеющий любую одну из нуклеотидных последовательностей, представленных в SEQ ID NO. 1 - SEQ ID NO. 7, причем маркер способен выявлять локус устойчивости к ложной мучнистой росе в растении Brassica oleracea.
[0034] <20> набор праймеров, содержащий любой один или более праймеров, имеющих нуклеотидные последовательности, представленные в SEQ ID NO. 8 - SEQ ID NO. 21, причем набор праймеров способен выявлять локус устойчивости к ложной мучнистой росе в растении Brassica oleracea.
[0035] <21> Способ обнаружения устойчивости к ложной мучнистой росе в растении Brassica oleracea, включающий использование любого одного или более маркеров, имеющих нуклеотидные последовательности, представленные в SEQ ID NO. 1 - SEQ ID NO. 7, или любого одного или более праймеров, имеющих нуклеотидные последовательности, представленные в SEQ ID NO. 8 - SEQ ID NO. 21.
Предпочтительные результаты Изобретения
[0036] Устойчивая к ложной мучнистой росе капуста согласно настоящему изобретению имеет выраженную устойчивость к ложной мучнистой росе, вызываемой Hyaloperonospora brassicae. Кроме того, использование устойчивой к ложной мучнистой росе капусты согласно настоящему изобретению в качестве материала обеспечивает дальнейшую селекцию новой устойчивой к ложной мучнистой росе линии капусты. Кроме того, использование маркера, связанного с устойчивостью к ложной мучнистой росе согласно настоящему изобретению, обеспечивает обнаружение или отбор устойчивости к ложной мучнистой росе даже без проведения теста путем заражения. Выращивание линии капусты, выведенной согласно настоящему изобретению, обеспечивает выращивание капусты даже в зонах, где выращивание было трудно по причине распространения ложной мучнистой росы, и снижает трудовые и финансовые затраты на химическое опрыскивание, которое было необходимо при выращивании. Кроме того, устойчивая к ложной мучнистой росе капуста согласно настоящему изобретению обеспечивает транспортировку свежих овощей, выращенных с уменьшенным количеством химических опрыскиваний, и дополнительно подавляет распространение болезней, это обеспечивает уборку свежих овощей с очень высокой оценкой продукции.
Краткое описание чертежей
[0037] На фиг. 1 показан симптом в тесте заражения ложной мучнистой росой (слева показана восприимчивая линия, а справа показана устойчивая линия). На фигуре для левой восприимчивой линии на поверхности листьев наблюдается образование повреждений от желтых до коричневых.
На фиг. 2 показан электрофоретический спектр маркера ДНК, связанного в непосредственной близости от фактора устойчивости к ложной мучнистой росе (Пример 2).
На фиг. 3 показана карта сцепления в непосредственной близости от фактора устойчивости к ложной мучнистой росе (Пример 3).
На фиг. 4 показан индекс оценки тяжести болезни при проведении полевых испытаний примера 5.
На фиг. 5 показан результат проведения полевых испытаний линии капусты, выведенной согласно настоящему изобретению, (Пример 5), включая условие «CB-20» (исходная родительская линия) и изогенную линию, введенную с фактором устойчивости к ложной мучнистой росе.
На фиг. 6 показан результат проведения полевых испытаний трех линий капусты, выведенных согласно настоящему изобретению (Пример 5).
На фиг. 7 показан результат проведения испытания первого поколения (F1) сорта с использованием родительской линии капусты «DMR-CB-20», выведенной согласно настоящему изобретению (Пример 6).
На фиг. 8-1 показаны нуклеотидные последовательности маркеров (DMTLR-1-DMTLR-7).
На фиг. 8-2 показаны нуклеотидные последовательности маркеров (DMTLR-1-DMTLR-7).
На фиг. 8-3 показаны нуклеотидные последовательности маркеров (DMTLR-1-DMTLR-7).
На фиг. 8-4 показаны нуклеотидные последовательности маркеров (DMTLR-1-DMTLR-7).
На фиг. 8-5 показаны нуклеотидные последовательности маркеров (DMTLR-1-DMTLR-7).
Варианты осуществления изобретения
[0038] Ниже настоящее изобретение описано подробно.
[0039] Устойчивая к ложной мучнистой росе капуста
Настоящее изобретение относится к описанной выше капусте, имеющей устойчивость к ложной мучнистой росе (устойчивой к ложной мучнистой росе капусте), или ее потомству.
[0040] В настоящем описании «потомство» включает гибриды, полученные путем гибридизации устойчивой к ложной мучнистой росе капусты согласно настоящему изобретению и растения Brassica oleracea, которые можно гибридизировать с растением. Соответственно, «потомство» также включает, например, потомство, полученное путем гибридизации устойчивой к ложной мучнистой росе капусты согласно настоящему изобретению в качестве растения-опылителя (отцовского растения) и растения Brassica oleracea в качестве опыляемого растения (материнского растения), которое можно гибридизировать с растением. Кроме того, «потомство» также включает, например, растения, полученные путем слияния клеток устойчивой к ложной мучнистой росе капусты согласно настоящему изобретению и растения, которое можно слить с капустой, и межвидовые гибридные растения.
[0041] Термин «растение Brassica oleracea» означает крестоцветное растение, которое представляет собой растение Brassica oleracea, принадлежащее к роду Brassica, и включает, например, B. oleracea var. capitata (капуста), B. oleracea var. italica (брокколи), B. oleracea var. botrytis (цветная капуста), B. oleracea var. gemmifera (брюссельская капуста), B. oleracea var. gongyloides (кольраби), B. oleracea var. acephara (декоративная капуста, листовая) и B. oleracea var. albograbra (китайская листовая капуста).
[0042] «Капуста» в данном случае означает виды растения, принадлежащие к Brassica oleracea, и представляет собой виды растения, классифицируемые как B. oleracea var. capitata.
[0043] В настоящем описании «ложная мучнистая роса» означает болезнь, вызываемую оомицетами семейства Peronosporaceae, предпочтительно болезнь, вызываемую Hyaloperonospora brassicae. Соответственно, устойчивость к ложной мучнистой росе в данном случае означает устойчивость к болезням, вызываемым этими патогенами.
[0044] Соответственно, устойчивая к ложной мучнистой росе капуста согласно настоящему изобретению проявляет устойчивость к вызывающему ложную мучнистую росу грибку (предпочтительно Hyaloperonospora brassicae), и дает единственную, доминирующую экспрессию. Использование этого растения в качестве материала обеспечивает выведение новой родительской линии капусты, имеющей устойчивость к ложной мучнистой росе. «Родительская линия» в данном случае означает линию, выведенную для получения гибридного сорта, и обычно гибридный сорт получают путем гибридизации двух или более родительских линий, имеющих разные фенотипы.
[0045] Соответственно, «устойчивость к ложной мучнистой росе» согласно настоящему изобретению означает устойчивость к патогену Hyaloperonospora brassicae, возбудителю ложной мучнистой росы, а более конкретно основана на факторе, расположенном в непосредственной близости от SEQ ID NO. 1 - SEQ ID NO. 7. То есть согласно предпочтительному варианту осуществления настоящего изобретения устойчивая к ложной мучнистой росе капуста или ее потомство согласно настоящему изобретению имеет ген устойчивости к ложной мучнистой росе, расположенный в непосредственной близости от локуса, представленного любой одной или более из SEQ ID NO. 1 - SEQ ID NO. 7.
[0046] В данном случае определение «представленный любой одной или более SEQ ID NO. 1 - SEQ ID NO. 7» включает случай, когда нуклеотидные последовательности, представленные в SEQ ID NO. 1 - SEQ ID NO. 7, находятся в пределах диапазона определенной идентичности последовательностей или диапазона, имеющего частичную мутацию. Последовательности диапазона, которыми можно манипулировать также как последовательностями SEQ ID NO. 1 - SEQ ID NO. 7, могут быть вполне понятны специалисту в данной области. Соответственно, например, определение «представленный любой одной или более SEQ ID NO. 1 - SEQ ID NO. 7» используют в смысле включения случая, представленного в любой одной или более следующих нуклеотидных последовательностей (a)-(c):
(a) любой одной или более нуклеотидных последовательностей, представленных в SEQ ID NO. 1 - SEQ ID NO. 7.
(b) любой одной или более нуклеотидных последовательностей, имеющих идентичность последовательностей 95% или более с нуклеотидными последовательностями, представленными в SEQ ID NO. 1 - SEQ ID NO. 7, и
(c) любой одной или более нуклеотидных последовательностей, полученных путем делеции, замещения, вставки и/или добавления одной или множества нуклеотидных последовательностей, представленных в SEQ ID NO. 1 - SEQ ID NO. 7.
[0047] Вследствие этого, согласно предпочтительному варианту осуществления настоящего изобретения устойчивая к ложной мучнистой росе капуста или ее потомство согласно настоящему изобретению рассматривается как имеющая ген устойчивости к ложной мучнистой росе, расположенный в непосредственной близости от локуса, представленного в любой одной или более нуклеотидных последовательностях, представленных в описанных выше (a)-(c).
[0048] В (b) «имеющий идентичность последовательностей 95% или более с нуклеотидными последовательностями, представленными в SEQ ID NO. 1 - SEQ ID NO. 7» включает номера SEQ ID, имеющие идентичность последовательностей по меньшей мере 95%, предпочтительно по меньшей мере 96%, еще более предпочтительно по меньшей мере 97%, еще более предпочтительно 98% и особенно предпочтительно по меньшей мере 99% с нуклеотидными последовательностями, представленными в SEQ ID NO. 1 - SEQ ID NO. 7, при расчете с использованием известного алгоритма поиска гомологии, такого как BLAST и FASTA (например, с использованием параметра по умолчанию или начальной настройки).
[0049] Термин «идентичность последовательностей» в данном случае означает, например, процентное значение (%) количества идентичных нуклеотидов к общему количеству нуклеотидов, включая гэпы, при выравнивании двух последовательностей оснований (нуклеотидов) (причем гэп можно вводить или не вводить).
[0050] В (c) «множество» в «делеция, замещение, вставка, и/или добавление одной или множества нуклеотидных последовательностей, представленных в SEQ ID NO. 1 - SEQ ID NO. 7», составляет, например, приблизительно 10, предпочтительно восемь, более предпочтительно шесть, еще более предпочтительно пять, еще более предпочтительно четыре, еще более предпочтительно три и еще более предпочтительно две и особенно предпочтительно одну.
[0051] Согласно предпочтительному варианту осуществления настоящего изобретения SEQ ID NO. 1 - SEQ ID NO. 7 может быть SEQ ID NO. 22-28, соответственно. SEQ ID NO. 22-28 включают последовательности за пределами последовательностей SEQ ID NO. 1-7 между праймерами (включая последовательности праймеров), и были раскрыты авторами изобретения в описанном ниже примере 2.
[0052] Соответственно, фраза «представленный любой одной или более SEQ ID NO. 22-28» означает, что только части SEQ ID NO. 1-7, включенные в эти последовательности, включают те, что представлены в любой одной или более из описанных выше нуклеотидных последовательностей (a)-(c), и случай, в котором SEQ ID NO. 22-28 представлены любой одной или более следующими нуклеотидными последовательностями (a')-(c').
(a') любой одной или более нуклеотидными последовательностями, представленными в SEQ ID NO. 22 - SEQ ID NO. 28,
(b') любой одной или более нуклеотидными последовательностями, имеющими идентичность последовательностей 95% или более с нуклеотидными последовательностями, представленными в SEQ ID NO. 22 - SEQ ID NO. 28, и
(c') любой одной или более нуклеотидными последовательностями, полученными путем делеции, замещения, вставки и/или добавления одной или множества нуклеотидных последовательностей, представленных в SEQ ID NO. 22 - SEQ ID NO. 28.
[0053] В (b') «имеющий идентичность последовательностей 95% или более с нуклеотидными последовательностями, представленными в SEQ ID NO. 22 - SEQ ID NO. 28» включает номера SEQ ID, имеющие идентичность последовательностей по меньшей мере 95%, предпочтительно по меньшей мере 96%, еще более предпочтительно по меньшей мере 97%, еще более предпочтительно 98% и особенно предпочтительно по меньшей мере 99% с нуклеотидными последовательностями, представленными в SEQ ID NO. 22 - SEQ ID NO. 28 при расчете с использованием известного алгоритма поиска гомологии, такого как BLAST и FASTA (например, с использованием параметра по умолчанию или начальной настройки).
[0054] В (c') «множество» в «делеция, замещение, вставка, и/или добавление одной или множества нуклеотидных последовательностей, представленных в SEQ ID NO. 22 - SEQ ID NO. 28» составляет, например, приблизительно 10, предпочтительно восемь, более предпочтительно шесть, еще более предпочтительно пять, еще более предпочтительно четыре, еще более предпочтительно три и еще более предпочтительно две и особенно предпочтительно одну.
[0055] Под «близостью», упоминаемой в настоящем изобретении, из взаиморасположения между положением маркера и генов устойчивости к ложной мучнистой росе и при рядовой осведомленности специалиста в данной области специалист в данной области может легко понять степень расстояния. Например, в зависимости от условий анализа, это может быть расстояние приблизительно 10 см или менее (например, 7 см).
[0056] Кроме того, за счет использования нуклеотидной последовательности, представленной в SEQ ID NO. 1 - SEQ ID NO. 7 в качестве маркеров, из локусов, представленных этими последовательностями, можно оценить или подтвердить наличие гена устойчивости к ложной мучнистой росе, расположенного в непосредственной близости от них.
[0057] Соответственно, в еще одном варианте осуществления изобретения представлен маркер, который может обнаруживать локус устойчивости к ложной мучнистой росе в растении Brassica oleracea, причем маркер имеет любую одну из нуклеотидных последовательностей, представленных в SEQ ID NO. 1 - SEQ ID NO. 7. Также представлен способ обнаружения устойчивости к ложной мучнистой росе в растении Brassica oleracea, включающий обнаружение наличия гена устойчивости к ложной мучнистой росе за счет использования маркера любой одной или более последовательностей ДНК, представленных в SEQ ID NO. 1 - SEQ ID NO. 7.
[0058] «Любая из нуклеотидных последовательностей, представленных в SEQ ID NO. 1 - SEQ ID NO. 7», может включать любую одну из нуклеотидных последовательностей, представленных в описанных выше (a)-(c), при условии возможности точного определения гена устойчивости к ложной мучнистой росе.
[0059] Обнаружение этих маркеров можно проводить согласно известному специалистам в данной области методу, такому как метод ПЦР, метод ПЦР в реальном времени, метод RFLP, метод LAMP или метод генотипирования SNP на микрочипе.
[0060] Как описано выше, использование этих маркеров и метода обнаружения обеспечивает подтверждение, является ли объект «устойчивой к ложной мучнистой росе капустой или ее потомством, имеющим ген устойчивости к ложной мучнистой росе, расположенный в непосредственной близости от локуса, представленного любой одной или более из SEQ ID NO. 1 - SEQ ID NO. 7».
[0061] Предпочтительный вариант осуществления настоящего изобретения включает ген устойчивости к ложной мучнистой росе, который можно обнаруживать с помощью одного или более праймеров или пар праймеров, которые могут амплифицировать последовательность ДНК, представленную в SEQ ID NO. 1 - SEQ ID NO. 7. Согласно более предпочтительному варианту осуществления настоящего изобретения устойчивая к ложной мучнистой росе капуста или ее потомство согласно настоящему изобретению имеет ген устойчивости к ложной мучнистой росе, который можно обнаруживать с помощью любого одного или более праймеров, имеющих нуклеотидные последовательности, представленные в SEQ ID NO. 8 - SEQ ID NO. 21. Эти праймеры далее могут называться «маркеры DMTLR».
[0062] В данном случае, когда маркер ДНК «имеет» нуклеотидную последовательность, это значит, что маркер имеет нуклеотидную последовательность. Для маркера ДНК согласно настоящему изобретению любой один или несколько (например, один, два или три, предпочтительно один или два, более предпочтительно один) нуклеотидов в соответствующей нуклеотидной последовательности можно заместить, удалить, добавить, или удалить, или последовательность может содержать часть соответствующей нуклеотидной последовательности и иметь определенные свойства. В этих случаях слово «имеет» можно заменить на «содержит». Кроме того, когда замещение, делеция, добавление или делеция одного нуклеотида доступна, «имеет» можно заменить на «по существу содержит».
[0063] Устойчивость к ложной мучнистой росе в данном случае можно обнаружить и подтвердить путем проведения ПЦР за счет использования праймеров, представленных нуклеотидными последовательностями 8-21.
[0064] В еще одном варианте осуществления изобретения представлен набор праймеров, которые могут обнаруживать локус устойчивости к ложной мучнистой росе в растении Brassica oleracea, причем набор праймеров содержит любой один или более праймеров, имеющих нуклеотидные последовательности, представленные в SEQ ID NO. 8 - SEQ ID NO. 21.
[0065] В еще одном варианте осуществления изобретения представлен способ обнаружения устойчивости к ложной мучнистой росе в растении Brassica oleracea, включающий использование любого одного или более маркеров, имеющих нуклеотидные последовательности, представленные в SEQ ID NO. 1 - SEQ ID NO. 7, или любого одного или более праймеров, имеющих нуклеотидные последовательности, представленные в SEQ ID NO. 8 - SEQ ID NO. 21. Использование этих маркеров ДНК обеспечивает эффективную селекцию новой линии капусты, имеющей устойчивость к ложной мучнистой росе, без отбора с помощью теста путем заражения.
[0066] Устойчивая к ложной мучнистой росе капуста согласно настоящему изобретению имеет следующие характеристики.
(1) Конкретно, это - растение, имеющее любые последовательности ДНК, представленные в SEQ ID NO. 1 - SEQ ID NO. 7 в непосредственной близости от локуса устойчивости к ложной мучнистой росе, и проявляющее устойчивость к ложной мучнистой росе благодаря включению аллеля.
(2) Использование линии, имеющей описанную выше последовательность, в качестве материала для гибридизации обеспечивает выведение новой родительской линии капусты, имеющей устойчивость к ложной мучнистой росе. Введение устойчивости к ложной мучнистой росе можно подтвердить с помощью теста путем заражения. Альтернативно, новые маркеры можно сконструировать из маркеров ДНК, полученных на основе SEQ ID NO. 1 - SEQ ID NO. 7, и последовательности ДНК, расположенной в непосредственной близости от SEQ ID NO. 1 - SEQ ID NO. 7, на основе служебной информации, и использовать для отбора устойчивых растений. Кроме того, использование маркеров в непосредственной близости от локуса устойчивости к ложной мучнистой росе также обеспечивает отбор объектов, из которых был выделен не являющийся мишенью признак, связанный с локусом устойчивости к ложной мучнистой росе.
(3) Разработанная таким образом капуста согласно настоящему изобретению имеет устойчивость к патогену, вызывающему ложную мучнистую росу, Hyaloperonospora brassicae, и таким образом обеспечивает снижение трудовых и финансовых затрат для опрыскивания фунгицидами для борьбы с болезнью в течение периода выращивания.
[0067] Согласно предпочтительному варианту осуществления настоящего изобретения устойчивой к ложной мучнистой росе капустой или ее потомством согласно настоящему изобретению может быть любая из следующих:
1) устойчивая к ложной мучнистой росе капуста или ее потомство, причем ген устойчивости к ложной мучнистой росе найден в сорте брокколи, указанном в инвентарном номере FERM BP-22343;
2) устойчивая к ложной мучнистой росе капуста или ее потомство, причем ген устойчивости к ложной мучнистой росе найден в сорте капусты, указанном в инвентарном номере FERM BP-22344; и
3) капуста первого поколения, имеющая устойчивость к ложной мучнистой росе, которая указана в инвентарном номере FERM BP-22344.
[0068] В данном случае «найден» ген устойчивости к ложной мучнистой росе означает, что ген, существующий в конкретном сорте, включен в устойчивую к ложной мучнистой росе капусту или ее потомство. Более конкретно, устойчивая к ложной мучнистой росе капуста или ее потомство, имеющее ген устойчивости к ложной мучнистой росе, найденный в сорте брокколи, указанном в инвентарном номере FERM BP-22343, включает сорт брокколи, указанный в инвентарном номере FERM BP-22343, и любой сорт при условии, что они имеют ген устойчивости к ложной мучнистой росе, найденный в сорте брокколи, указанном в инвентарном номере FERM BP-22343.
[0069] Согласно еще одному варианту осуществления изобретения настоящее изобретение также относится к части растения устойчивой к ложной мучнистой росе капусты или ее потомства согласно настоящему изобретению, или к их семенам. «часть растения» включает такие органы как цветок, листья, стебель и корень, или их часть или ткани, или клетки или клеточные агрегаты из этих органов или тканей.
[0070] Способ селекции устойчивой к ложной мучнистой росе капусты
Способ селекции устойчивой к ложной мучнистой росе капусты согласно настоящему изобретению включает, как описано выше, придание нужной капусте устойчивости к ложной мучнистой росе от растения Brassica oleracea, имеющего устойчивость к ложной мучнистой росе.
[0071] «Растение Brassica oleracea, имеющее устойчивость к ложной мучнистой росе», означает растение Brassica oleracea, которое обладает способностью ограничения роста и развития патогена, вызывающего ложную мучнистую росу (предпочтительно Hyaloperonospora brassicae), или повреждения, которое она вызывает, и его можно получить, например, за счет проведения теста путем заражения с использованием представленного патогена, вызывающего ложную мучнистую росу (предпочтительно Hyaloperonospora brassicae), и оценки, имеет ли растение устойчивость к нему. Более предпочтительно, в этом тесте путем заражения фактором устойчивости, имеющимся в растении, является растение Brassica oleracea, демонстрирующее единственную доминирующую экспрессию. Более конкретно, например, тест путем заражения проводят согласно описанному ниже Примеру 1, и это обеспечивает подтверждение, представляет ли собой объект «растение Brassica oleracea, имеющее устойчивость к ложной мучнистой росе», которое можно использовать в способе селекции согласно настоящему изобретению.
[0072] Предпочтительно, «растением Brassica oleracea, имеющим устойчивость к ложной мучнистой росе», является растение Brassica oleracea, не являющееся капустой.
[0073] Более предпочтительно, «растением Brassica oleracea, имеющим устойчивость к ложной мучнистой росе», является сорт брокколи, указанный в инвентарном номере FERM BP-22343, или сорт капусты, указанный в инвентарном номере FERM BP-22344.
[0074] В способе селекции согласно настоящему изобретению «придание нужной капусте устойчивости к ложной мучнистой росе» означает введение в нужную капусту фактора устойчивости к ложной мучнистой росе» «растения Brassica oleracea, имеющего устойчивость к ложной мучнистой росе», чтобы придать капусте устойчивость к ложной мучнистой росе.
[0075] «Нужная капуста» означает капусту, которая не имеет устойчивости к ложной мучнистой росе, и капусту, которую можно гибридизировать с «растением Brassica oleracea, имеющим устойчивость к ложной мучнистой росе», и которой нужно ввести устойчивости к ложной мучнистой росе. Это капуста имеет полезный признак в качестве капусты.
[0076] «Устойчивость к ложной мучнистой росе», упоминаемую в данном случае, можно подтвердить с помощью известного средства, такого как тест путем заражения ложной мучнистой росой, более конкретно, ген устойчивости к ложной мучнистой росе, расположенный в непосредственной близости от локуса, представленного любой одной или более из SEQ ID NO. 1 - SEQ ID NO. 7.
[0077] Введение устойчивости к ложной мучнистой росе означает введение гена, который может проявлять в нужной капусте устойчивость к ложной мучнистой росе. В настоящем изобретении обычно этого введения можно добиться с помощью гибридизации «растения Brassica oleracea, имеющего устойчивость к ложной мучнистой росе», и нужной капусты, отбирая ту, что имеет нужную устойчивость к ложной мучнистой росе из гибридного потомства, полученного таким образом и проведения обратного скрещивания с использованием капусты в качестве родительского растения для обратного скрещивания.
[0078] Средством подтверждения устойчивости к ложной мучнистой росе в гибридном потомстве после гибридизации может быть тест путем заражения ложной мучнистой росой (например, может упоминаться в примере 1), или в отборе устойчивого растения можно использовать маркеры ДНК, полученные на основе SEQ ID NO. 1 - SEQ ID NO. 7, и маркеры, вновь сконструированные из последовательности ДНК, расположенной в непосредственной близости от SEQ ID NO. 1 - SEQ ID NO. 7, которые отбирают на основе служебной информации. Эти маркеры включают маркер, имеющий любую одну из нуклеотидных последовательностей, представленных в SEQ ID NO. 1 - SEQ ID NO. 7, и праймеры, имеющие нуклеотидные последовательности, представленные в SEQ ID NO. 8 - SEQ ID NO. 21. Это средство подтверждения таким же образом можно использовать в процессе обратного скрещивания, отбирая за счет этого потомство с устойчивостью к ложной мучнистой росе.
[0079] Согласно предпочтительному варианту осуществления настоящего изобретения способ селекции согласно настоящему изобретению включает анализ наличия гена устойчивости к ложной мучнистой росе с использованием любого одного или более маркеров последовательностей ДНК, представленных в SEQ ID NO. 1 - SEQ ID NO. 7, или одного или более праймеров или пар праймеров, которые могут амплифицировать последовательность ДНК. Еще более предпочтительно, праймеры представлены любой одной или более SEQ ID NO. 8 - SEQ ID NO. 21.
[0080] Согласно предпочтительному варианту осуществления настоящего изобретения способ селекции согласно настоящему изобретению проводят посредством придания нужной капусте устойчивости к ложной мучнистой росе путем постоянного обратного скрещивания капусты. Более конкретно, способ селекции согласно настоящему изобретению включает гибридизацию растения Brassica oleracea, имеющего устойчивость к ложной мучнистой росе, и нужной капусты, отбирая гибридное потомство, имеющее устойчивость к ложной мучнистой росе, и проводя постоянное обратное скрещивание их путем использования нужной капусты в качестве родительского растения для обратного скрещивания.
[0081] При проведении обратного скрещивания обычно количество обратных скрещиваний предпочтительно составляет приблизительно пять-семь.
[0082] При проведении эффективного обратного скрещивания можно использовать общегеномный маркер ДНК, чтобы приблизить объект к родительскому растению при обратном скрещивании на ранней стадии. Например, первое поколение обратного скрещивания (BC1F1) представляет собой разделенное поколение, скорости замещения генома у этих объектов - разные, а увеличение размера популяции обеспечивает получение объектов, у которых 90% или более области генома демонстрирует такой же генотип как у родительского растения для обратного скрещивания. Отбор этих объектов обеспечивает соответствие области, не являющейся локусом устойчивости к ложной мучнистой росе, такому же генотипу как у родительского растения для обратного скрещивания с некоторым числом поколений. В виде конкретного средства, полезного в качестве общегеномного маркера ДНК, когда доступна информация о последовательности генома родительского растения для обратного скрещивания, на основе информации можно получить маркеры ДНК для генотипирования каждого локуса.
[0083] Даже когда нет информации о последовательности генома родительского растения для обратного скрещивания, объект, имеющий генотип, близкий к генотипу родительского растения для обратного скрещивания можно отобрать из разделенного поколения с использованием метода случайной ПЦР, такого как RAPD (случайно амплифицируемая полиморфная ДНК), SRAP (полиморфизм фрагментов ДНК, связанных с определенной нуклеотидной последовательностью), или AFLP (полиморфизм длин амплифицированных фрагментов). Альтернативно, если доступны микрочипы для генотипирования SNP (например, продукты Affymetrix или Illumina), которые сконструированы для исчерпывающего анализа множества SNP, рассеянных в геноме, такие средства можно использовать для анализа.
[0084] Выведенную таким образом устойчивую к ложной мучнистой росе линию можно использовать не только непосредственно в качестве сорта, но также в качестве родителей или одного родителя в системе получения семян F1.
[0085] Соответственно, еще один вариант осуществления изобретения также представляет способ получения линии F1 с использованием устойчивой к ложной мучнистой росе линии, которую получают посредством способа селекции согласно настоящему изобретению, в качестве линии родителей или одного родителя, и способа получения семян линии F1.
[ПРИМЕРЫ]
[0086] Настоящее изобретение конкретно описано ниже со ссылкой на следующие примеры, но настоящее изобретение не следует ограничивать этими примерами.
[0087] Пример 1:
За счет использования генетических ресурсов брокколи, имеющихся в Sakata Seed Corporation, в качестве материалов нашли две линии брокколи («BR-23» и «BR-35»), которые проявляют устойчивость к обоим из двух изолятов ложной мучнистой росы (изоляты Dm-A и Dm-B (причем изолят Dm-B имеет более широкий спектр вирулентности к разным сортам чем Dm-A)).
[0088] Чтобы идентифицировать локус устойчивости к ложной мучнистой росе, содержащийся в этих устойчивых линиях, сперва, за счет использования в качестве материала линии «BR-23», гибридизировали две линии («BR-4» и «BR-24»), демонстрирующие восприимчивость к описанным выше двум изолятам, таким образом получая популяцию F2 и популяцию BC1F1, показанные в таблице 1. В качестве обозначения поколения F1 означает первое поколение, а BC1 означает поколение, один раз подвергнутое обратному скрещиванию. Более конкретно, «BC1F1» означает поколение, один раз подвергнутое обратному скрещиванию после прохождения стадии первого поколения.
[0089] Эти популяции, полученные таким образом, подвергали тестированию путем заражения с использованием изолята с более широким спектром вирулентности, Dm-B.
[0090] В тесте путем заражения степень распространения болезни (тяжести болезни) оценивали для первого-третьего настоящих листьев каждого объекта согласно следующей оценке тяжести болезни:0: симптом отсутствует,1: образуются коричневые пятна, нет образования спор,2: небольшое образование спор на коричневых пятнах,3: среднее образование спор, и4: образование спор в большом количестве.
[0091] Результат показан в таблице 1.
Как показал результат, в популяции F2 отношение устойчивость : восприимчивость составляло 3:1, тогда как в BC1F1 при гибридизации с восприимчивой линией отношение составляло 1:1. Эти результаты показали, что настоящий фактор устойчивости к болезни действует единственным доминирующим образом.
[0092] [Таблица 1]Генетические анализ с использованием брокколи «BR-23» (небольшая популяция)
[0093] Пример 2:
В таблице 1 за счет использования в качестве материалов популяции F2, которая показала разделение устойчивости и восприимчивости (картируемые популяции -1 и -2) и популяции BC1F1 (картируемые популяции -3 и -4), искали маркеры RAPD с помощью метода объемного анализа сегреганатов (метод BSA).
[0094] В качестве праймеров RAPD использовали 1180 типов 10-мерных праймеров, сконструированных Operon Technologies, Inc. И 460 типов 12-мерных праймеры, сконструированных BEX Co., Ltd. В качестве объемной ДНК из картируемой популяции -4 отбирали четыре устойчивых объекта и четыре восприимчивых объекта, и их ДНК использовали для получения объемной ДНК устойчивых объектов и объемной ДНК восприимчивых объектов.
[0095] В качестве первичного скрининга маркеров RAPD два типа объемной ДНК подвергали RAPD (случайно амплифицируемой полиморфной ДНК) за счет использования 1640 типов праймеров, отбирая за счет этого 245 типов маркеров, которые показали полиморфизм.
[0096] Во вторичном скрининге из картируемой популяция-4 отбирали два объекта, которые показали устойчивость, и два объекта, которые показали восприимчивость, и использовали в качестве матриц для отбора 36 типов маркеров, которые показали сходные рисунки с полиморфизмом, показанным в первичном скрининге.
[0097] В третичном скрининге из картируемой популяции-4 отобрали четыре объекта, которые показали устойчивость, и четыре объекта, которые показали восприимчивость, и использовали в качестве матриц для отбора 11 типов маркеров, которые показали сходные рисунки с полиморфизмом, показанным во вторичном скрининге. В этом состоянии те, что показали почти такую же картину разделения маркеров, как в фенотипе, применяли для всех объектов картируемой популяции-1 - картируемой популяции-4, и подтверждали степень расхождения между этими маркерами и оценкой фенотипа, и отбирали маркеры, имеющие сильную корреляцию с фенотипом.
[0098] В описанном выше тесте семь типов маркеров из 11 типов маркеров, у которых была подтверждена связь с фактором устойчивости к ложной мучнистой росе, анализировали на нуклеотидные последовательности амплифицированных фрагментов ДНК и конструировали специфические к последовательности праймеры, пытаясь таким образом преобразовать в SCAR (амплифицируемую область с охарактеризованной последовательностью).
[0099] Сперва, фрагменты ДНК, амплифицируемые с помощью RAPD, вырезали из агарозного геля, клонировали, а затем анализировали их нуклеотидные последовательности. В результате этого, определяли (SEQ ID NO. 1 - SEQ ID NO. 7, соответственно) (Фиг. 8) нуклеотидные последовательности описанных выше семи типов маркеров (DMTLR-1-DMTLR-7). В описании последовательностей сперва определяли последовательности SEQ ID NO. 22-28, и эти последовательности имели последовательности SEQ ID NO. 1-7, расположенные между праймерами SCAR (включая последовательность праймера SCAR). На фиг. 8 последовательностью, показанной подчеркиванием, является праймер SCAR, и последовательности, расположенные между праймерами SCAR (включая праймер SCAR), соответствуют SEQ ID NO. 1-7, соответственно.
[0100] Для клонирования в качестве вектора использовали pBluescriptII SK(-) (получено от Stratagene), а в качестве конкурирующей клетки использовали JM109 (E.coli JM109, получено от Toyobo Co., Ltd.). Для анализа нуклеотидных последовательностей использовали секвенатор ДНК ABI3130 (Applied Biosystems).
[0101] Для маркеров, нуклеотидные последовательности которых расшифровали, конкретно чтобы амплифицировать последовательности-мишени, праймеры (SEQ ID NO. 8 to 21) конструировали за счет использования программного обеспечения «Праймер 3» (программное обеспечение, поддерживающее конструкцию для полимеразной цепной реакции (ПЦР), программное обеспечение из открытого источника) (Таблица 2). Кроме того, результаты электрофорезного теста на эти праймеры (маркеры) (электрофоретические спектры) показаны на фиг. 2. Разработанные таким образом маркеры в данном случае называются «маркеры DMTLR».
[0102] [Таблица 2]
[0103] Пример 3:
За счет использования такой же популяция F2, как картируемая популяция-2, используемая в примере 2, также изучали реакцию устойчивости к изоляту Dm-A ложной мучнистой росы. Размер популяции F2 составлял 240 объектов (картируемая популяция-5), и изучали реакцию объектов к Dm-A; было продемонстрировано разделение, которое приведено в таблице 3. Проводили тест путем заражения изолятом Dm-A и оценивали таким же образом как в тесте путем заражения в примере 1.
[0104] [Таблица 3]Генетические анализ с использованием брокколи «BR-23» (большая популяция)
[0105] В результате сравнения с генотипом по маркеру SCAR, полученному в примере 2, подтвердили высокую корреляцию с фенотипом. В результате этого, оценили фактор устойчивости к ложной мучнистой росе линии «BR-23», чтобы показать реакцию устойчивости к двум изолятам с единственным геном.
[0106] На основе результата анализа выше анализировали взаимосвязь между фенотипами в популяции и маркерами за счет использования «Mapmaker 2.0» (Whitehead Institute), которое представляет собой программное обеспечение для анализа взаимосвязи маркеров.
[0107] Результат показан в карте сцепления фиг. 3. Как показал результат, было оценено, что факторы устойчивости расположены в непосредственной близости от SEQ ID NO. 1-7, особенно непосредственной близости от SEQ ID NO. 4 и SEQ ID NO. 5.
[0108] Пример 4:
Для линии «BR-35», которая отличается от устойчивой линии «BR-23», проанализированной в примере 2, чтобы подтвердить, имеет ли она такой же фактор устойчивости, как линия «BR-23», получили разделенную популяцию F2 с восприимчивой линией «BR-13», и проводили тест путем заражения с использованием изолята Dm-A (Таблица 4). тест путем заражения с использованием изолята Dm-A проводили и оценивали таким же образом, как тест путем заражения в примере 1.
[0109] [Таблица 4]
[0110] Кроме того, ПЦР проводили за счет использования SEQ ID NO. 8 и 9, исследовали генотип каждого объекта; все 42 объекта, в которых локус продемонстрировал устойчивость гомозиготного типа, и 83 объекта, показавших гетерозиготный тип, показали устойчивость (Таблица 5).
[0111] [Таблица 5]
[0112] Таблица 5 показывает результат классификации 180 объектов картируемой популяции-6 в таблице 4 согласно генотипу маркера ДНК DMTLR-1.
[0113] Полиморфизм и фенотип, показанные маркерами, имели очень высокую корреляцию, так что была дана оценка, что два типа линий росе «BR-23» и «BR-35» брокколи с устойчивостью к ложной мучнистой имеют идентичный фактор устойчивости.
[0114] ген устойчивости к ложной мучнистой росе, имеющийся в «BR-35», можно найти в F1 сорта брокколи «Sawayutaka», полученном из «BR-35» в качестве одного родительского растения.
[0115] Семена F1 сорта «Sawayutaka» брокколи депонированы с международным доступом (изначально депонированы) в NITE-IPOD (Room 120, 2-5-8 Kazusakamatari, Kisarazu, Chiba) 18 августа 2017 года (индекс для идентификации, присвоенный в депозитарии: SSC-BRO-17-001, инвентарный номер: FERM BP-22343).
[0116] Пример 5:
«BR-23» и «BR-35», которые представляют собой линии брокколи, имеющиеся в Sakata Seed Corporation, использовали в качестве материалов, имеющих устойчивость к ложной мучнистой росе, линию «CB-20», линию «CB-35», линию «CB-23» или линию «CB-97» отобрали из четырех сортов (Yoshin, Kandama, типы spring и ball, соответственно) в качестве капусты, в которую вводят устойчивость, и использовали в качестве родительских линий для обратного скрещивания в тесте гибридизации.
[0117] Для эффективного проведения обратного скрещивания (BC) в основном проводили анализ ДНК с использованием разработанного маркера DMTLR, отбирали объекты, содержащие локус устойчивости к ложной мучнистой росе в виде гетерозиготы, и проводили постоянное обратное скрещивание линий капусты «CB-20», «CB-35», «CB-23» и «CB-97», подтверждая в то же время их фенотипы.
[0118] Сперва, линии брокколи «BR-23» и «BR-35» гибридизировали с линиями капусты «CB-20», «CB-35», «CB-23» и «CB-97» с получением семян F1, и проводили отбор ДНК с маркерами DMTLR и постоянные обратные скрещивания. Чтобы эффективно проводить обратное скрещивание, проводили отбор с использованием 20 типов праймеров RAPD, с последующим отбором объектов, демонстрирующих генотипы, близкие к «CB-20», «CB-35», «CB-23» и «CB-97», которые являются их родительскими линиями для обратного скрещивания в их линиях обратного скрещивания. В результате этого в поколении BC2F1 отбирали объекты, маркеры RAPD которых полностью совпадали с их родительскими линиями для обратного скрещивания в «CB-20», и в поколении BC3F1 у других «CB-35», «CB-23» и «CB-97».
[0119] В поколении BC2F1 или поколении BC3F1 устойчивость и восприимчивость распознавали с помощью маркера DMTLR, и каждый из этих генотипов прототипировали вместе с их родительскими линиями для обратного скрещивания в каждом или в обоих Kakegawa Research Center или Kimitsu Breeding Station Sakata Seed Corporation.
[0120] Результаты показаны в таблице 6 и на фиг. 4-7.
[0121] Таблица 6 показывает результат пробного получения линии, полученной путем введения фактора устойчивости к ложной мучнистой росе, в линию «CB-20» капусты в полевых условиях, и результат оценки тяжестя болезни ложной мучнистой росы. В разделенном поколении в процессе обратного скрещивания объект, который оценивали, как имеющий фактор устойчивости к ложной мучнистой росе с помощью маркера DMTLR, показал устойчивость, даже при гетерозиготности, и объект, показавший восприимчивость, оценивали, как не имеющий фактора устойчивости к ложной мучнистой росе. Кроме того, для фенотипа, форма растения занчительно ближе к типу Yoshin «CB-20» в качестве родительской линии для обратного скрещивания.
[0122] [Таблица 6]
[0123] Признаки оценок, перечисленных в таблице 6, приведены на фиг. 4. В качестве индекса оценки тяжести болезни, тяжесть болезни означает следующее условие.Тяжесть болезни0: симптом отсутствует,1: повреждение небольшой величины,2: повреждение средней величины,3: множество повреждений.
[0124] На фиг. 5 представлены фотографии «CB-20» (исходная родительская линия), показанной в таблице 6, и изогенной линии, введенной с фактором устойчивости к ложной мучнистой росе. Как показано на фигуре, изогенная линия, введенная с фактором устойчивости к ложной мучнистой росе, подавляла распространение ложной мучнистой росы по сравнению с родительской линией «CB-20».
[0125] Кроме того, линии, которые подвергали обратному скрещиванию с тремя другими линиями капусты «CB-35», «CB-23» и «CB-97», также подвергали опытному производственному изучению в поле.
[0126] Результат показан на фиг. 6. Как показал результат, линия с введенным локусом устойчивости имела выраженную устойчивость основных листьев и кочана, даже в случае гетеро, и была подтвержденно эквивалентна родительским линиям «CB-35», «CB-23» и «CB-97», которые относились к Kandama, типы spring и ball, соответственно. Более конкретно, как показано на Фиг. 6, изогенная линия с введенным фактором устойчивости к ложной мучнистой росе подавляла распространение ложной мучнистой росы по сравнению с исходной родительской линией.
[0127] После этого капусту «CB-20», тип Yoshin, которая особенно уязвима для ложной мучнистой росы, несколько раз подвергали обратному скрещиванию, 20 объектов отбирали из линий, выращенных в поле Kakegawa Research Center, из другой и опыляемой культуры получали гомозиготу с устойчивостью к ложной мучнистой росе, за счет чего успешно добились первой селекции устойчивой к ложной мучнистой росе родительской линии капусты, имеющей практические свойства в качестве родительского растения F1 сорта.
[0128] Пример 6:
Кроме того, за счет использования в качестве растения-опылителя «DMR-CB-20» (линия DM капусты, выведенная как описано выше) с устойчивостью к ложной мучнистой росе и другой перспективной линии капусты «CB-5» получили линию с цитоплазматической мужской стерильностью в качестве опыляемого растения, F1 (название прототипа сорта: SK3-005). линию F1 постоянно прототипировали на Kimitsu Breeding Station Sakata Seed Corporation, и подтверждали стабильное проявление устойчивости к ложной мучнистой росе. таким образом проведена первая селекция сорта капусты F1 с устойчивостью к ложной мучнистой росе.
[0129] Семена, полученные в F1 выведенного сорта капусты с устойчивостью к ложной мучнистой росе, депонировали с международным доступом (изначально депонировали) в NITE-IPOD (Room 120, 2-5-8 Kazusakamatari, Kisarazu, Chiba) 18 августа 2017 года (индекс для идентификации, присвоенный в депозитарии: SSC-CAB-17-001, инвентарный номер: FERM BP-22344).
[0130] Сравнили F1 исходного сорта (F1 сорта, полученного за счет использования исходной родительской линии «CB-20») и F1 нового сорта с введенной устойчивостью к ложной мучнистой росе (F1 сорта, имеющего устойчивость к ложной мучнистой росе).
[0131] Результат показан на фиг. 7. Как показано на фиг. 7, в F1 сорта (левая фотография), которому была придана устойчивость к ложной мучнистой росе, подавлено распространение ложной мучнистой росы по сравнению с F1 исходного сорта.
--->
СПИСОК ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
<110> Sakata Seed Corporation
<120> Капуста, имеющая устойчивость к ложной мучнистой росе, и
способ получения капусты
<130> 800523JP01
<160> 28
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 1022
<212> ДНК
<213> Неизвестно
<220>
<223> Маркер 1
<400> 1
agcaaaagct tcatctctgc atataatact cagaacaatc aataatttta aaaagaaaac 120
aacagagtgc tataatgaga gagagagaga gagagagaga gactcactct cttgaatttc 180
gactgctgcc ttgcagtttc tgaagtcggg agctcgtagt acctatacaa ttaccagaac 240
atatactctc cgttgatatc taattaattc cacaaacaga gagaagagta gtggagattt 300
catacctcga gaacgtgagg gcgaagatcc ttgacaagga gacgcatctt gtagtagttg 360
gagttctcca ccttcagatt cccttccagc cccctctttc tcccccttga cgacggatct 420
gacggagcca cctgagctcc tcctatatgt ggccgactcg gaaccggcgg gttatctaag 480
tccatcgccg gcgaagatct ctgatctgct gcagctgctg taggaagcgg gagagatgaa 540
gtagcggaag gaggaggagg agttgccgcg gaggtcgatt tctccatttt caaaaagggg 600
gttttctcaa ccgtaacacc ccagcacggg acgcagcagc cgggaactta aaacgaccgc 660
gttgtaagaa atctactgat tcggttaggg cctacttggg ggcccattat cttttttctt 720
tgtctaaacg gcccgtctgt atccgatgac catcatatag aagggtaaat catcaagtaa 780
caacaacact gcaacagaca agggacatat gtagctgaac agagaactct ctattcatta 840
gactgagata tatgttcata ataaattaag tcaaatcctg cataatagct caaagctgga 900
tttaatcatt cataattcca tgaatttttt ttacatagat atagtcttca gtttgacccc 960
aaaaaaaaaa aatagtcttc atatactcat ctctccaaag tgattgctag tacagggtga 1020
tc 1022
<210> 2
<211> 220
<212> ДНК
<213> Неизвестно
<220>
<223> Маркер 2
<400> 2
agtagggagt aaaccaacga gtgtaaatat cttccccaag ccgttccggg atgatgtgca 60
aggtaaacca agtgatggct atggggacaa ggaaagaaac aaaatgttcc tgcatgaaaa 120
tattgaagtt tgatgcaaac ccacaaattt ggtatatatt tcaaagttat tggttcgtgt 180
tcaaacgggt atatgctaac aacctaatat gcactcgtgg 220
<210> 3
<211> 1314
<212> ДНК
<213> Неизвестно
<220>
<223> Маркер 3
<400> 3
gtgctccgtc aagattcgac gatcgtgttt tgtttccctt tttactttaa ctctcttcac 60
tcttcttcct tcattctcct cttctgatgg gaagccatag caacgcggag aaagatgaat 120
ccgccaccga gacggatgct acaacacggc agggatctct ctctgttaca gagtccaaca 180
ccgattgcga cgcagacgtc ttgcctcctc ctcctcctgc ggacgtgagt caattcgaag 240
aaggagagaa agttttagcc aaccacaaag gtcgtttcta cgaagccaag gtaatgttat 300
ttttgtctaa aattggaatg ttgtttgtgc ttttgtgttt aaaatttgat ctttgtttta 360
tgttttcagg ttcttgaaat tgcatttaaa gacaatgaat ggaactatta tgtgcattac 420
attgtaagtt tagattttat tttgttttgc gtaaccacga atctctgtaa aagcataaac 480
aaataaaaca catttattgt taatgctgcc gttattatat ttttgccgtt ttcaatatgt 540
aatcttttgt attttctttg gtttttacag ggttggaaca aaaggttagt agaccatccg 600
acagtactgt cacttactgc cggcttttta ttgtctgaat aatctttctg tacattgcat 660
catcggtctg aataatcatt ctgctgctaa atcaaaacgt ttgccaagat tacaagtttt 720
ttttgtttct aatgcattga taatttcatg gtttgattat tgttgtatat ctttgtaatg 780
attagttatt tgtatggaca gttgggacga atggataggt catgattgtg tgttgaaaca 840
caccgaggag aatattaagg aacagggtat taagcaagga gtcaagagtg ctatggcttg 900
gagagtgtcc aaggtgaaac ctagatgccc taatggtcag tgttctgggt cttttattag 960
aggctttgtt gcatgcttta tagatcatat gctagatatt atcatcattc tcttgttaat 1020
atattttgca gttgctagag gaagaaagcg gaagcaagat tctgttgata cactagtctc 1080
tccaatggtg tggattttcc tttcattttt ctctagattc caagtttctt tctattgttt 1140
tctgatcagt ttttgcctga ttgtttttgt tgtttgctgg atacaggagg agaatttggt 1200
tgctacagac aaccttttaa ctttcaatat cccgtcagcg ttgaggaagc aactcatcga 1260
cgattatgaa ttcgttactc agatgcaaaa ggtagctctc gattcattag gtcc 1314
<210> 4
<211> 1300
<212> ДНК
<213> Неизвестно
<220>
<223> Маркер 4
<400> 4
gcatcactaa gtcaagcaac tttgatctct tggttttaag tttcaaagaa gctatctttg 60
gacgtggatt gtttgacaga agtatacatc tttggactaa gtctgataga actagtagag 120
aacctcgact aactatgcaa gtattactag gaagattcca tttgcagaat ttaagatttg 180
ttggttccta aaattctcga aagctccttg aatttttgat gccaatcact ttgaatgtgt 240
tctttttgcc tccttaaagt taaccttatt tggagtaaat attgatcaaa ttagtataag 300
taactgtgta aggcttcacg tctccatcaa tcatcctgaa caatcactgc tttgccttaa 360
acaaacttgt taattattta taagtttttt tttatgaaac acaactttca ttaatactca 420
aacattccaa ctacaaataa ggaaggagtt taaccaaact ctaacaacaa ataataaagc 480
atacaagcta aaagtagaga aacctctaag atagaatgac agcgaactcg aagcatggct 540
cgaatgcgtc ggagcaagac tcacagcagt gctagaggct tgaaatttag tcactttgta 600
tcgtgacgtt aagatccaat ccgcacctcg gaatatcgtc gaaacgacat ccgttgcatc 660
ttcaggcccc gaacggaccg ctagacaata tgaacaaacg gctatagata aagatacaca 720
cctccattta gtgtttgggg ggaaaacatt tctcataact gaggcatggg gtaatacgac 780
tcgcatctcc tgagagaagt atgatagtga tgaaagtggt gtagattgtc ccgataaacc 840
caccggtaaa tagaaacttc gaaaactctt cttataagag agataaggtg ttgtatgcat 900
atcaacagtt tcggtaatat tttcagtgaa cccgccgaaa aatattagca agttggacca 960
aatgaccaaa ctcccccaca caaatgtggg ctttgaaacc gacagacttc taagaaatgg 1020
gctgaccttt ttataaccct taatgggcca ggcccagata gttatgttgc tagggtttgg 1080
gtcacaaaat tgtacgccgc cgaggctagt gtggaggaga tgaagagcgc ggcggggctg 1140
aagctggtct catcggagtg aacggtttgc gcagcaaagc agatcggaga agagatgtag 1200
cctttgatag tacagaagct ctcgccggag taacagtcaa gatagacgtc tgacggagta 1260
atgatgatga gggcgtgaag aggaaagcac aacctcattg 1300
<210> 5
<211> 390
<212> ДНК
<213> Неизвестно
<220>
<223> Маркер 5
<400> 5
ctctgcaata ttgtccttga tgagtttatt gtctcccttc tttttcagta aattcagttt 60
cgttttattt atctattgaa tttattgtcg ctattgaatt ttctgacgta tttctctgcg 120
atcactcaat ttactgtctc tgttgagttt ctcattcttc ccattcagaa tatatgtaga 180
aacaacaatt caatataagt catctgttcg ctctatcata gtagcgtaaa ggtatctttc 240
caaattgact tggcatccat attagagaga cgtcaatgaa tataagtagt atttacaact 300
aaattcgtct gattttacaa atgcttccaa gcgtacgtgt ataccaatgt tcgcctaaag 360
ataaatgcca aggttggtgt actgaattgc 390
<210> 6
<211> 300
<212> ДНК
<213> Неизвестно
<220>
<223> Маркер 6
<400> 6
cgatctcaca ctaactacgc ttcaccaaac aaaaagatca caatcaaatc tcatcatcct 60
acttaccaat ttaggccacg catcaatcgc acaagcttca actgtatcca aaaggcattc 120
aaacgcaccg tgctgcaaca aattagcaac aatgtttaac gtaatctcgc tacaagcatg 180
catgataacg aaacgagatc ttagatacaa acaacatctt aaataaattt aatcaaatta 240
tcgacaatgt ttaatgtaat cgctacaatc atgcatgatg acgaaacgag atctcagatt 300
<210> 7
<211> 2713
<212> ДНК
<213> Неизвестно
<220>
<223> Маркер 7
<400> 7
ttatagaagg cctgtgtacg acaacaaaga ggttttgaca cgttccaaca aatcccacat 60
cctgttgaca ccgttccggc aaaccagagg gaagcgattc actttagcac ttcgaatgaa 120
gtggctggat gagtatttgg cacacgcgtc aggcttttta gcacctttgt aagctttgca 180
gatgtagctt atgaagttct cataatcctg caatgaacac acagaaaaaa actgtggtga 240
gttcagagcc aagaaatatc aagcacacac acacacaaaa actttatgtt cccattgatc 300
acatccattt tctattgatc atgcctctca tgaagacact tcacttctcg tctgctaact 360
acagttcaca agaacaataa gataccacat ttggtaatcg caacatacat ttgacccaaa 420
aaaatggtaa gtcaattaat tttctccacg ctaatctatg ataaccctat aaaacatgtc 480
ttcctcatta gtttagttaa ctagaaagat gacccaactc tctaaataca ctaaatccaa 540
agtgttgcac aaccgaattc caaatcagtc ataagtatga atgactaaca agttaatata 600
gacacatcat tcataaacag ggagtaagag agcgtaaatt agtctaagta agaactcagt 660
agaatctaaa aaggatccta ttccaaacga acctcataaa gcggctgacc atcaaccact 720
acccagggaa cgtactgatg aggaggctga agtgcgctcg tttctgcagc atacttcaac 780
tcaagctgca gcaaatggaa acgattagtg aggaatgcaa cggaagcttc cgcttccgaa 840
caagaacata gtacataaag agaaggacac taagtacctt gtctccatgt ccactgctga 900
ggcaatcgga aacaggttta gagttgagat tgagcttctg ataacaagtc tcccacttgt 960
cgtacttgtg ctcagtcacc aaactctcaa cacagtggat aaacgggaaa tgatcgctct 1020
acaaaataaa aatgtaacga tctcacacta actacgcttc accaaacaaa aagatcacaa 1080
tcaaatctca tcatcctact taccaattta ggccacgcat caatcgcaca agcttcaact 1140
gtatccaaaa ggcattcaaa cgcaccgtgc tgcaacaaat tagcaacaat gtttaacgta 1200
atctcgctac aagcatgcat gataacgaaa cgagatctta gatacaaaca acatcttaaa 1260
taaatttaat caaattatcg acaatgttta atgtaatcgc tacaatcatg catgatgacg 1320
aaacgagatc tcagattcaa acaacaccac aatacaaatt gaagctctaa tttaatcaaa 1380
tcaggataca tcggaaaggt gtgagaagac ctggcaaacg gcagtgacat tatcggagcg 1440
gagcttggtg ttaccccacg gagatagatg gagatcgacg attgatatga gatcgtcttc 1500
gaagagcttc gtgaggtggt taacgatgaa ggaagaacag tacggacata gagactcgta 1560
gtacagtccc agcgacactt tcggagaaga tggcaggtca gatgatgatg acgatgatga 1620
tacgaagaag atcagagaaa cgtagcagaa taggagaaga agaagcttgc tcgtcgaaat 1680
cgacgccatg attgcaaaga gaagcaacct ctgttgtatc gtcttcgtcc tcttctctta 1740
ataacacgca tctcgatatg ctcggtgcga aacagatgac aataaccgat aaggcccgtc 1800
tcattctttg tgtgggcctt gttcaaagcc taaatactaa ttataaaatt tcataaaagc 1860
ccaaacgttt ataacaaagg ctccgaatac ttagtaaaat ttcttttgga ccaagtgcaa 1920
atatacatca aattagctac attaattttt gggttaagca gttgaccgag aattaaagag 1980
tgacaatata catcaaagct tggaatcaat ctcatacatg tgatgaacta gaggaccaat 2040
aaaatacttg tcatgtccat tgcttaggca aaggagggac atggattata taacctcatg 2100
tatacagatt atatatcaaa tgaaaatttt aggctattgg agtacgtgaa ggatttgatc 2160
aacaagactg agactgacga cgaggtaagc aagttgggta ggatgaatgt cgtcccagaa 2220
aaggtagtcg ttagcgtcgg gacaagtccg agttaaagga ttgcacaagt atgatagctc 2280
cagctctcct gttccgcagc atcctctcgt tgtctccttt attcctgtcc ctttcgaaaa 2340
aatcgattca gaccacgaaa aaatgcacgg tatatggcta tataacaaac tgtagactca 2400
taacctgtaa tgcgagcaca ctggattata aactcacctt agttattgta aaattaatct 2460
ttcgacttaa ttatatgaaa tgacgtcaac ataaaaatag atataatgaa aaataatatg 2520
tatcatagtg atttgtgcta ttatcatcga tatcatcatg tttaaaccaa caaatacata 2580
gttttttttt agcaaataca tatattatta acgaaaaaaa attatatata gtaatgtttt 2640
aattgttgga tagccaacaa gtataatacg taaattagca aatgcaaatg agttctatat 2700
ccagccaagc cac 2713
<210> 8
<211> 22
<212> ДНК
<213> Искусственная Последовательность
<220>
<223> праймер
<400> 8
cggtcttagt tgatttctca ag 22
<210> 9
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная Последовательность
<220>
<223> праймер
<400> 9
gatcaccctg tactagcaat c 21
<210> 10
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная Последовательность
<220>
<223> праймер
<400> 10
agtagggagt aaaccaacga g 21
<210> 11
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная Последовательность
<220>
<223> праймер
<400> 11
ccacgagtgc atattaggtt g 21
<210> 12
<211> 20
<212> ДНК
<213> Искусственная Последовательность
<220>
<223> праймер
<400> 12
gtgctccgtc aagattcgac 20
<210> 13
<211> 23
<212> ДНК
<213> Искусственная Последовательность
<220>
<223> праймер
<400> 13
ggacctaatg aatcgagagc tac 23
<210> 14
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная Последовательность
<220>
<223> праймер
<400> 14
gcatcactaa gtcaagcaac t 21
<210> 15
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная Последовательность
<220>
<223> праймер
<400> 15
caatgaggtt gtgctttcct c 21
<210> 16
<211> 22
<212> ДНК
<213> Искусственная Последовательность
<220>
<223> праймер
<400> 16
ctctgcaata ttgtccttga tg 22
<210> 17
<211> 20
<212> ДНК
<213> Искусственная Последовательность
<220>
<223> праймер
<400> 17
gcaattcagt acaccaacct 20
<210> 18
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная Последовательность
<220>
<223> праймер
<400> 18
cgatctcaca ctaactacgc t 21
<210> 19
<211> 22
<212> ДНК
<213> Искусственная Последовательность
<220>
<223> праймер
<400> 19
aatctgagat ctcgtttcgt ca 22
<210> 20
<211> 22
<212> ДНК
<213> Искусственная Последовательность
<220>
<223> праймер
<400> 20
ttatagaagg cctgtgtacg ac 22
<210> 21
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная Последовательность
<220>
<223> праймер
<400> 21
gtggcttggc tggatataga a 21
<210> 22
<211> 1176
<212> ДНК
<213> Неизвестно
<220>
<223> Маркер 1a
<400> 22
cggtccttag ttgatttctc aagtttgggt gtttgtccaa tcatctcttg gtacagttga 60
agcaaaagct tcatctctgc atataatact cagaacaatc aataatttta aaaagaaaac 120
aacagagtgc tataatgaga gagagagaga gagagagaga gactcactct cttgaatttc 180
gactgctgcc ttgcagtttc tgaagtcggg agctcgtagt acctatacaa ttaccagaac 240
atatactctc cgttgatatc taattaattc cacaaacaga gagaagagta gtggagattt 300
catacctcga gaacgtgagg gcgaagatcc ttgacaagga gacgcatctt gtagtagttg 360
gagttctcca ccttcagatt cccttccagc cccctctttc tcccccttga cgacggatct 420
gacggagcca cctgagctcc tcctatatgt ggccgactcg gaaccggcgg gttatctaag 480
tccatcgccg gcgaagatct ctgatctgct gcagctgctg taggaagcgg gagagatgaa 540
gtagcggaag gaggaggagg agttgccgcg gaggtcgatt tctccatttt caaaaagggg 600
gttttctcaa ccgtaacacc ccagcacggg acgcagcagc cgggaactta aaacgaccgc 660
gttgtaagaa atctactgat tcggttaggg cctacttggg ggcccattat cttttttctt 720
tgtctaaacg gcccgtctgt atccgatgac catcatatag aagggtaaat catcaagtaa 780
caacaacact gcaacagaca agggacatat gtagctgaac agagaactct ctattcatta 840
gactgagata tatgttcata ataaattaag tcaaatcctg cataatagct caaagctgga 900
tttaatcatt cataattcca tgaatttttt ttacatagat atagtcttca gtttgacccc 960
aaaaaaaaaa aatagtcttc atatactcat ctctccaaag tgattgctag tacagggtga 1020
tcatcttcta atcttcacaa caagtcaagc atgagctgtt ccagtaattc atttagaatc 1080
agttcactag tctcaaagcc aatgcactca acctcacttc taacgtcatc taaccagttt 1140
ccgcgtttat ccatgtcttc tctaatgatt tggtcc 1176
<210> 23
<211> 265
<212> ДНК
<213> Неизвестно
<220>
<223> Маркер 2a
<400> 23
gaacccctct cggaccggga ataagattct tggtttttcg gttaaagtag ggagtaaacc 60
aacgagtgta aatatcttcc ccaagccgtt ccgggatgat gtgcaaggta aaccaagtga 120
tggctatggg gacaaggaaa gaaacaaaat gttcctgcat gaaaatattg aagtttgatg 180
caaacccaca aatttggtat atatttcaaa gttattggtt cgtgttcaaa cgggtatatg 240
ctaacaacct aatatgcact cgtgg 265
<210> 24
<211> 1659
<212> ДНК
<213> Неизвестно
<220>
<223> Маркер 3a
<400> 24
gtgctccgtc aagattcgac gatcgtgttt tgtttccctt tttactttaa ctctcttcac 60
tcttcttcct tcattctcct cttctgatgg gaagccatag caacgcggag aaagatgaat 120
ccgccaccga gacggatgct acaacacggc agggatctct ctctgttaca gagtccaaca 180
ccgattgcga cgcagacgtc ttgcctcctc ctcctcctgc ggacgtgagt caattcgaag 240
aaggagagaa agttttagcc aaccacaaag gtcgtttcta cgaagccaag gtaatgttat 300
ttttgtctaa aattggaatg ttgtttgtgc ttttgtgttt aaaatttgat ctttgtttta 360
tgttttcagg ttcttgaaat tgcatttaaa gacaatgaat ggaactatta tgtgcattac 420
attgtaagtt tagattttat tttgttttgc gtaaccacga atctctgtaa aagcataaac 480
aaataaaaca catttattgt taatgctgcc gttattatat ttttgccgtt ttcaatatgt 540
aatcttttgt attttctttg gtttttacag ggttggaaca aaaggttagt agaccatccg 600
acagtactgt cacttactgc cggcttttta ttgtctgaat aatctttctg tacattgcat 660
catcggtctg aataatcatt ctgctgctaa atcaaaacgt ttgccaagat tacaagtttt 720
ttttgtttct aatgcattga taatttcatg gtttgattat tgttgtatat ctttgtaatg 780
attagttatt tgtatggaca gttgggacga atggataggt catgattgtg tgttgaaaca 840
caccgaggag aatattaagg aacagggtat taagcaagga gtcaagagtg ctatggcttg 900
gagagtgtcc aaggtgaaac ctagatgccc taatggtcag tgttctgggt cttttattag 960
aggctttgtt gcatgcttta tagatcatat gctagatatt atcatcattc tcttgttaat 1020
atattttgca gttgctagag gaagaaagcg gaagcaagat tctgttgata cactagtctc 1080
tccaatggtg tggattttcc tttcattttt ctctagattc caagtttctt tctattgttt 1140
tctgatcagt ttttgcctga ttgtttttgt tgtttgctgg atacaggagg agaatttggt 1200
tgctacagac aaccttttaa ctttcaatat cccgtcagcg ttgaggaagc aactcatcga 1260
cgattatgaa ttcgttactc agatgcaaaa ggtagctctc gattcattag gtccatatat 1320
caaggaattt atcagtgaca ttttttgtaa catttatgtg agcagcttgt ggaacttcct 1380
cgctcgccta atgtggatga tatcttgaag aagtacactg acagcaaaat gaagaaagat 1440
ggcaggtaag cgctttgtta atgtcatttt caacagttaa agagttattt cagtactttc 1500
ttttggtgag gttatgtagg gtaagcaatt cagtagagga gattctgaaa ggtttgcgtt 1560
gctactttga caatgctttg ccggtgatgt tactttacaa caatgagcgg aagcagtatg 1620
aggaaaacgt atctgagggt gtatctccct caactgtgt 1659
<210> 25
<211> 1399
<212> ДНК
<213> Неизвестно
<220>
<223> Маркер 4a
<400> 25
tcaacatata agtacaaatc tagcaaccga ctactattca aaaccagagt cttttgcatc 60
actaagtcaa gcaactttga tctcttggtt ttaagtttca aagaagctat ctttggacgt 120
ggattgtttg acagaagtat acatctttgg actaagtctg atagaactag tagagaacct 180
cgactaacta tgcaagtatt actaggaaga ttccatttgc agaatttaag atttgttggt 240
tcctaaaatt ctcgaaagct ccttgaattt ttgatgccaa tcactttgaa tgtgttcttt 300
ttgcctcctt aaagttaacc ttatttggag taaatattga tcaaattagt ataagtaact 360
gtgtaaggct tcacgtctcc atcaatcatc ctgaacaatc actgctttgc cttaaacaaa 420
cttgttaatt atttataagt ttttttttat gaaacacaac tttcattaat actcaaacat 480
tccaactaca aataaggaag gagtttaacc aaactctaac aacaaataat aaagcataca 540
agctaaaagt agagaaacct ctaagataga atgacagcga actcgaagca tggctcgaat 600
gcgtcggagc aagactcaca gcagtgctag aggcttgaaa tttagtcact ttgtatcgtg 660
acgttaagat ccaatccgca cctcggaata tcgtcgaaac gacatccgtt gcatcttcag 720
gccccgaacg gaccgctaga caatatgaac aaacggctat agataaagat acacacctcc 780
atttagtgtt tggggggaaa acatttctca taactgaggc atggggtaat acgactcgca 840
tctcctgaga gaagtatgat agtgatgaaa gtggtgtaga ttgtcccgat aaacccaccg 900
gtaaatagaa acttcgaaaa ctcttcttat aagagagata aggtgttgta tgcatatcaa 960
cagtttcggt aatattttca gtgaacccgc cgaaaaatat tagcaagttg gaccaaatga 1020
ccaaactccc ccacacaaat gtgggctttg aaaccgacag acttctaaga aatgggctga 1080
cctttttata acccttaatg ggccaggccc agatagttat gttgctaggg tttgggtcac 1140
aaaattgtac gccgccgagg ctagtgtgga ggagatgaag agcgcggcgg ggctgaagct 1200
ggtctcatcg gagtgaacgg tttgcgcagc aaagcagatc ggagaagaga tgtagccttt 1260
gatagtacag aagctctcgc cggagtaaca gtcaagatag acgtctgacg gagtaatgat 1320
gatgagggcg tgaagaggaa agcacaacct cattgtacct cgtgcttttt gaactgctcg 1380
tcggatcaaa tgtggaacc 1399
<210> 26
<211> 627
<212> ДНК
<213> Неизвестно
<220>
<223> Маркер 5a
<400> 26
ttttcaggta gttccactct catattatgt atgttgagtt tactgtccct attgagtttg 60
tgcaatttcc tatatatttc tctgcaatat tgtccttgat gagtttattg tctcccttct 120
ttttcagtaa attcagtttc gttttattta tctattgaat ttattgtcgc tattgaattt 180
tctgacgtat ttctctgcga tcactcaatt tactgtctct gttgagtttc tcattcttcc 240
cattcagaat atatgtagaa acaacaattc aatataagtc atctgttcgc tctatcatag 300
tagcgtaaag gtatctttcc aaattgactt ggcatccata ttagagagac gtcaatgaat 360
ataagtagta tttacaacta aattcgtctg attttacaaa tgcttccaag cgtacgtgta 420
taccaatgtt cgcctaaaga taaatgccaa ggttggtgta ctgaattgct tgttaactat 480
ggagcgttca ccagcaatgc cattagtaac acaagttcct agcattattg ctgggatgga 540
tgtaccatca gttgatgcga ttgtgagctc catacaatgg ccactcgtat caaaataaag 600
ggcatgtgtg tatgcgtaca caattgt 627
<210> 27
<211> 800
<212> ДНК
<213> Неизвестно
<220>
<223> Маркер 6a
<400> 27
atgaggaggc tgaagtgcgc tcgtttctgc agcatacttc aactcaagct gcagcaaatg 60
gaaacgatta gtgaggaatg caacggaagc ttccgcttcc gaacaagaac atagtacata 120
aagagaagga cactaagtac cttgtctcca tgtccactgc tgaggcaatc ggaaacaggt 180
ttagagttga gattgagctt ctgataacaa gtctcccact tgtcgtactt gtgctcagtc 240
accaaactct caacacagtg gataaacggg aaatgatcgc tctacaaaat aaaaatgtaa 300
cgatctcaca ctaactacgc ttcaccaaac aaaaagatca caatcaaatc tcatcatcct 360
acttaccaat ttaggccacg catcaatcgc acaagcttca actgtatcca aaaggcattc 420
aaacgcaccg tgctgcaaca aattagcaac aatgtttaac gtaatctcgc tacaagcatg 480
catgataacg aaacgagatc ttagatacaa acaacatctt aaataaattt aatcaaatta 540
tcgacaatgt ttaatgtaat cgctacaatc atgcatgatg acgaaacgag atctcagatt 600
caaacaacac cacaatacaa attgaagctc taatttaatc aaatcaggat acatcggaaa 660
ggtgtgagaa gacctggcaa acggcagtga cattatcgga gcggagcttg gtgttacccc 720
acggagatag atggagatcg acgattgata tgagatcgtc ttcgaagagc ttcgtgaggt 780
ggttaacgat gaaggaagaa 800
<210> 28
<211> 2846
<212> ДНК
<213> Неизвестно
<220>
<223> Маркер 7a
<400> 28
cttacacaac ccaacaacca tacactttgt gatatataga taataattaa tacagattca 60
tcatatctcg gaatctatat agattttaga gagttatcat gttacatatc acaaaagaaa 120
gagaaggtgt tttatagaag gcctgtgtac gacaacaaag aggttttgac acgttccaac 180
aaatcccaca tcctgttgac accgttccgg caaaccagag ggaagcgatt cactttagca 240
cttcgaatga agtggctgga tgagtatttg gcacacgcgt caggcttttt agcacctttg 300
taagctttgc agatgtagct tatgaagttc tcataatcct gcaatgaaca cacagaaaaa 360
aactgtggtg agttcagagc caagaaatat caagcacaca cacacacaaa aactttatgt 420
tcccattgat cacatccatt ttctattgat catgcctctc atgaagacac ttcacttctc 480
gtctgctaac tacagttcac aagaacaata agataccaca tttggtaatc gcaacataca 540
tttgacccaa aaaaatggta agtcaattaa ttttctccac gctaatctat gataacccta 600
taaaacatgt cttcctcatt agtttagtta actagaaaga tgacccaact ctctaaatac 660
actaaatcca aagtgttgca caaccgaatt ccaaatcagt cataagtatg aatgactaac 720
aagttaatat agacacatca ttcataaaca gggagtaaga gagcgtaaat tagtctaagt 780
aagaactcag tagaatctaa aaaggatcct attccaaacg aacctcataa agcggctgac 840
catcaaccac tacccaggga acgtactgat gaggaggctg aagtgcgctc gtttctgcag 900
catacttcaa ctcaagctgc agcaaatgga aacgattagt gaggaatgca acggaagctt 960
ccgcttccga acaagaacat agtacataaa gagaaggaca ctaagtacct tgtctccatg 1020
tccactgctg aggcaatcgg aaacaggttt agagttgaga ttgagcttct gataacaagt 1080
ctcccacttg tcgtacttgt gctcagtcac caaactctca acacagtgga taaacgggaa 1140
atgatcgctc tacaaaataa aaatgtaacg atctcacact aactacgctt caccaaacaa 1200
aaagatcaca atcaaatctc atcatcctac ttaccaattt aggccacgca tcaatcgcac 1260
aagcttcaac tgtatccaaa aggcattcaa acgcaccgtg ctgcaacaaa ttagcaacaa 1320
tgtttaacgt aatctcgcta caagcatgca tgataacgaa acgagatctt agatacaaac 1380
aacatcttaa ataaatttaa tcaaattatc gacaatgttt aatgtaatcg ctacaatcat 1440
gcatgatgac gaaacgagat ctcagattca aacaacacca caatacaaat tgaagctcta 1500
atttaatcaa atcaggatac atcggaaagg tgtgagaaga cctggcaaac ggcagtgaca 1560
ttatcggagc ggagcttggt gttaccccac ggagatagat ggagatcgac gattgatatg 1620
agatcgtctt cgaagagctt cgtgaggtgg ttaacgatga aggaagaaca gtacggacat 1680
agagactcgt agtacagtcc cagcgacact ttcggagaag atggcaggtc agatgatgat 1740
gacgatgatg atacgaagaa gatcagagaa acgtagcaga ataggagaag aagaagcttg 1800
ctcgtcgaaa tcgacgccat gattgcaaag agaagcaacc tctgttgtat cgtcttcgtc 1860
ctcttctctt aataacacgc atctcgatat gctcggtgcg aaacagatga caataaccga 1920
taaggcccgt ctcattcttt gtgtgggcct tgttcaaagc ctaaatacta attataaaat 1980
ttcataaaag cccaaacgtt tataacaaag gctccgaata cttagtaaaa tttcttttgg 2040
accaagtgca aatatacatc aaattagcta cattaatttt tgggttaagc agttgaccga 2100
gaattaaaga gtgacaatat acatcaaagc ttggaatcaa tctcatacat gtgatgaact 2160
agaggaccaa taaaatactt gtcatgtcca ttgcttaggc aaaggaggga catggattat 2220
ataacctcat gtatacagat tatatatcaa atgaaaattt taggctattg gagtacgtga 2280
aggatttgat caacaagact gagactgacg acgaggtaag caagttgggt aggatgaatg 2340
tcgtcccaga aaaggtagtc gttagcgtcg ggacaagtcc gagttaaagg attgcacaag 2400
tatgatagct ccagctctcc tgttccgcag catcctctcg ttgtctcctt tattcctgtc 2460
cctttcgaaa aaatcgattc agaccacgaa aaaatgcacg gtatatggct atataacaaa 2520
ctgtagactc ataacctgta atgcgagcac actggattat aaactcacct tagttattgt 2580
aaaattaatc tttcgactta attatatgaa atgacgtcaa cataaaaata gatataatga 2640
aaaataatat gtatcatagt gatttgtgct attatcatcg atatcatcat gtttaaacca 2700
acaaatacat agtttttttt tagcaaatac atatattatt aacgaaaaaa aattatatat 2760
agtaatgttt taattgttgg atagccaaca agtataatac gtaaattagc aaatgcaaat 2820
gagttctata tccagccaag ccacct 2846
СПИСОК ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
<110> Sakata Seed Corporation
<120> УСТОЙЧИВАЯ К ЛОЖНОЙ МУЧНИСТОЙ РОСЕ КАПУСТА И СПОСОБ ЕЕ СЕЛЕКЦИИ
<130> 800523JP01
<160> 28
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 1022
<212> ДНК
<213> Неизвестно
<220>
<223> Маркер 1
<400> 1
cggtccttag ttgatttctc aagtttgggt gtttgtccaa tcatctcttg gtacagttga 60
agcaaaagct tcatctctgc atataatact cagaacaatc aataatttta aaaagaaaac 120
aacagagtgc tataatgaga gagagagaga gagagagaga gactcactct cttgaatttc 180
gactgctgcc ttgcagtttc tgaagtcggg agctcgtagt acctatacaa ttaccagaac 240
atatactctc cgttgatatc taattaattc cacaaacaga gagaagagta gtggagattt 300
catacctcga gaacgtgagg gcgaagatcc ttgacaagga gacgcatctt gtagtagttg 360
gagttctcca ccttcagatt cccttccagc cccctctttc tcccccttga cgacggatct 420
gacggagcca cctgagctcc tcctatatgt ggccgactcg gaaccggcgg gttatctaag 480
tccatcgccg gcgaagatct ctgatctgct gcagctgctg taggaagcgg gagagatgaa 540
gtagcggaag gaggaggagg agttgccgcg gaggtcgatt tctccatttt caaaaagggg 600
gttttctcaa ccgtaacacc ccagcacggg acgcagcagc cgggaactta aaacgaccgc 660
gttgtaagaa atctactgat tcggttaggg cctacttggg ggcccattat cttttttctt 720
tgtctaaacg gcccgtctgt atccgatgac catcatatag aagggtaaat catcaagtaa 780
caacaacact gcaacagaca agggacatat gtagctgaac agagaactct ctattcatta 840
gactgagata tatgttcata ataaattaag tcaaatcctg cataatagct caaagctgga 900
tttaatcatt cataattcca tgaatttttt ttacatagat atagtcttca gtttgacccc 960
aaaaaaaaaa aatagtcttc atatactcat ctctccaaag tgattgctag tacagggtga 1020
tc 1022
<210> 2
<211> 220
<212> ДНК
<213> Неизвестно
<220>
<223> Маркер 2
<400> 2
agtagggagt aaaccaacga gtgtaaatat cttccccaag ccgttccggg atgatgtgca 60
aggtaaacca agtgatggct atggggacaa ggaaagaaac aaaatgttcc tgcatgaaaa 120
tattgaagtt tgatgcaaac ccacaaattt ggtatatatt tcaaagttat tggttcgtgt 180
tcaaacgggt atatgctaac aacctaatat gcactcgtgg 220
<210> 3
<211> 1314
<212> ДНК
<213> Неизвестно
<220>
<223> Маркер 3
<400> 3
gtgctccgtc aagattcgac gatcgtgttt tgtttccctt tttactttaa ctctcttcac 60
tcttcttcct tcattctcct cttctgatgg gaagccatag caacgcggag aaagatgaat 120
ccgccaccga gacggatgct acaacacggc agggatctct ctctgttaca gagtccaaca 180
ccgattgcga cgcagacgtc ttgcctcctc ctcctcctgc ggacgtgagt caattcgaag 240
aaggagagaa agttttagcc aaccacaaag gtcgtttcta cgaagccaag gtaatgttat 300
ttttgtctaa aattggaatg ttgtttgtgc ttttgtgttt aaaatttgat ctttgtttta 360
tgttttcagg ttcttgaaat tgcatttaaa gacaatgaat ggaactatta tgtgcattac 420
attgtaagtt tagattttat tttgttttgc gtaaccacga atctctgtaa aagcataaac 480
aaataaaaca catttattgt taatgctgcc gttattatat ttttgccgtt ttcaatatgt 540
aatcttttgt attttctttg gtttttacag ggttggaaca aaaggttagt agaccatccg 600
acagtactgt cacttactgc cggcttttta ttgtctgaat aatctttctg tacattgcat 660
catcggtctg aataatcatt ctgctgctaa atcaaaacgt ttgccaagat tacaagtttt 720
ttttgtttct aatgcattga taatttcatg gtttgattat tgttgtatat ctttgtaatg 780
attagttatt tgtatggaca gttgggacga atggataggt catgattgtg tgttgaaaca 840
caccgaggag aatattaagg aacagggtat taagcaagga gtcaagagtg ctatggcttg 900
gagagtgtcc aaggtgaaac ctagatgccc taatggtcag tgttctgggt cttttattag 960
aggctttgtt gcatgcttta tagatcatat gctagatatt atcatcattc tcttgttaat 1020
atattttgca gttgctagag gaagaaagcg gaagcaagat tctgttgata cactagtctc 1080
tccaatggtg tggattttcc tttcattttt ctctagattc caagtttctt tctattgttt 1140
tctgatcagt ttttgcctga ttgtttttgt tgtttgctgg atacaggagg agaatttggt 1200
tgctacagac aaccttttaa ctttcaatat cccgtcagcg ttgaggaagc aactcatcga 1260
cgattatgaa ttcgttactc agatgcaaaa ggtagctctc gattcattag gtcc 1314
<210> 4
<211> 1300
<212> ДНК
<213> Неизвестно
<220>
<223> Маркер 4
<400> 4
gcatcactaa gtcaagcaac tttgatctct tggttttaag tttcaaagaa gctatctttg 60
gacgtggatt gtttgacaga agtatacatc tttggactaa gtctgataga actagtagag 120
aacctcgact aactatgcaa gtattactag gaagattcca tttgcagaat ttaagatttg 180
ttggttccta aaattctcga aagctccttg aatttttgat gccaatcact ttgaatgtgt 240
tctttttgcc tccttaaagt taaccttatt tggagtaaat attgatcaaa ttagtataag 300
taactgtgta aggcttcacg tctccatcaa tcatcctgaa caatcactgc tttgccttaa 360
acaaacttgt taattattta taagtttttt tttatgaaac acaactttca ttaatactca 420
aacattccaa ctacaaataa ggaaggagtt taaccaaact ctaacaacaa ataataaagc 480
atacaagcta aaagtagaga aacctctaag atagaatgac agcgaactcg aagcatggct 540
cgaatgcgtc ggagcaagac tcacagcagt gctagaggct tgaaatttag tcactttgta 600
tcgtgacgtt aagatccaat ccgcacctcg gaatatcgtc gaaacgacat ccgttgcatc 660
ttcaggcccc gaacggaccg ctagacaata tgaacaaacg gctatagata aagatacaca 720
cctccattta gtgtttgggg ggaaaacatt tctcataact gaggcatggg gtaatacgac 780
tcgcatctcc tgagagaagt atgatagtga tgaaagtggt gtagattgtc ccgataaacc 840
caccggtaaa tagaaacttc gaaaactctt cttataagag agataaggtg ttgtatgcat 900
atcaacagtt tcggtaatat tttcagtgaa cccgccgaaa aatattagca agttggacca 960
aatgaccaaa ctcccccaca caaatgtggg ctttgaaacc gacagacttc taagaaatgg 1020
gctgaccttt ttataaccct taatgggcca ggcccagata gttatgttgc tagggtttgg 1080
gtcacaaaat tgtacgccgc cgaggctagt gtggaggaga tgaagagcgc ggcggggctg 1140
aagctggtct catcggagtg aacggtttgc gcagcaaagc agatcggaga agagatgtag 1200
cctttgatag tacagaagct ctcgccggag taacagtcaa gatagacgtc tgacggagta 1260
atgatgatga gggcgtgaag aggaaagcac aacctcattg 1300
<210> 5
<211> 390
<212> ДНК
<213> Неизвестно
<220>
<223> Маркер 5
<400> 5
ctctgcaata ttgtccttga tgagtttatt gtctcccttc tttttcagta aattcagttt 60
cgttttattt atctattgaa tttattgtcg ctattgaatt ttctgacgta tttctctgcg 120
atcactcaat ttactgtctc tgttgagttt ctcattcttc ccattcagaa tatatgtaga 180
aacaacaatt caatataagt catctgttcg ctctatcata gtagcgtaaa ggtatctttc 240
caaattgact tggcatccat attagagaga cgtcaatgaa tataagtagt atttacaact 300
aaattcgtct gattttacaa atgcttccaa gcgtacgtgt ataccaatgt tcgcctaaag 360
ataaatgcca aggttggtgt actgaattgc 390
<210> 6
<211> 300
<212> ДНК
<213> Неизвестно
<220>
<223> Маркер 6
<400> 6
cgatctcaca ctaactacgc ttcaccaaac aaaaagatca caatcaaatc tcatcatcct 60
acttaccaat ttaggccacg catcaatcgc acaagcttca actgtatcca aaaggcattc 120
aaacgcaccg tgctgcaaca aattagcaac aatgtttaac gtaatctcgc tacaagcatg 180
catgataacg aaacgagatc ttagatacaa acaacatctt aaataaattt aatcaaatta 240
tcgacaatgt ttaatgtaat cgctacaatc atgcatgatg acgaaacgag atctcagatt 300
<210> 7
<211> 2713
<212> ДНК
<213> Неизвестно
<220>
<223> Маркер 7
<400> 7
ttatagaagg cctgtgtacg acaacaaaga ggttttgaca cgttccaaca aatcccacat 60
cctgttgaca ccgttccggc aaaccagagg gaagcgattc actttagcac ttcgaatgaa 120
gtggctggat gagtatttgg cacacgcgtc aggcttttta gcacctttgt aagctttgca 180
gatgtagctt atgaagttct cataatcctg caatgaacac acagaaaaaa actgtggtga 240
gttcagagcc aagaaatatc aagcacacac acacacaaaa actttatgtt cccattgatc 300
acatccattt tctattgatc atgcctctca tgaagacact tcacttctcg tctgctaact 360
acagttcaca agaacaataa gataccacat ttggtaatcg caacatacat ttgacccaaa 420
aaaatggtaa gtcaattaat tttctccacg ctaatctatg ataaccctat aaaacatgtc 480
ttcctcatta gtttagttaa ctagaaagat gacccaactc tctaaataca ctaaatccaa 540
agtgttgcac aaccgaattc caaatcagtc ataagtatga atgactaaca agttaatata 600
gacacatcat tcataaacag ggagtaagag agcgtaaatt agtctaagta agaactcagt 660
agaatctaaa aaggatccta ttccaaacga acctcataaa gcggctgacc atcaaccact 720
acccagggaa cgtactgatg aggaggctga agtgcgctcg tttctgcagc atacttcaac 780
tcaagctgca gcaaatggaa acgattagtg aggaatgcaa cggaagcttc cgcttccgaa 840
caagaacata gtacataaag agaaggacac taagtacctt gtctccatgt ccactgctga 900
ggcaatcgga aacaggttta gagttgagat tgagcttctg ataacaagtc tcccacttgt 960
cgtacttgtg ctcagtcacc aaactctcaa cacagtggat aaacgggaaa tgatcgctct 1020
acaaaataaa aatgtaacga tctcacacta actacgcttc accaaacaaa aagatcacaa 1080
tcaaatctca tcatcctact taccaattta ggccacgcat caatcgcaca agcttcaact 1140
gtatccaaaa ggcattcaaa cgcaccgtgc tgcaacaaat tagcaacaat gtttaacgta 1200
atctcgctac aagcatgcat gataacgaaa cgagatctta gatacaaaca acatcttaaa 1260
taaatttaat caaattatcg acaatgttta atgtaatcgc tacaatcatg catgatgacg 1320
aaacgagatc tcagattcaa acaacaccac aatacaaatt gaagctctaa tttaatcaaa 1380
tcaggataca tcggaaaggt gtgagaagac ctggcaaacg gcagtgacat tatcggagcg 1440
gagcttggtg ttaccccacg gagatagatg gagatcgacg attgatatga gatcgtcttc 1500
gaagagcttc gtgaggtggt taacgatgaa ggaagaacag tacggacata gagactcgta 1560
gtacagtccc agcgacactt tcggagaaga tggcaggtca gatgatgatg acgatgatga 1620
tacgaagaag atcagagaaa cgtagcagaa taggagaaga agaagcttgc tcgtcgaaat 1680
cgacgccatg attgcaaaga gaagcaacct ctgttgtatc gtcttcgtcc tcttctctta 1740
ataacacgca tctcgatatg ctcggtgcga aacagatgac aataaccgat aaggcccgtc 1800
tcattctttg tgtgggcctt gttcaaagcc taaatactaa ttataaaatt tcataaaagc 1860
ccaaacgttt ataacaaagg ctccgaatac ttagtaaaat ttcttttgga ccaagtgcaa 1920
atatacatca aattagctac attaattttt gggttaagca gttgaccgag aattaaagag 1980
tgacaatata catcaaagct tggaatcaat ctcatacatg tgatgaacta gaggaccaat 2040
aaaatacttg tcatgtccat tgcttaggca aaggagggac atggattata taacctcatg 2100
tatacagatt atatatcaaa tgaaaatttt aggctattgg agtacgtgaa ggatttgatc 2160
aacaagactg agactgacga cgaggtaagc aagttgggta ggatgaatgt cgtcccagaa 2220
aaggtagtcg ttagcgtcgg gacaagtccg agttaaagga ttgcacaagt atgatagctc 2280
cagctctcct gttccgcagc atcctctcgt tgtctccttt attcctgtcc ctttcgaaaa 2340
aatcgattca gaccacgaaa aaatgcacgg tatatggcta tataacaaac tgtagactca 2400
taacctgtaa tgcgagcaca ctggattata aactcacctt agttattgta aaattaatct 2460
ttcgacttaa ttatatgaaa tgacgtcaac ataaaaatag atataatgaa aaataatatg 2520
tatcatagtg atttgtgcta ttatcatcga tatcatcatg tttaaaccaa caaatacata 2580
gttttttttt agcaaataca tatattatta acgaaaaaaa attatatata gtaatgtttt 2640
aattgttgga tagccaacaa gtataatacg taaattagca aatgcaaatg agttctatat 2700
ccagccaagc cac 2713
<210> 8
<211> 22
<212> ДНК
<213> Искусственная Последовательность
<220>
<223> праймер
<400> 8
cggtcttagt tgatttctca ag 22
<210> 9
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная Последовательность
<220>
<223> праймер
<400> 9
gatcaccctg tactagcaat c 21
<210> 10
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная Последовательность
<220>
<223> праймер
<400> 10
agtagggagt aaaccaacga g 21
<210> 11
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная Последовательность
<220>
<223> праймер
<400> 11
ccacgagtgc atattaggtt g 21
<210> 12
<211> 20
<212> ДНК
<213> Искусственная Последовательность
<220>
<223> праймер
<400> 12
gtgctccgtc aagattcgac 20
<210> 13
<211> 23
<212> ДНК
<213> Искусственная Последовательность
<220>
<223> праймер
<400> 13
ggacctaatg aatcgagagc tac 23
<210> 14
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная Последовательность
<220>
<223> праймер
<400> 14
gcatcactaa gtcaagcaac t 21
<210> 15
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная Последовательность
<220>
<223> праймер
<400> 15
caatgaggtt gtgctttcct c 21
<210> 16
<211> 22
<212> ДНК
<213> Искусственная Последовательность
<220>
<223> праймер
<400> 16
ctctgcaata ttgtccttga tg 22
<210> 17
<211> 20
<212> ДНК
<213> Искусственная Последовательность
<220>
<223> праймер
<400> 17
gcaattcagt acaccaacct 20
<210> 18
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная Последовательность
<220>
<223> праймер
<400> 18
cgatctcaca ctaactacgc t 21
<210> 19
<211> 22
<212> ДНК
<213> Искусственная Последовательность
<220>
<223> праймер
<400> 19
aatctgagat ctcgtttcgt ca 22
<210> 20
<211> 22
<212> ДНК
<213> Искусственная Последовательность
<220>
<223> праймер
<400> 20
ttatagaagg cctgtgtacg ac 22
<210> 21
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная Последовательность
<220>
<223> праймер
<400> 21
gtggcttggc tggatataga a 21
<210> 22
<211> 1176
<212> ДНК
<213> Неизвестно
<220>
<223> Маркер 1a
<400> 22
cggtccttag ttgatttctc aagtttgggt gtttgtccaa tcatctcttg gtacagttga 60
agcaaaagct tcatctctgc atataatact cagaacaatc aataatttta aaaagaaaac 120
aacagagtgc tataatgaga gagagagaga gagagagaga gactcactct cttgaatttc 180
gactgctgcc ttgcagtttc tgaagtcggg agctcgtagt acctatacaa ttaccagaac 240
atatactctc cgttgatatc taattaattc cacaaacaga gagaagagta gtggagattt 300
catacctcga gaacgtgagg gcgaagatcc ttgacaagga gacgcatctt gtagtagttg 360
gagttctcca ccttcagatt cccttccagc cccctctttc tcccccttga cgacggatct 420
gacggagcca cctgagctcc tcctatatgt ggccgactcg gaaccggcgg gttatctaag 480
tccatcgccg gcgaagatct ctgatctgct gcagctgctg taggaagcgg gagagatgaa 540
gtagcggaag gaggaggagg agttgccgcg gaggtcgatt tctccatttt caaaaagggg 600
gttttctcaa ccgtaacacc ccagcacggg acgcagcagc cgggaactta aaacgaccgc 660
gttgtaagaa atctactgat tcggttaggg cctacttggg ggcccattat cttttttctt 720
tgtctaaacg gcccgtctgt atccgatgac catcatatag aagggtaaat catcaagtaa 780
caacaacact gcaacagaca agggacatat gtagctgaac agagaactct ctattcatta 840
gactgagata tatgttcata ataaattaag tcaaatcctg cataatagct caaagctgga 900
tttaatcatt cataattcca tgaatttttt ttacatagat atagtcttca gtttgacccc 960
aaaaaaaaaa aatagtcttc atatactcat ctctccaaag tgattgctag tacagggtga 1020
tcatcttcta atcttcacaa caagtcaagc atgagctgtt ccagtaattc atttagaatc 1080
agttcactag tctcaaagcc aatgcactca acctcacttc taacgtcatc taaccagttt 1140
ccgcgtttat ccatgtcttc tctaatgatt tggtcc 1176
<210> 23
<211> 265
<212> ДНК
<213> Неизвестно
<220>
<223> Маркер 2a
<400> 23
gaacccctct cggaccggga ataagattct tggtttttcg gttaaagtag ggagtaaacc 60
aacgagtgta aatatcttcc ccaagccgtt ccgggatgat gtgcaaggta aaccaagtga 120
tggctatggg gacaaggaaa gaaacaaaat gttcctgcat gaaaatattg aagtttgatg 180
caaacccaca aatttggtat atatttcaaa gttattggtt cgtgttcaaa cgggtatatg 240
ctaacaacct aatatgcact cgtgg 265
<210> 24
<211> 1659
<212> ДНК
<213> Неизвестно
<220>
<223> Маркер 3a
<400> 24
gtgctccgtc aagattcgac gatcgtgttt tgtttccctt tttactttaa ctctcttcac 60
tcttcttcct tcattctcct cttctgatgg gaagccatag caacgcggag aaagatgaat 120
ccgccaccga gacggatgct acaacacggc agggatctct ctctgttaca gagtccaaca 180
ccgattgcga cgcagacgtc ttgcctcctc ctcctcctgc ggacgtgagt caattcgaag 240
aaggagagaa agttttagcc aaccacaaag gtcgtttcta cgaagccaag gtaatgttat 300
ttttgtctaa aattggaatg ttgtttgtgc ttttgtgttt aaaatttgat ctttgtttta 360
tgttttcagg ttcttgaaat tgcatttaaa gacaatgaat ggaactatta tgtgcattac 420
attgtaagtt tagattttat tttgttttgc gtaaccacga atctctgtaa aagcataaac 480
aaataaaaca catttattgt taatgctgcc gttattatat ttttgccgtt ttcaatatgt 540
aatcttttgt attttctttg gtttttacag ggttggaaca aaaggttagt agaccatccg 600
acagtactgt cacttactgc cggcttttta ttgtctgaat aatctttctg tacattgcat 660
catcggtctg aataatcatt ctgctgctaa atcaaaacgt ttgccaagat tacaagtttt 720
ttttgtttct aatgcattga taatttcatg gtttgattat tgttgtatat ctttgtaatg 780
attagttatt tgtatggaca gttgggacga atggataggt catgattgtg tgttgaaaca 840
caccgaggag aatattaagg aacagggtat taagcaagga gtcaagagtg ctatggcttg 900
gagagtgtcc aaggtgaaac ctagatgccc taatggtcag tgttctgggt cttttattag 960
aggctttgtt gcatgcttta tagatcatat gctagatatt atcatcattc tcttgttaat 1020
atattttgca gttgctagag gaagaaagcg gaagcaagat tctgttgata cactagtctc 1080
tccaatggtg tggattttcc tttcattttt ctctagattc caagtttctt tctattgttt 1140
tctgatcagt ttttgcctga ttgtttttgt tgtttgctgg atacaggagg agaatttggt 1200
tgctacagac aaccttttaa ctttcaatat cccgtcagcg ttgaggaagc aactcatcga 1260
cgattatgaa ttcgttactc agatgcaaaa ggtagctctc gattcattag gtccatatat 1320
caaggaattt atcagtgaca ttttttgtaa catttatgtg agcagcttgt ggaacttcct 1380
cgctcgccta atgtggatga tatcttgaag aagtacactg acagcaaaat gaagaaagat 1440
ggcaggtaag cgctttgtta atgtcatttt caacagttaa agagttattt cagtactttc 1500
ttttggtgag gttatgtagg gtaagcaatt cagtagagga gattctgaaa ggtttgcgtt 1560
gctactttga caatgctttg ccggtgatgt tactttacaa caatgagcgg aagcagtatg 1620
aggaaaacgt atctgagggt gtatctccct caactgtgt 1659
<210> 25
<211> 1399
<212> ДНК
<213> Неизвестно
<220>
<223> Маркер 4a
<400> 25
tcaacatata agtacaaatc tagcaaccga ctactattca aaaccagagt cttttgcatc 60
actaagtcaa gcaactttga tctcttggtt ttaagtttca aagaagctat ctttggacgt 120
ggattgtttg acagaagtat acatctttgg actaagtctg atagaactag tagagaacct 180
cgactaacta tgcaagtatt actaggaaga ttccatttgc agaatttaag atttgttggt 240
tcctaaaatt ctcgaaagct ccttgaattt ttgatgccaa tcactttgaa tgtgttcttt 300
ttgcctcctt aaagttaacc ttatttggag taaatattga tcaaattagt ataagtaact 360
gtgtaaggct tcacgtctcc atcaatcatc ctgaacaatc actgctttgc cttaaacaaa 420
cttgttaatt atttataagt ttttttttat gaaacacaac tttcattaat actcaaacat 480
tccaactaca aataaggaag gagtttaacc aaactctaac aacaaataat aaagcataca 540
agctaaaagt agagaaacct ctaagataga atgacagcga actcgaagca tggctcgaat 600
gcgtcggagc aagactcaca gcagtgctag aggcttgaaa tttagtcact ttgtatcgtg 660
acgttaagat ccaatccgca cctcggaata tcgtcgaaac gacatccgtt gcatcttcag 720
gccccgaacg gaccgctaga caatatgaac aaacggctat agataaagat acacacctcc 780
atttagtgtt tggggggaaa acatttctca taactgaggc atggggtaat acgactcgca 840
tctcctgaga gaagtatgat agtgatgaaa gtggtgtaga ttgtcccgat aaacccaccg 900
gtaaatagaa acttcgaaaa ctcttcttat aagagagata aggtgttgta tgcatatcaa 960
cagtttcggt aatattttca gtgaacccgc cgaaaaatat tagcaagttg gaccaaatga 1020
ccaaactccc ccacacaaat gtgggctttg aaaccgacag acttctaaga aatgggctga 1080
cctttttata acccttaatg ggccaggccc agatagttat gttgctaggg tttgggtcac 1140
aaaattgtac gccgccgagg ctagtgtgga ggagatgaag agcgcggcgg ggctgaagct 1200
ggtctcatcg gagtgaacgg tttgcgcagc aaagcagatc ggagaagaga tgtagccttt 1260
gatagtacag aagctctcgc cggagtaaca gtcaagatag acgtctgacg gagtaatgat 1320
gatgagggcg tgaagaggaa agcacaacct cattgtacct cgtgcttttt gaactgctcg 1380
tcggatcaaa tgtggaacc 1399
<210> 26
<211> 627
<212> ДНК
<213> Неизвестно
<220>
<223> Маркер 5a
<400> 26
ttttcaggta gttccactct catattatgt atgttgagtt tactgtccct attgagtttg 60
tgcaatttcc tatatatttc tctgcaatat tgtccttgat gagtttattg tctcccttct 120
ttttcagtaa attcagtttc gttttattta tctattgaat ttattgtcgc tattgaattt 180
tctgacgtat ttctctgcga tcactcaatt tactgtctct gttgagtttc tcattcttcc 240
cattcagaat atatgtagaa acaacaattc aatataagtc atctgttcgc tctatcatag 300
tagcgtaaag gtatctttcc aaattgactt ggcatccata ttagagagac gtcaatgaat 360
ataagtagta tttacaacta aattcgtctg attttacaaa tgcttccaag cgtacgtgta 420
taccaatgtt cgcctaaaga taaatgccaa ggttggtgta ctgaattgct tgttaactat 480
ggagcgttca ccagcaatgc cattagtaac acaagttcct agcattattg ctgggatgga 540
tgtaccatca gttgatgcga ttgtgagctc catacaatgg ccactcgtat caaaataaag 600
ggcatgtgtg tatgcgtaca caattgt 627
<210> 27
<211> 800
<212> ДНК
<213> Неизвестно
<220>
<223> Маркер 6a
<400> 27
atgaggaggc tgaagtgcgc tcgtttctgc agcatacttc aactcaagct gcagcaaatg 60
gaaacgatta gtgaggaatg caacggaagc ttccgcttcc gaacaagaac atagtacata 120
aagagaagga cactaagtac cttgtctcca tgtccactgc tgaggcaatc ggaaacaggt 180
ttagagttga gattgagctt ctgataacaa gtctcccact tgtcgtactt gtgctcagtc 240
accaaactct caacacagtg gataaacggg aaatgatcgc tctacaaaat aaaaatgtaa 300
cgatctcaca ctaactacgc ttcaccaaac aaaaagatca caatcaaatc tcatcatcct 360
acttaccaat ttaggccacg catcaatcgc acaagcttca actgtatcca aaaggcattc 420
aaacgcaccg tgctgcaaca aattagcaac aatgtttaac gtaatctcgc tacaagcatg 480
catgataacg aaacgagatc ttagatacaa acaacatctt aaataaattt aatcaaatta 540
tcgacaatgt ttaatgtaat cgctacaatc atgcatgatg acgaaacgag atctcagatt 600
caaacaacac cacaatacaa attgaagctc taatttaatc aaatcaggat acatcggaaa 660
ggtgtgagaa gacctggcaa acggcagtga cattatcgga gcggagcttg gtgttacccc 720
acggagatag atggagatcg acgattgata tgagatcgtc ttcgaagagc ttcgtgaggt 780
ggttaacgat gaaggaagaa 800
<210> 28
<211> 2846
<212> ДНК
<213> Неизвестно
<220>
<223> Маркер 7a
<400> 28
cttacacaac ccaacaacca tacactttgt gatatataga taataattaa tacagattca 60
tcatatctcg gaatctatat agattttaga gagttatcat gttacatatc acaaaagaaa 120
gagaaggtgt tttatagaag gcctgtgtac gacaacaaag aggttttgac acgttccaac 180
aaatcccaca tcctgttgac accgttccgg caaaccagag ggaagcgatt cactttagca 240
cttcgaatga agtggctgga tgagtatttg gcacacgcgt caggcttttt agcacctttg 300
taagctttgc agatgtagct tatgaagttc tcataatcct gcaatgaaca cacagaaaaa 360
aactgtggtg agttcagagc caagaaatat caagcacaca cacacacaaa aactttatgt 420
tcccattgat cacatccatt ttctattgat catgcctctc atgaagacac ttcacttctc 480
gtctgctaac tacagttcac aagaacaata agataccaca tttggtaatc gcaacataca 540
tttgacccaa aaaaatggta agtcaattaa ttttctccac gctaatctat gataacccta 600
taaaacatgt cttcctcatt agtttagtta actagaaaga tgacccaact ctctaaatac 660
actaaatcca aagtgttgca caaccgaatt ccaaatcagt cataagtatg aatgactaac 720
aagttaatat agacacatca ttcataaaca gggagtaaga gagcgtaaat tagtctaagt 780
aagaactcag tagaatctaa aaaggatcct attccaaacg aacctcataa agcggctgac 840
catcaaccac tacccaggga acgtactgat gaggaggctg aagtgcgctc gtttctgcag 900
catacttcaa ctcaagctgc agcaaatgga aacgattagt gaggaatgca acggaagctt 960
ccgcttccga acaagaacat agtacataaa gagaaggaca ctaagtacct tgtctccatg 1020
tccactgctg aggcaatcgg aaacaggttt agagttgaga ttgagcttct gataacaagt 1080
ctcccacttg tcgtacttgt gctcagtcac caaactctca acacagtgga taaacgggaa 1140
atgatcgctc tacaaaataa aaatgtaacg atctcacact aactacgctt caccaaacaa 1200
aaagatcaca atcaaatctc atcatcctac ttaccaattt aggccacgca tcaatcgcac 1260
aagcttcaac tgtatccaaa aggcattcaa acgcaccgtg ctgcaacaaa ttagcaacaa 1320
tgtttaacgt aatctcgcta caagcatgca tgataacgaa acgagatctt agatacaaac 1380
aacatcttaa ataaatttaa tcaaattatc gacaatgttt aatgtaatcg ctacaatcat 1440
gcatgatgac gaaacgagat ctcagattca aacaacacca caatacaaat tgaagctcta 1500
atttaatcaa atcaggatac atcggaaagg tgtgagaaga cctggcaaac ggcagtgaca 1560
ttatcggagc ggagcttggt gttaccccac ggagatagat ggagatcgac gattgatatg 1620
agatcgtctt cgaagagctt cgtgaggtgg ttaacgatga aggaagaaca gtacggacat 1680
agagactcgt agtacagtcc cagcgacact ttcggagaag atggcaggtc agatgatgat 1740
gacgatgatg atacgaagaa gatcagagaa acgtagcaga ataggagaag aagaagcttg 1800
ctcgtcgaaa tcgacgccat gattgcaaag agaagcaacc tctgttgtat cgtcttcgtc 1860
ctcttctctt aataacacgc atctcgatat gctcggtgcg aaacagatga caataaccga 1920
taaggcccgt ctcattcttt gtgtgggcct tgttcaaagc ctaaatacta attataaaat 1980
ttcataaaag cccaaacgtt tataacaaag gctccgaata cttagtaaaa tttcttttgg 2040
accaagtgca aatatacatc aaattagcta cattaatttt tgggttaagc agttgaccga 2100
gaattaaaga gtgacaatat acatcaaagc ttggaatcaa tctcatacat gtgatgaact 2160
agaggaccaa taaaatactt gtcatgtcca ttgcttaggc aaaggaggga catggattat 2220
ataacctcat gtatacagat tatatatcaa atgaaaattt taggctattg gagtacgtga 2280
aggatttgat caacaagact gagactgacg acgaggtaag caagttgggt aggatgaatg 2340
tcgtcccaga aaaggtagtc gttagcgtcg ggacaagtcc gagttaaagg attgcacaag 2400
tatgatagct ccagctctcc tgttccgcag catcctctcg ttgtctcctt tattcctgtc 2460
cctttcgaaa aaatcgattc agaccacgaa aaaatgcacg gtatatggct atataacaaa 2520
ctgtagactc ataacctgta atgcgagcac actggattat aaactcacct tagttattgt 2580
aaaattaatc tttcgactta attatatgaa atgacgtcaa cataaaaata gatataatga 2640
aaaataatat gtatcatagt gatttgtgct attatcatcg atatcatcat gtttaaacca 2700
acaaatacat agtttttttt tagcaaatac atatattatt aacgaaaaaa aattatatat 2760
agtaatgttt taattgttgg atagccaaca agtataatac gtaaattagc aaatgcaaat 2820
gagttctata tccagccaag ccacct 2846
<---
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| РАСТЕНИЯ BRASSICA OLERACEA, УСТОЙЧИВЫЕ К MYCOSPHAERELLA BRASSICICOLA | 2019 |
|
RU2810093C1 |
| СПОСОБ ДЕТЕКЦИИ НЕТИПИЧНОГО РАСТЕНИЯ BRASSICA OLERACEA | 2018 |
|
RU2787519C2 |
| МОЛЕКУЛЯРНЫЕ МАРКЕРЫ ГЕНА RLM4 РЕЗИСТЕНТНОСТИ К ЧЕРНОЙ НОЖКЕ BRASSICA NAPUS И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ | 2014 |
|
RU2718584C2 |
| РАСТЕНИЯ BRASSICA OLERACEA С УСТОЙЧИВОСТЬЮ К MYCOSPHAERELLA BRASSICICOLA | 2007 |
|
RU2438298C2 |
| УСТОЙЧИВОСТЬ К РАСТРЕСКИВАНИЮ СТРУЧКОВ У РАСТЕНИЙ РОДА BRASSICA | 2020 |
|
RU2820183C2 |
| МОЛЕКУЛЯРНЫЕ МАРКЕРЫ ГЕНА RLM2 РЕЗИСТЕНТНОСТИ К ЧЕРНОЙ НОЖКЕ BRASSICA NAPUS И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ | 2014 |
|
RU2717017C2 |
| МОЛЕКУЛЯРНЫЕ МАРКЕРЫ, АССОЦИИРОВАННЫЕ С УСТОЙЧИВОСТЬЮ ПОДСОЛНЕЧНИКА К OROBANCHE | 2018 |
|
RU2776361C2 |
| СПОСОБЫ И КОМПОЗИЦИИ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ УКОРОЧЕННЫХ РАСТЕНИЙ КУКУРУЗЫ | 2016 |
|
RU2745987C2 |
| Нуклеиновокислотная последовательность для обнаружения наличия трансгенного трансформанта сои DBN9004 в биологическом образце, набор, содержащий такую последовательность, и способ такого обнаружения | 2017 |
|
RU2743397C2 |
| РАСТЕНИЯ ТОМАТОВ С УЛУЧШЕННЫМИ ПРИЗНАКАМИ | 2019 |
|
RU2821992C2 |
Изобретение относится к области биохимии, в частности к устойчивой к ложной мучнистой росе капусте. Также раскрыты часть указанного растения и его семя. Изобретение позволяет эффективно бороться с ложной мучнистой росой. 3 н. и 4 з.п. ф-лы, 8 ил., 6 табл., 6 пр.
1. Устойчивая к ложной мучнистой росе капуста, имеющая ген устойчивости к ложной мучнистой росе, который расположен в непосредственной близости от локуса, представленного любой одной или более из SEQ ID NO. 1 - SEQ ID NO. 7.
2. Устойчивая к ложной мучнистой росе капуста по п. 1, имеющая ген устойчивости к ложной мучнистой росе, который можно выявить с помощью пары праймеров, выбранных из группы, состоящей из SEQ ID NO 8 и 9; SEQ ID NO 10 и 11; SEQ ID NO 12 и 13; SEQ ID NO 14 и 15; SEQ ID NO 16 и 17; SEQ ID NO 18 и 19; SEQ ID NO 20 и 21.
3. Устойчивая к ложной мучнистой росе капуста по п. 1 или 2, при этом ложная мучнистая роса представляет собой болезнь, вызванную Hyaloperonospora brassicae.
4. Устойчивая к ложной мучнистой росе капуста по любому из пп. 1-3, при этом ген устойчивости к ложной мучнистой росе найден в сорте брокколи, депонированном в Национальном Институте Технологии и Эволюции и указанном в инвентарном номере FERM BP-22343 от Августа 18, 2017.
5. Устойчивая к ложной мучнистой росе капуста по любому из пп. 1-3, при этом ген устойчивости к ложной мучнистой росе найден в сорте капусты, депонированном в Национальном Институте Технологии и Эволюции и указанном в инвентарном номере FERM BP-22344 от Августа 18, 2017.
6. Устойчивая к ложной мучнистой росе часть растения капусты по любому из пп. 1-5.
7. Устойчивое к ложной мучнистой росе семя капусты по любому из пп. 1-5.
| VICENTE J | |||
| G | |||
| et al., Genetics of resistance to downy mildew in Brassica oleracea and breeding towards durable disease control for UK vegetable production; Plant Pathology, 2012, 61, pp | |||
| Динамометрическая втулка | 1921 |
|
SU600A1 |
| WO 2010089374 A1, 12.08.2010 | |||
| МОЛЕКУЛЯРНЫЙ МАРКЕР FR_ER1 И ЕГО ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ДЛЯ СЕЛЕКЦИИ НОВЫХ СОРТОВ ГОРОХА, УСТОЙЧИВЫХ К МУЧНИСТОЙ РОСЕ | 2013 |
|
RU2593691C2 |
